JP3145406B2 - 液体試料中の生物学的材料の定量化装置および方法 - Google Patents
液体試料中の生物学的材料の定量化装置および方法Info
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- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
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- C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
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Description
【発明の詳細な説明】 発明の分野 本発明は、液体試料中の生物学的材料の定量化方法、
および定量化中に液体試料を保持するための物品に関す
る。
および定量化中に液体試料を保持するための物品に関す
る。
発明の背景 液体試料中の生物学的材料の濃度および水準の検出お
よび定量化には、多くの勤勉が必要である。例えば、水
中のバクテリアの濃度の定量は、水質検査の本質的な部
分である。EPA調整は、飲料水中に、いかなる大腸菌ま
たはエシェリヒア菌も存在しないことを必要とする。エ
シェリヒア菌および大腸菌型バクテリアの試験媒体とし
て用いられるコリラートまたはコリラート−18化学混同
物（イデックス研究所、ME）のような化学混同物の“存
在／不存在”形式は、この定量化には大変有用である。
コリラート化学混同物は、米国特許No.4,925,789のエド
ベルグの“多分汚染されているであろう材料の標本試料
中の目的微生物のその場検出に用いるための方法および
媒体”に記載された明瞭に記載された基板技術に基づ
く。
よび定量化には、多くの勤勉が必要である。例えば、水
中のバクテリアの濃度の定量は、水質検査の本質的な部
分である。EPA調整は、飲料水中に、いかなる大腸菌ま
たはエシェリヒア菌も存在しないことを必要とする。エ
シェリヒア菌および大腸菌型バクテリアの試験媒体とし
て用いられるコリラートまたはコリラート−18化学混同
物（イデックス研究所、ME）のような化学混同物の“存
在／不存在”形式は、この定量化には大変有用である。
コリラート化学混同物は、米国特許No.4,925,789のエド
ベルグの“多分汚染されているであろう材料の標本試料
中の目的微生物のその場検出に用いるための方法および
媒体”に記載された明瞭に記載された基板技術に基づ
く。
しかしながら、検出ではなく、バクテリア濃度の定量
が重要な領域もある。例えば、汚水、水浄化装置に入っ
てくる水、地表水の領域である。
が重要な領域もある。例えば、汚水、水浄化装置に入っ
てくる水、地表水の領域である。
生物学的材料の定量の古典的な方法は、膜ろ過および
最確数法（most probable number method）である。
最確数法（most probable number method）である。
膜ろ過では、必要な体積の試料が、バクテリアを特定
しないで捕獲する大変小さい穴のサイズのろ紙を通っ
て、ろ過される。それから、膜は、目的のバクテリアの
成長を支持する媒体上に置かれる。その媒体は、特定の
温度で、特定濃度時間培養され、結果のコロニーが数え
られる。膜ろ過の欠点は、（例えば、汚水試料のよう
に）バクテリア以外の粒子を含む試料が、膜をつまら
せ、使用できなくすることである。他の欠点は、膜が目
的以外のバクテリアを捕獲することである。
しないで捕獲する大変小さい穴のサイズのろ紙を通っ
て、ろ過される。それから、膜は、目的のバクテリアの
成長を支持する媒体上に置かれる。その媒体は、特定の
温度で、特定濃度時間培養され、結果のコロニーが数え
られる。膜ろ過の欠点は、（例えば、汚水試料のよう
に）バクテリア以外の粒子を含む試料が、膜をつまら
せ、使用できなくすることである。他の欠点は、膜が目
的以外のバクテリアを捕獲することである。
最確数法は、レクレスらの“食物の微生物学的実験方
法概論”（第３版、1992年）の105−199頁の“最確数技
術”や、グリーンベルグらの“水および汚水の実験の標
準的方法”（第８版、1992年）に述べられている。この
方法は、水の試料が、多くの管（例えば、10×10、10の
管がそれぞれ10mlを含む）に分配され、各管の中のバク
テリアは成長することを許容される。一定の温度で、一
定の時間培養された後、陽性の管の数が数えられる。最
確数は、以下の式で定義される。： MPN/100ml＝（Ｐ×100）/NTの平方根 ここで、Ｐは陽性の管の数、Ｎは陰性の管の試料のml、
Ｔは全管の試料のml、MPNは最確数である。本方法の最
大の欠点は、ほんの少しの管が用いられた場合、95％信
頼限界の領域が大きいということである。このような信
頼限界は、おおざっぱには、次のように計算される。： Log（MPN）±1.96・（0.58/nの平方根） ここで、ｎは試験の回数である。
法概論”（第３版、1992年）の105−199頁の“最確数技
術”や、グリーンベルグらの“水および汚水の実験の標
準的方法”（第８版、1992年）に述べられている。この
方法は、水の試料が、多くの管（例えば、10×10、10の
管がそれぞれ10mlを含む）に分配され、各管の中のバク
テリアは成長することを許容される。一定の温度で、一
定の時間培養された後、陽性の管の数が数えられる。最
確数は、以下の式で定義される。： MPN/100ml＝（Ｐ×100）/NTの平方根 ここで、Ｐは陽性の管の数、Ｎは陰性の管の試料のml、
Ｔは全管の試料のml、MPNは最確数である。本方法の最
大の欠点は、ほんの少しの管が用いられた場合、95％信
頼限界の領域が大きいということである。このような信
頼限界は、おおざっぱには、次のように計算される。： Log（MPN）±1.96・（0.58/nの平方根） ここで、ｎは試験の回数である。
発明の概要 本発明は、液体試料中のバクテリアの数をより正確に
定量するための方法、または、試料中の他のタイプの区
分された、特別の生物学的材料を定量するための方法で
ある。そのような生物学的材料は、酵素のようなたん白
質の集合体、または当業者に良く知られた混合物の反応
を用いた補足因子と同様に、菌や他の生きている有機体
を含んでも良い。本発明は、一般に、化学的および／ま
たは微生物学的反応体がその中で供給される液体試料を
保持するために設計された新しい物品を使用する。例え
ば、そのような化学的反応体は、コリラートやコリラー
ト−18のようなバクテリアのための特定の生物学的検出
媒体でも良く、またはエンテロラート化学混合物のよう
な腸球菌のための特定の生物学的検出媒体でも良い。用
いられる装置は、一般に、修正されたバッグの形状であ
る。バッグは、試験される液体試料を受け入れ、その内
部の容積を通して試料が分配され、バッグ内の分割され
た区画に（多くの手段のいずれか１つにより）分けられ
ことが許容されるように設計される。一般に、そのよう
な区画は、分割された化学反応が、使用される液体の複
数のアリコート中で起こることを許容するであろう。そ
のような区画は、また、１つの液体のアリコートが、他
の臨設したアリコートの反応に影響することを防ぐ。簡
単な具体例では、本発明は、液体試料が導入され、元の
液体試料のアリコートを夫々含む小さなバッグを形成す
るために、バッグの２つの対向した表面の簡単な加熱封
止により、液体試料が分割されるように、プラスティッ
クバッグを特徴とする。
定量するための方法、または、試料中の他のタイプの区
分された、特別の生物学的材料を定量するための方法で
