JP2022164822A5 - - Google Patents

Claims (24)

1. 細胞においてＢ２Ｍ遺伝子を不活性化させるための組成物であって、前記組成物が、ヌクレアーゼ又は前記ヌクレアーゼをコードするポリヌクレオチドを含み、前記ヌクレアーゼが、前記Ｂ２Ｍ遺伝子における標的部位に結合し、前記標的部位が、配列番号１２６又は配列番号１２７を含む、組成物。
2. 前記ヌクレアーゼが、挿入及び／又は欠失により前記Ｂ２Ｍ遺伝子を改変する、請求項１に記載の組成物。
3. 前記ヌクレアーゼが、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）を含む、請求項１又は２に記載の組成物。
4. 前記ＺＦＮが、ジンクフィンガータンパク質（ＺＦＰ）を含み、前記ＺＦＰが、Ｆ１からＦ５又はＦ１からＦ６の順番づけられた５つ又は６つのジンクフィンガーを含み、各ジンクフィンガーが認識ヘリックス領域を含み、前記ジンクフィンガータンパク質が、下記表
   
   の一つの行に示す順序で前記認識ヘリックス領域を含む、請求項３に記載の組成物。
5. 前記ＺＦＮが第１のＺＦＮ及び第２のＺＦＮを含み、前記第１のＺＦＮが５つのジンクフィンガーＦ１～Ｆ５を含み、前記５つのジンクフィンガーＦ１～Ｆ５が、それぞれ、配列番号１２８、４２、１２９、１３０及び６６からなり、前記第２のＺＦＮが６つのジンクフィンガーＦ１～Ｆ６を含み、前記６つのジンクフィンガーＦ１～Ｆ６が、それぞれ、配列番号１３１、１３２、２２、１３３、２９及び１３４からなる、請求項４に記載の組成物。
6. 改変部位が、配列番号１２６及び配列番号１２７を含む配列の間に配置される、請求項５に記載の組成物。
7. ヌクレアーゼ又は前記ヌクレアーゼをコードするポリヌクレオチドを含む組成物であって、細胞のゲノムに、１つ又は複数のドナーポリヌクレオチドを組み込む方法における使用のための組成物であって、
   前記方法が、
   （ａ）前記ヌクレアーゼ又は前記ヌクレアーゼをコードするポリヌクレオチドを前記細胞と接触させることであって、前記ヌクレアーゼがＢ２Ｍ遺伝子における標的部位に結合し、前記標的部位が配列番号１２６又は配列番号１２７を含む、前記ヌクレアーゼ又は前記ポリヌクレオチドを前記細胞と接触させること、
   （ｂ）１つ又は複数のドナーポリヌクレオチドを前記細胞と接触させること、及び
   （ｃ）前記細胞のゲノム内において、１つ又は複数のドナーポリヌクレオチドを、切断されたＢ２Ｍ遺伝子に組み込むこと
   を含む、組成物。
8. 前記ヌクレアーゼが、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）を含む、請求項７に記載の組成物。
9. 前記ＺＦＮが、ジンクフィンガータンパク質（ＺＦＰ）を含み、前記ＺＦＰが、Ｆ１からＦ５又はＦ１からＦ６の順番づけられた５つ又は６つのジンクフィンガーを含み、各ジンクフィンガーが認識ヘリックス領域を含み、前記ジンクフィンガータンパク質が、下記表
   
   の一つの行に示す順序で前記認識ヘリックス領域を含む、請求項８に記載の組成物。
10. 前記ＺＦＮが第１のＺＦＮ及び第２のＺＦＮを含み、前記第１のＺＦＮが５つのジンクフィンガーＦ１～Ｆ５を含み、前記５つのジンクフィンガーＦ１～Ｆ５が、それぞれ、配列番号１２８、４２、１２９、１３０及び６６からなり、前記第２のＺＦＮが６つのジンクフィンガーＦ１～Ｆ６を含み、前記６つのジンクフィンガーＦ１～Ｆ６が、それぞれ、配列番号１３１、１３２、２２、１３３、２９及び１３４からなる、請求項９に記載の組成物。
11. 前記ＺＦＮが、配列番号１２６及び配列番号１２７を含む配列の間に配置される改変部位を改変する、請求項１０に記載の組成物。
12. 前記ドナーポリヌクレオチドが、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）又は抗体結合Ｔ細胞受容体（ＡＣＴＲ）をコードする、請求項７～１１のいずれか１項に記載の組成物。
13. 細胞においてＢ２Ｍ遺伝子を不活性化するｉｎ ｖｉｔｒｏ又はｅｘ ｖｉｖｏ方法であって、
    ヌクレアーゼ又は前記ヌクレアーゼをコードするポリヌクレオチドを、前記細胞と接触させることを含み、前記ヌクレアーゼが前記Ｂ２Ｍ遺伝子における標的部位に結合し、前記標的部位が配列番号１２６又は配列番号１２７を含む、ｉｎ ｖｉｔｒｏ又はｅｘ ｖｉｖｏ方法。
14. 前記ヌクレアーゼが、挿入及び／又は欠失によって、前記Ｂ２Ｍ遺伝子を改変する、請求項１３に記載のｉｎ ｖｉｔｒｏ又はｅｘ ｖｉｖｏ方法。
15. 前記ヌクレアーゼが、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）を含む、請求項１３又は１４に記載のｉｎ ｖｉｔｒｏ又はｅｘ ｖｉｖｏ方法。
16. 前記ＺＦＮがジンクフィンガータンパク質（ＺＦＰ）を含み、前記ＺＦＰが、Ｆ１からＦ５又はＦ１からＦ６の順番づけられた５つ又は６つのジンクフィンガーを含み、各ジンクフィンガーが認識ヘリックス領域を含み、前記ジンクフィンガータンパク質が、下記表
    
