CN106389141A - 用于改善皮肤的组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及用于改善皮肤的组合物。本发明的芍药醇(Paeonol)促进皮肤的成纤维细胞的胶原蛋白合成,从而促进皮肤的再生,改善皱纹,增加皮肤的弹性,并通过改善皮肤色调而显示出皮肤纹理的改善效果,因此能够用作药物组合物、皮肤外用剂、化妆品组合物或保健食品。另外,由于促进皮肤干细胞的增殖,并显示出干性维持效果,因此可作为用于促进干细胞活性的组合物及包含该组合物的化妆品使用。
Description
技术领域
本发明涉及一种再生皮肤、改善皱纹、增加皮肤弹性、以及改善皮肤纹理等的用于改善皮肤的组合物。
背景技术
胶原蛋白是由皮肤的成纤维细胞生成的主要基质蛋白质,存在于细胞间质,作为其重要的功能,已知有皮肤的机械坚固性、结合组织的抵抗力和组织的结合力、细胞粘接的支撑、细胞分裂和分化(有机体的成生长或处置伤口时)的诱导等。这种胶原蛋白随着年龄的增长和紫外线照射引起的光老化而减少,并被认为与皮肤的皱纹形成有着密切的关联。另外,随着近年来对皮肤老化进行着广泛的研究,确认了胶原蛋白在皮肤中的重要功能。
已知有通过促进胶原蛋白的合成而显示皱纹改善效果的有效成分。例如,视黄酸(retinoic acid),TGF(transforming growth factor)[非专利文献1]、来自动物胎盘的蛋白质[专利文献1]、桦木酸(betulinic acid)[专利文献2],小球藻萃取物[专利文献3、4]等是已知的促进胶原蛋白合成的物质。但是,上述有效成分在适用于皮肤时,由于刺激和红肿等安全性问题而在使用量上受到限制,或者效果微不足道而实质上无法期待促进皮肤的胶原蛋白合成而改善皮肤功能的效果。
另一方面,作为皮肤表面形态的皮肤纹理的特征在于,具有由微细的线产生的三维微结构,且根据不同的年龄/部位而显著不同。皮肤纹理根据纹理线的深度区分为1次(约20-100μm)纹,2次(约5-40μm)纹,3次(约0.5μm)纹,越是好的皮肤,各纹理线之间会形成网状的网络结构,且具有线之间相交而形成的多边形和星形(star formation)越清晰的特征[非专利文献2]。
但是,已知随着年龄增长或者由于皮肤损伤,原本致密的微细纹理线的网络结构受到破坏,微细纹(2次、3次等)消失,1次纹则越发加深而产生皱纹[非专利文献3]。即,随着皮肤老化而显现出的代表性症候的皱纹,是长期微细变化的累积。
已知在胚胎学上人皮肤的所有构成成分来自于外胚层或中胚层。表皮、毛囊、皮脂腺以及汗腺等起源于外胚层,而黑色素细胞、神经以及特殊的感受器来自于神经外胚层。根据胚胎时期,胚胎干细胞重复分化而成为符合各自的组织功能的特性细胞,即使成为成体后在组织中也留有一定数量的干细胞,而在皮肤中干细胞主要存在于两处。首先存在于毛囊(hair follicle)。已知此处是未引起细胞分化的细胞,对表皮的再生起到重要的作用,对于毛发的再生与生长也起到重要的作用。其次是存在于表皮的基底层(the basal layerof epidermis)。已查明,位于此处的干细胞不仅支配表皮还支配着真皮层的成纤维细胞,起到维护皮肤健康的重要的作用。此处的干细胞具有干细胞量相对多、能够容易获得的优点而广泛用于皮肤干细胞的研究中。皮肤会持续再生(renew),存在于皮肤的上皮中的干细胞、即皮肤的上皮干细胞(epidermalstem cells)在创伤后,参与上皮的复原[非专利文献4]。上述皮肤的上皮干细胞也被称为皮肤干细胞(skin stem cells),当使上述皮肤干细胞活性化时,能够治疗外伤等皮肤创伤或者促进创伤治疗,还可以期待缓解皮肤皱纹。据报道,作为皮肤干细胞的指标使用整合素β1(integrinβ1)和整合素α6(integrinα6),上皮形态的形成及分化所需的皮肤干细胞的维持是通过p63蛋白质来调节。