ある。そのような生物学的材料は、酵素のようなたん白
質の集合体、または当業者に良く知られた混合物の反応
を用いた補足因子と同様に、菌や他の生きている有機体
を含んでも良い。本発明は、一般に、化学的および／ま
たは微生物学的反応体がその中で供給される液体試料を
保持するために設計された新しい物品を使用する。例え
ば、そのような化学的反応体は、コリラートやコリラー
ト−18のようなバクテリアのための特定の生物学的検出
媒体でも良く、またはエンテロラート化学混合物のよう
な腸球菌のための特定の生物学的検出媒体でも良い。用
いられる装置は、一般に、修正されたバッグの形状であ
る。バッグは、試験される液体試料を受け入れ、その内
部の容積を通して試料が分配され、バッグ内の分割され
た区画に（多くの手段のいずれか１つにより）分けられ
ことが許容されるように設計される。一般に、そのよう
な区画は、分割された化学反応が、使用される液体の複
数のアリコート中で起こることを許容するであろう。そ
のような区画は、また、１つの液体のアリコートが、他
の臨設したアリコートの反応に影響することを防ぐ。簡
単な具体例では、本発明は、液体試料が導入され、元の
液体試料のアリコートを夫々含む小さなバッグを形成す
るために、バッグの２つの対向した表面の簡単な加熱封
止により、液体試料が分割されるように、プラスティッ
クバッグを特徴とする。
このように、第１の見地では、本発明は、液体試料中
の生物学的材料の定量のための液体試料を保持するため
に改造された物品が特徴である。その物品は、その間に
容積を有する上面シートと下面シートを有するバッグを
含む。バッグは、バッグ内部の容積に、そこを通って液
体試料を入れることができる、上面の入口を有する。バ
ッグは、また、その中に、液体試料の１またはそれ以上
の部分を分離するために形成された複数の仕切を有す
る。また、液体試料を、バッグの中の容積に分配するこ
とができる通路も提供される。バッグは、液体試料の分
割されたアリコートを保持するための、区分された非透
過性の区画を形成することができるための材料から形成
される。バッグはいくらか特別な形状を有している一
方、バッグは、一般に、バッグのより狭い端部で上面開
口部を有する四角形で、液体を内部の容積にたやすく入
れることを許容するのに十分なサイズに形成されること
が好ましい。上面シートおよび下面シートは、バッグの
内部の簡単な対向した表面であり、以下に述べるように
改造されている。
の生物学的材料の定量のための液体試料を保持するため
に改造された物品が特徴である。その物品は、その間に
容積を有する上面シートと下面シートを有するバッグを
含む。バッグは、バッグ内部の容積に、そこを通って液
体試料を入れることができる、上面の入口を有する。バ
ッグは、また、その中に、液体試料の１またはそれ以上
の部分を分離するために形成された複数の仕切を有す
る。また、液体試料を、バッグの中の容積に分配するこ
とができる通路も提供される。バッグは、液体試料の分
割されたアリコートを保持するための、区分された非透
過性の区画を形成することができるための材料から形成
される。バッグはいくらか特別な形状を有している一
方、バッグは、一般に、バッグのより狭い端部で上面開
口部を有する四角形で、液体を内部の容積にたやすく入
れることを許容するのに十分なサイズに形成されること
が好ましい。上面シートおよび下面シートは、バッグの
内部の簡単な対向した表面であり、以下に述べるように
改造されている。
“仕切”により、試料が、１またはそれ以上の部分に
分割されるように、物品が形成される。そのような仕切
の例を以下で述べる。仕切られた液体は、バッグの他の
部分の液体の部分と通じないことは言うまでもない。
分割されるように、物品が形成される。そのような仕切
の例を以下で述べる。仕切られた液体は、バッグの他の
部分の液体の部分と通じないことは言うまでもない。
“通路”がバッグ内に供給されることにより、液体試
料のバッグ中および仕切りの回りへのたやすい分配が許
容される。そのような通路の例を以下で提供し、その用
語は通常の意味に用いられる。
料のバッグ中および仕切りの回りへのたやすい分配が許
容される。そのような通路の例を以下で提供し、その用
語は通常の意味に用いられる。
“個々に”により、バッグ内に形成された区画は、隣接
した区画中の反応に重要な影響を与えることなく、それ
らの区画内で、分離した化学反応が起きることを許容す
る。
した区画中の反応に重要な影響を与えることなく、それ
らの区画内で、分離した化学反応が起きることを許容す
る。
“重要でない効果”より通常の使用で、バッグ内の区
画間のいくらかの流通にもかかわらず、陽性の試料を、
陰性の試料からたやすく区別することができる。
画間のいくらかの流通にもかかわらず、陽性の試料を、
陰性の試料からたやすく区別することができる。
“液体試料”により、試料は（水のように）自然の状
態で液体である試料、または（食物粉のように）液体化
された試料を含む。
態で液体である試料、または（食物粉のように）液体化
された試料を含む。
好ましい具体例では、上述のように、バッグは、一般
には、バッグの１の狭い辺に沿った上部入口と、それら
の辺を通って液体が通過することを防ぐためにシールさ
れた残りの３つの辺を有する四角形である。即ち、物品
は、液体試料を保持するのに十分な方法で形成され、一
方、使用中に物品に区分された区画が形成される。１の
具体例では、バッグの下面シートは、試料を保持するた
めの複数の空所を形成するために仕切られている。下面
および上面シートは、合わされて、仕切りのラインに沿
ってヒートシールされ、例えば、区画の数が約40から6
0、好ましくは約50で、区画は基本的には同じサイズ
で、おおよそ0.1から2mlのアリコートを保持するよう
に、液体試料を保持するための複数の区画が形成され、
バッグは、ポリ塩化ビニル（ポリビニルクロライド）の
ような適当な材料から形成される。
には、バッグの１の狭い辺に沿った上部入口と、それら
の辺を通って液体が通過することを防ぐためにシールさ
れた残りの３つの辺を有する四角形である。即ち、物品
は、液体試料を保持するのに十分な方法で形成され、一
方、使用中に物品に区分された区画が形成される。１の
具体例では、バッグの下面シートは、試料を保持するた
めの複数の空所を形成するために仕切られている。下面
および上面シートは、合わされて、仕切りのラインに沿
ってヒートシールされ、例えば、区画の数が約40から6
0、好ましくは約50で、区画は基本的には同じサイズ
で、おおよそ0.1から2mlのアリコートを保持するよう
に、液体試料を保持するための複数の区画が形成され、
バッグは、ポリ塩化ビニル（ポリビニルクロライド）の
ような適当な材料から形成される。
他の好ましい具体例では、複数の仕切りは、互いに平
行に、入口からバッグの末端の方向に並ぶ。仕切は、液
体試料がそこを通ってあふれることができ、仕切りの間
への液体試料の分配を容易にするために入口と仕切の間
に通路が存在するような長さに、複数の通路を形成す
る。更に、通路は、仕切の間の液体の分配を容易にする
ために、仕切とバッグの末端の間に供給されてもよい。
また、バッグは、ポリエチレン・テレフタレート（PE
T）のようなMYLAR型プラスティックとともにポリエチレ
ンの同時押出でも形成される。
行に、入口からバッグの末端の方向に並ぶ。仕切は、液
体試料がそこを通ってあふれることができ、仕切りの間
への液体試料の分配を容易にするために入口と仕切の間
に通路が存在するような長さに、複数の通路を形成す
る。更に、通路は、仕切の間の液体の分配を容易にする
ために、仕切とバッグの末端の間に供給されてもよい。
