JP2627849B2 - アンジオテンシン変換酵素阻害剤 - Google Patents
アンジオテンシン変換酵素阻害剤Info
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- angiotensin converting
- angiotensin
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- phe
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- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
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- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/52—Improvements relating to the production of bulk chemicals using catalysts, e.g. selective catalysts
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、アンジオテンシンＩか
らアンジオテンシンＩＩへの変換を触媒するアンジオテ
ンシン変換酵素の阻害剤に関するものである。
らアンジオテンシンＩＩへの変換を触媒するアンジオテ
ンシン変換酵素の阻害剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】最近、アンジオテンシン変換酵素の阻害
剤が、本態性高血圧に効果的であることが多くの研究お
よび臨床の場で明らかにされている。
剤が、本態性高血圧に効果的であることが多くの研究お
よび臨床の場で明らかにされている。
【０００３】即ち、アンジオテンシン変換酵素は、昇圧
に働く内分泌・体内性因子として代表的なレニン・アン
ジオテンシン系で重要な役割を担っているとともに降圧
に働く内分泌系・体内性因子として代表的なカリクレイ
ン・キニン系に大きく関与している。さらに、レニン・
アンジオテンシン系では、腎臓の酵素レニンが血中に分
泌され、血中の糖蛋白質アンジオテンシンノーゲンに作
用し、アンジオテンシンＩを生成する。この物質には昇
圧作用はないがこれにアンジオテンシン変換酵素が作用
するとこの系の生物活性の中心であるアンジオテンシン
ＩＩは抹消血管を収縮させ抹消血管抵抗を増大させると
ともに副腎皮質に作用してアルドステロンの産生遊出を
促進する。アルドステロンは腎臓に作用し、ナトリウム
の再吸収を促進し、体内に水とともに貯留するため体液
量が増え、心拍量が増大する。これらの作用は血圧を大
きく上昇させる。このように、アンジオテンシン変換酵
素の生理的作用機序が明らかとなり、アンジオテンシン
変換酵素阻害剤による高血圧に対する有効性が確かめら
れている。
に働く内分泌・体内性因子として代表的なレニン・アン
ジオテンシン系で重要な役割を担っているとともに降圧
に働く内分泌系・体内性因子として代表的なカリクレイ
ン・キニン系に大きく関与している。さらに、レニン・
アンジオテンシン系では、腎臓の酵素レニンが血中に分
泌され、血中の糖蛋白質アンジオテンシンノーゲンに作
用し、アンジオテンシンＩを生成する。この物質には昇
圧作用はないがこれにアンジオテンシン変換酵素が作用
するとこの系の生物活性の中心であるアンジオテンシン
ＩＩは抹消血管を収縮させ抹消血管抵抗を増大させると
ともに副腎皮質に作用してアルドステロンの産生遊出を
促進する。アルドステロンは腎臓に作用し、ナトリウム
の再吸収を促進し、体内に水とともに貯留するため体液
量が増え、心拍量が増大する。これらの作用は血圧を大
きく上昇させる。このように、アンジオテンシン変換酵
素の生理的作用機序が明らかとなり、アンジオテンシン
変換酵素阻害剤による高血圧に対する有効性が確かめら
れている。
【０００４】このような理論的裏付けから、天然物から
のアンジオテンシン変換酵素阻害物質の検索が行なわ
れ、多数見出されている。さらに、より効果的阻害剤の
合成が行なわれている。一方、日常摂取されている食品
からもアンジオテンシン変換酵素阻害剤が見いだされて
おり、合成阻害剤と比べ、これらは、長年にわたる食経
験からその安全性が充分確かめられていることから、平
常の食生活により血圧を正常に保つ効果が期待されてい
