JP2910819B2 - 強酸性土壌を改良する微生物及び方法 - Google Patents
強酸性土壌を改良する微生物及び方法Info
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、強酸性土壌を改良する
新規微生物、その微生物の培養増殖方法及び該新規微生
物を利用した酸性土壌のＡｌ低減方法に関する。
新規微生物、その微生物の培養増殖方法及び該新規微生
物を利用した酸性土壌のＡｌ低減方法に関する。
【０００２】酸性雨の広がりやそのｐＨの低下は、森
林、湖沼、農耕地等に大きなダメージを与え、その防禦
は地球的規模において現在非常に重要な課題である。酸
性雨の植生に対する被害としては、雨の中に溶けている
ＳＯ4、ＮＯ3イオン等が葉や幹に傷害を与える直接的な
ものと、直接土壌中に進入し、ｐＨを低下させ、害を与
える間接的なものとがある。
林、湖沼、農耕地等に大きなダメージを与え、その防禦
は地球的規模において現在非常に重要な課題である。酸
性雨の植生に対する被害としては、雨の中に溶けている
ＳＯ4、ＮＯ3イオン等が葉や幹に傷害を与える直接的な
ものと、直接土壌中に進入し、ｐＨを低下させ、害を与
える間接的なものとがある。
【０００３】酸性雨等によって土壌が酸性化すると水素
イオンと共にＡｌイオンが土壌中に溶出し、活性化した
Ａｌイオンが植生に害をもたらす（環境庁水質保全局土
壌農薬課監修：酸性雨 土壌、植生への影響、酸性土壌
とその農業利用 田中 明編博友社（１９８４））。土
壌の酸性化は、ｐＨが、特に５以下になると、土壌中の
ＡｌやＭｎがイオン化、可溶化して、このＡｌとリン酸
とが結合するリン酸の不溶化やＣａ、Ｍｇ、Ｍｎ等の流
亡溶脱をもたらし、植生に甚大な被害をもたらす（Marc
hner H. Mineral Mutrition of Higher Plants, p484-4
98 Academic Press (1086), Robson A.D. Soil Acidity
and Plant Growth, p139-165, Academic Press (198
9)）。
イオンと共にＡｌイオンが土壌中に溶出し、活性化した
Ａｌイオンが植生に害をもたらす（環境庁水質保全局土
壌農薬課監修：酸性雨 土壌、植生への影響、酸性土壌
とその農業利用 田中 明編博友社（１９８４））。土
壌の酸性化は、ｐＨが、特に５以下になると、土壌中の
ＡｌやＭｎがイオン化、可溶化して、このＡｌとリン酸
とが結合するリン酸の不溶化やＣａ、Ｍｇ、Ｍｎ等の流
亡溶脱をもたらし、植生に甚大な被害をもたらす（Marc
hner H. Mineral Mutrition of Higher Plants, p484-4
98 Academic Press (1086), Robson A.D. Soil Acidity
and Plant Growth, p139-165, Academic Press (198
9)）。
【０００４】植物に対する酸性障害の主因はＡｌイオン
にあり、一般に植物根は溶液中のＡｌイオンが１ｐｐｍ
でも害がもたらされる。また、このＡｌイオンは多くの
微生物の活性に対しても害をもたらす。
にあり、一般に植物根は溶液中のＡｌイオンが１ｐｐｍ
でも害がもたらされる。また、このＡｌイオンは多くの
微生物の活性に対しても害をもたらす。
【０００５】本発明の新規微生物は、酸性化した土壌中
のＡｌを低減し、自然生態系を保持しつつ改良するのに
利用できる。また、本発明の方法は、強酸性且つ高Ａｌ
の環境下、生育する微生物を分離し、これを土壌、ぬか
くず等の適当な媒体と共に目的土壌中に施用して土壌の
酸性を改善するのに利用できる。
のＡｌを低減し、自然生態系を保持しつつ改良するのに
利用できる。また、本発明の方法は、強酸性且つ高Ａｌ
の環境下、生育する微生物を分離し、これを土壌、ぬか
くず等の適当な媒体と共に目的土壌中に施用して土壌の
酸性を改善するのに利用できる。
【０００６】
【従来の技術】一般に、先進国の農耕地では石灰等の施
