JP2020527605A

JP2020527605A - イソキノリニルスルホニル誘導体およびその使用

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Publication number: JP2020527605A
Application number: JP2020524668A
Authority: JP
Inventors: ユェンシャンヤオ; リチャン; ヂャオグオチェン; ララヂャオ; リンユンウ; シュフイチェン
Original assignee: チャイナリソーシーズファーマシューティカルホールディングスカンパニーリミテッド
Priority date: 2017-07-19
Filing date: 2018-07-18
Publication date: 2020-09-10
Anticipated expiration: 2038-07-18
Also published as: EP3656772B1; KR102424348B1; EP3656772A4; US11155559B2; WO2019015608A1; CA3070098C; US20200207772A1; ES2927542T3; JP6970295B2; KR20200031669A; CA3070098A1; AU2018303069A1; AU2018303069B2; EP3656772A1; CN111065637B; CN111065637A

Abstract

本発明は、Ｒｈｏプロテインキナーゼ阻害剤であるイソキノリニルスルホニル誘導体、およびＲｈｏプロテインキナーゼ関連疾患を治療する薬物の製造におけるその使用を公開する。具体的に、式（Ｉ）で表される化合物およびその薬学的に許容される塩を公開する。【化１】

Description

関連出願の相互参照

本願は以下の優先権を要求する：
ＣＮ２０１７１０５９０９５７．Ｘ、出願日２０１７−０７−１９。

本発明は、ＲＨＯプロテインキナーゼ阻害剤であるイソキノリニルスルホニル誘導体およびその薬物組成物に関する。具体的に、本発明は式（Ｉ）で表される化合物またはその薬学的に許容される塩に関する。

ファスジルは、幅広い薬理作用を有する新型薬物で、ＲＨＯキナーゼの阻害物質で、ミオシン軽鎖ホスファターゼの活性を増加することによって血管を拡張させ、内皮細胞の張力を下げ、脳組織の微循環を改善し、脳盗血の発生または重症化がなく、また炎症性因子を拮抗し、神経をアポトーシスから保護し、神経再生を促進する。本結果から、塩酸ファスジルは、神経機能回復の促進、臨床症状の軽減、致障害率の減少にある程度の治療効果がある。そのため、現場では経済条件の制限や疾患に対する意識によって、超早期の血栓溶解治療が実現できないことがあるが、疾患のさらなる進展を減少するには、治療ウィンドウ内で局所の血液循環の再構築が非常に重要になり、塩酸ファスジルは虚血性脳血管疾患に顕著な神経保護および治療作用を有し、臨床、特に現場における使用に適し、致障害率の減少、生活品質の向上に有利である。臨床用薬物であるニンテダニブおよびピルフェニドンはいずれも肺線維化に好適な改善作用がある。

すでに公開された特許ＷＯ２０１５／１６５３４１では、下記式で表される化合物が報告された（実施例３８）。ＲＯＣＫキナーゼ阻害剤として、この化合物は優れた酵素活性を有するが、その薬物動態学的性質およびｈＥＲＧ活性は望ましくない。現在の特許では、これらの性質が顕著に改善した、構造が修飾された類似化合物が報告された。

本発明の目的は、式（Ｉ）で表される化合物またはその薬学的に許容される塩またはその互変異性体を提供することにある。

ただし、
Ｔ_１、Ｔ_２はそれぞれ独立にＮＨまたはＣＨ_２から選ばれる。

Ｒ_１、Ｒ_３はそれぞれ独立にＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ_２から選ばれ、あるいはそれぞれ独立に任意に１、２または３個のＲで置換された：Ｃ_１−３アルキル基から選ばれる。

Ｒ_２はＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ_２から選ばれる。

Ｒ_４は任意に１、２または３個のＲで置換された：Ｃ_１−３アルキル基から選ばれる。

あるいは、Ｒ_３とＲ_４は連結して、任意に１、２または３個のＲで置換された３〜６員環を形成している。

ＲはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ_２から選ばれる。

本発明の一部の形態において、上記Ｒ_１、Ｒ_３はそれぞれ独立にＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ_２またはＣＨ_３から選ばれる。

本発明の一部の形態において、上記Ｒ_４はＣＨ_３から選ばれる。

本発明の一部の形態において、上記構造単位

は

から選ばれ、Ｒ_３、Ｒ_４は本発明で定義された通りである。

本発明の一部の形態において、上記構造単位

は

から選ばれる。

本発明の一部の形態において、上記Ｒ_３とＲ_４は連結して、任意に１、２または３個のＲで置換された３員環を形成しており、Ｒは本発明で定義された通りである。

本発明の一部の形態において、上記構造単位

は

から選ばれる。

本発明の一部の形態において、上記Ｒ_１、Ｒ_３はそれぞれ独立にＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ_２またはＣＨ_３から選ばれ、ほかの変量は上記で定義された通りである。

