JP2619037B2 - Ｘ線検査用の高封入容量のリポソームを含有する注射可能な不透明組成物 - Google Patents

Ｘ線検査用の高封入容量のリポソームを含有する注射可能な不透明組成物

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    • A61K49/0461—Dispersions, colloids, emulsions or suspensions
    • A61K49/0466—Liposomes, lipoprotein vesicles, e.g. HDL or LDL lipoproteins, phospholipidic or polymeric micelles

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、患者の循環系に注射することのできる水性
組成物に関し、その目的はＸ線による診断的検査のため
に或る器官を不透明化する（opacify）ことである。こ
の組成物は、生理学上許容される水性溶媒中の、リン脂
質膜を有する小胞としてのリポソームの懸濁液の形をと
り、これら小胞中にはＸ線に対して不透明である少なく
とも１つのヨウ素化された化合物の水性溶液が封入され
て含まれている。
研究すべき或る器官中への放射線スコープ検査用の不
透明剤の輸送のためにベヒクルとしてリポソームの懸濁
液を利用することは知られている。例えば、US−Ａ−4,
192,859の明細書は、レシチンおよびステロールから構
成されそして器官、特に網内皮および心臓血管系に関連
する器官の検査並びにリンパ管造影検査のための造影剤
を約20〜60重量％含有するリポソームの懸濁液を記載し
ている。そのような造影剤の中で、次のような化合物が
本明細書において言及される。
N,N′−ビス〔２−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメ
チル）−エチル〕−５−〔〔（２−ヒドロキシ−１−オ
キソプピル）−アミノ〕−2,4,6−トリヨード−1,3−ベ
ンゼン−ジカルボキシアミド（イオパミドール）；メト
リザミド；ジアトリゾイン酸；ジアトリゾエートナトリ
ウム；メグルミンジアトリゾエート；アセトリゾイン酸
およびその可溶性塩；ジプロトリゾイン酸；ヨーダミ
ド，ヨージパミドナトリウム、メグルミンヨージパミ
ド、ヨード馬尿酸およびその可溶性塩；ヨードメタム
酸；ヨードピラセットヨード−２−ピリドン−Ｎ−酢
酸、3,5−ジヨード−４−ピリドン−Ｎ−酢酸（ヨード
ピラセット）；前記酸のジエチルアンモニウム塩；イオ
タラム酸；メトリゾイン酸およびその塩；イオパノ酸、
イオセタム酸、イオフェノキシ酸およびそれらの可溶性
塩；チロパノエートナトリウム、イオポダートナトリウ
ムおよび他の同様なヨウ素化された化合物。本明細書に
従って使われるリポソームの脂質膜は、主としてリン脂
質、ステロール、レシチン、ジセチルホスフェートまた
はステアリルアミン、および有機溶媒を含む。本明細書
によれば常に、そのようなリポソームは、選択された脂
質成分を有機溶媒、例えばクロロホルム、ジクロロメタ
ン、エチルエーテル、四塩化炭素、酢酸エチル、ジオキ
サン、THF等と共に容器中で混合することにより調製さ
れ得る。揮発性化合物を減圧下で蒸発せしめた後、脂質
混合物を、正確に計った量の不透明剤を含有する緩衝液
中に分散させる。次いで全体を数時間撹拌し（これがリ
ポソームの形成を引き起こす）、そうして生成したリポ
ソームの小胞にその分散液の一部（不透明剤を含む）を
封入する。次に、それらリポソームのサイズおよび分散
液の粘度を減少させるために、分散液を超音波処理す
る。
不透明剤を含むリポソームの調製に関する他の文献も
ある。
例えば、FR−Ａ−2,561,101の明細書は、Ｘ線の不透
明剤を含有することのできるリポソームの調製方法を記
載している。この明細書によれば、まず第一に有機溶媒
中でリポソームの“前駆体”が調製され、次いでそれか
ら該溶媒を部分的に分離し、一部分の脂質を含んでいる
この溶液を、該前駆体の単分子膜を二分子膜に変換する
ために応用する。次にこの溶液を水性媒質中に分散せし
め、そして残った溶媒を完全に取り除く。
US−Ａ−4,567,034の明細書は、Ｘ線不透明剤および
コントラスト生成物のベクターとしてのリポソーム中へ
のそれの取り込みを記載している。
GB−Ａ−4,134,869の明細書は、リポソームの調製の
ための技術を記載しており、これによれば、水溶性のキ
ャリヤー剤（NaCl、サッカロース、ラクトース等）の粒
子（10μｍ）を両親媒性剤でコーティングし、次なる該
担体の水性溶媒中への分散でリポゾームを生ぜしめる。
該コーティングは、該脂質および封入されるべき生成物
（その中にＸ線造影剤が見出される）の有機溶液中に該
キャリヤーの固体粒子を分散させることにより行われ
る。両親媒性剤の中で、飽和された合成レシチンを言及
することになっている。
GB−Ａ−2,135,268の明細書もまた、水溶性のキャリ
ヤー剤の粒子から出発する、不透明剤を含み得るリポソ
ームを形成せしめるための方法を記載している。
GB−Ａ−2,135,647の明細書は、キャリヤー材料の粒
子が不溶性であるという違いを除けば上記２つの明細書
のものと幾らか類似しているリポソームの調製方法を記
載している。この中に含まれるものは、ガラスの微小球
または合成樹脂である。該粒子は、それらを脂質および
所望によりイオン性界面活性剤またはコレステロールを
含む有機溶液と接触させ、その操作に続いて蒸発せしめ
ることにより、それら成分を含むフィルムでコーティン
グされる。その後、封入すべき水性分散媒質、より特定
的にはＸ線不透明剤を含むものの中でそれら球体を撹拌
し、次いで濾過または遠心により後者を分離せしめるこ
とにより、所望のリポソームの溶液が得られる。
GB−Ａ−2,156,345の明細書は、Ｘ線−造影剤として
のトリヨード安息香酸のジアセチルアミノ化化合物およ
びそれのリポソーム内への取り込みを記載している。
GB−Ａ−2,157,283の明細書は、上記刊行物のものに
類似した化合物および20−60％の量におけるそれのリポ
ソーム内への取り込みを記載している。後者は、US 3,9
57,971の明細書に記載されている調製法と一致してい
る。
EP−Ａ−179,660の明細書は、リポソームの懸濁液の
調製方法を記載しており、これによれば、封入すべき生
物活性物質を脂質の存在下で有機溶液中に分散せしめ、
ゲルの形成が起こるまで溶媒を蒸発せしめ、そしてこの
ゲルを次の緩衝化水性溶媒中に再懸濁する。各成分の量
および操作条件の適切な調節により、リポソーム小胞の
非常に高程度の封入および非常に均質な分布をもたら
す。
リポソームに関する他の最近の文献の中で、コントラ
スト生成物のベクターとして、それらは言及されるかも
しれない:A.HARVONら、Radiology（1981）140,507;P.J.
RYAN ら、Biochem.Biophys:Acta（1983）756,106;S.E.
SELTZERら、AJR（1984）143,575;P.J.RYAN ら、Radiol
ogy（1984）152,759;O.A.ROZENBERG,Radiology（1983）
149,877;S.BENITAら、J.Pharm.Sci.（1984）73,1751;K.
