JP2022545730A

JP2022545730A - タケシマユリ抽出物を含む組成物

Info

Publication number: JP2022545730A
Application number: JP2022513345A
Authority: JP
Inventors: ソ・ヨン・イ; ヨン・ジェ・アン; ギル・ナム・キム; ム・ヒョン・ジン
Original assignee: エルジーハウスホールドアンドヘルスケアリミテッド
Priority date: 2019-08-30
Filing date: 2020-08-28
Publication date: 2022-10-28
Also published as: CN114258298B; KR102570987B1; KR20210027182A; US20220296498A1; WO2021040470A1; CN114258298A

Abstract

本発明によるタケシマユリ抽出物は、チロシナーゼの活性を阻害し、メラニンの総量を減少させて美白効果を示し、皮膚の線維芽細胞のコラーゲン合成を促進し、コラゲナーゼ活性を阻害してシワを改善し、皮膚の弾力を増進させ、糖化を抑制する抗糖化効果を示すだけでなく、ヒアルロン酸合成を促進して皮膚の保湿効果を示し、皮膚の荒れ改善による肌のキメ改善効果を示すことにより、刺激の緩和及びヒリヒリ感、かゆみ、熱感などに対する鎮静効果を示すことにより、化粧料、医薬または食品の製造に有用に使用することができる。

Description

本発明は、タケシマユリ抽出物を含む組成物に関する。

色白できれいな皮膚を欲するのは一般的な望みである。皮膚の色や明るさは、人の皮膚内のメラニン(ｍｅｌａｎｉｎ)の濃度と分布によって遺伝的に決定されるが、太陽紫外線、疲労またはストレスなどの環境的または生理的条件によっても影響を受ける。メラニンは、アミノ酸の一種であるチロシン(ｔｙｒｏｓｉｎｅ)にチロシナーゼ(ｔｙｒｏｓｉｎａｓｅ)という酵素が触媒として作用し、ドーパ(ＤＯＰＡ)及びドーパキノン(ｄｏｐａｑｕｉｎｏｎｅ)に順次変化した後、非酵素的な酸化反応を経て生成される。このようにメラニンが生成される経路は知られているが、メラニンの合成を誘導するメカニズムにおいてチロシナーゼが活性化される原因が何であるかについては、まだ明らかになっていない。

一方、一般的に知られている美白成分として、コウジ酸(Ｋｏｊｉｃａｃｉｄ)またはアルブチン(Ａｒｂｕｔｉｎ)などのチロシナーゼ酵素活性を阻害する物質、ヒドロキノン(Ｈｙｄｒｏｑｕｉｎｏｎｅ)、ビタミンＣ(Ｌ－Ａｓｃｏｒｂｉｃａｃｉｄ)またはそれらの誘導体と各種の植物の抽出物がある。これらはメラニン色素の合成を阻害することにより、皮膚のトーンを明るくして皮膚の美白を実現できるだけでなく、紫外線、ホルモンまたは遺伝に起因するシミやそばかすなどの皮膚過色素沈着症の改善が可能である。しかし、皮膚適用時、刺激と発赤などの安全性の問題で使用量の制限があるか、または効果が少なくて実質的な効果が期待できないという問題点がある。

また、コラーゲンは、皮膚の線維芽細胞から生成される主要基質タンパク質であって細胞外間質に存在し、重要な機能としては、皮膚の機械的堅牢性、結合組織の抵抗力と組織の結合力、細胞接着の支え、細胞分割と分化（有機体の成長または傷の治癒時）の誘導などが知られている。このようなコラーゲンは、年齢及び紫外線照射による光老化によって減少し、これは皮膚のシワ形成と密接な関連があることが知られている。また、近年、皮膚の老化に対する広範囲な研究が発展しつつ、皮膚におけるコラーゲンの重要な機能が明らかになっている。

コラーゲンの合成を促進してシワの改善効果を示す有効成分が知られている。例えば、レチノイン酸(ｒｅｔｉｎｏｉｃａｃｉｄ)、ＴＧＦ(ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ)、動物胎盤由来のタンパク質、ベツリン酸(Ｂｅｔｕｌｉｎｉｃａｃｉｄ)、クロレラ抽出物などがコラーゲン合成促進物質として知られている。しかし、前記有効成分は、皮膚適用時の刺激と発赤などの安全性の問題で使用量の制限があるか、または効果が少なくて実質的に皮膚のコラーゲン合成を促進して皮膚の機能を改善する効果が期待できないという問題点がある。

糖化（Ｇｌｙｃａｔｉｏｎ）とは、一般的に酵素の関与なしに発生する、たんぱく質または脂肪にブドウ糖または果糖のような単純糖が共有結合を形成する反応を意味する。最終糖化産物の蓄積は、タンパク質を硬くてより脆い状態に変化させ、糖化されたコラーゲンは、真皮層の細胞外基質においてコラーゲンが適切な構造を形成できないようにすることにより皮膚の弾力を失わせ、シワの生成を促進する。また、糖化によって生成された最終の糖化産物は、茶色を帯びる物質で、皮膚の老化が進むにつれて次第に顔色が黄色くなる原因物質と考えられており、特定の最終糖化産物が蓄積されるほど、皮膚で反射される反射光が減少することが知れている。糖化を抑制する物質として、アミノグアニジン（Ａｍｉｎｏｇｕａｎｉｄｉｎｅ）、ピリドキサミン（Ｐｙｒｉｄｏｘａｍｉｎｅ）、アスピリン（Ａｓｐｉｒｉｎ）などが知られているが、これらの物質は皮膚に対する安全性の問題で使用量の制限があるか、または効果が少なくて実質的に効果を期待できないという問題点がある。

皮膚は、表皮、真皮、皮下脂肪の３層から構成されており、このうち表皮の内側に存在する真皮は、皮膚老化の側面で最も重要な役割を果たし、これによって皮膚の美容面でも集中的な研究対象となっている。真皮の構造維持に重要な役割を果たす構成繊維には、サイトケラチン（ｃｙｔｏｋｅｒａｔｉｎ）、インテグリン（ｉｎｔｅｇｒｉｎ）、ラミニン（ｌａｍｉｎｉｎ）及びコラーゲン（ｃｏｌｌａｇｅｎ）などがある。このような繊維性構成繊維は、基本的に真皮の骨格を構成し、健康な皮膚を維持する役割を果たす。このうち、サイトケラチン、インテグリン及びラミニンは、表皮と真皮が連結される真皮表皮連接部に存在し、表皮と真皮の結合の強度を調節する役割を果たし、コラーゲンは、真皮の内部に全般的に存在し、皮膚全体の構造維持と弾力を調節する役割を果たすことが知られている。特に、コラーゲンの場合には、正常な構造が生成されない場合、強度や弾力的な面で正常タイプに比べて著しく弱くなり、真皮の構造維持に役に立たないことが知られている。これによって肌のキメ改善のためにそれぞれの構成繊維の合成を促進し、皮膚に及ぼす影響を分析する研究が多く行われている。

しかし、従来の化粧料組成物は、それぞれの構成繊維の合成量の増加が確認されるのみで、実質的な肌のキメ改善効果に対する研究は行われていない。したがって、皮膚刺激性がなく、肌のキメ改善効果のある物質の開発が必要である。

