JP3185802B2 - ポリ（ａｄｐ−リボース）グリコヒドロラーゼ阻害剤 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、後記化３で表わされる
グルコース誘導体の新規な用途に関する。

【０００２】

【従来技術・発明が解決しようとする課題】現有の抗癌
剤の殆どは、ＤＮＡ合成あるいは細胞分裂を抑制する作
用を持つが、これは正常細胞に対しても同等な作用を示
す。わずかに癌細胞は細胞分裂が速く、正常細胞は遅い
と言う差を利用して癌細胞により多くの障害を与えるこ
とで癌治療が成り立っている。正常細胞が受けた障害
は、副作用として表現され、生体がその副作用にどこま
で耐えられるかが、癌治療の上で重要なポイントとなっ
ている。

【０００３】以上のことから明らかなように、本来の癌
治療は癌細胞の生物学、生化学等に根ざすべきものであ
るが、現実にはその様な癌治療法にまで結びついていな
い。

【０００４】癌の原因としては、発癌物質、放射線およ
び癌ウイルスの３つが古くより指摘されてきた。その
内、癌ウイルスの持つ遺伝情報により細胞が癌化するこ
とが明らかになり、oncogene（癌遺伝子）なる言葉が生
まれた。その後、癌遺伝子は正常細胞にも存在し、それ
が何らかの原因でスイッチオンされて、細胞が癌化する
と言う仮説が立てられたのである。これは、時の流れと
共に発展し、今日その大筋が正しかったことは、当業者
であれば誰しも認めるところである。

【０００５】一方、高等動物のゲノムには癌遺伝子とな
り得るproto-oncogeneが５０種以上存在し、それらは正
常細胞の増殖や分化に重要な生理機能を果たしている。
それ故、細胞増殖や癌の制御の遺伝子レベルもしくは遺
伝子産物レベルでのコントロールの可能性が生まれて来
た。

【０００６】本発明の目的は癌遺伝子の発現を特異的に
阻害し、これを抑制する癌治療剤を提供することにあ
る。

【０００７】ところで、挿入されたマウス乳癌ウイルス
（ＭＭＴＶ）遺伝子の発現がコルチコイドにより制御さ
れているマウス乳癌細胞を用い、ＭＭＴＶ遺伝子発現に
はクロマチンタンパク質での脱ポリＡＤＰ−リボース反
応が引金となっていることが見出されている。即ち、ポ
リＡＤＰ−リボースが分解されることにより、その部分
のクロマチン構造の局所変化が、最終的にはＲＮＡポリ
メラーゼのプロモーターへの結合と転写促進につながる
と考えられている〔ジャーナル・バイオロジカル・ケミ
ストリー，２５８，１５３７１（１９８３）〕。

【０００８】この様な実情の下に、本発明者らはポリＡ
ＤＰ−リボースの分解を阻止すれば、癌遺伝子が活性化
されなくなると予想し、ＡＤＰ−リボースの分解に関与
する酵素であるポリ（ＡＤＰ−リボース）グリコヒドロ
ラーゼをヒト胎盤より分離精製し、本酵素に対し阻害作
用をもつ化合物を検討した。その結果、幾つかの新規化
合物に強い阻害活性を見出した。そして、さらに検討を
進めポリ（ＡＤＰ−リボース）グリコヒドロラーゼ阻害
に基づく抗癌作用を有する医薬として、使用に耐え得る
化合物を創製することに成功し本発明を完成した。

【０００９】

【課題を解決するための手段】即ち、本発明の要旨は以
下の通りである。一般式（Ｉ）

【化３】 〔式中、Ｒ¹ 〜Ｒ⁵ はそれぞれ水素原子またはＡ

【化４】 （式中、Ｚは直接結合、アルキレンまたはアルケニレン
を、Ｒ ⁷ 〜Ｒ ¹¹ は、それぞれ水素原子、水酸基または低
級アルコキシを示す。ただし、Ｒ ⁷ 〜Ｒ ¹¹ は同時に４個
または５個の水素原子を示すことはない。）を示す。た
だし、Ｒ¹ 〜Ｒ⁵は同時に水素原子を示すことはな
い。〕で表わされるグルコース誘導体を有効成分とする
ポリ（ＡＤＰ−リボース）グリコヒドロラーゼ阻害剤。

