KR101661288B1 - 피부 개선용 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 피부 개선용 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 페오놀(Paeonol)은 피부의 섬유아세포의 콜라겐 합성을 촉진하여 피부의 재생을 촉진시키고 주름을 개선하며 탄력을 증진시키고, 피부 밝기 개선으로 인한 피부결 개선 효과를 나타냄으로써 약학적 조성물, 피부외용제, 화장료 조성물 또는 건강식품으로 사용 가능하다. 또한, 피부줄기세포의 증식을 촉진하고, 줄기세포성 유지 효과를 나타내고 있어 줄기세포 활성 촉진용 조성물 및 이를 포함하는 화장료로 사용 가능하다.

Description

피부 개선용 조성물{Composition for improving skin}

본 발명은 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선 등의 피부 개선용 조성물에 관한 것이다.

콜라겐은 피부의 섬유아세포에서 생성되는 주요 기질 단백질로서 세포외 간질에 존재하고, 중요한 기능으로는 피부의 기계적 견고성, 결합조직의 저항력과 조직의 결합력, 세포접착의 지탱, 세포분할과 분화(유기체의 성장 혹은 상처 치유시)의 유도 등이 알려져 있다. 이러한 콜라겐은 연령 및 자외선 조사에 의한 광 노화에 의해 감소하며, 이는 피부의 주름 형성과 밀접한 연관이 있다고 알려져 있다. 또한, 근래에 들어 피부 노화에 대한 광범위한 연구가 발전되면서 피부에서의 콜라겐의 중요한 기능이 밝혀지고 있다.

콜라겐 합성을 촉진하여 주름 개선 효과를 나타내는 유효성분들이 알려져 있다. 예를 들어, 레티노산(retinoic acid), TGF(transforming growth factor)[비특허문헌 1], 동물 태반 유래의 단백질[특허문헌 1], 베튤린산(betulinic acid)[특허문헌 2], 클로렐라 추출물[특허문헌 3, 4] 등이 콜라겐 합성 촉진 물질로서 알려져 있다. 그러나, 상기 유효성분들은 피부 적용 시 자극과 발적 등의 안전성의 문제로 사용량의 제한이 있거나, 효과가 미미하여 실질적으로 피부의 콜라겐 합성을 촉진하여 피부 기능을 개선하는 효과를 기대할 수 없는 문제점이 있다.

한편, 피부 표면의 형태인 피부결은 미세한 선에 의해 형성된 3차원 미세구조를 특징으로 하며 연령별·부위별로 유의하게 다르다. 피부결은 선의 깊이에 따라 1차(약 20-100 μm), 2차(약 5-40 μm), 3차(약 0.5 μm) 라인으로 구분되며, 좋은 피부일수록 각 라인들이 그물형태의 네트워크구조를 이루며 선들이 만나서 생기는 다각형과 별 모양(star formation)이 뚜렷하다는 특징을 지니고 있다[비특허문헌 2].

그러나 나이가 들어감에 따라 또는 피부가 손상됨에 따라 촘촘하던 미세라인의 네트워크 구조가 무너져 미세 라인(2차, 3차 등)은 사라지고 1차 라인은 더욱 깊어져 주름이 생성되는 것으로 알려져 있다[비특허문헌 3]. 즉, 피부가 노화됨에 따라 나타나는 대표적인 징후인 주름은 이미 장기간에 걸쳐 일어나는 미세한 변화의 축적이다.