皮肤干细胞对于维持皮肤的健康和生理学及生物化学上的恒常性起到重要的作用。存在于皮肤的干细胞也受到老化的影响而在功能上发生异常,由此皮肤的恒常性被打破,产生各种问题。因此,通过这样的干细胞的活性可以改善皮肤老化的各种现象[非专利文献5]。
另外,迫切希望开发出对生物体安全,有效成分稳定,尤其是与已知的具有再生皮肤、改善皱纹、增加皮肤弹性及改善皮肤纹理效果的物质相比,其效果更优异的具有再生皮肤、改善皱纹、增加皮肤弹性及改善皮肤纹理的活性的成分。
现有技术文献
专利文献
专利文献1:日本特开平8-231370号
专利文献2:日本特开平8-208424号
专利文献3:日本特开平9-40523号
专利文献4:日本特开平10-36283号
非专利文献
非专利文献1:Cardinale G.et al,Adv.Enzymol.,41,p.425,1974
非专利文献2:Journal of the European Academy of Dermatology andVenereology.12:103-114,1999
非专利文献3:The British journal of dermatology.110:129-138,1984,Skin research and technology.5:189-194,1999
非专利文献4:Epidermal Stem Cells of the Skin,Cedric Blanpain,ElaineFuchs,Annual Review of Cell and Developmental Biology,November 2006,Vol.22,Pages 339-373
非专利文献5:Human skin stem cells and the ageing process,Cather inNiemann,Stem Cell Aging and Regenerative Medicine,November 2008,Pages986-997
发明内容
发明要解决的课题
本发明人等确认了芍药醇(Paeonol)促进皮肤成纤维细胞的胶原蛋白合成而促进皮肤的再生,皱纹的改善,皮肤弹性的增加,皮肤色调的改善所带来的皮肤纹理改善效果,也确认了芍药醇(Paeonol)的干细胞增殖促进效果及干性维持效果,由此完成了本发明。
因此,本发明的目的在于,提供一种用于再生皮肤、改善皱纹、增加皮肤弹性及改善皮肤纹理的组合物,其作为有效成分包含由下述化学式1表示的化合物。
化学式1:
另外,本发明另一目的在于,提供一种用于促进干细胞活性的组合物及包含该组合物的化妆品组合物,所述用于促进干细胞活性的组合物作为有效成分包含由下述化学式1表示的化合物。
化学式1:
解决课题所用的方法
作为解决上述课题的方法,本发明提供一种用于再生皮肤、改善皱纹、增加皮肤弹性、以及改善皮肤纹理的皮肤外用剂,其作为有效成分包含由下述化学式1表示的化合物。
化学式1:
作为解决上述课题的另一方法,本发明提供一种用于再生皮肤、改善皱纹、增加皮肤弹性及改善皮肤纹理的化妆品组合物,其作为有效成分包含由下述化学式1表示的化合物。
化学式1:
作为解决上述课题的又一方法,本发明提供一种用于促进干细胞活性的组合物及包含该组合物的化妆品组合物,所述用于促进干细胞活性的组合物作为有效成分包含由下述化学式1表示的化合物。
化学式1:
发明效果
本发明的芍药醇(Paeonol)显示出促进皮肤的成纤维细胞的胶原蛋白合成,促进皮肤的再生,改善皱纹,增加皮肤弹性,改善皮肤色调带来的改善皮肤纹理的效果,因此可用于药物、化妆品或保健食品中。另外,还显示出促进皮肤干细胞的增殖和维持干性效果,因此可以用作干细胞活性促进用组合物(用于促进干细胞活性的组合物)及包含该组合物的化妆品。
具体实施方式
以下,具体说明本发明的构成。
