JP2020529212A5 - - Google Patents
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Claims (15)
- 移植に適する単離された腎臓を監視するための方法であって、
単離された腎臓を灌流し、クレアチニンのスパイクをシステムに投与することと、
複数の時点で腎臓からの灌流液中のクレアチニンレベルを検出することであって、クレアチニンは、クレアチニナーゼ、クレアチナーゼおよびサルコシンオキシダーゼの酵素のミックスでクレアチニンをH2O2に変換し、H2O2のレベルを検出することによって検出することと、
腎機能を示すクレアチニンクリアランス率を判定することと
を含む、方法。 - 前記灌流液のサンプルは微小透析液である、請求項1に記載の方法。
- 基準を下回るクレアチニンクリアランス率は腎機能障害を示す、請求項1または2に記載の方法。
- 前記酵素は3つすべての酵素を含む組成物で提供されるか、または
前記酵素は別々に提供され、それぞれ前記灌流液と接触される、請求項1から3のいずれか一項に記載の方法。 - 前記組成物は、EPPS、HEPBS、POPSO、HEPPSO及びMOBSからなる群から選択されるバッファを含む、請求項4に記載の方法。
- 前記組成物は、pHが8.0〜8.95である、請求項4または5に記載の方法。
- 前記組成物は、pH8.0〜pH8.5のEPPS、任意にpH8.0〜pH8.5の50mM EPPS、任意にpH8.0の50mM EPPS、又はpH8.5の50mM EPPSを含む、請求項4から6のいずれか一項に記載の方法。
- 前記組成物は、クレアチニン及び酵素を含有する微小透析液の混合に由来する最終混合溶液が、クレアチニナーゼ、クレアチナーゼ及びサルコシンオキシダーゼを、10:5:1〜49:8:1U/mlの比率にて含むような組成物である、請求項4から7のいずれか一項に記載の方法。
- 前記比率は、10:5:1である、請求項8に記載の方法。
- サンプルにおけるクレアチニンを検出するためのセンサー系であって、
a.サルコシンオキシダーゼ、クレアチニナーゼ及びクレアチナーゼの酵素を含む組成物、及び
b.少なくとも第1の電流測定センサー、を含み、
前記酵素は溶液中にあり、前記組成物はpHが8.0〜8.95である、センサー系。 - a)前記組成物はさらにバッファを含み、前記バッファは、リン酸バッファでもPBSでもなく、及び/又はトリスバッファではなく、及び/又は四ホウ酸ではなく、及び/又はHEPESではない、
b)前記組成物はさらにバッファを含み、前記バッファは、EPPS、HEPBS、POPSO、HEPPSO、及びMOBSからなる群から選択される、
c)前記組成物はpHが8.5である、若しくは前記組成物はバッファを含み、前記バッファがpH8.5である、
d)前記組成物は、pH8.0〜8.5のEPPS、任意にpH8.0〜8.5の50mM EPPS、任意にpH8.0の50mM EPPS、又はpH8.5の50mM EPPSを含む、
e)前記組成物はさらに、ウレアーゼ及び/又はウリカーゼ及び/又はシスタチンCを検出する手段及び/又はアルブミンを検出する手段を含む、
f)前記組成物中のサルコシンオキシダーゼ及び/又はクレアチニナーゼ及び/又はクレアチナーゼの濃度は、最終反応混合液において、クレアチニナーゼの濃度が少なくとも300U/mlとなり、及び/又はクレアチナーゼの濃度が少なくとも120U/mlとなり、且つサルコシンオキシダーゼの濃度が少なくとも10U/mlとなるような濃度である、
g)前記組成物は、クレアチニン及び酵素を含有するサンプルの混合に由来する最終混合溶液が、クレアチニナーゼ、クレアチナーゼ、及びサルコシンオキシダーゼを、10:5:1〜49:8:1U/mlの比率にて含むような組成物である、
h)前記組成物は、クレアチニン及び酵素を含有するサンプルの混合に由来する最終混合溶液が、クレアチニナーゼ、クレアチナーゼ、及びサルコシンオキシダーゼを、600U/ml、300U/ml、及び60U/mlの量で含むような組成物であり、任意に前記組成物はpH8.5である、
i)前記系は、マイクロフルイディック回路、マイクロフルイディックデバイス、及び微小透析プローブのいずれか1つ以上を含む、
