JP3349086B2 - 光学活性トランス−３−置換グリシッド酸エステルの製造方法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、医薬化合物の合成
中間体として有用なトランス−３−置換または非置換フ
ェニルグリシッド酸エステル類の光学異性体を製造し、
使用する技術分野に属する。

【０００２】

【従来の技術】塩酸ジルチアゼム（化学名：（２Ｓ，３
Ｓ）−３−アセトキシ−５−［２−（ジメチルアミノ）
エチル］−２，３−ジヒドロ−２−（４−メトキシフェ
ニル）−１，５−ベンゾチアゼピン−４（５Ｈ）−オン
塩酸塩）はカルシウムチャンネル遮断薬として、狭心
症、本態性高血圧症の治療に広く使用されている医薬化
合物である（メルク・インデックス（Merck Index）１
２版５４１頁）。

【０００３】この化合物の合成法としては、ラセミ型ト
ランス−３−（４−メトキシフェニル）グリシッド酸エ
ステルを用い、のちの工程で光学分割する方法が従来か
ら知られている（特公昭４６−１６７４９号公報、同５
３−１８０３８号公報、同６１−５２１４２号公報）。

【０００４】また、ラセミ型トランス−グリシッド酸エ
ステル化合物を光学分割してえられた（２Ｒ，３Ｓ）−
３−（４−メトキシフェニル）グリシッド酸メチルエス
テルを用いる方法が見出され（特開昭６０−１３７７６
号公報）、種々ラセミ型トランス−グリシッド酸エステ
ル化合物を製造する方法が検討されており、たとえば、
つぎのような方法が知られている。

【０００５】（ａ）ラセミ型トランス−３−（４−メト
キシフェニル）グリシッド酸メチルエステルを加水分解
してアルカリ金属塩としたのち、光学分割剤（たとえ
ば、（−）−メチルベンジルアミン）とのジアステレオ
マー塩を形成させ、これを分割後、再度、エステル化す
る方法（特開昭６１−１４５１７４号公報、特開平２−
２３１４８０号公報）。

【０００６】（ｂ）不斉エステル残基（たとえば（−）
−メンチル基、（−）−２−フェニルシクロヘキシル
基、（−）−８−フェニルメンチル基）を有するクロロ
酢酸エステルと４−メトキシアニスアルデヒドとをダル
ツェンス(Darzens)反応させる方法（特開昭６１−２６
８６６３号公報、特開平２−１７１７０号公報、同２−
１７１６９号公報）。

【０００７】（ｃ）ラセミ型トランス−３−（４−メト
キシフェニル）グリシッド酸メチルエステルの（２Ｓ，
３Ｒ）−異性体を酵素的に不斉加水分解し、残存する
（２Ｒ，３Ｓ）−異性体を取得する方法（特開平２−１
０９９９５号公報、同３−１５３９８号公報、特表平４
−５０１３６０号公報）。

【０００８】（ｄ）トランス−４−メトキシケイ皮酸メ
チルエステルを不斉触媒の存在下、オスミウム酸化して
光学活性ジオール体を製造し、これを分子内閉環して
（２Ｒ，３Ｓ）−３−（４−メトキシフェニル）グリシ
ッド酸メチルエステルを不斉合成する方法（国際公開第
８９／０２４２８号パンフレット（１９８９）、同第８
９／１０３５０号パンフレット（１９８９））。

【０００９】（ｅ）ラセミ型トランス−３−（４−メト
キシフェニル）グリシッド酸メチルエステルの（２Ｓ，
３Ｒ）−異性体をブタノールで酵素的に不斉エステル交
換し、（２Ｒ，３Ｓ）−３−（４−メトキシフェニル）
グリシッド酸メチルエステルをうる方法（特開平４−２
２８０９５号公報、同６−７８７９０号公報）。

【００１０】また、ジルチアゼム以外の１，５−ベンゾ
チアゼピン誘導体にも、優れた薬理活性を有する化合物
が知られており、特開昭６０−２０２８７１号公報など
にはジルチアゼムと２位および３位の絶対配置が逆のベ
ンゾチアゼピン誘導体が血小板凝集抑制作用などを有す
ることが開示されており、この化合物の合成に使用する
（２Ｓ，３Ｒ）−３−（４−メチルフェニル）グリシッ
ド酸メチルエステルをラセミ型トランス−３−（４−メ
チルフェニル）グリシッド酸メチルエステルの酵素的不
斉加水分解により製造する方法も知られている（特開平
３−１７５９９５号公報）。

【００１１】さらに、ラセミ型トランス−３−（４−メ
トキシフェニル）グリシッド酸メチルエステルの（２
Ｓ，３Ｒ）−異性体をブタノールで酵素的に不斉エステ
ル交換し、未交換の（２Ｒ，３Ｓ）−３−（４−メトキ
シフェニル）グリシッド酸メチルエステルをえたのち、
エステル交換により生成する（２Ｓ，３Ｒ）−３−（４
−メトキシフェニル）グリシッド酸ブチルエステルを化
学的にエステル交換してメチルエステルに戻すことによ
り、両異性体を光学純度良くうる方法も知られている
（特開平８−２５９５５２号公報）。

【００１２】また、特開平４−２１７９６９号公報に
は、トランス−３−（４−メトキシフェニル）グリシッ
ド酸メチルエステルのラセミ体（（２Ｒ，３Ｓ）−異性
体と（２Ｓ，３Ｒ）−異性体の等量混合物）および（２
Ｒ，３Ｓ）−異性体を溶媒であるｔ−ブチルメチルエー
テルに加えて加熱溶解し、これに（２Ｒ，３Ｓ）−異性
体の結晶核を接種して晶析することにより、ラセミ体と
ともに溶解した（２Ｒ，３Ｓ）−異性体よりもわずかに
多い（２Ｒ，３Ｓ）−異性体結晶をうる方法が開示され
ている。

【００１３】また、特開平５−３０１８６４号公報に
は、トランス−３−（４−メトキシフェニル）グリシッ
ド酸４−クロロ−３−メチルフェニルエステルのラセミ
体（（２Ｒ，３Ｓ）−異性体と（２Ｓ，３Ｒ）−異性体
との等量混合物）をテトラヒドロフランに加熱溶解した
のち、３０℃で（２Ｒ，３Ｓ）−異性体の結晶を接種す
ることにより、ラセミ体とともに溶解させた（２Ｒ，３
Ｓ）−異性体よりもわずかに多い（２Ｒ，３Ｓ）−異性
体結晶をうる方法が開示されている。

【００１４】さらに、特開平８−２５９５５２号公報に
は、トランス−３−（４−メトキシフェニル）グリシッ
ド酸メチルエステルのラセミ体（（２Ｒ，３Ｓ）−異性
体と（２Ｓ，３Ｒ）−異性体との等量混合物）のうち、
（２Ｓ，３Ｒ）−異性体をブタノールで酵素的に不斉エ
ステル交換し、（２Ｓ，３Ｒ）−ブチルエステル／（２
Ｓ，３Ｒ）−メチルエステルをモル比で７．８／１にし
たのち、生成物から（２Ｒ，３Ｓ）−異性体結晶を晶析
させることが記載されている。

【００１５】しかし、この晶析法においては、少量残存
する（２Ｓ，３Ｒ）−３−（４−メトキシフェニル）グ
リシッド酸メチルエステルが晶析・混入しないように、
晶析後の母液中に（２Ｒ，３Ｓ）−３−（４−メトキシ
フェニル）グリシッド酸メチルエステルがエステル交換
されなかった（２Ｓ，３Ｒ）−異性体よりも多く残って
いる段階で、晶析を中止している。

【００１６】このため、このエステル交換反応で（２
Ｒ，３Ｓ）−３−（４−メトキシフェニル）グリシッド
酸メチルエステルは殆どエステル交換されておらず、ま
た、（２Ｓ，３Ｒ）−異性体のエステル交換転換率が高
いにもかかわらず、結晶としてえられる（２Ｒ，３Ｓ）
−３−（４−メトキシフェニル）グリシッド酸メチルエ
ステルの収率は充分とはいえない。

【００１７】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、トランス−
３−フェニルグリシッド酸エステル類の光学異性体混合
物を含む溶液から、所望の光学異性体の結晶を純度良
く、かつ、母液中の所望の光学異性体の濃度が従来法よ
りもはるかに低くなるまで結晶化させうる方法を提供す
ること、およびラセミ型トランス−３−フェニルグリシ
ッド酸エステル類を酵素で不斉エステル交換後、反応生
成物から所望の光学異性体を純度良く、かつ、母液中の
所望の光学異性体の濃度が従来法よりもはるかに低くな
るまで結晶化させうる方法を提供することを目的とす
る。

【００１８】

【課題を解決するための手段】本発明者らは従来技術の
問題を解決するために、鋭意研究を重ねた結果、トラン
ス−３−フェニルグリシッド酸エステル類のラセミ体溶
液に、その一方の異性体とエステル残基のみが異なり、
かつ、溶解性が高い化合物が共存するばあいには、その
共存化合物と同じ絶対配置を有する異性体の結晶化が阻
害されることを見出し、本発明の方法を完成した。

【００１９】本発明はつぎの方法に関する。

【００２０】一般式（Ｉ）：

【００２１】

【化８】

【００２２】（式中、環Ａは置換または非置換のベンゼ
ン環、Ｒ¹はエステル残基を示す）で表わされるトラン
ス−３−置換グリシッド酸エステルの２位、３位不斉炭
素に基づく、１つの光学異性体（Ａ）、他の光学異性体
（Ｂ）および光学異性体（Ｂ）とエステル残基のみが異
なるエステル（Ｂ′）を溶解した溶液［ただし、光学異
性体（Ｂ）のエステル残基がメチル基またはエチル基で
あり、エステル（Ｂ′）のエステル残基が光学異性体
（Ｂ）のエステル残基よりも炭素数が多い直鎖または分
枝鎖アルキル基、アルコキシ基（これらの基はハロゲン
原子で置換されていてもよい）、アリールアルキル基
（この基は直鎖もしくは分枝鎖低級アルキル基、直鎖も
しくは分枝鎖低級アルコキシ基またはハロゲン原子で置
換されていてもよい）、シクロヘキシル基である］か
ら、エステル（Ｂ′）が存在しなければ光学異性体
（Ｂ）が析出するが、エステル（Ｂ′）が存在するため
光学異性体（Ａ）は析出するが光学異性体（Ｂ）は析出
しない状態となるまで、光学異性体（Ａ）の結晶化を行
ない単離することを特徴とする光学異性体（Ａ）の製造
方法（請求項１）、光学異性体（Ａ）、光学異性体
（Ｂ）およびエステル（Ｂ′）以外に、さらに光学異性
体（Ａ）とエステル残基のみが異なり、エステル
（Ｂ′）と同じエステル残基を有するエステル（Ａ′）
を少量含んでいてもよい溶液から光学異性体（Ａ）の結
晶化を行なう請求項１記載の製造方法（請求項２）、 溶
液において光学異性体（Ａ）／光学異性体（Ｂ）がモル
比で４／６〜１０／１で、エステル（Ｂ′）／光学異性
体（Ｂ）がモル比で５／３〜１０／１である請求項１記
載の製造方法（請求項３）、溶液においてエステル
（Ａ′）／光学異性体（Ａ）のモル比がエステル
（Ｂ′）／光学異性体（Ｂ）のモル比の９／３５以下で
ある請求項２記載の製造方法（請求項４）、光学異性体
（Ａ）の製造に使用する溶媒が、アルコール系溶媒、エ
ーテル系溶媒、ハロゲン原子で置換されていてもよい芳
香族炭化水素系溶媒、ハロゲン原子で置換されていても
よい脂肪族炭化水素系溶媒、エステル系溶媒である請求
項１、２、３または４記載の製造方法（請求項５）、光
学異性体（Ａ）の結晶化を行ない単離する際の温度が−
３０〜＋１５℃、結晶化前の溶液における光学異性体
（Ａ）の濃度が０．５〜４モル／Ｌである請求項１、
２、３、４または５記載の製造方法（請求項６）、エス
テル（Ｂ′）を形成するアルコールを含み、かつ、光学
異性体（Ａ）および光学異性体（Ｂ）を溶解させた溶液
中、立体選択的にエステル交換する能力を有する酵素の
存在下で光学異性体（Ｂ）のエステル交換反応を行なっ
てえられた溶液（溶媒を交換した溶液であってもよい）
を、光学異性体（Ａ）の結晶化および単離を行なう溶液
として使用する請求項１、２、３、４、５または６記載
の製造方法（請求項７）、酵素が、転換率１０％におけ
るエステル交換反応についてのＥ値が２０以上の酵素で
ある請求項７記載の製造方法（請求項８）、エステル
（Ｂ′）を形成するアルコールを含み、かつ、光学異性
体（Ａ）および光学異性体（Ｂ）を溶解させた溶液中、
立体選択的にエステル交換する能力を有する酵素の存在
下でエステル（Ｂ′）／光学異性体（Ｂ）がモル比で５
／３〜１０／１になるようにエステル交換反応を行なっ
てえられた溶液（溶媒を交換した溶液であってもよい）
を光学異性体（Ａ）の結晶化および単離を行なう溶液と
して使用する請求項７記載の製造方法（請求項９）、光
学異性体（Ａ）の絶対配置が（２Ｒ，３Ｓ）、光学異性
体（Ｂ）の絶対配置が（２Ｓ，３Ｒ）である請求項１、
２、３、４、５、６、７、８または９記載の製造方法
（請求項１０）、環Ａが４−メトキシフェニル基であ
り、光学異性体（Ｂ）のエステル残基がメチル基であ
り、エステル（Ｂ′）のエステル残基がｎ−ブチル基で
ある請求項１、２、３、４、５、６、７、８、９または
１０記載の製造方法（請求項１１）、一般式（Ｉ）：

【００２３】

【化９】

【００２４】（式中、環Ａは置換または非置換のベンゼ
ン環、Ｒ¹はエステル残基を示す）で表わされるトラン
ス−３−置換グリシッド酸エステルの２位、３位不斉炭
素に基づく１つの光学異性体（Ａ）および他の光学異性
体（Ｂ）を、光学異性体（Ｂ）とエステル残基のみが異
なるエステル（Ｂ′）を形成するアルコールおよび立体
選択的にエステル交換する能力を有する酵素の存在下で
エステル（Ｂ′）／光学異性体（Ｂ）がモル比で１３／
７〜７．８／１になるようにエステル交換反応を行なっ
てえられた溶液［ただし、光学異性体（Ｂ）のエステル
残基がメチル基またはエチル基であり、エステル
（Ｂ′）のエステル残基が光学異性体（Ｂ）のエステル
残基よりも炭素数が多い直鎖または分枝鎖アルキル基、
アルコキシ基（これらの基はハロゲン原子で置換されて
いてもよい）、アリールアルキル基（この基は直鎖もし
くは分枝鎖低級アルキル基、直鎖もしくは分枝鎖低級ア
ルコキシ基またはハロゲン原子で置換されていてもよ
い）、シクロヘキシル基であり、溶媒を交換した溶液で
あってもよい］から光学異性体（Ａ）の結晶化を行な
い、最初の光学異性体（Ａ）の量に対して７５％以上の
収率で光学純度９９％以上の光学異性体（Ａ）を単離す
ることを特徴とする光学異性体（Ａ）の製造方法（請求
項１２）、酵素が、転換率１０％におけるエステル交換
反応についてのＥ値が２０以上の酵素である請求項１２
記載の製造方法（請求項１３）、光学異性体（Ａ）の絶
対配置が（２Ｒ，３Ｓ）、光学異性体（Ｂ）の絶対配置
が（２Ｓ，３Ｒ）である請求項１２または１３記載の製
造方法（請求項１４）、酵素がセラチア マルセッセン
ス由来のエステラーゼであり、エステル（Ｂ′）／光学
異性体（Ｂ）がモル比で２／１〜８／２であり、光学異
性体（Ａ）の収率が８０％以上である請求項１２記載の
製造方法（請求項１５）、環Ａが４−メトキシフェニル
基であり、光学異性体（Ｂ）のエステル残基がメチル基
であり、エステル（Ｂ′）のエステル残基がｎ−ブチル
基である請求項１２、１３、１４または１５記載の製造
方法（請求項１６）、（ａ）一般式（Ｉ）：

