JP2003149254A

JP2003149254A - 試料調製装置

Info

Publication number: JP2003149254A
Application number: JP2001346431A
Authority: JP
Inventors: Hironori Kobayashi; 弘典小林; Fumio Kubota; 文雄久保田
Original assignee: Sysmex Corp
Current assignee: Sysmex Corp
Priority date: 2001-11-12
Filing date: 2001-11-12
Publication date: 2003-05-21

Abstract

(57)【要約】【課題】多数のウェルを含む装置で簡易に短時間で、液
体などの注入および排出処理を伴う微量物質の測定法を
行うことができる試料調製装置の提供。【解決手段】複数の貫通されたウェルを有し、一端に液
体供給部が設けられたプレートと、ウェルの底部に配置
された多孔性膜とからなる１ユニットを複数個備え、プ
レートと多孔性膜とがそれぞれ離脱可能に設けられた支
持体と、液体供給部からウェルに供給された液体をウェ
ルの底部方向に吸引するための吸引機構とからなる試料
調製装置により上記課題を解決する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、試料調製装置に関
し、より詳細には、抗原抗体反応を利用して、生物学的
試料を短時間で処理することが可能な試料調製装置に関
する。

【０００２】

【従来の技術および発明が解決しようとする課題】生物
学的試料、例えば細胞や組織全体から採取されたバイオ
プシー検体に含まれる微量物質を検出したり、反応させ
たりする際に、マルチウェルプレートが汎用されてい
る。このマルチウェルプレートは、1枚のプレート中に
ウェルと呼ばれるくぼみが多数形成されており、そのく
ぼみを用いて、物質を検出するための操作を行ったり、
反応を行ったりする。１枚のプレートに少量でかつ多数
の異なる試料を注入して操作することができるため、特
に生物学的分野で多用されている。

【０００３】たとえば、微量物質を検出または定量する
ためのラジオイムノアッセイやエンザイムイムノアッセ
イ法の場合、マルチウェルプレートは以下のようにして
用いられる。まずプレートのウェル内壁に微量物質に対
して特異的な抗体を固定させ、その抗体に、微量物質を
含む試料液を反応させて、微量物質を結合させる。さら
に、微量物質に対して特異的に結合し、かつ蛍光色素や
放射性同位体などで標識化された別の特異的な抗体をそ
こへ反応させ、微量物質と結合させる。その後、標識の
存在を検出または定量して、微量物質の測定を行う。

【０００４】この際、マルチウェルプレートのウェルの
底から反応液を排出したり、ウェル内壁に残存する試薬
液を洗浄するためには、ウェル毎にピペットやマイクロ
ピペットで反応液を吸い上げたり、洗浄液を注入する必
要がある。したがって、マルチウェルプレートのように
多数のウェルを用いると、測定のための操作が煩雑にな
り、したがって長時間を要するという問題があった。

【０００５】本発明は上記課題に鑑みてなされたもので
あり、多数のウェルを含む容器で、簡易に短時間で多並
列的に液体、例えば生物学的試料液の固相形成および、
検出用試薬液や洗浄液等の排出処理および注入処理など
を行うことができる試料調製装置を提供することを目的
とする。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明によれば、複数の
貫通されたウェルを有し、一端に液体供給部が設けられ
たプレートと、ウェルの底部に配置された多孔性膜とか
らなる１ユニットを１または複数個備え、プレートと多
孔性膜とがそれぞれ離脱可能に設けられた支持体と、液
体供給部からウェルに供給された液体をウェルの底部方
向に吸引するための吸引機構とからなる試料調製装置が
提供される。

【０００７】

【発明の実施の形態】本発明の試料調製装置は、生物学
的試料液中に含まれる微量物質の固相形成および、検出
試薬液や洗浄液等の排出処理および注入処理といった試
料を調製するためのものであり、主として支持体と、吸
引機構とからなり、支持体はウェルと液体供給部を有す
るプレートと、多孔性膜とからなる単位ユニットを１ま
たは複数個有する。

【０００８】以下、液体とは、特に断りがない限り、測
定されるべき物質を含む試料液等、例えば生物学的試料
液または検量線作成のための標品液など；検出用試薬
液、例えば希釈液、抗体含有液、標識物質含有液など；
および洗浄液等、例えば洗浄液や純水などを意味する。