る。
のアンジオテンシン変換酵素阻害物質の検索が行なわ
れ、多数見出されている。さらに、より効果的阻害剤の
合成が行なわれている。一方、日常摂取されている食品
からもアンジオテンシン変換酵素阻害剤が見いだされて
おり、合成阻害剤と比べ、これらは、長年にわたる食経
験からその安全性が充分確かめられていることから、平
常の食生活により血圧を正常に保つ効果が期待されてい
る。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】上記のように、天然物
および食品由来アンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤は、
人体に対する安全性から需要性が高く、より一層の開発
が望まれていた。
および食品由来アンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤は、
人体に対する安全性から需要性が高く、より一層の開発
が望まれていた。
【０００６】本発明は、この課題を解決するためになさ
れたものであって、アンジオテンシン変換酵素を有効に
阻害することにより、血圧上昇を抑制する安全な物質
を、食品素材の中からみいだし、その阻害物質の構造を
明らかにするとともに、簡単な濃縮法を開発し、アンジ
オテンシン変換酵素阻害剤を含む食品素材を提供するこ
とを目的とする。
れたものであって、アンジオテンシン変換酵素を有効に
阻害することにより、血圧上昇を抑制する安全な物質
を、食品素材の中からみいだし、その阻害物質の構造を
明らかにするとともに、簡単な濃縮法を開発し、アンジ
オテンシン変換酵素阻害剤を含む食品素材を提供するこ
とを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明は、上述の目的の
ために種々の研究を重ねて得られた知見に基づいて完成
したものである。
ために種々の研究を重ねて得られた知見に基づいて完成
したものである。
【０００８】即ち、広範囲の食品に使用されている大豆
を原料として、その水抽出液を調製し、蛋白質分解酵素
により分解し、それの不溶物を遠心および濾過により取
り除き、そのろ液を直ちに逆相系充填剤を詰めたカラム
に流し、アンジオテンシン変換酵素阻害物質を吸着後、
含水アルコールで溶出することにより、簡単に阻害物質
を濃縮することができ、また、この阻害物質混合物から
構造式Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ、Ｐｒｏ−Ａｒ
ｇ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ、Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ、Ａｓｐ
−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ、Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒお
よびＰｈｅ−Ｔｙｒの６種のアンジオテンシン変換酵素
阻害ペプチドを単離することができたことによるもので
ある。
を原料として、その水抽出液を調製し、蛋白質分解酵素
により分解し、それの不溶物を遠心および濾過により取
り除き、そのろ液を直ちに逆相系充填剤を詰めたカラム
に流し、アンジオテンシン変換酵素阻害物質を吸着後、
含水アルコールで溶出することにより、簡単に阻害物質
を濃縮することができ、また、この阻害物質混合物から
構造式Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ、Ｐｒｏ−Ａｒ
ｇ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ、Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ、Ａｓｐ
−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ、Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒお
よびＰｈｅ−Ｔｙｒの６種のアンジオテンシン変換酵素
阻害ペプチドを単離することができたことによるもので
ある。
【０００９】そして、このことから、本発明において
は、上述の目的を達成するための手段として、構造式Ｐ
