JP2941960B2 - 殺線虫剤 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は殺線虫剤に関し、詳しく
は幼線虫移行症の原因となるトキソカラ属の線虫を殺虫
することを目的とする殺線虫剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】蛔虫病等に代表される寄生虫病は、結
核，脳卒中と共にかっては日本の三大病の一つと言われ
ていたが、現在ではすっかり影をひそめている。しか
し、特に熱帯圏においては、未だ我々の見たこともない
寄生虫による疾患が多く見られる。我が国においても、
それらの諸国との交流が盛んになるにつれ、また最近の
食生活におけるグルメブームにのって今までとは異なっ
たタイプの蠕虫疾患が見られるようになった。さらに、
ペット飼育の流行に伴ってペットの寄生虫を原因とする
幼線虫移行症（あるいは幼虫移行症；larva migrans)と
呼ばれる新しい寄生虫病が出現するようになった。

【０００３】幼線虫移行症は、トキソカラ症（toxocari
asis）とも呼ばれ、多くの場合、トキソカラ属の線虫で
あるイヌ蛔虫（Toxocara canis),ネコ蛔虫（T.cati）等
の幼虫がイヌ，ネコ等の動物からヒトに寄生して起こる
病気である。ヒトに寄生した幼虫は、速やかに腸管壁か
ら侵入し肝臓を通り肺に移行する。その後、さらに血流
にのって脳，眼，全身の筋肉等に移行し、それ以上成長
せずに幼虫のまま長期にわたり組織内を動き回り、発
熱，全身倦怠，栄養障害，咳，ジンマシン、時には肺炎
様の症状やてんかん様の発作を起こす。この幼虫が眼に
移行した場合は、視力障害や硝子体混濁をおこす。ま
た、稀ではあるが、髄膜炎を起こして死亡する例もあ
る。

【０００４】最近、免疫血清学的な診断法が開発され、
比較的容易に診断ができるようになるにつれ、この幼線
虫移行症の報告例が増えており、問題になりつつある。
ところが、この病気に対する有効な薬剤は現在全くな
く、幼線虫移行症に対する有効な予防・治療剤の開発が
望まれている。

【０００５】本発明者は、トキソカラ属の線虫を殺虫
し、幼線虫移行症の原因を取り除き、有効に予防もしく
は治療することが可能な殺線虫剤の開発を進めてきた。
すなわち、本発明者は、香料や香辛料は安全性が高く、
それ本来の匂いや呈味の活用以外にも抗菌活性・抗酸化
活性等の活性を有するものが多く様々な目的で用いられ
るようになってきていることに着目し、その中から、ト
キソカラ属の線虫に対し有効な殺線虫活性を有するもの
を見出そうと研究を重ねた。香料や香辛料が、寄生虫の
感染の防止に役割を果たしているとの報告は今まで見当
たらなかったが、これは、これらの寄生虫に対する殺線
虫活性を測定する容易な方法が開発されなかったことに
よると考えられる。

【０００６】そこで、本発明者は、まず、かかる測定の
ために必要な線虫の培養法の開発を行った。その結果、
幼線虫移行症の主要な病原虫と考えられているイヌ蛔虫
（Toxocara canis）の第２期幼虫は、市販のEagle-ＭＥ
Ｎ培地（日水製薬株式会社製）で容易に培養でき、更に
４００μｍ以上には成長せず、長期にわたって安定して
培養できることを見出した。また、この幼虫は薬物に対
する抵抗性が非常に強く、従来より知られているサント
ニンやカイニン酸等の市販の駆虫剤のほとんどがこの幼
虫に対して殺線虫的に働かないことを確認し、この幼虫
を殺すことができる化合物は、他の種類の寄生虫をも殺
すことができると予想した。すなわち、この幼虫は、有
効な殺線虫剤の開発のスクリーニングに優れていると考
えた。こうして、このイヌ蛔虫の培養幼虫を検体とし
て、香料や香辛料の殺線虫活性スクリーニングを行った
ところ、オークモス アブソリュート〔オークモス（Ev
ernia prunastri)及びトリーモス(E. furfuracea) のヘ
キサン抽出物のメタノール可溶部〕等に強い殺線虫活性
があることを見出し、既に報告した〔生薬学雑誌，第４
４巻，第３号，第１８３〜１９５頁（１９９０年）〕。