【００２５】

【化１０】

【００２６】（式中、環Ａは置換または非置換ベンゼン
環、Ｒ¹はエステル残基を示す）で表わされるトランス
−３−置換グリシッド酸エステルの２位、３位不斉炭素
に基づく、１つの光学異性体（Ａ）、他の光学異性体
（Ｂ）および光学異性体（Ｂ）とエステル残基のみが異
なるエステル（Ｂ′）を溶解した溶液［ただし、光学異
性体（Ｂ）のエステル残基がメチル基またはエチル基で
あり、エステル（Ｂ′）のエステル残基が光学異性体
（Ｂ）のエステル残基よりも炭素数が多い直鎖または分
枝鎖アルキル基、アルコキシ基（これらの基はハロゲン
原子で置換されていてもよい）、アリールアルキル基
（この基は直鎖もしくは分枝鎖低級アルキル基、直鎖も
しくは分枝鎖低級アルコキシ基またはハロゲン原子で置
換されていてもよい）、シクロヘキシル基である］を調
製し、 （ｂ）この溶液から、エステル（Ｂ′）が存在しなけれ
ば光学異性体（Ｂ）が析出するが、エステル（Ｂ′）が
存在するため光学異性体（Ａ）は析出するが光学異性体
（Ｂ）は析出しない状態となるまで、光学異性体（Ａ）
の結晶化を行ない、 （ｃ）光学異性体（Ａ）の結晶を単離し、 （ｄ）光学異性体（Ａ）および光学異性体（Ｂ）ととも
に母液中に存在する、エステル（Ｂ′）を化学的にエス
テル交換して光学異性体（Ｂ）としたのち、光学異性体
（Ｂ）の結晶化を行ない単離し、 （ｅ）一般式（Ｉ）で表わされるトランス−３−置換グ
リシッド酸エステルおよびエステル（Ｂ′）を母液に加
えて工程（ｂ）の結晶化に供する溶液とし、 （ｆ）前記工程（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）および（ｅ）を
この順序で繰り返す ことを特徴とする光学異性体（Ａ）および光学異性体
（Ｂ）の製造方法（請求項１７）、工程（ｄ）におい
て、さらに反応液に光学異性体（Ａ）とエステル残基の
みが異なり、エステル（Ｂ′）と同じエステル残基を有
するエステル（Ａ′）を加え、工程（ｅ）において母液
に含まれるエステル（Ａ′）を化学的にエステル交換し
て光学異性体（Ａ）に戻す請求項１７記載の製造方法
（請求項１８）、工程（ａ）において、光学異性体
（Ａ）、光学異性体（Ｂ）およびエステル（Ｂ′）以外
に、さらに光学異性体（Ａ）とエステル残基のみが異な
り、エステル（Ｂ′）と同じエステル残基を有するエス
テル（Ａ′）を少量含んでいてもよい溶液から光学異性
体（Ａ）の結晶化を行なう請求項１７または１８記載の
製造方法（請求項１９）、光学異性体（Ｂ）のエステル
残基がメチル基またはエチル基であり、エステル
（Ｂ′）のエステル残基が光学異性体（Ｂ）のエステル
残基よりも炭素数が多い直鎖または分枝鎖アルキル基、
アルコキシアルキル基（これらの基はハロゲン原子で置
換されていてもよい）、アリールアルキル基（この基は
直鎖もしくは分枝鎖低級アルキル基、直鎖もしくは分枝
鎖低級アルコキシ基またはハロゲン原子で置換されてい
てもよい）である請求項１７、１８または１９記載の製
造方法（請求項２０）、工程（ａ）における溶液におい
て光学異性体（Ａ）／光学異性体（Ｂ）がモル比で４／
６〜１０／１で、エステル（Ｂ′）／光学異性体（Ｂ）
がモル比で５／３〜１０／１である請求項１７記載の製
造方法（請求項２１）、工程（ａ）における溶液におい
て光学異性体（Ａ）／光学異性体（Ｂ）がモル比で４／
６〜１０／１で、エステル（Ｂ′）／光学異性体（Ｂ）
がモル比で５／３〜１０／１であり、工程（ｄ）におけ
るエステル（Ａ′）の添加量が、溶液におけるエステル
（Ａ′）／光学異性体（Ａ）がモル比で５／３〜１０／
１である請求項１８記載の製造方法（請求項２２）、工
程（ａ）における溶液においてエステル（Ａ′）／光学
異性体（Ａ）のモル比がエステル（Ｂ′）／光学異性体
（Ｂ）のモル比の９／３５以下である請求項１９記載の
製造方法（請求項２３）、光学異性体（Ａ）および光学
異性体（Ｂ）の製造に使用する溶媒が、アルコール系溶
媒、エーテル系溶媒、ハロゲン原子で置換されていても
よい芳香族炭化水素系溶媒、ハロゲン原子で置換されて
いてもよい脂肪族炭化水素系溶媒、エステル系溶媒であ
る請求項１７、１８、１９、２０、２１、２２または２
３記載の製造方法（請求項２４）、工程（ｂ）および工
程（ｃ）における光学異性体（Ａ）の結晶化を行ない単
離する際の温度が−３０〜＋１５℃、結晶化前の溶液に
おける光学異性体（Ａ）の濃度が０．５〜４モル／Ｌで
ある請求項１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３
または２４記載の製造方法（請求項２５）、請求項１、
２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、
１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２
１、２２、２３、２４または２５記載の方法で、光学異
性体（Ａ）として、（２Ｒ，３Ｓ）−３−置換グリシッ
ド酸エステルを製造し、製造された（２Ｒ，３Ｓ）−３
−置換グリシッド酸エステルを用いて、一般式（II）：

【００２７】

【化１１】

【００２８】（式中、環Ａおよび環Ｂはそれぞれ置換ま
たは非置換ベンゼン環、Ｒ²は−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｎ（ＣＨ₃）
₂または

【００２９】

【化１２】

【００３０】を示す）で表わされる（２Ｓ，３Ｓ）−
１，５−ベンゾチアゼピン誘導体またはその薬理的に許
容しうる塩を製造する方法（請求項２６）、環Ａが４−
メトキシフェニル基であり、環Ｂが非置換ベンゼン環で
あり、Ｒ²が−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｎ（ＣＨ₃）₂である請求項２
６記載の製造方法（請求項２７）、請求項１、２、３、
４、５、６、７、８、９、１１、１２、１３、１５、１
６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４
または２５記載の方法で、光学異性体（Ａ）として、
（２Ｓ，３Ｒ）−３−置換グリシッド酸エステルを製造
し、製造された（２Ｓ，３Ｒ）−３−置換グリシッド酸
エステルを用いて、一般式（III）：

【００３１】

【化１３】

【００３２】（式中、環Ａおよび環Ｂはそれぞれ置換ま
たは非置換ベンゼン環を示す）で表わされる（２Ｒ，３
Ｒ）−１，５−ベンゾチアゼピン誘導体またはその薬理
的に許容しうる塩を製造する方法（請求項２８）、請求
項１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、
１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２
０、２１、２２、２３、２４または２５記載の方法で、
光学異性体（Ａ）として、（２Ｒ，３Ｓ）−または（２
Ｓ，３Ｒ）−３−置換グリシッド酸エステルを製造し、
製造された（２Ｒ，３Ｓ）−または（２Ｓ，３Ｒ）−３
−置換グリシッド酸エステルを用いて、一般式：

【００３３】

【化１４】

【００３４】（式中、環Ａおよび環Ｂはそれぞれ置換ま
たは非置換ベンゼン環を示し、＊は不斉炭素原子を示
す）で表わされる光学活性トレオ−ニトロカルボン酸化
合物を製造する方法（請求項２９）。

【００３５】かかる本発明の方法によれば、トランス−
３−置換グリシッド酸エステル（Ｉ）の光学異性体混合
物溶液から、高純度の光学異性体を母液中の所望の光学
異性体の濃度が従来法よりもはるかに低くなるまで結晶
化させ取得することができる。また、トランス−３−置
換グリシッド酸エステル（Ｉ）のラセミ体を酵素で不斉
エステル交換後、生成物から高純度の光学異性体を母液
中の所望の光学異性体の濃度が従来法よりもはるかに低
くなるまで結晶化させ取得することができる。

【００３６】

【発明の実施の形態】本発明においては、一般式
（Ｉ）：

【００３７】

【化１５】

【００３８】（式中、環Ａは置換または非置換のベンゼ
ン環、Ｒ¹はエステル残基を示す）で表わされるトラン
ス−３−置換グリシッド酸エステルの２位、３位不斉炭
素に基づく、１つの光学異性体（Ａ）、他の光学異性体
（Ｂ）および光学異性体（Ｂ）とエステル残基のみが異
なるエステル（Ｂ′）を溶解した溶液（以下、溶液（Ａ
ＢＢ′）ともいう）が使用される。また、光学異性体
（Ａ）、光学異性体（Ｂ）およびエステル（Ｂ′）を溶
解した溶液には、これら以外に、さらに光学異性体
（Ａ）とエステル残基のみが異なり、エステル（Ｂ′）
と同じエステル残基を有するエステル（Ａ′）が少量含
まれていてもよい（さらにエステル（Ａ′）が含まれた
溶液を、以下、溶液（ＡＡ′ＢＢ′）ともいう）。

【００３９】前記トランス−３−置換フェニルグリシッ
ド酸エステル（Ｉ）（すなわち、光学異性体（Ａ）およ
び（Ｂ））としては、一般式（Ｉ）において、環Ａが置
換または非置換ベンゼン環であり、Ｒ¹がトランス−３
−置換グリシッド酸エステル（Ｉ）を結晶化溶媒中で結
晶化可能とするエステル残基である化合物をあげること
ができる。

【００４０】その具体例としては、環Ａが（ａ）直鎖ま
たは分枝鎖低級アルキル基（たとえば、メチル基、エチ
ル基、プロピル基、ｉ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｓ
ｅｃ−ブチル基、ｔ−ブチル基、ｎ−ヘキシル基、２−
ヘキシル基、３−ヘキシル基）、（ｂ）直鎖または分枝
鎖低級アルコキシ基（たとえば、メトキシ基、エトキシ
基、プロピルオキシ基、ｉ−プロピルオキシ基、ｎ−ブ
トキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、ｔ−ブトキシ基、ｎ−
ヘキシルオキシ基、２−ヘキシルオキシ基、３−ヘキシ
ルオキシ基）、または（ｃ）ハロゲン原子（たとえば、
フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子）で置換
されていてもよいフェニル基であり、Ｒ¹ がメチル基、
エチル基である化合物をあげることができる。

【００４１】好ましい例としては、環Ａがメチル基また
はメトキシ基で置換されたフェニル基であり、Ｒ¹がメ
チル基、エチル基である化合物をあげることができ、と
りわけ、環Ａがメチル基またはメトキシ基で４位が置換
されたフェニル基であり、Ｒ¹がメチ ル基、エチル基で
ある化合物をあげることができる。

【００４２】また、トランス−３−置換グリシッド酸エ
ステル（Ｉ）の光学異性体（Ｂ）とエステル残基のみが
異なる光学異性体（エステル（Ｂ′））のエステル残基
としては、トランス−３−置換グリシッド酸エステル
（Ｉ）の光学異性体よりも、結晶化に使用する溶媒中で
のエステル（Ｂ′）の溶解度を高くするエステル残基が
あげられる。

【００４３】光学異性体（Ｂ）とエステル残基のみが異
なるエステル（Ｂ′）のエステル残基としては、たとえ
ば、つぎのものをあげることができる。

【００４４】（ａ）置換基を有していてもよい、Ｒ¹よ
りも炭素数の多い直鎖または分枝鎖アルキル基（たとえ
ば、プロピル基、ｉ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｓｅ
ｃ−ブチル基、ｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、２−ペ
ンチル基、３−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、２−ヘキ
シル基、３−ヘキシル基、ｎ−ヘプチル基、２−ヘプチ
ル基、３−ヘプチル基、４−ヘプチル基、ｎ−オクチル
基、２−オクチル基、３−オクチル基、４−オクチル
基、ｎ−ノニル基、、２−ノニル基、３−ノニル基、４
−ノニル基、５−ノニル基、ｎ−デシル基、２−デシル
基、３−デシル基、４−デシル基、５−デシル基）、
（ｂ）置換基を有していてもよいアルコキシアルキル基
（たとえば、メトキシメチル基、エトキシメチル基、プ
ロピルオキシメチル基、メトキシエチル基、メトキシプ
ロピル基、メトキシブチル基、エトキシエチル基、プロ
ピルオキシプロピル基）、（ｃ）置換基を有していても
よいアリールアルキル基（たとえば、ベンジル基、フェ
ネチル基、フェニルプロピル基、ナフチルメチル基）。

【００４５】ここに、アルキル基、アルコキシアルキル
基の置換基としては、ハロゲン原子（たとえば、フッ素
原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子）を、アリール
アルキル基の置換基としては、直鎖または分枝鎖低級ア
ルキル基（たとえば、メチル基、エチル基、プロピル
基、ｉ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｓｅｃ−ブチル
基、ｔ−ブチル基、ｎ−ヘキシル基、２−ヘキシル基、
３−ヘキシル基）、直鎖または分枝鎖低級アルコキシ基
（たとえば、メトキシ基、エトキシ基、プロピルオキシ
基、ｉ−プロピルオキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｓｅｃ−
ブトキシ基、ｔ−ブトキシ基、ｎ−ヘキシルオキシ基、
２−ヘキシルオキシ基、３−ヘキシルオキシ基）、ハロ
ゲン原子（たとえば、フッ素原子、塩素原子、臭素原
子、ヨウ素原子）をあげることができる。

【００４６】光学異性体（Ｂ）とエステル残基のみが異
なるエステル（Ｂ′）のエステル残基の好ましい具体例
としては、ｉ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｓｅｃ−ブ
チル基、ｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル
基、ｎ−オクチル基、ｎ−ノニル基、ｎ−デシル基、ベ
ンジル基、フェネチル基をあげることができる。

【００４７】また、光学異性体（Ｂ）とエステル残基の
みが異なるエステル（Ｂ′）の絶対配置は、（２Ｒ，３
Ｓ）および（２Ｓ，３Ｒ）のいずれであってもよく、
（２Ｒ，３Ｓ）型のエステル（Ｂ′）を共存させれば
（２Ｓ，３Ｒ）型の光学異性体（Ａ）を、（２Ｓ，３
Ｒ）型のエステル（Ｂ′）を共存させれば（２Ｒ，３
Ｓ）型の光学異性体（Ａ）を高純度の結晶として、母液
中の光学異性体（Ａ）の濃度が従来法よりもはるかに低
くなるまで結晶化させることができ、したがって、従来
法よりもはるかに収率よく取得することができる。

【００４８】本発明の結晶化に使用する溶媒としては、
トランス−３−置換グリシッド酸エステル（Ｉ）の再結
晶に使用しうる溶媒をいずれも使用することができ、ア
ルコール系溶媒（たとえば、メタノール、エタノール、
ｎ−プロパノール、ｉ−プロパノール、ｎ−ブタノー
ル）、エーテル系溶媒（たとえば、ジエチルエーテル、
ｔ−ブチルメチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、
テトラヒドロフラン、ジオキサン）、ハロゲン原子で置
換されていてもよい芳香族炭化水素系溶媒（たとえば、
ベンゼン、トルエン、キシレン、クロロベンゼン、ジク
ロロベンゼン）、ハロゲン原子で置換されていてもよい
脂肪族炭化水素系溶媒（たとえば、ヘキサン、シクロヘ
キサン、ｎ−ヘプタン、ｎ−オクタン、ジクロロメタ
ン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、四塩化炭
素）、エステル系溶媒（たとえば酢酸メチルエステル、
酢酸エチルエステル）などをあげることができる。これ
らは２種以上を組み合わせて用いてもよい。

【００４９】また、トランス−３−置換グリシッド酸エ
ステル（Ｉ）および光学異性体（Ｂ）とエステル残基の
みが異なるエステル（Ｂ′）のエステル残基およびトラ
ンス−３−置換グリシッド酸エステル（Ｉ）のフェニル
基上の置換基により、適切な溶媒を適宜選択して使用す
ることができ、トランス−３−置換グリシッド酸エステ
ル（Ｉ）の光学異性体（Ａ）の溶解度が温度により大き
く変化し、かつ、光学異性体（Ｂ）とエステル残基のみ
が異なるエステル（Ｂ′）の溶解度が光学異性体（Ａ）
の溶解度よりもはるかに大きい溶媒が好ましい。

【００５０】たとえば、トランス−３−置換グリシッド
酸エステル（Ｉ）として、トランス−３−（４−メトキ
シフェニル）グリシッド酸メチルエステルを、光学異性
体（Ｂ）とエステル残基のみが異なるエステルとして、
そのｎ−ブチルエステルを使用するばあいには、メタノ
ール、エタノール、キシレンなどを使用するのが好まし
い。

【００５１】また、トランス−３−置換グリシッド酸エ
ステル（Ｉ）の光学異性体（Ａ）および（Ｂ）ならびに
これとエステル残基のみが異なるエステル（Ｂ′）を一
旦溶解することができ、かつ、溶液の温度を下げること
により、光学異性体（Ａ）が晶析するような範囲内で溶
媒量を適宜定めることができる。このため、溶媒量は光
学異性体（Ａ）および（Ｂ）ならびにこれとエステル残
基のみが異なるエステル（Ｂ′）の種類、これらの組
成、晶析温度などにより、実験的に適切な範囲を選択す
ることができる。一般に、光学異性体（Ａ）および
（Ｂ）の溶解度が大きく、かつ、温度変化による溶解度
変化が大きい溶媒では溶媒量を少なくすることが可能で
ある。

【００５２】たとえば、キシレン１００ｍｌに下記トラ
ンス−３−（４−メトキシフェニル）グリシッド酸エス
テル組成物を溶解させて溶液を調製したのち、−１０℃
に冷却させるばあいには、（２Ｒ，３Ｓ）メチルエステ
ルのみを効率的に、溶液中の（２Ｒ，３Ｓ）メチルエス
テル濃度＜（２Ｓ，３Ｒ）メチルエステル濃度の範囲に
おいても晶析させることができる。

【００５３】キシレン１００ｍｌに溶解させる組成物 （２Ｒ，３Ｓ）メチルエステル ４９ｇ （２Ｓ，３Ｒ）メチルエステル １４ｇ （２Ｓ，３Ｒ）ブチルエステル ３９ｇ （２Ｒ，３Ｓ）メチルエステルを晶析させたのちの溶液
中の組成物組成 （２Ｒ，３Ｓ）メチルエステル ９ｇ （２Ｓ，３Ｒ）メチルエステル 変化なし （２Ｓ，３Ｒ）ブチルエステル 変化なし また、晶析前の溶液における光学異性体（Ａ）の濃度と
しては、光学異性体（Ａ）の種類、溶媒の種類、晶析時
の温度などによっても異なるが、通常、０．５〜４モル
／Ｌが使用される。

【００５４】本発明の方法におけるトランス−３−置換
グリシッド酸エステル（Ｉ）の光学異性体（Ａ）および
（Ｂ）ならびに光学異性体（Ｂ）とエステル残基のみが
異なるエステル（Ｂ′）を含む溶液において、光学異性
体（Ａ）と光学異性体（Ｂ）との比率は、エステル
（Ｂ′）によって結晶化が抑制された光学異性体（Ｂ）
よりも光学異性体（Ａ）が結晶化しやすい範囲内にある
ことが必要であり、このばあいには本発明の方法により
光学異性体（Ａ）を結晶として取得することができる。

【００５５】しかし、光学異性体（Ａ）が光学異性体
（Ｂ）よりも多く含まれるばあいには、エステル
（Ｂ′）によって光学異性体（Ｂ）の結晶化が抑制され
ることによってえられる光学異性体（Ａ）の結晶に加え
て、初めから多く含まれる光学異性体（Ａ）も取得でき
る点で好ましい。