T.CHENG ら、Investigative Radiology（1987）22,47
−55;M.R.ZALUTZKY ら、Investigative Radiology（19
87）22,141−147。
前述の文献中に開示された前記技術は，実験的な試験
においてはよく実行されるけれども、幾つかの実際的問
題に実用の点で解決すべきことが残った。
従って、不透明剤を含有するリポソーム小胞は最終的
に肝臓および脾臓に定着するけれども、循環系における
それらの消失と伴に、脂肪代謝の危険を有する肺の毛細
血管により保持されることも可能である。さらに、実際
のリポソームのヨウ素化生成物の体積および重量での封
入の比容量は、比較的小さく（通常、脂質1g当り1g未満
のヨウ素）、そしてこれは所望の隠蔽効果を達成するた
めに比較的多量の脂質の注入を要する。この問題に関し
ては、このヨウ素は明らかに有機分子に結合しているけ
れども、実際問題として、脂質1g当りのヨウ素のｇとし
ての封入されたヨウ素の量によりリポソーム調製物を特
徴づけるのが常であるということに注意する。Ｘ線を使
う検査に必要なヨウ素の量に関しては、肝臓の不透明化
には組織1g当り２−2.5mgのオーダーのヨウ素濃度、即
ち約6g（肝臓の重さ約2.3kg）を必要とすることが認め
られる。注入されたリポソームの約40％だけが肝臓中に
保持されるという事実を考慮すると、最小で15gのヨウ
素を投与することが必要である。１のI/1比のためには
（当技術の現状では高い値）これは15gの脂質に相当
し、既にかなりの用量を構成する。このことから明らか
なように、主な着眼点はリポソームの封入容量を増加せ
しめることである。
例として、V.J.CARIDE,CRC Dritical Reviews in The
rapeutic Drug Carrier Systems（1985），１,121−153
によれば、彼が“小さい単一層板の（unilamellar）小
胞（SUV）として定義している、直径0.02〜0.5μｍを有
するクラスのリポソームの封入容量は、0.2〜1.5l/モル
のオーダーであり、これは約800の平均分子量（リン脂
質）だとしても、約１〜2ml/gリン脂質の封入容量に相
当する。例えば、ヨウ素300mg/mlのオーダーの不透明化
溶液を封入する場合には、I/1比ができれば1.5の値を超
えるように、この容量を5ml/gまたはそれより高く上げ
ることが望まれる。
さらに、隠蔽力を有する本発明のリポソームの懸濁液
により含まれるヨウ素のかなりの部分が水性分散相中に
溶解されておりそして該小胞内に封入されない（例え
ば、US−Ａ−4,192,859を参照のこと）。そういった状
況は望ましくないということがわかるだろう。何故な
ら、診断目的での注射の時に、封入されていないヨウ素
の部分が検査すべき器官中に固定されずそして全く有用
な目的に役立たないからである。結果として、無駄にヨ
ウ素を注入しなけれけばならないことを避けるために、
できる限りこの封入されない部分を減らし得るのが望ま
しい。
請求項１に定義された組成物は、封入力の欠除の欠点
を克服することを可能にする。実際、実験の間に、本発
明者らは、驚くべきことにリポソームの溶液の小胞のサ
イズをある値の範囲内に“標準化する”ことにおいて、
即ち、0.15μｍ以下または３μｍ以上の寸法を有する小
胞の大部分を、押出しによってサイジングすることによ
り排除することにより、そして好ましくは0.2〜１μｍ
のサイズに小胞の大部分を維持することにより、封入さ
れるヨウ素の量が幾分か増加することを確証した。この
結果は、該小胞の比封入容量（即ち、小胞の膜の脂質の
重量に対する封入された液体の体積）の増加の結果であ
り、ある場合にはこの比が10−15ml/g脂質に達すること
が可能である。
加えて、そして他の予期せぬ要素を構成して、該リポ
ソームをサイジングする方法は肺の毛細血管におけるリ
ポソームの保持の問題をかなり除去することを可能に
し、この器官において検出可能なそのようなリポソーム
の割合は、大きいサイズのリポソーム、例えば２〜３μ
ｍを超えるものを除去したとたんに減少する。標準化に
より、ここに特記するつもりなのは、サイズに応じた粒
子の統計的分布の基準に従って、標準化の操作が前記小
胞の分布曲線の収縮をもたらすことを言いたいというこ
とである；従って、本発明においては、それらの多分散
度の指数が４よりも高くなく、そして好ましくは、リポ
ソームの溶液の小胞の総数の70％以上のサイズが0.2〜
２μｍである。
上記の発見のためにそして請求項１に記載の封入溶液
中に溶解されるヨウ素化された不透明化合物の適当な選
択により、請求項2,3および11に記載の不透明組成物を
首尾よく得ることができる。また、そのような溶液をあ
る適当な処理（後述）にかけることにより、水性懸濁相
中に溶解されたヨウ素の大部分を首尾よく除去した。本
発明に係る組成物の粘度（ある完成の形態においては、
37℃で30よりも低いかまたは20〜30mP.s.のオーダーで
あろう）が、従来技術による懸濁液のそれ（例えば、US
−Ａ−4,192,859の明細書中に記載の懸濁液は、60％の
ヨウ素含量について、数百のmP.s.の粘度に達する）よ
りも低いことにも注目すべきであろう。リポソームの懸
濁液の粘度は、脂質のレベルを下げた時に減少し、そし
てI/1比を一定に保つためにそれら後者の封入容量を同
程度に増加せしめることが必要であるということが実際
に明らかであろう。
さらに、ヨウ素化された不透明剤の存在は、該溶液の
粘度を引き上げることに寄与し（例えば、１リットル当
りヨウ素300gのイオパミドールの水溶液は、20℃で8.8m
P.s.および37℃で4.7mP.s.の粘度を有する）、そしてリ
ポソームの分散溶媒中の該ヨウ素化された化合物の濃度
のどのような減少でもこの粘度を低下せしめる一助とな
るだろう。
本発明に係る組成のリポソームの脂質膜は、リポソー
ム懸濁液の通常粒子において通常に使われる両親媒性の
化合物から構成されてもよい。そのような化合物は、前
述の引用文献中に記載されている。リン脂質、例えば大
豆の加水分解されたレシチン（例えば、Nattermann Che
mieのNC−95H製品）、ジパルミトイルホスファチジルコ
リン（DPPC）、ジステアロイルホスファチジルコリン
（DSPC）、スフィンゴミエリン（SM）ジセチルホスフェ
ート（DCP）、ジパルミトイルホスファチジルグリセロ
ール（DPPG）およびジパルミトイルホスファチジル酸
（DPPA）を使うのが好ましい。リポソームの球体におけ
る通常のやり方（cf.導入部において引用した参考文
献）とは反対に、本発明において使用される脂質の中に
コレステロールを用いることは好ましくなく、これはそ
れらの安定化には必須でない。分散緩衝相に関する脂質
の割合は、通常0.1〜10％のオーダー、好ましくは約２
〜６％である。脂質に対する封入された液体の割合（v/
1比）は、5ml/g以下ではなくそして特別な場合には20ml
/gに達するだろう。好ましくは、それは５〜15ml/gであ
り、そして最も頻繁には７〜12ml/gである。
Ｘ線に対して不透明であるヨウ素化された有機化合物
として、前述の引用文献から知られる化合物のほとんど
