JP2021500936A - 止血組成物及びその製造方法 - Google Patents
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Abstract
Description
25mgのサンプルを取って2mLの遠心管に入れ、37℃で体外血液凝固実験を行い、正常血液を予め37℃の水浴で30分間保温した。その後、0.2M CaCl2を20μL加え、最後に保温した正常血液を1mL加え、正常血液が凝固した時の時間を当該サンプルの凝固時間とした。
25mgのサンプルを2mLの遠心管に入れ、37℃で体外血液凝固実験を行い、X因子欠乏血液を予め37℃の水浴で30分間保温した。その後、0.2M CaCl2を20μL加え、最後に保温したX因子欠乏血液を1mL加え、X因子欠乏血液が凝固した時の時間を当該サンプルの凝固時間とした。
25mgのサンプルを2mLの遠心管に入れ、37℃で体外血液凝固実験を行い、VIII因子欠乏血液を予め37℃の水浴で30分間保温した。その後、0.2M CaCl2を20μL加え、最後に保温したVIII因子欠乏血液を1mL加え、VIII因子欠乏血液が凝固した時の時間を当該サンプルの凝固時間とした。
25mgのサンプルを2mLの遠心管に入れ、37℃で体外血液凝固実験を行い、IX因子欠乏血液を37℃の水浴中で30分間保温した。その後、0.2M CaCl2を20μL加え、最後に保温したIX因子欠乏血液を1mL加え、IX因子欠乏血液が凝固した時の時間を当該サンプルの凝固時間とした。
25mgのサンプルを2mLの遠心管に入れ、37℃で体外血液凝固実験を行い、XI因子欠乏血液を37℃の水浴中で30分間保温した。その後、0.2M CaCl2を20μL加え、最後に保温したXI因子欠乏血液を1mL加え、XI因子欠乏血液が凝固した時の時間を当該サンプルの凝固時間とした。
自然血液凝固時間は、正常な人が出血してから血液凝固するまでに必要な時間である。
A型ゼオライトの血液凝固効果の測定
トリプシンの血液凝固効果の測定
トロンビンの血液凝固効果の測定
トロンビンゼオライト複合材料の調製:5gのA型ゼオライトを30mLの蒸留水に分散した。トロンビンをpH7.0のリン酸緩衝液に溶解し、質量濃度が0.1%であるトロンビン(Sigma T4648トロンビン、製造元Sigma−Aldrich社)溶液10mLを得た。その後、両者を体積比3:1で混合し、A型ゼオライトとトロンビンの重量比例が10:1である混合溶液40mLを得た。撹拌下で、0.5gのグリセロールと1gのマンニトールを加え、且つ質量濃度5%の塩化カルシウム溶液50μLを一滴ずつ滴下し、均一に混合し、更に撹拌状態で体積濃度1%のグルタルアルデヒド溶液250μLを一滴ずつ滴下して架橋し、その後、適当な形状の金型に注ぎ、2時間放置し、ゲルを形成した後、−20℃で24時間冷凍し、更に−40℃で36h真空冷凍乾燥し、金型を反転させ、磨砕、パッケージし、トロンビンゼオライト複合材料を得た。
(1)シリカアルミナ比が2であり、チャンネルが細孔であるA型ゼオライト(Na型)を、5M濃度の塩化ナトリウム溶液に室温で24h浸漬し、得られたゼオライト骨格外金属カチオンがNaであるA型ゼオライト(すなわち4A型ゼオライト)は、1価のナトリウムイオンがゼオライト骨格外金属カチオンの100%を占めた。
(1)シリカアルミナ比が2であり、チャンネルが細孔であるA型ゼオライト(Na型)を、5M濃度の塩化アンモニウム溶液で室温で24h浸漬し、得られたA型ゼオライトは、ゼオライト骨格外の金属カチオンの60%を占める1価のアンモニウムイオンを含み、1価のナトリウムイオンがゼオライト骨格外の金属カチオンの40%を占めた。
(1)シリカアルミナ比が15であり、チャンネルが細孔であるβゼオライト(Na型)を、0.1M濃度のアンモニア水溶液で室温で24h浸漬し、得られたβゼオライトは、ゼオライト骨格外の金属カチオンの40%を占める1価のアンモニウムイオンを含み、1価のナトリウムイオンがゼオライト骨格外の金属カチオンの60%を占めた。
(1)シリカアルミナ比が2であり、チャンネルが細孔であるA型ゼオライト(Na型)を、5M濃度の塩化マグネシウム溶液に室温で12h浸漬し、得られたA型ゼオライトは、ゼオライト骨格外の金属カチオンの95%を占める2価のマグネシウムイオンを含み、1価のナトリウムイオンがゼオライト骨格外の金属カチオンの5%を占めた。