また、生体に安全で、有効成分が安定的で、何よりも既存の皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化及び／又は肌のキメ改善効果のある物質より効果に優れた活性を持つ成分の開発が切実に望まれている。

本発明の目的は、タケシマユリ抽出物を有効成分として含む、皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿または肌のキメ改善用の化粧料組成物を提供することである。

また、本発明の目的は、タケシマユリ抽出物を有効成分として含む、皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿または肌のキメ改善用の皮膚外用剤を提供することである。

本発明の目的は、タケシマユリ抽出物を有効成分として含む、皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿または肌のキメ改善用の薬学組成物を提供することである。

本発明の目的は、タケシマユリ抽出物を有効成分として含む、皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿または肌のキメ改善用の食品組成物を提供することである。

本発明の目的は、前記タケシマユリ抽出物を皮膚に処理する工程を含む、皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿または肌のキメ改善方法を提供することである。

本発明の目的は、皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿、または肌のキメ改善用化粧料組成物を製造するための、タケシマユリ抽出物の用途を提供することである。

本発明の前記目的及びその他の目的は、下記に詳細に説明する本発明によって全て解決しうる。

本発明者らは、タケシマユリ抽出物が、メラニンの総量を減少させて美白効果を示し、皮膚の線維芽細胞のコラーゲン合成を促進し、コラゲナーゼ活性を阻害してシワを改善し、弾力を増進させ、皮膚の鎮静効果を示し、糖化を抑制する抗糖化効果を示すだけでなく、ヒアルロン酸の合成を促進して皮膚の保湿効果を示し、皮膚荒れ改善による肌のキメ改善効果を示すことができることを確認し、本発明を完成した。

したがって、本発明は、タケシマユリ抽出物の、皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿及び肌のキメ改善用途に関する。

以下、本発明の構成を詳細に説明する。

本発明は、タケシマユリ抽出物を有効成分として含む、皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿または肌のキメ改善用組成物を提供する。

本発明において、「タケシマユリ(Ｌｉｌｉｕｍｈａｎｓｏｎｉｉ）」は、オオクルマユリとも呼ばれ、ユリ目ユリ科に属する多年草で、韓国では、鬱陵島及び東北エリアに分布することが知られている。

本発明において、前記タケシマユリは種類に制限なく、栽培したものを使用してもよく、市販のものを使用してもよい。さらに、前記タケシマユリ抽出物は、タケシマユリのすべての部位を使用してもよく、抽出部位に制限を受けるものではない。前記タケシマユリ抽出物の製造は、前記植物体の形態によって制限されず、前記植物体は、乾燥などの加工過程を経たものを全て含む意味である。例えば、本発明におけるタケシマユリは、タケシマユリの全草、タケシマユリの根、タケシマユリの茎、タケシマユリの葉及びタケシマユリの花であってもよく、好ましくは、タケシマユリの全草、根又は花であってもよい。

本発明において、「抽出物」は、抽出処理により得られる抽出液、前記抽出液の希釈液や濃縮液、前記抽出液を乾燥して得られる乾燥物、前記抽出液の粗精製物や精製物、又はこれらの混合物など抽出液そのもの及び抽出液を用いて形成可能なすべての剤形の抽出物を含む。本発明のタケシマユリ抽出物は、タケシマユリの天然、雑種または変種植物から抽出されてもよく、植物組織培養物からも抽出が可能である。

本発明の抽出において、前記抽出方法は特に制限されず、当該技術分野において通常用いられる方法によって抽出してもよい。前記抽出方法の非制限的な例としては、溶媒抽出法、熱水抽出法、超音波抽出法、ろ過法、還流抽出法などがあり、これらは単独で行われてもよく、２種以上の方法を併用して行われてもよい。

本発明において抽出物の乾燥は、採取した植物から有用な成分が破壊されない範囲で公知の方法により行われてもよく、例えば、日陰で自然乾燥方法によって行われもよい。また、破砕は、その後の抽出過程で植物の有用な成分を十分に抽出できる程度に破砕すれば十分で、これを粉末化し得る。前記乾燥と破砕工程は、必要に応じて順序を変えて行うか、または繰り返して行ってもよい。

本発明において、タケシマユリを抽出するのに使用される抽出溶媒の種類は、特に制限されるものではなく、当該技術分野で公知の任意の溶媒を使用してもよい。本発明において、前記抽出物は、水、炭素数１～６の低級アルコールまたはこれらの混合溶媒で抽出して得られる。また、前記抽出溶媒の非制限的な例としては、水、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、ブチルアルコールなどの炭素原子数１～６の低級アルコール、グリセリン、ブチレングリコール、プロピレングリコールなどの多価アルコール、酢酸メチル、酢酸エチル、アセトン、ベンゼン、ヘキサン、ジエチルエーテル、ジクロロメタンなどの炭化水素系溶媒、またはこれらの混合物を使用してもよく、具体的には、水、低級アルコール、１，３－ブチレングリコール、酢酸エチルを単独で使用するか、または２種以上混合して使用してもよい。このとき、２種以上の溶媒を混合して使用する場合、溶媒間の混合割合は、特に制限されない。

本発明では、タケシマユリを抽出する溶媒として、より具体的には、エタノール、酢酸エチル、水、ジクロロメタン、ブタノール、ヘキサンなどを使用してもよい。前記溶媒を用いて抽出したタケシマユリ抽出物は、減圧蒸留した後、凍結乾燥または噴霧乾燥して乾燥抽出物として製造してもよい。以下の実施例では、抽出溶媒として水とエタノールを混合した溶媒を用いてタケシマユリ抽出物を製造し、これをろ過及び減圧濃縮して使用した。

前記抽出は、前記タケシマユリ乾燥物の重量を基準に、１～３０倍の重量、具体的には、２～１０倍に達する重量の溶媒を用いて１０～８０℃、具体的には、１５～５０℃の抽出温度で２時間～３０日、具体的には、１２時間～１８日の抽出時間の間抽出する方法を適用してもよく、前記乾燥及び前記破砕物を含めて１回～５回連続抽出して液状の粗抽出物を得る過程を含んでもよい。

本発明において、前記抽出物は、浮遊する固体粒子を除去するためにろ過、例えば、ナイロン、ろ過紙などを用いて粒子をろ過するか、または冷凍ろ過法などを用いてろ過した後、そのまま使用するか、またはそれを凍結乾燥、熱風乾燥、噴霧乾燥などを用いて乾燥させて使用してもよい。

前記液状の粗抽出物は、減圧ろ過などの方法により植物の乾燥破砕物と分離された後、濃縮または乾燥の過程を経ることができる。例えば、前記液状の粗抽出物を真空回転濃縮機で２０～１００℃、好ましくは、３０～７０℃で減圧濃縮した濃縮液であってもよく、前記液状の抽出物を乾燥して粉末化された抽出物を得ることもできる。このように濃縮または粉末化された抽出物は、必要に応じて水、アルコール、ＤＭＳＯ(ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｘｉｄｅ)又はこれらの混合溶媒に溶解して使用してもよい。