발생학적으로 사람 피부의 모든 구성성분은 외배엽이나 중배엽에서 유래되는 것으로 알려져 있다. 표피, 모낭, 피지선 및 땀샘선 등은 외배엽에서 기원하며, 멜라닌 세포, 신경 및 특수 감각 수용체는 신경외배엽에서 유래된다. 발생학적 시기에 따라 배아의 줄기세포는 분화를 거듭하여 각각의 조직 기능에 맞는 특성의 세포가 되고, 성체가 된 후에도 일정수의 줄기세포는 조직에 남게 되는데 피부에서는 주로 두 곳에 줄기세포들이 존재한다. 첫째는 모낭(hair follicle)에 존재한다. 이곳은 세포분화가 일어나기 전의 세포로 표피의 재생과 관련해 중요한 역할을 담당하는 것으로 알려져 있으며, 털의 재생과 성장에도 중요한 역할을 수행하고 있다. 둘째는 표피의 기저층(the basal layer of epidermis)이다. 이곳에 자리하고 있는 줄기세포는 표피는 물론 진피층의 섬유아세포까지 관장하여 피부 건강을 지키는 중요한 역할을 수행하고 있음이 밝혀졌다. 이곳의 줄기세포는 상대적으로 양이 많고 쉽게 얻을 수 있다는 장점이 있어 피부줄기세포 연구에 널리 사용되고 있다. 피부는 지속적으로 재생(renew)되며, 피부의 상피에 존재하는 줄기세포 즉, 피부의 상피줄기세포(epidermal stem cells)는 상처 후 상피의 복구에 관여한다[비특허문헌 4]. 상기 피부의 상피줄기세포는 피부줄기세포(skin stem cells)로도 칭해지며, 상기 피부줄기세포를 활성화시킬 경우, 외상 등의 피부상처를 치료하거나 상처 치료를 촉진할 수 있으며 피부의 주름완화 또한 기대할 수 있다. 피부줄기세포의 지표로는 인테그린β1(integrin β1) 및 인테그린 α6(integrin α6)이 사용되고 있고, 상피 형태 형성 및 분화에 필요한 피부줄기세포의 유지는 p63 단백질에 의해 조절된다고 보고되고 있다.

피부줄기세포는 피부의 건강과 생리학적 및 생화학적인 항상성을 유지하는데 중요한 역할을 수행한다. 피부에 존재하는 줄기세포도 노화의 영향으로 인하여 기능에 이상이 발생하게 되고, 이에 따라 피부의 항상성이 깨지면서 여러 가지 문제가 발생된다. 따라서 이러한 줄기세포의 활성을 통하여 피부노화의 여러 현상을 개선할 수 있을 것이다[비특허문헌 5].

또한, 생체에 안전하고, 유효성분이 안정하며, 무엇보다도 기존의 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선 효과가 있는 물질보다 효과가 우수한 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선 활성을 지닌 성분의 개발이 절실히 요망되고 있다.

일본 특개 평8-231370호 일본 특개 평8-208424호 일본 특개 평9-40523호 일본 특개 평10-36283호

Cardinale G. et al, Adv. Enzymol., 41, p. 425, 1974 Journal of the European Academy of Dermatology and Venereology. 12:103-114, 1999 The British journal of dermatology. 110: 129-138, 1984, Skin research and technology.5:189-194, 1999 Epidermal Stem Cells of the Skin, Cedric Blanpain, Elaine Fuchs, Annual Review of Cell and Developmental Biology, November 2006, Vol. 22, Pages 339-373 Human skin stem cells and the ageing process, Catherin Niemann, Stem Cell Aging and Regenerative Medicine, November 2008, Pages 986-997

이에, 본 발명자들은 페오놀(Paeonol)이 피부의 섬유아세포의 콜라겐 합성을 촉진하여 피부의 재생을 촉진시키고 주름을 개선하며 탄력을 증진시키고, 피부 밝기 개선으로 인한 피부결 개선 효과를 확인하였고, 줄기세포 증식 촉진 효과 및 줄기세포성 유지 효과를 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명의 목적은 하기 화학식 1로 표현되는 화합물을 유효성분으로 포함하는 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선용 조성물을 제공하는데 있다:

[화학식 1]

또한, 본 발명의 다른 목적은 하기 화학식 1로 표현되는 화합물을 유효성분으로 포함하는 줄기세포 활성 촉진용 조성물 및 상기 조성물을 포함하는 화장료 조성물을 제공하는데 있다:

[화학식 1]

상기 과제를 해결하기 위한 수단으로서, 본 발명은

하기 화학식 1로 표현되는 화합물을 유효성분으로 포함하는 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선용 피부 외용제를 제공한다.

[화학식 1]

상기 과제를 해결하기 위한 다른 수단으로서, 본 발명은

하기 화학식 1로 표현되는 화합물을 유효성분으로 포함하는 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

[화학식 1]

상기 과제를 해결하기 위한 또 다른 수단으로서, 본 발명은

하기 화학식 1로 표현되는 화합물을 유효성분으로 포함하는 줄기세포 활성 촉진용 조성물 및 상기 조성물을 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.

[화학식 1]

본 발명에 따른 페오놀(Paeonol)이 피부의 섬유아세포의 콜라겐 합성을 촉진하여 피부의 재생을 촉진시키고 주름을 개선하며 탄력을 증진시키고, 피부 밝기 개선으로 인한 피부결 개선 효과를 나타냄으로써 의약품, 화장료 또는 건강식품에 사용할 수 있다. 또한, 피부줄기세포의 증식을 촉진하고, 줄기세포성 유지 효과를 나타내고 있어 줄기세포 활성 촉진용 조성물 및 이를 포함하는 화장료로 사용할 수 있다.