【０００９】プレート３は、円形または多角形の平板か
らなり、ウェル３１を有する（図１参照）。プレート３
自体の大きさは特に限定されず、例えば１０ｃｍ²〜５
００ｃｍ²程度が挙げられる。各ウェル３１は、試料液
等を収納するのに必要な体積を有すればよい。ウェル３
１の形状は、特に限定されないが、例えば、円柱状、直
方体状または立方体等の多角柱状等が挙げられる。

【００１０】プレート３はウェル３１を複数個有し、例
えば６行３列のウェル３１を有する。プレート３は、整
然としている複数個のウェル３１の列を備えるのが好ま
しい。

【００１１】ウェル３１は、プレート３の一部に寄せ
て、全面に広がって、または中心部分に集まって備えら
れていてもよい。プレート３の中心部分に集まってウェ
ル３１が備えられると、プレート３の一端に備えられた
液体供給部２４からウェル３１に検出用試薬液および洗
浄液等を供給しやすいので、好ましい。

【００１２】プレート３は、ポリプロピレン、ポリスチ
レン、ポリカーボネート、ポリアセタール、塩化ビニル
等から選択される樹脂から製造されるが、液体とのなじ
みをよくするために、その表面に、一般的な親水性処理
（テトラエッチ処理、プラズマ処理など）を施すのが好
ましい。テトラエッチ処理は表面に親水性の薬剤をコー
ティングする処理であり、プラズマ処理は表面を粗くす
る処理の一例である。

【００１３】プレート３は、オーバーフロー廃液用溜め
４７を、プレート３の周囲の全部または一部に備えるの
が好ましい（図１参照）。オーバーフロー廃液用溜め４
７は、プレート３の周囲の一部に設けられる際には、プ
レート３の長手方向に液体供給部２４、ウェル３１およ
びオーバーフロー廃液用溜め４７の順の配置になるよう
に設けられるのがより好ましい。オーバーフロー廃液用
溜め４７は、プレート３内のウェル３１から溢れ出た廃
液を留めるためのものである。したがって、オーバーフ
ロー廃液用溜め４７の底は、通常、ウェル３１の高さよ
りも少なくとも低い。

【００１４】オーバーフロー廃液用溜め４７は、排水用
誘導管３９をオーバーフロー廃液用溜め４７の底に備え
るのが好ましい（図１参照）。排水用誘導管３９は、オ
ーバーフロー廃液用溜め４７に溜まった廃液を、排水溝
３２へ誘導するために設ける（図７および８参照）。こ
の排水用誘導管３９の端は、斜め（鋭角）に切断するの
が好ましい。斜めになっていることで、気泡による排水
用誘導管中の廃液の詰まりは防止される。

【００１５】プレート３は、ウェル３１とウェル３１の
間に溝３８を備えるのが好ましい（図１参照）。溝３８
は、検出用試薬液および洗浄液等が１つのウェル３１を
満たした後、溢れたものが、隣接するウェル３１へ流れ
込みやすくするために設けるものである。この溝によ
り、流入する検出用試薬液および洗浄液等が空気を噛み
込むことを防ぐことができる。溝３８は、ウェル３１の
全部または一部の間に設けられていてもよいが、全部に
設けられるのが好ましい。溝３８の深さは限定されない
が、通常約０．１〜５ｍｍ程度であり、約０．５ｍｍ程
度が好ましい。

【００１６】プレート３は、さらにプレート３の周囲の
全部に堰４０を備えるのが好ましい（図１参照）。堰
は、液体供給部２４から検出用試薬液および洗浄液等を
供給された際に、プレート３中のウェル３１から溢れる
量の液体が、プレート３から溢れないために設けられて
いる。これはプレート３中のウェル３１を、供給された
検出用試薬液および洗浄液等で満たすことができ、か
つ、１つのプレート３から溢れた、検出用試薬液および
洗浄液等が他のプレート３へ混ざらないような高さに設
けられるのが、好ましい。

【００１７】プレート３は、さらに多孔性膜固定用爪４
６を、ウェル３１の底の側に備えるのが好ましい（図８
参照）。該爪は、多孔性膜３６をプレート３の下面に密
着させるのに用いられる。