用によって土壌酸性を矯正するという対策が講じられて
いる。しかしながら、その他の地球上の広大な自然生態
系や発展途上国の耕地においては有効な方法がない。こ
のため、土壌中に多量なＡｌを含む環境に適応若しくは
好む土壌微生物を土壌中で生育させ、土壌を改良する方
法が期待されている。しかしながら、従来、強酸性且つ
高Ａｌの環境で好適に生育する微生物はＡｌ腐食菌（青
柳茂雄、芳賀実、長谷川喜一郎 アルミニウム腐食菌の
検出法）以外には知られていなかった。
用によって土壌酸性を矯正するという対策が講じられて
いる。しかしながら、その他の地球上の広大な自然生態
系や発展途上国の耕地においては有効な方法がない。こ
のため、土壌中に多量なＡｌを含む環境に適応若しくは
好む土壌微生物を土壌中で生育させ、土壌を改良する方
法が期待されている。しかしながら、従来、強酸性且つ
高Ａｌの環境で好適に生育する微生物はＡｌ腐食菌（青
柳茂雄、芳賀実、長谷川喜一郎 アルミニウム腐食菌の
検出法）以外には知られていなかった。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の目的
は、強酸性且つ高Ａｌの環境下、生育する微生物を分離
すること、該微生物を適当な培地で培養増殖すること及
びこれを適当な媒体と共に目的土壌中に適用して土壌の
酸性を改善する微生物及びその方法を提供することにあ
る。
は、強酸性且つ高Ａｌの環境下、生育する微生物を分離
すること、該微生物を適当な培地で培養増殖すること及
びこれを適当な媒体と共に目的土壌中に適用して土壌の
酸性を改善する微生物及びその方法を提供することにあ
る。
【０００８】
【課題を解決するための手段】本発明者らは上記課題を
解決すべく鋭意研究を行った結果、酸性茶園土壌中から
Ａｌイオンの高濃度下で生育する微生物を初めて分離し
た。これはFlavobacterium sp. でＳＴ−３９９１株と
命名した。この菌は、Ａｌ濃度１００ｐｐｍ下で最も生
育が盛んであり、生育とともに菌体内及び外にある種の
ポリマーを生産し、これが土壌中のＡｌを吸収・吸着さ
せ、ｐＨを上昇させる。 また、この菌は好Ａｌ性を示
す。本菌は、受託番号 ＦＥＲＭ Ｐ−１４０７２ と
して工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託された。
解決すべく鋭意研究を行った結果、酸性茶園土壌中から
Ａｌイオンの高濃度下で生育する微生物を初めて分離し
た。これはFlavobacterium sp. でＳＴ−３９９１株と
命名した。この菌は、Ａｌ濃度１００ｐｐｍ下で最も生
育が盛んであり、生育とともに菌体内及び外にある種の
ポリマーを生産し、これが土壌中のＡｌを吸収・吸着さ
せ、ｐＨを上昇させる。 また、この菌は好Ａｌ性を示
す。本菌は、受託番号 ＦＥＲＭ Ｐ−１４０７２ と
して工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託された。
【０００９】以下、本発明を詳細に説明する。日本の強
酸性土壌として知られる茶畑土壌１６箇所：
酸性土壌として知られる茶畑土壌１６箇所：
【００１０】 本菌の分離源及び採取地 番号 畑名 所在地 pH（H20） pH（KCL） 交換性Al （μｇ／乾土） ──────────────────────────────────── １ 西が山 静岡県榛原町切山 ４．３７ ４．００ ７９．７２ ２ 下の小屋 静岡県榛原町切山 ３．７３ ３．２０ ９９．５３ ３ 池の平 静岡県榛原町切山 ３．７９ ３．４１ ２６．９２ ４ 布引原 静岡県榛原町布引原４．３０ ４．０１ ２２．５１ ５ 地名 静岡県中川根町 ３．２５ ２．６４ ２９２．３７ ６ 平谷 静岡県中川根町 ４．２０ ３．５０ ８５．９８ ７ 志登呂 静岡県金谷町 ３．３１ ２．７７ ２８８．１０ ８ 猪土居 静岡県金谷町 ３．２３ ２．７３ ２９９．７３ ９ 初倉山 静岡県島田町 ３．３９ ２．９６ １０１．２７ １０ 新庄 静岡県相良町 ３．６９ ３．１３ ３３３．３６ １１ Ｍ 愛知県豊橋市 ３．０４ ２．７９ ２８７．７２ １２ Ｄ５ 愛知県豊橋市 ３．５４ ３．１８ ９３．４１ １３ 清水 静岡県清水市 ３．４０ ３．０５ ３６６．５４ １４ 宇治 京都市宇治市木幡 ４．０６ ３．２６ ２０６．６７ １５ 大嶺 静岡県竜山村 ３．８５ ３．１４ １７２．１０ １６ 懐山 静岡県天竜市 ３．５１ ３．０４ ４０４．６４ から表層土を採取し、Ａｌ耐性菌を検索した。
