JP2022186737A - コロナウイルス感染を治療するための方法および組成物 - Google Patents

Abstract

【課題】特定のウイルス感染に対して治療的に活性なオレアンドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、またはそれらの任意の組み合わせを含む改善された薬学的組成物が必要である。【解決手段】コロナウイルス科のウイルスによって引き起こされるウイルス感染などのウイルス感染を治療する方法が、提供される。少なくともオレアンドリンを有する組成物が、ウイルス感染を治療するために使用される。【選択図】図３０Ｂ

Description

参照による組み込み
３７ ＣＦＲ １．５２（ｅ）（５）に従って、本出願は、ＥＦＳを経由して電子フォーマットで承認されている配列表を含み、配列表は、参照により本明細書に組み込まれる。配列情報は、ＰＢＩ２２ＰＣＴ９_ＳＥＱ_ＳＴ２５．ｔｘｔと名付けられた大きさ１ＫＢの電子ファイルとして含まれ、Ｐａｔｅｎｔ－ｉｎ ３．５．１およびＣｈｅｃｋｅｒ ４．４．６を使用して２０２０年７月１０日に作成されており、参照によりその全体が本明細書によって組み込まれる。
本発明は、哺乳動物におけるアレナウイルス感染、ブニヤウイルス感染、フラビウイルス感染、トガウイルス感染、パラミクソウイルス感染、レトロウイルス感染、コロナウイルス感染またはフィロウイルス感染を治療するための抗ウイルス組成物およびその使用に関する。いくつかの実施形態は、出血性ウイルス感染の治療に関する。

Ｎｅｒｉｕｍ種のメンバーであるＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒは、亜熱帯アジア、米国南西部、および地中海に広く分布する観賞植物である。その医学的および毒物学的特性は、長い間認識されてきた。例えば、痔疾、潰瘍、ハンセン病、ヘビ咬傷、癌、腫瘍、神経障害、疣贅および細胞増殖性疾患の治療での使用が提案されている。Ｚｉｂｂｕら（Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．（２０１０），２（６），３５１－３５８）は、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの化学的および薬理学的活性について簡単に触れている。
Ｎｅｒｉｕｍ種の植物からの構成成分の抽出は、伝統的に、沸騰水、冷水、超臨界流体または有機溶媒を使用して実施されている。

ＡＮＶＩＲＺＥＬ（商標）（ＯｚｅｌのＵＳ５，１３５，７４５）は、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの熱水抽出物の濃縮形態または粉末形態を含む。Ｍｕｌｌｅｒら（Ｐｈａｒｍａｚｉｅ．（１９９１）Ｓｅｐｔ．４６（９），６５７－６６３）は、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの水抽出物の分析に関する結果を開示している。それらは、存在する多糖類が主にガラクツロン酸であることを報告している。他の糖類には、ラムノース、アラビノース、およびガラクトースが含まれる。Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの熱水抽出物内の多糖類含有量および多糖類の個々の糖組成物もまた、Ｎｅｗｍａｎら（Ｊ．Ｈｅｒｂａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ，（２００１）ｖｏｌ１，ｐｐ．１－１６）によって報告されている。熱水抽出物ＡＮＶＩＲＺＥＬ（商標）の組成分析は、Ｎｅｗｍａｎら（Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．（２０００），７２（１５），３５４７－３５５２）によって説明されている。Ｓｅｌｖａｒａｊらの米国特許第５，８６９，０６０号は、Ｎｅｒｉｕｍ種の抽出物および生成の方法に関する。抽出物を調製するために、植物材料を水に入れて沸騰させる。次いで、粗抽出物を植物から分離し、濾過によって滅菌する。次いで、得られた抽出物は、凍結乾燥され、粉末を生成することができる。米国特許第６，５６５，８９７号（米国登録前第２００２０１１４８５２号およびＳｅｌｖａｒａｊらのＰＣＴ国際公開第２０００／０１６７９３号）は、実質的に減菌の水抽出物の調製のための熱水抽出プロセスを開示している。Ｉｓｈｉｋａｗａら（Ｊ．Ｎｕｔｒ．Ｓｃｉ．Ｖｉｔａｍｉｎｏｌ．（２００７），５３，１６６－１７３）は、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの熱水抽出物、ならびにクロロホルム、メタノールおよび水の混合物を使用した液体クロマトグラフィーによるその分画を開示している。これらはまた、Ｎ．ｏｌｅａｎｄｅｒの葉抽出物が、ＩＩ型糖尿病の治療に使用されていることを報告している。２００６年８月２４日に公開されたＰａｎｙｏｓａｎのＵＳ２００６０１８８５８５は、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの熱水抽出物を開示している。２０１９年６月１８日に発行されたＳｍｏｔｈｅｒｓのＵＳ１０３２３０５５は、植物材料をアロエおよび水で抽出して、アロエおよび強心配糖体を含む抽出物を得る方法を開示している。２００７年７月５日に公開されたＲａｓｈａｎらのＵＳ２００７０１５４５７３は、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの冷水抽出物およびその使用を開示している。

Ｅｒｄｅｍｏｇｌｕら（Ｊ．Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．（２００３）Ｎｏｖ．８９（１），１２３－１２９）は、抗侵害受容作用および抗炎症作用に基づいて、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒを含む植物の水性抽出物およびエタノール抽出物の比較結果を開示している。Ｆａｒｔｙａｌら（Ｊ．Ｓｃｉ．Ｉｎｎｏｖ．Ｒｅｓ．（２０１４），３（４），４２６－４３２）は、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒのメタノール抽出物、水性抽出物および石油エーテル抽出物の、その抗菌活性に基づく比較結果を開示している。
Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの有機溶媒抽出物もまた、Ａｄｏｍｅら（Ａｆｒ．Ｈｅａｌｔｈ Ｓｃｉ．（２００３）Ａｕｇ．３（２），７７－８６；ｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、ｅｌ－Ｓｈａｚｌｙら（Ｊ．Ｅｇｙｐｔ Ｓｏｃ．Ｐａｒａｓｉｔｏｌ．（１９９６），Ａｕｇ．２６（２），４６１－４７３；ｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、Ｂｅｇｕｍら（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（１９９９）Ｆｅｂ．５０（３），４３５－４３８；ｍｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、Ｚｉａら（Ｊ．Ｅｔｈｎｏｌｐｈａｒｍａｃｏｌ．（１９９５）Ｎｏｖ．４９（１），３３－３９；ｍｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、およびＶｌａｓｅｎｋｏら（Ｆａｒｍａｔｓｉｉａ．（１９７２）Ｓｅｐｔ．－Ｏｃｔ．２１（５），４６－４７；ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）によって開示される。Ｔｕｒｋｍｅｎら（Ｊ．Ｐｌａｎａｒ Ｃｈｒｏｍａ．（２０１３），２６（３），２７９－２８３）は、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの葉および茎のエタノール水溶液抽出物を開示している。１９７４年９月３日に発行されたＹａｍａｕｃｈｉのＵＳ３８３３４７２は、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｄｏｒｕｍ ＳＯＬ（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ Ｌｉｎｎ）の葉の、水、有機溶媒または水性有機溶媒での抽出を開示しており、葉を、６０℃～１７０℃に加熱し、次いで抽出し、有機溶媒は、メタノール、エタノール、プロピルエーテルまたはクロロホルムである。

Ｎｅｒｉｕｍ種の超臨界流体抽出物は、知られており（ＵＳ８３９４４３４、ＵＳ８１８７６４４、ＵＳ７４０２３２５）、神経障害（ＵＳ８４８１０８６、ＵＳ９２２０７７８、ＵＳ９３５８２９３、ＵＳ２０１６０２４３１４３Ａ１、ＵＳ９８７７９７９、ＵＳ１０３８３８８６）および細胞増殖性障害（ＵＳ８３６７３６３、ＵＳ９４９４５８９、ＵＳ９８４６１５６）、ならびにいくつかのウイルス感染（ＵＳ１０５９６１８６、ＷＯ２０１８０５３１２３Ａ１、ＷＯ２０１９０５５１１９Ａ１）を治療することにおいて有効性が示されている。

トリテルペンは、幅広い様々な治療活性を有することが知られている。既知のトリテルペンのいくつかには、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、バルドキソロン、マスリン酸などが含まれる。トリテルペンの治療活性は、トリテルペンの組み合わせとしてではなく、主に個別に評価されている。
オレアノール酸は、バルドキソロンなどの化合物に代表されるトリテルペノイドのクラスに属し、それは、転写因子Ｎｒｆ２の活性化が抗酸化転写応答要素（ＡＲＥ）を含む下流の抗酸化遺伝子のプログラムの転写増加につながる自然細胞相２解毒経路の強力な活性化因子であることが示されている。バルドキソロン自体は、炎症状態の臨床試験で広く調査されているが、しかしながら、高められた濃度のバルドキソロンを含むある特定のトリテルペノイドの既知の細胞毒性に関連している可能性がある有害事象のため、慢性腎臓疾患の第３相臨床試験は終了した。

他の治療成分と組み合わせてトリテルペンを含む組成物は、植物抽出物として見出される。Ｆｕｍｉｋｏら（Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ（２００２），２５（１１），１４８５－１４８７）は、トリパノソーマ症を治療するためのＲｏｓｍａｒｉｍｕｓ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ Ｌ．のメタノール抽出物の評価を開示している。Ａｄｄｉｎｇｔｏｎら（ＵＳ８４８１０８６、ＵＳ９２２０７７８、ＵＳ９３５８２９３、ＵＳ２０１６／０２４３１４３Ａ１）は、神経学的状態の治療のためのオレアンドリンおよびトリテルペンを含むＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの超臨界流体抽出物（ＳＣＦ；ＰＢＩ－０５２０４）を開示している。Ａｄｄｉｎｇｔｏｎら（ＵＳ９０１１９３７、ＵＳ２０１５／０２８３１９１Ａ１）は、神経学的状態の治療のためのオレアンドリンおよびトリテルペンを含むＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒのＳＣＦ抽出物のトリテルペン含有画分（ＰＢＩ－０４７１１）を開示している。Ｊａｇｅｒら（Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ（２００９），１４，２０１６－２０３１）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含む様々な植物抽出物を開示している。Ｍｉｓｈｒａら（ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ２０１６ ２５；１１（７）：ｅ０１５９４３０．Ｅｐｕｂ ２０１６ Ｊｕｌ ２５）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含むＢｅｔｕｌａ ｕｔｉｌｉｓ樹皮の抽出物を開示している。Ｗａｎｇら（Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ（２０１６），２１，１３９）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含むＡｌｓｔｏｎｉａ ｓｃｈｏｌａｒｉｓの抽出物を開示している。Ｌ．ｅ Ｓｉｌｖａら（Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ（２０１２），１７，１２１９７）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含むＥｒｉｏｐｅ ｂｌａｎｃｈｅｔｔｉの抽出物を開示している。Ｒｕｉら（Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｓｃｉ．（２０１２），１３，７６４８－７６６２）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含むＥｕｃａｐｌｙｐｔｕｓ ｇｌｏｂｕｌｕｓの抽出物を開示している。Ａｙａｔｏｌｌａｈｉら（Ｉｒａｎ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．（２０１１），１０（２），２８７－２９４）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含むＥｕｐｈｏｒｂｉａ ｍｉｃｒｏｓｃｉａｄｉａの抽出物を開示している。Ｗｕら（Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ（２０１１），１６，１－１５）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含むＬｉｇｕｓｔｒｕｍ種の抽出物を開示している。Ｌｅｅら（Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ（２０１０），３３（２），３３０）は、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、および他の構成成分の混合物を含むＦｏｒｓｙｔｈｉａ ｖｉｒｉｄｉｓｓｉｍａの抽出物を開示している。

オレアノール酸（ＯまたはＯＡ）、ウルソール酸（ＵまたはＵＡ）、およびベツリン酸（ＢまたはＢＡ）は、ＰＢＩ－０５２０４（ＰＢＩ－２３；Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの超臨界流体抽出物）およびＰＢＩ－０４７１１（ＰＢＩ－０５２０４のトリテルペン含有画分０～４）に見出される３つの主要なトリテルペン構成成分である。発明者ら（本発明者のうちの２名）は、同様の濃度で脳スライス酸素グルコース欠乏（ＯＧＤ）モデルアッセイにおいてそれらの神経保護活性を比較することによる有効性に向けたトリテルペンの寄与について、以前に報告した（Ｖａｎ ＫａｎｅｇａｎらのＮａｔｕｒｅ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｒｅｐｏｒｔｓ（Ｍａｙ ２０１６），６：２５６２６．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓｒｅｐ２５６２６）。ＰＢＩ－０５２０４（ＰＢＩ）およびＰＢＩ－０４７１１（画分０～４）は、神経保護活性を提供することを見出した。

Ｎｅｒｉｕｍ種の抽出物は、強心配糖体、グリコン、ステロイド、トリテルペン、多糖類などの多数の異なるクラスの化合物を含むことが知られている。特定の化合物には、オレアンドリン；ネリタロシド；オドロシド；オレアノール酸；ウルソール酸；ベツリン酸；オレアンドリゲニン（ｏｌｅａｎｄｒｉｇｅｎｉｎ）；オレアシドＡ；ベツリン（ウルス－１２－エン－３－β，２８－ジオール）；２８－ノルウルス－１２－エン－３－β－オール；ウルス－１２－エン－３β－オール；３β，３β－ヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－酸；３β，２０α－ジヒドロキシウルス－２１－エン－２８－酸；３β，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－２８－酸；３β，１３β－ジヒドロキシウルス－１１－エン－２８－酸；３β，１２α－ジヒドロキシオレアナン－２８，１３β－オリド；３β，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアナン－２８－酸；およびその他の構成成分が挙げられる。

ウイルス性出血熱（ＶＨＦ）は、アレナウイルス科、ブニヤウイルス科、フィロウイルス科、フラビウイルス科、およびパラミクソウイルス科の５つの異なるウイルス科によって引き起こされ得る。フィロウイルス、例えば、エボラウイルス（ＥＢＯＶ）およびマールブルグウイルス（ＭＡＲＶ）は、人間に知られている最も病原性の高いウイルスであり、致死率が最大９０％のウイルス性出血熱の発生の原因物質である。各ビリオンは、一本鎖マイナスセンスＲＮＡの１つの分子を含む。支持療法または対症療法以外に、ＥＢＯＶ（エボラウイルス）およびＭＡＲＶ（マールブルグウイルス）感染、すなわちフィロウイルス感染の治療に利用可能な市販の治療効果のある薬物および予防薬は存在しない。５つの種のエボラウイルスが特定されている：タイフォレスト（以前のコートジボワール）、スーダン、ザイール、レストン、およびブンディブギョ。

マイナスセンス一本鎖エンベロープＲＮＡウイルス（（－）－（ｓｓ）－ｅｎｖＲＮＡＶ）は、アレナウイルス科、ブニヤウイルス科（ブニヤウイルス目）、フィロウイルス科、オルトミクソウイルス科、パラミクソウイルス科およびラブドウイルス科におけるウイルスを含む。マイナスウイルスＲＮＡは、ｍＲＮＡに相補的であり、翻訳の前にＲＮＡポリメラーゼによりプラスＲＮＡに変換されなければならない；したがって、マイナスセンスウイルスの精製したＲＮＡは、複製するためにプラスセンスＲＮＡに変換される必要があるので、それ自体感染性ではない。アレナウイルス科からの例示的なウイルスおよび感染症は、ラッサウイルス、無菌性髄膜炎、ガナリトウイルス、フニンウイルス、ルジョウイルス、マチュポウイルス、サビアウイルスおよびホワイトウォーターアロヨウイルスを含む。ブニヤウイルス科からの例示的なウイルスおよび感染症は、ハンタウイルス、クリミア－コンゴ出血熱オルトナイロウイルスを含む。パラミクソウイルス科からの例示的なウイルスおよび感染症は、ムンプスウイルス、ニパウイルス、ヘンドラウイルス、呼吸器多核体ウイルス（ＲＳＶ）、ヒトパラインフルエンザウイルス（ＨＰＩＶ）およびＮＤＶを含む。オルトミクソウイルス科からの例示的なウイルスおよび感染症は、インフルエンザウイルス（ＡからＣ）、イサウイルス、トゴトウイルス、クアランジャウイルス、Ｈ１Ｎ１、Ｈ２Ｎ２、Ｈ３Ｎ２、Ｈ１Ｎ２、スペイン風邪、アジア風邪、ホンコン風邪、ソ連風邪を含む。ラブドウイルス科からの例示的なウイルスおよび感染症は、狂犬病ウイルス、ベシクロウイルス、リッサウイルス、サイトラブドウイルスを含む。

フラビウイルスは、プラスセンス一本鎖エンベロープＲＮＡウイルス（（＋）－（ｓｓ）－ｅｎｖＲＮＡＶ）である。それらは、節足動物、主にダニおよび蚊に見出され、世界中で広範囲の罹患率および死亡率を引き起こす。蚊が媒介するウイルスのいくつかには、黄熱病、デング熱、日本脳炎、西ナイルウイルス、およびジカウイルスが含まれる。ダニ媒介性ウイルス感染には、ダニ媒介性脳炎、キャサヌール森林病、アルフルマ（Ａｌｋｈｕｒｍａ）病、オムスク出血熱が含まれる。出血性感染ではないが、ポワッサンウイルスはフラビウイルスである。（＋）－（ｓｓ）－ｅｎｖＲＮＡＶは、コロナウイルス科（ヒトおよび動物病原体）、フラビウイルス科（ヒトおよび動物病原体）、トガウイルス科（ヒトおよび動物病原体）およびアルテルウイルス科（動物病原体）を含む。

コロナウイルス（ＣｏＶ）は、コロナウイルス科の一般名称である。ヒトでは、ＣｏＶは、典型的には軽度であるが、ＳＡＲＳ（重度急性呼吸器症候群）－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ（中東呼吸器症候群）－ＣｏＶおよびＣＯＶＩＤ－１９などのまれな形態では致命的になり得る呼吸器感染症を引き起こす。ＣｏＶは、らせん対称のヌクレオカプシドを有し、ゲノムサイズは、約２６～約３２ キロベースの範囲である。他の例示的なヒトＣｏＶは、ＣｏＶ ２２９Ｅ、ＣｏＶ ＮＬ６３、ＣｏＶ ＯＣ４３、ＣｏＶ ＨＫＵ１およびＣｏＶ ＨＫＵ２０を含む。ＣｏＶのエンベロープは、３つの糖タンパク質を持つ：Ｓ － スパイクタンパク質：受容体結合、細胞融合、主要抗原；Ｅ － エンベロープタンパク質：エンベロープを伴う小さいタンパク質；およびＭ － 膜タンパク質：膜貫通 － 出芽＆エンベロープ形成。いくつかの種類のＣｏＶでは、第４の糖タンパク質が存在する：ＨＥ － ヘマグルチニン－エステラーゼ。ゲノムは、５’メチル化キャップおよび３’ポリ－Ａを有し、ｍＲＮＡとして直接機能する。ＣｏＶのヒト細胞への侵入は、エンドサイトーシスおよび膜融合を経由して発生し；複製は、細胞の細胞質において発生する。ＣｏＶは、呼吸器分泌物のエーロゾルにより、糞口経路により、また機械的伝播により伝播される。大半のウイルスの成長は、上皮細胞で発生する。時折、肝臓、腎臓、心臓または眼、ならびにマクロファージなどの他の細胞型が感染し得る。風邪様の呼吸器感染症では、成長は、上気道の上皮に限局して現れる。コロナウイルス感染は、きわめて一般的であり、世界中で発生する。感染症の発生率は、季節性が強く、冬に子供で発生率が最大である。成人の感染はさほど一般的ではない。コロナウイルス血清型の数および抗原変異の程度は、不明である。再感染は、生涯を通じて発生するらしく、これは、複数の血清型（少なくとも４つが知られている）および／または抗原変異を意味し、したがって、単一ワクチンでの、全ての血清型に対する免疫化の見込みはほとんどない。ＳＡＲＳは、発熱、乾性咳、呼吸困難（息切れ）、頭痛および低酸素血症（低血液酸素濃度）を含む症状を有するある種類のウイルス肺炎である。典型的な検査所見の知見は、リンパ球減少症（リンパ球数の減少）および緩やかに高められたアミノトランスフェラーゼレベル（肝臓の損傷を指示する）を含む。死亡は、肺胞の損傷による進行性呼吸器不全に起因し得る。ＳＡＲＳの典型的な臨床経過は、感染第１週の間での症状の改善、続いて第２週の間での悪化を伴う。ヒトＣｏＶに対して有効な抗ウイルス治療には、かなりの必要性が依然ある（組成物および方法）。

オレアンドリンおよびＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの抽出物は、ＨＩＶ－１のｇｐ１２０エンベロープ糖タンパク質が、成熟ウイルス粒子へと組み込まれるのを予防し、インビトロでウイルスの感染性を阻害することが示されている（Ｓｉｎｇｈら、Ｆｉｔｏｔｅｒａｐｉａ（２０１３）８４，３２－３９の“Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ ｄｅｒｉｖｅｄ ｃａｒｄｉａｃ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅ ｏｌｅａｎｄｒｉｎ ｉｓ ａ ｎｏｖｅｌ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ ＨＩＶ ｉｎｆｅｃｔｉｖｉｔｙ”）。

オレアンドリンは、抗ＨＩＶ活性を示したが、多くのウイルスに対して評価されていない。トリテルペンのオレアノール酸、ベツリン酸、およびウルソール酸は、異なるレベルの抗ウイルス活性を示すことが報告されているが、多くのウイルスに対して評価されていない。ベツリン酸は、ＨＳＶ－１株１Ｃ、インフルエンザＡ Ｈ７Ｎ１、ＥＣＨＯ ６、およびＨＩＶ－１に対するいくつかの抗ウイルス活性を示している。オレアノール酸は、ＨＩＶ－１、ＨＥＰ Ｃ、およびＨＣＶ Ｈ株ＮＳ５Ｂに対していくつかの抗ウイルス活性を示している。ウルソール酸は、ＨＩＶ－１、ＨＥＰ Ｃ、ＨＣＶ Ｈ株ＮＳ５Ｂ、ＨＳＶ－１、ＨＳＶ－２、ＡＤＶ－３、ＡＤＶ－８、ＡＤＶ－１１、ＨＥＰ Ｂ、ＥＮＴＶ ＣＶＢ１、およびＥＮＴＶ ＥＶ７１に対していくつかの抗ウイルス活性を示している。オレアンドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、およびベツリン酸の抗ウイルス活性は、特定のウイルスに対する有効性に関しては予測不可能である。オレアンドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、および／またはベツリン酸が抗ウイルス活性をほとんどまたはまったく有さないウイルスが存在し、それはオレアンドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、および／またはベツリン酸が特定の属のウイルスに対して抗ウイルス活性を示すかどうかを先験的に予測できないことを意味する。

Ｂａｒｒｏｗｓら（Ｃｅｌｌ Ｈｏｓｔ Ｍｉｃｒｏｂｅ（２０１６），２０，２５９－２７０の“Ａ ｓｃｒｅｅｎ ｏｆ ＦＤＡ－ａｐｐｒｏｖｅｄ ｄｒｕｇｓ ｆｏｒ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ Ｚｉｋａｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ”）は、ジゴキシンがジカウイルスに対する抗ウイルス活性を示すが、用量が高すぎて毒性がある可能性が高いことを報告している。Ｃｈｅｕｎｇら（Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓ．（２０１４）１１１，９３－９９の“Ａｎｔｉｖｉｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｌａｎａｔｏｓｉｄｅ Ｃ ａｇａｉｎｓｔ ｄｅｎｇｕｅ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ”）は、ラナトシドＣがデングウイルスに対する抗ウイルス活性を示すことを報告している。

ヒトＴ－リンパ好性ウイルス１型（ＨＴＬＶ－１）は、レトロウイルス科およびデルタレトロウイルス属のファミリーに属するレトロウイルスである。これは、ＤＮＡに逆転写され、次いで、細胞のＤＮＡに統合されるプラスセンスＲＮＡゲノムを有する。統合されると、ＨＴＬＶ－１は、ウイルスのシナプスを介して細胞から細胞へと広がることができるプロウイルスとしてのみ存在し続ける。存在する場合、いくつかの無細胞ビリオンが生成され、通常、検出可能なウイルスは血漿に存在しないが、ウイルスは、生殖器分泌物に存在する。ＨＴＬＶ－１は、主にＣＤ４＋Ｔ－リンパ球に感染し、とりわけ感染性皮膚炎、関節リウマチ、ブドウ膜炎、角結膜炎、乾燥症候群、シェーグレン症候群およびＨＡＭ／ＴＳＰを含むいくつかの自己免疫／炎症状態に加えて、まれには成人Ｔ－細胞白血病／リンパ腫（ＡＴＬＬ）、さらに治療抵抗性の確率が高い侵襲性の血液学的悪性疾患を引き起こし、一般に臨床的転帰が不良である。ＨＡＭ／ＴＳＰは、慢性的な進行性痙性対麻痺、尿失禁および軽度の知覚障害により臨床的に特徴付けられる。ＡＴＬＬは、ウイルス潜伏期、発癌性形質転換およびＨＴＬＶ－１－感染細胞のクローン展開に病原学的に関係するが、ＨＴＬＶ－１－関連脊髄症／熱帯性痙性対麻痺（ＨＡＭ／ＴＳＰ）などの炎症性疾患は、プロウイルス複製およびウイルス抗原の発現に対する自己免疫性および／または免疫病理学的応答によって引き起こされる。ＨＡＭ／ＴＳＰは、脊髄下部の損傷および脱髄をきたす進行性神経炎症性疾患である。ＨＴＬＶ－１に感染した循環Ｔ－細胞は、中枢神経系（ＣＮＳ）に浸潤し、ウイルスおよびＣＮＳの考えられる構成成分に対する免疫病原性応答を引き起こす。神経の損傷およびその後の変性は、ＨＡＭ／ＴＳＰを有する患者に重度の不能を引き起こし得る。ＣＮＳにおけるプロウイルス複製およびＨＴＬＶ－１－感染細胞の増殖の持続が、ウイルス抗原に対して標的化された細胞毒性Ｔ－細胞の応答につながり、これは、神経組織の自己免疫性破壊に応答することがある。

強心配糖体は、いくつかのウイルスに対していくつかの抗ウイルス活性を示すことが示されているが、特定の化合物は、異なるウイルスに対して非常に異なるレベルの抗ウイルス活性を示し、それは、いくつかは非常に乏しい抗ウイルス活性を示し、いくつかは同じウイルスに対して高められたときにより良好な抗ウイルス活性を示すことを意味する。

特定のウイルス感染に対して治療的に活性なオレアンドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、またはそれらの任意の組み合わせを含む改善された薬学的組成物の必要性が残っている。

本発明は、哺乳動物対象のウイルス感染を治療および／または予防するための薬学的組成物および方法を提供する。本発明はまた、哺乳動物対象におけるウイルス感染、例えば、ウイルス性出血熱（ＶＨＦ）感染を治療するための薬学的組成物および方法を提供する。本発明はまた、薬学的組成物の投与により哺乳動物のウイルス感染を治療する方法を提供する。本発明者らは、ヒトおよび動物におけるウイルス感染の治療におけるそれらの使用を正当化するのに十分な抗ウイルス活性を示す抗ウイルス組成物を調製することに成功した。本発明者らは、特定の投与計画を用いる対応する治療方法を開発した。本発明者らは、特定の投与計画を用いる対応する治療方法を開発した。本発明はまた、ウイルス感染に罹るリスクのある対象を治療する予防方法であって、対象がウイルス感染に罹る前に長期治療期間にわたって繰り返しの頻度で１回以上の用量の抗ウイルス組成物を対象に慢性的に投与し、それによって対象がウイルス感染に罹ることを予防することを含み、抗ウイルス組成物がオレアンドリンを含む方法を提供する。

いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、ウイルス感染した細胞を有する対象に投与され、細胞は、Ｎａ，Ｋ－ＡＴＰａｓｅのアルファ－３対アルファ－１アイソフォームの高められた比を示す。
いくつかの実施形態では、ウイルス感染は、以下のウイルス科のいずれかによって引き起こされる：アレナウイルス、アルテルウイルス、ブニヤウイルス、フィロウイルス、フラビウイルス、オルトミクソウイルス、パラミクソウイルス、ラブドウイルス、レトロウイルス（詳細には、デルタレトロウイルス属）、コロナウイルスまたはトガウイルス。いくつかの実施形態では、ｔｈｅウイルス感染は、（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶまたは（－）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶによって引き起こされる。

本発明のいくつかの実施形態は、フィロウイルス感染、フラビウイルス感染、ヘニパウイルス感染、アルファウイルス感染、またはトガウイルス感染を治療するための組成物および方法を対象とする。治療され得るウイルス感染には、少なくとも、エボラウイルス、マールブルグウイルス、アルファウイルス、フラビウイルス、黄熱、デング熱、日本脳炎、西ナイルウイルス、ジカウイルス、ベネズエラウマ脳脊髄炎（脳炎）（ＶＥＥ）ウイルス、チクングニアウイルス、西部ウマ脳脊髄炎（脳炎）（ＷＥＥ）ウイルス、東部ウマ脳脊髄炎（脳炎）（ＥＥＥ）ウイルス、ダニ媒介性脳炎、キャサヌール森林病、アルフルマ（Ａｌｋｈｕｒｍａ）病、オムスク出血熱、ヘンドラウイルス、ニパウイルス、デルタレトロウイルス属、ＨＴＬＶ－１ウイルス、およびそれらの種が挙げられる。
本発明のいくつかの実施形態は、アレナウイルス科、アルテルウイルス、ブニヤウイルス科、フィロウイルス科、フラビウイルス科（フラビウイルス属）、オルトミキシオウイルス科、パラミクソウイルス科、ラブドウイルス科、レトロウイルス科（デルタレトロウイルス属）、コロナウイルス科、（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶ、（－）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶまたはトガウイルス科のウイルスからのウイルス感染を治療するための組成物および方法を対象とする。
本発明のいくつかの実施形態は、ヘニパウイルス属、エボラウイルス属、フラビウイルス属、マールブルグウイルス属、デルタレトロウイルス属、コロナウイルス（ＣｏＶ）またはアルファウイルス属のウイルスからのウイルス感染を治療するための組成物および方法を対象とする。

いくつかの実施形態では、（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶは、コロナウイルス科、フラビウイルス科、トガウイルス科およびアルテルウイルス科からなる群から選択されるウイルスである。
いくつかの実施形態では、（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶは、ヒトに対して病原性であるコロナウイルスである。いくつかの実施形態では、コロナウイルススパイクタンパク質は、ヒト組織におけるＡＣＥ２（アンジオテンシン変換酵素２）受容体に結合する。いくつかの実施形態では、コロナウイルスは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＣＯＶＩＤ－１９（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）、ＣｏＶ ２２９Ｅ、ＣｏＶ ＮＬ６３、ＣｏＶ ＯＣ４３、ＣｏＶ ＨＫＵ１およびＣｏＶ ＨＫＵ２０からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶは、フラビウイルス、黄熱ウイルス、デング熱ウイルス、日本脳炎ウイルス、西ナイルウイルス、ジカウイルス、ダニ媒介性脳炎ウイルス、キャサヌール森林病ウイルス、アルフルマ（Ａｌｋｈｕｒｍａ）病ウイルス、オムスク出血熱ウイルスおよびポワッサンウイルスからなる群から選択されるウイルスである。

いくつかの実施形態では、（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶは、アルボウイルス、東部ウマ脳脊髄炎ウイルス（ＥＥＥＶ）、西部ウマ脳脊髄炎ウイルス（ＷＥＥＶ）、ベネズエラウマ脳脊髄炎ウイルス（ＶＥＥＶ）、チクングニアウイルス（ＣＨＩＫＶ）、オニョンニョンウイルス（ＯＮＮＶ）、ポゴスタ病ウイルス、シンドビスウイルス、ロスリバー熱ウイルス（ＲＲＶ）およびセムリキ森林ウイルスからなる群から選択されるトガウイルス科ウイルスである。

いくつかの実施形態では、（－）－（ｓｓ）－ｅｎｖＲＮＡＶは、アレナウイルス科、ブニヤウイルス科（ブニヤウイルス目）、フィロウイルス科、オルトミクソウイルス科、パラミクソウイルス科、またはラブドウイルス科からなる群から選択されるウイルスである。
いくつかの実施形態では、アレナウイルス科ウイルスは、ラッサウイルス、無菌性髄膜炎、ガナリトウイルス、フニンウイルス、ルジョウイルス、マチュポウイルス、サビアウイルスおよびホワイトウォーターアロヨウイルスからなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、ブニヤウイルス科ウイルスは、ハンタウイルスおよびクリミア－コンゴ出血熱オルトナイロウイルスからなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、パラミクソウイルス科ウイルスは、ムンプスウイルス、ニパウイルス、ヘンドラウイルス、呼吸器多核体ウイルス（ＲＳＶ）、ヒトパラインフルエンザウイルス（ＨＰＩＶ）、およびニューカッスル病ウイルス（ＮＤＶ）からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、オルトミクソウイルス科ウイルスは、インフルエンザウイルス（ＡからＣ）、イサウイルス、トゴトウイルス、クアランジャウイルス、Ｈ１Ｎ１ウイルス、Ｈ２Ｎ２ウイルス、Ｈ３Ｎ２ウイルス、Ｈ１Ｎ２ウイルス、スペイン風邪ウイルス、アジア風邪ウイルス、ホンコン風邪ウイルス、およびソ連風邪ウイルスからなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、ラブドウイルス科ウイルスは、狂犬病ウイルス、ベシクロウイルス、リッサウイルス、およびサイトラブドウイルスからなる群から選択される。

本発明はまた、ＨＴＬＶ－１－関連状態または神経炎症性疾患の治療のための実施形態を提供する。いくつかの実施形態では、ＨＴＬＶ－１－関連状態または神経炎症性疾患は、脊髄症／熱帯性痙性対麻痺（ＨＡＭ／ＴＳＰ）、成人Ｔ－細胞白血病／リンパ腫（ＡＴＬＬ）、自己免疫状態、炎症状態、感染性皮膚炎、関節リウマチ、ブドウ膜炎、角結膜炎乾燥症候群、シェーグレン症候群、およびＳｔｒｏｎｇｙｌｏｉｄｅｓ ｓｔｅｒｃｏｒａｌｉｓからなる群から選択される。
本発明はまた、治療した細胞の培養物の上清に放出されたＨＴＬＶ－１粒子の感染を阻害する方法、また、ウイルス学的シナプスのＥｎｖ－依存性形態を阻害することによりＨＴＬＶ－１の細胞内伝播を低減させる方法であって、それを必要とする対象に、有効量の抗ウイルス組成物を投与することを含む方法を提供する。
いくつかの実施形態では、本発明は、ａ）特定の強心配糖体（複数可）、ｂ）複数のトリテルペン、またはｃ）特定の強心配糖体（複数可）および複数のトリテルペンの組み合わせを含む（から本質的になる）抗ウイルス組成物を提供する。

本発明の一態様は、抗ウイルス組成物の対象への慢性投与により対象のウイルス感染を治療する方法を提供する。対象は、治療有効量（治療関連用量）の組成物を対象に慢性投与し、それにより、ウイルス感染に関連する症状の緩和またはウイルス感染の改善を提供することによって治療される。対象への組成物の投与は、感染直後、または感染後１日から５日以内の任意の時間、またはウイルス感染の確定診断後の最も早い時間に開始することができる。ウイルスは、本明細書に記載される任意のウイルスであり得る。
したがって、本発明はまた、哺乳動物のウイルス感染を治療する方法を提供し、方法は、哺乳動物に１つ以上の治療有効用量の抗ウイルス組成物を投与することを含む。１回以上の用量は、毎日、毎週、または毎月の頻度で投与される。１日あたり１回以上の用量が投与され得る。ウイルスは、本明細書に記載される任意のウイルスであり得る。

本発明はまた、治療を必要とする対象においてウイルス感染を治療する方法を提供し、方法は、
対象がウイルス感染を有するかどうかを判定することと、
抗ウイルス組成物の投与を指示することと、
処方された初期投与計画に従って一定期間、抗ウイルス組成物の初期用量を対象に投与することと、
抗ウイルス組成物による治療に対する対象の臨床応答および／または治療応答の妥当性を定期的に判定することと、
対象の臨床応答および／または治療応答が妥当である場合、所望の臨床エンドポイントが達成されるまで、必要に応じて抗ウイルス組成物による治療を継続すること、または
対象の臨床応答および／または治療応答が初期用量および初期投与計画で妥当でない場合、対象の所望の臨床応答および／または治療応答が達成されるまで、用量を漸増または漸減させることと、を含む。
抗ウイルス組成物による対象の治療は、必要に応じて継続される。患者が、ウイルス感染に関連する特定の症状の低減または緩和などの所望の臨床的エンドポイント（複数可）に達するまで、用量または投与計画が必要に応じて調節され得る。臨床応答および／または治療応答の妥当性の判定は、ウイルス感染に精通した臨床医によって行われ得る。

本発明の方法の個々のステップは、別々の施設で、または同じ施設内で行うことができる。
本発明は、本明細書に記載される全ての実施形態に対する別の実施形態を提供し、オレアンドリンは、ジゴキシンで置き換えられる、ジゴキシンと組み合わせて使用される。本発明の方法は、オレアンドリン、ジゴキシン、またはオレアンドリンおよびジゴキシンの組み合わせを用いてよい。したがって、オレアンドリン、ジゴキシン、オレアンドリン含有組成物、ジゴキシン含有組成物、またはオレアンドリンおよびジゴキシン含有組成物は、本発明の方法に使用され得る。強心配糖体は、オレアンドリン、ジゴキシンまたはそれらの組み合わせを意味するように解釈できる。強心配糖体含有組成物は、オレアンドリン、ジゴキシンまたはそれらの組み合わせを含む。

本発明はまた、コロナウイルス感染、詳細にはヒトに対して病原性であるコロナウイルスの感染、例えばＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を治療する方法であって、前記感染を有する対象に、治療有効用量の強心配糖体（強心配糖体含有組成物）を慢性投与することを含む方法を提供する。
本発明はまた、コロナウイルス感染、詳細にはヒトに対して病原性であるコロナウイルスの感染、例えばＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を治療する２つの経路の方法であって、前記感染を有する対象に、治療有効用量の強心配糖体（強心配糖体含有組成物）を慢性投与し、それにより、前記コロナウイルスのウイルスの複製を阻害すること、および、前記コロナウイルスの子孫ウイルスの感染性を低減させることを含む方法を提供する。
本発明はまた、前記感染を有する対象に、複数回の治療有効用量の強心配糖体（強心配糖体含有組成物）を繰り返し投与することにより（本明細書で論じられている投与様式のいずれかを介して）、コロナウイルス感染、詳細にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を治療する方法を提供する。１回以上の用量は、１週間に１日以上にわたって、任意に１カ月あたり１週間以上にわたって、任意に１年あたり１カ月以上にわたって１日に投与され得る。

本発明はまた、ヒトにおけるコロナウイルス感染を治療する方法であって、２日～約２カ月の治療期間にわたって、対象に１日あたり１～１０回の用量の強心配糖体（強心配糖体含有組成物）を投与することを含む方法を提供する。治療期間中に、１日に２～８、２～６または４回の用量が投与され得る。用量は、２日～約６０日間、２日～約４５日間、２日～約３０日間、２日～約２１日間、または２日～約１４日間投与され得る。前記投与は、本明細書で論じられている投与様式のいずれかを介してよい。前記対象において治療的に有効な血漿レベルのオレアンドリンおよび／またはジゴキシンを付与する全身投与が好ましい。

いくつかの実施形態では、ウイルス感染が治癒するまで、１回以上の用量のオレアンドリンが、複数日にわたり１日に投与される。いくつかの実施形態では、ウイルス感染が治癒するまで、１回以上の用量の強心配糖体（強心配糖体含有組成物）が、複数日および複数週間にわたり１日に投与される。１回以上の用量が１日に投与され得る。１、２、３、４、５、６回以上の用量が１日に投与される。

いくつかの実施形態では、治療した、例えばコロナウイルス感染を示す感染対象の血漿におけるオレアンドリンおよび／またはジゴキシンの濃度は、約１０ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以下、約５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以下、約２．５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以下、約２ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以下、または約１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以下である。いくつかの実施形態では、コロナウイルス感染を示す治療した対象の血漿におけるオレアンドリンおよび／またはジゴキシンの濃度は、約０．０００１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．０００５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．００１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．００１５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．０１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．０１５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．１５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．０５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、または約０．０７５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上である。いくつかの実施形態では、治療した感染対象の血漿におけるオレアンドリンおよび／またはジゴキシンの濃度は、約１０ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ～約０．０００１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ、約５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ～約０．０００５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ、約１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ～約０．００１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ、約０．５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ～約０．００１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ、約０．１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ～約０．００１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ、約０．０５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ～約０．００１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ、約０．０１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ～約０．００１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ、約０．００５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ～約０．００１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬである。本発明は、本明細書で明記されている血漿中濃度範囲の全ての組み合わせおよび選択肢を含む。

抗ウイルス組成物は、慢性的に、すなわち、毎日、１日おき、２日おき、３日おき、４日おき、５日おき、６日おき、毎週、１週おき、２週おき、３週おき、毎月、隔月、半月毎、１ヶ月おき、２ヶ月おき、四半期毎、四半期おき、季節毎、三半期毎、季節毎、半年毎、および／または毎年などの繰り返しの頻度で投与され得る。１週間以上、１カ月以上、１四半期以上、および／または１年以上の治療期間。有効用量の強心配糖体（強心配糖体含有組成物）が１日に１回以上投与される。

いくつかの実施形態では、対象に、１日あたり１４０ｍｉｃｒｏｇ～３１５ｍｉｃｒｏｇの強心配糖体を投与する。いくつかの実施形態では、用量は、２０ｍｉｃｒｏｇ～７５０ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～３００ｍｉｃｒｏｇ、または１２ｍｉｃｒｏｇ～１２０ｍｉｃｒｏｇの強心配糖体を含む。強心配糖体の１日用量は、２０ｍｉｃｒｏｇ～７５０ｍｉｃｒｏｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｇ、または０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｉｃｒｏｇの強心配糖体／日の範囲であり得る。ＳＣＦ抽出物中に存在するオレアンドリンの推奨される１日用量は、一般に１日２回約０．２５～約５０ｍｉｃｒｏｇ、または１日２回もしくは約１２時間毎に約０．９～５ｍｉｃｒｏｇである。用量は、約０．５～約１００ｍｉｃｒｏｇ／日、約１～約８０ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．５～約６０ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．８～約６０ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．８～約４０ｍｉｃｒｏｇ／日であり得る。最大耐容用量は、約１００ｍｉｃｒｏｇ／日、約８０ｍｉｃｒｏｇ／日、約６０ｍｉｃｒｏｇ／日、約４０ｍｉｃｒｏｇ／日、約３８．４ｍｉｃｒｏｇ／日、または約３０ｍｉｃｒｏｇ／日のオレアンドリンを含むｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物であり得、最小有効用量は、約０．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．８ｍｉｃｒｏｇ／日、約２ｍｉｃｒｏｇ／日、または約５ｍｉｃｒｏｇ／日であり得る。強心配糖体およびトリテルペンを含む好適な用量は、約０．０５～０．５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、または約０．０５～０．３ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日であり得る。いくつかの実施形態では、オレアンドリンの用量は、約１ｍｇ～約０．０５ｍｇ、約０．９ｍｇ～約０．０７ｍｇ、約０．７ｍｇ～約０．１ｍｇ、約０．５ｍｇ～約０．１ｍｇ、約０．４ｍｇ～約０．１ｍｇ、約０．３ｍｇ～約０．１ｍｇ、約０．２ｍｇである。本発明は、本明細書で明記されている用量の全ての組み合わせを含む。

いくつかの実施形態では、強心配糖体は、少なくとも２つの投与相：負荷相および維持相、で投与される。負荷相は、強心配糖体の定常状態血漿レベルがほぼ達成されるまで継続する。維持相は、治療の開始時に、または負荷相がほぼ完了した後で始める。用量漸増法は、負荷相および／または維持相で行われ得る。
本明細書に記載される全ての投与計画、投与スケジュール、および用量は、好適と想定される；しかしながら、いくつかの投与計画、投与スケジュール、および用量は、いくつかの対象で他のものよりも好適になり得る。目標の臨床的エンドポイントは、前記投与を誘導するために使用される。
組成物は、全身投与することができる。全身投与の様式には、非経口、頬側、経腸、筋肉内、皮下、舌下、経口、肺、または口腔が含まれる。組成物はまた、注射を介してまたは静脈内に投与することができる。組成物はまた、２つ以上の経路により同一の対象に投与され得る。いくつかの実施形態では、組成物は、非経口、頬側、経腸、筋肉内、皮下、舌下、経口、肺、および口腔からなる群から選択される２つ以上の投与様式のいずれかの組み合わせにより投与される。

本発明はまた、オレアンドリンおよび液体担体を含む舌下剤形を提供する。本発明はまた、ウイルス感染、詳細には、例えば本明細書に定義されるコロナウイルス感染を治療する方法であって、複数回用量のオレアンドリン含有（ジゴキシン含有）組成物を、前記ウイルス感染を有する対象に舌下投与することを含む方法を提供する。１日あたり１回以上の用量は、１週間あたり２日以上および１カ月あたり１週間以上、任意に１年あたり１カ月以上にわたって投与される。
いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、オレアンドリン（またはジゴキシンまたはオレアンドリンおよびジゴキシンの組み合わせ）および油を含む。油は、中鎖トリグリセリドを含み得る。抗ウイルス組成物は、１、２またはそれ以上のオレアンドリン含有抽出物、および１つ以上の薬学的賦形剤を含み得る。

追加の強心配糖体は、抗ウイルス組成物に存在する場合、オドロシド、ネリタロシド、またはオレアンドリゲニンがさらに含まれ得る。いくつかの実施形態では、組成物は、ａ）１つ以上のトリテルペ、ｂ）１つ以上のステロイド、ｃ）１つ以上のトリテルペン誘導体、ｄ）１つ以上のステロイド誘導体、またはｅ）それらの組み合わせをさらに含む。いくつかの実施形態では、組成物は、強心配糖体、およびａ）２つもしくは３つのトリテルペン、ｂ）２つもしくは３つのトリテルペン誘導体、ｃ）２つもしくは３つのトリテルペン塩、またはｄ）それらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、トリテルペンは、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、およびそれらの塩または誘導体からなる群から選択される。

本発明のいくつかの実施形態は、薬学的組成物が少なくとも１つの薬学的賦形剤および抗ウイルス組成物を含むものを含む。いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、ａ）少なくとも１つの強心配糖体および少なくとも１つのトリテルペン、ｂ）少なくとも１つの強心配糖体および少なくとも２つのトリテルペン、ｃ）少なくとも１つの強心配糖体および少なくとも３つのトリテルペン、ｄ）少なくとも２つのトリテルペンおよび強心配糖体を除く、ｅ）少なくとも３つのトリテルペンおよび強心配糖体を除く；またはｆ）少なくとも１つの強心配糖体、例えばオレアンドリン、ジゴキシンを含む。本明細書で使用される場合、特に明記しない限り、トリテルペンおよび強心配糖体の一般用語はまた、その塩および誘導体も包含する。
強心配糖体は、純粋な形態で、または１つ以上の強心配糖体を含む抽出物の一部として薬学的組成物中に存在し得る。トリテルペン（複数可）は、純粋な形態で、またはトリテルペン（複数可）を含む抽出物の一部として薬学的組成物中に存在し得る。いくつかの実施形態では、強心配糖体は、薬学的組成物中、主要な治療成分として存在し、抗ウイルス活性に主に関与する構成成分を意味する。いくつかの実施形態では、トリテルペン（複数可）は、薬学的組成物中、腫瘍な治療成分（複数可）として存在し、抗ウイルス活性に主に関与する構成成分（複数可）を意味する。