【００１８】プレート３は、プレート固定板２５上に複
数個並べて備えられてもよい（図２参照）。その際、図
７に示すように液体供給部２４がプレート３から離脱可
能であれば、プレート３はプレート固定板２５上に固定
されているので、プレート３の洗浄は容易であり、好ま
しい。プレート固定板２５に固定されたプレート３は、
多孔性膜３６、ならびに任意にろ紙２７、パッキン２６
および／または下面プレート４２を挟んで、吸引機構５
０を備えたマニホールド２８に締付けねじ２９で固定さ
れるのが好ましい（図２、７、８および９参照）。

【００１９】締付けねじ２９は、プレート固定板２５に
複数設けられるのが好ましい。マニホールド２８へ締付
ける際にはトルクドライバーを用いて約０．０５〜０．
４Ｎｍのトルクで均一に締付けるのが、さらに好まし
い。締付けは、ひずみが生じないように対角な配置にあ
る締付けねじを順に行うのが、より好ましい。

【００２０】本発明の装置は、さらに下面プレート４２
をマニホールド２８にはめ込んで備えるのが好ましい
（図７および８参照）。下面プレート４２は、プレート
３と一緒になって多孔性膜３６とろ紙２７を挟み、多孔
性膜３６にプレート３とウェル３１と同一面積、同一形
状の領域のみに液体試料を吸着させるために設けるもの
である。したがって、下面プレート４２の孔はプレート
３の貫通されたウェル３１と一致しているのが好まし
い。

【００２１】プレート３は、プレート３に検出用試薬液
および洗浄液等を供給するための液体供給部２４を、そ
の一端に備える（図１、２、４、７および８参照）。液
体供給部２４は、プレート３と一体化していても、プレ
ート３から離脱可能な形態であってもよい。本発明の装
置は、試料液等や、検出用試薬液で処理した後、プレー
トなどを洗浄する必要が生じることがある。したがって
本発明の装置では、プレート固定板２５に固定されたプ
レート３と多孔性膜３６を別々に洗浄することが可能で
ある。このとき、液体供給部２４がプレート３から分離
可能な形態であれば、液体供給部２４を分離した後のプ
レート３とそれが固定されたプレート固定板２５は独立
して洗浄することができ、好ましい。これにより、本発
明の装置の使用後の処理がさらに簡便となる。

【００２２】液体供給部２４は、接続口４９を介して液
体供給配管６に接続するのが好ましい（図１および４参
照）。接続口４９は、ポリアセタール樹脂、ＳＵＳ（ス
テンレス）のような樹脂や金属等から製造される。検出
用試薬液および洗浄液等の供給速度は、空気を噛みこま
ないよう考慮して、約０．１〜１．０ｍｌ／秒程度であ
り、約０．７ｍｌ／秒程度が好ましい。

【００２３】液体供給部２４は、他端に、さらに複数の
液体誘導流路３５を備えるのが好ましい（図１参照）。
液体誘導流路３５は、液体供給部２４から供給された検
出用試薬液および洗浄液等を、プレート３中のウェル３
１に誘導しやすくするために設けられるものである。液
体誘導流路３５は、液体供給部２４と、最も近くにある
ウェル３１とを結び、好ましくは直線状に設けられる。
この液体誘導流路３５は、検出用試薬液および洗浄液等
を誘導するきっかけを与えるためのものであり、検出用
試薬液および洗浄液等がその経路から溢れても、検出用
試薬液および洗浄液等の流れる方向は、液体供給部２４
からウェル３１の方向に限られるので、問題は生じな
い。従って、液体誘導流路３５の深さは、特に限定され
ない。

【００２４】液体供給部２４は、接続口４９近傍に送液
溜め３４をさらに備えるのが好ましい（図１参照）。送
液溜め３４は、液体供給配管６と液体誘導流路３５との
間に設けられるのがさらに好ましい。プレート３中にウ
ェル３１が数列に並んでいる場合、液体供給配管６から
供給された検出用試薬液および洗浄液等を送液溜め３４
に一旦溜め、溢れる検出用試薬液および洗浄液等を一斉
に送液溜め３４に最も近くに位置するウェル３１へ供給
するので、複数列のウェル３１が備えられていても、各
列に同時に検出用試薬液および洗浄液等が到達する。し
たがって、送液溜め３４は、液体供給配管６から供給さ
れた検出用試薬液および洗浄液等を、すべてのウェル３
１に短時間に均等に行き渡らせることができる。

