JP2773569B2 - 分離カラム、及び分離カラムの劣化防止方法，運搬方法，取扱方法そして分離カラム用封入液 - Google Patents

分離カラム、及び分離カラムの劣化防止方法，運搬方法，取扱方法そして分離カラム用封入液

Info

Publication number
JP2773569B2
JP2773569B2 JP4247557A JP24755792A JP2773569B2 JP 2773569 B2 JP2773569 B2 JP 2773569B2 JP 4247557 A JP4247557 A JP 4247557A JP 24755792 A JP24755792 A JP 24755792A JP 2773569 B2 JP2773569 B2 JP 2773569B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
separation column
group
carboxyalkylcysteine
column
separation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
JP4247557A
Other languages
English (en)
Other versions
JPH0694695A (ja
Inventor
順吉 三浦
健二 保田
三男 伊藤
正人 伊藤
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hitachi Ltd
Original Assignee
Hitachi Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hitachi Ltd filed Critical Hitachi Ltd
Priority to JP4247557A priority Critical patent/JP2773569B2/ja
Priority to US08/118,704 priority patent/US5407568A/en
Priority to EP93114878A priority patent/EP0588335B1/en
Priority to DE69307976T priority patent/DE69307976T2/de
Publication of JPH0694695A publication Critical patent/JPH0694695A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP2773569B2 publication Critical patent/JP2773569B2/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/96—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation using ion-exchange
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/10—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features
    • B01D15/20—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to the conditioning of the sorbent material
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/36—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving ionic interaction
    • B01D15/361—Ion-exchange
    • B01D15/363—Anion-exchange
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J39/00—Cation exchange; Use of material as cation exchangers; Treatment of material for improving the cation exchange properties
    • B01J39/26—Cation exchangers for chromatographic processes