이하, 본 발명의 구성을 구체적으로 설명한다.

피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선 성분이 실제 피부에 적용 시 우수한 효과를 발휘하기 위해서는 저농도에서 고활성의 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선 활성을 나타내고, 피부를 투과하여 흡수되는 능력이 우수하고, 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선 효과를 나타내기에 충분한 시간 동안 머무를 수 있도록 휘발성이 낮고, 조성물이나 피부 상에서 활성 성분이 안정하게 유지되고, 의약이나 화장품으로의 제형화가 용이하며, 또한 피부에 안전한 것이 바람직하다. 그러나, 공지의 성분 중 상기 특성을 모두 만족시키는 성분은 흔치 않다. 예를 들어, 몇몇 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선 성분들은 시험관 내 실험 시 저농도에서도 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선 활성은 우수하나, 피부를 투과하여 흡수되는 능력이 떨어져 실제 피부에 적용하기엔 어렵다. 또 다른 활성 성분들은 친수성이 낮아 의약이나 화장품으로 제형화가 어렵다. 또한, 몇몇 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선 성분들은 열, 광, 또는 산소에 노출되었을 때 상기 활성 성분이 분해되거나 다른 화합물로 변형되어 피부에 적용하기 전에 이미 효과가 사라지는 경우도 있다.

하기 실시예에서 확인할 수 있는 바와 같이, 페오놀은 저농도에서 월등히 우수한 콜라겐 합성 촉진 효과, 피부 밝기 개선 효과를 나타내므로 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선을 위한 의약품, 화장료, 건강식품 등의 유효성분으로 사용할 수 있다.

따라서, 그러므로 본 발명은 하기 화학식 1로 표현되는 화합물을 유효성분으로 포함하는 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선용 약학적 조성물을 제공한다.

[화학식 1]

상기 화학식 1의 화합물의 화합물명은 1-(2-하이드록시-4-메톡시페닐)에탄온(1-(2-hydroxy-4-methoxyphenyl)ethanone); 또는 2'-하이드록시-4'-메톡시아세토페논((2'-Hydroxy-4'-methoxyacetophenone); 1-(2-하이드록시-4-메톡시페닐)에탄-1-온(1-(2-hydroxy-4-methoxyphenyl)ethan-1-one) 이라 하며, 일명 페오놀(Paeonol) 또는 파에오놀이라고도 한다.

상기 화학식 1의 화합물은 합성하여 이용하거나, 시판되고 있는 화합물을 이용할 수 있다.

본 발명의 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선용 약학적 조성물은 상기 화학식 1의 화합물의 약제학적으로 허용 가능한 염을 포함할 수 있다.

상기 화학식 1의 화합물의 약제학적으로 허용 가능한 염은 유기산 또는 무기산을 이용하여 형성된 산 부가염일 수 있으며, 상기 유기산은, 예를 들면 포름산, 아세트산, 프로피온산, 락트산, 부티르산, 이소부티르산, 트리플루오로아세트산, 말산, 말레산, 말론산, 푸마르산, 숙신산, 숙신산 모노아미드, 글루탐산, 타르타르산, 옥살산, 시트르산, 글리콜산, 글루쿠론산, 아스코르브산, 벤조산, 프탈산, 살리실산, 안트라닐산, 디클로로아세트산, 아미노옥시 아세트산, 벤젠술폰산, p-톨루엔술폰산 및 메탄술폰산계 염을 포함하며 무기산은 예를 들면 염산, 브롬산, 황산, 인산, 질산, 탄산 및 붕산계 염을 포함한다.　바람직하게는 염산염 또는 아세트산염 형태일 수 있으며, 보다 바람직하게는 염산염 형태일 수 있다.

상기 언급된 산 부가염은 a) 상기 화학식 1의 화합물 및 산을 직접 혼합하거나, b) 이들 중 한 가지를 용매 또는 함수 용매 중에 용해시키고 혼합시키거나, 또는 c) 화학식 1의 화합물을 용매 또는 수하 용매 중의 산에 위치시키고 이들을 혼합하는 일반적인 염 제조방법으로 제조된다.