【００１０】本明細書において、Ａにおける低級アルコ
キシは、好適には炭素数１〜４であり、具体的にはメト
キシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキ
シ、イソブトキシ、sec-ブトキシ、tert- ブトキシ等が
例示されるが、特にメトキシが好ましい。

【００１１】当該Ａとしては、特にアルキレンまたはア
ルケニレンを介して、フェニルとカルボニルが結合した
ものおよびフェニルとカルボニルが直接結合したものが
好ましい。アルキレンとしては、メチレン、エチレン、
トリメチレン、テトラメチレン等の炭素数１〜４のもの
が例示されるが、特にメチレン、エチレンが好ましく、
アルケニレンとしては、炭素数１〜４のものが例示さ
れ、特にビニレンが好ましい。

【００１２】当該Ａの好ましい例は、一般式

【化５】 （式中、Ｚは直接結合、アルキレンまたはアルケニレン
を、Ｒ⁷ 〜Ｒ¹¹は、それぞれ水素原子、水酸基または低
級アルコキシを示す。ただし、Ｒ⁷ 〜Ｒ¹¹は同時に４個
または５個の水素原子を示すことはない。）で表わされ
る基である。

【００１３】当該Ａの特に好ましい具体例としては、ガ
ロイル、４−ヒドロキシ−３−メトキシベンゾイル、４
−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシベンゾイル、３，
４，５−トリメトキシベンゾイル、４−ヒドロキシ−３
−メトキシシンナモイル、４−ヒドロキシ−３，５−ジ
メトキシシンナモイル、３，４，５−トリメトキシシン
ナモイル、３，４，５−トリヒドロキシベンジルカルボ
ニル、３，４，５−トリヒドロキシフェネチルカルボニ
ル等が例示される。

【００１４】本発明の有効成分であるグルコース誘導体
（Ｉ）の製法としては、例えば、以下のような方法が挙
げられる。

【化６】 （上記式中、Ａは前記と同意義）上記反応は、通常のエ
ステル反応により行われる。

【００１５】出発原料である化合物（ｉ）および（ii）
はともに公知化合物であり、容易に入手することができ
る。なお、上記化合物（ｉ）はグルコースであり、化合
物（ii）はカルボン酸である。

【００１６】

【発明の作用・効果】本発明の有効成分であるグルコー
ス誘導体（Ｉ）は、後記実験例から明らかなように、ポ
リ（ＡＤＰ−リボース）グリコヒドロラーゼ阻害活性を
有するものであり、ポリ（ＡＤＰ−リボース）グリコヒ
ドロラーゼ阻害剤として悪性腫瘍の治療・予防に特に有
用である。その投与対象は、ヒトを含む哺乳動物（ヒ
ト、ウマ、イヌ、マウス、モルモット、ラット等）であ
る。

【００１７】本発明のポリ（ＡＤＰ−リボース）グリコ
ヒドロラーゼ阻害剤は、その有効成分であるグルコース
誘導体自体または製薬上許容されるキャリア等の製剤用
の添加剤との医薬製剤の形で、経口的、非経口的（経静
脈的、経直腸的等）に投与される。その剤型としては、
錠剤、カプセル剤、散剤、坐剤、直腸軟膏、注射剤等が
例示される。当該製剤は、自体既知の方法によって調製
される。

【００１８】本発明の有効成分であるグルコース誘導体
の投与量は、患者の年齢、体重および処置すべき病状の
重度や治療に対する反応により変わりうるが、例えば、
経口投与の場合、通常０．１〜１００mg／kg体重程度を
１日１回または数回にわたって投与する。

【００１９】

【実施例】以下に、本発明を詳細に説明するため実施例
を挙げるが、本発明はこれら実施例によって何ら限定さ
れるものではない。

【００２０】実施例１ １−Ｏ−ベンジル−Ｄ−グルコピラノース（化合物
１）の合成 ベンジルアルコール（１００ml）にＤ−グルコース（１
５．０ｇ）を加えて得られた懸濁液を０℃に冷却した
後、塩化水素ガスを３０分間吹き込んだ。得られた溶液
を２日間室温でかきまぜた後、エーテル（５００ml）を
加え上澄み液をデカンテーションした。この操作を３回
くりかえし、得られた油状物質をシリカゲルカラムクロ
マトグラフィー〔シリカゲル、溶媒；クロロホルム：メ
タノール＝８／１，５／１〕に付し、化合物１（１１．
７ｇ、５２％）を得た。

