CN101837143A - 一种药物缓释止血组合物及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种药物缓释止血组合物及制备方法，属于新型止血材料技术领域，包括载药壳聚糖微球、壳聚糖和透明质酸的组合物，所述的载药壳聚糖微球包括药用级壳聚糖和药用级氨甲环酸。本发明选用壳聚糖和透明质酸为主要止血基质同时结合壳聚糖药物缓释微球复合药物氨甲环酸，利用壳聚糖兼备止血功能和药物缓释功能特殊的性质，同时采用止血功能以及生物相容性较好的透明质酸和壳聚糖的组合物为主要基质，制备出能够快速止血并且药物/因子能够在一定时间内持续稳定释放的新型止血组合物，有着极大的经济和社会效益。

Description

一种药物缓释止血组合物及制备方法

技术领域

本发明属于新型止血材料技术领域，尤其是涉及一种制备简单，生物相容性好，效果显著，还具有治疗功能的药物或生物因子缓释可吸收止血组合物及其制备方法。

背景技术

在突发性事故的急救治疗、手术过程中的创伤止血，病患者局部有效地快速止血非常重要。目前报道的止血材料主要有粉末类(沸石、胶原粉末和马铃薯淀粉)、多孔海绵(明胶海绵、胶原海绵)、氧化再生纤维素和纤维蛋白胶等，它们各自有一定的不足之处：明胶和胶原的组织黏附力较差，两者的止血功能均依赖于足量的血小板和凝血因子，故应用受到限制；血纤维蛋白胶源自血液，可能会导致病毒感染；多孔沸石和马铃薯淀粉在吸收血液中的水分后会放出大量的热，导致伤口炎症。

随着我国医学界对止血材料止血性能要求的提高，开发出止血效果更佳的材料势在必行。首先，作为止血敷料或止血剂的材料要具备良好的止血性能，优良的生物相容性，无毒副作用，无刺激性，易于加工成型等。因此，从现有的条件出发，寻找自然界中优良的生物材料并加以加工、改进就成为一种理想的选择。其次，可根据各种止血材料不同的性能，采用多种止血材料联用的方法，使材料发挥更好的止血性能。此外，止血材料、止血方法和止血途径的研究有待进一步加强，以便开发出与现有止血途径不同的止血材料。

发明内容

本发明的目的在于提供一种制备简单，生物相容性好，效果显著，还具有治疗功能的药物缓释止血组合物及制备方法，弥补现有技术存在的不足。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种药物缓释止血组合物，包括载药壳聚糖微球、壳聚糖和透明质酸，所述的载药壳聚糖微球包括药用级壳聚糖和药用级氨甲环酸，该药用级壳聚糖与药用级氨甲环酸重量比为(0.01～100)∶1，所述的载药壳聚糖微球、壳聚糖和透明质酸重量比为(0.01～100)∶(0.01～100)∶1。

更优的方案是：所述的药物为乙酰甘氨酸乙二胺、氨基己酸(6-Aminocaproic acid，EACA)、氨甲环酸(Tranexamicacid，AMCHA)、止血敏、去氨加压素(Desmopresion)中的一种或几种。

更优的方案是：所述的的药物为生物凝血因子，如因子I(纤维蛋白原)、因子II(凝血素)、因子III(凝血酶原酶)、因子IV(钙(Ca2+)因子)、因子V(促凝血球蛋白原，易变因子)、因子VII(转变加速因子前体，促凝血酶原激酶原，辅助促凝血酶原激酶)、因子VIII(抗血友病球蛋白A(AHG A))、抗血友病因子A(AHFA)、血小板辅助因子I其中的一种或几种。

更优的方案是：所述的壳聚糖为壳聚糖衍生物，如羧甲基壳聚糖等；所述的透明质酸为透明质酸衍生物；所述的药用级壳聚糖的脱乙酰度为40-95％。

更优的方案是：所述的药用级壳聚糖的脱乙酰度为92-95％。

本发明的另一目的在于提供药物缓释止血组合物的制备方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种药物缓释止血组合物的制备方法，包括如下步骤：

1)将药用级壳聚糖溶解于酸性溶液得到0.5-3％的壳聚糖溶液，并加入药用级氨甲环酸得到药用级壳聚糖和药用级氨甲环酸溶液A，溶液中药用级壳聚糖与药用级氨甲环酸重量比为(0.01～100)∶1；