【００５６】また、エステル（Ｂ′）の光学異性体
（Ｂ）に対する比が大きくなるほど、光学異性体（Ｂ）
の結晶化抑制の程度が向上し、光学異性体（Ａ）の結晶
をより多く取得できるため、エステル（Ｂ′）の光学異
性体（Ｂ）に対する比率が大きいほど好ましい。

【００５７】これら異性体の比率は、光学異性体（Ａ）
および（Ｂ）ならびにエステル（Ｂ′）のエステル残
基、結晶化に使用する溶媒の種類にもよるが、一般に、
光学異性体（Ａ）／光学異性体（Ｂ）がモル比で４／６
〜１０／１程度、エステル（Ｂ′）／光学異性体（Ｂ）
がモル比で５／３〜１０／１程度であるのが好ましく、
とりわけ、光学異性体（Ａ）／光学異性体（Ｂ）が１／
１〜４／１程度、エステル（Ｂ′）／光学異性体（Ｂ）
が２／１〜７．８／１程度であるのが好ましい。

【００５８】また、本発明の方法では、光学異性体
（Ａ）および（Ｂ）ならびにエステル（Ｂ′）以外に、
他の成分を含む溶液から結晶化を行なうこともできる。
たとえば、これら３成分以外に、光学異性体（Ａ）とエ
ステル残基のみが異なる光学異性体（エステル
（Ａ′））を含むものであってもよい。エステル
（Ａ′）が含まれるばあい、エステル（Ａ′）／光学異
性体（Ａ）のモル比がエステル（Ｂ′）／光学異性体
（Ｂ）のモル比の９／３５以下であるのが、エステル
（Ａ′）の存在によって惹き起される光学異性体（Ａ）
の結晶化阻害の影響が少なく、光学異性体（Ａ）の結晶
を多く、しかも高純度でうることができる点で好まし
い。

【００５９】すなわち、光学異性体（Ａ）は、エステル
（Ａ′）の存在により結晶化が抑制されるが、エステル
（Ｂ′）による光学異性体（Ｂ）の結晶化抑制により、
光学異性体（Ａ）が先に結晶化するばあいも、本発明の
方法に含まれる。

【００６０】このばあいには、溶液に含まれるエステル
（Ｂ′）による光学異性体（Ｂ）の結晶化阻害の程度が
エステル（Ａ′）による光学異性体（Ａ）の結晶化阻害
の程度より大きく、光学異性体（Ａ）が光学異性体
（Ｂ）よりも結晶化しやすいばあいには、本発明の方法
により光学異性体（Ａ）を取得することができる。

【００６１】また、本発明の方法では、少なくとも光学
異性体（Ａ）および（Ｂ）ならびにエステル（Ｂ′）の
３異性体が溶液中に存在することが必要であり、この点
で、光学異性体（Ａ）および（Ｂ）のみからなる優先晶
析法とは明確に異なっている。また、本発明の方法はエ
ステル（Ｂ′）による光学異性体（Ｂ）の結晶化抑制を
利用するものであり、１回の晶析、単離で光学異性体
（Ａ）を単離するものであるが、光学異性体（Ａ）およ
び（Ｂ）のみを含む溶液に光学異性体（Ａ）の種結晶を
接種し、光学異性体（Ａ）を結晶化、ついで光学異性体
（Ｂ）の種結晶を接種して光学異性体（Ｂ）を結晶化さ
せる操作を繰り返して行なう優先晶析法とは、この点に
おいても明確に異なっているのである。さらに、本発明
の方法は、結晶化前の溶液中における光学異性体の濃度
が光学異性体（Ａ）＞＞光学異性体（Ｂ）から光学異性
体（Ａ）＜光学異性体（Ｂ）までの広い範囲の任意の範
囲で光学異性体（Ａ）の晶析、単離を行なう方法である
点でも、所望の光学異性体が他方の光学異性体よりも過
剰に含まれる溶液から各光学異性体を結晶化させて単離
する優先晶析法とは異なるのである。

【００６２】なお、光学異性体（Ａ）および（Ｂ）なら
びにエステル（Ｂ′）の溶液とともに光学異性体（Ａ）
の結晶が共存する状態での晶析も本発明の方法の態様に
含まれる。一方、光学異性体（Ｂ）が含まれておらず、
またはエステル（Ｂ′）が含まれていないために、エス
テル（Ｂ′）による光学異性体（Ｂ）の晶析の抑制が生
じないばあいは、本発明の方法から除外される。

【００６３】本発明の方法において結晶化を行なう温度
は、トランス−３−置換グリシッド酸エステル（Ｉ）の
光学異性体（Ａ）は結晶化するが、光学異性体（Ｂ）、
エステル（Ｂ′）が結晶化しない温度（ただし、放置す
るとはじめて析出するばあい、析出がはじまるまでは析
出しない温度に含む）でなければならない。かかる結晶
化の温度はトランス−３−置換グリシッド酸エステル
（Ｉ）の種類、溶媒の種類、結晶化させる溶液の組成に
よって変わるが、トランス−３−置換グリシッド酸エス
テル（Ｉ）の光学異性体（Ａ）のオキシラン環の安定性
からすれば、結晶化させる溶液を作製する際にあまり高
温に加熱して溶解することは好ましくないため、７０℃
程度以下の温度で溶解させ、室温以下の低温で結晶化さ
せるのが好ましい。

【００６４】また、一般に、溶媒量が多いばあい、低温
にしなければ光学異性体（Ａ）の結晶化が進行せず、一
方、溶媒量を少なくすれば比較的高温でも光学異性体
（Ａ）の結晶化が進行するため、工業化する際には、溶
媒量、設備面およびエネルギー面からは溶媒量を少なく
し、濃厚溶液から室温付近で結晶化させるのが好まし
い。

【００６５】しかし、一般に溶媒量を少なくし、濃厚溶
液から結晶化させると不純物の含有率が高くなる傾向に
あるため、純度の面からは溶媒量を多くし、低温で結晶
化させるのが好ましい。

【００６６】このため、光学異性体（Ａ）の晶析を効率
的に行なうためには、トランス−３−置換グリシッド酸
エステル（Ｉ）の種類、エステル（Ｂ′）のエステル残
基、溶媒の種類、結晶化させる溶液の組成によって、実
験的に最適の温度範囲を設定する必要がある。

【００６７】たとえば、光学異性体（Ａ）および（Ｂ）
がメチルエステル、エステル（Ｂ′）がｎ−ブチルエス
テルであり、メタノールから晶析するばあいには、−３
０〜＋１５℃の範囲で行なうのが好ましい。他のばあい
も同様の温度が採用される。

【００６８】なお、本発明の方法では、エステル
（Ｂ′）による光学異性体（Ｂ）の結晶化阻害が生じる
ため、溶解度が同じ光学異性体の晶析速度の差異を利用
する優先晶析法と異なり、非常に厳密な温度設定を行な
わなくても、光学異性体（Ｂ）の結晶を含まない光学異
性体（Ａ）を純度良く取得することができ、優先晶析法
に比べ、温度の許容範囲が広い。

【００６９】本発明の方法によれば、エステル（Ｂ′）
が共存することにより、光学異性体（Ｂ）の結晶化が阻
害され、また、光学異性体（Ｂ）が析出するばあいに
は、同じ絶対配置を有するエステル（Ｂ′）と混合した
アモルファスを形成して析出するため、光学異性体
（Ａ）の晶析が生じている状態と外観上区別することが
できる。

【００７０】なお、本発明の方法による光学異性体
（Ａ）の結晶化は、光学異性体（Ａ）、光学異性体
（Ｂ）およびエステル（Ｂ′）を溶解した溶液から、エ
ステル（Ｂ′）が存在しなければ光学異性体（Ｂ）が析
出する状態となるまで行なわれる。

【００７１】前記状態に該当するか否かは溶解度による
ため、溶液の温度がかわれば前記状態に該当しない溶液
も該当するようになる。また、逆のばあいもある。

【００７２】本発明における光学異性体（Ａ）、光学異
性体（Ｂ）およびエステル（Ｂ′）を溶解した溶液か
ら、エステル（Ｂ′）が存在しなければ光学異性体
（Ｂ）が析出するが、エステル（Ｂ′）が存在するため
光学異性体（Ａ）は析出するが光学異性体（Ｂ）は析出
しない状態を、本発明に使用する特定の溶液ａについて
温度および時間を変数としたばあいの関係を示す図１に
したがって説明する。なお、図１に記載の溶液ａは光学
異性体（Ａ）、光学異性体（Ｂ）およびエステル
（Ｂ′）の比率ならびに溶媒、濃度が一定で光学異性体
（Ａ）の濃度＞光学異性体（Ｂ）の濃度、エステル
（Ｂ′）は光学異性体（Ｂ）の結晶化を抑制するのに充
分な量含有されているとする。

【００７３】溶液ａは完全に均一な溶液である。溶液ａ
を冷却させると点ｂにおいて光学異性体（Ａ）の析出が
はじまる。さらに溶液の冷却をつづけると光学異性体
（Ｂ）よりも余分に溶解している光学異性体（Ａ）は析
出しきり、光学異性体（Ａ）／光学異性体（Ｂ）＝１／
１の点ｃに到達する。

【００７４】すなわち、点ｂから点ｃまで冷却する間に
光学異性体（Ａ）の結晶を析出させることができるはず
であるが、点ｂから点ｃに向けて冷却すると、点ｃに近
づくにしたがって溶液中の光学異性体（Ｂ）の割合が増
加するため、溶液のゆらぎ（溶液における温度、濃度な
どの部分的な不均一さ）が光学異性体（Ｂ）の析出に影
響を与えるため、特開平８−２５９５５２号公報では、
晶析後の母液において光学異性体（Ａ）／光学異性体
（Ｂ）＝１．３／１程度までしか光学異性体（Ａ）の結
晶化は行なわれていなかった。

【００７５】点ｃの溶液は、光学異性体を光学異性体
（Ａ）／光学異性体（Ｂ）＝１／１の割合で含有するか
ら、点ｃよりも溶液を冷却することにより析出する結晶
は、本来、光学異性体（Ａ）／光学異性体（Ｂ）＝１／
１の結晶になるはずである。

【００７６】ところが、本発明においては、エステル
（Ｂ′）が共存するため、光学異性体（Ｂ）の結晶化が
抑制され、点ｃよりもさらに溶液を冷却しても光学異性
体（Ａ）は析出するが、光学異性体（Ｂ）は析出しない
ため光学異性体（Ａ）の収量を増大させることができ
る。

【００７７】点ｃをすぎて溶液をさらに低温になるよう
に冷却すると、ついには光学異性体（Ａ）の析出だけで
なく、溶液全体が白濁し、光学異性体（Ａ）のみなら
ず、光学異性体（Ｂ）およびエステル（Ｂ′）のアモル
ファス状物が析出する点ｄに到達する。したがって、本
発明の方法は、点ｄより高い温度で行なう必要がある。

【００７８】なお、点ｃをすぎてさらに、たとえば点ｅ
まで冷却した溶液をその温度で冷却しつづけると、時間
ｔ後に点ｆに達し、溶液全体が白濁し、点ｄに到達した
のと同じ現象が生じ、エステル（Ｂ′）により結晶化が
抑制されていた光学異性体（Ｂ）がエステル（Ｂ′）と
ともにアモルファス状物として析出する。したがって、
本発明の方法は溶液が白濁するまでの時間ｔまでに行な
う必要がある。

【００７９】以上のように、本発明の方法では、図１の
「本発明の方法が到達する状態」となるまで結晶化が行
なわれる。この状態は溶液を形成する光学異性体
（Ａ）、（Ｂ）の種類、比率、濃度、エステル（Ｂ′）
の種類、濃度、溶媒の種類、量などによりかわるため、
条件がかわればそれぞれの条件に応じて適宜求めればよ
い。

【００８０】たとえば、図１で用いた溶液における光学
異性体の割合が光学異性体（Ａ）＜光学異性体（Ｂ）に
なるばあい、光学異性体（Ａ）の析出開始点は点ｃより
点ｄ側になり、析出開始点から点ｄの間で光学異性体
（Ａ）を結晶化させ単離することができる。

【００８１】析出した結晶の単離は、デカンテーショ
ン、濾過などの通常の方法により行なうことができる。
処理量が多いばあいには時間がかかるが、少量のばあい
には短時間に行なうことができる（実験室的な単離のば
あい瞬間的に行なうことも可能）。単離に時間がかかる
ばあい、その時間を予め確保するために、たとえば図１
の点ｅで晶析を行ない、単離のための時間ｔを確保する
のが好ましい。

【００８２】本発明の方法によれば、たとえば、ラセミ
型トランス−３−（４−メトキシフェニル）グリシッド
酸メチルエステルに、光学異性体（Ｂ）の析出を抑制す
ることができるのに充分な量の（２Ｓ，３Ｒ）−３−
（４−メトキシフェニル）グリシッド酸ｎ−ブチルエス
テルを添加して晶析を行なえば、晶析後の母液における
（２Ｓ，３Ｒ）−３−（４−メトキシフェニル）グリシ
ッド酸メチルエステルが（２Ｒ，３Ｓ）−３−（４−メ
トキシフェニル）グリシッド酸メチルエステルの２倍以
上になるまで、（２Ｒ，３Ｓ）−３−（４−メトキシフ
ェニル）グリシッド酸メチルエステルを結晶化させるこ
とができ、かつ、えられる結晶の光学純度も９９％以上
にすることができる。

【００８３】このため、晶析後の母液において、光学異
性体（Ｂ）と光学異性体（Ａ）の量が同じになるまで、
全く光学異性体（Ｂ）の晶析を生じさせることなく、光
学異性体（Ａ）の晶析を行なうことができるとともに、
光学異性体（Ｂ）に比べ、光学異性体（Ａ）の量が少な
くなるまで、光学異性体（Ａ）を純粋な結晶の形で取得
することができる。

【００８４】特開平８−２５９５５２号公報には、ラセ
ミ型トランス−３−（４−メトキシフェニル）グリシッ
ド酸メチルエステルをセラチア マルセッセンス（Ｓｅ
ｒｒａｔｉａ ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ）由来のエステラ
ーゼで不斉エステル交換することにより、その（２Ｓ，
３Ｒ）−異性体の７．８／８．８（約８８．６％）をｎ
−ブチルエステルとし、酵素を除去後、溶媒を減圧留去
し、ｉ−プロパノールから晶析することにより光学純度
９９％以上の（２Ｒ，３Ｓ）−３−（４−メトキシフェ
ニル）グリシッド酸メチルエステルを結晶の形で取得し
ている。

【００８５】しかし、このばあいには、（２Ｓ，３Ｒ）
−３−（４−メトキシフェニル）グリシッド酸メチルエ
ステルの結晶化などを避けて、光学純度の良い（２Ｒ，
３Ｓ）−３−（４−メトキシフェニル）グリシッド酸メ
チルエステルの結晶をうるために、晶析後の母液におい
て（２Ｒ，３Ｓ）−３−（４−メトキシフェニル）グリ
シッド酸メチルエステルが（２Ｓ，３Ｒ）−３−（４−
メトキシフェニル）グリシッド酸メチルエステルの約
１．３倍程度となった段階で晶析を停止している。

【００８６】これに対し、本発明の方法では、たとえ
ば、同じ組成物であっても晶析後の母液において（２
Ｓ，３Ｒ）−３−（４−メトキシフェニル）グリシッド
酸メチルが（２Ｒ，３Ｓ）−３−（４−メトキシフェニ
ル）グリシッド酸メチルの約２倍程度になるまで、晶析
を行なうことができる。

【００８７】光学異性体（Ａ）の結晶化の程度は、トラ
ンス−３−置換グリシッド酸エステル（Ｉ）およびこれ
に含まれる光学異性体（Ｂ）とエステル残基のみが異な
るエステル（Ｂ′）の割合、結晶化溶媒、溶媒量、晶析
温度などによるが、光学異性体（Ａ）結晶化の限界は、
光学異性体（Ｂ）およびエステル（Ｂ′）が混合したア
モルファス状物の析出が始まる段階で結晶化溶液に白濁
が生じるため、これを指標として知ることができる。

【００８８】純度は、一般に晶析させるときの溶液濃度
（光学異性体に対する溶媒量）、光学異性体（Ａ）と
（Ｂ）との比率、温度、晶析量などの影響をうけ、溶液
濃度が低く、光学異性体（Ａ）と（Ｂ）との合計量中の
光学異性体（Ａ）の比率が高く、晶析温度が高く、晶析
量が少ないばあい、すなわち光学異性体（Ａ）、（Ｂ）
がともに析出しにくく、晶析量が少ないばあいに光学異
性体（Ａ）の純度は高くなり、収率と相反する関係にあ
るが、本発明の方法のばあいには、エステル（Ｂ′）が
共存するために光学異性体（Ｂ）の析出が抑制されるこ
とにより、純度９９％以上のものを好ましくは７５％以
上の収率で取得することができる。また、その際の操作
も、光学異性体（Ａ）、（Ｂ）およびエステル（Ｂ′）
を溶解した溶液から、エステル（Ｂ′）が存在しなけれ
ば光学異性体（Ａ）と光学異性体（Ｂ）とがともに結晶
化するが、エステル（Ｂ′）が存在するため光学異性体
（Ａ）は結晶化するが光学異性体（Ｂ）は結晶化しない
状態となるまで光学異性体（Ａ）の結晶化を行ない、光
学異性体（Ｂ）およびエステル（Ｂ′）が析出しはじめ
る前に単離するという簡単な方法で、母液中の光学異性
体（Ｂ）の量＞光学異性体（Ａ）の量の範囲に到るまで
析出させ続けることができる。

【００８９】従来法では、通常、光学異性体（Ａ）およ
び光学異性体（Ｂ）（光学異性体（Ａ）の含量＞光学異
性体（Ｂ）の含量）を含む溶液（ＡＢ）から光学異性体
（Ａ）結晶を析出させて単離するため、光学異性体
（Ａ）は結晶化するが、光学異性体（Ｂ）は結晶化しな
い溶媒、温度、濃度をえらび、純度の高いものをうるに
は、収率をある程度犠牲にして光学異性体（Ａ）を結晶
化させる方法がとられてきた。しかしながら、本発明の
方法で光学異性体（Ａ）を析出させるばあいには、従来
法ではエステル（Ｂ′）が存在しなければ光学異性体
（Ａ）と光学異性体（Ｂ）とがともに結晶化する状態と
なるまで光学異性体（Ａ）結晶を析出させることができ
る。

