JP2022096164A - 発毛及び育毛剤 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は下記の実施形態を有するものである。
項1.シーバックソーンの果実加工物を有効成分とする毛乳頭細胞増殖促進剤。
項2.シーバックソーンの果実加工物を有効成分とする、バーシカン及びFGF7からなる群から選択される少なくとも1種の発毛促進因子の発現亢進剤。
項3.シーバックソーンの果実加工物を有効成分とする、BMP-4及びTGF-β2からなる群から選択される少なくとも1種の脱毛誘導因子の発現抑制剤。
項4.シーバックソーンの果実加工物を含有する育毛剤。
項5.シーバックソーンの果実加工物を含有する頭髪化粧料。
シーバックソーン(Sea buckthorn)は、サジー(沙棘)又はシーベリー(Sea berry)とも称されるグミ科の植物(学名:Hippophae rhamnoides)である。その果実部は、従来から、栄養価が高い果物として食されている。また果実やその中に含まれている種子から採られるオイル(シーバックソーンオイル:果実油、種子油、コンプリート油)には、抗炎症作用、抗菌作用、日焼け止め作用、抗酸化作用、血圧降下作用、血中コレステロール低下作用、血栓除去作用、免疫刺激作用、エモリエント作用、瘢痕形成作用などの効果効能が知られている。さらに果皮にも、フラボノイド、カロテノイド、植物ステロール及びアミノ酸等の活性物質が多量に含まれており、その栄養価の高さが注目されている。
SBT果実の加工物は、前記SBT果実の加工物であればよく、例えばSBT果実から採取したエキスやオイルを挙げることができる。SBT果実のエキスには、SBT果実の絞汁及びその濃縮又は乾燥物;並びにSBT果実の溶媒抽出液及びその濃縮又は乾燥物が含まれる。またSBT果実のオイルには、SBT果実を低温圧搾して採取したオイル(果実油、コンプリート油)が含まれる。好ましくはSBT果実のエキスであり、当該エキスにはより好適なものとしてSBT果実の溶媒抽出エキスが含まれる。
本発明の毛乳頭細胞増殖促進剤、発毛促進因子発現促進剤、脱毛誘導因子発現抑制剤、及び育毛剤は、前述するSBT果実加工物を有効成分として含有することを特徴とする。
これらの製剤は、SBT果実加工物のみからなるものであってもよいし、SBT果実加工物を他の成分を配合して所望の形態に製剤化したものであってもよい。製剤化は、制限されないものの、具体的には、SBT果実加工物に加えて、生体に安全な、例えば薬学的に許容し得るキャリアーその他任意の助剤を用いて、常法に従い、粉末状、顆粒状、液状、乳液状、クリーム状、フォーム状、ゼリー状等の任意の剤形に調製することができる。
本発明の頭髪化粧料は、SBT果実加工物を育毛成分として含有するものである。
SBT果実加工物は、前述するように、毛乳頭細胞増殖促進作用、バーシカン発現亢進作用、FGF7発現亢進作用、BMP-4発現抑制作用、及び/又は、TGF-β2発現抑制作用を有しており、育毛成分として、頭髪化粧料に配合するのに好適である。
本発明の頭髪化粧料は、本発明の効果を奏することを限度として、その製造に際して、頭髪化粧料の原料としてSBT果実加工物をそのまま配合してもよいし、SBT果実加工物を製剤化して毛乳頭細胞増殖促進剤、バーシカン発現亢進剤、FGF7発現亢進剤、BMP-4発現抑制剤、TGF-β2発現抑制剤、及び/又は育毛剤として調製したものを配合してもよい。頭髪化粧料におけるSBT果実加工物やこうした各種製剤の配合割合は、前記の作用を1または2以上発揮する有効量であればよく、その使用目的、性別、年齢等を考慮して適宜調整することができる。好適な配合割合は、SBT果実加工物(好ましくはSBT果実抽出物)の量として約 0.001~10質量%の範囲から適宜設定することができる。
以上、本明細書において、「含む」及び「含有する」の用語には、「からなる」及び「から実質的になる」という意味が含まれる。
シーバックソーン(Hippophae rhamnoides)の果実(果皮を含む生の全果実を細断したもの)10gを入れた容器に、50容量%のエタノール水溶液を、約100mLを加える。暗所室温条件下で7日間浸漬、熟成した後、固形分を濾過して除去し抽出液を採取する。この工程で生じるオリや沈殿を濾過した。斯くして調製した抽出液を、そのまま、以下の実験例に使用した。
製造例で調製したシーバックソーン果実抽出物(以下、「SBT果実エキス」と称する)について、正常ヒト毛乳頭細胞を用いて、毛乳頭細胞増殖促進作用を評価した。
(a)使用培地
基礎培地:牛胎児血清(FBS)を含まないDMEM培地(Life Technologies社製)
栄養培地:10%FBS含有DMEM培地(Life Technologies社製)
いずれの培地にも、抗生物質(Penicillin 100 units/ml、Streptomycin 100μg/ml、Amphotericin B 250ng/ml)を配合した。
(b)細胞培養
正常ヒト毛乳頭細胞を、栄養培地を入れた96wellプレートに、7000 cells/wellの割合になるように播種し、1日培養した後、栄養培地を、各種濃度のSBT果実エキス(乾燥残分として16.3ppm、81.5ppm)含有基礎培地(被験例)、SBT果実エキスを含まない基礎培地(Negative control:NC)(陰性対照)、またはSBT果実エキスを含まない栄養培地(Positive control:PC)(陽性対照)に交換し、それぞれ4日間培養した。培養は全て37℃-5%CO2条件下で行った。各系列ともn=8で実験を行った。
