JP2710052B2 - コードファクター関連化合物及びその製造法並びに該化合物を含有する免疫増強剤 - Google Patents
コードファクター関連化合物及びその製造法並びに該化合物を含有する免疫増強剤Info
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Description
【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、コードファクター関連化合物及びその製造
法並びに該化合物を含有する免疫増強剤に関する。
法並びに該化合物を含有する免疫増強剤に関する。
（従来の技術） 本発明の化合物は、文献未記載の新規化合物である。
コードファクターと呼称されるトレハロースのミコー
ル酸エステル（α，α−トレハロース−6,6′−ジミコ
レート）には、マウスに対する致死毒性の他に、免疫増
強活性、抗腫瘍活性、感染に対する宿主抵抗性の増強活
性などがあることが知られている。
ル酸エステル（α，α−トレハロース−6,6′−ジミコ
レート）には、マウスに対する致死毒性の他に、免疫増
強活性、抗腫瘍活性、感染に対する宿主抵抗性の増強活
性などがあることが知られている。
このα，α−トレハロース−6,6′−ジミコレート
（以下単にTDMということがある）の化学合成について
は、既に報告されている〔I.アズマら、ケミカル・アン
ド・ファーマシューティカル・プレティン（Chemical
＆ Pharmaceutical Bulletin），33，（1985）4544〜45
55〕。
（以下単にTDMということがある）の化学合成について
は、既に報告されている〔I.アズマら、ケミカル・アン
ド・ファーマシューティカル・プレティン（Chemical
＆ Pharmaceutical Bulletin），33，（1985）4544〜45
55〕。
（発明が解決しようとする課題） しかしながら、腫瘍の免疫療法に使用する免疫増強剤
としてTDMを考えた場合、その強い毒性が問題となるた
めに、TDMの構造変換による毒性の消失もしくは軽減が
望まれていた。
としてTDMを考えた場合、その強い毒性が問題となるた
めに、TDMの構造変換による毒性の消失もしくは軽減が
望まれていた。
（課題を解決するための手段） そこで本発明者らは上記課題を解決するために鋭意研
究を重ねた結果、TDMの糖骨格をβ，β−トレハロース
もしくはα，β−トレハロースに換えたものを化学合成
することに成功し、更に免疫増強活性の指標となるマク
ロファージ活性化能及び毒性の測定を行ったところ、良
好な結果を得るに至り、本発明を完成させた。
究を重ねた結果、TDMの糖骨格をβ，β−トレハロース
もしくはα，β−トレハロースに換えたものを化学合成
することに成功し、更に免疫増強活性の指標となるマク
ロファージ活性化能及び毒性の測定を行ったところ、良
好な結果を得るに至り、本発明を完成させた。
即ち、本発明の新規なコードファクター関連化合物
は、下記の一般式（Ｉ）又は（II）で表される化合物で
ある。
は、下記の一般式（Ｉ）又は（II）で表される化合物で
ある。
式（Ｉ） 〔式中、R1はベンジル基を示し、且つR2はトリチル基、
水素原子、トシル基又はアシル基（ミコロイル基をも含
む。本出願明細書中では単にアシル基ということがあ
る）を示すか、あるいはR1は水素原子を示し、且つR2は
アシル基を示す。〕 式（II） （式中、R1はベンジル基を示し、R2はベンジリデン基又
は水素原子を示し、且つR3はベンジリデン基、水素原
子、トシル基、又はアシル基を示すか、あるいはR1及び
R2は水素原子を示し、且つR3はアシル基を示す。） 以下に本発明の内容を詳細に説明する。
水素原子、トシル基又はアシル基（ミコロイル基をも含
む。本出願明細書中では単にアシル基ということがあ
る）を示すか、あるいはR1は水素原子を示し、且つR2は
アシル基を示す。〕 式（II） （式中、R1はベンジル基を示し、R2はベンジリデン基又
は水素原子を示し、且つR3はベンジリデン基、水素原
子、トシル基、又はアシル基を示すか、あるいはR1及び
R2は水素原子を示し、且つR3はアシル基を示す。） 以下に本発明の内容を詳細に説明する。
（ａ） 一般式（Ｉ）の化合物の合成 一般式（Ｉ）で表される化合物（11）は、後述のスキ
ーム１に示すように、公知化合物のβ，β−トレハロー
ス（10）〔E.フィッシャー（E.Fischer）ら、ベリヒテ
（Berichte），42（1909）2776の方法により合成でき
る。〕とトリチル化後、ベンジル化することによって合
成することができる。上記化合物（10）のトリチル化
は、塩化トリチル／ピリジンで処理することによって実
施できるが、このトリチル化反応は、例えば10〜100℃
の温度で、１分〜100時間撹拌することによって実施す
ることができる。
ーム１に示すように、公知化合物のβ，β−トレハロー
ス（10）〔E.フィッシャー（E.Fischer）ら、ベリヒテ
（Berichte），42（1909）2776の方法により合成でき
る。〕とトリチル化後、ベンジル化することによって合
成することができる。上記化合物（10）のトリチル化
は、塩化トリチル／ピリジンで処理することによって実
施できるが、このトリチル化反応は、例えば10〜100℃
の温度で、１分〜100時間撹拌することによって実施す
ることができる。
また、トリチル化後のベンジル化は、トリチル化物を
例えばN,N−ジメチルホルムアミド（以下DMFということ