【００２５】多孔性膜３６としては疎水性多孔性膜が好
ましく、タンパクと疎水結合することができるもの、具
体的には、ＰＶＤＦ（ポリビニリデンフロライド）疎水
性メンブレン、ナイロン（荷電処理済み）メンブレン、
ニトロセルロース等が挙げられる。疎水性多孔性膜は対
象がタンパクの場合であり、対象が変わればそれに応じ
た多孔性膜を用いることが可能である。多孔性膜３６の
孔の大きさとしては、ウェル３１中に液体を入れたとき
に、その液体に含まれる物質と効率的に疎水結合し、そ
の物質を検出に必要な量を十分に保持できるよう、孔の
大きさを選択するのが好ましい。例えば、多孔性膜３６
の孔は、０．１〜１０μｍ、好ましくは０．１〜０．５
μｍの大きさのものを用いることができる。

【００２６】多孔性膜３６は、本発明の装置を使用する
際に用いる、調製を行うのに必要な液体の溶媒などで、
浸漬などして湿らせるのが好ましい。そのような溶媒と
しては、例えば、タンパク量を測定するために本発明の
装置を用いる際には、トランスファーバッファーが挙げ
られる。

【００２７】多孔性膜３６は、プレート３と共に支持体
（プレート固定板２５、下面プレート４２、マニホール
ド２８、パッキン２６など）から離脱可能である。した
がって、本発明の装置を用いる際には、液体を入れたと
きにプレート３と多孔性膜３６が形成するウェル３１か
ら液体が漏れないように、プレート３と多孔性膜３６と
の間は隙間なく固定されているのが好ましい。

【００２８】多孔性膜３６は、プレート３毎に、分離さ
れた形態で配置されてもよいが、複数のプレート３の下
に、１枚のつながった多孔性膜３６を用いてもよい。多
孔性膜３６上で反応を行う場合、１枚の多孔性膜３６を
複数のプレートに用いると、図３に示すように、各プレ
ート３毎に得られる多孔性膜３６が１枚で得られ、該膜
上に形成された、例えば標識されたタンパクからの標識
画像を自動的に読み取る装置を用いて各画像を読み取る
のに好ましい。

【００２９】多孔性膜３６が、吸引機構５０による陰圧
での吸引により乾燥しすぎる際には、多孔性膜３６と、
吸引機構５０の間に１枚以上のろ紙２７を挟みこんでも
よい（図１、７および８参照）。ろ紙２７の大きさは、
少なくともウェル３１の底より大きいのが好ましく、ウ
ェル３１の集まり全体より大きいのがより好ましい。ろ
紙２７は、多孔性膜３６を湿らすのに用いた溶媒と同様
な溶媒で、予め湿らすのが好ましい。湿らされたろ紙２
７は、多孔性膜３６に湿気を与え、多孔性膜３６が過剰
に乾燥するのを防止する。

【００３０】多孔性膜３６と、吸引機構５０の間に１枚
以上のろ紙２７を挟みこむ場合、ろ紙２７が水分を吸収
して膨張するので、ろ紙２７の厚みを有するパッキン２
６を多孔性膜３６と吸引機構５０の間に挟むのが好まし
い（図７および８参照）。ウェル３１の底部方向に吸引
する際、プレートにあるウェル以外の隙間から外気を吸
引することを避けるためである。パッキン２６は、シリ
コンやニトリルゴムといった合成ゴムなどの弾性材料か
ら製造され、少なくとも、水分で膨張したろ紙が収納で
きる形の貫通した穴を有する。

【００３１】本発明のユニットは、上記プレート３と、
上記多孔性膜３６とからなる。本発明の装置は、該ユニ
ットを１または複数個備え、かつ上記プレート３と上記
多孔性膜３６がそれぞれ離脱可能に設けられた支持体
（プレート固定板２５、下面プレート４２、マニホール
ド２８、パッキン２６など）からなる（図８参照）。

【００３２】吸引機構５０は、固相廃液管４４に接続す
る吸引溝４８と、オーバーフロー廃液管４５に接続する
排水溝３２とからなる（図８参照）。吸引溝４８は、ウ
ェル３１中の液体を、ウェル３１の底である多孔性膜３
６を通過させて、底部方向に吸引するために設けられ
る。排水溝３２は、ウェル３１から溢れた廃液を、吸引
排出するために設けられる。吸引機構５０による吸引圧
は、多孔性膜３６の孔の大きさや、該膜の強さを考慮に
入れて決められるが、通常約５０〜１０００ｍｍＨｇで
あり、約１００〜３００ｍｍＨｇが好ましい。