また、バッグは、ポリエチレン・テレフタレート（PE
T）のようなMYLAR型プラスティックとともにポリエチレ
ンの同時押出でも形成される。
他の好ましい具体例では、第１の複数の区画は１のサ
イズ（例えば2ml）、第２の複数のおよび／または第３
の複数の区画は、例えば、第１のサイズより小さい（例
えば、0.02および0.2ml）、異なったサイズで供給され
る。仕切は、（以下に示すように）、上面および下面シ
ートの一方、または双方に空所として形成される。これ
らの具体例は、試料中で定量される生物学的材料の濃度
が高い時に用いる特別な仕様である。区画の様々なサイ
ズは、試料の希釈工程を削除し、それゆえに時間と希釈
中に起こりうる誤差を少なくし、検出範囲を広くする。
イズ（例えば2ml）、第２の複数のおよび／または第３
の複数の区画は、例えば、第１のサイズより小さい（例
えば、0.02および0.2ml）、異なったサイズで供給され
る。仕切は、（以下に示すように）、上面および下面シ
ートの一方、または双方に空所として形成される。これ
らの具体例は、試料中で定量される生物学的材料の濃度
が高い時に用いる特別な仕様である。区画の様々なサイ
ズは、試料の希釈工程を削除し、それゆえに時間と希釈
中に起こりうる誤差を少なくし、検出範囲を広くする。
関連した見地から、本発明は、液体試料中の生物学的
材料の定量に用いるためのキットとして特徴がある。こ
のキットは、上述の物品およびコリラートやコリラート
−18化学混合物のような特定の生物学的検出媒体を含
む。加えて、関連した見地から、本発明は、バッグが液
体試料を保持するためにシールされた後の、および上述
のように、バッグの中の区画が区分された、交流のない
区画に形成された後の液体試料を含む上述の物品として
も特徴がある。
材料の定量に用いるためのキットとして特徴がある。こ
のキットは、上述の物品およびコリラートやコリラート
−18化学混合物のような特定の生物学的検出媒体を含
む。加えて、関連した見地から、本発明は、バッグが液
体試料を保持するためにシールされた後の、および上述
のように、バッグの中の区画が区分された、交流のない
区画に形成された後の液体試料を含む上述の物品として
も特徴がある。
更に、関連した見地から、本発明は、液体試料中の生
物学的材料の定量方法としても特徴がある。この方法
は、上述のような物品を供給する工程、およびバッグ内
に配置されている液体試料に試験媒体を加える工程を含
む。この方法は、更に、バッグ中の試料を分配し、バッ
グの複数の区分された非透過性の区画を形成し、これに
より、区画中に分離された複数のアリコート中で、試験
媒体と試料の混合が確実に行なわれる。この方法は、最
後に、例えば以下に述べるような、標準的手段の数のい
ずれかにより、各区画中の生物学的材料の存在または不
存在の検出を含む。
物学的材料の定量方法としても特徴がある。この方法
は、上述のような物品を供給する工程、およびバッグ内
に配置されている液体試料に試験媒体を加える工程を含
む。この方法は、更に、バッグ中の試料を分配し、バッ
グの複数の区分された非透過性の区画を形成し、これに
より、区画中に分離された複数のアリコート中で、試験
媒体と試料の混合が確実に行なわれる。この方法は、最
後に、例えば以下に述べるような、標準的手段の数のい
ずれかにより、各区画中の生物学的材料の存在または不
存在の検出を含む。
好ましい具体例では、定量される生物学的材料はエシ
ェリヒアおよび大腸菌型バクテリアであり、試験媒体
は、コリラートやコリラート−18化学混合物のような特
定の生物学的検出媒体である。区画を形成する方法は、
液体試料、試験媒体，上で検討したような幾つかの得ら
れる反応物のための非透過性の区画の間のシールにより
区画の形成するための、バッグのヒートシールを含む。
ヒートシールは、温度が約250−350度Ｆのヒートシール
装置を用いて、約５秒間、バッグに熱を供給することを
含む。他の好ましい具体例では、上記方法は、バクテリ
アの成長、または液体試料および試験媒体中のいずれか
の化学存在物の反応を許容するために、所望の温度、所
望の時間、バッグを培養することを含む。
ェリヒアおよび大腸菌型バクテリアであり、試験媒体
は、コリラートやコリラート−18化学混合物のような特
定の生物学的検出媒体である。区画を形成する方法は、
液体試料、試験媒体，上で検討したような幾つかの得ら
れる反応物のための非透過性の区画の間のシールにより
区画の形成するための、バッグのヒートシールを含む。
ヒートシールは、温度が約250−350度Ｆのヒートシール
装置を用いて、約５秒間、バッグに熱を供給することを
含む。他の好ましい具体例では、上記方法は、バクテリ
アの成長、または液体試料および試験媒体中のいずれか
の化学存在物の反応を許容するために、所望の温度、所
望の時間、バッグを培養することを含む。
当業者は、この発明の新しい物品、およびその使用方
法は、本質的に、上で述べた構成要素からなる。これら
の用語は、通常の意味に用いられ、即ち、物品は単に構
成要素と名付けられたものからなり、または物品の有用
性に重要な影響を与えない他の構成要素を本質的に含ん
でも良く、本発明のより洗練された見地で、有用かどう
か特別に記載されていない他の構成要素を含んでもよ
い。
法は、本質的に、上で述べた構成要素からなる。これら
の用語は、通常の意味に用いられ、即ち、物品は単に構
成要素と名付けられたものからなり、または物品の有用
性に重要な影響を与えない他の構成要素を本質的に含ん
でも良く、本発明のより洗練された見地で、有用かどう
か特別に記載されていない他の構成要素を含んでもよ
い。
このように、本発明は、液体試料中の生物学的材料の
定量のための新しい方法である。この方法は、伝統的方
法である膜ろ過および最確数法より、より信頼でき、よ
り速い結果を供給する。本方法は、一般に、以下の工程
を含む。：試料への試験媒体の添加工程。試料を保持
し、多くのサブサンプルへの迅速な分配を許容するため
に設計された物品への、試料の移動工程。試料を、物品
の複数の区分された非透過性の区画に十分均等に分ける
分配工程。区画中での試料媒体および試料の混合を確実
にするための区画のシール工程。物品の培養工程。結果
の記録および解析工程。
定量のための新しい方法である。この方法は、伝統的方
法である膜ろ過および最確数法より、より信頼でき、よ
り速い結果を供給する。本方法は、一般に、以下の工程
を含む。：試料への試験媒体の添加工程。試料を保持
し、多くのサブサンプルへの迅速な分配を許容するため
に設計された物品への、試料の移動工程。試料を、物品
の複数の区分された非透過性の区画に十分均等に分ける
分配工程。区画中での試料媒体および試料の混合を確実
にするための区画のシール工程。物品の培養工程。結果
の記録および解析工程。
本発明は、定量方法中に試料を保持するための新しい
物品をも特徴とする。物品は、一般的に、そこを通っ
て、液体試料を物品に流し込むことができる入口と、液
体試料を分離するように形成され構成された複数の仕切
と、液体試料が物品を通って基本的に均等に分配される
ことを許容する通路とを本質的に含む。物品は、仕切ら
れ、シールされることができる材料から形成され、液体
試料は、区分された非透過性の区画に分離され閉じ込め
られる。
物品をも特徴とする。物品は、一般的に、そこを通っ
て、液体試料を物品に流し込むことができる入口と、液
体試料を分離するように形成され構成された複数の仕切
と、液体試料が物品を通って基本的に均等に分配される
ことを許容する通路とを本質的に含む。物品は、仕切ら
れ、シールされることができる材料から形成され、液体
試料は、区分された非透過性の区画に分離され閉じ込め