    の一つの行に示す順序で前記認識ヘリックス領域を含む、請求項１５に記載のｉｎ ｖｉｔｒｏ又はｅｘ ｖｉｖｏ方法。
17. 前記ＺＦＮが第１のＺＦＮ及び第２のＺＦＮを含み、前記第１のＺＦＮが５つのジンクフィンガーＦ１～Ｆ５を含み、前記５つのジンクフィンガーＦ１～Ｆ５が、それぞれ、配列番号１２８、４２、１２９、１３０及び６６からなり、前記第２のＺＦＮが６つのジンクフィンガーＦ１～Ｆ６を含み、前記６つのジンクフィンガーＦ１～Ｆ６が、それぞれ、配列番号１３１、１３２、２２、１３３、２９及び１３４からなる、請求項１６に記載の組成物。
18. 前記ＺＦＮが、配列番号１２６及び配列番号１２７を含む配列の間に配置される改変部位を改変する、請求項１７に記載の組成物。
19. 細胞のゲノムに、１つ又は複数のドナーポリヌクレオチドを組み込むｉｎ ｖｉｔｒｏ又はｅｘ ｖｉｖｏ方法であって、
    （ａ）ヌクレアーゼ又は前記ヌクレアーゼをコードするポリヌクレオチドを前記細胞と接触させることであって、前記ヌクレアーゼがＢ２Ｍ遺伝子における標的部位に結合し、前記標的部位が配列番号１２６又は配列番号１２７を含む、前記ヌクレアーゼ又は前記ポリヌクレオチドを前記細胞と接触させること、
    （ｂ）１つ又は複数のドナーポリヌクレオチドを前記細胞と接触させること、及び
    （ｃ）前記細胞のゲノム内において、１つ又は複数のドナーポリヌクレオチドを、切断されたＢ２Ｍ遺伝子に組み込むこと
    を含む、ｉｎ ｖｉｔｒｏ又はｅｘ ｖｉｖｏ方法。
20. 前記ヌクレアーゼがジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）を含む、請求項１９に記載のｉｎ ｖｉｔｒｏ又はｅｘ ｖｉｖｏ方法。
21. 前記ＺＦＮがジンクフィンガータンパク質（ＺＦＰ）を含み、前記ＺＦＰが、Ｆ１からＦ５又はＦ１からＦ６の順番づけられた５つ又は６つのジンクフィンガーを含み、各ジンクフィンガーが認識ヘリックス領域を含み、前記ジンクフィンガータンパク質が、下記表
    
    の一つの行に示す順序で前記認識ヘリックス領域を含む、請求項２０に記載のｉｎ ｖｉｔｒｏ又はｅｘ ｖｉｖｏ方法。
22. 前記ＺＦＮが第１のＺＦＮ及び第２のＺＦＮを含み、前記第１のＺＦＮが５つのジンクフィンガーＦ１～Ｆ５を含み、前記５つのジンクフィンガーＦ１～Ｆ５が、それぞれ、配列番号１２８、４２、１２９、１３０及び６６からなり、前記第２のＺＦＮが６つのジンクフィンガーＦ１～Ｆ６を含み、前記６つのジンクフィンガーＦ１～Ｆ６が、それぞれ、配列番号１３１、１３２、２２、１３３、２９及び１３４からなる、請求項２１に記載のｉｎ ｖｉｔｒｏ又はｅｘ ｖｉｖｏ方法。
23. 前記ＺＦＮが、配列番号１２６及び配列番号１２７を含む配列の間に配置される改変部位を改変する、請求項２２に記載のｉｎ ｖｉｔｒｏ又はｅｘ ｖｉｖｏ方法。
24. 前記ドナーポリヌクレオチドが、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）又は抗体結合Ｔ細胞受容体（ＡＣＴＲ）をコードする、請求項１９～２３のいずれか１項に記載のｉｎ ｖｉｔｒｏ又はｅｘ ｖｉｖｏ方法。