本発明において、前記有効成分は、タケシマユリ抽出物の分画物であってもよい。

本発明において使用される用語の「分画物」は、様々な構成成分を含む混合物から特定成分または特定成分グループを分離するため、分画を行って得られた結果物を意味する。

本発明において前記分画物を得る分画方法は特に制限されず、当該技術分野において通常の使用方法により行われてもよい。前記分画方法の非制限的な例としては、タケシマユリを抽出して得たタケシマユリ抽出物に所定の溶媒に処理を施し、前記抽出物から分画物を得る方法が挙げられる。

本発明において前記分画物を得るのに使用される溶媒の種類は特に制限されず、当該技術分野で公知の任意の溶媒を使用してもよい。前記分画溶媒の非制限的な例としては、水、アルコールなどの極性溶媒と、ヘキサン、酢酸エチル、クロロホルム、ジクロロメタン、ブタノールなどの非極性溶媒などが挙げられる。これらは単独で使用されるか、または２種以上混合して使用されてもよい。前記分画溶媒のうちアルコールを使用する場合には、炭素数１～６のアルコールを使用してもよい。

本発明において、「皮膚の美白効果」とは、メラニン色素の合成を阻害することにより皮膚のトーンを明るくするだけでなく、紫外線、ホルモンまたは遺伝に起因するシミやそばかすなどの皮膚過色素沈着を改善することをいう。

本発明において、「シワの改善効果」とは、皮膚にシワが生成されることを抑制または阻害するか、または既に生成されているシワを緩和させることをいう。

本発明において、「弾力増進効果」とは、皮膚に対する弾力性が増加することで、皮膚弾力の損失を抑制または阻害するか、または既に減少した弾力を緩和させることをいう。

本発明において、「皮膚の鎮静効果」とは、外部刺激による皮膚刺激症状を緩和または改善させることで、外部刺激による皮膚の症状またはこれによる皮膚のトラブルを元の状態に回復させる効果をいう。前記皮膚の刺激は、外部の刺激により皮膚に紅斑、かゆみ、ヒリヒリ感又は熱感等の症状が発生することを意味し、皮膚の光敏感性又はアレルギーなどにより誘発されるものであってもよい。より具体的には、前記皮膚の鎮静効果は、外部刺激による皮膚の症状又はこれによる皮膚のトラブルを緩和させるものであってもよい。

本発明において、「抗糖化効果」とは、細胞に存在するブドウ糖とたんぱく質が反応し、身体内のタンパク質機能が低下する糖化（ｇｌｙｃａｔｉｏｎ）現象を予防するか、または抑制することをいう。生体内の糖化では、皮膚及び組織内タンパク質のアミノ基と還元糖との非酵素反応により初期の糖化産物であるシッフ塩基(ｓｃｈｉｆｆ－ｂａｓｅ)が形成され再配列されてより安定したアマドリ産物(ａｍａｄｏｒｉｐｒｏｄｕｃｔ)が生成する。その後、時間の経過に伴い、アマドリ産物が活性酸素に曝されると、切断、交差結合、凝集、カルボニル基の形成などの様々な段階を経て、最終糖化産物(ａｄｖａｎｃｅｄｇｌｙｃａｔｉｏｎｅｎｄｐｒｏｄｕｃｔｓ, ＡＧＥｓ)が形成される。形成された最終糖化産物－タンパク質結合は非常に安定であり、非可逆的反応であるため、年を取るにつれて持続的に増加し、透明ではなく弾力を失った肌が作り出される。さらに、最終糖化産物が蓄積し続けると、様々な皮膚のトラブルが発生することがある。最終糖化産物の蓄積により皮膚のトラブルが発生すると、糖化の進行により皮膚が清くならず黄色く見える現象、皮膚が硬くなって柔らかくない現象、最終糖化産物の沈着により部分的にムラが生じる現象などが発生することがある。このような側面で、本発明における抗糖化効果は、糖化の進行及び最終糖化産物の蓄積による皮膚のトラブルの抑制または予防、皮膚トーンの改善、及び肌のキメ改善効果までも含みうる。

本発明において、「皮膚保湿効果」とは、皮膚の水分が減少するのを阻害または抑制するか、または皮膚の水分含有量を増加させて皮膚表面を滑らかにし、ツヤを付与することをいう。

本発明において、「肌のキメ改善効果」とは、老化、ストレスなどの影響により皮膚表面が荒れることを抑制または阻害することにより皮膚の表面を滑らかにし、光沢を付与し、皮膚のトーンを明るく改善することをいう。

一方、本明細書において用語の「有効成分として含む」とは、タケシマユリ抽出物の前述した皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿または肌のキメ改善活性を達成するのに十分な量を含むことを意味する。

そこで、本発明は、前記タケシマユリ抽出物を有効成分として含む、皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿または肌のキメ改善用の化粧料組成物を提供する。

前記組成物を化粧料組成物として使用する場合、一般的な乳化剤形又は可溶化剤形の形態で製造してもよい。例えば、柔軟化粧水または栄養化粧水などの化粧水、フェイシャルローションまたはボディローションなどの乳液、栄養クリーム、水分クリームまたはアイクリームなどのクリーム、エッセンス、化粧軟膏、スプレー、ゲル、パック、サンスクリーン、メイクアップベース、液体状、固体状またはスプレー状などのファンデーション、パウダー、クレンジングクリーム、クレンジングローション、クレンジングオイルなどのメーキャップ除去剤、クレンジングフォーム、石鹸、ボディウォッシュなどの洗浄剤の剤形を有してもよい。

また、前記タケシマユリ抽出物にさらに脂肪物質、有機溶媒、溶解剤、濃縮剤、ゲル化剤、軟化剤、抗酸化剤、懸濁化剤、安定化剤、発泡剤（ｆｏａｍｉｎｇａｇｅｎｔ）、芳香剤、界面活性剤、水、イオン型乳化剤、非イオン型乳化剤、充填剤、金属イオン封鎖剤、キレート化剤、保存剤、ビタミン、遮断剤、湿潤化剤、必須オイル、染料、顔料、親水性活性剤、親油性活性剤または脂質小胞など化粧品分野で通常用いられる添加剤を含有してもよい。前記添加剤は、天然添加剤または合成添加剤を全て含んでもよい。

前記天然添加剤は、有機農業原料、植物及び植物由来原料、動物及び動物由来原料、ミネラル及びミネラル由来原料並びに水などの成分を意味する。一例として、保湿剤、紫外線遮断剤、中和剤、香料、防腐剤、酸化防止剤、粘増剤、粘度調節剤、被膜形成剤及び色素からなる群から選ばれた一つ以上の添加剤であってもよい。

本発明において、前記天然添加剤は、天然物又は自然物から得られるか、または天然物又は自然物由来の成分を簡単に改質させるか、または自然由来の成分のうち合成された成分を含む意味であり、自然由来の成分ではない人工的な方法で合成された合成成分を排除する意味である。