(1)シリカアルミナ比が2であり、チャンネルが細孔であるA型ゼオライト(Na型)を、5M濃度の塩化マグネシウム溶液に室温で12h浸漬し、得られたA型ゼオライトは、ゼオライト骨格外の金属カチオンの95%を占める2価のマグネシウムイオンを含み、1価のナトリウムイオンがゼオライト骨格外の金属カチオンの5%を占めた。
メソポーラスシリカMCM−41(チャンネルは2.8〜4.5nm)を1mL水溶液に均一に分散させ、メソポーラスシリカMCM−41の懸濁液を形成し、メソポーラスシリカMCM−41とトリプシンを十分に接触させ(トリプシンとメソポーラスシリカMCM−41の質量比が1:10になるように添加する)、25℃で30min混合し、且つ上記溶液を−20℃で5h真空乾燥させ、トリプシンMCM−41組成物を得た。
シリカアルミナ比が2であるメソポーラスA型ゼオライト(Na型、チャンネルは5nm)を、5M濃度の塩化マグネシウム溶液で室温で12h浸漬し、得られたA型ゼオライトは、ゼオライト骨格外の金属カチオン含有量の95%を占める2価のマグネシウムイオンを含み、1価のナトリウムイオンがゼオライト骨格外の金属カチオンの5%を占めた。
(1)アルミナ比が1.5であり、チャンネルが細孔である菱沸石(Na型)を、5M濃度の塩化マグネシウム溶液で室温で12h浸漬し、得られた菱沸石は、ゼオライト骨格外の金属カチオンの含有量の95%を占める2価のマグネシウムイオンを含み、1価のナトリウムイオンがゼオライト骨格外の金属カチオンの5%を占めた。
(1)シリカアルミナ比が15であり、チャンネルが細孔であるβゼオライト(Na型)を、5M濃度の塩化マグネシウム溶液で室温で12h浸漬し、得られたβゼオライトは、ゼオライト骨格外の金属カチオンの95%を占める2価のマグネシウムイオンを含み、1価のナトリウムイオンがゼオライト骨格外の金属カチオンの5%を占めた。
(1)シリカアルミナ比が10であり、チャンネルが細孔であるモルデナイト(Na型)を、5M濃度の塩化マグネシウム溶液に室温で12h浸漬し、得られたモルデナイトは、ゼオライト骨格外の金属カチオン含有量の95%を占める2価のマグネシウムイオン含み、1価のナトリウムイオンがゼオライト骨格外の金属カチオンの5%を占めた。
(1)シリカアルミナ比が1であり、チャンネルが細孔であるX型ゼオライト(Na型)を、5M濃度の塩化マグネシウム溶液に室温で12h浸漬し、得られたモルデナイトは、ゼオライト骨格外の金属カチオン含有量の95%を占める2価のマグネシウムイオンを含み、1価のナトリウムイオンがゼオライト骨格外の金属カチオンの5%を占めた。
(1)シリカアルミナ比が3であり、チャンネルが細孔であるY型ゼオライト(Na型)を、5M濃度の塩化マグネシウム溶液に室温で12h浸漬し、得られたY型ゼオライトはゼオライト骨格外の金属カチオン含有量の95%を占める2価のマグネシウムイオンを含み、1価のナトリウムイオンがゼオライト骨格外の金属カチオンの5%を占めた。
(1)シリカアルミナ比が20であり、チャンネルが細孔であるZSM−5型ゼオライト(Na型)を、5M濃度の塩化マグネシウム溶液に室温で12h浸漬し、得られたZSM−5型ゼオライトはゼオライト骨格外の金属カチオン含有量の95%を占める2価のマグネシウムイオンを含み、1価のナトリウムイオンがゼオライト骨格外の金属カチオンの5%を占めた。
Claims (19)
- 少なくともゼオライトとトリプシンを含む止血組成物であって、前記ゼオライトのチャンネルが細孔であり、前記ゼオライトが二価の金属カチオンを含み、前記トリプシンとゼオライトの質量比が1:200〜4:10であることを特徴とする止血組成物。
- 前記二価の金属カチオンが、コバルトイオン、ニッケルイオン、カルシウムイオン、マグネシウムイオン、ストロンチウムイオンのいずれか1種または複数種から選択されることを特徴とする請求項1に記載の止血組成物。
- 前記トリプシンとゼオライトの質量比が1:100〜3:10であり、好ましくは、前記トリプシンとゼオライトの質量比が1:60〜2.5:10であり、好ましくは、前記トリプシンとゼオライトの質量比が1:50〜2:10であり、好ましくは、前記トリプシンとゼオライトの質量比が1:40〜1.5:10であり、好ましくは、前記トリプシンとゼオライトの質量比が1:20〜1:10であることを特徴とする請求項1に記載の止血組成物。
- 前記二価の金属陽イオンがゼオライト骨格外の金属陽イオンの50%〜95%を占め、好ましくは、前記二価の金属陽イオンがゼオライト骨格外の金属陽イオンの60%〜90%を占め、好ましくは、前記二価の金属陽イオンがゼオライト骨格外の金属陽イオンの65%〜85%を占め、好ましくは、前記二価の金属陽イオンがゼオライト骨格外の金属陽イオンの70%〜80%を占め、好ましくは、前記二価の金属陽イオンがゼオライト骨格外の金属陽イオンの72%〜78%を占めることを特徴とする請求項1に記載の止血組成物。