がある。）このような溶媒中、水素化ナトリウム（Na
H）と臭化ベンジルで処理することによって実施するこ
とができる。
例えばN,N−ジメチルホルムアミド（以下DMFということ
がある。）このような溶媒中、水素化ナトリウム（Na
H）と臭化ベンジルで処理することによって実施するこ
とができる。
更に、化合物（12）は、化合物（11）を脱トリチル化
することによって合成することができる。この脱トリチ
ル化は、例えば濃度80％の酢酸水溶液のような溶媒中で
10〜100℃の温度で、１分〜24時間撹拌することによっ
て実施することができる。
することによって合成することができる。この脱トリチ
ル化は、例えば濃度80％の酢酸水溶液のような溶媒中で
10〜100℃の温度で、１分〜24時間撹拌することによっ
て実施することができる。
化合物（13）は、化合物（12）をトシル化することに
より合成することができる。このトシル化は例えば化合
物（12）を塩化トシル／ピリジンで処理することによっ
て実施することができる。
より合成することができる。このトシル化は例えば化合
物（12）を塩化トシル／ピリジンで処理することによっ
て実施することができる。
更に、化合物（14）は、化合物（13）をアシル化する
ことによって合成することができるが、このアシル化
は、例えばトルエンのような溶媒中で、18−クラウン−
６の存在下、ミコール酸カリウムで処理することによっ
て実施することができる。
ことによって合成することができるが、このアシル化
は、例えばトルエンのような溶媒中で、18−クラウン−
６の存在下、ミコール酸カリウムで処理することによっ
て実施することができる。
化合物（15）は化合物（14）を脱ベンジル化すること
によって合成することができるが、この脱ベンジル化
は、例えばテトラヒドロフラン（以下THFということが
ある。）−エタノール−水系の溶媒中でパラジウム−炭
素（Pd−Ｃ）のような触媒の存在下で水素還元すること
によって実施することができる。
によって合成することができるが、この脱ベンジル化
は、例えばテトラヒドロフラン（以下THFということが
ある。）−エタノール−水系の溶媒中でパラジウム−炭
素（Pd−Ｃ）のような触媒の存在下で水素還元すること
によって実施することができる。
（ｂ） 一般式（II）の化合物の合成 一般式（II）で表される化合物（17）は、後述のスキ
ーム２に示すように、公知化合物のα，β−トレハロー
ス（16）〔W.N.Haworthら、ジャーナル・オブ・ケミカ
ル・ソサイエティー（Journal of Chemical Societ
y），（1931）2847の方法により製造することができ
る。〕をベンジリデン化後、ベンジル化することによっ
て合成することができるが、この化合物（16）のベンジ
リデン化は、例えばDMFのような溶媒中で、ｐ−トルエ
ンスルホン酸の存在下でα，α−ジメトキシトルエンで
処理することによって実施することができる。また、ベ
ンジリデン化後のベンジル化は、例えばDMFのような溶
媒中で水素化ナトリウムと臭化ベンジルで処理すること
によって実施することができる。
ーム２に示すように、公知化合物のα，β−トレハロー
ス（16）〔W.N.Haworthら、ジャーナル・オブ・ケミカ
ル・ソサイエティー（Journal of Chemical Societ
y），（1931）2847の方法により製造することができ
る。〕をベンジリデン化後、ベンジル化することによっ
て合成することができるが、この化合物（16）のベンジ
リデン化は、例えばDMFのような溶媒中で、ｐ−トルエ
ンスルホン酸の存在下でα，α−ジメトキシトルエンで
処理することによって実施することができる。また、ベ
ンジリデン化後のベンジル化は、例えばDMFのような溶
媒中で水素化ナトリウムと臭化ベンジルで処理すること
によって実施することができる。
更に、化合物（18）は、化合物（17）を脱ベンジリデ
ン化することによって合成することができるが、この脱
ベンジリデン化は、例えば濃度80％の酢酸水溶液のよう
な溶媒中で10〜100℃の温度で、１分〜24時間撹拌する
ことによって実施することができる。
ン化することによって合成することができるが、この脱
ベンジリデン化は、例えば濃度80％の酢酸水溶液のよう
な溶媒中で10〜100℃の温度で、１分〜24時間撹拌する
ことによって実施することができる。
化合物（19）は、化合物（18）をトシル化することに
よって合成することができるが、このトシル化は、例え
ば化合物（18）を塩化トシル／ピリジンで処理すること
によって実施することができる。
よって合成することができるが、このトシル化は、例え
ば化合物（18）を塩化トシル／ピリジンで処理すること
によって実施することができる。
更に、化合物（20）は、化合物（19）をアシル化する
ことによって合成することができるが、このアシル化
は、例えばトルエンのような溶媒中で18−クラウン−６
の存在下でミコール酸カリウムで処理することによって
実施することができる。
ことによって合成することができるが、このアシル化
は、例えばトルエンのような溶媒中で18−クラウン−６
の存在下でミコール酸カリウムで処理することによって
実施することができる。
化合物（21）は、化合物（20）を脱ベンジル化するこ
とによって合成することができるが、この脱ベンジル化
は、例えばCHCl3−THF系の溶媒中でパラジウムブラック
のような触媒の存在下で水素還元することによって実施
することができる。