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は液体クロマトグラフィに
使用する分離カラムに係り、特に保存安定性を向上させ
た分離カラム、及び保存安定性を向上させるための分離
カラムの劣化防止方法，運搬方法，取扱方法そして保存
安定性を高めるのに好適な分離カラム用の封入液に関す
る。
【０００２】
【従来の技術】液体クロマトグラフィに使用する分離カ
ラム及び充填剤については、「クロマト用樹脂−平山忠
一，岡本佳男著，１９８９，共立出版」に詳細に述べら
れている。特に、この中では充填剤の高機能化を目的と
した新規材料に関して多く触れられているほか、充填剤
の適用範囲の拡大についても述べている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】上述した高機能化を目
的とした新規材料を充填剤として使用した分離カラムは
比較的安定性が乏しく、これらのカラムは製作されてか
ら使用されるまでの保存中、又は使用された後において
も、一般的な分離カラムと比較して、劣化の進み具合が
早く、寿命が短いという問題点があった。
【０００４】特に、最近では、臨床化学分析用に専用の
液体クロマトグラフが上市されており、このような装置
において、劣化の激しい分離カラムを使用しオペレータ
ーが劣化した状態に気付かずに分析を実行すると同定ミ
スを起こしたり、ベースラインの補正が不適当な状態に
なるために、定量値に大きな誤差を含むようになる。仮
にオペレータが分離カラムの劣化に気付いて、装置のパ
ラメータを変更するか、新しいカラムに交換すれば同定
ミスは防げるが、オペレータに煩雑さをしいることにな
る。また、カラムは充填剤が同じであっても全く同一の
分離カラムを製造することは困難であるため、寿命の短
い分離カラムを使用した場合カラムの交換回数が増える
ためそれだけ得られるクロマトグラムの質が劣化するこ
との危険度が増加することにもなる。このため、従来一
部の種類の分離カラムは、保存中の劣化を防止するため
に冷蔵保存を義務づけているものがあった。しかし、こ
の方法は分離カラムの保存，運搬に関して多くの時間
と、管理手段が必要であった。
【０００５】本発明の目的は、製造されてから使用され
るまでの保存中、また使用された後においても冷蔵手段
の特別な手段を必要とせず、簡単な構成で充填剤の性能
の劣化を防止する分離カラムを提供することにある。
【０００６】本発明の他の目的は、分離カラムの運搬に
おいてその充填剤の性能劣化を防止する分離カラムの運
搬方法を提供することにある。
【０００７】また、本発明の他の目的は試料分析におけ
る分離カラムの取扱いにおいてその充填剤の性能劣化を
防止する分離カラムの取扱い方法を提供することにあ
る。
【０００８】さらに、本発明の他の目的は分離カラムの
性能劣化を防止するために充填剤と共に分離カラムに封
入される分離カラム用の封入液を提供することにある。
【０００９】
【課題を解決するための手段】これらの課題を解決する
ため保存中又は使用後の分離能や保持時間等の変動を防
止する方法について研究した結果、これらの分離カラム
の劣化は充填剤に導入した化学修飾基の変化に起因する
ものであることを見い出し本発明に到達した。すなわ
ち、上述した目的を達成するため本発明は、分離カラム
内の充填剤が保存中に変化することを防止するため、充
填剤の封入液として充填剤と同じ構造を分子中に持つ溶
液を使用し、未使用状態，使用後、のいかんにかかわら
ず長期にわたり性能の劣化の少ない分離カラムを構成す
ることにある。
【００１０】そして、本発明は分離カラムの運搬におい
て、その充填剤の性能劣化を防止するために、充填剤と
同じ構造を分子中に持つ溶液をその分離カラムに充填剤
と共に封入した後に運搬することにある。
【００１１】また、本発明は試料分析における分離カラ
ムの取扱いにおいて、試料溶液が分離カラムを透過した
後に、その分離カラムの充填剤と同じ構造を分子中に持
つ溶液を分離カラムに流すことにある。
【００１２】さらに、本発明は分離カラムの性能劣化を
防止する封入液として、その充填剤と同じ構造を分子中
に持つ溶液を使用することにある。
【００１３】
【作用】以下、本発明の作用について詳しく説明する。
【００１４】官能基を導入する担体はシリカゲル，有機
ポリマーゲル等が使用できる。有機ポリマーゲルのう
ち、メタクリル酸系のゲルについて説明する。
【００１５】ゲルの合成に利用するモノマーとして、ヒ