いくつかの実施形態では、オレアンドリン含有抽出物は、植物材料の抽出により得られる。抽出物は、植物材料の熱水抽出物、冷水抽出物、超臨界流体（ＳＣＦ）抽出物、亜臨界液体抽出物、有機溶媒抽出物、またはそれらの組み合わせを含み得る。いくつかの実施形態では、抽出物は、抽出流体として、任意にアルコールを含んでもよい亜臨界液体二酸化炭素を使用したＮｅｒｉｕｍ植物塊（バイオマス）の亜臨界液体抽出により調製される、（バイオマス）であった。いくつかの実施形態では、オレアンドリン含有組成物は、２つ以上の異なる種類のオレアンドリン含有抽出物を含む。
本発明の実施形態は、オレアンドリン含有バイオマス（植物材料）がＮｅｒｉｕｍ ｓｐ．、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ Ｌ（Ａｐｏｃｙｎａｃｅａｅ）、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｄｏｕｒｕｍ、シロバナキョウチクトウ、ピンクバナキョウチクトウ（ｐｉｎｋ ｏｌｅａｎｄｅｒ）、Ｔｈｅｖｅｔｉａ ｓｐ．、Ｔｈｅｖｅｔｉａ ｐｅｒｕｖｉａｎａ、キバナキョウチクトウ、Ｔｈｅｖｅｔｉａ ｎｅｒｉｆｏｌｉａ、Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ、前記種のいずれかの細胞培養物（細胞塊）、またはそれらの組み合わせであるものを含む。いくつかの実施形態では、バイオマスは、葉、茎、花、樹皮、果実、種子、樹液、および／または鞘を含む。

いくつかの実施形態では、抽出物は、抽出物が対象に投与されたとき、強心配糖体の治療有効性に寄与する、抽出中に強心配糖体とともに得られる少なくとも１つの他の薬理学的に活性な薬剤を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、１つ以上の他の非強心配糖体の治療上有効な薬剤、すなわち、強心配糖体ではない１つ以上の薬剤をさらに含む。いくつかの実施形態では、組成物は、１つ以上の抗ウイルス化合物（複数可）をさらに含む。いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、薬理学的に活性な多糖類を除外する。

いくつかの実施形態では、抽出物は、１つ以上の強心配糖体および１つ以上の強心配糖体前駆体（カルデノリド、カルダジエノリド、およびカルダトリエノリドなど、それらの全てが強心配糖体のアグリコン構成物質、例えば、ジギトキシン、アセチルジギトキシン、ジギトキシゲニン、ジゴキシン、アセチルジゴキシン、ジゴキシゲニン、メジゴキシン、ストロファンチン、シマリン、ウアベイン、またはストロファンチジンである）を含む。抽出物は、強心配糖体前駆体として、強心配糖体の１つ以上のグリコン構成物質（グルコシド、フルクトシド、および／またはグルクロニドなど）をさらに含み得る。したがって、抗ウイルス組成物は、１つ以上の強心配糖体、ならびに１つ以上のアグリコン構成物質、および１つ以上のグリコン構成物質からなる群から選択される２つ以上の強心配糖体前駆体を含み得る。抽出物はまた、Ｎｅｒｉｕｍ ｓｐ．またはＴｈｅｖｅｔｉａ ｓｐ．の植物材料から得られる、１つ以上の他の非強心配糖体の治療的に有効な薬剤を含み得る。

いくつかの実施形態では、オレアンドリン（ＯＬ）、オレアノール酸（ＯＡ）、ウルソール酸（ＵＡ）、およびベツリン酸（ＢＡ）を含む組成物は、オレアンドリン含有量に基づく同等の用量を比較すると、純粋なオレアンドリンよりも有効である。
いくつかの実施形態では、総トリテルペン含有量（ＯＡ＋ＵＡ＋ＢＡ）対オレアンドリンのモル比は、約１５：１～約５：１、または約１２：１～約８：１、または約１００：１～約１５：１、または約１００：１～約５０：１、または約１００：１～約７５：１、または約１００：１～約８０：１、または約１００：１～約９０：１、または約１０：１の範囲である。
いくつかの実施形態では、個々のトリテルペン対オレアンドリンのモル比は、以下の範囲である：約２～８（ＯＡ）：約２～８（ＵＡ）：約０．１～１（ＢＡ）：約０．５～１．５（ＯＬ）；約または３～６（ＯＡ）：約３～６（ＵＡ）：約０．３～８（ＢＡ）：約０．７～１．２（ＯＬ）；または約４～５（ＯＡ）：約４～５（ＵＡ）：約０．４～０．７（ＢＡ）：約０．９～１．１（ＯＬ）；または約４．６（ＯＡ）：約４．４（ＵＡ）：約０．６（ＢＡ）：約１（ＯＬ）。

いくつかの実施形態では、Ｎｅｒｉｕｍ ｓｐ．またはＴｈｅｖｅｔｉａ ｓｐ．植物材料の抽出により得られるものなどの他の治療薬は、抽出物の調製中に得られる多糖ではなく、それは酸性ホモポリガラクツロナンまたはアラビノガラツロナンではないことを意味する。いくつかの実施形態では、抽出物は、別の治療薬を除外および／または抽出物の調製中に得られる酸性ホモポリガラクツロナンまたはアラビノガラツロナンを除外する。
いくつかの実施形態では、Ｎｅｒｉｕｍ ｓｐ．またはＴｈｅｖｅｔｉａ ｓｐ．植物材料の抽出により得られるものなどの他の治療薬は、抽出物、例えば酸性ホモポリガラクツロナンまたはアラビノガラツロナンの調製中に得られる多糖類である。いくつかの実施形態では、抽出物は、別の治療薬を含み、かつ／または、前記植物材料からの抽出物の調製中に得られる酸性ホモポリガラクツロナンまたはアラビノガラツロナンを含む。

いくつかの実施形態では、抽出物は、オレアンドリン、ならびに、強心配糖体、グリコン、アグリコン、ステロイド、トリテルペン、多糖類、糖類、アルカロイド、脂肪、タンパク質、ネリタロシド、オドロシド、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、オレアンドリゲニン、オレアシドＡ、ベツリン（ウルサ－１２－エン－３β，２８－ジオール）、２８－ノルウルサ－１２－エン－３β－オール、ウルサ－１２－エン－３β－オール、３β，３β－ヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－酸、３β，２０α－ジヒドロキシウルサ－２１－エン－２８－酸、３β，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－２８－酸、３β，１３β－ジヒドロキシウルサ－１１－エン－２８－酸、３β，１２α－ジヒドロキシオレアナン－２８，１３β－オリド、３β，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアナン－２８－酸、ホモポリガラクツロナン、アラビノガラツロナン、クロロゲン酸、コーヒー酸、Ｌ－キナ酸、４－クマロイル－ＣｏＡ、３－Ｏ－カフェオイルキナ酸、５－Ｏ－カフェオイルキナ酸、カルデノリドＢ－１、カルデノリドＢ－２、オレアゲニン、ネリジジノシド、ネリゾシド、オドロシド－Ｈ、ガラクツロン酸、ラムノース、アラビノース、キシロース、およびガラクトースで構成される３－ベータ－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－５－ベータ，１４ベータ－ジヒドロキシ－カルド－２０（２２）－エノリドペクチン性多糖類、１７０００～１２００００Ｄの範囲のＭＷ、または約３５０００Ｄ、約３０００Ｄ、約５５００Ｄ、もしくは約１２０００ＤのＭＷを有する多糖類、カルデノリドモノグリコシド、カルデノリドＮ－１、カルデノリドＮ－２、カルデノリドＮ－３、カルデノリドＮ－４、プレグナン、４，６－ジエン－３，１２，２０－トリオン、２０Ｒ－ヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，１２－ジオン、１６ベータ，１７ベータ－エポキシ－１２ベータ－ヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，２０－ジオン、１２ベータ－ヒドロキシプレグナ－４，６，１６－トリエン－３，２０－ジオン（ネリジエノンＡ）、２０Ｓ，２１－ジヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，１２－ジオン（ネリジエノンＢ）、ネリウクマル酸、イソネリウクマル酸、オレアンデロン酸（ｏｌｅａｎｄｅｒｏｉｃ ａｃｉｄ）、オレアンデレン（ｏｌｅａｎｄｅｒｅｎ）、８アルファ－メトキシラブダン－１８－酸、１２－ウルセン、カネロシド、ネリウモシド、３β－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－２α－ヒドロキシ－８，１４β－エポキシ－５β－カルダ－１６：１７，２０：２２－ジエノリド、３β－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－２α，１４β－ジヒドロキシ－５β－カルダ－１６：１７，２０：２２－ジエノリド、３β，２７－ジヒドロキシ－ウルサ－１８－エン－１３，２８－オリド、３β，２２α，２８－トリヒドロキシ－２５－ノル－ルプ－１（１０），２０（２９）－ジエン－２－オン、ｃｉｓ－カレニン（３β－ヒドロキシ－２８－Ｚ－ｐ－クマロイルオキシ－ウルサ－１２－エン－２７－酸）、ｔｒａｎｓ－カレニン（３－β－ヒドロキシ－２８－Ｅ－ｐ－クマロイルオキシ－ウルサ－１２－エン－２７－酸）、３ベータ－ヒドロキシ－５アルファ－カルダ－１４（１５），２０（２２）－ジエノリド（ベータ－アンヒドロエピジギトキシゲニン）、３ベータ－Ｏ－（Ｄ－ジギタロシル）－２１－ヒドロキシ－５ベータ－カルダ－８，１４，１６，２０（２２）－テトラエノリド（ネリウモゲニン－Ａ－３ベータ－Ｄ－ジギタロシド）、プロセラゲニン、ネリジエノンＡ、３ベータ，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－２８－酸、３ベータ，１３ベータ－ジヒドロキシウルサ－１１－エン－２８－酸、３ベータ－ヒドロキシウルサ－１２－エン－２８－アルデヒド、２８－オルウルサ－１２－エン－３ベータ－オール、ウルサ－１２－エン－３ベータ－オール、ウルサ－１２－エン－３ベータ，２８－ジオール、３ベータ，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－酸、（２０Ｓ，２４Ｒ）－エポキシダンマラン－３ベータ，２５－ジオール、２０ベータ，２８－エポキシ－２８アルファ－メトキシタラキサステラン－３ベータ－オール、２０ベータ，２８－エポキシタラキサステル－２１－エン－３ベータ－オール、２８－ノル－ウルサ－１２－エン－３ベータ，１７ベータ－ジオール、３ベータ－ヒドロキシウルサ－１２－エン－２８－アルデヒド、アルファ－ネリウルセート、ベータ－ネリウルセート、３アルファ－アセトフェノキシ－ウルサ－１２－エン－２８－酸、３ベータ－アセトフェノキシ－ウルサ－１２－エン－２８－酸、オレアンデロール酸（ｏｌｅａｎｄｅｒｏｌｉｃ ａｃｉｄ）、カネロジオン、３β－ｐ－ヒドロキシフェノキシ－１１α－メトキシ－１２α－ヒドロキシ－２０－ウルセン－２８－酸、２８－ヒドロキシ－２０（２９）－ルペン－３，７－ジオン、カネロシン、３アルファ－ヒドロキシ－ウルサ－１８，２０－ジエン－２８－酸、Ｄ－サルメントース、Ｄ－ジギノース、ネリジジノシド、ネリゾシド、イソリシノール酸、ゲンチオビオシルネリゴシド、ゲンチオビオシルボーモントシド、ゲンチオビオシルオレアンドリン、ホリネリン、１２β－ヒドロキシ－５β－カルダ－８，１４，１６，２０（２２）－テトラエノリド、８β－ヒドロキシ－ジギトキシゲニン、Δ１６－８β－ヒドロキシ－ジギトキシゲニン、Δ１６－ネリアゲニン、ウバオール、ウルソールアルデヒド、２７（ｐ－クマロイルオキシ）ウルソール酸、オレアンデロール（ｏｌｅａｎｄｅｒｏｌ）、１６－アンヒドロ－デアセチル（ｄｅａｃｔｅｙｌ）－ネリゴシド、９－Ｄ－ヒドロキシ－ｃｉｓ－１２－オクタデカン酸、アジゴシド、アジネリン、アルファ－アミリン、ベータ－シトステロール、カンペステロール（ｃａｍｐｅｓｔｒｏｌ）、カウチューク、カプリン酸、カプリル酸、コリン、コルネリン、コルテネリン、デアセチルオレアンドリン、ジアセチル－ネリゴシド、ホリアンドリン、プソイドクラミン（ｐｓｅｕｄｏｃｕｒａｍｉｎｅ）、ケルセチン、ケルセチン－３－ラムノグルコシド、ケルシトリン、ロサギニン（ｒｏｓａｇｉｎｉｎ）、ルチン、ステアリン酸、スチグマステロール、ストロスペシド、ウレヒトキシン（ｕｒｅｈｉｔｏｘｉｎ）およびウザリゲニンからなる群から選択される少なくとも１つの他の化合物を含む。抽出物に存在し得る追加の成分は、Ｇｕｐｔａらにより開示されている（ＩＪＰＳＲ（２０１０（，１（３），２１－２７、その開示全体が参照により本明細書に組み込まれる）。

オレアンドリンはまた、Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓの形質転換カルスに由来する懸濁液培養物の抽出物から得られる。Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍの熱水、有機溶媒、水性有機溶媒、または超臨界流体抽出物は、本発明に従って使用され得る。
オレアンドリンはまた、インビトロのＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒマイクロ培養物の抽出物から得られ、それによってシュート培養物は、実生から、および／またはＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ品種、例えばＳｐｌｅｎｄｅｎｓ Ｇｉｇａｎｔｅｕｍ、ＲｅｖａｎｃｈｅもしくはＡｌｓａｃｅ、または他の品種の茎端から開始できる。マイクロ培養Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの熱水、有機溶媒、水性有機溶媒、または超臨界流体抽出物は、本発明に従って使用され得る。
抽出物はまた、前記植物種のいずれかの細胞塊（細胞培養物に存在するものなど）の抽出により得られる。

本発明はまた、対象におけるウイルス感染の治療のための医薬品の製造における強心配糖体の使用を提供する。いくつかの実施形態では、そのような医薬品の製造は、本発明の１つ以上の抗ウイルス化合物を提供することと、薬学的剤形の抗ウイルス化合物（複数可）の用量を含むことと、薬学的剤形をパッケージすることとを含む。いくつかの実施形態では、製造は、ＰＣＴ国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ０６／２９０６１に記載されるように行うことができる。製造はまた、パッケージされた剤形を売主（小売業者、卸売業者、および／または流通業者）に送ること、ウイルス感染を有する対象にパッケージされた剤形を販売またはそうでなければ提供すること、使用、投与計画、投与、内容物、および剤形の毒性プロファイルに関する指示を提供するラベルおよび添付文書を医薬品とともに含むことなどの１つ以上の追加のステップを含む。いくつかの実施形態では、ウイルス感染の治療は、対象がウイルス感染を有することを判定することと、投与計画に従って対象への薬学的剤形の投与を指示することと、１つ以上の薬学的剤形を対象に投与することとを含み、１つ以上の薬学的剤形は、投与計画に従って投与される。

薬学的組成物は、水溶性（混和性）共溶媒、水不溶性（不混和性）共溶媒、界面活性剤、抗酸化剤、キレート剤、および吸収促進剤からなる群から選択される少なくとも１つの材料の組み合わせをさらに含み得る。
可溶化剤は、少なくとも単一の界面活性剤であるが、それはまた、ａ）界面活性剤および水混和性溶媒；ｂ）界面活性剤および水不混和性溶媒；ｃ）界面活性剤、抗酸化剤；ｄ）界面活性剤、抗酸化剤、および水混和性溶媒；ｅ）界面活性剤、抗酸化剤、および水不混和性溶媒；ｆ）界面活性剤、水混和性溶媒、および水不混和性溶媒；またはｇ）界面活性剤、抗酸化剤、水混和性溶媒、および水不混和性溶媒の組み合わせなどの材料の組み合わせであり得る。
薬学的組成物は、ａ）少なくとも１つの液体担体、ｂ）少なくとも１つの乳化剤、ｃ）少なくとも１つの可溶化剤、ｄ）少なくとも１つの分散剤、ｅ）少なくとも１つの他の賦形剤、またはｆ）それらの組み合わせを任意にさらに含む。

いくつかの実施形態では、水混和性溶媒は、低分子量（６０００未満）のＰＥＧ、グリコール、またはアルコールである。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、ペグ化界面活性剤であり、ポリ（エチレングリコール）官能基を含む界面活性剤を意味する。
本発明は、本明細書に開示された本発明の態様、実施形態、および下位実施形態の全ての組み合わせを含む。
以下の図は、本明細書の一部を形成し、特許請求される発明の例示的な実施形態を説明する。当業者は、これらの図および本明細書の説明に照らして、過度の実験なしで本発明を実施することができるであろう。

エボラウイルスに対する様々な組成物のインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表を示す。 エボラウイルスに対する様々な組成物のインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表を示す。 マールブルグウイルスに対する様々な組成物のインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表を示す。 マールブルグウイルスに対する様々な組成物のインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表を示す。 Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞におけるジカウイルス（ＳＩＫＶ株ＰＲＶＡＢＣ５９）に対するオレアンドリンのインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表を示す。 Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞におけるジカウイルス（ＳＩＫＶ株ＰＲＶＡＢＣ５９）に対するジゴキシンのインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表を示す。 Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞におけるエボラウイルスに対する様々な組成物（オレアンドリン、ジゴキシン、およびＰＢＩ－０５２０４）のインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表を示す。 Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞におけるマールブルグウイルスに対する様々な組成物（オレアンドリン、ジゴキシン、およびＰＢＩ－０５２０４）のインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表を示す。 様々な組成物（オレアンドリン、ジゴキシン、およびＰＢＩ－０５２０４）の存在下でのＶｅｒｏ Ｅ６細胞のインビトロ細胞生存率を要約する図表を示す。 組成物（オレアンドリンおよびＰＢＩ－０５２０４）の、ウイルスへの曝露後すぐにＶｅｒｏ Ｅ６細胞におけるエボラウイルスを阻害する能力を要約する図表を示し、図１０Ａは感染後２時間である。 組成物（オレアンドリンおよびＰＢＩ－０５２０４）の、ウイルスへの曝露後すぐにＶｅｒｏ Ｅ６細胞におけるエボラウイルスを阻害する能力を要約する図表を示し、図１０Ｂは感染後２４時間である。 組成物（オレアンドリンおよびＰＢＩ－０５２０４）の、ウイルスへの曝露後すぐにＶｅｒｏ Ｅ６細胞におけるマールブルグウイルスを阻害する能力を要約する図表を示し、図１１Ａは感染後２時間である。 組成物（オレアンドリンおよびＰＢＩ－０５２０４）の、ウイルスへの曝露後すぐにＶｅｒｏ Ｅ６細胞におけるマールブルグウイルスを阻害する能力を要約する図表を示し、図１１Ｂは感染後２４時間である。 組成物（オレアンドリンおよびＰＢＩ－０５２０４）の、オレアンドリンに曝露されたウイルス感染したＶｅｒｏ Ｅ６細胞による感染性子孫の生成を阻害する能力を要約する図表を示し、図１２Ａはエボラウイルスである。 組成物（オレアンドリンおよびＰＢＩ－０５２０４）の、オレアンドリンに曝露されたウイルス感染したＶｅｒｏ Ｅ６細胞による感染性子孫の生成を阻害する能力を要約する図表を示し、図１２Ｂはマールブルグウイルスである。 Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞におけるベネズエラウマ脳脊髄炎ウイルス（図１３Ａ）に対する様々な組成物（オレアンドリン、ジゴキシン、およびＰＢＩ－０５２０４）のインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表を示す。 Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞における西部ウマ脳脊髄炎ウイルス（図１３Ｂ）に対する様々な組成物（オレアンドリン、ジゴキシン、およびＰＢＩ－０５２０４）のインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表を示す。 ビヒクル対照、オレアンドリン、またはＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒの抽出物が、ＨＴＬＶ－１複製または新たに合成されたウイルス粒子放出の際に有する、ＨＴＬＶ－１ ｐ１９^Gagの定量（実施例１９および２０を参照されたい）により判定される効果を要約する図表を示す。未処理（ＵＴ）細胞は、比較のために示されている。全てのデータは、少なくとも３つの独立した実験の代表である。データは、実験±標準偏差（エラーバー）の平均を表す。 ＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１リンパ腫Ｔ－細胞株に対するビヒクル対照、オレアンドリン、およびＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物の相対的細胞毒性を要約する図表を示す。全てのデータは、少なくとも３つの独立した実験の代表である。データは、実験±標準偏差（エラーバー）の平均を表す。 （図１６Ａ）Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＩＴＣ（緑）およびＰＩ（赤）で染色した結果の代表的な顕微鏡写真を示し、合成画像におけるＤＩＣ位相差が示されている。個々のＡｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＩＴＣおよびＰＩ蛍光チャネル画像も示されている。スケールバー、２０μｍ。（図１６Ｂ）Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＩＴＣ（緑）およびＰＩ（赤）で染色した結果の代表的な顕微鏡写真を示し、合成画像におけるＤＩＣ位相差が示されている。個々のＡｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＩＴＣおよびＰＩ蛍光チャネル画像も示されている。スケールバー、２０μｍ。（図１６Ｃ）Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＩＴＣ（緑）およびＰＩ（赤）で染色した結果の代表的な顕微鏡写真を示し、合成画像におけるＤＩＣ位相差が示されている。個々のＡｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＩＴＣおよびＰＩ蛍光チャネル画像も示されている。スケールバー、２０μｍ。（図１６Ｄ）Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＩＴＣ（緑）およびＰＩ（赤）で染色した結果の代表的な顕微鏡写真を示し、合成画像におけるＤＩＣ位相差が示されている。個々のＡｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＩＴＣおよびＰＩ蛍光チャネル画像も示されている。スケールバー、２０μｍ。（図１６Ｅ）Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＩＴＣ（緑）およびＰＩ（赤）で染色した結果の代表的な顕微鏡写真を示し、合成画像におけるＤＩＣ位相差が示されている。個々のＡｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＩＴＣおよびＰＩ蛍光チャネル画像も示されている。スケールバー、２０μｍ。（図１６Ｆ）Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＩＴＣ（緑）およびＰＩ（赤）で染色した結果の代表的な顕微鏡写真を示し、合成画像におけるＤＩＣ位相差が示されている。個々のＡｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＩＴＣおよびＰＩ蛍光チャネル画像も示されている。スケールバー、２０μｍ。 オレアンドリンで処理したＨＴＬＶ－１＋リンパ腫Ｔ－細胞からのＨＴＬＶ－１複製、または新たに合成されたウイルス粒子の放出の際のビヒクル対照、オレアンドリン、またはＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒの抽出物が有する効果を要約する図表を示す。 処理したｈｕＰＢＭＣでのビヒクル対照、オレアンドリン、またはＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒの抽出物の相対的細胞毒性を要約する図表を示す。 ビヒクル対照、オレアンドリン、またはＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒの抽出物を含むｈｕＰＢＭＣによる共培養アッセイにおける、ＨＴＬＶ－１伝播の相対的阻害を要約する図表を示す。 ＧＦＰ－発現ＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１ Ｔ－細胞株の代表的な顕微鏡写真を示す：蛍光顕微鏡検査（上のパネル）および免疫ブロッティング（下のパネル）。 ｈｕＰＢＭＣとマイトマイシンＣで処理したＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１／ｐＬｅｎｔｉ－ＧＦＰリンパ芽球（緑色細胞）の間のウイルス学的シナプスの代表的な顕微鏡写真を示す。 図２１の顕微鏡写真の定量による標準偏差（エラーバー）付き平均化データの図表を示す。 オレアンドリン（赤色のバー）または対照ビヒクル（インキュベーション培地）（黒色のバー）で処理した、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスに感染したＶＥＲＯ Ｅ６細胞での、「処理」後２４時間および４８時間のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス力価（ＰＦＵ／ｍＬ）対時間（ｈ）のｌｏｇ（実施例２８）の図表を示す。細胞は、感染前にオレアンドリンで前処理した。感染２時間後の最初のインキュベーション後、感染細胞を洗浄して、細胞外ウイルスおよびオレアンドリンを除去した。次いで、回収した感染細胞を以下のように処理した。感染細胞を、オレアンドリン（図２３Ａ：水性成分としてＲＰＭＩ １６４０培地を有する０．１％ＤＭＳＯ水溶液中に１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ；図２３Ｃ：ＲＰＭＩ １６４０を有する０．０１％ＤＭＳＯ水溶液中に０．１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ）または対照ビヒクルのみ（図２３Ｂ：ＲＰＭＩ １６４０を有する０．１％ＤＭＳＯ水溶液；図２３Ｄ：ＲＰＭＩ １６４０を有する０．０１％ＤＭＳＯ水溶液）で処理し、ウイルス力価を測定した。 オレアンドリン（赤色のバー）または対照ビヒクル（インキュベーション培地）（黒色のバー）で処理した、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスに感染したＶＥＲＯ Ｅ６細胞での、「処理」後２４時間および４８時間のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス力価（ＰＦＵ／ｍＬ）対時間（ｈ）のｌｏｇ（実施例２８）の図表を示す。細胞は、感染前にオレアンドリンで前処理した。感染２時間後の最初のインキュベーション後、感染細胞を洗浄して、細胞外ウイルスおよびオレアンドリンを除去した。次いで、回収した感染細胞を以下のように処理した。感染細胞を、オレアンドリン（図２３Ａ：水性成分としてＲＰＭＩ １６４０培地を有する０．１％ＤＭＳＯ水溶液中に１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ；図２３Ｃ：ＲＰＭＩ １６４０を有する０．０１％ＤＭＳＯ水溶液中に０．１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ）または対照ビヒクルのみ（図２３Ｂ：ＲＰＭＩ １６４０を有する０．１％ＤＭＳＯ水溶液；図２３Ｄ：ＲＰＭＩ １６４０を有する０．０１％ＤＭＳＯ水溶液）で処理し、ウイルス力価を測定した。 オレアンドリン（赤色のバー）または対照ビヒクル（インキュベーション培地）（黒色のバー）で処理した、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスに感染したＶＥＲＯ Ｅ６細胞での、「処理」後２４時間および４８時間のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス力価（ＰＦＵ／ｍＬ）対時間（ｈ）のｌｏｇ（実施例２８）の図表を示す。細胞は、感染前にオレアンドリンで前処理した。感染２時間後の最初のインキュベーション後、感染細胞を洗浄して、細胞外ウイルスおよびオレアンドリンを除去した。次いで、回収した感染細胞を以下のように処理した。感染細胞を、オレアンドリン（図２３Ａ：水性成分としてＲＰＭＩ １６４０培地を有する０．１％ＤＭＳＯ水溶液中に１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ；図２３Ｃ：ＲＰＭＩ １６４０を有する０．０１％ＤＭＳＯ水溶液中に０．１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ）または対照ビヒクルのみ（図２３Ｂ：ＲＰＭＩ １６４０を有する０．１％ＤＭＳＯ水溶液；図２３Ｄ：ＲＰＭＩ １６４０を有する０．０１％ＤＭＳＯ水溶液）で処理し、ウイルス力価を測定した。 オレアンドリン（赤色のバー）または対照ビヒクル（インキュベーション培地）（黒色のバー）で処理した、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスに感染したＶＥＲＯ Ｅ６細胞での、「処理」後２４時間および４８時間のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス力価（ＰＦＵ／ｍＬ）対時間（ｈ）のｌｏｇ（実施例２８）の図表を示す。細胞は、感染前にオレアンドリンで前処理した。感染２時間後の最初のインキュベーション後、感染細胞を洗浄して、細胞外ウイルスおよびオレアンドリンを除去した。次いで、回収した感染細胞を以下のように処理した。感染細胞を、オレアンドリン（図２３Ａ：水性成分としてＲＰＭＩ １６４０培地を有する０．１％ＤＭＳＯ水溶液中に１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ；図２３Ｃ：ＲＰＭＩ １６４０を有する０．０１％ＤＭＳＯ水溶液中に０．１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ）または対照ビヒクルのみ（図２３Ｂ：ＲＰＭＩ １６４０を有する０．１％ＤＭＳＯ水溶液；図２３Ｄ：ＲＰＭＩ １６４０を有する０．０１％ＤＭＳＯ水溶液）で処理し、ウイルス力価を測定した。 ウイルス複製（Ｙ１、左軸）の阻害パーセント、および感染２４時間後のＶｅｒｏ－Ｅ６細胞カウント（Ｙ２、右軸：前記細胞に対するオレアンドリンの潜在的な細胞毒性発現）対培地中におけるオレアンドリンの濃度（ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ）の二重ｙ軸（実施例２９）の図表を示す。 感染４８時間後に得たことを除いて、図２４Ａの培養物に対するものである。 指示された濃度のオレアンドリンに対して細胞を連続曝露した後、２４時間のＶｅｒｏ－Ｅ６細胞（細胞力価）対培地中におけるオレアンドリンの濃度（ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ）のパーセント（実施例３０）の図表を示す。 ＳＡＲｓ－ＣｏＶ－２ウイルスに感染し、次いでオレアンドリン（青色の丸）、または対照ビヒクル（インキュベーション培地）（赤色の正方形）で処理したＶＥＲＯ ＣＣＬ－８１細胞での、「処理」後２４時間（図２６Ａ）および４８時間（図２６Ｂ）のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス力価（ＰＦＵ／ｍＬ）対培地中におけるオレアンドリンの濃度（ｃｅｒｏｐｉｔｈｅｃｕｓ ａｅｔｈｉｏｐｓ腎臓の正常細胞；ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ａｔｃｃ．ｏｒｇ／ｐｒｏｄｕｃｔｓ／ａｌｌ／ＣＣＬ－８１．ａｓｐｘ）のｌｏｇ（実施例３１）の図表を示す。 ＳＡＲｓ－ＣｏＶ－２ウイルスに感染し、次いでオレアンドリン（青色の丸）、または対照ビヒクル（インキュベーション培地）（赤色の正方形）で処理したＶＥＲＯ ＣＣＬ－８１細胞での、「処理」後２４時間（図２６Ａ）および４８時間（図２６Ｂ）のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス力価（ＰＦＵ／ｍＬ）対培地中におけるオレアンドリンの濃度（ｃｅｒｏｐｉｔｈｅｃｕｓ ａｅｔｈｉｏｐｓ腎臓の正常細胞；ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ａｔｃｃ．ｏｒｇ／ｐｒｏｄｕｃｔｓ／ａｌｌ／ＣＣＬ－８１．ａｓｐｘ）のｌｏｇ（実施例３１）の図表を示す。 図２６Ａおよび２６Ｂの試料では、２４時間（図２６Ｃ）および４８時間（図２６Ｄ）でウイルス力価の倍単位の低減が判定された。 図２６Ａおよび２６Ｂの試料では、２４時間（図２６Ｃ）および４８時間（図２６Ｄ）でウイルス力価の倍単位の低減が判定された。 オレアンドリン（青い丸）または対照ビヒクル（インキュベーション培地）（赤い正方形）で処理したＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスに感染したＶＥＲＯ Ｅ６細胞での、「処理」後２４時間および４８時間のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス力価（ＰＦＵ／ｍＬ）対時間（ｈ）のｌｏｇ（実施例２８）の図表を示す。細胞は、感染前にオレアンドリンで前処理した。感染２時間後の最初のインキュベーション後、感染細胞を洗浄して、細胞外ウイルスおよびオレアンドリンを除去した。次いで、回収した感染細胞を以下のように処理した。感染細胞をオレアンドリン（図２７Ａ：水性成分としてＲＰＭＩ １６４０培地を有するＤＭＳＯ水溶液（０．００５％）中に０．００５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ；図２７Ｂ：ＲＰＭＩ １６４０を有するＤＭＳＯ水溶液（０．０１％）中に０．０１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ；図２７Ｃ：ＲＰＭＩ １６４０を有するＤＭＳＯ水溶液（０．０５％）中に０．０５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ；図２７Ｂ： ＲＰＭＩ １６４０を有するＤＭＳＯ水溶液（０．１％）中に０．１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ）で処理し、ウイルス力価を測定した。 オレアンドリン（青い丸）または対照ビヒクル（インキュベーション培地）（赤い正方形）で処理したＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスに感染したＶＥＲＯ Ｅ６細胞での、「処理」後２４時間および４８時間のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス力価（ＰＦＵ／ｍＬ）対時間（ｈ）のｌｏｇ（実施例２８）の図表を示す。細胞は、感染前にオレアンドリンで前処理した。感染２時間後の最初のインキュベーション後、感染細胞を洗浄して、細胞外ウイルスおよびオレアンドリンを除去した。次いで、回収した感染細胞を以下のように処理した。感染細胞をオレアンドリン（図２７Ａ：水性成分としてＲＰＭＩ １６４０培地を有するＤＭＳＯ水溶液（０．００５％）中に０．００５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ；図２７Ｂ：ＲＰＭＩ １６４０を有するＤＭＳＯ水溶液（０．０１％）中に０．０１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ；図２７Ｃ：ＲＰＭＩ １６４０を有するＤＭＳＯ水溶液（０．０５％）中に０．０５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ；図２７Ｂ： ＲＰＭＩ １６４０を有するＤＭＳＯ水溶液（０．１％）中に０．１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ）で処理し、ウイルス力価を測定した。 オレアンドリン（青い丸）または対照ビヒクル（インキュベーション培地）（赤い正方形）で処理したＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスに感染したＶＥＲＯ Ｅ６細胞での、「処理」後２４時間および４８時間のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス力価（ＰＦＵ／ｍＬ）対時間（ｈ）のｌｏｇ（実施例２８）の図表を示す。細胞は、感染前にオレアンドリンで前処理した。感染２時間後の最初のインキュベーション後、感染細胞を洗浄して、細胞外ウイルスおよびオレアンドリンを除去した。次いで、回収した感染細胞を以下のように処理した。感染細胞をオレアンドリン（図２７Ａ：水性成分としてＲＰＭＩ １６４０培地を有するＤＭＳＯ水溶液（０．００５％）中に０．００５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ；図２７Ｂ：ＲＰＭＩ １６４０を有するＤＭＳＯ水溶液（０．０１％）中に０．０１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ；図２７Ｃ：ＲＰＭＩ １６４０を有するＤＭＳＯ水溶液（０．０５％）中に０．０５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ；図２７Ｂ： ＲＰＭＩ １６４０を有するＤＭＳＯ水溶液（０．１％）中に０．１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ）で処理し、ウイルス力価を測定した。 オレアンドリン（青い丸）または対照ビヒクル（インキュベーション培地）（赤い正方形）で処理したＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスに感染したＶＥＲＯ Ｅ６細胞での、「処理」後２４時間および４８時間のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス力価（ＰＦＵ／ｍＬ）対時間（ｈ）のｌｏｇ（実施例２８）の図表を示す。細胞は、感染前にオレアンドリンで前処理した。感染２時間後の最初のインキュベーション後、感染細胞を洗浄して、細胞外ウイルスおよびオレアンドリンを除去した。次いで、回収した感染細胞を以下のように処理した。感染細胞をオレアンドリン（図２７Ａ：水性成分としてＲＰＭＩ １６４０培地を有するＤＭＳＯ水溶液（０．００５％）中に０．００５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ；図２７Ｂ：ＲＰＭＩ １６４０を有するＤＭＳＯ水溶液（０．０１％）中に０．０１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ；図２７Ｃ：ＲＰＭＩ １６４０を有するＤＭＳＯ水溶液（０．０５％）中に０．０５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ；図２７Ｂ： ＲＰＭＩ １６４０を有するＤＭＳＯ水溶液（０．１％）中に０．１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ）で処理し、ウイルス力価を測定した。 ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスに感染し、次いで、オレアンドリン（暗青色の丸（Ｅｘｐ．２）および薄青色の丸（Ｅｘｐ．３））または対照ビヒクル（インキュベーション培地）（暗赤色の正方形（Ｅｘｐ．２）および薄赤色の正方形（Ｅｘｐ．３））で処理したＶＥＲＯ ８１細胞での、「処理後」２４時間（図２８Ａ）および４８時間（図２８Ｂ）のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス力価（ＰＦＵ／ｍＬ）対培地中におけるオレアンドリンの濃度のｌｏｇの図表を示す。Ｅｘｐ．２およびＥｘｐ．３は、単にアッセイを反復して実行される。 ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスに感染し、次いで、オレアンドリン（暗青色の丸（Ｅｘｐ．２）および薄青色の丸（Ｅｘｐ．３））または対照ビヒクル（インキュベーション培地）（暗赤色の正方形（Ｅｘｐ．２）および薄赤色の正方形（Ｅｘｐ．３））で処理したＶＥＲＯ ８１細胞での、「処理後」２４時間（図２８Ａ）および４８時間（図２８Ｂ）のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス力価（ＰＦＵ／ｍＬ）対培地中におけるオレアンドリンの濃度のｌｏｇの図表を示す。Ｅｘｐ．２およびＥｘｐ．３は、単にアッセイを反復して実行される。 ウイルス力価対培地中におけるオレアンドリン濃度の棒グラフを示し、ウイルス力価を、感染２４時間後（図２９Ａ）および４８時間（図２９Ｂ）で測定した。いくつかの試料では、細胞を、オレアンドリン（実線の青色のバー）またはＤＭＳＯ対照ビヒクルのみ（実線の赤色のバー）で感染の前後（２時間）に処理した。他の試料では、細胞を、オレアンドリン（破線の青色のバー：感染１２時間後；白抜きの青色のバー：感染２４時間後）またはＤＭＳＯ対照ビヒクルのみ（破線の赤色のバー：感染１２時間後；白抜きの赤色のバー：感染２４時間後）で処理した。 ウイルス力価対培地中におけるオレアンドリン濃度の棒グラフを示し、ウイルス力価を、感染２４時間後（図２９Ａ）および４８時間（図２９Ｂ）で測定した。いくつかの試料では、細胞を、オレアンドリン（実線の青色のバー）またはＤＭＳＯ対照ビヒクルのみ（実線の赤色のバー）で感染の前後（２時間）に処理した。他の試料では、細胞を、オレアンドリン（破線の青色のバー：感染１２時間後；白抜きの青色のバー：感染２４時間後）またはＤＭＳＯ対照ビヒクルのみ（破線の赤色のバー：感染１２時間後；白抜きの赤色のバー：感染２４時間後）で処理した。 ２つの抽出物の組み合わせ組成物（ＰＢＩ－Ａ）の抗ＣＯＶＩＤ－１９活性を評価する図表を示す。図３０Ｂでは、μｇ／ｍｌ（オレアンドリン濃度）の指定から、ＰＢＩ－Ａが１ｍｇ／ｍｌ（オレアンドリン濃度）溶液として供給されたと推定される。ウイルス力価（Ｌｏｇ₁₀（ＰＦＵ／ｍＬ））対Ｌｏｇ₁₀希釈係数（図３０Ａ）または対Ｌｏｇ₁₀オレアンドリンの濃度（図３０Ｂ）を判定した。図３０Ａは、実施例３１の感染前アッセイのデータ処理に対するものであり、図３０Ｂは、実施例３４の感染後アッセイの処理に対するものである。 ２つの抽出物の組み合わせ組成物（ＰＢＩ－Ａ）の抗ＣＯＶＩＤ－１９活性を評価する図表を示す。図３０Ｂでは、μｇ／ｍｌ（オレアンドリン濃度）の指定から、ＰＢＩ－Ａが１ｍｇ／ｍｌ（オレアンドリン濃度）溶液として供給されたと推定される。ウイルス力価（Ｌｏｇ₁₀（ＰＦＵ／ｍＬ））対Ｌｏｇ₁₀希釈係数（図３０Ａ）または対Ｌｏｇ₁₀オレアンドリンの濃度（図３０Ｂ）を判定した。図３０Ａは、実施例３１の感染前アッセイのデータ処理に対するものであり、図３０Ｂは、実施例３４の感染後アッセイの処理に対するものである。

本発明は、１つ以上の有効用量の抗ウイルス組成物（または抗ウイルス組成物および少なくとも１つの薬学的賦形剤を含む薬学的組成物）の対象への慢性または急性投与により、対象のウイルス感染を治療する方法を提供する。組成物は、対象に最適な投与計画に従って投与され、用量および投与計画の好適性は、ウイルス感染の従来の臨床慣行および臨床治療エンドポイントに従って臨床的に決定される。
本明細書で使用される場合、「対象」という用語は、哺乳動物、例えば、ネコ、イヌ、マウス、モルモット、ウマ、ウシ、ヒツジ、およびヒトなどの温血動物を意味すると解釈される。

本明細書で使用される場合、ウイルス感染のリスクのある対象は、ａ）蚊、特にＡｅｄｅｓ種（Ａｅｄｅｓ ｅｇｙｐｔｉ、Ａｅｄｅｓ ａｌｂｏｐｉｃｔｕｓ）の蚊が生息する範囲内の地理的地域に住んでいる対象、ｂ）ウイルス感染を有する人または人々と一緒にまたはその近くに住んでいる対象、ｃ）ウイルス感染を有する人と性的関係を有する対象、ｄ）ダニ、特にＩｘｏｄｅｓ種（Ｉｘｏｄｅｓ ｍａｒｘ、Ｉｘｏｄｅｓ ｓｃａｐｕｌａｒｉｓ、またはＩｘｏｄｅｓ ｃｏｏｋｅ種）のダニが生息する範囲内の地理的地域に住んでいる対象、ｅ）オオコウモリが生息する範囲内の地理的地域に住んでいる対象、ｆ）熱帯地方に住んでいる対象、ｇ）アフリカに住んでいる対象、ｈ）ウイルス感染を有する他の対象の体液と接触している対象、ｉ）子供、またはｊ）弱まった免疫系を有する対象である。いくつかの実施形態では、対象は、女性、妊娠することができる女性、または妊娠中の女性である。

本発明に従って治療される対象は、治療応答を示すであろう。「治療応答」とは、ウイルス感染に罹患している対象が、強心配糖体による治療の結果として、以下の臨床的利益：対象の血液もしくは血漿中の活性ウイルス力価の低減、対象の血液もしくは血漿からの活性ウイルスの根絶、感染の改善、感染に関連する症状の発生の低減、感染の部分的もしくは完全な寛解、または感染の進行までの時間の増加、ならびに／あるいは前記ウイルス感染症を引き起こすウイルスの感染性の低減の少なくとも１つを享受することを意味する。治療応答は、完全または部分的な治療応答であり得る。
本明細書で使用される場合、「進行までの時間」は、ウイルス感染が診断（または治療）されてから感染が悪化し始めるまでの期間、長さ、または持続時間である。それは、感染のさらなる進行なしで感染のレベルが維持される期間であり、感染が再び進行し始めると、期間は終了する。疾患の進行は、治療の開始前または開始時に感染に罹患している対象を「病期分類」することにより決定される。例えば、対象の健康は、治療の開始前または開始時に決定される。対象は、次いで抗ウイルス組成物で治療し、ウイルス力価を定期的にモニターした。後のいくつかの時点で、感染の症状が悪化し、したがって感染の進行および「進行までの時間」の終了をマークし得る。感染が進行しなかった間の期間、または感染のレベルもしくは重症度が悪化しなかった間の期間が、「進行までの時間」である。

投与計画には、投与スケジュールに従って投与される治療関連用量（または有効用量）の１つ以上の強心配糖体、および／またはトリテルペン（複数可）が含まれる。したがって、治療関連用量は、抗ウイルス組成物による治療に対するウイルス感染の治療応答が観察され、かつ対象に、過剰量の望ましくないまたは有害な副作用なしで抗ウイルス組成物を投与することができる治療用量である。治療関連用量は、患者にいくつかの副作用を引き起こし得るが、対象にとって致命的ではない。それは、抗ウイルス組成物を投与されている対象に対する臨床的利益のレベルが、抗ウイルス組成物またはその構成成分（複数可）の投与により対象によって経験される有害な副作用のレベルを超える用量である。治療関連用量は、様々な確立された薬理学、薬力学、および薬物動態学の原則に従って、対象により異なるであろう。しかしながら、治療関連用量（例えば、オレアンドリンに対する）は、典型的には約２５マイクログラム、約１００マイクログラム、約２５０マイクログラム、約５００マイクログラムまたは約７５０マイクログラムの強心配糖体／日、あるいはそれは用量あたり約２５～７５０マイクログラムの強心配糖体、または約２５マイクログラム、約１００マイクログラム、約２５０マイクログラム、約５００マイクログラムまたは約７５０マイクログラムの強心配糖体／日を超え得ない範囲にあり得る。治療関連用量（例えば、個々または一緒のトリテルペンに対する）の別の例は、典型的には体重１ｋｇあたり約０．１マイクログラム～１００マイクログラム、約０．１ｍｇ～約５００ｍｇ、約１００～約１０００ｍｇ、約１５～約２５ｍｇ／ｋｇ、約２５～約５０ｍｇ／ｋｇ、約５０～約１００ｍｇ／ｋｇ、約１００～約２００ｍｇ／ｋｇ、約２００～約５００ｍｇ／ｋｇ、約１０～約７５０ｍｇ／ｋｇ、約１６～約６４０ｍｇ／ｋｇ、約１５～約７５０ｍｇ／ｋｇ、約１５～約７００ｍｇ／ｋｇ、または約１５～約６５０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲であろう。対象において標的治療結果を提供するために必要な抗ウイルス組成物の実際の量は、薬局の基本原則に従って対象毎に異なり得ることは、当該技術分野で既知である。

ジゴキシンによる治療は、２つ以上の投与相：負荷相および維持相、を使用して行われ得る。負荷相は、ジゴキシンの定常状態血漿レベルが達成されるまで以下の投与計画を用いることができ、維持相は、負荷相の完了後、以下の投与計画を用いることができる。

治療関連用量は、ウイルス感染の治療に通常使用される任意の投与計画に従って投与することができる。治療関連用量は、１日１回、２回、３回、またはそれ以上投与することができる。それは、１日おき、３日おき、４日おき、５日おき、半週毎、毎週、隔週、３週間おき、４週間おき、毎月、隔月、半月毎、３ヶ月おき、４ヶ月おき、半年毎、毎年、または上記のいずれかの組み合わせに従って投与され、好適な投与スケジュールに到達する。例えば、治療関連用量は、１週間以上にわたって１日１回以上（最も高い用量では１日に最大１０回）投与することができる。