위와는 별도로 추가적으로 염이 가능한 형태는 가바염, 가바펜틴염, 프레가발린염, 니코틴산염, 아디페이트염, 헤미말론산염, 시스테인염, 아세틸시스테인염, 메티오닌염, 아르기닌염, 라이신염, 오르니틴염, 아스파르트산염 등이 있다.

또한, 본 발명의 상기 화학식 1의 화합물을 의약품으로 사용하는 경우, 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다. 예컨대, 공지의 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선 성분을 포함할 수 있을 것이다. 추가적인 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선 성분을 포함하게 되면 본 발명의 조성물의 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선 효과는 더욱 증진될 수 있을 것이다. 상기 성분 추가 시에는 복합 사용에 따른 피부 안전성, 제형화의 용이성, 유효성분들의 안정성을 고려할 수 있다. 본 발명의 한 구체예에서, 상기 조성물은 당업계에 공지된 피부 재생 성분으로서, 레티노산, TGF, 동물 태반 유래의 단백질, 베튤린산 및 클로렐라 추출물 및 이들의 유도체와 각종 식물 추출물로 구성되는 군으로부터 선택되는 1종 또는 2종 이상의 성분을 추가로 포함할 수 있다. 추가의 성분은 전체 조성물 중량에 대하여 0.0001 중량% 내지 10 중량%로 포함될 수 있을 것이며, 상기 함량 범위는 피부 안전성, 상기 화학식 1의 화합물의 제형화 시의 용이성 등의 요건에 따라 조절될 수 있을 것이다.

또한, 본 발명의 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선용 약학적 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 더 포함할 수 있다.

약학적으로 허용되는 담체는 완충액, 주사용 멸균수, 일반 식염수 또는 인산염 완충 식염수, 슈크로스, 히스티딘, 염 및 폴리솔베이트 등과 같은 여러 성분을 함유할 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있으며, 일반 의약품 제제의 형태, 예를 들어, 임상 투여 시 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다.

경구 투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 본 발명의 약학적 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(Calcium carbonate), 수크로스(Sucrose) 또는 락토오스(Lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다.

단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.

비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌 글리콜(Propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명에 있어서, '피부 재생 효과'라 함은 피부 외부 및 내부 원인에 의한 손상에 대하여 피부 조직이 회복되는 것을 말한다. 상기 외부 원인에 의한 손상은 자외선, 외부 오염 물질, 창상, 외상 등을 들 수 있으며, 상기 내부 원인에 의한 손상은 스트레스 등을 들 수 있다.

본 발명에 있어서, '주름 개선 효과'라 함은 피부에 주름이 생성되는 것을 억제 또는 저해하거나, 이미 생성된 주름을 완화시키는 것을 말한다.

본 발명에 있어서, '탄력 증진 효과'라 함은 피부에 대한 탄력성이 증가되는 것으로, 피부 탄력의 손실을 억제 또는 저해하거나, 이미 감소된 탄력을 완화시키는 것을 말한다.

본 발명에 있어서, '피부결 개선 효과'라 함은 노화, 스트레스 등의 영향으로 피부 표면이 거칠어지는 것을 억제 또는 저해함으로써 피부 표면을 매끄럽게 하고, 광택을 부여하며, 피부 톤을 밝게 개선하는 것을 말한다.

본 발명의 약학적 조성물은 유효량의 상기 화학식 1의 화합물을 포함할 때 바람직한 피부 재생 효과, 주름 개선 효과, 탄력 증진 효과, 및 피부결 개선 효과를 제공할 수 있다. 본 발명에 있어서, '유효량'이라 함은 손상된 피부의 재생을 촉진하거나, 주름을 개선하거나, 탄력을 증진시키거나, 피부결 개선 효과를 나타낼 수 있는 화합물의 양을 의미한다. 본 발명의 조성물에 포함되는 상기 화학식 1의 화합물의 유효량은 조성물이 제품화되는 형태, 상기 화합물이 피부에 적용되는 방법 및 피부에 머무르는 시간 등에 따라 달라질 것이다. 예컨대, 상기 조성물이 의약품으로 제품화되는 경우에는 일상적으로 피부에 적용하게 되는 화장품으로 제품화되는 경우에 비해 높은 농도로 상기 화학식 1의 화합물을 포함할 수 있을 것이다. 따라서, 일일 투여량은 상기 화학식 1의 화합물의 양을 기준으로 0.1 내지 100 ㎎/㎏이고, 바람직하게는 30 내지 80 ㎎/㎏이고, 더욱 바람직하게는 50 내지 60 mg/kg이며, 하루 1 ∼ 6 회 투여될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.

본 발명은 또한 상기 화학식 1의 화합물을 유효성분으로 포함하는 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선용 피부 외용제의 제형으로 제공할 수 있다.

상기 화학식 1의 화합물을 피부외용제로 사용하는 경우, 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 피부용 외용제에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 피부 과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 또한 상기 성분들은 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.

상기 화학식 1의 화합물이 피부 외용제 제형으로 제공될 경우, 이에 제한되는 것은 아니나, 연고, 패취, 겔, 크림 또는 분무제와 같은 제형을 가질 수 있다.

본 발명은 또한 상기 화학식 1의 화합물을 유효성분으로 포함하는 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선용 화장료의 제형으로 제공할 수 있다.

상기 화학식 1의 화합물을 화장품으로 사용하는 경우, 상기 화학식 1의 화합물을 유효성분으로 함유하여 제조되는 화장품은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형의 형태로 제조할 수 있다. 예컨대, 유연 화장수 또는 영양 화장수 등과 같은 화장수, 훼이셜 로션, 바디로션 등과 같은 유액, 영양 크림, 수분 크림, 아이 크림 등과 같은 크림, 에센스, 화장연고, 스프레이, 젤, 팩, 선 스크린, 메이크업 베이스, 액체 타입, 고체 타입 또는 스프레이 타입 등의 파운데이션, 파우더, 클렌징 크림, 클렌징 로션, 클렌징 오일과 같은 메이크업 제거제, 클렌징 폼, 비누, 바디 워쉬 등과 같은 세정제 등의 제형을 가질 수 있다.

또한, 상기 화장품은 상기 화학식 1의 화합물에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다.

상기 화학식 1의 화합물은 화장품으로 제품화되는 경우에 유효성분이 단기간 내에 피부에 머무르게 되는 메이크업 제거제, 세정제 등과 같은 워쉬-오프(wash-off) 타입의 화장품의 경우에는 비교적 높은 농도의 상기 화학식 1의 화합물을 포함할 수 있을 것이다. 반면, 유효성분이 장기간 동안 피부에 머무르게 되는 화장수, 유액, 크림, 에센스 등의 리브-온(leave-on) 타입의 화장품의 경우에는 워쉬-오프 타입의 화장품에 비해 낮은 농도의 상기 화학식 1의 화합물을 포함해도 무방할 것이다. 이에 제한되는 것은 아니나, 본 발명의 한 구체예에서, 상기 조성물은 상기 화학식 1의 화합물을 전체 조성물 중량에 대하여 0.0001 중량% 내지 10 중량%(바람직하게는 0.0001 중량% 내지 1 중량%)로 포함할 수 있다. 본 발명의 조성물이 상기 화학식 1의 화합물을 0.0001 중량% 미만으로 포함할 경우에는 충분한 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선 효과를 기대할 수 없고, 10 중량%를 초과하여 포함할 경우에는 알러지 등 원치 않는 반응이 발생하거나 피부 안전성에 문제가 있을 수 있으므로 이를 방지하기 위한 것이다.

본 발명은 또한 상기 화학식 1의 화합물을 포함하는 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선용 건강식품에 관한 것이다.

본 명세서에서 '건강식품'이란, 상기 화학식 1의 화합물을 음료, 차류, 향신료, 껌, 과자류 등의 식품소재에 첨가하거나, 캡슐화, 분말화, 현탁액 등으로 제조한 식품으로, 이를 섭취할 경우 건강상 특정한 효과를 가져오는 것을 의미하나, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있다.

이와 같이 하여 얻어지는 본 발명의 건강식품은, 일상적으로 섭취하는 것이 가능하기 때문에 높은 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선 효과를 기대할 수 있어 매우 유용하다.

상기 화학식 1의 화합물을 식품첨가물로 사용하는 경우, 상기 화학식 1의 화합물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합양은 그의 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 본 발명의 조성물은 원료에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가된다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.

본 발명의 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 mL 당 일반적으로 약 0.01 ∼ 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 ∼ 0.03 g 이다.

상기 외에 본 발명의 건강식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강식품은 천연 과일주스, 과일주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부당 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.

본 발명은 또한, 상기 화학식 1의 화합물을 유효성분으로 포함하는 줄기세포 활성 촉진용 조성물을 제공한다.

본 발명에서 용어 ‘줄기세포’는 스스로 세포 분열을 할 수 있고, 매우 다양한 형태의 특이 세포 타입(specific cell type)으로 분화할 수 있는 능력을 갖는 세포이다. 이러한 줄기세포의 종류는 특별히 제한되지 않으며, 한 구체예에서, 상기 줄기세포는 피부줄기세포일 수 있다. 상기 ‘피부줄기세포’는 피부(표피, 진피 및 피하지방층)를 이루는 세포로 분화될 수 있는 줄기세포를 의미한다. 상기 피부를 이루는 세포는 표피에 존재하는 케라티노사이트(keratinocyte), 멜라노사이트(melanocyte) 및 진피에 존재하는 섬유아세포(콜라겐 및 엘라스틴의 생합성을 주로 담당)를 포함한다.

상기 피부줄기세포의 종류는 특별히 제한되지 않는다. 본 발명에서 사용되는 피부줄기세포는 그것이 어디로부터 유래한 것인지 관계없이 이용될 수 있다. 예를 들어, 피부줄기세포는 공지의 피부줄기세포 공급원, 예를 들어, 모낭 또는 표피의 기저층에서 얻을 수 있으며, 채취 대상인 동물은 포유동물일 수 있다. 한 구체예에서, 포유동물은 인간, 마우스, 랫트, 기니어 피그, 토끼, 원숭이, 돼지, 말, 소, 양, 영양, 개 또는 고양이를 포함할 수 있지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 바람직하게 포유동물은 인간일 수 있다. 이러한, 피부줄기세포 공급원으로부터 피부줄기세포를 수득하는 방법에 대해서는 당업계에서 잘 알려져 있다.

본 발명에 있어서, '줄기세포 활성 촉진 효과'라 함은 줄기세포 증식 촉진 효과 및/또는 줄기세포성 유지 효과를 포함하는 것을 말한다.

피부줄기세포는 피부의 건강과 생리학적 및 생화학적인 항상성을 유지하는데 중요한 역할을 수행한다. 피부에 존재하는 줄기세포도 노화의 영향으로 인하여 기능에 이상이 발생하게 되고, 이에 따라 피부의 항상성이 깨지면서 여러 가지 문제가 발생된다. 이러한 줄기세포의 활성을 통하여 피부 노화의 여러 현상을 개선할 수 있으며[비특허문헌 5], 이에 대해 본 발명에서는 피부 재생, 주름 개선, 탄력 증진, 및 피부결 개선 효과를 확인하였다.

따라서, 본 발명은 상기 줄기세포 활성 촉진용 조성물을 포함하는 화장료 조성물을 제공할 수 있다. 이러한 화장료 제형에 대해서는 앞서 화학식 1의 화합물을 포함하는 화장료 제형에 관한 설명에 기재된 내용과 동일하다.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.

참조예 1: 페오놀(Paeonol) 물질 정보

[화학식 1]

CAS No.: 552-41-0

구입처: Sichuan Hongjie Import&Export CO., LTD

참조예 2: 무혈청 배지조건에서 피부줄기세포의 배양

Cellntec 사에서 구입한 인간 피부줄기세포(Human epidermal stem cell)를 48-웰 플레이트(6×10³ cells/well)에, 소태아혈청(fetal bovine serum)과 유사한 BPE(Bovine pituitary extract)가 첨가된 CNT-57 배지(Cellntec사)를 이용하여 24 시간 동안 5% CO₂ 및 37℃ 조건에서 배양하였다. 그 후, 배양액을 흡입관을 통하여 제거한 다음, PBS 용액(GibcoBRL 사)을 이용하여 배지 성분을 제거하고, BPE가 포함되지 않은 CNT-57 배지에 화학식 1의 화합물 20 ㎍/mL을 처리하여 5％ CO₂ 및 37℃ 조건에서 72 시간 동안 배양하였다.

실험예 1: CCK -8 평가법을 통한 피부줄기세포 증식 촉진 효과

상기 참조예 2에서 배양된 피부줄기세포에 CCK-8(Cell counting kit-8) 평가를 실시하였다. CCK-8 평가는 세포 내 전자전달계 내의 탈수소효소(Dehydrogenase)가 테트라졸리움 염(Tetrazolium Salt)를 분해하여 생성하는 포르마잔(Formazan)의 흡광도를 측정하여 살아있는 세포의 밀도를 간접적으로 나타내는 분석방법이다.

세포에 CCK-8 용액(배지부피의 1/10을 처리)을 37℃에서 2 시간 동안 처리한 후, 파장 450 nm 에서의 흡광도를 측정함으로써 분광학적으로 측정하였다. 화학식 1의 화합물의 피부줄기세포의 증식 촉진 효과는 측정된 흡광도 값으로부터 대조군(BPE 첨가한 CNT-57 배지) 대비 하기 수학식 1에 따라 증식율(%)을 구하고, 그 값을 하기 표 1에 나타냈다.

[수학식 1]

증식율(%) = (시료처리군의 흡광도/대조군의 흡광도) × 100

피부줄기세포의 증식 촉진 효과

첨가시료	농도	대조군 대비 세포 증식율(%)
화학식 1의 화합물	20 ㎍/mL	128%
대조군	-	100%

상기 표 1의 결과에서 볼 수 있듯이, 본 발명의 화학식 1의 화합물을 처리한 배지조건에서의 피부줄기세포는 우수한 증식 촉진 효과를 나타내었다.

실험예 2: 피부줄기세포의 줄기세포성( stemness ) 유지 효과 확인

상기 참조예 2에서 배양된 피부줄기세포의 줄기세포성 유지 효과 확인을 위해 p63 발현 정도를 평가하였다. p63은 세포 내 전사인자로서 피부줄기세포의 유지 마커로 잘 알려져 있다. 세포의 RNA를 분리하여 cDNA를 합성한 다음, Taqman 염색액으로 실시간-PCR을 수행하여 p63의 발현 정도를 측정하였다. 본 실험에서 RNA의 농도는 S16 리보솜 RNA로 표준화하였다.

상기 실험 결과는 하기 표 2에 나타내었다. 하기 표 2에서 p63 증가 배수의 수치는 대조군(BPE 첨가한 CNT-57 배지) 대비 배수를 의미한다.

줄기세포성(stemness) 유지 효과(반복수 = 3)

첨가시료	농도	p63 증가 배수(배)
화학식 1의 화합물	20 ㎍/mL	1.243
대조군	-	1.0

상기 표 2의 결과에서 볼 수 있듯이, 본 발명의 화학식 1의 화합물을 처리한 배지 조건은 피부줄기세포의 p63 발현을 촉진하여 줄기세포성 유지 효과가 우수하다.

실시예 1: 콜라겐 합성 촉진 효과

화학식 1의 화합물을 인간유래의 섬유아세포의 배양액에 첨가하여 세포수준에서 콜라겐 합성 촉진 효과를 실험하였다. 생합성된 콜라겐의 측정은 PICP EIA kit (Procollagen Type I C-Peptide Enzyme ImmunoAssay KIT)를 이용하여 정량하였다.

화학식 1의 화합물을 최종 농도 10 ㎍/ml, 20 ㎍/ml가 되도록 하여 비타민 C와 대조군(무첨가)과 함께 각각 인간 유래의 섬유아세포(7 x 10⁴ cells/cm²)의 배양 배지에 첨가하여 1일간 배양한 후, 배양액을 취하여 PICP EIA Kit로 각 농도에서 콜라겐 생합성 정도를 분광광도계를 이용하여 450 nm에서 측정하였다. 콜라겐 생합성능은 대조군에 대한 상대적인 합성능으로 증가율을 계산하고 결과를 하기 표 3에 정리하였다.

농도에 따른 콜라겐 합성 촉진 효과(반복수 = 3)

첨가 시료	적용 농도(㎍/ml)	대조군 대비 콜라겐 합성증가율(%)
화학식 1의 화합물	10 ㎍/ml	47.2%
화학식 1의 화합물	20 ㎍/ml	65.0%
비타민 C	50 ㎍/ml	30.6%

그 결과 상기 표 3의 결과에서 볼 수 있듯이, 본 발명의 화학식 1의 화합물은 인간 유래의 섬유아세포에 대하여 우수한 콜라겐 합성능이 있으며, 일반적으로 콜라겐 합성 능력이 있는 것으로 알려진 비타민 C를 적용한 경우보다 적은 농도로 더 우수한 콜라겐 합성 효과를 얻을 수 있음을 알 수 있다.

실시예 2: 각질박리(turn-over)개선에 대한 효능성

하기 제제예 2의 영양크림에 대해서 건강한 20대에서 50대의 여성을 대상으로 각질 박리 개선 효과를 다음과 같이 시험하였다.