ドロキシエチルメタクリレート，ポリエチレングリコー
ルメタクリレート，グリセリンメタクリレートなどの親
水性メタクリル酸類などが使用される。
【００１６】架橋剤としてはエチレングリコールジメタ
クリレート，ジエチレングリコールジメタクリレート，
トリエチレングリコールジメタクリレートなどの多官能
メタクリル酸エステル類などが使用される。これらのモ
ノマーと架橋剤の重合は特に限定されるものではなく常
法が利用できる。また、特開平2−196810 号あるいは特
開平3−255360 号に示された方法で重合及びイオン交換
基の導入を行っても良い。
【００１７】上記した方法により得られたゲルをステン
レス鋼製あるいはポリマー製のカラムに充填し分離カラ
ムとするが、この充填も特に限定されるものではなく、
希薄な塩の水溶液にゲルを懸濁させ、このスラリをカラ
ムに高圧で送るスラリ充填法を用いることができる。
【００１８】例えば、弱陽イオン交換基としてカルボキ
シル基又はカルボキシアルキル基が導入されたものをゲ
ルとした分離カラムの場合において、充填直後の未使用
の状態で保存しておいても、イオン交換基の脱落，イオ
ン交換基どうしの脱水縮合などにより性能の劣化、特に
保持時間の減少が観察される。
【００１９】このような分離カラムにおいても、カルボ
キシル基又はカルボキシアルキル基を含む水溶液を分離
カラムに封入する封入液として用いれば、上述したイオ
ン交換基の変化が抑制でき、その結果として保持時間の
減少等の性能の劣化が防止できる。
【００２０】
【実施例】以下、本発明の一実施例を図を用いて説明す
る。
【００２１】液体クロマトグラフ装置を使用する分析と
して、人間の血液中のヘモグロビン類の分析が多く行わ
れており、本発明の実施例においてはヘモグロビン類の
分析を目的とした充填剤が収められた分離カラムを中心
に説明を行っているが、本発明が適用できる充填剤はこ
れらの種類に限られるものではない。
【００２２】また、これらの充填剤の劣化を防止する封
入液の成分に、Ｓ−カルボキシルアルキルシスティンと
して、Ｓ−カルボキシルメチルシスティンを用いるのが
実用的であるため、Ｓ−カルボキシルエチルシスティン
も同様の働きを得る目的に使用できるが、実施例におい
ては、Ｓ−カルボキシルシスティンの代表としてＳ−カ
ルボキシルメチルシスティンを採り上げて説明する。
【００２３】実施例１ 特開平2−196810 号に記載の方法に準じてカルボキシメ
チル基を導入し、陽イオン交換ゲルを得た。このゲルを
温水で洗浄後、カルボキシメチル基の定量を行った結
果、０.３３ｍＥｑ／ｇ のカルボキシル基が導入されて
いた。このイオン交換体を内径４.６mm ，長さ３５mmの
カラムに充填し、グリケーテッド ヘモグロビン分析用
のカラムを作成した。
【００２４】この分離カラムを図２に示す。分離カラム
１０にはクロマト管１１にイオン交換体１２が収めら
れ、試料容液が通る流路上にはフィルター１３が設けら
れている。
【００２５】そして、これらの分離カラム１０による２
つの分離カラムグループを用意し、一方の分離カラム１
０のグループには充填剤と同じ構造を分子中に持つ封入
液で封入し、他方のグループの分離カラムには封入液の
みを封入した。
【００２６】この時、分離カラムの劣化を防ぐ封入液の
液性としては中性が良く、特にｐＨ５〜９の範囲が好ま
しいため、０.１moｌ／ｌ の塩化ナトリウム水溶液を使
用し、またこの封入液に溶かす充填剤と同じ構造を持つ
物質の濃度としては０.１〜１００ｍmo1／ｌが良く、好
ましくは１〜１０ｍmo1／ｌの範囲が好ましいため２ｍm
o1／ｌ のＳ−カルボキシルメチルシスティンを含ませ
るようにした。
【００２７】図１はこれら２種類の分離カラムの充填剤
の粒子と封入液の状態を対比した模式図である。充填剤
はクロマト管内に密閉されているが、通常の圧力で充填
された場合は約５０％の空隙があり、充填剤の周囲には
封入液が存在する。ポリマーの保持体２０にイオン交換
基の修飾基２２がついており、この周囲及び細孔２４の
内部に封入液がある。図１−（ａ）は封入液が塩化ナト
リウム２６の水溶液のみの場合を示し、図１−（ｂ）は
本発明による分離カラムの状態を示しており、塩化ナト
リウム２６と共にＳ−カルボキシルメチルシスティン２
８が液中に存在している。これらの分離カラムを分析装
置に装着する。
【００２８】分析装置としては、送液ポンプにはＬ−６
３００形、検出器にはＬ−４２００形（いずれも日立製
作所製）を使用した。また、溶出には塩濃度の異なる３