実施例１５は、その両方ともがフィロウイルスであるエボラウイルス（図１および２）およびマールブルグウイルス（図３および４）感染の治療のためのオレアンドリン（唯一の活性として）、Ａｎｖｉｒｚｅｌ（商標）（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの熱水抽出物）、およびＰＢＩ－０５２０４（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの超臨界流体（ＳＣＦ）抽出物）を含む組成物の有効性を評価するために使用されるインビトロアッセイの詳細な説明を提供する。

熱水抽出物は、経口、舌下、皮下、および筋肉内投与され得る。一実施形態は、ＡＮＶＩＲＺＥＬ（商標）（Ｎｅｒｉｕｍ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．、Ｓａｎ Ａｎｔｏｎｉｏ，ＴＸ；Ｓａｌｕｄ Ｉｎｔｅｇｒａｌ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｌｉｎｉｃ，Ｔｅｇｕｃｉｇａｌｐａ，Ｈｏｎｄｕｒａｓ；ｗｗｗ．ｓａｌｕｄｉｎｔｅｇｒａｌ．ｃｏｍ；ｗｗｗ．ａｎｖｉｒｚｅｌ．ｃｏｍ）の商品名で液体剤形として利用できる。舌下投与では、典型的な投与計画は、１日あたり１．５ｍｌ、または１日に３回の用量の０．５ｍｌである。注入による投与では、典型的な投与計画は、約１～約２ｍｌ／日、または約１週間～約６カ月以上にわたって約０．１～約０．４ｍｌ／ｍ²／日、または約１週間～約６カ月以上にわたって約０．４～約０．８ｍｌ／ｍ²／日、または約１週間～約６カ月以上にわたって約０．８～約１．２ｍｌ／ｍ²／日である。ＡＮＶＩＲＺＥＬ（商標）の最大耐量はきわめて高いため、より高い用量が使用できる。ＡＮＶＩＲＺＥＬ（商標）は、オレアンドリン、オレアンドリゲニン、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒから抽出された多糖類（熱水抽出物）を含む。市販のバイアルは、約２００～約９００ｍｉｃｒｏｇのオレアンドリン、約５００～約７００ｍｉｃｒｏｇのオレアンドリゲニン、およびＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒから抽出された多糖類を含む、約１５０ｍｇのｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物をフリーズドライ粉末（投与前に水で再構成する前）として含む。前記バイアルはまた、少なくとも１つの浸透物質、例えばマンニトール、塩化ナトリウム、少なくとも１つの緩衝剤、例えばアスコルビン酸ナトリウムとアスコルビン酸、少なくとも１つの防腐剤、例えばプロピルパラベン、メチルパラベンなどの薬学的賦形剤を含み得る。

実験は、組成物を４０ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬで細胞に添加し、次いで、ウイルスを添加して１時間インキュベートすることにより準備した。ウイルスの細胞への添加の際、組成物の最終濃度は、２０ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬである。異なる量のオレアンドリンを含む組成物は、それらが含むオレアンドリンの濃度に応じて調節し、モル濃度に変換することができる。図１～４は、抽出物のオレアンドリン含有量に基づいた有効性を示す。ＯＬ自体が有効である。ＯＬ、ＯＡ、ＵＡ、およびＢＡを含むＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒのＳＣＦ抽出物であるＰＢＩ－０５２０４は、ＯＬ自体よりも実質的に有効である。Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの熱水抽出物であるＡｎｖｉｒｚｅｌ（商標）は、ＯＬ自体よりも有効である。両方の抽出物は、ナノモル範囲で有効性を明確に示す。ＰＢＩ－０５２０４抽出物のオレアンドリンの割合（１．７４％）は、Ａｎｖｉｒｚｅｌ（商標）の割合（０．４５９％、４．５９ｍｉｃｒｏｇ／ｍｇ）よりも高い。ＰＢＩ－０５２０４の最も高い用量では、ＥＢＯＶおよびＭＡＲＶ感染を完全に阻害したが、Ａｎｖｉｒｚｅｌ（商標）で２０ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬを超える用量では毒性が観察されるため、Ａｎｖｉｒｚｅｌ（商標）は完全な阻害を示さなかった。データは、ＰＢＩ－０５２０４のエボラウイルスおよびマールブルグウイルスに対する最も高い抗ウイルス活性を示す。ＰＢＩ－０５２０４のトリテルペンの組み合わせは、オレアンドリンの抗ウイルス活性が増加させた。

実施例６は、ジカウイルス（フラビウイルス）感染の治療のための強心配糖体の有効性を評価するために使用されるインビトロアッセイの詳細な説明を提供する。Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に、オレアンドリン（図５）またはジゴキシン（図６）の存在下で、０．２のＭＯＩでジカウイルス（ＺＩＫＶ株ＰＲＶＡＢＣ５９）を感染させた。細胞を、ウイルスおよび強心配糖体とともに１時間インキュベートした後、接種物および非吸収強心配糖体（存在する場合）を除去した。細胞を、新鮮な培地に浸し、４８時間インキュベートした後、それらをホルマリンで固定し、ＺＩＫＶ感染を染色した。データは、両方の強心配糖体のジカウイルスに対する抗ウイルス活性を示すが、しかしながら、オレアンドリンは、ジゴキシンよりも高い（ほぼ８倍高い）抗ウイルス活性を示した。
実施例１４は、ジカウイルスおよびデングウイルスに対する試験組成物の抗ウイルス活性を評価するために使用されるアッセイの詳細な説明を提供する。データは、オレアンドリンが、ジカウイルスおよびデング熱ウイルスに対する有効性を示すことを示す。

図７は、Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞におけるエボラウイルス（ＥＢＯＶ）に対する様々な組成物（オレアンドリン、ジゴキシン、およびＰＢＩ－０５２０４）のインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表である。図８は、Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞におけるマールブルグウイルス（ＭＡＲＶ）に対する様々な組成物（オレアンドリン、ジゴキシン、およびＰＢＩ－０５２０４）のインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表を示す。図９は、様々な組成物（オレアンドリン、ジゴキシン、およびＰＢＩ－０５２０４）の存在下でのＶｅｒｏ Ｅ６細胞のインビトロ細胞生存率を要約する図表を示す。図７～８では、ウイルス感染前に宿主細胞を組成物に曝露した。Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に、オレアンドリン、ジゴキシン、またはオレアンドリン含有植物抽出物であるＰＢＩ－０５２０４の存在下でＥＢＯＶ／Ｋｉｋ（図７、ＭＯＩ＝１）またはＭＡＲＶ／Ｃｉ６７（図８、ＭＯＩ＝１）を感染させた。１時間後、接種物および化合物を除去し、新鮮な培地を細胞に添加した。４８時間後、細胞を固定して免疫染色し、ＥＢＯＶまたはＭＡＲＶに感染した細胞を検出した。感染した細胞を、Ｏｐｅｒｅｔｔａを使用して数えた。

抗ウイルス活性に関して、偽陽性が観察されないことを確実にするために、組成物の存在下での細胞生存率を試験した。図９のデータについては、Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞を上記の化合物で処理した。ＡＴＰレベルは、細胞生存率の測定としてＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏによって測定された。オレアンドリン、ジゴキシン、およびＰＢＩ－０５２０４は、細胞生存率を低減しないことが判定され、これは、本明細書の他の図で詳述される抗ウイルス活性が、個々の化合物の細胞毒性によって引き起こされる偽陽性によるものではないことを意味する。
したがって、本発明は、哺乳動物または宿主細胞のウイルス感染を治療する方法を提供し、方法は、当該ウイルス感染の罹患前に哺乳動物または宿主細胞に抗ウイルス組成物を投与し、それにより当該哺乳動物または宿主細胞のウイルス感染時に、抗ウイルス組成物が、ウイルス力価を低減し、ウイルス感染を改善、低減、または排除することを含む。

本発明の抗ウイルス組成物および方法はまた、抗ウイルス組成物の投与前に発生したウイルス感染の治療にも有用である。Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に、ＥＢＯＶ（図１０Ａ、１０Ｂ）またはＭＡＲＶ（図１１Ａ、１１Ｂ）を感染させた。感染後２時間（図１０Ａ、１１Ａ）または感染後２４時間（図１０Ｂ、１１Ｂ）で、オレアンドリンまたはＰＢＩ－０５２０４を１時間細胞に添加し、次いで廃棄し、細胞を培養培地に戻した。

図１０Ａおよび１０Ｂは、組成物（オレアンドリンおよびＰＢＩ－０５２０４）の、ウイルスへの曝露後すぐにＶｅｒｏ Ｅ６細胞におけるエボラウイルスを阻害する能力を要約する図表を示し、図１０Ａは感染後２時間、図１０Ｂは感染後２４時間である。抗ウイルス組成物が、ウイルス感染後２時間以内（または最大１２時間以内）に投与されると、抗ウイルス組成物は、有効な治療を提供し、ＥＢＯＶウイルス力価を低減する。２４時間後でも、ウイルス組成物は有効であるが、しかしながら、最初のウイルス感染が増加した後の時間が経過するにつれて、その有効性はより低くなる。同じ評価をＭＡＲＶで行った。図１１Ａおよび１１Ｂは、組成物（オレアンドリンおよびＰＢＩ－０５２０４）の、ウイルスへの曝露後すぐにＶｅｒｏ Ｅ６細胞におけるマールブルグウイルスを阻害する能力を要約する図表を示し、図１１Ａは感染後２時間、図１１Ｂは感染後２４時間である。抗ウイルス組成物が、ウイルス感染後２時間以内（または最大１２時間以内）に投与されると、抗ウイルス組成物は、有効な治療を提供し、ＭＡＲＶウイルス力価を低減する。２４時間後でも、ウイルス組成物は有効であるが、しかしながら、最初のウイルス感染が増加した後の時間が経過するにつれて、その有効性はより低くなる。

本明細書の組成物の抗ウイルス活性が、例えば、感染後２４時間以内にウイルス感染細胞の単一世代で低減されることを考慮し、抗ウイルス組成物がウイルス増殖を阻害することができるかどうかを評価し、それは感染性子孫の生成を阻害することを意味する。Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に、オレアンドリンまたはＰＢＩ－０５２０４の存在下でＥＢＯＶまたはＭＡＲＶを感染させ、４８時間インキュベートした。感染した細胞培養物の上清を、新鮮なＶｅｒｏ Ｅ６細胞に継代し、１時間インキュベートし、次いで廃棄した。継代した上清を含む細胞を、４８時間インキュベートした。ＥＢＯＶ（Ｂ）またはＭＡＲＶ（Ｃ）に感染した細胞は、本明細書に記載されるように評価された。対照感染率は、ＥＢＯＶについては６６％、ＭＡＲＶについては６７％であった。本発明の抗ウイルス組成物は、感染性子孫の生成を阻害した。
したがって、本発明の抗ウイルス組成物は、ａ）ウイルスへの暴露後のウイルス感染を阻害するために、ウイルス感染の前に予防的に投与することができるか、ｂ）ウイルス複製および感染性子孫の生成を阻害もしくは低減するために、ウイルス感染後に投与することができるか、またはｃ）ａ）およびｂ）の組み合わせである。

トガウイルスのアルファウイルスに対する抗ウイルス組成物の抗ウイルス活性は、Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞においてＶＥＥウイルスおよびＷＥＥウイルスを使用して評価された。図１３Ａおよび１３Ｂは、Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞におけるベネズエラウマ脳脊髄炎ウイルス（図１３Ａ）および西部ウマ脳脊髄炎ウイルス（図１３Ｂ）に対する様々な組成物（オレアンドリン、ジゴキシン、およびＰＢＩ－０５２０４）のインビトロ用量応答抗ウイルス活性を要約する図表を示す。Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に、示された化合物の存在下または非存在下で１８時間、ベネズエラウマ脳炎ウイルス（図１３Ａ、ＭＯＩ＝０．０１）または西部ウマ脳炎ウイルス（図１３Ｂ、ＭＯＩ＝０．１）を感染させた。感染した細胞を、以前のように検出し、Ｏｐｅｒｅｔｔａで数えた。本発明の抗ウイルス組成物は、有効であることが見出された。
したがって、本発明は、対象または宿主細胞において、アレナウイルス科ウイルス、フィロウイルス科ウイルス、フラビウイルス科ウイルス（フラビウイルス属）、レトロウイルス科ウイルス、デルタレトロウイルス属ウイルス、コロナウイルス科ウイルス、パラミクソウイルス科ウイルス、またはトガウイルス科ウイルスによって引き起こされるウイルス感染を治療する方法であって、有効量の抗ウイルス組成物を投与し、それにより、ウイルスを抗ウイルス組成物に曝露させること、および前記ウイルス感染を治療することを含む方法を提供する。

本発明者らは、ＨＴＬＶ－１（ヒトＴ－細胞白血病ウイルス１型；エンベロープを有するレトロウイルス；デルタレトロウイルス属）感染の治療のための、オレアンドリンおよび本明細書に記載される抽出物の使用を評価した。精製したオレアンドリン化合物、またはＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒの抽出物が、ＨＴＬＶ－１プロウイルス複製、ならびに／または、ｐ１９^Gag含有ウイルス粒子の生成および放出を阻害できるかどうかを判定するために、ウイルス生成ＨＴＬＶ－１－形質転換ＳＬＢ１リンパ腫Ｔ－細胞株を、上昇濃度のオレアンドリンもしくはＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物、または減菌ビヒクル対照（ＭｉｌｌｉＱで処理したｄｄＨ₂Ｏ中の２０％ＤＭＳＯ）で処理し、次いで、１０％ＣＯ₂下で３７℃にて７２時間インキュベートした。細胞をその後遠心分離によりペレット化し、抗ＨＴＬＶ－１ ｐ１９^GagのＥＬＩＳＡ（Ｚｅｐｔｏｍｅｔｒｉｘ）を行うことにより、培養物の上清に放出される細胞外ｐ１９^Gag含有ウイルス粒子の相対レベルを定量した。

図１４は、ビヒクル対照（１．５μｌ、７．５μｌ、または１５μｌ）、または上昇濃度（１０μｇ／ｍｌ、５０μｇ／ｍｌ、および１００μｇ／ｍｌ）のオレアンドリン化合物もしくはＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒの抽出物で７２時間処理したＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１リンパ腫Ｔ－細胞株によって発現されるＨＴＬＶ－１ ｐ１９^Gagの定量（実施例１９および２０）についてのデータを示す。ウイルス複製および細胞外粒子の培養物の上清への放出は、抗ＨＴＬＶ－１ ｐ１９^Gag ＥＬＩＳＡ（Ｚｅｐｔｏｍｅｔｒｉｘ）を行うことにより定量した。オレアンドリンは、ＨＴＬＶ－１複製または新たに合成されたウイルス粒子の放出を有意に阻害しなかった。本発明者らは、抽出物またはオレアンドリンのみが、ウイルスの複製またはｐ１９^Gag含有粒子の培養物上清への放出を有意に阻害しないことを判定した。本発明者らは、したがって、さらなる抗ウイルス活性を予想しなかった；しかしながら、本発明者らは、処理した細胞から収集したウイルス粒子が、初代ヒト末梢血単核細胞（ｈｕＰＢＭＣ）で感染性の低減を示したことを想定外に見出した。ＨＩＶ－１とは異なり、細胞外ＨＴＬＶ－１粒子は感染性が乏しく、ウイルス伝播は、典型的にはウイルス学的シナプスを経た直接の細胞内相互反応を経由して発生する。
本発明は、したがって、感染性が低減したＨＴＬＶ－１ウイルス粒子を生成する方法であって、本発明の抗ウイルス組成物によりＨＴＬＶ－１ウイルス粒子を治療して、感染性が低減した前記ＨＴＬＶ－１ウイルス粒子を得ることを含む方法を提供する。

観察された抗ウイルス活性が、抗ウイルス組成物の、ＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１リンパ芽球に対する潜在的な細胞毒性によるアーチファクトではなかったことを確実にするために、本発明者らは、次いで、処理したＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１リンパ芽球培養物中で、精製したオレアンドリン化合物およびＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物の様々な希釈物の細胞毒性を評価した（実施例２１）。ＳＬＢ１ Ｔ－細胞を、本明細書に記載されるオレアンドリンまたはＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物の上昇濃度（１０、５０および１００μｇ／ｍｌ）で７２時間処理した。陰性対照として、細胞はまた、薬物処理した培養物に使用される体積に一致した上昇量（１．５、７．５、および１５μｌ）のビヒクル溶液で処理した。シクロホスファミド（５０μＭ；Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）で処理した細胞は、アポトーシスの陽性対照として含まれた。次いで、試料を洗浄し、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＩＴＣおよびヨウ化プロピジウム（ＰＩ）で染色し、共焦点蛍光顕微鏡検査により分析した。Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＩＴＣ および／またはＰＩ－陽性細胞の相対的割合は、蛍光顕微鏡検査により定量し、２０×対物レンズを使用して視野を３回カウントした。

結果（図１５および図１６Ａ～１６Ｆ）は、最低濃度（１０μｇ／ｍｌ）のオレアンドリンおよびＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物は、有意な細胞毒性／アポトーシスを誘導しなかったことを指示する。しかしながら、より高い濃度（約５０および約１００μｇ／ｍｌ）の粗植物抽出物は、注目すべきことには、オレアンドリン化合物が誘導するよりもアポトーシスをさらに誘導した。これは、オレアンドリンが、Ｎ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物の約１．２３％を占めることと一致する。オレアンドリンによって引き起こされる細胞毒性は、処理したＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１細胞において、ビヒクル対照よりも有意に高くなかった。

本発明者らは、次いで、オレアンドリンまたはＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物が、共培養アッセイにおいて、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）－発現ＨＴＬＶ－１＋リンパ腫Ｔ－細胞株から、ｈｕＰＢＭＣへのウイルス伝播を阻害できたかどうかを調査した（実施例２０）。これらの研究では、ＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１リンパ腫Ｔ－細胞を、９６ウェルマイクロタイタープレート中において、上昇濃度のオレアンドリン化合物もしくはＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物、またはビヒクル対照で７２時間処理し、次いでウイルス含有上清を収集し、インビトロで初代培養ヒト末梢血単核細胞（ｈｕＰＢＭＣ）を直接感染させるために使用した。７２時間後、直接感染の結果として、培養物の上清に放出された細胞外ｐ１９^Gag含有ウイルス粒子の相対的レベルは、抗ＨＴＬＶ－１ ｐ１９^GagＥＬＩＳＡを行うことにより定量した。

ＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１リンパ腫Ｔ－細胞株を、ビヒクル対照、または上昇濃度（１０μｇ／ｍｌ、５０μｇ／ｍｌ、および１００μｇ／ｍｌ）のＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物もしくはオレアンドリン化合物で７２時間処理し、次いで、ウイルス含有上清を収集し、初代ｈｕＰＢＭＣを直接感染させるために使用した。ビヒクル対照、Ｎ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物、またはオレアンドリンはまた、ｈｕＰＢＭＣに対する培養基に含まれていた。７２時間後、培養物の上清を収集し、抗ＨＴＬＶ－１ ｐ１９^Gag ＥＬＩＳＡを行うことにより、生成された相当量の細胞外ウイルス粒子を定量した。

データ（図１７）は、いずれも最低濃度（１０μｇ／ｍｌ）のオレアンドリンおよびＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物さえ、同じ量のビヒクル対照と比較して、処理した細胞の培養物の上清に放出された、新たに合成されたｐ１９^Gag含有ウイルス粒子の感染性を阻害したことを指示する。オレアンドリンおよび粗抽出物のいずれも、ウイルス学的シナプスの形成、およびＨＴＬＶ－１インビトロの伝播を阻害した。オレアンドリンで処理したＨＴＬＶ－１＋リンパ腫Ｔ－細胞により生成した細胞外ウイルス粒子は、初代ｈｕＰＢＭＣに対する感染性の低下を示す。重要なことには、オレアンドリンは、レトロウイルス感染サイクルの特有の段階を表す成熟粒子へのエンベロープ糖タンパク質の組み込みを低減させることにより、エンベロープを有するウイルスに対して抗ウイルス活性を示す。

観察された抗ウイルス活性が、抗ウイルス組成物の、処理したｈｕＰＢＭＣに対する潜在的な細胞毒性によるアーチファクトではなかったことを確実にするために、本発明者らはまた、処理したｈｕＰＢＭＣで、精製したオレアンドリンおよびＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物の細胞毒性を、ビヒクル陰性対照と比較して調査した（実施例２１）。バフィーコートの初代ｈｕＰＢＭＣを単離し、フィトヘマグルチニン（ＰＨＡ）で刺激し、組換えヒトインターロイキン－２（ｈＩＬ－２）の存在下で培養した。細胞を、次いで、上昇濃度のオレアンドリンもしくはＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物で、または上昇体積のビヒクルで７２時間処理した。試料を、続いてＡｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＩＴＣおよびＰＩで染色し、視界あたりのアポトーシス（すなわち、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＩＴＣおよび／またはＰＩ－陽性）細胞の相対的割合は、共焦点蛍光顕微鏡検査および３回のカウントにより定量した。

ビヒクル対照、Ｎ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物、およびオレアンドリン化合物の細胞毒性効果は、初代ｈｕＰＢＭＣを７２時間処理することにより評価し、次いで培養物を、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＩＴＣおよびＰＩで染色した。アポトーシス（すなわち、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＩＴＣおよび／またはＰＩ－陽性）細胞の相対的割合は、蛍光顕微鏡検査および２０×対物レンズを使用した視野の３回のカウントにより定量した。細胞の合計数は、ＤＩＣ位相差顕微鏡検査を使用して判定した。シクロホスファミド（５０μＭ）で処理した細胞は、アポトーシスに対する陽性対照として含まれていた。この試料における細胞の数を指示するＮＡは、高い毒性のため、正確な評価をするには少なすぎた。
データ（図１８）は、ｈｕＰＢＭＣにおいて、ビヒクル対照と比較して中等度の細胞毒性（例えば、最低濃度で３５～３７％）を示したオレアンドリンを指示する。対照的に、Ｎ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物は、有意に細胞毒性であり、最低濃度でさえも高いレベルのプログラム細胞死を誘導した。ｈｕＰＢＭＣは、精製したオレアンドリンに、ＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１リンパ芽球よりやや感受性であった；しかしながら、ｈｕＰＢＭＣは、本明細書に記載されるトリテルペンなどの他の細胞毒性化合物も含む粗Ｎ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物にいっそう大幅に感受性であった。

本発明者らはまた、オレアンドリンまたはＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物が、共培養実験において、ＨＴＬＶ－１粒子の標的ｈｕＰＢＭＣへの伝播を阻害できるかどうかを調査した（実施例２２）。これらの研究では、ウイルス生成ＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１ Ｔ－細胞株を、マイトマイシンＣで、次いで増加量のオレアンドリン、Ｎ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物、またはビヒクル対照で１５分または３時間処理した。ＳＬＢ１細胞は、無血清培地で２×洗浄し、同数のｈｕＰＢＭＣを、次いで各ウェルに添加し、試料を、１０％ＣＯ₂下、３７℃にて、加湿インキュベーター中で、完全培地中において７２時間共培養した。ＨＴＬＶ－１の相対的な細胞内伝播は、抗ＨＴＬＶ－１ ｐ１９^Gag ＥＬＩＳＡを行って、培養物の上清に放出された細胞外ウイルスのレベルを測定することにより評価した。
初代ｈｕＰＢＭＣを、マイトマイシンＣで処理したＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１リンパ腫Ｔ－細胞と共培養し、これらは、ビヒクル対照または上昇濃度（１０μｇ／ｍｌ、５０μｇ／ｍｌ、および１００μｇ／ｍｌ）のＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物もしくはオレアンドリン化合物で１５分または３時間前処理した。ビヒクル対照、抽出物、および化合物はまた、共培養基に存在していた。７２時間後、上清を収集し、放出された細胞外ウイルス粒子の量を、抗ＨＴＬＶ－１ ｐ１９^Gag ＥＬＩＳＡを行うことにより定量した。

図１９で示されている結果は、オレアンドリンおよびＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物のいずれも、ビヒクル対照と比較してＨＴＬＶ－１の伝播を阻害したことを示すが；ＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１細胞の前処理の１５分と３時間との間で観察される差はなかった。
本発明者らはまた、オレアンドリンが、共培養アッセイにおいて、ウイルス学的シナプスの形成、およびＨＴＬＶ－１の伝播を阻害するかどうかを調査した（実施例２２）。ＧＦＰ－発現ＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１ Ｔ－細胞株は、ＳＬＢ１リンパ腫Ｔ－細胞をｐＬｅｎｔｉ－６．２／Ｖ５－ＤＥＳＴ－ＧＦＰベクターで形質導入することにより生成し、ブラストサイジン（５μｇ／ｍｌ；Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で２週間にわたり選択した。ＧＦＰ－陽性クローンを、蛍光顕微鏡検査（図２０の上のパネル）および免疫ブロッティング（図２０の下のパネル）によりスクリーニングし、膨張させ、繰り返し継代した。ＤＩＣ位相差の画像を比較のために示す。

ビヒクル対照または上昇量（１０μｇ／ｍｌ、５０μｇ／ｍｌ、および１００μｇ／ｍｌ）のＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物もしくはオレアンドリン化合物で３時間前処理した、ｈｕＰＢＭＣと、マイトマイシンＣで処理したＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１／ｐＬｅｎｔｉ－ＧＦＰリンパ芽球（緑色細胞）との間のウイルス学的シナプスの形成を、蛍光顕微鏡検査により視覚化した（図２１）。ウイルス伝播は、感染した（すなわち、ＨＴＬＶ－１ ｇｐ２１－陽性、赤色）ｈｕＰＢＭＣ（ＧＦＰ－陰性）の相対的割合は、２０×対物レンズを使用した蛍光顕微鏡検査により２０視野（ｎ＝２０）で定量化することにより評価した（ビヒクル対照パネルにおける矢印を参照されたい）。蛍光顕微鏡検査のデータを定量した（図２２）。データから、抗ウイルス組成物が、共培養アッセイにおいて、ウイルス学的シナプスの形成、およびＨＴＬＶ－１の伝播を阻害することが確認される。
したがって、本発明はまた、処理した細胞の培養物の上清に放出されたＨＴＬＶ－１粒子の感染性を阻害する（低減させる）方法、また、ウイルス学的シナプスのＥｎｖ－依存性形成を阻害することによりＨＴＬＶ－１の細胞内伝播を低減させる方法であって、有効量の抗ウイルス組成物でウイルス感染細胞（インビトロまたはインビボ）を治療することを含む方法を提供する。

本明細書の組成物の抗ウイルス活性は、ライノウイルス感染に対して評価された。ライノウイルスは、ピコルナウイルス科およびエンテロウイルス属である。それは、エンベロープを有さず、（＋）極性のｓｓ－ＲＮＡウイルスである。オレアンドリンは、ウイルスの複製を阻害しなかったため、本明細書で用いられる濃度およびアッセイで、ライノウイルスに対して不活性であることが見出された。

ＣｏＶ感染症は、実施例２６に詳述されているようにインビボで治療でき、抗ウイルス組成物は、単剤療法または併用療法として対象に投与される。ＣｏＶに対するオレアンドリンの有効性は、実施例２７に従ってインビボで確立した。子供は、オレンジジュースの一部として０．２５ｍｌの再構成されたＡＮＶＩＲＺＥＬ（商標）を投与された。次いで１２時間毎、子供は、０．５ｍｌの再構成されたＡＮＶＩＲＺＥＬ（商標）を約２～３日の期間にわたって投与された。小児は、ＣＯＶＩＤ－１９感染から回復した。

コロナウイルス、例えばＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ－１９）に対するオレアンドリン（オレアンドリン含有組成物）の有効性のさらなる証明は、実施例２８によるインビトロ評価を経て得られ、Ｖｅｒｏ細胞をオレアンドリンで前処理し、次いで、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染させた。細胞の感染後、細胞外ウイルスおよびオレアンドリンを洗い流し、感染細胞を、次いで、オレアンドリン（図２３Ａ：０．１％ ｖ／ｖＤＭＳＯ水溶液中に１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ；図２３Ｃ：０．０１％ ｖ／ｖＤＭＳＯ水溶液中に０．１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ）または対照ビヒクルとしてＤＭＳＯ水溶液のみ（図２３Ｂ：０．１％ ｖ／ｖＤＭＳＯ水溶液；図２３Ｄ：０．０１％ ｖ／ｖＤＭＳＯ水溶液）で処理した。結果は、ａ）オレアンドリン前処理が、２４時間でウイルス量の１３６８倍の低減、および４８時間の時点で３６９倍の低減を引き起こした；ｂ）オレアンドリンが、約０．１～約１．０ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬの全濃度範囲よりも有効であり、高用量は、低用量よりわずかに優れていたので、オレアンドリンが、低濃度、例えば０．０１～０．１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬでさえも、有効な可能性は非常に高い；ｃ）オレアンドリンは、ウイルスの複製を完全に止めるには単回投与が不十分なので、繰り返し投与されるべきである；また、ｄ）オレアンドリンとＶｅｒｏ細胞のプレインキュベーションを３０分のみ使用することは、初期ウイルス感染の低減でわずかにしか有効にならず、子孫ビリオンの感染性に影響を及ぼすと思われないことを指示する。結果はまた、０．１および１．０ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬの濃度でのオレアンドリンは、Ｖｅｒｏ細胞に過度に毒性ではないことを指示した。結果は、オレアンドリンが、ａ）連続した薬物処理なしの約１ｌｏｇ₁₀；およびｂ）連続した薬物処理を伴う約＞３ｌｏｇ₁₀（毒性なし）により、子孫ウイルスの感染性を阻害することをさらに指示する。

オレアンドリンが、ウイルスの複製を直接阻害するかどうかを判定するために、Ｖｅｒｏ－Ｅ６細胞をＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスに感染させ、実施例２９に従って様々な濃度のオレアンドリンで処理した。結果は、図２４Ａおよび２４Ｂで示されている。２４時間の時点（図２４Ａ）で、吸収相中のみオレアンドリンで処理したウェルでは（前処理データ）、抗ウイルス活性を観察し、評価されたＩＣ₅₀は０．６２５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬであった。オレアンドリンで処理したウェルでは、アッセイの持続時間にわたり（持続時間データ）、オレアンドリンは、多量の接種ウイルスの存在下でさえ、ウイルスの侵入および／またはウイルスの複製を有意に限定した。４８時間の時点（図２４Ｂ）で、吸収相中のみオレアンドリンで処理したウェルでは（前処理データ）、時間の終わりまでに最小限の抗ウイルス活性を観察した。アッセイの持続時間にわたり（持続時間データ）オレアンドリンで処理したウェルでは、オレアンドリンは、ウイルス感染を有意に限定した。潜在的な作用方法は、ウイルスの複製、集合、および／または放出の阻害を含む。

ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する、オレアンドリンの観察された抗ウイルス活性が、Ｖｅｒｏ－Ｅ６細胞に対するオレアンドリンの細胞毒性のためではないことを確実にするために、細胞力価を２４時間（図２４Ａ）および４８時間（図２４Ｂ）の時点で判定した。１．０ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上のオレアンドリン濃度で、細胞毒性が現れ、アッセイに潜在的に干渉した；しかしながら、０．６２５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以下のオレアンドリン濃度では、細胞毒性の干渉は実質的に低減し、それにより、きわめて低濃度でさえも、オレアンドリンの強力な抗ウイルス活性を確認した。Ｖｅｒｏ－Ｅ６細胞に対するオレアンドリンの毒性度の追加証拠は、実施例３０のアッセイ（図２５）で観察された。０．６２５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬのオレアンドリン濃度で、約８０％のＶｅｒｏ細胞は、２４時間の時点で依然生存能力があり、より低い濃度で、なお低い毒性が観察された。Ｖｅｒｏ－Ｅ６細胞に対するオレアンドリンの毒性は、オレアンドリンがヒトに毒性であることを示唆しないと理解されるべきである。この毒性測定は、抗ウイルス活性を測定する場合、バックグラウンド細胞死の潜在的な影響を判定するためだけに使用される。
オレアンドリンは、したがって、ウイルス感染、詳細にはコロナウイルス感染、例えばＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を治療するための少なくとも２つの機構（経路）を所有する：ａ）ウイルスの複製の直接阻害；およびｂ）子孫ウイルスの感染性の低減。

さらに、オレアンドリンは、きわめて低用量でさえ抗ウイルス活性を所有し、オレアンドリンは、かなりの予防効果を示す。これは、実施例３１に従って示され、ＶＥＲＯ ＣＣＬ－８１細胞を、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染させた。細胞は、感染前にオレアンドリンで前処理した。感染２時間後の最初のインキュベーション後、感染細胞を洗浄して、細胞外ウイルスおよびオレアンドリンを除去した。次いで、回収した感染細胞を以下のように処理した。感染細胞をオレアンドリン（水性成分としてＲＰＭＩ １６４０培地を有するＤＭＳＯ水溶液中で様々な濃度）または対照ビヒクルのみ（ＲＰＭＩ １６４を有するＤＭＳＯ水溶液）で処理し、「処理」後２４時間（図２６Ａ）および４８時間（図２６Ｂ）で、ウイルス力価を測定した。オレアンドリンなしで、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は、２４時間の時点までに高い（およそ６ｌｏｇ₁₀プラーク形成単位（ｐｆｕ）／ｍｌ）力価に達し、その後の時点でこの力価を維持し：それは、一貫してアッセイの検出限界以下に留まった。１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ～０．０５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬのオレアンドリン濃度により、２４時間のみでウイルス力価のかなりの低減が生じた。より高い２つの用量は、ウイルス力価を原則的に検出限界以下に低下させ、試験されるオレアンドリン濃度のいずれでも、細胞毒性は観察されなかった。ウイルス力価における倍単位の低減を、これらの試料で計算した。約１，０００倍～約４０，０００倍の範囲のウイルス力価における倍単位の低減（図２６Ｃおよび２６Ｄ）は、４８時間の時点で観察され、約１，０００倍～約２０，０００倍は、２４時間の時点で観察された。１０ｎｇ／ｍｌ用量は、感染２４時間後でＤＭＳＯ対照と比較して有意な効果を示さなかったが、感染４８時間後では力価の有意な低減を確かにもたらした。重要なことには、オレアンドリンに起因する低減は、４８時間で測定した場合、２４時間と比較して最高濃度で向上した。上昇したオレアンドリンの予防有効性は、経時的に（２４ｖｓ．４８時間）、感染２４時間後の１１．９８ｎｇ／ｍｌおよび感染４８時間後の７．０７ｎｇ／ｍｌで計算したＥＣ₅₀値として反映されていた。

上で説明されているＶｅｒｏ８１細胞に、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の阻害が、全体または感染粒子生成のレベルにあったかどうかを判定するために、ゲノム分析を施した。ＲＮＡを、予防的研究の細胞培養物の上清から抽出し、ゲノム等価物は、ｑＲＴ－ＰＣＲにより定量した（実施例３９）。感染アッセイにより最初に観察されたオレアンドリンの予防効果は、ゲノム等価物のレベルで確認された。感染２４時間後に、オレアンドリンは、４つの最高用量で、上清におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ゲノムを有意に低減した。感染アッセイにより最初に観察されたオレアンドリンの予防効果は、ゲノム等価物のレベルで確認された。感染２４時間後に、オレアンドリンは、４つの最高用量で、上清におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ゲノムを有意に低減した。

追加の研究を行って、感染２４時間および４８時間後の、オレアンドリンに対するＣＯＶＩＤ－１９感染の用量応答を判定した（図２７Ａ～２７Ｂ）。用量応答を観察し、培地中におけるオレアンドリンの濃度の上昇により、ウイルス力価がさらに低減した；しかしながら、試験した最低濃度（０．０５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ）でさえ、２４時間で力価が低減し、感染４８時間後でさらに力価が低減した。最高用量で、感染性のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２力価に１，０００倍超の低減が生じ、０．５μｇ／ｍｌおよび１００ｎｇ／ｍｌの用量が、１００倍超の低減を引き起こし、５０ｎｇ／ｍｌの用量が、７８倍の低減を生じた。

図２８Ａおよび２８Ｂは、反復研究の結果を示し、それぞれ３回実施して、培地中のオレアンドリン濃度（０．００５～１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ）を変化させ、ＣＯＶＩＤ－１９の治療への用量応答を判定した。Ｖｅｒｏ８１細胞において、０．０１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬを超える濃度で、感染２４時間および４８時間後でさえも、かなりの抗ウイルス活性が観察された。きわめて低濃度の０．０５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬでさえ、ウイルス力価の大幅な低減が観察された。

感染後におけるオレアンドリンの抗ウイルス有効性を判定するために、実施例３４による研究を行った。Ｖｅｒｏ８１細胞は、感染前にオレアンドリンで前処理しなかった。その代わり、細胞を、ＣＯＶＩＤ－１９ウイルスに感染させ、次いで、感染１２時間および２４時間後でオレアンドリンにより処理した（指示濃度で）。ウイルス力価を、次いで、感染２４時間後（図２９Ａ）および４８時間（図２９Ｂ）で測定した。データは、単回の処理のみでさえも、オレアンドリンが抗ウイルス活性を、感染後少なくとも１２、少なくとも２４時間、または少なくとも３６時間発揮できることを示す。このアッセイが、ヒトウイルス感染と比較して時間が短縮されたアッセイであると留意することは重要である。２４時間の時点は、ヒトにおける感染後約５～７日に等しく、４８時間の時点は、ヒトにおける感染後約１０～１４日に等しい。

２つの抽出物の組み合わせ組成物（ＤＭＳＯ（９８重量％）に溶解した１重量％のエタノール抽出物、１重量％の実施例３６を含むＰＢＩ－Ａ）を使用して、実施例３１および３４のアッセイを繰り返した。図３０Ａは、実施例３１のアッセイに従って、２つの抽出物の組み合わせ組成物の評価に対する結果を詳述し、図３０Ｂは、実施例３４のアッセイに従って、２つの抽出物（１重量％）の評価に対する結果を詳述する。図３０Ａにおけるデータは、元のストック溶液の相対的希釈に基づいて、ＰＢＩ－Ａの相対的な抗ウイルス（抗ＣＯＶＩＤ－１９）有効性を示す。図３０Ｂにおけるデータは、アッセイ溶液中におけるオレアンドリンの相対的濃度（μｇ／ｍＬ）に基づく。各グラフにおける点線は、ＣＦＵ（ウイルスのコロニー形成単位）アッセイを使用して検出できるウイルスの最低濃度を示す。

図３０Ａおよび３０Ｂにおける結果に基づき、２つの抽出物の組み合わせ組成物は、純粋オレアンドリンで観察されたものと同一の範囲である０．０５～１．０μｇ／ｍｌを含む濃度で、ＣＯＶＩＤ－１９に対する抗ウイルス剤として有効である。
アッセイで評価されたオレアンドリンの濃度が、用量および血漿中濃度の観点から臨床的に関連性があることを観察するのも重要である。
オレアンドリン含有組成物の安全性の証明は、前記細胞の、異なる濃度のオレアンドリンを含む溶液への曝露後に、乳酸脱水素酵素の放出を判定するためのインビトロ細胞アッセイによりさらに得られる。１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬの最大濃度で、対照ビヒクルを超えるさらなる毒性は存在しなかったことを判定した。

ＣＯＶＩＤ－１９ウイルス感染の治療におけるオレアンドリン（オレアンドリン含有組成物、オレアンドリン含有抽出物）の有効性は、ＦＤＡの治験用新薬利用範囲拡大制度の下での、実施例３５による、オレアンドリン含有舌下剤形（実施例３２または３７）の対象への投与によりさらに確立された。年齢１８歳～７８歳（ｙ）の範囲の対象に、１日あたり１５ｍｉｃｒｏｇ用量、約６時間間隔で４回、または、１日あたり１５ｍｇ用量、約８時間間隔で３回のオレアンドリン（２つの抽出物の組成物として）を投与した。治療の開始前に、対象の臨床状態および／またはウイルス力価を観察した。いくつかの対象は、緩和ケア中、またはホスピスケア中であった。臨床状態および／またはウイルス力価を、１～２週間、１０～１４日の治療期間中に定期的に判定した。以下の結果を、治療の開始後に観察した。

追加のインビボ研究は、ＦＤＡの治験用新薬利用範囲拡大制度の下で、異なるレベルのＣＯＶＩＤ－１９関連症状を示す第２群のヒト対象において行った。治療の開始前に、対象の臨床状態および／またはウイルス力価を判定して、ＣＯＶＩＤ－１９感染を確認した。いくつかの対象は、中等度から重度の症状を示した。年齢の範囲の対象に、１日あたり１５ｍｉｃｒｏｇ用量、約６時間間隔で４回のオレアンドリン（２つの抽出物の組成物として）を投与した。臨床状態および／またはウイルス力価を、１～２週間、１０～１４日の治療期間中に定期的に判定した。全ての対象は、治療の開始後５～１２日以内にＣＯＶＩＤ－１９感染から完全に回復した。

オレアンドリンはまた、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の感染に対する過敏な炎症応答の予防において利益になり得る強力な抗炎症応答を生成すると示されている。
本発明は、したがって、ＣＯＶＩＤ－１９ウイルス感染を治療する方法であって、複数回用量の強心配糖体（強心配糖体含有組成物、または強心配糖体含有抽出物）を、前記感染症を有する対象に投与することを含む方法を提供する。複数回用量は、１週間あたり２日以上にわたって、任意に１カ月あたり１週間以上にわたって、さらに任意に１年あたり１カ月以上にわたっての１日あたり１回以上の用量として分けることができる。好ましい強心配糖体は、オレアンドリンである。

本発明は、したがって、コロナウイルス感染、詳細にはヒトに対して病原性であるコロナウイルス感染、例えばＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を治療する方法であって、前記感染を有する対象に、治療有効用量の強心配糖体（強心配糖体含有組成物）を慢性投与することを含む方法を提供する。慢性投与は、１回以上の（複数の）治療有効用量の強心配糖体（強心配糖体含有組成物）を繰り返し投与することにより達成できる。１回以上の用量は、１週間に１日以上にわたって、任意に１カ月あたり１週間以上にわたって、任意に１年あたり１カ月以上にわたって１日に投与され得る。

したがって、本発明は、治療を必要とする対象（詳細にはヒト対象）において、ウイルス、例えばＣｏＶの感染を治療する方法であって、対象に、ａ）オレアンドリン；またはｂ）オレアンドリン、およびＮｅｒｉｕｍ種から抽出される１つ以上の他の化合物を含む１回以上の用量の抗ウイルス組成物を投与することを含む方法を提供する。オレアンドリンは、Ｎｅｒｉｕｍ種の抽出物の一部として存在し得、この抽出物は、ａ）超臨界流体抽出物；ｂ）熱水抽出物；ｃ）有機溶媒抽出物；ｄ）水性有機溶媒抽出物；ｅ）超臨界流体を使用し、任意に少なくとも１つの有機溶媒（抽出改質剤）を加える抽出物；ｆ）亜臨界液体を使用し、任意に少なくとも１つの有機溶媒（抽出改質剤）を加える抽出物；またはｇ）前記抽出物のいずれか２つ以上の任意の組み合わせであり得る。

ＰＢＩ－０５２０４（本明細書、およびその開示全体が参照により本明細書に組み込まれる、２０１２年５月２９日発行のＡｄｄｉｎｇｔｏｎのＵＳ８１８７６４４Ｂ２、２００８年７月２２日発行のＡｄｄｉｎｇｔｏｎのＵＳ７４０２３２５Ｂ２、２０１３年３月１２日発行のＡｄｄｉｎｇｔｏｎらのＵＳ８３９４４３４Ｂ２に記載される）は、主要な薬理学的に活性な構成成分として強心配糖体（オレアンドリン、ＯＬ）およびトリテルペン（オレアノール酸（ＯＡ）、ウルソール酸（ＵＡ）、およびベツリン酸（ＢＡ））を含む。ＯＬ対総トリテルペンのモル比は、約１：（１０～９６）である。ＯＡ：ＵＡ：ＢＡのモル比は、約７．８：７．４：１である。ＰＢＩ－０５２０４のＯＡ、ＵＡ、およびＢＡの組み合わせは、ＯＬ等モル基準で比較した場合、オレアンドリンの抗ウイルス活性を増加させる。ＰＢＩ－０４７１１は、ＰＢＩ－０５２０４の画分であるが、それは強心配糖体（ＯＬ）を含まない。ＰＢＩ－０４７１１のＯＡ：ＵＡ：ＢＡのモル比は、約３：２．２：１である。ＰＢＩ－０４７１１はまた、抗ウイルス活性も保有する。したがって、ＯＬ、ＯＡ、ＵＡ、およびＢＡを含む抗ウイルス組成物は、ＯＬの等モル含有量に基づいて、唯一の活性成分としてＯＬを含む組成物よりも有効である。いくつかの実施形態では、個々のトリテルペン対オレアンドリンのモル比は、以下の範囲である：約２～８（ＯＡ）：約２～８（ＵＡ）：約０．１～１（ＢＡ）：約０．５～１．５（ＯＬ）；または約３～６（ＯＡ）：約３～６（ＵＡ）：約０．３～８（ＢＡ）：約０．７～１．２（ＯＬ）；または約４～５（ＯＡ）：約４～５（ＵＡ）：約０．４～０．７（ＢＡ）：約０．９～１．１（ＯＬ）；または約４．６（ＯＡ）：約４．４（ＵＡ）：約０．６（ＢＡ）：約１（ＯＬ）。

唯一の抗ウイルス剤としてオレアンドリンを含む抗ウイルス組成物は、本発明の範囲内にある。単体の抗ウイルス剤としてジゴキシンを含む抗ウイルス組成物は、本発明の範囲内にある。
抗ウイルス剤としてオレアンドリンおよび複数のトリテルペンを含む抗ウイルス組成物は、本発明の範囲内にある。いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）、ウルソール酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）、およびベツリン酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）を含む。化合物のモル比は、本明細書に記載される通りである。

主要な活性成分として複数のトリテルペンを含む（ステロイド、強心配糖体、および薬理学的に活性な成分を除くことを意味する）抗ウイルス組成物はまた、本発明の範囲内にある。上記のように、ＰＢＩ－０４７１１は。ＯＡ、ＵＡ、およびＢＡを主要な活性成分として含み、それは抗ウイルス活性を示す。いくつかの実施形態では、トリテルペンベースの抗ウイルス組成物は、ＯＡ、ＵＡ、およびＢＡを含み、それらの各々は独立して、その遊離酸形態、塩形態、重水素化形態、および誘導体形態から各発生時に選択される。

ＰＢＩ－０１０１１は、ＯＡ、ＵＡ、およびＢＡを含む改善されたトリテルペンベースの抗ウイルス組成物であり、ＯＡ：ＵＡ：ＢＡのモル比は、約９～１２：最大約２：最大約２、または約１０：約１：約１、または約９～１２：約０．１～２：約０．１～２、または約９～１１：約０．５～１．５：約０．５～１．５、または約９．５～１０．５：約０．７５～１．２５：約０．７５～１．２５、または約９．５～１０．５：約０．８～１．２：約０．８～１．２、または約９．７５～１０．５：約０．９～１．１：約０．９～１．１である。

いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、本明細書に記載されるように、ＯＡ対ＵＡのモル比で存在する少なくともオレアノール酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）およびウルソール酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）を含む。ＯＡは、ＵＡを超える大モル過剰で存在する。
いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、本明細書に記載されるように、ＯＡ対ＢＡのモル比で存在する少なくともオレアノール酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）およびベツリン酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）を含む。ＯＡは、ＢＡを超える大モル過剰で存在する。
いくつかの実施形態では、抗ウイルス組成物は、本明細書に記載されるように、ＯＡ対ＵＡ対ＢＡのモル比で存在する少なくともオレアノール酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）、ウルソール酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）、およびベツリン酸（その遊離酸、塩、誘導体、またはプロドラッグ）を含む。ＯＡは、ＵＡおよびＢＡの両方を超える大モル過剰で存在する。
いくつかの実施形態では、トリテルペンベースの抗ウイルス組成物は、強心配糖体を除外する。

一般に、アレナウイルス感染、アルテルンウイルス感染、フィロウイルス感染、フラビウイルス感染（フラビウイルス属）、デルタレトロウイルス属、コロナウイルス科、パラミクソウイルス科、オルトミクソウイルス科、またはトガウイルス感染を有する対象は、以下のように治療される。対象は、当該対象が当該ウイルスに感染しているかどうかを判定するために評価される。抗ウイルス組成物の投与が指示される。抗ウイルス組成物の初期用量は、一定期間（治療期間）、処方された投与計画に従って対象に投与される。対象の臨床応答および治療応答のレベルは、定期的に判定される。ある用量で治療応答のレベルが低すぎる場合、対象における治療応答の所望のレベルが達成されるまで、所定の用量漸増スケジュールに従って用量が漸増される。抗ウイルス組成物による対象の治療は、必要に応じて継続される。患者が感染自体の停止、感染に関連する症状の低減、および／または感染の進行の低減などの所望の臨床的エンドポイント（複数可）に達するまで、用量または投与計画が必要に応じて調節され得る。

臨床医が、抗ウイルス組成物および１つ以上の他の治療薬の組み合わせによりウイルス感染を有する対象を治療する意図があり、対象が有するウイルス感染が、当該１つ以上の他の治療薬による治療に少なくとも部分的に治療的に応答することが知られている場合、本発明の方法は、治療関連用量の抗ウイルス組成物および治療関連用量の当該１つ以上の他の治療薬を、それを必要とする対象に投与することを含み、抗ウイルス組成物は、第１の投与計画に従って投与され、１つ以上の他の治療薬は、第２の投与計画に従って投与される。いくつかの実施形態では、第１および第２の投与計画は同じである。いくつかの実施形態では、第１および第２の投与計画は異なる。
本発明の抗ウイルス組成物（複数可）は、一次抗ウイルス療法、補助抗ウイルス療法、または併用抗ウイルス療法として投与することができる。本発明の方法は、抗ウイルス組成物の少なくとも１つの他の既知の抗ウイルス組成物との別々の投与または同時投与を含み、本発明の抗ウイルス組成物は、既知の抗ウイルス組成物（化合物（複数可））またはウイルス感染に関連する症状を治療するための組成物の投与の前、その間、またはその後に投与され得ることを意味する。例えば、炎症、嘔吐、悪心、頭痛、発熱、下痢、悪心、蕁麻疹、結膜炎、倦怠感、筋肉痛、関節痛、発作、または麻痺を治療するために使用される薬剤は、本発明の抗ウイルス組成物とともに、またはそれとは別々に投与することができる。

１つ以上の他の治療薬は、治療上有効であると臨床医が認識している用量および投与計画に従って、または治療有効以下であると臨床医が認識している用量で投与することができる。抗ウイルス組成物および１つ以上の他の治療薬の組み合わせの投与により提供される臨床的利益および／または治療効果は、相加的または相乗的であり得、そのようなレベルの利益または効果は、組み合わせの投与と個々の抗ウイルス組成物構成成分（複数可）および１つ以上の他の治療薬の投与との比較により決定されている。食品医薬品局、世界保健機関、欧州医薬品庁（Ｅ．Ｍ．Ｅ．Ａ．）、薬品・医薬品行政局（ＴＧＡ、オーストラリア）、全米保健機関（ＰＡＨＯ）、医薬品・医療機器安全局（Ｍｅｄｓａｆｅ、ニュージーランド）、または世界中の様々な保健省によって提案または説明されているような用量および投与計画に従って、１つ以上の他の治療薬を投与することができる。

ウイルス感染を治療するための本発明の抗ウイルス組成物に含まれ得る例示的な他の治療薬は、抗レトロウイルス剤、インターフェロンα（ＩＦＮ－ａ）、ジドブジン、ラミブジン、シクロスポリンＡ、三酸化ヒ素を用いたＣＨＯＰ、バルプロ酸ナトリウム、メトトレキサート、アザチオプリン、１つ以上の症状を軽減する薬物（複数可）、ステロイドスペアリング薬、副腎皮質ステロイド、シクロホスファミド、免疫抑制剤、抗炎症剤、ヤヌスキナーゼ阻害剤、トファシチニブ、カルシニューリン阻害剤、タクロリムス、ｍＴＯＲ阻害剤、シロリムス、エベロリムス、ＩＭＤＨ阻害剤、アザチオプリン、レフルノミド、ミコフェノール酸、生物製剤、アバタセプト、アダリムマブ、アナキンラ、セルトリズマブ、エタネルセプト、ゴリムマブ、インフリキシマブ、イキセキズマブ、ナタリズマブ、リツキシマブ、セクキヌマブ、トシリズマブ、ウステキヌマブ、ベドリズマブ、モノクローナル抗体、バシリキシマブ、ダクリズマブ、ポリクローナル抗体、ヌクレオシド類似体、逆転写酵素阻害剤、エムトリシタビン、テルビブジン、アバカビル、アデホビル、ジダノシン、エムトリシタビン、エンテカビル、スタブジン、テノフォビル、アジスロマイシン、マクロライド系抗生物質、プロテアーゼ阻害剤、インターフェロン、免疫応答改質剤、ｍＲＮＡ合成阻害剤、タンパク質合成阻害剤、チアゾリド、ＣＹＰ３Ａ４阻害剤、ヘテロ環式ビグアニジン、ＣＣＲ５受容体阻害剤、およびそれらの組み合わせを含む。研究された治療法はまた、血漿分離および／または放射線照射を含む。特定のウイルスに対する抗体はまた、本発明の抗ウイルス組成物で治療した対象に投与され得る。初めてウイルス感染した生存者の血液から得られた血漿は、同一種類のウイルス感染を有する他の対象に投与され得、前記他の対象はまた、本発明の抗ウイルス組成物を投与される。例えば、ＣＯＶＩＤ－１９感染の生存者からの血漿は、ＣＯＶＩＤ－１９感染を有する別の対象に投与され得、前記他の対象はまた、本発明の抗ウイルス組成物を投与される。

実施例５は、哺乳動物におけるジカウイルス感染の治療のための例示的な手順を提供する。実施例１２は、哺乳動物におけるフィロウイルス感染（エボラウイルス、マールブルグウイルス）の治療のための例示的な手順を提供する。実施例１３は、哺乳動物におけるフラビウイルス感染、黄熱病、デング熱、日本脳炎、西ナイルウイルス、ジカウイルス、ダニ媒介性脳炎、キャサヌール森林病、アルフルマ（Ａｌｋｈｕｒｍａ）病、オムスク出血熱、ポワッサンウイルス感染の治療のための例示的な手順を提供する。実施例２５は、デルタレトロウイルス属（ＨＴＬＶ－１）感染症を治療するための例示的な手順を示す。

薬学的組成物中に存在する抗ウイルス化合物（複数可）（トリテルペン（複数可）、強心配糖体（複数可）など）は、それらの非修飾形態、塩形態、誘導体形態、またはそれらの組み合わせで存在し得る。本明細書で使用される場合、「誘導体」という用語は、ａ）第１の化学物質に構造的に関連し、それから理論的に誘導可能な化学物質；ｂ）同様の第１の化合物から形成される化合物、もしくは第１の化合物の１つの原子が別の原子または原子の群で置き換えられた場合、別の第１の化合物から生じると考えられ得る化合物；ｃ）親化合物から誘導もしくは取得され、親化合物の必須要素を含む化合物；またはｄ）１つ以上のステップで同様の構造の第１の化合物から生成され得る化学化合物を意味すると解釈される。例えば、誘導体は、その重水素化形態、酸化形態、脱水、不飽和、ポリマー複合体化、またはグリコシル化形態を含み得るか、あるいはエステル、アミド、ラクトン、同族体、エーテル、チオエーテル、シアノ、アミノ、アルキルアミノ、スルフヒドリル、複素環式、複素式環縮合、重合、ペグ化、ベンジリデニル、トリアゾリル、ピペラジニル、またはそれらの重水素化形態を含み得る。

本明細書で使用される場合、「オレアンドリン」という用語は、特に明記しない限り、オレアンドリンの全ての既知の形態を意味すると解釈される。オレアンドリンは、ラセミ体、光学的に純粋な形態、または光学的に濃縮された形態で存在し得る。Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ植物材料は、例えば、テキサス州アタスコサのアルドリッジ・ナーサリーなどの商業的な植物供給業者から入手することができる。

超臨界流体（ＳＣＦ）抽出物は、ＵＳ７，４０２，３２５、ＵＳ８３９４４３４、ＵＳ８１８７６４４、またはＰＣＴ国際公開第ＷＰ２００７／０１６１７６Ａ２に詳述されるように調製することができ、それらの開示全体は、参照により本明細書に組み込まれる。抽出は、エタノールなどの改質剤（有機溶媒）の存在下または不在下で、超臨界二酸化炭素を使用して行うことができる。

強心配糖体、特にオレアンドリンを含む他の抽出物は、様々な異なるプロセスによって調製することができる。抽出物は、熱水抽出物の調製のための手順を説明するＤｒ．Ｈｕｓｅｙｉｎ Ｚｉｙａ Ｏｚｅｌ（米国特許第５，１３５，７４５号）によって開発されたプロセスに従って抽出物を調製することができる。水性抽出物には、分子量が２ＫＤ～３０ＫＤで変化するいくつかの多糖類、オレアンドリン、オレアンドリゲニン、オドロシドおよびネリタロシドが含まれると報告されている。多糖類には、酸性ホモポリガラクツロナンまたはアラビノガラツロナンが含まれると報告されている。Ｓｅｌｖａｒａｊらの米国特許第５，８６９，０６０号は、Ｎｅｒｉｕｍ種の熱水抽出物およびその生成方法、例えば、実施例２を開示している。次いで、得られた抽出物は、凍結乾燥され、粉末を生成することができる。米国特許第６，５６５，８９７号（米国登録前第２００２０１１４８５２号およびＳｅｌｖａｒａｊらのＰＣＴ国際公開第ＷＯ２０００／０１６７９３号）は、実質的に減菌の抽出物の調製のための熱水抽出プロセスを開示している。Ｅｒｄｅｍｏｇｌｕら（Ｊ．Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．（２００３）Ｎｏｖ．８９（１），１２３－１２９）は、抗侵害受容作用および抗炎症作用に基づいて、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒを含む植物の水性抽出物およびエタノール抽出物の比較結果を開示している。Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの有機溶媒抽出物もまた、Ａｄｏｍｅら（Ａｆｒ．Ｈｅａｌｔｈ Ｓｃｉ．（２００３）Ａｕｇ．３（２），７７－８６；ｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、ｅｌ－Ｓｈａｚｌｙら（Ｊ．Ｅｇｙｐｔ Ｓｏｃ．Ｐａｒａｓｉｔｏｌ．（１９９６），Ａｕｇ．２６（２），４６１－４７３；ｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、Ｂｅｇｕｍ ら（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（１９９９）Ｆｅｂ．５０（３），４３５－４３８；ｍｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、Ｚｉａら（Ｊ．Ｅｔｈｎｏｌｐｈａｒｍａｃｏｌ．（１９９５）Ｎｏｖ．４９（１），３３－３９；ｍｅｔｈａｎｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）、およびＶｌａｓｅｎｋｏら（Ｆａｒｍａｔｓｉｉａ．（１９７２）Ｓｅｐｔ．－Ｏｃｔ．２１（５），４６－４７；ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔ）によって開示される。Ｓｉｎｇｈらの米国登録前特許出願公開第２００４０２４７６６０号は、癌の治療における使用のためのオレアンドリンのタンパク質安定化リポソーム製剤の調製を開示している。Ｓｉｎｇｈらの米国登録前特許出願公開第２００５００２６８４９号は、シクロデキストリンを含むオレアンドリンの水溶性製剤を開示している。Ｓｉｎｇｈらの米国登録前特許出願公開第２００４００８２５２１号は、熱水抽出物からのオレアンドリンのタンパク質安定化ナノ粒子製剤の調製を開示している。

オレアンドリンはまた、Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓの形質転換カルス（Ｉｂｒａｈｉｍら、Ｅｎｚ． Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｔｅｃｈｎｏ．（２００７），４１（３），３３１－３３６の“Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｏｌｅａｎｄｒｉｎ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｂｙ ｃｏｍｂｉｎｅｄ Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｆｕｎｇａｌ ｅｌｉｃｉｔａｔｉｏｎ ｉｎ Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ ｃｅｌｌ ｃｕｌｔｕｒｅｓ”、その開示全体が参照により本明細書に組み込まれる）に由来する懸濁液培養物の抽出物から得られる。ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍの熱水、有機溶媒、水性有機溶媒、または超臨界流体抽出物が、本発明に従って使用され得る。

オレアンドリンはまた、インビトロで、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒマイクロ培養物の抽出物から得られ、それによってシュート培養を実生から、および／あるいはＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ品種Ｓｐｌｅｎｄｅｎｓ Ｇｉｇａｎｔｅｕｍ、ＲｅｖａｎｃｈｅもしくはＡｌｓａｃｅ、または他の品種の茎端から開始できる（Ｖｉｌａら、ＨｏｒｔＳｃｉｅｎｃｅ（２０１０），４５（１），９８－１０２の“Ｍｉｃｒｏｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ Ｏｌｅａｎｄｅｒ（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ Ｌ．）”、その開示全体が参照により本明細書に組み込まれる）。マイクロ培養Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの熱水、有機溶媒、水性有機溶媒、または超臨界流体抽出物は、本発明に従って使用され得る。

抽出物はまた、それらの多糖類および炭水化物の含有量が異なる。熱水抽出物は、グルコースで調製された標準曲線に対して４０７．３グルコース当量単位の炭水化物を含むが、一方で、ＳＣＦ ＣＯ₂抽出物の分析は、定量限界を下回る非常に低いレベルで見出された炭水化物レベルを見出した。しかしながら、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの熱水抽出物中の炭水化物の量は、ＳＣＦ ＣＯ₂抽出物のそれよりも少なくとも１００倍多かった。ＳＣＦ抽出物の多糖類含有量は、０％、＜０．５％、＜０．１％、＜０．０５％、または＜０．０１％重量であり得る。いくつかの実施形態では、ＳＣＦ抽出物は、植物塊の抽出中に得られた多糖類を除外する。

ＳＣＦ ＣＯ₂抽出物および熱水抽出物の部分的な組成物は、ＪＥＯＬ ＡｃｃｕＴＯＦ－ＤＡＲＴ質量分析計（ＪＥＯＬ ＵＳＡ、Ｐｅａｂｏｄｙ，ＭＡ，ＵＳＡ）で、ＤＡＲＴ ＴＯＦ－ＭＳ（飛行質量分析のリアルタイム時間の直接分析）によって決定した。
Ｎｅｒｉｕｍ種またはＴｈｅｖｅｔｉａ種のＳＣＦ抽出物は、オレアンドリンおよびトリテルペンなどの薬理学的に活性な化合物の混合物である。ＳＣＦプロセスによって得られる抽出物は、周囲温度で実質的に水不溶性の、粘性の半固体である（溶媒を除去した後）。ＳＣＦ抽出物は、様々な異なる範囲の水溶性を有する多くの異なる構成成分を含む。超臨界流体プロセスからの抽出物は、重量で０．９重量％～２．５重量％のオレアンドリンまたは１．７重量％～２．１重量％のオレアンドリンまたは１．７重量％～２．０重量％のオレアンドリンの理論的範囲を含む。異なる量のオレアンドリンを含むＳＣＦ抽出物が得られている。一実施形態では、ＳＣＦ抽出物は、約２重量％のオレアンドリンを含む。ＳＣＦ抽出物は、熱水抽出物よりも３～１０倍高い濃度のオレアンドリンを含む。これは、ＨＰＬＣならびにＬＣ／ＭＳ／ＭＳ（タンデム質量分析）分析の両方によって確認された。

ＳＣＦ抽出物は、オレアンドリンおよびトリテルペンオレアノール酸、ベツリン酸およびウルソール酸、ならびに任意に本明細書に記載される他の構成成分を含む。オレアンドリンおよびトリテルペンの含有量は、バッチにより異なり得るが、しかしながら、変動の程度は過度ではない。例えば、ＳＣＦ抽出物（ＰＢＩ－０５２０４）のバッチは、これら４つの構成成分について分析され、以下の各々のおおよその量を含むことが見出された。

個々の構成成分の含有量は、示された値に対して±２５％、±２０％、±１５％、±１０％、または±５％異なり得る。したがって、ＳＣＦ抽出物中のオレアンドリンの含有量は、ＳＣＦ抽出物の１ｍｇあたり２０ｍｇ±５ｍｇ（２０ｍｇの±２５％である）の範囲になる。

オレアンドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、およびそれらの誘導体はまた、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ（ｗｗｗ．ｓｉｇｍａａｌｄｒｉｃｈ．ｃｏｍ；Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ，ＵＳＡ）からも購入することができる。ジゴキシンは、ＨＩＫＭＡ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＬＴＤ（ＮＤＡ Ｎ０１２６４８、エリキシル剤、０．０５ｍｇ／ｍＬ；錠剤、０．１２５ｍｇ、０．２５ｍｇ）、ＶｉｓｔａＰｈａｒｍ Ｉｎｃ．（ＮＤＡ Ａ２１３０００、エリキシル剤、０．０５ｍｇ／ｍＬ）、Ｓａｎｄｏｚ Ｉｎｃ．（ＮＤＡ Ａ０４０４８１、注射剤、０．２５ｍｇ／ｍＬ）、Ｗｅｓｔ－Ｗａｒｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＬＴＤ（ＮＤＡ Ａ０８３３９１、注射剤、０．２５ｍｇ／ｍＬ）、Ｃｏｖｉｓ Ｐｈａｒｍａ ＢＶ（ＮＤＡ Ｎ００９３３０、０．１ｍｇ／ｍＬ、０．２５ｍｇ／ｍＬ）、Ｉｍｐａｘ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（ＮＤＡ Ａ０７８５５６、錠剤、０．１２５ｍｇ、０．２５ｍｇ）、Ｊｅｒｏｍｅ Ｓｔｅｖｅｎｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．（ＮＤＡ Ａ０７６２６８、錠剤、０．１２５ｍｇ、０．２５ｍｇ）、Ｍｙｌａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．（ＮＤＡ Ａ０４０２８２、錠剤、０．１２５ｍｇ、０．２５ｍｇ）、Ｓｕｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｉｎｃ．（ＮＤＡ Ａ０７６３６３、錠剤、０．１２５ｍｇ、０．２５ｍｇ）、Ｃｏｎｃｏｒｄｉａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．（ＮＤＡ Ａ０２０４０５、錠剤、０．０６２５、０．１２５ｍｇ、０．１８７５ｍｇ、０．２５ｍｇ、０．３７５ｍｇ、０．５ｍｇ、ＬＡＮＯＸＩＮ）、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ ＬＬＣ（ＮＤＡ ０１８１１８、カプセル剤、０．０５ｍｇ、０．１ｍｇ、０．１５ｍｇ、０．２ｍｇ、ＬＡＮＯＸＩＣＡＰＳ）から市販されている。

本明細書で使用される場合、個々に命名されたトリテルペンは、それらの天然（非修飾、遊離酸）形態、それらの塩形態、誘導体形態、プロドラッグ形態、またはそれらの組み合わせで、各発生時に選択される。トリテルペンの重水素化形態を含む組成物およびそれを用いる使用方法もまた、本発明の範囲内にある。

オレアノール酸の誘導体、プロドラッグ、および塩は、２０１５年１月８日に公開されたＧｒｉｂｂｌｅらのＵＳ２０１５／００１１６２７Ａ１、２０１４年１１月２０日に公開されたＲｏｎｇらのＵＳ２０１４／０３４３１０８Ａ１、２０１４年１１月２０日に公開されたＸｕらのＵＳ２０１４／０３４３０６４Ａ１、２０１４年６月２６日に公開されたＡｎｄｅｒｓｏｎらのＵＳ２０１４／０１７９９２８Ａ１、２０１４年４月１０日に公開されたＢｅｎｄｅｒらのＵＳ２０１４／０１００２２７Ａ１、２０１４年３月２７日に公開されたＪｉａｎｇらのＵＳ２０１４／００８８１８８Ａ１、２０１４年３月２７日に公開されたＪｉａｎｇらのＵＳ２０１４／００８８１６３Ａ１、２０１４年３月６日に公開されたＪｉａｎｇらのＵＳ２０１４／００６６４０８Ａ１、２０１３年１１月２８日に公開されたＡｎｄｅｒｓｏｎらのＵＳ２０１３／０３１７００７Ａ１、２０１３年１１月１４日に公開されたＧｒｉｂｂｌｅらのＵＳ２０１３／０３０３６０７Ａ１、２０１２年９月２７日に公開されたＡｎｄｅｒｓｏｎらのＵＳ２０１２／０２４５３７４、２０１２年９月２０日に公開されたＪｉａｎｇらのＵＳ２０１２／０２３８７６７Ａ１、２０１２年９月２０日に公開されたＳｈｏｄｅらのＵＳ２０１２／０２３７６２９Ａ１、２０１２年８月２３日に公開されたＡｎｄｅｒｓｏｎらのＵＳ２０１２／０２１４８１４Ａ１、２０１２年６月２８日に公開されたＬｅｅらのＵＳ２０１２／０１６５２７９Ａ１、２０１１年１２月１日に公開されたＡｒｎｔｚｅｎらのＵＳ２０１１／０２９４７５２Ａ１、２０１１年４月２１日に公開されたＭａｊｅｅｄらのＵＳ２０１１／００９１３９８Ａ１、２０１０年７月２９日に公開されたＡｒｎｔｚｅｎらのＵＳ２０１０／０１８９８２４Ａ１、２０１０年２月２５日に公開されたＪｉａｎｇらのＵＳ２０１０／００４８９１１Ａ１、および２００６年４月６日に公開されたＡｒｎｔｚｅｎらのＵＳ２００６／００７３２２２Ａ１に開示されており、それらの開示全体は、参照により本明細書に組み込まれる。

ウルソール酸の誘導体、プロドラッグ、および塩は、２０１５年１月８日に公開されたＧｒｉｂｂｌｅらのＵＳ２０１５／００１１６２７Ａ１、２０１３年１１月１４日に公開されたＧｒｉｂｂｌｅらのＵＳ２０１３／０３０３６０７Ａ１、２０１５年８月６日に公開されたＹｏｏｎらのＵＳ２０１５／０２１８２０６Ａ１、２００４年１１月３０日に発行されたＦｒｉｔｓｃｈｅらのＵＳ６８２４８１１、２０１０年５月８日に発行されたＯｃｈｉａｉらのＵＳ７７１８６３５、２０１４年５月２０日に発行されたＬｉｎらのＵＳ８７２９０５５、および２０１５年９月１日に発行されたＹｏｏｎらのＵＳ９１２０８３９に開示されており、それらの開示全体は、参照により本明細書に組み込まれる。

ベツリン酸の誘導体、プロドラッグ、および塩は、２０１５年１月８日に公開されたＧｒｉｂｂｌｅらのＵＳ２０１５／００１１６２７Ａ１、２０１３年１１月１４日に公開されたＧｒｉｂｂｌｅらのＵＳ２０１３／０３０３６０７Ａ１、２０１２年９月２０日に公開されたＳｈｏｄｅらのＵＳ２０１２／０２３７６２９Ａ１、２０１７年７月２０日に公開されたＲｅｇｕｅｉｒｏ－ＲｅｎらのＵＳ２０１７／０２０４１３３Ａ１、２０１７年４月６日に公開されたＮｉｔｚらのＵＳ２０１７／００９６４４６Ａ１、２０１５年１１月２６日に公開されたＰａｒｔｈａｓａｒａｄｈｉ ＲｅｄｄｙらのＵＳ２０１５／０３３７００４Ａ１、２０１５年４月３０日に公開されたＲｅｄｄｙらのＵＳ２０１５／０１１９３７３Ａ１、２０１４年１０月２日に公開されたＹａｎらのＵＳ２０１４／０２９６５４６Ａ１、２０１４年８月２８日に公開されたＳｗｉｄｏｒｓｋｉらのＵＳ２０１４／０２４３２９８Ａ１、２０１４年８月７日に公開されたＲｅｄｄｙらのＵＳ２０１４／０２２１３２８Ａ１、２０１４年３月６日に公開されたＬｅｕｎｉｓらのＵＳ２０１４／００６６４１６Ａ１、２０１３年３月１４日に公開されたＤｕｒｓｔらのＵＳ２０１３／００６５８６８Ａ１、２０１３年１月３１日に公開されたＲｅｇｕｅｉｒｏ－ＲｅｎらのＵＳ２０１３／００２９９５４Ａ１、２０１２年１１月２９日に公開されたＺｈａｎｇらのＵＳ２０１２／０３０２５３０Ａ１、２０１２年８月２３日に公開されたＰｏｗｅｒらのＵＳ２０１２／０２１４７７５Ａ１、２０１２年４月２６日に公開されたＨｏｎｄａらのＵＳ２０１２／０１０１１４９Ａ１、２０１１年９月１５日に公開されたＢｕｌｌｏｃｋらのＵＳ２０１１／０２２４１８２、２０１１年１２月２２日に公開されたＨｅｍｐらのＵＳ２０１１／０３１３１９１Ａ１、２０１１年９月１５日に公開されたＰｉｃｈｅｔｔｅらのＵＳ２０１１／０２２４１５９Ａ１、２０１１年９月８日に公開されたＰａｒｔｈａｓａｒａｄｈｉ ＲｅｄｄｙらのＵＳ２０１１／０２１８２０４、２００９年８月１３日に公開されたＳａｆｅらのＵＳ２００９／０２０３６６１Ａ１、２００９年５月２１日に公開されたＫｒａｓｕｔｓｋｙらのＵＳ２００９／０１３１７１４Ａ１、２００９年３月１９日に公開されたＫｒａｓｕｔｓｋｙらのＵＳ２００９／００７６２９０、２００９年３月１２日に公開されたＬｅｕｎｉｓらのＵＳ２００９／００６８２５７Ａ１、２００８年１１月２７日に公開されたＭｕｋｈｅｒｊｅｅらのＵＳ２００８／０２９３６８２、２００７年３月２９日に公開されたＰｅｚｚｕｔｏらのＵＳ２００７／００７２８３５Ａ１、２００６年１１月９日に公開されたＪａｎｓｅｎらのＵＳ２００６／０２５２７３３Ａ１、および２００６年１１月９日に公開されたＯ’ＮｅｉｌｌらのＵＳ２００６／０２５２７４Ａ１に開示されており、それらの開示全体は、参照により本明細書に組み込まれる。

抗ウイルス組成物は、任意の好適な薬学的に許容される剤形に製剤化することができる。非経口、耳、眼、鼻、吸入、頬側、舌下、経腸、局所、口腔、経口、および注射可能な剤形が特に有用である。特定の剤形には、固体または液体の剤形が含まれる。例示的な好適な剤形には、錠剤、カプセル、丸剤、カプレット、トローチ、サシェ、溶液、懸濁液、分散液、バイアル、バッグ、ボトル、注射液、ｉ．ｖ．（静脈内）、ｉ．ｍ．（筋肉内）またはｉ．ｐ．（腹腔内）投与可能な液体および薬科学の当業者に既知である他のそのような剤形が含まれる。

ウイルス感染は、複数の器官に同時に影響を与え、複数の器官に不全を引き起こし得るので、１つ超の経路により組成物を投与することが有利になり得る。例えば、ＣＯＶＩＤ－１９は、肺、心臓、胃腸管、および脳に影響を与えることが知られている。したがって、強心配糖体含有組成物は、有利には、吸入可能な組成物および経口組成物、舌下組成物および経口組成物、吸入可能な組成物および舌下組成物、吸入可能な組成物および非経口組成物、舌下組成物および非経口組成物、経口組成物および非経口組成物、または他のそのような組み合わせとして投与され得る。

抗ウイルス組成物を含む好適な剤形は、抗ウイルス組成物を本明細書に記載またはＰｉら（Ｃｕｒｒ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．（Ｍａｒ ２０１６），１３（８），１３５８－１３６６の“Ｕｒｓｏｌｉｃ ａｃｉｄ ｎａｎｏｃｒｙｓｔａｌｓ ｆｏｒ ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ ｒａｔｅ ａｎｄ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ：ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐａｒｔｉｃｌｅ ｓｉｚｅ”）、Ｙａｎｇら（Ｉｎｔ．Ｊ．Ｎａｎｏｍｅｄ．（２０１３），８（１），２９１７－２９２６の“Ｓｅｌｆ－ｍｉｃｒｏｅｍｕｌｓｉｆｙｉｎｇ ｄｒｕｇ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｏｒａｌ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ：ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ”）、Ｌｉら（Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．（２０１４），３７（６），９２６－９３７のＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｓｕｃｒｏｓｅ ｅｓｔｅｒ ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ ｎａｎｏｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｓ ｐｒｅｐａｒｅｄ ｂｙ ｗｅｔ ｂａｌｌ ｍｉｌｌｉｎｇ ｗｉｔｈ ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ”）、Ｚｈａｎｇら（Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．（Ｊｕｎｅ ２０１４），１０３（６），１７１１－１７１９の“Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ ｏｆ ｏｒａｌ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｅ ｔｈｒｏｕｇｈ ｌｉｐｉｄ ｎａｎｏｓｐｈｅｒｅｓ：ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ，ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ，ａｎｄ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ”）、Ｇｏｄｕｇｕら（ＰＬｏＳ Ｏｎｅ（Ｍａｒ ２０１４），９（３）：ｅ８９９１９の“Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｔｏ ｉｍｐｒｏｖｅ ｔｈｅ ｏｒａｌ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｎｏｖｅｌ ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ｄｒｕｇｓ ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ ａｎｄ ｂｅｔｕｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ”）、Ｚｈａｏら（Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．（Ｓｅｐ ２０１４），２１（６），４６７－４７９の“Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｅｔｕｌｉｎ ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ ｆｏｒ ｏｒａｌ ｈｙｐｏｇｌｙｃｅｍｉｃ ｄｒｕｇ ｂｙ ａｎｔｉｓｏｌｖｅｎｔ ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ”）、Ｙａｎｇら（ＦｏｏｄＣｈｅｍ．（Ｍａｙ ２０１２），１３２（１），３１９－３２５の“Ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ａｎｄ ｏｒａｌ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｕｒｓｏｌｉｃ ａｃｉｄ ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ ｕｓｉｎｇ ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ ａｎｔｉ－ｓｏｌｖｅｎｔ（ＳＡＳ）ｐｒｏｃｅｓｓ”）、Ｃａｏら（Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍ．（Ａｕｇ．２０１２），９（８），２１２７－２１３５の“Ｅｔｈｙｌｅｎｅ ｇｌｙｃｏｌ－ｌｉｎｋｅｄ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｄｉｅｓｔｅｒ ｐｒｏｄｒｕｇｓ ｏｆ ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ ｆｏｒ ＰＥＰＴ１－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｔｒａｎｓｐｏｒｔ：ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ”）、Ｌｉら（Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．（Ａｕｇ ２０１１），２８（８），２０２０－２０３３の“Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ，ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ ｓｕｃｒｏｓｅ ｅｓｔｅｒ－ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ ｎａｎｏｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｓ ｏｆ ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ”）、Ｔｏｎｇら（Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．（Ｆｅｂ ２０１１），４０４（１－２），１４８－１５８の“Ｓｐｒａｙ ｆｒｅｅｚｅ ｄｒｙｉｎｇ ｗｉｔｈ ｐｏｌｙｖｉｎｙｌｐｙｒｒｏｌｉｄｏｎｅ ａｎｄ ｓｏｄｉｕｍ ｃａｐｒａｔｅ ｆｏｒ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ ａｎｄ ｏｒａｌ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｌｉｔｙ ｏｆ ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ，ａ ＢＣＳ Ｃｌａｓｓ ＩＶ ｃｏｍｐｏｕｎｄ”）、Ｘｉら（ＡＡＰＳ ＰｈａｒｍＳｃｉＴｅｃｈ（２００９），１０（１），１７２－１８２のＦｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｓｅｌｆ－ｎａｎｏｅｍｕｌｓｉｆｉｅｄ ｄｒｕｇ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｓｙｓｔｅｍ ｏｆ ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ”）、Ｃｈｅｎら（Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．（Ｆｅｂ ２００５），５７（２），２５９－２６４の“Ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ ｎａｎｏｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｓ：ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ，ｉｎ－ｖｉｔｒｏ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｎｈａｎｃｅｄ ｈｅｐａｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ”）に記載される薬学的に許容される賦形剤と混合することによって調製することができ、それらの開示全体は、参照により本明細書に組み込まれる。

好適な剤形はまた、２０１２年５月２９日に発行されたＡｄｄｉｎｇｔｏｎのＵＳ８１８７６４４Ｂ２、２００８年７月２２日に発行されたＡｄｄｉｎｇｔｏｎのＵＳ７４０２３２５Ｂ２、２０１３年３月１２日に発行されたＡｄｄｉｎｇｔｏｎらのＵＳ８３９４４３４Ｂ２に従って作製することができ、それらの開示全体は、参照により本明細書に組み込まれる。好適な剤形はまた、実施例１３～１５に記載されるように作製することができる。

有効量のまたは治療関連量の抗ウイルス化合物（強心配糖体、トリテルペン、またはそれらの組み合わせ）が特に企図される。「有効量」という用語により、薬学的有効量が企図されることが理解される。薬学的有効量は、必要なまたは所望の治療応答に十分な活性成分の量または分量、言い換えれば、患者に投与されたときにかなりの生物学的応答を誘発するのに十分な量である。かなりの生物学的応答は、活性物質の単回または複数回用量の結果として発生し得る。用量は、１つ以上の剤形を含んでもよい。任意の患者の特定の用量レベルは、治療される適応症、適応症の重症度、患者の健康、年齢、性別、体重、食事、薬理学的応答、用いられる特定の剤形、および他のそのような要因を含む様々な要因に依存することが理解されよう。

経口投与に所望の用量は最大５剤形であるが、単回用量としてわずか１および最大１０剤形を投与してもよい。例示的な投与形態は、用量あたり合計０．１～５００ｍｇ（１～１０の用量レベル）で、投与形態あたり約０．０１～１００ｍｇまたは０．０１～１００ｍｉｃｒｏｇの抗ウイルス組成物を含み得る。用量は、対象において特定の治療応答または臨床的利益を達成するために、事前に決定および／または調整され得る投与計画に従って投与される。
強心配糖体は、約２０～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１２ｍｉｃｒｏｇ～約３００ｍｉｃｒｏｇ、または約１２ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇのオレアンドリンの初期用量を対象に提供するのに十分な量で剤形に存在し得る。剤形は、オレアンドリン約２０～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約０．０１ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇまたは約０．０１ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇのオレアンドリン、オレアンドリン抽出物またはオレアンドリンを含むＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの抽出物を含み得る。
抗ウイルス剤は、経口剤形に含まれ売る。剤形のいくつかの実施形態は、腸溶コーティングされておらず、０．５～１時間以下の期間内に抗ウイルス組成物のそれらの電荷を放出する。剤形のいくつかの実施形態は、腸溶コーティングされており、空腸、回腸、小腸、および／または大腸（結腸）からなどの胃の下流に抗ウイルス組成物のそれらの電荷を放出する。腸溶コーティングされた剤形は、経口投与後１～１０時間以内に抗ウイルス組成物を全身循環に放出する。
抗ウイルス組成物は、急速放出、即時放出、制御放出、持続放出、持効性放出、長期放出、バースト放出、連続放出、遅延放出、もしくはパルス放出剤形、またはそれらの種類の放出のうちの２つ以上を示す剤形に含まれ得る。剤形からの抗ウイルス組成物の放出プロファイルは、ゼロ次、疑似ゼロ、一次、疑似一次、またはＳ字状放出プロファイルであり得る。抗ウイルス組成物が投与される対象におけるトリテルペンの血漿濃度プロファイルは、１つ以上の最大値を示し得る。

ヒトの臨床データに基づいて、オレアンドリンの投与される用量の５０％～７５％が、経口的に生物学的に利用可能になると予想され、それ故に、剤形あたり約１０～約２０ｍｉｃｒｏｇ、約２０～約４０ｍｉｃｒｏｇ、約３０～約５０ｍｉｃｒｏｇ、約４０～約６０ｍｉｃｒｏｇ、約５０～約７５ｍｉｃｒｏｇ、約７５～約１００ｍｉｃｒｏｇのオレアンドリンを提供する。５リットルの成人の平均血液量を考慮すると、予想されるオレアンドリン血漿濃度は、約０．０５～約２ｎｇ／ｍｌ、約０．００５～約１０ｎｇ／ｍＬ、約０．００５～約８ｎｇ／ｍＬ、約０．０１～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０２～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０３～約６ｎｇ／ｍＬ、約０．０４～約５ｎｇ／ｍＬ、または約０．０５～約２．５ｎｇ／ｍＬの範囲にあるであろう。ＳＣＦ抽出物中に存在するオレアンドリンの推奨される１日用量は、一般に１日２回約０．２ｍｉｃｒｏｇ～約４．５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ体重である。オレアンドリンの用量は、約０．２～約１ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ体重／日、約０．５～約１．０ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ体重／日、約０．７５～約１．５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ体重／日、約１．５～約２．５２ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ体重／日、約２．５～約３．０ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ体重／日、約３．０～４．０ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ体重／日、または約３．５～４．５ｍｉｃｒｏｇオレアンドリン／ｋｇ体重／日であり得る。オレアンドリンの最大耐容用量は、約３．５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ体重／日～約４．０ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ体重／日であり得る。最小有効用量は、約０．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．８ｍｉｃｒｏｇ／日、約２ｍｉｃｒｏｇ／日、または約５ｍｉｃｒｏｇ／日であり得る。

抗ウイルス組成物は、存在するトリテルペンおよびそれらが存在するモル比の組み合わせにより、低用量から高用量で投与することができる。ヒトへの治療有効用量は、体重１ｋｇあたり約１００～１０００ｍｇまたは約１００～１０００ｍｉｃｒｏｇの抗ウイルス組成物である。そのような用量は、２４時間の期間で最大１０回投与することができる。他の好適な投与範囲を以下に指定する。

本明細書の化合物は、本発明の組成物または製剤において１つ以上の機能を有し得ることに留意すべきである。例えば、化合物は、界面活性剤および水混和性溶媒の両方として、または界面活性剤および水不混和性溶媒の両方として役立ち得る。
液体組成物は、１つ以上の薬学的に許容される液体担体を含み得る。液体担体は、水性、非水性、極性、非極性、および／または有機担体であり得る。液体担体には、例として、限定されることなく、水混和性溶媒、水不混和性溶媒、水、緩衝液、およびそれらの混合物が含まれる。

本明細書で使用される場合、交換可能に使用される「水溶性溶媒」または「水混和性溶媒」という用語は、水との二相混合物を形成しないか、または水中で十分に可溶性であり、液相を分離せずに少なくとも５パーセントの溶媒を含む水性溶媒混合物を提供する有機液体を指す。溶媒は、ヒトまたは動物への投与に好適である。例示的な水溶性溶媒には、例としておよび限定することなく、ＰＥＧ（ポリ（エチレングリコール））、ＰＥＧ４００（約４００の近似分子量を有するポリ（エチレングリコール）、エタノール、アセトン、アルカノール、アルコール、エーテル、プロピレングリコール、グリセリン、トリアセチン、ポリ（プロピレングリコール）、ＰＶＰ（ポリ（ビニルピロリドン））、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、ピリジン、プロパノール、Ｎ－メチルアセトアミド、ブタノール、ソルフォール（ｓｏｌｕｐｈｏｒ）（２－ピロリドン）、ファルマソルブ（ｐｈａｒｍａｓｏｌｖｅ）（Ｎ－メチル－２－ピロリドン）が含まれる。

本明細書で使用される場合、その用語が交換可能に使用される「水不溶性溶媒」または「水不混和性溶媒」という用語は、水との二相混合物を形成するか、または水中の溶媒の濃度が５パーセントを超える場合に相分離を提供する有機液体を指す。溶媒は、ヒトまたは動物への投与に好適である。例示的な水不溶性溶媒には、例としておよび限定することなく、中／長鎖トリグリセリド、油、ヒマシ油、トウモロコシ油、ビタミンＥ、ビタミンＥ誘導体、オレイン酸、脂肪酸、オリーブ油、ソフチザン６４５（ジグリセリルカプリレート／カプレート／ステアレート／ヒドロキシイステアレートアジペート）、ミグリオール、キャプテックス（ｃａｐｔｅｘ）（Ｃａｐｔｅｘ３５０：グリセリルトリカプリレート／カプレート／ラウレートトリグリセリド；Ｃａｐｔｅｘ３５５：グリセリルトリカプリレート／カプレートトリグリセリド；Ｃａｐｔｅｘ３５５ ＥＰ／ＮＦ：グリセリルトリカプリレート／カプレート中鎖トリグリセリド）が含まれる。

好適な溶媒は、“Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎ Ｈａｒｍｏｎｉｓａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｆｏｒ Ｒｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ｆｏｒ Ｈｕｍａｎ Ｕｓｅ（ＩＣＨ）ｇｕｉｄａｎｃｅ ｆｏｒ ｉｎｄｕｓｔｒｙ Ｑ３Ｃ Ｉｍｐｕｒｉｔｉｅｓ：Ｒｅｓｉｄｕａｌ Ｓｏｌｖｅｎｔｓ”（１９９７）に列挙されており、それはどの量の残留溶媒が、医薬品において安全であるとみなされるかを推奨している。例示的な溶媒は、クラス２またはクラス３の溶媒として列挙されている。クラス３の溶媒には、例えば、酢酸、アセトン、アニソール、１－ブタノール、２－ブタノール、酢酸ブチル、ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル、クメン、エタノール、エチルエーテル、酢酸エチル、ギ酸エチル、ギ酸、ヘプタン、酢酸イソブチル、酢酸イソプロピル、酢酸メチル、メチル－１－ブタノール、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、２－メチル－１－プロパノール、ペンタン、１－ペンタノール、１－プロパノール、２－プロパノール、または酢酸プロピルが含まれる。

本発明において水不混和性溶媒として使用され得る他の材料には、Ｃａｐｔｅｘ１００：プロピレングリコールジカプレート；Ｃａｐｔｅｘ２００：プロピレングリコールジカプリレート／ジカプレート；Ｃａｐｔｅｘ２００Ｐ：プロピレングリコールジカプリレート／ジカプレート；プロピレングリコールジカプリロカプレート；Ｃａｐｔｅｘ３００：グリセリルトリカプリレート／カプレート；Ｃａｐｔｅｘ３００ＥＰ／ＮＦ：グリセリルトリカプリレート／カプレート中鎖トリグリセリド；Ｃａｐｔｅｘ３５０：グリセリルトリカプリレート／カプレート／ラウレート；Ｃａｐｔｅｘ３５５：グリセリルトリカプリレート／カプレート；Ｃａｐｔｅｘ３５５ＥＰ／ＮＦ：グリセリルトリカプリレート／カプレート中鎖トリグリセリド；Ｃａｐｔｅｘ５００：トリアセチン；Ｃａｐｔｅｘ５００Ｐ：トリアセチン（医薬品グレード）；Ｃａｐｔｅｘ８００：プロピレングリコールジ（２－エチテキサノエート）；Ｃａｐｔｅｘ８１０Ｄ：グリセリルトリカプリレート／カプレート／リノレエート；Ｃａｐｔｅｘ１０００：グリセリルトリカプレート；ＣａｐｔｅｘＣＡ：中鎖トリグリセリド；Ｃａｐｔｅｘ ＭＣＴ－１７０：中鎖トリグリセリド；Ｃａｐｍｕｌ ＧＭＯ：グリセリルモノオレエート；Ｃａｐｍｕｌ ＧＭＯ－５０ ＥＰ／ＮＦ：グリセリルモノオレエート；Ｃａｐｍｕｌ ＭＣＭ：中鎖モノおよびジグリセリド；Ｃａｐｍｕｌ ＭＣＭ Ｃ８：グリセリルモノオレエート；Ｃａｐｍｕｌ ＭＣＭ Ｃ１０：グリセリルモノカプレート；Ｃａｐｍｕｌ ＰＧ－８：プロピレングリコールモノカプリレート；Ｃａｐｍｕｌ ＰＧ－１２：プロピレングリコールモノラウレート；Ｃａｐｒｏｌ １０Ｇ１０Ｏ：デカグリセロールデカオレエート；Ｃａｐｒｏｌ ３ＧＯ：トリグリセロールモノオレエート；Ｃａｐｒｏｌ ＥＴ：混合脂肪酸のポリグリセロールエステル；Ｃａｐｒｏｌ ＭＰＧＯ：ヘキサグリセロールジオレエート；Ｃａｐｒｏｌ ＰＧＥ ８６０：デカグリセロールモノ－、ジオレートが挙げられる。

本明細書で使用される場合、「界面活性剤」とは、極性または荷電親水性部分ならびに非極性疎水性（親油性）部分を含む化合物を指し、すなわち、界面活性剤は、両親媒性である。界面活性剤という用語は、化合物のうちの１つまたは混合物を指し得る。界面活性剤は、可溶化剤、乳化剤、または分散剤であり得る。界面活性剤は、親水性であるか、または疎水性であり得る。

親水性界面活性剤は、薬学的組成物での使用に好適な任意の親水性界面活性剤であり得る。そのような界面活性剤は、アニオン性、カチオン性、双性イオン性または非イオン性であり得るが、非イオン性親水性界面活性剤が、現在好ましい。上に議論されるように、これらの非イオン性親水性界面活性剤は、一般に約１０を超えるＨＬＢ値を有する。親水性界面活性剤の混合物もまた、本発明の範囲内にある。
同様に、疎水性界面活性剤は、薬学的組成物での使用に好適な任意の疎水性界面活性剤であり得る。一般に、好適な疎水性界面活性剤は、約１０未満のＨＬＢ値を有する。疎水性界面活性剤の混合物もまた、本発明の範囲内にある。