为了用于再生皮肤、改善皱纹、增加皮肤弹性及改善皮肤纹理的成分在实际应用于皮肤时发挥优异的效果,希望其具有以下功能:在低浓度下显示出高的再生皮肤、改善皱纹、增加皮肤弹性及改善皮肤纹理的活性;透过皮肤被吸收的能力优异;挥发性低从而能够停留足够显示出再生皮肤、改善皱纹、增加弹性及改善皮肤纹理效果所需的时间;活性成分在组合物或皮肤中得到稳定的维持;易于剂型化为药物或化妆品;而且对皮肤安全。但是,在公知的成分中能够全部满足上述特性的成分并不多。例如,某些用于再生皮肤、改善皱纹、增加弹性及改善皮肤纹理的成分虽然在试验管内实验时在低浓度下的再生皮肤、改善皱纹、增加弹性及改善皮肤纹理的活性优异,但是透过皮肤被吸收的能力低,难以适用于实际皮肤中。另外,其他活性成分由于亲水性低,因此难以剂型化为药物或化妆品。另外,有些再生皮肤、改善皱纹、增加皮肤弹性及改善皮肤纹理的成分在暴露于热、光或氧气中时,存在上述活性成分被分解或转变为其它化合物从而在应用于皮肤之前已经失效的情况。
通过下述实施例,可确认:芍药醇在低浓度下显示出极其优异的促进胶原蛋白合成的效果、改善皮肤色调的效果,因此可作为用于再生皮肤、改善皱纹、增加皮肤弹性及改善皮肤纹理的药物、化妆品、保健食品等的有效成分使用。
因此,本发明提供一种用于再生皮肤、改善皱纹、增加弹性及改善皮肤纹理的药物组合物,其作为有效成分包含由下述化学式1表示的化合物。
化学式1:
上述化学式1的化合物的化合物名称为1-(2-羟基-4-甲氧基苯基)乙酮(1-(2-hydroxy-4-methoxyphenyl)ethanone);或者2'-羟基-4'-甲氧基苯乙酮((2'-Hydroxy-4'-methoxyacetophenone);1-(2-羟基-4-甲氧基苯基)乙烷-1-酮(1-(2-hydroxy-4-methoxyphenyl)ethan-1-one),也称作芍药醇(Paeonol)、牡丹酚、丹皮酚。
上述化学式1的化合物可以合成而使用或者可以使用市售的化合物。
本发明的用于再生皮肤、改善皱纹、增加皮肤弹性及改善皮肤纹理的药物组合物可以包含由上述化学式1表示的化合物的药学上可接受的盐。
上述由化学式1表示的化合物的药学上可接受的盐可以为使用有机酸或无机酸形成的酸加成盐,上述有机酸例如可举出甲酸、乙酸、丙酸、乳酸、丁酸、异丁酸、三氟乙酸、苹果酸、马来酸、丙二酸、富马酸、琥珀酸、琥珀酸单酰胺、谷氨酸、酒石酸、草酸、柠檬酸、羟基乙酸、葡萄糖醛酸、抗坏血酸、苯甲酸、苯二甲酸、水杨酸、邻氨基苯甲酸、二氯乙酸、氨氧乙酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、以及甲磺酸系的盐,上述无机酸例如可举出盐酸、溴酸、硫酸、磷酸、硝酸、碳酸、以及硼酸系的盐。优选可以为盐酸盐或乙酸盐的形态,更优选为盐酸盐形态。
上述提及的酸加成盐可以通过如下常规的盐制造方法来制造:a)将上述化学式1的化合物和酸直接混合;或b)将其中的一种溶解于溶剂或含水溶剂中后进行混合;或c)将化学式1的化合物置于溶剂或水化溶剂中的酸中,将它们混合。
作为与上述不同的其他的可接受的盐的形态,有γ-氨基丁酸盐、加巴喷丁盐、普瑞巴林盐、烟酸盐、己二酸盐、半丙二酸盐、半胱氨酸盐、乙酰半胱氨酸盐、蛋氨酸盐、精氨酸盐、赖氨酸盐、鸟氨酸盐、天冬氨酸盐等。
另外,将本发明的上述化学式1的化合物用作药物时,还可以含有1种以上显示出相同或类似的功能的有效成分。例如,还可以包含公知的再生皮肤、改善皱纹、增加皮肤弹性及改善皮肤纹理的成分。若追加了上述再生皮肤、改善皱纹、增加弹性及改善皮肤纹理的成分时,可更加提高本发明组合物的再生皮肤、改善皱纹、增加皮肤弹性及改善皮肤纹理的效果。在追加上述成分时,可以考虑复合使用引起的皮肤安全性、剂型化的容易性、以及有效成分之间的稳定性。本发明的一具体实施例中,上述组合物是该领域中公知的皮肤再生成分,还可以包含选自于由视黄酸、TGF、来自动物胎盘的蛋白质,桦木酸、小球藻萃取物及它们的衍生物和各种植物萃取物所组成的组中的一种或两种以上的成分。追加成分的含量可相对于组合物总重量为0.0001重量%~10重量%,上述含量范围可根据皮肤安全性、上述化学式1的化合物在剂型化时的容易性等重要条件来调节。