本発明の一部の形態において、上記Ｒ_４はＣＨ_３から選ばれ、ほかの変量は上記で定義された通りである。

本発明の一部の形態において、上記構造単位

は

から選ばれ、ほかの変量は上記で定義された通りである。

本発明の一部の形態において、上記構造単位

は

から選ばれ、ほかの変量は上記で定義された通りである。

本発明の一部の形態において、上記Ｒ_３とＲ_４は連結して、任意に１、２または３個のＲで置換された３員環を形成しており、ほかの変量は上記で定義された通りである。

本発明の一部の形態において、上記構造単位

は

から選ばれ、ほかの変量は上記で定義された通りである。

本発明の一部の形態において、上記化合物またはその薬学的に許容される塩およびその異性体は、

から選ばれる。

ただし、Ｒ_１〜Ｒ_４は上記で定義された通りである。

本発明の別の一部の形態は上記各変量の任意の組み合わせからなる。

また、本発明は、下記式で表される化合物、その異性体またはその薬学的に許容される塩であって、

から選ばれる化合物を提供する。

また、本発明は、活性成分として治療有効量の上記の化合物、その異性体またはその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体とを含む薬物組成物を提供する。

また、本発明は、血管収縮による関連疾患を治療する薬物の製造における、上記の化合物、その異性体またはその薬学的に許容される塩あるいは上記組成物の使用を提供する。

定義と説明
別途に説明しない限り、本明細書で用いられる以下の用語および連語は以下の意味を有する。一つの特定の用語または連語は、特別に定義されない場合、不確定または不明瞭ではなく、普通の定義として理解されるべきである。本明細書で商品名が出た場合、相応の商品またはその活性成分を指す。本明細書で用いられる「薬学的に許容される塩」は、それらの化合物、材料、組成物および／または剤形に対するもので、これらは信頼できる医学的判断の範囲内にあり、ヒトおよび動物の組織との接触に適し、毒性、刺激性、アレルギー反応またはほかの問題または合併症があまりなく、合理的な利益／リスク比に合う。

用語「薬学的に許容される塩」とは、本発明の化合物の塩で、本発明で発見された特定の置換基を有する化合物と比較的に無毒の酸または塩基とで製造される。本発明の化合物に比較的に酸性の官能基が含まれる場合、単独の溶液または適切な不活性溶媒において十分な量の塩基でこれらの化合物の中性の形態と接触することで塩基付加塩を得ることができる。薬学的に許容される塩基付加塩は、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、有機アンモニアまたはマグネシウムの塩あるいは類似の塩を含む。本発明の化合物に比較的に塩基性の官能基が含まれる場合、単独の溶液または適切な不活性溶媒において十分な量の酸でこれらの化合物の中性の形態と接触することで酸付加塩を得ることができる。薬学的に許容される酸付加塩の実例は、無機酸塩および有機酸塩、さらにアミノ酸（たとえばアルギニンなど）の塩、およびグルクロン酸のような有機酸の塩を含み、前記無機酸は、例えば塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、炭酸水素イオン、リン酸、リン酸一水素イオン、リン酸二水素イオン、硫酸、硫酸水素イオン、ヨウ化水素酸、亜リン酸などを含み、前記有機酸は、例えば酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸、マレイン酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、スベリン酸、フマル酸、乳酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、クエン酸、酒石酸やメタンスルホン酸などの類似の酸を含む。本発明の一部の特定の化合物は、塩基性および酸性の官能基を含有するため、任意の塩基付加塩または酸付加塩に転換することができる。

本発明の薬学的に許容される塩は、酸基または塩基性基を含む母体化合物から通常の方法で合成することができる。通常の場合、このような塩の製造方法は、水または有機溶媒あるいは両者の混合物において、遊離酸または塩基の形態のこれらの化合物を化学量論量の適切な塩基または酸と反応させて製造する。本発明の一部の化合物は、非溶媒和物の形態または溶媒和物の形態で存在してもよく、水和物の形態を含む。一般的に、溶媒和物の形態は非溶媒和物の形態と同等で、いずれも本発明の範囲に含まれる。

本発明の一部の化合物は、不斉炭素原子（光学中心）または二重結合を有してもよい。ラセミ体、ジアステレオマー、幾何異性体および単独の異性体はいずれも本発明の範囲に含まれる。