種類の溶離液（Ａ液，Ｂ液，Ｃ液）を使用するステップ
ワイズ溶出法を用い、検出波長は４１５ｎｍを用いた。
この時の溶離液は、Ａ液に５２.５ｍmol／ｌのリン酸緩
衝液（ｐＨ６.２）、Ｂ液には６７.５ｍmol／ｌのリン
酸緩衝液(ｐＨ６.２)、Ｃ液には２１０.０ｍmol／ｌの
リン酸緩衝液(ｐＨ６.１０）を使用し、送液時間はＡ：
０〜０.２min，Ｂ：０.３〜１.４min，Ｃ：１.５〜１.
８min，Ａ：１.９〜３.５min とした、流量は１.２ｍｌ
／min とし、カラム温度は４０℃とした。分析試料は健
常者血液を０.１％界面活性剤Triton Ｘ−１００ローム
・アンド・ハース社製で１００倍に希釈したものを使用
した。
【００２９】Ｓ−カルボキシメチルシスティンを封入液
中に含むカラムと含まないカラムについて、保存中の安
定性を見るために７０℃に恒温槽に保存した。各カラム
をグリケーテッド ヘモグロビン分析装置に取付け、保
存時間とグリコヘモグロビンＡ1Ｃ の保持時間の関係を
調べた。結果を図３に示す。図より明らかなように７０
℃の加熱劣化促進実験において、Ｓ−カルボキシメチル
システィンを含む液を封入した分離カラムをそうでない
カラムに比較して劣化の進みが遅く保存安定性に優れて
いることが分る。
【００３０】図４に実験開始時と４０時間経過後のＳ−
カルボキシメチルシスティンを封入液中に含むカラムと
含まないカラムのクロマトグラムを示す。封入液にＳ−
カルボキシルメチルシスティンを含むものは、図４−
（ｂ）に示したように、それぞれの成分を４０時間経過
した後でも明確に同定することが可能であるが、Ｓ−カ
ルボキシルメチルシスティンを含まないものは図４−
（ｃ）に示したように、Ａ１ｃより早く溶出するピーク
の保持時間が著しく短くなっているため、Ａ１ａピーク
そしてＡ１ｂピークの分離が悪くなってしまっている。
【００３１】これらの結果として分離カラムの劣化が化
学反応の法則に沿って進行すると、本発明によらないカ
ラムは３０℃の室温で保存すると約１３日でグリコヘモ
グロビンＡ1Ｃ の保持時間が０.２ 分以上変化し、明ら
かに分離カラムの劣化が観察できる。一方、Ｓ−カルボ
キシメチルシスティンを封入液として使用する本発明に
よる分離カラムは同じく３０℃で保存してもカラムの劣
化が観察されるまで約２カ月間の長い期間が必要となる
ことが判明した。
【００３２】実施例２ 図５は本発明による分離カラムの運搬の一実施例を示
す。運搬時の分離カラムはその内部に充填剤３２と共に
Ｓ−カルボキシルメチルシスティンを含んだ封入液３０
が収められ、そしてカラムの両端は充填剤が乾燥しない
ように密栓３４により密封されている。
【００３３】このようにカラムの充填剤と同じ構造を分
子中に持つ溶液で、カラムを封入することにより、例え
ば分離カラムを製造してから分離カラムのユーザーに送
る運搬中、そしてユーザーが分析に使うまでの期間等に
おいて、従来では劣化をおさえるため分離カラムを冷蔵
することが必要な場合があったが、本発明の分離カラム
の運搬方法によれば冷蔵せずに冷暗所に保存するだけで
分離カラムの劣化を防ぐことが出来るようになる。
【００３４】実施例３ 実施例１で得られた分離カラムと実施例１で示した分析
装置，溶離液を用いヘモグロビンを約５０検体分析し、
分析終了後に２日間放置する。１本のカラムは分析終了
後２ｍmol／ｌ のＳ−カルボキシメチルシスティンを含
む５２.５ｍmol／ｌのリン酸緩衝液(ｐＨ６.２）からな
る溶離液Ａで２０分間洗浄し、他の１本は分析終了後２
１０.０ｍmol／ｌのリン酸緩衝液(ｐＨ６.１）からなる
溶離液Ｃで同じく２０分間洗浄した。このときのヘモグ
ロビンＡ1Ｃ の保持時間の変化を図６に示す。この図か
らもＳ−カルボキシメチルシスティンを含む液で洗浄後
放置したカラムの劣化の進みが遅く安定性が高いことが
分る。
【００３５】実施例４ 本発明による専用装置の実施例を図７に示す。
【００３６】グリケーテッド ヘモグロビン分析専用装
置に、分析に直接関与しない洗浄液５９と、この液を一
連の分析が終了した後で流れるようにした流路の切換弁
52ｄが設けられている。溶離液５１Ａ〜５１Ｃには実施
例１に対応した同様のリン酸緩衝液が用いられ、ポンプ
５３によりオートサンプラ５４を経由して分離カラム５
５に送られる。ヘモグロビンの各分画は可視検出器５６
により検出され、この信号はデータ処理装置５７に記
録，解析される。流路切換弁５２ａ〜５２ｃは最適のク
ロマトグラフが得られるように一定時間間隔で開閉が繰