另外,本发明的用于再生皮肤、改善皱纹、增加皮肤弹性及改善皮肤纹理的药物组合物还可以包含药学上可接受的载体。
药学上可接受的载体可以含有例如缓冲溶液、注射用灭菌水、普通的生理盐水或磷酸盐缓冲盐水、蔗糖、组氨酸、盐以及聚山梨酸酯等的各种成分。
本发明的药物组合物可以通过口服或非口服的方式给药,可以以普通药品制剂的形态,例如临床给药时的口服及非口服的各种剂型给药,在制剂化时,可以使用通常使用的填充剂、增量剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、表面活性剂等的稀释剂或赋形剂来调剂。
用于口服给药的固体制剂包括片剂、丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂等,这样的固体制剂可以通过在本发明的药物组合物中混入至少一种以上的赋形剂,例如淀粉、碳酸钙(Calcium carbonate)、蔗糖(Sucrose)或乳糖(Lactose)、明胶等来进行调剂。
除了单纯的赋形剂以外,还可以使用硬脂酸镁、滑石等的润滑剂等。作为用于口服的液状制剂,可以举出悬浮剂、口服溶液剂(oral solutions)、乳剂、糖浆剂等,除了经常使用的作为单纯稀释剂的水、液体石蜡以外,可以包含各种赋形剂,例如湿润剂、甜味剂、芳香剂、保鲜剂等。
用于非口服给药的制剂中可以包含杀菌水溶液、非水性溶剂、悬浮剂、乳剂、冷冻干燥制剂、栓剂。作为非水性溶剂、悬浮用剂,可以使用丙二醇(Propylene glycol)、聚乙二醇、橄榄油等的植物油,油酸乙酯等的可注射的酯等。作为栓剂的基质,可以使用witepsol、聚乙二醇、吐温(tween)61、可可脂、月桂精脂(Laurin butter)、甘油明胶(glycerogelatin)等。
本发明中,所谓“皮肤再生效果”是指,皮肤组织对于皮肤外部和内部原因引起的损伤的恢复。上述外部原因引起的损伤包括由紫外线、外部污染物质、创伤、外伤引起的损伤等,上述内部原因引起的损伤包括精神压力等。
本发明中,所谓“皱纹改善效果”是指,抑制或阻碍皮肤生成皱纹,或者缓解已经生成的皱纹。
本发明中,所谓“弹性增加效果”是指,皮肤的弹性增加,抑制或阻碍皮肤弹力的损失,或者缓解已经减少的弹性。
本发明中,所谓“皮肤纹理改善效果”是指,通过抑制或阻碍由于老化、压力等的影响导致的皮肤表面变粗糙的现象,从而使皮肤表面变得光滑、赋予光泽、改善肤色变亮。
本发明的药物组合物在包含有效量的上述化学式1的化合物时,可以带来理想的皮肤再生效果、皱纹改善效果、弹性增加效果及皮肤纹理改善效果。本发明中,“有效量”是指是指能够显示出促进受损皮肤的再生、皱纹改善、弹性增加,皮肤纹理改善的效果的化合物的量。本发明的组合物中包含的上述化学式1的化合物的有效量根据组合物被制成制品时的形态、上述化合物适用于皮肤的方法以及停留在皮肤的时间等而不同。例如,将上述组合物制成药物时,与制成通常适用于皮肤的化妆品时相比,可以以更高浓度包含上述化学式1的化合物。由此,一天的给药量以上述化学式1的化合物的量为基准时为0.1~100mg/kg,优选为30~80mg/kg,更优选为50~60mg/kg,每天可以给药1~6次。
本发明的药物组合物可以单独使用或者与手术、放射线治疗、激素治疗、化学治疗以及使用生物反应调节剂的方法等组合使用。
本发明还可作为用于再生皮肤、改善皱纹、增加皮肤弹性及改善皮肤纹理的皮肤外用剂的剂型提供,其作为有效成分包含上述化学式1的化合物。
将上述化学式1的化合物用作皮肤外用剂时,还可以含有脂类物质、有机溶剂、增溶剂、浓缩剂及胶凝剂、软化剂、抗氧剂、悬浮剂、稳定剂、发泡剂(foaming agent)、芳香剂、表面活性剂、水、离子型或非离子型乳化剂、填充剂、金属离子封锁剂及螯合剂、保鲜剂、维生素、阻断剂、湿润剂、精油、染料、颜料、亲水性或亲油性活性剂、脂质囊泡或通常用于皮肤用外用剂的任意的其它成分等在皮肤科学领域中通常使用的佐剂(辅助剂)。另外,上述成分能够以皮肤科学领域中通常使用的量导入。