別途に説明しない限り、楔形の結合および破線の結合

は立体中心の絶対配置を表し、波線

で楔形の結合または破線の結合

を表し、

で立体中心の相対配置を表す。本明細書に記載された化合物がオレフィン系の二重結合またはほかの幾何学的不斉中心を含有する場合、別途に定義しない限り、これらは、Ｅ、Ｚ幾何異性体を含む。同様に、すべての互変異性形態も本発明の範囲内に含まれる。

本発明の化合物は、特定の幾何または立体異性体の形態が存在してもよい。本発明は、すべてのこのような化合物を想定し、シスおよびトランス異性体、（−）−および（＋）−鏡像異性体、（Ｒ）−および（Ｓ）−鏡像異性体、ジアステレオマー、（Ｄ）−異性体、（Ｌ）−異性体、およびそのラセミ混合物ならびにほかの混合物、たとえば鏡像異性体または非鏡像異性体を多く含有する混合物を含み、すべてのこれらの混合物は本発明の範囲内に含まれる。アルキル基などの置換基にほかの不斉炭素原子が存在してもよい。すべてのこれらの異性体およびこれらの混合物はいずれも本発明の範囲内に含まれる。

光学活性な（Ｒ）−および（Ｓ）−異性体ならびにＤおよびＬ異性体は、不斉合成またはキラル試薬またはほかの通常の技術を用いて調製することができる。本発明のある化合物の一つの鏡像異性体を得るには、不斉合成またはキラル補助剤を有する誘導作用によって調製することができるが、ここで、得られたジアステレオマー混合物を分離し、かつ補助基を分解させて単離された所要の鏡像異性体を提供する。あるいは、分子に塩基性官能基（たとえばアミノ基）または酸性官能基（たとえばカルボキシ基）が含まれる場合、適切な光学活性な酸または塩基とジアステレオマーの塩を形成させ、さらに本分野で公知の通常の方法によってジアステレオマーの分割を行った後、回収して単離された鏡像異性体を得る。また、鏡像異性体と非鏡像異性体の分離は、通常、クロマトグラフィー法によって行われ、前記クロマトグラフィー法はキラル固定相を使用し、かつ任意に化学誘導法（たとえばアミンからカルバミン酸塩を生成させる。）と併用する。

本発明の化合物は、当該化合物を構成する一つまたは複数の原子には、非天然の比率の原子同位元素が含まれてもよい。たとえば、三重水素（^３Ｈ）、ヨウ素−１２５（^１２５Ｉ）またはＣ−１４（^１４Ｃ）のような放射性同位元素で化合物を標識することができる。本発明の化合物のすべての同位元素の構成の変換は、放射性の有無を問わず、いずれも本発明の範囲内に含まれる。

用語「薬学的に許容される担体」とは本発明の有効量の活性物質を送達することができ、活性物質の生物活性を干渉せず、かつ宿主または患者に毒・副作用がない任意の製剤または担体媒体を指し、代表的な担体は水、油、野菜やミネラル、クリームベース、洗剤ベース、軟膏ベースなどを含む。これらのベースは懸濁剤、増粘剤、皮膚透過促進剤などを含む。これらの製剤は化粧品分野または局部薬物分野の技術者に周知である。

「任意の」または「任意に」とは後記の事項または状況によって可能であるが必ずしも現れるわけではなく、かつ当該記述はそれに記載される事項または状況が生じる場合およびその事項または状況が生じない場合を含むことを意味する。

用語「置換された」とは、特定の原子における任意の一つまたは複数の水素原子が置換基で置換されたことで、特定の原子の原子価状態が正常でかつ置換後の化合物が安定していれば、重水素および水素の変形体を含んでもよい。置換基がケトン基（すなわち＝Ｏ）である場合、２つの水素原子が置換されたことを意味する。ケトン置換は、芳香族基に生じない。用語「任意に置換された」とは、置換されてもよく、置換されていなくてもよく、別途に定義しない限り、置換基の種類と数は化学的に安定して実現できれば任意である。

変量（たとえばＲ）のいずれかが化合物の組成または構造に１回以上現れる場合、その定義はいずれの場合においても独立である。そのため、例えば、一つの基が０−２個のＲで置換された場合、前記基は任意に２個以下のＲで置換され、かついずれの場合においてもＲが独立の選択肢を有する。また、置換基および／またはその変形体の組み合わせは、このような組み合わせであれば安定した化合物になる場合のみ許容される。

連結基の数が０の場合、たとえば−（ＣＲＲ）_０−は、当該連結基が単結合であることを意味する。

そのうちの一つの変量が単結合の場合、それで連結している２つの基が直接連結しており、たとえばＡ−Ｌ−ＺにおけるＬが単結合を表す場合、この構造は実際にＡ−Ｚになる。

置換基がない場合、当該置換基が存在しないことを表し、たとえばＡ−ＸにおけるＸがない場合、当該構造が実際にＡとなることを表す。置換基は一つの環における１個以上の原子に連結する場合、このような置換基はこの環における任意の原子と結合してもよく、たとえば、構造単位