前記天然原料は、一例として、国が定める有機農業基準及びエコ認証等級又はこれに準ずる天然由来等級の化粧品原料を意味するものであってもよい。

前記エコ認証基準とは、合成工程を排除し、エコ栽培及び加工された成分から構成された組成物としての認証基準であり、代表的なエコ認証としては、フランスのエコサート(ｅｃｏｃｅｒｔ)、ヨーロッパのコスモス(Ｃｏｓｍｏｓ)、アメリカのＵＳＤＡ(ＵＳＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＡｇｒｅｃｕｌｔｕｒｅ)、ドイツのＢＤＩＨ(ＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｏｆＧｅｒｍａｎＩｎｄｕｓｔｒｉｅｓａｎｄＴｒａｄｉｎｇＦｉｒｍｓ)及び日本のＪＡＳ（ＪａｐａｎｅｓｅＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｏｆＳｔａｎｄａｒｄ）などがあり、最近のエコ製品を好む消費者ニーズに合わせて、各国では成分または製品に対して安全性を認証するエコ認証制度を多様に展開している。各国ごとに細部的な数値及び範囲などが部分的に相異しているが、原料及び成分の一次的な構成物については、大きな枠組みでは、エコ認証の範疇についてグローバルな統一性を示している。自然由来の天然成分については、エコ有機農業成分の範疇に含まれ、その他の半加工された成分類については、ＰＰＡＩ（ＰｈｙｓｉｃａｌｌｙＰｒｏｃｅｓｓｅｄＡｇｒｏＩｎｇｒｅｄｉｅｎｔ）及びＣＰＡＩ（ＣｈｅｍｉｃａｌｌｙＰｒｏｃｅｓｓｅｄＡｇｒｏＩｎｇｒｅｄｉｅｎｔ）に区分し、これらの規格に適合する原料についてのみエコサート、コスモス又はＵＳＤＡなどの認証を付与している。

本発明において国で定める有機農業及びエコ認証原料及び成分とは、国で定める有機農基準及びエコ認証基準に準ずるか、または準じることができる成分のみから構成され、国で定める有機農及びエコ等級を満たすことができる化粧料原料及び組成物を指す。例えば、中国政府が定める基準又は中国で認められる有機農及びエコ認証基準に準ずるか、または準ずることができる成分のみから構成されることを意味する。

本発明において、前記合成添加剤は、天然由来ではなく化学的に合成過程を経た原料を意味する。

本発明による化粧料組成物に含まれる前記成分の各々は、好ましくは、中国政府で定める「化粧品安全・技術規範」に規定された最大使用量を超えない範囲内で、本発明の化粧料組成物に含まれてもよい。

前記タケシマユリ抽出物は、化粧品として製品化される場合、有効成分が短期間内に皮膚にとどまることになるメイクアップ除去剤または洗浄剤などのウォッシュ－オフ(ｗａｓｈ－ｏｆｆ)タイプの化粧品の場合には、比較的高濃度の前記タケシマユリ抽出物を含んでもよい。一方、有効成分が長期間皮膚にとどまることになる化粧水、乳液、クリームまたはエッセンスなどのリブ－オン(ｌｅａｖｅ－ｏｎ)タイプの化粧品の場合には、ウォッシュ－オフタイプの化粧品に比べて低濃度の前記タケシマユリ抽出物を含んでも構わない。これに制限されるものではないが、本発明の一具体例において、前記組成物は、前記タケシマユリ抽出物を全組成物重量に対して０．０００１重量部～１０重量部（好ましくは、０．０００１重量部～５重量部）の量で含んでもよい。本発明の組成物が前記タケシマユリ抽出物を０．０００１重量部未満の量で含む場合には、十分な皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿または肌のキメ改善効果が期待できず、１０重量部を超えて含む場合は、アレルギーなど不要な反応が発生するか、または皮膚の安全性に問題が発生することがあるため、これを防止するためである。

また、本発明は、前記タケシマユリ抽出物を有効成分として含む、皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿または肌のキメ改善用皮膚外用剤を提供する。

前記タケシマユリ抽出物を皮膚外用剤として使用する場合、さらに脂肪物質、有機溶媒、溶解剤、濃縮剤及びゲル化剤、軟化剤、抗酸化剤、懸濁化剤、安定化剤、発泡剤（ｆｏａｍｉｎｇａｇｅｎｔ）、芳香剤、界面活性剤、水、イオン型乳化剤、非イオン型乳化剤、充填剤、金属イオン封鎖剤、キレート化剤、保存剤、ビタミン、遮断剤、湿潤化剤、必須オイル、染料、顔料、親水性活性剤、親油性活性剤または脂質小胞などの皮膚外用剤に通常使用される任意の他の成分などの皮膚科学分野において使用される補助剤を含んでもよい。また、前記成分は、皮膚科学分野で通常使用される量で導入されてもよい。

前記タケシマユリ抽出物が皮膚外用剤として使用される場合、これに制限されるものではないが、軟膏、パッチ、ゲル、クリーム又は噴霧剤などの剤形であってもよい。

さらに、本発明は、前記タケシマユリ抽出物を有効成分として含む、皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿または肌のキメ改善用薬学組成物を提供する。

前記薬学組成物は、オイル又は水性媒質中の溶液、懸濁液又は乳化液の形態であるか、またはエキス剤、粉末剤、顆粒剤、錠剤又はカプセル剤の形態であってもよい。

また、前記組成物は、さらに同一又は類似の機能を示す有効成分を１種以上含んでもよい。例えば、公知の皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿及び肌のキメ改善成分を含んでもよい。さらに皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿及び肌のキメ改善成分を含むことになると、本発明の組成物の皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿及び肌のキメ改善効果は、さらに増進されうる。前記成分追加の際には、複合使用による皮膚の安全性、剤形化の容易性、有効成分の安定性が考えられる。本発明の一具体例において、前記組成物は、当業界で公知の皮膚の美白成分として、コウジ酸、アルブチンなどのチロシナーゼ酵素活性を抑制する物質、ハイドロキノン、ビタミン－Ｃ及びこれらの誘導体と各種植物抽出物から構成される群から選ばれる１種または２種以上の成分をさらに含んでもよい。追加成分は、全組成物重量に対して０．０００１重量部～１０重量部まで含まれてもよく、前記含量範囲は、皮膚安全性、前記タケシマユリ抽出物の剤形化時の容易性などの要件によって調節しうる。

また、本発明の組成物は、薬学的に許容可能な担体をさらに含んでもよい。

薬学的に許容可能な担体は、緩衝液、注射用滅菌水、一般食塩水又はリン酸塩緩衝食塩水、スクロース、ヒスチジン、塩及びポリソルベートなどの多くの成分を含んでもよい。

本発明の組成物は、経口または非経口で投与してもよく、一般薬学製剤の形態、例えば、臨床投与時に経口及び非経口の様々な剤形で投与してもよいが、製剤化する場合には、通常使用する充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩解剤、界面活性剤などの希釈剤又は賦形剤を用いて調剤してもよい。

経口投与のための固形剤形には、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤などが含まれ、これらの固形製剤は、本発明の医薬組成物に少なくとも一つ以上の賦形剤、例えばデンプン、カルシウムカーボネート(Ｃａｌｃｉｕｍｃａｒｂｏｎａｔｅ)、スクロース(ｓｕｃｒｏｓｅ)またはラクトース（Ｌａｃｔｏｓｅ）、ゼラチンなどを混合して調製されてもよい。