2)将溶液A滴加到含乳化剂溶液的溶液B中，室温高速搅拌10-60min后，加入交联剂，继续室温高速搅拌10-60min，得到载药壳聚糖微球A；

3)将壳聚糖置于透明质酸溶液中，溶液中壳聚糖和透明质酸的重量比为(0.01～100)∶1，室温高速搅拌1-100min后得到混合溶液B；

4)将载药壳聚糖微球A置于混合溶液B中，溶液中载药壳聚糖微球和胶原蛋白(0.01～100)∶1，室温高速搅拌5-100min后得到混合溶液C；

5)将混合溶液C置于止血海绵模具中，冷冻干燥后得到海绵状载药止血组合物D；

6)D经消毒射线照射15-30min后得到成品E。

可替代的方案是：步骤3)中将壳聚糖溶于0.1-30％(v/v)的醋酸溶液或蚁酸溶液等酸性溶液中，将溶有壳聚糖的酸性溶液与透明质酸溶液混合。

可替代的方案是：步骤3)中可将透明质酸溶于壳聚糖溶液中。

可替代的方案是：步骤5)也可以采用高温干燥、风干等常见的干燥方法。

可替代的方案是：步骤6)可以采用高温消毒、环氧乙烷消毒、紫外消毒等常见的消毒方法。

可替代的方案是：将壳聚糖溶液置于模具中冷冻干燥得到壳聚糖的海绵，将其浸入含载药壳聚糖微球的透明质酸溶液中1-60min钟后取出干燥，得到载药止血组合物。

可替代的方案是：将透明质酸溶液置于模具中冷冻干燥得到透明质酸的海绵，将其浸入含载药壳聚糖微球的壳聚糖溶液中1-60min钟后取出干燥，得到载药止血组合物。

可替代的方案是：壳聚糖溶液置于模具中冷冻干燥得到壳聚糖的海绵，，将其依次浸入载药壳聚糖微球溶液和透明质酸溶液中1-60min钟后取出干燥，得到载药止血组合物。

可替代的方案是：得到透明质酸的海绵后，将其先后浸入载药壳聚糖微球溶液和壳聚糖溶液中1-60min钟后取出干燥，得到载药止血组合物。

更优的方案是：所述步骤2)中所述乳化剂为0.8-52％(质量体积分数)的石蜡溶液；所述交联剂为三聚磷酸盐，该三聚磷酸盐的用量为步骤1中药用级壳聚糖重量的0.1-50倍。

本发明专利与现有技术相比，具有如下优点和有益效果：

透明质酸是构成人体细胞间质、眼玻璃体、关节滑液等结缔组织的主要成分，在体内发挥保水、维持细胞外空间、调节渗透压、润滑、促进细胞修复的重要生理功能。透明质酸分子中含有大量的羧基和羟基。透明质酸用于预防术后粘连和促进皮肤伤口的愈合。生物相容性优异，其降解产物无毒，且能被生物体完全吸收。

由于壳聚糖具有优良的生物相容性和可生物降解性能，为几丁质的脱乙酰的产物，脱乙酰度越大，其表面的氨基含量越高，对亲水性和生物相容性有着很大的影响，本发明使用高脱乙酰度的壳聚糖(高达95％)，使得整个止血海绵的生物相容性以及止血止痛功能大幅提高。

血循环中存在各种纤溶酶(原)的天然拮抗物，如抗纤溶酶素(antiplasmin)等。正常情况时，血液中抗纤溶活性比纤溶活性高很多倍，所以不致发生纤溶性出血。但这些拮抗物不能阻滞已吸附在纤维蛋白网上的激活物(如尿激酶等)所激活而形成纤溶酶。纤溶酶是一种肽链内切酶，在中性环境中能裂解纤维蛋白(原)的精氨酸和赖氨酸肽链，形成纤维蛋白降解产物，并引起凝血块溶解出血。氨甲环酸能竞争性阻抑纤溶酶原在纤维蛋白上吸附，从而防止其激活，保护纤维蛋白不被纤溶酶所降解和溶解，最终达到止血效果。氨甲环酸能直接抑制纤溶酶活力，减少纤溶酶激活补体的作用，从而达到防止遗传性血管神经性水肿的发生。

本发明选用壳聚糖、透明质酸复合得到主要止血基质同时结合壳聚糖药物缓释微球复合药物氨甲环酸，利用壳聚糖兼备止血功能和药物缓释功能特殊的性质，同时采用止血功能以及生物相容性较好的透明质酸为主要基质，制备出能够快速止血并且药物能够在一定时间内持续稳定释放药物/因子的新型止血组合物，有着极大的经济和社会效益。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步详细说明：