j)前記系は、連続流系をさらに含む、
k)前記系はさらに、患者由来のサンプル、若しくは閉ループ単離灌流腎臓器官由来のサンプルをとる手段を含む、
l)患者由来のサンプルは、任意に血液、尿、血漿、組織液、髄液由来の、微小透析液である、
m)前記系は、前記サルコシンオキシダーゼ、クレアチニナーゼ及びクレアチナーゼの組成物がサンプルに、前記サンプルを前記センサーと接触させる前に加えられるようにアレンジされ、検知試薬が、前記センサーとの接触の1、2、5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、225、250秒、5、5.5、6、6.5、7.5、8、8.5、9、9.5、若しくは10分超前に加えられるようにアレンジされている、
n)前記系は、前記サンプル中の酸素の量を、検知試薬の添加前若しくは添加後に増大させる手段を含み、任意に酸素の量を増大させる前記手段は
ミキサーであって、任意にバッフル又は蛇行ゾーンを含み、任意に高度に浸透性の材料、例えばPDMSから製造されているミキサー;
Teflonチューブによって連結された複数の混合ステージ;
加圧コンテナ
のいずれか1つ以上から選択される、
o)前記系は、10μM未満、任意に7.5μM未満、任意に5μM未満、任意に4μM未満、任意に3μM未満、任意に2μM未満、任意に1μM未満の濃度のクレアチニンを検出することができる、
p)前記センサー系は、40μM〜120μMのクレアチニンのバックグラウンドレベルに対して、1μM未満、2μM未満、3μM未満、4μM未満、5μM未満、7.5μM未満、若しくは10μM未満のクレアチニン濃度の変化を検出することができる、
q)前記系は、前記センサーからデータを収集する手段を含み、任意に前記系はさらに、前記データを送信するワイヤレス送信手段を含む、
r)前記系はさらに、データ分析手段、任意にコンピュータ若しくはウェアラブルデバイスを含み、任意に前記データ分析手段は、ワイヤレスで送信されたデータを受信する手段を含む、
s)少なくとも1つの廃棄物収集レセプタクルをさらに含み、任意に前記廃棄物収集レセプタクルの容量は、10ml未満、例えば9.5ml未満、例えば9ml未満、例えば8.5ml未満、例えば8ml未満、例えば7.5ml未満、例えば7ml未満、例えば6.5ml未満、例えば6ml未満、例えば5.5ml未満、例えば5ml未満、例えば4.5ml未満、例えば4ml未満、例えば3.5ml未満、例えば3ml未満、例えば2.5ml未満、例えば2ml未満、例えば1.5ml未満、例えば1ml未満、例えば0.5ml未満、例えば0.25ml未満である、
t)前記系は、携帯型の系である、
u)前記系は、クレアチニンレベル/クレアチニンクリアランス率/糸球体濾過量を算出する手段を含む、
v)剤、任意に造影剤若しくは薬物、又はクレアチニン若しくはクレアチン若しくはサルコシンを送達する手段をさらに含み、任意に前記手段は薬物ポンプであり、
任意に前記薬物は、免疫抑制剤;化学療法剤、例えば白金剤;抗菌物質、例えばグリコペプチドバンコマイシン及びテイコプラニン、並びにペニシリン;並びにオピオイド鎮痛薬、例えばモルヒネ、ジアモルフィン、及びコデインからなる群から選択され;
任意に送達される剤の量は、算出した前記クレアチニンレベル/クレアチニンクリアランス率/糸球体濾過量に基づいて調整される、
w)前記系はさらに、第2のセンサー、及び任意に第2のサンプルを得る第2の手段を含み、前記第2のサンプルは、前記第2のセンサーでの検出前に、クレアチナーゼ及びサルコシンオキシダーゼを含む第2の検知試薬と接触させられ、任意に前記系は、前記第2の検知試薬が、前記センサーとの接触の1、2、5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、225、250秒、5、5.5、6、6.5、7.5、8、8.5、9、9.5若しくは10分超前に加えられた前記第2のサンプルに加えられるように配置されている、
x)前記系は、前記第2のセンサーから得られるデータを、前記第1のセンサーから得られるデータから減算する手段を含む、