られる。
物品およびその使用は、複数の区画の存在に依存し、
それらはシールされて、本質的には、試料や用いられる
試験媒体に対して、および得られる反応生成物に対して
非透過性である。区画の数は変化させることができる
が、要求された正確さを伴った解析のためのいずれか１
つの試験で十分であろう。好ましい具体例では、試料が
入れられる前にバッグ内に空所を形成することによっ
て、あるいは試料が入れられた後で、予め存在する仕切
を区画に分割することによって、複数の区画が形成され
る。この区画の形成を成し遂げるための他の手段として
は、その中に試料バッグが配置された堅いわくを供給
し、複数の交線でわくからの圧力により試料の分割に影
響するようにわくを閉じるような手段でも可能である。
そのようなわくは試料の結果が読まれるまで残され、そ
の後の除去され、他の試料とともに用いられる。
それらはシールされて、本質的には、試料や用いられる
試験媒体に対して、および得られる反応生成物に対して
非透過性である。区画の数は変化させることができる
が、要求された正確さを伴った解析のためのいずれか１
つの試験で十分であろう。好ましい具体例では、試料が
入れられる前にバッグ内に空所を形成することによっ
て、あるいは試料が入れられた後で、予め存在する仕切
を区画に分割することによって、複数の区画が形成され
る。この区画の形成を成し遂げるための他の手段として
は、その中に試料バッグが配置された堅いわくを供給
し、複数の交線でわくからの圧力により試料の分割に影
響するようにわくを閉じるような手段でも可能である。
そのようなわくは試料の結果が読まれるまで残され、そ
の後の除去され、他の試料とともに用いられる。
本発明のそれらの見地から、本発明は、いくつかの個
別的に分配された生物学的材料、例えばバクテリア、寄
生虫、酵母、ウイルスまたは試料中に一定のレベルで存
在するたん白質にも応用され、検出することができる材
料の１または複数の単位を提供する。試験媒体の選択
は、検出される生物学的材料に依存する。試験媒体は、
定量するために求められる生物学的材料の存在を検出
し、媒体中にありそうな他の生物学的材料の存在を検出
しないことが好ましい。また、検出すべき生物学的材料
が試料中に存在した場合、色の変化または蛍光のような
いくらかの視覚的または他の感覚的変化を引き起こす材
料でなければならない。
別的に分配された生物学的材料、例えばバクテリア、寄
生虫、酵母、ウイルスまたは試料中に一定のレベルで存
在するたん白質にも応用され、検出することができる材
料の１または複数の単位を提供する。試験媒体の選択
は、検出される生物学的材料に依存する。試験媒体は、
定量するために求められる生物学的材料の存在を検出
し、媒体中にありそうな他の生物学的材料の存在を検出
しないことが好ましい。また、検出すべき生物学的材料
が試料中に存在した場合、色の変化または蛍光のような
いくらかの視覚的または他の感覚的変化を引き起こす材
料でなければならない。
上述のように、本発明に用いられるバッグは、ポリエ
チレン、ポリエチレン・テレフタレート（PET）のよう
なMYLAR−型プラスティックとして供給されるのよう
な、非透過性の区画に形成できる材料から作られる。選
択された材料は、基板または化学的変化の生成物に応じ
て変化する。例えば、コリラート製品では、特定のバク
テリアの存在が、オルソニトロフェニール（ONP）の生
成により表示され、この生成物の重要な量は、ヒートシ
ール後はバッグの材料を通りぬけることができない。も
し、この反応がガスを生成する場合、ガスの存在の検出
が望まれる以外は、材料はガス透過性であり、液体不透
過性であることが好ましい。
チレン、ポリエチレン・テレフタレート（PET）のよう
なMYLAR−型プラスティックとして供給されるのよう
な、非透過性の区画に形成できる材料から作られる。選
択された材料は、基板または化学的変化の生成物に応じ
て変化する。例えば、コリラート製品では、特定のバク
テリアの存在が、オルソニトロフェニール（ONP）の生
成により表示され、この生成物の重要な量は、ヒートシ
ール後はバッグの材料を通りぬけることができない。も
し、この反応がガスを生成する場合、ガスの存在の検出
が望まれる以外は、材料はガス透過性であり、液体不透
過性であることが好ましい。
本発明は、また、上で検討した50−100の袋または管
に試料を分配するために、水平にバッグをシールするた
めに設計された新しいヒートシール装置であることを特
徴とする。それを行うために、シール部分は、互いにむ
しろ平行な角度に供給され、空気はバッグの中には捕獲
されず、排気される。ヒートシール機は、本質的に、ト
ースタであり、試料を伴ったバッグは、一片のパンをト
ースタに入れるように、ヒートシール機中に配置され
る。このように、０度より大きく約45度より小さい角度
で、歯の長手方向にそってヒートシール歯が互いに接す
る従来のヒートシール機とは違い、一般に、その角度は
シールが進行する間、１度から15度の間であり、本質的
に、２つの歯は互いに平行に配置される。
に試料を分配するために、水平にバッグをシールするた
めに設計された新しいヒートシール装置であることを特
徴とする。それを行うために、シール部分は、互いにむ
しろ平行な角度に供給され、空気はバッグの中には捕獲
されず、排気される。ヒートシール機は、本質的に、ト
ースタであり、試料を伴ったバッグは、一片のパンをト
ースタに入れるように、ヒートシール機中に配置され
る。このように、０度より大きく約45度より小さい角度
で、歯の長手方向にそってヒートシール歯が互いに接す
る従来のヒートシール機とは違い、一般に、その角度は
シールが進行する間、１度から15度の間であり、本質的
に、２つの歯は互いに平行に配置される。
他のヒートシール装置の具体例では、装置は物品をシ
ールするための加熱されたローラ状のシール機である。
物品は、物品の仕切の各列に、約320−370度Ｆで、おお
よそ１−２秒間熱を供給するための固定されたローラに
対して動く、皿に乗せられる。
ールするための加熱されたローラ状のシール機である。
物品は、物品の仕切の各列に、約320−370度Ｆで、おお
よそ１−２秒間熱を供給するための固定されたローラに
対して動く、皿に乗せられる。
他の具体例では、ヒートシール機械が複数のヒートシ
ールエレメントとともに提供され、ヒートシールと本発
明の物品の試料の仕切りが同時に達成できる。
ールエレメントとともに提供され、ヒートシールと本発
明の物品の試料の仕切りが同時に達成できる。
異なったサイズの区画が提供される上述の具体例で
は、そのようなバッグが、１つのサイズの区画のみを有
するバッグより重要な利点を有することは、当業者にと
っては明らかである。それらのバッグでは、試料の希釈
なしに、更に正確な定量が許容される。このように、そ
のようなバッグの利点は、希釈工程が削除でき（これに
よって、時間と希釈による誤差の可能性が低減され）、
また分析を行うのに必要な材料も少なくできることであ
る。
は、そのようなバッグが、１つのサイズの区画のみを有
するバッグより重要な利点を有することは、当業者にと
っては明らかである。それらのバッグでは、試料の希釈
なしに、更に正確な定量が許容される。このように、そ
のようなバッグの利点は、希釈工程が削除でき（これに
よって、時間と希釈による誤差の可能性が低減され）、
また分析を行うのに必要な材料も少なくできることであ
る。
本発明は、例えば、食物中のバクテリアの定量のよう
な他の分野への応用も有する。食物中のバクテリアの存
在を特定するための現在の方法は、食物およびバッファ
が加えられるプラスティックバッグが用いられる。バッ
