JPH0940523A - クロレラ水抽出物含有線維芽細胞増殖促進物質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【課題】新規で且つ安全な線維芽細胞増殖促進物質、並
びに医薬品・医薬部外品或は化粧品分野の各種皮膚外用
剤及び浴用剤を提供することを課題とする。 【解決手段】クロレラ水抽出物が正常細胞による繊維芽
細胞増殖促進作用を顕著に有することを確認し、よっ
て、クロレラ水抽出物を繊維芽細胞増殖促進物質として
応用すること、更に皮膚外用剤及び浴用剤にも使用する
ことができる。 【効果】繊維芽細胞増殖促進物質として利用でき、湿
疹、肌荒れ、肌の乾燥、アトピー性皮膚炎などの皮膚疾
患や皮膚及び真皮の発育促進、皮膚の老化防止、並びに
創傷治癒促進などを目的とした、皮膚・頭皮、口腔、
眼、耳、鼻、肛門、陰部などの様々な外傷に対しての予
防、治療に有効的で、更に安全性も高いものである。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、新規で且つ安全な
クロレラ水抽出物を含有する線維芽細胞増殖促進物質、
並びに医薬品・医薬部外品或は化粧品分野の各種皮膚外
用剤・浴用剤への応用に関するものである。

【０００２】その利用分野は、各種の内用・外用製剤類
（動物用に使用する製剤も含む）全般において利用で
き、具体的には、アンプル状、カプセル状、粉末状、顆
粒状、丸剤、錠剤状、固形状、液状、ゲル状、気泡状、
クリーム状、軟膏状、シート状などの1)医薬品類、2)医
薬部外品類、3)食品類、4)局所又は全身用の皮膚化粧品
類、5)頭皮・頭髪に適用する薬用及び／又は化粧用の製
剤類（例えば、シャンプー剤、リンス剤、トリートメン
ト剤、パーマネント液、整髪料、ヘアートニック剤、育
毛・養毛料など）、6)浴湯に投じて使用する浴用剤など
が上げられる。

【０００３】又、皮膚及び真皮の発育促進、皮膚の老化
防止、肌荒れ並びに創傷治癒促進などを目的として、皮
膚・頭皮、口腔、眼、耳、鼻、肛門、陰部などの様々な
外傷にも用いることができる。

【０００４】

【従来の技術】個体老化或いはこれに伴って起こる各種
の疾患などは、分裂し得るすべての細胞の老化（分裂速
度や細胞機能の低下）と相関関係があり、細胞レベルで
の老化防止を目的として、細胞賦活剤の探索が数多く行
われるようになっている。中でも細胞賦活剤の一つに細
胞成長因子があり、既に種々の因子が確認され、本出願
人による結合組織加水分解物（特開昭62-84024）、胸線
・脾臓などの臓器由来水溶性蛋白（特開昭63-188697,63
-188698）、或いは牛胎盤エキス（特開平03-141299）や
更には牛脳や牛脳下垂体・鶏冠の抽出物（特開平01-175
998）などが知られており、これらは医薬部外品や化粧
品に利用されている。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、これら
はすべて動物系由来のものであり、植物系由来として
は、本出願人による、クコが細胞生着率及びコロニー形
成促進作用などの細胞賦活物質（特開平02-117686）と
して開示されているが、未だ、植物系由来のもので細胞
増殖能を有する物質は得られていないのが現状である。
そこで、本発明者らはクロレラ抽出物独自の新規、有用
利用とその作用に関する検討、追求を試み鋭意研究を進
めてきた。

【０００６】すなわち、本発明者らは、上記事情に鑑
み、線維芽細胞増殖促進物質として有用性のある様々な
植物又は成分を開発のテーマとし、クロレラ水抽出物に
線維芽細胞増殖促進作用を有することを見出し、更に皮
膚／頭皮（例えば、湿疹、肌荒れ、皮膚のカサツキな
ど）の様々な疾患予防並びに改善に有効で、安全性の高
い皮膚外用剤及び浴用剤を提供することをもって、本発
明を完成するに至った。

【０００７】

【課題を解決するための手段】尚、本発明で用いられる
「クロレラ」とは緑色植物門（Chlorophyta），緑藻網
（Chlorophyceae），クロロコッカス目（Chlorococcale
s），オオシスティス科（Oocystaceae），クロレラ属
（Chlorella）に分類される、直径３ー１０ミクロンの
単細胞緑藻類を指し、例えば、クロレラ・ブルガリス
（C・Vulgaris）、クロレラ・ピレノイドサ（C・Pyreno
idosa）、クロレラ・エリプソイデイア（C・Ellipsoide
a）などが代表的な物として上げられる。尚、クロレラ
抽出物には繊維芽細胞増殖促進作用を有することは全く
知られていない。

【０００８】又、その他の藻類、例えば、緑藻類（クラ
ミドモナス属：クラミドモナス、アカユキモ，ドゥナリ
エラ属：ドゥナリエラ，クロロコッカス属：クロロコッ
カス，クワノミモ属：クワノミモ，ボルボックス属：オ
オヒゲマワリ、ボルボックス，パルメラ属，ヨツメモ
属，アオミドロ属：ヒザオリ，ツルギミドロ属，ヒビミ
ドロ属：ヒビミドロ，アオサ属：アナアオサ、アミアオ
サ、ナガアオサ，アオノリ属：スジアオノリ、ウスバア
オノリ、ヒラアオノリ、ボウアオノリ，カワノリ属：カ
ワノリ，フリッチエラ属，シオグサ属：オオシオグサ、
アサミドリシオグサ、カワシオグサ、マリモ，バロニア
属：タマゴバロニア、タマバロニア，マガタマモ属：マ
ガタマモ，イワヅタ属：フサイワヅタ、スリコギヅタ、
ヘライワヅタ、クロキヅタ，ハネモ属，ミル属：ミル、
クロミル、サキブチミル、ナガミル、ヒラミル，カサノ
リ属：カサノリ，ジュズモ属：フトジュズモ、タマジュ
ズモ、ミゾジュズモ，ミカヅキモ属，コレカエテ属，ツ
ヅミモ属，キッコウグサ属：キッコウグサ，アオミドロ
属：アオミドロ，ヒトエグサ属：ヒトエグサ、ヒロハノ
ヒトエグサ、ウスヒトエグサ、モツキヒトエ，サヤミド
ロ属，クンショウモ属，スミレモ属：スミレモ，ホシミ
ドロ属，フシナシミドロ属など）、藍藻類（スイゼンジ
ノリ属：スイゼンジノリ，アオコ属，ネンジュモ属：カ
ワタケ、イシクラゲ、ハッサイ，ユレモ属，ラセンモ
(スピルリナ)属：スピルリナ，トリコデスミウム(アイ
アカシオ)属など）、褐藻類（チガイソ属：チガイソ，
マツモ属：マツモ，ツルモ属：ツルモ，スギモク属：ス
ギモク，フクロノリ属：フクロノリ，スジメ属：スジ
メ，ムチモ属：ムチモ、ヒラムチモ，ウルシグサ属：ウ
ルシグサ、ケウルシグサ、タバコグサ，アミジグサ属：
アミジグサ，カジメ属：カジメ，アラメ属：アラメ，ハ
バノリ属：ハバノリ，ヒバマタ属：ヒバマタ，ヒジキ
属：ヒジキ，イシゲ属：イシゲ，コンブ属：マコンブ、
リシリコンブ、ミツイシコンブ、ナガコンブ、ホソメコ
ンブ、ガツガラコンブ、カキジマコンブ，オオウキモ
属：オオウキモ，イワヒゲ属：イワヒゲ，モズク属：モ
ズク，ブルウキモ属：ブルウキモ，ウミウチワ属：ウミ
ウチワ、コナウミウチワ、アカバウミウチワ，イソガワ
ラ属：イソガワラ，ホンダワラ属：マメダワラ、ウミト
ラノオ、アカモク、ノコギリモク、ホンダワラ，カヤモ
ノリ属：カヤモノリ，ケヤリ属：ケヤリ，フトモズク
属：フトモズク，ワカメ属：ワカメなど）、紅藻類（ユ
イキリ属：ユイキリ，カニノテ属：カニノテ，カワモズ
ク属：カワモズク、アオカワモズク、ヒメカワモズク，
カギノリ属：カギノリ，エゴノリ属：エゴノリ，イギス
属：イギス，ヤナギノリ属：ハナヤナギ，ツノマタ属：
ツノマタ，サンゴモ属：サンゴモ，イデユコゴメ属：イ
デユコゴメ，マクリ属：マクリ，キリンサイ属：キリン
サイ，テングサ科：マクサ、ヒラクサ，スギノリ属：ス
ギノリ，フノリ属：ハナフノリ、フクロフノリ、マフノ
リ，オゴノリ属：オゴノリ、カバノリ，ムカデノリ属：
ムカデノリ，オキツノリ属：オキツノリ，ベニモズク
属：ベニモズク，イバラノリ属：イバラノリ、サイダイ
バラ、タチイバラ、カギイバラノリ，ソゾ属：クロソ
ゾ、コブソゾ、ハネソゾ、ソゾノハナ，アヤニシキ属：
アヤニシキ，トサカノリ属：トサカノリ，オキチモズク
属：オキチモズク，ウミゾウメン属：ウミゾウメン，フ
ジマツモ属：フジマツモ，ダルス属：ダルス，イトグサ
属，アマノリ属：アサクサノリ、スサビノリ、ウップル
イノリ、オニアマノリ、タサ、フイリタサ、ベニタサ，
チノリモ属：チノリモ，フサノリ属：フサノリ，チスジ
ノリ属：チスジノリなど）、車軸藻類（シャジクモ属，
シラタマモ属，ホシツリモ属：ホシツリモ，リクノタム
ヌス属，フラスコモ属：ヒメフラスコモ、チャボフラス
コモ，トリペラ属など）、黄色藻類（ヒカリモ属：ヒカ
リモなど）においても同様に線維芽細胞増殖促進作用が
期待できる。

【０００９】

【発明の実施の形態】本発明で使用するクロレラ水抽出
物とは、クロレラ原体をそのまま或いは乾燥させて、水
や熱水で抽出したもので、応用する繊維芽細胞増殖促進
物質、皮膚外用剤及び浴用剤の形態により乾燥、濃縮、
或いは希釈等を任意に行い調整すれば良い。

【００１０】尚、製造方法は特に制限されるものではな
いが、通常、常温〜常圧下での溶媒の沸点の範囲であれ
ば良く、抽出後は濾過又はイオン交換樹脂を用い、吸着
・脱色・精製して溶液状、ペースト状、ゲル状、粉末状
とすれば良い。更に多くの場合は、そのままの状態で利
用できるが、必要ならば、その効力に影響のない範囲で
更に脱臭、脱色などの精製処理を加えても良く、脱臭・
脱色等の精製処理手段としては、活性炭カラムなどを用
いれば良く、抽出物質により一般的に適用される通常の
手段を任意に選択して行えば良い。

【００１１】本発明のクロレラ水抽出物は、そのまま繊
維芽細胞増殖促進物質として利用できる他、皮膚外用剤
及び浴用剤へ配合できるが、その配合量としては特に規
定するものではないが、繊維芽細胞増殖促進物質、化粧
料又は飲食品の種類、品質、期待される作用の程度によ
って若干異なるが、通常、０．０００５重量％以上（以
下、重量％で表わす）好ましくは３〜４０％が良い。
尚、配合量が０．０００５％より少ないと効果が充分期
待できない。

【００１２】尚、本発明の繊維芽細胞増殖促進物質、皮
膚外用剤及び浴用剤は、前記の必須成分に加え必要に応
じ、本発明の効果を損なわない範囲内で、医薬品類、医
薬部外品類、化粧品類などの製剤に使用される成分や添
加剤を併用して製造することができる。

【００１３】例えば、油脂類（アボガド油，アルモンド
油，ウイキョウ油，エゴマ油，オリブ油，オレンジ油，
オレンジラファー油，ゴマ油，カカオ脂，カミツレ油，
カロット油，キューカンバー油，牛脂，牛脂脂肪酸，ク
クイナッツ油，サフラワー油，大豆油，ツバキ油，トウ
モロコシ油，ナタネ油，パーシック油，ヒマシ油，綿実
油，落花生油，タートル油，ミンク油，卵黄油，カカオ
脂，パーム油，パーム核油，モクロウ，ヤシ油，牛脂，
豚脂，硬化油，硬化ヒマシ油など）

【００１４】ロウ類（ミツロウ，カルナバロウ，鯨ロ
ウ，ラノリン，液状ラノリン，還元ラノリン，硬質ラノ
リン，カンデリラロウ，モンタンロウ，セラックロウな
ど）

【００１５】鉱物油（流動パラフィン，ワセリン，パラ
フィン，オゾケライド，セレシン，マイクロクリスタン
ワックス，ポリエチレン末，スクワレン，スクワラン，
プリスタンなど）

【００１６】脂肪酸類（ラウリン酸，ミリスチン酸，パ
ルミチン酸，ステアリン酸，ベヘン酸，オレイン酸，１
２-ヒドロキシステアリン酸，ウンデシレン酸，トール
油，ラノリン脂肪酸などの天然脂肪酸、イソノナン酸，
カプロン酸，２−エチルブタン酸，イソペンタン酸，２
−メチルペンタン酸，２−エチルヘキサン酸，イソペン
タン酸などの合成脂肪酸）

【００１７】アルコール類（エタノール，イソピロパノ
ール，ラウリルアルコール，セタノール，ステアリルア
ルコール，オレイルアルコール，ラノリンアルコール，
コレステロール，フィトステロールなどの天然アルコー
ル、２−ヘキシルデカノール，イソステアリルアルコー
ル，２−オクチルドデカノールなどの合成アルコー
ル）、更に多価アルコール類（酸化エチレン，エチレン
グリコール，ジエチレングリコール，トリエチレングリ
コール，エチレングリコールモノエチルエーテル，エチ
レングリコールモノブチルエーテル，ジエチレングリコ
ールモノメチルエーテル，ジエチレングリコールモノエ
チルエーテル，ポリエチレングリコール，酸化プロピレ
ン，プロピレングリコール，ポリプロピレングリコー
ル，１，３−ブチレングリコール，グリセリン，バチル
アルコール，ペンタエリトリトール，ソルビトール，マ
ンニトール，ブドウ糖，ショ糖など）

【００１８】エステル類（ミリスチン酸イソプロピル，
パルミチン酸イソプロピル，ステアリン酸ブチル，ラウ
リン酸ヘキシル，ミリスチン酸ミリスチル，オレイン酸
オレイル，オレイン酸デシル，ミリスチン酸オクチルド
デシル，ジメチルオクタン酸ヘキシルデシル，乳酸セチ
ル，乳酸ミリスチル，フタル酸ジエチル，フタル酸ジブ
チル，酢酸ラノリン，モノステアリン酸エチレングリコ
ール，モノステアリン酸プロピレングリコール，ジオレ
イン酸プロピレングリコールなど）

【００１９】金属セッケン（ステアリン酸アルミニウ
ム，ステアリン酸マグネシウム，ステアリン酸亜鉛，ス
テアリン酸カルシウム，パルミチン酸亜鉛，ミリスチン
酸マグネシウム，ラウリン酸亜鉛，ウンデシレン酸亜鉛
など）

【００２０】ガム質及び水溶性高分子化合物（アラビア
ゴム，ベンゾインゴム，ダンマルゴム，グアヤク脂，ア
イルランド苔，カラヤゴム，トラガントゴム，キャロブ
ゴム，クインシード，寒天，カゼイン，デキストリン，
ゼラチン，ペクチン，デンプン，カラギーナン，カルボ
キシアルキルキチン又はキトサン，ヒドロキシアルキル
キチン又はキトサン，低分子キトサン，キトサン塩，硫
酸化キチンまたはキトサン，リン酸化キチン又はキトサ
ン，アルギン酸及びその塩，ヒアルロン酸及びその塩，
コンドロイチン硫酸，ヘパリン，エチルセルロース，メ
チルセルロース，カルボキシメチルセルロース，カルボ
キシエチルセルロース，カルボキシエチルセルロースナ
トリウム，ヒドロキシエチルセルロース，ヒドロキシプ
ロピルセルロース，ニトロセルロース，結晶セルロー
ス，ポリビニルアルコール，ポリビニルメチルエーテ
ル，ポリビニルピロリドン，ポリビニルメタアクリレー
ト，ポリアクリル酸塩，ポリエチレンオキサイドやポリ
プロピレンオキサイド等のポリアルキレンオキサイド又
はその架橋重合物，カルボキシビニルポリマー，ポリエ
チレンイミンなど）

【００２１】界面活性剤「アニオン界面活性剤（カルボ
ン酸塩，スルホン酸塩，硫酸エステル塩，リン酸エステ
ル塩）」、「カチオン界面活性剤（アミン塩，四級アン
モニウム塩）」、「両性界面活性剤：カルボン酸型両性
界面活性剤（アミノ型，ベタイン型），硫酸エステル型
両性界面活性剤，スルホン酸型両性界面活性剤，リン酸
エステル型両性界面活性剤」、「非イオン界面活性剤
（エーテル型非イオン界面活性剤，エーテルエステル型
非イオン界面活性剤，エステル型非イオン界面活性剤，
ブロックポリマー型非イオン界面活性剤，含窒素型非イ
オン界面活性剤）」、「その他の界面活性剤（天然界面
活性剤，タンパク質加水分解物の誘導体，高分子界面活
性剤，チタン・ケイ素を含む界面活性剤，フッ化炭素系
界面活性剤）」

【００２２】ビタミン類「ビタミンＡ群：レチノール，
レチナール（ビタミンＡ₁），デヒドロレチナール（ビ
タミンＡ₂），カロチン，リコピン（プロビタミン
Ａ）」、「ビタミンＢ群：チアミン塩酸塩，チアミン硫
酸塩（ビタミンＢ₁），リボフラビン（ビタミンＢ₂），
ピリドキシン（ビタミンＢ₆），シアノコバラミン（ビ
タミンＢ₁₂），葉酸類，ニコチン酸類，パントテン酸
類，ビオチン類，コリン，イノシトール類」、「ビタミ
ンＣ群：アスコルビン酸及びその誘導体」、「ビタミン
Ｄ群：エルゴカルシフェロール（ビタミンＤ₂），コレ
カルシフェロール（ビタミンＤ₃），ジヒドロタキステ
ロール」、「ビタミンＥ群：トコフェロール及びその誘
導体，ユビキノン類」、「ビタミンＫ群：フィトナジオ
ン（ビタミンＫ₁），メナキノン（ビタミンＫ₂），メナ
ジオン（ビタミンＫ₃），メナジオール（ビタミン
Ｋ₄）」やその他、フェルラ酸，γ−オリザノールなど

【００２３】アミノ酸（バリン，ロイシン，イソロイシ
ン，トレオニン，メチオニン，フェニルアラニン，トリ
プトファン，リジン，グリシン，アラニン，アスパラギ
ン，グルタミン，セリン，システイン，シスチン，チロ
シン，プロリン，ヒドロキシプロリン，アスパラギン
酸，グルタミン酸，ヒドロキシリジン，アルギニン，オ
ルニチン，ヒスチジンなどや，それらの硫酸塩，リン酸
塩，硝酸塩，クエン酸塩，あるいはピロリドンカルボン
酸の如きアミノ酸誘導体など）

【００２４】更に、動物組織或いは植物、生薬の抽出物
（植物類にあっては、水，有機溶媒（エタノール，プロ
ピレングリコール，１，３−ブチレングリコールなど）
の１種又は２種以上の混液で抽出されたエキスが望まし
い。又，動物組織にあっては，前記植物と同法により得
られるエキスの他，組織を加水分解して得られたエキス
などであっても良い。これらは保湿成分として，或いは
これまでに知られる種々の美容効果，医療的効果を目的
として用いられる。）、例えば，アセンヤク(阿仙薬)，
アシタバ，アセロラ，アルテア，アルニカ，アボカド，
アマチャ(甘茶)，アロエ，アロエベラ，イラクサ，イチ
ョウ(銀杏葉，銀杏)，ウイキョウ(茴香)，ウコン(鬱
金)，ウスバサイシン(細辛)，ウメ(烏梅)，ウラジロガ
シ，ウワウルシ，ノイバラ(営実)，ヒキオコシ(延命
草)，オウギ(黄耆)，コガネバナ(オウゴン)，ヤマザク
ラ(桜皮)，キハダ(黄柏)，オウレン(黄連)，オタネニン
ジン(人参)，オトギリソウ(弟切草)，オドリコソウ，オ
ランダガラシ，オレンジ，イトヒメハギ(遠志)，ウツボ
グサ(夏枯草)，ツルドクダミ(何首烏)，エンジュ(槐
花)，ヨモギ(ガイ葉)，ガジュツ(莪朮)，クズ(葛根)，
カノコソウ(吉草根)，カミツレ，キカラスウリ(瓜呂
根)，カワラヨモギ(茵チン蒿)，カンゾウ(甘草)，フキ
タンポポ（款冬花，款冬葉），キイチゴ，キウイ果実，
キキョウ(桔梗)，キク(菊花)，キササゲ(梓実)，ミカン
属植物果実(枳実)，タチバナ(橘皮)，キュウリ，ウドま
たはシシウド(羌活，独活)，アンズ(杏仁)，クコ(地骨
皮，枸杞子，枸杞葉)，クララ(苦参)，クスノキ，クマ
ザサ，グレープフルーツ果実，ニッケイ(桂皮)，ケイガ
イ(ケイガイ)，エビスグサ(決明子)，マルバアサガオ又
はアサガオ(ケン牛子)，，ベニバナ(紅花)，ゴバイシ
(五倍子)，コンフリー、コパイバ、クチナシ(山梔子)，
ゲンチアナ，ホオノキ(厚朴)，ヒナタイノコズチ(牛
膝)，ゴシュユ(呉茱萸)，ゴボウ，チョウセンゴミシ(五
味子)，米，米ぬか，コムギ，ミシマサイコ(柴胡)，サ
フラン，サボンソウ，サンザシ(山ザ子)，サンショウ
(山椒)，サルビア，サンシチニンジン(三七人参)，シイ
タケ（椎茸），ジオウ(地黄)，シクンシ(使君子)，ムラ
サキ(紫根)，シソ(紫蘇葉，紫蘇子)，カキ(柿蒂)，シャ
クヤク(芍薬)，オオバコ(車前子，車前草)，ショウガ
(生姜)，ショウブ(菖蒲)，トウネズミモチ(女貞子)，シ
モツケソウ，シラカバ，スイカズラ(金銀花，忍冬)，セ
イヨウキヅタ，セイヨウノコギリソウ，セイヨウニワト
コ，アズキ(赤小豆)，ニワトコ(接骨木)，ゼニアオイ，
センキュウ(川キュウ)，センブリ(当薬)，クワ(桑白
皮，桑葉)，ナツメ(大棗)，ダイズ，タラノキ，チクセ
ツニンジン(竹節人参)，ハナスゲ(知母)，ワレモコウ
(地楡)，ドクダミ(十薬)，フユムシナツクサタケ(冬虫
夏草)，トウガラシ，ホオズキ(登呂根)，タチジャコウ
ソウ，リョクチャ(緑茶)，コウチャ(紅茶)，チョウジ
(丁子)，ウンシュウミカン(陳皮)，ツバキ，ツボクサ，
トウガラシ(番椒)，トウキ(当帰)，トウキンセンカ，ダ
イダイ(橙皮)，ワレモコウ(地楡)，トウモロコシ(南蛮
毛)，トチュウ(杜仲，杜仲葉)，トマト，ナンテン(南天
実)，ニンニク(大サン)，オオムギ(麦芽)，ハクセン(白
蘚皮)，ジャノヒゲ(麦門冬)，パセリ，バタタ，ハッカ
(薄荷)，ハマメリス，バラ，ビワ葉(枇杷葉)，マツホド
(茯リョウ)，ブドウまたはその葉，ヘチマ，ボダイジ
ュ，ボタン(牡丹皮)，ホップ，マイカイ(マイ瑰花)，松
葉，マロニエ，マンネンロウ，ムクロジ，メリッサ，メ
リロート，ボケ(木瓜)，モヤシ，モモ(桃仁，桃葉)，ヒ
オウギ(射干)，ビンロウジュ(檳ロウ子)，メハジキ(益
母草)，ヤグルマギク，ユキノシタ(虎耳草)，ヤマモモ
(楊梅皮)，ヤシャブシ（矢車），ハトムギ(ハトムギ，
ヨクイニン)，モウコヨモギ，ヤマヨモギ，ラベンダ
ー，リンゴ果実，マンネンタケ(霊芝)，レモン果実，レ
ンギョウ(連翹)，レンゲソウ，ゲンノショウコ(老鸛
草)，ハシリドコロ(ロート根)，鶏トサカ，牛・人の胎
盤抽出物，豚・牛の胃，十二指腸，或いは腸の抽出物若
しくはその分解物，水溶性コラーゲン，水溶性コラーゲ
ン誘導体，コラーゲン加水分解物，エラスチン，エラス
チン加水分解物，水溶性エラスチン誘導体，シルク蛋
白，シルク蛋白分解物，牛血球蛋白分解物など）

【００２５】微生物培養代謝物（酵母エキス，亜鉛含有
酵母エキス，ゲルマニウム含有酵母エキス，セレン含有
酵母エキス，マグネシウム含有酵母エキス，米醗酵エキ
ス，ユーグレナ抽出物，脱脂粉乳の乳酸発酵物など）や
α−ヒドロキシ酸（グリコール酸，クエン酸，リンゴ
酸，酒石酸，乳酸など）

【００２６】無機顔料（無水ケイ酸，ケイ酸マグネシウ
ム，タルク，カオリン，ベントナイト，マイカ，雲母チ
タン，オキシ塩化ビスマス，酸化ジルコニウム，酸化マ
グネシウム，酸化亜鉛，酸化チタン，炭酸カルシウム，
炭酸マグネシウム，黄酸化鉄，ベンガラ，黒酸化鉄，グ
ンジョウ，酸化クロム，水酸化クロム，カーボンブラッ
ク，カラミンなど）

【００２７】紫外線吸収剤（ｐ−アミノ安息香酸誘導
体，サルチル酸誘導体，アントラニル酸誘導体，クマリ
ン誘導体，アミノ酸系化合物，ベンゾトリアゾール誘導
体，テトラゾール誘導体，イミダゾリン誘導体，ピリミ
ジン誘導体，ジオキサン誘導体，カンファー誘導体，フ
ラン誘導体，ピロン誘導体，核酸誘導体，アラントイン
誘導体，ニコチン酸誘導体，ビタミンＢ₆誘導体，オキ
シベンゾン，ベンゾフェノン，グアイアズレン，シコニ
ン，バイカリン，バイカレイン，ベルベリン等）

【００２８】収斂剤（乳酸，酒石酸，コハク酸，クエン
酸，アラントイン，塩化亜鉛，硫酸亜鉛，酸化亜鉛，カ
ラミン，ｐ−フェノールスルホン酸亜鉛，硫酸アルミニ
ウムカリウム，レソルシン，塩化第二鉄，タンニン酸な
ど）

【００２９】抗酸化剤（アスコルビン酸及びその塩，ス
テアリン酸エステル，トコフェロール及びそのエステル
誘導体，ノルジヒドログアセレテン酸，ブチルヒドロキ
シトルエン（ＢＨＴ），ブチルヒドロキシアニソール
（ＢＨＡ），パラヒドロキシアニソール，没食子酸プロ
ピル，セサモール，セサモリン，ゴシポールなど）

【００３０】抗炎症剤（イクタモール，インドメタシ
ン，カオリン，サリチル酸，サリチル酸ナトリウム，サ
リチル酸メチル，アセチルサリチル酸，塩酸ジフェンヒ
ドラミン，ｄ又はｄｌ−カンフル，ヒドロコルチゾン，
グアイアズレン，カマズレン，マレイン酸クロルフェニ
ラミン，グリチルリチン酸及びその塩，グリチルレチン
酸及びその塩など）

【００３１】殺菌・消毒薬（アクリノール，イオウ，塩
化ベンザルコニウム，塩化ベンゼトニウム，塩化メチル
ロザニリン，クレゾール，グルコン酸カルシウム，グル
コン酸クロルヘキシジン，スルファミン，マーキュロク
ロム，ラクトフェリン又はその加水分解物など）

【００３２】頭髪用剤（二硫化セレン，臭化アルキルイ
ソキノリニウム液，ジンクピリチオン，ビフェナミン，
チアントール，カスタリチンキ，ショウキョウチンキ，
トウガラシチンキ，塩酸キニーネ，強アンモニア水，臭
素酸カリウム，臭素酸ナトリウム，チオグリコール酸な
ど）

【００３３】香料（ジャコウ，シベット，カストリウ
ム，アンバーグリスなどの天然動物性香料、アニス精
油，アンゲリカ精油，イランイラン精油，イリス精油，
ウイキョウ精油，オレンジ精油，カナンガ精油，カラウ
ェー精油，カルダモン精油，グアヤクウッド精油，クミ
ン精油，黒文字精油，ケイ皮精油，シンナモン精油，ゲ
ラニウム精油，コパイババルサム精油，コリアンデル精
油，シソ精油，シダーウッド精油，シトロネラ精油，ジ
ャスミン精油，ジンジャーグラス精油，杉精油，スペア
ミント精油，西洋ハッカ精油，大茴香精油，チュベロー
ズ精油，丁字精油，橙花精油，冬緑精油，トルーバルサ
ム精油，バチュリー精油，バラ精油，パルマローザ精
油，檜精油，ヒバ精油，白檀精油，プチグレン精油，ベ
イ精油，ベチバ精油，ベルガモット精油，ペルーバルサ
ム精油，ボアドローズ精油，芳樟精油，マンダリン精
油，ユーカリ精油，ライム精油，ラベンダー精油，リナ
ロエ精油，レモングラス精油，レモン精油，ローズマリ
ー精油，和種ハッカ精油などの植物性香料、その他合成
香料など）

【００３４】色素・着色剤（赤キャベツ色素，赤米色
素，アカネ色素，アナトー色素，イカスミ色素，ウコン
色素，エンジュ色素，オキアミ色素，柿色素，カラメ
ル，金，銀，クチナシ色素，コーン色素，タマネギ色
素，タマリンド色素，スピルリナ色素，ソバ全草色素，
チェリー色素，海苔色素，ハイビスカス色素，ブドウ果
汁色素，マリーゴールド色素，紫イモ色素，紫ヤマイモ
色素，ラック色素，ルチンなど）

【００３５】甘味料（砂糖，甘茶，果糖，アラビノー
ス，ガラクトース，キシロース，マンノース，麦芽糖，
蜂蜜，ブドウ糖，ミラクリン，モネリンなど）

【００３６】栄養強化剤（貝殻焼成カルシウム，シアノ
コラバミン，酵母，小麦胚芽，卵黄粉末，ヘミセルロー
ス，ヘム鉄など）

【００３７】乳製品（牛乳，チーズ，生クリーム，バタ
ー，マーガリン，粉乳，ホエー，練乳など）

【００３８】その他、保湿剤、ホルモン類、金属イオン
封鎖剤、ｐＨ調整剤、キレート剤、防腐・防バイ剤、清
涼剤、安定化剤、乳化剤、動・植物性蛋白質及びその分
解物、動・植物性多糖類及びその分解物、動・植物性糖
蛋白質及びその分解物、血流促進剤、消炎剤・抗アレル
ギー剤、細胞賦活剤、角質溶解剤、創傷治療剤、増泡
剤、増粘剤、口腔用剤、消臭・脱臭剤、苦味料、調味
料、酵素などが上げられ、本発明の繊維芽細胞増殖促進
物質と今日までに知られている繊維芽細胞増殖促進作用
を有する成分との併用によっては、相加的及び相乗的な
繊維芽細胞増殖促進作用が期待できる。

【００３９】又、本発明の繊維芽細胞増殖促進物質、更
に皮膚外用剤及び浴用剤の剤型は任意であり、アンプル
状、カプセル状、粉末状、顆粒状、丸剤、錠剤状、固形
状、液状、ゲル状、気泡状、乳液状、クリーム状、軟膏
状、シート状などの医薬品類、医薬部外品類、皮膚・頭
髪用化粧品類及び浴用剤に配合して用いることができ
る。

【００４０】具体的には、例えば、内用・外用薬用製
剤、化粧水、乳液、クリーム、軟膏、ローション、オイ
ル、パックなどの基礎化粧料、洗顔料や皮膚洗浄料、シ
ャンプー、リンス、ヘアートリートメント、ヘアクリー
ム、ポマード、ヘアスプレー、整髪料、パーマ剤、ヘア
ートニック、染毛料、育毛・養毛料などの頭髪化粧料、
ファンデーション、白粉、おしろい、口紅、頬紅、アイ
シャドウ、アイライナー、マスカラ、眉墨、まつ毛など
のメークアップ化粧料、美爪料などの仕上げ用化粧料、
香水類、浴用剤、その他、歯磨き類、口中清涼剤・含嗽
剤、液臭・防臭防止剤、衛生用品、衛生綿類、ウエット
ティシュなどが上げられ、その他、一般的な飲食品類へ
の使用も可能である。

【００４１】尚、本発明のクロレラ抽出物含有抗繊維芽
細胞増殖促進物質、皮膚外用剤及び浴用剤への添加の方
法については、予め加えておいても、製造途中で添加し
ても良く、作業性を考えて適宜選択すれば良い。

【００４２】

【実施例】以下に、製造例、試験例、処方例を上げて説
明するが、本発明がこれらに制約されるものではない。

【００４３】（製造例１）クロレラ原末100gを水（約80
℃）にて約４時間加温抽出し、吸引濾過して抽出液（乾
燥固形分0.4〜0.7重量％）を約1kg得る。

【００４４】（製造例２）クロレラ原末100gを水（約90
℃）にて約２ー３時間加温抽出後、0.22μｍフィルター
（東洋製紙製）にて無菌濾過し、得られた抽出液を乾燥
して粉末（乾燥固形分0.4〜0.6重量％）を約10.0g得
る。

【００４５】（試験１）繊維芽細胞増殖促進作用の評価 本発明者は、皮膚の正常線維芽細胞をもとにし、ＭＴＴ
還元法を用いて、細胞増殖促進作用を評価することとし
た。

【００４６】（試験方法）尚、ＭＴＴ還元法とは、細胞
毒性及び細胞賦活評価法（成長及び生存細胞の迅速な色
彩定量：Tim Mosmann；Journal of Immunological Met
hods p55-63(1983)参考）の一つであり、ＭＴＴ（3-(4,
5-Dimetyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyltetrazolium Bro
mide)が細胞に取り込まれ、細胞内のミトコンドリアに
存在するNADHによって還元され開裂し、水不溶性のブル
ーホルマザンを生成する性質を利用したもので、このブ
ルーホルマザンを酸性イソプロパノールに溶解させ、そ
の吸光度を測定するものである。即ち、このブルーホル
マザン量がミトコンドリアの絶対量として表されるため
経日的に変化するブルーホルマザン量を細胞数として計
算した。

【００４７】（試験２）繊維芽細胞増殖促進作用の定量 更に本発明者は、目的物質を加えない対称群の細胞増殖
率を培養液に加える牛胎児血清の濃度を調整し、ゼロ近
くに抑制することにより、目的物質の細胞増殖促進作用
を定量的に表現できることを確立した。以下、具体的な
試験法について述べる。

【００４８】（試験方法）５％ＦＣＳ（牛胎児血清）含
有ＭＥＭ培地を用い、ヒト皮膚線維芽細胞（ＮＢ１ＲＧ
Ｂ 理研ジーンバンク・細胞開発銀行より購入）を２×
10⁴Cell/Wellの密度で96Wells plateに分注し、24時間
５％CO₂、37℃の条件で培養した。その後培地を0.05％Ｍ
ＴＴ濃度５％ＦＣＳ含有ＭＥＭ培地に交換し、４時間５
％CO₂、37℃の条件でインキュベイトして、培地を取り除
き、酸性イソプロパノールを加えマイクロプレートリー
ダーにて５７０−６２０ｎｍの吸光度を求めた。又、前
日同様に細胞を分注したマイクロプレートについては培
地を、各種濃度のＦＣＳ含有ＭＥＭ溶液に培地交換し、
培養した。尚、各種濃度のＦＣＳ含有ＭＥＭ培地で培養
中細胞を死滅させることなく、又、細胞増殖を認めない
最善の条件を満たす最小量を検討した。

【００４９】（試験結果）結果は図１の如く、添加する
ＦＣＳ濃度は培養液中０．５％において、細胞を死滅さ
せることなく、又、細胞増殖も認めない最善の条件であ
ることを確認した。

【００５０】

【図１】

【００５１】（試験３）繊維芽細胞増殖促進試験 （試験方法） ａ．繊維芽細胞増殖促進の測定 上記、試験２で確認した０．５％濃度ＦＣＳ含有ＭＥＭ
培地に固形分濃度を0.05重量％となるようにクロレラ粉
末を精製水にて溶解した検体100μＬを１Well中に加
え、試験２と同様な操作を行い、試験１のＭＴＴ還元法
により細胞数として測定した。尚、図１で指標とした、
０．５％濃度ＦＣＳ含有ＭＥＭ培地をコントロールとし
て、比較検討した。

【００５２】（試験結果）図２のごとく、本発明のクロ
レラ水抽出物は、コントロールに対して繊維芽細胞増殖
促進作用を有することが確認できた。

【００５３】

【図２】

【００５４】（試験４）安全性試験 （１）皮膚一次刺激性試験 製造例１〜２で得られた抽出液及び粉末を乾燥固形分濃
度が約0.5重量％となるように精製水にて調製し、背部
を剪毛した日本白色家兎（雌性，１群３匹，体重2.3kg
前後）の皮膚に適用した。判定は、適用後24,48,72時間
に一次刺激性の評点法にて紅斑及び浮腫を指標として行
った。その結果は、すべての動物において、何等、紅斑
及び浮腫を認めず陰性と判定された。

【００５５】（試験５）安全性試験 （２）皮膚累積刺激性試験 同様に製造例１〜２で得られた抽出液及び粉末を乾燥固
形分濃度が約0.5重量％となるように精製水にて調製
し、側腹部を剪毛したハートレー系モルモット（雌性，
１群３匹，体重320g前後）の皮膚に１日１回、週５回，
0.5ml／匹を塗布した。塗布は２週に渡って行い、剪毛
は各週の最終塗布日に行った。判定は、各塗布日及び最
終塗布日の翌日に一次刺激性の評点法にて紅斑及び浮腫
を指標として行った。その結果は、すべての動物におい
て、２週間に渡って何等、紅斑及び浮腫を認めず陰性と
判定された。

【００５６】（試験６）安全性試験 （３）急性毒性試験 同様に製造例２で得られた粉末（乾燥固形分約0.5重量
％）のクロレラ水抽出粉末を試験前、４時間絶食させた
ddy系マウス（雄性及び雌性，１群５匹，５週齢）に2,0
00mg／kg量経口投与し、毒性症状の発現、程度などを経
時的に観察した。その結果、すべてのマウスにおいて14
日間何等異状を認めず、又、解剖の結果も異状がなかっ
た。よって、LD₅₀は2,000mg／kg以上と判定された。

【００５７】（処方例）各種繊維芽細胞増殖剤・皮膚外
用剤・浴用剤の製造 上記の評価結果に従い、以下にその処方例を示すが、各
処方例は各製品の製造における常法により製造したもの
で良く、配合量のみを示した。又、本発明はこれらに限
定されるわけではない。

【００５８】 （処方例１）乳液 重量％ 1.スクワラン 5.0 2.オリーブ油 5.0 3.ホホバ油 5.0 4.セチルアルコール 1.5 5.グリセリンモノステアレート 2.0 6.ポリオキシエチレン(20)セチルエーテル 3.0 7.ポリオキシエチレン(20)ソオルビタンモノオレート 2.0 8.1,3-ブチレングリコール 1.0 9.グリセリン 2.0 10.クロレラ熱水抽出液(固形分0.5％) 3.0 11.香料，防腐剤 適量 12.精製水 100とする残余

【００５９】 （処方例２）ローション 重量％ 1.ソルビット 2.0 2.1.3-ブチレングリコール 2.0 3.ポリエチレングリコール1000 1.0 4.ポリオキシエチレンオレイルエーテル(25E.O.) 2.0 5.エタノール 10.0 6.クロレラ水抽出液(固形分0.3％) 10.0 7.ｐＨ調整剤 適量 8.防腐剤 適量 9.精製水 100とする残余

【００６０】 （処方例３）ピールオフパック 重量％ 1.グリセリン 5.0 2.プロピレングリコール 4.0 3.ポリビニルアルコール 15.0 4.エタノール 8.0 5.ポリオキシエチレングリコール 1.0 6.クロレラ水抽出液(固形分0.4％) 3.0 7.香料，防腐剤 適量 8.精製水 100とする残余

【００６１】 （処方例４）コールドクリーム 重量％ 1.サラシミツロウ 11.0 2.流動パラフィン 22.0 3.ラノリン 10.0 4.アーモンド油 15.0 5.ホウ砂 0.5 6.クロレラ熱水抽出液(固形分0.5％) 3.0 7.香料，防腐剤 適量 8.精製水 100とする残余

【００６２】 （処方例５）シャンプー 重量％ 1.ラウリル硫酸トリエタノールアミン 5.0 2.ポリオキシエチレンラウリルエーテル硫酸ナトリウム 12.0 3.1,3-ブチレングリコール 4.0 4.ラウリン酸ジエタノールアミド 2.0 5.エデト酸二ナトリウム 0.1 6.クロレラ熱水抽出液(固形分0.5％) 5.0 7.香料,防腐剤 適量 8.精製水 100とする残余

【００６３】 （処方例６）ボディーソープ 重量％ 1.ラウリン酸カリウム 15.0 2.ミリスチン酸カリウム 5.0 3.プロピレングリコール 5.0 4.クロレラ水抽出液(固形分0.4％) 5.0 5.ｐＨ調整剤 適量 6.防腐剤 適量 7.精製水 100とする残余

【００６４】 （処方例７）リンス 重量％ 1.塩化ステアリルトリメチルアンモニウム 2.0 2.セトステアリルアルコール 2.0 3.ポリオキシエチレンラノリンエーテル 3.0 4.プロピレングリコール 5.0 5.クロレラ水抽出液(固形分0.4％) 5.0 6.ｐＨ調整剤 適量 7.防腐剤 適量 8.精製水 100とする残余

【００６５】 （処方例８）ヘアーリキッド 重量％ 1.エタノール 29.0 2.ポリオキシプロピレンブチルエーテルリン酸 10.0 3.ポリオキシプロピレンモノブチルエーテル 5.0 4.トリエタノールアミン 1.0 5.クロレラ熱水抽出液(固形分0.6％) 5.0 6.防腐剤 適量 7.精製水 100とする残余

【００６６】 （処方例９）ヘアートニック 重量％ 1.エタノール 40.0 2.オレイン酸エチル 1.0 3.ポリオキシエチレン(40)硬化ヒマシ油 2.0 4.クロレラ熱水抽出液(固形分0.5％) 5.0 5.精製水 100とする残余

【００６７】 （処方例１０）顆粒浴用剤 重量％ 1.炭酸水素ナトリウム 61.0 2.無水硫酸ナトリウム 35.0 3.ホウ砂 3.0 4.クロレラ熱水抽出液乾燥粉末(固形分0.5％) 3.0

【００６８】 （処方例１１）果汁飲料 重量％ 1.ブドウ糖液糖 33.0 2.グレープフルーツ果汁 63.0 3.香料 0.5 4.クロレラ水抽出液乾燥粉末(固形分0.4％) 3.0 5.酸味料 適量

【００６９】（処方例１２）被覆保護剤 ガーゼ又はリニメント布にクロレラ熱水抽出液(固形分
0.5％)・抗生物質・抗炎症など適量を混合した処方液を
含浸させ、外傷部に添付する。又、クロレラ抽出物を直
接、局所に散布し、ガーゼなどで被覆しても良い。

【００７０】（試験７）使用効果試験 本発明のクロレラ水抽出物を含有する皮膚外用剤及び浴
用剤を実際に使用した場合の効果について検討を行っ
た。使用テストは乾燥ぎみの肌や湿疹，じんましん，ア
トピー性皮膚炎などの皮膚疾患で悩む２〜３０歳の２０
名をパネラーとし、毎日、朝と夜の２回、洗顔後に処方
例１の乳液の適量を顔面に３ヶ月に渡って塗布すること
により行った。又、頭皮や髪の生え際に同様の皮膚疾患
が見られる２０名（２〜３０歳）についても、毎日の洗
髪後、処方例９のヘアートニックの適量を頭皮に２ヶ月
に渡って塗布することにより使用テストを実施した。

【００７１】更に、処方例１０のクロレラ水抽出物を含
有する浴用剤についても、乾燥ぎみの肌や湿疹，じんま
しん，アトピー性皮膚炎などの皮膚疾患で悩む、１〜６
５歳の２０名を対象に、３ヶ月間、必ず１日１回適量の
浴用剤を溶解させた浴湯に入浴してもらい、使用テスト
を実施した。対照には、乳液，ヘアートニック，浴用剤
からクロレラ水抽出物を除いたものを同様な方法にて処
方したものを用いた。又、評価方法は下記の基準にて行
い、結果は表１のごとくで表中の数値は人数を表す。
尚、使用期間中に皮膚又は頭皮の異常を訴えた者はなか
った。

【００７２】「皮膚（頭皮）疾患改善効果」 有 効：湿疹などの炎症に伴う赤みやかゆみ、乾燥
肌、肌荒れが改善された。 やや有効：湿疹などの炎症に伴う赤みやかゆみ、乾燥
肌、肌荒れがやや改善された。 無 効：使用前と変化なし。

【００７３】（試験結果）表１のごとく、本発明のクロ
レラ水抽出物含有皮膚外用剤及び浴用剤の使用は、湿疹
による炎症、かゆみ、乾燥肌、肌荒れなどの皮膚疾患に
対して、良好な効果が確認された。

【００７４】

【表１】

【００７５】

【発明の効果】本発明のクロレラ水抽出物は、正常細胞
による繊維芽細胞増殖促進作用を顕著に有することは明
らかであり、更に細胞毒性を示さないので、人又は動物
に対して内用又は外用しても安全なものである。従っ
て、繊維芽細胞増殖促進物質として利用でき、湿疹、肌
荒れ、肌の乾燥、アトピー性皮膚炎などの皮膚疾患や皮
膚及び真皮の発育促進、皮膚の老化防止、並びに創傷治
癒促進などを目的とした、皮膚・頭皮、口腔、眼、耳、
鼻、肛門、陰部などの様々な外傷に対しての予防、治療
に有効的である。更に、あらゆる形態の製剤（医薬品
類、医薬部外品類、化粧品類）への応用も可能であり、
本発明のクロレラ水抽出物含有皮膚外用剤及び浴用剤
は、湿疹による炎症、かゆみ、皮膚のカサツキ、肌荒れ
などの皮膚・頭皮に対して、その予防及び改善を目的と
して使用することもできる。

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は、本発明のコントロールとして条件設定
する際に、指標として用いた、各種濃度のＦＣＳ（牛胎
児血清）含有のＭＥＭ培地中で培養した時のヒト皮膚線
維芽細胞増殖曲線を示す。

【図２】図２は、コントロール（０．５％濃度ＦＣＳ
（牛胎児血清）含有のＭＥＭ培地）と本発明のクロレラ
水抽出物を添加した際のヒト皮膚線維芽細胞増殖曲線を
示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ６１Ｋ 7/08 Ａ６１Ｋ 7/48 7/48 7/50 7/50 35/80 ＡＤＡ 35/80 ＡＤＡ ＡＤＴＡ ＡＤＴ Ａ２３Ｌ 2/00 Ｚ

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】クロレラ水抽出物を含有することを特徴と
   する線維芽細胞増殖促進物質。
2. 【請求項２】線維芽細胞増殖促進作用を有する、クロレ
   ラ水抽出物を含有することを特徴とする皮膚外用剤及び
   浴用剤。