とによって合成することができるが、この脱ベンジル化
は、例えばCHCl3−THF系の溶媒中でパラジウムブラック
のような触媒の存在下で水素還元することによって実施
することができる。
尚、前記工程において合成される化合物（11），（1
2），（13），（14），（15），（17），（18），（1
9），（20），（21）は何れも新規化合物である。
2），（13），（14），（15），（17），（18），（1
9），（20），（21）は何れも新規化合物である。
（10） R1＝R2＝Ｈ （11） R1＝Bn,R2＝Tr （12） R1＝Bn,R2＝Ｈ （13） R1＝Bn,R2＝Ts （14） R1＝Bn,R2＝ミコロイル基 （15） R1＝H,R2＝ミコロイル基 〔H:水素原子,Bn:ベンジル基,Tr:トリチル基,Ts:トシル
基；いずれも以下同様〕 （16） R1＝R2＝R3＝Ｈ （17） R1＝Bn,R2＝R3＝ベンジリデン基 （18） R1＝Bn,R2＝R3＝Ｈ （19） R1＝Bn,R2＝H,R3＝Ts （20） R1＝Bn,R2＝H,R3＝ミコロイル基 （21） R1＝R2＝H,R3＝ミコロイル基 （実施例） 以下に実施例を挙げて本発明の内容を更に具体的に説
明するが、本発明の範囲は以下の実施例に限定されるも
のではない。
基；いずれも以下同様〕 （16） R1＝R2＝R3＝Ｈ （17） R1＝Bn,R2＝R3＝ベンジリデン基 （18） R1＝Bn,R2＝R3＝Ｈ （19） R1＝Bn,R2＝H,R3＝Ts （20） R1＝Bn,R2＝H,R3＝ミコロイル基 （21） R1＝R2＝H,R3＝ミコロイル基 （実施例） 以下に実施例を挙げて本発明の内容を更に具体的に説
明するが、本発明の範囲は以下の実施例に限定されるも
のではない。
実施例−１〔化合物（10）→化合物（11）〕 化合物（10）304.0mg（0.89ミリモル）をピリジン6ml
に溶解し、塩化トリチル594.0mg（2.13ミリモル）を加
えて、50℃で39時間撹拌後、更に、塩化トリチル148.5m
g（0.53ミリモル）を加えて50℃で23時間撹拌した。こ
の反応液を減圧濃縮して、残渣を80gのシリカゲルを詰
めたカラムに流し込み、溶出液〔CHCl3:CH3OH＝10:1,
（CH3CH2）3N1％含有〕にて溶出して精製し、得られた
ジトリチル化物（Rf＝0.53,CHCl3:CH3OH＝5:1）をDMF20
mlに溶解し、60％NaH320mg（8.0ミリモル）を加えて水
冷しながら30分間撹拌した。次に、臭化ベンジル0.95ml
（8.0ミリモル）を滴下し、水冷しながら17時間撹拌し
た。反応終了後、CH3OH2mlを加えて水冷しながら30分間
撹拌して減圧濃縮し、残渣を80gのシリカゲルを詰めた
カラムに流し込み、溶出液〔トルエン，（CH3CH2）3 N1
％含有〕にて溶出して精製し、化合物（11）998.6mgを
得た（収率82.2％）。
に溶解し、塩化トリチル594.0mg（2.13ミリモル）を加
えて、50℃で39時間撹拌後、更に、塩化トリチル148.5m
g（0.53ミリモル）を加えて50℃で23時間撹拌した。こ
の反応液を減圧濃縮して、残渣を80gのシリカゲルを詰
めたカラムに流し込み、溶出液〔CHCl3:CH3OH＝10:1,
（CH3CH2）3N1％含有〕にて溶出して精製し、得られた
ジトリチル化物（Rf＝0.53,CHCl3:CH3OH＝5:1）をDMF20
mlに溶解し、60％NaH320mg（8.0ミリモル）を加えて水
冷しながら30分間撹拌した。次に、臭化ベンジル0.95ml
（8.0ミリモル）を滴下し、水冷しながら17時間撹拌し
た。反応終了後、CH3OH2mlを加えて水冷しながら30分間
撹拌して減圧濃縮し、残渣を80gのシリカゲルを詰めた
カラムに流し込み、溶出液〔トルエン，（CH3CH2）3 N1
％含有〕にて溶出して精製し、化合物（11）998.6mgを
得た（収率82.2％）。
〔化合物（11）の性質〕 TLC（薄層クロマトグラフィー）Rf＝0.32（溶出液
トルエン） 元素分析 C92H86O11・H2Oとして 計算値 C,79.74;H,6.40 測定値 C,79.74;H,6.36 比旋光度▲〔α〕25 D▼＝−12.4゜（Ｃ＝1.17,CHCl3） 実施例−２〔化合物（11）→化合物（12）〕 化合物（11）939.0mgを濃度80％の酢酸水溶液25mlに
溶解し、80℃で２時間撹拌後、THF10mlを加えて、更に8
0℃で１時間撹拌した。反応液を減圧濃縮して、残渣を8
0gのシリカゲルを詰めたカラムに流し込み、溶出液（ト
ルエン：酢酸エチル＝2:1）にて溶出・精製し、化合物
（12）314.2mgを得た（収率51.8％）。
トルエン） 元素分析 C92H86O11・H2Oとして 計算値 C,79.74;H,6.40 測定値 C,79.74;H,6.36 比旋光度▲〔α〕25 D▼＝−12.4゜（Ｃ＝1.17,CHCl3） 実施例−２〔化合物（11）→化合物（12）〕 化合物（11）939.0mgを濃度80％の酢酸水溶液25mlに
溶解し、80℃で２時間撹拌後、THF10mlを加えて、更に8
0℃で１時間撹拌した。反応液を減圧濃縮して、残渣を8
0gのシリカゲルを詰めたカラムに流し込み、溶出液（ト
ルエン：酢酸エチル＝2:1）にて溶出・精製し、化合物
（12）314.2mgを得た（収率51.8％）。
〔化合物（12）の性質〕 TLC,Rf＝0.49（溶出液 トルエン：酢酸エチル＝1:
1） 元素分析 C54H58O11として 計算値 C,73.45;H,6.62 測定値 C,73.28;H,6.63 比旋光度▲〔α〕25 D▼＝＋10.1゜（Ｃ＝0.55,CHCl3）13 C−NMR（CDCl3） 100.1（Ｃ−1,1JCH162.4Hz）,84.4（Ｃ−３）,82.1
（Ｃ−２）,77.3（Ｃ−４）,75.2（Ｃ−５）,61.7（Ｃ
−６） 実施例−３〔化合物（12）→化合物（13）〕 化合物（12）223.6mg（0.25ミリモル）をピリジン2ml
に溶解し、氷冷後、塩化トシル144.8mg（0.76ミリモ
ル）を加えて、０℃で１時間撹拌し、更に室温で19時間
撹拌した。反応終了後、酢酸エチル50ml、氷水20mlを加
えて抽出を行ない、有機物層を５％塩酸、飽和食塩水、
飽和重曹水、飽和食塩水の順に処理して、MgSO4で乾燥
した。ろ過後、減圧濃縮して、残渣を25gのシリカゲル
を詰めたカラムに流し込み、溶出液（トルエン：酢酸エ
チル＝10:1）にて溶出・精製し、化合物（13）260.1mg
を得た（収率86.2％）。
1） 元素分析 C54H58O11として 計算値 C,73.45;H,6.62 測定値 C,73.28;H,6.63 比旋光度▲〔α〕25 D▼＝＋10.1゜（Ｃ＝0.55,CHCl3）13 C−NMR（CDCl3） 100.1（Ｃ−1,1JCH162.4Hz）,84.4（Ｃ−３）,82.1
（Ｃ−２）,77.3（Ｃ−４）,75.2（Ｃ−５）,61.7（Ｃ
−６） 実施例−３〔化合物（12）→化合物（13）〕 化合物（12）223.6mg（0.25ミリモル）をピリジン2ml
に溶解し、氷冷後、塩化トシル144.8mg（0.76ミリモ
ル）を加えて、０℃で１時間撹拌し、更に室温で19時間
撹拌した。反応終了後、酢酸エチル50ml、氷水20mlを加
えて抽出を行ない、有機物層を５％塩酸、飽和食塩水、
飽和重曹水、飽和食塩水の順に処理して、MgSO4で乾燥
した。ろ過後、減圧濃縮して、残渣を25gのシリカゲル
を詰めたカラムに流し込み、溶出液（トルエン：酢酸エ
チル＝10:1）にて溶出・精製し、化合物（13）260.1mg
を得た（収率86.2％）。
〔化合物（13）の性質〕 TLC Rf＝0.57（溶出液 トルエン：酢酸エチル＝6:
1） 元素分析 C68H70O15S2として 計算値 C,68.55:H,5.92 測定値 C,68.47;H,5.96 比旋光度▲〔α〕25 D▼＝−4.1゜（Ｃ＝0.20,CHCl3） 実施例−４〔化合物（13）→化合物（14）〕 化合物（13）116.7mg（0.10ミリモル）をトルエン10m
lに溶解し、ミコール酸カリウム（平均組成C80H157O3.5
K,Aoyama B）240.9mg（0.20ミリモル）と18−クラウン
−６ 31.7mg（0.12ミリモル）を加えて、100℃で16時
間撹拌した。反応液を減圧濃縮して、残渣をヘキサン5m
lに溶解し、ろ過後、減圧濃縮して、その残渣を30gのシ
リカゲルを詰めたカラムに流し込み、溶出液（ヘキサ
ン：エーテル＝7:4）にて溶出・精製し、化合物（14）1
93.0mgを得た（収率61.6％）。
1） 元素分析 C68H70O15S2として 計算値 C,68.55:H,5.92 測定値 C,68.47;H,5.96 比旋光度▲〔α〕25 D▼＝−4.1゜（Ｃ＝0.20,CHCl3） 実施例−４〔化合物（13）→化合物（14）〕 化合物（13）116.7mg（0.10ミリモル）をトルエン10m
lに溶解し、ミコール酸カリウム（平均組成C80H157O3.5
K,Aoyama B）240.9mg（0.20ミリモル）と18−クラウン
−６ 31.7mg（0.12ミリモル）を加えて、100℃で16時
間撹拌した。反応液を減圧濃縮して、残渣をヘキサン5m
lに溶解し、ろ過後、減圧濃縮して、その残渣を30gのシ
リカゲルを詰めたカラムに流し込み、溶出液（ヘキサ
ン：エーテル＝7:4）にて溶出・精製し、化合物（14）1
93.0mgを得た（収率61.6％）。
〔化合物（14）の性質〕 TLC Rf＝0.41（溶出液 トルエン：酢酸エチル＝10:
1） 元素分析 C214H370O16として 計算値 C,80.34;H,11.66 測定値 C,80.10;H,11.64 比旋光度▲〔α〕25 D▼＝＋2.2゜（Ｃ＝0.36,CHCl3） 実施例−５〔化合物（14）→化合物（15）〕 化合物（14）154.6mgをTHF10mlに溶解し、水0.5mlに
懸濁させた10％パラジウム−炭素触媒150mgとエタノー
ル10mlを加えてH2を封入し、50゜で21時間撹拌後、触媒
をろ過して除去してから減圧濃縮して、残渣を再度THF1
5mlに溶解し、水0.5mlに懸濁させた10％パラジウム−炭
素触媒140mgとエタノール15mlを加えてH2を封入し、50
℃で19時間撹拌した。触媒をろ過して除去した後、減圧
濃縮して、その残渣を10gのシリカゲルを詰めたカラム
に流し込み、溶出液（CHCl3:CH3OH＝25:1）にて溶出・
精製し、得られたワックス状の化合物（15）をエーテル
1mlに溶解し、０℃のCH3OH20mlに滴下して析出させ、遠
心分離後、減圧乾燥して、化合物（15）48.0mgを白色粉
末状で得た（収率38.0％）。
1） 元素分析 C214H370O16として 計算値 C,80.34;H,11.66 測定値 C,80.10;H,11.64 比旋光度▲〔α〕25 D▼＝＋2.2゜（Ｃ＝0.36,CHCl3） 実施例−５〔化合物（14）→化合物（15）〕 化合物（14）154.6mgをTHF10mlに溶解し、水0.5mlに