グはバクテリアの解放が行なわれる装置に配置される。
本方法の他の仕様では、例えば、ストマッカフィルタの
ような、裏に配置されたフィルタを伴ったバッグが用い
られる。食物は、裏の内部に配置され、バクテリアが、
外部のバッグの中に解放される。このバッグは上述のよ
うに仕切られ、区画化されている。代わりに、工程の後
に、材料の所望の量がストマッカバッグの外部に取り出
され、ここで述べた物品の具体例の１つの中に配置さ
れ、ここで述べたように試験される。
な他の分野への応用も有する。食物中のバクテリアの存
在を特定するための現在の方法は、食物およびバッファ
が加えられるプラスティックバッグが用いられる。バッ
グはバクテリアの解放が行なわれる装置に配置される。
本方法の他の仕様では、例えば、ストマッカフィルタの
ような、裏に配置されたフィルタを伴ったバッグが用い
られる。食物は、裏の内部に配置され、バクテリアが、
外部のバッグの中に解放される。このバッグは上述のよ
うに仕切られ、区画化されている。代わりに、工程の後
に、材料の所望の量がストマッカバッグの外部に取り出
され、ここで述べた物品の具体例の１つの中に配置さ
れ、ここで述べたように試験される。
本発明の他の特徴および利点は、好ましい具体例の以
下の記述、および請求項から明らかになるであろう。
下の記述、および請求項から明らかになるであろう。
図の簡単な説明 図１、２および３は、液体試料中の生物学的材料の定
量方法に用いる液体を保持するために取り付けられた物
品の、夫々、等倍図、上面図、側面図である。
量方法に用いる液体を保持するために取り付けられた物
品の、夫々、等倍図、上面図、側面図である。
図４および５は、本発明に有用な物品の他の具体例
の、夫々、側面図および上面図である。
の、夫々、側面図および上面図である。
図６は、本発明の物品の第３の具体例の上面図であ
る。
る。
図７および８は、本発明の物品の第４の具体例の、夫
々、側面図および上面図である。
々、側面図および上面図である。
図９は、本発明の物品の第５の具体例の等倍図であ
る。
る。
図10および11は、本発明の物品の第６の具体例の、夫
々、上面図および側面図である。
々、上面図および側面図である。
発明の詳細な説明 液体試料中の生物学的材料の定量方法に用いる物品の
多くの具体例を以下に示す。
多くの具体例を以下に示す。
この具体例では、定量される生物学的材料は、エシェ
リヒアおよび大腸菌型バクテリアであり、試験媒体は、
コリラート化学混合物である。エシェリヒアおよび大腸
菌型バクテリアを特定するための本具体例の使用および
コリラート化学混合物の使用は、例として用いるのみで
ある。本発明は、液体試料中にあるレベルで存在する
（１またはそれ以上の単位の上記材料を検出することが
できるように供給された）いくつかの生物学的材料、お
よび適用できる試験媒体に適用することができる。例え
ば、本発明は、腸球菌および全生存するバクテリアの検
出に適用することができる。
リヒアおよび大腸菌型バクテリアであり、試験媒体は、
コリラート化学混合物である。エシェリヒアおよび大腸
菌型バクテリアを特定するための本具体例の使用および
コリラート化学混合物の使用は、例として用いるのみで
ある。本発明は、液体試料中にあるレベルで存在する
（１またはそれ以上の単位の上記材料を検出することが
できるように供給された）いくつかの生物学的材料、お
よび適用できる試験媒体に適用することができる。例え
ば、本発明は、腸球菌および全生存するバクテリアの検
出に適用することができる。
実施例１ 定量中の試料を保持する物品の第１の具体例を図１−
３に示す。まず図１を参照して、物品Ａは、一般的に、
バッグと製氷皿の組み合わせのような形状である。物品
Ａは、一般的に、ポリ塩化ビニルからなる上面シート１
および下面シート２の２つの四角いシートから形成され
る。上面シート１は本質的に平坦である。
３に示す。まず図１を参照して、物品Ａは、一般的に、
バッグと製氷皿の組み合わせのような形状である。物品
Ａは、一般的に、ポリ塩化ビニルからなる上面シート１
および下面シート２の２つの四角いシートから形成され
る。上面シート１は本質的に平坦である。
図１−３について、下面シート２は、上面シートから
離れる方向にシートの一方が突き出した多くの空所３を
有するように形成されている。（各部分の寸法は、イン
チで図中に示される。）この具体例では、液体約2mlを
夫々保持する等しい大きさの15の空所３を有する。上面
シート１および下面シート２は、長さ方向に沿った２つ
の長い辺４、５と、１の狭い辺６で互いにシールされて
いる。第４の辺７は、そこを通って物品に試料が入れら
れるような入口を形成するように、シールされずに残さ
れる、３つのシールされた辺以外では、上面シート１お
よび下面シート２はシールおよび接続されず、試料が物
品を通って全ての空所の周囲に分配されることを許容す
るように上面シート１および下面シート２の間に通路８
を残す。
離れる方向にシートの一方が突き出した多くの空所３を
有するように形成されている。（各部分の寸法は、イン
チで図中に示される。）この具体例では、液体約2mlを
夫々保持する等しい大きさの15の空所３を有する。上面
シート１および下面シート２は、長さ方向に沿った２つ
の長い辺４、５と、１の狭い辺６で互いにシールされて
いる。第４の辺７は、そこを通って物品に試料が入れら
れるような入口を形成するように、シールされずに残さ
れる、３つのシールされた辺以外では、上面シート１お
よび下面シート２はシールおよび接続されず、試料が物
品を通って全ての空所の周囲に分配されることを許容す
るように上面シート１および下面シート２の間に通路８
を残す。
第１の具体例を用いて、試料中のエシェリヒアおよび
大腸菌型バクテリアのレベルの定量方法について以下の
ように完成する。第１に、試験する試料とコリラート化
学混合物100mlを、入口７を通して物品に流し込む。混
合物は、基本的に、50の空所３に均等に分配される。10
0mlとともに、各空所３には、混合物約2mlが入る。
大腸菌型バクテリアのレベルの定量方法について以下の
ように完成する。第１に、試験する試料とコリラート化
学混合物100mlを、入口７を通して物品に流し込む。混
合物は、基本的に、50の空所３に均等に分配される。10
0mlとともに、各空所３には、混合物約2mlが入る。
入口７はそれから閉じられる。上面シート１および下
面シート２は、それから空所の間の、縦、横の仕切に沿
ってシールされ、試料および試験媒体2mlを含む50の個
別的にシールされた区画を形成する。
面シート２は、それから空所の間の、縦、横の仕切に沿
ってシールされ、試料および試験媒体2mlを含む50の個
別的にシールされた区画を形成する。
シールが試料、試験媒体および得られた生成物のため
に非透過性であるかぎり、また、シールが、定量する生
物学的材料を破壊し、重大な損傷を負わせない限り、ま
たはその試験に影響をおよぼさない限り、シールは異な
った方法で行うことが可能である。この具体例では、シ
ールはヒートシールにより形成される。ヒートシール
は、290度から370度Ｆの間の温度のヒートシール装置を
用いて、５秒間、仕切に沿って物品に熱を供給すること
により行なわれる。液体試料の結果的な温度は、約５−
10度Ｆ程度以上には上がらない。
に非透過性であるかぎり、また、シールが、定量する生
物学的材料を破壊し、重大な損傷を負わせない限り、ま
たはその試験に影響をおよぼさない限り、シールは異な
った方法で行うことが可能である。この具体例では、シ
ールはヒートシールにより形成される。ヒートシール
は、290度から370度Ｆの間の温度のヒートシール装置を