实施例1

将1克脱乙酰度为40％壳聚糖溶于100ml 0.2％(v/v)醋酸溶液中，并加入0.1克药物氨甲环酸得到壳聚糖和药物的醋酸溶液A；将溶液A液滴加入到乳化剂10％石蜡溶液B中，室温高速搅拌10min后加入5克交联剂三聚磷酸盐，继续室温高速搅拌10min后，得到载药壳聚糖微球C；将1克脱乙酰度为40％壳聚糖(分子量为2万-30万之间)溶于100ml 0.2％(v/v)醋酸溶液中，室温高速搅拌10min后加入0.1克透明质酸，继续室温高速搅拌10min得到壳聚糖和透明质酸的混合溶液D；将1克载药壳聚糖微球C置于20ml混合溶液D中室温搅拌10min，置于长方形模具中，将含有药物微球的混合溶液冷冻干燥并经Co60射线照射消毒后得到所需的海绵状止血组合物。

实施例2

将1克脱乙酰度为60％壳聚糖溶于100ml 1％(v/v)醋酸溶液中，并加入0.1克药物氨甲环酸得到壳聚糖和药物的醋酸溶液A；将溶液A液滴加入到乳化剂20％石蜡溶液B中，室温高速搅拌10min后加入0.5克交联剂三聚磷酸盐，继续室温高速搅拌100min后，得到载药壳聚糖微球C；将1克脱乙酰度为60％壳聚糖(分子量为10万-50万之间)溶于100ml1％(v/v)醋酸溶液中，加入1wt％透明质酸溶液50ml，室温高速搅拌10min后得到壳聚糖和透明质酸的混合溶液D；

将0.1克载药壳聚糖微球C置于20mi混合溶液D中室温搅拌10min，置于长方形模具中，将含有药物微球的混合溶液D冷冻干燥并经紫外线照射消毒后得到所需的海绵状止血组合物。

实施例3

将1克脱乙酰度为80％壳聚糖溶于100ml 2％(v/v)醋酸溶液中，并加入0.1克药物氨甲环酸得到壳聚糖和药物的醋酸溶液A；将溶液A液滴加入到乳化剂5％石蜡溶液B中，室温高速搅拌10min后加入10克交联剂三聚磷酸盐，继续室温高速搅拌10min后，得到载药壳聚糖微球C；将1克脱乙酰度为80％壳聚糖(分子量为0.5万-20万之间)溶于100ml 2％(v/v)醋酸溶液中，并加入2wt％透明质酸钠溶液100ml继续室温高速搅拌20min后得到壳聚糖和透明质酸的混合溶液D；将1克载药壳聚糖微球置于30ml混合溶液D中室温搅拌10min，置于长方形模具中，将含有药物微球的混合溶液D经60℃高温干燥10h后，并经环氧乙烷消毒后得到所需的海绵状止血组合物。

实施例4

将1克脱乙酰度为92％壳聚糖溶于100ml 3％(v/v)醋酸溶液中，并加入0.1克药物氨甲环酸得到壳聚糖和药物的醋酸溶液A；将溶液A液滴加入到乳化剂10％石蜡溶液B中，室温高速搅拌10min后加入5克交联剂三聚磷酸盐，继续室温高速搅拌10min后，得到载药壳聚糖微球C；将50ml 3wt％脱羧甲基壳聚糖水溶液与50ml2wt％透明质酸钠溶液混合，室温下高速搅拌得到混合溶液D。将1克载药壳聚糖微球C置于20ml混合溶液D中室温搅拌10min，置于长方形模具中冷冻干燥并经Co60射线照射消毒后得到所需的海绵状止血组合物。

实施例5

将1克脱乙酰度为95％壳聚糖溶于100ml 4％(v/v)醋酸溶液中，并加入0.1克药物乙酰甘氨酸乙二胺得到壳聚糖和药物的醋酸溶液A；将溶液A液滴加入到乳化剂10％石蜡溶液B中，室温高速搅拌10min后加入5克交联剂三聚磷酸盐，继续室温高速搅拌10min后，得到载药壳聚糖微球C；将50ml5wt％脱羧甲基壳聚糖水溶液与50ml2wt％透明质酸钠溶液混合，室温下高速搅拌得到混合溶液D；将1克载药壳聚糖微球C置于20ml混合溶液D中室温搅拌10min，置于长方形模具中，于零下2摄氏度冷冻3小时候，置于冷冻干燥机中冷冻干燥8小时候取出，然后经Co60照射消毒后，得到所需的止血组合物。