単純な賦形剤の他にマグネシウム、スチレート、タルクなどの潤滑剤も使用される。経口のための液状製剤としては、懸濁剤、内用液剤、乳剤、シロップ剤などが該当するが、よく用いられる単純希釈剤である水、リキドパラフィンの他にも様々な賦形剤、例えば湿潤剤、甘味剤、芳香剤、保存剤などが含まれてもよい。

非経口投与のための製剤には滅菌された水溶液、非水性溶剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥製剤、坐剤が含まれる。非水性溶剤、懸濁溶剤としてはプロピレングリコール(Ｐｒｏｐｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ)、ポリエチレングリコール、オリーブオイルなどの植物油、エチルオレートなどの注射可能なエステルなどが使用されてもよい。坐剤の基剤としては、ウィテプソル（ｗｉｔｅｐｓｏｌ）、マクロゴール、ツイン（ｔｗｅｅｎ）６１、カカオ脂、ラウリン脂、グリセロゼラチンなどが使用されてもよい。

本発明において、「有効量」とは、皮膚を白くしたり、シワを改善させたり、弾力を増大させたり、皮膚刺激を鎮静させたり、糖化を抑制したり、皮膚に保湿を付与したり、肌のキメを改善できる抽出物の量を意味する。本発明の組成物が有効量の前記タケシマユリ抽出物を含む場合、好ましい皮膚の美白効果、シワの改善効果、弾力増進効果、皮膚の鎮静効果、抗糖化効果、皮膚の保湿効果及び肌のキメ改善効果を提供しうる。本発明の組成物に含まれる前記タケシマユリ抽出物の有効量は、組成物が製品化される形態、前記化合物が皮膚に適用される方法及び皮膚にとどまる時間などによって異なる。例えば、前記組成物が薬学剤形で製品化される場合には、日常的に皮膚に適用される化粧品として製品化される場合に比べて、高濃度で前記タケシマユリ抽出物を含みうる。したがって、１日投与量は、前記タケシマユリ抽出物の量を基準に０．１～１００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは、３０～８０ｍｇ／ｋｇ、さらに好ましくは、５０～６０ｍｇ／ｋｇであり、１日１～６回投与されてもよい。

本発明の組成物は、単独で、または手術、放射線治療、ホルモン治療、化学治療及び生物学的反応調節剤を使用する方法などと併用して使用してもよい。

また、本発明は、前記タケシマユリ抽出物を有効成分として含む、皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿または肌のキメ改善用医薬外品を提供する。

本発明において、「医薬外品」とは、前記タケシマユリ抽出物を有効成分として含むことに加えて、必要に応じて薬学的に許容可能な担体、賦形剤または希釈剤をさらに含んでもよい。前記薬学的に許容可能な担体、賦形剤または希釈剤は、本発明の効果を損なわない限り制限されず、例えば、充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩解剤、界面活性剤、潤滑剤、甘味剤、芳香剤又は保存剤を含んでもよいが、これに制限されるものではない。

前記医薬外品は、例えば消毒清潔剤、シャワーフォーム、軟膏液、ウェットティッシュ、コーティング剤などであってもよく、好ましくは、外用軟膏、ローションなどの半固形製剤として製造されてもよいが、これに制限されない。前記医薬外品の製剤化方法、用量、利用方法、構成成分などは、技術分野において公知の通常の技術から適宜選ばれてもよい。

また、本発明は、前記タケシマユリ抽出物を有効成分として含む、皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿または肌のキメ改善用食品組成物を提供する。

前記食品剤形は、前記タケシマユリ抽出物を飲料、茶類、香辛料、ガム、菓子類などの食品素材に添加するか、またはカプセル化、粉末化、懸濁液などで製造した食品を意味する。

前記食品剤形は、日常的に摂取することが可能であるため、高い皮膚の美白、シワの改善、弾力増大、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿及び肌のキメ改善効果が期待できるため、非常に有用である。

前記タケシマユリ抽出物を食品添加物として使用する場合、前記タケシマユリ抽出物をそのまま添加するか、または他の食品または食品成分とともに使用されてもよく、通常の方法によって適切に使用されてもよい。有効成分の混合量は、その使用目的（予防、健康又は治療的処置）に応じて適切に決定されてもよい。一般に、食品または飲料の製造時に本発明の組成物は、原料に対して１５重量部以下、好ましくは、１０重量部以下の量で添加される。しかし、健康及び衛生を目的とするか、又は健康調節を目的とする長期間の摂取の場合には、前記量は、前記範囲以下であってもよく、安全性の面で何ら問題もないため、有効成分は、前記範囲以上の量で使用されてもよい。

前記食品の種類には特に制限はない。前記物質を添加できる食品の例としては、肉類、ソーセージ、パン、チョコレート、キャンディー類、スナック類、菓子類、ピザ、ラーメン、その他の麺類、ガム類、アイスクリーム類を含む酪農製品、各種スープ、飲料水、お茶、ドリンク剤、アルコール飲料及びビタミン複合剤などがあり、通常の意味での健康食品をすべて含む。

食品剤形が飲料の場合、通常の飲料のように様々な香味剤または天然炭水化物などを追加成分として含有してもよい。前記天然炭水化物は、ブドウ糖、果糖などのモノサッカライド、マルトース、シュクロスなどのジサッカライド及びデキストリン、シクロデキストリンなどのポリサッカライド、キシリトール、ソルビトール、エリトリトールなどの糖アルコールである。甘味剤としては、タウマチン、ステビア抽出物などの天然甘味剤やサッカリン、アスパルテームなどの合成甘味剤などを使用してもよい。前記天然炭水化物の割合は、本発明の組成物１００ｍＬ当たり、一般に約０．０１～０．０４ｇ、好ましくは、約０．０２～０．０３ｇである。

前記の他に、食品剤形は様々な栄養剤、ビタミン、電解質、風味剤、着色剤、ペクト酸及びその塩、アルギン酸及びその塩、有機酸、保護性コロイド増粘剤、ｐＨ調整剤、安定化剤、防腐剤、グリセリン、アルコール、炭酸飲料に使用される炭酸化剤などを含有してもよい。その他に食品剤形は、天然フルーツジュース、フルーツジュース飲料及び野菜飲料の製造のための果肉を含有してもよい。これらの成分は、独立的にまたは混合して使用してもよい。これら添加剤の割合はそれほど重要ではないが、本発明の組成物１００重量部当たり０．０１～０．１重量部の範囲から選ばれることが一般的である。

また、本発明は、前記タケシマユリ抽出物を皮膚に処理する段階を含む、皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿または肌のキメ改善方法を提供する。

また、本発明は、皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿または肌のキメ改善用化粧料組成物を製造するためタケシマユリ抽出物の用途を提供する。

本発明による前記タケシマユリ抽出物は、メラニンの総量を減少させ、チロシナーゼ活性を阻害して美白効果を示し、皮膚の線維芽細胞のコラーゲン合成を促進し、コラゲナーゼ活性を阻害してシワを改善して皮膚の弾力を増進させ、刺激緩和及びヒリヒリ感、かゆみ、熱感などに対する皮膚の鎮静効果を示し、糖化を抑制する抗糖化効果を示すだけでなく、ヒアルロン酸の合成を促進して皮膚の保湿効果を示し、皮膚の荒れ改善による肌のキメ改善効果を示すことにより、化粧料、医薬または食品の製造においてタケシマユリ抽出物を有用に使用しうる。