【００３３】具体的には、空圧源８の陰圧出口に設けら
れた圧力調整具（明記せず）により、吸引配管５に陰圧
が供給され、その陰圧は吸引バルブ４の開閉によってコ
ントロールされる。吸引配管５は吸引バルブ４を経て固
相廃液管４４から吸引溝４８へ到達する。また吸引配管
５の途中から分岐した別経路（明記せず）は、オーバー
フロー廃液管４５を経て排水溝３２に到達する。吸引構
４８によりウェル３１の底部から吸引された液体と、排
水溝３２により集められたオーバーフロー廃液は、吸引
配管５を通じて廃水タンク７へ集められる（図４参
照）。

【００３４】支持体は、さらに、本発明の装置を構成す
る際に必要な他の部材、例えばプレート固定板２５、マ
ニホールド２８、マニホールドシャシー４３等を備えて
もよい（図１、２、４、８参照）。

【００３５】マニホールド２８は、マニホールドシャシ
ー４３に備えられるのが好ましい（図８参照）。マニホ
ールドシャシー４３はマニホールド２８を固定し、固相
廃液管４４やオーバーフロー廃液管４５を収納するのに
用いられる。

【００３６】本発明の試料調製装置１は、上記ユニット
が１または複数個備えられるが、さらに、多孔性膜３６
用の蛍光画像解析装置、吸光度測定装置、散乱光強度測
定装置、透過光強度測定装置等の測定装置、多孔性膜３
６を乾燥するための装置、プレート３等を洗浄するため
の装置、プレート３に試料液等を注入するためのマルチ
ピペッター、自動ピペッターなどを付加することができ
る（図示せず）。本発明の試料調製装置１が上記のよう
な装置を含むことにより、本発明の装置は試料測定の自
動化を実現することが可能であり、さらに多項目につい
ての多数の試料の測定も可能である。

【００３７】本発明による装置を用いるには、液体供給
部２４を機械で自動的に調節して行う。具体的には、図
４において示すように、洗浄液タンク１４と純水タンク
１５とを切り替えるためのタンク切替バルブ１３によ
り、該タンクのいずれかからギアポンプ１２によって液
体供給部２４へ自動的に洗浄液または純水を供給する。

【００３８】ギアポンプ１２による送液速度は、スイッ
チパネル１１にある速度変更ダイヤル（図示せず）によ
って調整する。また、スイッチパネル１１にあるバルブ
ユニット９のモード切替ダイヤル（図示せず）によって
チャンネルを切り替えることで、任意のプレートに独立
して送液するモードや、端のプレート３から切り替えて
全プレート３に一定時間だけ洗浄液を送液するモードが
ある。これらの切り替えは、電磁弁ユニット１０をシー
ケンスプログラムによって制御することで実現すること
ができる。この電磁弁ユニットとバルブユニットを切替
える力は、空圧源８によって供給される。

【００３９】また、洗浄液を液体供給配管６に供給した
後の塩析を防ぐために、終了処理モードとして、液体供
給配管６内部や、液体供給部２４を純水で通すための終
了モードも備えるのが好ましい。終了モードは、タンク
切替バルブの切り替えによって調節される。逆に装置の
使用前には、終了処理モードで供給された純水が液体供
給配管６などに溜まっているため、それを洗浄液に置き
かえるためのスタートモードを備えるのが好ましい。

【００４０】ウェル３１に試料液等や、本発明の装置を
用いて測定を行うために必要な液体を注入し、一定時間
放置する際には、ウェル３１内の溶媒の蒸発を防止する
ため、および外部からの異物の混入を防止するために、
蒸発防止カバー３０およびカバー３３でプレート３また
は支持体の全体を覆うのが好ましい（図２参照）。