【００２１】 ３，４，５−トリベンジルオキシ安息
香酸（化合物２）の合成 窒素雰囲気下にジメチルホルムアミド（５０ml）、没食
子酸（１０ｇ）、無水炭酸カリウム（４４ｇ）および塩
化ベンジル（２７ml）を加えて得られた溶液を１４０℃
で一夜かきまぜた酢酸エチル（１リットル）で希釈し
た。酢酸エチル層を水、飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグ
ネシウムで乾燥させた。減圧下溶媒を留去後粗生成物を
得た。得られた粗生成物にエタノール（２００ml）およ
び１．６Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（５０ml）を加え、
加熱還流を２時間行った。反応後、エタノールを約半分
ほど留去し、得られた残査を０℃に冷却し、０．５Ｎの
塩酸で液をｐＨを２とした。その際、析出してきた固体
を濾取した後、乾燥し化合物２（１５．６ｇ、６４％）
を得た。

【００２２】 １─Ｏ−ベンジル−２，３，４，６−
テトラキス−（３，４，５−トリベンジルオキシ ベン
ゾイル) −Ｄ−グルコピラノース（化合物３）の合成 化合物２（７．０ｇ）、塩化チオニル（４０ml）そして
ジメチルホルムアミド（１ml）を氷冷下混合した。得ら
れた溶液を一夜加熱還流し、その後過剰の塩化チオニル
を常圧そして減圧下で留去し化合物２の酸塩化物を調製
した。窒素雰囲気下に化合物１（０．８３ｇ）をピリジ
ン（１０ml）に加えかきまぜておき、その溶液中に上記
手法で調製した化合物２の酸塩化物（化合物２を７．０
ｇ用いた場合の粗生成物）のピリジン（３０ml）溶液を
滴下した。その後室温で一夜かきまぜ、酢酸エチル
（０．６リットル）で希釈した。得られた懸濁液を濾過
し、酢酸エチル層を水、０．０５Ｎ塩酸、飽和炭酸水素
ナトリウム水および飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシ
ウムで乾燥させた。減圧下溶媒を留去後粗生成物を得
た。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラ
フィー〔シリカゲル、溶媒；酢酸エチル：ヘキサン＝１
／４、１／３、１／２〕に付し化合物３（２．８５ｇ、
４９％）を得た。

【００２３】 ¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃)δ：４．２〜
４．８（ｍ，３Ｈ），４．８〜５．１（ｍ，２４Ｈ），
５．１〜５．７（ｍ，３Ｈ），６．１〜６．３（ｍ，１
Ｈ），７．１〜７．５（ｍ，７２Ｈ）． ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）：１７１８，１５８０

【００２４】 ２，３，４，６−テトラキス−Ｏ−ガ
ロイル−Ｄ−グルコピラノース（化合物４）の合成 窒素雰囲気下に化合物３（２．８５ｇ）、酢酸エチル／
メタノール（３／１：１５０ml）およびパラジウム−ブ
ラック（３．０ｇ）を加えた後に水素置換を行い反応を
開始した。室温で１時間ほどかきまぜた後、パラジウム
−ブラックを濾去した。得られた濾液を濃縮し、シリカ
ゲルカラムクロマトグラフィー〔シリカゲル、溶媒；ヘ
キサン：テトラヒドロフラン：メタノール＝６０／３０
／１０、５０／３７．５／１２．５、４０／４５／１
５〕に付し化合物４（０．９４ｇ、８６％）を得た。

【００２５】 ¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆)δ：４．３
〜４．５（ｍ，２Ｈ），５．０〜５．２（ｍ，２Ｈ），
５．３〜５．５（ｍ，２Ｈ），５．８〜６．２（ｍ，１
Ｈ，Ｈ¹)，６．７〜７．１（ｍ，８Ｈ），９．１９（ｂ
ｒｓ，１２Ｈ）． ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）：３３００，１７００，１６１
０¹³ Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆)δ：６２．０，６６．
２，６７．０，６８．４，６９．４，８９．５，１０
４．２，１０８．８，１１６．２，１１６．３，１１
６．５，１１６．６，１１９．１，１３８．６，１３
８．７，１３９．０，１４２．８，１４３．０，１４
５．３，１４５．５，１４５．５，１６４．５，１６
４．７，１６５．０，１６５．２，１６５．５（α、β
混合物）．