懸濁させた10％パラジウム−炭素触媒150mgとエタノー
ル10mlを加えてH2を封入し、50゜で21時間撹拌後、触媒
をろ過して除去してから減圧濃縮して、残渣を再度THF1
5mlに溶解し、水0.5mlに懸濁させた10％パラジウム−炭
素触媒140mgとエタノール15mlを加えてH2を封入し、50
℃で19時間撹拌した。触媒をろ過して除去した後、減圧
濃縮して、その残渣を10gのシリカゲルを詰めたカラム
に流し込み、溶出液（CHCl3:CH3OH＝25:1）にて溶出・
精製し、得られたワックス状の化合物（15）をエーテル
1mlに溶解し、０℃のCH3OH20mlに滴下して析出させ、遠
心分離後、減圧乾燥して、化合物（15）48.0mgを白色粉
末状で得た（収率38.0％）。
〔化合物（15）の性質〕 TLC Rf＝0.46（溶出液 CHCl3:CH3OH＝15:1） 元素分析 C172H334O16として 計算値 C,77.71;H,12.66 測定値 C,77.40;H,12.39 比旋光度▲〔α〕25 D▼＝＋32.0゜（Ｃ＝0.36,CHCl3）1 H−NMR（CDCl3:CD3OD＝30:1） 4.546（d,J9.2Hz,H−１） 実施例−６〔化合物（16）→化合物（17）〕 化合物（16）262.7mg（0.77ミリモル）をDMF5mlに溶
解し、トルエン5mlを加えて減圧下50℃で共沸処理後、
α，α−ジメトキシトルエン255μ（1.7ミリモル）と
ｐ−トルエンスルホン酸10mgを加えて、減圧下60℃で１
時間撹拌した。冷却後、60％NaH148mg（3.7ミリモル）
を加えて水冷しながら15分間撹拌し、臭化ベンジル0.44
ml（3.7ミリモル）を滴下して水冷しながら23時間撹拌
した。更に、60％NaH74mgと臭化ベンジル0.22mlを加え
て水冷しながら１時間撹拌した。反応終了後、CH3OH2ml
を加えて水冷しながら30分間撹拌し、減圧濃縮して、そ
の残渣を50gのシリカゲルを詰めたカラムに流し込み、
溶出液〔トルエン：酢酸エチル＝10:1,（CH3CH2）3N1％
含有〕にて溶出・精製し、化合物（17）602.0mgを得た
（収率89.2％）。
解し、トルエン5mlを加えて減圧下50℃で共沸処理後、
α，α−ジメトキシトルエン255μ（1.7ミリモル）と
ｐ−トルエンスルホン酸10mgを加えて、減圧下60℃で１
時間撹拌した。冷却後、60％NaH148mg（3.7ミリモル）
を加えて水冷しながら15分間撹拌し、臭化ベンジル0.44
ml（3.7ミリモル）を滴下して水冷しながら23時間撹拌
した。更に、60％NaH74mgと臭化ベンジル0.22mlを加え
て水冷しながら１時間撹拌した。反応終了後、CH3OH2ml
を加えて水冷しながら30分間撹拌し、減圧濃縮して、そ
の残渣を50gのシリカゲルを詰めたカラムに流し込み、
溶出液〔トルエン：酢酸エチル＝10:1,（CH3CH2）3N1％
含有〕にて溶出・精製し、化合物（17）602.0mgを得た
（収率89.2％）。
〔化合物（17）の性質〕 TLC Rf＝0.32（溶出液 トルエン：酢酸エチル＝10:
1） 元素分析 C54H54O11として 計算値 C,73.78;H,6.19 測定値 C,73.75;H,6.21 比旋光度▲〔α〕25 D▼＝＋10.0゜（Ｃ＝0.63,CHCl3）1 H−NMR（CDCl3） 7.52−7.16（30H,aromatic protons）,5.553（s,2H, 実施例−７〔化合物（17）→化合物（18）〕 化合物（17）562.4mgを80％酢酸水溶液15mlに溶解
し、80℃で１時間撹拌した。反応液を減圧下30℃,10分
間で濃縮して、残渣を50gのシリカゲルを詰めたカラム
に流し込み、溶出液（CHCl3:CH3OH＝10:1）にて溶出・
精製し、化合物（18）294.0mgを得た（収率65.4％）。
1） 元素分析 C54H54O11として 計算値 C,73.78;H,6.19 測定値 C,73.75;H,6.21 比旋光度▲〔α〕25 D▼＝＋10.0゜（Ｃ＝0.63,CHCl3）1 H−NMR（CDCl3） 7.52−7.16（30H,aromatic protons）,5.553（s,2H, 実施例−７〔化合物（17）→化合物（18）〕 化合物（17）562.4mgを80％酢酸水溶液15mlに溶解
し、80℃で１時間撹拌した。反応液を減圧下30℃,10分
間で濃縮して、残渣を50gのシリカゲルを詰めたカラム
に流し込み、溶出液（CHCl3:CH3OH＝10:1）にて溶出・
精製し、化合物（18）294.0mgを得た（収率65.4％）。
〔化合物（18）の性質〕 TLC Rf＝0.32（溶出液 CHCl3:CH3OH＝10:1） 元素分析 C40H46O11として 計算値 C,68.36;H,6.60 測定値 C,67.93;H,6.59 比旋光度▲〔α〕25 D▼＝＋13.2゜（Ｃ＝0.34,CHCl3）13 C−NMR（CDCl3） 104.6（Ｃ−１′,1JCH158.5Hz）,99.3（Ｃ−1,1JCH16
8.2Hz） 実施例−８〔化合物（18）→化合物（19）〕 化合物（18）124.4mg（0.18ミリモル）をピリジン
（ドライ）2mlに溶解し、氷冷後、塩化トシル79.7mg
（0.42ミリモル）を加えて、０℃から室温まで温度を上
げながら21時間撹拌した。反応終了後、酢酸エチル50m
l、氷水20mlを加えて抽出を行ない、有機物層を５％塩
酸、飽和食塩水、飽和重曹水、飽和食塩水の順に処理し