返される。流路切換弁５２，ポンプ５３，オートサンプ
ラ５４，検出器５６，データ処理装置５７はそれぞれコ
ンピュータ５８によりコントロールされる。本実施例で
はＳ−カルボキシメチルシスティンを含む洗浄液５９を
溶離液と別個に設けてている。
【００３７】この洗浄液には溶離液として使用する溶液
にＳ−カルボキシメチルシスティンを溶解したものが利
用できる。本実施例では、溶離液５１Ａの成分に２ｍmo
l／ｌのＳ−カルボキシメチルシスティンを含有させた
水液体を使用した。また、分離カラムは実施例で示した
ように封入液として、２ｍmol／ｌのＳ−カルボキシメ
チルシスティンを含む０.１mol／ｌ塩化ナトリウム水溶
液を用いたものを装置にセットした後、使用できるよう
にした。
【００３８】カラムの安定化だけの目的には溶離液５１
Ａ〜５１Ｃの全部あるいは１部に安定化剤を含有させる
ことでも達成される。しかし、安定化剤は充填剤の官能
基と同じ構造を分子中に持つため、試料中の目的成分と
相互作用を示す。このため、安定化剤の種類や濃度によ
っては、安定化剤を含まない溶離液で分析した場合と全
く異った分離を示すことがある。本実施例によれば、洗
浄液５９は分析に直接関与しないため、分離の状態に配
慮せずに洗浄液５９の内容が選択できる。本実施例の専
用装置で分析した場合と、実施例１で使用した分析装置
で分析し、Ｓ−カルボキシメチルシスティンで洗浄しな
い場合とで、グリコヘモグロビンＡ1Ｃの保持時間の変
化を調べたところ、図２と同様の結果を得た。
【００３９】また、分離カラム５５に洗浄液５９をポン
プ５３により所定時間流した後に、ポンプ５３を停止さ
せて分離カラム５５内に洗浄液５９を保持させることが
可能であり、これにより一連の分析が終了した後、次の
分析を行うまでの間の分離カラム５５の劣化を遅くする
ことが可能になり安定性を向上させることが出来る。ま
た、本実施例の装置によれば、一連の分析が終了後にカ
ラムの洗浄が行えるためヘモグロビンの分離パターンを
考慮することなく洗浄液の組成を決めることができるう
え、オペレータは意識しないで分離カラムの長寿命化が
達成できるという効果がある。
【００４０】
【発明の効果】以上の説明から明らかなように、分離カ
ラムの封入液として充填剤に導入された官能基と同じ構
造を分子内に持つ成分を含む溶液を使用することによ
り、分離カラムの保存中の安定性を向上させることがで
きる。そして、カラムを室温で保存，運搬することが可
能になり管理工程を減らすことができる。また、この封
入液と同じ成分を含む溶液を洗浄液として使用すること
で、同様に安定性を向上させることができるので、分離
カラムの長寿命化に役立つ。さらに寿命が長くなること
はカラムの交換頻度が減ることになり、カラム交換に伴
う分析データの質的変化を防止する効果がある。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明例の分離カラムと比較例の分離カラムの
充填剤状態の比較図。
【図２】本発明の一実施例の分離カラムの構成図。
【図３】実施例１の分離カラムと、比較例の分離カラム
でヘモグロビンを分析したときのグリコヘモグロビンＡ
１Ｃの保持時間対比図。
【図４】実施例１の比較分析における本発明の一実施例
の分離カラムと比較例のクロマトグラム対比図。
【図５】本発明の一実施例の分離カラムの運搬方法。
【図６】実施例２の分離カラムと比較例のグリコヘモグ
ロビンの保持時間の対比図。
【図７】本発明の一実施例を示す専用分析装置の流路構
成図。
【符号の説明】
１１…クロマト管、１２…イオン交換体、１３…フィル
ター、２０…保持体、２２…イオン交換基の修飾基、２
４…細孔、２６…塩化ナトリウム、２８…Ｓ−カルボキ
シルメチルシスティン、３０…Ｓ−カルボキシルメチル
システィンを含んだ封入液、３２…充填剤、３４…密
栓、５１Ａ〜５１Ｃ…溶離液、５２ａ〜５２ｄ…流路切
換弁、５３…ポンプ、５４…オートサンプラ、５５…分
離カラム、５６…検出器、５７…データ処理装置、５８
…コンピューター。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 伊藤 正人 茨城県勝田市市毛882番地 株式会社 日立製作所 計測器事業部内 (56)参考文献 特開 昭62−255866（ＪＰ，Ａ) 特開 平５−281222（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) G01N 30/50