【００９０】つぎに溶液（ＡＢＢ′）および溶液（Ａ
Ａ′ＢＢ′）の調製方法について説明する。

【００９１】エステル（Ａ′）は光学異性体（Ａ）の収
率を低下させる方向に使用する化合物であるから、溶液
中には含まれていない方が好ましい。したがって、溶液
の製造時に不可避的に混入するばあいを除き、積極的に
加えられるものではないから、溶液（ＡＢＢ′）および
溶液（ＡＡ′ＢＢ′）のうちの溶液（ＡＢＢ′）が好ま
しい。

【００９２】溶液（ＡＢＢ′）の製法としては、溶液
（ＡＢ）にエステル（Ｂ′）を加える方法、光学異性体
（Ａ）および光学異性体（Ｂ）に、エステル交換用アル
コール（Ｒ³−ＯＨ）および立体選択的にエステル交換
する能力を有する酵素、要すれば有機溶媒を加えてエス
テル交換反応を行なってうる方法などがあげられる。酵
素を用いるエステル交換反応によるばあい、酵素の立体
選択性が１００％のばあいにはじめて溶液（ＡＢＢ′）
がえられ、立体選択性が１００％未満のばあいには溶液
（ＡＡ′ＢＢ′）がえられる。したがって立体選択性の
よい酵素を用いるのが好ましい。

【００９３】溶液（ＡＢ）は、通常、化学合成によって
えられるが、不斉合成のばあいを除き、ラセミ体溶液で
ある。

【００９４】エステル（Ｂ′）は、本発明の方法におい
て光学異性体（Ａ）結晶を単離した溶液中に高含有率で
残存しており、必要であれば取り出すことができる。ま
た、エステル（Ｂ′）はエステル（Ａ′）およびエステ
ル（Ｂ′）の混合物から酵素を用いてエステル（Ａ′）
を選択的に加水分解することによってもうることができ
る。

【００９５】通常ラセミ体の溶液（ＡＢ）にエステル
（Ｂ′）を加え、エステル（Ｂ′）が存在するため光学
異性体（Ａ）は結晶化するが光学異性体（Ｂ）は結晶化
しない条件を満足する溶液（ＡＢＢ′）を製造すること
ができる。

【００９６】エステル（Ｂ′）を加える溶液は、ラセミ
体の溶液に限られず、たとえば不斉合成法（たとえば、
特開昭６１−２６８６６３号公報、特開平２−１７１７
０号公報、同２−１７１６９号公報、国際公開第８９／
０２４２８号パンフレット（１９８９）、同第８９／１
０３５０号パンフレット（１９８９）など）により製造
されたはじめから光学異性体（Ａ）および（Ｂ）の割合
が偏った溶液、酵素を用いた加水分解法（たとえば、特
開平２−１０９９９５号公報、同３−１５３９８号公
報、特表平４−５０１３６０号公報など）または化学分
割法（たとえば、特開昭６１−１４５１７４号公報、特
開平２−２３１４８０号公報など）により分解したのち
または分解途中のものをエステル化したものを含む溶液
に加えて、本発明の方法を適用してもよい。このように
従来からの不斉合成法、光学分割法と本発明の方法とを
組み合わせて実施してもよく、このばあいには、従来法
による不斉誘導、光学分割法による不斉収率が不充分な
ばあいであっても、収率よく、高純度の光学異性体
（Ａ）を回収することができる。

【００９７】また、エステル（Ｂ′）を加えるかわりに
酵素を用いてエステル交換反応を行なわせ、本発明の方
法を適用してもよい。

【００９８】たとえば、ラセミ型トランス−３−（４−
メトキシフェニル）グリシッド酸メチルエステルの（２
Ｓ，３Ｒ）−異性体をブタノールで酵素的に不斉エステ
ル交換し、（２Ｒ，３Ｓ）−３−（４−メトキシフェニ
ル）グリシッド酸メチルエステルをうる方法（特開平４
−２２８０９５号公報、同６−７８７９０号公報、同８
−２５９５５２号公報）などに、本発明の方法を適用し
てもよい。

【００９９】本発明の光学異性体の製造方法の応用には
様々なものが考えられるが、たとえば、（ａ）トランス
−３−置換グリシッド酸エステル（Ｉ）の２位、３位不
斉炭素に基づく、１つの光学異性体（Ａ）、他の光学異
性体（Ｂ）および光学異性体（Ｂ）とエステル残基のみ
が異なるエステル（Ｂ′）を溶解した溶液を調製し、
（ｂ）この溶液から、エステル（Ｂ′）が存在しなけれ
ば光学異性体（Ｂ）が析出するが、エステル（Ｂ′）が
存在するため光学異性体（Ａ）は析出するが光学異性体
（Ｂ）は析出しない状態となるまで、光学異性体（Ａ）
の結晶化を行ない、（ｃ）光学異性体（Ａ）の結晶を単
離し、（ｄ）光学異性体（Ａ）および光学異性体（Ｂ）
とともに母液中に存在する、エステル（Ｂ′）を化学的
にエステル交換して光学異性体（Ｂ）としたのち、光学
異性体（Ｂ）の結晶化を行ない単離し、（ｅ）一般式
（Ｉ）で表わされるトランス−３−置換グリシッド酸エ
ステルおよびエステル（Ｂ′）を母液に加えて工程
（ｂ）の結晶化に供する溶液とし、（ｆ）前記工程
（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）および（ｅ）をこの順序で繰り
返す循環プロセスを行なうことにより、光学異性体
（Ａ）および光学異性体（Ｂ）をいずれも高純度で取得
することができる。

【０１００】前記製造方法では、光学異性体（Ａ）単離
後の溶液中では光学異性体（Ｂ）の濃度が光学異性体
（Ａ）の濃度よりも高いため、通常の結晶化を行なうの
みでも、光学異性体（Ｂ）のみを結晶化、単離して、光
学異性体（Ｂ）を取得することができるが、工程（ｄ）
において、エステル交換後の反応液から光学異性体
（Ｂ）を結晶化する際に、エステル（Ａ′）を添加すれ
ば、エステル（Ａ′）による光学異性体（Ａ）の結晶化
阻害により、光学異性体（Ｂ）をより効率的に結晶化す
ることができる。工程（ｄ）において、エステル
（Ａ′）を添加したばあいには、工程（ｅ）において母
液に含まれるエステル（Ａ′）を化学的にエステル交換
して光学異性体（Ａ）に戻す。

【０１０１】前記工程（ｄ）におけるエステル（Ａ′）
を添加するばあいの添加量は、工程（ａ）における溶液
において含まれる（Ｂ′）の量に順じ、光学異性体
（Ａ）および（Ｂ）ならびにエステル（Ａ′）のエステ
ル残基、結晶化に使用する溶媒の種類にもよるが、一般
に、エステル（Ａ′）／光学異性体（Ａ）がモル比で５
／３〜１０／１程度となるように添加されるのが好まし
い。

【０１０２】この循環プロセスにおいて使用される化学
的エステル交換については、本発明の製造方法における
結晶化後の母液に、有機アミンおよび交換後の光学異性
体におけるエステル残基に対応するアルコールを添加し
て反応させたのち、有機アミンおよびアルコールを留去
することにより実施することができる。

【０１０３】化学的エステル交換に使用するアルコール
はエステル交換を受けるエステル１モルあたり、１〜１
０００モル、とりわけ２〜１０モルの割合で使用するの
が好ましく、化学的エステル交換に使用するアルコール
が、メタノール、エタノールなどの低沸点アルコールと
なるような組み合わせになっているプロセスが循環させ
るためには好ましい。

【０１０４】有機アミンとしては、モノアルキルアミン
（たとえば、メチルアミン、エチルアミン、プロピルア
ミン、ブチルアミン）、ジアルキルアミン（たとえば、
ジメチルアミン、ジエチルアミン、ジプロピルアミン、
ジイソプロピルアミン）、トリアルキルアミン（たとえ
ば、トリメチルアミン、トリエチルアミン）、環状アミ
ン（たとえば、モルホリン）、芳香族アミン（たとえ
ば、ピリジン）などを使用することができるが、とりわ
け、ジエチルアミン、ジプロピルアミン、ジイソプロピ
ルアミンなどの低沸点ジアルキルアミンを使用するのが
好ましい。また、有機アミンはエステル交換を受けるエ
ステル１モルあたり、０．０１〜１０００モル、とりわ
け０．１〜１０モルの割合で使用するのが好ましい。

【０１０５】前記循環プロセスを行なえば、１サイクル
で光学異性体（Ａ）および（Ｂ）をいずれも高純度にえ
ることができ、化学的エステル交換後に有機アミンおよ
びアルコールを充分に留去することができれば、実際上
無限にプロセスを循環させることができるため、不斉化
学反応を行なわなくても、循環させるだけで、高純度の
光学異性体（Ａ）および（Ｂ）を効率よく取得すること
ができる。

【０１０６】また、結晶化時の溶液の揺らぎ（溶液温
度、濃度などの部分的不均一さ）に基づく対掌体の混入
による光学純度の低下を抑制できるとともに、１サイク
ルあたりの光学異性体取得量が多いため、工業上有利で
ある。

【０１０７】つぎに、エステル交換法により光学異性体
（Ａ）、（Ｂ）およびエステル（Ｂ′）を含む溶液を調
製し、本発明の方法を適用するばあいについて説明す
る。

【０１０８】光学異性体（Ａ）および（Ｂ）の溶液にエ
ステル（Ｂ′）を形成するアルコールを加え、光学異性
体（Ｂ）を酵素で不斉エステル交換して光学異性体
（Ａ）の結晶化に使用する溶液を調製するばあい、光学
異性体（Ａ）が光学異性体（Ｂ）よりも多量に含まれる
とともに、光学異性体（Ｂ）の結晶化を阻害するエステ
ル（Ｂ′）を含む混合物を１つの反応で直接うることが
できる点から好ましい。

【０１０９】本発明の方法により光学異性体（Ａ）を結
晶化させ、単離するばあいにも光学異性体（Ａ）と光学
異性体（Ｂ）の割合は光学異性体（Ａ）が多いほど好ま
しく、したがって、エステル（Ｂ′）の割合も多いほど
好ましいが、このばあい光学異性体（Ｂ）の割合を少な
くするためには、酵素およびエステル交換用アルコール
の使用量を増やし、長時間反応させるというように、コ
ストが高く、また副反応が多くおこる方法によらなけれ
ばならない。

【０１１０】本発明の方法では、従来法と異なり、エス
テル（Ｂ′）が光学異性体（Ｂ）の析出を抑制するた
め、エステル交換の程度を低くした範囲でも光学分割を
行なうことができ、モル比で光学異性体（Ａ）／光学異
性体（Ｂ）が４／６〜１０／１、エステル（Ｂ′）／光
学異性体（Ｂ）が５／３〜１０／１、とりわけ、光学異
性体（Ａ）／光学異性体（Ｂ）が３／１〜４／１、エス
テル（Ｂ′）／光学異性体（Ｂ）が２／１〜７．８／１
であれば純度の高い光学異性体（Ａ）を高収率でうるこ
とができる。

【０１１１】前記エステル交換用アルコールの例として
は、前述のエステル（Ｂ′）のエステル残基を与えるア
ルコールが使用される。

【０１１２】また、前記酵素としては、トランス−３−
置換グリシッド酸エステル（Ｉ）およびエステル交換用
アルコールを基質とし、立体選択的にエステル交換する
能力を有する酵素であれば使用しうる。その具体例とし
てはつぎの酵素があげられる。

【０１１３】トランス−３−置換グリシッド酸エステル
（Ｉ）の（２Ｓ，３Ｒ）−異性体を選択的にエステル交
換する酵素としては、たとえばセラチア（Ｓｅｒｒａｔ
ｉａ）属、カンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属、ムコール
（Ｍｕｃｏｒ）属、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏ
ｎａｓ）属、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ
ｓ）属、アルカリゲネス（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）
属、アブシディア（Ａｂｓｉｄｉａ）属、フサリウム
（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属、ギベレラ（Ｇｉｂｅｒｅｌｌ
ａ）属、ノイロスポラ（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ）属、ト
リコデルマ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）属、リゾプス
（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）属、アクロモバクター（Ａｃｈｒ
ｏｍｏｂａｃｔｅｒ）属、バシラス（Ｂａｃｉｌｌｕ
ｓ）属、ブレビバクテリウム（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒ
ｉｕｍ）属、コリネバクテリウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃ
ｔｅｒｉｕｍ）属、プロビデンシヤ（Ｐｒｏｖｉｄｅｎ
ｃｉａ）属、サッカロマイコプシス（Ｓａｃｃｈａｒｏ
ｍｙｃｏｐｓｉｓ）属、ノカルディア（Ｎｏｃａｒｄｉ
ａ）属、アルスロバクター（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅ
ｒ）属微生物由来のエステラーゼ、α−キモトリプシ
ン、豚肝臓エステラーゼ、豚すい臓エステラーゼなどを
使用することができる。

【０１１４】前記酵素の具体例としては、たとえばアブ
シディア コリンビフェラ（Ａｂｓｉｄｉａ ｃｏｒｙ
ｍｂｉｆｅｒａ）ＩＦＯ ４００９、同ＩＦＯ ４０１
０、アスペルギルス オクラセウス（Ａｓｐｅｒｇｉｌ
ｌｕｓ ｏｃｈｒａｃｅｕｓ）ＩＦＯ ４３４６、アス
ペルギルステレウス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｔｅｒ
ｒｅｕｓ）ＩＦＯ ６１２３、フサリウム オキシスポ
ラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）ＩＦＯ
５９４２、同ＡＴＣＣ ６５９、フサリウムソラニ
（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｏｌａｎｉ）ＩＦＯ ５２３
２、ギベレラ フジクロイ（Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ ｆ
ｕｊｉｋｕｒｏｉ）ＩＦＯ ５３６８、ムコール アン
グリマクロスポラス（Ｍｕｃｏｒ ａｎｇｕｌｉｍａｃ
ｒｏｓｐｏｒｕｓ）ＩＡＭ ６１４９、ムコール シル
シネロイデス（Ｍｕｃｏｒ ｃｉｒｃｉｎｅｌｌｏｉｄ
ｅｓ）ＩＦＯ ６７４６、ムコール フラバス（Ｍｕｃ
ｏｒｆｌａｖｕｓ）ＩＡＭ ６１４３、ムコール フラ
ギリス（Ｍｕｃｏｒ ｆｒａｇｉｌｉｓ）ＩＦＯ ６４
４９、ムコール ジェネベンシス（Ｍｕｃｏｒ ｇｅｎ
ｅｖｅｎｓｉｓ）ＩＡＭ ６０９１、ムコール グロボ
サス（Ｍｕｃｏｒｇｌｏｂｏｓｕｓ）ＩＦＯ ６７４
５、ムコール ジャンセニ（Ｍｕｃｏｒ ｊａｎｓｓｅ
ｎｉｉ）ＩＦＯ ５３９８、ムコール ジャバニカス
（Ｍｕｃｏｒｊａｖａｎｉｃｕｓ）ＩＦＯ ４５６９、
同ＩＦＯ ４５７０、同ＩＦＯ ４５７２、同ＩＦＯ
５３８２、ムコール ランプロスポラス（Ｍｕｃｏｒ
ｌａｍｐｒｏｓｐｏｒｕｓ）ＩＦＯ ６３３７、ムコー
ル ペトリンスラリス（Ｍｕｃｏｒ ｐｅｔｒｉｎｓｕ
ｌａｒｉｓ）ＩＦＯ ６７５１、ムコール プランベウ
ス（Ｍｕｃｏｒ ｐｌｕｍｂｅｕｓ）ＩＡＭ ６１１
７、ムコール プライニ（Ｍｕｃｏｒ ｐｒａｉｎｉ）
ＩＡＭ ６１２０、ムコール プシラス（Ｍｕｃｏｒ
ｐｕｓｉｌｌｕｓ）ＩＡＭ ６１２２、ムコール ラセ
モサス（Ｍｕｃｏｒｒａｃｅｍｏｓｕｓ）ＩＦＯ ４５
８１、ムコール ラマニアヌス（Ｍｕｃｏｒ ｒａｍａ
ｎｎｉａｎｕｓ）ＩＡＭ ６１２８、ムコール レカル
バス（Ｍｕｃｏｒ ｒｅｃｕｒｖｕｓ）ＩＡＭ ６１２
９、ムコール シルバティカス（Ｍｕｃｏｒ ｓｉｌｖ
ａｔｉｃｕｓ）ＩＦＯ ６７５３、ムコール スピネッ
センス（Ｍｕｃｏｒ ｓｐｉｎｅｓｃｅｎｓ）ＩＡＭ
６０７１、ムコール サブチリシマス（Ｍｕｃｏｒ ｓ
ｕｂｔｉｌｉｓｓｉｍｕｓ）ＩＦＯ ６３３８、ノイロ
スポラ クラッサ（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ ｃｒａｓｓ
ａ）ＩＦＯ ６０６８、リゾプス アリザス（Ｒｈｉｚ
ｏｐｕｓ ａｒｒｈｉｚｕｓ）ＩＦＯ ５７８０、リゾ
プス デレマー（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ｄｅｌｅｍａｒ）
ＡＴＣＣ ３４６１２、リゾプス ジャポニカス（Ｒｈ
ｉｚｏｐｕｓ ｊａｐｏｎｉｃｕｓ）ＩＦＯ ４７５
８、トリコデルマ ビリデ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ
ｖｉｒｉｄｅ）ＩＦＯ ４８４７、アクロモバクター
サイクロクラステス（Ａｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒ ｃ
ｙｃｌｏｃｌａｓｔｅｓ）ＩＡＭ １０１３、バシラス
スフェリカス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｈａｅｒｉｃ
ｕｓ）ＩＦＯ ３５２５、ブレビバクテリウム ケトグ
ルタミカム（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｋｅｔｏ
ｇｌｕｔａｍｉｃｕｍ）ＡＴＣＣ １５５８８、コリネ
バクテリウム アルカノリティカム（Ｃｏｒｙｎｅｂａ
ｃｔｅｒｉｕｍ ａｌｋａｎｏｌｙｔｉｃｕｍ）ＡＴＣ
Ｃ ２１５１１、コリネバクテリウム ハイドロカーボ
クラスタム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｈｙｄ
ｒｏｃａｒｂｏｃｌａｓｔｕｍ）ＡＴＣＣ １５５９
２、コリネバクテリウム プリモリオキシダンス（Ｃｏ
ｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐｒｉｍｏｒｉｏｘｙｄ
ａｎｓ）ＡＴＣＣ ３１０１５、プロビデンシヤ アル
カリファシエンス（Ｐｒｏｖｉｄｅｎｃｉａ ａｌｃａ
ｌｉｆａｃｉｅｎｓ）ＪＣＭ １６７３、シュードモナ
ス ムタビリス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｍｕｔａｂ
ｉｌｉｓ）ＡＴＣＣ ３１０１４、シュードモナスプチ
ダ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｔｉｄａ）ＡＴＣＣ
１７４２６、同ＡＴＣＣ１７４５３、同ＡＴＣＣ ３
３０１５、セラチア リクエファシエンス（Ｓｅｒｒａ
ｔｉａ ｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）ＡＴＣＣ ２７５
９２、セラチア マルセッセンス（Ｓｅｒｒａｔｉａ
ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ）ＡＴＣＣ １３８８０、同ＡＴ
ＣＣ １４７６４、同ＡＴＣＣ １９１８０、同ＡＴＣ
Ｃ ２１０７４、同ＡＴＣＣ ２７１１７、同ＡＴＣＣ
２１２１２、セラチア マルセッセンス（Ｓｅｒｒａ
ｔｉａ ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ）Ｓｒ４１（ＦＥＲＭＢ
Ｐ−４８７（微工研条寄 第４８７号））、カンジダ
パラプシロシス（Ｃａｎｄｉｄａ ｐａｒａｐｓｉｌｏ
ｓｉｓ）ＩＦＯ ０５８５、サッカロマイコプシス リ
ポリティカ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｏｐｓｉｓ ｌｉ
ｐｏｌｙｔｉｃａ）ＩＦＯ ０７１７、同ＩＦＯ ０７
４６、同ＩＦＯ １１９５、同ＩＦＯ１２０９、同ＩＦ
Ｏ １５４８、ノカルディア アステロイデス（Ｎｏｃ
ａｒｄｉａ ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ）ＩＦＯ ３３８
４、同ＩＦＯ ３４２４、同ＩＦＯ ３４２３、ノカル
ディア ガードネリ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｇａｒｄｎｅ
ｒｉ）ＡＴＣＣ ９６０４、アルスロバクター ウレア
ファシエンス ノブ バール（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅ
ｒ ｕｒｅａｆａｃｉｅｎｓ ｎｏｖ． ｖａｒ．）、
アルスロバクター グロビフォルミス（Ａｒｔｈｒｏｂ
ａｃｔｅｒ ｇｌｏｂｉｆｏｒｍｉｓ）、カンジダ シ
リンドラシア（Ｃａｎｄｉｄａ ｃｙｌｉｎｄｒａｃｅ
ａ）由来のエステラーゼなどをあげることができる。