当以皮肤外用剂的剂型提供上述化学式1的化合物时,可以采用软膏、贴剂(Patch)、凝胶、乳霜或喷雾剂等的剂型,但不限于此。
另外,本发明也可以提供为作为有效成分含有上述化学式1的化合物的用于再生皮肤、改善皱纹、增加弹性及改善皮肤纹理的化妆品的剂型。
将上述化学式1的化合物用作化妆品时,作为有效成分含有上述化学式1的化合物来制造的化妆品可以制造成通常的乳化剂型和可溶化剂型的形态。例如,可以为:柔软化妆水或营养化妆水等化妆水,面部乳液(Facial Lotion)、身体润肤乳液(Body Lotion)等的乳液,营养霜、保湿霜、眼霜等的乳霜,精华、化妆软膏、喷雾、凝胶、面膜、防晒霜、隔离霜(Makeup Base)、液态或固态或喷雾型的粉底霜,粉饼,洁面霜、洁面乳、洁面油等的卸妆剂,洁面泡沫、肥皂、沐浴露等的洗剂等剂型。
另外,上述化妆品除了含有上述化学式1的化合物外还可以含有脂类物质、有机溶剂、增溶剂、浓缩剂及胶凝剂、软化剂、抗氧剂、悬浮剂、稳定剂、发泡剂(foaming agent)、芳香剂、表面活性剂、水、离子型或非离子型乳化剂、填充剂、金属离子封锁剂及螯合剂、保鲜剂、维生素、阻断剂、湿润剂、精油、染料、颜料、亲水性或亲油性活性剂、脂质囊泡或通常用于化妆品的任意的其它成分等在化妆品学领域中通常使用的辅助剂。
将上述化学式1的化合物制成化妆品时,若为有效成分短时间内停留在皮肤的卸妆产品、洗剂等的洗净(wash-off)型化妆品的情况下,可以包含较高浓度的上述化学式1的化合物。相反,若为有效成分长时间停留在皮肤的化妆水、乳液、乳霜、精华等保养(leave-on)类型的化妆品的情况下,可包含低于洗净型化妆品浓度的上述化学式1的化合物。在本发明的一个具体例中,上述组合物中上述化学式1的化合物的含量相对于组合物总重量可以为0.0001重量%~10重量%(优选为0.0001重量%~1重量%),但不限于此。本发明的组合物若包含小于0.0001重量%的上述化学式1的化合物,则不能期待充分的皮肤再生、皱纹改善、皮肤弹性增加以及皮肤纹理改善的效果,若包含超过10重量%,则有可能出现过敏等不希望出现的反应或者在皮肤安全性上存在问题,因此上述范围的设定是为了防止此类问题的发生。
另外,本发明还涉及包含上述化学式1的化合物的用于再生皮肤、改善皱纹、增加皮肤弹性及改善皮肤纹理的保健食品。
本说明书中,“保健食品”是指,将上述化学式1的化合物添加到饮料、茶类、香料、口香糖、饼干类等的食品原料中的食品,或者制造成胶囊化、粉末化、悬浮液等的食品,当摄取这些食品时在健康上带来特定效果,但与一般的药物不同,以食品为原料,因而具有不存在长期服用药物时可能发生的副作用等优点。
以这种方式得到的本发明的保健食品可以在日常中摄取,因此可以期待高度的皮肤再生、皱纹改善、弹性增加及皮肤纹理改善的效果,因而非常有用。
将上述化学式1的化合物用作食品添加剂时,可以将上述化学式1的化合物直接添加或者与其它食品或食品成分一起使用,可以根据常规方法适宜地使用。有效成分的混合量可以根据其使用目的(预防、保健或治疗处置)而适当地决定。通常,在制造食品或饮料时,以相对于原料15重量份以下,优选10重量份以下的量添加本发明的组合物。然而,在以保健和卫生为目的或以健康调节为目的而长期摄入的情况下,上述量可以为上述范围以下,由于在安全性方面不存在任何问题,因此有效成分也可以以上述范围以上的量来使用。
上述食品的种类无特殊限制。作为可添加上述物质的食品,例如肉类、香肠、面包、巧克力、糖类、点心类、饼干类、披萨饼、方便面、其他面类、口香糖类、包括冰淇淋类的乳制品、各类汤、饮料、茶、清凉剂、酒精饮料、以及复合维生素剂等,通常意义上的保健食品则全部包括。