追加の好適な可溶化剤の例には、エタノール、イソプロパノール、ブタノール、ベンジルアルコール、エチレングリコール、プロピレングリコール、ブタンジオールおよびその異性体、グリセロール、ペンタエリスリトール、ソルビトール、マンニトール、トランスクトール、ジメチルイソソルビド、ポリエチレングリコール、ポリプロピレン、ポリビニルアルコール、ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよび他のセルロース誘導体、シクロデキストリンおよびシクロデキストリン誘導体などのアルコールおよびポリオール；テトラヒドロフルフリルアルコールＰＥＧエーテル（ＢＡＳＦから商品名Ｔｅｔｒａｇｌｙｃｏｌで市販されている、グリコフロール）またはメトキシＰＥＧ（Ｕｎｉｏｎ Ｃａｒｂｉｄｅ）などの約２００～約６０００の平均分子量を有するポリエチレングリコールのエーテル；２－ピロリドン、２－ピペリドン、カプロラクタム、Ｎ－アルキルピロリドン、Ｎ－ヒドロキシアルキルピロリドン、Ｎ－アルキルピペリドン、Ｎ－アルキルカプロラクタム、ジメチルアセトアミド、およびポリビニピロリドンなどのアミド；プロピオン酸エチル、クエン酸トリブチル、クエン酸アセチルトリエチル、クエン酸アセチルトリブチル、クエン酸トリエチル、オレイン酸エチル、カプリル酸エチル、酪酸エチル、トリアセチン、プロピレングリコールモノアセテート、プロピレングリコールジアセテート、カプロラクトンおよびその異性体、バレロラクトンおよびその異性体、ブチロラクトンおよび異性体などのエステル；ならびにジメチルアセトアミド、ジメチルイソソルビド（Ａｒｌａｓｏｌｖｅ ＤＭＩ（ＩＣＩ））、Ｎ－メチルピロリドン（Ｐｈａｒｍａｓｏｌｖｅ（ＩＳＰ））、モノオクタノイン、ジエチレングリコールノノエチルエーテル（Ｇａｔｔｅｆｏｓｓｅから商品名Ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌで入手可能）、および水などの当該技術分野で知られている他の可溶化剤が挙げられる。可溶化剤の混合物もまた、本発明の範囲内にある。

示されている場合を除いて、本明細書で言及される化合物は、標準的な商業的供給源から容易に入手可能である。
必要ではないが、組成物または製剤は、１つ以上のキレート剤、１つ以上の防腐剤、１つ以上の抗酸化剤、１つ以上の吸着剤、１つ以上の酸性化剤、１つ以上のアルカリ化剤、１つ以上の消泡剤、１つ以上の緩衝剤、１つ以上の着色剤、１つ以上の電解質、１つ以上の塩、１つ以上の安定化剤、１つ以上の張性改質剤、１つ以上の希釈剤、またはそれらの組み合わせをさらに含み得る。

本発明の組成物はまた、固定油、落花生油、ゴマ油、綿実油、トウモロコシ油、およびオリーブ油などの油；オレイン酸、ステアリン酸、およびイソステアリン酸などの脂肪酸；ならびにオレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、脂肪酸グリセリド、およびアセチル化脂肪酸グリセリドなどの脂肪酸エステルを含み得る。組成物は、エタノール、イソプロパノール、ヘキサデシルアルコール、グリセロール、およびプロピレングリコールなどのアルコール；２，２－ジメチル－１，３－ジオキソラン－４－メタノールなどのグリセロールケタール；ポリ（エチレングリコール）４５０などのエーテル；鉱油およびワセリンなどの石油系炭化水素；水；薬学的に好適な界面活性剤、懸濁化剤、もしくは乳化剤；またはそれらの混合物を含み得る。

薬学的製剤の技術分野で使用される化合物は、一般に、様々な機能または目的に役立つことを理解されたい。したがって、本明細書で名付けられた化合物が一度だけ言及されるか、または本明細書で２つ以上の用語を定義するために使用される場合、その目的または機能は、その名付けられた目的（複数可）または機能（複数可）のみに限定されると解釈されるべきではない。
製剤の１つ以上の構成成分は、その遊離塩基、遊離酸、または薬学的もしくは分析的に許容される塩形態で存在し得る。本明細書で使用される場合、「薬学的または分析的に許容される塩」は、イオン結合対を形成するために必要に応じて酸と化合物を反応させることにより修飾された化合物を指す。許容される塩の例には、例えば、非毒性の無機酸または有機酸から形成される従来の非毒性の塩が含まれる。好適な非毒性の塩には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルホン酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸、および当業者に知られている他のものなどの無機酸に由来するものが含まれる。アミノ酸、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２－アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチオン酸、および当業者に知られている他のものなどの有機酸から調製された塩。一方で、薬理学的に活性な成分が酸官能基を有する場合、薬学的に許容される塩基が添加され、薬学的に許容される塩を形成する。他の好適な塩の一覧は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ´ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１７^th．ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，１９８５，ｐ．１４１８に見出され、その関連する開示は、参照により本明細書に組み込まれる。

「薬学的に許容される」という語句は、健全な医学的判断の範囲内で、人間および動物の組織との接触での使用に好適であり、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応、または任意の他の問題もしくは合併症なく、合理的な利益／リスク比に相応する、化合物、材料、組成物、および／または剤形を指す。

剤形は、製薬業界で知られている任意の従来の手段によって作製することができる。液体剤形は、少なくとも１つの液体担体および抗ウイルス組成物を容器に提供することによって調製することができる。１つ以上の他の賦形剤を、液体剤形に含めることができる。固体剤形は、少なくとも１つの固体担体および抗ウイルス組成物を提供することによって調製することができる。１つ以上の他の賦形剤を、固体剤形に含めることができる。
剤形は、従来のパッケージング機器および材料を使用してパッケージすることができる。それは、パック、ボトル、ビア、バッグ、シリンジ、封筒、パケット、ブリスターパック、箱、アンプル、またはその他のそのような容器に入れることができる。
本発明の組成物は、任意の剤形に含まれ売る。特定の剤形には、固体または液体の剤形が含まれる。例示的な好適な剤形には、錠剤、カプセル、丸剤、カプレット、トローチ、サシェ、および薬科学の当業者に知られている他のそのような剤形が含まれる。

上記の説明および以下の実施例を考慮して、当業者は、過度の実験をすることなく、請求された本発明を実施することができるであろう。上記は、本発明の実施形態の調製のためのある特定の手順を詳述する以下の実施例を参照してより理解されるであろう。これらの例になされる全ての参照は、説明を目的のためである。以下の実施例は、網羅的なものとみなされるべきではないが、本発明によって企図される多くの実施形態のうちのほんのいくつかのみの単なる例示とみなされるべきである。
Ｖｅｒｏ ＣＣＬ８１細胞を、予防および治療アッセイ（ＡＴＣＣ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）に使用した。プラークアッセイは、Ｖｉｎｅｅｔ Ｍｅｎａｃｈｅｒｙ（ＵＴＭＢ、Ｇａｌｖｅｓｔｏｎ、ＴＸ）に好意で提供されたＶｅｒｏ Ｅ６細胞で行った。細胞を、５％ＣＯ₂と３７℃のインキュベーター中で維持した。細胞は、５％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）（Ａｔｌａｎｔａ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ，Ｌａｗｒｅｎｃｅｖｉｌｌｅ，ＧＡ）ａｎｄ １％ ペニシリウム／ストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ，Ｇｒａｎｄ Ｉｓｌａｎｄ，ＮＹ）を補充したＤｕｌｂｅｃｃｏ改質Ｅａｇｌｅ培地（Ｇｉｂｃｏ，Ｇｒａｎｄ Ｉｓｌａｎｄ，ＮＹ）を利用して繁殖させた。維持培地は、ＦＢＳを２％に減少させたが、他の点では同一であった。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２株ＵＳＡ_ＷＡ１／２０２０（Ｇｅｎｂａｎｋ ａｃｃｅｓｓｉｏｎ ＭＴ０２０８８０）は、Ｗｏｒｌｄ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｅｍｅｒｇｉｎｇ Ｖｉｒｕｓｅｓ ａｎｄ Ａｒｂｏｖｉｒｕｓｅｓにより提供された。全ての研究で、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＮｅｘｔＧｅｎ配列Ｖｅｒｏ４継代株が利用された。

（実施例１）
粉末化したキョウチクトウの葉の超臨界流体抽出
方法Ａ．二酸化炭素を使用。
キョウチクトウの葉の材料を、収穫、洗浄、および乾燥し、その後、キョウチクトウの葉の材料を、米国特許第５，２３６，１３２号、第５，５９８，９７９号、第６，５１７，０１５号、および第６，７１５，７０５号に記載されているものなどの粉砕および脱水装置に通すことにより、粉末化したキョウチクトウの葉を調製した。使用した出発材料の重量は、３．９４ｋｇであった。
出発材料を、抽出装置で３００ｂａｒ（３０ＭＰａ、４３５１ｐｓｉ）の圧力および５０℃（１２２°Ｆ）の温度で純ＣＯ₂と混合した。合計１９７ｋｇのＣＯ₂を使用して、５０：１の溶媒対原料の比率を得た。次いで、ＣＯ₂および原料の混合物を分離装置に通し、分離装置で混合物の圧力および温度を変化させ、抽出物を二酸化炭素から分離した。

抽出物（６５ｇ）を、良い香りを有する茶色がかった、粘着性の、粘性物質として得た。色は、クロロフィルおよび他の残留発色性化合物によって引き起こされた可能性が高い。正確な収率決定のために、チューブおよび分離器をアセトンですすぎ、アセトンを蒸発させて追加の抽出物９ｇを得た。総抽出量は、７４ｇであった。出発物質の重量に基づいて、抽出物の収率は、１．８８％であった。抽出物中のオレアンドリンの含有量を、高圧液体クロマトグラフィーおよび質量分析法を使用して、５６０．１ｍｇ、または０．７６％の収率であると計算した。

方法Ｂ．二酸化炭素およびエタノールの混合物を使用
キョウチクトウの葉の材料を、収穫、洗浄、および乾燥し、その後、キョウチクトウの葉の材料を、米国特許第５，２３６，１３２号、第５，５９８，９７９号、第６，５１７，０１５号、および第６，７１５，７０５号に記載されているものなどの粉砕および脱水装置に通すことにより、粉末化したキョウチクトウの葉を調製した。使用した出発材料の重量は、３．８５ｋｇであった。
出発物質を、抽出装置で２８０ｂａｒ（２８ＭＰａ、４０６１ｐｓｉ）の圧力および５０℃（１２２°Ｆ）の温度で、改質剤として純ＣＯ₂および５％エタノールと混合した。合計１６０ｋｇのＣＯ₂および８ｋｇのエタノールを使用して、４３．６対１の溶媒対原料の比率を得た。次いで、ＣＯ₂、エタノール、および原料の混合物を分離装置に通し、分離装置で混合物の圧力および温度を変化させ、抽出物を二酸化炭素から分離した。
エタノールの除去後、抽出物（２０７ｇ）を、明らかにいくらかのクロロフィルを含む暗緑色の、粘着性の、粘性のある塊として得た。出発物質の重量に基づいて、抽出物の収率は、５．３８％であった。抽出物中のオレアンドリンの含有量を、高圧液体クロマトグラフィーおよび質量分析法を使用して、１．８９ｇ、または０．９１％の収率であると計算した。

（実施例２）
粉末化したキョウチクトウの葉の熱水抽出
（比較例）
温水抽出は、典型的には、キョウチクトウの葉からオレアンドリンおよび他の活性成分を抽出するために使用される。熱水抽出プロセスの例は、米国特許第５，１３５，７４５号および第５，８６９，０６０号に見出され得る。

５ｇの粉末化したキョウチクトウの葉を使用して、熱水抽出を実施した。１０容量の沸騰水（キョウチクトウ出発原料の重量）を、粉末化したキョウチクトウの葉に添加し、混合物を６時間一定に撹拌した。次いで、混合物を濾過し、葉の残留物を収集し、同じ条件下で再度抽出した。濾液を混合して凍結乾燥した。抽出物の外観は、茶色であった。乾燥した抽出物の重量は、約１．４４ｇであった。３４．２１ｍｇの抽出物材料を、水に溶解し、高圧液体クロマトグラフィーおよび質量分析を使用してオレアンドリン含有量分析を行った。オレアンドリンの量を、３．６８ｍｇであると判定した。抽出物の量に基づいて、オレアンドリンの収率を、０．２６％であると計算した。

（実施例３）
薬学的組成物の調製。
方法Ａ．クレモフォールベースの薬物送達システム
以下の成分を、示される量で提供した。

賦形剤を瓶に分注し、Ｎｅｗ Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃ２４ＫＣ冷蔵インキュベーターシェーカーで、６０℃で２４時間振盪して、均一性を確実にした。次に、試料を引き抜き、可溶化について視覚的に検査した。２４時間後、全ての製剤について、賦形剤および抗ウイルス組成物の両方が完全に溶解した。

方法Ｂ．ＧＭＯ／クレモフォールベースの薬物送達システム
以下の成分を、示される量で提供した。

方法Ａの手順に従った。

方法Ｃ．ラブラゾルベースの薬物送達システム
以下の成分を、示される量で提供した。

方法Ａの手順に従った。

方法Ｄ．ビタミンＥ－ＴＰＧＳベースのミセル形成システム
以下の成分を、示される量で提供した。

方法Ａの手順に従った。

方法Ｅ．多構成成分薬物送達システム
以下の成分を、示される量で提供した。

方法Ａの手順に従った。

方法Ｆ．多構成成分薬物送達システム
以下の成分を、カプセルに含まれることが示されている量で提供した。

方法Ａの手順に従った。

（実施例４）
腸溶コーティングされたカプセルの調製
ステップＩ：液体充填カプセルの調製
硬ゼラチンカプセル（５０カウント、００サイズ）に、実施例３の液体組成物を充填した。これらのカプセルに、８００ｍｇの製剤を手で充填し、次いで、５０％エタノール／５０％水溶液で、手で密封した。次いで、カプセルを、以下の成分を示される量で含む２２％ゼラチン溶液で、手でバンディングした。

ゼラチン溶液を完全に混合し、１～２時間膨潤させた。膨潤後、溶液をしっかりと覆い、５５℃のオーブンに入れて液化させた。ゼラチン溶液全体が液体になると、バンディングを行った。

先の尖った丸い３／０アーティストブラシを使用して、ゼラチン溶液をカプセルに塗布した。シオノギ社から提供されているバンディングキットを使用した。バンディング後、カプセルを、周囲条件に１２時間保持し、バンドを硬化させた。

ステップＩＩ：液体充填カプセルのコーティング
以下の表に列挙される成分からコーティング分散液を調製した。

ステップＩのバンディングしたカプセルを使用した場合、分散液を、２０．０ｍｇ／ｃｍ²のコーティングレベルまでカプセルに塗布した。以下の条件を使用して、カプセルをコーティングした。

（実施例５）
対象におけるジカウイルス感染の治療
方法Ａ．抗ウイルス組成物療法
ジカウイルス感染を呈している対象に、抗ウイルス組成物を処方し、治療関連用量を、処方された投与計画に従って一定期間対象に投与する。対象の治療応答のレベルを、定期的に判定する。治療応答のレベルは、血液または血漿中の対象のジカウイルス力価を判定することによって測定することができる。ある用量で治療応答のレベルが低すぎる場合、対象における治療応答の所望のレベルが達成されるまで、所定の用量漸増スケジュールに従って用量が漸増される。抗ウイルス組成物による対象の治療は、必要に応じて継続され、患者が所望の臨床的エンドポイントに達するまで、用量または投与計画が必要に応じて調節され得る。

方法Ｂ．併用療法：別の薬剤との抗ウイルス組成物
ジカウイルス感染またはその症状の治療のために対象が１つ以上の他の治療薬を処方および投与されることを除いて、上記の方法Ａに従う。次いで、抗ウイルス組成物の前、後、またはそれとともに１つ以上の他の治療薬を投与することができる。１つ以上の他の治療薬の用量漸増（または漸減）もまた行うことができる。

（実施例６）
ジカウイルス感染に対する抗ウイルス活性のインビトロ評価
方法Ａ．純粋な化合物
Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞（Ｖｅｒｏ Ｃ１００８細胞としても既知である、ＡＴＴＣ番号ＣＲＬ－１５８６；ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ａｔｃｃ．ｏｒｇ／Ｐｒｏｄｕｃｔｓ／Ａｌｌ／ＣＲＬ－１５８６．ａｓｐｘ）に、強心配糖体の存在下で、０．２のＭＯＩ（感染多重度）でＺＩＫＶ（ジカウイルス株ＰＲＶＡＢＣ５９；ＡＴＣＣ ＶＲ－１８４３；ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ａｔｃｃ．ｏｒｇ／Ｐｒｏｄｕｃｔｓ／Ａｌｌ／ＶＲ－１８４３．ａｓｐｘ）を感染させた。細胞を、ウイルスおよび化合物とともに１時間インキュベートした後、接種物および化合物を廃棄した。細胞に、新鮮な培地を与え、４８時間インキュベートした後、それらをホルマリンで固定し、ＺＩＫＶ感染を染色した。シンチグラフィーにより判定されたオレアンドリン（図１Ａ）およびジゴキシン（図１Ｂ）の代表的な感染率を示す。他の化合物は、同じ条件下で評価され、ジカウイルスに対して非常に異なるレベルの抗ウイルス活性を示した。

方法Ｂ．抽出物形態の化合物
試験されている標的化合物を含む抽出物を、抽出物の量が抽出物中の標的化合物の量に正規化されることを除いて、方法Ａで詳述されるように評価する。例えば、２重量％のオレアンドリンを含む抽出物は、抽出物１ｍｇあたり２０ｍｉｃｒｏｇのオレアンドリンが含む。したがって、評価のためのオレアンドリンの意図された量が２０ｍｉｃｒｏｇである場合、１ｍｇの抽出物をアッセイで使用する。

（実施例７）
抗ウイルス組成物を含む錠剤の調製
３％サイロイド２４４ＦＰおよび９７％微結晶セルロース（ＭＣＣ）の初期錠剤化混合物を混合した。次いで、実施例３に従って調製された組成物の既存のバッチを、湿式造粒を介してサイロイド／ＭＣＣ混合物に組み込んだ。この混合物は、以下の表で「初期錠剤化混合物」と標識される。圧縮性を高めるために、追加のＭＣＣをさらに顆粒状で添加した。初期錠剤化混合物へのこの添加を、「さらなる顆粒状添加」と標識した。さらなる顆粒状添加から得られた混合物は、「最終錠剤化混合物」と同じ組成物であった。

サイロイド２４４ＦＰは、Ｇｒａｃｅ Ｄａｖｉｓｏｎによって製造されたコロイド状二酸化ケイ素である。コロイド状二酸化ケイ素は、吸着剤、流動促進剤、および錠剤崩壊剤などのいくつかの機能を提供するために一般的に使用される。サイロイド２４４ＦＰを、その重量の３倍の油を吸着するその能力およびその５．５ミクロンの粒子サイズのために選択した。

（実施例８）
オレアンドリンを含む溶液のＨＰＬＣ分析
試料（オレアンドリン標準、ＳＣＦ抽出物、および熱水抽出物）を、以下の条件を用いてＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ）で分析した：シンメトリーＣ１８カラム（５．０μｍ、１５０´４．６ｍｍ内径；Ｗａｔｅｒｓ）；ＭｅＯＨ：水の移動相＝５４：４６（ｖ／ｖ）および流量１．０ｍｌ／分。検出波長を、２１７ｎｍに設定した。試料を、オレアンドリンのおおよその目標濃度を達成するために、化合物または抽出物を一定量のＨＰＬＣ溶媒に溶解することによって調製した。オレアンドリンの保持時間は、内部標準を使用することによって判定することができる。オレアンドリンの濃度は、内部標準を使用してシグナル応答曲線を作成することによって判定／較正することができる。

（実施例９）
薬学的組成物の調製
本発明の薬学的組成物は、以下の方法のうちのいずれかで調製することができる。混合を、湿潤または乾燥条件下で行うことができる。薬学的組成物は、調製中に圧縮、乾燥、またはその両方を行うことができる。薬学的組成物は、剤形に分割することができる。

方法Ａ．
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも１つの抗ウイルス化合物と混合する。

方法Ｂ．
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも２つの抗ウイルス化合物と混合する。
方法Ｃ．
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも１つの強心配糖体と混合する。

方法Ｄ．
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも２つのトリテルペンと混合する。
方法Ｅ．
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも１つの強心配糖体および本明細書に開示される少なくとも２つのトリテルペンと混合する。
方法Ｄ．
少なくとも１つの薬学的賦形剤を、本明細書に開示される少なくとも３つのトリテルペンと混合する。

（実施例１０）
トリテルペン混合物の調製
以下の組成物を、示されたおおよそのモル比で指定されたトリテルペンを混合することによって作製した。

各組成物について、３つの異なるそれぞれの溶液を作製し、よって各溶液中のトリテルペンの総濃度は、約９μＭ、１８μＭ、または３６μＭであった。

（実施例１１）
抗ウイルス組成物の調製
抗ウイルス組成物は、その個々のトリテルペン成分を混合して混合物を形成することによって調製することができる。許容される抗ウイルス活性を提供した上記で調製したトリテルペン混合物を、抗ウイルス組成物に製剤化した。

オレアノール酸およびウルソール酸を含む抗ウイルス組成物
既知量のオレアノール酸およびウルソール酸を、本明細書で定義される構成成分の所定のモル比に従って混合した。構成成分は、固体形態で混合するか、または溶媒（複数可）、例えば、メタノール、エタノール、クロロホルム、アセトン、プロパノール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、水、もしくはそれらの混合物で混合した。得られた混合物は、本明細書に記載される相対モル比で構成成分を含んでいた。
薬学的に許容される抗ウイルス組成物の場合、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を、薬理学的に活性な薬剤と混合した。抗ウイルス組成物を、哺乳動物への投与のために製剤化する。

オレアノール酸およびベツリン酸を含む抗ウイルス組成物
既知量のオレアノール酸およびベツリン酸を、本明細書で定義される構成成分の所定のモル比に従って混合した。構成成分は、固体形態で混合するか、または溶媒（複数可）、例えば、メタノール、エタノール、クロロホルム、アセトン、プロパノール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、水、もしくはそれらの混合物で混合した。得られた混合物は、本明細書に記載される相対モル比で構成成分を含んでいた。
薬学的に許容される抗ウイルス組成物の場合、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を、薬理学的に活性な薬剤と混合した。抗ウイルス組成物を、哺乳動物への投与のために製剤化する。

オレアノール酸、ウルソール酸、およびベツリン酸を含む抗ウイルス組成物
既知量のオレアノール酸、ウルソール酸、およびベツリン酸を、本明細書で定義される構成成分の所定のモル比に従って混合した。構成成分は、固体形態で混合するか、または溶媒（複数可）、例えば、メタノール、エタノール、クロロホルム、アセトン、プロパノール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、水、もしくはそれらの混合物で混合した。得られた混合物は、本明細書に記載される相対モル比で構成成分を含んでいた。
薬学的に許容される抗ウイルス組成物の場合、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を、薬理学的に活性な薬剤と混合した。抗ウイルス組成物を、哺乳動物への投与のために製剤化する。

オレアドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、およびベツリン酸を含む抗ウイルス組成物
既知量のオレアンドリンオレアノール酸、ウルソール酸、およびベツリン酸を、本明細書で定義される構成成分の所定のモル比に従って混合した。構成成分は、固体形態で混合するか、または溶媒（複数可）、例えば、メタノール、エタノール、クロロホルム、アセトン、プロパノール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、水、もしくはそれらの混合物で混合した。得られた混合物は、本明細書に記載される相対モル比で構成成分を含んでいた。
薬学的に許容される抗ウイルス組成物の場合、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を、薬理学的に活性な薬剤と混合した。抗ウイルス組成物を、哺乳動物への投与のために製剤化する。

（実施例１２）
対象におけるフィロウイルス感染の治療
例示的なフィロウイルス感染には、エボラウイルスおよびマールブルグウイルスが含まれる。
方法Ａ．抗ウイルス組成物療法
フィロウイルス感染を呈している対象に、抗ウイルス組成物を処方し、治療関連用量を、処方された投与計画に従って一定期間対象に投与する。対象の治療応答のレベルを、定期的に判定する。治療応答のレベルは、血液または血漿中の対象のフィロウイルス力価を判定することによって測定することができる。ある用量で治療応答のレベルが低すぎる場合、対象における治療応答の所望のレベルが達成されるまで、所定の用量漸増スケジュールに従って用量が漸増される。抗ウイルス組成物による対象の治療は、必要に応じて継続され、患者が所望の臨床的エンドポイントに達するまで、用量または投与計画が必要に応じて調節され得る。
方法Ｂ．併用療法：別の薬剤との抗ウイルス組成物
フィロウイルス感染またはその症状の治療のために対象が１つ以上の他の治療薬を処方および投与されることを除いて、上記の方法Ａに従う。次いで、抗ウイルス組成物の前、後、またはそれとともに１つ以上の他の治療薬を投与することができる。１つ以上の他の治療薬の用量漸増（または漸減）もまた行うことができる。

（実施例１３）
対象におけるフラビウイルス感染の治療
例示的なフラビウイルス感染には、黄熱病、デング熱、日本脳炎、西ナイルウイルス、ジカウイルス、ダニ媒介性脳炎、キャサヌール森林病、アルフルマ病、チクングニアウイルス、オムスク出血熱、ポワッサンウイルス感染が含まれる。
方法Ａ．抗ウイルス組成物療法
フラビウイルス感染を呈している対象に、抗ウイルス組成物を処方し、治療関連用量を、処方された投与計画に従って一定期間対象に投与する。対象の治療応答のレベルを、定期的に判定する。治療応答のレベルは、血液または血漿中の対象のフラビウイルス力価を判定することによって測定することができる。ある用量で治療応答のレベルが低すぎる場合、対象における治療応答の所望のレベルが達成されるまで、所定の用量漸増スケジュールに従って用量が漸増される。抗ウイルス組成物による対象の治療は、必要に応じて継続され、患者が所望の臨床的エンドポイントに達するまで、用量または投与計画が必要に応じて調節され得る。
方法Ｂ．併用療法：別の薬剤との抗ウイルス組成物
フラビウイルス感染またはその症状の治療のために対象が１つ以上の他の治療薬を処方および投与されることを除いて、上記の方法Ａに従う。次いで、抗ウイルス組成物の前、後、またはそれとともに１つ以上の他の治療薬を投与することができる。１つ以上の他の治療薬の用量漸増（または漸減）もまた行うことができる。

（実施例１４）
ジカウイルスおよびデングウイルスに対する抗ウイルス活性の評価
ＣＰＥベースの抗ウイルスアッセイを、ある範囲の濃度で、試験組成物の存在下または不在下で標的細胞を感染させることによって行った。標的細胞の感染は、細胞変性効果および細胞死をもたらす。この種類のアッセイでは、試験組成物の存在下でのＣＰＥの低減、および対応する細胞生存率の増加を、抗ウイルス活性の指標として使用する。ＣＰＥベースのアッセイについて、細胞生存率をニュートラルレッドの読み取り値で判定した。生細胞を、ニュートラルレッドをそれらのリソソームに組み込む。ニュートラルレッドの取り込みは、細胞質よりもそれらのリソソーム内のより低いｐＨを維持する生細胞の能力に依存しており、この活性プロセスは、ＡＴＰを必要とする。リソソーム内に入ると、ニュートラルレッド色素は荷電し、細胞内に保持される。ニュートラルレッド（０．０３３％）とともに３時間インキュベートした後、細胞外色素を除去し、細胞をＰＢＳで洗浄し、細胞内ニュートラルレッドを５０％エタノール＋１％酢酸の溶液で可溶化した。４９０ｎｍでの各ウェルの吸光度（光学密度）を読み取ることによって、溶液中のニュートラルレッドの量を定量化した。

付着細胞株を使用して、ウイルスのパネルに対する組成物の抗ウイルス活性を評価した。細部へのウイルスの添加前に、組成物を、標的細胞とともに３０分間事前にインキュベートした。組成物は、感染インキュベーション期間中、細胞培養培地に存在した。各感染アッセイについて、ウイルスの不在下での組成物の細胞毒性効果を判定するために、同じ濃度の組成物（複製）を使用して、生存率アッセイを並行して設定した。

試験組成物の抗ウイルス活性を、試験条件下での細胞の感染レベル（免疫染色ベースのアッセイの場合）または生存率（ＣＰＥベースのアッセイの場合）を非感染細胞の感染レベルまたは生存率と比較することによって判定した。細胞毒性効果を、阻害剤の存在下での生存率を模擬処理細胞の生存率と比較することによって、非感染細胞で評価した。細胞毒性を、ＸＴＴ生存率アッセイによって判定し、これは、対応する感染アッセイの読み出しと同じ時点で実施した。
試験組成物を、１００％メタノールに溶解した。試験される最高濃度として５０μＭで開始して、８倍希釈を行うことによって、８つの濃度の組成物を生成した（複製で）。組成物の最高試験濃度（５０μＭ）は、培養培地中のメタノールの最終濃度０．２５％（ｖ／ｖ％）をもたらした。メタノールビヒクルの一連の８倍希釈は、各アッセイのプレートに含まれ、濃度は各組成物の試験条件におけるメタノールの最終濃度を反映している。可能な場合、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して、各アッセイについて組成物のＥＣ５０およびＣＣ５０を判定した。

抗ウイルス活性は、ウイルス誘発性細胞変性効果（ＣＰＥ）に対する保護の程度によって評価した。異なる濃度の対照または組成物の存在下で、細胞をウイルスで攻撃した。ＣＰＥに対する保護の程度を、感染後６日（ＺＩＫＶ、ジカウイルス）または７日（ＤＥＮＶ、デングウイルス）後に、異なる試験条件で細胞生存率を定量化し、値を未処理の細胞およびビヒクルのみ（感染培地）で処理した細胞の値と比較することによって監視した。

中和アッセイの品質管理を全てのプレートで行い、ｉ）バックグラウンドに対するシグナル（Ｓ／Ｂ）値、ｉｉ）既知の阻害剤による阻害、およびｉｉｉ）全てのデータポイントの変動係数（ＣＶ）により測定されるアッセイの変動を判定した。感染アッセイの全体的な変動は、３．４％～９．５％の範囲であり、生存率アッセイの全体的な変動は、１．４％～３．２％の範囲であり、全てのＣＶ値の平均として計算した。感染アッセイのシグナル対バックグラウンド（Ｓ／Ｂ）は、２．９～１１．０の範囲であったが、一方で、生存率アッセイのシグナル対バックグラウンド（Ｓ／Ｂ）は、６．５～２９．９の範囲であった。

ニュートラルレッド読み取りによるＤＥＮＶ２誘発細胞変性効果（ＣＰＥ）の保護：ＤＥＮＶ２抗ウイルスアッセイでは、０８－１０３８１ Ｍｏｎｔｓｅｒｒａｔ株を使用した。ウイルスストックを、Ｃ６／３６昆虫細胞で生成した。Ｖｅｒｏ細胞（Ｃｅｒｃｏｐｉｔｈｅｃｕｓ ａｅｔｈｉｏｐｓに由来する上皮腎細胞）を、５％ＦＢＳを含むＭＥＭ（ＭＥＭ５）で維持した。感染および生存率の両方のアッセイのために、細胞を、９６ウェル透明平底プレートに１ウェルあたり１０，０００個の細胞で播種し、２４時間３７℃で、ＭＥＭ５で維持した。感染の日に、１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含むＭＥＭを使用して、試料をＵ底プレートに８倍に希釈した。試験物質の希釈液を、１．２５倍の最終濃度で調製し、４０μｌを標的細胞とともに３７℃で３０分間インキュベートした。試験材料の事前インキュベーション後、１％ＢＳＡを含むＭＥＭで調製した１０μｌのウイルス希釈液を各ウェルに添加し（１ウェルあたり５０μｌの最終体積）、プレートを、５％ＣＯ２の加湿インキュベーターで、３７℃で３時間インキュベートした。アッセイで使用されるウイルスの体積を、リバビリンおよびＤＥＮＶ２の既知の阻害剤である化合物Ａ３によって阻害される線形範囲のシグナルを生成するように以前に決定した。感染インキュベーションの後、細胞を、ＰＢＳ、次いで２％ＦＢＳを含むＭＥＭ（ＭＥＭ２）で洗浄し、未結合ウイルスを除去した。続いて、ＭＥＭ２で１倍の濃度で調製した阻害剤希釈液を含む５０μｌの培地を、各ウェルに添加した。プレートを、インキュベーター（５％ＣＯ２）で、３７℃で７日間インキュベートした。ウイルスを含まない対照（「模擬感染」）、培地のみでインキュベートした感染細胞、ビヒクルのみ（メタノール）でインキュベートした感染細胞、および細胞を含まないウェル（バックグラウンドを判定するため）を、アッセイプレートに含めた。５０μＭリバビリンおよび０．５μＭ化合物Ａ３を含む対照ウェルもまた、アッセイプレートに含めた。感染の７日後、細胞を、ニュートラルレッドで染色し、細胞生存率を監視した。試験材料を、感染培地で連続８倍希釈を使用して複製で評価した。対照は、ウイルスなしでインキュベートした細胞（「模擬感染」）、培地のみでインキュベートした感染細胞、またはリバビリン（０．５μＭ）もしくはＡ３（０．５μＭ）の存在下での感染細胞を含んだ。メタノールビヒクルのみを使用した完全な複製阻害曲線は、同じアッセイプレートに含まれた。

ニュートラルレッド読み取りによるＺＩＫＶ誘導細胞変性効果（ＣＰＥ）の保護：ＺＩＫＶ抗ウイルスアッセイでは、ＰＬＣａｌ＿ＺＶ株を使用した。Ｖｅｒｏ細胞（Ｃｅｒｃｏｐｉｔｈｅｃｕｓ ａｅｔｈｉｏｐｓに由来する上皮腎細胞）を、５％ＦＢＳを含むＭＥＭ（ＭＥＭ５）で維持した。感染および生存率の両方のアッセイのために、細胞を、９６ウェル透明平底プレートに１ウェルあたり１０，０００個の細胞で播種し、２４時間３７℃で、ＭＥＭ５で維持した。感染の日に、１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含むＭＥＭを使用して、試料をＵ底プレートに８倍に希釈した。試験物質の希釈液を、１．２５倍の最終濃度で調製し、４０μｌを標的細胞とともに３７℃で３０分間インキュベートした。試験材料の事前インキュベーション後、１％ＢＳＡを含むＭＥＭで調製した１０μｌのウイルス希釈液を各ウェルに添加し（１ウェルあたり５０μｌの最終体積）、プレートを、５％ＣＯ２の加湿インキュベーターで、３７℃で３時間インキュベートした。感染インキュベーションの後、細胞を、ＰＢＳ、次いで２％ＦＢＳを含むＭＥＭ（ＭＥＭ２）で洗浄し、未結合ウイルスを除去した。続いて、ＭＥＭ２で１倍の濃度で調製した阻害剤希釈液を含む５０μｌの培地を、各ウェルに添加した。プレートを、インキュベーター（５％ＣＯ２）で、３７℃で６日間インキュベートした。ウイルスを含まない対照（「模擬感染」）、培地のみでインキュベートした感染細胞、ビヒクルのみ（メタノール）でインキュベートした感染細胞、および細胞を含まないウェル（バックグラウンドを判定するため）を、アッセイプレートに含めた。感染の６日後、細胞を、ニュートラルレッドで染色し、細胞生存率を監視した。試験材料を、感染培地で連続８倍希釈を使用して複製で評価した。対照は、ウイルスなしでインキュベートした細胞（「模擬感染」）、培地のみでインキュベートした感染細胞、またはＡ３（０．５μＭ）の存在下での感染細胞を含んだ。メタノールビヒクルのみを使用した完全な複製阻害曲線は、同じアッセイプレートに含まれた。

ＣＰＥベースの生存率データの分析：ニュートラルレッドアッセイでは、４９０ｎｍでの吸光度を監視することによって、細胞生存率を判定した。細胞を含まないウェルで得られた平均シグナルを、全ての試料から差し引いた。次いで、全てのデータポイントを、同じアッセイプレート上の模擬（非感染）細胞の８つのウェルで観察された平均シグナルの割合として計算した。培地のみで処理された感染細胞は、非感染細胞で観察されたシグナルの平均４．２％（ＨＲＶの場合）、２６．９％（ＤＥＮＶの場合）、および５．１％（ＺＩＫＶの場合）の平均にシグナルを低減した。このアッセイのシグナル対バックグラウンド（Ｓ／Ｂ）は、２．９（ＤＥＮＶの場合）、および７．２（ＺＩＫＶの場合）であり、ビヒクルのみで処理した感染細胞の生存率と比較した「模擬感染」細胞の生存率として判定した。

化合物誘発細胞毒性を評価するための生存率アッセイ（ＸＴＴ）：模擬感染細胞を、対応する感染アッセイで使用したものと同じ実験設定および阻害剤濃度を使用して、阻害剤希釈液（または培地のみ）とともにインキュベートした。インキュベーション温度およびインキュベーション期間の長さは、対応する感染アッセイの条件を反映した。細胞生存率を、ＸＴＴ法で評価した。ＸＴＴアッセイは、ミトコンドリアの活性を測定し、橙色のホルマザン色素を形成する黄色のテトラゾリウム塩（ＸＴＴ）の切断に基づく。反応は、活性なミトコンドリアを有する生細胞でのみ生じる。ホルマザン色素は、走査型マルチウェル分光光度計を使用して直接定量化される。細胞を含まないウェルから得られたバックグラウンドレベルを、全てのデータポイントから差し引いた。メタノールビヒクルのみの対照（各オレアンドリン試験ウェルの最終メタノールパーセントを反映する７つの濃度で）を、生存率アッセイプレートに含めた。生存率の程度は、４９０ｎｍでの吸光度を測定することによって監視した。

細胞毒性データの分析：ＸＴＴアッセイでは、４９０ｎｍでの吸光度を監視することによって、細胞生存率を判定した。細胞を含まないウェルで得られた平均シグナルを、全ての試料から差し引いた。次いで、全てのデータポイントを、同じアッセイプレート上の模擬（非感染）細胞の８つのウェルで観察された平均シグナルの割合として計算した。このアッセイのシグナル対バックグラウンド（Ｓ／Ｂ）は、２９．９（ＩＶＡの場合）、８．７（ＨＲＶの場合）、６．５（ＤＥＮＶの場合）、および６．７（ＺＩＫＶの場合）であり、細胞を含まないウェルで観察されたシグナルと比較した「模擬感染」細胞の生存率として判定した。

（実施例１５）
フィロウイルス（エボラウイルスおよびマールブルグウイルス）に対する抗ウイルス活性の評価
方法Ａ．
Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に、オレアンドリン、ジゴキシン、またはオレアンドリン含有植物抽出物であるＰＢＩ－０５２０４の存在下でＥＢＯＶ／Ｋｉｋ（Ａ、ＭＯＩ＝１）またはＭＡＲＶ／Ｃｉ６７（Ｂ、ＭＯＩ＝１）を感染させた。１時間後、接種物および化合物を除去し、新鮮な培地を細胞に添加した。４８時間後、細胞を固定して免疫染色し、ＥＢＯＶまたはＭＡＲＶに感染した細胞を検出した。感染した細胞を、Ｏｐｅｒｅｔｔａを使用して数えた。Ｃ）Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞を、上記の化合物で処理した。ＡＴＰレベルは、細胞生存率の測定としてＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏによって測定された。
方法Ｂ．
Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に、ＥＢＯＶ（Ａ、Ｂ）またはＭＡＲＶ（Ｃ、Ｄ）を感染させた。感染後２時間（Ａ、Ｃ）または感染後２４時間（Ｂ、Ｄ）で、オレアンドリンまたはＰＢＩ－０５２０４を１時間細胞に添加し、次いで廃棄し、細胞を培養培地に戻した。感染後４８時間で、感染した細胞を図１のように分析した。
方法Ｃ．
Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に、オレアンドリンまたはＰＢＩ－０５２０４の存在下でＥＢＯＶまたはＭＡＲＶを感染させ、４８時間インキュベートした。感染した細胞培養物の上清を、新鮮なＶｅｒｏ Ｅ６細胞に継代し、１時間インキュベートし、次いで廃棄した（Ａに示されるように）。継代した上清を含む細胞を、４８時間インキュベートした。ＥＢＯＶ（Ｂ）またはＭＡＲＶ（Ｃ）に感染した細胞を、以前に記載されるように検出した。対照感染率は、ＥＢＯＶについては６６％、ＭＡＲＶについては６７％であった。

（実施例１６）
トガウイルス科ウイルスに対する抗ウイルス活性の評価
（アルファウイルス：ＶＥＥＶおよびＷＥＥＶ）
Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に、示された化合物の存在下または非存在下で１８時間、ベネズエラウマ脳炎ウイルス（Ａ、ＭＯＩ＝０．０１）または西部ウマ脳炎ウイルス（Ｂ、ＭＯＩ＝０．１）を感染させた。感染した細胞を、本明細書に記載されるように検出し、Ｏｐｅｒｅｔｔａで数えた。

（実施例１７）
対象におけるパラミクソウイルス感染の治療
例示的なパラミクソウイルス科ウイルス感染には、ヘニパウイルス属感染、ニパウイルス感染、またはヘンドラウイルス感染が含まれる。
方法Ａ．抗ウイルス組成物療法
パラミクソウイルス科感染を呈している対象に、抗ウイルス組成物を処方し、治療関連用量を、処方された投与計画に従って一定期間対象に投与する。対象の治療応答のレベルを、定期的に判定する。治療応答のレベルは、血液または血漿中の対象のウイルス力価を判定することによって測定することができる。ある用量で治療応答のレベルが低すぎる場合、対象における治療応答の所望のレベルが達成されるまで、所定の用量漸増スケジュールに従って用量が漸増される。抗ウイルス組成物による対象の治療は、必要に応じて継続され、患者が所望の臨床的エンドポイントに達するまで、用量または投与計画が必要に応じて調節され得る。
方法Ｂ．併用療法：別の薬剤との抗ウイルス組成物
パラミクソウイルス科感染またはその症状の治療のために対象が１つ以上の他の治療薬を処方および投与されることを除いて、上記の方法Ａに従う。次いで、抗ウイルス組成物の前、後、またはそれとともに１つ以上の他の治療薬を投与することができる。１つ以上の他の治療薬の用量漸増（または漸減）もまた行うことができる。

実施例１８
初代ｈｕＰＢＭＣの細胞株および単離
ウイルス生成ＨＴＬＶ－１－形質転換（ＨＴＬＶ－１＋）ＳＬＢ１リンパ腫Ｔ－細胞株（Ａｒｎｏｌｄら，２００８；Ｐ．Ｇｒｅｅｎ，Ｔｈｅ Ｏｈｉｏ Ｓｔａｔｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ－Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｎｔｅｒに好意で提供された）を、１０％ＣＯ₂下、３７℃にて加湿インキュベーター中で、１０％加熱不活化ウシ胎仔血清（ＦＢＳ；Ｂｉｏｗｅｓｔ）、１００Ｕ／ｍｌペニシリン、１００μｇ／ｍｌストレプトマイシン硫酸塩、および２０μｇ／ｍｌゲンタマイシン硫酸塩（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を補充したＩｓｃｏｖｅの改質Ｄｕｌｂｅｃｃｏ培地（ＩＭＤＭ；ＡＴＣＣ Ｎｏ．３０－２００５）において培養した。

初代ヒト末梢血単核細胞（ｈｕＰＢＭＣ）は、ＳＭＵ試験審査委員会の承認を受けたプロトコールの下で、またＨｅｌｓｉｎｋｉ宣言の原理に沿って、ＳＭＵ Ｍｅｍｏｒｉａｌ Ｈｅａｌｔｈ Ｃｅｎｔｅｒに鑑定者なしで提供された全血試料から単離した。簡潔には、２ｍｌの全血を、ポリプロピレンコニカルチューブ（Ｃｏｒｎｉｎｇ）中で、等しい体積の減菌リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、ｐＨ７．４と混合し、次いで試料を、３ｍｌのリンパ球分離培地（ＭＰ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌｓ）の上に静かに積層した。試料を、室温にて、スイングバケットローター中で、４００×ｇで３０分遠心分離した。バフィーコートのｈｕＰＢＭＣを続いて吸引し、ＲＰＭＩ－１６４０培地（ＡＴＣＣ Ｎｏ．３０－２００１）中で２×洗浄し、２６０×ｇで７分にわたる遠心分離によりペレット化した。細胞は、２０％ＦＢＳ、１００Ｕ／ｍｌペニシリン、１００μｇ／ｍｌストレプトマイシン硫酸塩、２０μｇ／ｍｌゲンタマイシン硫酸塩、および５０Ｕ／ｍｌ組み換えヒトインターロイキン－２（ｈｕ－ＩＬ－２；Ｒｏｃｈｅ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ）を補充したＲＰＭＩ－１６４０培地中で再懸濁し、１０ｎｇ／ｍｌフィトヘマグルチニン（ＰＨＡ；Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）で２４時間刺激し、１０％ＣＯ₂下、３７℃にて加湿インキュベーター中で成長させた。翌日、細胞を２６０×ｇで７分にわたる遠心分離によりペレット化し、ＲＰＭＩ－１６４０培地で２×洗浄して、ＰＨＡを除去し、次いで再懸濁し、抗生物質および５０Ｕ／ｍｌ ｈｕ－ＩＬ－２を補充した完全培地中で培養した。

実施例１９
ＧＦＰ発現ＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１／ｐＬｅｎｔｉ－ＧＦＰ Ｔ－細胞クローンの生成
ＧＦＰ発現ＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１ Ｔ－細胞クローンを生成するために、２×１０⁶個のＳＬＢ１細胞を６０ｍｍ²組織培養皿（Ｃｏｒｎｉｎｇ）、１０％加熱不活化ＦＢＳおよび抗生物質を補充したＩＭＤＭ中に蒔き、次いで、ブラストサイジン耐性遺伝子も持つｐＬｅｎｔｉ－６．２／Ｖ５－ＤＥＳＴ－緑色蛍光タンパク質発現ベクターを含むレンチウイルス粒子を形質導入した。６時間後、形質導入された細胞を、室温にて、２６０×ｇで７分にわたる遠心分離によりペレット化した、無血清ＩＭＤＭで２×洗浄し、５μｇ／ｍｌブラストサイジン（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を補充した完全培地中で再懸濁し、９６ウェルマイクロタイタープレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ）に等分した。培養物を、３７℃および１０％ＣＯ₂の加湿インキュベーター中で、ブラストサイジンにより２週間選択して維持した。ＧＦＰ発現リンパ芽球を、蛍光顕微鏡検査によりスクリーニングし、次いで、９６ウェルマイクロタイタープレート中での限定希釈により蒔いて、均質なＧＦＰ発現細胞クローンを得た。生じたＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１／ｐＬｅｎｔｉ－ＧＦＰ Ｔ－リンパ球クローンを膨張させ、繰り返し継代し；ＧＦＰの発現を、硫酸ドデシルナトリウム－ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）、およびウサギポリクローナル抗ＧＦＰ（ＦＬ）抗体（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）を使用した免疫ブロッティングにより確認した。

