JP3400282B2

JP3400282B2 - 脂質代謝改善剤およびそれを含有する食品

Info

Publication number: JP3400282B2
Application number: JP03779597A
Authority: JP
Inventors: 智史松原; 弘子早川; 惠美安田; 範江小野寺; 文保石川
Original assignee: Yakult Honsha Co Ltd
Current assignee: Yakult Honsha Co Ltd
Priority date: 1997-02-21
Filing date: 1997-02-21
Publication date: 2003-04-28
Anticipated expiration: 2017-02-21
Also published as: JPH10229841A

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、豆乳に乳酸菌を作
用させて得られる発酵豆乳を主成分とする脂質代謝改善
剤、それを含有する食品および低比重リポタンパク質抗
酸化剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】従来、動脈硬化症の予防・改善法として
は、血中コレステロール量を低下させることが一般的に
行なわれており、かかる方法は、高コレステロール血
症、特に高ＬＤＬ（低比重リポタンパク質）コレステロ
ール血症の改善において効果的である（馬淵宏ら(198
7)Coronary vol4,281 ）。一方、動脈硬化の発生は、Ｌ
ＤＬの酸化変性が発端となって起こることが報告（Stei
nberg D ら(1989)New Engl J Med,321,1196-1197) され
ており、ＬＤＬに対し抗酸化活性を有する物質が注目さ
れている。また、豆乳には、大豆蛋白質、リン脂質、イ
ソフラボンが含まれており、脂質代謝に有効であること
が期待されている。しかしながら、豆乳には特有の不快
臭や不快味があるため多くの消費者から敬遠されている
のが現状である。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】したがって、本発明の
目的は、動脈硬化症予防・改善に優れた脂質代謝改善剤
を提供することにある。

【０００４】

【課題を解決するための手段】かかる実情に鑑み、本発
明者らは、豆乳の持つ有効成分に着目し、鋭意研究を行
った結果、豆乳に乳酸菌を作用させて得られた発酵豆乳
が、ＬＤＬに対する優れた抗酸化活性及び脂質の腸管か
らの吸収抑制作用を有し、脂質代謝改善剤として有用で
あることを見出し、本発明を完成した。

【０００５】すなわち、本発明は、乳酸菌を豆乳に作用
させて得られる発酵豆乳を含有することを特徴とする脂
質代謝改善剤、ＬＤＬ抗酸化剤、コレステロールの腸管
からの吸収抑制剤およびこれを含有する脂質代謝改善食
品を提供することにある。

【０００６】なお、豆乳特有の不快臭を軽減することを
目的として、乳酸菌やビィフィズス菌で豆乳を発酵させ
ることなどが試みられているが、発酵豆乳に優れた脂質
代謝改善効果があることは未だ報告されていない。

【０００７】

【発明の実施の形態】本発明の脂質代謝改善剤は、豆乳
に乳酸菌を作用させて得られた発酵豆乳を主成分とす
る。ここで、本発明において用いられる発酵豆乳は、豆
乳に乳酸菌を作用させて得られるものであり、例えば以
下の工程に従い製造されるものが挙げられる。

【０００８】（１）豆乳の製造（工程１）本発明で用いる豆乳はいかなる方法で製造されたもので
あってもよいが、例えば、原料となる大豆を水につけた
後、熱水又は０．５〜１．０重量％（以下、単に％で示
す）の炭酸ナトリウムを含む熱水を添加して磨砕後、お
からを取り除き、更に加熱殺菌することにより製造する
ことができる。

【０００９】ここで、本発明において用いられる豆乳の
原料となる大豆は、特に制限はないが、油脂を含有した
丸大豆、脱皮大豆、又はフレーク大豆等を原料としたも
のが好ましく、特に脱皮大豆を原料としたものが好まし
い。

【００１０】また、かかる豆乳には、必要に応じて、製
造後、次の工程である微生物処理のために、ショ糖、ブ
ドウ糖、果糖、転化糖等の食品に用いられる糖や、肉エ
キス、ペプトン、酵母エキス、ペプチド等の微生物の増
殖に必要な栄養素を添加してもよく、微生物の至適ｐＨ
に調整するために豆乳にクエン酸、リンゴ酸、アスコル
ビン酸、乳酸、酢酸等の食品に用いられる酸を添加して
もよい。