インジケーター色素としてalamarBlue(登録商標)試薬(コスモバイオ製)を用いて、製品説明に従って、細胞増殖を測定した。具体的には、4日間培養した後、alamarBlue(登録商標)試薬を各ウエルに添加し、37℃、5%CO2条件下でインキュベートし、細胞の代謝活性によりレサズリンをレゾルフィンに変換させて、その蛍光強度(Ex 550 nm / Em 590 nm)を測定した。陰性対照の測定値を100%として、各被験例及び陽性対照の細胞増殖率(%)を算出した。
結果を図1に示す。図1に示すように、SBT果実エキスには、ヒト毛乳頭細胞の増殖を促進し亢進させる作用があることが確認された。
製造例で調製したSBT果実エキスについて、正常ヒト毛乳頭細胞を用いて、発毛促進因子であるバーシカン及びFGF7の遺伝子発現亢進作用を評価した。
毛乳頭細胞を、栄養培地を入れた24wellプレートに、30000cells/wellの割合になるように播種し、37℃、5%CO2条件下で1日培養した後、栄養培地を、乾燥残分として15ppmのSBT果実エキスを含有する基礎培地に交換し、それぞれ37℃、5%CO2条件下で4時間培養した。培養した後に毛乳頭細胞を回収し、毛乳頭細胞におけるバーシカン、及びFGF7の遺伝子発現量を解析した。具体的には、回収した毛乳頭細胞から、ISOGEN II(日本ジーン社)を用いて、製品説明書に従って、mRNAを抽出し、その後、SuperScript III(Thermo Fisher Scientific社)を用いてcDNAに逆転写し、リアルタイムPCRを実施して、毛乳頭細胞におけるバーシカン、及びFGF7の発現量を測定した。なお、各実験において、SBT果実エキスを添加しないで培養した毛乳頭細胞(陰性対照例:SBT濃度 0ppm)についても、バーシカン、及びFGF7の発現量を測定し、当該対照例の発現量に対する相対比として、SBT果実エキスの効果(遺伝子発現亢進作用)を評価した。
バーシカンの発現亢進作用を評価した結果を図2に、FGF7の発現亢進作用を評価した結果を図3に、それぞれ示す。図2及び3に示すように、SBT果実エキスには、バーシカン及びFGF7の発現を促進し亢進させる作用があることが確認された。
製造例で調製したSBT果実エキスについて、正常ヒト毛乳頭細胞を用いて、発毛抑制因子であるBMP-4の遺伝子発現亢進作用を評価した。
毛乳頭細胞を、栄養培地を入れた24wellプレートに、30000 cells/wellの割合になるように播種し、37℃、5%CO2条件下で1日培養した後、栄養培地を、乾燥残分として15ppmのSBT果実エキスを含有する基礎培地に交換し、それぞれ37℃、5%CO2条件下で4時間培養した。培養した後に毛乳頭細胞を回収し、毛乳頭細胞におけるBMP-4の遺伝子発現量を解析した。具体的には、回収した毛乳頭細胞から、ISOGEN II(日本ジーン社)を用いて、製品説明書に従って、mRNAを抽出し、その後、SuperScript III(Thermo Fisher Scientific社)を用いてcDNAに逆転写し、リアルタイムPCRを実施して、毛乳頭細胞におけるBMP-4の発現量を測定した。なお、SBT果実エキスを添加しないで培養した毛乳頭細胞(対照例:SBT濃度 0ppm)についても、BMP-4の発現量を測定し、当該対照例の発現量に対する相対比として、SBT果実エキスの効果(遺伝子発現抑制作用)を評価した。
BMP-4の発現抑制作用を評価した結果を図4に示す。図4に示すように、SBT果実エキスには、BMP-4の発現を抑制する作用があることが確認された。
製造例で調製したSBT果実エキスについて、正常ヒト毛乳頭細胞を用いて、脱毛誘導因子であるTGF-β2の遺伝子発現亢進作用を評価した。
毛乳頭細胞を、栄養培地を入れた24wellプレートに、30000 cells/wellの割合になるように播種し、37℃、5%CO2条件下で1日培養した後、栄養培地を、乾燥残分として15ppmのSBT果実エキスを含有する基礎培地に交換し、それぞれ37℃、5%CO2条件下で4時間培養した。培養した後に毛乳頭細胞を回収し、毛乳頭細胞におけるTGF-β2の遺伝子発現量を解析した。具体的には、回収した毛乳頭細胞から、ISOGEN II(日本ジーン社)を用いて、製品説明書に従って、mRNAを抽出し、その後、SuperScript III(Thermo Fisher Scientific社)を用いてcDNAに逆転写し、リアルタイムPCRを実施して、毛乳頭細胞におけるTGF-β2の発現量を測定した。なお、SBT果実エキスを添加しないで培養した毛乳頭細胞(対照例:SBT濃度0ppm)についても、TGF-β2の発現量を測定し、対照例の発現量に対する相対比として、SBT果実エキスの効果(遺伝子発現抑制作用)を評価した。
TGF-β2の発現抑制作用を評価した結果を図5に示す。図5に示すように、SBT果実エキスには、TGF-β2の発現を抑制する作用があることが確認された。
Claims (5)
- シーバックソーンの果実加工物を有効成分とする毛乳頭細胞増殖促進剤。
- シーバックソーンの果実加工物を有効成分とする、バーシカン及び線維芽細胞増殖因子-7からなる群から選択される少なくとも1種の発毛促進因子の発現亢進剤。
- シーバックソーンの果実加工物を有効成分とする、骨形成タンパク-4及びトランスフォーミング増殖因子-ベータ2からなる群から選択される少なくとも1種の脱毛誘導因子の発現抑制剤。
- シーバックソーンの果実加工物を含有する育毛剤。
- シーバックソーンの果実加工物を含有する頭髪化粧料。
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