本发明的保健饮料组合物与通常的饮料相同地可以含有各种增香剂或天然碳水化合物等作为追加成分。上述天然碳水化合物可以使用葡萄糖、果糖等的单糖,麦芽糖、蔗糖等的二糖,以及糊精、环糊精等的多糖,木糖醇、山梨糖醇、赤藓糖醇等糖醇。作为甜味剂,可以使用索马甜(Thaumatin)、甜叶菊提取物等的天然甜味剂,或糖精、阿斯巴甜等的合成甜味剂等。通常上述天然碳水化合物的比率为每本发明的组合物100mL包含约0.01~0.04g,优选为约0.02~0.03g。
除了上述以外,本发明的保健食品可以含有各种营养剂、维生素、电解质、调味剂、着色剂、果胶酸及其盐、海藻酸及其盐、有机酸、保护性胶体增稠剂、pH调节剂、稳定剂、防腐剂、甘油、酒精、用于碳酸饮料的碳酸化剂等。除此以外,本发明的保健食品可以含有用于制造天然果汁、果汁饮料、以及蔬菜饮料的果肉。这种成分可以单独使用或者混合而使用。这种添加剂的比例虽不重要,但通常是相对于本发明的组合物100重量份为0.01~0.1重量份的范围。
另外,本发明提供作为有效成分包括上述化学式1的化合物的用于促进干细胞活性的组合物。
本发明中,术语“干细胞”为能够自行进行细胞分裂,具有能够分化为极其多样形态的特定细胞类型(specific cell type)的能力的细胞。对这种干细胞的种类没有特别限制,在一个具体例中,上述干细胞可以为皮肤干细胞。上述“皮肤干细胞”是指能够分化为构成皮肤(表皮、真皮和皮下脂肪层)的细胞的干细胞。构成上述皮肤的细胞包括存在于表皮的角质形成细胞(keratinocyte)、黑色素细胞(melanocyte)以及存在于真皮的成纤维细胞(主要负责胶原和弹性蛋白的生物合成)。
对上述皮肤干细胞的种类没有特别限制。本发明中使用的皮肤干细胞与其来自于何处无关地均可利用。例如,皮肤干细胞可来自于公知的皮肤干细胞来源,例如可从毛囊或表皮的基底层获得,作为采集对象的动物可以是哺乳动物。在一个具体例中,哺乳动物可以包括人、小鼠、大鼠、豚鼠、兔、猴、猪、马、牛、羊、羚羊、狗或猫,但不限于此。优选地,哺乳动物为人。对于从上述皮肤干细胞来源获取皮肤干细胞的方法,在本领域是周知的。
本发明中,“干细胞活性促进效果”包括干细胞增殖促进效果和/或干性维持效果。
皮肤干细胞对于维持皮肤的健康和生理学及生物化学上的恒常性起到重要的作用。存在于皮肤的干细胞也会受到老化的影响而在功能上发生异常,由此皮肤的恒常性被打破,产生各种问题。通过这种干细胞的活性可以改善皮肤老化的各种现象[非专利文献5],对此,本发明中确认了皮肤再生、皱纹改善、弹性增加及皮肤纹理改善的效果。
由此,本发明可以提供包含上述用于促进干细胞活性的组合物的化妆品组合物。对于这种化妆品剂型,与之前关于包含化学式1的化合物的化妆品剂型的说明中记载的内容相同。
以下,通过实施例对本发明进行详细的说明。但是,以下实施例只是用于举例说明本发明,本发明的内容并非限定于下述实施例。
参考例1:芍药醇(Paeonol)物质信息
化学式1:
CASNo.:552-41-0
供应商:Sichuan Hongjie Import&Export CO.,LTD
参考例2:无血清培养基条件下皮肤干细胞的培养
利用48-孔板(6×103cells/well)中添加有与胎牛血清(fetal bovine serum)类似的BPE(Bovine pituitary extract)的CNT-57培养基(Cellntec公司),在5%CO2和37℃条件下培养24小时从Cellntec公司购入的人皮肤干细胞(Human epidermal stem cell)。之后,通过吸入管去除培养液后,利用PBS溶液(GibcoBRL公司)去除培养基成分,用不包含BPE的CNT-57培养基处理化学式1的化合物20μg/mL,在5%CO2和37℃条件下培养了72小时。
实验例1:利用CCK-8评价法的皮肤干细胞增殖促进效果