て、MgSO4で乾燥した。ろ過後、減圧濃縮して、残渣を1
2gのシリカゲルを詰めたカラムに流し込み、溶出液（ト
ルエン：酢酸エチル＝4:1）にて溶出・精製し、化合物
（19）121.1mgを得た（収率67.7％）。
8.2Hz） 実施例−８〔化合物（18）→化合物（19）〕 化合物（18）124.4mg（0.18ミリモル）をピリジン
（ドライ）2mlに溶解し、氷冷後、塩化トシル79.7mg
（0.42ミリモル）を加えて、０℃から室温まで温度を上
げながら21時間撹拌した。反応終了後、酢酸エチル50m
l、氷水20mlを加えて抽出を行ない、有機物層を５％塩
酸、飽和食塩水、飽和重曹水、飽和食塩水の順に処理し
て、MgSO4で乾燥した。ろ過後、減圧濃縮して、残渣を1
2gのシリカゲルを詰めたカラムに流し込み、溶出液（ト
ルエン：酢酸エチル＝4:1）にて溶出・精製し、化合物
（19）121.1mgを得た（収率67.7％）。
〔化合物（19）の性質〕 TLC Rf＝0.50（溶出液 トルエン：酢酸エチル＝3:
1） 元素分析 C54H58O15S2・1/3C6H5CH3として 計算値 C,64.94;H,5.87 測定値 C,65.11;H,5.82 比旋光度▲〔α〕25 D▼＝−44.0゜（Ｃ＝0.20,CHCl3）1 H−NMR（CDCl3） 7.80−7.71（4H,aromatic protons）,7.35−7.16（24
H,aromatic protons）13 C−NMR（CDCl3） 103.5（Ｃ−１′、1JCH161.4Hz）,99.3（Ｃ−1,1JCH1
70.2Hz） 実施例−９〔化合物（19）→化合物（20）〕 化合物（19）109.9mg（0.11ミリモル）をトルエン10m
lに溶解し、ミコール酸カリウム267.1mg（0.22ミリモ
ル）と18−クラウン−６ 34.4mg（0.13ミリモル）を加
えて、100℃で15時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し
て、残渣をCHCl35mlに溶解し、ろ過後、減圧濃縮して、
その残渣を35gのシリカゲルを詰めたカラムに流し込
み、溶出液（トルエン：酢酸エチル＝6:1）にて溶出・
精製し、化合物（20）197.2mgを得た（収率60.1％）。
1） 元素分析 C54H58O15S2・1/3C6H5CH3として 計算値 C,64.94;H,5.87 測定値 C,65.11;H,5.82 比旋光度▲〔α〕25 D▼＝−44.0゜（Ｃ＝0.20,CHCl3）1 H−NMR（CDCl3） 7.80−7.71（4H,aromatic protons）,7.35−7.16（24
H,aromatic protons）13 C−NMR（CDCl3） 103.5（Ｃ−１′、1JCH161.4Hz）,99.3（Ｃ−1,1JCH1
70.2Hz） 実施例−９〔化合物（19）→化合物（20）〕 化合物（19）109.9mg（0.11ミリモル）をトルエン10m
lに溶解し、ミコール酸カリウム267.1mg（0.22ミリモ
ル）と18−クラウン−６ 34.4mg（0.13ミリモル）を加
えて、100℃で15時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し
て、残渣をCHCl35mlに溶解し、ろ過後、減圧濃縮して、
その残渣を35gのシリカゲルを詰めたカラムに流し込
み、溶出液（トルエン：酢酸エチル＝6:1）にて溶出・
精製し、化合物（20）197.2mgを得た（収率60.1％）。
〔化合物（20）の性質〕 TLC Rf＝0.54（溶出液 トルエン：酢酸エチル＝4:
1） 元素分析 C200H358O16として 計算値 C,79.57;H,11.95 測定値 C,79.63;H,11.76 比旋光度▲〔α〕25 D▼＝＋18.6゜（Ｃ＝0.43,CHCl3,42
時間後） 実施例−10〔化合物（29）→化合物（21）〕 化合物（20）174.8mgをCHCl35mlに溶解し、パラジウ
ムブラック触媒35mgとTHF5mlを加えてH2を封入し、50℃
で４時間撹拌後、触媒をろ過して除去してから減圧濃縮
して、残渣を12gのシリカゲルを詰めたカラムに流し込
み、溶出液（CHCl3:CH3OH＝10:1）にて溶出・精製し、
得られたワックス状の化合物（21）をエーテル1mlに溶
解し、０℃のCH3OH20mlに滴下して析出させ、遠心分離
後、減圧乾燥して、化合物（21）123.12mgを白色粉末状
で得た（収率80.1％）。
1） 元素分析 C200H358O16として 計算値 C,79.57;H,11.95 測定値 C,79.63;H,11.76 比旋光度▲〔α〕25 D▼＝＋18.6゜（Ｃ＝0.43,CHCl3,42
時間後） 実施例−10〔化合物（29）→化合物（21）〕 化合物（20）174.8mgをCHCl35mlに溶解し、パラジウ
ムブラック触媒35mgとTHF5mlを加えてH2を封入し、50℃
で４時間撹拌後、触媒をろ過して除去してから減圧濃縮
して、残渣を12gのシリカゲルを詰めたカラムに流し込
み、溶出液（CHCl3:CH3OH＝10:1）にて溶出・精製し、
得られたワックス状の化合物（21）をエーテル1mlに溶
解し、０℃のCH3OH20mlに滴下して析出させ、遠心分離
後、減圧乾燥して、化合物（21）123.12mgを白色粉末状
で得た（収率80.1％）。