【００１１】（１）菌学的性質 分離したＡｌ耐性菌を分類学的に同定した。本耐性菌
は、 Ａ 形態的性質 径 ０．８〜１．３μｍ 長さ １．０〜３．０μｍ かん菌。 Ｂ 生育 ５℃ ＋ 室温（１８−２２℃） ＋ ３７℃ ＋ ４２℃ − Ｓｉｍｍｏｎ培地での生育 −
は、 Ａ 形態的性質 径 ０．８〜１．３μｍ 長さ １．０〜３．０μｍ かん菌。 Ｂ 生育 ５℃ ＋ 室温（１８−２２℃） ＋ ３７℃ ＋ ４２℃ − Ｓｉｍｍｏｎ培地での生育 −
【００１２】Ｃ 生理的性質 好気性 グラム染色 − 周毛を有し、 カタラーゼ生産 ＋ オキシダーゼ ＋ グルコースを酸化分解する。 カゼイン消化 ＋ エスクリン加水分解 ＋ インドール生産 ＋ 硝酸塩生産 ＋ 亜硝酸塩生産 − スターチ加水分解 − ウレアーゼ生産 − ＯＮＰＧ − トリブチリンの加水分解 ＋ アルギニンジヒドロラーゼ − Ｋｉｎｇ培地生産蛍光色素 − グルコースからガス − グルコネート酸化 − Ｈ Ｓ 生産 − リジンオルニチンのデカルポキシラーゼ − マロネート資化 − クリステンセンのシトレート上 でのアルカリ生産 − ゼラチン加水分解 ＋ レチトビテリン培地での オパーレッセンス ＋ グルコースＯＦ培地での酸化 ＋ 黄色色素の生産 ＋ Ｔｗｅｅｎ ８０ 加水分解 ＋ ＧＣコンテント（ｍｏｌ％） ６２．４
【００１３】炭素源からの酸生成 ラクトース ＋ キシロース ＋ マンノース ＋ ラフィノース ＋ 澱粉 ＋ セロビオース ＋ デキストリン ＋ トレハロース ＋ フラクトース ＋ デキストロース ＋ レブロース ＋ リボース ± ｄ，ｌ−マレート − エスクリン − イヌリン − アドニトール − アミグダリン − アラビノース − マルトース − ヒプラート − ソルビトール − メレチトース − ピルベート − ガラクトース − ラムノース − グリセロール − マンニトール − サリシン ± ドルシトール − グルコネート − サッカロース ± スクシネート − ナフタレン ± イノシトール − ソルボース ±
【００１４】炭素源の利用 ラクトース − キシロース − マンノース − ラフィノース − 澱粉 − セロビオース − デキストリン − トレハロース − フラクトース − デキストロース − レブロース − リボース − ｄ，ｌ−マレート − エスクリン − イヌリン − アドニトール − アミグダリン − アラビノース − マルトース − ヒプラート − ソルビトール − メレチトース − ピルベート ＋ ガラクトース − ラ ムノース − グリセロール − マンニトール − サリシン − ドルシトール − グルコネート − サッカロース − スクシネート ＋ ナフタレン − イノシトール − ソルボース − シトレート −
【００１５】上記の生理学及び微生物学的特徴から（Be
rgey Manual of Systematic Bacteriology (William &
Wilkins, 1984）本菌はFlavobacterium 属に属し、Flav
obacterium sp. と同定した。しかし、本菌は、強酸性
及び高Ａｌ環境下での増殖・生育において公知菌とは顕
著な相違を有することから新菌種と認め、これをFlavob
acterium sp. ＳＴ−３９９１株と命名した。
rgey Manual of Systematic Bacteriology (William &
Wilkins, 1984）本菌はFlavobacterium 属に属し、Flav