【０００７】しかしながら、その成分が何であるかは未
だ報告されていない。また、オークモス アブソリュー
トは非常に高価であり、それ自身を有効成分とする殺線
虫剤は、工業的に有利とは言い難い。よって、より安価
に工業的に有利に得ることができるものの開発が必要に
なってきた。尚、本発明の殺線虫剤において有効成分と
して含有される一般式(1)

【０００８】

【化２】

【０００９】（式中、Ｒは炭素数４〜９のアルキル基を
示す。）で表わされる化合物のうち、Ｒが炭素数４〜８
のアルキル基である化合物は、特公昭４８−１７０７４
号公報，特公昭４８−１７０７６号公報及び特公昭４８
−１７０７７号公報において、抗乳酸菌活性，抗酢酸菌
活性，抗酵母活性を有することが報告されているが、線
虫に対する活性の報告は未だ見当たらない。Ｒが炭素数
９のアルキル基である化合物については、特開昭６３−
４１４４４号公報で新規化合物として挙げられており、
その用途は、感熱感光紙に含有させる顕色剤としての記
載があるのみである。また、一般式(1) の化合物と類似
の骨格を有する下記一般式(2)

【００１０】

【化３】

【００１１】 （式中、Ｒ´は炭素数２〜１１のアルキル基を示す。）
で表される化合物について、特開昭５３−５９０２６号
公報に殺線虫組成物の有効成分として挙げられている
が、この化合物は植物寄生性の土壌線虫を殺虫するもの
であり、動物に寄生する線虫をも殺虫するという記載は
ない。

【００１２】

【発明が解決しようとする課題】前述のように、幼線虫
移行症に対する有効な薬剤は今まで存在しなかった。そ
こで、本発明はイヌ，ネコ等の動物に寄生するトキソカ
ラ属の線虫を殺虫し、幼線虫移行症の原因を取り除き、
有効に予防または治療することを目的とするもので、安
価で工業的に有利に得ることができる殺線虫剤を提供す
るものである。

【００１３】

【課題を解決するための手段】前記課題に鑑み、本発明
者は、前述のオークモスアブソリュートの活性成分につ
いて検討を重ね、この活性の主成分が下記化合物の２，
４−ジヒドロキシ−３，６−ジメチル安息香酸メチルエ
ステル(3），３−ホルミル−２，４−ジヒドロキシ−６
−メチル安息香酸エチルエステル(4）及び５−クロロ−
３−ホルミル−２，４−ジヒドロキシ−６−メチル安息
香酸エチルエステル(5）であることを確認した。

【００１４】

【化４】

【００１５】これら化合物のイヌ蛔虫に対する最小死滅
濃度（Minimumlethal concentration; ＭＬＣ）は、そ
れぞれ４１０μＭ，１００μＭ，１１０μＭであった。
これらの事実に基づき、種々のヒドロキシ安息香酸を合
成し、殺線虫活性を測定したところ、下記一般式(1)

【００１６】

【化５】

【００１７】 （式中、Ｒは炭素数４〜９のアルキル基を示す。）で表
される２，４−ジヒドロキシ安息香酸のアルキルエステ
ルが高い殺線虫活性を有していることを見出し、本発明
を完成した。