を利用することが可能である；しかしながら、ある不透
明剤は、リポソーム小胞中へのそれらの水溶液の封入容
量および保管中の該小胞の安定性の点で他のものよりも
適する。実際、溶液中での不透明剤の幾つかは、リポソ
ームの形成時に他のものよりも封入されにくく、そして
さらに、それらの幾つかは他のものよりも保管または取
扱い時にリポソーム膜の外側に拡散しやすい。
この理由で、不透明剤として、トリヨード安息香酸か
ら誘導されるイオン性の造影剤、例えばジアトリゾイン
酸のナトリウム塩および／またはメグルミン塩、および
好ましくは非イオン性造影剤、例えば非限定的例として
与えられるイオパミドールまたはイオメプロールを使用
するのが好ましい。該造影剤は、100〜450gのヨウ素/
1、好ましくは250〜380g I/1の濃度を有する水溶液の形
で使われる。そのような溶液、および本発明に係る組成
物を使って、6gのヨウ素/gリン脂質に及ぶであろう封入
されたヨウ素量が得られる。
一般に、本発明の組成物を用いると、リポソーム小胞
により占有される体積は懸濁液全体積の約５〜60％を示
し、そしてある特別な場合にはそれらの数値を超えるか
もしれない（70−80％まで）。
本発明に係る組成物を調製するため、即ちリポソーム
小胞の封入容量を増加せしめるため、そして例えば、リ
ポソーム〔この小胞は1.5gのヨウ素/g液体（I/1＞1.5）
より多くの不透明水性液体を封入する力をもったリン脂
質膜を有する〕の水性懸濁液を提供するための方法は、
それらの小胞のサイズを標準化すること、即ち選ばれた
範囲内にサイズが含まれる小胞の“重要な部分”を選択
しそして他のものを除去すること、またはある手段によ
り後者（他のもの）を、選ばれた範囲に相当する直径を
有する新しい小胞に転換することである。リポソームの
サイズの標準化に関して“重要な部分”という言い方に
より、回折分光分析により粒子の直径および粒子の分布
を測定する時に使われる多分散係数Ｐの概念を言及す
る。〔COULTER Nano−Sizer装置（商標登録済）を使う
ための取扱説明書−COULTER ELECTRONICS LTD,.Great B
ritainを参照のこと〕。Ｐ値のスケールは、０〜10の範
囲である。１の値は単分散の粒子に相当する。例えば、
８の値は、最大と最小の粒子の寸法の比が約４であるこ
とを示す。
また、粒子の分布曲線の広がりＷを計算することを可
能にする、係数ｓ、即ちそれらの大部分の寸法の範囲
は、Ｗ＝sdw（ここでdwは該装置により与えられた粒子
のサイズである）の関係に従って、250nmより大きい粒
子については５で、そして100〜250nmの粒子については
４でＰを割ることにより与えられる。本発明において
は、多分散度の値を指数Ｐと言及し、そして４に等しい
かまたはそれより小さいＰの値については粒子の大部分
が測定されたサイズに相当するとみなされる。
従って、請求項４にクレームされた方法は、請求項１
に定義されたような組成物に到達するための手段を説明
している。小胞の大部分が約0.15〜３μｍ、特に0.2〜
１μｍのサイズを有し、特に高い封入容量を有するとい
うことが実際に確認された。“大部分”という言い方に
より、少なくとも70％の該リポソーム小胞が選択された
範囲に適合する直径を有するという事実を表示したいと
思う。
この範囲内に含まれるリポソーム小胞が何故そのよう
な高い容量を統合する能力があるかの正確な理由は明ら
かになっていないが、次のような議論を提出することが
できる。第一に、この限界より下のリポソームは不都合
な体積／面積の比を有し（実際、球径が減少すればする
ほど、この比は小さくなる）、そして第二に、約２μｍ
を超える該小胞はしばしば多層板状（plurilamellar）
でありそして結果として与えられた容積に対するそれら
の膜の分子量が大きすぎる。正確に寸法規則された膜を
通した押出しにより、多層板状のリポソームが少なくと
も部分的に、単層板（monolamellar）の膜を有する小さ
いリポソームに再配列される；これらの“再配列され
た”リポソームの大部分は、本発明に係る組成物に適す
る最適寸法に相当する。
一般に、リポソームの溶液の標準化は、圧力下で濾過
膜を押し通すことにより行われる。この“押出し”に利
用される圧力は、1barと数barの少しの間で異なるであ
ろう。好ましくは、約0.4〜２μｍの孔径を有する膜に
ついては、0.5〜10barの押出圧力を使う。この方法で、
１〜20ml/sec/cm2のオーダーの濾過速度を保証すること
ができる。水性分散相が適当な割合で不透明剤を含む時
に、押出し処理に続いてI/1比の増加がもたらされるこ
とはきわめて理解されることである。もしこの相からヨ
ウ素を除いた場合、該小胞の外部の相の内部への通過に
より封入されたヨウ素の増加をもたらすことが不可能で
あることは明らかである。
押出し温度が該小胞中に封入される溶液の不透明剤の
濃度と関連して役割を果たすことは立証されている。従
って、もし押出しを通常温度にて行うならば、I/1比の
いくらかの減少を生じさせることが可能である。反対
に、そして付加的な予期しない要素を構成して、リポソ
ーム壁を形成するリン脂質の転移温度より高い温度で進
めた場合、この比に増加が観察される。好ましくは、50
°〜90℃、例えば約75℃の温度を使う。
懸濁液中に含まれる封入されていないヨウ素の量、即
ちリポソームが懸濁されている緩衝化水相中に溶解され
た不透明剤の割合を減少させるために、超遠心または限
外濾過が有利に使われており、この方法は該小胞自体と
前記の水相との間の物理的分離を引き起こす。この分離
が達成されたらすぐに、該リポソームを新しい水性分散
相に再分散せしめる。この操作を繰り返すことにより、
リポソームの損失（各操作で避けられない）が相当にな
らずに、外側の媒質中の不透明剤の割合を、望んだ含
量、例えば2mg/mlまたは0.2mg/mlのオーダーにさえも減
少させることができる。一般に、そのような遠心操作は
数千のｇ、例えば10,000〜250,000gの遠心加速度で行わ
れる。常用の技術に従ったミクロフィルタレーションま
たは透析によっても、そのような結果を得ることができ
る。決められた調整された孔径、例えば0.1μｍまたは
それより大きい孔（前述のウルトラフィルタレションの
場合には、その膜の孔は0.1μｍより小さい）を有する
壁のチューブのセット中で、処理すべき懸濁液の循環を
生ぜしめることにより、ミクロフィルタレーション操作
を行うことができる。該フィルタレーションを受けた懸
濁液の体積が減少する（該チューブの孔を通るこの懸濁
液の通過により）につれて、新しい溶媒、例うば緩衝化
混合物または生理学上許容される水溶液により置換され
る。これらの技術を使って、分散液体中に含まれる望ま
しくない物質、特に溶解されたヨウ素の大部分が除去さ
れる。さらに、ミクロフィルタレーションは該濾液にお
いて、幾つかの望ましくない溶液、特にごく小さい残存
小胞を除去することを可能にし、これは、I/1比の改善
の効果を有する。
リポソームの外部の懸濁相を構成する媒質として、循
環系の液体および生存組織と適合する溶液を使うことが
可能である。そのような溶液の例として言及されるの
は、トリス、リン酸塩等で緩衝化されているかまたは緩
衝化されていない、塩溶液、水溶液（中性領域のpH）、
および塩、グルコース、不透明剤、緩衝剤等から選ばれ
た１つまたは複数の物質を含む高張溶液である。１つの
典型的な溶液（0.8 Osm）は、グリコース（0.7M）、NaC
l（0.9％）およびトリス（10mM）を含有する。
本発明において出発物質として使用され得るリポソー
ム懸濁液の調製のために、既知の技術、特に前に引用し
た文献中に記載されているものを利用することができ
る。
好ましく利用されるのは、REV法〔cf.F.Szoka ら、
（1978）Proc.Natl.Acad.Sci.USA 75,4194〕およびEP−
Ａ−179.660の明細書中に記載されているものである。
これらの方法の適用により、一般に次のパラメーター
を有するリポソームの最初の懸濁液が得られる：緩衝液
0.9％NaCl,10mM Tris,pH7−7.5; −脂質、約１％； −全ヨウ素濃度、20−30mg/ml; −リポソーム内のヨウ素濃度、１−2g/g脂質 （300g/lのイオパミドール溶液）。
そのような最初の溶液に前述の操作を行うことによ
り、本発明に係る不透明組成物が得られる。
実験動物への注入による不透明剤としてのそれの利用
の時に、本発明の組成物はその特有の隠蔽力および選択
性のために、非常に有効であることが示される。特に、
肺におけるヨウ素の保持の30〜40倍の減少が観察され
る。重量で20％より少ないヨウ素の全量を使う本発明の
組成物を用いると、ヨウ素の全体濃度がリポソームの懸
濁液の60重量％に達するであろう従来技術（例えば、US
−Ａ−4,192,859参照）による懸濁液を用いて得られる
ものと等価またはより優れた診断結果を得ることができ
る。
次の実験部分が本発明を具体的に説明する。
例１ まず最初に、クロロホルム42ml中にジパルミトイルホ
スファチジル酸（DPPA,FLUKA）57mgおよびジパルミトイ
ルホスアァチジルコリン（DPPC,FLUKA）543mgを含む溶
液を調製する。この溶液20mlにクロロホルム20mlおよび
ジイソプロピルエーテル40mlを加え、次いで撹拌した
後、76％（p/v）メグルミンジアトリゾエート水溶液12m
l、即ちヨウ素化されている不透明剤（BRACCO）を加え
る。50℃に加熱され得られたその混合物を、超音波（Br
aun Labsonic 1510）に５分間かけた。次にそのエマル
ションを、ゲルが得られるまでロータリーエバポレータ
ー中で45℃にて濃縮した。そのフラスコに76％メグルミ
ンジアトリゾエート水溶液約8mlおよび蒸留水4mlの混合
物を入れ、そして撹拌しながら蒸発を続けた。均一混合
物を得た後、そこに76％メグルミンジアトリゾエート水
溶液約20mlおよび蒸留水8mlの混合物を再び添加し、そ
して溶媒の最後の痕跡量を蒸発により取り除いた。得ら
れたリポソームの溶液（溶液Ａ）の体積を蒸留水により
40mlに調整した。
リポソーム内部に効果的に封入されたメグルミンジア
トリゾエートの量を決定した。得られた該調製物（5m
l）を235,000gで25分間遠心した。その小胞を10mlの塩
溶液（0.9％NaCl,10mM Tris−HCl,pH7.2）中に取り出
し、そして２回目の遠心操作（15分、26,000g）を行っ
た。この遠心に続く懸濁液中への取出しの段階をさらに
４回繰り返した。これは封入されなかったメグルミンジ
アトリゾエートの完全な除去を可能にする。最後の5ml
中への懸濁の後、得られた該溶液のアリコート（0.9m
l）を、ドデシル硫酸ナトリウムの10％溶液0.1mlに添加
し、そして40℃に５分間加熱した。この溶液の260nmで
の光学濃度を測定することにより、この段階で、最終調
製物がml当り10.4mgのヨウ素に相当する21.4mg/mlのメ
グルミンジアトリゾエートを含有することが決定され
た。脂質のロスを無視することにより、この調製物が7.
14mg/mlのリン脂質、即ち1.45のヨウ素／リン脂質比を
有するだろうことが立証される。
溶液Ａの残りを75℃に加熱し、次いで１ミクロンの孔
径を有するポリカーボネート濾紙（Nuclepore）を通し
て加熱下において押出した。次いで得られた溶液を周囲
温度まで冷却し、そしてその後、前述のような一連の遠
心分離に続く懸濁液中への取出しを行った。５回の洗浄
後に得られた上清液の分光光度分析は、0.2mg/mlより低
い外部相中の残存ヨウ素濃度を示した。この時点で、リ
ポソームの残渣を全体積7mlの緩衝液中に懸濁した。最
終調製物中の全ヨウ素濃度を決定するために、この調製
物のアリコート量を、前述のようにドデシル硫酸ナトリ
ウムの存在下40℃で５分間インキュベートした。分光光
度分析は、最終調製物が、ml当り62.5mgのヨウ素に相当
しそして1.75のI/1比を示す、128.5mg/mlのメグルミン
ジアトリゾエートを含有することを示した。従って、該
押出し法は、封入されたヨウ素の20％の増加をもたらし
た。
例２ ジイソプロピルエーテル100mlに、重量比において次
の物質:DPPC3/DPPA1/DSPC1を含むリン脂質の混合物〔こ
の混合物は7.1mg/mlの濃度（重量で）でクロロホルム中
に溶解されている〕100mlを添加した。
次いでそこにイオパミドールの61.2％水溶液（ml当り
300mgのヨウ素）30mlを添加し、そして全体を超音波を
使って50°で６分間超音波処理した（BRAUNラブソニッ
ク1510超音波装置）。揮発性の溶媒を除去するため、Ro
tavapore（45°/8mmHg）を使って乳状溶液を蒸発せしめ
た。形成されたゲルを該イオパミドール溶液100ml中に
再び分散させた。次いでこの調製物の資料を、約5barの
圧力下で0.8μm,1μｍまたは２μｍの膜（Nuclepore）
を通す押出しテストを行った。
様々な押出された調製物又は非−押出し調製物を超遠
心（235,000g;30分）し、その後、該リポソーム小胞を
緩衝化溶媒（0.9％ NaCl,10mM Tris,pH7.2）中に再分散
させた（テスト１および２）。変法によれば、分散相と
して、イオパミドールに対して等張の溶媒、即ち0.7Mグ
ルコース、15mM NaCl,1mM Trisのものを使った（テスト
３）。この精製段階（分散相中に溶解されているヨウ素
の除去）を、これらの溶液の１つまたは他のものを使っ
て、ある回数繰返した。遠心分離を26,000gで15分間行
い、0.2mg/ml以下の分散相の残存ヨウ素含量まで下げ
る。この含量は260nmでの分光光度により測定された。
一般に、４またはそれより少ない遠心および再分散工程
の数が、所望の純度を達成するのに十分である。
この時点で、例１に記載したようにして、ドデシル硫
酸ナトリウム（SDS）でのアリコート量の処理により、
封入されたヨウ素の量を決定した:0.1mlの10％水性SDS
を0.9mlのリポソームの溶液に加え、そしてその混合物
を40℃で５分間加熱し、次いで分光光度の読みを行う
（対照は封入されたヨウ素を有さない同等の試料であ
る）。１μｇのヨウ素/ml溶液に相当する光学濃度は、2
60nmで0.054である。粒子カウンター（COULTER Nanosiz
er）により、リポソームの小胞の平均サイズおよびその
多分散度を確認した。
その結果を下表に示す。テスト１および２は塩溶液中
の懸濁液の試料に関し；テスト３はグルコース溶媒中の
懸濁液に関する。
この表の結果は、一回の押出し操作が封入されたヨウ
素の量における有意な増加および多分散度指数Ｐの減少
を導くことを示している。加えて、濾過膜の孔の大きさ
が減少すると、封入されたヨウ素のI/1比（および小胞
の寸法の均質性の程度も）が増加する。
別のテストにおいて、封入されたヨウ素の含量を約6m
g/mg脂質まで増加せしめることが可能であった。
例３ E.SPONTONら〔Intern.J.Pharmaceutics（1985）23,29
9）に従って、クロロホルム（42ml）中に543mgのジパル
ミトイルホスファチジルコリン（FLUKA）、57mgのジパ
ルミトイルホスファチジル酸（FLUKA）および微量の14C
−トリパルミチン（Amersham,0.1μCi）を含む溶液を調
製した。この溶液14mlを200mlのフラスコに入れ、そし
て部分真空下25℃にてロータリーエバポレーターで蒸発
乾固せしめた。次いでそこに予め約55℃に加熱したイオ
パミドール（BRACCO）の61.2％溶液（ml当りヨウ素300m
gに相当する）25mlを添加し、そしてその混合物を周囲
温度にて２時間インキュベートした。次にこの混合物の
連続した５回の遠心操作（１回目は235,000gで30分間、
次の４回は４℃において29,000gで30分間）を行った。
これら遠心操作の各回ごとに残渣を塩溶液（0.9％ NaC
l,10mM Tris−HCl,pH7.2）中に再懸濁した。その後、26
0nmで分光光度的に測定し（前の例を参照のこと）、最
後の洗浄操作の洗浄水中のイオパミドールの残存濃度、
およびドデシル硫酸ナトリウム（SDS）によるリポソー
ム小胞の破壊後の封入された溶液の該濃度を決定した。
このようにして、残存した洗浄水ml当り0.08mgのヨウ
素、および洗浄された組成物（25ml）中のリポソーム溶
液ml当り7.8mgの封入されたヨウ素が測定された。シン
チレーションカウンター（Beckman LS 8100）を使った
最終組成物のアリコート量の分析により（例４参照）、
該脂質の濃度が5.2mg/ml（これは最初の脂質の65％に相
当する）であることがわかった。
全体として、ml当り7.7mgの封入されたヨウ素およびm
l当り5.5mgの脂質（ヨウ素／リン脂質の比が1.39）を含
む375mlの懸濁液を得るように、前述したようなリポソ
ームの調製を繰り返した。次いでこの調製物をミクロフ
ィルタレーション・モジュール（タイプMD 020 CP2N、
孔径0.2μｍ、ENKA,Wuppertal,German Federal Repudli
c）の助力で10℃にてダイアフィルタレーションにかけ
た。膜を通過し濾液中に排出された液体の体積は、新し
い塩溶液（NaCl 0.9％,Tris−HCl 10mM,pH7.2）のリポ
ソーム懸濁液中への添加により連続的に置き換えられ
る。濾液の1.5lの除去の後、ダイアフィルタレーション
された溶液を濃縮し、これで97mlのミクロフィルタレー
ションされたリポソームを生じ、0.2μｍよりも小さい
サイズの小胞の大部分は除去されている。分析は、この
調製物がml当り24.9mgの封入されたヨウ素およびml当り
16.4mgの脂質、即ち1.52の封入されたヨウ素／リン脂質
の比、を含むことを示す。従って、ミクロフィルタレー
ションは、封入されたヨウ素／リン脂質の濃度を1.39か
ら1.52へ増加せしめ、すなわち約９％増加せしめること
を可能にした。
例４ 例２に記載した方法により、120mgの脂質（NC−95H/D
PPA＝重量で9/1）からリポソームの溶液（３バッチ）を
調製した。これらの脂質は、さらに1.5μCiの14C−トリ
パルミチン（放射性トレーサー要素）を含有する。ヨウ
素溶液（300mg/ml）として使われるのは、8mMトリス緩
衝剤、pH7.2,10-3M EDTA二ナトリウム塩中61.2重量％の
イオパミドールの溶液であり、この溶液を、前もって0.
45μｍのフィルターを通して濾過しておく。
前記の成分によって得られたリポソームの懸濁液のう
ちの二つを、それぞれ２μｍと0.8μｍの孔径を有する
膜を通して75℃にて押出した。第三の溶液（対照）は、
押出ししなかった。それぞれＥ−2,E−0.8およびＴと名
づけられた三つの溶液を、例２に記載のようにして超遠
心により精製し、次いで塩溶液（0.9％ NaCl,10mM Tri
s,pH7,2）中に懸濁し、遠心と再懸濁を４回繰り返し
た。このようにして、例２に記載した分析により測定す
ると、それらは、小胞の平均寸法（多分散度）および脂
質1mg当りの封入されたヨウ素の量（mg）について下記
のそれぞれの値で連続して得られる。
T: 521nm（５）； 2.39 Ｅ−2: 351nm（３）； 2.72 Ｅ−0.8:323nm（２）； 2.53 これらのリポソームを、kg当たり120mgのヨウ素の割
合で、実験用ラット（SPRAGUE−DAWLEY）の尾の静脈に
注射した。注射後１時間目に、該動物を殺し、そしてヘ
パリン処理した試験管に血液を回収し、同様に肝臓およ
び肺器官を回収してこれを乾燥および計量後、適当な燃
焼装置（PACKARDオキシダイザー）中で燃焼させた。こ
の燃焼により発生するCO2を集め、シンチレーションに
より分析した。血液はソルエン（Soluene）／イソプロ
パノールの1:1（v/v）混合物（1ml）中の溶液（0.25ml
のアリコート量）にし、そしてH2O2（0.5ml,32％）によ
る脱色を行った後に分析する。種々の試料を10mlのDIMI
LUME（シンチレーション液）に加え、そしてBECKMANN L
S−8100シンチレーションカウンターを使ってそれらの
放射能を測定する。
下表に与えられる結果は、検査中の血液または器官に
より保持された注入線量の百分率として表わされる（各
結果は３回の測定の平均である）。見本 血液 肝臓 肺 Ｔ 1.0 41.5 12.3 Ｅ−２ 1.6 43.2 0.5 Ｅ−08 1.4 47.9 0.3 上の結果から、0.8および２μｍの膜の孔径の範囲に
相当する両サイズ限界の間への該小胞の大きさの均一化
が、肺により該小胞の捕獲の相当な減少をもたらすとい
うことが立証される。
例５ 例４（見本Ｅ−08）において記載したようにして、リ
ポソームの懸濁液を調製した。そのような懸濁液の分析
は次の値を提供する： 32.5mgの脂質および70.2mgのヨウ素/ml懸濁液、これは
脂質1mg当り封入されたヨウ素2.16mgに相当する。
次の段階は、この懸濁液のSprague−Dawleyラット
（各グループ５匹ずつの動物）へのkg当り250mgのヨウ
素の割合における注射であった。
比較のために、リポソーム中に封入されていない同量
のヨウ素を対照ラットに注射した。
30分後、１時間後、４時間後および24時間後、グルー
プにおいて該動物を殺し、血液を収集し、そしてヘパリ
ン処理した試験管中に保存した。器官（肝臓、脾臓、腎
臓および肺）をあらかじめ除去しそして重さを量った。
残存血液の量を決定するために、MEIJERら〔Clin.Chim.
Acta（1962），７,638〕により記載された方法に従っ
て、これら器官のアリコート量を7mMアンモニア（5ml）
中でホモジナイズした。
上述した種々の器官により保持されたヨウ素の量を、
Crアノードを有するPHILIPS PW 1410装置、電圧＝50kV;
電流＝50mAを使ったＸ線蛍光により測定した。血液含有
量について補正された結果が下表に示され、そして未処
置の動物に関して実施された測定値も含んでいる。
上の結果は、該リポソームによるヨウ素の投与がいか
に肝臓および脾臓によるそれの保持および腎臓によるそ
れの比較的遅い排泄に好都合であるかを示している。
本発明により達成される相当な技術的進歩を立証する
ために、本発明により得られた結果と従来技術に従った
ものとを、並行して示すことが重要となる。
技術の現状を確立するために、導入部において引用し
たいくつかの参考文献との参照を行う。問題の比較は表
（第 頁）への参照により達せられる。その表中には、
リポソーム懸濁液に固有である一連のパラメーターが並
んでいる。参考文献の著書の名が第一列に示されてい
る。
例６ 例４（見本Ｅ−08）に記載したようにして調製された
リポソームをヨウ素250mg/kgの投与量においてSprague
−Dawleyラットに静脈注射し、これを注射の前後に肝臓
のコンピュータ化された断層Ｘ線撮影器にかけた。
Siemens Somatom 2断層Ｘ線撮影器を使用し、検査は
次の条件のもとで行った： −256×256のマトリックス −視野14cm −検査される層の厚さ2mm −スキャン時間５秒 −Ｘ線:125kV mAs230 リポソームの懸濁液の注射前、次いで注射の５′,1
0′,15′,30′,60′,90′、２時間、３時間および４時
間後に像を記録した。ハウンスフィールド単位（HU）で
表わされる、肝臓のコントラストにおいて増加が観察さ
れ、この増加は30分〜４時間の期間の間に50％〜130％
であった。
上記の例において開示された技術において、リポソー
ム小胞を調製するためにDPPAの代わりにジセチル−ホス
フェート（DCP）またはジパルミトイル−ホスファチジ
ルグリセロール（DPPG）を使用しても、同様の結果が経
験されるということに注目すべきである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ラミ ベルナール スイス国，ツェーハー‐1227 カルージ ュ，シェマン ジル ビュ 27 (56)参考文献 米国特許4192859（ＵＳ，Ａ) 米国特許4647447（ＵＳ，Ａ) 仏国特許2437831（ＦＲ，Ｂ１) Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ Ｖｏｌ．152 Ｐ．759−762（1984），Ｒａｄｉｏｌ. Ｄｉａｇｒ，Ｖｏｌ．24（1983）Ｎｏ. ４ Ｐ．507−514，Ｒａｄｉｏｌ．Ｄｉ ａｇｎ，Ｖｏｌ．26 Ｐ．285−292 （1985）Ａｏｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｐｈ ｓ．Ｂｉｏｅｎｇ．（1980）Ｖｏｌ. ９，Ｐ．467−508，細胞工学、Ｖｏｌ. ２，Ｎｏ．９，Ｐ．1136−1150．，「新 製剤開発システム総合技術−基剤・添加 物篇−」Ｒ＆Ｄプランニング社発行（昭 和60年）Ｐ．229−247

Claims (12)

    (57)【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】脂質膜を有するリポソーム小胞の生理的に
    許容できる水性媒質中の懸濁液の形をとり、該小胞はそ
    の中に封入された水溶液中Ｘ線に対して不透明な少なく
    とも１つのヨウ素化された有機化合物を含有し、該リポ
    ソームの小胞が0.15〜３μｍである平均サイズを有し、
    そして前記膜の脂質の重量に対する該リポソーム小胞中
    に封入されたヨウ素の重量が1.5g/gより多く且つ6g/g以
    下であることを特徴とするＸ線検査用造影剤。
  2. 【請求項２】検討中の範囲における粒子のサイズの多分
    散度が４よりも高くないことを特徴とする、請求項１に
    記載の造影剤。
  3. 【請求項３】前記水性媒質中に懸濁している脂質の濃度
    が20〜60g/lであり、それらの粘度が30mP.s.を超えない
    ことを特徴とする、請求項１に記載の造影剤。
  4. 【請求項４】前記ヨウ素化された有機化合物が、イオパ
    ミドール、イオメプロール、イオヘキソール、イオペン
    トール、イオプロミド、イオシミド、イオベンゾール、
    イオトロラン、イオタスル、イオジキサノール、イオデ
    シモル、1,3−ビス−（Ｎ−3,5−ビス−（2,3−ジヒド
    ロキシプロピルアミノカルボニル）−2,4,6−トリヨー
    ドーフェニル）−Ｎ−ヒドロキシアセチル−アミノ）−
    プロパンから選択されることを特徴とする、請求項１に
    記載の造影剤。
  5. 【請求項５】前記脂質が、加水分解されたダイズのレシ
    チン、ジパルミトイル−ホスファチジルコリン（DPP
    C）、ジステアロイル−ホスファチジルコリン（DSP
    C）、スフィンゴミエリン（SM）、ジセチル−ホスフェ
    ート（DCP）、ジパルミトイル−ホスファチジルグリセ
    ロール（DPPG）およびジパルミトイル−ホスファチジル
    酸（DPPA）のうちの１つまたは複数から選択されること
    を特徴とする、請求項１に記載の造影剤。
  6. 【請求項６】脂質膜を有するリポソーム小胞の生理的に
    許容できる水性媒質中の懸濁液の形をとり、該小胞はそ
    の中に封入された水溶液中Ｘ線に対して不透明な少なく
    とも１つのヨウ素化された有機化合物を含有し、該リポ
    ソームの小胞が0.15〜３μｍである平均サイズを有し、
    そして前記膜の脂質の重量に対する該リポソーム小胞中
    に封入されたヨウ素の重量が1.5g/gより多く且つ6g/g以
    下であることを特徴とするＸ線検査用造影剤の製造方法
    であって、前記水性液体中に懸濁しているリポソーム
    を、0.4〜３μｍの範囲の孔径を有する濾過膜を通して
    押出し、前記膜の孔のサイズに相当する値の範囲内に前
    記小胞のサイズを“標準化”するようにすることを特徴
    とする方法。
  7. 【請求項７】押出しによる標準化の後で前記小胞の多分
    散度指数が４よりも高くないことを特徴とする、請求項
    ６に記載の方法。
  8. 【請求項８】“標準化された”リポソームの懸濁液を、
    前記水性液体の前記小胞を分離または濃縮するために超
    遠心または限界濾過にかけ、次いでこうして分離または
    濃縮された該小胞を、溶解されているヨウ素の存在しな
    い新しい分散媒質中に再懸濁せしめることを特徴とし、
    この操作の結果、封入されていないヨウ素の割合を減少
    せしめることになる、請求項６に記載の方法。
  9. 【請求項９】標準化の後、該リポソーム小胞の少なくと
    も70％のサイズが0.2〜２μｍであることを特徴とす
    る、請求項６に記載の方法。
  10. 【請求項１０】“標準化された”リポソームの懸濁液を
    ミクロフィルタレーションにかけることを特徴とし、こ
    の操作の結果、サイズが前記の範囲より下であるリポソ
    ームの残存量を排除し、さらに水性懸濁剤の封入されて
    いないヨウ素の濃度を減少せしめることになる、請求項
    ６に記載の方法。
  11. 【請求項１１】該リポソームの膜を構成している脂質の
    転移温度よりも高い温度において操作を行うことを特徴
    とし、これら条件化の結果、封入されたヨウ素の濃度を
    増加せしめることになる、請求項６に記載の方法。
  12. 【請求項１２】前記温度が50〜90℃であることを特徴と
    する、請求項11に記載の方法。
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Families Citing this family (71)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH672733A5 (ja) * 1987-05-22 1989-12-29 Bracco Ind Chimica Spa
MX9203504A (es) * 1988-04-20 1992-07-01 Liposome Co Inc Complejo agente: lipido activo de alta proporcion.
US6551576B1 (en) 1989-12-22 2003-04-22 Bristol-Myers Squibb Medical Imaging, Inc. Container with multi-phase composition for use in diagnostic and therapeutic applications
US6088613A (en) 1989-12-22 2000-07-11 Imarx Pharmaceutical Corp. Method of magnetic resonance focused surgical and therapeutic ultrasound
US5542935A (en) * 1989-12-22 1996-08-06 Imarx Pharmaceutical Corp. Therapeutic delivery systems related applications
US5580575A (en) * 1989-12-22 1996-12-03 Imarx Pharmaceutical Corp. Therapeutic drug delivery systems
US5469854A (en) * 1989-12-22 1995-11-28 Imarx Pharmaceutical Corp. Methods of preparing gas-filled liposomes
US5585112A (en) 1989-12-22 1996-12-17 Imarx Pharmaceutical Corp. Method of preparing gas and gaseous precursor-filled microspheres
US5820848A (en) * 1990-01-12 1998-10-13 The Liposome Company, Inc. Methods of preparing interdigitation-fusion liposomes and gels which encapsulate a bioactive agent
US20040208826A1 (en) * 1990-04-02 2004-10-21 Bracco International B.V. Ultrasound contrast agents and methods of making and using them
US20010024638A1 (en) * 1992-11-02 2001-09-27 Michel Schneider Stable microbubble suspensions as enhancement agents for ultrasound echography and dry formulations thereof
US6613306B1 (en) * 1990-04-02 2003-09-02 Bracco International B.V. Ultrasound contrast agents and methods of making and using them
US6989141B2 (en) * 1990-05-18 2006-01-24 Bracco International B.V. Ultrasound contrast agents and methods of making and using them
IN172208B (ja) * 1990-04-02 1993-05-01 Sint Sa
US5578292A (en) 1991-11-20 1996-11-26 Bracco International B.V. Long-lasting aqueous dispersions or suspensions of pressure-resistant gas-filled microvesicles and methods for the preparation thereof
USRE39146E1 (en) 1990-04-02 2006-06-27 Bracco International B.V. Long-lasting aqueous dispersions or suspensions of pressure-resistant gas-filled microvesicles and methods for the preparation thereof
US5445813A (en) * 1992-11-02 1995-08-29 Bracco International B.V. Stable microbubble suspensions as enhancement agents for ultrasound echography
US7083778B2 (en) * 1991-05-03 2006-08-01 Bracco International B.V. Ultrasound contrast agents and methods of making and using them
AU636481B2 (en) * 1990-05-18 1993-04-29 Bracco International B.V. Polymeric gas or air filled microballoons usable as suspensions in liquid carriers for ultrasonic echography
US20030194376A1 (en) * 1990-05-18 2003-10-16 Bracco International B.V. Ultrasound contrast agents and methods of making and using them
IS1685B (is) * 1990-12-11 1998-02-24 Bracco International B.V. Aðferð við að búa til fitukúlur (liposomes) sem eru gæddar auknum hæfileika til að draga í sig og halda í sér aðskotaefnum
US5447635A (en) * 1991-02-26 1995-09-05 Bracco International B.V. Process of concentration and purification of organic compounds
US5205290A (en) 1991-04-05 1993-04-27 Unger Evan C Low density microspheres and their use as contrast agents for computed tomography
SE470086B (sv) * 1991-04-23 1993-11-08 Kabi Pharmacia Ab Organspecifik emulsion
SE9101709L (sv) * 1991-06-03 1992-12-04 Karlshamns Lipidteknik Ab Lipidderivat som diagnostikum eller kontrastmedel
IL104084A (en) * 1992-01-24 1996-09-12 Bracco Int Bv Sustainable aqueous suspensions of pressure-resistant and gas-filled blisters, their preparation, and contrast agents containing them
CA2146963A1 (en) * 1992-10-16 1994-04-28 Andreas Sachse Process and device for producing liquid, dispersed systems
DE1118326T1 (de) * 1993-05-21 2002-04-18 Liposome Co Inc Reduzierung von durch Liposomen induzierten physiologischen Gegenreaktionen
US6217849B1 (en) 1993-09-29 2001-04-17 Bracco Research S.A. Liposome suspensions as blood pool imaging contrast agents
HU225495B1 (en) * 1993-12-15 2007-01-29 Bracco Research Sa Gas mixtures useful as ultrasound contrast media
ZA952485B (en) * 1994-03-28 1995-12-15 Nycomed Imaging As Liposomes
US6743779B1 (en) 1994-11-29 2004-06-01 Imarx Pharmaceutical Corp. Methods for delivering compounds into a cell
WO1996025955A1 (en) * 1995-02-24 1996-08-29 Bracco Research S.A. Liposome suspensions as blood pool imaging contrast agents
DE19518221A1 (de) * 1995-05-10 1996-11-14 Schering Ag Verwendung nichtsteroidaler Entzündungshemmer zur Verbesserung der physiologischen Verträglichkeit partikulärer pharmazeutischer Zubereitungen
US6521211B1 (en) 1995-06-07 2003-02-18 Bristol-Myers Squibb Medical Imaging, Inc. Methods of imaging and treatment with targeted compositions
AU736301B2 (en) 1996-05-01 2001-07-26 Imarx Therapeutics, Inc. Methods for delivering compounds into a cell
US6414139B1 (en) 1996-09-03 2002-07-02 Imarx Therapeutics, Inc. Silicon amphiphilic compounds and the use thereof
US6120751A (en) 1997-03-21 2000-09-19 Imarx Pharmaceutical Corp. Charged lipids and uses for the same
US6537246B1 (en) 1997-06-18 2003-03-25 Imarx Therapeutics, Inc. Oxygen delivery agents and uses for the same
US6090800A (en) 1997-05-06 2000-07-18 Imarx Pharmaceutical Corp. Lipid soluble steroid prodrugs
US6416740B1 (en) 1997-05-13 2002-07-09 Bristol-Myers Squibb Medical Imaging, Inc. Acoustically active drug delivery systems
US6548047B1 (en) 1997-09-15 2003-04-15 Bristol-Myers Squibb Medical Imaging, Inc. Thermal preactivation of gaseous precursor filled compositions
US20010003580A1 (en) 1998-01-14 2001-06-14 Poh K. Hui Preparation of a lipid blend and a phospholipid suspension containing the lipid blend
JP4109780B2 (ja) 1998-03-06 2008-07-02 株式会社東海理化電機製作所 ギヤ機構及びウエビング巻取装置
IL138672A0 (en) * 1998-03-31 2001-10-31 Yissum Res Dev Co Liposomal bupivacaine compositions and methods of preparation
