JP2021066683A - 凍結保存用治具の固定具 - Google Patents
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Abstract
Description
P=(V/T)×100(%)
P:空隙率(%)
V:空隙容量(ml/m2)
T:厚み(μm)
アルミを用いて金属切削加工により、図1及び図2に示す、1ヶ所のスリット部2に凸型の凹凸構造部3を有する形態の実施例1の固定具を作製した。なお、スリット部の幅T2は3.2mmであり、スリット部2の長さT1は基材20の側面部から10mmであり、スリット部の深さT3は10mmである。凹凸構造部はスリット部の内部の側面からそれぞれ0.25mmの凸型構造とし、凸型の凹凸構造部3により狭まった部分の幅方向の長さT4は2.7mmである。
アルミを用いて金属切削加工により、図13に示す、1ヶ所のスリット部2に凸型構造を凹凸構造部3として有し、スリット開口部から挿入方向に進むほど、スリット部2の幅T2が徐々に狭まった構造となっている形態の実施例2の固定具を作製した。なお、スリット部2の長さT1は基材20の側面部から10mmであり、スリット部2の深さT3は10mmである。スリット部の幅T2はスリット開口部4で4mmであり、スリット開口部4から挿入方向に向かって、基材上面中央部側のスリット部2の閉塞部で3mmまで一定に減少する構造とした。凹凸構造部の幅T4は2.7mmで一定とした。
アルミを用いて金属切削加工により、図6に示す、スリット部の内部の片側の側面にのみ凸型構造の凹凸構造部を有する形態の実施例3の固定具を作製した。なお、スリット部の幅T2は3.2mmであり、スリット部の長さT1は基材20の側面部から10mmであり、スリット部の深さT3は10mmである。凹凸構造部はスリット部の内部の側面から0.25mmの凸型構造であり、1ヶ所の凸型構造の凹凸構造部3により狭まった部分の長さT6は2.95mmである。
ABS樹脂を用いて積層型の3Dプリンターで加工を行った以外は実施例1と同様にして実施例4の固定具を作製した。
ABS樹脂を用いて積層型の3Dプリンターで加工を行い、図11に示す形態のスリット部の内部の側面に凸型の凹凸構造部3を有する実施例5の固定具を作製した。なお、スリット部2の幅T2は3.2mmであり、スリット部の深さT3は10mmである。スリット部2の長さは挿入方向から20mm直進した後に90度右側に向きを変えて10mm直進した形態とした。凹凸構造部3はスリット部2の内部の側面からそれぞれ0.25mmの凸型構造とし、凹凸構造部の幅T4は2.7mmである。
実施例1〜5の固定具について、凍結保存用治具の固定具合を評価するために、図18に図示されるような凍結保存用治具を作製した。凍結保存用治具は、短冊状(幅1.5mm、長さ20mm、厚み190μm)のポリエチレンテレフタレート樹脂フィルムをストリップ9とし、ABS樹脂の把持部と接着し本体部材7を作製した。キャップ部材8をABS樹脂で作製した。キャップ部材8の外形は3.1mmの四角柱であり、先端部近くに0.3mmの深さの凹部を有する構造である。上記凍結保存用治具を用いて、平衡化処理したマウス8細胞期胚を保存液0.1μLと共に、透過型顕微鏡下で滴下付着させた。なお、保存液は、シグマアルドリッチ社製 Medium199培地に、15容積%DMSO、15容積%エチレングリコール、17質量%スクロースが含まれる組成のものを用いた。次いで、透過型顕微鏡下で、載置部を含むストリップをキャップ部材に挿入し、その後液体窒素に浸漬して凍結操作を行った。保冷操作の後に、液体窒素下で、上記凍結保存用治具のキャップ部材側を、キャップ部材の先端部が有する凹部が凍結保存用治具が有する凹凸構造部にはまり込む状態で、実施例1〜5の固定具のスリット部に挿入し、図18に示す形態で、固定・保持した際の様子を以下の基準で評価した。これらの結果を表1に示す。
○:安定して固定ができた。
△:固定ができたが、やや不安定であった。
上記の「凍結保存用治具の固定具合の評価」と同様の方法により、図18に示す形態で、実施例1〜5の固定具を用いて凍結保存用治具をそれぞれ固定・保持した。その後、図20に示す形態のように、凍結保存用治具の本体部材とキャップ部材を分離する際の作業性を評価したが、実施例1〜5の固定具はいずれも迅速な融解操作が可能であり、高い作業性を有することが示された。また実施例1〜5の固定具を用いた融解作業では、細胞又は組織が液体窒素中に位置することを容易に確認できた。
2 スリット部
3 凹凸構造部
4 スリット開口部
5 空洞構造部
6 凍結保存用治具
7 本体部材
8 キャップ部材
9 ストリップ
10 細胞
11 保存液
12 接合部
13 液体窒素
14 液面
15 凍結容器
16 液面ゲージ
17 上限マーキング部
18 下限マーキング部
19 融解液
20 基材
Claims (1)
- 上面、側面及び底面を有する基材からなる凍結保存用治具の固定具であって、少なくとも片端が基材の側面部に開口したスリット部を基材の上面に有し、該スリット部内部の側面に凍結保存用治具を固定するための凹凸構造部を少なくとも有することを特徴とする凍結保存用治具の固定具。
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