JP2022510604A

JP2022510604A - 抗ｉｌ－２５抗体およびその使用

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Publication number: JP2022510604A
Application number: JP2021528846A
Authority: JP
Inventors: リ・グオ; ティアンティアン・スン; シャオシュ・チ; チェン・ドン
Original assignee: Suzhou Kanova Biopharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Suzhou Kanova Biopharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2018-11-19
Filing date: 2018-11-19
Publication date: 2022-01-27
Anticipated expiration: 2038-11-19
Also published as: AU2018450414A2; EP3883965A4; AU2018450414A1; KR20210087487A; US20210332123A1; CN112638940B; CN112638940A; EP3883965A1; WO2020102935A1; JP7184310B2; KR102598319B1

Abstract

本発明は、（ヒト）ＩＬ－２５に対する抗ＩＬ－２５抗体、前記抗体をコードする核酸、前記抗体を含む組成物、特に医薬組成物、および前記抗体と組成物の使用に関する。

Description

ＩＬ－２５は、主にＩＬ－１７Ｅとして知られている２０ＫＤａのタンパク質であり、１４番染色体にコードされており、１１７アミノ酸を含んでいる。サイトカインＩＬ－１７ファミリーは、ＩＬ－１７ＡからＩＬ－１７Ｆまでの６つのメンバーで構成されているが、その中でもＩＬ－２５（即ち、ＩＬ－１７Ｅ）はユニークな構造と機能を持っている（ＩｗａＫｕｒａＹ，ｅｔａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ２０１１；３４：１４９－１６２；ＣｈａｎｇＳＨ，ＤｏｎｇＣ．ＣｅｌｌＳｉｇｎａｌ２０１１；２３：１０６９－１０７５．）。ＩＬ－２５の受容体（ＩＬ－１７ＢＲ）は、主にＴｈ２細胞で高発現している（ＲｏｕｖｉｅｒＥ，ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９３；１５０：５４４５－５４５６）。ＩＬ－２５は、アレルギー疾患の始まりにつながる適応免疫反応の内部安全性を調節し、肺粘膜細胞や線維芽細胞の刺激に役割を果たしている。また、ＩＬ－２５は、他のサイトカインの産生にも影響を及ぼすことがある。例えば、ヒトや、マウスにおけるＩＬ－２５の産生、又は動物へのＩＬ－２５の注射により、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－１３などのＴｈ２サイトカインが高濃度に産生される。また、ＩＬ－２５のｍＲＮＡはＴｈ２細胞に高発現していることも、試験的に示された。ＩＬ－２５がアレルギー性炎症に関与する強力な炎症性サイトカインタンパクであることは、多くの研究グループが報告した（ＦｏｒｔＭＭ，ｅｔａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ２００１；１５：９８５－９９５，ＰａｎＧ，ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００１；１６７：６５５９－６５６７；ＫｉｍＭ，ｅｔａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，２００２；１００：２３３０－２３４０）。

アレルギー疾患の多くは、２型免疫系の不調に起因する。いくつかの研究により、Ｔｈ２細胞と粘膜細胞、マクロファージ、好酸球、好塩基球および肺上皮細胞がＩＬ－２５の隠れた生産者であることが確認されている（ＲｏｕｖｉｅｒＥ，ｅｔａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ，１９９３，１５０：５４４５－５４５６）。喘息モデルマウスにおいて、ＩｇＥに関連した乳腺細胞を活性化した後、ＩＬ－２５とＩｇＥの間に横の関係が観察された。このような知見によると、喘息患者の肺感染から２４時間後に最も高い産生が見られた。気道のマクロファージによるＩＬ－２５の産生が、肺の炎症反応の調節に関与している可能性が示唆されている。（ＷａｎｇｙＹＨ，ｅｔａｌ．，Ｊ．ＥｘｐＭｅｄ．２００７；２０４：１８３７－４７）。

ＲＳウイルス（ＲｅｓｐｉｒａｔｏｒｙＳｙｎｃｙｔｉａｌＶｉｒｕｓ、ＲＳＶ）は、子供の喘息の進行リスクを高めると考えている。これまでに、ＲＳＶに罹患した子供たちのＮＫ細胞の欠損と減少の影響について、いくつかの研究が行われてきた。しかし、重要なのは、ＲＳＶ感染によるＮＫ細胞の減少が、どのようにしてＩＮＦ－α産生の抑制、Ｔｈ２の進行、ＩＬ－２５の増加につながり、最終的にアレルギー疾患を引き起こすのかということである（ＳｉｍｏｅｓＥＡ，ｅｔａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ．１９９９；３５４：８４７－５２）。また、２０１０年にＧｅｒａｒｄＡｉｅらが行った研究から、Ｔｈ２反応の亢進と気道上皮細胞由来のＩＬ－２５の影響により、ＤＣ細胞でのｎｏｔｃｈリガンドｊａｇｇｅｄの発現が亢進し、炎症や喘息が引き起こされることが示された（ＧｅｒａｒｄＥＫａｉＫｏ，ｅｔａｌ．，ＪＩｍｍｕｎｏｌ．２０１０；１８５：４６８１－４６８９）。

さらに、いくつかのヒトの研究では、軽度のアトピー性喘息患者（ｎ＝５～１０）のアレルゲン吸入チャレンジ前と２４時間後の気管支生検、およびアトピー患者（ｎ＝５～１０）のアレルゲン表皮下注射後７２時間までの皮膚生検において、ＩＬ－２５およびＩＬ－２５Ｒの免疫反応性細胞の数と表現型を評価するために、逐次的な単一および二重免疫染色が行われた。その結果、ＩＬ－２５の免疫反応は、ベースラインでは両臓器の表皮細胞の大部分に発現しており、チャレンジによってさらに増強されなかった。ＩＬ－２５Ｒの免疫反応性細胞は、チャレンジの前後で表皮にはほとんど見られなかった。アレルゲンのチャレンジは、両つの臓器の粘膜下層において、ＩＬ－２５およびＩＬ－２５Ｒの免疫反応性の発現の有意な増加（Ｐ＜０．０１）に関連している。ＩＬ－２５免疫反応性は、好酸球、マスト細胞、内皮細胞と同じ位置で、ＩＬ－２５Ｒ免疫反応は好酸球、マスト細胞、内皮細胞、Ｔリンパ球と同じ位置で局在した。両つの臓器において、ＩＬ－２５発現の増加は、アレルゲンで誘発した後期臨床反応の程度との相関性が認められた（ＣｏｒｒｉｇａｎＣＪ，ｅｔａｌ．，Ｊ．ＡｌｌｅｒｇｙＣｌｉｎＩｍｍｕｎｏｌ，２０１１；１２８：１１７－１２４）。

ＩｗａＫｕｒａＹ，ｅｔａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ２０１１；３４：１４９－１６２ＣｈａｎｇＳＨ，ＤｏｎｇＣ．ＣｅｌｌＳｉｇｎａｌ２０１１；２３：１０６９－１０７５ＲｏｕｖｉｅｒＥ，ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９３；１５０：５４４５－５４５６ＦｏｒｔＭＭ，ｅｔａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ２００１；１５：９８５－９９５ＰａｎＧ，ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００１；１６７：６５５９－６５６７ＫｉｍＭ，ｅｔａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，２００２；１００：２３３０－２３４０ＲｏｕｖｉｅｒＥ，ｅｔａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ，１９９３，１５０：５４４５－５４５６ＷａｎｇｙＹＨ，ｅｔａｌ．，Ｊ．ＥｘｐＭｅｄ．２００７；２０４：１８３７－４７ＳｉｍｏｅｓＥＡ，ｅｔａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ．１９９９；３５４：８４７－５２ＧｅｒａｒｄＥＫａｉＫｏ，ｅｔａｌ．，ＪＩｍｍｕｎｏｌ．２０１０；１８５：４６８１－４６８９ＣｏｒｒｉｇａｎＣＪ，ｅｔａｌ．，Ｊ．ＡｌｌｅｒｇｙＣｌｉｎＩｍｍｕｎｏｌ，２０１１；１２８：１１７－１２４

しかし、乳房における原腫瘍免疫と抗腫瘍免疫の制御における白血球の機能的意義については、まだ十分に理解されていない。乳腺癌のＭＭＴＶ－ＰｙＭＴモデルを用いて、ＩＬ－４を発現するＣＤ４＋Ｔリンパ球が、腫瘍関連のＣＤ１１ｂ＋Ｇｒ１－Ｆ４／８０＋マクロファージの表現型とエフェクター機能を直接制御することにより、乳腺癌の浸潤とその後の転移を間接的に促進し、さらに悪性乳腺上皮細胞の上皮成長因子受容体シグナルを活性化することにより転移を促進することを明らかにした。これらのデータを総合すると、抗腫瘍性の獲得免疫プログラムは、原腫瘍の微小環境で簒奪され、上皮細胞の行動を制御する自然免疫系の細胞構成要素を機能的に関与させることで、かえって悪性腫瘍を促進する可能性があることを示している。（ＤｅＮａｒｄｏＤＧ，ｅｔａｌ．，Ｃａｎｃｅｒｃｅｌｌ，２００９，１６：９１－１０２）。以上のことから、前記サイトカインは、喘息や自己免疫疾患の中のアレルギー性炎症の発生、がんの治療にも関与していると考えられる。

一態様では、本発明は、ネズミ抗ＩＬ－２５モノクローナル抗体１８Ｈ３を含む、ヒトＩＬ－２５に特異的に結合することができる抗体を提供するものである。より詳細には、本発明は、（ｉ）ネズミ抗体１８Ｈ３と競争して（ヒト）ＩＬ－２５に結合する、及び／又は（ｉｉ）１８Ｈ３と（ヒト）ＩＬ－２５の同じエピトープに結合する、及び／又は（ｉｉｉ）１８Ｈ３の（ヒト）ＩＬ－２５への結合をクロスブロックする、抗体に関するものである。

もう一つの態様では、本発明は、本発明の抗体をコードする、単離された核酸を提供するものである。

さらに一つの態様において、本発明は、前記核酸を含む宿主細胞を提供するものである。

さらにもう一つの態様では、本発明は、前記宿主細胞を、抗体が産生されるように培養することを含む、本発明の抗体を産生する方法を提供する。

もう一つの態様では、本発明は、本発明の抗体と、薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物を提供する。

もう一つの態様では、本発明は、さらに、有効量の本発明の抗体を被験者に投与することを含む、被験者におけるＩＬ－２５に関連した疾患の治療方法を提供する。

本発明はまた、被験者におけるＩＬ－２５に関連した疾患の薬剤の製造のための、本発明の抗体の使用を提供する。

具体的には、本発明は以下に関する。

［１］（ｉ）ネズミ抗体１８Ｈ３と競合して（ヒト）ＩＬ－２５に結合する、及び／又は（ｉｉ）１８Ｈ３と（ヒト）ＩＬ－２５の同じエピトープに結合する、及び／又は（ｉｉｉ）１８Ｈ３の（ヒト）ＩＬ－２５への結合をクロスブロックする、抗ＩＬ－２５抗体。