obacterium sp. と同定した。しかし、本菌は、強酸性
及び高Ａｌ環境下での増殖・生育において公知菌とは顕
著な相違を有することから新菌種と認め、これをFlavob
acterium sp. ＳＴ−３９９１株と命名した。
【００１６】（３）微生物の創製手段 まず、一般土壌を減菌し、土壌溶液（土壌１００ｇに純
水１Ｌを加え、３０分間振とうし、１μｍフィルターで
濾過したもの）を作成し、それにペプトン０．０７から
０．１％、好ましくは０．０５％とイーストエキストラ
クト０．００１から０．０５％、好ましくは０．０２５
％を加え（以下、Ｓ−ＬＢ液体培地とする）、さらに１
００ｐｐｍのＡｌを添加しｐＨを３．７に調整した。こ
の液体培地の１０ｍｌに検索土壌試料１ｇを加え、微生
物の生育を観察した。生育が観察された試験管から０．
１ｍｌを取り、Ｓ−ＬＢ寒天培地に入れ、その中で生育
したコロニーを単一化し、さらにＳ−ＬＢ寒天培地に入
れ、生育を確認した。この培地で生育した６試料を耐性
菌として分離した。それらについて再び耐性試験を繰り
返し、３種類の菌に明かな生育と増殖を認めた。中でも
生育の早い１種類の耐性菌を分離した。
水１Ｌを加え、３０分間振とうし、１μｍフィルターで
濾過したもの）を作成し、それにペプトン０．０７から
０．１％、好ましくは０．０５％とイーストエキストラ
クト０．００１から０．０５％、好ましくは０．０２５
％を加え（以下、Ｓ−ＬＢ液体培地とする）、さらに１
００ｐｐｍのＡｌを添加しｐＨを３．７に調整した。こ
の液体培地の１０ｍｌに検索土壌試料１ｇを加え、微生
物の生育を観察した。生育が観察された試験管から０．
１ｍｌを取り、Ｓ−ＬＢ寒天培地に入れ、その中で生育
したコロニーを単一化し、さらにＳ−ＬＢ寒天培地に入
れ、生育を確認した。この培地で生育した６試料を耐性
菌として分離した。それらについて再び耐性試験を繰り
返し、３種類の菌に明かな生育と増殖を認めた。中でも
生育の早い１種類の耐性菌を分離した。
【００１７】（４）微生物の有用性 本発明微生物は、強酸性且つ高Ａｌの環境下、生育する
微生物であるため、これを適当な媒体と共に目的土壌中
に施用してＡｌの低減及び土壌の酸性を改善するのに有
用である。
微生物であるため、これを適当な媒体と共に目的土壌中
に施用してＡｌの低減及び土壌の酸性を改善するのに有
用である。
【００１８】（５）微生物の培養・増殖 無機塩としては、硫酸塩、マグネシウム塩、カルシウム
塩、鉄塩、その他の金属塩が用いられる。窒素源として
は、本菌が資化しうるものであればよく、たとえば、ペ
プトン、イ、ーストエキス、尿素、硫酸アンモニウム、
塩化アンモニウム、リン酸アンモニウム、硝酸アンモニ
ウム及び各種アミノ酸を添加しうる。これらの窒素源は
１種でもよく、また２種以上添加してもよい。炭素源と
しては、グルコース、ラクトース、サッカロース、マル
トース、廃糖蜜、澱粉を添加できる。成長促進用養素源
として、ビタミン、酵母エキス、麦芽エキス等を適量添
加してもよい。好適な、培養温度は １０〜３０℃、好
ましくは２０〜３０℃で、培養ｐＨは、通常２．０から
５．０、好ましくは３．０から４．０である。好気的振
とう、通気攪拌法により増殖しうる。培養時間は通常６
日以上、好ましくは１０日でよい。具体的な培地組成を
次に示す。
塩、鉄塩、その他の金属塩が用いられる。窒素源として
は、本菌が資化しうるものであればよく、たとえば、ペ
プトン、イ、ーストエキス、尿素、硫酸アンモニウム、
塩化アンモニウム、リン酸アンモニウム、硝酸アンモニ
ウム及び各種アミノ酸を添加しうる。これらの窒素源は
１種でもよく、また２種以上添加してもよい。炭素源と
しては、グルコース、ラクトース、サッカロース、マル
トース、廃糖蜜、澱粉を添加できる。成長促進用養素源
として、ビタミン、酵母エキス、麦芽エキス等を適量添
加してもよい。好適な、培養温度は １０〜３０℃、好
ましくは２０〜３０℃で、培養ｐＨは、通常２．０から
５．０、好ましくは３．０から４．０である。好気的振