Claims (11)

    (57)【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】カルボキシル基又はカルボキシアルキル基
    をイオン交換基として有する充填剤が充填された分離カ
    ラムにおいて、 Ｓ−カルボキシアルキルシスティンを含む溶液が前記分
    離カラムに封入されていることを特徴とする分離カラ
    ム。
  2. 【請求項２】請求項１の分離カラムにおいて、 前記Ｓ−カルボキシアルキルシスティンは、Ｓ−カルボ
    キシメチルシスティンであることを特徴とする分離カラ
    ム。
  3. 【請求項３】請求項１の分離カラムにおいて、 前記Ｓ−カルボキシアルキルシスティンは、Ｓ−カルボ
    キシエチルシスティンであることを特徴とする分離カラ
    ム。
  4. 【請求項４】請求項１の分離カラムにおいて、 前記Ｓ−カルボキシアルキルシスティンを含む溶液のｐ
    Ｈは中性の溶液であることを特徴とする分離カラム。
  5. 【請求項５】請求項１の分離カラムにおいて、 前記溶液は前記Ｓ−カルボキシアルキルシスティンを0.
    1〜100m mol/lの濃度で含むことを特徴とする分離カラ
    ム。
  6. 【請求項６】カルボキシル基又はカルボキシアルキル基
    で修飾された陽イオン樹脂が充填された分離カラムにお
    いて、 Ｓ−カルボキシアルキルシスティンを含む溶液が前記分
    離カラムに封入されていることを特徴とする分離カラ
    ム。
  7. 【請求項７】カルボキシル基又はカルボキシアルキル基
    をイオン交換基として有する充填剤を充填して分離カラ
    ムにすること、 Ｓ−カルボキシアルキルシスティンを含む溶液を前記分
    離カラムに封入することを特徴とする分離カラムの劣化
    防止方法。
  8. 【請求項８】カルボキシル基又はカルボキシアルキル基
    をイオン交換基として有する充填剤が充填され、かつＳ
    −カルボキシアルキルシスティンを含む溶液が封入され
    た分離カラムを温度管理せずに常温で運搬することを特
    徴とする分離カラムの運搬方法。
  9. 【請求項９】カルボキシル基又はカルボキシアルキル基
    をイオン交換基として有する充填剤が充填され、かつＳ
    −カルボキシアルキルシスティンを含む溶液が封入され
    た分離カラムを液体クロマトグラフ装置の流路に接続す
    ること、 その後前記分離カラムにグリコヘモグロビン分析用溶離
    液を供給すること、 前記分離カラムが前記溶離液で平衡化された後に試料溶
    液を前記分離カラムに導入すること、 前記試料溶液の成分分離が終了した後にＳ−カルボキシ
    アルキルシスティンを含む洗浄液を前記分離カラムに流
    すことを特徴とする分離カラムの取扱方法。
  10. 【請求項１０】請求項９の分離カラムの取扱方法におい
    て、 前記Ｓ−カルボキシアルキルシスティンを含む溶液が前
    記分離カラムに所定時間流された後に流れを停止せし
    め、前記Ｓ−カルボキシアルキルシスティンを含む溶液
    を前記分離カラム内に保持せしめることを特徴とする分
    離カラムの取扱方法。
  11. 【請求項１１】カルボキシル基又はカルボキシアルキル
    基をイオン交換基として有する充填剤が充填された分離
    カラムに封入される分離カラム用封入液であって、この
    液はＳ−カルボキシアルキルシスティンを含むことを特
    徴とする分離カラム用封入液。
JP4247557A 1992-09-17 1992-09-17 分離カラム、及び分離カラムの劣化防止方法，運搬方法，取扱方法そして分離カラム用封入液 Expired - Fee Related JP2773569B2 (ja)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP4247557A JP2773569B2 (ja) 1992-09-17 1992-09-17 分離カラム、及び分離カラムの劣化防止方法，運搬方法，取扱方法そして分離カラム用封入液
US08/118,704 US5407568A (en) 1992-09-17 1993-09-09 Separation column containing S-carboxyalkylcysteine
EP93114878A EP0588335B1 (en) 1992-09-17 1993-09-15 Separation column and method for preventing its deterioration
DE69307976T DE69307976T2 (de) 1992-09-17 1993-09-15 Trennungssäule und Verfahren zum Verhindern ihrer Verschlechterung