用いて、５秒間、仕切に沿って物品に熱を供給すること
により行なわれる。液体試料の結果的な温度は、約５−
10度Ｆ程度以上には上がらない。
物品は、それから、約35℃で約24時間培養される。
結果は、エシェリヒアおよび大腸菌型バクテリアの存
在を示す区画の数を数えることにより解析する。それら
の有機体の存在は、試料の色の変化から判断される、エ
シェリヒアおよび大腸菌型バクテリアの量は、型通りの
統計的な分析で特定することができる。
在を示す区画の数を数えることにより解析する。それら
の有機体の存在は、試料の色の変化から判断される、エ
シェリヒアおよび大腸菌型バクテリアの量は、型通りの
統計的な分析で特定することができる。
実施例２ 再度、図１−３より、仕切のヒートシールが少し異な
った方法で完成できる。デュポンNo.5、リッド・ストッ
ク・コーティングのような、熱活性化粘着物が、上面１
および下面２の接着を促進するために上面１に供給され
る。ヒートシールは280度から310度Ｆの間の温度のヒー
トシール装置を用いて、５秒間、仕切に沿って物品に熱
を供給することにより行なわれる。この方法の利点は、
良い接着、および低温の利用である。
った方法で完成できる。デュポンNo.5、リッド・ストッ
ク・コーティングのような、熱活性化粘着物が、上面１
および下面２の接着を促進するために上面１に供給され
る。ヒートシールは280度から310度Ｆの間の温度のヒー
トシール装置を用いて、５秒間、仕切に沿って物品に熱
を供給することにより行なわれる。この方法の利点は、
良い接着、および低温の利用である。
実施例３ 物品の第２の具体例を、図４および５に示す。図４を
参照して、物品Ｂは、一般に、物品の中に所望の量の試
料を入れることを許容する物品の上端の入口10を備えた
バッグの形状をしている。物品は、例えばポリエチレン
・テレフタレート（PET）のようなMYLAR−型のプラステ
ィックとともにポリエチレン（PE）の同時押出でも形成
される。物品の３つの辺11、12、13は、一般に四角いバ
ッグ型の物品を形成するためにシールされている。
参照して、物品Ｂは、一般に、物品の中に所望の量の試
料を入れることを許容する物品の上端の入口10を備えた
バッグの形状をしている。物品は、例えばポリエチレン
・テレフタレート（PET）のようなMYLAR−型のプラステ
ィックとともにポリエチレン（PE）の同時押出でも形成
される。物品の３つの辺11、12、13は、一般に四角いバ
ッグ型の物品を形成するためにシールされている。
物品Ｂは、入口10と反対側の先端12の間に、バッグの
長手方向に沿って延びた、９つの縦の仕切を有する。仕
切14もまた、シールされている。物品の中に試料を入れ
るのを促進し、試料が仕切の間に分配されるのを保証す
るために、第１のチャネル15が、入口近くに形成される
ように、仕切が配置される。第２のチャネルは、試料が
物品の中を移動して空気を追い出すのを保証するため
に、物品の底に残される。
長手方向に沿って延びた、９つの縦の仕切を有する。仕
切14もまた、シールされている。物品の中に試料を入れ
るのを促進し、試料が仕切の間に分配されるのを保証す
るために、第１のチャネル15が、入口近くに形成される
ように、仕切が配置される。第２のチャネルは、試料が
物品の中を移動して空気を追い出すのを保証するため
に、物品の底に残される。
図４を参照して、ひと続きの、予め形成された通路17
が、仕切の間の試料の通過を保証するために縦の仕切14
の間に形成されている。
が、仕切の間の試料の通過を保証するために縦の仕切14
の間に形成されている。
この第２の具体例を用いて、試料中のエシェリヒアお
よび大腸菌型バクテリアのレベルの定量方法が以下のよ
うにして完成した。第１に、試験される試料、およびコ
リラート化学混合物のような試験媒体約100mlが、入口1
1を通って、物品の中に流し込まれる。混合物は物品の
中へ、チャネル15および16、通路17により仕切の回りに
分配される。入口11はそれからシールされる。物品は、
それから９つの水平な仕切に沿ってシールされ、存在す
る仕切14に沿った新しい９つの仕切は、ほぼ等しいサイ
ズの分割された区画を形成する。シールは、試料と試験
媒体の混合物を、十分に均等に、100の区画の中および
周辺に分配する方法で行なわれる。各区画には、試料お
よび試験媒体がおおよそ1ml入っている。
よび大腸菌型バクテリアのレベルの定量方法が以下のよ
うにして完成した。第１に、試験される試料、およびコ
リラート化学混合物のような試験媒体約100mlが、入口1
1を通って、物品の中に流し込まれる。混合物は物品の
中へ、チャネル15および16、通路17により仕切の回りに
分配される。入口11はそれからシールされる。物品は、
それから９つの水平な仕切に沿ってシールされ、存在す
る仕切14に沿った新しい９つの仕切は、ほぼ等しいサイ
ズの分割された区画を形成する。シールは、試料と試験
媒体の混合物を、十分に均等に、100の区画の中および
周辺に分配する方法で行なわれる。各区画には、試料お
よび試験媒体がおおよそ1ml入っている。
物品の仕切およびシールは、シールが試料、試験媒体
および得られた反応物にとって非透過性である限り、シ
ールが定量される生物学的材料を重要な破壊を行わず、
それらの試験に影響を与えない限り、異なった方法で行
なうことが可能である。この具体例では、シールは、ヒ
ートシールにより行なわれる。ヒートシールは、300−3
50度Ｆ周辺の温度の加熱ワイアを用いて、２秒間、仕切
に沿って物品に熱を供給することにより行なわれる。
および得られた反応物にとって非透過性である限り、シ
ールが定量される生物学的材料を重要な破壊を行わず、
それらの試験に影響を与えない限り、異なった方法で行
なうことが可能である。この具体例では、シールは、ヒ
ートシールにより行なわれる。ヒートシールは、300−3
50度Ｆ周辺の温度の加熱ワイアを用いて、２秒間、仕切
に沿って物品に熱を供給することにより行なわれる。
シールの後、物品は約35℃でおおよそ24時間、培養さ
れる。結果は、エシェリヒアや大腸菌型バクテリアが存
在することを示す区画の数を数えるにより、解析され
る。
れる。結果は、エシェリヒアや大腸菌型バクテリアが存
在することを示す区画の数を数えるにより、解析され
る。
実施例４ 図６は、第３の具体例を示したものであり、試料中の
定量される生物学的材料の濃度が高い場合に用いられる
特別な仕様を有している。異なったサイズの区画は、試
料を希釈する工程を省略し、これにより時間と希釈によ
る誤差の可能性を減らしている。加えて、この“自動希
釈”は、定量できる範囲を増加させることができる。
定量される生物学的材料の濃度が高い場合に用いられる
特別な仕様を有している。異なったサイズの区画は、試
料を希釈する工程を省略し、これにより時間と希釈によ
る誤差の可能性を減らしている。加えて、この“自動希
釈”は、定量できる範囲を増加させることができる。
図６を参照すると、物品Ｃおよびその使用は、異なっ
た３つのサイズの区画30、31、32が存在することを除け
ば、上述の第１の具体例と類似している。50の区画30が
存在し、それらは試料をおおよそ2ml保持できる。50の
区画31が存在し、それらは試料をおおよそ0.2ml保持で
きる。50の区画32が存在し、それらは試料をおおよそ0.
02ml保持できる。
た３つのサイズの区画30、31、32が存在することを除け
ば、上述の第１の具体例と類似している。50の区画30が
存在し、それらは試料をおおよそ2ml保持できる。50の
区画31が存在し、それらは試料をおおよそ0.2ml保持で
きる。50の区画32が存在し、それらは試料をおおよそ0.