とう、通気攪拌法により増殖しうる。培養時間は通常６
日以上、好ましくは１０日でよい。具体的な培地組成を
次に示す。
【００１９】
【表１】
【００２０】
【実施例】以下、実施例および試験例等により本発明を
さらに詳細に説明するが、本発明はこれら実施例および
試験例等に限定されるものではない。
さらに詳細に説明するが、本発明はこれら実施例および
試験例等に限定されるものではない。
【００２１】本明細書における実施例および試験例等で
使用した分析機器および生分解性試験で使用した機器
は、下記のとおりである。
使用した分析機器および生分解性試験で使用した機器
は、下記のとおりである。
【００２２】１）原子吸光光度計： ＡＡ−３００／４
００（バリアン製）
００（バリアン製）
【００２３】実施例１ 菌の検索 まず、一般土壌を減菌し、土壌溶液（土壌１００ｇに純
水１Ｌを加え、３０分浸透し、１μｍフィルターで濾過
したもの）を作成し、それにペプトン０．０５％とイー
ストエキストラクト０．０２５％を加え（以下、Ｓ−Ｌ
Ｂ液体培地とする）、さらに１００ｐｐｍのＡｌを添加
しｐＨを３．７に調整した。この液体培地の１０ｍｌに
検索土壌試料１ｇを加え、微生物の生育を観察した。生
育が観察された試験管から０．１ｍｌを取り、Ｓ−ＬＢ
寒天培地に入れ、その中で生育したコロニーを単一化
し、さらにＳ−ＬＢ寒天培地に入れ、生育を確認した。
この培地で生育した菌種６種類を耐性菌として分離し
た。それらについて再び耐性試験を繰り返し、３種類の
菌に明かな生育と増殖を認めた。中でも生育の早い１種
類の耐性菌を分離した。
水１Ｌを加え、３０分浸透し、１μｍフィルターで濾過
したもの）を作成し、それにペプトン０．０５％とイー
ストエキストラクト０．０２５％を加え（以下、Ｓ−Ｌ
Ｂ液体培地とする）、さらに１００ｐｐｍのＡｌを添加
しｐＨを３．７に調整した。この液体培地の１０ｍｌに
検索土壌試料１ｇを加え、微生物の生育を観察した。生
育が観察された試験管から０．１ｍｌを取り、Ｓ−ＬＢ
寒天培地に入れ、その中で生育したコロニーを単一化
し、さらにＳ−ＬＢ寒天培地に入れ、生育を確認した。
この培地で生育した菌種６種類を耐性菌として分離し
た。それらについて再び耐性試験を繰り返し、３種類の
菌に明かな生育と増殖を認めた。中でも生育の早い１種
類の耐性菌を分離した。
【００２４】この菌種は、無機培地に、ペプトン０．０
５％とイーストエキストラクト０．０２５％を加えた場
合より、土壌溶離液にそれらを加えた培地の方が成長が
良好であった。ＮａＣｌの添加は、さらに生育・耐性と
も良い結果を示した。
５％とイーストエキストラクト０．０２５％を加えた場
合より、土壌溶離液にそれらを加えた培地の方が成長が
良好であった。ＮａＣｌの添加は、さらに生育・耐性と
も良い結果を示した。
【００２５】実施例２ 菌の同定分離したＡｌ耐性菌
を分類学的に同定した。本耐性菌は、径 ０．８〜１．
３μｍ、長さ１．０〜３．０μｍの小かん菌であった。
周毛を有していた。グラム染色性は陰性。好気性で、カ
タラーゼ及びオキシダーゼに陽性で、グルコースを酸化
分解する、特徴を有しており、また他の生理学的性質及
び微生物学的特徴から（Bergey Manual of Systematic
Bacteriology (William & Wilkins, 1984）本菌をFlavo
bacterium sp. と同定した。
を分類学的に同定した。本耐性菌は、径 ０．８〜１．
３μｍ、長さ１．０〜３．０μｍの小かん菌であった。
周毛を有していた。グラム染色性は陰性。好気性で、カ
タラーゼ及びオキシダーゼに陽性で、グルコースを酸化
分解する、特徴を有しており、また他の生理学的性質及
び微生物学的特徴から（Bergey Manual of Systematic
Bacteriology (William & Wilkins, 1984）本菌をFlavo
bacterium sp. と同定した。
【００２６】実施例３ Ａｌ耐性の検討 この分離した耐性菌をＡｌ耐性等について標準菌と比較