对上述参考例2中培养的皮肤干细胞进行CCK-8(Cell counting kit-8)评价。CCK-8评价是对细胞内电子传递体系内的脱氢酶(Dehydrogenase)分解四唑盐(Tetrazolium Salt)而生成的甲(Formazan)的吸光度进行测定,从而间接地显示存活的细胞密度的分析方法。
在37℃下用CCK-8溶液(处理培养基体积的1/10)对细胞处理2小时后,通过测定波长450nm下的吸光度来进行光谱学测定。对于化学式1的化合物的皮肤干细胞的增殖促进效果,根据将所测定的吸光度值与对照组(添加了BPE的CNT-57培养基)进行比较的下述数学式1,求出增殖率(%),将其值示于下述表1中。
数学式1:
增殖率(%)=(试样处理组的吸光度/对照组的吸光度)×100
表1
皮肤干细胞的增殖促进效果
添加试样 | 浓度 | 与对照组比较的细胞增殖率(%) |
化学式1的化合物 | 20μg/mL | 128% |
对照组 | - | 100% |
由上述表1的结果可以看出,用本发明的化学式1的化合物处理的培养基条件下的皮肤干细胞显示出优异的增殖促进效果。
实验例2:皮肤干细胞的干性(stemness)维持效果确认
为了确认在上述参考例2中培养的皮肤干细胞的干性维持效果,评价p63表达程度。p63作为细胞内转录因子且作为皮肤干细胞的维持标志物而周知。将细胞的RNA分离而合成cDNA之后,用Taqman染色液实施实时-PCR来测定p63的表达程度。本实验中,用S16核糖体RNA对RNA的浓度进行了标准化。
将上述实验结果示于下述表2中。下述表2中的p63增加倍数的数值表示与对照组(添加了BPE的CNT-57培养基)比较的倍数。
表2
干性(stemness)维持效果(重复数=3)
添加试样 | 浓度 | p63增加倍数(倍) |
化学式1的化合物 | 20μg/mL | 1.243 |
对照组 | - | 1.0 |
从上述表2的结果可以看出,用本发明的化学式1的化合物处理的培养基条件促进了皮肤干细胞的p63表达,因此干性维持效果优异。
实施例1:胶原蛋白合成促进效果
将化学式1的化合物添加至人成纤维细胞的培养液中,在细胞水平上测试了胶原蛋白合成的促进效果。通过PICPEIAkit(Procol lagen Type I C-Peptide Enzyme ImmunoAssay KIT)测定生物合成的胶原蛋白。
以使化学式1的化合物的最终浓度成为10μg/mL、20μg/mL的方式,与维生素C和对照组(无添加)一同分别添加在人成纤维细胞(7x104cells/cm2)的培养基中,培养1天,之后取培养液,通过PICP EIA Kit,并利用分光光度计,在450nm下测定各浓度的胶原蛋白生物合成程度。对胶原蛋白生物合成能力而言,以相对于对照组的相对合成能力来计算出增加率,并将其结果示于表3中。
表3
根据浓度的胶原蛋白合成促进效果(重复数=3)
添加试样 | 使用浓度(μg/mL) | 与对照组对比的胶原蛋白合成增加率(%) |
化学式1的化合物 | 10μg/mL | 47.2% |
化学式1的化合物 | 20μg/mL | 65.0% |
维生素C | 50μg/mL | 30.6% |
从上述表3的结果可知,本发明的化学式1的化合物对于人成纤维细胞具有优异的胶原蛋白合成能力,与使用了通常认为具有胶原蛋白合成能力的维生素C相比,能够以更低的浓度得到更优异的胶原蛋白合成效果。
实施例2:对于角质剥离(turn-over)改善的功效性
以健康的20岁至50岁的女性为对象,以如下方式试验了下述制剂例2的营养乳霜的角质剥离改善效果。
对20名20岁至50岁的女性的试验部位,用DHA(Dihydroxyacetone,Sigma Aldrich,USA)1.5%溶液进行8小时封闭斑贴(Closed Patch)使其沉积后,将制造例的营养乳霜每天2次涂敷到试验部位上。在涂敷4天后、涂敷8天后、以及涂敷12天后,利用Chromameter CR-400(Minolta,Japan)对沉积部位的皮肤色调进行仪器测定以及利用DSLR进行照片拍摄。测定值通过求出除了最大值和最小值以外的3次平均值来进行评价,沉积部位的皮肤色调的改善越大,显示出角质剥离改善效果越好。