【００２６】実施例２ １，２，３，４，６−ペンタ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ−
グルコピラノース（化合物５）の合成 タンニン酸（２５ｇ）、メタノール（２００ml）および
０．１Ｍ酢酸−酢酸ナトリウム（ｐＨ６．０）（２００
ml）を加え、３７℃の恒温槽で７日間ときどきかきまぜ
ながら反応を行った。反応後、溶液量が約半分になるま
で濃縮し、得られた濃縮液を酢酸エチルで抽出した。得
られた抽出液を水、飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシ
ウムで乾燥した。溶媒を留去後粗生成物（約２０ｇ）を
得た。得られた粗生成物（１０ｇ）についてシリカゲル
カラムクロマトグラフィー〔シリカゲル、溶媒；ヘキサ
ン：テトラヒドロフラン：メタノール＝６／３／１、５
０／３７．５／１２．５、４／４．５／１．５〕に付し
化合物５（１．３９ｇ）を得た。

【００２７】 ¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆)δ：４．３
（ｂｒｓ），４．５〜４．６（ｍ），５．９４（ｄ，
ｄ，Ｊ＝９．７），６．３５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１
Ｈ），６．７７（ｓ，２Ｈ），６．８２（ｓ，２Ｈ），
６．８５（ｓ，２Ｈ），６．９２（ｓ，２Ｈ），６．９
８（ｓ，２Ｈ），９．１１（ｂｒｓ，１５Ｈ）． ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）：３３５０，１７００，１６１
０¹³ Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆)δ：６１．３，６７．
６，７０．５，７１．９，７２．２，９１．７，１０
８．８，１１７．４，１１８．０，１１８．１，１１
８．９，１３８．６，１３８．８，１３９．０，１３
９．５，１４５．３，１４５．３，１４５．４，１４
５．６，１６３．９，１６４．４，１６４．６，１６
４．８，１６５．４．

【００２８】実施例３〜５ 実施例１に準じて以下の３種の化合物を合成した。 実施例３ １，２，３，４，６−ペンタ−Ｏ−（３，５−ジメトキ
シ−４−ヒドロキシシンナモイル）−Ｄ−グルコピラノ
ース ¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃/Ｄ₂ Ｏ）δ：３．７８〜４．
０１（ｍ，３０Ｈ），４．２７〜６．９０（ｍ，７
Ｈ），６．１３〜６．５５（ｍ，５Ｈ），６．６０〜
６．９０（ｍ，１０Ｈ），７．４６〜７．８０（ｍ，５
Ｈ） ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）：２９５０，２８５０，１７１
０，１６３０，１６００，１５１０，１４６０，１２８
０，１２２０

【００２９】実施例４ １，２，３，４，６−ペンタ−Ｏ−（３，４，５−トリ
メトキシベンゾイル）−Ｄ−グルコピラノース ¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃)δ：３．８〜４．１（ｍ，４
５Ｈ），４．３〜４．９（ｍ，３Ｈ），５．５７（ｄ
ｄ，０．４Ｈ），５．７〜５．９（ｍ，１．６Ｈ），
５．９〜６．２（ｍ，０．６Ｈ），６．２〜６．４
（ｍ，１Ｈ），６．８１（ｄ，０．４Ｈ），７．１〜
７．５（ｍ，１０Ｈ） ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）：１７２０，１５８０，１３３
０，１２１０，１１２５ｍｐ．８５〜９０℃

【００３０】実施例５ １，２，３，４，６−ペンタ−Ｏ−（３，４，５−トリ
メトキシシンナモイル）−Ｄ−グルコース ¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃)δ：３．６０〜４．０５
（ｍ，４５Ｈ），４．３０〜６．９７（ｍ，７Ｈ），
６．１９〜６．５５（ｍ，５Ｈ），６．６０〜６．９７
（１０Ｈ） ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^-1）：２９３０，１７２０，１６３
０，１５８０，１５００，１２７０，１２４０，１１３
０