【００４１】本発明の装置は、以下のように使用するこ
とができる。試料調製装置のウェル３１中に、試料液等
を注入し、吸引機構５０を用いてウェル３１の底部方向
に陰圧で吸引して、ウェル３１から試料液等を除去す
る。その結果、多孔性膜３６上には、試料液等中の測定
されるべき物質であるタンパク等が固相形成される。ウ
ェル３１の底部の多孔性膜３６上に測定されるべき物質
が固相形成された、試料調製装置のウェル３１に、該装
置の液体供給部２４より、その物質と特異性を有する抗
体を含む検出用試薬液を注入し、所定の条件下で放置す
ることによりウェル３１中で抗原抗体反応等を進行させ
る。反応後、上記のように、該装置の吸引機構５０を用
いてウェル３１から検出用試薬液を除去する。また、ウ
ェル３１内を洗浄する際には、該装置の液体供給部２４
により洗浄液等を複数のウェル３１に注入し、該装置の
吸引機構５０を用いてウェル３１から除去する。このよ
うに、本発明の装置を用いると、短時間にかつ容易に多
並列的に、プレート３中の複数のウェル３１から液体を
除去することができ、検出用試薬液や洗浄液などを供給
することができる。

【００４２】本発明による装置は、詳細には、以下の工
程：（１）組織もしくは細胞を可溶化させて調製した試料液
を、１以上のウェルを有し、ウェルの底部に疎水性多孔
性膜を配置したプレート中のウェルに注入し、プレート
の疎水性多孔性膜側から吸引することにより試料液中の
タンパクを該膜に固相形成させ、（２）標識化されてい
るか、または標識との反応性部位を有し、かつ測定目的
のタンパクと特異性を有する第１抗体の溶液を該ウェル
中に注入し、測定目的のタンパクと結合させ、（３）洗
浄処理を行い未反応第１抗体を除去し、（４）標識化さ
れていない第１抗体を用いた場合には、標識との反応性
部位に標識を作用させて該抗体を標識化し、（５）測定
目的のタンパクに結合した標識の量を測定し、（６）予
め作製した検量線をもとに、該標識の量を用いて、目的
タンパク量を算出することからなるタンパク量の測定法
において好適に用いることができる。

【００４３】本発明の装置は、より詳細には、以下の方
法に用いることができる。ヒト患部から採取した可溶化
試料６人分に対してタンパクの定量を実施した。図５の
プロトコル参照。（１）スイッチパネル１１内のモードスイッチのスター
トモードスイッチを押し、配管内部に溜まっていた純水
を洗浄液に置き換えた。（２）トランスファーバッファー中に、ＰＶＤＦメンブ
レン（３５１×６１ｍｍ）を浸漬し、初期化した。ＰＶ
ＤＦメンブレンは２枚用意した。また、ＰＤＶＦメンブ
レンの裏側にろ紙を用いるため、ろ紙（５８×３０ｍ
ｍ、厚さ０．８ｍｍ）を３６枚、同じトランスファーバ
ッファー中に浸漬した。（３）プレート固定板２５の上に１つのウェルの底面積
が一定（２４ｍｍ²）の６行３列の１８のウェルから構
成されるプレートを９つ設置し、ＣＰＤＩＢ（Crude Pr
otein Direct Immobilization）セット２とした。セッ
トは２つ用意した。マニホールド２８上の所定の位置
に、ろ紙を２枚重ね、その上に初期化したＰＶＤＦメン
ブレンを載せ、その上からセットを設置した。セット
は、締付けねじ２９をトルクドライバーを用いて約０．
２Ｎｍのトルクで均一に締付けてマニホールド２８に固
定した。（４）締付けねじでセットを締付けると、ろ紙に含まれ
ていたローディングバッファーが、プレートのウェル内
に浮き上がってくるため、１つのプレートにつき、空圧
源８により約２００ｍｍＨｇの陰圧で約１０秒間吸引し
た。（５）その後、吸引配管５の中に残った残圧を取り去る
ために、吸引配管５の途中に設けた弁（図示せず）によ
り大気解放した。（６）１つのプレート中に、図６のようにウェルを割り
当て、スタンダード領域（定量目的タンパクの標品の所
定の濃度勾配の溶液を注入）１６の６ウェルと試料領域
（試料を注入）１７〜２２の１２ウェル（１試料につき
２ウェル）とした。（７）ウェルに注入された溶液を、１つのプレートにつ
き空圧源８により２００ｍｍＨｇの陰圧で１５秒間吸引
した。（８）スイッチパネル１１をオートモードにセットし、
洗浄液タンク１４から洗浄液を、液体供給配管６を通じ
て液体供給部２４まで流した。オートモードによりプレ
ートを切り替えながら、プレート中の全てのウェルに洗
浄液を満たした。洗浄液が各プレートに到達する様子を
図示したのが、図１（ｂ）の矢印である。（９）ウェルに洗浄液が満たされたプレートから順番
に、約５００ｍｍＨｇの陰圧で約３０秒／プレートの時
間、吸引機構により洗浄液をウェルから吸引した。（１０）目的タンパクと特異的に結合する蛍光標識した
抗体を、定量項目に対応したプレートへの量で分注し、
約３０分間放置した。（１１）ウェルに注入された溶液を、１つのプレートに
つき空圧源８により２００ｍｍＨｇの陰圧で１５秒間吸
引した。（１２）１５分間、多孔性膜３６を取り出し、乾燥機中
で乾燥させた。（１３）蛍光読み取り装置により多孔性膜３６の各ウェ
ルに相当する箇所に固定されたタンパクを標識した標識
物質からの蛍光強度を測定した。