实施例6

将5克脱乙酰度为45％壳聚糖溶于100ml 5％(v/v)醋酸溶液中，并加入5克药物氨甲环酸得到壳聚糖和药物的醋酸溶液A；将溶液A液滴加入到乳化剂10％石蜡溶液B中，室温高速搅拌50min后加入1克交联剂三聚磷酸盐，继续室温高速搅拌50min后，得到载药壳聚糖微球C；将5克羧甲基壳聚糖(分子量为50万-100万之间)溶于50ml蒸馏水中，室温高速搅拌10min后置于长方形模具中，冷冻干燥后得到海绵状物D。将D至于1wt％透明质酸钠溶液中充分浸润5min后，于50摄氏度烘干得到海绵状D，再将D浸入1wt％透明质酸钠溶液中充分浸润5min后，于80摄氏度烘干，如此反复2-10次，得到海绵状组合物E；将E至于含载药壳聚糖微球C的溶液中充分浸润5min后，于50摄氏度烘干，如此反复1-5次，得到含载药微球海绵状组合物F，经环氧乙烷消毒后，得到最终所需的止血组合物。

本发明的药物缓释止血组合物产品对不同部位以及不同伤口的效果，经过多次实验发现，在出血量为1±0.5ml时产品的止血时间在1±0.5min，产品的载药缓释系统能够在3天内持续稳定的有效浓度释放。本发明所述的制备药物缓释止血组合物材料的方法，配方简单，制备工艺易行，在48个小时内即可制备。

以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。

Claims (8)

1.一种药物缓释止血组合物，其特征是：包括载药壳聚糖微球和壳聚糖透明质酸组合物，所述的载药壳聚糖微球包括药用级壳聚糖和药用级氨甲环酸，该药用级壳聚糖与药用级氨甲环酸重量比为0.01～100∶1，所述的载药壳聚糖微球、透明质酸和壳聚糖重量比为0.01～100∶0.01～100∶1。

2.如权利要求1所述的药物缓释止血组合物，其特征是：所述的透明质酸为透明质酸或其衍生物，壳聚糖为壳聚糖或其衍生物，所述的药用级壳聚糖的脱乙酰度为40-95％。

3.如权利要求2所述的药物缓释止血组合物，其特征是：所述的药用级壳聚糖的脱乙酰度为92-95％

4.如权利要求1所述的药物缓释止血组合物，其特征是：所述所述的药物为乙酰甘氨酸乙二胺、氨基己酸(6一Aminocaproic acid，EACA)、氨甲环酸(Tranexamicacid，AMCHA)、止血敏、去氨加压素(Desmopresion)中的一种或几种。

5.如权利要求1所述的药物缓释止血组合物，其特征是：所述的的药物为生物凝血因子，生物凝血因子为纤维蛋白原；或凝血素；或凝血酶原酶；或钙因子；或促凝血球蛋白原、或转变加速因子前体与促凝血酶原激酶原与辅助促凝血酶原激酶；或抗血友病球蛋白A(AHG A))、抗血友病因子A(AHFA)、血小板辅助因子I、血友病因子其中的一种或几种。

6.一种药物缓释止血组合物的制备方法，其特征是：包括如下步骤：

(1)将药用级壳聚糖溶解于酸性溶液得到0.5-3％的壳聚糖溶液，并加入药用级氨甲环酸得到药用级壳聚糖和药用级氨甲环酸溶液A，溶液中药用级壳聚糖与药用级氨甲环酸重量比为0.01～100∶1；

(2)将溶液A滴加到含乳化剂溶液的溶液B中，室温高速搅拌10-60min后，加入交联剂，继续室温高速搅拌10-60min，得到载药壳聚糖微球；

(3)将载药壳聚糖微球置于如权利要求1-3任一所述的胶原蛋白溶液中，溶液中载药壳聚糖微球和胶原蛋白(0.01～100)∶1，室温高速搅拌1-100min后置于止血海绵模具中，冷冻干燥后形成止血海绵，经消毒射线照射1-60min后得到成品。

7.如权利要求6所述的药物缓释止血组合物的制备方法，其特征是：步骤(1)中所述的酸性溶液为0.1-10％(v/v)的醋酸溶液或蚁酸溶液。

8.如权利要求6所述的药物缓释止血组合物的制备方法，其特征是：所述步骤(2)中所述乳化剂为0.8-52％的石蜡溶液；所述交联剂为三聚磷酸盐，该三聚磷酸盐的用量为步骤1中药用级壳聚糖重量的0.1-50倍。