【００１１】（２）豆乳の発酵（工程２）前記工程１で製造した豆乳に乳酸菌を作用させる方法は
特に限定されず、例えば、培養した乳酸菌の菌液を上記
豆乳に接種した後、その微生物に適した温度、時間、嫌
気性菌ならば嫌気性等の条件を適宜決定して発酵を行え
ばよい。なお、発酵は、菌株を複数種組み合わせた混合
発酵であってもよいし、菌株を複数種組み合わせた連続
発酵であってもよい。

【００１２】ここで、豆乳に作用させる乳酸菌はそれ自
体又はその代謝産物等が人体に有害なものでなければ、
特に限定されるものでないが、ラクトバチルス属、ラク
トコッカス属、ストレプトコッカス属又はロイコノスト
ック属に属する乳酸菌が好ましく、特に、ラクトバチル
ス・カゼイ、ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクト
バチルス・プランタラム、ラクトバチルス・ヘルベティ
カス、ラクトバチルス・ガッセリ、ラクトバチルス・サ
リバリウス・サリバリウス、ラクトバチルス・サリバリ
ウス・サリシニウス、ラクトバチルス・ブヒネリ、ラク
トバチルス・ファーメンタム、ラクトバチルス・パラカ
ゼイ・トレランス、ラクトパチルス・パラカゼイ・パラ
カゼイ、ラクトバチルス・ジョンソニー、ラクトバチル
ス・デルブルッキ・デルブルッキ、ラクトバチルス・デ
ルブルッキ・ブルガリクス、ラクトバチルス・デルブル
ッキ・ラクチス、ラクトバチルス・ガリナラム、ラクト
バチルス・アミロボラス、ラクトバチルス・ブレビス・
ブレビス、ラクトバチルス・ラムノーサス、ラクトバチ
ルス・ケフィア、ラクトバチルス・クリスパータス、ラ
クトバチルス・ロイテリ、ラクトコッカス・ラクチス・
ラクチス、ラクトコッカス・ラクチス・クレモリス、ラ
クトコッカス・プランタラム、ラクトコッカス・ラフィ
ノラクチス、ストレプトコッカス・サーモフィルス、ロ
イコノストック・メセンテロイデス・クレモリス、ロイ
コノストック・ラクチス等が好ましい。

【００１３】豆乳に乳酸菌を作用させて得られた発酵豆
乳は、そのまま本発明の脂質代謝改善剤とすることがで
きるが、食品や経口医薬品に通常使用されている添加物
を加えてもよい。ここで用いる添加物としては、糖類、
蛋白質、脂質、ビタミン類、植物抽出物、動物抽出物、
ゲル化剤、香料、着色剤等が挙げられる。なお、本発明
の脂質代謝改善剤に用いる発酵豆乳は、未殺菌のままで
も、殺菌してからでも用いることができる。

【００１４】本発明の脂質代謝改善剤及び低比重リポタ
ンパク質抗酸化剤を医薬として使用する場合の投与量
は、投与法、患者の年齢、体重、容態によって異なる
が、経口投与の場合、成人患者に対して１日あたり１０
０〜５００mlとすることが好ましい。

【００１５】また、本発明の脂質代謝改善剤は、任意の
範囲で食品に添加して用いることができ、脂質代謝改善
食品とすることができる。食品としては、乳酸菌飲料、
発酵乳、豆乳、牛乳、チーズ、プリン、アイスクリーム
等に１０〜８０％、好ましくは４０〜７０％程度含有さ
せればよく、その他ビスケット、パン等に含有させるこ
ともできる。

【００１６】

【実施例】以下、実施例を挙げて本発明を更に詳細に説
明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものでは
ない。

【００１７】実施例１素豆乳（四国化工機製）にグルコースを１％（Ｗ／Ｖ）
加え、pHを２Ｍクエン酸で６．８としたのち、１００
℃、３０分蒸気滅菌したものを豆乳培地とした。これに
ヒト由来乳酸菌のシードスターターを０．５〜１％接種
し、至適温度（26〜 37℃）の範囲で７日間培養した。
培養終了後、各菌液を１ｇずつ供栓付試験管にとったの
ち、メタノールを７ml加え、時々攪拌しながら一晩４℃
で放置した。その後、遠心分離（1500×ｇ,5℃）し、上
清を１０mlにメスアップして１０倍希釈サンプルとし
た。測定までこれを−２０℃で保存し、抗酸化性を測定
する際に更に４倍希釈して使用した。