【００１８】すなわち、本発明は上記一般式(1) で表さ
れる化合物を含有することを特徴とする殺線虫剤を提供
するものである。

【００１９】本発明の殺線虫剤において有効成分として
含有される一般式(1）の化合物（以下、化合物(1）とい
う。）は、合成によって容易に得ることができる。例え
ば、２，４−ジヒドロキシ安息香酸を相当するアルコー
ル（例えば、一般式(1）のＲがｎ−ブチル基である場合
は、ｎ−ブタノール）に溶解し、室温下で塩酸ガスを通
した後、５〜１０時間加熱還流し、反応後溶媒を留去し
て得られる残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー
によって精製することによって得られる。また、２，４
−ジヒドロキシ安息香酸，炭酸水素ナトリウム及び相当
するアルキルブロマイド（例えば、一般式(1）のＲがｎ
−ヘプチル基である場合は、ｎ−ヘプチルブロマイド）
をＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドに溶解し、約５０℃で
６〜１０時間かく拌し、精製することによっても得るこ
とができる。

【００２０】これらの化合物(1）の安全性については、
前述の特公昭４８−１７０７４号公報に記載されている
ように、国連の世界保健機構（ＷＨＯ）や食糧農業機構
（ＦＡＯ）により評価されているパラオキシ安息香酸エ
ステル類とほぼ同様の代謝機構によって代謝されると考
えられ、安全性に問題はないと言える。

【００２１】実際に、本発明の化合物(1) において一般
式(1) のＲがｎ−オクチル基である場合につき、その急
性毒性を調べ、安全性を確認した。すなわち、１６匹の
ｄｄＹマウス（４週令、雄、体重２０〜３０ｇ）に被検
化合物を２g /kg 、１日１回の割合で５日間にわたり経
口投与した。合計投与量が１０g /kg に至っても、いず
れのマウスも健常であり、異常は見られなかった。した
がって、ＬＤ₅₀は２g/kg 以上であり、毒性が極めて弱
いことが明らかである。

【００２２】こうして得られる化合物(1）は、イヌ，ネ
コ等の動物に対して、あるいはヒトに対して散剤，錠
剤，カプセル剤，顆粒剤，液剤等の経口投与剤；皮下，
筋肉若しくは静脈注射剤等いずれの方法によっても投与
することができる。これらの製剤化は、公知の方法によ
って行うことができる。すなわち、経口投与用の散剤，
錠剤，カプセル剤又は顆粒剤は、化合物(1）をデンプ
ン，乳糖，マンニトール等の賦形剤；カルボキシメチル
セルロースナトリウム，ヒドロキシプロピルセルロース
等の結合剤；結晶セルロース，カルボキシメチルセルロ
ースカルシウム等の崩壊剤；タルク，ステアリン酸マグ
ネシウム等の滑沢剤；その他必要に応じて湿潤剤等を適
宜組み合わせて処方することにより製造することができ
る。また、経口用の液剤は、水性または油性乳濁剤溶
液，シロップ剤等にすればよく、ソルビットシロップ，
メチルセルロース，ヒドロキシエチルセルロース等の乳
化補助剤；レシチンソルビタンモノオレート，ポリオキ
シエチレン硬化ヒマシ油等の乳化剤；その他防腐剤、保
存剤、安定化剤、香料等を適宜配合することができる。
注射剤は、油溶液，乳化液，水溶液のような形態にすれ
ばよく、これらの溶剤は通常用いられる乳化剤，安定化
剤を適宜加えることができる。その他、化合物(1）の適
量を通常の飼料に混ぜて動物に摂取させることも可能で
ある。

【００２３】尚、化合物(1）は、１種類のみを配合して
殺線虫剤としてもよく、あるいは２種類以上を混合して
配合し殺線虫剤としてもよい。

【００２４】こうして得られる本発明の殺線虫剤は、イ
ヌ，ネコ等の動物に適用してヒトの疾病を予防する目的
で用いたり、また疾病にかかったヒトに適用して治療の
目的で用いることができる。

【００２５】本発明の殺線虫剤の投与量は動物の種類，
年令，体重等、あるいは疾病の程度によって異なるが、
経口投与の場合、化合物(1）の量が約５〜１０mg／kg、
非経口投与の場合、２〜４mg／kg程度となるように１日
１回乃至数回に分けて投与するのが好適である。

【００２６】

【実施例】次に、化合物(1）の合成例，化合物(1）の殺
線虫活性試験例及び実施例として製剤例を掲げ本発明を
具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるもの
ではない。