［２］前記抗体が、重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、該重鎖可変領域が、下記配列ａ）、ｂ）およびｃ）を含み、
ａ）下記（ｉ）又は（ｉｉ）を含み、又は実質的にからなるＣＤＲ１：（ｉ）アミノ酸配列ＧＦＳＬＳＴＳＧＭＧＬＧ（ＳＥＱＩＤＮＯ：１）、（ｉｉ）アミノ酸配列ＧＦＳＬＳＴＳＧＭＧＬＧ（ＳＥＱＩＤＮＯ：１）とのアミノ酸変異を３つ、２つ又は１つしか有しないアミノ酸配列、
ｂ）下記（ｉ）又は（ｉｉ）を含み、又は実質的にからなるＣＤＲ２、（ｉ）アミノ酸配列ＨＩＷＷＤＤＶＫＨＹＫＰＡＬＫＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ：２）、（ｉｉ）アミノ酸配列ＨＩＷＷＤＤＶＫＨＹＫＰＡＬＫＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ：２）とのアミノ酸変異を３つ、２つ又は１つしか有しないアミノ酸配列、
ｃ）下記（ｉ）又は（ｉｉ）を含み、又は実質的にからなるＣＤＲ３：（ｉ）アミノ酸配列ＭＧＱＬＨＹＹＧＹＤＹＡＭＤＹ（ＳＥＱＩＤＮＯ：３）、（ｉｉ）アミノ酸配列ＭＧＱＬＨＹＹＧＹＤＹＡＭＤＹ（ＳＥＱＩＤＮＯ：３）とのアミノ酸変異を３つ、２つ又は１つしか有しないアミノ酸配列、
且つ、
前記軽鎖可変領域が、下記配列ａ）、ｂ）およびｃ）を含む、前記［１］に記載の抗ＩＬ－２５抗体、
ａ）（ｉ）又は（ｉｉ）を含み、又は実質的にからなるＣＤＲ１、（ｉ）アミノ酸配列ＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹ（ＳＥＱＩＤＮＯ：４）、（ｉｉ）アミノ酸配列ＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹ（ＳＥＱＩＤＮＯ：４）とのアミノ酸変異を３つ、２つ又は１つしか有しないアミノ酸配列、
ｂ）下記（ｉ）又は（ｉｉ）を含み、又は実質的にからなるＣＤＲ２：（ｉ）アミノ酸配列ＲＴＳＮＬＡＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ：５）、（ｉｉ）アミノ酸配列ＲＴＳＮＬＡＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ：５）とのアミノ酸変異を３つ、２つ又は１つしか有しないアミノ酸配列、
ｃ）下記（ｉ）又は（ｉｉ）を含み、又は実質的にからなるＣＤＲ３、（ｉ）アミノ酸配列ＱＬＹＨＳＹＰＰＴＷＴ（ＳＥＱＩＤＮＯ：６）、（ｉｉ）アミノ酸配列ＱＬＹＨＳＹＰＰＴＷＴ（ＳＥＱＩＤＮＯ：６）とのアミノ酸変異を３つ、２つ又は１つしか有しないアミノ酸配列。

［３］前記重鎖可変領域が、アミノ酸配列ＧＦＳＬＳＴＳＧＭＧＬＧ（ＳＥＱＩＤＮＯ：１）を有するＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＨＩＷＷＤＤＶＫＨＹＫＰＡＬＫＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ：２）を有するＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＭＧＱＬＨＹＹＧＹＤＹＡＭＤＹ（ＳＥＱＩＤＮＯ：３）を有するＣＤＲ３を含み、
前記軽鎖可変領域が、アミノ酸配列ＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹ（ＳＥＱＩＤＮＯ：４）を有するＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＲＴＳＮＬＡＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ：５）を有するＣＤＲ２と、およびアミノ酸配列ＱＬＹＨＳＹＰＰＴＷＴ（ＳＥＱＩＤＮＯ：６）を有するＣＤＲ３を含む、前記［２］に記載の抗ＩＬ－２５抗体。

［４］前記重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２のアミノ酸配列と少なくとも７０％、例えば少なくとも８０％、例えば少なくとも８５％、例えば少なくとも９０％又は９５％以上の配列同一性を有し、及び／又は
軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１３のアミノ酸配列と少なくとも７０％、例えば少なくとも８０％、例えば少なくとも８５％、例えば少なくとも９０％又は９５％以上の配列同一性を有する、前記［１］～［３］のいずれか１項に記載の抗ＩＬ－２５抗体。

［５］前記重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：７、ＳＥＱＩＤＮＯ：８、ＳＥＱＩＤＮＯ：９またはＳＥＱＩＤＮＯ：１２のアミノ酸配列を含み、及び／又は
軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１またはＳＥＱＩＤＮＯ：１３のアミノ酸配列を含む、前記［１］～［４］のいずれか１項に記載の抗ＩＬ－２５抗体。

［６］下記ｉ）、ｉｉ）、ｉｉｉ）、ｉｖ）、ｖ）、ｖｉ）またはｖｉｉ）を特徴とする、前記［５］に記載の抗ＩＬ－２５抗体、
ｉ）重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：７のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０のアミノ酸配列を含むこと、
ｉｉ）重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：７のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１のアミノ酸配列を含むこと、
ｉｉｉ）重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：８のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０のアミノ酸配列を含むこと、
ｉｖ）重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：８のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１のアミノ酸配列を含むこと、
ｖ）重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：９のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０のアミノ酸配列を含むこと、
ｖｉ）重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：９のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１のアミノ酸配列を含むこと、
ｖｉｉ）重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１３のアミノ酸配列を含むこと。

［７］前記抗ＩＬ－２５抗体が、モノクローナル抗体、及び／又はネズミ抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体であり、好ましくはＩｇＧクラスに属する抗体である、前記［１］に記載の抗ＩＬ－２５抗体。

［８］前記抗ＩＬ－２５抗体が、（ヒト）ＩＬ－２５に結合する抗体断片であり、好ましくはＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ－ＳＨ、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ－Ｃ、Ｆａｂ’－Ｃ－ＳＨ、Ｆａｂ－Ｃ－ＳＨ、ｓｃＦｖ、ダイアボディ（ｄｉａｂｏｄｙ）、またはＦ（ａｂ’）２、ダイアボディ（ｄｉａｂｏｄｙ）、線形抗体、一本鎖抗体分子（例えばｓｃＦｖ）、及び抗体断片により形成された多重特異性抗体からなる群から選ばれる、前記［１］に記載の抗ＩＬ－２５抗体。

［９］前記［１］～［８］のいずれか１項に記載の抗体をコードする、単離された核酸。

［１０］前記［９］の核酸を含む、宿主細胞。

［１１］前記［１０］の宿主細胞を、抗体が産生されるように培養することを含む、前記［１］～［８］のいずれか１項に記載の抗体の製造方法。

［１２］前記［１］～［８］のいずれか１項に記載の抗体と、薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物。

［１３］前記［１］～［８］のいずれか１項に記載の抗体、前記［９］に記載の核酸、前記［１０］に記載の宿主細胞、または前記［１２］に記載の医薬組成物を有効量で被験者に投与することを含む、被験者におけるＩＬ－２５に関連した疾患の治療方法。

［１４］前記被験者が、哺乳類、好ましくはラット、マウス、サル、またはヒトである、前記［１３］に記載の方法。

［１５］前記ＩＬ－２５に関連した疾患が、ＩｇＥ、ＩＬ－４、ＩＬ－５及び／又はＩＬ－１３が過剰発現／過剰生産されている自己免疫疾患、炎症性疾患または癌から選択され、好ましくはアレルギー性（炎症性）疾患、より好ましくは喘息（例えば、アレルギー性喘息）、アトピー性皮膚炎、アトピー性アレルギー疾患、アレルギー性鼻炎、花粉症、アレルギー性結膜炎、湿疹、食物アレルギー、乾癬、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎、関節リウマチ（ＲＡ）、多発性硬化症（ＭＳ）、全身性エリテマトーデス、変形性関節症または炎症性腸疾患（ＩＢＤ）から選択される、前記［１３］または［１４］に記載の方法。

［１６］被験者におけるＩＬ－２５に関連した疾患の薬剤の製造のための、前記［１］～［８］のいずれか１項に記載の抗体、前記［９］に記載の核酸、前記［１０］に記載の宿主細胞または前記［１２］に記載の医薬組成物の使用。

［１７］被験者におけるＩＬ－２５に関連した疾患の治療方法に使用するための、前記［１］～［８］のいずれか１項に記載の抗体、前記［９］の核酸、前記［１０］の宿主細胞または前記［１２］の医薬組成物。

図１は、抗ＩＬ－２５抗体の発現および精製を示す図であり、実施例２に記載のように、その中、ＶＨ１－１－ＶＬ１－２は、可変重鎖ドメイン（ＶＨ１－１）および可変軽鎖ドメイン（ＶＬ１－２）により形成された抗体を表し、このような命名法は、他の抗体にも適用される。例えば、ＶＨ２－１－ＶＬ１－２はＶＨ２－１とＶＬ１－２により形成された抗体、ＶＨ２－１－ＶＬ２－１はＶＨ２－１とＶＬ２－１により形成された抗体、ＶＨ１－１－ＶＬ２－２はＶＨ１－１とＶＬ２－２により形成された抗体、ＶＨ１－２－ＶＬ２－１はＶＨ１－２とＶＬ２－１により形成された抗体をそれぞれ表す。図２は、実施例４に記載のように、抗ＩＬ－２５抗体の、ヒトＩＬ－２５（ｈＩＩ２５－ＨＩＳ）に対する結合をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す図である。ヒトＩｇＧ１（ｈＩｇＧ１）を対照抗体として用いた。ＥＣ５０/ＩＣ５０値はＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍにより算出した。図３は、実施例５に記載のように、抗ＩＬ－２５抗体が、ヒトＩＬ－２５によって刺激された炎症性サイトカインＣＸＣＬ１の産生をブロックすることを示す。対照抗体として、ヒトＩｇＧ１（ｈＩｇＧ１）およびネズミＩｇＧ１（ｍＩｇＧ１）を用いた。ＥＣ５０/ＩＣ５０値はＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍにより算出した。図４は、実施例６および７に記載のように、抗ＩＬ－２５抗体がヒトＩＬ－２５に結合した同時、ＥＬＩＳＡによって測定された結果から、他のＩＬ－１７ファミリーメンバーとの交差反応性はなし、逆にマウスおよびカニクイザルのＩＬ－２５に対する交差反応性を有したことを示す。前記図の中、親ネズミｍＡｂは、ネズミ１８Ｈ３である。前記図の中、「１１２１」はＶＨ１－１とＶＬ２－１により形成された抗体を表し、「２１１２」はＶＨ２－１とＶＬ１－２により形成された抗体を表す。対照抗体としては、ヒトＩｇＧ１（ｈＩｇＧ１）を用いた。ＥＣ５０/ＩＣ５０値はＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍにより算出した。図５は、実施例８に記載のように、抗ＩＬ－２５抗体の動物体内におけるＩｎｖｉｖｏ効果を示す図である。

実施形態を挙げて本発明を説明するが、本発明はこれらの実施形態に限定されるものではないことは理解すべきである。それどころか、本発明は、請求の範囲によって定義される本発明の範囲内に含まれるすべての置換、変更、および等価のものを含む。本文に記載されたものと類似、均等の様々な方法および材料を、本発明の範囲に使用され得ることは、当業者であれば分かる。本発明は、記載された方法および材料に限定されるものではない。

Ｉ. 定義
本明細書および請求の範囲で使用される用語「含有する」、「含まれる」、「有する」および「含む」は、記載された特徴、全体、成分、または工程の存在を意味しているが、その他の１つまたは数個の特徴、全体、成分、工程またはそれらのグループの存在又は追加を排除するものではない。