【０１１５】また、アルカリ性リパーゼ（アクロモバク
ター（Ａｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒ）由来、和光純薬工
業（株）製）、リパーゼＢ（シュードモナス フラジ
（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｒａｇｉ）２２−３９Ｂ
由来、和光純薬工業（株）製）、リパーゼＭ「アマノ」
１０（ムコール ジャバニカス（Ｍｕｃｏｒ ｊａｖａ
ｎｉｃｕｓ）由来、天野製薬（株）製）、リパーゼ タ
イプXI（リゾプス アリザス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ａｒ
ｒｈｉｚｕｓ）由来、シグマ社製）、タリパーゼ（リゾ
プス デレマー（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ｄｅｌｅｍａｒ）
由来、田辺製薬（株）製）、リパーゼＮＫ−１１６（リ
ゾプス ジャポニカス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓｊａｐｏｎｉ
ｃｕｓ）由来、長瀬産業（株）製）、リパーゼＮ（リゾ
プス ニビウス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ｎｉｖｅｕｓ）由
来、天野製薬（株）製）、リパーゼＳＰ ４３５＆５２
５（カンジダ アンタークティカ（Ｃａｎｄｉｄａ ａ
ｎｔａｒｃｔｉｃａ）由来、ノボ社製）、アルカラーゼ
（バシラス リヘニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉ
ｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来、ノボ社製）、リパーゼ
タイプVII（カンジダ シリンドラシア（Ｃａｎｄｉ
ｄａ ｃｙｌｉｎｄｒａｃｅａ）由来、シグマ社製）、
リパーゼ（ブタ膵臓由来、和光純薬工業（株）製）、エ
ステラーゼ（ブタ肝臓由来、シグマ社製）、コレステロ
ールエステラーゼ（カンジダ ルゴサ（Ｃａｎｄｉｄａ
ｒｕｇｏｓａ）由来、長瀬産業（株）製）、リパーゼ
ＯＦ（カンジダ シリンドラシア（Ｃａｎｄｉｄａ ｃ
ｙｌｉｎｄｒａｃｅａ）由来、名糖産業（株）製）、リ
パーゼＱＬ（アルカリゲネスエスピー（Ａｌｋａｌｉｇ
ｅｎｅｓ ｓｐ．）由来、名糖産業（株）製）、リパー
ゼＡＬ（アクロモバクター エスピー（Ａｃｈｒｏｍｏ
ｂａｃｔｅｒ ｓｐ．）由来、名糖産業（株）製）、リ
パーゼＰＬ（アルカリゲネス エスピー（Ａｌｋａｌｉ
ｇｅｎｅｓ ｓｐ．）由来、名糖産業（株）製）などの
市販酵素を用いることもできる。

【０１１６】これら酵素のうち、セラチア（Ｓｅｒｒａ
ｔｉａ）属、カンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属、アルカリ
ゲネス（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）属、アクロモバクタ
ー（Ａｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒ）属微生物由来のエス
テラーゼを用いるのが好ましく、とりわけ、セラチア
マルセッセンス（Ｓｅｒｒａｔｉａ ｍａｒｃｅｓｃｅ
ｎｓ）、カンジダ シリンドラシア（Ｃａｎｄｉｄａ
ｃｙｌｉｎｄｒａｃｅａ）微生物由来のエステラーゼを
使用するのが好ましい。

【０１１７】一方、トランス−３−置換グリシッド酸エ
ステル（Ｉ）の（２Ｒ，３Ｓ）−異性体を選択的にエス
テル交換する酵素としては、たとえばミクロコッカス
（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ）属、アグロバクテリウム
（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、マイクロバクテリ
ウム（Ｍｉｃｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、リゾビウム
（Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ）属、シトロバクター（Ｃｉｔｒ
ｏｂａｃｔｅｒ）属、デバリオミセス（Ｄｅｂａｒｙｏ
ｍｙｃｅｓ）属、ハンセニアスポラ（Ｈａｎｓｅｎｉａ
ｓｐｏｒａ）属、ハンゼヌラ（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ）
属、ピチア（Ｐｉｃｈｉａ）属、ロドスポリディウム
（Ｒｈｏｄｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）属、シゾサッカロミ
セス（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属、
スポロボロミセス（Ｓｐｏｒｏｂｏｌｏｍｙｃｅｓ）
属、クロエケラ（Ｋｌｏｅｃｋｅｒａ）属、トルラスポ
ラ（Ｔｏｒｕｌａｓｐｏｒａ）属、ストレプトミセス
（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属微生物由来のエステラ
ーゼなどを使用することができる。

【０１１８】かかる微生物酵素の具体例としては、ミク
ロコッカス ユリエ（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｕｒｅ
ａｅ）ＩＡＭ １０１０（ＦＥＲＭ ＢＰ−２９９
６）、アグロバクテリウム ラジオバクター（Ａｇｒｏ
ｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｒａｄｉｏｂａｃｔｅｒ）ＩＡＭ
１５２６、同ＩＦＯ １３２５９、マイクロバクテリ
ウム エスピー（Ｍｉｃｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓ
ｐ．）ＡＴＣＣ ２１３７６、リゾビウム メリロッテ
ィ（Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｍｅｌｉｌｏｔｉ）ＩＦＯ１
３３３６、シトロバクター フロンディ（Ｃｉｔｒｏｂ
ａｃｔｅｒ ｆｒｅｕｎｄｉｉ）ＡＴＣＣ ８０９０、
デバリオミセス ハンセニー バル ファブリ（Ｄｅｂ
ａｒｙｏｍｙｃｅｓ ｈａｎｓｅｎｉｉ ｖａｒ． ｆ
ａｂｒｙｉ）ＩＦＯ ００１５、デバリオミセス ネパ
レンシス（Ｄｅｖａｒｙｏｍｙｃｅｓｎｅｐａｌｅｎｓ
ｉｓ）ＩＦＯ ００３９、ハンセニアスポラ バルビエ
ンシス（Ｈａｎｓｅｎｉａｓｐｏｒａ ｖａｌｂｙｅｎ
ｓ）ＩＦＯ ０１１５、ハンゼヌラ ポリモアファ（Ｈ
ａｎｓｅｎｕｌａ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈａ）ＩＦＯ１０
２４、ハンゼヌラ サツルナス（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ
ｓａｔｕｒｎｕｓ）ＨＵＴ ７０８７、ピチア ファリ
ノーサ（Ｐｉｃｈｉａ ｆａｒｉｎｏｓａ）ＩＦＯ ０
６０７、ピチア パストリス（Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔ
ｏｒｉｓ）ＩＦＯ ０９４８、同ＩＦＯ １０１３、同
ＩＡＭ １２２６７、ピチア ウイカーハミー（Ｐｉｃ
ｈｉａ ｗｉｃｋｅｒｈａｍｉｉ）ＩＦＯ １２７８、
ロドスポリディウム トルロイデス（Ｒｈｏｄｏｓｐｏ
ｒｉｄｉｕｍ ｔｏｒｕｌｏｉｄｅｓ）ＩＦＯ ０５５
９、シゾサッカロミセス ポンベ（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃ
ｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｐｏｍｂｅ）ＩＦＯ ０３５
８、スポロボロミセス グラシリス（Ｓｐｏｒｏｂｏｌ
ｏｍｙｃｅｓ ｇｒａｃｉｌｌｉｓ）ＩＦＯ １０３
３、クロエケラ コルティシス（Ｋｌｏｅｃｋｅｒａ
ｃｏｒｔｉｃｉｓ）ＩＦＯ ０６３３、トルラスポラ
デルブルエキー（Ｔｏｒｕｌａｓｐｏｒａ ｄｅｌｂｒ
ｕｅｃｋｉｉ）ＩＦＯ ０４２２、ストレプトミセス
グリセウス サブスプ グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍ
ｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ ｓｕｂｓｐ． ｇｒｉｓｅ
ｕｓ）ＩＦＯ ３４３０、同ＩＦＯ ３３５５、ストレ
プトミセス ラベンデュラー サブスプ ラベンデュラ
ー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｌａｖｅｎｄｕｌａｅ
ｓｕｂｓｐ． ｌａｖｅｎｄｕｌａｅ）ＩＦＯ ３３６
１、同ＩＦＯ ３４１５、同ＩＦＯ ３１４６由来のエ
ステラーゼなどをあげることができる。

【０１１９】酵素は市販酵素を使用してもよく、微生物
細胞の培養液からえられるものであってもよい。また、
酵素は微生物の野性株、変異株からえられるものであっ
てもよく、遺伝子組み換え、細胞融合などの生物工学的
手法により誘導された細菌であってもよい。

【０１２０】前記微生物由来の酵素は、特開平３−１５
３９８号などに記載された慣用の培養法（たとえば、慣
用の炭素源、チッ素源および無機塩類を含有する培地
中、常温乃至加温下、かつ、好気的条件下、ｐＨ５〜
８）で微生物を培養し、培養液から遠心分離、濾過など
の常法により、菌体を除去し、必要に応じ、さらに、吸
着樹脂などを用いて不純物を除去することによりえられ
るが、微生物培養液をそのままの形で酵素として用いる
こともできる。

【０１２１】これら酵素はそのまま使用することもでき
るが、凍結乾燥して使用することができ、またポリアク
リルアミド法、含硫多糖ゲル法（たとえば、カラギーナ
ンゲル法）、寒天ゲル法、光架橋性樹脂法、ポリエチレ
ングリコール法、セライト法、膜吸着法などの公知の方
法で固定化して使用することもできる。

【０１２２】さらに、これら固定化された酵素は、固定
化されたものをカラムに充填して使用することもでき
る。

【０１２３】前記酵素のうちでは、Ｅ値が高いものが、
立体選択性が高く、光学異性体（Ａ）がエステル
（Ａ′）に交換される量が少なく、一方、光学異性体
（Ｂ）がエステル（Ｂ′）に交換される量が多く、した
がって、光学異性体（Ａ）が析出するのを抑制するエス
テル（Ａ′）の量が少なく、光学異性体（Ａ）の析出量
が多くなり、一方、光学異性体（Ｂ）の析出は抑制され
るため好ましい。

【０１２４】Ｅ値は酵素の立体選択性を表わすポピュラ
ーな指標の１つであり、単位濃度当たりの各立体異性体
についての酵素反応速度比（（２Ｒ，３Ｓ）−エステル
についてのエステル交換速度と（２Ｓ，３Ｒ）−エステ
ルについてのエステル交換速度との比（単位濃度当た
り））となっている。

【０１２５】また、Ｅ値については、一般に反応が相当
程度進行したばあいには、酵素の失活、副反応、測定誤
差などの影響が大きく出るため、本明細書におけるＥ値
は、副反応、逆反応、測定誤差の少ない範囲である転換
率１０％（トランス−ｄｌ体の１０％がエステル交換さ
れた時点）のときのＥ値である。Ｅ値は式：

【０１２６】

【数１】

【０１２７】で表わされる値であり、酵素それぞれに特
有の値である。

【０１２８】すなわち、Ｅ値がきまり、エステル交換の
転換率がきまれば、酵素の種類に関係なくエステル交換
反応後の光学異性体の比率が定まり、それから取得され
る結晶の光学純度、収率も予測することができることに
なる。

【０１２９】本発明の方法に用いる溶液を調製するのに
好ましいＥ値は２０以上、さらには５０以上である。前
記のごとき好ましいＥ値を有する酵素は、適宜実験的に
選択することができる。

【０１３０】酵素の使用量は、使用する酵素の種類、使
用形態などによっても異なるが、通常、光学異性体
（Ｂ）１ｇ当たり、１×１０〜１×１０⁵Ｕ、好ましく
は１×１０²〜１×１０⁴Ｕのオリーブ油加水分解活性を
有する量の酵素を使用するのが好ましい。

【０１３１】オリーブ油加水分解活性は、オリーブ油に
リパーゼが作用するときにエステル結合の切断に伴って
増加する脂肪酸の量を測定する脂肪消化力試験法（「医
薬品研究」Ｖｏｌ．１１，Ｎｏ３ ５０５−５０６（１
９８０））により求められる。

【０１３２】エステル交換反応は、適当な溶媒中または
無溶媒で実施することができ、溶媒としては、芳香族有
機溶媒（たとえば、ベンゼン、トルエン、キシレン）、
ハロゲン化芳香族有機溶媒（たとえば、クロロベンゼ
ン、ジクロロベンゼン）、脂肪族有機溶媒（たとえば、
ヘキサン、ヘプタン、シクロヘキサン）、ハロゲン化脂
肪族有機溶媒（たとえば、ジクロロメタン、クロロホル
ム、四塩化炭素、トリクロロエタン）、ケトン系溶媒
（たとえば、アセトン、メチルエチルケトン、メチルイ
ソブチルケトン）、エーテル系溶媒（たとえば、ジメチ
ルエーテル、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテ
ル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、テトラヒドロフ
ラン、１，４−ジオキサン）、エステル系溶媒（たとえ
ば、酢酸エチル、酢酸ブチル）などをあげることがで
き、とりわけ、トルエン、キシレン、ヘキサン、四塩化
炭素、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、ジイソプロピ
ルエーテルを用いるのが酵素の失活が少なく、反応速度
が速い点で好ましい。

【０１３３】基質である光学異性体（Ａ）、（Ｂ）の濃
度は、概ね０．０２〜３モル／Ｌ、とりわけ０．０２〜
２モル／Ｌとするのが反応速度が速く、エステル交換反
応の設備を小型化できる点で好ましく、エステル交換用
アルコールの量は、光学異性体（Ｂ）１モルに対して
０．６〜１０モル、好ましくは０．８〜５モルであるの
が酵素の失活を抑制し、反応速度を速めることができる
点で好ましい。

【０１３４】反応系中に水分が混入するとエステル交換
反応とともに加水分解反応がおこり、そののち本発明の
方法を適用したばあいに収率の低下が生じる。したがっ
て、酵素がエステル交換反応についての活性を示すため
に必要とする以上の水の存在を極力避けて反応させるこ
とが好ましい。また、溶媒によっては、加水分解物の溶
解度の低いものもあり、純度の低下にもつながることが
ある。

【０１３５】反応は常温ないし加温下、好ましくは１０
〜５０℃、とりわけ２０〜４０℃で好適に進行する。

【０１３６】エステル交換反応における転換率は、酵素
の立体選択性、光学異性体（Ａ）の収率などに応じて適
宜選択することができ、また、基質であるトランス−３
−置換グリシッド酸エステル（Ｉ）、エステル（Ｂ′）
のエステル残基に応じ、酵素活性、反応温度、反応時間
などを変化させることにより自在に変えることができ
る。

【０１３７】従来法で純度の高い光学異性体（Ａ）を収
率良くうるためには、酵素の選択性がある程度以上であ
ることが必要であるとともに、一般にエステル交換の転
換率をあげることも必要である。