〔化合物（21）の性質〕 TLC Rf＝0.38（溶出液 CHCl3:CH3OH＝10:1） 元素分析 C172H334O16として 計算値 C,77.71;H,12.66 測定値 C,77.49;H,12.51 比旋光度▲〔α〕25 D▼＝−19.8゜（Ｃ＝0.33,CHCl3） （実験例） 本発明化合物は予想通り毒性が大幅に軽減されたが、
以下にその薬理活性に関して行った実験の例を挙げて述
べる。
以下にその薬理活性に関して行った実験の例を挙げて述
べる。
実験例−１（毒性試験） ヤルコニーの方法〔E.Yarkoniら,infect.Immun.,18
（1977）552〕に従い、TDM関連化合物2mgとドラケオー
ル6VR（Drakeol,鉱物油）45mgをホモジナイズした後、
更に1.1％ツイーン（Tween）80を含む生理食塩水455μ
を加えてホモジナイズして得た水中油型エマルジョン
を７〜９週令のC57BL/6（メス）マウス５匹に0.1mlずつ
静脈注射し、体重変化と生死を観察した。その結果を第
１図及び第１表に示す。比較として公知のTDM（α，
α）を用い、対照としてTDM未添加の系を用いた。
（1977）552〕に従い、TDM関連化合物2mgとドラケオー
ル6VR（Drakeol,鉱物油）45mgをホモジナイズした後、
更に1.1％ツイーン（Tween）80を含む生理食塩水455μ
を加えてホモジナイズして得た水中油型エマルジョン
を７〜９週令のC57BL/6（メス）マウス５匹に0.1mlずつ
静脈注射し、体重変化と生死を観察した。その結果を第
１図及び第１表に示す。比較として公知のTDM（α，
α）を用い、対照としてTDM未添加の系を用いた。
第１図及び第１表から、公知のTDM（α，α）の系で
は、３週間後の生存数が０であるのに対し、本発明化合
物であるTDM（α，β）及びTDM（β，β）の系では、一
時的な体重減少は見られるもののすぐに回復し、毒性に
関して大幅な改善がなされたことがわかる。
は、３週間後の生存数が０であるのに対し、本発明化合
物であるTDM（α，β）及びTDM（β，β）の系では、一
時的な体重減少は見られるもののすぐに回復し、毒性に
関して大幅な改善がなされたことがわかる。
実験例２（腹腔マクロファージ活性化試験） 加藤の方法〔Arch.Biochem.Biophys.,140（1970）37
9〕により作製したTDM関連化合物の水サスペンジョンを
PBSで100μg/mlに希釈し、0.5mlずつ７〜９週令のC57BL
/6（メス）マウスの腹腔内に投与（各グループ２匹ず
つ）した。５日後マウスの腹腔内滲出細胞を集め、96穴
プレートにガラス付着性細胞が105個／穴ずつ入る様に
蒔いた。次に125I−UdRでラベルされたB16−BL6細胞
（マウスメラノーマ）を標的細胞として104個／穴ずつ
上から加え、３日間37℃ CO2インキュベーターで培養し
た。対照としてPBSのみ投与したマウスの腹腔内滲出細
胞を用いた。
9〕により作製したTDM関連化合物の水サスペンジョンを
PBSで100μg/mlに希釈し、0.5mlずつ７〜９週令のC57BL
/6（メス）マウスの腹腔内に投与（各グループ２匹ず
つ）した。５日後マウスの腹腔内滲出細胞を集め、96穴
プレートにガラス付着性細胞が105個／穴ずつ入る様に
蒔いた。次に125I−UdRでラベルされたB16−BL6細胞
（マウスメラノーマ）を標的細胞として104個／穴ずつ
上から加え、３日間37℃ CO2インキュベーターで培養し
た。対照としてPBSのみ投与したマウスの腹腔内滲出細
胞を用いた。
３日目に37℃に温めたPBSで各穴を２回洗浄し、残っ
た生存標的細胞を70μの0.1N−NaOHで破壊し、綿棒で
ふき取り、綿棒の放射線量をガンマーカウンターで測定
した。その結果を第２表に示す。
た生存標的細胞を70μの0.1N−NaOHで破壊し、綿棒で
ふき取り、綿棒の放射線量をガンマーカウンターで測定
した。その結果を第２表に示す。
第２表から、本発明化合物であるTDM（α，β）及びT
DM（β，β）は公知のTDM（α，α）とほぼ同等の腹腔
マクロファージ活性化能を有していることがわかる。
DM（β，β）は公知のTDM（α，α）とほぼ同等の腹腔
マクロファージ活性化能を有していることがわかる。
（発明の効果） 以上の実験例からも明らかなように、本発明化合物は
各種免疫療法の免疫増強剤として有用である。
各種免疫療法の免疫増強剤として有用である。
第１図は、TDM関連化合物を静脈注射したマウスの体重
の経日的変化を示す。
の経日的変化を示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 加藤 和昭 埼玉県北葛飾郡吉川町中曽根477
Claims (7)
- 【請求項１】下記一般式（Ｉ）で表される化合物。 式（Ｉ） （式中、R1はベンジル基を示し、且つR2はトリチル基、
水素原子、トシル基又はアシル基を示すか、あるいはR1
は水素原子を示し、且つR2はミコロイル基を示す。） - 【請求項２】下記一般式（II）で表される化合物。 式（II） （式中、R1はベンジル基を示し、R2とR3は共同して一つ
のベンジリデン基又はそれぞれ水素原子を示すか、また
はR2は水素原子を示し且つR3はトシル基又はアシル基を
示し、あるいはR1及びR2は水素原子を示し、且つR3はア
シル基を示す。） - 【請求項３】一般式（II）のR1及びR2が水素原子であ
り、R3がミコロイル基である請求項２記載の化合物。 - 【請求項４】（ａ）β，β−トレハロース［化合物（1
0）］をトリチル化後、ベンジル化し、一般式（Ｉ）で
表される化合物（11）［一般式（Ｉ）中、R1はベンジル