タケシマユリ抽出物を含むエッセンスを３０代から５０代の女性１１人に４週間１日２回顔全体に塗布させた後、アンケート用紙を作成させて、皮膚改善の程度を評価した結果である。

以下、実施例によって本出願を詳細に説明する。しかし、本出願の保護範囲が、後述する実施例によって制限されるものではない。

＜実施例１～３＞タケシマユリ抽出物の製造

タケシマユリ（Ｌｉｌｉｕｍｈａｎｓｏｎｉｉ）の全草（実施例１）、根（実施例２）、及び花（実施例３）を準備し、それぞれの質量の１０倍に相当する７０％エタノール水溶液を加えて常温で３日間抽出した後、減圧ろ過した。ろ過した抽出物をロータリーエバポレーター(ｒｏｔａｒｙｅｖａｐｏｒａｔｏｒ)（Ｂｕｃｈｉ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）で濃縮、乾燥してタケシマユリ抽出物を製造した。

＜比較例１～３＞ユリ属植物抽出物の製造

Ｌｉｌｉｕｍｃａｎｄｉｄｕｍ（比較例１）、ＬｉｌｉｕｍＳｉｂｅｒｉａ（比較例２）及びＬｉｌｉｕｍｍａｒｔａｇｏｎ（比較例３）それぞれの全草を質量の１０倍に相当する７０％エタノール水溶液を加えて常温で３日間抽出した後、減圧ろ過した。ろ過した抽出物をロータリーエバポレーター（Ｂｕｃｈｉ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）で濃縮、乾燥して各抽出物を製造した。

＜実験例１＞皮膚のシワ改善及び弾力増進効果の確認

１）コラーゲン総量増加効果

タケシマユリ抽出物とユリ属植物抽出物の３種をヒト由来線維芽細胞の培養液に添加し、細胞レベルでのコラーゲン総量増加効果を比較した。

増加したコラーゲン総量の測定は、ＰＩＣＰＥＩＡｋｉｔ（ＰｒｏｃｏｌｌａｇｅｎＴｙｐｅＩＣ－ＰｅｐｔｉｄｅＥｎｚｙｍｅＩｍｍｕｎｏＡｓｓａｙＫＩＴ）を用いて定量した。実験前の実施例１～３で製造したタケシマユリ抽出物と比較例１～３で製造したユリ属植物抽出物の濃度（μｇ／ｍｌ）を変えて、ヒト由来線維芽細胞を対象に細胞毒性を評価し、細胞毒性のない濃度を選定し（１００μｇ／ｍｌ）、コラーゲン総量の増加程度を評価した。

それぞれの試料をヒト線維芽細胞の培養培地に添加して１日間培養した後、培養液を得てＰＩＣＰＥＩＡキットで各濃度でのコラーゲンの総量増加程度を分光光度計を用いて４５０ｎｍで測定した。効果の比較のために何も添加していない線維芽細胞の培養培地（対照群）とビタミンＣを最終濃度５２．８μｇ／ｍｌとなるように添加した試料に対して、同じ方法でコラーゲン総量の増加程度を測定した。コラーゲンの総量は、ＵＶ吸光度として測定し、コラーゲン総量の増加率は、対照群に対する相対的なコラーゲン総量の割合で計算し、その結果を下記表１にまとめた。

前記表１の結果から分かるように、タケシマユリ抽出物は、コラーゲン合成を促進してコラーゲンの総量を増加させる効能に優れており、試験濃度においてコラーゲン総量を増加させる効能があることが知られているビタミンＣ及びユリ属植物抽出物に類似、またはより優れたコラーゲン総量増加効果を示した。

２)コラゲナーゼ活性抑制効果

タケシマユリ抽出物またはユリ属植物抽出物３種に対してコラゲナーゼ活性抑制効果を次のように確認した。

ヒト正常皮膚細胞である線維芽細胞を２４－ウェルマイクロプレートに各ウェル当たり２.５×１０^４細胞数になるように接種し、１０％血清ＤＭＥＭ培地及び３７℃の条件で２４時間培養した。その後、１０％血清ＤＭＥＭ培地を除去し、リン酸緩衝溶液で１回洗浄した後、実施例１～３及び比較例１～３を添加した無血清ＤＭＥＭ培地で線維芽細胞を３０分間さらに培養した。このとき、対照群としては、線維芽細胞を抽出物が含まれていない無血清ＤＭＥＭ培地で３０分間さらに培養した。

試料処理３０分後、コラゲナーゼであるＭＭＰ－１を生成させることが知られている物質であるＴＮＦ－α（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ－α）１０ｎｇ／ｍｌで線維芽細胞を刺激した後、２４時間培養した。このとき、ＴＮＦ－α無処理群と処理群は、本発明のタケシマユリ抽出物が含まれていない対照群のうち、それぞれＴＮＦ－αを処理しない無処理群とＴＮＦ－αを処理した処理群とした。

各ウェルの上層液を集めてＭＭＰ－１分析キット（Ａｍｅｒｓｈａｍ、アメリカ）を用いて新たに合成されたＭＭＰ－１の量（ｎｇ／ｍｌ）を測定し、コラゲナーゼ活性阻害率は、下記数１によってＭＭＰ－１生成抑制率（％）を計算した。結果を、下記表２に示す。

下記数１において、陰性対照群のＭＭＰ－１の量は、ＴＮＦ－α無処理群のＭＭＰ－１の量を意味し、陽性対照群のＭＭＰ－１の量は、ＴＮＦ－α処理群のＭＭＰ－１の量を意味し、実験群のＭＭＰ－１の量は、実施例１～３及び比較例１～３が各濃度で添加された群をいう。

（Ｘ＝実験群のＭＭＰ－１の量、Ｙ＝陽性対照群のＭＭＰ－１の量、Ｚ＝陰性対照群のＭＭＰ－１の量）

前記表２の結果から分かるように、実施例１～３及び比較例１～３を評価したとき、同一濃度において、タケシマユリ抽出物がユリ属植物抽出物に比べて約２～３倍の水準でコラゲナーゼであるＭＭＰ－１に対する優れた阻害能力があることが分かる。

＜実験例２＞皮膚の美白効果の確認

１)チロシナーゼ阻害効果

チロシナーゼ酵素は、キノコ類（Ｍｕｓｈｒｏｏｍ）から抽出されたもので、シグマ（ＳＩＧＭＡ）社から市販されるものを使用した。まず、基質であるチロシンを蒸留水に溶解して０．３ｍｇ／ｍｌの溶液とし、その溶液を１．０ｍｌずつ試験管に入れた後、ここにポタシウム－ホスフェート緩衝溶液（０．１ｍｏｌ濃度、ｐＨ６．８）１．０ｍｌ及び蒸留水０．７ｍｌを添加した。本発明の実施例１～３及び比較例１～３をエタノール溶液に最終濃度１００μｇ／ｍｌの濃度でそれぞれ混合して準備した試料液０.２ｍｌを反応液に入れた後、３７℃恒温槽で１０分間反応させた。このとき、対照群は、試料液の代わりにエタノール溶液だけを０．２ｍｌ入れたものを準備し、陽性対照群としては、ビタミンＣを使用した。この反応液に２５００ｕｎｉｔｓ／ｍｌのチロシナーゼ溶液０.１ｍｌずつ入れて、再び３７℃恒温槽で１０分間反応させた。この反応液が入った試験管を氷水中に入れて急冷して反応を中止させ、光電分光分析計で波長４７５ｎｍにおける吸光度を測定し、その結果を下記表３に示した。それぞれのチロシナーゼ阻害効果は、下記数２で算出した。