【０１３８】しかし、エステル交換の転換率をあげるた
めには、反応が相当程度進行した段階で酵素反応液に少
量しか含まれない光学異性体（Ｂ）をエステル交換しな
ければならないため、多量の酵素、長時間の反応による
酵素の失活、不安定なトランス−３−置換グリシッド酸
エステル（Ｉ）の化学的分解、酵素の選択性が完全でな
いことに由来する光学異性体（Ａ）の酵素的エステル交
換などを考えあわせると、高度に転換率をあげること
は、工業的には不可能である。

【０１３９】たとえば、特開平８−２５９５５２号公報
には、ラセミ型トランス−３−（４−メトキシフェニ
ル）グリシッド酸メチルエステルをセラチア マルセッ
センス由来のエステラーゼで不斉エステル交換すること
により、その（２Ｓ，３Ｒ）−異性体を（２Ｓ，３Ｒ）
−ブチルエステル／（２Ｓ，３Ｒ）−メチルエステルを
モル比で７．８／１とする（（２Ｓ，３Ｒ）メチルエス
テル１０．８ｇと（２Ｓ，３Ｒ）ｎ−ブチルエステル１
０１．８５ｇ）ことが記載されているが、基質１モル当
たり、５×１０⁵Ｕのエステラーゼを使用して、２４時
間反応後、反応溶液が３分の１になるまで溶媒を減圧留
去し、さらに５×１０⁵Ｕのエステラーゼを添加して１
６時間反応させている。

【０１４０】このような方法は、反応時間が長すぎ、か
つ、操作が煩雑であるとともに、高価な酵素の使用量が
多すぎるため、実質的に工業的に使用することができな
い。

【０１４１】これに対し、本発明の方法によれば、たと
えば、セラチア マルセッセンスＳｒ４１（ＦＥＲＭ
ＢＰ−４８７）由来のエステラーゼを使用したばあいに
は、ラセミ型トランス−３−（４−メトキシフェニル）
グリシッド酸メチルエステルからその（２Ｓ，３Ｒ）−
異性体の７０％をｎ−ブチルエステルに転換する（エス
テル（Ｂ′）／光学異性体（Ｂ）＝７／３）だけで（１
×１０⁵Ｕ、２４時間反応）、反応後の混合物から純度
９９％以上の（２Ｒ，３Ｓ）−３−（４−メトキシフェ
ニル）グリシッド酸メチルエステルを酵素反応に使用す
るラセミ体に含まれる（２Ｒ，３Ｓ）−異性体のうちの
８０％以上を取得することができる。

【０１４２】なお、エステル交換に使用するラセミ体の
溶解度が低い溶媒を用いるため、反応開始から終了まで
結晶が析出しているばあいも本発明に含まれる。このば
あいには、エステル交換反応後、酵素とともに結晶を濾
別し、そののち酵素と結晶との分離を行なう一方、濾液
は別に冷却し、析出した結晶を濾別することにより、目
的物をえてもよく、また、エステル交換反応後、反応液
をそのまま冷却し、析出した結晶を酵素とともに濾別
し、ついで酵素と分離することによって目的物をえても
よい。

【０１４３】また、エステル交換反応を行なうだけでは
結晶は析出しないが、反応の途中で溶媒を留去させ、結
晶を析出させるばあいも本発明に含まれる。溶媒を途中
まで留去させたのちの結晶の単離は、前記と同様にして
行なえばよい。溶媒を大部分留去させたのち異なった溶
媒を加えて結晶の単離を行なうばあいにも同様にして行
なえばよい。溶媒を大部分留去させるばあいには、エス
テル交換反応により生成したアルコールも系外に除くこ
とができるため、のちのエステル交換反応がすすみやす
くなる。

【０１４４】このように、トランス−３−置換グリシッ
ド酸エステル（Ｉ）からその光学異性体を工業的に製造
するに際し、単独では実際上使用することができないと
考えられていたエステル交換法を、晶析法と組み合わせ
ることにより、エステル交換の転換率が低い段階で酵素
反応を停止させても、高純度、高収率で光学異性体
（Ａ）がえられることを見出し、光学異性体（Ａ）の工
業的に適用可能な製造方法としたことに本発明の方法の
特徴がある。

【０１４５】前記説明は、エステル（Ｂ′）が存在しな
ければ光学異性体（Ｂ）が結晶化するが、エステル
（Ｂ′）が存在するため光学異性体（Ａ）は結晶化する
が光学異性体（Ｂ）は結晶化しない状態となるまで光学
異性体（Ａ）の結晶化を行なうことにより、光学異性体
（Ａ）を単離する方法であるが、従来から光学異性体
（Ａ）を単離するのに使用されている条件でも光学異性
体（Ａ）を析出させる際に、エステル（Ｂ′）を存在さ
せることによって溶液（ＡＢＢ′）または溶液（ＡＡ′
ＢＢ′）から光学異性体（Ｂ）の析出を一層しにくくす
ることができるため、溶液（ＡＢＢ′）または溶液（Ａ
Ａ′ＢＢ′）からの光学異性体（Ａ）の析出量を従来法
に比べて増加させることができる。また、エステル交換
率の低い溶液（ＡＢＢ′）または溶液（ＡＡ′ＢＢ′）
からでも従来法と比較して高い収率、高い純度で光学異
性体（Ａ）を製造することができる。

【０１４６】たとえば、トランス−３−置換グリシッド
酸エステル（Ｉ）（光学異性体（Ａ）および光学異性体
（Ｂ））を、光学異性体（Ｂ）とエステル残基のみが異
なるエステル（Ｂ′）を形成するアルコールおよび立体
選択的にエステル交換する能力を有する酵素、さらには
転換率１０％におけるエステル交換反応についてのＥ値
が２０以上の酵素、たとえばセラチア マルセッセンス
Ｓｒ４１（ＦＥＲＭＢＰ−４８７）由来のエステラーゼ
の存在下でエステル（Ｂ′）／光学異性体（Ｂ）がモル
比で１３／７〜７．８／１、さらには２／１〜８／２に
なるようにエステル交換反応を行なってえられた溶液
（溶媒を交換した溶液であってもよい）から光学異性体
（Ａ）の結晶化を行ない、最初の光学異性体（Ａ）の量
に対して７５％以上、さらには８０％以上の収率で純度
９９％以上の光学異性体（Ａ）を単離することができ
る。

【０１４７】なお、前記溶媒を交換した溶液とは、エス
テル交換反応によって生成したアルコールを除去するた
めに、また反応途中で溶媒の全部または一部を交換した
溶液、エステル交換反応時にはエステル交換反応に適す
る溶媒を使用し、晶析時には晶析に適する溶媒を使用す
るために溶媒の全部または一部を交換した溶液などのこ
とであり、光学異性体（Ａ）を高純度かつ高収率でうる
ことができるように適宜選べばよい。

【０１４８】なお、エステル交換反応を行なってえられ
た溶液には、エステル交換反応後、反応液から慣用の方
法（たとえば濾過、デカンテーション）により酵素を除
去してえられる溶液も含まれるものである。

【０１４９】このようにしてえられるトランス−３−置
換グリシッド酸エステルの光学異性体（Ａ）として、た
とえば（２Ｒ，３Ｓ）−異性体を用い、常法、たとえば
特公昭４６−１６７４９号公報、特公昭６３−１３９９
４号公報、特開平５−２０１８６５号公報、特開平２−
２８９５５８号公報、特公平２−２８５９４号公報、ケ
ミカル アンド ファーマシューティカル ブレチン
（Chem. Pharm. Bull.）１８（１０），２０２８−２０
３７（１９７０）、特開平２−１７１６８号公報、特開
平４−２３４８６６号公報、特開平５−２２２０１６号
公報、特開平４−２２１３７６号公報、特開平５−２０
２０１３号公報、特開平２−１７１７０号公報、特開平
２−２８６６７２号公報、特開平６−２７９３９８号公
報、特開昭５８−９９４７１号公報、特開平８−２６９
０２６号公報、特開昭６１−１１８３７７号公報、特開
平６−２２８１１７号公報、特開平２−７８６７３号公
報、欧州特許出願公開第７９６８５３号明細書（１９９
４）、オランダ王国特許出願公開第１００６２９３号明
細書（１９９７）などに記載の方法にしたがって、一般
式（IV）：

【０１５０】

【化１６】

【０１５１】（式中、環Ｂは前記と同じ、Ｒ⁴は水素原
子、２−（ジメチルアミノ）エチル基または

【０１５２】

【化１７】

【０１５３】）で表わされるアミノチオフェノール誘導
体（たとえば２−アミノチオフェノール、２−アミノ−
５−クロロチオフェノール、２−アミノ−５−ベンジル
チオフェノール、２−（ジメチルアミノエチルアミノ）
チオフェノール、一般式：

【０１５４】

【化１８】

【０１５５】（式中、環Ｂは前記と同じ）で表わされる
化合物など）と反応させるか、または一般式（Ｖ）：

【０１５６】

【化１９】

【０１５７】（式中、環Ｂは前記と同じ）で表わされる
ニトロチオフェノール誘導体（たとえば２−ニトロチオ
フェノール、２−ニトロ−５−クロロチオフェノール、
２−ニトロ−５−ベンジルチオフェノールなど）と反応
後、ニトロ基を還元して、一般式（VI）：

【０１５８】

【化２０】

【０１５９】（式中、環Ａ、環Ｂ、Ｒ¹およびＲ⁴は前記
と同じ）で表わされる（２Ｓ，３Ｓ）−３−（２−アミ
ノフェニルチオ）−３−フェニル−２−ヒドロキシプロ
ピオン酸エステル類を製造し、必要であれば加水分解し
たのち、分子内閉環して一般式（VII）：

【０１６０】

【化２１】

【０１６１】（式中、環Ａ、環ＢおよびＲ⁴は前記と同
じ）で表わされる（２Ｓ，３Ｓ）−２−フェニル−３−
ヒドロキシ−１，５−ベンゾチアゼピン誘導体とし、こ
の化合物を、任意の順序で、５位チッ素原子をジメチル
アミノエチル化し、３位に置換した水酸基をアセチル化
して、一般式（II）：

【０１６２】

【化２２】

【０１６３】（式中、環Ａ、環ＢおよびＲ²は前記と同
じ）で表わされる（２Ｓ，３Ｓ）−１，５−ベンゾチア
ゼピン誘導体またはその薬理的に許容しうる塩を製造す
ることができる。前記合成経路を以下に示す。

【０１６４】

【化２３】

【０１６５】一般式（II）で表わされる（２Ｓ，３Ｓ）
−１，５−ベンゾチアゼピン誘導体またはその薬理的に
許容しうる塩の具体例としては、たとえば（２Ｓ，３
Ｓ）−２−（４−メトキシフェニル）−３−アセトキシ
−５−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−２，３−ジ
ヒドロ−１，５−ベンゾチアゼピン−４（５Ｈ）−オン
（ジルチアゼム）、（２Ｓ，３Ｓ）−２−（４−メトキ
シフェニル）−３−アセトキシ−５−［２−（ジメチル
アミノ）エチル］−８−クロロ−２，３−ジヒドロ−
１，５−ベンゾチアゼピン−４（５Ｈ）−オン、（２
Ｓ，３Ｓ）−３−アセトキシ−５−［３−［４−（２−
メトキシフェニル）−１−ピペラジニル］プロピル］−
２，３−ジヒドロ−２−（４−メトキシフェニル）−８
−クロロ−１，５−ベンゾチアゼピン−４（５Ｈ）−オ
ン、（２Ｓ，３Ｓ）−３−アセトキシ−８−ベンジル−
２，３−ジヒドロ−５−（２−ジメチルアミノエチル）
−２−（４−メトキシフェニル）−１，５−ベンゾチア
ゼピン−４（５Ｈ）−オンや、それらの薬理的に許容し
うる塩などがあげられる。

【０１６６】一方、トランス−３−置換グリシッド酸エ
ステル類の光学異性体（Ａ）としてたとえば（２Ｓ，３
Ｒ）−異性体を用い、常法、たとえば前述の（２Ｒ，３
Ｓ）−異性体を用いて一般式（II）で表わされる（２
Ｓ，３Ｓ）−１，５−ベンゾチアゼピン誘導体を製造す
るのに採用しうる既知方法にしたがって一般式（IV）で
表わされるアミノチオフェノール誘導体と反応させる
か、または一般式（Ｖ）で表わされるニトロチオフェノ
ール誘導体と反応後、生成物のニトロ基を還元して、一
般式（VIII）：

【０１６７】

【化２４】

【０１６８】（式中、環Ａ、環ＢおよびＲ¹は前記と同
じ）で表わされる（２Ｒ，３Ｒ）−３−（２−アミノフ
ェニルチオ）−３−フェニル−２−ヒドロキシプロピオ
ン酸エステル類を製造し、必要であれば加水分解したの
ち、分子内閉環して一般式（IX）：

【０１６９】

【化２５】

【０１７０】（式中、環Ａ、環Ｂは前記と同じ）で表わ
される（２Ｒ，３Ｒ）−２−フェニル−３−ヒドロキシ
−１，５−ベンゾチアゼピン誘導体とし、この化合物
を、任意の順序で、５位チッ素原子をジメチルアミノエ
チル化し、３位に置換した水酸基をアセチル化すること
により、一般式（III）：

【０１７１】

【化２６】

【０１７２】（式中、環Ａ、環Ｂは前記と同じ）で表わ
される（２Ｒ，３Ｒ）−１，５−ベンゾチアゼピン誘導
体に導くことができる。前記合成経路を以下に示す。

【０１７３】

【化２７】

【０１７４】一般式（III）で表わされる（２Ｒ，３
Ｒ）−１，５−ベンゾチアゼピン誘導体またはその薬理
的に許容しうる塩の具体例としては、たとえば（２Ｒ，
３Ｒ）−シス−２−（４−メチルフェニル）−３−アセ
トキシ−５−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−８−
メチル−２，３−ジヒドロ−１，５−ベンゾチアゼピン
−４（５）−オンや、それらの薬理的に許容しうる塩な
どがあげられる。

【０１７５】さらに、本発明の製造方法でえられるトラ
ンス−３−置換グリシッド酸エステルの光学異性体
（Ａ）を出発原料として用い、従来既知の方法により、
光学分割剤として有用な一般式：

【０１７６】

【化２８】

【０１７７】（式中、環Ａおよび環Ｂは前記と同じ、＊
は不斉炭素原子を表わす）で示される光学活性トレオ−
ニトロカルボン酸化合物を製造することもできる。

【０１７８】かかる光学活性トレオ−ニトロカルボン酸
化合物の製法において、環Ａおよび環Ｂは前記１，５−
ベンゾチアゼピン誘導体の製造方法におけるものと同様
のものをあげることができるが、環Ａが４−低級アルコ
キシフェニル基、環Ｂが式：

【０１７９】

【化２９】

【０１８０】（式中、Ｈａｌはハロゲン原子を表わす）
で示される置換ベンゼン環であるばあいが好ましく、環
Ａが４−メトキシフェニル基、環Ｂは前記式においてＨ
ａｌが塩素原子であるものがとりわけ好ましい。

【０１８１】具体的には、たとえば、トランス−３−置
換グリシッド酸エステルの光学異性体（Ａ）を、特公昭
６１−１８５４９号などに記載された方法により、一般
式：

【０１８２】

【化３０】

【０１８３】（式中、環Ｂは前記と同じ）で示されるニ
トロチオフェノール化合物と反応させた後、生成物をケ
ミカル・アンド・ファーマシューティカル・ブレチン
（Ｃｈｅｍ． Ｐｈａｒｍ． Ｂｕｌｌ．）１８（１
０），２０２８−２０３７（１９７０）記載の方法に従
って生成物を加水分解することにより、実施することが
できる。

【０１８４】この方法では、トランス−３−置換グリシ
ッド酸エステルの（２Ｒ，３Ｓ）体を使用すれば、トレ
オ−ニトロカルボン酸化合物の（２Ｓ，３Ｓ）体をえる
ことができ、トランス−3-置換グリシッド酸エステルの
（２Ｓ，３Ｒ）体を使用すれば、トレオ−ニトロカルボ
ン酸の（２Ｒ，３Ｒ）体をえることができる。

【０１８５】なお、本明細書における直鎖または分枝鎖
低級アルキル基とは、炭素数１〜６の直鎖または分枝鎖
アルキル基のことであり、また、直鎖または分枝鎖低級
アルコキシ基とは、炭素数１〜６の直鎖または分枝鎖ア
ルコキシ基のことであり、さらに、シクロアルキル基と
は、炭素数３〜６のシクロアルキル基のことであり、そ
して、アリール基とは、炭素数６〜１０のアリール基の
ことである。

【０１８６】また、本明細書における直鎖または分枝鎖
アルキル基とは、炭素数１〜１２の直鎖または分枝鎖ア
ルキル基のことであり、アルコキシアルキル基とは、ア
ルコキシ基の炭素数が１〜６でアルキル基の炭素数が１
〜６のアルコキシアルキル基のことであり、また、アリ
ールアルキル基とは、アリール基の炭素数が６〜１０で
アルキル基の炭素数が１〜６のアリールアルキル基のこ
とである。

【０１８７】

【実施例】つぎに本発明を実験例などに基づいてさらに
詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるもので
はない。

【０１８８】実験例１ 表１記載の量の（２Ｒ，３Ｓ）−３−（４−メトキシフ
ェニル）グリシッド酸メチルエステル（以下、ＭＰＧＭ
という）、（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭ、（２Ｓ，３Ｒ）
−ＭＰＧＲ³（（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭのメチルエス
テルをＲ³エステルにしたもの、Ｒ³＝ｎ−プロピル基、
ｎ−ブチル基、ｎ−オクチル基、ｎ−デシル基、ベンジ
ル基、シクロヘキシル基、２−オクチル基）およびメタ
ノール３０ｍｌを３００ｍｌのナスフラスコに入れ、昇
温して溶解し、マグネチックスターラーで撹拌しながら
−１５℃まで冷却した。−１５℃になったのち５分間静
置し、上澄液中の各成分の濃度をＨＰＬＣ^＊で測定し，
溶液量を換算して上澄液中における各成分の量を求め
た。また、（晶析前（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭ量−上澄
液中（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭ量）を結晶析出量として
求めた。結果を表１に示す。

【０１８９】なお、析出した結晶の一部をサンプリング
し、濾過後、結晶と等量のメタノール（−１５℃）で洗
浄し、真空乾燥させたのち、ＨＰＬＣで純度を調べた結
果、いずれも（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭの含有率は９９
％以上であった。