ｒｏ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ、Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｖａ
ｌ−Ｐｈｅ、Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ、Ａｓｐ−Ｔｈｒ
−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ、Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒよりなるア
ンジオテンシン変換酵素阻害剤を提起し、また、大豆蛋
白質溶液を蛋白質加水分解酵素で分解後、直ちに逆相分
配系樹脂に吸着し、含水アルコールで溶出してなるアン
ジオテンシン変換酵素阻害剤の製造法を提起するもので
ある。
は、上述の目的を達成するための手段として、構造式Ｐ
ｒｏ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ、Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｖａ
ｌ−Ｐｈｅ、Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ、Ａｓｐ−Ｔｈｒ
−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ、Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒよりなるア
ンジオテンシン変換酵素阻害剤を提起し、また、大豆蛋
白質溶液を蛋白質加水分解酵素で分解後、直ちに逆相分
配系樹脂に吸着し、含水アルコールで溶出してなるアン
ジオテンシン変換酵素阻害剤の製造法を提起するもので
ある。
【００１０】
【実施例】次に本発明の実施例を具体的に説明する。 （実施例１）豆乳２リットルに１ｇの蛋白質分解酵素を
添加し、緩やかに撹拌しながら４５℃で２時間加水分解
を行なった。次に、反応容器をそのまま沸騰水中につけ
加熱を続けることにより、熱凝固性蛋白質を凝集し、遠
心分離により、上清を得た。さらにセライト濾過により
透明液を得ることができた。この液を凍結乾燥すること
により、凍結乾燥物８０．８４ｇを得ることができた。
また、アンジオテンシン変換酵素阻害活性は、ＩＣ５０
１２５μｇ／ｍｌであった。なお、ここで濾過液を凍
結乾燥したのは、ＩＣ５０を測定するためであり、凍結
乾燥を行なわずに次の工程にいくことができる。
添加し、緩やかに撹拌しながら４５℃で２時間加水分解
を行なった。次に、反応容器をそのまま沸騰水中につけ
加熱を続けることにより、熱凝固性蛋白質を凝集し、遠
心分離により、上清を得た。さらにセライト濾過により
透明液を得ることができた。この液を凍結乾燥すること
により、凍結乾燥物８０．８４ｇを得ることができた。
また、アンジオテンシン変換酵素阻害活性は、ＩＣ５０
１２５μｇ／ｍｌであった。なお、ここで濾過液を凍
結乾燥したのは、ＩＣ５０を測定するためであり、凍結
乾燥を行なわずに次の工程にいくことができる。
【００１１】凍結乾燥物８０ｇを４００ｍｌの水に溶解
後、逆相分配系樹脂を充填し、予め水で平衡化したカラ
ム（５×２８ｃｍ）に供給し、１リットルの水で溶出し
た後、順次１０％づつメタノール濃度を上げ、５０％メ
タノールまでステップワイズで溶出を行なった。ここで
用いた逆相分配系樹脂は、オクタデシルシラン（株式会
社ワイエムシー）を用いたが、いずれの逆相分配樹脂で
も使用できる。また、溶出メタノールを用いたがこれに
かぎるものではない。最後に、１００％メタノールで溶
出後、各溶出画分を濃縮・凍結乾燥し、収量とアンジオ
テンシン変換酵素阻害活性を測定した。その結果（表
１）１００％水溶出画分、即ち、非吸着成分に阻害活性
は、検出されなかった。また、１０〜１００％メタノー
ル溶出画分全てに同程度の活性が検出されることから、
アンジオテンシン変換酵素阻害ペプチドは、逆相分配系
充填カラムに吸着する性質を有し、しかも、多数存在す
るものと推定された。また、この結果から明らかなよう
に一回の操作によりアンジオテンシン変換酵素阻害活性
の高い物質を高収量で得ることができる。
後、逆相分配系樹脂を充填し、予め水で平衡化したカラ
ム（５×２８ｃｍ）に供給し、１リットルの水で溶出し
た後、順次１０％づつメタノール濃度を上げ、５０％メ
タノールまでステップワイズで溶出を行なった。ここで