検討した。培地は２００ｍｌの培養フラスコ中にＳ−Ｌ
Ｂ液体培地とＡｌイオンを１００ｐｐｍから２０００ｐ
ｐｍまでの各濃度になるように加え、ｐＨを１Ｎ ＨＣ
ｌ及び１Ｎ ＮａＯＨを用いて、２．９から４．０まで
に調整し、最終量を１００ｍｌとなるようにした。前培
養として、Ａｌイオンを１００ｐｐｍ、ＰＨ４．０に調
整したＳ−ＬＢ液体培地で、２５℃、１００ｒｐｍで４
８時間振とう培養した菌溶液を準備し、その１ｍｌを各
処理Ｓ−ＬＢ培地に入れ、２５℃、７日間、１００ｒｐ
ｍで振とう培養した。そして菌の生育状況を濁度計ＤＯ
メーターにより観察し耐性範囲を測定した。標準菌種及
び本分離菌の酸性・Ａｌ耐性を表１に、分離菌種の酸性
・Ａｌ耐性を表２に示す。分離した耐性菌はＡｌを添加
しない場合でｐＨが３．０でも生育し、酸性に強い菌で
あった。
検討した。培地は２００ｍｌの培養フラスコ中にＳ−Ｌ
Ｂ液体培地とＡｌイオンを１００ｐｐｍから２０００ｐ
ｐｍまでの各濃度になるように加え、ｐＨを１Ｎ ＨＣ
ｌ及び１Ｎ ＮａＯＨを用いて、２．９から４．０まで
に調整し、最終量を１００ｍｌとなるようにした。前培
養として、Ａｌイオンを１００ｐｐｍ、ＰＨ４．０に調
整したＳ−ＬＢ液体培地で、２５℃、１００ｒｐｍで４
８時間振とう培養した菌溶液を準備し、その１ｍｌを各
処理Ｓ−ＬＢ培地に入れ、２５℃、７日間、１００ｒｐ
ｍで振とう培養した。そして菌の生育状況を濁度計ＤＯ
メーターにより観察し耐性範囲を測定した。標準菌種及
び本分離菌の酸性・Ａｌ耐性を表１に、分離菌種の酸性
・Ａｌ耐性を表２に示す。分離した耐性菌はＡｌを添加
しない場合でｐＨが３．０でも生育し、酸性に強い菌で
あった。
【００２７】
【表２】
【００２８】
【表３】
【００２９】さらに、Ａｌが１００ｐｐｍ添加した場
合、ｐＨが３．０でも生育した。５００、１０００ｐｐ
ｍでも生育し、極めて高濃度の２０００ｐｐｍでもｐＨ
３．５まで耐性を示した。このように本菌は極めて強い
酸性・Ａｌ耐性を有する特異性を持っている。Flavobac
terium sp.の標準株菌は、ｐＨ４．０以下ではほとんど
生育が見られないし、また、Ａｌ １００ｐｐｍ添加で
ほとんど耐性を示さなかった。
合、ｐＨが３．０でも生育した。５００、１０００ｐｐ
ｍでも生育し、極めて高濃度の２０００ｐｐｍでもｐＨ
３．５まで耐性を示した。このように本菌は極めて強い
酸性・Ａｌ耐性を有する特異性を持っている。Flavobac
terium sp.の標準株菌は、ｐＨ４．０以下ではほとんど
生育が見られないし、また、Ａｌ １００ｐｐｍ添加で
ほとんど耐性を示さなかった。
【００３０】実施例４ 菌の生長・増殖 本耐性菌の生長・増殖は、２１個の培養フラスコを用い
て、培養開始時のＰＨを３．３とし、Ａｌイオンを０、
１００、３００ｐｐｍになるよう調整した場合の処理
と、無菌の場合の計４処理の培養系で検討した。１００
ｐｐｍ下では２０時間から増殖が始まりダブリングタイ
ムを見ると１０時間となり、急激な増殖がみられた。３
００ｐｐｍでは、増殖は遅れ、５０時間後から増殖が始
まるがダブリングタイムは７．８と早くなった。このこ
とは、本菌がＡｌを取り込み利用していることを示唆す
るものであり、チャ樹等で知られている好Ａｌ性と同様
に本菌が好Ａｌ性微生物であることを示す。
て、培養開始時のＰＨを３．３とし、Ａｌイオンを０、
１００、３００ｐｐｍになるよう調整した場合の処理
と、無菌の場合の計４処理の培養系で検討した。１００
ｐｐｍ下では２０時間から増殖が始まりダブリングタイ
ムを見ると１０時間となり、急激な増殖がみられた。３
００ｐｐｍでは、増殖は遅れ、５０時間後から増殖が始
まるがダブリングタイムは７．８と早くなった。このこ
とは、本菌がＡｌを取り込み利用していることを示唆す
るものであり、チャ樹等で知られている好Ａｌ性と同様
に本菌が好Ａｌ性微生物であることを示す。
【００３１】実施例５ Ａｌイオンの吸着・吸収 本菌の生育過程におけるＡｌイオンの吸着・吸収につい