は置換基Ｒがシクロヘキシル基またはシクロヘキサジエンにおける任意の位置に置換されてもよいことを表す。挙げられた置換基に対してどの原子を通して置換された基に連結するか明示しない場合、こうのような置換基はその任意の原子を通して結合してもよく、たとえば、ピリジル基は置換基としてピリジン環における炭素原子のいずれかを通して置換された基に結合してもよい。挙げられた連結基に対してその連結方向を明示しない場合、その連結方向は任意で、たとえば、

における連結基Ｌは−Ｍ−Ｗ−で、この時−Ｍ−Ｗ−は左から右への読む順と同様の方向で環Ａと環Ｂを連結して

を構成してもよく、左から右への読む順と反対の方向で環Ａと環Ｂを連結して

を構成してもよい。前記連結基、置換基および／またはその変形体の組み合わせは、このような組み合わせで安定した化合物になる場合のみ許容される。

別途に定義しない限り、「環」は置換または無置換のシクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、シクロアルケニル基、ヘテロアルケニル基、シクロアルキニル基、ヘテロアルキニル基、アリール基あるいはヘテロアリール基を表す。いわゆる環は、単環、連結環、スピロ環、縮合環または橋架け環を含む。環における原子の数は、通常、環の員数と定義され、たとえば「５−７員環」とは環状に並ぶ５−７個の原子を表す。別途に定義しない限り、当該環は任意に１−３個のヘテロ原子を含む。そのため、「５−７員環」はたとえばフェニルピリジンおよびピペリジル基を含む。一方、用語「５−７員ヘテロシクロアルキル基環」はピリジル基およびピペリジル基を含むが、フェニル基を含まない。用語「環」はさらに少なくとも一つの環を含む環系を含み、その中の各「環」はいずれも独立に上記定義に準じる。

特別に定義しない限り、用語「炭化水素基」またはその下位概念（たとえばアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基など）そのものまたはほかの置換基の一部として直鎖、分枝鎖または環状の炭化水素原子団あるいはその組合せを表し、完全飽和のもの（たとえばアルキル基）、単不飽和または多不飽和のもの（たとえばアルケニル基、アルキニル基、アリール基）でもよく、単置換のものでも多置換のものでもよく、１価のもの（たとえばメチル基）、２価のもの（たとえばメチレン基）または多価のもの（たとえばメチン基）でもよく、２価または多価の原子団を含んでもよく、所定の数の炭素原子を有する（たとえばＣ_１−Ｃ_１２は１−１２個の炭素を表し、Ｃ_１−１２はＣ_１、Ｃ_２、Ｃ_３、Ｃ_４、Ｃ_５、Ｃ_６、Ｃ_７、Ｃ_８、Ｃ_９、Ｃ_１０、Ｃ_１１およびＣ_１２から、Ｃ_３−１２はＣ_３、Ｃ_４、Ｃ_５、Ｃ_６、Ｃ_７、Ｃ_８、Ｃ_９、Ｃ_１０、Ｃ_１１およびＣ_１２から選ばれる）。「炭化水素基」は、脂肪族炭化水素基および芳香族炭化水素基を含み、前記脂肪族炭化水素基は鎖状および環状を含み、具体的にアルキル基、アルケニル基、アルキニル基を含むが、これらに限定されず、前記芳香族炭化水素基は６−１２員の芳香族炭化水素基、たとえばベンゼン、ナフタレンなどを含むが、これらに限定されない。一部の実施例において、用語「炭化水素基」は直鎖、分枝鎖の原子団あるいはその組合せを表し、完全飽和、単不飽和または多不飽和のものでもよく、２価または多価の原子団を含んでもよい。飽和炭化水素原子団の実例は、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉｓｏ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｔ−ブチル基、イソブチル基、ｓ−ブチル基、イソブチル基、シクロヘキシル基、（シクロヘキシル）メチル基、シクロプロピルメチル基、およびｎ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、ｎ−ヘプチル基、ｎ−オクチル基などの原子団の同族体および異性体などを含むが、これらに限定されない。不飽和炭化水素基は一つまたは複数の二重結合または三重結合を有し、実例は、ビニル基、２−プロペニル基、ブテニル基、クロチル基、２−イソペンテニル基、２−（ブタジエニル）基、２，４−ペンタジエニル基、３−（１，４−ペンタジエニル）、エチニル基、１−及び３−プロピニル基、３−ブチニル基、及びより高級の同族体と異性体を含むが、これらに限定されない。