y)前記第1のセンサーは、データを継続的に収集する、
及び/又は
z)前記第1のセンサーは、少なくとも24時間毎に、又は少なくとも22時間毎に、例えば少なくとも20時間毎に、例えば少なくとも18時間毎に、例えば少なくとも16時間毎に、例えば少なくとも14時間毎に、例えば少なくとも12時間毎に、例えば少なくとも10時間毎に、例えば少なくとも8時間毎に、例えば少なくとも6時間毎に、例えば少なくとも5時間毎に、例えば少なくとも4時間毎に、例えば少なくとも3時間毎に、例えば少なくとも2時間毎に、例えば少なくとも1.5時間毎に、例えば少なくとも1時間毎に、例えば少なくとも50分毎に、例えば少なくとも45分毎に、例えば少なくとも40分毎に、例えば少なくとも35分毎に、例えば少なくとも30分毎に、例えば少なくとも25分毎に、例えば少なくとも20分毎に、例えば少なくとも15分毎に、例えば少なくとも10分毎に、例えば少なくとも5分毎に、例えば少なくとも2分毎に、例えば少なくとも1.5分毎に、例えば少なくとも60秒毎に、例えば少なくとも45秒毎に、例えば少なくとも30秒毎に、例えば少なくとも15秒毎に、例えば少なくとも10秒毎に、例えば少なくとも5秒毎に、例えば少なくとも2秒毎に、例えば少なくとも1秒毎に、例えば少なくとも0.5秒毎にデータを収集する、
請求項10に記載のセンサー系。 - 微小透析液のサンプル中のクレアチニンを検出するために用いられる組成物であって、
サルコシンオキシダーゼ、クレアチニナーゼ、及びクレアチナーゼの酵素を含み、
前記酵素の全てが溶液中にあり、前記組成物はpHが8.0〜8.95である、組成物。 - 前記組成物はバッファを含み、
前記バッファは、リン酸バッファでもPBSでもなく、及び/又はトリスバッファではなく、及び/又は四ホウ酸ではなく、及び/又はHEPESではない、及び/又は
前記バッファは、EPPS、HEPBS、POPSO、HEPPSO、及びMOBSからなる群から選択される、及び/又は
前記バッファは、pKaが7.0〜9.0、任意に7.3〜8.95、任意に8.5である、及び/又は
前記組成物又は前記バッファは、pHが7.0〜9.0、任意に7.3〜8.95、任意に8.5である、及び/又は
前記組成物は、pH8.0〜8.5のEPPS、任意にpH8.0〜8.5の50mM EPPS、任意にpH8.0の50mM EPPS、又はpH8.5の50mM EPPSを含む、及び/又は
ウレアーゼ及び/又はウリカーゼ及び/又はシスタチンCを検出する手段及び/又はアルブミンを検出する手段をさらに含む、及び/又は
クレアチニナーゼ及び/又はクレアチナーゼ及び/又はサルコシンオキシダーゼの濃度は、最終反応混合液において、クレアチニナーゼの濃度が少なくとも300U/mlとなり、及び/又はクレアチナーゼの濃度が少なくとも120U/mlとなり、且つサルコシンオキシダーゼの濃度が少なくとも10U/mlとなるような濃度である、及び/又は
前記組成物は、クレアチニン及び酵素を含有するサンプルの混合に由来する最終混合溶液が、クレアチニナーゼ、クレアチナーゼ、及びサルコシンオキシダーゼを、10:5:1〜49:8:1U/mlの比率にて含むような組成物である、及び/又は
前記組成物は、クレアチニン及び酵素を含有するサンプルの混合に由来する最終混合溶液が、クレアチニナーゼ、クレアチナーゼ、及びサルコシンオキシダーゼを、600U/ml、300U/ml、及び60U/mlの量で含むような組成物であり、任意に前記組成物はpH8.5である、
請求項12に記載の組成物。 - ヒト又は動物の対象由来の単離されたサンプル中のクレアチニンのレベルの判定方法であって、
請求項10から13のいずれか一項に記載のセンサー系又は組成物を使用することを含む、方法。 - 移植のための単離された腎臓を監視するためのキットであって、
請求項12または13に記載の組成物、
クレアチニン、
EPPS、HEPBS、POPSO、HEPPSO及びMOBSからなる群から選択されるバッファ、
微小透析プローブ、
少なくとも1つの廃棄物レセプタクル、及び
少なくとも1つの精密ポンプ
を含むキット。
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