【０１９０】＊：ＨＰＬＣ 条件 カラム充填剤：キラルセル（ＣＨＩＲＡＬＣＥＬ）ＯＤ
（ダイセル化学工業（株）製） 展開溶媒：ヘキサン−イソプロパノール（２０：１） 流速：１．０ｍｌ／ｍｉｎ カラム温度：４０℃ 検出：２３７ｎｍの紫外線吸収

【０１９１】

【表１】

【０１９２】実験例２ 表２〜表７に記載の量の（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭ、
（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭ、（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧｎ
Ｂｕ（（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭのメチルエステルをｎ
−ブチルエステルにかえたもの）およびメタノール３０
ｍｌを３００ｍｌナスフラスコに入れ、２．５ｃｍマグ
ネチックスターラー、３００ｒｐｍで撹拌して溶解させ
たのち、表２〜表７に記載の温度に冷却し、所定時間
（０、０．５、１時間）経過後撹拌を止め、上澄液をサ
ンプリングし、その濃度をＨＰＬＣで測定し、溶液量を
換算して上澄液中の量を求めた。また、（晶析前（２
Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭ量−上澄液中（２Ｒ，３Ｓ）−Ｍ
ＰＧＭ量）を結晶析出量として求めた。

【０１９３】白濁時間は晶析温度にしたのち、白濁を生
じるまでの時間を示し、上澄液中の各異性体の量は白濁
を生じる前に採取したサンプルのＨＰＬＣ測定より求め
た。

【０１９４】（ａ）（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧｎＢｕ／
（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭ＝１．７（モル比）

【０１９５】

【表２】

【０１９６】（ｂ）（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧｎＢｕ／
（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭ＝２．０（モル比）

【０１９７】

【表３】

【０１９８】（ｃ）（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧｎＢｕ／
（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭ＝２．２（モル比）

【０１９９】

【表４】

【０２００】（ｄ）（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧｎＢｕ／
（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭ＝２．４（モル比）

【０２０１】

【表５】

【０２０２】（ｅ）（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧｎＢｕ／
（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭ＝２．７（モル比）

【０２０３】

【表６】

【０２０４】（ｆ）（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧｎＢｕ／
（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭ＝３．８（モル比）

【０２０５】

【表７】

【０２０６】実験例３ 表８記載の量の（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭ、（２Ｓ，３
Ｒ）−ＭＰＧＭ、（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧｎＢｕと、表
８記載の量の表８記載の溶媒とを１０００ｍｌナスフラ
スコに入れ、２．５ｃｍマグネチックスターラー、３０
０ｒｐｍで撹拌して溶解させたのち、表８記載の温度に
冷却後、すぐに撹拌を止め、上澄液をサンプリングし、
その濃度をＨＰＬＣで測定し、溶液量を換算して上澄液
中の量を求めた。また、（晶析前（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰ
ＧＭ量−上澄液中（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭ量）を結晶
析出量として求めた。結果を表８に示す。

【０２０７】なお、析出した結晶の一部をサンプリング
し、濾過後、結晶と等量のメタノール（−１０℃）で洗
浄し、真空乾燥したのちＨＰＬＣで純度を調べたとこ
ろ、いずれも（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭの含有率は９９
％以上であった。

【０２０８】

【表８】

【０２０９】実験例４ 表９に記載の量の（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭ、（２Ｓ，
３Ｒ）−ＭＰＧＭ、（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧｎＢｕおよ
び表９記載の量のメタノールを３００ｍｌナスフラスコ
に入れ、２．５ｃｍマグネチックスターラー、３００ｒ
ｐｍで撹拌して溶解させたのち、−１０℃に冷却して１
時間撹拌後，撹拌を止め上澄液をサンプリングし、その
濃度をＨＰＬＣで測定し、溶液量を換算して上澄液中の
各異性体の量を求めた。析出晶を濾取し、結晶と等量の
メタノールを用い、−１０℃で洗浄することにより結晶
を取得し、ＨＰＬＣで組成を調べた。結果を表９に示
す。

【０２１０】

【表９】

【０２１１】実験例５ 表１０記載の量の（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭ、（２Ｓ，
３Ｒ）−ＭＰＧＭ、（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧｎＢｕ、
（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧｎＢｕおよびメタノール３０ｍ
ｌを３００ｍｌナスフラスコに入れ、２．５ｃｍマグネ
チックスターラー、３００ｒｐｍで撹拌して溶解させた
のち、３０分かけて−１５℃まで冷却後，２時間経過後
撹拌を止めて上澄液をサンプリングし、その濃度をＨＰ
ＬＣで測定し，溶液量を換算して上澄液中の量を求め
た。また、（晶析前（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭ量−上澄
液中（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭ量）を結晶析出量として
求めた。結果を表１０に示す。

【０２１２】なお、析出した結晶の一部をサンプリング
し、結晶と等量のメタノールを用い、−１５℃で洗浄
し、真空乾燥後、ＨＰＬＣで組成を調べた。

【０２１３】

【表１０】

【０２１４】実験例６ （２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭ １０．４ｇ、（２Ｓ，３
Ｒ）−ＭＰＧＭ １０．４ｇ、（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧ
ｎＢｕ ４０．５ｇおよびメタノール１５０ｍｌからな
る溶液を５００ｍｌナスフラスコに入れ、２．５ｃｍマ
グネチックスターラー、３００ｒｐｍで撹拌し、３０分
かけて−１０℃まで冷却し１０分撹拌した。析出した結
晶を濾取し、１０ｍｌのメタノール（−１０℃）で洗浄
したのち真空乾燥し、ＨＰＬＣで組成を調べた。その結
果、（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭを９９％以上含む結晶
４．５ｇ（晶析前の（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭから４３
％の収率）を単離できた。

【０２１５】また、結晶取得後、母洗液の洗液に相当す
るメタノール１０ｍｌを濃縮留去したのち、−１０℃に
冷却して（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭの種晶を添加してそ
のまま３０分撹拌すると、液が濁りアモルファス状物が
析出した。析出したアモルファス状物を濾取し、その組
成をＨＰＬＣで測定したところ、種晶と同じ配置の（２
Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭを最も多く含むが、（２Ｒ，３
Ｓ）−ＭＰＧＭもほぼ同量、さらに（２Ｓ，３Ｒ）−Ｍ
ＰＧｎＢｕを（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭの約２／３含む
固体であることがわかった。

【０２１６】実験例７ （２ＲＳ，３ＳＲ）−ＭＰＧＭ １０４ｇ（０．５モ
ル）（（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭ ５２ｇ、（２Ｓ，３
Ｒ）−ＭＰＧＭ ５２ｇを含む）をキシレン５００ｍ
ｌ、ｎ−ブタノール８０ｍｌ、水０．２５ｍｌの混液に
溶解後、参考例１−（２−ｂ）でえられたセラチア マ
ルセッセンス由来のエステラーゼ２００ｍｇ（オリーブ
油分解活性４×１０⁴Ｕ）を懸濁し、３０℃で２４時間
撹拌した。反応液をＨＰＬＣで分析したところ、（２
Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭ ５０ｇ、（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰ
ＧＭ １３．５ｇおよび（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧｎＢｕ
４４ｇからなることがわかった。

【０２１７】反応液から濾紙を用いて酵素を濾去したの
ち、６０〜７０℃、減圧で濃縮して溶媒をすべて留去す
るとオイル状の残渣がえられた。濃縮残査にメタノール
１５０ｍｌを添加し、撹拌すると結晶が析出した。さら
に晶析率をあげるために、この液を−１５℃まで冷却
し、−１５℃に達したのち３０分撹拌し、ついで、析出
晶を濾取し、−１５℃に冷却したメタノール４０ｍｌで
洗浄した。えられた結晶を真空乾燥し、（２Ｒ，３Ｓ）
−ＭＰＧＭ ４４．２ｇをえた。このときの母洗液をＨ
ＰＬＣで分析した結果、（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭ ６
ｇ、（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭ １３．５ｇおよび（２
Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧｎＢｕ ４４ｇからなることがわか
った。

【０２１８】収率：８５．０％（仕込みラセミ体中の
（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭを１００％としたときの値） （２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭの含有率：９９％以上 実験例８ （２ＲＳ，３ＳＲ）−ＭＰＧＭ ２０．８ｇ（（２Ｒ，
３Ｓ）−ＭＰＧＭ１０．４ｇ、（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧ
Ｍ １０．４ｇを含む）、ｎ−ブタノール１６ｍｌ、キ
シレン１００ｍｌ、参考例１−（２−ｂ）でえられたセ
ラチア マルセッセンス由来のエステラーゼ１０ｍｇ
（オリーブ油分解活性２×１０³Ｕ）、水２５μｌ、温
度３０℃の条件で酵素反応を表１１記載のエステル交換
率になるまで行なったのち、濾紙を用いて酵素を濾別
し、６０〜７０℃、減圧で濃縮して溶媒を留去してオイ
ル状の残渣をえた。

【０２１９】えられた残渣にメタノール３０ｍｌを添加
し、３００ｍｌナスフラスコ中、２．５ｃｍマグネチッ
クスターラー、３００ｒｐｍで撹拌し、−１０℃に冷却
後撹拌を止め、上澄液をサンプリングし、その化合物濃
度をＨＰＬＣで測定し、溶液量を換算して上澄液中の量
を求めた。また、（晶析前（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭ量
−上澄液中（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭ量）を、結晶析出
量として求めた。結果を表１１に示す。

【０２２０】なお、析出した結晶の一部をサンプリング
し、濾過し、結晶と等量のメタノール（−１０℃）で洗
浄し、真空乾燥したのちＨＰＬＣで調べた結果、いずれ
も（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭの含有率は９９％以上であ
った。

【０２２１】

【表１１】

【０２２２】実験例９ （２ＲＳ，３ＳＲ）−ＭＰＧＭ １０４ｇ（０．５モ
ル）（（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭ ５２ｇ、（２Ｓ，３
Ｒ）−ＭＰＧＭ ５２ｇを含む）をキシレン５００ｍ
ｌ、ｎ−ブタノール８０ｍｌの混液に溶解後、参考例１
−（２−ａ）でえられたセライト固定化エステラーゼ
３．０ｇ（オリーブ油分解活性２．５×１０⁴Ｕ）を懸
濁し、３０℃で２４時間撹拌した。反応液をＨＰＬＣで
分析した結果、組成は（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭ ５１
ｇ、（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭ １４．７ｇおよび（２
Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧｎＢｕ ３８ｇからなることがわか
った。

【０２２３】反応液から濾紙を用いてセライト固定化エ
ステラーゼを濾別したのち、６０〜７０℃、減圧で濃縮
して溶媒をすべて留去するとオイル状の残渣がえられ
た。濃縮残査にメタノール １５０ｍｌを添加し、撹拌
すると結晶が析出した。さらに晶析率をあげるためにこ
の液を−１０℃まで冷却し、−１０℃に達したのち３０
分撹拌したのち、析出晶を濾別し、−１０℃に冷却した
メタノール４０ｍｌで洗浄した。えられた結晶を真空乾
燥し、（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭ ４３．１ｇをえた。
このときの母洗液をＨＰＬＣで分析した結果、（２Ｒ，
３Ｓ）−ＭＰＧＭ７ｇ、（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭ １
４．７ｇおよび（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧｎＢｕ ３８ｇ
からなることがわかった。

【０２２４】収率：８２．９％（仕込みラセミ体中の
（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭを１００％としたときの値） （２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭの含有率：９９％以上 実験例１０ （１）（２ＲＳ，３ＳＲ）−ＭＰＧＭ２０ｇおよび（２
Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧｎＢｕ ４１ｇをメタノール １５０
ｍｌに約３０〜４０℃で溶解した。この溶液を撹拌下冷
却し、０℃で（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭの種晶１０ｍｇ
を添加し、−１０℃まで３０分かけて冷却した後、同温
度で１０分間撹拌した。析出晶をグラスフィルターで濾
取し、−１０℃のメタノール２０ｍｌで洗浄した後、真
空乾燥し、（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭをえた。また、濾
液および洗液を併せて、（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭ、
（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭおよび（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰ
ＧｎＢｕを含むメタノール溶液をえた。

【０２２５】（２）前記メタノール溶液にメタノール１
００ｍｌおよびジイソプロピルアミン１０ｍｌを添加
し、３０℃で１６時間撹拌することにより、（２Ｓ，３
Ｒ）−ＭＰＧｎＢｕは（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭに変換
された。

【０２２６】（３）反応液を０℃で、３０分間静置し、
析出した（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭの結晶をろ取し、５
℃のメタノール４０ｍｌで洗浄した。母液を減圧濃縮す
ることにより、（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭおよび（２
Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭをほぼ等量含む残査をえた。

【０２２７】（４）残査に（２ＲＳ，３ＳＲ）−ＭＰＧ
Ｍの全量が約２０ｇになるように、（２ＲＳ，３ＳＲ）
−ＭＰＧＭを添加し、さらに、（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧ
ｎＢｕおよびメタノールを加えて前記（１）の工程に付
した。

【０２２８】前記（１）〜（４）の工程を３回繰り返し
た結果を表１２に示す。

【０２２９】

【表１２】

【０２３０】前記３回の繰り返しにより、（２Ｒ，３
Ｓ）−ＭＰＧＭを合計１６．２ｇえることができ、ま
た、各回でえられた（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧＭはいずれ
も純度９８％以上、光学純度９７％以上であった。

【０２３１】また、光学異性体として使用した（２Ｓ，
３Ｒ）−ＭＰＧｎＢｕよりも、モル数の多い（２Ｓ，３
Ｒ）−ＭＰＧＭを結晶として取得することができるた
め、えられる（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭのうち、（２
Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧｎＢｕとして必要な量だけを化学的
エステル交換して（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧｎＢｕとすれ
ば、高純度の（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭも取得すること
ができる。

【０２３２】実験例１１ ２Ｌの撹拌装置付反応容器に（２ＲＳ，３ＳＲ）−ＭＰ
ＧＭ１８７ｇ（０．９モル）［（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰＧ
Ｍ９３．５ｇおよび（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭ９３．５
ｇを含む］をキシレン７２０ｍｌおよびｎ−ブタノール
５７．６ｍｌ（０．９モル）の混液に溶解する。この溶
液に、参考例１−（２−ａ）でえられたセライト固定化
エステラーゼ３．０ｇ（予め精製水０．８１ｍｌを加え
たもの、オリーブ油分解活性２．５×１０⁴Ｕ）を懸濁
し、１５ｍｍＨｇの減圧下、３０℃で４時間撹拌した。
反応液をＨＰＬＣで分析した結果、（２Ｒ，３Ｓ）−Ｍ
ＰＧＭ９１．６ｇ、（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭ２４．３
ｇおよび（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧｎＢｕ８３．２ｇから
なることがわかった。

【０２３３】反応液からセライト固定化エステラーゼを
濾別した後、濾液を６０〜７０℃で減圧濃縮することに
よりオイル状の残査がえられた。残査にメタノール１５
０ｍｌを添加し、撹拌下、−１０℃まで冷却し、−１０
℃に達したのち、さらに３０分撹拌して結晶を析出させ
た。析出晶を濾取し、−１０℃のメタノールで洗浄後、
結晶を真空乾燥することにより、（２Ｒ，３Ｓ）−ＭＰ
ＧＭ８２．３ｇをえた（純度９９％以上）。母液および
洗液を併せ、ＨＰＬＣで分析した結果、（２Ｒ，３Ｓ）
−ＭＰＧＭ９．１ｇ、（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧＭ２４．
１ｇおよび（２Ｓ，３Ｒ）−ＭＰＧｎＢｕ８３．０ｇを
含むことがわかった。

【０２３４】参考例１ （１）デキストリン１％、硫酸アンモニウム０．２％、
ミーストＳ（アサヒビール（株）製）２％、リン酸一カ
リウム０．２％、硫酸マグネシウム０．０５％、硫酸第
一鉄０．００１％、ｓｐａｎ８５（ソルビタン トリオ
レエート界面活性剤、花王（株）製、レオドールＳＰ−
３００ １．５％ｗ／ｖおよびポリアルキレングリコー
ル誘導体系界面活性剤（カラリン１０２、三洋化成工業
（株）製）０．２％ｖ／ｖよりなる液体培地１８Ｌ（ｐ
Ｈ７．０）を３０Ｌ容ジャーファメンターに入れ，滅菌
後、予め同培地で２７．５℃、２０時間往復振盪培養し
たセラチア マルセッセンスＳｒ４１（ＦＥＲＭ ＢＰ
−４８７）の前培養液２００ｍｌを接種し、２５℃で
０．３３ｖｖｍ、０．５ｋｇ／ｃｍ²・Ｇ、３００ｒｐ
ｍの条件下で、Ｌ−プロリン１．５％を連続添加しなが
ら２８時間培養した。この培養液１０Ｌを遠心除菌後、
吸着樹脂ＳＰ２０７（三菱化学（株）製）にて不純物を
除去した。えられた上澄液は、限外濾過膜（ＳＬＰ１０
５３、旭化成工業（株）製）を用いて１Ｌまで濃縮後、
１．０×１０⁴Ｕ／ｍｌのオリーブ油分解活性を持つエ
ステラーゼ１０８０ｍｌをえた。

【０２３５】（２−ａ）前記（１）でえた濃縮酵素液３
０ｍｌを５００ｍｌ容ナス型フラスコに入れたセライト
（セライトコーポレーション製、California, USA）３
０ｇに浸みこませたのち、均一に混ぜた。ロータリーエ
バポレーターを用いて外温３０℃で減圧乾燥し、８．２
Ｕ／ｍｇの活性を有するセライト固定化エステラーゼ３
６．５ｇをえた。