【００１８】シリアンハムスター（雄６週齢）をＭＦ飼
料で１週間予備飼育したのち、０．５％コレステロー
ル、および５％ラードを添加したＭＦ飼料で２週間飼育
した。解剖前日に２４時間絶食させ、腹部大動脈から採
血を行い、ＥＤＴＡ法により血漿を調製した。この血漿
から超遠心法によりＬＤＬ画分を採取し、生理的リン酸
緩衝液で２４時間解析したのち、適当な濃度に希釈して
酸化反応用ＬＤＬとした。

【００１９】ＬＤＬが酸化変性を受けると陰性荷電が増
大し、アガロースゲル上で電気泳動を行うと移動距離が
大きくなることから、移動距離の増大を酸化の指標とし
て発酵豆乳の抗酸化性を調べた。

【００２０】ＬＤＬ（終濃度500μg/ml protein）は、
サンプル添加後、５μM CuSO₄存在下で３７℃６時間イ
ンキュベートして酸化させ、ＥＤＴＡ添加ののち氷水中
で冷却して反応を止めた。また、サンプルの代わりにメ
タノールを加えたものをコントロールとし、メタノー
ル、ＥＤＴＡ添加後、０℃でインキュベートしたものを
ブランクとした。

【００２１】反応液１μlを１％アガロースゲル（マル
チトラックＬＤＨアイソザイムゲル・16:CIBA-CORNIN
G）にアプライし、90Ｖで45分間泳動後、コーコレスト
・Ａ（日本ケミファ）によるコレステロール染色を行っ
た。ゲルを乾燥後、各レーンにおけるＬＤＬの移動距離
を測定した。ブランクをＬＤＬが全く酸化されていない
状態と仮定し、コントロールと比べてサンプル添加によ
り移動距離の増大が抑制された割合をＬＤＬ変性抑制率
とした。

【００２２】計算式は（１）に示した。なお、抗酸化性
は豆乳培地の値を１００としたときの比抑制率として表
した。

【００２３】

【数１】

【００２４】

【表１】

【００２５】以上の結果により、乳酸菌による発酵豆乳
は、ＬＤＬ抗酸化活性を有し、豆乳と比較しても優れた
ＬＤＬ抗酸化活性が認められた。

【００２６】実施例２１０％脱脂粉乳に必要に応じて０．５％酵母エキスやグ
ルコースを添加した培地にて前培養した乳酸菌を１％グ
ルコースを加えクエン酸でｐＨを６．８〜６．９に調整
した素豆乳（四国化工機（株）製、１００℃９０分滅
菌）に０．５〜１％接種し所定温度で２日間培養した。

【００２７】上記のとおり調製した発酵豆乳２００mg
に、後述する方法で調製した人工脂質ミセルを２００μ
l を加えて、３７℃で１時間放置後、遠心分離（8000×
ｇ,15分）し上清のコレステロール濃度をデタミナＴＣ
５５５（協和メディックス）を用いて測定した。コント
ロールとしては素豆乳を用い、各発酵豆乳の沈殿に移行
したコレステロール量を下記式（２）によりコレステロ
ール不溶化率とした。

【００２８】

【数２】

【００２９】〔人工脂質ミセルの調製〕リン酸バッファ
ー（150mM,pH7.0）７５mlに、oxgall(DIFCO社製)２ｇ、
コレステロール（和光純薬工業製）９２１mg、リゾフォ
スファチジルコリン（ＳＩＧＭＡ社製）１３５mgの順で
加えて溶解し、次いでモノオレイン酸（東京化成工業
（株）社製）９０．２mg、オレイン酸（和光純薬工業
（株）社製）７０２．２mgを加え混合し、リン酸バッフ
ァーを加えて全量を１００mlとした。溶液を攪拌しなが
ら、室温での超音波処理（ＳＯＮＩＦＲ（BRANSON社
製），スモールチップ）を行った。このエマルジョン及
びミセル溶液をしばらく攪拌後100,000×ｇ、２５℃に
て超遠心分離を１６〜１８時間行った。超遠心分離後、
透明なミセル層のみを回収し、人工脂質ミセルを調製し
た。