在表4中示出了结果。
表4
皮肤色调改善效果
区分 | 涂覆4天后 | 涂覆8天后 | 涂覆12天后 |
改善率(%) | 1.23 | 4.69 | 11.58 |
从上述表4中可知,当使用了本发明的制剂例的营养乳霜时,能够得到角质剥离效果。
制剂例1:药物制剂的制造
1.片剂的制造
化学式1的化合物0.2㎎
玉米淀粉100㎎
乳糖100㎎
硬脂酸镁2㎎
混合上述成分后,根据常规的片剂的制造方法进行压片,制造了片剂。
制剂例2:化妆品的制造
1.营养乳霜的制造
按照下述组成,根据常规方法制造了作为有效成分包含化学式1的化合物的营养乳霜。
化学式1的化合物0.2重量%
β-1,3-葡聚糖5.0重量%
蜂蜡10.0重量%
聚山梨酸酯601.5重量%
PEG60氢化蓖麻油2.0重量%
山梨糖醇酐倍半异硬脂酸酯0.5重量%
液体石蜡10.0重量%
角鲨烷5.0重量%
辛酸/癸酸三酸甘油酯5.0重量%
甘油5.0重量%
丁二醇3.0重量%
丙二醇3.0重量%
三乙醇胺0.2重量%
防腐剂0.05重量%
色素0.05重量%
香料0.05重量%
纯净水加至100重量%
制剂例3:皮肤外用剂的制造
1.软膏的制造
按照下述组成,根据常规方法制造作为有效成分包含化学式1的化合物的软膏。
化学式1的化合物0.5重量%
β-1,3-葡聚糖10.0重量%
蜂蜡10.0重量%
聚山梨酸酯605.0重量%
PEG60氢化蓖麻油2.0重量%
山梨糖醇酐倍半异硬脂酸酯0.5重量%
凡士林5.0重量%
液体石蜡10.0重量%
角鲨烷5.0重量%
牛油树脂(Shea Butter)3.0重量%
辛酸/癸酸三酸甘油酯5.0重量%
甘油10.0重量%
丙二醇10.2重量%
三乙醇胺0.2重量%
防腐剂0.05重量%
色素0.05重量%
香料0.05重量%
纯净水加至100重量%
Claims (9)
1.一种用于再生皮肤和改善皱纹的皮肤外用剂,其作为有效成分包含由下述化学式1表示的化合物,
2.一种用于再生皮肤和改善皱纹的化妆品组合物,其作为有效成分包含由下述化学式1表示的化合物,
3.一种用于增加皮肤弹性的皮肤外用剂,其作为有效成分包含由下述化学式1表示的化合物,
4.一种用于增加皮肤弹性的化妆品组合物,其作为有效成分包含由下述化学式1表示的化合物,
5.一种用于改善皮肤纹理的皮肤外用剂,其作为有效成分包含由下述化学式1表示的化合物,
6.一种用于改善皮肤纹理的化妆品组合物,其作为有效成分包含由下述化学式1表示的化合物,
7.一种用于促进干细胞活性的组合物,其作为有效成分包含由下述化学式1表示的化合物,
8.根据权利要求7所述的用于促进干细胞活性的组合物,其特征在于,所述干细胞活性是促进干细胞增殖或维持干性的活性。
9.一种化妆品组合物,其包含权利要求7所述的用于促进干细胞活性的组合物。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
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C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
REG | Reference to a national code |
Ref country code: HK Ref legal event code: DE Ref document number: 1228802 Country of ref document: HK |
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20170215 |