【００４４】

【発明の効果】本発明に従えば、多数のウェルを含む容
器で、簡易に短時間で検出用試薬液および洗浄液等の注
入および液体の排出処理を行える試料調製装置が提供さ
れる。本発明の装置を用いることにより、多並列的に多
数のウェルを処理することが可能であるので、多数の項
目の試料調製を一度に行うことができ、試料調製処理の
自動化も可能である。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明の装置のユニットの例を示す概略図であ
る。

【図２】本発明の装置の例を示す概略図である。

【図３】本発明の装置を用いて得た多孔性膜上の蛍光画
像の例を示す図である。

【図４】本発明の複数のユニットを含む装置の例を示す
概略図である。

【図５】本発明の装置を用いたタンパク定量法の実施を
説明するプロトコールである。

【図６】本発明で用いたプレートへのスタンダードと試
料の分注の配置を示す図である。

【図７】本発明の装置の例の構成を示す概略図である。

【図８】本発明の装置の例を示す正面および側面断面図
である。

【図９】本発明の装置の例を示す断面図である。

【符号の説明】

１試料調製装置２セット３プレート４吸引バルブ５吸引配管６液体供給配管７廃水タンク８空圧源９バルブユニット１０電磁弁ユニット１１スイッチパネル１２ギアポンプ１３タンク切替バルブ１４洗浄液タンク１５純水タンク１６スタンダード領域１７試料１１８試料２１９試料３２０試料４２１試料５２２試料６２３バックグラウンド２４液体供給部２５プレート固定板２６パッキン２７ろ紙２８マニホールド２９締付けねじ３０蒸発防止カバー３１ウェル３２排水溝３３カバー３４送液溜め３５液体誘導流路３６多孔性膜３７位置決めピン３８溝３９排水用誘導管４０堰４１排水用誘導管の排水口４２下面プレート４３マニホールドシャシー４４固相廃液管４５オーバーフロー廃液管４６多孔性膜固定用爪４７オーバーフロー廃液用溜め４８吸引溝４９接続口５０吸引機構

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続きＦターム(参考） 2G045 AA40 BB14 DA36 FB03 FB07 FB12 GC15 2G058 AA09 BA07 CA01 CC02 CC05 CC17 CC19 EA11 EA14 EB11 FB12 GA01

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】複数の貫通されたウェルを有し、一端に
液体供給部が設けられたプレートと、ウェルの底部に配
置された多孔性膜とからなる１ユニットを１または複数
個備え、プレートと多孔性膜とがそれぞれ離脱可能に設
けられた支持体と、液体供給部からウェルに供給された液体をウェルの底部
方向に吸引するための吸引機構とからなる試料調製装
置。
【請求項２】液体供給部が、一端に液体供給配管に接
続するための接続口を有し、他端に複数の液体誘導流路
を備える請求項１に記載の試料調製装置。
【請求項３】液体供給部が、さらに接続口近傍に送液
溜めを備える請求項2に記載の試料調製装置。
【請求項４】オーバーフロー用液溜めが、プレートの
周囲の全部または一部に備えられる請求項１〜３のいず
れか一つに記載の試料調製装置。
【請求項５】オーバーフロー用液溜めが、排水用誘導
管をオーバーフロー廃液用溜めの底に備える請求項４に
記載の試料調製装置。
【請求項６】プレートが、ウェルとウェルの間に溝を
備える請求項１〜５のいずれか一つに記載の試料調製装
置。
【請求項７】プレートが、さらに全周囲に堰を備える
請求項１〜６のいずれか一つに記載の試料調製装置。