表３のように、タケシマユリ抽出物によるチロシナーゼ阻害効果が確認でき、特に実施例１～３は、１００μｇ／ｍｌの濃度でチロシナーゼ阻害剤として知られたアスコルビン酸（ビタミンＣ）より阻害効果が高く、美白効果が非常に優れていた。

２)メラニンの総量減少効果の確認

実施例１～３及び比較例１～３をそれぞれマウスのメラノーマ細胞（Ｂ－１６ｍｏｕｓｅｍｅｌａｎｏｍａｃｅｌｌ）の培養液に添加し、細胞レベルでの美白効果を実験した。

各抽出物を培養液に最終濃度が１００μｇ／ｍｌとなるように実験し、対照群であるアルブチンも１００μｇ／ｍｌとなるように培地に添加し、それぞれＢ－１６メラノマ細胞に処理して３日間培養した。

その後、培養された細胞をトリプシン（ｔｒｙｐｓｉｎ）処理して培養容器から剥がして遠心分離した後、メラニンを抽出した。剥がした細胞は、水酸化ナトリウム溶液（１Ｎ）１ｍｌを加えて１０分間煮沸してメラニンを溶かして分光光度計を用いて、４００ｎｍで吸光度を測定して生成したメラニンの量を測定した。

前記メラニンの量は、単位細胞数当たり（１０^６ｃｅｌｌ）の吸光度で示す方法で測定し、対照群に対する相対的なメラニンの総量に対する阻害率（％）で計算し、結果を表４にまとめた。

前記表４の結果から分かるように、タケシマユリ抽出物に対するすべての実施例において美白効果が確認できた。特に実施例１～３は、美白効果が知られているアルブチンと比較したとき、同じ濃度でもメラニン阻害効果がさらに優れており、比較例であるユリ属植物抽出物と比較したときにも、２倍以上の優れた効果を示すことが確認できる。

＜実験例３＞皮膚の保湿効果の確認－１

１)ヒアルロン酸合成増進効果の確認

ヒト由来線維芽細胞（ＨｕｍａｎＤｅｒｍａｌＦｉｂｒｏｂｌａｓｔ）を、１０％ウシ胎児血清（ｆｅｔａｌｂｏｖｉｎｅｓｅｒｕｍ）を含むＤＭＥＭ培地で１×１０^５ｃｅｌｌｓ／ｍＬで培養し、２４ウェルプレートに５００μlずつ分注して１８時間培養した。その後、ウシ胎児血清が含まれていないＤＭＥＭ培地に試料を希釈し、各試料を下記濃度別に添加した。陽性対照群としてヒアルロン酸生成を促進すると知られている表皮成長因子（ＥＧＦ、ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ）を１０ｐｐｂの濃度で処理した。２４時間培養後、細胞培養液を回収し、ＨｙａｌｕｒｏｎａｎＥＬＩＳＡキット(Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ)を用いてヒアルロン酸濃度を測定した。

また、無添加対照群のヒアルロン酸濃度を基準（１００％）として各試料を処理した実験群のヒアルロン酸濃度を数値化し、下記表５に示した。

前記表５に示すように、タケシマユリ抽出物に対する全ての実施例においてヒアルロン酸合成が増加した結果を確認できた。特に実施例１～３は、陽性対照群より高い濃度であるにもかかわらず、陽性対照群に比べてさらに優れた効能を示し、他のユリ属植物抽出物である比較例に比べて、その効果が非常に優れていることが分かる。

＜製造例１＞タケシマユリ抽出物を含むエッセンスの製造

前記実施例１～３で製造したタケシマユリ抽出物の皮膚改善効果を確認するため、下記表６の組成によってエッセンスを製造した。

＜実験例４＞皮膚の保湿効果確認－２

１)エッセンス使用前後の皮膚の水分量変化

皮膚の保湿効果を実験するため、前記製造例１で製造したエッセンスで皮膚評価を行った。評価対象としては、３０～４０歳の女性２０人をランダムに５人ずつ選定し、それぞれＡ～Ｄのエッセンスを顔全体に使用させた後、２週間後に皮膚の水分含有量を測定した。具体的には、前記被験者２０人を対象として顔面を石鹸で洗うようにした後、恒温恒湿条件（温度２０±２℃、相対湿度４０±２％）に皮膚を適応させた。コルネオメーター（Ｃｏｒｎｅｏｍｅｔｅｒ、ＣＭ８２５）を用いて、皮膚表面電気容量を３回繰り返し測定した。その平均結果を表７に示した。

前記表７のように、タケシマユリ抽出物を含有するエッセンス（Ａ～Ｃ）を２週間使用したとき、皮膚表面の水分含有量が対照群（Ｄ）に比べて格段に高いことを確認し、タケシマユリ抽出物に優れた保湿効果があることを確認した。

＜実験例５＞肌のキメ改善効果の確認

１)人体の皮膚に対する肌のキメ改善効果の確認

前記製造例１で製造したエッセンスの肌のキメ改善効果を確認するための官能評価を行った。３０代から５０代の女性４０人を募集した後、ランダムに１０人ずつ選定し、それぞれＡ～Ｄのエッセンスを顔全体に４週間１日２回塗布するようにした。使用４週後に皮膚荒れの改善程度に応じて、点数を１～１０まで付与し、肌のキメ改善効果を比較した。このとき、１点に近いほど肌のキメ改善効果がなく、１０点に近いほど肌のキメ改善効果に優れていることを意味する。それぞれに対する平均点数を下記表８に示した。

前記表８に示すように、タケシマユリ抽出物を含有するエッセンスを使用する場合（Ａ～Ｃ）、タケシマユリ抽出物が添加されていないものを使用する場合（Ｄ）より肌のキメ改善効果がさらに優れていることが分かる。

２)皮膚改善度のアンケート評価

前記製造例１のＡエッセンスの皮膚改善効果を確認するため、アンケート評価を行った。３０代から５０代の女性１１人にＡを４週間、１日２回顔全体に塗布させた。使用４週間後にアンケート紙を作成し、皮膚改善程度を評価して図１に示した。図１において、「そうだ」と「非常にそうだ」と回答した被験者の割合を示した。