【００３０】

【表２】

【００３１】

【表３】

【００３２】以上の結果により、乳酸菌による発酵豆乳
はいずれも豆乳に比べミセル不溶化作用が強かった。コ
レステロールが小腸粘膜から吸収されるにはミセルに溶
解していることが必須である。よって発酵豆乳は豆乳よ
りもコレステロールの吸収を抑制することが期待され
る。

【００３３】

【発明の効果】本発明の脂質代謝改善剤は、腸管からの
コレステロールの吸収を抑制し、血中コレステロール濃
度を低下させることが期待できるので、動脈硬化症の予
防・改善効果が期待できる。また、本発明の脂質代謝改
善剤は、ＬＤＬに対する優れた抗酸化活性を有するの
で、動脈硬化の発端とされるＬＤＬの酸化変性を効果的
に防止することができる。更に、本発明の脂質代謝改善
剤は、豆乳に乳酸菌を作用させて得られた発酵豆乳から
なるので、安全性にも全く問題のない官能的にも優れた
脂質代謝改善剤であり、動脈硬化の予防および治療に有
用である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩ // Ａ２３Ｃ 9/13 Ａ２３Ｃ 9/152 9/152 19/093 19/093 Ａ２３Ｇ 9/02 Ａ２３Ｇ 9/02 Ａ２３Ｌ 1/187 Ａ２３Ｌ 1/187 Ａ６１Ｋ 37/02 ＡＤＮ (72)発明者小野寺範江東京都港区東新橋１丁目１番19号株式会社ヤクルト本社内 (72)発明者石川文保東京都港区東新橋１丁目１番19号株式会社ヤクルト本社内 (56)参考文献特開平６−276979（ＪＰ，Ａ) 特開平７−147898（ＪＰ，Ａ) 特開平３−201944（ＪＰ，Ａ) 特開平８−169（ＪＰ，Ａ) 特開平９−23848（ＪＰ，Ａ) 特開昭60−164450（ＪＰ，Ａ) 特開昭64−13958（ＪＰ，Ａ) 井村隆，大豆タンパク質の血清脂質改善作用−ヒトにおける大豆タンパク質の最小有効摂取量の検討−，ＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃＲｅｓｅａｒｃｈ，1996, Ｖｏｌ．17，Ｎｏ．６，ｐａｇｅｓ 573−578 (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) A23L 1/20 A61K 35/78 ABX A61K 38/00 ADN

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】乳酸菌を豆乳に作用させて得られる発酵
豆乳を含有することを特徴とする低比重リポタンパク質
抗酸化剤。
【請求項２】該乳酸菌が、ラクトバチルス属、ラクト
コッカス属、ストレプトコッカス属およびロイコノスト
ック属より選ばれる一種又は二種以上である請求項１記
載の低比重リポタンパク質抗酸化剤。
【請求項３】該乳酸菌が、ラクトバチルス・カゼイ、
ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバチルス・プ
ランタラム、ラクトバチルス・ヘルベティカス、ラクト
バチルス・ガッセリ、ラクトバチルス・サリバリウス・
サリバリウス、ラクトバチルス・サリバリウス・サリシ
ニウス、ラクトバチルス・ブヒネリ、ラクトバチルス・
ファーメンタム、ラクトバチルス・パラカゼイ・トレラ
ンス、ラクトバチルス・パラカゼイ・パラカゼイ、ラク
トバチルス・ジョンソニー、ラクトバチルス・デルブル
ッキ・デルブルッキ、ラクトバチルス・デルブルッキ・
ブルガリクス、ラクトバチルス・デルブルッキ・ラクチ
ス、ラクトバチルス・ガリナラム、ラクトバチルス・ア
ミロボラス、ラクトバチルス・ブレビス・ブレビス、ラ
クトバチルス・ラムノーサス、ラクトバチルス・ケフィ
ア、ラクトバチルス・クリスパータス、ラクトバチルス
・ロイテリ、ラクトコッカス・ラクチス・ラクチス、ラ
クトコッカス・ラクチス・クレモリス、ラクトコッカス
・プランタラム、ラクトコッカス・ラフィノラクチス、
ストレプトコッカス・サーモフィルス、ロイコノストッ
ク・メセンテロイデス・クレモリスおよびロイコノスト
ック・ラクチスより選ばれる１種又は２種以上である請
求項１又は２記載の低比重リポタンパク質抗酸化剤。