02ml保持できる。
実施例５ 図７および８は、第４の具体例であり、特に、定量さ
れる生物学的材料の濃度の高い場合に用いられる使用を
有している。区画の異なったサイズは、試料を希釈する
工程を省略し、これにより時間と希釈による誤差の可能
性を減らし、定量できる範囲を増加させることができ
る。
れる生物学的材料の濃度の高い場合に用いられる使用を
有している。区画の異なったサイズは、試料を希釈する
工程を省略し、これにより時間と希釈による誤差の可能
性を減らし、定量できる範囲を増加させることができ
る。
図７、８を参照して、物品Ｄおよびその使用は、１の
サイズの通路50を形成する９つの仕切40があること、よ
り小さいサイズの通路51を形成する９つの仕切41がある
こと、更に小さいサイズの通路52を形成する９つの仕切
42があることを除けば、上述の第２の具体例に類似して
いる。物品は、上述の第２の具体例で述べたように、９
つの水平な仕切に沿ってシールされる。このシールは30
0の区画となる。仕切40の存在と共に、この新しい９つ
の仕切は、夫々おおよそ1mlの試料を保持するための100
の分離した区画を形成する。仕切41の存在と共に、この
新しい９つの仕切は、夫々おおよそ0.1mlの試料を保持
するための100の分離した区画を形成する。仕切42の存
在と共に、９つの新しい仕切は、夫々おおよそ0.01mlの
試料を保持するための100の分離した区画を形成する。
サイズの通路50を形成する９つの仕切40があること、よ
り小さいサイズの通路51を形成する９つの仕切41がある
こと、更に小さいサイズの通路52を形成する９つの仕切
42があることを除けば、上述の第２の具体例に類似して
いる。物品は、上述の第２の具体例で述べたように、９
つの水平な仕切に沿ってシールされる。このシールは30
0の区画となる。仕切40の存在と共に、この新しい９つ
の仕切は、夫々おおよそ1mlの試料を保持するための100
の分離した区画を形成する。仕切41の存在と共に、この
新しい９つの仕切は、夫々おおよそ0.1mlの試料を保持
するための100の分離した区画を形成する。仕切42の存
在と共に、９つの新しい仕切は、夫々おおよそ0.01mlの
試料を保持するための100の分離した区画を形成する。
実施例６ 図９に、第５の具体例であり、特に、定量される生物
学的材料の濃度の高い場合に用いられる使用を有してい
る。２つ異なったサイズの区画は、試料を希釈する工程
を省略し、これにより時間と希釈による誤差の可能性を
減らし、定量できる範囲を増加させることができる。加
えて、この“自動希釈”は、定量できる範囲を増加させ
ることができる。
学的材料の濃度の高い場合に用いられる使用を有してい
る。２つ異なったサイズの区画は、試料を希釈する工程
を省略し、これにより時間と希釈による誤差の可能性を
減らし、定量できる範囲を増加させることができる。加
えて、この“自動希釈”は、定量できる範囲を増加させ
ることができる。
図11を参照して、物品Ｅおよびその使用は、２つの異
なったサイズの区画43および44を有している除いて、上
述の第３の具体例、物品Ｃと類似している。それぞれが
おおよそ2mlの試料を保持する50の区画43を有する。そ
れぞれがおおよそ0.2mlの試料を保持する50の区画44を
有する。
なったサイズの区画43および44を有している除いて、上
述の第３の具体例、物品Ｃと類似している。それぞれが
おおよそ2mlの試料を保持する50の区画43を有する。そ
れぞれがおおよそ0.2mlの試料を保持する50の区画44を
有する。
実施例７ 物品の第６の具体例、物品Ｆを図10および11に示す。
図10、11を参照して、物品Ｆは、大体、図１−３に示す
物品Ａに似た形状に、51番目の空所45を付け加えたもの
である。この51番目の空所45は、他の50の空所３からの
オーバーフローを保持し、シール工程中に物品の外部に
液体がオーバーフローする危険性を除去または減少させ
る。このように、この空所は、物品の中の液体の汚染を
防止することができる。
図10、11を参照して、物品Ｆは、大体、図１−３に示す
物品Ａに似た形状に、51番目の空所45を付け加えたもの
である。この51番目の空所45は、他の50の空所３からの
オーバーフローを保持し、シール工程中に物品の外部に
液体がオーバーフローする危険性を除去または減少させ
る。このように、この空所は、物品の中の液体の汚染を
防止することができる。
結果が、エシェリヒアおよび大腸菌型バクテリアの存
在を示す、51の区画の数を数えることにより、または、
（51番目の空所を除いた）50の区画の数を数えることに
より解析できることを除いて、物品Ｆの使用は、物品Ａ
と同じである。
在を示す、51の区画の数を数えることにより、または、
（51番目の空所を除いた）50の区画の数を数えることに
より解析できることを除いて、物品Ｆの使用は、物品Ａ
と同じである。
実施例８ 具体例のバリエーションについてここで述べるが、上
面シート１は、ポリエチレンのようなプラスティックに
覆われた紙片補強の薄から形成されても良く、下面シー
ト２は、ポリ塩化ビニルから形成されても良い。
面シート１は、ポリエチレンのようなプラスティックに
覆われた紙片補強の薄から形成されても良く、下面シー
ト２は、ポリ塩化ビニルから形成されても良い。
実施例９ 具体例の小さなバリエーションをここに述べるが、物
品はトータルで10mlを保持するために形成されても良
い。このバリエーションは、食物や他の産業のための特
別な応用であり、ここでは、より少ない単位の試料の使
用が可能になり、許容される。
品はトータルで10mlを保持するために形成されても良
い。このバリエーションは、食物や他の産業のための特
別な応用であり、ここでは、より少ない単位の試料の使
用が可能になり、許容される。
製造 上記具体例は、例えば、当業者に良く知られたモール
ディング技術のような標準工程により製造することがで
きる。
ディング技術のような標準工程により製造することがで
きる。
使用 本発明の、比較実験の具体例では、エシェリヒアの定
量のための伝統的な技術と同等の結果を提供できる。実
際、いくつかの場合では、本発明の具体例が、他の技術
より、あたかも良いエシェリヒアの回復を提供できるよ
うに思える。
量のための伝統的な技術と同等の結果を提供できる。実
際、いくつかの場合では、本発明の具体例が、他の技術
より、あたかも良いエシェリヒアの回復を提供できるよ
うに思える。
他の具体例は、以下の請求項に含まれる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ナーキ、アリ アメリカ合衆国04105メイン州、ファル マウス、パインハースト・レイン２番 (72)発明者 ピアーソン、マーク・ダブリュー アメリカ合衆国04072メイン州、サコ、 ブラッドリー・ストリート316番 (72)発明者 ウェシュラー、トーマス・アール アメリカ合衆国04107メイン州、ケー プ・エリザベス、パーク・サークル・ロ ード25番 (72)発明者 ワードロー、スティーブン・シー アメリカ合衆国06475コネチカット州、 オールド・セイブルック、ノース・カバ ー・ロード191番 (72)発明者 フィナーティー、マイケル・ピー アメリカ合衆国04210メイン州、オーバ ーン、ミノット・アヴェニュー309番 (72)発明者 カーペンター、チャールズ・アール アメリカ合衆国04074メイン州、スカー ボロウ、ホームズ・ロード175番 (56)参考文献 国際公開91／16086（ＷＯ，Ａ１) (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C12M 1/00 - 1/34 C12Q 1/00 - 1/20 A61M 1/00 G01N 33/487
Claims (37)
- 【請求項１】液体試料中の生物学的材料の定量するため
の物品において、 その間にある容積を封入する上面シート（１）と下面シ
ート（２）とを有するバッグであって、そこを通って該
液体試料が該バッグの該容積中に流し込まれる上部入口
（７）を有する該バッグと、 該バッグの中の該液体試料の１またはそれ以上の部分を
分離し、該液体試料をアリコートにするために形成され
た、該バッグ中の複数の仕切（９）と、 そこを通って該液体試料を該バッグ中の容積中に分配す
ることができる通路（８）とを含み、 該バッグが、該液体試料の分離されたアリコートを保持
するための区分された非透過性の区画を形成するような
材料からなり、隣接した区画中の反応に意味のある影響
を与えることなく、複数の該区画中で同じ化学的／生物
学的反応を分離して起こさせることにより、それぞれの
該区画中で該生物学的材料の存在又は不存在を検出し、
該生物学的材料の統計的に信頼できる定量化を行うため
の物品。 - 【請求項２】上記バッグが大略四角形で、上記上部入口
（７）が該バッグの１辺に沿って設けられており、残り
の３辺（４、５、６）が液体がそこを通過しないように
シールされている請求項１の物品。 - 【請求項３】上記区画が、上記バッグの上記上面および
上記下面シートに沿った複数のラインをヒートシールす