US6706280B2 (en) * 1998-08-19 2004-03-16 Bracco Research S.A. Carboxylated phosphatidic acid esters
JP3980777B2 (ja) 1998-11-02 2007-09-26 株式会社東海理化電機製作所 ウエビング巻取装置
US6426145B1 (en) 1999-05-20 2002-07-30 Scimed Life Systems, Inc. Radiopaque compositions for visualization of medical devices
ATE340561T1 (de) 1999-05-27 2006-10-15 Euro Celtique Sa Verwendung von antiseptika zur herstellung von arzneimitteln zur prophylaxe und behandlung von entzündungen im korperinneren des menschen
US7297344B1 (en) 1999-05-27 2007-11-20 Euro-Celtique, S.A. Preparations for the promotion of wound healing in the upper respiratory tract and/or ear
US7300667B1 (en) 1999-05-27 2007-11-27 Euro-Celtique, S.A. Preparations for the application of anti-inflammatory, especially antiseptic agents and/or agents promoting the healing of wounds, to the lower respiratory tract
EP1289565B1 (en) 2000-06-02 2015-04-22 Bracco Suisse SA Compounds for targeting endothelial cells
JP2005170923A (ja) * 2003-10-21 2005-06-30 Konica Minolta Medical & Graphic Inc リポソーム含有ｘ線造影剤およびその製造方法
JP2005170928A (ja) * 2003-10-21 2005-06-30 Konica Minolta Medical & Graphic Inc リポソーム含有ｘ線造影剤およびその製造方法
JP4654590B2 (ja) * 2004-03-31 2011-03-23 コニカミノルタエムジー株式会社 Ｘ線ｃｔ用造影組成物およびその製造方法
US7713517B2 (en) * 2004-04-21 2010-05-11 Marval Biosciences, Inc. Compositions and methods for enhancing contrast in imaging
US8357351B2 (en) 2004-04-21 2013-01-22 Ananth Annapragada Nano-scale contrast agents and methods of use
JPWO2006009022A1 (ja) * 2004-07-21 2008-05-01 コニカミノルタエムジー株式会社 リポソーム含有ｘ線造影剤およびその製造方法
WO2006016468A1 (ja) * 2004-08-11 2006-02-16 Konica Minolta Medical & Graphic, Inc. リポソーム含有製剤の製造方法
WO2006047409A2 (en) * 2004-10-22 2006-05-04 Dynamis Therapeutics, Inc. Dermal delivery of n-methyl-glucamine and n-methyl-glucamine compounds
WO2007129311A2 (en) * 2006-05-04 2007-11-15 Pan Sci Tech S.A. Nano-particles with contrast agents for diagnostic delivery system for x-ray and ct
JP2011506325A (ja) 2007-12-05 2011-03-03 マーバル バイオサイエンシーズ インコーポレイテッド ナノスケールのコントラスト剤及びその使用方法
WO2009152445A1 (en) * 2008-06-13 2009-12-17 Marval Biosciences, Inc. Imaging of atherosclerotic plaques using liposomal imaging agents
JP2012520898A (ja) * 2009-03-19 2012-09-10 マーヴァル バイオサイエンシーズ，インコーポレイテッド 画像化におけるコントラスト強調のための組成物および方法
US10894098B2 (en) 2012-04-09 2021-01-19 Signablok, Inc. Methods and compositions for targeted imaging
IT1404011B1 (it) 2010-12-03 2013-11-08 Uni Degli Studi Magna Graecia Di Catanzaro Nanovettore coniugato con tsh per il trattamento del cancro della tiroide
FR3017295B1 (fr) * 2014-02-07 2018-01-12 Guerbet Composition destinee a vectoriser un agent anticancereux
NZ733010A (en) 2014-12-31 2023-01-27 Lantheus Medical Imaging Inc Lipid-encapsulated gas microsphere compositions and related methods
FR3039767B1 (fr) 2015-08-04 2017-09-08 Guerbet Sa Composition destinee a vectoriser un agent anticancereux
WO2017192910A2 (en) 2016-05-04 2017-11-09 Lantheus Medical Imaging, Inc. Methods and devices for preparation of ultrasound contrast agents
US9789210B1 (en) 2016-07-06 2017-10-17 Lantheus Medical Imaging, Inc. Methods for making ultrasound contrast agents

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3957971A (en) * 1974-07-29 1976-05-18 Lever Brothers Company Moisturizing units and moisturizing compositions containing the same
US4235871A (en) * 1978-02-24 1980-11-25 Papahadjopoulos Demetrios P Method of encapsulating biologically active materials in lipid vesicles
US4529561A (en) * 1978-03-24 1985-07-16 The Regents Of The University Of California Method for producing liposomes in selected size range
US4192859A (en) * 1978-09-29 1980-03-11 E. R. Squibb & Sons, Inc. Contrast media containing liposomes as carriers
CH641682A5 (en) * 1978-10-05 1984-03-15 Daeniker Felix X-ray contrast medium
US4241046A (en) * 1978-11-30 1980-12-23 Papahadjopoulos Demetrios P Method of encapsulating biologically active materials in lipid vesicles
US4647447A (en) * 1981-07-24 1987-03-03 Schering Aktiengesellschaft Diagnostic media
US4519024A (en) * 1983-09-02 1985-05-21 At&T Bell Laboratories Two-terminal transistor rectifier circuit arrangement
US4599227A (en) * 1983-11-07 1986-07-08 Wisconsin Alumni Research Foundation Injectable pharmaceutical preparation for the induction of multiple follicular growth
US4744989A (en) * 1984-02-08 1988-05-17 E. R. Squibb & Sons, Inc. Method of preparing liposomes and products produced thereby
US4567034A (en) * 1984-09-07 1986-01-28 E. R. Squibb & Sons, Inc. Esters of diatrizoic acid as X-ray contrast agents
CH672733A5 (ja) * 1987-05-22 1989-12-29 Bracco Ind Chimica Spa

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ Ｖｏｌ．１５２ Ｐ．７５９−７６２（１９８４），Ｒａｄｉｏｌ．Ｄｉａｇｒ，Ｖｏｌ．２４（１９８３）Ｎｏ．４ Ｐ．５０７−５１４，Ｒａｄｉｏｌ．Ｄｉａｇｎ，Ｖｏｌ．２６ Ｐ．２８５−２９２（１９８５）Ａｏｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｐｈｓ．Ｂｉｏｅｎｇ．（１９８０）Ｖｏｌ．９，Ｐ．４６７−５０８，細胞工学、Ｖｏｌ．２，Ｎｏ．９，Ｐ．１１３６−１１５０．，「新製剤開発システム総合技術−基剤・添加物篇−」Ｒ＆Ｄプランニング社発行（昭和６０年）Ｐ．２２９−２４７

Also Published As

Publication number Publication date
ATE80294T1 (de) 1992-09-15
AU612371B2 (en) 1991-07-11
IL86409A0 (en) 1988-11-15
WO1988009165A1 (en) 1988-12-01
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IL86409A (en) 1991-12-12
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ZA883449B (en) 1988-11-16
CA1303978C (en) 1992-06-23
CH672733A5 (ja) 1989-12-29
US5626832A (en) 1997-05-06
US5445810A (en) 1995-08-29
ES2009917A6 (es) 1989-10-16
DE3874485T2 (de) 1993-03-11
US5312615A (en) 1994-05-17
EP0314764A1 (en) 1989-05-10
DE3874485D1 (de) 1992-10-15
MX9203271A (es) 1992-07-01

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