て以下のように検討した。２００ｍｌの培養フラスコに
Ｓ−ＬＢ液体培地を１００ｍｌ入れ、ｐＨを３．５に調
整し、滅菌した後、Ａｌイオンとして各々０、１００、
３００ ｐｐｍになるように添加した。この場合、ｐＨ
が３．８から４．０付近になると培地がＡｌ（ＯＨ）3
となり白濁するため、ｐＨは３．５とした。この培地に
前記前培養した耐性菌を０．１ｍｌ入れ、２５℃、１０
０ｐｐｍにて１０日間振とう培養した。採取試料の溶液
は１２０００ｒｐｍ、２０分間遠心分離し、その上澄み
液をミニボアフィルター（０．４５μｍ）で通したもの
と、沈澱物を分け、後者は、硫酸及び硝酸を加え分解し
た後、それぞれについて Ａｌを原子吸光光度計で測定
した。
て以下のように検討した。２００ｍｌの培養フラスコに
Ｓ−ＬＢ液体培地を１００ｍｌ入れ、ｐＨを３．５に調
整し、滅菌した後、Ａｌイオンとして各々０、１００、
３００ ｐｐｍになるように添加した。この場合、ｐＨ
が３．８から４．０付近になると培地がＡｌ（ＯＨ）3
となり白濁するため、ｐＨは３．５とした。この培地に
前記前培養した耐性菌を０．１ｍｌ入れ、２５℃、１０
０ｐｐｍにて１０日間振とう培養した。採取試料の溶液
は１２０００ｒｐｍ、２０分間遠心分離し、その上澄み
液をミニボアフィルター（０．４５μｍ）で通したもの
と、沈澱物を分け、後者は、硫酸及び硝酸を加え分解し
た後、それぞれについて Ａｌを原子吸光光度計で測定
した。
【００３２】その結果を表４に示す。
【００３３】
【表４】
【００３４】その結果、培養開始当初から経時的にｐＨ
の上昇が見られ、１０日目にはｐＨ４．５に達した。一
方、Ａｌの吸着・吸収や Ａｌ（ＯＨ）3の生成による
溶液中のＡｌイオン量の減少は培養２日目で９３％、４
日で７２％、７日で５４％、１０日で５１％、と漸減し
た。外観は菌の生育に伴って培養液が、懸濁を始め、白
濁し、液体も粘性を帯びた。この溶液を花粉管伸長テス
ト（Konishi, S. Ferguson, I.B. & Putterill. Plant
Science, 56, 55-59 (1988) ）で調べたところ、この
溶液はＡｌ阻害を軽減させた。。
の上昇が見られ、１０日目にはｐＨ４．５に達した。一
方、Ａｌの吸着・吸収や Ａｌ（ＯＨ）3の生成による
溶液中のＡｌイオン量の減少は培養２日目で９３％、４
日で７２％、７日で５４％、１０日で５１％、と漸減し
た。外観は菌の生育に伴って培養液が、懸濁を始め、白
濁し、液体も粘性を帯びた。この溶液を花粉管伸長テス
ト（Konishi, S. Ferguson, I.B. & Putterill. Plant
Science, 56, 55-59 (1988) ）で調べたところ、この
溶液はＡｌ阻害を軽減させた。。
【００３５】実施例５ 酸性土壌におけるＡｌイオン
の吸着・吸収 本菌の生育過程における酸性土壌でのＡｌイオンの吸着
・吸収について以下のように検討した。２００ｍｌの培
養フラスコに酸性土壌を２００ｇ入れ、ｐＨを３．５に
調整し、滅菌した後、Ａｌイオンとして各々０、１００
ｐｐｍになるように添加した。 この培地に前記前培
養した耐性菌を０．３ｍｌ入れ、室温で１０日間振とう
培養した。培養後、培養フラスコに５００ｍｌの純水を
加え、振とうした後、ｐＨを測定した。また、培養液は
１２０００ｒｐｍ、２０分間遠心分離し、その上澄み液
をミニボアフィルター（０．４５μｍ）で通したもの
と、沈澱物を分け、Ａｌを原子吸光光度計で測定した。
の吸着・吸収 本菌の生育過程における酸性土壌でのＡｌイオンの吸着
・吸収について以下のように検討した。２００ｍｌの培
養フラスコに酸性土壌を２００ｇ入れ、ｐＨを３．５に
調整し、滅菌した後、Ａｌイオンとして各々０、１００
ｐｐｍになるように添加した。 この培地に前記前培
養した耐性菌を０．３ｍｌ入れ、室温で１０日間振とう
培養した。培養後、培養フラスコに５００ｍｌの純水を
加え、振とうした後、ｐＨを測定した。また、培養液は
１２０００ｒｐｍ、２０分間遠心分離し、その上澄み液