用いた逆相分配系樹脂は、オクタデシルシラン（株式会
社ワイエムシー）を用いたが、いずれの逆相分配樹脂で
も使用できる。また、溶出メタノールを用いたがこれに
かぎるものではない。最後に、１００％メタノールで溶
出後、各溶出画分を濃縮・凍結乾燥し、収量とアンジオ
テンシン変換酵素阻害活性を測定した。その結果（表
１）１００％水溶出画分、即ち、非吸着成分に阻害活性
は、検出されなかった。また、１０〜１００％メタノー
ル溶出画分全てに同程度の活性が検出されることから、
アンジオテンシン変換酵素阻害ペプチドは、逆相分配系
充填カラムに吸着する性質を有し、しかも、多数存在す
るものと推定された。また、この結果から明らかなよう
に一回の操作によりアンジオテンシン変換酵素阻害活性
の高い物質を高収量で得ることができる。
【００１２】逆相分配系充填カラムに吸着したアンジオ
テンシン変換酵素阻害物質の有効性を確かめるために、
高血圧自然発症ラット（ＳＨＲ）を用い調べた。即ち、
窒素源としてカゼイン、分離大豆蛋白および豆乳を上記
のように処理し、逆相分配系樹脂を充填したカラムにか
け非吸着成分の溶出後、１００％メタノールで溶出し、
この１００％メタノール溶出画分を凍結乾燥し粉末状に
したものを用い、合成実験飼料を作成し、ＳＨＲに投与
した。なお、その時の飼料組成は、表２の通りであっ
た。この飼料を飲水とともに自由に摂取させた。血圧
は、無麻酔下、非絶食下で尾静脈圧を測定した。その結
果、図１に示すように１００％メタノール溶出画分に血
圧上昇抑制効果が認められた。
テンシン変換酵素阻害物質の有効性を確かめるために、
高血圧自然発症ラット（ＳＨＲ）を用い調べた。即ち、
窒素源としてカゼイン、分離大豆蛋白および豆乳を上記
のように処理し、逆相分配系樹脂を充填したカラムにか
け非吸着成分の溶出後、１００％メタノールで溶出し、
この１００％メタノール溶出画分を凍結乾燥し粉末状に
したものを用い、合成実験飼料を作成し、ＳＨＲに投与
した。なお、その時の飼料組成は、表２の通りであっ
た。この飼料を飲水とともに自由に摂取させた。血圧
は、無麻酔下、非絶食下で尾静脈圧を測定した。その結
果、図１に示すように１００％メタノール溶出画分に血
圧上昇抑制効果が認められた。
【００１３】（実施例２）実施例１に示したように、ア
ンジオテンシン変換酵素阻害物質混合物が実際にＳＨＲ
の血圧上昇抑制作用を示すことから、その活性本体の単
離精製を行なった。即ち、実施例１における２０％メタ
ノール溶出画分２．７７ｇを１５％メタノールに溶解
し、予め同じ溶媒で平衡化したオクタデシルシリルカラ
ム（２．５×２２ｃｍ）に供給し、同じ溶媒で溶出し
た。各画分の２２０ｎｍにおける吸光度を測定した結果
（図２）、Ｎｏ．９３にピークを示した。また、各フラ
クション１００μｌを使用し、阻害活性を測定した結
果、Ｎｏ．９３ピーク成分の比活性が低いと考えられる
ことから、Ｎｏ．３５から８０およびＮｏ．１１０から
１６０を濃縮・凍結乾燥し、それぞれ２０Ｉおよび２０
ＩＩ画分とした。また、各画分のＩＣ５０は、２０Ｉが
５０μｇ／ｍｌ２０ＩＩが４０μｇ／ｍｌであった。
ンジオテンシン変換酵素阻害物質混合物が実際にＳＨＲ
の血圧上昇抑制作用を示すことから、その活性本体の単
離精製を行なった。即ち、実施例１における２０％メタ
ノール溶出画分２．７７ｇを１５％メタノールに溶解
し、予め同じ溶媒で平衡化したオクタデシルシリルカラ
ム（２．５×２２ｃｍ）に供給し、同じ溶媒で溶出し
た。各画分の２２０ｎｍにおける吸光度を測定した結果
（図２）、Ｎｏ．９３にピークを示した。また、各フラ
クション１００μｌを使用し、阻害活性を測定した結
果、Ｎｏ．９３ピーク成分の比活性が低いと考えられる
ことから、Ｎｏ．３５から８０およびＮｏ．１１０から
１６０を濃縮・凍結乾燥し、それぞれ２０Ｉおよび２０
ＩＩ画分とした。また、各画分のＩＣ５０は、２０Ｉが
５０μｇ／ｍｌ２０ＩＩが４０μｇ／ｍｌであった。
【００１４】続いて、２０ＩＩ画分をバイオゲルＰ−２
（バイオ・ラッド ラボラトリーズ株式会社）によるゲ
ル濾過を行なった。即ち、２０ＩＩ画分０．３３ｇを蒸
留水に溶解し、蒸留水で平衡化してあるバイオゲルＰ−
２カラム（２×９１ｃｍ）でゲル濾過を行なった。活性
ピークＮｏ．４５−５３．５４−６３および６４−８５
（図３）をそれぞれ濃縮・凍結乾燥し２０ＩＩ−１、２
０ＩＩ−２、２０ＩＩ−３とした。各画分のＩＣ
５０は、それぞれ９３，５および３μｇ／ｍｌであっ
た。