【０２３６】（２−ｂ）前記（１）でえた濃縮酵素液１
０００ｍｌを凍結乾燥して、１．９６×１０⁵Ｕ／ｇの
オリーブ油分解活性を有するエステラーゼ５４ｇをえ
た。

【０２３７】参考例２ ２％ポリビニルアルコール（商品名：ポバール１１７、
（株）クラレ製）２２５ｍｌと局方オリーブ油７５ｍｌ
の混液を５〜１０℃にて１０分間、１４，５００ｒｐｍ
で乳化し、えられたオリーブ油乳化液５．０ｍｌと０．
２５Ｍトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．０）４．０ｍｌ
（２．５ｍＭ塩化カルシウムを含む）を３７℃で１０分
間予熱しておいた。これに１ｍｌの酵素液を加え、３７
℃で２０分間反応させたのち、アセトン−エタノール混
液（１：１）２０ｍｌを加えて反応を停止し、フェノー
ルフタレインを指示薬として０．０５ＮＮａＯＨ溶液で
滴定した。以上の方法で１分間に１μモルの脂肪酸を遊
離する酵素量を１ユニットとした。

【０２３８】

【発明の効果】本発明によると、トランス−３−フェニ
ルグリシッド酸エステル類の光学異性体混合物を含む溶
液から、所望の光学異性体の結晶を純度良く、かつ、母
液中の所望の光学異性体の濃度が従来法よりもはるかに
低くなるまで結晶化させることができる。また、ラセミ
型トランス−３−フェニルグリシッド酸エステル類を酵
素で不斉エステル交換後、反応生成物から所望の光学異
性体を純度良く、かつ、母液中の所望の光学異性体の濃
度が従来法よりもはるかに低くなるまで結晶化させるこ
とができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明における光学異性体（Ａ）、光学異性体
（Ｂ）およびエステル（Ｂ′）を溶解した溶液から、エ
ステル（Ｂ′）が存在しなければ光学異性体（Ｂ）が析
出するが、エステル（Ｂ′）が存在するため光学異性体
（Ａ）は析出するが光学異性体（Ｂ）は析出しない状態
を、本発明に使用する特定の溶液ａ（光学異性体
（Ａ）、光学異性体（Ｂ）およびエステル（Ｂ′）の比
率ならびに溶媒、濃度が一定で光学異性体（Ａ）の濃度
＞光学異性体（Ｂ）の濃度、エステル（Ｂ′）は光学異
性体（Ｂ）の結晶化を抑制するのに充分な量含有されて
いる溶液）について温度および時間を変数としたばあい
の関係を説明するためのグラフである。

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ Ｃ１２Ｎ 9/16 Ｃ１２Ｎ 9/16 // Ａ６１Ｋ 31/5513 Ａ６１Ｋ 31/5513 Ａ６１Ｐ 25/22 Ａ６１Ｐ 25/22 (Ｃ１２Ｎ 9/16 Ｃ１２Ｒ 1:43 Ｃ１２Ｒ 1:43） Ｃ０７Ｍ 7:00 Ｃ０７Ｍ 7:00 (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) C07D 303/00 - 303/48 C07D 301/00 - 301/32 C12N 9/00 - 9/16

Claims (29)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 一般式（Ｉ）： 【化１】 （式中、環Ａは置換または非置換のベンゼン環、Ｒ¹は
   エステル残基を示す）で表わされるトランス−３−置換
   グリシッド酸エステルの２位、３位不斉炭素に基づく、
   １つの光学異性体（Ａ）、他の光学異性体（Ｂ）および
   光学異性体（Ｂ）とエステル残基のみが異なるエステル
   （Ｂ′）を溶解した溶液［ただし、光学異性体（Ｂ）の
   エステル残基がメチル基またはエチル基であり、エステ
   ル（Ｂ′）のエステル残基が光学異性体（Ｂ）のエステ
   ル残基よりも炭素数が多い直鎖または分枝鎖アルキル
   基、アルコキシ基（これらの基はハロゲン原子で置換さ
   れていてもよい）、アリールアルキル基（この基は直鎖
   もしくは分枝鎖低級アルキル基、直鎖もしくは分枝鎖低
   級アルコキシ基またはハロゲン原子で置換されていても
   よい）、シクロヘキシル基である］から、エステル
   （Ｂ′）が存在しなければ光学異性体（Ｂ）が析出する
   が、エステル（Ｂ′）が存在するため光学異性体（Ａ）
   は析出するが光学異性体（Ｂ）は析出しない状態となる
   まで光学異性体（Ａ）の結晶化を行ない単離することを
   特徴とする光学異性体（Ａ）の製造方法。
2. 【請求項２】 光学異性体（Ａ）、光学異性体（Ｂ）お
   よびエステル（Ｂ′）以外に、さらに光学異性体（Ａ）
   とエステル残基のみが異なり、エステル（Ｂ′）と同じ
   エステル残基を有するエステル（Ａ′）を少量含んでい
   てもよい溶液から光学異性体（Ａ）の結晶化を行なう請
   求項１記載の製造方法。
3. 【請求項３】 溶液において光学異性体（Ａ）／光学異
   性体（Ｂ）がモル比で４／６〜１０／１で、エステル
   （Ｂ′）／光学異性体（Ｂ）がモル比で５／３〜１０／
   １である請求項１記載の製造方法。
4. 【請求項４】 溶液においてエステル（Ａ′）／光学異
   性体（Ａ）のモル比がエステル（Ｂ′）／光学異性体
   （Ｂ）のモル比の９／３５以下である請求項２記載の製
   造方法。
5. 【請求項５】 光学異性体（Ａ）の製造に使用する溶媒
   が、アルコール系溶媒、エーテル系溶媒、ハロゲン原子
   で置換されていてもよい芳香族炭化水素系溶媒、ハロゲ
   ン原子で置換されていてもよい脂肪族炭化水素系溶媒、
   エステル系溶媒である請求項１、２、３または４記載の
   製造方法。
6. 【請求項６】 光学異性体（Ａ）の結晶化を行ない単離
   する際の温度が−３０〜＋１５℃、結晶化前の溶液にお
   ける光学異性体（Ａ）の濃度が０．５〜４モル／Ｌであ
   る請求項１、２、３、４または５記載の製造方法。
7. 【請求項７】 エステル（Ｂ′）を形成するアルコール
   を含み、かつ、光学異性体（Ａ）および光学異性体
   （Ｂ）を溶解させた溶液中、立体選択的にエステル交換
   する能力を有する酵素の存在下で光学異性体（Ｂ）のエ
   ステル交換反応を行なってえられた溶液（溶媒を交換し
   た溶液であってもよい）を、光学異性体（Ａ）の結晶化
   および単離を行なう溶液として使用する請求項１、２、
   ３、４、５または６記載の製造方法。
8. 【請求項８】 酵素が、転換率１０％におけるエステル
   交換反応についてのＥ値が２０以上の酵素である請求項
   ７記載の製造方法。
9. 【請求項９】 エステル（Ｂ′）を形成するアルコール
   を含み、かつ、光学異性体（Ａ）および光学異性体
   （Ｂ）を溶解させた溶液中、立体選択的にエステル交換
   する能力を有する酵素の存在下でエステル（Ｂ′）／光
   学異性体（Ｂ）がモル比で５／３〜１０／１になるよう
   にエステル交換反応を行なってえられた溶液（溶媒を交
   換した溶液であってもよい）を光学異性体（Ａ）の結晶
   化および単離を行なう溶液として使用する請求項７記載
   の製造方法。
10. 【請求項１０】 光学異性体（Ａ）の絶対配置が（２
    Ｒ，３Ｓ）、光学異性体（Ｂ）の絶対配置が（２Ｓ，３
    Ｒ）である請求項１、２、３、４、５、６、７、８また
    は９記載の製造方法。
11. 【請求項１１】 環Ａが４−メトキシフェニル基であ
    り、光学異性体（Ｂ）のエステル残基がメチル基であ
    り、エステル（Ｂ′）のエステル残基がｎ−ブチル基で
    ある請求項１、２、３、４、５、６、７、８、９または
    １０記載の製造方法。
12. 【請求項１２】 一般式（Ｉ）： 【化２】 （式中、環Ａは置換または非置換のベンゼン環、Ｒ¹は
    エステル残基を示す）で表わされるトランス−３−置換
    グリシッド酸エステルの２位、３位不斉炭素に基づく１
    つの光学異性体（Ａ）および他の光学異性体（Ｂ）を、
    光学異性体（Ｂ）とエステル残基のみが異なるエステル
    （Ｂ′）を形成するアルコールおよび立体選択的にエス
    テル交換する能力を有する酵素の存在下でエステル
    （Ｂ′）／光学異性体（Ｂ）がモル比で１３／７〜７．
    ８／１になるようにエステル交換反応を行なってえられ
    た溶液［ただし、光学異性体（Ｂ）のエステル残基がメ
    チル基またはエチル基であり、エステル（Ｂ′）のエス
    テル残基が光学異性体（Ｂ）のエステル残基よりも炭素
    数が多い直鎖または分枝鎖アルキル基、アルコキシ基
    （これらの基はハロゲン原子で置換されていてもよ
    い）、アリールアルキル基（この基は直鎖もしくは分枝
    鎖低級アルキル基、直鎖もしくは分枝鎖低級アルコキシ
    基またはハロゲン原子で置換されていてもよい）、シク
    ロヘキシル基であり、溶媒を交換した溶液であってもよ
    い］から光学異性体（Ａ）の結晶化を行ない、最初の光
    学異性体（Ａ）の量に対して７５％以上の収率で光学純
    度９９％以上の光学異性体（Ａ）を単離することを特徴
    とする光学異性体（Ａ）の製造方法。
13. 【請求項１３】 酵素が、転換率１０％におけるエステ
    ル交換反応についてのＥ値が２０以上の酵素である請求
    項１２記載の製造方法。
14. 【請求項１４】 光学異性体（Ａ）の絶対配置が（２
    Ｒ，３Ｓ）、光学異性体（Ｂ）の絶対配置が（２Ｓ，３
    Ｒ）である請求項１２または１３記載の製造方法。
15. 【請求項１５】 酵素がセラチア マルセッセンス由来
    のエステラーゼであり、エステル（Ｂ′）／光学異性体
    （Ｂ）がモル比で２／１〜８／２であり、光学異性体
    （Ａ）の収率が８０％以上である請求項１２記載の製造
    方法。
16. 【請求項１６】 環Ａが４−メトキシフェニル基であ
    り、光学異性体（Ｂ）のエステル残基がメチル基であ
    り、エステル（Ｂ′）のエステル残基がｎ−ブチル基で
    ある請求項１２、１３、１４または１５記載の製造方
    法。
17. 【請求項１７】 （ａ）一般式（Ｉ）： 【化３】 （式中、環Ａは置換または非置換ベンゼン環、Ｒ¹はエ
    ステル残基を示す）で表わされるトランス−３−置換グ
    リシッド酸エステルの２位、３位不斉炭素に基づく、１
    つの光学異性体（Ａ）、他の光学異性体（Ｂ）および光
    学異性体（Ｂ）とエステル残基のみが異なるエステル
    （Ｂ′）を溶解した溶液［ただし、光学異性体（Ｂ）の
    エステル残基がメチル基またはエチル基であり、エステ
    ル（Ｂ′）のエステル残基が光学異性体（Ｂ）のエステ
    ル残基よりも炭素数が多い直鎖または分枝鎖アルキル
    基、アルコキシ基（これらの基はハロゲン原子で置換さ
    れていてもよい）、アリールアルキル基（この基は直鎖
    もしくは分枝鎖低級アルキル基、直鎖もしくは分枝鎖低
    級アルコキシ基またはハロゲン原子で置換されていても
    よい）、シクロヘキシル基である］を調製し、 （ｂ）この溶液から、エステル（Ｂ′）が存在しなけれ
    ば光学異性体（Ｂ）が析出するが、エステル（Ｂ′）が
    存在するため光学異性体（Ａ）は析出するが光学異性体
    （Ｂ）は析出しない状態となるまで、光学異性体（Ａ）
    の結晶化を行ない、 （ｃ）光学異性体（Ａ）の結晶を単離し、 （ｄ）光学異性体（Ａ）および光学異性体（Ｂ）ととも
    に母液中に存在する、エステル（Ｂ′）を化学的にエス
    テル交換して光学異性体（Ｂ）としたのち、光学異性体
    （Ｂ）の結晶化を行ない単離し、 （ｅ）一般式（Ｉ）で表わされるトランス−３−置換グ
    リシッド酸エステルおよびエステル（Ｂ′）を母液に加
    えて工程（ｂ）の結晶化に供する溶液とし、 （ｆ）前記工程（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）および（ｅ）を
    この順序で繰り返すことを特徴とする光学異性体（Ａ）
    および光学異性体（Ｂ）の製造方法。
18. 【請求項１８】 工程（ｄ）において、さらに反応液に
    光学異性体（Ａ）とエステル残基のみが異なり、エステ
    ル（Ｂ′）と同じエステル残基を有するエステル
    （Ａ′）を加え、工程（ｅ）において母液に含まれるエ
    ステル（Ａ′）を化学的にエステル交換して光学異性体
    （Ａ）に戻す請求項１７記載の製造方法。
19. 【請求項１９】 工程（ａ）において、光学異性体
    （Ａ）、光学異性体（Ｂ）およびエステル（Ｂ′）以外
    に、さらに光学異性体（Ａ）とエステル残基のみが異な
    り、エステル（Ｂ′）と同じエステル残基を有するエス
    テル（Ａ′）を少量含んでいてもよい溶液から光学異性
    体（Ａ）の結晶化を行なう請求項１７または１８記載の
    製造方法。
20. 【請求項２０】 光学異性体（Ｂ）のエステル残基がメ
    チル基またはエチル基であり、エステル（Ｂ′）のエス
    テル残基が光学異性体（Ｂ）のエステル残基よりも炭素
    数が多い直鎖または分枝鎖アルキル基、アルコキシアル
    キル基（これらの基はハロゲン原子で置換されていても
    よい）、アリールアルキル基（この基は直鎖もしくは分
    枝鎖低級アルキル基、直鎖もしくは分枝鎖低級アルコキ
    シ基またはハロゲン原子で置換されていてもよい）であ
    る請求項１７、１８または１９記載の製造方法。
21. 【請求項２１】 工程（ａ）における溶液において光学
    異性体（Ａ）／光学異性体（Ｂ）がモル比で４／６〜１
    ０／１で、エステル（Ｂ′）／光学異性体（Ｂ）がモル
    比で５／３〜１０／１である請求項１７記載の製造方
    法。
22. 【請求項２２】 工程（ａ）における溶液において光学
    異性体（Ａ）／光学異性体（Ｂ）がモル比で４／６〜１
    ０／１で、エステル（Ｂ′）／光学異性体（Ｂ）がモル
    比で５／３〜１０／１であり、工程（ｄ）におけるエス
    テル（Ａ′）の添加量が、溶液におけるエステル
    （Ａ′）／光学異性体（Ａ）がモル比で５／３〜１０／
    １である請求項１８記載の製造方法。
23. 【請求項２３】 工程（ａ）における溶液においてエス
    テル（Ａ′）／光学異性体（Ａ）のモル比がエステル
    （Ｂ′）／光学異性体（Ｂ）のモル比の９／３５以下で
    ある請求項１９記載の製造方法。
24. 【請求項２４】 光学異性体（Ａ）および光学異性体
    （Ｂ）の製造に使用する溶媒が、アルコール系溶媒、エ
    ーテル系溶媒、ハロゲン原子で置換されていてもよい芳
    香族炭化水素系溶媒、ハロゲン原子で置換されていても
    よい脂肪族炭化水素系溶媒、エステル系溶媒である請求
    項１７、１８、１９、２０、２１、２２または２３記載
    の製造方法。
25. 【請求項２５】 工程（ｂ）および工程（ｃ）における
    光学異性体（Ａ）の結晶化を行ない単離する際の温度が
    −３０〜＋１５℃、結晶化前の溶液における光学異性体
    （Ａ）の濃度が０．５〜４モル／Ｌである請求項１７、
    １８、１９、２０、２１、２２、２３または２４記載の
    製造方法。
26. 【請求項２６】 請求項１、２、３、４、５、６、７、
    ８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、
    １７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４また
    は２５記載の方法で、光学異性体（Ａ）として、（２
    Ｒ，３Ｓ）−３−置換グリシッド酸エステルを製造し、
    製造された（２Ｒ，３Ｓ）−３−置換グリシッド酸エス
    テルを用いて、一般式（II）： 【化４】 （式中、環Ａおよび環Ｂはそれぞれ置換または非置換ベ
    ンゼン環、Ｒ²は−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｎ（ＣＨ₃）₂または 【化５】 を示す）で表わされる（２Ｓ，３Ｓ）−１，５−ベンゾ
    チアゼピン誘導体またはその薬理的に許容しうる塩を製
    造する方法。
27. 【請求項２７】 環Ａが４−メトキシフェニル基であ
    り、環Ｂが非置換ベンゼン環であり、Ｒ²が−ＣＨ₂ＣＨ
    ₂Ｎ（ＣＨ₃）₂である請求項２６記載の製造方法。
28. 【請求項２８】 請求項１、２、３、４、５、６、７、
    ８、９、１１、１２、１３、１５、１６、１７、１８、
    １９、２０、２１、２２、２３、２４または２５記載の
    方法で、光学異性体（Ａ）として、（２Ｓ，３Ｒ）−３
    −置換グリシッド酸エステルを製造し、製造された（２
    Ｓ，３Ｒ）−３−置換グリシッド酸エステルを用いて、
    一般式（III）： 【化６】 （式中、環Ａおよび環Ｂはそれぞれ置換または非置換ベ
    ンゼン環を示す）で表わされる（２Ｒ，３Ｒ）−１，５
    −ベンゾチアゼピン誘導体またはその薬理的に許容しう
    る塩を製造する方法。
29. 【請求項２９】 請求項１、２、３、４、５、６、７、
    ８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、
    １７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４また
    は２５記載の方法で、光学異性体（Ａ）として、（２
    Ｒ，３Ｓ）−または（２Ｓ，３Ｒ）−３−置換グリシッ
    ド酸エステルを製造し、製造された（２Ｒ，３Ｓ）−ま
    たは（２Ｓ，３Ｒ）−３−置換グリシッド酸エステルを
    用いて、一般式： 【化７】 （式中、環Ａおよび環Ｂはそれぞれ置換または非置換ベ
    ンゼン環を示し、＊は不斉炭素原子を示す）で表わされ
    る光学活性トレオ−ニトロカルボン酸化合物を製造する
    方法。