- 前記ゼオライトのシリカアルミナ比が1〜20であり、好ましくは、前記シリカアルミナ比が1.2〜15であり、好ましくは、前記シリカアルミナ比が1.5〜4であり、好ましくは、前記シリカアルミナ比が2〜3であることを特徴とする請求項1に記載の止血組成物。
- 前記ゼオライトが、A型ゼオライト、菱沸石、β型ゼオライト、モルデナイト、X型ゼオライト、Y型ゼオライト、ZSM−5型ゼオライトのいずれか1種または複数種から選択されることを特徴とする請求項1に記載の止血組成物。
- 以下のステップを含む止血組成物の製造方法であって、
(1)ゼオライトのチャンネルが細孔であり、ゼオライトの表面に二価の金属カチオンを含むゼオライトの懸濁液を調製し、
(2)ゼオライトの懸濁液をトリプシンと接触させ、
(3)ゼオライトの表面にトリプシンを吸着させることで前記止血組成物を得る
ことを特徴とする止血組成物の製造方法。 - 前記ゼオライトの懸濁液におけるゼオライトと脱イオン水の質量比が1:0.5〜1:20であり、好ましくは、前記ゼオライトの懸濁液におけるゼオライトと脱イオン水の質量比が1:0.8〜1:10であり、好ましくは、前記ゼオライトの懸濁液におけるゼオライトと脱イオン水の質量比が1:1〜1:5であり、好ましくは、前記ゼオライトの懸濁液におけるゼオライトと脱イオン水の質量比が1:1.5〜1:2.5であることを特徴とする請求項7に記載の製造方法。
- 前記ステップ(1)におけるゼオライトの懸濁液に対し超音波処理を行うことを特徴とする請求項7に記載の製造方法。
- 前記超音波処理の時間が0.5〜30minであり、超音波周波数が20〜200kHzであり、超音波パワーが200〜5000Wであることを特徴とする請求項9に記載の製造方法。
- 前記ステップ(2)の接触温度が10〜37℃であり、好ましくは、前記ステップ(2)の接触温度が15〜30℃であり、好ましくは、前記ステップ(2)の接触温度が20〜25℃であることを特徴とする請求項7に記載の製造方法。
- 前記ステップ(3)が、トリプシンをゼオライトの表面に吸着させた後に、さらにゼオライトの懸濁液とトリプシンを凍結乾燥させるステップを含み、好ましくは、前記凍結乾燥の温度が0℃〜−80℃であり、好ましくは、前記凍結乾燥の温度が−10℃〜−60℃であり、好ましくは、前記凍結乾燥の温度が−20℃〜−50℃であり、好ましくは、前記凍結乾燥の温度が−30℃〜−45℃であることを特徴とする請求項7に記載の製造方法。
- 前記トリプシンとゼオライトの質量比が1:200〜4:10であり、前記トリプシンとゼオライトの質量比が1:100〜3:10であり、好ましくは、前記トリプシンとゼオライトの質量比が1:60〜2.5:10であり、好ましくは、前記トリプシンとゼオライトの質量比が1:50〜2:10であり、好ましくは、前記トリプシンとゼオライトの質量比が1:40〜1.5:10であり、好ましくは、前記トリプシンとゼオライトの質量比が1:20〜1:10であることを特徴とする請求項7に記載の製造方法。
- 請求項1〜6のいずれか1項に記載の止血組成物及び添加剤を含むことを特徴とする止血複合材料。
- 前記添加剤が、担体、抗菌材料、帯電防止材料、高分子多糖のいずれか一種または複数種から選択されることを特徴とする請求項14に記載の止血複合材料。
- 前記担体が、綿、絹、羊毛、プラスチック、セルロース、レーヨン、ポリエステル、ポリウレタン、ポリエチレンフォーム、ポリアクリル酸フォーム、低密度ポリエーテル、ポリビニルアルコール、ポリメタクリル酸メチルのいずれか1種または複数種から選択されることを特徴とする請求項14に記載の止血複合材料。
- 前記抗菌材料が、ナノ銀粒子、バニラアルデヒド、エチルバニラアルデヒド化合物のいずれか1種または複数種から選択されることを特徴とする請求項14に記載の止血複合材料。
- 前記高分子多糖類が、セルロース、リグニン、デンプン、キトサン、アガロースのいずれか1種または複数種から選択されることを特徴とする請求項14に記載の止血複合材料。
- 請求項1〜6のいずれか1項に記載の止血組成物または請求項14〜18のいずれか1項に記載の止血複合材料の止血分野における使用。
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