別途に定義しない限り、用語の「環状炭化水素基」、「ヘテロ環状炭化水素基」またはその下位概念（たとえばアリール基、ヘテロアリール基、シクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、シクロアルケニル基、ヘテロシクロアルケニル基、シクロアルキニル基、ヘテロシクロアルキニル基など）そのものまたはほかの用語と合わせて、環化した「炭化水素基」、「ヘテロ炭化水素基」を表す。また、ヘテロ炭化水素基またはヘテロ環状炭化水素基（たとえばヘテロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基）について、ヘテロ原子は当該基が分子のほかの部分に付着した位置を占めてもよい。環状炭化水素基の実例は、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、１−シクロヘキセニル基、３−シクロヘキセニル基、シクロヘプチル基などを含むが、これらに限定されない。ヘテロシクロ基の非制限的な実例は、１−（１，２，５，６−テトラヒドロピリジル）基、１−ピペリジル基、２−ピペリジル基、３−ピペリジル基、４−モルホリル基、３−モルホリル基、テトラヒドロフラン−２−イル基、テトラヒドロフリルインロール−３−イル、テトラヒドロチエン−２−イル基、テトラヒドロチエン−３−イル基、１−ピペラジル基および２−ピペラジル基を含む。

特別に定義しない限り、用語「アルキル基」は直鎖または分枝鎖の飽和炭化水素基を表し、単置換のもの（たとえば−ＣＨ_２Ｆ）でも多置換のもの（たとえば−ＣＦ_３）でもよく、１価のもの（たとえばメチル基）、２価のもの（たとえばメチレン基）または多価のもの（たとえばメチン基）でもよい。アルキル基の例は、メチル基（Ｍｅ）、エチル基（Ｅｔ）、プロピル基（たとえば、ｎ−プロピル基やイソプロピル基）、ブチル基（たとえば、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓ−ブチル基、ｔ−ブチル基）、ペンチル基（たとえば、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基）などを含む。

特別に定義しない限り、用語「シクロアルキル基」は任意の安定した環状または多環炭化水素基を含み、炭素原子のいずれも飽和のもので、単置換のものでも多置換のものでもよく、１価のもの、２価のものまたは多価のものでもよい。このようなシクロアルキル基の実例は、シクロプロピル基、ノルボルナニル基、［２．２．２］ビシクロオクタン、［４．４．０］ビシクロデカンなどを含むが、これらに限定されない。

別途に定義しない限り、用語「ハロ」または「ハロゲン」そのものまたはもう一つの置換基の一部として、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素の原子を表す。また、用語「ハロアルキル基」とは、モノハロアルキル基とポリハロアルキル基を含む。例えば、用語「ハロ（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキル基」とは、トリフルオロメチル基、２，２，２−トリフルオロエチル基、４−クロロブチル基および３−ブロモプロピル基などを含むが、これらに限定されない。別途に定義しない限り、ハロアルキル基の実例は、トリフルオロメチル基、トリクロロメチル基、ペンタフルオロエチル基およびペンタクロロエチル基を含むが、これらに限定されない。

用語「脱離基」とは別の官能基または原子で置換反応（たとえば求核置換反応）で置換されてもよい官能基または原子を指す。たとえば、代表的な脱離基は、トリフルオロメタンスルホン酸エステル、塩素、臭素、ヨウ素、たとえばメタンスルホン酸エステル、トルエンスルホン酸エステル、ｐ−ブロモベンゼンスルホン酸エステル、ｐ−トルエンスルホン酸エステルなどのスルホン酸エステル基、たとえばアセチルオキシ基、トリフルオロアセチルオキシ基などのアシルオキシ基を含む。

用語「保護基」は「アミノ保護基」、「ヒドロキシ保護基」または「メルカプト保護基」を含むが、これらに限定されない。用語「アミノ保護基」とはアミノ基の窒素の位置における副反応の防止に適する保護基を指す。代表的なアミノ保護基は、ホルミル基、アルカノイル基（たとえばアセチル基、トリクロロアセチル基またはトリフルオロアセチル基）ようなようアシル基、ｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）基のようなアルコキシカルボニル基、ベントキシカルボニル（Ｃｂｚ）基および９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）基のようなアリールメトキシカルボニル基、ベンジル（Ｂｎ）基、トリフェニルメチル（Ｔｒ）基、１，１−ビス（４’−メトキシフェニル）メチル基のようなアリールメチル基、トリメチルシリル（ＴＭＳ）基およびｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ）基のようなシリル基などを含むが、これらに限定されない。用語「ヒドロキシ保護基」とはヒドロキシ基の副反応の防止に適する保護基を指す。代表的なヒドロキシ保護基は、メチル基、エチル基およびｔ−ブチル基のようなアルキル基、アルカノイル基（たとえばアセチル基）ようなようアシル基、ベンジル（Ｂｎ）基、ｐ−メトキシベンジル（ＰＭＢ）基、９−フルオレニルメチル（Ｆｍ）基およびジフェニルメチル（ＤＰＭ）基のようなアリールメチル基、トリメチルシリル（ＴＭＳ）基およびｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ）基のようなシリル基などを含むが、これらに限定されない。