基を示し、R2はトリチル基を示す。］を製造する工程、 （ｂ）化合物（11）を脱トリチル化し、一般式（Ｉ）で
表される化合物（12）［一般式（Ｉ）中、R1はベンジル
基を示し、R2は水素原子を示す。］を製造する工程、 （ｃ）化合物（12）をトシル化し、一般式（Ｉ）で表さ
れる化合物（13）［一般式（Ｉ）中、R1はベンジル基を
示し、R2はトシル基を示す。］を製造する工程、 （ｄ）化合物（13）をアシル化し、一般式（Ｉ）で表さ
れる化合物（14）［一般式（Ｉ）中、R1はベンジル基を
示し、R2はミコロイル基を示す。］を製造する工程、 （ｅ）化合物（14）を脱ベンジル化し、一般式（Ｉ）で
表される化合物（15）［一般式（Ｉ）中、R1は水素原子
を示し、R2はミコロイル基を示す。］を製造する工程、 の諸工程からなることを特徴とするコードファクター関
連化合物である化合物（15）の製造方法。 - 【請求項５】（ａ）α，β−トレハロース［化合物（1
6）］をベンジリデン化後、ベンジル化し、一般式（I
I）で表される化合物（17）［一般式（II）中、R1はベ
ンジル基を示し、R2及びR3はベンジリデン基を示す。］
を製造する工程、 （ｂ）化合物（17）を脱ベンジリデン化し、一般式（I
I）で表される化合物（18）［一般式（II）中、R1はベ
ンジル基を示し、R2及びR3は水素原子を示す。］を製造
する工程、 （ｃ）化合物（18）をトシル化し、一般式（II）で表さ
れる化合物（19）［一般式（II）中、R1はベンジル基を
示し、R2は水素原子を示し、R3はトシル基を示す。］を
製造する工程、 （ｄ）化合物（19）をアシル化し、一般式（II）で表さ
れる化合物（20）［一般式（II）中、R1はベンジル基を
示し、R2は水素原子を示し、R3はミコロイル基を示
す。］を製造する工程、 （ｅ）化合物（20）を脱ベンジル化し、一般式（II）で
表される化合物（21）［一般式（II）中、R1及びR2は水
素原子を示し、R3はミコロイル基を示す。］を製造する
工程、 の諸工程からなることを特徴とするコードファクター関
連化合物である化合物（21）の製造方法。 - 【請求項６】下記一般式（Ｉ）で表される化合物を有効
成分として含有することを特徴とする免疫増強剤。 式（Ｉ） （式中、R1はベンジル基を示し、且つR2はトリチル基、
水素原子、トシル基又はアシル基を示すか、あるいはR1
は水素原子を示し、且つR2はアシル基を示す。） - 【請求項７】下記一般式（II）で表される化合物を有効
成分として含有することを特徴とする免疫増強剤。 式（II） （式中、R1はベンジル基を示し、R2とR3は共同して一つ
のベンジリデン基又はそれぞれ水素原子を示すか、また
はR2は水素原子を示し且つR3はトシル基又はアシル基を
示し、あるいはR1及びR2は水素原子を示し、且つR3はア
シル基を示す。）
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63153460A JP2710052B2 (ja) | 1988-06-23 | 1988-06-23 | コードファクター関連化合物及びその製造法並びに該化合物を含有する免疫増強剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63153460A JP2710052B2 (ja) | 1988-06-23 | 1988-06-23 | コードファクター関連化合物及びその製造法並びに該化合物を含有する免疫増強剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH024798A JPH024798A (ja) | 1990-01-09 |
| JP2710052B2 true JP2710052B2 (ja) | 1998-02-10 |
Family
ID=15563043
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63153460A Expired - Fee Related JP2710052B2 (ja) | 1988-06-23 | 1988-06-23 | コードファクター関連化合物及びその製造法並びに該化合物を含有する免疫増強剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2710052B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3815291A1 (de) * | 1988-05-05 | 1989-11-23 | Basf Ag | Waessrige saure reinigerformulierungen |
-
1988
- 1988-06-23 JP JP63153460A patent/JP2710052B2/ja not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ANN MICROBIOL INST PASTEUR * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH024798A (ja) | 1990-01-09 |
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|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |