JP2023506691A

JP2023506691A - Ｂｔｋ阻害剤としてのピロロピリミジン系化合物およびその使用

Info

Publication number: JP2023506691A
Application number: JP2022528124A
Authority: JP
Inventors: ジャン，ヤン; ウー，ウェンタオ; ゲン，カイジュン; リィ，チウ; リィ，ジアン; チェン，シューホイ
Original assignee: Zhejiang Longcharm Bio Tech Pharma Co Ltd
Current assignee: Zhejiang Longcharm Bio Tech Pharma Co Ltd
Priority date: 2019-11-13
Filing date: 2020-11-13
Publication date: 2023-02-20
Anticipated expiration: 2040-11-13
Also published as: CN117551103A; CN114728974A; CN114728974B; KR20220097455A; WO2021093839A1; EP4059935A1; EP4059935A4; JP7473642B2; US20230357248A1

Abstract

本発明は、ピロロピリミジン系化合物、およびＢＴＫプロテインキナーゼ阻害剤に関連する疾患のための医薬品の調製におけるその使用を開示する。具体的に、式（ＩＩＩ）で表される化合物およびその薬学的に許容される組成物を開示する。TIFF2023506691000090.tif4160【選択図】なし

Description

＜関連出願への相互参照＞
本出願は、２０１９年１１月１３日に出願されたＣＮ２０１９１１１０９７７３．２、２０１９年１２月１３日に出願されたＣＮ２０１９１１２８８４９２．８、２０２０年０２月１７日に出願されたＣＮ２０２０１００９６５８２．３、および２０２０年０７月２２日に出願されたＣＮ２０２０１０７１１２７０．９に基づく優先権を主張する。
＜技術分野＞

本発明は、ピロロピリミジン系化合物、およびＢＴＫプロテインキナーゼ阻害剤に関連する疾患のための医薬品の調製におけるその使用に関する。

本発明のピロロピリミジン系化合物は、様々な治療用途を有する新規のプロテインキナーゼ阻害剤であり、プロテインキナーゼによる増殖、炎症および自己免疫などに関連する障害の治療に使用することができる。

キナーゼは、リン酸供与体（例えば、ＡＴＰ）から特定の基質へのリン酸基の移動を制御する酵素である。プロテインキナーゼは、キナーゼの大きなサブセットであり、さまざまな細胞シグナルおよび細胞プロセスの調節において重要な役割を果たす。ＢＴＫはプロテインキナーゼの１つである。

ＢＴＫは、ＴＥＣ細胞質チロシンキナーゼファミリー（ＴＥＣｆａｍｉｌｙｋｉｎａｓｅｓ、ＴＦＫｓ）のメンバーである。この家族には５つのメンバーがあり、ＢＴＫに加えて、ＩＴＫ、ＴＥＣ、ＢＭＸおよびＴＸＫがある。ＴＦＫｓは６億年以上の進化の歴史があり、非常に古いキナーゼファミリーに属し、主に造血系で役割を果たしている。

ＢＴＫは、主にＢリンパ球のさまざまな細胞内および細胞外のシグナルの伝達や増幅に関与し、Ｂ細胞の成熟に必要である。ＸＬＡ患者におけるＢＴＫ機能の不活性化は、末梢Ｂ細胞および免疫グロブリンの欠乏を引き起こす。ＢＴＫの上流のシグナル伝達受容体には、成長因子およびサイトカイン受容体、ケモカイン受容体のようなＧタンパク質結合受容体、抗原受容体（特にＢ細胞受容体［ＢＣＲ］）、およびインテグリンなどが含まれる。また、ＢＴＫは、ホスホイノシチド－３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）－ＡＫＴ経路、ホスホリパーゼ－Ｃ（ＰＬＣ）、プロテインキナーゼＣ、転写因子κＢ（ＮＦ－κＢ）などを含む多くの主要な下流シグナル伝達経路を活性化させる。ＢＣＲシグナル伝達および細胞移動におけるＢＴＫの役割は十分に確立されており、これらの機能もＢＴＫ阻害剤の主要な標的である思われる。ＢＴＫ活性の増加は、Ｂ細胞慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）やマントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）などの血液癌細胞で検出されている。ＢＴＫ機能の異常な活動は、Ｂ細胞の悪性腫瘍や自己免疫疾患を引き起こすことが多く、研究開発のターゲットとして注目されている。

現在、ＦＤＡによって販売が承認されているＢＴＫ阻害剤としては、イブルチニブ及びアカラブルチニブがある。これらの２つの不可逆的共有結合阻害剤は、タンパク質Ｃ４８１と共有結合を形成することで、ＢＴＫの活性を効果的に阻害することができる。臨床研究では、患者は、イブルチニブ及びアカラブルチニブの投与後に、Ｃ４８１Ｓ、Ｃ４８１Ｙ、Ｃ４８１Ｒ、Ｃ４８１Ｆを含む耐性変異を引き起こす可能性があることが分かった。タンパク質システインＣ４８１変異による薬剤耐性について、ピロロピリミジン系の一連の不可逆的ＢＴＫ阻害剤を設計および合成した。

本発明は、式（ＩＩＩ）で表される化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。

ただし、
Ｒ_１は、ハロゲンおよびＣ_１－３アルコキシからなる群から選択され、前記のＣ_１－３アルコキシは、１個、２個または３個のＲ_ａで置換されていてもよく；
或いは、２個のＲ_１は、それらが接続されている結合と共にシクロプロピルを形成してもよく；
各Ｒ_ａは、Ｄ、ハロゲンおよびＯＨからなる群から選択され；
Ｒ_２は、ハロゲン、メチル、フェノキシおよびピリジルオキシからなる群から選択され、前記のフェノキシおよびピリジルオキシは、１個、２個または３個のハロゲンで置換されていてもよく；
Ｒ_３は、－ＣＨ_２ＯＨから選択され、ｍは、１および２からなる群から選択され；
或いは、Ｒ_３は、ＣＮおよびＣＨ_２ＣＮからなる群から選択され、ｍは、０、１および２からなる群から選択され；
ｎは、１、２および３からなる群から選択され；
Ｅ_１は、Ｏ、ＳおよびＮＨからなる群から選択され；
環Ａは、テトラヒドロピラニルから選択される。

本発明の一部の実施形態において、上記の各Ｒ_ａは、Ｄ、ＦおよびＯＨからなる群から選択され、他の変数は本発明で定義された通りである。

本発明の一部の実施形態において、上記のＲ_１は、Ｆ、ＯＣＨ_３、ＯＣＤ_３およびＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨからなる群から選択され、他の変数は本発明で定義された通りである。

本発明の一部の実施形態において、上記のＲ_２は、Ｆ、Ｃｌ、メチル、フェノキシ、２－フルオロフェノキシ、および２－ピリジルオキシからなる群から選択され、他の変数は本発明で定義された通りである。

本発明の一部の実施形態において、上記のＥ_１は、ＮＨから選択され、他の変数は本発明で定義された通りである。

本発明の一部の実施形態において、上記の環Ａは、

から選択され、他の変数は本発明で定義された通りである。

本発明は、式（Ｉ）で表される化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。

Ｒ_１は、ハロゲンから選択され；
或いは、２個のＲ_１は、それらが接続されている結合と共にシクロプロピルを形成してもよく；
Ｒ_２は、ハロゲンおよびフェノキシからなる群から選択され；
ｍ、ｎは、それぞれ独立して１、２および３からなる群から選択され；
Ｅ_１は、Ｏ、ＳおよびＮＨからなる群から選択され；
環Ａは、ピラン環から選択される。

本発明の一部の実施形態において、上記のＲ_１は、Ｆから選択され；或いは、２個のＲ_１は、それらが接続されている結合と共にシクロプロピルを形成してもよく、他の変数は本発明で定義された通りである。

本発明の一部の実施形態において、上記のＲ_２は、Ｃｌおよびフェノキシからなる群から選択され、他の変数は本発明で定義された通りである。

本発明の一部の実施形態において、上記の環Ａは、

ただし、
Ｒ_１は、ハロゲンおよびＣ_１－３アルコキシからなる群から選択され、前記のＣ_１－３アルコキシは、１個、２個または３個のハロゲンで置換されていてもよく；
或いは、２個のＲ_１は、それらが接続されている結合と共にシクロプロピルを形成してもよく；
Ｒ_２は、ハロゲンおよびフェノキシからなる群から選択され；
Ｒ_３は、－ＣＨ_２ＯＨから選択され、ｍは、１および２からなる群から選択され；
或いは、Ｒ_３は、ＣＮから選択され、ｍは、０、１および２からなる群から選択され；
ｎは、１、２および３からなる群から選択され；
Ｅ_１は、Ｏ、ＳおよびＮＨからなる群から選択され；
環Ａは、テトラヒドロピラニルから選択される。

本発明の一部の実施形態において、上記のＲ_１は、Ｈ、ＦおよびＯＣＨ_３からなる群から選択され、前記のＯＣＨ_３は、１個、２個または３個のハロゲンで置換されていてもよく、他の変数は本発明で定義された通りである。

本発明の一部の実施形態において、上記のＲ_１は、Ｈ、ＦおよびＯＣＨ_３からなる群から選択され、他の変数は本発明で定義された通りである。

本発明の一部の実施形態において、上記の環Ａは、

からなる群から選択され、他の変数は本発明で定義された通りである。

ただし、
Ｒ_１は、ハロゲンおよびＣ_１－３アルコキシからなる群から選択され、前記のＣ_１－３アルコキシは、１個、２個または３個のＲ_ａで置換されていてもよく；
或いは、２個のＲ_１は、それらが接続されている結合と共にシクロプロピルを形成してもよく；
各Ｒ_ａは、ハロゲンおよびＯＨからなる群から選択され；
Ｒ_２は、ハロゲン、メチル、フェノキシおよびピリジルオキシからなる群から選択され、前記のフェノキシおよびピリジルオキシは、１個、２個または３個のハロゲンで置換されていてもよく；
Ｒ_３は、－ＣＨ_２ＯＨから選択され、ｍは、１および２からなる群から選択され；
或いは、Ｒ_３は、ＣＮおよびＣＨ_２ＣＮからなる群から選択され、ｍは、０、１および２からなる群から選択され；
ｎは、１、２および３からなる群から選択され；
Ｅ_１は、Ｏ、ＳおよびＮＨからなる群から選択され；
環Ａは、テトラヒドロピラニルから選択される。

本発明の一部の実施形態において、上記の各Ｒ_ａは、ＦおよびＯＨからなる群から選択され、他の変数は本発明で定義された通りである。

本発明の一部の実施形態において、上記の環Ａは、

本発明の一部の実施形態において、

からなる群から選択される上記の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供し、
ここで、Ｒ_１、Ｒ_２およびｍは本発明で定義された通りである。

また、本発明の一部の実施形態は、上記のそれぞれの変数を任意に組み合わせたものである。

さらに、本発明は、

からなる群から選択される化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。

本発明は、

また、本発明は、ＢＴＫプロテインキナーゼ阻害剤に関連する医薬品の調製における上記の化合物またはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。

本発明の一部の実施形態において、前記のＢＴＫプロテインキナーゼ阻害剤に関連する医薬品が、血液腫瘍に用いられる医薬品である上記の使用を提供する。

技術的効果
本発明の化合物は、ＢＴＫ^{Ｃ４８１Ｓ}突然変異に対して強い阻害作用を有し、ＴＭＤ８細胞に対して良好な阻害作用を有する。また、マウスおよびラットの血漿における本発明化合物４の遊離薬物濃度は、参考例１よりも高く、腫瘍に対する本発明化合物４の阻害効果は、参考例１よりも明らかに優れている。

定義と用語
特に明記しない限り、本明細書で使用される以下の用語は、以下の意味を有することを意図している。特定の用語は、特定の定義がない場合に、不定または不明瞭と見なされるべきではないが、通常の意味で理解されるべきである。本明細書に商品名が記載される場合、その対応する商品またはその活性成分を指す。

ここで、用語「薬学的に許容される」とは、これらの化合物、材料、組成物、および/または剤形について、信頼性のある医学的判断の範囲内で、ヒトおよび動物の組織と接触して使用することに適し、過度の毒性、刺激、アレルギー反応または他の問題または合併症を伴うことなく、合理的な利益/リスク比に見合うことをいう。

用語「薬学的に許容される塩」とは、本発明で発見された特定の置換基を有する化合物を比較的毒性のない酸または塩基と反応させることで調製される本発明の化合物の塩を指す。本発明の化合物が比較的酸性の官能基を含む場合、純粋な溶液または適宜な不活性溶媒中で、このような化合物が中性形態として十分な量の塩基と接触させることで、塩基付加塩が得られる。薬学的に許容される塩基付加塩は、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、有機アミンもしくはマグネシウムの塩、または類似の塩を含む。本発明の化合物が比較的塩基性の官能基を含む場合、純粋な溶液または適宜な不活性溶媒中で、このような化合物が中性形態として十分な量の酸と接触させることで、酸付加塩を得ることができる。薬学的に許容される酸付加塩は、無機酸塩と有機酸塩を含む。上記の無機酸塩として、例えば、塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、重炭酸塩、リン酸、リン酸一水素塩、リン酸二水素塩、硫酸、硫酸水素塩、ヨウ化水素酸、亜リン酸などの無機酸塩が挙げられる。上記の有機酸塩として、例えば、酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸、マレイン酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、スベリン酸、フマル酸、乳酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、p－トルエンスルホン酸、クエン酸、酒石酸、メタンスルホン酸などの類似の酸の塩や、アミノ酸（例えばアルギニンなど）の塩、およびグルクロン酸などの有機酸の塩が挙げられる。本発明の一部の特定の化合物は、塩基性官能基と酸性官能基の両方を含むため、塩基付加塩または酸付加塩のいずれかに変換することができる。

本発明の薬学的に許容される塩は、通常の化学的方法によって酸性または塩基性部分を含む親化合物から調製することができる。一般的に、このような塩は、水または有機溶媒或いは両者の混合物中で、これらの化合物を遊離酸または塩基として化学量論量の適宜な塩基または酸と反応させることで調製される。

特に明記しない限り、「異性体」という用語は、幾何異性体、シス－トランス異性体、立体異性体、鏡像異性体、光学異性体、ジアステレオマー、および互変異性体を含むことを意図している。

本発明の化合物は、特定の幾何異性体または立体異性体として存在してもよい。本発明では、シスとトランス異性体、（－）と（＋）エナンチオマー、（Ｒ）と（Ｓ）エナンチオマー、ジアステレオ異性体、（Ｄ）異性体、（Ｌ）異性体、およびそのラセミ混合物、他の混合物、例えばエナンチオマーまたはジアステレオ異性体が豊富な混合物を含むすべてのこのような化合物が想定される。これらはすべて本発明の範囲内に含まれる。アルキル基などの置換基は、さらなる不斉炭素原子を有していてもよい。これらの異性体およびそれらの混合物はすべて、本発明の範囲内に含まれる。

特に明記しない限り、「エナンチオマー」または「光学異性体」という用語は、互いに鏡像関係にある立体異性体を指す。

特に明記しない限り、「シス－トランス異性体」または「幾何異性体」という用語は、二重結合や環形成炭素原子間の単結合が自由に回転できないことにより生成される。

特に明記しない限り、「ジアステレオマー」という用語は、分子に２つ以上のキラル中心を含み、且つ分子間で非鏡像関係にある立体異性体を指す。

特に明記しない限り、「（＋）」とは右旋性異性体を意味し、「（－）」とは左旋性異性体を意味し、「（±）」とはラセミ体を意味する。

特に明記しない限り、くさび形の実線結合（

）およびくさび形の破線結合（

）で立体中心の絶対配置を表し、直線形の実線結合（

）と直線形の破線結合（

）で立体中心の相対配置を表し、波線（

）でくさび形の実線結合（

）またはくさび形の破線結合（

）を表し、或いは波線（

）で直線形の実線結合（

）と直線形の破線結合（

）を表す。

本発明の化合物は、特定の形態で存在してもよい。特に明記しない限り、「互変異性体」または「互変異性体形態」という用語は、異なる官能基の異性体が室温で動的平衡状態にあり、互いに迅速に変換できることを意味する。互変異性体が可能な場合（例えば、溶液の中に）に、互変異性体の化学平衡を達成できる。例えば、プロトン互変異性体（ｐｒｏｔｏｎｔａｕｔｏｍｅｒ）（プロトトロピック互変異性体（ｐｒｏｔｏｔｒｏｐｉｃｔａｕｔｏｍｅｒ）としても知られる）には、ケト－エノール異性化やイミン－エナミン異性化などのプロトン移動による相互変換が含まれる。原子価互変異性体（ｖａｌｅｎｃｅｔａｕｔｏｍｅｒ）には、一部の結合電子の再結合による相互変換が含まれる。ケト－エノール互変異性化の例としては、ペンタン－２，４－ジオンと４－ヒドロキシペント－３－エン－２－オンとの２つの互変異性体間の相互変換がある。

特に明記しない限り、「１つの異性体に富む」、「異性体に富む」、「１つの鏡像異性体に富む」または「鏡像異性体に富む」という用語は、１つの異性体または鏡像異性体の含有量が１００％未満であり、且つその異性体または鏡像異性体の含有量は６０％以上、または７０％以上、または８０％以上、または９０％以上、または９５％以上、または９６％以上、または９７％以上、または９８％以上、または９９％以上、または９９．５％以上、または９９．６％以上、または９９．７％以上、または９９．８％以上、または９９．９％以上であることを意味する。

特に明記しない限り、「異性体過剰率」または「鏡像異性体過剰率」という用語は、２つの異性体または２つの鏡像異性体の相対パーセンテージ間の差を指す。例えば、一方の異性体または鏡像異性体が９０％の量で存在し、他方の異性体または鏡像異性体が１０％の量で存在する場合、異性体または鏡像異性体過剰率（ｅｅ値）は８０％である。

光学活性を有する（Ｒ）と（Ｓ）異性体、およびＤとＬ異性体は、キラル合成、キラル試薬または他の従来技術を用いて調製される。本発明のある化合物の１種類のエナンチオマーを得たい場合、純粋な所望のエナンチオマーは、不斉合成、または得られたジアステレオマー混合物の分離および補助基の開裂を含む、キラル補助剤による誘導作用によって得ることができる。或いは、分子が塩基性官能基（アミノ基など）または酸性官能基（カルボキシル基など）を含む場合、化合物は適宜な光学活性を有する酸または塩基と反応して、ジアステレオマー異性体の塩を形成し、その後、当技術分野における一般的な方法でジアステレオマーの分離を行い、純粋なエナンチオマーを回収する。さらに、エナンチオマーおよびジアステレオ異性体は、一般的に、キラル固定相を使用した、任意に化学誘導法（例えば、アミンからカルバメートを生成する）と組み合わせたクロマトグラフィーによって単離される。

本発明の化合物は、該化合物を構成する１つ以上の原子で非自然な割合の原子同位体を含んでもよい。本発明の化合物は、この化合物を構成する１つ以上の原子に非天然な割合で同位体原子を含有していてもよい。例えば、トリチウム（^３Ｈ）、ヨウ素－１２５（^１２５Ｉ）またはＣ－１４（^１４Ｃ）のような放射性同位体で標識された化合物が用いられる。別の例として、水素を重水素に置き換えて重水素化薬物を形成することができる。重水素と炭素との結合は、通常の水素と炭素との結合よりも強い。重水素化されていない薬物と比較して、重水素化された薬物は、毒性副作用の低減、薬物の安定性の向上、有効性の向上、および薬物の生物学的半減期の延長などの利点を有する。本発明の化合物のすべての同位体組成の変化は、放射能を有するかどうかにかかわらず、本発明の範囲内に含まれる。

特に明記しない限り、「Ｃ_１－３アルコキシ」という用語は、酸素原子を介して分子の他の部分に結合している、１～３個の炭素原子を含むアルキル基を示す。前記のＣ_１－３アルコキシは、Ｃ_１－２、Ｃ_２－３、Ｃ_３およびＣ_２のアルコキシなどを含む。Ｃ_１－３アルコキシの例として、メトキシ、エトキシ、プロポキシ(n－プロポキシおよびイソプロポキシを含む)などが挙げられるが、これらに限定されない。

特に明記しない限り、「ハロ」または「ハロゲン」という用語は、それ自体、または別の置換基の一部として、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素の原子を表す。

「任意の」または「任意に」という用語は、後続の事項または状況が発生する可能性があるが必ず発生ではないことを意味し、この用語は、上記の事項または状況が発生する場合および上記の事項または状況が発生しない場合を含む。

「置換された」という用語は、特定の原子上の１個以上の水素原子が置換基によって置換されることを指し、また、特定の原子の原子価が正常であり、且つ置換された化合物は安定している限り、重水素および水素の変種を含んでも良い。置換基がオキソ基（即ち、＝Ｏ）である場合、２個の水素原子が置換されていることを意味する。なお、芳香環基では、オキソ基の置換は起こらない。「置換されていてもよい」という用語は、原子が置換基で置換されても置換されていなくてもよいことを意味し、特に断りのない限り、置換基の種類および数は、化学的に実現可能である限り任意である。

いずれの変数（例えば、Ｒ）でも化合物の組成や構造中に一回以上現れる場合、それぞれの場合での定義は独立している。したがって、例えば、ある基が０～２個のＲで置換されている場合、上記の基は多くても２個のＲで置換されていてもよく、且つそれぞれの場合におけるＲは独立した選択肢を有する。さらに、置換基および／またはその変種の組み合わせは、安定な化合物を生じる場合に限り許容される。

例えば－（ＣＲＲ）_０－のような、連結基の数が０である場合、その連結基は単結合であることを意味する。

変数が単結合である場合、該単結合によって結合された２つの基が直接結合していることを意味する。例えば、Ａ－Ｌ－ＺにおけるＬが単結合を表す場合、該構造は実質的にＡ－Ｚである。

置換基が空いている場合は、該置換基が存在しないことを意味し、例えば、Ａ－ＸにおけるＸが空いている場合、該構造は実質的にＡである。挙げられた連結基の連結方向を明記しない場合、その連結方向は任意である。例えば、

における連結基Ｌが－Ｍ－Ｗ－である場合、この－Ｍ－Ｗ－は、左から右への読み取り順序と同じ方向で環Ａと環Ｂを連結して

となってもよく、左から右への読み取り順序と逆方向で環Ａと環Ｂを連結して

となってもよい。前記した連結基、置換基および／またはそのバリアントの組み合わせは、このような組み合わせが安定な化合物を生じる場合に限り許容される。

本発明の化合物は、以下の実施形態、それらを他の化学合成方法と組み合わせた実施形態、および当業者に周知の同等置換を含む、当業者に周知の様々な合成方法によって調製される。好ましい実施形態は、本発明の実施例を含むが、これらに限定されない。

本発明の化合物の構造は、当業者に周知の従来の方法によって確認することができる。本発明が化合物の絶対配置に関する場合、その絶対配置は、当技術分野の従来の技術によって確認することができる。例えば、単結晶Ｘ線回折法（ＳＸＲＤ）では、得られた単結晶について、ＢｒｕｋｅｒＤ８ｖｅｎｔｕｒｅ回折計（スキャンモード：φ／ωスキャン、光源：ＣｕＫα線）を使用して回折強度データを収集した後、さらに、直接法（Ｓｈｅｌｘｓ９７）で結晶構造を分析し、絶対配置を確認する。

本発明で使用される全ての溶媒は市販されている。本発明は以下の略語を使用する。ａｑは、水を表す。ｅｑは、当量または等価を表す。Ｍは、ｍｏｌ／Ｌを表す。ＤＣＭは、ジクロロメタンを表す。ＰＥは、石油エーテルを表す。ＤＭＦは、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミドを表す。ＮＭＰは、Ｎ－メチルピロリドンを表す。ＤＭＳＯは、ジメチルスルホキシドを表す。ＥｔＯＡｃは、酢酸エチルを表す。ＥｔＯＨは、エタノールを表す。ＭｅＯＨは、メタノールを表す。ＣＢｚは、アミノ保護基であるベンジルオキシカルボニルを表す。ＢＯＣは、アミノ保護基であるｔｅｒｔ－ブチルカルボニルを表す。ｒ．ｔ．は、室温を表す。Ｏ／Ｎは、一晩を表す。ＴＨＦは、テトラヒドロフランを表す。Ｂｏｃ_２Ｏは、ジｔｅｒｔ－ブチルジカーボネートを表す。ＴＦＡは、トリフルオロ酢酸を表す。ＤＩＰＥＡは、ジイソプロピルエチルアミンを表す。ＳＯＣｌ_２は、塩化チオニルを表す。ｍｐは、融点を表す。

化合物は、当技術分野における一般的な命名法又はＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）ソフトウェアによって命名され、市販の化合物は、メーカのカタログ名を使用する。

本発明の化合物は、ＢＴＫ^{Ｃ４８１Ｓ}突然変異に対して強い阻害作用を有し、ＴＭＤ８細胞に対して良好な阻害作用を有する。また、マウスおよびラットの血漿における本発明化合物４の遊離薬物濃度は、参考例１よりも高く、腫瘍に対する本発明化合物４の阻害効果は、参考例１よりも明らかに優れている。

図１は、二分子立体構造の楕円体図である。図２は、単分子立体構造の楕円体図である。図３は、ａ軸方向に沿ったユニットセルスタッキング図である。図４は、化合物の絶対配置図である。図５は、マウスにおけるヒトびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫ＴＭＤ８の異種移植腫瘍の腫瘍体積に対する試験化合物の影響（Ｄａｙ１４）（Ｍｅａｎ±ＳＥＭ）を示す図である。

本発明は、実施例により以下に詳細に記載される。しかしながら、これらの例が本発明に対して不利な制限を有することは意図されていない。本発明は本明細書で詳細に説明されており、実施形態も開示されている。本発明の精神および範囲から逸脱することなく、本明細書に開示される実施形態に様々な変更および修正を加えることができることは当業者には明らかであろう。

中間体Ａ

合成経路：

工程１：化合物Ａ２の合成
フェノール（７．４９ｇ，７９．５４ｍｍｏｌ，７．００ｍＬ，１．５ｅｑ）、化合物Ａ１（１０ｇ，５３．０３ｍｍｏｌ，１ｅｑ）、炭酸セシウム（２５．９２ｇ，７９．５４ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）を、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶解し、８０℃で３時間反応させた。反応終了後、反応液を濾過し、水を添加し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を回転蒸発させて除去し、カラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１）により精製して、化合物Ａ２。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２６３．１［Ｍ＋１］を得た。

工程２：化合物Ａの合成
化合物Ｂ（６ｇ，２５．８１ｍｍｏｌ，１ｅｑ）をテトラヒドロフラン（１８０ｍＬ）に加え、－７８℃（懸濁液、部分的に溶解）に冷却した後、ｎ－ブチルリチウム（２．５Ｍ，２１．６８ｍＬ，２．１ｅｑ）を滴下した。滴下完了後、－７８℃で撹拌しながら１時間反応させ、さらに、化合物Ａ２（７．１２ｇ，２７．１０ｍｍｏｌ，１．０５ｅｑ）のテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）溶液を滴下し、撹拌しながら１時間反応させた。反応終了後、飽和塩化アンモニウムで反応をクエンチし、５分間撹拌し、有機相を分離し、水相を酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、濃縮し、粗製中間体Ａを得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３８４．２［Ｍ＋１］。

実施例１

合成経路：

化合物００１－１は、先行文献であるＥｕｒ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００３，２４１８－２４２７に記載された化合物２１の合成に従って得られた。

工程１：化合物００１－２の合成
ジクロロメタン（７７９．６５ｍｇ，２．９１ｍｍｏｌ，２３４．８３μＬ，２ｅｑ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解し、０℃でジエチル亜鉛（１Ｍ，２．９１ｍＬ，２ｅｑ）を加え、０．５時間撹拌した後、トリフルオロ酢酸（３３１．９１ｍｇ，２．９１ｍｍｏｌ，２１５．５３μＬ，２ｅｑ）を加え、さらに０．５時間撹拌し、化合物００１－１を加えた後、２０℃で１時間反応させた。反応終了後、反応液に飽和塩化アンモニウムを添加し、反応をクエンチし、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮して、を得た化合物００１－２。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３８０．２［Ｍ＋Ｎａ］。

工程２：化合物００１－３の合成
化合物００１－２（０．０５ｇ，１３９．８４μｍｏｌ，１ｅｑ）を１，４－ジオキサン（１ｍＬ）に溶解し、塩酸／ジオキサン（４Ｍ，３４９．５９μＬ，１０ｅｑ）を加え、その後、２０℃で１時間反応させた。反応終了後、反応液を減圧下で濃縮し、化合物００１－３を得た。この化合物をさらに精製することなく次の反応でそのまま使用した。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１４４．２［Ｍ＋１］。

工程３：化合物１の合成
化合物００１－３（２０．０２ｍｇ，１３９．８４μｍｏｌ，１ｅｑ）をイソプロパノール（５ｍＬ）に溶解し、中間体Ａ（５３．７３ｍｇ，１３９．８４μｍｏｌ，１ｅｑ）およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（４５．１８ｍｇ，３４９．６０μｍｏｌ，６０．８９μＬ，２．５ｅｑ）を加えた後、１３０℃で２時間マイクロ波反応させた。反応終了後、真空下で濃縮して、粗生成物を得た。粗生成物を分取分離（クロマトグラフィーカラム：ＷｅｌｃｈＸｔｉｍａｔｅＣ１８１５０ｍｍ＊２５ｍｍ＊５μｍ；移動相：［水（０．２２５％ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ（アセトニトリル）％：３５％－６５％，８ｍｉｎ）により精製し、化合物１を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４９１．１［Ｍ＋１］。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ８．８７（ｂｒｄ，Ｊ＝７．７８Ｈｚ，１Ｈ），８．２７（ｓ，１Ｈ），７．３３－７．４０（ｍ，３Ｈ），７．２８（ｓ，１Ｈ），７．１６（ｓ，１Ｈ），７．００－７．０５（ｍ，３Ｈ），６．９０（ｄｄ，Ｊ＝２．１３，８．４１Ｈｚ，１Ｈ），４．８０－４．９５（ｍ，１Ｈ），４．０９（ｄｄ，Ｊ＝６．５３，１１．５４Ｈｚ，１Ｈ），３．６５－３．８０（ｍ，２Ｈ），３．５４－３．６３（ｍ，１Ｈ），２．７９（ｔ，Ｊ＝１０．９２Ｈｚ，１Ｈ），１．０４－１．３１（ｍ，２Ｈ），０．８７－０．９８（ｍ，１Ｈ），０．７４－０．８５（ｍ，１Ｈ）。

実施例２

合成経路：

工程１：化合物００２－２の合成
化合物００１－１（１０ｇ，２９．１１ｍｍｏｌ，１ｅｑ）をジクロロメタン（１００ｍＬ）に溶解し、０℃でｍ－クロロ過安息香酸（７．５３ｇ，４３．６６ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）を加えた後、２０℃で１５時間反応させた。反応液に飽和亜硫酸ナトリウム溶液を添加して反応をクエンチし、次に、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出し、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１）により精製して、化合物００２－２を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３０４．２［Ｍ－^ｔＢｕ＋１］。

工程２：化合物００２－３の合成
化合物００２－２（５ｇ，１３．９１ｍｍｏｌ，１ｅｑ）をテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）に溶解し、－２０℃で水素化アルミニウムリチウム（２．５Ｍ，８．３４ｍＬ，１．５ｅｑ）を加えた後、２０℃で３時間反応させた。反応終了後、反応液に水酸化ナトリウム溶液を添加し、反応をクエンチし、濾過し、フィルターケーキを酢酸エチルで洗浄し、濾液を合わせ、濃縮して粗生成物を得た。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝３：１）により精製して、化合物００２－３を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３０６．１［Ｍ－^ｔＢｕ＋１］。

工程３：化合物００２－４の合成
化合物００２－３（１．７ｇ，４．７０ｍｍｏｌ，１ｅｑ）をジクロロメタン（３ｍＬ）に溶解し、０℃でデス・マーチン試薬（２．９９ｇ，７．０５ｍｍｏｌ，２．１８ｍＬ，１．５ｅｑ）を加えた後、２０℃で３時間反応させた。反応液を濾過し、濾液を回転蒸発して乾固させ、粗生成物を得た。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１）により精製して、化合物００２－４を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３８２．１［Ｍ＋Ｎａ］。

工程４：化合物００２－５の合成
化合物００２－４（０．２１ｇ，５８４．０９μｍｏｌ，１ｅｑ）をジクロロエタン（１０ｍＬ）に溶解し、－７８℃で三フッ化ジエチルアミノ硫黄（２８２．４５ｍｇ，１．７５ｍｍｏｌ，２３１．５１μＬ，３ｅｑ）を加えた後、２０℃で２時間反応させた。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム溶液を添加して反応をクエンチし、次に、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を濃縮して粗生成物を得た。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝１０：１）により精製して、化合物００２－５を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３２６．１［Ｍ－^ｔＢｕ＋１］。

工程５：化合物００２－６の合成
化合物００２－５（２２２．８５ｍｇ，５８４．０９μｍｏｌ，１ｅｑ）を酢酸エチル（４ｍＬ）に溶解し、塩酸／酢酸エチル（５８４．０９μｍｏｌ，１ｅｑ）を加えた後、２０℃で１時間反応させ、反応液を回転蒸発して乾固させ、粗化合物００２－６を得た。これをそのまま次の工程で使用した。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１６８．１［Ｍ＋１］。

工程６：化合物２の合成
化合物００２－６（９７．６３ｍｇ，５８４．０９μｍｏｌ，１ｅｑ）、中間体Ａ（１７９．５３ｍｇ，４６７．２７μｍｏｌ，０．８ｅｑ）を、イソプロパノール（５ｍＬ）に溶解し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１８８．７２ｍｇ，１．４６ｍｍｏｌ，２５４．３４μＬ，２．５ｅｑ）を加え、１３０℃で２時間マイクロ波反応させた。反応液を回転蒸発して乾固させ、粗生成物を得た。粗生成物を分取分離（クロマトグラフィーカラム：ＷｅｌｃｈＸｔｉｍａｔｅＣ１８１５０ｍｍ＊２５ｍｍ＊５μｍ；移動相：［水（０．２２５％ギ酸）－アセトニトリル］；Ｂ（アセトニトリル）％：４０％－７０％，８．５ｍｉｎ）により精製し、化合物２を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５１５．０［Ｍ＋１］。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ９．３９（ｂｒｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），８．３８（ｂｒｓ，１Ｈ），７．３９－７．５３（ｍ，４Ｈ），７．２１－７．２７（ｍ，１Ｈ），７．１２（ｂｒｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，３Ｈ），６．９９（ｂｒｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），５．０３（ｂｒｓ，１Ｈ），４．２３－４．４０（ｍ，１Ｈ），３．８３（ｂｒｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，２Ｈ），３．５４－３．７３（ｍ，２Ｈ），２．０６－２．２４ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ）。

実施例３

合成経路：

工程１：化合物００３－１の合成
三フッ化ジエチルアミノ硫黄（２４９．６６ｍｇ，１．５５ｍｍｏｌ，２０４．６４μＬ，１．４ｅｑ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、０℃で化合物００２－３（０．４ｇ，１．１１ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を加えた後、０℃で１時間反応させた。反応液に飽和塩化アンモニウム溶液を添加して酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、粗生成物を得た。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１）により精製して、化合物００３－１を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３８６．２［Ｍ＋Ｎａ］。

工程２：化合物００３－２の合成
化合物００３－１（０．１２ｇ，３３０．０９μｍｏｌ，１ｅｑ）を酢酸エチル（２ｍＬ）に溶解し、窒素ガス下で塩酸／酢酸エチル（４Ｍ，２．４０ｍＬ，２９．０８ｅｑ）を加え、２０℃で１時間反応させた。反応液を回転蒸発して乾固させ、化合物００３－２を得た。化合物００３－２を精製せずにそのまま次の工程で使用した。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１４９．９［Ｍ＋Ｈ］。

工程３：化合物３の合成
化合物００３－２（５２．２８ｍｇ，１３６．０７μｍｏｌ，０．８ｅｑ）、中間体Ａ（２５．３７ｍｇ，１７０．０９μｍｏｌ，１ｅｑ）を、イソプロパノール（５ｍＬ）に溶解し、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５４．９６ｍｇ，４２５．２３μｍｏｌ，７４．０６μＬ，２．５ｅｑ）を加えた後、１３０℃で２時間マイクロ波反応させた。反応液を回転蒸発して乾固させ、粗生成物を得た。粗生成物を分取分離（クロマトグラフィーカラム：ＷｅｌｃｈＸｔｉｍａｔｅＣ１８１５０ｍｍ＊２５ｍｍ＊５μｍ；移動相：［水（０．２２５％ギ酸）－アセトニトリル］；Ｂ（アセトニトリル）％：４０％－７０％，８．５ｍｉｎ）により精製し、化合物３を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４９７．１［Ｍ＋Ｈ］。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ９．１４（ｂｒｄ，Ｊ＝７．７８Ｈｚ，１Ｈ），８．３８（ｂｒｓ，１Ｈ），７．３９－７．５０（ｍ，４Ｈ），７．２３－７．２７（ｍ，１Ｈ），７．１３（ｂｒｄ，Ｊ＝８．２８Ｈｚ，３Ｈ），６．９９（ｂｒｄ，Ｊ＝８．２８Ｈｚ，１Ｈ），４．７６－５．００（ｍ，１Ｈ），４．６５（ｂｒｓ，１Ｈ），４．３３－４．５０（ｍ，１Ｈ），３．７３－３．８４（ｍ，１Ｈ），３．６４－３．７３（ｍ，２Ｈ），３．３７（ｂｒｔ，Ｊ＝１１．０４Ｈｚ，１Ｈ），２．２３－２．３０（ｍ，１Ｈ），１．８９（ｂｒｄ，Ｊ＝１１．２９Ｈｚ，１Ｈ）。

実施例４

合成経路：

工程１：化合物００４－１の合成
化合物００２－３（０．１１７ｇ，３２３．６１μｍｏｌ，１ｅｑ）をアセトニトリル（２ｍＬ）に溶解し、窒素ガス下、２０℃で、酸化銀（２２４．９７ｍｇ，９７０．８３μｍｏｌ，３ｅｑ）およびヨードメタン（４５９．３３ｍｇ，３．２４ｍｍｏｌ，２０１．４６μＬ，１０ｅｑ）を順次に加えた後、８０℃に加熱して１２時間反応させた。冷却した後、反応液を濾過し、濾液を回転蒸発して乾固させ、化合物００４－１を得た。化合物００４－１を精製せずにそのまま次の工程で使用した。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３１９．８５［Ｍ－^ｔＢｕ＋Ｈ］。

工程２：化合物００４－２の合成
化合物００４－１（１２１．５４ｍｇ，３２３．６１μｍｏｌ，１ｅｑ）をジクロロメタン（２ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（３０．８０ｍｇ，２７０．１２μｍｏｌ，０．０２ｍＬ，０．８４ｅｑ）を加えた後、２０℃で１時間反応させた。反応液をそのまま回転蒸発して乾固させ、化合物００４－２を得た。化合物００４－２を精製せずにそのまま次の工程で使用した反応。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２７６．２０［Ｍ＋Ｈ］。

工程３：化合物４の合成
化合物中間体Ａ（９９．４７ｍｇ，２５８．８９μｍｏｌ，０．８ｅｑ）および化合物００４－２（８９．１４ｍｇ，３２３．６１μｍｏｌ，１ｅｑ）を、イソプロパノール（２ｍＬ）に溶解し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１０４．５６ｍｇ，８０９．０３μｍｏｌ，１４０．９１μＬ，２．５ｅｑ）を加えた後、１３０℃で１時間マイクロ波反応させた。反応液を回転蒸発して乾固させ、粗生成物を得た。粗生成物を分取分離（クロマトグラフィーカラム：ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＧｅｍｉｎｉ－ＮＸ８０ｍｍ＊４０ｍｍ＊３μｍ；移動相：［水（０．０５％ＮＨ_３Ｈ_２Ｏ＋１０ｍＭＮＨ_４ＨＣＯ_３）－アセトニトリル］；Ｂ（アセトニトリル）％：３７％－５７％，８ｍｉｎ）により精製した。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５０８．９［Ｍ］。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ９．２５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），８．３５（ｓ，１Ｈ），７．５０－７．３９（ｍ，３Ｈ），７．３９－７．３２（ｍ，１Ｈ），７．２８－７．２２（ｍ，１Ｈ），７．１４－７．０８（ｍ，３Ｈ），６．９８（ｄｄ，Ｊ＝２．３，８．３Ｈｚ，１Ｈ），４．５７（ｂｒｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），４．０８（ｄｄ，Ｊ＝５．４，１０．２Ｈｚ，１Ｈ），３．９３－３．８２（ｍ，２Ｈ），３．８１－３．６９（ｍ，２Ｈ），３．６４－３．５３（ｍ，４Ｈ），２．０３（ｂｒｄ，Ｊ＝１３．１Ｈｚ，１Ｈ），１．７０（ｂｒｓ，１Ｈ）。

化合物４の単結晶Ｘ線回折測定による分析
機器モデル：ＢｒｕｋｅｒＤ８ＶｅｎｔｕｒｅＰｈｏｔｏｎＩＩ
測定方法：アセトンを用いた溶媒揮発法により、室温で５日間成長させて結晶を得た。測定用の結晶のサイズは０．０７×０．１５×０．３４ｍｍであった。この結晶は三斜晶系に属し、空間群がＰ１であり、ユニットセルパラメーター：ａ＝９．３２８３（６）、ｂ＝１２．０１４９（７）、ｃ＝１２．７２６０（８）Å、α＝９８．９５２（３）、β＝１０６．２５７（２）^ｏ、γ＝９２．１７８（３）^ｏであり、ユニットセルの体積Ｖ＝１３４７．５９（１５）Å^３であり、ユニットセル内の非対称単位の数Ｚ＝１であった。
機器パラメーター：
ＢｒｕｋｅｒＤ８ＶｅｎｔｕｒｅＰｈｏｔｏｎＩＩＸ線回折計を使用して、回折強度データを収集した。光源はＣｕＫ_α放射線であり、走査モードはφ／ωスキャンであり、収集された回折点は合計３１２３１個であり、独立した回折点は８３９０個であり、観察可能な点の数（Ｉ／ｓｉｇｍａ≧２）は８１３５個である。

直接法（Ｓｈｅｌｘｓ９７）により結晶構造を解析し、すべての７６個の非水素原子の位置を得た。最小二乗法により構造パラメーターを補正し、原子種を判明した。幾何学的計算法および差分フーリエ法により、すべての水素原子位置を取得した。補正後、Ｒ_１＝０．０５０１、ｗＲ_２＝０．１４５４（ｗ＝１／σ｜Ｆ｜^２）、Ｓ＝１．０４６であった。最終的な化学量論式は（Ｃ_２６Ｈ_２５ＣｌＮ_４Ｏ_５）_２・Ｃ_３Ｈ_６Ｏであり、計算された分子量は１０７５．９７であり、計算された結晶密度は１．３２６ｇ／ｃｍ^３であった。

単結晶の結果は、結晶状態の分子配列が第一タイプの空間群に属し、化合物が光学活性を持ち、フラック変数が０．０４９（４）であり、結晶における化合物の絶対配置を決定できることを示す。結晶状態では、分子間に水素結合があり、分子同士は、水素結合とファンデルワールス力により、安定した空間配置を維持する。

化合物４の立体構造の楕円体図、ａ軸方向に沿ったユニットセルスタッキング図、および化合物の絶対配置図を図１、２、３および４に示す。化合物４の結晶構造データおよびパラメーターを表１、２、３、４、および５に示す。

等価原子を生成するための対称変換：＃１ｘ，ｙ＋１，ｚ－１＃２ｘ，ｙ－１，ｚ＋１

実施例５

合成経路：

化合物００５－１（即ち、参考例１）は、特許ＷＯ２０１７１１１７８７におけるＣｏｍｐｏｕｎｄ（Ｉ）について記載された方法に従って調製された。

工程１：化合物００５－２の合成
化合物００５－１（０．４ｇ，８３５．２０μｍｏｌ，１ｅｑ）をアセトニトリル（５ｍＬ）に溶解し、窒素ガス下でヨードベンゼンアセテート（９４１．５５ｍｇ，２．９２ｍｍｏｌ，３．５ｅｑ）、２，２，６，６－テトラメチルピペリジンオキシド（２６．２７ｍｇ，１６７．０４μｍｏｌ，０．２ｅｑ）を加えた後、水（５ｍＬ）を添加した。次に、３０℃で１２時間反応させた。反応液を回転蒸発して乾固させ、化合物００５－２を得た。化合物００５－２を精製せずにそのまま次の工程で使用した反応。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４９３．２［Ｍ＋Ｈ］。

工程２：化合物００５－３の合成
化合物００５－２（２０５．５４ｍｇ，４１７μｍｏｌ，１ｅｑ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、２０℃、窒素ガス下でＮ，Ｎ’－カルボニルジイミダゾール（１０１．４２ｍｇ，６２５．５０μｍｏｌ，１．５ｅｑ）を加え、１時間撹拌した後、反応液にアンモニア水（１４６．１４ｍｇ，４．１７ｍｍｏｌ，１６０．５９μＬ，１０ｅｑ）を滴下した後、激しく０．５時間撹拌した。反応液を回転蒸発して乾固させ、化合物００５－３を得て、精製せずにそのまま次の工程で使用した。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４９１．９［Ｍ＋Ｈ］。

工程３：化合物５の合成
化合物００５－３（０．１ｇ，２０３．２８μｍｏｌ，１ｅｑ）をＮ．Ｎ－ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）に溶解し、塩化シアヌル（５６．２３ｍｇ，３０４．９２μｍｏｌ，１．５ｅｑ）を加えた後、２０℃で１時間反応させた。反応液を回転蒸発して乾固させ、粗生成物を得た。粗生成物を分取分離（クロマトグラフィーカラム：ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＧｅｍｉｎｉ－ＮＸ８０ｍｍ＊４０ｍｍ＊３μｍ；移動相：［水（０．０５％ＮＨ_３Ｈ_２Ｏ＋１０ｍＭＮＨ_４ＨＣＯ_３）－アセトニトリル］；Ｂ（アセトニトリル）％：４７％－７７％，８．５ｍｉｎ）により精製し、化合物５を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４７３．９［Ｍ＋Ｈ］。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ９．３２（ｂｒｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），８．２８（ｓ，１Ｈ），７．４１－７．３４（ｍ，２Ｈ），７．２２－７．１０（ｍ，２Ｈ），７．０７－６．９８（ｍ，３Ｈ），６．９１（ｂｒｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），４．７１（ｂｒｓ，１Ｈ），４．４３（ｂｒｓ，１Ｈ），４．１５（ｂｒｄ，Ｊ＝１１．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８４（ｂｒｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，１Ｈ），２．３６（ｂｒｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ，１Ｈ），２．２９－２．１４（ｍ，１Ｈ），１．９８（ｂｒｄ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，１Ｈ），１．９３－１．７３（ｍ，１Ｈ）。

実施例６

合成経路：

工程１：化合物００６－１の合成
化合物００５－１（０．３５ｇ，７３０．８０μｍｏｌ，１ｅｑ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、０℃でトリエチルアミン（７３．９５ｍｇ，７３０．８０μｍｏｌ，１ｅｑ）およびメタンスルホニルクロリド（１１７．２０ｍｇ，１．０２ｍｍｏｌ，１．４ｅｑ）を加え、６時間反応させた。反応終了後、水を添加し、ジクロロメタンで３回（毎回２０ｍｌ）抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を回転蒸発させて除去し、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝５０：１－２０：１）により精製して、化合物００６－１を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５５７．０［Ｍ＋Ｈ］。

工程２：化合物６の合成
化合物００６－１（１００ｍｇ，１７９．５３μｍｏｌ，１ｅｑ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解し、シアン化ナトリウム（１３０ｍｇ，２．６５ｍｍｏｌ，１４．７７ｅｑ）を加え、７０℃で８時間反応させた。反応終了後、水を添加し、酢酸エチルで２回（毎回１５ｍｌ）抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を回転蒸発させて除去し、粗生成物を分取分離（クロマトグラフィーカラム：ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＧｅｍｉｎｉ－ＮＸ８０ｍｍ＊３０ｍｍ＊３μｍ；移動相：［水（１０ｍＭＮＨ_４ＨＣＯ_３）－アセトニトリル］；Ｂ（アセトニトリル）％：４４％－７４％，９．５ｍｉｎ）により精製し、化合物６を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４８８．０［Ｍ＋Ｈ］。１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，４００ＭＨｚ）： δ １３．２８（ｂｒｓ，１Ｈ），８．７９（ｂｒｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），８．２８（ｓ，１Ｈ），７．３１－７．４０（ｍ，４Ｈ），７．１４－７．１８（ｍ，１Ｈ），７．００－７．０８（ｍ，３Ｈ），６．９０（ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．１Ｈｚ，１Ｈ），４．３１（ｂｒｄ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，２Ｈ），３．５５－３．６５（ｍ，１Ｈ），３．２０－３．２９（ｍ，１Ｈ），２．５３（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），２．２９（ｂｒｓ，１Ｈ），１．９０（ｂｒｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ），１．６０－１．７２ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ）

実施例７

合成経路：

工程１：化合物００７－１の合成
化合物００２－３（８３０ｍｇ，２．３０ｍｍｏｌ，１ｅｑ）、ｐ－ニトロ安息香酸（６１３．８４ｍｇ，３．６７ｍｍｏｌ，１．６ｅｑ）、トリフェニルホスフィン（２．４１ｇ，９．１８ｍｍｏｌ，４ｅｑ）を、トルエン（１４ｍＬ）に溶解し、さらにアゾジカルボン酸ジエチル（１．６０ｇ，９．１８ｍｍｏｌ，１．６７ｍＬ，４ｅｑ）を加え、６５℃で１２時間反応させた。反応終了後、水を添加し、酢酸エチルで３回（毎回２０ｍＬ）抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を回転蒸発させて除去し、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝５０：１－２０：１）により精製して、化合物００７－１を得た。

工程２：化合物００７－２の合成
化合物００７－１（６５０ｍｇ，１．２７ｍｍｏｌ，１ｅｑ）、炭酸カリウム（４３９．８１ｍｇ，３．１８ｍｍｏｌ，２．５ｅｑ）を無水テトラヒドロフラン（５ｍＬ）およびメタノール（５ｍＬ）に溶解し、２０℃で１２時間反応させた。反応終了後、濾過し、溶媒を回転蒸発させて除去し、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝５０：１－１０：１）により精製して、化合物００７－２を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３０６．１［Ｍ－^ｔＢｕ＋Ｈ］。

工程３：化合物００７－３の合成
化合物００７－２（３４０ｍｇ，９４０．４０μｍｏｌ，１ｅｑ）をアセトニトリル（５ｍＬ）に溶解し、窒素ガス下で，酸化銀（６５３．７９ｍｇ，２．８２ｍｍｏｌ，３ｅｑ）およびヨードメタン（１．３３ｇ，９．４０ｍｍｏｌ，１０ｅｑ）を加え、８０℃で４０時間封管反応させた。反応終了後、濾過し、回転蒸発して乾固させ、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝５０：１－２０：１）により精製して、化合物００７－３を得た。

工程４：化合物００７－４の合成
化合物００７－３（２４０ｍｇ，６３９．０２μｍｏｌ，１ｅｑ）を１，４－ジオキサン（４ｍＬ）に溶解し、ＨＣｌ／ｄｉｏｘａｎｅ（４Ｍ，４．７９ｍＬ，３０ｅｑ）を加え、２０℃で３時間反応させた。反応終了後、そのまま回転蒸発して乾固させ、００７－４を得た。粗生成物をそのまま次の工程で使用した。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１６１．８［Ｍ＋Ｈ］。

工程４：化合物７の合成
化合物００７－４（１００ｍｇ，６２０．３５μｍｏｌ，１ｅｑ）、化合物Ａ（１４３．０１ｍｇ，３７２．２１μｍｏｌ，０．６ｅｑ）を、イソプロパノール（２ｍＬ）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（２４０．５２ｍｇ，１．８６ｍｍｏｌ，３ｅｑ）を加え、１３０℃で１時間マイクロ波反応させた。溶媒を回転蒸発させて除去し、粗生成物を分取分離（クロマトグラフィーカラム：ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＧｅｍｉｎｉ－ＮＸ７５ｍｍ＊３０ｍｍ＊３μｍ；移動相：［水（０．２２５％ギ酸）－アセトニトリル］；Ｂ（アセトニトリル）％：３５％－５５％，７ｍｉｎ）により精製し、化合物７を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５０９．１［Ｍ＋Ｈ］。^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，４００ＭＨｚ）： δ ＝９．１０（ｂｒｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ），８．３４（ｓ，１Ｈ），７．３７－７．４９（ｍ，４Ｈ），７．２１－７．２８（ｍ，１Ｈ），７．０７－７．１６（ｍ，３Ｈ），６．９９（ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．３Ｈｚ，１Ｈ），４．３０－４．５２（ｍ，２Ｈ），３．５５－３．８５（ｍ，４Ｈ），３．５０（ｓ，３Ｈ），３．３１（ｂｒｔ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），２．２２（ｂｒｄｄ，Ｊ＝１２．７，３．６Ｈｚ，１Ｈ），１．５４ｐｐｍ（ｑ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１Ｈ）。

実施例８

合成経路：

工程１：化合物００８－１の合成
化合物００２－３（１ｇ，２．７７ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を１，２－ジクロロエタン（１０ｍＬ）に溶解し、酢酸ロジウム二量体（１２．２２ｍｇ，２７．６６μｍｏｌ，０．０１ｅｑ）を加え、８０℃でジアゾ酢酸エチル（３１５．５９ｍｇ，２．７７ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を滴下し、８時間反応させた。反応終了後、水を添加し、酢酸エチルで３回（毎回３０ｍＬ）抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を回転蒸発させて除去し、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝５０：１－２０：１）により精製して、化合物００８－１を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３４８．２［Ｍ－^ｔＢｕ＋Ｈ］。

工程２：化合物００８－２の合成
化合物００８－１（１．６ｇ，３．５７ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を無水エタノール（１５ｍＬ）に溶解し、氷浴下で水素化ホウ素ナトリウム（４０５．６８ｍｇ，１０．７２ｍｍｏｌ，３ｅｑ）を加え、室温にゆっくりと昇温し、１２時間反応させた。反応終了後、飽和塩化アンモニウム３０ｍＬを添加し、酢酸エチルで３回（毎回３０ｍＬ）抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を回転蒸発させて除去し、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝４０：１－１５：１）により精製して、化合物００８－２を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３０６．２［Ｍ－Ｂｏｃ＋Ｈ］。

工程３：化合物００８－３の合成
化合物００８－２（３３０．００ｍｇ，８１３．６１μｍｏｌ，１ｅｑ）を１，４－ジオキサン（４ｍＬ）に溶解し、ＨＣｌ／ｄｉｏｘａｎｅ（４Ｍ，６．１０ｍＬ，３０ｅｑ）を加え、２０℃で１２時間反応させて、固体が析出し、濾過し、生成物００８－３を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１９０．２［Ｍ＋Ｈ］。

工程４：化合物８の合成
化合物００８－３（４０ｍｇ，１７５．６８μｍｏｌ，１ｅｑ）、化合物Ａ（６７．５０ｍｇ，１７５．６８μｍｏｌ，１ｅｑを、イソプロパノール（１．５ｍＬ）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（６８．１２ｍｇ，５２７．０４μｍｏｌ，３ｅｑ）を加え、１３０℃で１時間マイクロ波反応させた。溶媒を回転蒸発させて除去し、粗生成物を分取分離（クロマトグラフィーカラム：ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＧｅｍｉｎｉ－ＮＸ７５ｍｍ＊３０ｍｍ＊３μｍ；移動相：［水（０．２２５％ギ酸）－アセトニトリル］；Ｂ（アセトニトリル）％：３０％－５０％，７ｍｉｎ）により精製し、化合物８を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５３９．１［Ｍ＋Ｈ］。１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，４００ＭＨｚ）： δ ＝９．４６（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），８．３３（ｓ，１Ｈ），７．４１－７．４８（ｍ，４Ｈ），７．２３－７．２８（ｍ，１Ｈ），７．１３（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），７．０８（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），６．９６（ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．３Ｈｚ，１Ｈ），４．５４－４．６７（ｍ，１Ｈ），３．９６－４．１４（ｍ，３Ｈ），３．８３－３．９２（ｍ，２Ｈ），３．６９－３．８２（ｍ，３Ｈ），３．４９－３．６４（ｍ，２Ｈ），２．０９（ｂｒｄ，Ｊ＝１４．６Ｈｚ，１Ｈ），１．７１ｐｐｍ（ｂｒｔ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，１Ｈ）。

実施例９

合成経路：

工程１：化合物００９－２合成
化合物００９－１（４．５ｇ，２６．７６ｍｍｏｌ，１ｅｑ）、フェノール（２．５２ｇ，２６．７６ｍｍｏｌ，１ｅｑ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）に溶解し、炭酸セシウム（８．７２ｇ，２６．７６ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を加え、１２０℃で５時間反応させた。反応液を濾過し、水を添加し、酢酸エチルで３回（毎回５０ｍＬ）抽出し、有機相を合わせ、回転蒸発して乾固させ、粗生成物を得た。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝５０：１）により精製して、化合物００９－２を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２４２．８０［Ｍ＋Ｈ］。

工程２：化合物００９－３合成
化合物Ｂ（９１３．８４ｍｇ，３．９３ｍｍｏｌ，１ｅｑ）をテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）に溶解し、－７８℃でｎ－ブチルリチウム（２．５Ｍ，３．３０ｍＬ，２．１ｅｑ）を加え、１．５時間反応させた。次に、－７８℃で化合物００９－２（１ｇ，４．１３ｍｍｏｌ，１．０５ｅｑ）のテトラヒドロフラン（５ｍＬ）溶液を滴下した後、撹拌しながら６時間反応させた。２ｍＬの水で反応をクエンチし、有機相を分離し、水相を酢酸エチルで２回（毎回３０ｍｌ）抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を回転蒸発して乾固させ、粗生成物を得た。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）により精製して、化合物００９－３を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３８７．２０［Ｍ＋Ｎａ］。

工程３：化合物９の合成
化合物００４－２（１５９．５２ｍｇ，９８９．５７μｍｏｌ，１．２ｅｑ）、化合物００９－３（０．３ｇ，８２４．６４μｍｏｌ，１ｅｑ）を、イソプロパノール（５ｍＬ）に溶解し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（２６６．４４ｍｇ，２．０６ｍｍｏｌ，２．５ｅｑ）を加え、１３０℃で２時間マイクロ波反応させた。粗生成物を分取分離（クロマトグラフィーカラム：ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＧｅｍｉｎｉ－ＮＸ１５０ｍｍ＊４０ｍｍ＊５μｍ；移動相：［水（０．２２５％ギ酸）－アセトニトリル］；Ｂ（アセトニトリル）％：３７％－５７％，８ｍｉｎ）により精製し、化合物９を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４８９．１５［Ｍ＋Ｈ］。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ＝９．３７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），８．２５－８．１５（ｍ，１Ｈ），７．３９－７．２６（ｍ，４Ｈ），７．１４－７．０６（ｍ，１Ｈ），７．００（ｄｄ，Ｊ＝１．０，８．５Ｈｚ，２Ｈ），６．８７－６．７４（ｍ，２Ｈ），４．５４－４．３８（ｍ，１Ｈ），３．９８（ｄｄ，Ｊ＝５．３，１０．５Ｈｚ，１Ｈ），３．８５－３．７３（ｍ，２Ｈ），３．７１－３．６２（ｍ，２Ｈ），３．５４－３．４４（ｍ，４Ｈ），２．３０（ｓ，３Ｈ），２．０１－１．８９（ｍ，１Ｈ），１．６９－１．５６（ｍ，１Ｈ）

実施例１０

合成経路：

工程１：化合物０１０－２合成
化合物０１０－１（５ｇ，２９．０５ｍｍｏｌ，１ｅｑ）、フェノール（２．７３ｇ，２９．０５ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）に溶解し、炭酸セシウム（９．４６ｇ，２９．０５ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を加えた後、８５℃で１２時間反応させた。反応液を濾過し、水を添加し、酢酸エチルで３回（毎回５０ｍＬ）抽出し、有機相を合わせ、回転蒸発して乾固させ、粗生成物を得た。粗生成物を分取分離（クロマトグラフィーカラム：ＷｅｌｃｈＸｔｉｍａｔｅＣ１８１００＊４０ｍｍ＊３μｍ；移動相：［水（０．０７５％ギ酸）－アセトニトリル］；アセトニトリル％：４０％－７０％，８ｍｉｎ）により精製し、化合物０１０－２を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２４６．８０［Ｍ＋Ｈ］。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ＝７．８４（ｔ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．３８－７．２７（ｍ，２Ｈ），７．２２－７．１０（ｍ，１Ｈ），７．０５－６．９５（ｍ，２Ｈ），６．７０（ｄｄ，Ｊ＝２．３，８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．５９（ｄｄ，Ｊ＝２．４，１２．１Ｈｚ，１Ｈ），３．８８－３．８１（ｍ，３Ｈ）。

工程２：化合物０１０－３合成
化合物Ｂ（８５８．２６ｍｇ，３．６９ｍｍｏｌ，１ｅｑ）をテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）に溶解し、－７８℃でｎ－ブチルリチウム（２．５Ｍ，３．１０ｍＬ，２．１ｅｑ）を加え、１．５時間反応させた。次に、－７８℃で化合物０１０－２（１ｇ，４．０６ｍｍｏｌ，１．１ｅｑ）のテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）溶液を滴下した後、撹拌しながら６時間反応させた。２ｍＬの水で反応をクエンチし、有機相を分離し、水相を酢酸エチルで（３０ｍＬ×２）抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を回転蒸発して乾固させ、粗生成物を得た。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）により精製して、化合物０１０－３を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３６７．８０［Ｍ＋Ｈ］。

工程３：化合物１０の合成
化合物００４－２（１４６．１１ｍｇ，９０６．３９μｍｏｌ，１ｅｑ）、化合物０１０－３（０．３ｇ，８１５．７５μｍｏｌ，０．９ｅｑ）を、イソプロパノール（５ｍＬ）に溶解し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（２９２．８５ｍｇ，２．２７ｍｍｏｌ，２．５ｅｑ）を加え、１３０℃で２時間マイクロ波反応させた。粗生成物を分取分離（クロマトグラフィーカラム：ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＧｅｍｉｎｉ－ＮＸ１５０ｍｍ＊４０ｍｍ＊５μｍ；移動相：［水（０．２２５％ギ酸）－アセトニトリル］；Ｂ（アセトニトリル）％：３７％－５７％，８ｍｉｎ）により精製し、化合物１０を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４９３．２０［Ｍ＋Ｈ］。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ＝９．２０（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），８．３５（ｓ，１Ｈ），７．６２－７．４２（ｍ，４Ｈ），７．２８－７．２３（ｍ，１Ｈ），７．１４（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．８８（ｄｄ，Ｊ＝２．３，８．５Ｈｚ，１Ｈ），６．７８（ｄｄ，Ｊ＝２．３，１１．０Ｈｚ，１Ｈ），４．６２－４．４９（ｍ，１Ｈ），４．０６（ｄｄ，Ｊ＝５．１，１０．９Ｈｚ，１Ｈ），３．８５（ｂｒｓ，２Ｈ），３．８１－３．７１（ｍ，２Ｈ），３．６４－３．５２（ｍ，４Ｈ），２．０３（ｂｒｄ，Ｊ＝１３．８Ｈｚ，１Ｈ），１．７０（ｂｒｓ，１Ｈ）

実施例１１

合成経路：

工程１：化合物０１１－１合成
化合物Ａ１（４ｇ，２１．２１ｍｍｏｌ，１ｅｑ）および２－ヒドロキシピリジン（２．０２ｇ，２１．２１ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を、Ｎ，Ｎジメチルホルムアミド（１５ｍＬ）に溶解し、炭酸カリウム（３．５２ｇ，２５．４５ｍｍｏｌ，１．２ｅｑ）を加え、７０℃で１６時間反応させた。２５ｍＬの水を添加し、酢酸エチルで２回（毎回５０ｍＬ）抽出し、有機相を合わせ、２０ｍＬの飽和塩化ナトリウム溶液で１回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を回転蒸発させて除去し、室温下、１５ｍＬの酢酸エチルでスラリー化させ、濾過し、化合物０１１－１を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２６３．９［Ｍ＋Ｈ］。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３－ｄ）δ ＝７．９９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｄ，１Ｈ），７．４８－７．４０（ｍ，２Ｈ），７．３２（ｄ，１Ｈ），６．６９（ｄ，１Ｈ），６．３０（ｔ，１Ｈ），４．０６－３．９２（ｍ，３Ｈ）。

工程２：化合物０１１－２合成
化合物Ｂ（８３９．６５ｍｇ，３．６１ｍｍｏｌ，１ｅｑ）をテトラヒドロフラン溶液（１０ｍＬ）に溶解し、窒素ガス下で－７８℃に冷却した後、ｎ－ブチルリチウム（２．５Ｍ，２．８９ｍＬ，２ｅｑ）を滴下し、１．５時間反応させた後、さらに化合物０１１－１（１．００ｇ，３．７９ｍｍｏｌ，１．０５ｅｑ）を加え、３時間反応させた。１５ｍＬの水で反応をクエンチし、酢酸エチルで２回（毎回３０ｍＬ）抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を回転蒸発して乾固させ、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝２０：１－１０：１）により精製して、化合物０１１－２を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３８５．０［Ｍ＋Ｈ］。

工程３：化合物１１合成
化合物００４－２（３５．１５ｍｇ，２１８．０７μｍｏｌ，１．２ｅｑ）および化合物０１１－２（７０ｍｇ，１８１．７２μｍｏｌ，１ｅｑ）を、イソプロパノール（３ｍＬ）に溶解し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（５８．７２ｍｇ，４５４．３１μｍｏｌ，２．５ｅｑ）を加え、１２５℃で１．５時間マイクロ波反応させた。減圧下で溶媒を除去した。粗生成物を分取分離（クロマトグラフィーカラム：ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＧｅｍｉｎｉ－ＮＸ７５ｍｍ＊３０ｍｍ＊５μｍ；移動相：［水（０．２２５％ギ酸）－アセトニトリル］；Ｂ（アセトニトリル）％：１５％－３５％，７ｍｉｎ）により精製し、化合物１１を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５１０．１［Ｍ＋Ｈ］。１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ ＝９．２６（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．２５（ｓ，１Ｈ），７．７６－７．６６（ｍ，４Ｈ），７．６０（ｓ，１Ｈ），７．５３（ｄ，１Ｈ），６．７１（ｄ，１Ｈ），６．５７（ｔ，１Ｈ），４．４９（ｓ，１Ｈ），４．０２（ｍ，１Ｈ），３．８９－３．７５（ｍ，２Ｈ），３．６８（ｔ，１Ｈ），２．１６（ｄ，１Ｈ），１．６７－１．５４（ｍ，１Ｈ）。

実施例１２

合成経路：

工程１：化合物０１２－１合成
化合物Ａ１（５ｇ，２６．５１ｍｍｏｌ，１ｅｑ）及び２－フルオロフェノール（３．５７ｇ，３１．８２ｍｍｏｌ，１．２ｅｑ）を、Ｎ，Ｎジメチルホルムアミド（２５ｍＬ）に溶解し、炭酸セシウム（１０．３７ｇ，３１．８２ｍｍｏｌ，１．２ｅｑ）を加え、７０℃で３時間反応させた。２５ｍＬの水を添加し、酢酸エチルで２回（毎回５０ｍＬ）抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を回転蒸発させて除去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝５０：１－３０：１）により精製して、化合物０１２－１を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２８０．９［Ｍ＋Ｈ］。

工程２：化合物０１２－２合成
化合物Ｂ（７２０ｍｇ，３．１０ｍｍｏｌ，１ｅｑ）をテトラヒドロフラン溶液（６ｍＬ）に溶解し、窒素ガス下で－７８℃に冷却した後、ｎ－ブチルリチウム（２．５Ｍ，２．６０ｍＬ，２．１ｅｑ）を滴下し、１時間反応させた後、さらに化合物０１２－１（７２４．４４ｍｇ，２．５８ｍｍｏｌ，１ｅｑ）のテトラヒドロフラン溶液（４ｍＬ）を加え、４時間反応させた。１５ｍＬの水で反応をクエンチし、酢酸エチルで２回（毎回３０ｍＬ）抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を回転蒸発して乾固させ、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝５０：１－３０：１）により精製して、化合物０１２－２を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４０２．０［Ｍ＋Ｈ］。

工程３：化合物１２合成
化合物００４－２（６０ｍｇ，３７２．２１μｍｏｌ，１ｅｑ）および化合物０１２－２（１１９．７６ｍｇ，２９７．７７μｍｏｌ，０．８ｅｑ）をイソプロパノール（２ｍＬ）に溶解し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１４４．３１ｍｇ，１．１２ｍｍｏｌ，３ｅｑ）を加え、１３０℃で１．５時間マイクロ波反応させた。減圧下で溶媒を除去した。粗生成物を分取分離（クロマトグラフィーカラム：ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＧｅｍｉｎｉ－ＮＸ７５ｍｍ＊３０ｍｍ＊５μｍ；移動相：［水（０．２２５％ギ酸）－アセトニトリル］；Ｂ（アセトニトリル）％：３５％－６５％，７ｍｉｎ）により精製し、化合物１２を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５２７．１［Ｍ＋Ｈ］。１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，４００ＭＨｚ）： δ ＝１２．６０－１３．２５（ｍ，１Ｈ），９．２８（ｂｒｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），８．３３（ｓ，１Ｈ），７．４３（ｂｒｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．３２－７．３９（ｍ，１Ｈ），７．１６－７．２７（ｍ，４Ｈ），７．０７（ｓ，１Ｈ），６．９６（ｂｒｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．５６（ｂｒｓ，１Ｈ），４．０７（ｂｒｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，１Ｈ），３．８４（ｂｒｓ，２Ｈ），３．７４（ｂｒｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ，２Ｈ），３．５８（ｓ，４Ｈ），２．０３（ｂｒｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），１．６２－１．７５ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ）。

実施例１３

合成経路：

工程１：化合物０１３－１の合成
化合物００２－３（５００ｍｇ，１．３８ｍｍｏｌ，１ｅｑ）をアセトニトリル（５ｍＬ）に溶解し、窒素ガス下で酸化銀（９６１．４５ｍｇ，４．１５ｍｍｏｌ，３ｅｑ）および重水素化ヨードメタン（２．００ｇ，１３．８３ｍｍｏｌ，１０ｅｑ）を加え、８０℃で４８時間封管反応させた。反応終了後、濾過し、回転蒸発して乾固させ、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝５０：１－２０：１）により精製して、化合物０１３－１を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２７９．１［Ｍ＋Ｈ］。

工程２：化合物０１３－２の合成
化合物０１３－１（１４０ｍｇ，３６９．７９μｍｏｌ，１ｅｑ）を１，４－ジオキサン（２ｍＬ）に溶解し、塩酸／１，４－ジオキサン（４Ｍ，２．７７ｍＬ，３０ｅｑ）を加え、２０℃で３時間反応させた。反応終了後、そのまま回転蒸発して乾固させ、０１３－２を得た。粗生成物をそのまま次の工程で使用した。

工程３：化合物１３の合成
化合物０１３－２（６０ｍｇ，３６５．３７μｍｏｌ，１ｅｑ）、化合物Ａ（１４０．３８ｍｇ，３６５．３７μｍｏｌ，１ｅｑ）を、イソプロパノール（１ｍＬ）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（１４１．６６ｍｇ，１．１０ｍｍｏｌ，１９０．９２μＬ，３ｅｑ）を加え、１３０℃４時間マイクロ波反応させた。溶媒を回転蒸発させて除去し、粗生成物を分取分離（クロマトグラフィーカラム：ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＧｅｍｉｎｉ－ＮＸ７５ｍｍ＊３０ｍｍ＊３μｍ；移動相：［水（０．２２５％ギ酸）－アセトニトリル］；Ｂ（アセトニトリル）％：３５％－５５％，７ｍｉｎ）により精製し、化合物１３を得た。ＬＣＭＳ：（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５１２．１［Ｍ＋Ｈ］。１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，４００ＭＨｚ）： δ ＝９．３０（ｂｒｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），８．３２（ｂｒｓ，１Ｈ），７．３５－７．４９（ｍ，４Ｈ），７．２５（ｂｒｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．１１（ｂｒｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，３Ｈ），６．９８（ｂｒｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），４．５６（ｂｒｓ，１Ｈ），４．０７（ｂｒｓ，１Ｈ），３．６９－３．９４（ｍ，４Ｈ），３．５９（ｂｒｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），２．０２（ｂｒｄ，Ｊ＝１３．６Ｈｚ，１Ｈ），１．７０ｐｐｍ（ｂｒｔ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，１Ｈ）。

生物学的試験データ：
実験例１：ＢＴＫ酵素活性アッセイ
ＢＴＫ酵素活性アッセイの具体的なプロセスは以下の通りである。
緩衝液：２０ｍｍの２－［４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジニル］－エタンスルホン酸（Ｈｅｐｅｓ）（ｐＨ７．５）、１０ｍｍの塩化マグネシウム、１ｍｍのエチレンビス（オキシエチレンニトリロ）四酢酸（ＥＧＴＡ）、０．０２％ポリオキシエチレンドデシルエーテル（Ｂｒｉｊ３５）、０．０２ｍｇ／ｍＬのＢＳＡ、０．１ｍｍのバナジン酸ナトリウム（Ｎａ_３ＶＯ_４）、２ｍｍのジチオスレイトール（ＤＴＴ）、１％のＤＭＳＯ、２００μｍのアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）。

１．新たに調製された反応緩衝液で基質を調製した。
２．必要な補因子を上記の基質溶液に加えた。
３．キナーゼＢＴＫ^{Ｃ４８１Ｓ}を上記の基質溶液に加え、均一に混合した。
４．ＤＭＳＯに溶解した化合物を、Ｅｃｈｏ５５０（Ａｃｏｕｓｔｉｃｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；ｎａｎｏｌｉｔｅｒｒａｎｇｅ）によってキナーゼ反応混合物に添加し、室温で２０分間インキュベートした。
５． ^３３Ｐ－ＡＴＰ（比放射能１０μＣｉ／μＬ）を反応混合物に加えて、反応を開始させた。
６．混合物を室温で２時間インキュベートした。
７．フィルター結合法によって放射性を検出した。
８．キナーゼ活性データは、溶媒（ジメチルスルホキシド）反応と比較して、試験サンプル中の残存キナーゼ活性の割合を表した。Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄソフトウェア）を使用してＩＣ_５０値とフィッティング曲線を取得し、結果を表６に示す。

結論：本発明の化合物は、ＢＴＫ^{Ｃ４８１Ｓ}突然変異に対して強い阻害作用を有する。

実験例２：ＢＴＫ細胞活性アッセイ
１．細胞の培養および継代
細胞の継代プロセスで使用される培地、トリプシンおよび１×ＰＢＳを、３７℃の水浴で予熱し、上澄みを吸引した。トリプシン１ｍＬを加えてリンスし、リンス液を吸引した。それぞれ１ｍＬのトリプシンを加え、細胞が脱落したまで３７℃で細胞を消化した。１０ｍＬの培地を加えて均一に混合した。混合物を１０００ｒｐｍで５分間遠心分離し、細胞を１０ｍＬの培地に再懸濁させた。０．７ｍＬの細胞懸濁液をピペットでカウントカップに入れ、ＶｉＣｅｌｌＸＲでカウントして、それぞれ３２万７千／ｍＬの細胞密度を得た。１．１７ｍＬの細胞懸濁液と培地をそれぞれ採取し、細胞懸濁液を希釈した。以下のマイクロプレートレイアウト図に従って、３８４ウェルマイクロプレートの周辺ウェルに１００μＬのリン酸緩衝液を添加し、他のウェルに４０μＬの細胞懸濁液をそれぞれ添加した後、細胞プレートをインキュベーターで培養した。

２．投薬
（１）化合物の調製：
試験化合物の９μＬ希釈液をＰｏｄ用の浅いウェルプレート（Ｌａｂｃｙｔｅ、＃ＬＰ－０２００）に加えた。浅いウェルプレートを２５００ｒｐｍで３０秒間遠心分離した。
（２）細胞板をインキュベーターから取り出した。
（３）以下のマイクロプレートレイアウト図に従って、Ｐｏｄで化合物を３倍段階希釈して、１０個の濃度を得た。希釈した化合物をそれぞれ１００ｎＬで細胞プレートに加えた後、細胞プレートをインキュベーターに戻して培養した。

３．ＤＭＳＯを加えたＤａｙ０プレートに、２０μＬのＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏを加え、暗所で１０分間振とうした。Ｅｎｖｉｓｉｏｎでプレートを読み取った。

４．５日目：ＣＴＧを加え、プレートを読み取った。
（１）７２時間培養した後、２０μＬのＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏを細胞板に加え、暗所で１０分間振とうした。
（２）Ｅｎｖｉｓｉｏｎでプレートを読み取った。

アッセイの結果
１．各群における０％阻害（ＤＭＳＯウェル、ＭＡＸ）および１００％阻害（ｄａｙ０、ＤＭＳＯ）の平均値および標準偏差を算出した。
２．阻害率（％）＝（１－（サンプル値－１００％阻害の平均値）／（０％阻害の平均値－１００％阻害の平均値））＊１００；
３．ＧｒａｐｈＰａｄ５．０ソフトウェアによって曲線をフィッティングさせ、結果を表７に示す。

結論：本発明の化合物は、ＴＭＤ８細胞に対して良好な阻害作用を有する。

実験例３：動的溶解度の測定
試験化合物をＤＭＳＯに溶解させ、１０ｍｍｏｌ／Ｌのストック液を調製した。ピペット（ＥｐｐｅｎｄｏｒｆＲｅｓｅａｒｃｈ社）を使用して、容量２ｍＬのスクリューキャップ付きガラスバイアルに９８０μＬの溶解媒体を加えた。２０μＬの各試験化合物の原液およびＱＣサンプルを、ｐＨ７．４に相当する試験溶液の緩衝液にそれぞれ添加した。試験化合物およびＤＭＳＯの最終濃度は、それぞれ２００μＭよおび２％であった。バイアルにキャップをかぶせた。理論上の最大濃度は２００μＭであった。室温、８８０ｒｐｍで該混合物を２４時間振盪した。バイアルを１３０００ｒｐｍで３０分間遠心分離した。デジタルピペットで２００μＬの上澄みを９６ウェルフィルタープレートに移し、高速液体クロマトグラフィーにより試験化合物の溶解度を測定した。結果を表８に示す。

結論：本発明化合物４は、参考例１の溶解度よりも優れている。

実験例４：血漿タンパク結合（ＰＰＢ）アッセイ
実験手順：様々な属の９９５μＬのブランク血漿を採取し、試験化合物およびワルファリンの最終濃度がともに２μＭになるように、５μＬの試験化合物作業溶液（４００μＭ）またはワルファリン作業溶液（４００μＭ）を加えた。サンプルを十分に混合した。ＤＭＳＯ（有機相）の最終濃度は０．５％であった。試験化合物とワルファリンの血漿サンプル５０μＬを、サンプル受入プレートにピペットで移し（ｔｒｉｐｌｉｃａｔｅ）、対応するブランク血漿または緩衝液を、対応する容量ですぐに追加して、各サンプルウェルの最終容量を１００μＬにした。ここで、血漿：透析緩衝液の容量比は１：１であった。次に、これらのサンプルに５００μＬの停止溶液を添加した。これらのサンプルは、Ｔ_０サンプルとして回収率および安定性の測定ために使用された。Ｔ_０サンプルを２～８℃で保管し、他の透析サンプルと一緒に次の処理をした。試験化合物およびワルファリンの血漿サンプル１５０μＬを、各透析ウェルの投与側に添加し、ブランク透析緩衝液１５０μＬを、透析ウェルの対応する受容側に添加した。次に、透析プレートを湿った５％ＣＯ_２インキュベーターに入れ、約１００ｒｐｍ、３７℃で４時間振とうしながらインキュベートした。透析が終了した後、透析後の緩衝液サンプルと透析後の血漿サンプルを５０μＬで新しいサンプル受入プレートに移した。対応するブランク血漿または緩衝液を、対応する容量でサンプルに加え、各サンプルウェルの最終容量を１００μＬにした。ここで、血漿：透析緩衝液の容量比は１：１であった。すべてのサンプルをタンパク質沈殿に供し、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳで分析した。次の式により、タンパク質の結合率および回収率を算出した。式：％Ｕｎｂｏｕｎｄ＝１００＊Ｆ／Ｔ、％Ｂｏｕｎｄ＝１００－％Ｕｎｂｏｕｎｄ、％Ｒｅｃｏｖｅｒｙ＝１００＊（Ｆ＋Ｔ）／Ｔ_０。ここで、Ｆは、４時間透析した後の透析液中の化合物のピーク面積比である。Ｔは、４時間透析した後の血漿中の化合物のピーク面積比である。Ｔ_０は、ゼロ時点での血漿サンプル中の化合物のピーク面積比である。実験結果を表９に示す。

結論：本発明化合物４の血漿タンパク質への結合は、参考例１よりも弱い。

実験例５：ラットにおけるインビボ血漿タンパク結合（ＰＰＢ）アッセイ
１．実験の流れ：
１．１透析膜およびマトリックスの調製
実験当日に、流していた冷たい水道水で凍結血漿を解凍した。血漿を完全に解凍した後、３２２０×ｇで血漿を５分間遠心分離し、血漿中の懸濁物および沈殿物を除去した。
二層透析膜を超純水に約１時間浸した後、取り出した。それを二分して、エタノール－水（２０：８０、ｖ：ｖ）溶液に２０分間浸すか、２～８℃で置き、有効期間が１か月であった。実験を開始する前に、透析膜を超純水で２回リンスし、さらに超純水に２０分間浸して使用した。
１．２化合物サンプルの混合工程および対照化合物の希釈プロセス
１．２．１化合物サンプルの混合工程
適量の元のサンプルを混合サンプル収集管に移し、混合サンプル収集管内のサンプルを十分に混合した。
１．２．２対照化合物の希釈プロセス
対照化合物をジメチルスルホキシドに溶解して、１０ｍＭのストック溶液を得た。ジメチルスルホキシドで希釈したことにより、４００μＭの作業液を得た。血漿サンプルの調製プロセス：９９５μＬのブランク血漿を採取し、５μＬのワルファリン作業液を添加して十分に混合し、濃度２μＭの血漿サンプルを得た。ＤＭＳＯ（有機相）の濃度は０．５％であった。
１．３実験手順
Ｔ_０サンプルの調製プロセス：３０μＬのワルファリン血漿サンプルをサンプル受入プレート（ｎ＝３）に移し、各サンプルウェルの最終容量が６０μＬになるように３０μＬのブランク緩衝液を直ちに加えた。ここで、血漿：透析緩衝液の容量比は１：１であった。次に、試験化合物とワルファリンのＴ_０サンプルに、３００μＬの停止溶液を添加した。混合物を２～８℃で保管し、他の透析サンプルと一緒に次の処理をした。
血漿サンプルの透析プロセス：化合物を含む５０μＬの（混合後のサンプルチューブからの）血漿サンプルおよび対照化合物を含む５０μＬの血漿サンプルを、各透析ウェルの投与側に添加し（ｎ＝３）、５０μＬのブランク透析緩衝液を、透析ウェルの対応する受容側に添加した。次に、透析プレートを５％ＣＯ_２インキュベーターに入れ、約１００ｒｐｍ、３７℃で４時間振とうしながらインキュベートした。
透析が終了した後、透析後の緩衝液サンプル（透析液）および透析後の血漿サンプルを、３０μＬで新しい９６ウェルプレート（サンプル受入プレート）に移した。対応するブランク血漿または緩衝液を、対応する容量でサンプルに加え、各サンプルウェルの最終容量を６０μＬにした。ここで、血漿：透析緩衝液の容量比は１：１であった。すべてのサンプルに３００μＬの停止溶液を加え、均一に振とうした。振とう後、サンプルを４０００ｒｐｍで２０分間遠心分離した。タンパク質を沈殿させた後、１００μＬの上清を採取してＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析を行った。結果を表１０に示す。

注：ａ：３回結果の平均値、ｂ：４回結果の平均値。

結論：ラットにおける本発明化合物４の血漿タンパク質への結合は、参考例１よりも弱い。

実験例６：マウスにおける化合物の薬物動態評価
実験目的：ＣＤ－１マウスにおける化合物の薬物動態（静脈内）を測定する。
ＣＤ－１マウスにおける経口および静脈内注射された化合物４および参照例１（化合物００５－１）の薬物動態研究
化合物４および参照例１を溶媒（１０％ＮＭＰ／６０％ＰＥＧ４００／３０％Ｈ_２Ｏ）と０．１０ｍｇ／ｍＬで混合した。ボルテックスし、超音波処理して、０．１ｍｇ／ｍＬの清澄溶液を調製した。７～１０週齢のＣＤ－１雄マウスを選択し、候補化合物溶液を０．２１ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内投与した。
一定期間の全血を収集して血漿を調製した。ＬＣ－ＭＳ／ＭＳにより薬物濃度を分析し、ＰｈｏｅｎｉｘＷｉｎＮｏｎｌｉｎソフトウェア（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ社、ＵＳＡ）により薬物動態パラメータを算出した。結果を表１１に示す。

結論：マウスにおける本発明化合物４の血漿中遊離薬物濃度は、参考例１よりも高い。

実験例６－１：マウスにおける化合物の薬物動態評価
実験目的：ＣＤ－１マウスにおける化合物の薬物動態（経口）を測定する。
ＣＤ－１マウスにおける経口および静脈内注射された化合物４および参照例１（化合物００５－１）の薬物動態研究
化合物４および参照例１（化合物００５－１）を溶媒（１０％ＮＭＰ／６０％ＰＥＧ４００／３０％Ｈ_２Ｏ）と混合した。ボルテックスし、超音波処理して、０．６ｍｇ／ｍＬの清澄溶液を調製した。７～１０週齢のＣＤ－１雄マウスを選択し、候補化合物溶液を３．１ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内投与した。
一定期間の全血を収集して血漿を調製した。ＬＣ－ＭＳ／ＭＳにより薬物濃度を分析し、ＰｈｏｅｎｉｘＷｉｎＮｏｎｌｉｎソフトウェア（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ社、ＵＳＡ）により薬物動態パラメータを算出した。結果を表１２に示す。

実験例７：ラットにおける化合物の薬物動態評価
実験目的：ＳＤラットにおける化合物の薬物動態（静脈内）を測定する。
ＳＤラットにおける経口および静脈内注射された化合物４および参照例１の薬物動態研究
化合物４および参照例１を溶媒（１０％ＮＭＰ／６０％ＰＥＧ４００／３０％Ｈ_２Ｏ）と０．１０ｍｇ／ｍＬで混合した。ボルテックスし、超音波処理して、０．５ｍｇ／ｍＬの清澄溶液を調製した。７～１０週齢のＣＤ－１雄マウスを選択し、候補化合物溶液を０．５ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内投与した。一定期間の全血を収集して血漿を調製した。ＬＣ－ＭＳ／ＭＳにより薬物濃度を分析し、ＰｈｏｅｎｉｘＷｉｎＮｏｎｌｉｎソフトウェア（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ社、ＵＳＡ）により薬物動態パラメータを算出した。結果を表１３に示す。

結論：ラットにおける本発明化合物４の血漿中遊離薬物濃度は、参考例１よりも高い。

実験例７－１：ＳＤラットにおける化合物の薬物動態評価
実験目的：ＳＤラットにおける化合物の薬物動態（経口）を測定する。
ＳＤラットにおける経口および静脈内注射された化合物４および参照例１の薬物動態研究
化合物４および参照例１を溶媒（１０％ＮＭＰ／６０％ＰＥＧ４００／３０％Ｈ_２Ｏ）と混合した。ボルテックスし、超音波処理して、２ｍｇ／ｍＬの清澄溶液を調製した。７～１０週齢のＣＤ－１雄マウスを選択し、候補化合物溶液を２ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内投与した。
一定期間の全血を収集して血漿を調製した。ＬＣ－ＭＳ／ＭＳにより薬物濃度を分析し、ＰｈｏｅｎｉｘＷｉｎＮｏｎｌｉｎソフトウェア（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ社、ＵＳＡ）により薬物動態パラメータを算出した。結果を表１４に示す。

実験例８：インビボ研究
ＳＣＩＤマウスにおけるＴＭＤ８の異種移植腫瘍モデル：
実験方法：ヒトびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫をマウスに皮下移植した腫瘍モデルを確立した。対数増殖期の腫瘍細胞を収集し、カウントした後、ＲＰＭＩ１６４０に再懸濁させた。細胞懸濁液を４×１０７／ｍＬの濃度に調整し、Ｍａｔｒｉｇｅｌ（１：１）で均一に混合した。１ｍＬの注射器（４ゲージ番号針）、４×１０６細胞／マウスでマウス背部の右側に腫瘍細胞を皮下接種した。動物の腫瘍が約１００～３００ｍｍ^３に達した後、腫瘍体積のサイズに応じて担癌マウスをランダムに６つの群に分け、各群に６匹のマウスを配置した。実験当日に、群によって、対応する薬物を動物に投与した。第１群Ｇ１を陰性対照群として、１０％ＮＭＰ／６０％ＰＥＧ４００／３０％Ｈ_２Ｏを強制経口のみで投与した。第２群Ｇ２を陽性対照群として、３０ｍｇ／ｋｇの用量で参照例１（化合物０５－１）を投与した。第３群Ｇ３では、化合物４を３０ｍｇ／ｋｇの用量で１日１回、合計１５日間投与した。

実験において、動物の体重および腫瘍サイズを週に３回測定し、動物の臨床症状を毎日観察して記録した。最新の動物の体重に基づいて毎回投与した。
腫瘍の測定において、デジタルノギスで長さ（ａ）および幅（ｂ）測定した。腫瘍体の積（Ｔｕｍｏｒｖｏｌｕｍｅ，ＴＶ）の計算式は、ＴＶ＝ａ×ｂ^２／２であった。

実験結果：
マウスにおけるヒトびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫ＴＭＤ８の腫瘍体積に対する各試験化合物の影響
参照例１および化合物４は両方とも、マウスにおけるヒトびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫ＴＭＤ８の異種移植腫瘍に対して一定の阻害作用を有する。
マウスにおけるヒトびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫の異種移植腫瘍に対する参考例１の阻害作用は、１０日目に有意差が観察された。相対腫瘍増殖率Ｔ／Ｃは４８．０５％（Ｐ＜０．０１、両側ｔ検定）であり、１４日目の相対腫瘍増殖率は３７．２８％（Ｐ＜０．００１、両側ｔ検定）であり、腫瘍体積抑制率ＴＧＩ（％）は６１．７０％であった。
マウスにおけるヒトびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫の異種移植腫瘍に対する化合物４の阻害作用は、５日目に有意差が観察された。相対腫瘍増殖率Ｔ／Ｃは６６．３３％（Ｐ＜０．０５、両側ｔ検定）であり、１４日目の相対腫瘍増殖率は２１．５３％（Ｐ＜０．００１、両側ｔ検定）であり、腫瘍体積抑制率ＴＧＩ（％）は７９．０４％であった。詳細な結果を図５および表１６に示す。

注：Ｎ／Ａは検出されないことを示す。

実験の結論：インビボ有効性の面において、本発明化合物４は、腫瘍に対する阻害効果が参照例１よりも明らかに優れている。

Claims

式（ＩＩＩ）で表される化合物またはその薬学的に許容される塩であって、

ただし、
Ｒ_１は、ハロゲンおよびＣ_１－３アルコキシからなる群から選択され、前記のＣ_１－３アルコキシは、１個、２個または３個のＲ_ａで置換されていてもよく；
或いは、２個のＲ_１は、それらが接続されている結合と共にシクロプロピルを形成してもよく；
各Ｒ_ａは、Ｄ、ハロゲンおよびＯＨからなる群から選択され；
Ｒ_２は、ハロゲン、メチル、フェノキシおよびピリジルオキシからなる群から選択され、前記のフェノキシおよびピリジルオキシは、１個、２個または３個のハロゲンで置換されていてもよく；
Ｒ_３は、－ＣＨ_２ＯＨから選択され、ｍは、１および２からなる群から選択され；
或いは、Ｒ_３は、ＣＮおよびＣＨ_２ＣＮからなる群から選択され、ｍは、０、１および２からなる群から選択され；
ｎは、１、２および３からなる群から選択され；
Ｅ_１は、Ｏ、ＳおよびＮＨからなる群から選択され；
環Ａは、テトラヒドロピラニルから選択される、
式（ＩＩＩ）で表される化合物またはその薬学的に許容される塩。
各Ｒ_ａが、Ｄ、ＦおよびＯＨからなる群から選択される、
請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
Ｒ_１が、Ｆ、ＯＣＨ_３、ＯＣＤ_３およびＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨからなる群から選択される、
請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
Ｒ_２が、Ｆ、Ｃｌ、メチル、フェノキシ、２－フルオロフェノキシ、および２－ピリジルオキシからなる群から選択される、
請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
Ｅ_１が、ＮＨから選択される、
請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
環Ａが、

から選択される、
請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
前記の化合物が、

からなる群から選択され、
ここで、
Ｒ_１、Ｒ_２およびｍが、請求項１～４のいずれか１項に定義した通りである、
請求項１～４のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
からなる群から選択される、化合物またはその薬学的に許容される塩。
前記の化合物が、

からなる群から選択される、
請求項８に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
ＢＴＫプロテインキナーゼ阻害剤に関する医薬品の調製における、請求項１～９のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩の使用。
前記のＢＴＫプロテインキナーゼ阻害剤に関する医薬品が血液腫瘍に用いられる医薬品である、請求項１０に記載の使用。