（バイオ・ラッド ラボラトリーズ株式会社）によるゲ
ル濾過を行なった。即ち、２０ＩＩ画分０．３３ｇを蒸
留水に溶解し、蒸留水で平衡化してあるバイオゲルＰ−
２カラム（２×９１ｃｍ）でゲル濾過を行なった。活性
ピークＮｏ．４５−５３．５４−６３および６４−８５
（図３）をそれぞれ濃縮・凍結乾燥し２０ＩＩ−１、２
０ＩＩ−２、２０ＩＩ−３とした。各画分のＩＣ
５０は、それぞれ９３，５および３μｇ／ｍｌであっ
た。
【００１５】ＹＭＣ−ＯＤＳ ＡＭ３２３カラム（株式
会社ワイエムシー）を用い、２０ＩＩ−２および２０Ｉ
Ｉ−３画分から活性成分の単離を高速液体クロマトグラ
フィーで行なった。その結果（図４および図５）、２０
ＩＩ−２画分から２０ＩＩ−２１、２２、２３および２
４の４成分を分離することができ、また、２０ＩＩ−３
画分から２０ＩＩ−３１および２０ＩＩ−３２の２成分
を分離することができた。また、単離した各成分のＩＣ
５０および構造解析の結果を表３に示した。
会社ワイエムシー）を用い、２０ＩＩ−２および２０Ｉ
Ｉ−３画分から活性成分の単離を高速液体クロマトグラ
フィーで行なった。その結果（図４および図５）、２０
ＩＩ−２画分から２０ＩＩ−２１、２２、２３および２
４の４成分を分離することができ、また、２０ＩＩ−３
画分から２０ＩＩ−３１および２０ＩＩ−３２の２成分
を分離することができた。また、単離した各成分のＩＣ
５０および構造解析の結果を表３に示した。
【００１６】なお、この実施例におけるアンジオテンシ
ン変換酵素阻害率の測定は、公知のアンジオテンシン変
換酵素阻害活性測定法（Ｃｕｓｈｍａｎ−Ｃｈｅｕｎｇ
法）によって測定した。即ち、１単位のアンジオテンシ
ン変換酵素（シグマ社、ラビット肺由来）を２０ｍｌの
０．１Ｍホウ酸緩衝液（ｐＨ８．３、０．３Ｍ ＮａＣ
ｌを含む）に溶解し、アンジオテンシン変換酵素溶液を
調製した。この酵素液０．１５ｍｌに阻害剤溶液０．１
ｍｌを加え、さらに、１００ｍｇのヒプリルーヒスチジ
ル−ロイシン（Ｈｉｐｐｕｒｙｌ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ、シ
グマ社）を５０ｍｌのホウ酸緩衝液（ｐＨ８．３、０．
３Ｍ ＮａＣｌを含む）に溶解して調製した基質溶液
０．２５ｍｌを加え混合した。次に、この混合溶液を、
３７℃で３０分間反応した後、１規定の塩酸を０．２５
ｍｌ添加し反応を停止した。その後１．５ｍｌの酢酸エ
チルを加えて充分撹拌し、３，０００ｒｐｍで２分間遠
心分離後、酢酸エチル層を１ｍｌ採取した。この酢酸エ
チルを蒸発乾固後、１ｍｌの蒸留水に溶解し、抽出した
ヒプリル酸の吸収（２２８ｎｍ）を測定し、アンジオテ
ンシン変換酵素阻害率を下記の式により求めた。 ｛１−（ＯＤａ−ＯＤａｂ）／（ＯＤｃ−ＯＤｃｂ）｝×１００ （但し、ＯＤａは上記のようにしてサンプルを加えて測
定した時の吸光度、ＯＤａｂは混合液を反応する前に１
規定の塩酸を０．２５ｍｌ添加し測定した時の吸光度、
ＯＤｃは混合液にサンプルを加えずに測定した時の吸光
度、ＯＤｃｂは混合液にサンプルを加えずに１規定の塩
酸を０．５ｍｌ添加して測定した時の吸光度）またアン
ジオテンシン変換酵素阻害率が５０％になるのに必要な
阻害物質の濃度をＩＣ５０と定義し阻害活性の強さの指
標とした。
ン変換酵素阻害率の測定は、公知のアンジオテンシン変
換酵素阻害活性測定法（Ｃｕｓｈｍａｎ−Ｃｈｅｕｎｇ
法）によって測定した。即ち、１単位のアンジオテンシ
ン変換酵素（シグマ社、ラビット肺由来）を２０ｍｌの
０．１Ｍホウ酸緩衝液（ｐＨ８．３、０．３Ｍ ＮａＣ
ｌを含む）に溶解し、アンジオテンシン変換酵素溶液を
調製した。この酵素液０．１５ｍｌに阻害剤溶液０．１
ｍｌを加え、さらに、１００ｍｇのヒプリルーヒスチジ
ル−ロイシン（Ｈｉｐｐｕｒｙｌ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ、シ
グマ社）を５０ｍｌのホウ酸緩衝液（ｐＨ８．３、０．
３Ｍ ＮａＣｌを含む）に溶解して調製した基質溶液
０．２５ｍｌを加え混合した。次に、この混合溶液を、
３７℃で３０分間反応した後、１規定の塩酸を０．２５
ｍｌ添加し反応を停止した。その後１．５ｍｌの酢酸エ
チルを加えて充分撹拌し、３，０００ｒｐｍで２分間遠
心分離後、酢酸エチル層を１ｍｌ採取した。この酢酸エ
チルを蒸発乾固後、１ｍｌの蒸留水に溶解し、抽出した
ヒプリル酸の吸収（２２８ｎｍ）を測定し、アンジオテ