【００２７】 合成例１ ２，４−ジヒドロキシ安息香酸０．２ｇをｎ−ブタノー
ル５ｍｌに溶解し、室温下で塩酸ガスを通した後、５時
間加熱還流を行った。反応後、溶媒を留去して得られた
残渣をシリカゲル〔ＢＷ−８２０ＭＨ（富士デヴィソン
化学株式会社製）、以下同様〕カラムクロマトグラフィ
ーによって精製し、目的とする２，４−ジヒドロキシ安
息香酸ブチルエステル（化合物(1）−１）を得た。同様
にして、ｎ−ペンタノール，ｎ−ヘキサノールを用いて
反応を行うことにより、２，４−ジヒドロキシ安息香酸
ペンチルエステル（化合物(1）−２）及び２，４−ジヒ
ドロキシ安息香酸ヘキシルエステル（化合物(1）−３）
を得た。また、同様にして、比較化合物として２，４−
ジヒドロキシ安息香酸メチルエステル（比較化合物−
２）、２，４−ジヒドロキシ安息香酸エチルエステル
（比較化合物−３）及び２，４−ジヒドロキシ安息香酸
プロピルエステル（比較化合物−４）を合成した。これ
らの化合物の融点〔ミクロ融点測定装置（株式会社柳本
製作所製）、以下同様〕を後記第１表にまとめて記す。

【００２８】上記した化合物の構造の確認は、核磁気共
鳴スペクトル（ ¹Ｈ−ＮＭＲ）〔ＪＮＭ ＧＸ−４００
型装置（日本電子株式会社製）、４００ＭＨｚ，溶媒＝
ＣＤＣｌ₃ ，内部標準物質＝テトラメチルシラン、以下
同様〕及び質量スペクトル（ＭＳ）〔Ｍ−８０型装置
（株式会社日立製作所製）、以下同様〕を測定すること
によって行った。尚、収率はいずれの化合物においても
７０％以上であった。

【００２９】 合成例２ ２，４−ジヒドロキシ安息香酸０．２ｇをＮ，Ｎ−ジメ
チルアセトアミド３ｍｌに溶解し、炭酸水素ナトリウム
（２モル等量）を炭酸ガスの発泡に注意しながら加え、
更にｎ−ヘプチルブロマイド（１モル等量）を加えて５
０℃で６時間加熱かく拌した。反応混合物を水に注ぎ、
ジエチルエーテルで抽出しエーテル層を食塩水で洗浄し
た後、乾燥・濃縮を行いシリカゲルカラムクロマトグラ
フィーによって精製し、目的とする２，４−ジヒドロキ
シ安息香酸ヘプチルエステル（化合物(1) −４）を得
た。同様にして、ｎ−オクチルブロマイド，ｎ−ノニル
ブロマイドを用いて反応を行うことにより、２，４−ジ
ヒドロキシ安息香酸オクチルエステル（化合物(1) −
５）及び２，４−ジヒドロキシ安息香酸ノニルルエステ
ル（化合物(1) −６）を得た。また、同様にして、比較
化合物として２，４−ジヒドロキシ安息香酸デシルエス
テル（比較化合物−５）、２，４−ジヒドロキシ安息香
酸テトラデシルエステル（比較化合物−６）を合成し
た。これらの化合物の融点は後記第１表にまとめて記
す。

【００３０】また、これらの化合物の構造の確認は、 ¹
Ｈ−ＮＭＲ及びＭＳを測定することによって行った。
尚、収率はいずれの化合物においても７０％以上であっ
た。

【００３１】試験例合成例１及び合成例２で得た化合物
(1) −１〜化合物(1) −６（本発明の殺線虫剤において
有効成分として含有される化合物），比較化合物１〜６
（一般式(1) においてＲが水素原子あるいは炭素数が化
合物(1) と異なるアルキル基である化合物）及び比較化
合物７（４−ｎ−ヘキシルレゾルシノール；化合物(1)
と類似骨格を有し、殺線虫活性を有することが知られて
いる化合物。ただし、イヌ蛔虫についての殺線虫活性は
報告されていない。また、最近は胃粘膜刺激があるとさ
れ、使用されていない。米国特許第４，０９３，６６７
号参照）について殺線虫活性を調べた。