本発明の化合物は当業者に熟知の様々な合成方法によって製造するができ、以下挙げられた具体的な実施形態、ほかの化学合成方法と合わせた実施形態および当業者に熟知の同等の代替方法を含み、好適な実施形態は本発明の実施例を含むが、これらに限定されない。

本発明に使用される溶媒は市販品として入手可能である。本発明は下記略号を使用する。ａｑは水を、ＨＡＴＵはＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファートを、ＥＤＣはＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩を、ｍ−ＣＰＢＡは３−クロロ過安息香酸を、ｅｑは当量、等量を、ＣＤＩはカルボニルジイミダゾールを、ＤＣＭはジクロロメタンを、ＰＥは石油エーテルを、ＤＩＡＤはアゾジカルボン酸ジイソプロピルを、ＤＭＦはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを、ＤＭＳＯはジメチルスルホキシドを、ＥｔＯＡｃは酢酸エチルを、ＥｔＯＨはエタノールを、ＭｅＯＨはメタノールを、ＣＢｚはアミン保護基のベントキシカルボニル基を、ＢＯＣはアミン保護基のｔ−ブチルカルボニル基を、ＨＯＡｃは酢酸を、ＮａＣＮＢＨ_３はシアノ水素化ホウ素ナトリウムを、ｒ．ｔ．は室温を、Ｏ／Ｎは一晩行うことを、ＴＨＦはテトラヒドロフランを、Ｂｏｃ_２Ｏはジカルボン酸ジ−ｔ−ブチルを、ＴＦＡはトリフルオロ酢酸を、ＤＩＰＥＡはジイソプロピルエチルアミンを、ＳＯＣｌ_２は塩化チオニルを、ＣＳ_２は二硫化炭素を、ＴｓＯＨはｐ−トルエンスルホン酸を、ＮＦＳＩはＮ−フルオロ−Ｎ−（ベンゼンスルホニル）ベンゼンスルホニルアミドを、ＮＣＳは１−クロロピロリジン−２，５−ジオンを、ｎ−Ｂｕ_４ＮＦはテトラブチルアンモニウムフルオリドを、ｉＰｒＯＨは２−プロパノールを、ｍｐは融点を、ＬＤＡはリチウムジイソプロピルアミドを、ＤＩＢＡＬ−Ｈは水素化ジイソブチルアルミニウムを表す。

化合物は人工的にまたはＣｈｅｍＤｒａｗ＜登録商標＞ソフトによって名付けられ、市販化合物はメーカーのカタログの名称が使用された。

本発明の化合物は顕著で、ひいては予想外のプロテアーゼの抑制活性を有する。ＰＫの面では、本発明の化合物は半減期が約３倍向上し、クリアランスが顕著に低下し、本発明が既存技術よりも優れた性質を持つことが証明された。同時に、本発明の化合物は、既存技術と比べ、ｈＥＲＧの潜在的リスクがより低い。

肺線維化スコアＯｎｅ−ｗａｙＡＮＯＶＡ（一元配置分散分析）： ^＃＃＃ｐ＜０．００１ｖｓ．偽手術群；＊ｐ＜０．０５ｖｓ．モデル群；＊＊ｐ＜０．０１ｖｓ．モデル群；＊＊＊ｐ＜０．００１ｖｓ．モデル群；Ｔ−ｔｅｓｔ：^＄ｐ＜０．０５ｖｓ．モデル群。肺線維化スコア百分率Ｔｏｗ−ｗａｙＡＮＯＶＡ（二元配置分散分析）： ^＃＃＃ｐ＜０．００１ｖｓ．偽手術群；＊ｐ＜０．０５ｖｓ．モデル群；＊＊ｐ＜０．０１ｖｓ．モデル群；＊＊＊ｐ＜０．００１ｖｓ．モデル群。

具体的な実施形態
以下、本発明を実施例により詳しく説明するが、本発明の何らの不利な制限にもならない。ここで、本発明を詳しく説明し、その具体的な実施例の形態も公開したため、本発明の精神と範囲を逸脱することなく、本発明の具体的な実施形態に様々な変更や改良を加えることができることは、当業者にとって明らかである。