図１に示すように、タケシマユリ抽出物を含有する製造例１のＡエッセンスを使用した使用者７０％以上が優れた肌のキメ改善効果を感じたことが確認できた。

＜実験例６＞抗糖化効果の確認

抗糖化(ａｎｔｉ－ｇｌｙｃａｔｉｏｎ)効能を確認するため、Ｌ－アルギニン(Ｌ－ａｒｇｉｎｉｎｅ)とブドウ糖を用いて、糖化阻害活性を測定した。

まず、１Ｍリン酸緩衝溶液（ｐＨ７．４）を用いて１ＭＬ－アルギニン（ａｒｇｉｎｉｎｅ）、１Ｍブドウ糖を溶かして準備し、１Ｍリン酸緩衝溶液を用いて試料の濃度が１００μｇ／ｍｌとなるように希釈して準備した。１ＭＬ－アルギニンと１Ｍリン酸緩衝溶液を１対４の割合で混合した後、９６ウェルプレートに８０μlずつ分注した。これにそれぞれ１００μｇ／ｍｌで希釈した試料と陽性対照群として使用される０．０１Ｍアミノグアニジン（ａｍｉｎｏｇｕａｎｉｄｉｎ）を１００μｌずつ添加した。これらの試料をよく混合した後、最後にブドウ糖の最終濃度が０.１Ｍとなるように１Ｍリン酸緩衝液で希釈したブドウ糖を入れた後、７０℃で４時間反応させた。９６ウェルプレートを分光光度計を用いて４２０ｎｍで吸光度を測定し、糖化程度を測定した。

下記数３のＧｌｙｃａｔｉｏｎ実験群は、１ＭＬ－アルギニンと１Ｍブドウ糖を入れて糖化を誘発させた実験群であり、試料自体の吸光度を測定するためにブドウ糖を入れずに１ＭＬ－アルギニンと試料のみを入れて４２０ｎｍで吸光度を測定した。

糖化阻害活性は、下記数３で求められる。実験は、それぞれ３回ずつ行って平均値で示した。

前記表９の結果に示すように、タケシマユリ抽出物に対する全ての実施例において抗糖化効果が確認でき、抗糖化物質として知られているアミノグアニジンと比較したとき、アミノグアニジンと類似したレベルの抗糖化効果が示された。このようなタケシマユリ抽出物の優れた抗糖化効果により、最終糖化産物による皮膚トラブルが改善されることが期待できる。

＜実験例７＞皮膚の鎮静効果の確認

１)刺激緩和効果の確認

タケシマユリ抽出物の刺激緩和効能を確認するため、刺激関連物質であるＰＧＥ２（ＰｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎＥ２）抑制効果を測定した。

まず、プロスタグランジンＥ２(ＰＧＥ２)を測定するため、マウスマクロファージＲＡＷ２６４.７Ｍｏｕｓｅｍａｃｒｏｐｈａｇｅｃｅｌｌｌｉｎｅ(ＫＣＬＢｎｏ４００７１, ＫｏｒｅａｎＣｅｌｌＬｉｎｅＢａｎｋ, Ｓｅｏｕｌ, Ｋｏｒｅａ)を購入し、２.５×１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍｌの細胞接種濃度９６－ｗｅｌｌｍｉｃｒｏｐｌａｔｅに１００μｌずつ分注した。培地は、１０％ＦＢＳ（ＧｉｂｃｏＢＲＬ，ＧｒａｎｄＩｓｌａｎｄ，ＮＹ，ＵＳＡ）及び１％ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ／ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ(ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＨｙｃｌｏｎｅ, Ｗａｌｔｈａｍ, ＭＡ, ＵＳＡ)を添加したＤＭＥＭ（ＧｉｂｃｏＢＲＬ，ＧｒａｎｄＩｓｌａｎｄ，ＮＹ，ＵＳＡ）培地を使用し、５％ＣＯ_２、３７℃環境で培養した。前記ＲＡＷ２６４.７細胞を分注した細胞培養液にＬＰＳ(Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ)(Ｓｉｇｍａ, Ｓｔ. Ｌｏｕｉｓ, ＭＯ, ＵＳ)を１μｇ／ｍｌを処理して刺激を誘導し、実施例１～３及び比較例１～３を処理した。その後、細胞を２４時間培養し、９００ｒｐｍ、４℃で５分間遠心分離した後、細胞培養液を回収して培養液中に生産されたプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）の生成量を確認した。プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）は、商業的に購入可能なＰＧＥ２ＥＬＩＳＡキット(ＭｙＢｉｏＳｏｕｒｃｅＣｏ．，Ｌｔｄ．，ＳａｎＤｉｅｇｏ, ＣＡ, ＵＳＡ)を用いて、メーカーの指針に従って測定した。

その結果、タケシマユリ抽出物に対する実施例１～３において全てＰＧＥ２生成量減少効果が確認できた。すなわち、前記ＰＧＥ２生成抑制効果により、タケシマユリ抽出物が皮膚刺激を緩和させることができることを確認した。

２)ヒリヒリ感、かゆみ、熱感鎮静効果の確認

タケシマユリ抽出物の皮膚の鎮静効果を確認するために刺激を誘発した後、ヒリヒリ感、かゆみ、熱感が鎮静されるかどうかを評価した。

まず、健康な成人男性１５人及び成人女性１５人の腕部位に０.２％ラウレス硫酸ナトリウム（ＳＬＥＳ）水溶液が貼布されたチャンバーを貼り付け、８時間経過後にピンチャンバーを除去して評価者が感じるヒリヒリ感、かゆみ、熱感を以下の表のような基準で評価した。評価基準は、下記表１１の通りである。

＜皮膚の鎮静効果評価基準＞

次に、ランダムに選定された先に製造したＡ～Ｄのエッセンスを１日１回(午前９時)、３日間ＳＬＥＳが塗布された皮膚部位に塗った後に感じられるヒリヒリ感、かゆみ、熱感を評価した。その結果は次の通りである。

前記表１２～１４に示すように、タケシマユリ抽出物を含むＡ～Ｃエッセンスの使用後のヒリヒリ感、かゆみ、熱感を感じる程度が非常に減少したことが確認でき、それに対してタケシマユリ抽出物が含まれていないＤエッセンスの場合、０日目と３日目の差が非常にわずかであることが確認できた。

Claims

タケシマユリ（Ｌｉｌｉｕｍｈａｎｓｏｎｉｉ）抽出物またはその分画物を有効成分として含む、皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿または肌のキメ改善用化粧料組成物。
タケシマユリ（Ｌｉｌｉｕｍｈａｎｓｏｎｉｉ）抽出物が、タケシマユリの水、有機溶媒またはそれらの混合物の抽出物である、請求項１に記載の化粧料組成物。
前記有機溶媒が、炭素数１～６の低級アルコール、多価アルコール、炭化水素系溶媒またはそれらの混合物である、請求項２に記載の化粧料組成物。
タケシマユリ分画物が、タケシマユリ抽出物の炭素数１～６の低級アルコール、アセトンまたは酢酸エチルを含む極性溶媒、エーテル、クロロホルム、ベンゼン、ヘキサンまたはジクロロヘキサンを含む非極性溶媒、またはそれらの混合溶媒による分画物である、請求項１に記載の化粧料組成物。
タケシマユリ抽出物またはその分画物が、組成物１００重量部に対して０．０００１～１０重量部で含まれる、請求項１に記載の化粧料組成物。
タケシマユリ抽出物またはその分画物を有効成分として含む、皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿または肌のキメ改善用薬学組成物。
タケシマユリ抽出物またはその分画物を有効成分として含む、皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿または肌のキメ改善用皮膚外用剤。
タケシマユリ抽出物またはその分画物を有効成分として含む、皮膚の美白、シワの改善、弾力増進、皮膚の鎮静、抗糖化、皮膚の保湿または肌のキメ改善用食品組成物。