「親和性」とは、分子（例えば、抗体）が単一の結合サイトで、その結合パートナー（例えば、抗原）との非共有相互作用の合計の強さを意味する。特記しない限り、本文で使用される場合、用語「結合親和性」とは、結合対のメンバー（例えば、抗体と抗原）の間の１：１の相互作用を反映する、内在の結合親和性を意味する。分子Ｘの、パートナーであるＹに対する親和性は、通常、解離定数（Ｋ_ｄ）で表される。親和性は、本文に記載されている方法を含め、当技術分野で知られている一般的な方法で測定することができる。

用語「抗体」は、最も広い意味で本文において使用され、様々な抗体構造を包含し、その中、所望の抗原結合活性を示す限り、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、マルチスペシフィック抗体（例えば、ビススペシフィック抗体）、並びに抗体断片を含むが、これらに限定されない。

用語「抗ＩＬ－２５抗体」および「ＩＬ－２５に結合する抗体」は、十分な親和性でＩＬ－２５を結合可能であるので、ＩＬ－２５を標的とした診断剤及び/又は治療剤として用いることができる抗体を指す。一部の実施形態では、前記抗ＩＬ－２５抗体と無関な非ＩＬ－２５タンパク質との結合の程度（例えば、ＳＰＲにて測定されたる）は、前記抗体とＩＬ－２５との結合の約１０％未満である。特定の実施形態では、ＩＬ－２５に結合する抗体は、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦５ｎｍ、≦４ｎＭ、≦３ｎＭ、≦２ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０.１ｎＭ、≦０.０１ｎＭ、または≦０.００１ｎＭ（例えば、１０^－８Ｍ以下、例えば、１０^－８Ｍから１０^－１３Ｍ、例えば、１０^－９Ｍから１０^－１３Ｍ）の解離定数（Ｋ_Ｄ）を有する。特定の実施形態では、抗ＩＬ－２５抗体は、異なる種（例えば、マウス、ヒト、およびカニクイザル）からのＩＬ－２５間で保存的なＩＬ－２５のエピトープに結合する。

「抗体断片」とは、完全な抗体の一部を含んで、完全な抗体が結合する抗原に結合する分子であって、完全な抗体と異なる分子を意味する。抗体断片の例としては、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ－ＳＨ、Ｆａｂ'－ＳＨ、Ｆａｂ'、Ｆａｂ－Ｃ、Ｆａｂ'－Ｃ－ＳＨ、Ｆａｂ－Ｃ－ＳＨ、ｓｃＦｖ、ダイアボディ、若しくはＦ（ａｂ'）２、ダイアボディ、直鎖抗体、一本鎖抗体分子（例えばｓｃＦｖ）、及び抗体断片により形成された多重特異性抗体が挙げられるが、これらに限定されない。

本文で使用される場合、用語「Ｆａｂ」とは、重鎖定常領域を含む抗体を指し、前記重鎖定常領域が、ＣＨ１ドメイン、又は軽鎖定常領域とジスルフィド結合を形成するのに十分なＣＨ１ドメインの一部を有するが、ＣＨ２ドメインまたはＣＨ３ドメインを有しない。本文で使用される場合、Ｆａｂは、ヒンジ領域である１つ以上のアミノ酸を含んでいてもよい。したがって、本文で使用される場合、用語「Ｆａｂ」はＦａｂ'抗体をカバーする。Ｆａｂは、別の非天然アミノ酸、例えばＣ末端のシステインを含んでいてもよく、その場合はＦａｂ－Ｃと呼ばれることがある。後述するように、Ｆａｂ－Ｃという用語には、Ｃ末端の天然システインを含め、ヒンジ領域の天然アミノ酸を含むＦａｂが含まれる。一部の実施形態では、Ｆａｂは、遺伝子工学改変したシステインを含むものである（即ち、Ｆａｂは、ＴＨＩＯＭＡＢであってもよい）。

参照抗体と「同じエピトープに結合する抗体」とは、競合アッセイにおいて参照抗体とその抗原との結合の５０％以上をブロックする、抗体を指す。一方、競合アッセイにおいて、参照抗体は、抗体とその抗原との結合の５０％以上をブロックする。

「キメラ」抗体とは、重鎖及び/又は軽鎖の一部が特定の供給源または種から由来し、そして重鎖及び/又は軽鎖の残部が別の供給源または種から由来する、抗体をいう。

抗体の「クラス」とは、その重鎖が有する定常ドメインまたは定常領域のタイプを意味する。抗体にはＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、ＩｇＭの５つの主要なクラスがあり、これらクラスの中のいくつかは、さらにサブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１，ＩｇＧ２，ＩｇＧ３，ＩｇＧ４，ＩｇＡ１とＩｇＡ２に分けられる。異なるクラスに属する免疫グロブリンに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれ、α、δ、ε、γ、μと呼ばれる。好ましくは、本発明の抗体はＩｇＧクラスに属するものである。

「エピトープ」とは、抗体が結合する抗原分子上の、特定の部位を意味する。

「可変領域」または「可変ドメイン」とは、抗体の重鎖または軽鎖の中、抗体と抗原の結合に関与するドメインをいう。抗体の重鎖および軽鎖の可変ドメイン（それぞれ、ＶＨおよびＶＬ）は、一般的に類似な構造を有しており、各ドメインは４つの保存的フレームワーク領域（ＦＲ）と、３つの高頻度変異領域（ＨＶＲ）からなる。（例えば、Ｋｉｎｄｔｅｔａｌ. ＫｕｂｙＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ, ６ｔｈｅｄ., Ｗ.Ｈ. ＦｒｅｅｍａｎａｎｄＣｏ., ｐａｇｅ９１（２００７）を参照する）。単一のＶＨまたはＶＬドメインによっては、抗原結合特異性の付与に十分である可能性がある。さらに、相補的なＶＬまたはＶＨドメインのライブラリをスクリーニングするために、特定の抗原を結合する抗体に対しては、それぞれ、前記抗原を結合する抗体からのＶＨまたはＶＬドメインを用いて単離してもよい。例えば、Ｐｏｒｔｏｌａｎｏｅｔａｌ., Ｊ. Ｉｍｍｕｎｏｌ. １５０:８８０－８８７ (１９９３); ＣｌａｒＫｓｏｎｅｔａｌ., Ｎａｔｕｒｅ３５２:６２４－６２８ (１９９１)を参照する。

本文で使用される場合、２つのアミノ酸配列を比較する場合、用語「アミノ酸の変異」は、第２の配列と比較し、第１の配列のある位置では、１つのアミノ酸残基の挿入、欠失または置換を有することを意味する。理解すべきように、２つのアミノ酸配列の間は、１つ、２つまたはそれ以上の前記したアミノ酸の変異を含むことができる。より詳細には、本文に記載のアミノ酸配列及び/又はポリペプチドの中、用語「アミノ酸の変異」は、探究したいＣＤＲ配列と比較して、指定されたＣＤＲ配列のある位置に単一のアミノ酸残基の挿入、欠失または置換を有することを意味する。この点において、探究したいアミノ酸配列は、１つまたは複数の、親和性成熟のための自体既知の技術にて、親和性成熟により指定されたアミノ酸配列に由来するアミノ酸配列であってもよい。好ましくは、「アミノ酸の変異」は、以下に定義されるような「保存的な」アミノ酸置換である。

「参照ポリペプチド配列に対する「パーセント（％）（アミノ酸）配列同一性」とは、最大のパーセントの配列同一性を達成するために配列を整列させ、必要に応じてギャップを導入した後に、候補配列中の、参照ポリペプチド配列中のアミノ酸残基と同一であるアミノ酸残基の割合と定義され、ここで、保存的置換を配列同一性の一部として考慮しない。アミノ酸配列の同一性を決定するためのアライメントは、当業者の能力範囲内の様々な方法、例えば、一般に入手可能なコンピュータソフトウェアであるＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮまたはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）などを使用することで、達成することができる。配列アラインメントに適切なパラメータ（比較する配列の全長にわたって、最大のアラインメントを達成するために必要なアルゴリズムを含め）は、当業者であれば決定することができる。なお、本発明の目的に沿えば、配列比較コンピュータプログラムＡＬＩＧＮ－２を用いて、％アミノ酸配列同一性の値が生成された。ＡＬＩＧＮ－２配列比較コンピュータ・プログラムはＧｅｎｅｎｔｅｃｈ社によって作成され、ソース・コードはユーザー・ドキュメンテーションとともに米国著作権局（ワシントンＤ.Ｃ.、２０５５９）に提出され、米国著作権登録番号ＴＸＵ５１００８７で登録されている。ＡＬＩＧＮ－２プログラムは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ, Ｉｎｃ., ＳｏｕｔｈＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ, Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａから公衆に開放されており、また、ソースコードからコンパイルすることもできる。ＡＬＩＧＮ－２プログラムは、デジタルＵＮＩＸ（登録商標）Ｖ４.０Ｄを含め、ＵＮＩＸ（登録商標）オペレーティングシステムでコンパイルされて使用するべきである。すべての配列比較パラメータはＡＬＩＧＮ－２プログラムによって設定され、変動しない。

アミノ酸配列の比較にＡＬＩＧＮ－２を採用する場合では、所定のアミノ酸配列Ａが、所定のアミノ酸配列Ｂに対しての/との/の間の、％アミノ酸配列同一性（言い換えれば、所定のアミノ酸配列Ａが、所定のアミノ酸配列Ｂに対して/と/の間に、ある％アミノ酸配列同一性を有する/包含すること）は、以下のように計算される。
１００X分数Ｘ/Ｙ

ここで、Ｘは、配列アラインメントプログラムＡＬＩＧＮ－２によるＡとＢのアラインメントにおいて、同一マッチと評価されたアミノ酸残基の数であり、Ｙは、Ｂのアミノ酸残基の総数である。理解できるように、アミノ酸配列Ａの長さがアミノ酸配列Ｂの長さと等しくない場合、Ｂに対してのＡのアミノ酸配列同一性の割合は、Ａに対してのＢのアミノ酸配列同一性の割合と等しくない。特に明記しない限り、本明細書で使用されるすべての％アミノ酸配列同一性値は、直前の段落に記載のように、ＡＬＩＧＮ－２コンピュータープログラムを使用して得られる。

また、２つのアミノ酸配列の間の配列同一性の程度を決定する際に、当業者は、いわゆる「保存的」アミノ酸置換を考慮に入れることができる。前記保存的アミノ酸置換は、通常、アミノ酸残基が類似の化学構造を有する別のアミノ酸残基で置換され、そしてポリペプチドの機能、活性または他の生物学的特性にほとんどまたは実質的に影響を与えないアミノ酸置換として説明することができる。この保存的アミノ酸置換は当技術分野でよく知られており、例えば、ＷＯ０４/０３７９９９、ＧＢ３３５７６８、ＷＯ９８/４９１８５、ＷＯ００/４６３８３およびＷＯ０１/０９３００を参照する。さらに、このようなアミノ酸置換の（好ましい）タイプ及び/又は組み合わせは、ＷＯ０４/０３７９９９、ＷＯ９８/４９１８５およびそれらに引用された文献の相関教示に基づいて選択することができる。

このような保存的置換は、好ましくは、以下のグループ（ａ）～（ｅ）内の１つのアミノ酸が、同じグループ内の別のアミノ酸残基で置換されている置換である。（ａ）小さな、脂肪族の、非極性またはわずかに極性のある残基：Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、ＰｒｏおよびＧｌｙ、（ｂ）極性であり、負の電荷を持っている残基およびそれらの（電荷を持たない）アミド：Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ; （ｃ）極性であり、正の電荷を持っている残基：Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、（ｄ）大きな、脂肪族の、非極性の残基：Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｃｙｓ、ならびに（ｅ）芳香族残基：Ｐｈｅ、ＴｙｒおよびＴｒｐ。特に好ましい保存的置換は：ＡｌａからＧｌｙまたはＳｅｒへの置換、ＡｒｇからＬｙｓへの置換、ＡｓｎからＧｌｎまたはＨｉｓへの置換、ＡｓｐからＧｌｕへの置換、ＣｙｓからＳｅｒへの置換、ＧｌｎからＡｓｎへの置換、ＧｌｕからＡｓｐへの置換、ＧｌｙからＡｌａまたはＰｒｏへの置換、ＨｉｓからＡｓｎまたはＧｌｎへの置換、ＩｌｅからＬｅｕまたはＶａｌへの置換、ＬｅｕからＩｌｅまたはＶａｌへの置換、ＬｙｓからＡｒｇ、ＧｌｎまたはＧｌｕへの置換、ＭｅｔからＬｅｕ、ＴｙｒまたはＩｌｅへの置換、ＰｈｅからＭｅｔ、ＬｅｕまたはＴｙｒへの置換、ＳｅｒからＴｈｒへの置換、ＴｈｒからＳｅｒへの置換、ＴｒｐからＴｙｒへの置換、ＴｙｒからＴｒｐへの置換、及び/又はＰｈｅからＶａｌ、ＩｌｅまたはＬｅｕへの置換である。

本明細書で使用される用語「クロスブロック」とは、免疫グロブリン、抗体、免疫グロブリン単一可変ドメイン、ポリペプチドまたは他の結合剤により、他の免疫グロブリン、抗体、免疫グロブリン単一可変ドメイン、ポリペプチドまたは結合剤と所定の標的の結合を妨害する能力を意味する。定量的なクロスブロッキングアッセイには、表面プラズモン共鳴技術により相互作用の程度を測定可能なＢＩＡｃｏｒｅ装置を用いた。もう一つの好適な定量的クロスブロッキングアッセイは、ＥＬＩＳＡによるアプローチを使用して、標的への結合の面で、免疫グロブリン、抗体、免疫グロブリン単一可変ドメイン、ポリペプチドまたは他の結合剤の間の競合を測定する。

「薬学的に許容される担体」とは、医薬製剤の中、活性成分以外の成分であって、被験者における毒性のないものをいう。薬学的に許容される担体には、バッファー、賦形剤、安定剤、または防腐剤が含まれるが、これらに限定されない。

本文で使用される場合、用語「治療」（およびその変体、「治療する」または「の治療」など）は、治療を受けている個体の自然経過を変化させようとする臨床的介入を意味し、また、予防のために又は臨床病理の経過中に実施することが可能である。望ましい治療効果には、疾患の発生または再発の防止、症状の緩和、疾患の直接的または間接的な病理学的結果の減少、疾患の進行速度の減少、疾患状態の改善または緩和、および寛解または予後の改善を含むが、これらに限定されない。一部の実施形態では、本発明の抗体は、疾患の発症を延ばするため、または疾患の進行を遅らせるために使用される。免疫関連疾患の治療において、治療剤は、免疫応答を構成する成分の応答の大きさを直接変化させるか、他の治療剤、例えば、抗生剤、抗真菌剤、抗炎症剤、化学療法剤などにより、疾患が治療に対する感受性を高めることができる。

本文で使用される場合、用語「ベクター」は、それに連結されている別の核酸を伝搬することができる、核酸分子を意味する。前記用語には、自己複製する核酸構造を持っているベクターと、（そのベクターが導入された）宿主細胞のゲノムに組み込まれたベクターを含む。一部のベクターは、それらに操作可能に連結された核酸の発現をガイドすることができる。本明細書では、このようなベクターを「発現ベクター」と呼ばれる。

ＩＩ. 組成物と方法
Ａ. 例示的な抗ＩＬ－２５抗体
本発明は、（例えば、ヒト）ＩＬ－２５に結合する単離された抗体を提供する。特に、本発明は、非常に高い親和性でＩＬ－２５と結合する抗体、例えば、１００ｐＭ未満、７５ｐＭ未満、５０ｐＭ未満、または１０ｐＭ未満の（実施例に記載の方法（複数）によって測定される）Ｋ_Ｄを有する抗体を提供する。さらに、本発明は、高可溶性である抗体、例えばＦａｂを提供する。本発明に記載のいずれかの実施形態において、抗体はモノクローナル抗体であってもよい。一部の実施形態では、抗体は、ヒト抗体、ヒト化抗体、またはキメラ抗体であってもよい。本発明に記載のいずれかの実施形態において、抗体は、Ｆａｂフラグメントであってもよい。

一部の実施形態では、本発明は、（ｉ）ネズミ抗体１８Ｈ３と競合して（ヒト）ＩＬ－２５に結合する、及び/又は（ｉｉ）１８Ｈ３と（ヒト）ＩＬ－２５の同じエピトープに結合する、及び/又は（ｉｉｉ）１８Ｈ３の（ヒト）ＩＬ－２５への結合をクロスブロックする、抗ＩＬ－２５抗体を提供する。

一部の実施形態では、抗体は、重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含み、重鎖可変領域は、
ａ）（ｉ）又は（ｉｉ）を含み、又は実質的にからなるＣＤＲ１：（ｉ）アミノ酸配列ＧＦＳＬＳＴＳＧＭＧＬＧ（ＳＥＱＩＤＮＯ: １）、（ｉｉ）アミノ酸配列ＧＦＳＬＳＴＳＧＭＧＬＧ（ＳＥＱＩＤＮＯ: １）とのアミノ酸変異を３つ、２つ又は１つしか有しないアミノ酸配列、
ｂ）下記（ｉ）又は（ｉｉ）を含み、又は実質的にからなるＣＤＲ２、（ｉ）アミノ酸配列ＨＩＷＷＤＤＶＫＨＹＫＰＡＬＫＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ: ２）、（ｉｉ）アミノ酸配列ＨＩＷＷＤＤＶＫＨＹＫＰＡＬＫＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ: ２）とのアミノ酸変異を３つ、２つ又は１つしか有しないアミノ酸配列、および
ｃ）下記（ｉ）又は（ｉｉ）を含み、又は実質的にからなるＣＤＲ３：（ｉ）アミノ酸配列ＭＧＱＬＨＹＹＧＹＤＹＡＭＤＹ（ＳＥＱＩＤＮＯ：３）、（ｉｉ）アミノ酸配列ＭＧＱＬＨＹＹＧＹＤＹＡＭＤＹ（ＳＥＱＩＤＮＯ：３）とのアミノ酸変異を３つ、２つ又は１つしか有しないアミノ酸配列、を含み、
且つ、前記軽鎖可変領域は、
ａ）（ｉ）又は（ｉｉ）を含み、又は実質的にからなるＣＤＲ１、（ｉ）アミノ酸配列ＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹ（ＳＥＱＩＤＮＯ: ４）、（ｉｉ）アミノ酸配列ＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹ（ＳＥＱＩＤＮＯ: ４）とのアミノ酸変異を３つ、２つ又は１つしか有しないアミノ酸配列、
ｂ）下記（ｉ）又は（ｉｉ）を含み、又は実質的にからなるＣＤＲ２：（ｉ）アミノ酸配列ＲＴＳＮＬＡＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ: ５）、（ｉｉ）アミノ酸配列ＲＴＳＮＬＡＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ: ５）とのアミノ酸変異を３つ、２つ又は１つしか有しないアミノ酸配列、および
ｃ）下記（ｉ）又は（ｉｉ）を含み、又は実質的にからなるＣＤＲ３：（ｉ）アミノ酸配列ＱＬＹＨＳＹＰＰＴＷＴ（ＳＥＱＩＤＮＯ: ６）、（ｉｉ）アミノ酸配列ＱＬＹＨＳＹＰＰＴＷＴ（ＳＥＱＩＤＮＯ: ６）とのアミノ酸変異を３つ、２つ又は１つしか有しないアミノ酸配列
を含むものである。

一部の実施形態では、重鎖可変領域が、アミノ酸配列ＧＦＳＬＳＴＳＧＭＧＬＧ（ＳＥＱＩＤＮＯ：１）を有するＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＨＩＷＷＤＤＶＫＨＹＫＰＡＬＫＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ：２）を有するＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＭＧＱＬＨＹＹＧＹＤＹＡＭＤＹ（ＳＥＱＩＤＮＯ：３）を有するＣＤＲ３を含み、軽鎖可変領域が、アミノ酸配列ＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹ（ＳＥＱＩＤＮＯ: ４）を有するＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＲＴＳＮＬＡＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ: ５）を有するＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＱＬＹＨＳＹＰＰＴＷＴ（ＳＥＱＩＤＮＯ: ６）を有するＣＤＲ３を含む。好ましくは、重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２のアミノ酸配列と少なくとも７０％、例えば少なくとも８０％、例えば少なくとも８５％、例えば少なくとも９０％または９５％以上（例えば、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％）のアミノ酸配列同一性を有し、及び/又は、軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１３のアミノ酸配列と少なくとも７０％、例えば少なくとも８０％、例えば少なくとも８５％、例えば少なくとも９０％または９５％超（例えば、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）のアミノ酸配列の同一性を有する。一部の実施形態では、重／軽鎖可変領域は、参照配列と比べて置換（例えば、保存的置換）、挿入または欠失を含むが、当該配列を含む抗ＩＬ－２５抗体は、ＩＬ－２５に結合する能力を保有している。特定の実施形態でが、ＳＥＱＩＤＮＯ：１～６、１２および１３のいずれか１つまたは複数は、合計１～１０（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９および１０）のアミノ酸が置換、挿入及び/又は欠失されている。特定の実施形態では、置換、挿入または欠失が、ＣＤＲ以外の領域（即ち、ＦＲの中）で起こる。

本発明の実施形態のいずれかにおいて、抗ＩＬ－２５抗体はヒト化したものであってもよい。一部の実施形態では、抗ＩＬ－２５抗体は、前記実施形態のいずれかに記載のＣＤＲを含み、さらに、ヒトのアクセプターフレームワーク、例えば、ヒト免疫グロブリンフレームワーク、またはヒト共有フレームワークを含む。特定の実施形態では、ヒトのアクセプターフレームワークは、ヒトＶＬカッパＩ共有（ＶＬＫＩ）フレームワーク及び/又はＶＨフレームワークであるＶＨ１である。特定の実施形態では、ヒトのアクセプターフレームワークは、本文に記載の変異のいずれか１つを含む、ヒトＶＬカッパＩ共有（ＶＬＫＩ）フレームワーク及び/又はＶＨフレームワークであるＶＨ１である。

より好ましくは、重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ:７、ＳＥＱＩＤＮＯ:８、ＳＥＱＩＤＮＯ:９またはＳＥＱＩＤＮＯ:１２のアミノ酸配列を含み、及び/又は軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ:１０、ＳＥＱＩＤＮＯ:１１またはＳＥＱＩＤＮＯ:１３のアミノ酸配列を含む。最も好ましくは、本発明に記載の抗ＩＬ－２５抗体は、下記ｉ）、ｉｉ）、ｉｉｉ）、ｉｖ）、ｖ）、ｖｉ）又はｖｉｉ）のいずれかのものである、ｉ）重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：７のアミノ酸配列を含み、且つ軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０のアミノ酸配列を含む抗体、ｉｉ）重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：７のアミノ酸配列を含み、且つ軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１のアミノ酸配列を含む抗体、ｉｉｉ）重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ: ８のアミノ酸配列を含み、且つ軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ: １０のアミノ酸配列を含む抗体、ｉｖ）重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ: ８のアミノ酸配列を含み、且つ軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ: １１のアミノ酸配列を含む抗体、ｖ）重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ: ９のアミノ酸配列を含み、且つ軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ: １０のアミノ酸配列を含む抗体、ｖｉ）重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ: ９のアミノ酸配列を含み、且つ軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ: １１のアミノ酸配列を含む抗体、ｖｉｉ）重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ: １２のアミノ酸配列を含み、且つ軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ: １３のアミノ酸配列を含む抗体。

もう一つの態様では、上に述べた実施形態のいずれかに記載のＶＨと、上に述べた実施形態のいずれかに記載のＶＬとを含む、抗ＩＬ－２５抗体を提供する。

さらに一つの態様では、本発明は、上に述べた実施形態のいずれかにおける抗ＩＬ－２５抗体と同じエピトープに結合する、抗体を提供する。

本発明のさらに一つの態様では、前記の実施形態のいずれかに記載の抗ＩＬ－２５抗体は、モノクローナル抗体であり、例えば、ヒトモノクローナル抗体である。一部の実施形態では、抗ＩＬ－２５抗体は抗体フラグメント、例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ－ＳＨ、Ｆａｂ'－ＳＨ、Ｆａｂ'、Ｆａｂ－Ｃ、Ｆａｂ'－Ｃ－ＳＨ、Ｆａｂ－Ｃ－ＳＨ、ｓｃＦｖ、ジアボディ又はＦ（ａｂ'）２フラグメントである。もう一つの実施形態では、抗体は、実質的に全長抗体、例えば、ＩｇＧ１抗体、ＩｇＧ２ａ抗体、または本文で定義される他の抗体クラス若しくはアイソタイプである。一部の実施形態では、抗ＩＬ－２５抗体は、Ｆａｂである。

Ｂ. 組換え方法及び組成物
抗体は、組換え方法及び組成物を用いて製造することができる。一部の実施形態では、本文に記載の抗ＩＬ－２５抗体をコードする単離された核酸が提供される。当該核酸は、抗体のＶＬを含むアミノ酸配列及び/又はＶＨを含むアミノ酸配列（例えば、抗体の軽鎖及び/又は重鎖）をコードすることができる。さらなる実施形態では、当該核酸を含む１つまたは複数のベクター（例えば、発現ベクター）が提供される。さらなる実施形態では、前記核酸を含む宿主細胞が提供される。

一部の実施形態では、宿主細胞は、真核生物の細胞、例えば、ＨＥＫ２９３細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、またはリンパ系細胞（例えば、Ｙ０、ＮＳ０、Ｓｐ２０細胞）である。一部の実施形態では、上に述べた抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を、抗体の発現に適した条件下で培養することと、任意に、宿主細胞（または宿主細胞の培養液）から抗体を回収することとを含む、抗ＩＬ－２５抗体の製造方法が提供される。

Ｃ. アッセイ
本発明で提供される抗ＩＬ－２５抗体は、当技術分野で知られている様々なアッセイによって、その物理的／化学的特性及び/又は生物学的活性を同定、スクリーニング、または特徴づけることができる。一部の実施形態では、本発明の抗体は、例えば、ＥＬＩＳＡ、ＳＰＲ、ＢＩＡＣｏｒｅ（登録商標）、ＦＡＣＳまたはウェスタンブロットなどの既知の方法によって、その抗原結合活性を測定する。

もう一つの態様では、ＩＬ－２５への結合について、本文に記載の抗体のいずれかと競争する抗体を同定するために、競合アッセイを使用してもよい。特定の実施形態では、このような競合抗体は、本文に記載の抗体が結合するエピトープと同じエピトープ（例えば、線状エピトープ、またはコンフォメーションエピトープ）に結合する。抗体が結合するエピトープをマッピングする方法として、詳細な例示的方法は、Ｍｏｒｒｉｓ（１９９６）「ＥｐｉｔｏｐｅＭａｐｐｉｎｇＰｒｏｔｏｃｏｌｓ」、ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙｖｏｌ. ６６（ＨｕｍａｎａＰｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ）に記載されている。

Ｄ. 診断および検出に使用する方法及び組成物
特定の実施形態では、本発明で提供される抗ＩＬ－２５抗体のいずれかは、生物学的サンプル中のＩＬ－２５の存在の検出に有用である。本文で使用される場合、用語「検出」は、定量的または定性的検出を包含する。用語「生物学的サンプル」は、例えば、細胞または組織を含む。

一部の実施形態では、診断または検出方法に使用する抗ＩＬ－２５抗体が提供される。さらに一つの態様では、生物学的サンプル中のＩＬ－２５の存在を検出する方法が提供される。特定の実施形態では、前記方法は、抗ＩＬ－２５抗体とＩＬ－２５の結合が許容される条件で、生物学的試料を、本文に記載の抗ＩＬ－２５抗体に接触させることと、生物学的試料中の抗ＩＬ－２５抗体とＩＬ－２５との間に複合体が形成されるかどうかを検出することを含む。このような方法は、インビトロ方法またはインビボ方法であってもよい。一部の実施形態では、抗ＩＬ－２５抗体は、抗ＩＬ－２５抗体による治療に適した被験者を選択するために使用され、例えば、患者の選択のためのバイオマーカーとして、ＩＬ－２５が使用される場合。

Ｅ. 医薬製剤
本発明はまた、本発明の抗体と薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物に関する。

本文に記載の抗ＩＬ－２５抗体の医薬製剤は、所要純度を有する当該抗体を、１つまたは複数の、任意選択の薬学的に許容される担体（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ'ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ１６ｔｈｅｄｉｔｉｏｎ, Ｏｓｏｌ, Ａ. Ｅｄ. (１９８０)）と混合することで、凍結乾燥製剤または水溶液として製造される。薬学的に許容される担体は、投与される用量および濃度で、通常被検者に対して非毒性なものであり、リン酸塩、クエン酸塩などの有機酸などの緩衝剤、アスコルビン酸、メチオニンなどの酸化防止剤、防腐剤、金属錯体（例えば、Ｚｎ－タンパク質錯体）、及び/又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤などが含まれるが、これらに限定されない。

また、本明細書の製剤は、必要に応じて、治療される特定の適応症に基づいて、一つ以上の活性成分を含むことができる。一部の実施形態では、活性成分は、互いに不利な影響を及ぼさない相補的な活性を有する。

Ｆ. 治療方法及び組成物
本発明で提供される抗ＩＬ－２５抗体のいずれも、方法（例えば、治療方法）に使用することができる。

本発明は、また、本発明の抗体、核酸、宿主細胞または医薬組成物を、有効量で被験者に投与することを含む、被験者におけるＩＬ－２５に関連した疾患の治療方法に関する。特に、前記有効量は、ＩＬ－２５、その生物学的若しくは薬理学的活性、及び/又は、ＩＬ－２５が関与する生物学的経路若しくはシグナリングを調節するのに十分な量であってもよい。

本発明の任一実施形態における「被験者」は、哺乳類であってよく、好ましくはラット、マウス、サルまたはヒトである。

抗ＩＬ－２５抗体は、非経口投与、皮下投与、腹腔内投与、硝子体内投与、肺内投与および鼻腔内投与を含め任意の適切な手段で投与されてもよく、また、局所的な免疫抑制治療を行こう場合には、必要に応じて、病巣内投与も可能である。非経口投与としては、筋肉内投与、静脈内投与、動脈内投与、腹腔内投与、硝子体内投与、皮下投与などが挙げられる。さらに、抗体をパルス式灌流（ｐｕｌｓｅｉｎｆｕｓｉｏｎ）により投与すること、特に、漸減する用量で抗体、またはその抗体変異体、またはその断片（例えば、抗原結合断片）を投与することは好ましい。一部の実施形態では、投与は、注射（例えば、静脈内注射または皮下注射）によって投与されてもよく、これは、部分的に、投与が短期間であるか長期間であるかに依存する。

本発明に記載の抗ＩＬ－２５抗体は、ＩＬ－２５に関連した疾患の予防及び/又は治療のために使用することができる。当該疾患は、過剰なまたは制御されていないＩＬ－２５の産生／発現／活性に関連し得る。例えば、ＩＬ－２５に関連した疾患は、ＩｇＥ、ＩＬ－４、ＩＬ－５及び/又はＩＬ－１３が過剰に発現している自己免疫疾患または炎症性疾患から選択することができ、好ましくはアレルギー性（炎症性）疾患であり、より好ましくは喘息（例えば、アレルギー性喘息）、アトピー性皮膚炎、アトピー性アレルギー疾患、アレルギー性鼻炎、花粉症、アレルギー性結膜炎、湿疹、食物アレルギー、乾癬、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎、関節リウマチ（ＲＡ）、多発性硬化症（ＭＳ）、全身性エリテマトーデス、変形性関節症または炎症性腸疾患（ＩＢＤ）から選択されるものである。

また、本発明は、被験者におけるＩＬ－２５に関連した疾患の薬剤の製造のための、本発明に記載の抗ＩＬ－２５抗体、核酸、宿主細胞または医薬組成物の使用に関する。

以下は、本発明の方法及び組成物の例である。理解すべきように、前記の一般的な記載を鑑み、様々な他の実施形態で実施することができる。

実施例１抗ＩＬ－２５抗体の製造
タンパク質発現の一般的な標準法に従って自社で製造した１０μｇのヒトＩＬ－２５タンパク質（ＮＣＢＩＧｅｎｅＩＤ：６４８０６）と、完全フロイントアジュバント（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ, Ｃａｔ＃Ｆ６８８１）とを皮下注射することで、ＩＬ－２５ＫＯマウス（１６－１８ｇ、６週齢、ｎ＝３、清華大学ＣｈｅｎＤｏｎｇ教授研究室より提供）を免疫した。免疫は、３日間の間隔で５回繰り返した。最後のブーストから３日後、注射部位に近いリンパ節を細かい切り出した。リンパ球は、ＰＥＧ１５００（ＰｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅＧｌｙｃｏｌ１５００, ＲｏｃｈｅＴＭ. Ｃａｔ＃:７８３６４１, １０×４ｍｌｉｎ７５ｍＭＨｅｐｅｓ, ＰＥＧ５０％Ｗ/Ｖ）の存在下で、Ａｇ８.６５３骨髄腫細胞（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ, Ｃａｔ＃８５０１１４２０）と融合させ、ＨＡＴセレクション（Ｓｉｇｍａｃａｔ＃: Ｈ０２６２）とＨＦＣＳ（ＨｙｂｒｉｄｏｍａＦｕｓｉｏｎａｎｄｃｌｏｎｉｎｇＣｌｏｎｉｎｇＳｕｐｐｌｅｍｅｎｔ, ５０×, Ｒｏｃｈｅｃａｔ＃: １１－３６３－７３５－００１）を用いてクローニングを行った。ハイブリドーマの上清は、ヒトＩＬ－２５に結合できる抗体を製造するために、ＥＬＩＳＡによりスクリーニングした。さらに、拮抗的な抗ＩＬ－２５ｍＡｂを、細胞に対しての機能アッセイによって選択した（ＲａｉｇＲ, ｅｔａｌ, Ｇｕｔ２０００; ４６:３５０－３５８を参照した）。選択されたネズミＩＬ－２５拮抗的なｍＡｂ候補（１８Ｈ３、ｍＩｇＧ１）は、ＣＤＲグラフトおよび復帰突然変異（バックミューテーション）を用いて、シークエンスされて（ＳＥＱＩＤＮｏ.１２＆１３）ヒト化された。

ＣＤＲグラフト化による抗体のヒト化：アクセプターフレームワークの選択を行った。ＮＣＢＩＩｇ－Ｂｌａｓｔ（ｈｔｔｐ://ｗｗｗ.ｎｃｂｉ.ｎｌｍ.ｎｉｈ.ｇｏｖ/ｐｒｏｊｅｃｔｓ/ｉｇｂｌａｓｔ/）を用いて、ヒト生殖細胞系のデータベースに親抗体の可変ドメイン配列を検索した。ネズミＩＬ－２５拮抗的なｍＡｂ候補（１８Ｈ３）の重鎖および軽鎖の６つのＣＤＲ配列（ＳＥＱＩＤＮＯ：１～６）を、それぞれ以下に示した。重鎖と軽鎖のそれぞれについて、５つの異なるヒトアクセプター（即ち、親抗体と高い相同性を有するヒト可変ドメイン）を選択した。ヒトアクセプターのＣＤＲを、マウスのＣＤＲに置き換えて、ヒト化可変ドメイン配列を作製した。５本のヒト化重鎖と、５本のヒト化軽鎖を、それぞれ設計して合成し、発現ベクターに挿入した。ヒト化抗体は発現させて、親和性順序付け試験に使用した。最も強い結合親和性を有する抗体（ＶＨ１－ＶＬ２、ＶＨ１－ＶＬ１、ＶＨ２－ＶＬ２、ＶＨ２－ＶＬ１）を選択し、復帰突然変異に供した。それらの変異体から、結合性と機能性のアッセイに基づいてＶＨ１－１－ＶＬ２－１、ＶＨ１－１－ＶＬ１－２、ＶＨ２－１－ＶＬ１－２とＶＨ２－１－ＶＬ２－１を選択した（ＳＥＱＩＤＮＯ: ７－１０）。

ＣＤＲ１Ｈのアミノ酸配列（ＳＥＱＩＤＮＯ: １）、
ＧＦＳＬＳＴＳＧＭＧＬＧ
ＣＤＲ２Ｈのアミノ酸配列（ＳＥＱＩＤＮＯ：２）、
ＨＩＷＤＶＫＨＹＫＰＡＬＫＳ
ＣＤＲ３Ｈのアミノ酸配列（ＳＥＱＩＤＮＯ: ３）、
ＭＧＱＬＨＹＹＧＹＤＹＡＭＤＹ
ＣＤＲ１Ｌのアミノ酸配列（ＳＥＱＩＤＮＯ: ４）、
ＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹ
ＣＤＲ２Ｌアミノ酸配列（ＳＥＱＩＤＮＯ: ５）、
ＲＴＳＮＬＡＳ
ＣＤＲ３Ｌアミノ酸配列（ＳＥＱＩＤＮＯ: ６））、
ＱＬＹＨＳＹＰＰＴＷＴ
可変重鎖ドメイン（ＶＨ１－１）のアミノ酸配列（ＳＥＱＩＤＮＯ: ７）、
ＱＶＴＬＫＥＳＧＰＴＬＶＫＰＴＱＴＬＴＬＴＣＴＦＳＧＦＳＬＳＴＳＧＭＧＬＧＷＩＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＬＡＨＩＷＷＤＤＶＫＨＹＫＰＡＬＫＳＲＬＴＩＴＫＤＴＳＫＮＱＶＶＬＴＭＴＮＶＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＭＧＱＬＨＹＹＧＹＤＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
可変重鎖ドメイン（ＶＨ２－１）のアミノ酸配列（ＳＥＱＩＤＮＯ: ８）、
ＱＶＴＬＲＥＳＧＰＡＬＬＫＰＴＱＴＬＴＬＴＣＴＦＳＧＦＳＬＳＴＳＧＭＧＬＧＷＩＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＬＡＨＩＷＷＤＤＶＫＨＹＫＰＡＬＫＳＲＬＴＩＳＫＤＴＳＫＮＱＶＶＬＴＩＴＮＶＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＭＧＱＬＨＹＹＧＹＤＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
可変重鎖ドメイン（ＶＨ１－２）のアミノ酸配列（ＳＥＱＩＤＮＯ:９）、
ＭＧＷＳＷＩＬＬＦＬＬＳＶＴＡＧＶＨＳＱＶＴＬＫＥＳＧＰＴＬＬＫＰＴＱＴＬＴＬＴＣＴＦＳＧＦＳＬＳＴＳＧＭＧＬＧＷＩＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＬＡＨＩＷＷＤＤＶＫＨＹＫＰＡＬＫＳＲＬＴＩＴＫＤＴＳＫＮＱＶＶＬＴＩＴＮＶＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＭＧＱＬＨＹＹＧＹＤＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
可変軽鎖ドメイン（ＶＬ２－１）のアミノ酸配列（ＳＥＱＩＤＮＯ: １０）、
ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＦＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＰＬＩＹＲＴＳＮＬＡＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＹＴＬＴＩＳＳＭＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＬＹＨＳＹＰＰＴＷＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ
可変軽鎖ドメイン（ＶＬ１－２）のアミノ酸配列（ＳＥＱＩＤＮＯ:１１）、
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＡＳＰＧＥＲＶＴＩＳＣＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＰＬＩＹＲＴＳＮＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＭＥＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＬＹＨＳＹＰＰＴＷＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ
１８Ｈ３の可変重鎖のアミノ酸配列（ＳＥＱＩＤＮＯ:１２）、
ＱＶＴＬＫＥＳＧＰＧＩＬＱＰＳＱＴＬＳＬＴＣＳＦＳＧＦＳＬＳＴＳＧＭＧＬＧＷＩＲＱＰＳＧＫＧＬＥＷＬＡＨＩＷＷＤＤＶＫＨＹＫＰＡＬＫＳＲＬＴＩＳＫＤＩＳＳＳＱＶＦＬＴＩＡＳＶＤＴＡＤＴＡＴＹＹＣＡＲＭＧＱＬＨＹＹＧＹＤＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ
１８Ｈ３の可変軽鎖のアミノ酸配列（ＳＥＱＩＤＮＯ:１３）、
ＱＩＶＬＴＱＳＰＡＩＭＳＡＳＰＧＥＫＶＴＩＳＣＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹＷＹＱＱＫＰＧＳＳＰＫＰＷＩＹＲＴＳＮＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＳＹＳＬＴＩＳＳＭＥＡＥＤＡＡＴＹＹＣＱＬＹＨＳＹＰＰＴＷＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ

実施例２抗ＩＬ－２５抗体の発現と精製
ヒト化ＩｇＧ重鎖（ＳＥＱＩＤＮＯ：７、８または９の可変ドメインアミノ酸配列）および軽鎖（ＳＥＱＩＤＮＯ：１０または１１の可変アミノ酸配列）をコードするＤＮＡ配列を合成し、ｐＣＤＮＡ３.１ベクター（ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社から購入可能である）に挿入して、完長ＩｇＧの発現プラスミドを構築した。親抗体の発現は、１００ｍｌのＨＥＫ２９３細胞の培養物（ＨＥＫ２９３細胞は、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社から購入可能である）で行った。そして、上清をプロテインＡアフィニティカラム（ＧＥＨｅａｌｔｈｃａｒｅｌｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ社から購入可能である）で精製した。精製した抗体は，ＰＤ－１０ＤｅｓａｌｔｉｎｇＣｏｌｕｍｎ（ＴｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社から購入可能である）を用いてＰＢＳにバッファー交換した。精製したタンパクの濃度と純度は、それぞれＯＤ２８０とＳＤＳ－ＰＡＧＥで測定した。ヒト化抗体は、３０ｍｌのＨＥＫ２９３細胞培養液で発現された。細胞をスピンダウンして、上清をろ取し、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ解析を行った（図１）。

実施例３抗ＩＬ－２５抗体の、ヒトＩＬ－２５に対する結合親和性のＳＰＲ解析
抗ヒトＦｃγ特異的抗体（ＪａｃＫｓｏｎＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ, ＬｏｔＮｏ.１２４４４８, Ｃｏｄｅ.１０９－００８－０９８）を、アミンカップリング法でＢｉａｃｏｒｅＴ２００センサーチップに固定化した。培養液中に分泌された４種類の抗体と親抗体を注入し、Ｆｃ（捕捉相）を介して、抗ヒトＦｃ抗体で個別的に捕捉した。平衡化した後、ＩＬ－２５を３００秒かけて注入し（結合期）、その後、ランニングバッファーを１２００秒かけて注入した（解離期）。各サイクルにおいては、ヒト化抗体の流動細胞の応答から、参照流動細胞（流動細胞１）の応答を差し引いた。表面は、次のヒト化抗体を注入する前に再生された。この過程は、すべての抗体を分析完了まで繰り返した。ヒト化抗体の解離速率は、ＢｉａｃｏｒｅＴ２００評価ソフトウェアを用いて、実験データを、１:１の相互作用モデルにローカルフィットすることで得られた。抗体は、解離速率定数（解離定数、Ｋ_ｄ）で順序付けした。親抗体と同様の親和性でＩＬ－２５と互いに作用した結合物を選択した（表１）。

^ａＶＨ１－１+ＶＬ１－２は、ＶＨ１－１とＶＬ１－２により形成された抗体を表した。このような命名法は、他の抗体にも適用される。

実施例４.ＥＬＩＳＡで測定したヒトＩＬ－２５への結合性
ＭａｘｉＳｏｒｐ９６ウェルプレート（ＮＵＮＣ＃４４９８２４、ｗｗｗ.ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ.ｃｏｍ）を、１ｘＰＢＳ中の２μｇ／ｍｌのヒトＩＬ－２５（Ｒ＆Ｄｓｙｓｔｅｍｓ＃１２５８－ＩＬ－０２５／ＣＦ）で被覆された（５０μｌ／ウェル）。プレートを４℃で一晩インキュベートした。コーティング液を除去し、プレートを２００μｌ/ウェルのＰＢＳＴ（０.０５％ｔｗｅｅｎ－２０を含む１ｘＰＢＳ）で１回洗浄した。そして、２００μｌ/ウェルのブロッキングバッファー（０.０５％ｔｗｅｅｎ－２０、３％ＢＳＡを含む１ｘＰＢＳ）を加え、室温で１時間インキュベートした。ブロッキングバッファーを除去し、プレートを２００μｌ／ウェルのＰＢＳＴ（０.０５％ｔｗｅｅｎ－２０を含む１ｘＰＢＳ）で３回洗浄した。抗ＩＬ－２５抗体（実施例２で作製した）を、１ｘＰＢＳによって１０、３.３３、１.１１、０.３７、０.１２３、０.０４１、０.０１３７、０.００４６、０.００１５、０.０００３１、０.０００１０２、０.００００３４μｇ/ｍｌに希釈し、プレートに添加した（５０μｌ／ウェル）。プレートを室温で２時間インキュベートした。ウェル内の抗体を除去し、プレートを２００μｌ/ウェルのＰＢＳＴ（０.０５％ｔｗｅｅｎ－２０を含む１ｘＰＢＳ）で３回洗浄した。Ｇｏａｔａｎｔｉ－ｈｕｍａｎＩｇＧ（Ｈ＆Ｌ）－ＨＲＰ二次抗体（ＪａｃＫｓｏｎＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ＃１０９－０３５－０８８, ｗｗｗ.ｊａｃＫｓｏｎｉｍｍｕｎｏ.ｃｏｍ）を、１ｘＰＢＳにおいて１:５０００に希釈して、各ウェルに添加した（５０μｌ／ウェル）。プレートを室温で１時間インキュベートした。二次抗体を除去し、プレートを毎回２００μｌ／ウェルのＰＢＳＴ（０.０５％ｔｗｅｅｎ－２０を含む１ｘＰＢＳ）で、７回洗浄した。５０μｌ／ウェルのＴＭＢ（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ＃８５－００－４２０１－５６, ｗｗｗ.ｅｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ.ｃｏｍ）を加えて、プレートを室温で数分間インキュベートした。その後、５０μｌ／ウェルの２ＮＨ_２ＳＯ_４を加えて反応を停止した。ヒトＩＬ－２５の結合について、波長４５０ｎｍで光密度を測定した。平衡定数であるＥＣ_５０（ｎＭ）を図２に示した。この結果は、抗ＩＬ２５抗体が高い親和性でヒトＩＬ－２５に結
合できることを示している。

実施例５.抗ＩＬ２５抗体は、ヒトＩＬ－２５によって刺激された炎症性サイトカインの産生をブロックした
このアッセイは、抗ＩＬ－２５抗体（実施例２で作製した）を用いてＨＴ－２９細胞（ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ, ＃ＴＣＨｕ１０３）をプレインキュベーションした後、ＩＬ－２５タンパク質（Ｒ＆Ｄｓｙｓｔｅｍｓ＃１２５８－ＩＬ－０２５/ＣＦ）で刺激し、前記細胞からのＣＸＣＬ１/ＧＲＯａｌｐｈａの産生を検出した。ＨＴ－２９細胞は、その細胞表面にＩＬ－２５受容体を発現している。抗ＩＬ－２５抗体によっては、サイトカインとＩＬ－２５受容体との結合をブロックし、ＩＬ－２５による刺激されたＣＸＣＬ１の発現を抑制することができる。培養上清中に放出したＣＸＣＬ１は、ＥＬＩＳＡにて検出することができる。ＣＸＣＬ１の検出は、抗ＩＬ－２５抗体による抑制効果を示すことができる。

ＨＴ２９細胞を、１.０ｘ１０^４ｃｅｌｌｓ／ウェルの細胞密度で、１０％ＦＢＳ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃから購入可能である）、１％ペニシリンストレプトマイシン（ＰＳ, ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃから購入可能である）を加えた０.２ｍｌ／ウェルのＭｃＣｏｙ'ｓ５Ａ（改変）培地にて９６ウェルプレートに播種した。抗ＩＬ－２５抗体とｈＩＬ－２５の混合物を対応するウェルに加えて、３７℃で４８時間インキュベートした。その後、上清を採取してＣＸＣＬ１ＥＬＩＳＡに供した。ＣＸＣＬ１の測定は、ＨｕｍａｎＣＸＣＬ１ＥＬＩＳＡＲｅａｄｙ－ＳＥＴ－Ｇｏキット（Ｒ＆Ｄｓｙｓｔｅｍ＃ＤＹ２７５）を用いて行った。結果は図３に示した。その結果は、抗ＩＬ２５抗体が、サイトカインによって誘導、刺激されたＣＸＣＬの産生をブロックし、これにより炎症の発生を抑制することが示された。

実施例６.ＥＬＩＳＡで測定したように、ヒトＩＬ－２５に結合する同時、他のＩＬ－１７ファミリーメンバーとの交差反応性がない
ＭａｘｉＳｏｒｐ９６ウェルプレート（ＮＵＮＣ＃４４９８２４, ｗｗｗ.ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ.ｃｏｍ）を、１ｘＰＢＳ（５０ μｌ／ウェル）の中の２μｇ/ｍｌのヒトＩＬ－１７Ａ（ＣｅｌｌＳｉｇｎａｌｉｎｇ＃８９２８ＳＦ, ｗｗｗ.ｃｅｌｌｓｉｇｎａｌ.ｃｏｍ）、ヒトＩＬ－１７Ｆ（ＣｅｌｌＳｉｇｎａｌｉｎｇ＃８９０６ＬＣ, ｗｗｗ.ｃｅｌｌｓｉｇｎａｌ.ｃｏｍ）、ヒトＩＬ－１７Ｂ（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ＃２００－２８, ｗｗｗ.ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ.ｃｏｍ）、ヒトＩＬ－１７Ｃ（Ｒ＆Ｄｓｙｓｔｅｍｓ＃１２３４－ＩＬ－０２５/ＣＦ, ｗｗｗ.ｒｎｄｓｙｓｔｅｍｓ.ｃｏｍ）、ヒトＩＬ－１７Ｄ（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ＃２００－２７, ｗｗｗ.ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ.ｃｏｍ）、ヒトＩＬ－１７Ｅ（Ｒ＆Ｄｓｙｓｔｅｍｓ＃１２５８－ＩＬ－０２５/ＣＦ, ｗｗｗ.ｒｎｄｓｙｓｔｅｍｓ.ｃｏｍ）で、それぞれコーティングした。プレートを４℃で一晩インキュベートした。コーティング液を除去し、プレートを２００μｌ／ウェルのＰＢＳＴ（０.０５％ｔｗｅｅｎ－２０を含む１ｘＰＢＳ）で１回洗浄した。そして、２００μｌ／ウェルのブロッキングバッファー（０.０５％ｔｗｅｅｎ－２０、３％ＢＳＡを含む１ｘＰＢＳ）を加え、室温で１時間インキュベートした。ブロッキングバッファーを除去し、プレートを２００μｌ／ウェルのＰＢＳＴ（０.０５％ｔｗｅｅｎ－２０を含む１ｘＰＢＳ）で３回洗浄した。抗ＩＬ－２５抗体（実施例２で作製した）を、１ｘＰＢＳによって１０、３.３３、１.１１、０.３７、０.１２３、０.０４１、０.０１３７、０.００４６、０.００１５、０.０００３１、０.０００１０２、０.００００３４μｇ/ｍｌに希釈し、プレートに添加した（５０μｌ／ウェル）。プレートを室温で２時間インキュベートした。ウェル内の抗体を除去し、プレートを毎回２００μｌ／ウェルのＰＢＳＴ（０.０５％ｔｗｅｅｎ－２０を含む１ｘＰＢＳ）で３回洗浄した。ヤギ抗ヒトＩｇＧ（Ｈ＆Ｌ）－ＨＲＰ二次抗体（ＪａｃＫｓｏｎＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ＃１０９－０３５－０８８, ｗｗｗ.ｊａｃＫｓｏｎｉｍｍｕｎｏ.ｃｏｍ）を、１ｘＰＢＳで１:５０００に希釈し、各ウェルに加えた（５０μｌ／ウェル）。プレートを室
温で１時間インキュベートした。二次抗体を除去し、プレートを毎回２００μｌ／ウェルのＰＢＳＴ（０.０５％ｔｗｅｅｎ－２０を含む１ｘＰＢＳ）で、７回洗浄した。５０μｌ／ウェルのＴＭＢ（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ＃８５－００－４２０１－５６, ｗｗｗ.ｅｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ.ｃｏｍ）を加えて、プレートを室温で数分間インキュベートした。その後、５０μｌ／ウェルの２ＮＨ２ＳＯ４を加えて反応を停止した。４５０ｎｍでプレートを読み取った。結果を表２に示した。抗ＩＬ－２５抗体は、ＩＬ－２５には結合したが、ヒトＩＬ－１７Ａ、１７Ｂ、１７Ｃ、１７Ｄ、１７Ｆには結合しなかったことから、他のＩＬ－１７ファミリーメンバーに対して交差反応性を有しないことが分かる。

実施例７.マウスとカニクイザルのＩＬ－２５に対する交差反応性（結合アッセイ）
抗ＩＬ－２５抗体の、マウスとカニクイザルのＩＬ－２５に対する結合は、ＥＬＩＳＡにより測定した。アッセイは、ヒトＩＬ－２５に代えて、カニクイザルＩＬ－２５（ＧｅｎｅＩＤ：ＸＭ_００５５６０８６１、ｓｔａｎｄａｒｄｍｏｌｅｃｕｌａｒｂｉｏｌｏｇｙｍｅｔｈｏｄ、ＣａｒｓｏｎＳ, ＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ, ２０１２に従って自社生産した）とマウスＩＬ－２５（ＧｅｎｅＩＤ：ＡＦ４５８０６０.１、ｓｔａｎｄａｒｄｍｏｌｅｃｕｌａｒｂｉｏｌｏｇｙｍｅｔｈｏｄ、ＣａｒｓｏｎＳ, ＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ, ２０１２に従って自社生産した）をそれぞれ用いた以外、実施例６と同様の方法で行った。図４に示すように、抗ＩＬ２５抗体は、ネズミとカニクイザルのＩＬ－２５の両方に対して結合能力を有した。そのため、抗ＩＬ２５抗体は、ネズミ又はカニクイザルの動物疾患モデルにも使用することができる。

カニクイザルのＩＬ－２５に対する交差反応性によると、マウスとカニクイザルが、抗ＩＬ２５抗体の薬物動態学、薬力学、毒物学試験に適格であることが分かる。抗ＩＬ－２５抗体を医薬組成物として開発することは有利である。

実施例８抗ＩＬ－２５抗体の効果のインビボ動物リサーチ
アレルギー性喘息は、様々な挑発的な刺激によって誘発される、制御不能な気道高反応性（ＡＨＲ）を特徴とし、また、肺への２型の炎症性浸潤と関係している。２型の免疫反応は、ＩｇＥ、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－１３などのサイトカインを産生するＣＤ４+ ＴＨ２細胞サブセットの存在を特徴とする。インターロイキン（ＩＬ）－２５（ＩＬ－１７Ｅ）は、喘息の発症メカニズムに重要な役割を果たしていることが証明されている。ＩＬ－２５の過剰発現や外因性投与により、上皮細胞の増生、粘液の過剰分泌、気道の高反応性などの、生体内の喘息の病態生理学特徴は再現した。

抗ＩＬ－２５抗体（１８Ｈ３）のｉｎｖｉｖｏ有効性については、Ｃ５７ＢＬ６Ｊマウス（ｎ=５/群、８週齢、体重：１８－２０ｇ、ＢｅｉｊｉｎｇＶｉｔａｌＲｉｖｅｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙＡｎｉｍａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＣｏ.Ｌｔｄ.から購入可能である）の、ＯＶＡ誘発された喘息モデルに対する治療において検討した。１日目に、明ばん中のチキンオバルブミン０.５ｍｇ/ｍｌ（ＰＢＳで１ｍｇ/ｍｌＯＶＡを作ってフィルターで滅菌し、ミョウバンと１:１の比率で混合した後、１時間ボルテックスした）を、マウスあたり２００μｌで、すべてのマウスに対して腹腔内注射した。１７日目に、すべてのマウスに対して、２回目のＩＰ免疫（１日目と同じプロトコル）を適用し、そして、麻酔したマウスに、ＰＢＳ中のオバルブミン５０μｌ（ＯＶＡ１００μｇ）を１回目の鼻腔内注射（ＰＢＳで２ｍｇ／ｍｌＯＶＡを作って、フィルターで滅菌し、マウスあたり５０μｌ）で投与した。２５、２６、２７日目には、鼻腔内注射を毎日繰り返し、そして２８日目に、最後の注射から２４時間以内にマウスを犠牲にした。体重に応じて、ＰＢＳ、抗ＩＬ２５抗体１８Ｈ３（図５の抗ｈＩＬ２５抗体）について投与量を調整した（１０μｌ/ｇ）。ｉｎｖｉｖｏ試験のデザインを表３に示した。マウスから採取した血液を遠心分離（８０００ｒｐｍ，１０分）するにより血清サンプルを製造し、分析まで－８０℃で保存した。ＢＡＬＦ（気管支肺胞洗浄液）の採取：致死量のペントバルビタールナトリウム（１５０ｍｇ/Ｋｇ）で動物を安楽死させ、直後に右の肺を０.７ｍｌの冷ＰＢＳで破碎し、ＢＡＬＦを約０.５ｍｌ採取した。その後、ＢＡＬＦを２５００ｒｐｍで５分間遠心分離して上清を回収し、分析まで－８０℃で保存した。血清およびＢＡＬＦサンプルは、サイトカインＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－１３とＩｇＥの測定に供した。これらのサイトカインの測定キットは、ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ社から購入可能である。図５に示すように、抗ＩＬ２５抗体１８Ｈ３は、喘息動物モデルにおいて、ＩＬ－４、ＩＬ－１３、ＩＬ－５およびＩｇＥの産生を抑制した。このデータから、抗ＩＬ２５抗体は、これらのサイトカイン及び/又はＩｇＥの上昇を表示している自己免疫疾患および炎症性疾患（即ち、喘息）の治療に使用できることが分かる。

明確に理解するために、例示および実施例をあげて、本発明を詳細に説明するが、本発明の範囲を何らこれらの説明および実施例に限定されるものと解釈されるべきではない。本明細書で引用したすべての特許、及び科学文献の開示内容は、引用によりその全体が本出願に組み込まれる。

Claims

抗ＩＬ－２５抗体であって、該抗体が（ｉ）ネズミ抗体１８Ｈ３と競合して（ヒト）ＩＬ－２５に結合する抗体、（ｉｉ）ネズミ抗体１８Ｈ３と同じ（ヒト）ＩＬ－２５のエピトープに結合する抗体、及び／又は（ｉｉｉ）ネズミ抗体１８Ｈ３と（ヒト）ＩＬ－２５の間の結合をクロスブロックする抗体である、抗ＩＬ－２５抗体。
前記抗体が、重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域が、
ａ）下記（ｉ）又は（ｉｉ）を含み、又は実質的にからなるＣＤＲ１：（ｉ）アミノ酸配列ＧＦＳＬＳＴＳＧＭＧＬＧ（ＳＥＱＩＤＮＯ：１）、（ｉｉ）アミノ酸配列ＧＦＳＬＳＴＳＧＭＧＬＧ（ＳＥＱＩＤＮＯ：１）とのアミノ酸変異を３つ、２つ又は１つしか有しないアミノ酸配列、
ｂ）下記（ｉ）又は（ｉｉ）を含み、又は実質的にからなるＣＤＲ２、（ｉ）アミノ酸配列ＨＩＷＷＤＤＶＫＨＹＫＰＡＬＫＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ：２）、（ｉｉ）アミノ酸配列ＨＩＷＷＤＤＶＫＨＹＫＰＡＬＫＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ：２）とのアミノ酸変異を３つ、２つ又は１つしか有しないアミノ酸配列、および
ｃ）下記（ｉ）又は（ｉｉ）を含み、又は実質的にからなるＣＤＲ３：（ｉ）アミノ酸配列ＭＧＱＬＨＹＹＧＹＤＹＡＭＤＹ（ＳＥＱＩＤＮＯ：３）、（ｉｉ）アミノ酸配列ＭＧＱＬＨＹＹＧＹＤＹＡＭＤＹ（ＳＥＱＩＤＮＯ：３）とのアミノ酸変異を３つ、２つ又は１つしか有しないアミノ酸配列、
を含み、前記軽鎖可変領域が、
ａ）下記（ｉ）又は（ｉｉ）を含み、又は実質的にからなるＣＤＲ１、（ｉ）アミノ酸配列ＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹ（ＳＥＱＩＤＮＯ：４）、（ｉｉ）アミノ酸配列ＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹ（ＳＥＱＩＤＮＯ：４）とのアミノ酸変異を３つ、２つ又は１つしか有しないアミノ酸配列、
ｂ）下記（ｉ）又は（ｉｉ）を含み、又は実質的にからなるＣＤＲ２：（ｉ）アミノ酸配列ＲＴＳＮＬＡＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ：５）、（ｉｉ）アミノ酸配列ＲＴＳＮＬＡＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ：５）とのアミノ酸変異を３つ、２つ又は１つしか有しないアミノ酸配列、および
ｃ）下記（ｉ）又は（ｉｉ）を含み、又は実質的にからなるＣＤＲ３：（ｉ）アミノ酸配列ＱＬＹＨＳＹＰＰＴＷＴ（ＳＥＱＩＤＮＯ：６）、（ｉｉ）アミノ酸配列ＱＬＹＨＳＹＰＰＴＷＴ（ＳＥＱＩＤＮＯ：６）とのアミノ酸変異を３つ、２つ又は１つしか有しないアミノ酸配列、
を含む、請求項１に記載の抗ＩＬ－２５抗体。
前記重鎖可変領域が、アミノ酸配列ＧＦＳＬＳＴＳＧＭＧＬＧ（ＳＥＱＩＤＮＯ：１）を有するＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＨＩＷＷＤＤＶＫＨＹＫＰＡＬＫＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ：２）を有するＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＭＧＱＬＨＹＹＧＹＤＹＡＭＤＹ（ＳＥＱＩＤＮＯ：３）を有するＣＤＲ３を含み、
前記軽鎖可変領域が、アミノ酸配列ＳＡＳＳＳＶＳＹＭＹ（ＳＥＱＩＤＮＯ：４）を有するＣＤＲ１と、アミノ酸配列ＲＴＳＮＬＡＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ：５）を有するＣＤＲ２と、アミノ酸配列ＱＬＹＨＳＹＰＰＴＷＴ（ＳＥＱＩＤＮＯ：６）を有するＣＤＲ３を含む、請求項２に記載の抗ＩＬ－２５抗体。
前記重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２のアミノ酸配列と少なくとも７０％、例えば少なくとも８０％、例えば少なくとも８５％、例えば少なくとも９０％又は９５％以上の配列同一性を有し、及び／又は
前記軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１３のアミノ酸配列と少なくとも７０％、例えば少なくとも８０％、例えば少なくとも８５％、例えば少なくとも９０％又は９５％以上の配列同一性を有する、請求項１～３のいずれか１項に記載の抗ＩＬ－２５抗体。
前記重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：７、ＳＥＱＩＤＮＯ：８、ＳＥＱＩＤＮＯ：９またはＳＥＱＩＤＮＯ：１２のアミノ酸配列を含み、及び／又は
前記軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１またはＳＥＱＩＤＮＯ：１３のアミノ酸配列を含む、請求項１～４のいずれか１項に記載の抗ＩＬ－２５抗体。
前記抗体が、以下のｉ）、ｉｉ）、ｉｉｉ）、ｉｖ）、ｖ）、ｖｉ）またはｖｉｉ）：
ｉ）重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：７のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０のアミノ酸配列を含む抗体、
ｉｉ）重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：７のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１のアミノ酸配列を含む抗体、
ｉｉｉ）重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：８のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０のアミノ酸配列を含む抗体、
ｉｖ）重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：８のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１のアミノ酸配列を含む抗体、
ｖ）重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：９のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１０のアミノ酸配列を含む抗体、
ｖｉ）重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：９のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１１のアミノ酸配列を含む抗体、
ｖｉｉ）重鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１２のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域が、ＳＥＱＩＤＮＯ：１３のアミノ酸配列を含む抗体、
のいずれかに記載の抗体である、請求項５に記載の抗ＩＬ－２５抗体。
前記抗体が、モノクローナル抗体、及び／又はネズミ抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体であり、好ましくはＩｇＧクラスに属する抗体である、請求項１に記載の抗ＩＬ－２５抗体。
前記抗体が、（ヒト）ＩＬ－２５に結合する抗体断片であり、好ましくは、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ－ＳＨ、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ－Ｃ、Ｆａｂ’－Ｃ、Ｆａｂ’－Ｃ－ＳＨ、Ｆａｂ－Ｃ－ＳＨ、ｓｃＦｖ、ダイアボディ、またはＦ（ａｂ’）２、ダイアボディ、線形抗体、一本鎖抗体分子（例えば、ｓｃＦｖ）、および、抗体断片により形成された多重特異性抗体からなる群から選ばれるものである、請求項１に記載の抗ＩＬ－２５抗体。
前記請求項のいずれか１項に記載の抗体をコードする、単離された核酸。
請求項９に記載の核酸を含む、宿主細胞。
請求項１０に記載の宿主細胞を、抗体が産生されるように培養することを含む、請求項１～８のいずれか１項に記載の抗体の製造方法。
請求項１～８のいずれか１項に記載の抗体と、薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
請求項１～８のいずれか１項に記載の抗体、請求項９に記載の核酸、請求項１０に記載の宿主細胞、または請求項１２に記載の医薬組成物を有効量で、被験者に投与することを含む、被験者におけるＩＬ－２５に関連した疾患の治療方法。
前記被験者が、哺乳類、好ましくはラット、マウス、サル、またはヒトである、請求項１３に記載の方法。
前記ＩＬ－２５に関連した疾患が、ＩｇＥ、ＩＬ－４、ＩＬ－５及び／又はＩＬ－１３が過剰発現／過剰生産されている自己免疫疾患、炎症性疾患または癌から選択され、好ましくはアレルギー性（炎症性）疾患、より好ましくは喘息（たとえば、アレルギー性喘息）、アトピー性皮膚炎、アトピー性アレルギー疾患、アレルギー性鼻炎、花粉症、アレルギー性結膜炎、湿疹、食物アレルギー、乾癬、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎、関節リウマチ（ＲＡ）、多発性硬化症（ＭＳ）、全身性エリテマトーデス、変形性関節症または炎症性腸疾患（ＩＢＤ）から選択される、請求項１３又は１４に記載の方法。
被験者におけるＩＬ－２５に関連した疾患の薬剤の製造のための、請求項１～８のいずれか１項に記載の抗体、請求項９に記載の核酸、請求項１０に記載の宿主細胞または請求項１２に記載の医薬組成物の使用。
被験者におけるＩＬ－２５に関連した疾患の治療方法に使用するための、請求項１～８のいずれか一項に記載の抗体、請求項９に記載の核酸、請求項１０に記載の宿主細胞または請求項１２に記載の医薬組成物。