実施例２０
抗ＨＴＬＶ－１ ｐ１９^Gag ＥＬＩＳＡによるウイルス生成および粒子の感染性の定量
ＨＴＬＶ－１プロウイルス複製、および新たに合成された細胞外ウイルス粒子放出の際に、オレアンドリンまたはＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒの抽出物の効果を判定するために、ＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１リンパ腫Ｔ－細胞株を、９６ウェルマイクロタイタープレート中の、抗生物質を補充した３００μｌの完全培地に、ウェルあたり２×１０⁴個の細胞を蒔き、１０％ＣＯ₂下で３７℃にてインキュベートした。精製したオレアンドリン化合物およびＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒの抽出物（Ｐｈｏｅｎｉｘ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；Ｓｉｎｇｈら、２０１３を参照されたい）を、２ｍｇ／ｍｌのストック濃度でビヒクル溶液（ＭｉｌｌｉＱ蒸留／脱イオンＨ₂Ｏ中２０％ ｖ／ｖジメチルスルホキシド、ＤＭＳＯ）中で再懸濁し、次いで、ルアーロック０．２μｍ注射器フィルター（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を使用して滅菌した。ＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１細胞を、１０、５０、および１００μｇ／ｍｌの濃度でのオレアンドリンもしくはＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物、または上昇量（１．５、７．５、および１５μｌ）のビヒクル対照で７２時間処理した。９６ウェルマイクロタイタープレートを、次いで、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ Ａ－２－ＤＷＰスイングプレートローターを使用して、室温にて２６０×ｇで７分遠心分離して、細胞をペレット化し、培養物の上清に放出された細胞外ｐ１９^Gag含有ＨＴＬＶ－１粒子のレベルは、比色抗ｐ１９^Gag 酵素結合免疫吸着測定アッセイ（ＥＬＩＳＡ；Ｚｅｐｔｏｍｅｔｒｉｘ）を行うことにより、ｐ１９^Gagタンパク質標準と比較して定量した。試料は、Ｂｅｒｔｈｏｌｄ Ｔｒｉｓｔａｒ ＬＢ ９４１マルチモードマイクロプレートリーダーで、吸光度モード４５０ｎｍにて、３つの複製を用いて分析した。

オレアンドリンで処理した細胞から収集された、新たに合成された細胞外ＨＴＬＶ－１粒子の感染性を評価するために、２×１０⁴個のＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１ Ｔ－リンパ芽球は、抗生物質を補充した３００μｌの完全培地中に蒔き、培養物を、上昇濃度（１０、５０、および１００μｇ／ｍｌ）のオレアンドリンまたはＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物、またはビヒクル対照（１．５、７．５、および１５μｌ）で７２時間処理した。次いで、５０μｌのウイルス含有上清を使用して、ｈｕＰＢＭＣを直接感染させ、これを９６ウェルマイクロタイタープレートのウェルあたり２×１０⁴個の細胞の密度で、抗生物質およびｈｕ－ＩＬ－２を補充した完全培地中に蒔いた。オレアンドリン化合物、Ｎ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物、またはビヒクル対照は、新たに生成された粒子により考えられる再感染事象をコントロールするために、ｈｕＰＢＭＣ培地中で維持した。７２時間後、感染したｈｕＰＢＭＣにより培養物の上清に放出された、細胞外ｐ１９^Gag含有ＨＴＬＶ－１ビリオンの相対的レベルは、抗ＨＴＬＶ－１ ｐ１９^Gag ＥＬＩＳＡを介して定量した。

実施例２１
細胞アポトーシスの測定
処理した細胞培養物におけるオレアンドリン化合物、Ｎ．ｏｌｅａｎｄｅｒの抽出物、またはビヒクル対照の相対的な細胞毒性を評価するために、２×１０⁴個のＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１リンパ腫Ｔ－細胞、または活性化した／培養したｈｕＰＢＭＣを、抗生物質を補充した３００μｌの完全培地に蒔き、１０％ＣＯ₂下、３７℃にて加湿インキュベーター中で維持した。培養物を上昇濃度（１０、５０、および１００μｇ／ｍｌ）のオレアンドリンもしくはＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物、またはビヒクル対照（１．５、７．５、１５ｍｌ）で処理し、７２時間インキュベートした。シクロホスファミド（５０μＭ；Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）で処理した細胞は、アポトーシスの陽性対照として含まれた。細胞を、次いで吸引し、ポリ－Ｌ－リジンおよびコンカナバリンＡ（１ｍｇ／ｍｌ；Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）の減菌０．０１％溶液で前処理したＰｅｒｍａｎｏｘ ８－チャンバ組織培養スライド（Ｎａｌｇｅ）に蒔いた。試料は、続いて、フルオレセインイソチオシアネートおよびヨウ化プロピジウム（ＰＩ；ＢＤ－Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）とコンジュゲートしたＡｎｎｅｘｉｎ Ｖ（Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＩＴＣ）を用いる、顕微鏡検査のアポトーシス検出キットを使用して染色し、視界あたりのアポトーシスの相対的割合（すなわち、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＩＴＣ および／またはＰＩ－陽性）細胞を、２０×対物レンズを使用して共焦点蛍光顕微鏡検査により３回定量した。視界あたりの細胞の総数は、ＤＩＣ位相差フィルターを使用した顕微鏡検査により定量した。

実施例２２
共培養アッセイにおけるＨＴＬＶ－１伝播およびウイルス学的シナプス形成
ＨＴＬＶ－１の伝播は、典型的には、ウイルス学的シナプスを経た、感染細胞と未感染の標的細胞との間の直接接触を介して発生する（Ｉｇａｋｕｒａら、２００３；Ｐａｉｓ－Ｃｏｒｒｅｉａら、２０１０；Ｇｒｏｓｓら、２０１６；Ｏｍｓｌａｎｄら、２０１８；Ｍａｊｏｒｏｖｉｔｓら、２００８）ので、本発明者らは、オレアンドリン、Ｎ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物、またはビヒクル対照が、ウイルス学的シナプスの形成、および／またはインビトロでの細胞内相互反応を経由した感染性のＨＴＬＶ－１粒子の伝播に影響し得るかどうかを試験した。これらの実験では、２×１０⁴個のウイルス生成ＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１ Ｔ－細胞を、９６ウェルマイクロタイタープレートに蒔き、３００μｌの完全培地において、マイトマイシンＣ（１００μｇ／ｍｌ）で、１０％ＣＯ₂下、３７℃にて２時間処理した（Ｂｒｙｊａら、２００６）。培養基を、次いで除去し、細胞を無血清ＩＭＤＭで２×洗浄し、細胞を、上昇量（１０、５０、および１００μｇ／ｍｌ）のオレアンドリン、またはＮ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物、またはビヒクル対照（１．５、７．５、および１５μｌ）で１５分または３時間処理した。あるいは、２×１０⁴個のＧＦＰ発現ＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１／ｐＬｅｎｔｉ－ＧＦＰ Ｔ－細胞を、８－チャンバ組織培養スライドにおいて、３００μｌの完全培地中に蒔き、マイトマイシンＣで処理し、無血清ＩＭＤＭで２×洗浄し、次いで、共焦点顕微鏡検査の実験で説明されているように、オレアンドリン、Ｎ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物、またはビヒクル対照で処理した。本発明者らは、次に培地を吸引し、ＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１細胞を無血清培地で２×洗浄し、２×１０⁴個のｈｕＰＢＭＣを各ウェルの、２０％ＦＢＳ、抗生物質および５０Ｕ／ｍｌ ｈｕ－ＩＬ－２を補充した３００μｌのＲＰＭＩ－１６４０培地中に添加し、次いで細胞を、１０％ＣＯ₂下、３７℃にて加湿インキュベーター中で、さらに７２時間共培養した（細胞を６時間共培養して、ＳＬＢ１／ｐＬｅｎｔｉ－ＧＦＰリンパ芽球を使用した共焦点顕微鏡検査により、ウイルス学的シナプス形成およびウイルスの伝播を視覚化した）。陰性対照として、ｈｕＰＢＭＣを、ウイルス生成細胞なしでそれのみ培養した。オレアンドリン、Ｎ．ｏｌｅａｎｄｅｒ抽出物、およびビヒクルを、共培地中で維持した。共培養物の上清に放出された細胞外ｐ１９^Gag含有ＨＴＬＶ－１粒子の相対的レベルは、細胞内ウイルス伝播の結果として、抗ＨＴＬＶ－１ ｐ１９^Gag ＥＬＩＳＡを行うことにより定量した。ＧＦＰ－陽性ＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ／ｐＬｅｎｔｉ－ＧＦＰ細胞と、ｈｕＰＢＭＣとの間に形成されたウイルス学的シナプスは、固定試料を、抗ＨＴＬＶ－１ ｇｐ２１^Env一次抗体およびローダミン赤色コンジュゲート二次抗体で染色することにより、免疫蛍光共顕微鏡検査を使用して視覚化した。ジアミジノ－２－フェニル－インドール二塩酸塩（ＤＡＰＩ；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ）核染色が未感染（すなわち、ＨＴＬＶ－１－陰性）細胞の比較のため、およびそれを視覚化するために含まれた。共培養アッセイにおけるＨＴＬＶ－１のｈｕＰＢＭＣへの細胞内伝播は、２０×対物レンズを使用して、２０視野でＨＴＬＶ－１ ｇｐ２１^Env－陽性（およびＧＦＰ－陰性）ｈｕＰＢＭＣの相対的割合をカウントすることにより定量した。

実施例２３
顕微鏡検査
細胞アポトーシスおよび細胞毒性を定量化するために、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＩＴＣ／ＰＩ－染色試料は、Ｐｌａｎ－Ａｐｏｃｈｒｏｍａｔ ２０×／０．８対物レンズおよびＺｅｉｓｓ ＺＥＮシステムソフトウェア（Ｃａｒｌ Ｚｅｉｓｓ Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ）を使用して、Ａｉｒｙｓｃａｎ検出器およびステージＣＯ₂インキュベーターを備えたＺｅｉｓｓ ＬＳＭ８００機器での共焦点蛍光顕微鏡検査により視覚化した。マイトマイシンＣで処理したＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１／ｐＬｅｎｔｉ－ＧＦＰリンパ芽球と、培養したｈｕＰＢＭＣとの間のウイルス学的シナプスの形成およびウイルス伝播（すなわち、抗ＨＴＬＶ－１ ｇｐ２１^Env－陽性ｈｕＰＢＭＣの相対的割合を定量化することにより判定される）を、Ｐｌａｎ－Ａｐｏｃｈｒｏｍａｔ ２０ｘ／０．８ 対物レンズを使用した免疫蛍光－共焦点顕微鏡検査により視覚化した。ＤＡＰＩの相対的蛍光強度、抗ＨＴＬＶ－１ ｇｐ２１^Env－特異性（ローダミン赤色 － 陽性）およびＧＦＰシグナルは、Ｚｅｎ ２．５Ｄ分析ツール（Ｃａｒｌ Ｚｅｉｓｓ Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ）を使用してグラフとして定量した。ＧＦＰ発現ＨＴＬＶ－１＋ＳＬＢ１／ｐＬｅｎｔｉ－ＧＦＰ Ｔ－細胞クローンを、Ｎｉｋｏｎ Ｅｃｌｉｐｓｅ ＴＥ２０００－Ｕ倒立顕微鏡と、６３３ｎｍおよび５４３ｎｍ Ｈｅ／Ｎｅ、ならびに４８８ｎｍ Ａｒレーザーを備えたＤ－Ｅｃｌｉｐｓｅ共焦点イメージングシステムで、Ｐｌａｎ Ｆｌｕｏｒ １０×／０．３０対物レンズおよびＤＩＣ位相差フィルター（Ｎｉｋｏｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を使用して、共焦点蛍光顕微鏡検査によりスクリーニングした。

実施例２４
統計解析
実験データセットの統計学的有意性は、不対両側Ｓｔｕｄｅｎｔのｔ検定（アルファ＝０．０５）を使用して判定しＳｈａｐｉｒｏ－Ｗｉｌｋ正常性試験およびＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍ ７．０３ソフトウェアを使用してＰ－値を計算した。Ｐ－値を：０．１２３４（ｎｓ）、０．０３３２（^*）、０．００２１（^**）、０．０００２（^***）、＜０．０００１（^****）と定義した。特に注記がなければ、エラーバーは、少なくとも３つの独立した実験からのＳＥＭを表す。

実施例２５
対象におけるデルタレトロウイルス感染の治療
例示的なデルタレトロウイルス感染は、ＨＴＬＶ－１を含む。
方法Ａ．抗ウイルス組成物療法
ＨＴＬＶ－１感染を呈している対象に、抗ウイルス組成物を処方し、治療関連用量を、処方された投与計画に従って一定期間対象に投与する。対象の治療応答のレベルを、定期的に判定する。治療応答のレベルは、血液または血漿中の対象のＨＴＬＶ－１ウイルス力価を判定することによって測定することができる。ある用量で治療応答のレベルが低すぎる場合、対象における治療応答の所望のレベルが達成されるまで、所定の用量漸増スケジュールに従って用量が漸増される。抗ウイルス組成物による対象の治療は、必要に応じて継続され、患者が所望の臨床的エンドポイントに達するまで、用量または投与計画が必要に応じて調節され得る。
方法Ｂ．併用療法：別の薬剤との抗ウイルス組成物
ＨＴＬＶ－１感染またはその症状の治療のために対象が１つ以上の他の治療薬を処方および投与されることを除いて、上記の方法Ａに従う。次いで、抗ウイルス組成物の前、後、またはそれとともに１つ以上の他の治療薬を投与することができる。１つ以上の他の治療薬の用量漸増（または漸減）もまた行うことができる。例示的な他の治療薬は、本明細書に記載される。

実施例２６
対象におけるＣｏＶ感染の治療
例示的なＣｏＶ感染は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＣＯＶＩＤ－１９（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）、ＣｏＶ ２２９Ｅ、ＣｏＶ ＮＬ６３、ＣｏＶ ＯＣ４３、ＣｏＶ ＨＫＵ１、およびＣｏＶ ＨＫＵ２０を含む。
方法Ａ．抗ウイルス組成物療法
ＣｏＶ感染を呈している対象に、抗ウイルス組成物を処方し、治療関連用量を、処方された投与計画に従って一定期間対象に投与する。対象の治療応答のレベルを、定期的に判定する。治療応答のレベルは、血液または血漿中の対象のＣｏＶウイルス力価を判定することによって測定することができる。ある用量で治療応答のレベルが低すぎる場合、対象における治療応答の所望のレベルが達成されるまで、所定の用量漸増スケジュールに従って用量が漸増される。抗ウイルス組成物による対象の治療は、必要に応じて継続され、患者が所望の臨床的エンドポイントに達するまで、用量または投与計画が必要に応じて調節され得る。
方法Ｂ．併用療法：別の薬剤との抗ウイルス組成物
ＣｏＶ感染またはその症状の治療のために対象が１つ以上の他の治療薬を処方および投与されることを除いて、上記の方法Ａに従う。次いで、抗ウイルス組成物の前、後、またはそれとともに１つ以上の他の治療薬を投与することができる。１つ以上の他の治療薬の用量漸増（または漸減）もまた行うことができる。例示的な他の治療薬は、本明細書に記載される。

実施例２７
ＡＮＶＩＲＺＥＬ（商標）を使用した対象におけるＣＯＶＩＤ－１９感染の治療
ＣＯＶＩＤ－１９を呈している子供（小児）に、以下のようにＡＮＶＩＲＺＥＬ（商標）を投与して、ＣＯＶＩＤ－１９に関連する症状を治療した。ＡＮＶＩＲＺＥＬ（商標）を投与する前に、対象のウイルス感染は悪化した。対象に、以下の投与計画に従ってＡＮＶＩＲＺＥＬ（商標）を処方し、投与した：２～３日間にわたり１２時間毎に初期用量 － ０．２５ｍＬの再構成ＡＮＶＩＲＺＥＬ（商標）、次いで０．５ｍＬの再構成ＡＮＶＩＲＺＥＬ（商標）。対象のＣＯＶＩＤ－１９感染は、消散し、薬物関連毒性は観察されなかった。

実施例２８
ＣＯＶＩＤ－１９ウイルスに対するオレアンドリンのインビトロ評価
この研究の目的は、子孫ビリオンの感染性に対するオレアンドリンの影響を判定することであった。

メタノール中のオレアンドリンのストック溶液（１０ｍｇオレアンドリン／ｍＬ）を調製した。ストック溶液を使用して、ＤＭＳＯ（水性培地ＲＰＭＩ １６４０中０．１％または０．０１％ ｖ／ｖおよびオレアンドリン（２０ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ、１０ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ，１．０ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ、または０．１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ）含有インキュベーション培地を調製した。インキュベーション溶液は、以下の通りである。

培養物中の未感染Ｖｅｒｏ細胞（目標初期細胞数１×１０⁶個）を、バイアル中の指示されたインキュベーション培地のそれぞれにおいて、３７℃にて３０分インキュベートした。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス接種を、次いで各バイアルに追加して、目標初期ウイルス力価（約ＰＦＵ／ｍＬ １×１０⁴個）を達成した。約０．１の目標ＭＯＩ（感染多重度）。溶液を３７℃にて２時間さらにインキュベートして、Ｖｅｒｏ細胞の感染を達成した。感染Ｖｅｒｏ細胞を、次いで、対照ビヒクルで洗浄して、細胞外ウイルスおよびオレアンドリンを除去した。各インキュベーション培地の新たなアリコートを、それぞれの感染Ｖｅｒｏ細胞の各バイアルに添加した。第２のアリコートにおいてオレアンドリンを受けたものは、「感染後＋処理」として示し、第２のアリコートにおいてオレアンドリンを受けていないものは、「感染後－処理」として示した（図２３Ａ～２３Ｄ）。各バイアルでのウイルス力価は、感染後約２４時間および約４８時間で判定した。
Ｖｅｒｏ細胞に対するオレアンドリンの潜在的毒性を判定する手段として、上記のものに基づいて、未感染Ｖｅｒｏ細胞の平行培養物を調製した。
獲得したデータには、感染および未感染細胞で生成されたウイルスの量、子孫ウイルスの感染性、およびオレアンドリンの相対的安全性（非毒性）が含まれていた。

実施例２９
ＣＯＶＩＤ－１９ウイルスに対するオレアンドリンのインビトロ評価
このアッセイの目的は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対するオレアンドリンの直接的な抗ウイルス活性を判定することであった。

増殖培地を、６ウェルプレートにおけるおよそ１０⁶個のＶｅｒｏ ＣＣＬ８１細胞の集密単層から除去した。オレアンドリンを培養基中で段階希釈し、９６ウェルプレート中にシードされているＶｅｒｏ－Ｅ６細胞に添加した。増殖培地を、１．０μｇ／ｍｌ、０．５μｇ／ｍｌ、１００ｎｇ／ｍｌ、５０ｎｇ／ｍｌ、１０ｎｇ／ｍｌ、または５ｎｇ／ｍｌオレアンドリン、または適合したＤＭＳＯのみの対照を含む２００μｌの維持培地で置き換えた。プレートは、ウイルスの添加前に３７℃にて約３０分インキュベートした。
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスを、０．４（侵入アッセイ）または０．０２（複製アッセイ）のＭＯＩ（感染多重度）で、オレアンドリンで処理した細胞および未処理細胞に添加した。オレアンドリンは、３７℃にて１時間のインキュベーション中、ウェルに留まった。
吸収の１時間後、接種培地を除去し、ＰＢＳ（標準リン酸緩衝生理食塩水）で１回洗浄した。
培地のみ（オレアンドリンなし）を、データスライドで「前処理」と指定されているオレアンドリンで処理したウェルに戻した。指示されている濃度のオレアンドリンを有する培地を、データスライドで「持続」と指定されているウェルに戻した。
プレートを、感染後２４時間（侵入アッセイ）または４８時間（複製アッセイ）固定し、ウイルス特異的抗体および蛍光標識二次抗体で免疫染色した。
細胞は、Ｏｐｅｒｅｔｔａを使用して撮像し、データは、Ｈａｒｍｏｎｉａソフトウェアでカスタムアルゴリズムを使用して分析して、各ウェルにおける感染細胞のパーセントを判定した。
結果は、図２４Ａおよび２４Ｂで示されている。

実施例３０
Ｖｅｒｏ－Ｅ６細胞に対するオレアンドリン毒性のインビトロ評価
このアッセイの目的は、Ｖｅｒｏ－Ｅ６細胞に対するオレアンドリンの相対的な潜在的毒性を判定することであった。
オレアンドリンを培養基中で段階希釈し、９６ウェルプレートにシードされたＶｅｒｏ－Ｅ６細胞に添加し、３７℃にて約２４時間インキュベートした。細胞数は、細胞力価Ｇｌｏアッセイを使用して得た。
結果は、図２５で示されている。

実施例３１
ＣＯＶＩＤ－１９ウイルスに対するオレアンドリンのインビトロ評価
この研究の目的は、オレアンドリンを用いた治療に対するＣＯＶＩＤ－１９ウイルスの用量応答を判定することであった。
より低い濃度のオレアンドリンを使用することを除いて、実施例２８の手順を繰り返した：１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ、０．５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ、０．１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ、０．０５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ、および０．００５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ。さらに、ＶＥＲＯ ＣＣＬ－８１細胞を、ＶＥＲＯ Ｅ６細胞の代わりに使用した。
ウイルス力価を、実施例２８に従って判定し、ウイルス力価における倍単位の低減は、対照試料との比較により計算した。結果は、図２６Ａ～２６Ｄ、２７Ａ～２７Ｄ、ならびに２８Ａおよび２８Ｂで示されている。

実施例３２
舌下液体剤形
オレアンドリンを含む舌下剤形は、オレアンドリンまたはオレアンドリン含有組成物（例えばオレアンドリン含有抽出物；２重量％）と、中鎖トリグリセリド（９５重量％）および香味剤（３重量％）を混合することにより作った。剤形におけるオレアンドリン含有量は、約２５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬであった。

実施例３３
Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの亜臨界流体抽出物の調製
Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒバイオマスの超臨界流体抽出ではなく、亜臨界液体抽出を用いることにより、オレアンドリン含有抽出物を調製するための改善された方法を開発した。
乾燥させ、粉末化したバイオマスを抽出チャンバに入れ、これを次いで密封した。二酸化炭素（約９５重量％）およびアルコール（約５重量％；メタノールまたはエタノール）をチャンバ中に注入した。チャンバの内部温度および圧力は、抽出培地が、抽出時間の大部分または実質的に全てにわたって、超臨界流体相ではなく亜臨界液相中で：約２℃～約１６℃（約７℃～約８℃）の範囲の温度、約１１５～約１３５ｂａｒ（約１２４ｂａｒ）の範囲の圧力で維持されるようにした。抽出期間は、約４時間～約１２時間（約６～約１０時間）であった。抽出環境を次いで濾過し、上清を収集した。二酸化炭素を上清から放出し、生じた粗抽出物をエタノール（約９部エタノール：約１部抽出物）中で希釈し、約－５０℃にて少なくとも１２時間冷凍した。溶液を解凍し、濾過した（１００ミクロンの細孔サイズフィルター）。濾液を元の体積の約１０％に濃縮し、次いで減菌濾過した（細孔サイズ０．２ミクロンのフィルター）。濃度抽出物を、次いで５０％エタノール水溶液で、１ｍＬの溶液あたり抽出物約１．５ｍｇの濃度に希釈した。
生じた亜臨界液体（ＳｂＣＬ）抽出物には、オレアンドリン、およびＮｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒから抽出可能な１つ以上の他の化合物が含まれており、前記１つ以上の他の化合物は、本明細書に定義される。

実施例３４
ＣＯＶＩＤ－１９ウイルスに対するオレアンドリンのインビトロ評価
この研究の目的は、オレアンドリンの前処理なしでの（実施例２８のように）、子孫ビリオンの感染性に対するオレアンドリンの影響を判定することであった。
細胞が、感染前にオレアンドリンで前処理されていないことを除いて、実施例２８の手順を繰り返した。その代わり、感染細胞は、感染後１２時間および２４時間で、オレアンドリンまたは対照ビヒクルで処理した。さらに、ＶＥＲＯ Ｅ６細胞の代わりにＶＥＲＯ ＣＣＬ－８１細胞を使用し、より低い濃度のオレアンドリンを使用した：１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ、０．５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ、０．１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ、および０．０５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ。データは、図２９Ａおよび２９Ｂで示されている。

実施例３５
ＣＯＶＩＤ－１９ウイルスに対するオレアンドリンのインビボ評価
この研究の目的は、ＣＯＶＩＤ－１９ウイルスに既に感染した対象の治療における、オレアンドリン含有抽出物（ＯＣＥ）の有効性を判定することであった。
実施例３２の剤形に従って調製したＯＣＥの舌下、頬側または経口投与前に、臨床状態を判定するために、広範な人口統計学的分布を表し、ＣＯＶＩＤ－１９感染を呈する対象を評価した。組成物は、対象の口腔に液滴を入れることにより、対象に安全に投与した。投与計画は、およそ用量あたり０．５ｍＬおよび１日あたり４回（約６時間毎に１回）であり、これは、１日あたり約５０ｍｉｃｒｏｇのオレアンドリンに近似している。あるいは、一日総量の半分を投与した。全ての対象が完全な回復を経験した。

実施例３６
Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒのエタノール抽出物の調製
この目的は、Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒバイオマスをエタノール水溶液で抽出することによりエタノール抽出物を調製することであった。
粉砕した乾燥葉を、エタノール水溶液（９０％ ｖ／ｖエタノール；１０％ ｖ／ｖ水）で繰り返し処理した。組み合わせたエタノール上清を組み合わせ、濾過し、次いで真空で蒸発させることにより濃縮して、その中のエタノールおよび水の量を減少させ、約２５ｍｇオレアンドリン／ｍＬの抽出物を含む粗エタノール抽出物（約５０％ ｖ／ｖエタノール含有量を有する）を得た。

実施例３７
Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒの抽出物の組み合わせを含む剤形の調製
この目的は、実施例３６のエタノール抽出物の一部（１重量％）を、実施例３３のＳｂＣＬ抽出物の一部（１重量％）、中鎖トリグリセリド（９５重量％）、および香味剤（３重量％）と組み合わせることを除いて、実施例３２に従って剤形を調製することであった。

実施例３８
ＣＯＶＩＤ－１９ウイルスに対するジゴキシンのインビボ評価
この研究の目的は、既にＣＯＶＩＤ－１９ウイルスに感染した対象の治療におけるジゴキシン含有組成物（ＤＣＣ）の有効性を判定することであった。ジゴキシンを含む市販の剤形を購入する。
ＤＣＣの経口または全身投与の前に臨床状態を判定するために、ＣＯＶＩＤ－１９感染を呈した対象を評価する。市販の組成物は、本明細書に記載される。それぞれに対して安全な投与計画は、それぞれのＮＤＡおよび添付文書で説明されている。組成物は、意図されている投与経路に従って各対象に安全に投与される。臨床モニタリングは、治療応答を判定するために行い、用量を適切な方法で滴定した。

実施例３９
オレアンドリンで処理したＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染におけるゲノム対感染粒子の比の判定
この研究の目的は、オレアンドリンによるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の阻害が、全体または感染粒子生成のレベルにあったかどうかを判定することである。
試料に対するゲノムコピーを定量化するために、標準製造者プロトコールを利用して２００μｌの試料を、５：１体積比のＴＲＩｚｏｌ ＬＳ（Ａｍｂｉｏｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）で抽出し、１１μｌ 水中で再懸濁した。抽出したＲＮＡを、以前に公開されたアッセイ（２６）に従って、ｑＲＴ－ＰＣＲによりＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２について試験した。簡潔には、以下のプライマーおよびプローブを使用してＮ遺伝子を増幅させた：フォワードプライマー［５’－ＴＡＡＴＣＡＧＡＣＡＡＧＧＡＡＣＴＧＡＴＴＡ－３’］（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ．１）；逆プライマー［５’－ＣＧＡＡＧＧＴＧＴＧＡＣＴＴＣＣＡＴＧ－３’］（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ．２）；およびプローブ［５’－ＦＡＭ－ＧＣＡＡＡＴＴＧＴＧＣＡＡＴＴＴＧＣＧＧ－ＴＡＭＲＡ－３’；（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ．３）］。２０μｌ反応混合物は、ｉＴａｑ Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ ｐｒｏｂｅｓ Ｏｎｅ－Ｓｔｅｐ ｋｉｔ（ＢｉｏＲａｄ，Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，ＣＡ）を使用して、製造者の指示に従って調製した：反応ミックス（２×：１０μＬ）、ｉＳｃｒｉｐｔ逆転写酵素（０．５μＬ）、プライマー（１０μＭ：１．０μＬ）、プローブ（１０μＭ：０．５μＬ）、抽出したＲＮＡ（４μＬ）および水（３μＬ）。ｑＲＴ－ＰＣＲ反応は、サーマルサイクラーＳｔｅｐＯｎｅＰｌｕｓ（商標）Ｒｅａｌ－Ｔｉｍｅ ＰＣＲ Ｓｙｓｔｅｍｓ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して行った。反応を５０℃にて５分、９５℃にて２０秒、続いて４０サイクルの９５℃にて５秒および６０℃にて３０秒でインキュベートした。陽性対照ＲＮＡシークエンス（ヌクレオチド２６，０４４～２９，８８３のＣＯＶＩＤ－２０１９ゲノム）を使用して、評価中の試料におけるＮ遺伝子のＲＮＡコピー数を評価した。

本明細書で使用される場合、「約」または「おおよそ」という用語は、指定された値の±１０％、±５％、±２．５％、または±１％を意味すると解釈される。本明細書で使用される場合、「実質的に」という用語は、「大部分」または「少なくとも大部分」または「５０％超」を意味すると解釈される。

上記は、本発明の特定の実施形態の詳細な説明である。本発明の特定の実施形態を例示の目的で本明細書に説明してきたが、本発明の精神および範囲から逸脱することなく様々な修正を行うことができることを理解されたい。したがって、本発明は、添付の特許請求の範囲による場合を除いて限定されない。本明細書で開示および特許請求される実施形態の全ては、本開示に照らして過度の実験なしで作成および実行することができる。

上記は、本発明の特定の実施形態の詳細な説明である。本発明の特定の実施形態を例示の目的で本明細書に説明してきたが、本発明の精神および範囲から逸脱することなく様々な修正を行うことができることを理解されたい。したがって、本発明は、添付の特許請求の範囲による場合を除いて限定されない。本明細書で開示および特許請求される実施形態の全ては、本開示に照らして過度の実験なしで作成および実行することができる。
次に、本発明のまた別の好ましい態様を示す。
１． 治療を必要とする対象においてウイルス感染を治療する方法であって、オレアンドリン、ジゴキシン、またはそれらの組み合わせを含む１回以上の用量の抗ウイルス組成物を前記対象に投与することを含み、前記ウイルス感染が、プラスセンス一本鎖エンベロープＲＮＡウイルス（（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡ－Ｖ）によって引き起こされる、方法。
２． ウイルス感染に罹るリスクのある対象を治療する予防方法であって、前記対象が前記ウイルス感染に罹る前に長期治療期間にわたって繰り返しの頻度で１回以上の用量の抗ウイルス組成物を前記対象に慢性的に投与し、それによって前記対象が前記ウイルス感染に罹ることを予防することを含み、前記抗ウイルス組成物が、オレアンドリン、ジゴキシン、またはそれらの組み合わせを含み、前記ウイルス感染が、プラスセンス一本鎖エンベロープＲＮＡウイルス（（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡ－Ｖ）によって引き起こされる、方法。
３． 前記対象が前記ウイルス感染を有するかどうかを判定することと、
前記抗ウイルス組成物の投与を指示することと、
処方された初期投与計画に従って一定期間、前記抗ウイルス組成物の初期用量を前記対象に投与することと、
前記抗ウイルス組成物による治療に対する対象の臨床応答および／または治療応答の妥当性を定期的に判定することと、
前記対象の臨床応答および／または治療応答が妥当である場合、所望の臨床エンドポイントが達成されるまで、必要に応じて前記抗ウイルス組成物による治療を継続すること、または
前記対象の臨床応答および／または治療応答が前記初期用量および初期投与計画で妥当でない場合、前記対象の所望の臨床応答および／または治療応答が達成されるまで、前記用量を漸増または漸減させることと、を含む、上記１に記載の方法。
４． 用量が、前記対象の体重１Ｋｇあたり約１００～１０００ｍｇまたは約１００～１０００ｍｉｃｒｏｇの抗ウイルス組成物を含む、上記１～３のいずれか一項に記載の方法。
５． １日あたり投与される前記組成物の一部としてのオレアンドリンの量が、１４０ｍｉｃｒｏｇ～３１５ｍｉｃｒｏｇ、２０ｍｉｃｒｏｇ～７５０ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～３００ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～１２０ｍｉｃｒｏｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｉｃｒｏｇ、約０．５～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約１．５～約６０ｍｉｃｒｏｇ、約１．８～約６０ｍｉｃｒｏｇ、または約１．８～約４０ｍｉｃｒｏｇからなる群から選択される、上記１～４のいずれか一項に記載の方法。
６． 前記抗ウイルス組成物の用量が、１日２回または約１２時間毎投与され、前記用量におけるオレアンドリンの量が、約０．２５～約５０ｍｉｃｒｏｇまたは約０．９～５ｍｉｃｒｏｇである、上記１～５のいずれか一項に記載の方法。
７． 前記抗ウイルス組成物の用量が、１日あたり対象の体重１ｋｇあたりの抗ウイルス組成物の単位量に基づいて約０．０５～０．５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、または約０．０５～０．３ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日を含む、上記１～６のいずれか一項に記載の方法。
８． ａ）前記抗ウイルス組成物におけるオレアンドリンの１日用量が、最高で約１００ｍｉｃｒｏｇ／日、約８０ｍｉｃｒｏｇ／日、約６０ｍｉｃｒｏｇ／日、約４０ｍｉｃｒｏｇ／日、約３８．４ｍｉｃｒｏｇ／日もしくは約３０ｍｉｃｒｏｇ／日、および／またはｂ）前記抗ウイルス組成物におけるオレアンドリンの１日用量が、最小で０．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．８ｍｉｃｒｏｇ／日、約２ｍｉｃｒｏｇ／日、もしくは約５ｍｉｃｒｏｇ／日である、上記１～７のいずれか一項に記載の方法。
９． 強心配糖体が、少なくとも２つの投与相：負荷相および維持相、で投与される、上記１～８のいずれか一項に記載の方法。
１０． 前記強心配糖体が、ジゴキシンであり、前記負荷相および維持相の前記投与計画が、以下の通りである、上記９に記載の方法。

１１． 前記１回以上の用量の投与後、前記対象におけるオレアンドリンの血漿中濃度が、血漿１ｍＬあたりのオレアンドリンの量として、約０．０５～約２ｎｇ／ｍｌ、約０．００５～約１０ｎｇ／ｍL、約０．００５～約８ｎｇ／ｍL、約０．０１～約７ｎｇ／ｍL、約０．０２～約７ｎｇ／ｍL、約０．０３～約６ｎｇ／ｍL、約０．０４～約５ｎｇ／ｍL、または約０．０５～約２．５ｎｇ／ｍLの範囲である、上記１～１０のいずれか一項に記載の方法。
１２． 治療を必要とする対象においてウイルス感染を治療する方法であって、オレアンドリンを含む１回以上の用量の抗ウイルス組成物を前記対象に投与することを含み、前記ウイルス感染が、プラスセンス一本鎖エンベロープＲＮＡウイルス（（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡ－Ｖ）によって引き起こされ、
用量が、前記対象の体重１Ｋｇあたり約１００～１０００ｍｇまたは約１００～１０００ｍｉｃｒｏｇの抗ウイルス組成物を含み；または、１日あたり投与されるオレアンドリンの量が、１４０ｍｉｃｒｏｇ～３１５ｍｉｃｒｏｇ、２０ｍｉｃｒｏｇ～７５０ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～３００ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～１２０ｍｉｃｒｏｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｉｃｒｏｇ、約０．５～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約１．５～約６０ｍｉｃｒｏｇ、約１．８～約６０ｍｉｃｒｏｇ、もしくは約１．８～約４０ｍｉｃｒｏｇからなる群から選択され；または、前記抗ウイルス組成物の用量が、１日あたり対象の体重１ｋｇあたりの抗ウイルス組成物の単位量に基づいて、約０．０５～０．５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、もしくは約０．０５～０．３ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日を含み；
前記１回以上の用量の投与後、前記対象におけるオレアンドリンの血漿中濃度が、血漿１ｍＬあたりのオレアンドリンの量として、約０．０５～約２ｎｇ／ｍｌ、約０．００５～約１０ｎｇ／ｍＬ、約０．００５～約８ｎｇ／ｍＬ、約０．０１～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０２～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０３～約６ｎｇ／ｍＬ、約０．０４～約５ｎｇ／ｍＬ、または約０．０５～約２．５ｎｇ／ｍＬの範囲である、方法。
１３． 前記（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶが、コロナウイルス科、フラビウイルス科、トガウイルス科、およびアルテルウイルス科からなる群から選択されるウイルスである、上記１～１２のいずれか一項に記載の方法。
１４． 前記（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶが、ヒトに対して病原性であるコロナウイルスである、上記１～１３のいずれか一項に記載の方法。
１５． 前記コロナウイルスが、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＣＯＶＩＤ－１９（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）、ＣｏＶ ２２９Ｅ、ＣｏＶ ＮＬ６３、ＣｏＶ ＯＣ４３、ＣｏＶ ＨＫＵ１、およびＣｏＶ ＨＫＵ２０からなる群から選択される、上記１４に記載の方法。
１６． 前記（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶが、フラビウイルス、黄熱ウイルス、デング熱ウイルス、日本脳炎ウイルス、西ナイルウイルス、ジカウイルス、ダニ媒介性脳炎ウイルス、キャサヌール森林病ウイルス、アルフルマ（Ａｌｋｈｕｒｍａ）病ウイルス、オムスク出血熱ウイルス、およびポワッサンウイルスからなる群から選択されるウイルスである、上記１～１３のいずれか一項に記載の方法。
１７． 前記（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶが、アルボウイルス、東部ウマ脳脊髄炎ウイルス（ＥＥＥＶ）、西部ウマ脳脊髄炎ウイルス（ＷＥＥＶ）、ベネズエラウマ脳脊髄炎ウイルス（ＶＥＥＶ）、チクングニアウイルス（ＣＨＩＫＶ）、オニョンニョンウイルス（ＯＮＮＶ）、ポゴスタ病ウイルス、シンドビスウイルス、ロスリバー熱ウイルス（ＲＲＶ）およびセムリキ森林ウイルスからなる群から選択されるトガウイルス科ウイルスである、上記１～１３のいずれか一項に記載の方法。
１８． 治療を必要とする対象においてウイルス感染を治療する方法であって、オレアンドリン、ジゴキシンまたはそれらの組み合わせを含む１回以上の用量の抗ウイルス組成物を前記対象に投与することを含み、前記ウイルス感染が、マイナスセンス一本鎖エンベロープＲＮＡウイルス（（－）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡ－Ｖ）によって引き起こされる、方法。
１９． ウイルス感染に罹るリスクのある対象を治療する予防方法であって、前記対象が前記ウイルス感染に罹る前に長期治療期間にわたって繰り返しの頻度で１回以上の用量の抗ウイルス組成物を前記対象に慢性的に投与し、それによって前記対象が前記ウイルス感染に罹ることを予防することを含み、前記抗ウイルス組成物が、オレアンドリン、ジゴキシンまたはそれらの組み合わせを含み、前記ウイルス感染が、マイナスセンス一本鎖エンベロープＲＮＡウイルス（（－）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡ－Ｖ）によって引き起こされる、方法。
２０． 前記対象が前記ウイルス感染を有するかどうかを判定することと、
前記抗ウイルス組成物の投与を指示することと、
処方された初期投与計画に従って一定期間、前記抗ウイルス組成物の初期用量を前記対象に投与することと、
前記抗ウイルス組成物による治療に対する対象の臨床応答および／または治療応答の妥当性を定期的に判定することと、
前記対象の臨床応答および／または治療応答が妥当である場合、所望の臨床エンドポイントが達成されるまで、必要に応じて前記抗ウイルス組成物による治療を継続すること、または
前記対象の臨床応答および／または治療応答が前記初期用量および初期投与計画で妥当でない場合、前記対象の所望の臨床応答および／または治療応答が達成されるまで、前記用量を漸増または漸減させることと、を含む、上記１８に記載の方法。
２１． 用量が、前記対象の体重１ｋｇあたり約１００～１０００ｍｇまたは約１００～１０００ｍｉｃｒｏｇの抗ウイルス組成物を含む、上記１８～２０のいずれか一項に記載の方法。
２２． １日あたり投与される前記組成物の一部としてのオレアンドリンの量が、１４０ｍｉｃｒｏｇ～３１５ｍｉｃｒｏｇ、２０ｍｉｃｒｏｇ～７５０ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～３００ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～１２０ｍｉｃｒｏｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｉｃｒｏｇ、約０．５～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約１．５～約６０ｍｉｃｒｏｇ、約１．８～約６０ｍｉｃｒｏｇ、または約１．８～約４０ｍｉｃｒｏｇからなる群から選択される、上記１８～２１のいずれか一項に記載の方法。
２３． 前記抗ウイルス組成物の用量が、１日２回または約１２時間毎投与され、前記用量におけるオレアンドリンの量が、約０．２５～約５０ｍｉｃｒｏｇまたは約０．９～５ｍｉｃｒｏｇである、上記１８～２２のいずれか一項に記載の方法。
２４． 前記抗ウイルス組成物の用量が、１日あたり対象の体重１ｋｇあたりの抗ウイルス組成物の単位量に基づいて、約０．０５～０．５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、または約０．０５～０．３ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日を含む、上記１８～２３のいずれか一項に記載の方法。
２５． ａ）前記抗ウイルス組成物におけるオレアンドリンの１日用量が、最高で約１００ｍｉｃｒｏｇ／日、約８０ｍｉｃｒｏｇ／日、約６０ｍｉｃｒｏｇ／日、約４０ｍｉｃｒｏｇ／日、約３８．４ｍｉｃｒｏｇ／日もしくは約３０ｍｉｃｒｏｇ／日であり、かつ／またはｂ）前記抗ウイルス組成物におけるオレアンドリンの１日用量が、最小で約０．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．８ｍｉｃｒｏｇ／日、約２ｍｉｃｒｏｇ／日、もしくは約５ｍｉｃｒｏｇ／日である、上記１８～２４のいずれか一項に記載の方法。
２６． 前記１回以上の用量の投与後、前記対象におけるオレアンドリンの血漿中濃度が、血漿１ｍＬあたりのオレアンドリンの量として、約０．０５～約２ｎｇ／ｍｌ、約０．００５～約１０ｎｇ／ｍＬ、約０．００５～約８ｎｇ／ｍＬ、約０．０１～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０２～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０３～約６ｎｇ／ｍＬ、約０．０４～約５ｎｇ／ｍＬ、または約０．０５～約２．５ｎｇ／ｍＬの範囲である、上記１８～２５のいずれか一項に記載の方法。
２７． 治療を必要とする対象においてウイルス感染を治療する方法であって、
オレアンドリンを含む１回以上の用量の抗ウイルス組成物を前記対象に投与することを含み、前記ウイルス感染が、マイナスセンス一本鎖エンベロープＲＮＡウイルス（（－）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡ－Ｖ）によって引き起こされ、
用量が、前記対象の体重１Ｋｇあたり約１００～１０００ｍｇもしくは約１００～１０００ｍｉｃｒｏｇの抗ウイルス組成物を含み；または、１日あたり投与されるオレアンドリンの量が、１４０ｍｉｃｒｏｇ～３１５ｍｉｃｒｏｇ、２０ｍｉｃｒｏｇ～７５０ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～３００ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～１２０ｍｉｃｒｏｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｉｃｒｏｇ、約０．５～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約１．５～約６０ｍｉｃｒｏｇ、約１．８～約６０ｍｉｃｒｏｇ、もしくは約１．８～約４０ｍｉｃｒｏｇからなる群から選択され；または、前記抗ウイルス組成物の用量が、１日あたり対象の体重１ｋｇあたりの抗ウイルス組成物の単位量に基づいて、約０．０５～０．５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、もしくは約０．０５～０．３ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日を含み；
前記１回以上の用量の投与後、前記対象におけるオレアンドリンの血漿中濃度が、血漿１ｍＬあたりのオレアンドリンの量として、約０．０５～約２ｎｇ／ｍｌ、約０．００５～約１０ｎｇ／ｍＬ、約０．００５～約８ｎｇ／ｍＬ、約０．０１～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０２～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０３～約６ｎｇ／ｍＬ、約０．０４～約５ｎｇ／ｍＬ、または約０．０５～約２．５ｎｇ／ｍＬの範囲である、方法。
２８． 前記（－）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶが、アレナウイルス科ウイルス、ブニヤウイルス科（ブニヤウイルス目）ウイルス、フィロウイルス科ウイルス、オルトミクソウイルス科ウイルス、パラミクソウイルス科ウイルス、およびラブドウイルス科ウイルスからなる群から選択されるウイルスである、上記１８～２７のいずれか一項に記載の方法。
２９． 前記（－）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶが、ラッサウイルス、無菌性髄膜炎、ガナリトウイルス、フニンウイルス、ルジョウイルス、マチュポウイルス、サビアウイルスおよびホワイトウォーターアロヨウイルスからなる群から選択されるアレナウイルス科ウイルスである、上記１８～２８のいずれか一項に記載の方法。
３０． 前記（－）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶが、ハンタウイルス、クリミア－コンゴ出血熱オルトナイロウイルスからなる群から選択されるブニヤウイルス科ウイルスである、上記１８～２８のいずれか一項に記載の方法。
３１． 前記（－）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶが、ムンプスウイルス、ニパウイルス、ヘンドラウイルス、呼吸器多核体ウイルス（ＲＳＶ）、ヒトパラインフルエンザウイルス（ＨＰＩＶ）、およびＮＤＶからなる群から選択されるパラミクソウイルス科ウイルスである、上記１８～２８のいずれか一項に記載の方法。
３２． 前記（－）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶが、インフルエンザウイルス（ＡからＣ）、イサウイルス、トゴトウイルス、クアランジャウイルス、Ｈ１Ｎ１、Ｈ２Ｎ２、Ｈ３Ｎ２、Ｈ１Ｎ２、スペイン風邪、アジア風邪、ホンコン風邪、ソ連風邪からなる群から選択されるオルトミクソウイルス科ウイルスである、上記１８～２８のいずれか一項に記載の方法。
３３． 前記（－）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶが、狂犬病ウイルス、ベシクロウイルス、リッサウイルス、サイトラブドウイルスからなる群から選択されるラブドウイルス科ウイルスである、上記１８～２８のいずれか一項に記載の方法。
３４． ウイルス感染を有する対象に、オレアンドリン、ジゴキシンまたはそれらの組み合わせを含む１回以上の用量の強心配糖体を舌下投与することを含む、本明細書における上記１～３３のいずれか一項に記載のウイルス感染を治療する方法。
３５． コロナウイルス感染を治療する方法であって、前記感染を有する対象に、複数回の治療有効用量のオレアンドリン、ジゴキシンまたはそれらの組み合わせを投与することを含む、方法。
３６． 前記複数回の用量が、１週間あたり２日以上にわたって１日あたり投与される１回以上の用量である、上記３４または３５に記載の方法。
３７． 投与が１カ月あたり１週間以上継続する、上記３６に記載の方法。
３８． 投与が１年あたり１カ月以上継続する、上記３７に記載の方法。
３９． 前記コロナウイルスが、ヒトに対して病原性である、上記３４～３８のいずれか一項に記載の方法。
４０． 前記コロナウイルスが、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＣＯＶＩＤ－１９（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）、ＣｏＶ ２２９Ｅ、ＣｏＶ ＮＬ６３、ＣｏＶ ＯＣ４３、ＣｏＶ ＨＫＵ１、およびＣｏＶ ＨＫＵ２０からなる群から選択される、上記３４～３９のいずれか一項に記載の方法。
４１． 前記対象の血漿におけるオレアンドリンの濃度が、オレアンドリンの投与後、血漿１ｍＬあたりのオレアンドリンの量として、ａ）約１０ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以下、約５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以下、約２．５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以下、約２ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以下、もしくは約１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以下；ｂ）約０．０００１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．０００５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．００１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．００１５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．０１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．０１５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．１５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．０５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、もしくは約０．０７５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上；ｃ）項目ａ）の任意の上限と、項目ｃ）の任意の下限との組み合わせ；または、ｄ）約０．０５～約２ｎｇ／ｍｌ、約０．００５～約１０ｎｇ／ｍＬ、約０．００５～約８ｎｇ／ｍＬ、約０．０１～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０２～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０３～約６ｎｇ／ｍＬ、約０．０４～約５ｎｇ／ｍＬ、もしくは約０．０５～約２．５ｎｇ／ｍＬの範囲である、上記３４～４０のいずれか一項に記載の方法。
４２． 用量が、前記対象の体重１Ｋｇあたり約１００～１０００ｍｇまたは約１００～１０００ｍｉｃｒｏｇの抗ウイルス組成物を含む、上記３４～４０のいずれか一項に記載の方法。
４３． １日あたり投与される前記組成物の一部としてのオレアンドリンの量が、１４０ｍｉｃｒｏｇ～３１５ｍｉｃｒｏｇ、２０ｍｉｃｒｏｇ～７５０ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～３００ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～１２０ｍｉｃｒｏｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｉｃｒｏｇ、約０．５～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約１．５～約６０ｍｉｃｒｏｇ、約１．８～約６０ｍｉｃｒｏｇ、または約１．８～約４０ｍｉｃｒｏｇからなる群から選択される、上記３４～４２のいずれか一項に記載の方法。
４４． 前記抗ウイルス組成物の用量が、１日２回または約１２時間毎投与され、前記用量におけるオレアンドリンの量が、約０．２５～約５０ｍｉｃｒｏｇまたは約０．９～５ｍｉｃｒｏｇである、上記３４～４３のいずれか一項に記載の方法。
４５． 前記抗ウイルス組成物の用量が、１日あたり対象の体重１ｋｇあたりの抗ウイルス組成物の単位量に基づいて、約０．０５～０．５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、または約０．０５～０．３ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日を含む、上記３４～４４のいずれか一項に記載の方法。
４６． ａ）前記抗ウイルス組成物におけるオレアンドリンの１日用量が、最高で約１００ｍｉｃｒｏｇ／日、約８０ｍｉｃｒｏｇ／日、約６０ｍｉｃｒｏｇ／日、約４０ｍｉｃｒｏｇ／日、約３８．４ｍｉｃｒｏｇ／日もしくは約３０ｍｉｃｒｏｇ／日であり、かつ／またはｂ）前記抗ウイルス組成物におけるオレアンドリンの１日用量が、最小で約０．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．８ｍｉｃｒｏｇ／日、約２ｍｉｃｒｏｇ／日、もしくは約５ｍｉｃｒｏｇ／日である、上記３４～４５のいずれか一項に記載の方法。
４７． 強心配糖体が、少なくとも２つの投与相：負荷相および維持相、で投与される、上記１～４６のいずれか一項に記載の方法。
４８． 前記強心配糖体が、ジゴキシンであり、前記負荷相および維持相の前記投与計画が、以下の通りである、上記４７に記載の方法。