をミニボアフィルター（０．４５μｍ）で通したもの
と、沈澱物を分け、Ａｌを原子吸光光度計で測定した。
【００３６】その結果、培養開始当初にｐＨの上昇が見
られ、１０日目にはｐＨ ３．８に達した。一方、Ａｌ
の吸着・吸収や Ａｌ（ＯＨ）3の生成による溶液中の
Ａｌイオン量の減少は培養１０日目に５０％に減少し
た。
られ、１０日目にはｐＨ ３．８に達した。一方、Ａｌ
の吸着・吸収や Ａｌ（ＯＨ）3の生成による溶液中の
Ａｌイオン量の減少は培養１０日目に５０％に減少し
た。
【００３７】
【発明の効果】本発明によれば、強酸性且つ高Ａｌの環
境下、生育する微生物を分離すること、及びこれを適当
な媒体と共に目的土壌中に適用して土壌の酸性を改善す
る微生物及びその方法を提供することができた。
境下、生育する微生物を分離すること、及びこれを適当
な媒体と共に目的土壌中に適用して土壌の酸性を改善す
る微生物及びその方法を提供することができた。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ Ｃ０９Ｋ 101:00 109:00 (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) C12N 1/20 C09K 17/00 ＣＡ（ＳＴＮ) ＢＩＯＳＩＳ
Claims (3)
- 【請求項１】 強酸性且つ高Ａｌ環境下、生育増殖しう
るフラボバクテリウム（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕ
ｍ）に属する微生物ＳＴ−３９９１株。 - 【請求項２】 低ｐＨにおいて、土壌溶液、ペプトン、
イーストエキスを含有する倍地を用いて請求項１の微生
物を培養増殖する方法。 - 【請求項３】 酸性土壌の改良方法ににおいて、請求項
１の微生物を該土壌に施用して、酸性土壌のｐＨを高
め、Ａｌを低減する方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6028992A JP2910819B2 (ja) | 1994-01-31 | 1994-01-31 | 強酸性土壌を改良する微生物及び方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6028992A JP2910819B2 (ja) | 1994-01-31 | 1994-01-31 | 強酸性土壌を改良する微生物及び方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07213279A JPH07213279A (ja) | 1995-08-15 |
| JP2910819B2 true JP2910819B2 (ja) | 1999-06-23 |
Family
ID=12263917
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6028992A Expired - Lifetime JP2910819B2 (ja) | 1994-01-31 | 1994-01-31 | 強酸性土壌を改良する微生物及び方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2910819B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102010830B (zh) * | 2010-08-26 | 2013-02-27 | 北京芳能科技有限公司 | 一种螺旋藻的驯化方法及其应用 |
-
1994
- 1994-01-31 JP JP6028992A patent/JP2910819B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH07213279A (ja) | 1995-08-15 |
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