実施例１

工程１
化合物１ａ（３０．００ｇ，１７３．２４ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（４３．８３ｇ，４３３．００ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５００ｍＬ）溶液を０℃に冷却した後、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート（７９．０５ｇ，２０８．００ｍｍｏｌ）を入れた。得られた反応液を０℃で１０分間撹拌した。その後、Ｎ−メトキシメチルアミン塩酸塩（１８．５９ｇ，１９１．００ｍｍｏｌ）を入れて２０℃で１６時間撹拌した。反応液を水（１．００Ｌ）に注ぎ、酢酸エチル（２．００Ｌ×２）で抽出し、有機相を合併して無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過して乾燥するまで蒸発させ、粗製品をシリカゲルカラム（石油エーテル／酢酸エチル＝１００−０％）によって分離・精製し、化合物１ｂを得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ） δ ４．１３−４．０７（ｍ，２Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ），３．３７（ｓ，１Ｈ），３．２１（ｓ，３Ｈ），１．３７−１．３５（ｍ，２Ｈ），１．２６−１．２２（ｍ，３Ｈ），１．０３−１．００（ｍ，２Ｈ）。

工程２
０℃で化合物１ｂ（３４．００ｇ，１５７．２４ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３００ｍＬ）溶液に水素化ナトリウム（７．５５ｇ，１８９．００ｍｍｏｌ，６０％）を入れた。得られた反応液を０℃で１０分間撹拌した後、臭化アリル（２８．５３ｇ，２３５．８６ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応液を２０℃で５時間撹拌した。反応液を水（１．００Ｌ）に注いで酢酸エチル（３００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合併し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、粗製品をシリカゲルカラム（石油エーテル／酢酸エチル＝１００−０％）によって分離・精製した。化合物１ｃを得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ５．８５−５．７７（ｍ，１Ｈ），５．０６−５．０３（ｍ，２Ｈ），４．１７−４．０８（ｍ，２Ｈ），３．９８−３．９４（ｍ，２Ｈ），３．６３（ｓ，３Ｈ），３．１５（ｓ，３Ｈ），１．５３（ｂｒｓ，２Ｈ），１．２６−１．２１（ｍ，５Ｈ）。

工程３
０℃で水素化アルミニウムリチウム（３．６３ｇ，９５．７１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（４４０ｍＬ）溶液に化合物１ｃ（２２．３０ｇ，８７．０１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２２０ｍＬ）溶液を入れ、そして０℃で１時間撹拌した。反応を飽和塩化アンモニウム水溶液（３００ｍＬ）でゆっくりクエンチングし、そして酢酸エチル（３００ｍＬ×３）で抽出し、有機相を合併して無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、粗製品をシリカゲルカラム（石油エーテル／酢酸エチル＝１００−０％）によって分離・精製し、化合物１ｄを得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ９．１５（ｂｒｓ，１Ｈ），５．８９−５．８１（ｍ，１Ｈ），５．１４−５．１１（ｍ，２Ｈ），４．１９−４．１１（ｍ，２Ｈ），３．８１（ｂｒｓ，２Ｈ），１．５３（ｂｒｓ，２Ｈ），１．４２（ｂｒｓ，２Ｈ），１．２４（ｂｒｓ，３Ｈ）。

工程４
化合物１ｄ（４．５０ｇ，２２．８２ｍｍｏｌ）のトルエン（４５ｍＬ）溶液に化合物１ｅ（４．５０ｇ，２５．１０ｍｍｏｌ）を入れ、そして１３０℃に加熱して７２時間撹拌した。反応を１Ｎ希塩酸（１５０ｍＬ）でクエンチングし、そして酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で洗浄した。残った水相を水酸化ナトリウムでｐＨ値が１２になるように調整した後、ジクロロメタン／メタン＝１０：１の混合溶媒（１００ｍＬ×３）で抽出し、有機相を合併し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、粗製品をシリカゲルカラム（石油エーテル／酢酸エチル＝１００−０％）によって分離・精製し、化合物１ｆを得た。

工程５
化合物１ｆ（４．３０ｇ，１３．６８ｍｍｏｌ）およびＢＯＣ_２Ｏ（４．４８ｇ，２０．５２ｍｍｏｌ）のメタノール（１００ｍＬ）溶液に湿潤パラジウム炭素（１．２０ｇ，１０％）を入れた。得られた反応液を５０℃および５０ｐｓｉの水素ガス雰囲気で２０時間撹拌した後、反応液をろ過し、濃縮し、粗製品をシリカゲルカラム（石油エーテル／酢酸エチル＝１００−０％）によって分離・精製し、化合物１ｇを得た。