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP4247557A JP2773569B2 (ja) 1992-09-17 1992-09-17 分離カラム、及び分離カラムの劣化防止方法，運搬方法，取扱方法そして分離カラム用封入液

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPH0694695A JPH0694695A (ja) 1994-04-08
JP2773569B2 true JP2773569B2 (ja) 1998-07-09

Family

ID=17165268

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP4247557A Expired - Fee Related JP2773569B2 (ja) 1992-09-17 1992-09-17 分離カラム、及び分離カラムの劣化防止方法，運搬方法，取扱方法そして分離カラム用封入液

Country Status (4)

Country Link
US (1) US5407568A (ja)
EP (1) EP0588335B1 (ja)
JP (1) JP2773569B2 (ja)
DE (1) DE69307976T2 (ja)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2669255B2 (ja) * 1992-04-01 1997-10-27 株式会社日立製作所 ヘモグロビン類の分析方法，分析装置およびそれに用いるカラム劣化抑制液
JP3346965B2 (ja) * 1995-09-14 2002-11-18 株式会社日立製作所 アミノ酸分析装置
JP2008175810A (ja) * 2006-12-19 2008-07-31 Ngk Insulators Ltd 分析用カートリッジ及び吸光度測定装置
US20090294362A1 (en) * 2008-05-30 2009-12-03 Persson Jonas Par Stationary phase for hydrophilic interaction chromatography
WO2015046566A1 (ja) * 2013-09-30 2015-04-02 積水メディカル株式会社 収納容器に収納されたカラム及びカラム収納容器