４９． 前記抗ウイルス組成物が、ａ）オレアンドリン；ｂ）オレアンドリン、オレアノール酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）およびウルソール酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）の組み合わせ；ｃ）オレアンドリン、オレアノール酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）およびベツリン酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）の組み合わせ；ｄ）オレアンドリン、オレアノール酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）、ウルソール酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）およびベツリン酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）の組み合わせ；ｅ）オレアンドリン、オレアノール酸（遊離酸またはその塩）、ウルソール酸（遊離酸または塩）、およびベツリン酸（遊離酸または）の組み合わせ；またはｆ）オレアンドリン、ならびにオレアノール酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）、ウルソール酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）、ベツリン酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）からなる群から選択される少なくとも２つのトリテルペンの組み合わせを含む、上記１～４８のいずれか一項に記載の方法。
５０． 抗ウイルス組成物の用量において、オレアンドリン対前記トリテルペンのモル比が、以下のいずれかから選択される、上記４９に記載の方法。

５１． 総トリテルペン含有量（オレアノール酸＋ウルソール酸＋ベツリン酸）対オレアンドリンのモル比が、約１５：１～約５：１、または約１２：１～約８：１、または約１００：１～約１５：１、または約１００：１～約５０：１、または約１００：１～約７５：１、または約１００：１～約８０：１、または約１００：１～約９０：１、または約１０：１の範囲である、上記４９に記載の方法。
５２． 個々のトリテルペン（オレアノール酸（ＯＡ）：ウルソール酸（ＵＡ）：ベツリン酸（ＢＡ））対オレアンドリン（ＯＬ）のモル比が、以下の範囲である：２～８（ＯＡ）：２～８（ＵＡ）：０．１～１（ＢＡ）：０．５～１．５（ＯＬ）；または３～６（ＯＡ）：３～６（ＵＡ）：０．３～８（ＢＡ）：０．７～１．２（ＯＬ）；または４～５（ＯＡ）：４～５（ＵＡ）：０．４～０．７（ＢＡ）：０．９～１．１（ＯＬ）；４．６（ＯＡ）：４．４（ＵＡ）：０．６（ＢＡ）：１（ＯＬ）；約９～１２（ＯＡ）：最大約２（ＵＡ）：最大約２、または約１０（ＯＡ）：約１（ＵＡ）：約１、または約９～１２（ＯＡ）：約０．１～２（ＵＡ）：約０．１～２（ＢＡ）、または約９～１１（ＯＡ）：約０．５～１．５（ＵＡ）：約０．５～１．５（ＢＡ）、または約９．５～１０．５（ＯＡ）：約０．７５～１．２５（ＵＡ）：約０．７５～１．２５（ＢＡ）、または約９．５～１０．５（ＯＡ）：約０．８～１．２（ＵＡ）：約０．８～１．２（ＢＡ）、または約９．７５～１０．５（ＯＡ）：約０．９～１．１（ＵＡ）：約０．９～１．１（ＢＡ）、上記４９に記載の方法。
５３． 前記抗ウイルス組成物が、バイオマスの抽出物を含む、上記１～５２のいずれか一項に記載の方法。
５４． 前記抽出物が、熱水抽出、冷水抽出、有機溶媒抽出、超臨界流体抽出、亜臨界液体抽出、またはそれらの組み合わせにより調製される、上記５３に記載の方法。
５５． 前記バイオマスが、Ｎｅｒｉｕｍ種、またはＡｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ種からの植物材料のバイオマスである、上記５３または５４に記載の方法。
５６． 前記抽出物が、オレアンドリン、および前記バイオマスから抽出された１つ以上の化合物の組み合わせを含む、上記５３～５５のいずれか一項に記載の方法。
５７． 前記抽出物が、１つ以上の強心配糖体前駆体、強心配糖体の１つ以上のグリコン構成物質、またはそれらの組み合わせをさらに含む、上記５３～５６のいずれか一項に記載の方法。
５８． 前記抽出物が、オレアンドリン、ならびに強心配糖体、グリコン、アグリコン、ステロイド、トリテルペン、多糖類、糖類、アルカロイド、脂肪、タンパク質、ネリタロシド、オドロシド、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、オレアンドリゲニン、オレアシドＡ、ベツリン（ウルサ－１２－エン－３β，２８－ジオール）、２８－ノルウルサ－１２－エン－３β－オール、ウルサ－１２－エン－３β－オール、３β，３β－ヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－酸、３β，２０α－ジヒドロキシウルサ－２１－エン－２８－酸、３β，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－２８－酸、３β，１３β－ジヒドロキシウルサ－１１－エン－２８－酸、３β，１２α－ジヒドロキシオレアナン－２８，１３β－オリド、３β，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアナン－２８－酸、ホモポリガラクツロナン、アラビノガラツロナン、クロロゲン酸、コーヒー酸、Ｌ－キナ酸、４－クマロイル－ＣｏＡ、３－Ｏ－カフェオイルキナ酸、５－Ｏ－カフェオイルキナ酸、カルデノリドＢ－１、カルデノリドＢ－２、オレアゲニン、ネリジジノシド、ネリゾシド、オドロシド－Ｈ、ガラクツロン酸、ラムノース、アラビノース、キシロース、およびガラクトースで構成される３－ベータ－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－５－ベータ，１４ベータ－ジヒドロキシ－カルド－２０（２２）－エノリドペクチン性多糖類、１７０００～１２００００Ｄの範囲のＭＷ、または約３５０００Ｄ、約３０００Ｄ、約５５００Ｄ、もしくは約１２０００ＤのＭＷを有する多糖類、カルデノリドモノグリコシド、カルデノリドＮ－１、カルデノリドＮ－２、カルデノリドＮ－３、カルデノリドＮ－４、プレグナン、４，６－ジエン－３，１２，２０－トリオン、２０Ｒ－ヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，１２－ジオン、１６ベータ，１７ベータ－エポキシ－１２ベータ－ヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，２０－ジオン、１２ベータ－ヒドロキシプレグナ－４，６，１６－トリエン－３，２０－ジオン（ネリジエノンＡ）、２０Ｓ，２１－ジヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，１２－ジオン（ネリジエノンＢ）、ネリウクマル酸、イソネリウクマル酸、オレアンデロン酸、オレアンデレン、８アルファ－メトキシラブダン－１８－酸、１２－ウルセン、カネロシド、ネリウモシド、３β－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－２α－ヒドロキシ－８，１４β－エポキシ－５β－カルダ－１６：１７，２０：２２－ジエノリド、３β－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－２α，１４β－ジヒドロキシ－５β－カルダ－１６：１７，２０：２２－ジエノリド、３β，２７－ジヒドロキシ－ウルサ－１８－エン－１３，２８－オリド、３β，２２α，２８－トリヒドロキシ－２５－ノル－ルプ－１（１０），２０（２９）－ジエン－２－オン、ｃｉｓ－カレニン（３β－ヒドロキシ－２８－Ｚ－ｐ－クマロイルオキシ－ウルサ－１２－エン－２７－酸）、ｔｒａｎｓ－カレニン（３－β－ヒドロキシ－２８－Ｅ－ｐ－クマロイルオキシ－ウルサ－１２－エン－２７－酸）、３ベータ－ヒドロキシ－５アルファ－カルダ－１４（１５），２０（２２）－ジエノリド（ベータ－アンヒドロエピジギトキシゲニン）、３ベータ－Ｏ－（Ｄ－ジギタロシル）－２１－ヒドロキシ－５ベータ－カルダ－８，１４，１６，２０（２２）－テトラエノリド（ネリウモゲニン－Ａ－３ベータ－Ｄ－ジギタロシド）、プロセラゲニン、ネリジエノンＡ、３ベータ，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－２８－酸、３ベータ，１３ベータ－ジヒドロキシウルサ－１１－エン－２８－酸、３ベータ－ヒドロキシウルサ－１２－エン－２８－アルデヒド、２８－オルウルサ－１２－エン－３ベータ－オール、ウルサ－１２－エン－３ベータ－オール、ウルサ－１２－エン－３ベータ，２８－ジオール、３ベータ，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－酸、（２０Ｓ，２４Ｒ）－エポキシダンマラン－３ベータ，２５－ジオール、２０ベータ，２８－エポキシ－２８アルファ－メトキシタラキサステラン－３ベータ－オール、２０ベータ，２８－エポキシタラキサステル－２１－エン－３ベータ－オール、２８－ノル－ウルサ－１２－エン－３ベータ，１７ベータ－ジオール、３ベータ－ヒドロキシウルサ－１２－エン－２８－アルデヒド、アルファ－ネリウルセート、ベータ－ネリウルセート、３アルファ－アセトフェノキシ－ウルサ－１２－エン－２８－酸、３ベータ－アセトフェノキシ－ウルサ－１２－エン－２８－酸、オレアンデロール酸、カネロジオン、３β－ｐ－ヒドロキシフェノキシ－１１α－メトキシ－１２α－ヒドロキシ－２０－ウルセン－２８－酸、２８－ヒドロキシ－２０（２９）－ルペン－３，７－ジオン、カネロシン、３アルファ－ヒドロキシ－ウルサ－１８，２０－ジエン－２８－酸、Ｄ－サルメントース、Ｄ－ジギノース、ネリジジノシド、ネリゾシド、イソリシノール酸、ゲンチオビオシルネリゴシド、ゲンチオビオシルボーモントシド、ゲンチオビオシルオレアンドリン、ホリネリン、１２β－ヒドロキシ－５β－カルダ－８，１４，１６，２０（２２）－テトラエノリド、８β－ヒドロキシ－ジギトキシゲニン、Δ１６－８β－ヒドロキシ－ジギトキシゲニン、Δ１６－ネリアゲニン、ウバオール、ウルソールアルデヒド、２７（ｐ－クマロイルオキシ）ウルソール酸、オレアンデロール、１６－アンヒドロ－デアセチル－ネリゴシド、９－Ｄ－ヒドロキシ－ｃｉｓ－１２－オクタデカン酸、アジゴシド、アジネリン、アルファ－アミリン、ベータ－シトステロール、カンペステロール、カウチューク、カプリン酸、カプリル酸、コリン、コルネリン、コルテネリン、デアセチルオレアンドリン、ジアセチル－ネリゴシド、ホリアンドリン、プソイドクラミン、ケルセチン、ケルセチン－３－ラムノグルコシド、ケルシトリン、ロサギニン、ルチン、ステアリン酸、スチグマステロール、ストロスペシド、ウレヒトキシン、およびウザリゲニンからなる群から選択される１つ以上の化合物を含む、上記５３
～５７のいずれか一項に記載の方法。
５９． 前記抽出物の１日用量が、最高で約１００ｍｉｃｒｏｇ／日、約８０ｍｉｃｒｏｇ／日、約６０ｍｉｃｒｏｇ／日、約４０ｍｉｃｒｏｇ／日、約３８．４ｍｉｃｒｏｇ／日または約３０ｍｉｃｒｏｇ／日である、上記５３～５８のいずれか一項に記載の方法。
６０． 前記抽出物の１日用量が、最小で０．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．８ｍｉｃｒｏｇ／日、約２ｍｉｃｒｏｇ／日、もしくは約５ｍｉｃｒｏｇ／日である、上記５２～５８のいずれか一項に記載の方法。
６１． 前記対象の血液または血漿中のウイルス力価が、前記治療の結果として低減されるかまたは増加しない、上記１～６０のいずれか一項に記載の方法。
６２． 前記投与が、全身、非経口、頬側、経腸、筋肉内、皮下、舌下、経口、口腔、またはそれらの組み合わせである、上記１～６１のいずれか一項に記載の方法。
６３． １回以上の用量が、毎日、毎週、または毎月の頻度で投与される、上記１～６２のいずれか一項に記載の方法。
６４． 前記抗ウイルス組成物が、感染直後、または感染後１日から５日以内の任意の時間、またはウイルス感染の確定診断後の最も早い時間に投与される、上記１～６３のいずれか一項に記載の方法。
６５． 前記抗ウイルス組成物は、一次抗ウイルス療法、補助抗ウイルス療法、または併用抗ウイルス療法として投与される、上記１～６４のいずれか一項に記載の方法。
６６． 前記投与が、前記抗ウイルス組成物の少なくとも１つの他の抗ウイルス組成物、または前記ウイルス感染に関連する症状を治療するための少なくとも１つの他の組成物との別々の投与もしくは同時投与を含む、上記１～６５のいずれか一項に記載の方法。
６７． 前記症状が、炎症、嘔吐、悪心、頭痛、発熱、下痢、悪心、蕁麻疹、結膜炎、倦怠感、筋肉痛、関節痛、発作、および麻痺からなる群から選択される、上記６６に記載の方法。
６８． オレアンドリン、ジゴキシンまたはそれらの組み合わせを含む、舌下剤形。
６９． 少なくとも１つの液体担体をさらに含む、上記６８に記載の剤形。
７０． オレアンドリンを含み、Ｎｅｒｉｕｍ ｓｐ．またはＴｈｅｖｅｔｉａ ｓｐ．のバイオマスの亜臨界液体抽出により調製されている、抽出物
７１． 前記亜臨界液体が、二酸化炭素を含み、アルコールをさらに含んでもよい、上記７０に記載の抽出物。
７２． オレアンドリンを含む抽出物を調製する方法であって、オレアンドリン含有バイオマスに、アルコールをさらに含んでもよい亜臨界液体二酸化炭素を用いて、オレアンドリンを前記バイオマスから抽出するのに十分な期間抽出を行うことを含む、方法。
７３． オレアンドリンを含む抽出物を調製する方法であって、
オレアンドリン含有バイオマスを、亜臨界液体二酸化炭素を含み、アルコールをさらに含んでもよい抽出液で、オレアンドリンを前記バイオマスから抽出するのに十分な期間抽出することと、
前記バイオマスを前記抽出液から分離する一方、前記抽出液を保持することと、次いで
抽出液を除去し、それにより前記抽出物を形成することと、を含む、方法。
７４． オレアンドリン含有抽出物の組み合わせを生成する方法であって、
第１のオレアンドリン含有バイオマスに有機溶媒抽出を行って、オレアンドリン含有有機溶媒抽出物を得ることと、
第２のオレアンドリン含有バイオマスに亜臨界液体（ＳｂＣＬ）抽出（ＳｂＣＬＥ）を行って、オレアンドリン含有ＳｂＣＬ抽出物を得ることと、
前記オレアンドリン含有有機溶媒抽出物および前記オレアンドリン含有ＳｂＣＬ抽出物を組み合わせて、前記組み合わせたオレアンドリン含有抽出物を得ることと、を含む、方法。
７５． 本明細書に定義されるオレアンドリン含有有機溶媒抽出物の一部、および本明細書に定義されるオレアンドリン含有ＳｂＣＬ抽出物の一部を含む、改善されたオレアンドリン含有組成物。
７６． コロナウイルス感染を治療する方法であって、それを必要とする対象に、少なくとも約５日～約１カ月の治療期間にわたって１日あたり複数回用量のオレアンドリンを投与することを含み、オレアンドリンが、オレアンドリン含有バイオマスから得られる少なくとも１つの抽出物を含む薬学的組成物に存在する、方法。
７７． １日あたりのオレアンドリンの総用量が、約１ｍｉｃｒｏｇ～約１８０ｍｉｃｒｏｇ、約１ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約５ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１０ｍｉｃｒｏｇ～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約１０ｍｉｃｒｏｇ～約７５ｍｉｃｒｏｇ、約１５ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約１５ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１５ｍｉｃｒｏｇ～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏ～約９０ｍｉｃｒｏｇ、約４０ｍｉｃｒｏｇ～約７０ｍｉｃｒｏｇ、約１ｍｉｃｒｏｇ、約５ｍｉｃｒｏｇ、約１０ｍｉｃｒｏｇ、約２０ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏｇ、約４０ｍｉｃｒｏｇ、約５０ｍｉｃｒｏｇ、約６０ｍｉｃｒｏｇ、約７０ｍｉｃｒｏｇ、約８０ｍｉｃｒｏｇ、約９０ｍｉｃｒｏｇ、約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１１０ｍｉｃｒｏｇ、約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約１３０ｍｉｃｒｏｇ、約１４０ｍｉｃｒｏｇ、約１５０ｍｉｃｒｏｇ、約１６０ｍｉｃｒｏｇ、約１７０ｍｉｃｒｏｇ、または約１８０ｍｉｃｒｏｇから、各発生時に独立して選択される、上記７６に記載の方法。
７８． 前記１日あたり複数回用量のオレアンドリンが、１日あたり２～１０回、１日あたり２～８回、１日あたり２～６回、１日あたり２～４回、１日あたり２回、１日あたり３回、１日あたり４回、１日あたり５回、１日あたり６回、１日あたり７回、１日あたり８回、１日あたり９回、または１日あたり１０回である、上記７６または７７に記載の方法。
７９． 前記薬学的組成物が、Ｎｅｒｉｕｍ種から得られる少なくとも２つの抽出物を含む、上記７６～７８のいずれか一項に記載の方法。
８０． 前記抽出物が、熱水抽出物、溶媒抽出物、超臨界流体抽出物、および亜臨界液体抽出物からなる群から、各発生時に独立して選択される、上記７９に記載の方法。
８１． 本明細書に記載されるウイルス感染を治療する方法。
８２． 本明細書に記載される組成物。
８３． 本明細書に記載される抗ウイルス組成物。
８４． 本明細書に記載されるオレアンドリン含有組成物。
８５． コロナウイルス感染を治療する方法であって、それを必要とする対象に、１日あたり１回以上の用量のオレアンドリンを、少なくとも約５日間～約１カ月以上の治療期間投与することを含み、前記コロナウイルス感染が、ヒトに対して病原性である、方法。
８６． 前記コロナウイルスが、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＣＯＶＩＤ－１９（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）、ＣｏＶ ２２９Ｅ、ＣｏＶ ＮＬ６３、ＣｏＶ ＯＣ４３、ＣｏＶ ＨＫＵ１、およびＣｏＶ ＨＫＵ２０からなる群から選択される、上記８５に記載の方法。
８７． １日あたりのオレアンドリンの総用量が、約１ｍｉｃｒｏｇ～約１８０ｍｉｃｒｏｇ、約１ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約５ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１０ｍｉｃｒｏｇ～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約１０ｍｉｃｒｏｇ～約７５ｍｉｃｒｏｇ、約１５ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約１５ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１５ｍｉｃｒｏｇ～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏ～約９０ｍｉｃｒｏｇ、約４０ｍｉｃｒｏｇ～約７０ｍｉｃｒｏｇ、約１ｍｉｃｒｏｇ、約５ｍｉｃｒｏｇ、約１０ｍｉｃｒｏｇ、約２０ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏｇ、約４０ｍｉｃｒｏｇ、約５０ｍｉｃｒｏｇ、約６０ｍｉｃｒｏｇ、約７０ｍｉｃｒｏｇ、約８０ｍｉｃｒｏｇ、約９０ｍｉｃｒｏｇ、約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１１０ｍｉｃｒｏｇ、約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約１３０ｍｉｃｒｏｇ、約１４０ｍｉｃｒｏｇ、約１５０ｍｉｃｒｏｇ、約１６０ｍｉｃｒｏｇ、約１７０ｍｉｃｒｏｇ、約１８０ｍｉｃｒｏｇ、約１４０ｍｉｃｒｏｇ～約３１５ｍｉｃｒｏｇ、約２０ｍｉｃｒｏｇ～約７５０ｍｉｃｒｏｇ、約１２ｍｉｃｒｏｇ～約３００ｍｉｃｒｏｇ、約１２ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約０．０１ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｇ、約０．０１ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約０．５～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約１．５～約６０ｍｉｃｒｏｇ、約１．８～約６０ｍｉｃｒｏｇ、および約１．８～約４０ｍｉｃｒｏｇから、各発生時に独立して選択される、上記８５に記載の方法。
８８． 用量が、１日あたり対象の体重１ｋｇあたりのオレアンドリン単位量に基づいて、約０．０５～０．５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、または約０．０５～０．３ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日を含む、上記８５に記載の方法。
８９． ａ）オレアンドリンの１日用量が、最高で約１００ｍｉｃｒｏｇ／日、約８０ｍｉｃｒｏｇ／日、約６０ｍｉｃｒｏｇ／日、約４０ｍｉｃｒｏｇ／日、約３８．４ｍｉｃｒｏｇ／日もしくは約３０ｍｉｃｒｏｇ／日であり、かつ／またはｂ）オレアンドリンの１日用量が、最小で０．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．８ｍｉｃｒｏｇ／日、約２ｍｉｃｒｏｇ／日、もしくは約５ｍｉｃｒｏｇ／日である、上記８５に記載の方法。
９０． 用量が、１日２回または約１２時間毎投与され、前記用量におけるオレアンドリンの量が、約０．２５～約５０ｍｉｃｒｏｇまたは約０．９～１５ｍｉｃｒｏｇである、上記８５に記載の方法。
９１． 前記１日あたり１回以上の用量のオレアンドリンが、１日あたり２～１０回、１日あたり２～８回、１日あたり２～６回、１日あたり２～４回、１日あたり２回、１日あたり３回、１日あたり４回、１日あたり５回、１日あたり６回、１日あたり７回、１日あたり８回、１日あたり９回、または１日あたり１０回である、上記８５に記載の方法。
９２． オレアンドリンが、オレアンドリン含有バイオマスから得られる少なくとも１つの抽出物を含む組成物に存在する、上記８５に記載の方法。
９３． 前記抽出物が、熱水抽出物、溶媒抽出物、および超臨界流体抽出物からなる群から、各発生時に独立して選択される、上記９２に記載の方法。
９４． 前記１回以上の用量の投与後、前記対象におけるオレアンドリンの血漿中濃度が、血漿１ｍＬあたりのオレアンドリンの量として、約０．０５～約２ｎｇ／ｍｌ、約０．００５～約１０ｎｇ／ｍＬ、約０．００５～約８ｎｇ／ｍＬ、約０．０１～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０２～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０３～約６ｎｇ／ｍＬ、約０．０４～約５ｎｇ／ｍＬ、または約０．０５～約２．５ｎｇ／ｍＬの範囲である、上記８５に記載の方法。
９５． コロナウイルス感染を治療する方法であって、前記感染を有する対象に、複数回の治療有効用量のオレアンドリンまたはオレアンドリン含有組成物を投与することを含む、方法。
９６． 前記複数回の治療有効用量が、１週間あたり２日以上にわたって１日あたり１回以上投与される、上記９５に記載の方法。
９７． 投与が１カ月あたり１週間以上継続する、上記９６に記載の方法。
９８． 投与が１年あたり１カ月以上継続する、上記９７に記載の方法。
９９． 前記コロナウイルスが、ヒトに対して病原性である、上記９５に記載の方法。
１００． 前記コロナウイルスが、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＣＯＶＩＤ－１９（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）、ＣｏＶ ２２９Ｅ、ＣｏＶ ＮＬ６３、ＣｏＶ ＯＣ４３、ＣｏＶ ＨＫＵ１、およびＣｏＶ ＨＫＵ２０からなる群から選択される、上記９９に記載の方法。
１０１． オレアンドリンが、オレアンドリン含有バイオマスから得られる少なくとも１つの抽出物を含む組成物に存在する、上記９５に記載の方法。
１０２． 前記抽出物が、熱水抽出物、溶媒抽出物、および超臨界流体抽出物からなる群から、各発生時に独立して選択される、上記１０１に記載の方法。
１０３． 前記抽出物が、オレアンドリンおよび前記バイオマスから抽出された１つ以上の化合物の組み合わせを含む、上記１０１に記載の方法。
１０４． 前記１つ以上の化合物が、１つ以上の強心配糖体前駆体、強心配糖体の１つ以上のグリコン構成物質、またはそれらの組み合わせを含む、上記１０３に記載の方法。
１０５． 前記投与が、全身、非経口、頬側、経腸、筋肉内、皮下、舌下、経口、口腔、またはそれらの組み合わせである、上記９５に記載の方法。
１０６． 前記抗ウイルス組成物が、感染直後、または感染後１日から５日以内の任意の時間、またはウイルス感染の確定診断後の最も早い時間に投与される、上記９５に記載の方法。
１０７． 前記抗ウイルス組成物が、一次抗ウイルス療法、補助抗ウイルス療法、もしくは併用抗ウイルス療法として投与され、または前記投与が、前記組成物の少なくとも１つの他の抗ウイルス組成物、もしくは前記ウイルス感染に関連する症状を治療するための少なくとも１つの他の組成物との別々の投与もしくは同時投与を含む、上記９５に記載の方法。
１０８． １日あたりのオレアンドリンの総用量が、約１ｍｉｃｒｏｇ～約１８０ｍｉｃｒｏｇ、約１ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約５ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１０ｍｉｃｒｏｇ～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約１０ｍｉｃｒｏｇ～約７５ｍｉｃｒｏｇ、約１５ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約１５ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１５ｍｉｃｒｏｇ～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏ～約９０ｍｉｃｒｏｇ、約４０ｍｉｃｒｏｇ～約７０ｍｉｃｒｏｇ、約１ｍｉｃｒｏｇ、約５ｍｉｃｒｏｇ、約１０ｍｉｃｒｏｇ、約２０ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏｇ、約４０ｍｉｃｒｏｇ、約５０ｍｉｃｒｏｇ、約６０ｍｉｃｒｏｇ、約７０ｍｉｃｒｏｇ、約８０ｍｉｃｒｏｇ、約９０ｍｉｃｒｏｇ、約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１１０ｍｉｃｒｏｇ、約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約１３０ｍｉｃｒｏｇ、約１４０ｍｉｃｒｏｇ、約１５０ｍｉｃｒｏｇ、約１６０ｍｉｃｒｏｇ、約１７０ｍｉｃｒｏｇ、約１８０ｍｉｃｒｏｇ、約１４０ｍｉｃｒｏｇ～約３１５ｍｉｃｒｏｇ、約２０ｍｉｃｒｏｇ～約７５０ｍｉｃｒｏｇ、約１２ｍｉｃｒｏｇ～約３００ｍｉｃｒｏｇ、約１２ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約０．０１ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｇ、約０．０１ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約０．５～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約１．５～約６０ｍｉｃｒｏｇ、約１．８から約６０ｍｉｃｒｏｇ、および約１．８～約４０ｍｉｃｒｏｇから、各発生時に独立して選択される、上記９５に記載の方法。
１０９． 用量が、１日あたり対象の体重１ｋｇあたりのオレアンドリン単位量に基づいて、約０．０５～０．５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、または約０．０５～０．３ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日を含む、上記９５に記載の方法。
１１０． ａ）オレアンドリンの１日用量が、最高で約１００ｍｉｃｒｏｇ／日、約８０ｍｉｃｒｏｇ／日、約６０ｍｉｃｒｏｇ／日、約４０ｍｉｃｒｏｇ／日、約３８．４ｍｉｃｒｏｇ／日もしくは約３０ｍｉｃｒｏｇ／日であり、かつ／またはｂ）オレアンドリンの１日用量が、最小で０．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．８ｍｉｃｒｏｇ／日、約２ｍｉｃｒｏｇ／日、もしくは約５ｍｉｃｒｏｇ／日である、上記９５に記載の方法。
１１１． 用量が、１日２回または約１２時間毎投与され、前記用量におけるオレアンドリンの量が、約０．２５～約５０ｍｉｃｒｏｇまたは約０．９～１５ｍｉｃｒｏｇである、上記９５に記載の方法。
１１２． 前記１日あたり１回以上の用量のオレアンドリンが、１日あたり２～１０回、１日あたり２～８回、１日あたり２～６回、１日あたり２～４回、１日あたり２回、１日あたり３回、１日あたり４回、１日あたり５回、１日あたり６回、１日あたり７回、１日あたり８回、１日あたり９回、または１日あたり１０回である、上記９５に記載の方法。
１１３． 前記１回以上の用量の投与後、前記対象におけるオレアンドリンの血漿中濃度が、血漿１ｍＬあたりのオレアンドリンの量として、約０．０５～約２ｎｇ／ｍｌ、約０．００５～約１０ｎｇ／ｍＬ、約０．００５～約８ｎｇ／ｍＬ、約０．０１～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０２～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０３～約６ｎｇ／ｍＬ、約０．０４～約５ｎｇ／ｍＬ、または約０．０５～約２．５ｎｇ／ｍＬの範囲である、上記９５に記載の方法。
１１４． 前記抽出物が、オレアンドリン、ならびに強心配糖体、グリコン、アグリコン、ステロイド、トリテルペン、多糖類、糖類、アルカロイド、脂肪、タンパク質、ネリタロシド、オドロシド、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、オレアンドリゲニン、オレアシドＡ、ベツリン（ウルサ－１２－エン－３β，２８－ジオール）、２８－ノルウルサ－１２－エン－３β－オール、ウルサ－１２－エン－３β－オール、３β，３β－ヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－酸、３β，２０α－ジヒドロキシウルサ－２１－エン－２８－酸、３β，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－２８－酸、３β，１３β－ジヒドロキシウルサ－１１－エン－２８－酸、３β，１２α－ジヒドロキシオレアナン－２８，１３β－オリド、３β，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアナン－２８－酸、ホモポリガラクツロナン、アラビノガラツロナン、クロロゲン酸、コーヒー酸、Ｌ－キナ酸、４－クマロイル－ＣｏＡ、３－Ｏ－カフェオイルキナ酸、５－Ｏ－カフェオイルキナ酸、カルデノリドＢ－１、カルデノリドＢ－２、オレアゲニン、ネリジジノシド、ネリゾシド、オドロシド－Ｈ、ガラクツロン酸、ラムノース、アラビノース、キシロース、およびガラクトースで構成される３－ベータ－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－５－ベータ，１４ベータ－ジヒドロキシ－カルド－２０（２２）－エノリドペクチン性多糖類、１７０００～１２００００Ｄの範囲のＭＷ、または約３５０００Ｄ、約３０００Ｄ、約５５００Ｄ、もしくは約１２０００ＤのＭＷを有する多糖類、カルデノリドモノグリコシド、カルデノリドＮ－１、カルデノリドＮ－２、カルデノリドＮ－３、カルデノリドＮ－４、プレグナン、４，６－ジエン－３，１２，２０－トリオン、２０Ｒ－ヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，１２－ジオン、１６ベータ，１７ベータ－エポキシ－１２ベータ－ヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，２０－ジオン、１２ベータ－ヒドロキシプレグナ－４，６，１６－トリエン－３，２０－ジオン（ネリジエノンＡ）、２０Ｓ，２１－ジヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，１２－ジオン（ネリジエノンＢ）、ネリウクマル酸、イソネリウクマル酸、オレアンデロン酸、オレアンデレン、８アルファ－メトキシラブダン－１８－酸、１２－ウルセン、カネロシド、ネリウモシド、３β－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－２α－ヒドロキシ－８，１４β－エポキシ－５β－カルダ－１６：１７，２０：２２－ジエノリド、３β－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－２α，１４β－ジヒドロキシ－５β－カルダ－１６：１７，２０：２２－ジエノリド、３β，２７－ジヒドロキシ－ウルサ－１８－エン－１３，２８－オリド、３β，２２α，２８－トリヒドロキシ－２５－ノル－ルプ－１（１０），２０（２９）－ジエン－２－オン、ｃｉｓ－カレニン（３β－ヒドロキシ－２８－Ｚ－ｐ－クマロイルオキシ－ウルサ－１２－エン－２７－酸）、ｔｒａｎｓ－カレニン（３－β－ヒドロキシ－２８－Ｅ－ｐ－クマロイルオキシ－ウルサ－１２－エン－２７－酸）、３ベータ－ヒドロキシ－５アルファ－カルダ－１４（１５），２０（２２）－ジエノリド（ベータ－アンヒドロエピジギトキシゲニン）、３ベータ－Ｏ－（Ｄ－ジギタロシル）－２１－ヒドロキシ－５ベータ－カルダ－８，１４，１６，２０（２２）－テトラエノリド（ネリウモゲニン－Ａ－３ベータ－Ｄ－ジギタロシド）、プロセラゲニン、ネリジエノンＡ、３ベータ，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－２８－酸、３ベータ，１３ベータ－ジヒドロキシウルサ－１１－エン－２８－酸、３ベータ－ヒドロキシウルサ－１２－エン－２８－アルデヒド、２８－オルウルサ－１２－エン－３ベータ－オール、ウルサ－１２－エン－３ベータ－オール、ウルサ－１２－エン－３ベータ，２８－ジオール、３ベータ，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－酸、（２０Ｓ，２４Ｒ）－エポキシダンマラン－３ベータ，２５－ジオール、２０ベータ，２８－エポキシ－２８アルファ－メトキシタラキサステラン－３ベータ－オール、２０ベータ，２８－エポキシタラキサステル－２１－エン－３ベータ－オール、２８－ノル－ウルサ－１２－エン－３ベータ，１７ベータ－ジオール、３ベータ－ヒドロキシウルサ－１２－エン－２８－アルデヒド、アルファ－ネリウルセート、ベータ－ネリウルセート、３アルファ－アセトフェノキシ－ウルサ－１２－エン－２８－酸、３ベータ－アセトフェノキシ－ウルサ－１２－エン－２８－酸、オレアンデロール酸、カネロジオン、３β－ｐ－ヒドロキシフェノキシ－１１α－メトキシ－１２α－ヒドロキシ－２０－ウルセン－２８－酸、２８－ヒドロキシ－２０（２９）－ルペン－３，７－ジオン、カネロシン、３アルファ－ヒドロキシ－ウルサ－１８，２０－ジエン－２８－酸、Ｄ－サルメントース、Ｄ－ジギノース、ネリジジノシド、ネリゾシド、イソリシノール酸、ゲンチオビオシルネリゴシド、ゲンチオビオシルボーモントシド、ゲンチオビオシルオレアンドリン、ホリネリン、１２β－ヒドロキシ－５β－カルダ－８，１４，１６，２０（２２）－テトラエノリド、８β－ヒドロキシ－ジギトキシゲニン、Δ１６－８β－ヒドロキシ－ジギトキシゲニン、Δ１６－ネリアゲニン、ウバオール、ウルソールアルデヒド、２７（ｐ－クマロイルオキシ）ウルソール酸、オレアンデロール、１６－アンヒドロ－デアセチル－ネリゴシド、９－Ｄ－ヒドロキシ－ｃｉｓ－１２－オクタデカン酸、アジゴシド、アジネリン、アルファ－アミリン、ベータ－シトステロール、カンペステロール、カウチューク、カプリン酸、カプリル酸、コリン、コルネリン、コルテネリン、デアセチルオレアンドリン、ジアセチル－ネリゴシド、ホリアンドリン、プソイドクラミン、ケルセチン、ケルセチン－３－ラムノグルコシド、ケルシトリン、ロサギニン、ルチン、ステアリン酸、スチグマステロール、ストロスペシド、ウレヒトキシン、およびウザリゲニンからなる群から選択される１つ以上の化合物を含む、上記１１３
に記載の方法。

Claims (114)

1. 治療を必要とする対象においてウイルス感染を治療する方法であって、オレアンドリン、ジゴキシン、またはそれらの組み合わせを含む１回以上の用量の抗ウイルス組成物を前記対象に投与することを含み、前記ウイルス感染が、プラスセンス一本鎖エンベロープＲＮＡウイルス（（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡ－Ｖ）によって引き起こされる、方法。
2. ウイルス感染に罹るリスクのある対象を治療する予防方法であって、前記対象が前記ウイルス感染に罹る前に長期治療期間にわたって繰り返しの頻度で１回以上の用量の抗ウイルス組成物を前記対象に慢性的に投与し、それによって前記対象が前記ウイルス感染に罹ることを予防することを含み、前記抗ウイルス組成物が、オレアンドリン、ジゴキシン、またはそれらの組み合わせを含み、前記ウイルス感染が、プラスセンス一本鎖エンベロープＲＮＡウイルス（（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡ－Ｖ）によって引き起こされる、方法。
3. 前記対象が前記ウイルス感染を有するかどうかを判定することと、
   前記抗ウイルス組成物の投与を指示することと、
   処方された初期投与計画に従って一定期間、前記抗ウイルス組成物の初期用量を前記対象に投与することと、
   前記抗ウイルス組成物による治療に対する対象の臨床応答および／または治療応答の妥当性を定期的に判定することと、
   前記対象の臨床応答および／または治療応答が妥当である場合、所望の臨床エンドポイントが達成されるまで、必要に応じて前記抗ウイルス組成物による治療を継続すること、または
   前記対象の臨床応答および／または治療応答が前記初期用量および初期投与計画で妥当でない場合、前記対象の所望の臨床応答および／または治療応答が達成されるまで、前記用量を漸増または漸減させることと、を含む、請求項１に記載の方法。
4. 用量が、前記対象の体重１Ｋｇあたり約１００～１０００ｍｇまたは約１００～１０００ｍｉｃｒｏｇの抗ウイルス組成物を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。
5. １日あたり投与される前記組成物の一部としてのオレアンドリンの量が、１４０ｍｉｃｒｏｇ～３１５ｍｉｃｒｏｇ、２０ｍｉｃｒｏｇ～７５０ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～３００ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～１２０ｍｉｃｒｏｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｉｃｒｏｇ、約０．５～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約１．５～約６０ｍｉｃｒｏｇ、約１．８～約６０ｍｉｃｒｏｇ、または約１．８～約４０ｍｉｃｒｏｇからなる群から選択される、請求項１～４のいずれか一項に記載の方法。
6. 前記抗ウイルス組成物の用量が、１日２回または約１２時間毎投与され、前記用量におけるオレアンドリンの量が、約０．２５～約５０ｍｉｃｒｏｇまたは約０．９～５ｍｉｃｒｏｇである、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。
7. 前記抗ウイルス組成物の用量が、１日あたり対象の体重１ｋｇあたりの抗ウイルス組成物の単位量に基づいて約０．０５～０．５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、または約０．０５～０．３ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日を含む、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。
8. ａ）前記抗ウイルス組成物におけるオレアンドリンの１日用量が、最高で約１００ｍｉｃｒｏｇ／日、約８０ｍｉｃｒｏｇ／日、約６０ｍｉｃｒｏｇ／日、約４０ｍｉｃｒｏｇ／日、約３８．４ｍｉｃｒｏｇ／日もしくは約３０ｍｉｃｒｏｇ／日、および／またはｂ）前記抗ウイルス組成物におけるオレアンドリンの１日用量が、最小で０．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．８ｍｉｃｒｏｇ／日、約２ｍｉｃｒｏｇ／日、もしくは約５ｍｉｃｒｏｇ／日である、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。
9. 強心配糖体が、少なくとも２つの投与相：負荷相および維持相、で投与される、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。
10. 前記強心配糖体が、ジゴキシンであり、前記負荷相および維持相の前記投与計画が、以下の通りである、請求項９に記載の方法。
    

    

    
    