【００３２】イヌ蛔虫（Toxocara canis）の第２期幼虫
をEagle-ＭＥＮ培地（日水製薬株式会社製）で培養し、
４００μｍ程度になったものを１検体につき１群２０匹
として２群用意し、各検体をジメチルスルホキシド（Ｄ
ＭＳＯ）に溶解した。次いで、これをＤＭＳＯの最終濃
度が２％ｖ／ｖとなるように生理食塩水で稀釈した溶液
に加え、３７℃で培養し、幼虫の様子を培養開始後１時
間，３時間，６時間，２４時間目に顕微鏡で観察した。

【００３３】検体の殺線虫活性は相対運動性値（ＲＭ
値）で評価した。すなわち、観察時の幼虫の状態を下記
の基準でランク分けし、各ランクに属する幼虫の数を数
え、この数と各ランクの活動係数(n) から下記の式(1),
(2）を用いてＲＭ値を計算した。ＲＭ値が小さいほど活
性が強く、幼虫が完全に死ぬとこの値は０になる。

【００３４】 イヌ蛔虫幼虫の状態 活動係数(n) 虫体全体を動かし、運動をしているもの ３ 虫体の一部を観察時間内に僅かに動かしているもの ２ 全く虫体を動かさないが、死亡していると判断しかねるもの １ 死亡しているもの ０

【００３５】

【式１】

【００３６】また、２４時間培養したときにＲＭ＝０と
なる最小の濃度を最小死滅濃度(Minimum lethal concen
tration;ＭＬＣ）とし、以上の結果をまとめて第１表に
示した。

【００３７】

【表１】

【００３８】第１表から明らかなように、本発明の殺線
虫剤において有効成分として含有される化合物は、イヌ
蛔虫の幼虫に対して非常に強い殺線虫活性を示した。こ
れに比べ、比較化合物１〜６は、それほど強い活性を示
さなかった。

【００３９】

【００４０】上記成分を常法に従って混和し、６０メッ
シュの金網を通して粒度を調整した後、打錠機を用いて
錠剤を１個製造した。この錠剤は、体重１０kgの犬の場
合、１日あたり１個、体重５０kgの人の場合、１日あた
り４〜６個を経口投与する。

【００４１】

【００４２】上記成分を十分に混和し、６０メッシュの
金網を通して粒度を調整した後、ゼラチンカプセルに充
填し、カプセル剤を１個製造した。このカプセル剤は、
体重１０kgの犬の場合、１日あたり１個、体重５０kgの
人の場合、１日あたり４〜６個を経口投与する。

【００４３】

【００４４】上記処方に従い、常法により注射剤を調製
し、１アンプル５mlずつ充填した。

【００４５】

【００４６】上記処方によって得られる基本飼料に大豆
油１０ｇ，化合物(1) −４を２００mg及び化合物(1) −
５を１５０mg添加、混合し、加熱加圧押出機により成形
した。この飼料は約２００ｇを１日１回摂取させる。

【００４７】

【００４８】上記処方によって得られる基本飼料に大豆
油１０ｇ，化合物(1) −６を４００mg添加、混合し、加
熱加圧押出機により成形した。この飼料は約１００ｇを
１日１〜数回に分けて摂取させる。

【００４９】

【発明の効果】本発明の殺線虫剤は、イヌ，ネコ等の動
物に寄生するトキソカラ属の線虫を殺虫することによっ
て、トキソカラ属の幼線虫が動物からヒトに寄生して起
こる幼線虫移行症を効果的に予防もしくは治療する優れ
たものである。

Claims (1)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 一般式(1) 【化１】 （式中、Ｒは炭素数４〜９のアルキル基を示す。）で表
   される化合物を含有することを特徴とする殺線虫剤。