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3349920A (en) * 1965-08-18 1967-10-31 Waters Associates Inc System for protecting liquid chromatography columns
US4407961A (en) * 1981-03-16 1983-10-04 Sanders James L Ion-exchange system and method for isolation and determination of glycosylated hemoglobin in human blood
JPS5923247A (ja) * 1982-07-30 1984-02-06 Jeol Ltd 生体液試料捕集方法
JPS6336143A (ja) * 1986-07-30 1988-02-16 Tosoh Corp 安定型糖化ヘモグロビン測定方法および装置
JPS6375558A (ja) * 1986-09-18 1988-04-05 Shimadzu Corp グリコヘモグロビン分析法
US4810391A (en) * 1987-11-06 1989-03-07 Bio-Rad Laboratories, Inc. Separation of hemoglobin A2 from hemoglobin mixture
JPH07119746B2 (ja) * 1988-03-14 1995-12-20 株式会社日立製作所 イオンクロマトグラフ装置
JPH02196810A (ja) * 1988-10-22 1990-08-03 Mitsubishi Kasei Corp アクリル系架橋ポリマー粒子およびその製造方法
US5028696A (en) * 1988-10-28 1991-07-02 Torres Anthony R Ion exchange and separation method
JP2929456B2 (ja) * 1990-03-06 1999-08-03 東ソー株式会社 グリコヘモグロビンの分離定量法
JP2669255B2 (ja) * 1992-04-01 1997-10-27 株式会社日立製作所 ヘモグロビン類の分析方法，分析装置およびそれに用いるカラム劣化抑制液

Also Published As

Publication number Publication date
EP0588335A1 (en) 1994-03-23
DE69307976T2 (de) 1997-08-28
DE69307976D1 (de) 1997-03-20
JPH0694695A (ja) 1994-04-08
US5407568A (en) 1995-04-18
EP0588335B1 (en) 1997-02-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Benson Jr et al. Accelerated chromatographic analysis of amino acids in physiological fluids containing glutamine and asparagine
US5358639A (en) Method of analyzing hemoglobins
JP2773569B2 (ja) 分離カラム、及び分離カラムの劣化防止方法，運搬方法，取扱方法そして分離カラム用封入液
Girod et al. Enantioseparations using nonaqueous capillary electrochromatography on cellulose and amylose tris (3, 5‐dimethylphenylcarbamates) coated on silica gels of various pore and particle size
JP2782470B2 (ja) グリコヘモグロビンの分離方法および分離装置並びに分離カラム
Kašička et al. Isotachophoretic electrodesorption of proteins from an affinity adsorbent on a microscale
JP2001159625A (ja) ヘモグロビンａ２の分離方法
JP4404429B2 (ja) ヘモグロビン類の測定方法
JP4473999B2 (ja) カラム洗浄液
JP2003014714A (ja) ヘモグロビン類の測定方法
JP2002082105A (ja) 液体クロマトグラフィー用充填剤、カラム、及びそれを用いたヘモグロビン類の測定方法
JPH09127091A (ja) 糖化ヘモグロビンの測定方法
Iriyama et al. Electrochemical detection of ascorbic and uric acids in the eluate from reversed-phase high-performance liquid chromatography with newly developed rigid-type porous polymer packing (polymetacrylate gels)
US4980058A (en) Separation of hemoglobin A2 from hemoglobin mixture
JP4094776B2 (ja) 溶血試薬及びこれを用いたヘモグロビン類の測定方法
Compton et al. Chromatographic analysis of therapeutic proteins
JPH1010107A (ja) 液体クロマトグラフィーによる試料の分析方法
Iwamoto et al. Urinary uric acid determination by reversed-phase high-performance liquid chromatography with electrochemical detection
Kawazu Comparison of efficiency of cation-exchange resins in the chromatographic separation of metal ions with aqueous acetone-hydrochloric acid solution
Janeček et al. Sample-induced internal pH gradients in microcolumn liquid chromatography of proteins
JP2002535113A (ja) 放射性ヨウ化物同位体の精製および濃縮方法
JPH03144360A (ja) カテコールアミン類の分析装置
Boardman Ion-exchange chromatography
JP3975017B2 (ja) 液体クロマトグラフィーによるヘモグロビン類の測定方法
JP2012037421A (ja) 液体クロマトグラム用カラムフィルタ

Legal Events

Date Code Title Description
FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080424

Year of fee payment: 10

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090424

Year of fee payment: 11

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090424

Year of fee payment: 11

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100424

Year of fee payment: 12

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110424

Year of fee payment: 13

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120424

Year of fee payment: 14

LAPS Cancellation because of no payment of annual fees