ンシン変換酵素阻害率を下記の式により求めた。 ｛１−（ＯＤａ−ＯＤａｂ）／（ＯＤｃ−ＯＤｃｂ）｝×１００ （但し、ＯＤａは上記のようにしてサンプルを加えて測
定した時の吸光度、ＯＤａｂは混合液を反応する前に１
規定の塩酸を０．２５ｍｌ添加し測定した時の吸光度、
ＯＤｃは混合液にサンプルを加えずに測定した時の吸光
度、ＯＤｃｂは混合液にサンプルを加えずに１規定の塩
酸を０．５ｍｌ添加して測定した時の吸光度）またアン
ジオテンシン変換酵素阻害率が５０％になるのに必要な
阻害物質の濃度をＩＣ５０と定義し阻害活性の強さの指
標とした。
【００１７】
【発明の効果】以上説明したように、本発明によれば、
高血圧の予防に効果的であることが臨床の場で明らかに
されているアンジオテンシン変換酵素阻害剤を、副作用
などの面で心配のある合成阻害剤としてではなく、長い
食体験からその安全性が立証されている食品である大豆
を用い、その蛋白質分解酵素により生成するアンジオテ
ンシン変換酵素阻害ペプチドを逆相分配系カラムに吸着
後、含水アルコールで溶出することにより、濃縮した形
態として得られるようにしているのだから、平常の食生
活により血圧を正常に保つ効果のある安全な食品素材
を、簡単な操作で濃縮して得られるようになる。また、
単離したアンジオテンシン変換酵素阻害ペプチドは、阻
害率が高く食品素材としてばかりではなく医薬品として
活用できるようになる。
高血圧の予防に効果的であることが臨床の場で明らかに
されているアンジオテンシン変換酵素阻害剤を、副作用
などの面で心配のある合成阻害剤としてではなく、長い
食体験からその安全性が立証されている食品である大豆
を用い、その蛋白質分解酵素により生成するアンジオテ
ンシン変換酵素阻害ペプチドを逆相分配系カラムに吸着
後、含水アルコールで溶出することにより、濃縮した形
態として得られるようにしているのだから、平常の食生
活により血圧を正常に保つ効果のある安全な食品素材
を、簡単な操作で濃縮して得られるようになる。また、
単離したアンジオテンシン変換酵素阻害ペプチドは、阻
害率が高く食品素材としてばかりではなく医薬品として
活用できるようになる。
【図１】カゼイン、分離大豆蛋白および逆相分配系樹脂
に吸着した成分の自然発症高血圧にラットに対する血圧
抑制を示す図である。
に吸着した成分の自然発症高血圧にラットに対する血圧
抑制を示す図である。
【図２】オクタデシルシリルカラム（株式会社ワイエム
シー）による逆相分配クロマトグラフイーで分画した各
フラクションの２２０ｎｍにおける吸光度およびアンジ
オテンシン変換酵素阻害率を示した図である。
シー）による逆相分配クロマトグラフイーで分画した各
フラクションの２２０ｎｍにおける吸光度およびアンジ
オテンシン変換酵素阻害率を示した図である。
【図３】ゲル濾過（バイオゲルＰ−２）によって分画さ
れた各フラクションの２２０ｎｍにおける吸光度および
アンジオテンシン変換酵素阻害率を示した図である。
れた各フラクションの２２０ｎｍにおける吸光度および
アンジオテンシン変換酵素阻害率を示した図である。
【図４】高速液体クロマトグラフイーを用いて分画を行
なった時の吸光度を表す図である。
なった時の吸光度を表す図である。
【図５】高速液体クロマトグラフイーを用いて分画を行
なった時の吸光度を表す図である。
なった時の吸光度を表す図である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｋ 5/113 Ｃ０７Ｋ 5/117 5/117 Ｃ１２Ｎ 9/99 Ｃ１２Ｎ 9/99 Ｃ１２Ｐ 21/06 ＺＮＡ Ｃ１２Ｐ 21/06 ＺＮＡ Ａ６１Ｋ 37/64 ＡＥＤ
Claims (2)
- 【請求項１】 構造式Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙ
ｒ、Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｐｈｅ、Ｌｅｕ−Ｇｌｕ
−Ｐｈｅ、Ａｓｐ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ、Ｔｙｒ−
Ｐｒｏ−Ｓｅｒよりなるアンジオテンシン変換酵素阻害
剤。 - 【請求項２】 大豆蛋白質溶液を蛋白質加水分解酵素で
分解後、直ちに逆相分配系樹脂に吸着し、含水アルコー
ルで溶出せしめてなる請求項１記載のアンジオテンシン
変換酵素阻害剤。
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