20세에서 50세까지의 여성 20명의 시험 부위에 DHA(Dihydroxyacetone, Sigma Aldrich, USA) 1.5% 용액을 8시간 동안 폐쇄첩포하여 침착시킨 후 제조예 영양크림을 매일 2회 시험 부위에 도포하였다. 도포 4일 후, 도포 8일 후, 도포 12일 후에 Chromameter CR-400(Minolta, Japan)을 이용하여 침착 부위의 피부 밝기에 대한 기기측정과 DSLR을 이용하여 사진 촬영을 실시하였다. 측정값은 최대값과 최소값을 제외한 3회의 평균값을 구하여 평가하였으며, 침착 부위의 피부 밝기 개선이 높을수록 각질 박리 개선 효과가 있음을 나타낸다.

결과는 하기 표 4에 나타내었다.

피부 밝기 개선 효과

구분	도포 4일 후	도포 8일 후	도포 12일 후
개선율(%)	1.23	4.69	11.58

상기 표 4에서 볼 수 있듯이, 본 발명에 의한 제제예 영양크림을 사용한 경우 각질 박리 개선 효과가 있는 것으로 나타났다.

제제예 1: 약학적 제제의 제조

1. 정제의 제조

화학식 1의 화합물 0.2㎎

옥수수전분 100㎎

유 당 100㎎

스테아린산 마그네슘 2㎎

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.

제제예 2: 화장품의 제조

1. 영양크림의 제조

하기 조성과 같이, 화학식 1의 화합물을 유효성분으로 포함하는 영양크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

화학식 1의 화합물 0.2중량％

베타-1,3-글루칸 5.0 중량％

밀납 10.0 중량％

폴리솔베이트60 1.5 중량％

피이지 60 경화피마자유 2.0 중량％

솔비탄세스퀴올레이트 0.5 중량％

유동파라핀 10.0 중량％

스쿠알란 5.0 중량％

카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 5.0 중량％

글리세린 5.0 중량％

부틸렌글리콜 3.0 중량％

프로필렌글리콜 3.0 중량％

트리에탄올아민 0.2 중량％

방부제 0.05 중량％

색소 0.05 중량％

향료 0.05 중량％

정제수 to 100 중량％

제제예 3: 피부외용제의 제조

1. 연고의 제조

하기 조성과 같이, 화학식 1의 화합물을 유효성분으로 포함하는 연고를 통상의 방법에 따라 제조하였다.

화학식 1의 화합물 0.5 중량％

베타-1,3-글루칸 10.0 중량%

밀납 10.0 중량%

폴리솔베이트60 5.0 중량%

피이지 60 경화피마자유 2.0 중량%

솔비탄세스퀴올레이트 0.5 중량%

바셀린 5.0 중량%

유동파라핀 10.0 중량%

스쿠알란 5.0 중량%

쉐어버터 3.0 중량%

카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 5.0 중량%

글리세린 10.0 중량%

프로필렌글리콜 10.2 중량%

트리에탄올아민 0.2 중량%

방부제 0.05 중량％

색소 0.05 중량％

향료 0.05 중량％

정제수 to 100 중량%

Claims (9)

1. 하기 화학식 1로 표현되는 화합물을 유효성분으로 포함하는 줄기세포 활성 촉진을 통한 주름 개선용 피부 외용제:
   [화학식 1]
   

   

   
   
2. 하기 화학식 1로 표현되는 화합물을 유효성분으로 포함하는 줄기세포 활성 촉진을 통한 주름 개선용 화장료 조성물:
   [화학식 1]
   

   

   
   
3. 하기 화학식 1로 표현되는 화합물을 유효성분으로 포함하는 줄기세포 활성 촉진을 통한 피부 탄력 증진용 피부 외용제:
   [화학식 1]
   

   

   
   
4. 하기 화학식 1로 표현되는 화합물을 유효성분으로 포함하는 줄기세포 활성 촉진을 통한 피부 탄력 증진용 화장료 조성물:
   [화학식 1]
   

   

   
   
5. 하기 화학식 1로 표현되는 화합물을 유효성분으로 포함하는 줄기세포 활성 촉진을 통한 각질 박리 촉진용 피부 외용제:
   [화학식 1]
   

   

   
   
6. 하기 화학식 1로 표현되는 화합물을 유효성분으로 포함하는 줄기세포 활성 촉진을 통한 각질 박리 촉진용 화장료 조성물:
   [화학식 1]
   

   
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