【００３１】実験例１ ポリ（ＡＤＰ−リボース）グリ
コヒドロラーゼ阻害作用 アッセイ用バッファー（０．０１％ウシ血清アルブミン
−１０ｍＭメルカプトエタノール−５０ｍＭカリウム・
リン酸、ｐＨ７．０）に、 ³Ｈ−（ＡＤＰ−リボース）
_n=15を加え、その２７μｌに被験物質およびヒト胎盤よ
り調製した核由来、ポリ（ＡＤＰ−リボース）グリコヒ
ドロラーゼ溶液を加えて全量３０μｌとした後、３７℃
にて１時間インキュベーションした。その後、ＤＥ８１
濾紙に反応液を吸収させ、水、エタノール、アセトンで
濾紙を洗浄した後、それを乾燥させ、液体シンチレーシ
ョンカウンターにて、未反応基質 ³Ｈ−（ＡＤＰ−リボ
ース）を測定し、本酵素に対する試験物質の阻害作用を
検討した。その結果、化合物４のＩＣ₅₀値は２２μｇ／
ml、化合物５では７μｇ／mlであった。

【００３２】 製剤例１：錠剤 本発明化合物 １０ｇ 直打用微粒No. ２０９（富士化学社製） １１０ｇ メタケイ酸アルミン酸マグネシウム ２０％ トウモロコシデンプン ３０％ 乳糖 ５０％ 結晶セルロース ６０ｇ ＣＭＣカルシウム １８ｇ ステアリン酸マグネシウム ２ｇ

【００３３】、およびはいずれも予め１００メッ
シュの篩に通す。この、、とをそれぞれ乾燥し
て一定含水率にまで下げた後、上記の重量割合で混合機
を用いて混合する。全質均等にした混合末にを添加し
て短時間（３０秒間）混合し、混合末を打錠して、１錠
２００mgの錠剤とした。

【００３４】この錠剤は必要に応じて通常用いられる胃
溶性フィルムコーティング剤（例えば、ポリビニルアセ
タールジエチルアミノアセテート）や食用性着色剤でコ
ーティングしてもよい。

【００３５】 製剤例２：カプセル剤 本発明化合物 ５０ｇ 乳糖 ９３０ｇ ステアリン酸マグネシウム ２０ｇ

【００３６】上記成分をそれぞれ秤量した後均一に混合
し、混合粉体をハードゼラチンカプセルに２００mgずつ
充填した。

【００３７】製剤例３：注射剤 本発明化合物 ５mg ブドウ糖 １００mg 生理食塩水 １０ml

【００３８】上記の混合液をメンブランフィルターで濾
過後、再び除菌濾過を行い、その濾過液を無菌的にバイ
アルに分注し、窒素ガスを充填した後、密封して静脈内
注射剤とした。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ Ｃ１２Ｎ 9/99 Ｃ１２Ｎ 9/99 (56)参考文献 Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．, Ｖｏｌ．35，Ｎｏ．２（1987）ｐ．814 −822 (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) A61K 31/7024 C07H 13/02 - 13/08 ＣＡ（ＳＴＮ) ＣＡＯＬＤ（ＳＴＮ) ＣＡＰＬＵＳ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)

Claims (1)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 一般式（Ｉ） 【化１】 〔式中、Ｒ¹〜Ｒ⁵はそれぞれ水素原子またはＡ 【化２】 （式中、Ｚは直接結合、アルキレンまたはアルケニレン
   を、Ｒ⁷〜Ｒ¹¹は、それぞれ水素原子、水酸基または低
   級アルコキシを示す。ただし、Ｒ⁷〜Ｒ¹¹は同時に４個
   または５個の水素原子を示すことはない。）を示す。た
   だし、Ｒ¹〜Ｒ⁵は同時に水素原子または同時にガロイル
   基を示すことはなく、ならびに、Ｒ ¹ 、Ｒ ² およびＲ ⁵ が
   同時にガロイル基を示す場合、Ｒ ³ が水素原子またはガ
   ロイル基を示し、Ｒ ⁴ が水素原子を示すことはない。〕
   で表わされるグルコース誘導体を有効成分とするポリ
   （ＡＤＰ−リボース）グリコヒドロラーゼ阻害剤。