11. 前記１回以上の用量の投与後、前記対象におけるオレアンドリンの血漿中濃度が、血漿１ｍＬあたりのオレアンドリンの量として、約０．０５～約２ｎｇ／ｍｌ、約０．００５～約１０ｎｇ／ｍL、約０．００５～約８ｎｇ／ｍL、約０．０１～約７ｎｇ／ｍL、約０．０２～約７ｎｇ／ｍL、約０．０３～約６ｎｇ／ｍL、約０．０４～約５ｎｇ／ｍL、または約０．０５～約２．５ｎｇ／ｍLの範囲である、請求項１～１０のいずれか一項に記載の方法。
12. 治療を必要とする対象においてウイルス感染を治療する方法であって、オレアンドリンを含む１回以上の用量の抗ウイルス組成物を前記対象に投与することを含み、前記ウイルス感染が、プラスセンス一本鎖エンベロープＲＮＡウイルス（（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡ－Ｖ）によって引き起こされ、
    用量が、前記対象の体重１Ｋｇあたり約１００～１０００ｍｇまたは約１００～１０００ｍｉｃｒｏｇの抗ウイルス組成物を含み；または、１日あたり投与されるオレアンドリンの量が、１４０ｍｉｃｒｏｇ～３１５ｍｉｃｒｏｇ、２０ｍｉｃｒｏｇ～７５０ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～３００ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～１２０ｍｉｃｒｏｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｉｃｒｏｇ、約０．５～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約１．５～約６０ｍｉｃｒｏｇ、約１．８～約６０ｍｉｃｒｏｇ、もしくは約１．８～約４０ｍｉｃｒｏｇからなる群から選択され；または、前記抗ウイルス組成物の用量が、１日あたり対象の体重１ｋｇあたりの抗ウイルス組成物の単位量に基づいて、約０．０５～０．５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、もしくは約０．０５～０．３ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日を含み；
    前記１回以上の用量の投与後、前記対象におけるオレアンドリンの血漿中濃度が、血漿１ｍＬあたりのオレアンドリンの量として、約０．０５～約２ｎｇ／ｍｌ、約０．００５～約１０ｎｇ／ｍＬ、約０．００５～約８ｎｇ／ｍＬ、約０．０１～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０２～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０３～約６ｎｇ／ｍＬ、約０．０４～約５ｎｇ／ｍＬ、または約０．０５～約２．５ｎｇ／ｍＬの範囲である、方法。
13. 前記（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶが、コロナウイルス科、フラビウイルス科、トガウイルス科、およびアルテルウイルス科からなる群から選択されるウイルスである、請求項１～１２のいずれか一項に記載の方法。
14. 前記（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶが、ヒトに対して病原性であるコロナウイルスである、請求項１～１３のいずれか一項に記載の方法。
15. 前記コロナウイルスが、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＣＯＶＩＤ－１９（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）、ＣｏＶ ２２９Ｅ、ＣｏＶ ＮＬ６３、ＣｏＶ ＯＣ４３、ＣｏＶ ＨＫＵ１、およびＣｏＶ ＨＫＵ２０からなる群から選択される、請求項１４に記載の方法。
16. 前記（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶが、フラビウイルス、黄熱ウイルス、デング熱ウイルス、日本脳炎ウイルス、西ナイルウイルス、ジカウイルス、ダニ媒介性脳炎ウイルス、キャサヌール森林病ウイルス、アルフルマ（Ａｌｋｈｕｒｍａ）病ウイルス、オムスク出血熱ウイルス、およびポワッサンウイルスからなる群から選択されるウイルスである、請求項１～１３のいずれか一項に記載の方法。
17. 前記（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶが、アルボウイルス、東部ウマ脳脊髄炎ウイルス（ＥＥＥＶ）、西部ウマ脳脊髄炎ウイルス（ＷＥＥＶ）、ベネズエラウマ脳脊髄炎ウイルス（ＶＥＥＶ）、チクングニアウイルス（ＣＨＩＫＶ）、オニョンニョンウイルス（ＯＮＮＶ）、ポゴスタ病ウイルス、シンドビスウイルス、ロスリバー熱ウイルス（ＲＲＶ）およびセムリキ森林ウイルスからなる群から選択されるトガウイルス科ウイルスである、請求項１～１３のいずれか一項に記載の方法。
18. 治療を必要とする対象においてウイルス感染を治療する方法であって、オレアンドリン、ジゴキシンまたはそれらの組み合わせを含む１回以上の用量の抗ウイルス組成物を前記対象に投与することを含み、前記ウイルス感染が、マイナスセンス一本鎖エンベロープＲＮＡウイルス（（－）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡ－Ｖ）によって引き起こされる、方法。
19. ウイルス感染に罹るリスクのある対象を治療する予防方法であって、前記対象が前記ウイルス感染に罹る前に長期治療期間にわたって繰り返しの頻度で１回以上の用量の抗ウイルス組成物を前記対象に慢性的に投与し、それによって前記対象が前記ウイルス感染に罹ることを予防することを含み、前記抗ウイルス組成物が、オレアンドリン、ジゴキシンまたはそれらの組み合わせを含み、前記ウイルス感染が、マイナスセンス一本鎖エンベロープＲＮＡウイルス（（－）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡ－Ｖ）によって引き起こされる、方法。
20. 前記対象が前記ウイルス感染を有するかどうかを判定することと、
    前記抗ウイルス組成物の投与を指示することと、
    処方された初期投与計画に従って一定期間、前記抗ウイルス組成物の初期用量を前記対象に投与することと、
    前記抗ウイルス組成物による治療に対する対象の臨床応答および／または治療応答の妥当性を定期的に判定することと、
    前記対象の臨床応答および／または治療応答が妥当である場合、所望の臨床エンドポイントが達成されるまで、必要に応じて前記抗ウイルス組成物による治療を継続すること、または
    前記対象の臨床応答および／または治療応答が前記初期用量および初期投与計画で妥当でない場合、前記対象の所望の臨床応答および／または治療応答が達成されるまで、前記用量を漸増または漸減させることと、を含む、請求項１８に記載の方法。
21. 用量が、前記対象の体重１ｋｇあたり約１００～１０００ｍｇまたは約１００～１０００ｍｉｃｒｏｇの抗ウイルス組成物を含む、請求項１８～２０のいずれか一項に記載の方法。
22. １日あたり投与される前記組成物の一部としてのオレアンドリンの量が、１４０ｍｉｃｒｏｇ～３１５ｍｉｃｒｏｇ、２０ｍｉｃｒｏｇ～７５０ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～３００ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～１２０ｍｉｃｒｏｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｉｃｒｏｇ、約０．５～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約１．５～約６０ｍｉｃｒｏｇ、約１．８～約６０ｍｉｃｒｏｇ、または約１．８～約４０ｍｉｃｒｏｇからなる群から選択される、請求項１８～２１のいずれか一項に記載の方法。
23. 前記抗ウイルス組成物の用量が、１日２回または約１２時間毎投与され、前記用量におけるオレアンドリンの量が、約０．２５～約５０ｍｉｃｒｏｇまたは約０．９～５ｍｉｃｒｏｇである、請求項１８～２２のいずれか一項に記載の方法。
24. 前記抗ウイルス組成物の用量が、１日あたり対象の体重１ｋｇあたりの抗ウイルス組成物の単位量に基づいて、約０．０５～０．５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、または約０．０５～０．３ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日を含む、請求項１８～２３のいずれか一項に記載の方法。
25. ａ）前記抗ウイルス組成物におけるオレアンドリンの１日用量が、最高で約１００ｍｉｃｒｏｇ／日、約８０ｍｉｃｒｏｇ／日、約６０ｍｉｃｒｏｇ／日、約４０ｍｉｃｒｏｇ／日、約３８．４ｍｉｃｒｏｇ／日もしくは約３０ｍｉｃｒｏｇ／日であり、かつ／またはｂ）前記抗ウイルス組成物におけるオレアンドリンの１日用量が、最小で約０．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．８ｍｉｃｒｏｇ／日、約２ｍｉｃｒｏｇ／日、もしくは約５ｍｉｃｒｏｇ／日である、請求項１８～２４のいずれか一項に記載の方法。
26. 前記１回以上の用量の投与後、前記対象におけるオレアンドリンの血漿中濃度が、血漿１ｍＬあたりのオレアンドリンの量として、約０．０５～約２ｎｇ／ｍｌ、約０．００５～約１０ｎｇ／ｍＬ、約０．００５～約８ｎｇ／ｍＬ、約０．０１～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０２～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０３～約６ｎｇ／ｍＬ、約０．０４～約５ｎｇ／ｍＬ、または約０．０５～約２．５ｎｇ／ｍＬの範囲である、請求項１８～２５のいずれか一項に記載の方法。
27. 治療を必要とする対象においてウイルス感染を治療する方法であって、
    オレアンドリンを含む１回以上の用量の抗ウイルス組成物を前記対象に投与することを含み、前記ウイルス感染が、マイナスセンス一本鎖エンベロープＲＮＡウイルス（（－）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡ－Ｖ）によって引き起こされ、
    用量が、前記対象の体重１Ｋｇあたり約１００～１０００ｍｇもしくは約１００～１０００ｍｉｃｒｏｇの抗ウイルス組成物を含み；または、１日あたり投与されるオレアンドリンの量が、１４０ｍｉｃｒｏｇ～３１５ｍｉｃｒｏｇ、２０ｍｉｃｒｏｇ～７５０ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～３００ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～１２０ｍｉｃｒｏｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｉｃｒｏｇ、約０．５～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約１．５～約６０ｍｉｃｒｏｇ、約１．８～約６０ｍｉｃｒｏｇ、もしくは約１．８～約４０ｍｉｃｒｏｇからなる群から選択され；または、前記抗ウイルス組成物の用量が、１日あたり対象の体重１ｋｇあたりの抗ウイルス組成物の単位量に基づいて、約０．０５～０．５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、もしくは約０．０５～０．３ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日を含み；
    前記１回以上の用量の投与後、前記対象におけるオレアンドリンの血漿中濃度が、血漿１ｍＬあたりのオレアンドリンの量として、約０．０５～約２ｎｇ／ｍｌ、約０．００５～約１０ｎｇ／ｍＬ、約０．００５～約８ｎｇ／ｍＬ、約０．０１～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０２～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０３～約６ｎｇ／ｍＬ、約０．０４～約５ｎｇ／ｍＬ、または約０．０５～約２．５ｎｇ／ｍＬの範囲である、方法。
28. 前記（－）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶが、アレナウイルス科ウイルス、ブニヤウイルス科（ブニヤウイルス目）ウイルス、フィロウイルス科ウイルス、オルトミクソウイルス科ウイルス、パラミクソウイルス科ウイルス、およびラブドウイルス科ウイルスからなる群から選択されるウイルスである、請求項１８～２７のいずれか一項に記載の方法。
29. 前記（－）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶが、ラッサウイルス、無菌性髄膜炎、ガナリトウイルス、フニンウイルス、ルジョウイルス、マチュポウイルス、サビアウイルスおよびホワイトウォーターアロヨウイルスからなる群から選択されるアレナウイルス科ウイルスである、請求項１８～２８のいずれか一項に記載の方法。
30. 前記（－）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶが、ハンタウイルス、クリミア－コンゴ出血熱オルトナイロウイルスからなる群から選択されるブニヤウイルス科ウイルスである、請求項１８～２８のいずれか一項に記載の方法。
31. 前記（－）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶが、ムンプスウイルス、ニパウイルス、ヘンドラウイルス、呼吸器多核体ウイルス（ＲＳＶ）、ヒトパラインフルエンザウイルス（ＨＰＩＶ）、およびＮＤＶからなる群から選択されるパラミクソウイルス科ウイルスである、請求項１８～２８のいずれか一項に記載の方法。
32. 前記（－）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶが、インフルエンザウイルス（ＡからＣ）、イサウイルス、トゴトウイルス、クアランジャウイルス、Ｈ１Ｎ１、Ｈ２Ｎ２、Ｈ３Ｎ２、Ｈ１Ｎ２、スペイン風邪、アジア風邪、ホンコン風邪、ソ連風邪からなる群から選択されるオルトミクソウイルス科ウイルスである、請求項１８～２８のいずれか一項に記載の方法。
33. 前記（－）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶが、狂犬病ウイルス、ベシクロウイルス、リッサウイルス、サイトラブドウイルスからなる群から選択されるラブドウイルス科ウイルスである、請求項１８～２８のいずれか一項に記載の方法。
34. ウイルス感染を有する対象に、オレアンドリン、ジゴキシンまたはそれらの組み合わせを含む１回以上の用量の強心配糖体を舌下投与することを含む、本明細書における請求項１～３３のいずれか一項に記載のウイルス感染を治療する方法。
35. コロナウイルス感染を治療する方法であって、前記感染を有する対象に、複数回の治療有効用量のオレアンドリン、ジゴキシンまたはそれらの組み合わせを投与することを含む、方法。
36. 前記複数回の用量が、１週間あたり２日以上にわたって１日あたり投与される１回以上の用量である、請求項３４または３５に記載の方法。
37. 投与が１カ月あたり１週間以上継続する、請求項３６に記載の方法。
38. 投与が１年あたり１カ月以上継続する、請求項３７に記載の方法。
39. 前記コロナウイルスが、ヒトに対して病原性である、請求項３４～３８のいずれか一項に記載の方法。
40. 前記コロナウイルスが、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＣＯＶＩＤ－１９（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）、ＣｏＶ ２２９Ｅ、ＣｏＶ ＮＬ６３、ＣｏＶ ＯＣ４３、ＣｏＶ ＨＫＵ１、およびＣｏＶ ＨＫＵ２０からなる群から選択される、請求項３４～３９のいずれか一項に記載の方法。
41. 前記対象の血漿におけるオレアンドリンの濃度が、オレアンドリンの投与後、血漿１ｍＬあたりのオレアンドリンの量として、ａ）約１０ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以下、約５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以下、約２．５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以下、約２ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以下、もしくは約１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以下；ｂ）約０．０００１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．０００５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．００１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．００１５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．０１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．０１５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．１ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．１５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、約０．０５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上、もしくは約０．０７５ｍｉｃｒｏｇ／ｍＬ以上；ｃ）項目ａ）の任意の上限と、項目ｃ）の任意の下限との組み合わせ；または、ｄ）約０．０５～約２ｎｇ／ｍｌ、約０．００５～約１０ｎｇ／ｍＬ、約０．００５～約８ｎｇ／ｍＬ、約０．０１～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０２～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０３～約６ｎｇ／ｍＬ、約０．０４～約５ｎｇ／ｍＬ、もしくは約０．０５～約２．５ｎｇ／ｍＬの範囲である、請求項３４～４０のいずれか一項に記載の方法。
42. 用量が、前記対象の体重１Ｋｇあたり約１００～１０００ｍｇまたは約１００～１０００ｍｉｃｒｏｇの抗ウイルス組成物を含む、請求項３４～４０のいずれか一項に記載の方法。
43. １日あたり投与される前記組成物の一部としてのオレアンドリンの量が、１４０ｍｉｃｒｏｇ～３１５ｍｉｃｒｏｇ、２０ｍｉｃｒｏｇ～７５０ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～３００ｍｉｃｒｏｇ、１２ｍｉｃｒｏｇ～１２０ｍｉｃｒｏｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｇ、０．０１ｍｉｃｒｏｇ～１００ｍｉｃｒｏｇ、約０．５～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約１．５～約６０ｍｉｃｒｏｇ、約１．８～約６０ｍｉｃｒｏｇ、または約１．８～約４０ｍｉｃｒｏｇからなる群から選択される、請求項３４～４２のいずれか一項に記載の方法。
44. 前記抗ウイルス組成物の用量が、１日２回または約１２時間毎投与され、前記用量におけるオレアンドリンの量が、約０．２５～約５０ｍｉｃｒｏｇまたは約０．９～５ｍｉｃｒｏｇである、請求項３４～４３のいずれか一項に記載の方法。
45. 前記抗ウイルス組成物の用量が、１日あたり対象の体重１ｋｇあたりの抗ウイルス組成物の単位量に基づいて、約０．０５～０．５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、または約０．０５～０．３ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日を含む、請求項３４～４４のいずれか一項に記載の方法。
46. ａ）前記抗ウイルス組成物におけるオレアンドリンの１日用量が、最高で約１００ｍｉｃｒｏｇ／日、約８０ｍｉｃｒｏｇ／日、約６０ｍｉｃｒｏｇ／日、約４０ｍｉｃｒｏｇ／日、約３８．４ｍｉｃｒｏｇ／日もしくは約３０ｍｉｃｒｏｇ／日であり、かつ／またはｂ）前記抗ウイルス組成物におけるオレアンドリンの１日用量が、最小で約０．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．８ｍｉｃｒｏｇ／日、約２ｍｉｃｒｏｇ／日、もしくは約５ｍｉｃｒｏｇ／日である、請求項３４～４５のいずれか一項に記載の方法。
47. 強心配糖体が、少なくとも２つの投与相：負荷相および維持相、で投与される、請求項１～４６のいずれか一項に記載の方法。
48. 前記強心配糖体が、ジゴキシンであり、前記負荷相および維持相の前記投与計画が、以下の通りである、請求項４７に記載の方法。
    

    

    
    
49. 前記抗ウイルス組成物が、ａ）オレアンドリン；ｂ）オレアンドリン、オレアノール酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）およびウルソール酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）の組み合わせ；ｃ）オレアンドリン、オレアノール酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）およびベツリン酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）の組み合わせ；ｄ）オレアンドリン、オレアノール酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）、ウルソール酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）およびベツリン酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）の組み合わせ；ｅ）オレアンドリン、オレアノール酸（遊離酸またはその塩）、ウルソール酸（遊離酸または塩）、およびベツリン酸（遊離酸または）の組み合わせ；またはｆ）オレアンドリン、ならびにオレアノール酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）、ウルソール酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）、ベツリン酸（遊離酸、塩、またはプロドラッグ）からなる群から選択される少なくとも２つのトリテルペンの組み合わせを含む、請求項１～４８のいずれか一項に記載の方法。
50. 抗ウイルス組成物の用量において、オレアンドリン対前記トリテルペンのモル比が、以下のいずれかから選択される、請求項４９に記載の方法。
    

    

    
    
51. 総トリテルペン含有量（オレアノール酸＋ウルソール酸＋ベツリン酸）対オレアンドリンのモル比が、約１５：１～約５：１、または約１２：１～約８：１、または約１００：１～約１５：１、または約１００：１～約５０：１、または約１００：１～約７５：１、または約１００：１～約８０：１、または約１００：１～約９０：１、または約１０：１の範囲である、請求項４９に記載の方法。
52. 個々のトリテルペン（オレアノール酸（ＯＡ）：ウルソール酸（ＵＡ）：ベツリン酸（ＢＡ））対オレアンドリン（ＯＬ）のモル比が、以下の範囲である：２～８（ＯＡ）：２～８（ＵＡ）：０．１～１（ＢＡ）：０．５～１．５（ＯＬ）；または３～６（ＯＡ）：３～６（ＵＡ）：０．３～８（ＢＡ）：０．７～１．２（ＯＬ）；または４～５（ＯＡ）：４～５（ＵＡ）：０．４～０．７（ＢＡ）：０．９～１．１（ＯＬ）；４．６（ＯＡ）：４．４（ＵＡ）：０．６（ＢＡ）：１（ＯＬ）；約９～１２（ＯＡ）：最大約２（ＵＡ）：最大約２、または約１０（ＯＡ）：約１（ＵＡ）：約１、または約９～１２（ＯＡ）：約０．１～２（ＵＡ）：約０．１～２（ＢＡ）、または約９～１１（ＯＡ）：約０．５～１．５（ＵＡ）：約０．５～１．５（ＢＡ）、または約９．５～１０．５（ＯＡ）：約０．７５～１．２５（ＵＡ）：約０．７５～１．２５（ＢＡ）、または約９．５～１０．５（ＯＡ）：約０．８～１．２（ＵＡ）：約０．８～１．２（ＢＡ）、または約９．７５～１０．５（ＯＡ）：約０．９～１．１（ＵＡ）：約０．９～１．１（ＢＡ）、請求項４９に記載の方法。
53. 前記抗ウイルス組成物が、バイオマスの抽出物を含む、請求項１～５２のいずれか一項に記載の方法。
54. 前記抽出物が、熱水抽出、冷水抽出、有機溶媒抽出、超臨界流体抽出、亜臨界液体抽出、またはそれらの組み合わせにより調製される、請求項５３に記載の方法。
55. 前記バイオマスが、Ｎｅｒｉｕｍ種、またはＡｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ種からの植物材料のバイオマスである、請求項５３または５４に記載の方法。
56. 前記抽出物が、オレアンドリン、および前記バイオマスから抽出された１つ以上の化合物の組み合わせを含む、請求項５３～５５のいずれか一項に記載の方法。
57. 前記抽出物が、１つ以上の強心配糖体前駆体、強心配糖体の１つ以上のグリコン構成物質、またはそれらの組み合わせをさらに含む、請求項５３～５６のいずれか一項に記載の方法。
58. 前記抽出物が、オレアンドリン、ならびに強心配糖体、グリコン、アグリコン、ステロイド、トリテルペン、多糖類、糖類、アルカロイド、脂肪、タンパク質、ネリタロシド、オドロシド、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、オレアンドリゲニン、オレアシドＡ、ベツリン（ウルサ－１２－エン－３β，２８－ジオール）、２８－ノルウルサ－１２－エン－３β－オール、ウルサ－１２－エン－３β－オール、３β，３β－ヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－酸、３β，２０α－ジヒドロキシウルサ－２１－エン－２８－酸、３β，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－２８－酸、３β，１３β－ジヒドロキシウルサ－１１－エン－２８－酸、３β，１２α－ジヒドロキシオレアナン－２８，１３β－オリド、３β，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアナン－２８－酸、ホモポリガラクツロナン、アラビノガラツロナン、クロロゲン酸、コーヒー酸、Ｌ－キナ酸、４－クマロイル－ＣｏＡ、３－Ｏ－カフェオイルキナ酸、５－Ｏ－カフェオイルキナ酸、カルデノリドＢ－１、カルデノリドＢ－２、オレアゲニン、ネリジジノシド、ネリゾシド、オドロシド－Ｈ、ガラクツロン酸、ラムノース、アラビノース、キシロース、およびガラクトースで構成される３－ベータ－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－５－ベータ，１４ベータ－ジヒドロキシ－カルド－２０（２２）－エノリドペクチン性多糖類、１７０００～１２００００Ｄの範囲のＭＷ、または約３５０００Ｄ、約３０００Ｄ、約５５００Ｄ、もしくは約１２０００ＤのＭＷを有する多糖類、カルデノリドモノグリコシド、カルデノリドＮ－１、カルデノリドＮ－２、カルデノリドＮ－３、カルデノリドＮ－４、プレグナン、４，６－ジエン－３，１２，２０－トリオン、２０Ｒ－ヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，１２－ジオン、１６ベータ，１７ベータ－エポキシ－１２ベータ－ヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，２０－ジオン、１２ベータ－ヒドロキシプレグナ－４，６，１６－トリエン－３，２０－ジオン（ネリジエノンＡ）、２０Ｓ，２１－ジヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，１２－ジオン（ネリジエノンＢ）、ネリウクマル酸、イソネリウクマル酸、オレアンデロン酸、オレアンデレン、８アルファ－メトキシラブダン－１８－酸、１２－ウルセン、カネロシド、ネリウモシド、３β－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－２α－ヒドロキシ－８，１４β－エポキシ－５β－カルダ－１６：１７，２０：２２－ジエノリド、３β－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－２α，１４β－ジヒドロキシ－５β－カルダ－１６：１７，２０：２２－ジエノリド、３β，２７－ジヒドロキシ－ウルサ－１８－エン－１３，２８－オリド、３β，２２α，２８－トリヒドロキシ－２５－ノル－ルプ－１（１０），２０（２９）－ジエン－２－オン、ｃｉｓ－カレニン（３β－ヒドロキシ－２８－Ｚ－ｐ－クマロイルオキシ－ウルサ－１２－エン－２７－酸）、ｔｒａｎｓ－カレニン（３－β－ヒドロキシ－２８－Ｅ－ｐ－クマロイルオキシ－ウルサ－１２－エン－２７－酸）、３ベータ－ヒドロキシ－５アルファ－カルダ－１４（１５），２０（２２）－ジエノリド（ベータ－アンヒドロエピジギトキシゲニン）、３ベータ－Ｏ－（Ｄ－ジギタロシル）－２１－ヒドロキシ－５ベータ－カルダ－８，１４，１６，２０（２２）－テトラエノリド（ネリウモゲニン－Ａ－３ベータ－Ｄ－ジギタロシド）、プロセラゲニン、ネリジエノンＡ、３ベータ，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－２８－酸、３ベータ，１３ベータ－ジヒドロキシウルサ－１１－エン－２８－酸、３ベータ－ヒドロキシウルサ－１２－エン－２８－アルデヒド、２８－オルウルサ－１２－エン－３ベータ－オール、ウルサ－１２－エン－３ベータ－オール、ウルサ－１２－エン－３ベータ，２８－ジオール、３ベータ，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－酸、（２０Ｓ，２４Ｒ）－エポキシダンマラン－３ベータ，２５－ジオール、２０ベータ，２８－エポキシ－２８アルファ－メトキシタラキサステラン－３ベータ－オール、２０ベータ，２８－エポキシタラキサステル－２１－エン－３ベータ－オール、２８－ノル－ウルサ－１２－エン－３ベータ，１７ベータ－ジオール、３ベータ－ヒドロキシウルサ－１２－エン－２８－アルデヒド、アルファ－ネリウルセート、ベータ－ネリウルセート、３アルファ－アセトフェノキシ－ウルサ－１２－エン－２８－酸、３ベータ－アセトフェノキシ－ウルサ－１２－エン－２８－酸、オレアンデロール酸、カネロジオン、３β－ｐ－ヒドロキシフェノキシ－１１α－メトキシ－１２α－ヒドロキシ－２０－ウルセン－２８－酸、２８－ヒドロキシ－２０（２９）－ルペン－３，７－ジオン、カネロシン、３アルファ－ヒドロキシ－ウルサ－１８，２０－ジエン－２８－酸、Ｄ－サルメントース、Ｄ－ジギノース、ネリジジノシド、ネリゾシド、イソリシノール酸、ゲンチオビオシルネリゴシド、ゲンチオビオシルボーモントシド、ゲンチオビオシルオレアンドリン、ホリネリン、１２β－ヒドロキシ－５β－カルダ－８，１４，１６，２０（２２）－テトラエノリド、８β－ヒドロキシ－ジギトキシゲニン、Δ１６－８β－ヒドロキシ－ジギトキシゲニン、Δ１６－ネリアゲニン、ウバオール、ウルソールアルデヒド、２７（ｐ－クマロイルオキシ）ウルソール酸、オレアンデロール、１６－アンヒドロ－デアセチル－ネリゴシド、９－Ｄ－ヒドロキシ－ｃｉｓ－１２－オクタデカン酸、アジゴシド、アジネリン、アルファ－アミリン、ベータ－シトステロール、カンペステロール、カウチューク、カプリン酸、カプリル酸、コリン、コルネリン、コルテネリン、デアセチルオレアンドリン、ジアセチル－ネリゴシド、ホリアンドリン、プソイドクラミン、ケルセチン、ケルセチン－３－ラムノグルコシド、ケルシトリン、ロサギニン、ルチン、ステアリン酸、スチグマステロール、ストロスペシド、ウレヒトキシン、およびウザリゲニンからなる群から選択される１つ以上の化合物を含む、請求項５３～５７のいずれか一項に記載の方法。
59. 前記抽出物の１日用量が、最高で約１００ｍｉｃｒｏｇ／日、約８０ｍｉｃｒｏｇ／日、約６０ｍｉｃｒｏｇ／日、約４０ｍｉｃｒｏｇ／日、約３８．４ｍｉｃｒｏｇ／日または約３０ｍｉｃｒｏｇ／日である、請求項５３～５８のいずれか一項に記載の方法。
60. 前記抽出物の１日用量が、最小で０．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．８ｍｉｃｒｏｇ／日、約２ｍｉｃｒｏｇ／日、もしくは約５ｍｉｃｒｏｇ／日である、請求項５２～５８のいずれか一項に記載の方法。
61. 前記対象の血液または血漿中のウイルス力価が、前記治療の結果として低減されるかまたは増加しない、請求項１～６０のいずれか一項に記載の方法。
62. 前記投与が、全身、非経口、頬側、経腸、筋肉内、皮下、舌下、経口、口腔、またはそれらの組み合わせである、請求項１～６１のいずれか一項に記載の方法。
63. １回以上の用量が、毎日、毎週、または毎月の頻度で投与される、請求項１～６２のいずれか一項に記載の方法。
64. 前記抗ウイルス組成物が、感染直後、または感染後１日から５日以内の任意の時間、またはウイルス感染の確定診断後の最も早い時間に投与される、請求項１～６３のいずれか一項に記載の方法。
65. 前記抗ウイルス組成物は、一次抗ウイルス療法、補助抗ウイルス療法、または併用抗ウイルス療法として投与される、請求項１～６４のいずれか一項に記載の方法。
66. 前記投与が、前記抗ウイルス組成物の少なくとも１つの他の抗ウイルス組成物、または前記ウイルス感染に関連する症状を治療するための少なくとも１つの他の組成物との別々の投与もしくは同時投与を含む、請求項１～６５のいずれか一項に記載の方法。
67. 前記症状が、炎症、嘔吐、悪心、頭痛、発熱、下痢、悪心、蕁麻疹、結膜炎、倦怠感、筋肉痛、関節痛、発作、および麻痺からなる群から選択される、請求項６６に記載の方法。
68. オレアンドリン、ジゴキシンまたはそれらの組み合わせを含む、舌下剤形。
69. 少なくとも１つの液体担体をさらに含む、請求項６８に記載の剤形。
70. オレアンドリンを含み、Ｎｅｒｉｕｍ ｓｐ．またはＴｈｅｖｅｔｉａ ｓｐ．のバイオマスの亜臨界液体抽出により調製されている、抽出物
71. 前記亜臨界液体が、二酸化炭素を含み、アルコールをさらに含んでもよい、請求項７０に記載の抽出物。
72. オレアンドリンを含む抽出物を調製する方法であって、オレアンドリン含有バイオマスに、アルコールをさらに含んでもよい亜臨界液体二酸化炭素を用いて、オレアンドリンを前記バイオマスから抽出するのに十分な期間抽出を行うことを含む、方法。
73. オレアンドリンを含む抽出物を調製する方法であって、
    オレアンドリン含有バイオマスを、亜臨界液体二酸化炭素を含み、アルコールをさらに含んでもよい抽出液で、オレアンドリンを前記バイオマスから抽出するのに十分な期間抽出することと、
    前記バイオマスを前記抽出液から分離する一方、前記抽出液を保持することと、次いで
    抽出液を除去し、それにより前記抽出物を形成することと、を含む、方法。
74. オレアンドリン含有抽出物の組み合わせを生成する方法であって、
    第１のオレアンドリン含有バイオマスに有機溶媒抽出を行って、オレアンドリン含有有機溶媒抽出物を得ることと、
    第２のオレアンドリン含有バイオマスに亜臨界液体（ＳｂＣＬ）抽出（ＳｂＣＬＥ）を行って、オレアンドリン含有ＳｂＣＬ抽出物を得ることと、
    前記オレアンドリン含有有機溶媒抽出物および前記オレアンドリン含有ＳｂＣＬ抽出物を組み合わせて、前記組み合わせたオレアンドリン含有抽出物を得ることと、を含む、方法。
75. 本明細書に定義されるオレアンドリン含有有機溶媒抽出物の一部、および本明細書に定義されるオレアンドリン含有ＳｂＣＬ抽出物の一部を含む、改善されたオレアンドリン含有組成物。
76. コロナウイルス感染を治療する方法であって、それを必要とする対象に、少なくとも約５日～約１カ月の治療期間にわたって１日あたり複数回用量のオレアンドリンを投与することを含み、オレアンドリンが、オレアンドリン含有バイオマスから得られる少なくとも１つの抽出物を含む薬学的組成物に存在する、方法。
77. １日あたりのオレアンドリンの総用量が、約１ｍｉｃｒｏｇ～約１８０ｍｉｃｒｏｇ、約１ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約５ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１０ｍｉｃｒｏｇ～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約１０ｍｉｃｒｏｇ～約７５ｍｉｃｒｏｇ、約１５ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約１５ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１５ｍｉｃｒｏｇ～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏ～約９０ｍｉｃｒｏｇ、約４０ｍｉｃｒｏｇ～約７０ｍｉｃｒｏｇ、約１ｍｉｃｒｏｇ、約５ｍｉｃｒｏｇ、約１０ｍｉｃｒｏｇ、約２０ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏｇ、約４０ｍｉｃｒｏｇ、約５０ｍｉｃｒｏｇ、約６０ｍｉｃｒｏｇ、約７０ｍｉｃｒｏｇ、約８０ｍｉｃｒｏｇ、約９０ｍｉｃｒｏｇ、約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１１０ｍｉｃｒｏｇ、約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約１３０ｍｉｃｒｏｇ、約１４０ｍｉｃｒｏｇ、約１５０ｍｉｃｒｏｇ、約１６０ｍｉｃｒｏｇ、約１７０ｍｉｃｒｏｇ、または約１８０ｍｉｃｒｏｇから、各発生時に独立して選択される、請求項７６に記載の方法。
78. 前記１日あたり複数回用量のオレアンドリンが、１日あたり２～１０回、１日あたり２～８回、１日あたり２～６回、１日あたり２～４回、１日あたり２回、１日あたり３回、１日あたり４回、１日あたり５回、１日あたり６回、１日あたり７回、１日あたり８回、１日あたり９回、または１日あたり１０回である、請求項７６または７７に記載の方法。
79. 前記薬学的組成物が、Ｎｅｒｉｕｍ種から得られる少なくとも２つの抽出物を含む、請求項７６～７８のいずれか一項に記載の方法。
80. 前記抽出物が、熱水抽出物、溶媒抽出物、超臨界流体抽出物、および亜臨界液体抽出物からなる群から、各発生時に独立して選択される、請求項７９に記載の方法。
81. 本明細書に記載されるウイルス感染を治療する方法。
82. 本明細書に記載される組成物。
83. 本明細書に記載される抗ウイルス組成物。
84. 本明細書に記載されるオレアンドリン含有組成物。
85. コロナウイルス感染を治療する方法であって、それを必要とする対象に、１日あたり１回以上の用量のオレアンドリンを、少なくとも約５日間～約１カ月以上の治療期間投与することを含み、前記コロナウイルス感染が、ヒトに対して病原性である、方法。
86. 前記コロナウイルスが、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＣＯＶＩＤ－１９（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）、ＣｏＶ ２２９Ｅ、ＣｏＶ ＮＬ６３、ＣｏＶ ＯＣ４３、ＣｏＶ ＨＫＵ１、およびＣｏＶ ＨＫＵ２０からなる群から選択される、請求項８５に記載の方法。
87. １日あたりのオレアンドリンの総用量が、約１ｍｉｃｒｏｇ～約１８０ｍｉｃｒｏｇ、約１ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約５ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１０ｍｉｃｒｏｇ～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約１０ｍｉｃｒｏｇ～約７５ｍｉｃｒｏｇ、約１５ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約１５ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１５ｍｉｃｒｏｇ～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏ～約９０ｍｉｃｒｏｇ、約４０ｍｉｃｒｏｇ～約７０ｍｉｃｒｏｇ、約１ｍｉｃｒｏｇ、約５ｍｉｃｒｏｇ、約１０ｍｉｃｒｏｇ、約２０ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏｇ、約４０ｍｉｃｒｏｇ、約５０ｍｉｃｒｏｇ、約６０ｍｉｃｒｏｇ、約７０ｍｉｃｒｏｇ、約８０ｍｉｃｒｏｇ、約９０ｍｉｃｒｏｇ、約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１１０ｍｉｃｒｏｇ、約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約１３０ｍｉｃｒｏｇ、約１４０ｍｉｃｒｏｇ、約１５０ｍｉｃｒｏｇ、約１６０ｍｉｃｒｏｇ、約１７０ｍｉｃｒｏｇ、約１８０ｍｉｃｒｏｇ、約１４０ｍｉｃｒｏｇ～約３１５ｍｉｃｒｏｇ、約２０ｍｉｃｒｏｇ～約７５０ｍｉｃｒｏｇ、約１２ｍｉｃｒｏｇ～約３００ｍｉｃｒｏｇ、約１２ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約０．０１ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｇ、約０．０１ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約０．５～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約１．５～約６０ｍｉｃｒｏｇ、約１．８～約６０ｍｉｃｒｏｇ、および約１．８～約４０ｍｉｃｒｏｇから、各発生時に独立して選択される、請求項８５に記載の方法。
88. 用量が、１日あたり対象の体重１ｋｇあたりのオレアンドリン単位量に基づいて、約０．０５～０．５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、または約０．０５～０．３ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日を含む、請求項８５に記載の方法。
89. ａ）オレアンドリンの１日用量が、最高で約１００ｍｉｃｒｏｇ／日、約８０ｍｉｃｒｏｇ／日、約６０ｍｉｃｒｏｇ／日、約４０ｍｉｃｒｏｇ／日、約３８．４ｍｉｃｒｏｇ／日もしくは約３０ｍｉｃｒｏｇ／日であり、かつ／またはｂ）オレアンドリンの１日用量が、最小で０．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．８ｍｉｃｒｏｇ／日、約２ｍｉｃｒｏｇ／日、もしくは約５ｍｉｃｒｏｇ／日である、請求項８５に記載の方法。
90. 用量が、１日２回または約１２時間毎投与され、前記用量におけるオレアンドリンの量が、約０．２５～約５０ｍｉｃｒｏｇまたは約０．９～１５ｍｉｃｒｏｇである、請求項８５に記載の方法。
91. 前記１日あたり１回以上の用量のオレアンドリンが、１日あたり２～１０回、１日あたり２～８回、１日あたり２～６回、１日あたり２～４回、１日あたり２回、１日あたり３回、１日あたり４回、１日あたり５回、１日あたり６回、１日あたり７回、１日あたり８回、１日あたり９回、または１日あたり１０回である、請求項８５に記載の方法。
92. オレアンドリンが、オレアンドリン含有バイオマスから得られる少なくとも１つの抽出物を含む組成物に存在する、請求項８５に記載の方法。
93. 前記抽出物が、熱水抽出物、溶媒抽出物、および超臨界流体抽出物からなる群から、各発生時に独立して選択される、請求項９２に記載の方法。
94. 前記１回以上の用量の投与後、前記対象におけるオレアンドリンの血漿中濃度が、血漿１ｍＬあたりのオレアンドリンの量として、約０．０５～約２ｎｇ／ｍｌ、約０．００５～約１０ｎｇ／ｍＬ、約０．００５～約８ｎｇ／ｍＬ、約０．０１～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０２～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０３～約６ｎｇ／ｍＬ、約０．０４～約５ｎｇ／ｍＬ、または約０．０５～約２．５ｎｇ／ｍＬの範囲である、請求項８５に記載の方法。
95. コロナウイルス感染を治療する方法であって、前記感染を有する対象に、複数回の治療有効用量のオレアンドリンまたはオレアンドリン含有組成物を投与することを含む、方法。
96. 前記複数回の治療有効用量が、１週間あたり２日以上にわたって１日あたり１回以上投与される、請求項９５に記載の方法。
97. 投与が１カ月あたり１週間以上継続する、請求項９６に記載の方法。
98. 投与が１年あたり１カ月以上継続する、請求項９７に記載の方法。
99. 前記コロナウイルスが、ヒトに対して病原性である、請求項９５に記載の方法。
100. 前記コロナウイルスが、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＣＯＶＩＤ－１９（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）、ＣｏＶ ２２９Ｅ、ＣｏＶ ＮＬ６３、ＣｏＶ ＯＣ４３、ＣｏＶ ＨＫＵ１、およびＣｏＶ ＨＫＵ２０からなる群から選択される、請求項９９に記載の方法。
101. オレアンドリンが、オレアンドリン含有バイオマスから得られる少なくとも１つの抽出物を含む組成物に存在する、請求項９５に記載の方法。
102. 前記抽出物が、熱水抽出物、溶媒抽出物、および超臨界流体抽出物からなる群から、各発生時に独立して選択される、請求項１０１に記載の方法。
103. 前記抽出物が、オレアンドリンおよび前記バイオマスから抽出された１つ以上の化合物の組み合わせを含む、請求項１０１に記載の方法。
104. 前記１つ以上の化合物が、１つ以上の強心配糖体前駆体、強心配糖体の１つ以上のグリコン構成物質、またはそれらの組み合わせを含む、請求項１０３に記載の方法。
105. 前記投与が、全身、非経口、頬側、経腸、筋肉内、皮下、舌下、経口、口腔、またはそれらの組み合わせである、請求項９５に記載の方法。
106. 前記抗ウイルス組成物が、感染直後、または感染後１日から５日以内の任意の時間、またはウイルス感染の確定診断後の最も早い時間に投与される、請求項９５に記載の方法。
107. 前記抗ウイルス組成物が、一次抗ウイルス療法、補助抗ウイルス療法、もしくは併用抗ウイルス療法として投与され、または前記投与が、前記組成物の少なくとも１つの他の抗ウイルス組成物、もしくは前記ウイルス感染に関連する症状を治療するための少なくとも１つの他の組成物との別々の投与もしくは同時投与を含む、請求項９５に記載の方法。
108. １日あたりのオレアンドリンの総用量が、約１ｍｉｃｒｏｇ～約１８０ｍｉｃｒｏｇ、約１ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約５ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１０ｍｉｃｒｏｇ～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約１０ｍｉｃｒｏｇ～約７５ｍｉｃｒｏｇ、約１５ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約１５ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１５ｍｉｃｒｏｇ～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏ～約９０ｍｉｃｒｏｇ、約４０ｍｉｃｒｏｇ～約７０ｍｉｃｒｏｇ、約１ｍｉｃｒｏｇ、約５ｍｉｃｒｏｇ、約１０ｍｉｃｒｏｇ、約２０ｍｉｃｒｏｇ、約３０ｍｉｃｒｏｇ、約４０ｍｉｃｒｏｇ、約５０ｍｉｃｒｏｇ、約６０ｍｉｃｒｏｇ、約７０ｍｉｃｒｏｇ、約８０ｍｉｃｒｏｇ、約９０ｍｉｃｒｏｇ、約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１１０ｍｉｃｒｏｇ、約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約１３０ｍｉｃｒｏｇ、約１４０ｍｉｃｒｏｇ、約１５０ｍｉｃｒｏｇ、約１６０ｍｉｃｒｏｇ、約１７０ｍｉｃｒｏｇ、約１８０ｍｉｃｒｏｇ、約１４０ｍｉｃｒｏｇ～約３１５ｍｉｃｒｏｇ、約２０ｍｉｃｒｏｇ～約７５０ｍｉｃｒｏｇ、約１２ｍｉｃｒｏｇ～約３００ｍｉｃｒｏｇ、約１２ｍｉｃｒｏｇ～約１２０ｍｉｃｒｏｇ、約０．０１ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｇ、約０．０１ｍｉｃｒｏｇ～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約０．５～約１００ｍｉｃｒｏｇ、約１～約８０ｍｉｃｒｏｇ、約１．５～約６０ｍｉｃｒｏｇ、約１．８から約６０ｍｉｃｒｏｇ、および約１．８～約４０ｍｉｃｒｏｇから、各発生時に独立して選択される、請求項９５に記載の方法。
109. 用量が、１日あたり対象の体重１ｋｇあたりのオレアンドリン単位量に基づいて、約０．０５～０．５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日、または約０．０５～０．３ｍｉｃｒｏｇ／ｋｇ／日を含む、請求項９５に記載の方法。
110. ａ）オレアンドリンの１日用量が、最高で約１００ｍｉｃｒｏｇ／日、約８０ｍｉｃｒｏｇ／日、約６０ｍｉｃｒｏｇ／日、約４０ｍｉｃｒｏｇ／日、約３８．４ｍｉｃｒｏｇ／日もしくは約３０ｍｉｃｒｏｇ／日であり、かつ／またはｂ）オレアンドリンの１日用量が、最小で０．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．５ｍｉｃｒｏｇ／日、約１．８ｍｉｃｒｏｇ／日、約２ｍｉｃｒｏｇ／日、もしくは約５ｍｉｃｒｏｇ／日である、請求項９５に記載の方法。
111. 用量が、１日２回または約１２時間毎投与され、前記用量におけるオレアンドリンの量が、約０．２５～約５０ｍｉｃｒｏｇまたは約０．９～１５ｍｉｃｒｏｇである、請求項９５に記載の方法。
112. 前記１日あたり１回以上の用量のオレアンドリンが、１日あたり２～１０回、１日あたり２～８回、１日あたり２～６回、１日あたり２～４回、１日あたり２回、１日あたり３回、１日あたり４回、１日あたり５回、１日あたり６回、１日あたり７回、１日あたり８回、１日あたり９回、または１日あたり１０回である、請求項９５に記載の方法。
113. 前記１回以上の用量の投与後、前記対象におけるオレアンドリンの血漿中濃度が、血漿１ｍＬあたりのオレアンドリンの量として、約０．０５～約２ｎｇ／ｍｌ、約０．００５～約１０ｎｇ／ｍＬ、約０．００５～約８ｎｇ／ｍＬ、約０．０１～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０２～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０３～約６ｎｇ／ｍＬ、約０．０４～約５ｎｇ／ｍＬ、または約０．０５～約２．５ｎｇ／ｍＬの範囲である、請求項９５に記載の方法。
114. 前記抽出物が、オレアンドリン、ならびに強心配糖体、グリコン、アグリコン、ステロイド、トリテルペン、多糖類、糖類、アルカロイド、脂肪、タンパク質、ネリタロシド、オドロシド、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、オレアンドリゲニン、オレアシドＡ、ベツリン（ウルサ－１２－エン－３β，２８－ジオール）、２８－ノルウルサ－１２－エン－３β－オール、ウルサ－１２－エン－３β－オール、３β，３β－ヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－酸、３β，２０α－ジヒドロキシウルサ－２１－エン－２８－酸、３β，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－２８－酸、３β，１３β－ジヒドロキシウルサ－１１－エン－２８－酸、３β，１２α－ジヒドロキシオレアナン－２８，１３β－オリド、３β，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアナン－２８－酸、ホモポリガラクツロナン、アラビノガラツロナン、クロロゲン酸、コーヒー酸、Ｌ－キナ酸、４－クマロイル－ＣｏＡ、３－Ｏ－カフェオイルキナ酸、５－Ｏ－カフェオイルキナ酸、カルデノリドＢ－１、カルデノリドＢ－２、オレアゲニン、ネリジジノシド、ネリゾシド、オドロシド－Ｈ、ガラクツロン酸、ラムノース、アラビノース、キシロース、およびガラクトースで構成される３－ベータ－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－５－ベータ，１４ベータ－ジヒドロキシ－カルド－２０（２２）－エノリドペクチン性多糖類、１７０００～１２００００Ｄの範囲のＭＷ、または約３５０００Ｄ、約３０００Ｄ、約５５００Ｄ、もしくは約１２０００ＤのＭＷを有する多糖類、カルデノリドモノグリコシド、カルデノリドＮ－１、カルデノリドＮ－２、カルデノリドＮ－３、カルデノリドＮ－４、プレグナン、４，６－ジエン－３，１２，２０－トリオン、２０Ｒ－ヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，１２－ジオン、１６ベータ，１７ベータ－エポキシ－１２ベータ－ヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，２０－ジオン、１２ベータ－ヒドロキシプレグナ－４，６，１６－トリエン－３，２０－ジオン（ネリジエノンＡ）、２０Ｓ，２１－ジヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，１２－ジオン（ネリジエノンＢ）、ネリウクマル酸、イソネリウクマル酸、オレアンデロン酸、オレアンデレン、８アルファ－メトキシラブダン－１８－酸、１２－ウルセン、カネロシド、ネリウモシド、３β－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－２α－ヒドロキシ－８，１４β－エポキシ－５β－カルダ－１６：１７，２０：２２－ジエノリド、３β－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－２α，１４β－ジヒドロキシ－５β－カルダ－１６：１７，２０：２２－ジエノリド、３β，２７－ジヒドロキシ－ウルサ－１８－エン－１３，２８－オリド、３β，２２α，２８－トリヒドロキシ－２５－ノル－ルプ－１（１０），２０（２９）－ジエン－２－オン、ｃｉｓ－カレニン（３β－ヒドロキシ－２８－Ｚ－ｐ－クマロイルオキシ－ウルサ－１２－エン－２７－酸）、ｔｒａｎｓ－カレニン（３－β－ヒドロキシ－２８－Ｅ－ｐ－クマロイルオキシ－ウルサ－１２－エン－２７－酸）、３ベータ－ヒドロキシ－５アルファ－カルダ－１４（１５），２０（２２）－ジエノリド（ベータ－アンヒドロエピジギトキシゲニン）、３ベータ－Ｏ－（Ｄ－ジギタロシル）－２１－ヒドロキシ－５ベータ－カルダ－８，１４，１６，２０（２２）－テトラエノリド（ネリウモゲニン－Ａ－３ベータ－Ｄ－ジギタロシド）、プロセラゲニン、ネリジエノンＡ、３ベータ，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－２８－酸、３ベータ，１３ベータ－ジヒドロキシウルサ－１１－エン－２８－酸、３ベータ－ヒドロキシウルサ－１２－エン－２８－アルデヒド、２８－オルウルサ－１２－エン－３ベータ－オール、ウルサ－１２－エン－３ベータ－オール、ウルサ－１２－エン－３ベータ，２８－ジオール、３ベータ，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－酸、（２０Ｓ，２４Ｒ）－エポキシダンマラン－３ベータ，２５－ジオール、２０ベータ，２８－エポキシ－２８アルファ－メトキシタラキサステラン－３ベータ－オール、２０ベータ，２８－エポキシタラキサステル－２１－エン－３ベータ－オール、２８－ノル－ウルサ－１２－エン－３ベータ，１７ベータ－ジオール、３ベータ－ヒドロキシウルサ－１２－エン－２８－アルデヒド、アルファ－ネリウルセート、ベータ－ネリウルセート、３アルファ－アセトフェノキシ－ウルサ－１２－エン－２８－酸、３ベータ－アセトフェノキシ－ウルサ－１２－エン－２８－酸、オレアンデロール酸、カネロジオン、３β－ｐ－ヒドロキシフェノキシ－１１α－メトキシ－１２α－ヒドロキシ－２０－ウルセン－２８－酸、２８－ヒドロキシ－２０（２９）－ルペン－３，７－ジオン、カネロシン、３アルファ－ヒドロキシ－ウルサ－１８，２０－ジエン－２８－酸、Ｄ－サルメントース、Ｄ－ジギノース、ネリジジノシド、ネリゾシド、イソリシノール酸、ゲンチオビオシルネリゴシド、ゲンチオビオシルボーモントシド、ゲンチオビオシルオレアンドリン、ホリネリン、１２β－ヒドロキシ－５β－カルダ－８，１４，１６，２０（２２）－テトラエノリド、８β－ヒドロキシ－ジギトキシゲニン、Δ１６－８β－ヒドロキシ－ジギトキシゲニン、Δ１６－ネリアゲニン、ウバオール、ウルソールアルデヒド、２７（ｐ－クマロイルオキシ）ウルソール酸、オレアンデロール、１６－アンヒドロ－デアセチル－ネリゴシド、９－Ｄ－ヒドロキシ－ｃｉｓ－１２－オクタデカン酸、アジゴシド、アジネリン、アルファ－アミリン、ベータ－シトステロール、カンペステロール、カウチューク、カプリン酸、カプリル酸、コリン、コルネリン、コルテネリン、デアセチルオレアンドリン、ジアセチル－ネリゴシド、ホリアンドリン、プソイドクラミン、ケルセチン、ケルセチン－３－ラムノグルコシド、ケルシトリン、ロサギニン、ルチン、ステアリン酸、スチグマステロール、ストロスペシド、ウレヒトキシン、およびウザリゲニンからなる群から選択される１つ以上の化合物を含む、請求項１１３に記載の方法。

Images