ることにより形成される請求項１の物品。 - 【請求項４】上記複数の仕切（９）が、上記液体試料を
保持するために、上記バッグ中に、複数の区分されたウ
エル（空所）（３）を形成するために設けられた請求項
１の物品。 - 【請求項５】上記ウエル（３）の数が、40と60を含み、
その間にある請求項４の物品。 - 【請求項６】上記ウエル（３）が、大体等しいサイズで
ある請求項４の物品。 - 【請求項７】上記区画が、おおよそ0.2mlからおおよそ
2.0mlの液体を保持するサイズである請求項４の物品。 - 【請求項８】上記区画が、おおよそ0.2mlの液体を保持
するサイズである請求項４の物品。 - 【請求項９】上記バッグが、ポリ塩化ビニルから形成さ
れる請求項１の物品。 - 【請求項１０】上記バッグの上記上面シート（１）が、
ポリエチレンで覆われた紙片補強の箔から形成され、上
記下面シート（２）がポリ塩化ビニルから形成される請
求項１の物品。 - 【請求項１１】複数の仕切（14）は、互いに平行に、上
記バッグの上記入口（10）から遠位端部（12）の方向に
走り、 しかも、そのような仕切は、液体試料がそこを通って流
れることができる複数の通路（17）を形成し、 更に、上記仕切が、該仕切（14）間の液体試料の分配を
促進するために、該入口（10）と該仕切（14）との間に
通路（15）が形成される長さである請求項１の物品。 - 【請求項１２】更に、上記仕切（14）間の液体試料の分
配を促進するために、該仕切（14）と上記入口（10）か
ら遠位の端部（12）との間に第２の通路（16）を含む請
求項11の物品。 - 【請求項１３】上記仕切（14）が、上記バッグの上記上
面（１）および上記下面（２）に沿った複数の線をヒー
トシールすることにより形成される請求項11の物品。 - 【請求項１４】上記バッグが、ポリエチレンテレフタレ
ートとともに同時押出されたポリエチレンから形成され
る請求項１の物品。 - 【請求項１５】第１の複数のウエル（30）が１のサイズ
であり、第２の複数のウエル（31）がより小さいサイズ
である請求項５の物品。 - 【請求項１６】上記第１および第２の複数のウエルとサ
イズの異なった第３の複数のウエル（32）を含む請求項
15の物品。 - 【請求項１７】上記区画が、上記バッグの上記上面
（１）シートおよび上記下面（２）シートに沿った複数
の線をヒートシールすることにより形成される請求項15
の物品。 - 【請求項１８】上記区画が、上記バッグの上記上面
（１）シートおよび上記下面（２）シートに沿った複数
の線をヒートシールすることにより形成される請求項16
の物品。 - 【請求項１９】上記第１の複数のウエル（30）の数が40
および60の間であり、 上記第２の複数のウエル（31）の数が40および60の間で
ある請求項18の物品。 - 【請求項２０】上記第１の複数のウエル（30）が、おお
よそ2mlの液体を保持するサイズであり、 上記第２の複数のウエル（31）が、おおよそ0.2mlの液
体を保持するサイズである請求項19の物品。 - 【請求項２１】液体試料中の生物学的材料の定量に用い
るためのキットであって、 請求項１に列挙した物品と、 一定の生物学的検出媒体とを含むキット。 - 【請求項２２】更に、上記上面シートおよび上記下面シ
ートの一方または双方の内面に適用された熱活性な接着
剤を含む請求項21のキット。 - 【請求項２３】液体試料中の生物学的材料の定量方法で
あって、 その間にある容積を封入する上面シート（１）と下面シ
ート（２）を有し、該液体試料をバッグ中の該容積に、
そこを通って流し込むことができる上部入口（７）を有
する該バッグを提供する工程を含み、 該バッグが、該液体試料の分離されたアリコートを保持
するための区分された非透過性の区画を形成することが
できる材料から形成され、 更に、該方法が、試験媒体として化学的および／または
生物学的反応物を該液体試料に添加する工程と、 該試験媒体と該液体試料の混合物を該バッグ中に配置す
る工程と、 該試験媒体と該液体試料の混合物を該バッグ中に分配す
る工程と、 複数の区分された非透過性な区画を該バッグ中に形成
し、試験媒体と液体試料の該混合物を該区画中の複数の
分離されたアリコート中に確実に入れる工程と、 隣接した区画中の反応に意味のある影響を与えることな
く、複数の該区画中で同じ化学的／生物学的反応を分離
して起こさせることにより、それぞれの該区画中で該生
物学的材料の存在又は不存在を検出し、該生物学的材料
の統計的に信頼できる定量化を行う工程とを含む方法。 - 【請求項２４】上記バッグが、該バッグ中の上記液体試
料の１またはそれ以上の部分を分離するために形成され
た、複数の仕切（９）を備えている請求項23の方法。 - 【請求項２５】上記複数の仕切が、上記液体試料を保持
するための上記バッグ中の複数の区分されたウエル
（３）を形成するために設けられる請求項24の方法。 - 【請求項２６】上記ウエル（３）の数が40および60を含
んでこの間にある請求項25の方法。 - 【請求項２７】上記ウエル（３）が、大体同じサイズで
ある請求項25の方法。 - 【請求項２８】定量化される上記生物学的材料が、エシ
ェリヒアおよび大腸菌型バクテリアであり、上記試験媒
体が一定の生物学的検出媒体である請求項23の方法。 - 【請求項２９】上記区画を形成する工程が、 該区画を形成するために上記バッグをヒートシールする
工程を含み、 該区画の間のシールが、上記液体試料、上記試験媒体お
よび結果反応物にとって非透過性である請求項23の方
法。 - 【請求項３０】上記ヒートシール工程が、 約143℃と約188℃（約290゜Fと約370゜F）の間の温度の
ヒートシール装置を用いて、約５秒間、上記バッグに熱
を加える工程を含む請求項29の方法。 - 【請求項３１】上記ヒートシール工程が、 上記物品の上記内面に熱活性な接着剤を適用し、 約137℃と約155℃（約280゜Fと約310゜F）の間の温度の
ヒートシール装置を用いて、約５秒間、上記バッグに熱
を加える工程を含む請求項29の方法。 - 【請求項３２】上記ヒートシール工程が、 上記物品の上記内面に熱活性な接着剤を適用し、 約160℃と約188℃（約320゜Fと約370゜F）の間の温度
を、該物品の中の仕切の各列に、約１−２秒間加えて、
該バッグに熱を加える工程を含む請求項29の方法。 - 【請求項３３】上記検出工程が、所望の温度で、所望の
時間、上記バッグをインキュベート（培養）する工程を
含む請求項23の方法。 - 【請求項３４】上記バッグ中に、複数の区分された非透
過性の区画を形成する工程が、 １のサイズの、第１の複数の区画（30）を形成する工程
と、 より小さいサイズの、第２の複数の区画（31）を形成す
る工程とを含む請求項23の方法。 - 【請求項３５】更に、上記第１の複数の区画（30）およ
び上記第２の複数の区画（31）と異なったサイズの第３
の複数の区画（32）を形成する工程を含む請求項30の方
法。 - 【請求項３６】上記上面シート（１）と上記下面シート
（２）とがシールされて、上記液体試料の分離されたア
リコートを保持するための、個別的にシールされた上記
区画が形成され、 上記生物学的材料の存在するおよび／又は存在しない該
区画を検出することにより、該液体試料に含まれる該生
物学的材料の定量化を行う請求項１の物品。 - 【請求項３７】上記区画が、略等しいサイズの、複数の
区画を含む請求項36の物品。
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/201,110 | 1994-02-23 | ||
| US201,110 | 1994-02-23 | ||
| US08/201,110 US5518892A (en) | 1994-02-23 | 1994-02-23 | Apparatus and method for quantification of biological material in a liquid sample |
| PCT/US1995/002255 WO1995023026A1 (en) | 1994-02-23 | 1995-02-22 | Apparatus and method for quantification of biological material in a liquid sample |
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Family
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|---|---|---|---|
| JP52245495A Expired - Fee Related JP3145406B2 (ja) | 1994-02-23 | 1995-02-22 | 液体試料中の生物学的材料の定量化装置および方法 |
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|---|---|
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