工程６
化合物１ｇ（４．１０ｇ，１３．２１ｍｍｏｌ）のエタノール（１２０ｍＬ）および水（３０ｍＬ）の溶液に水酸化カリウム（２２．２４ｇ，３９６．３０ｍｍｏｌ）を入れ、この反応液を９５℃で４０時間撹拌した。反応液を濃縮してエタノールを除去した後、ジクロロメタン（１５０ｍＬ×５）で抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、粗製品をシリカゲルカラム（石油エーテル／酢酸エチル＝１００−０％）によって分離・精製し、化合物１ｈを得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ４．１３−４．０８（ｍ，１Ｈ），３．７５−３．５８（ｍ，１Ｈ），３．３４−３．２９（ｍ，１Ｈ），３．１１−３．０６（ｍ，２Ｈ），２．７３−２．６９（ｍ，１Ｈ），２．００−１．９５（ｍ，２Ｈ），１．７０ −１．６７（ｍ，１Ｈ），１．４９−１．４４（ｍ，１０Ｈ），０．６６−０．５９（ｍ，２Ｈ）。

工程７
化合物１ｈ（２００ｍｇ，０．８４ｍｍｏｌ）および化合物１ｉ（２８７ｍｇ，１．２６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）溶液にトリエチルアミン（１７０ｍｇ，１．６８ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた反応液を１５℃で５時間反応させた。反応終了後、そのままジクロロメタンを除去し、得られた粗製品を分取薄層プレート（酢酸エチル）によって精製して化合物１ｊを得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ９．３６−９．３４（ｍ，１Ｈ），８．７１−８．６９（ｍ，１Ｈ），８．４８−８．４７（ｍ，２Ｈ），８．２５−８．２０（ｍ，１Ｈ），７．７４−７．７０（ｍ，１Ｈ），４．１５−３．９６（ｍ，２Ｈ），３．７３−３．２５（ｍ，４Ｈ），１．８４−１．６２（ｍ，１Ｈ），１．６０（ｂｒｓ，３Ｈ），１．３８（ｓ，９Ｈ），１．２６−０．６８（ｍ，２Ｈ）。

工程８
２０℃で、化合物１ｊ（１３０ｍｇ，０．３０ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（１ｍＬ）溶液にＨＣｌ／ＥｔＯＡｃ（４ｍＬ，４Ｍ）を入れた。得られた反応液を同温度で続いて２時間撹拌した。反応終了後、ろ過し、乾燥して化合物１を得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋３３０、実測値３３０。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ_２Ｏ） δ ９．７５（ｓ，１Ｈ），８．８１−８．６５（ｍ，４Ｈ），８．０８（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．１０−４．０７（ｍ，１Ｈ），３．９３−３．９１（ｍ，１Ｈ），３．７９−３．７４（ｍ，１Ｈ），３．５１−３．４８（ｍ，１Ｈ），３．４２−３．２５（ｍ，２Ｈ），２．４１−２．３９（ｍ，１Ｈ），２．０３ −２．０２（ｍ，１Ｈ），１．３９−１．３６（ｍ，１Ｈ），１．１４−１．１２（ｍ，１Ｈ），０．８１−０．７８（ｍ，１Ｈ），０．５４−０．５３（ｍ，１Ｈ）。

実施例２

工程１
化合物１ｈおよび化合物２ａから化合物１の合成方法に従って化合物２を得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋３６４、実測値３６４。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ_２Ｏ） δ ９．３０（ｓ，１Ｈ），８．６７（ｓ，１Ｈ），８．６２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），８．４６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．８６（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．０５−３．９４（ｍ，２Ｈ），３．８２−３．７７（ｍ，１Ｈ），３．５７−３．５５（ｍ，１Ｈ），３．３８−３．２２（ｍ，２Ｈ），２．４２−２．３９（ｍ，１Ｈ），２．０８−２．０４（ｍ，１Ｈ），１．０６−０．７９（ｍ，４Ｈ）。

実施例３

工程１
化合物１ｈおよび化合物３ａから化合物１の合成方法に従って化合物３を得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋３４８、実測値３４８。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ） δ ９．２５（ｓ，１Ｈ），８．６７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ１Ｈ），８．５３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．４５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８６（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），３．８５−３．７３（ｍ，２Ｈ），３．４３（ｓ，１Ｈ），３．０６−２．９８（ｍ，１Ｈ），２．７２−２．６５（ｍ，１Ｈ），２．１５−２．０５（ｍ，１Ｈ），１．７３−１．７１（ｍ，１Ｈ），０．９７−０．８７（ｍ，１Ｈ），０．８２−０．７９（ｍ，２Ｈ），０．６９−０．６０（ｍ，２Ｈ）。

実施例４

工程１
２００ｍＬ密封缶にベンジルグリシン４ａ（７．０６ｇ，４２．７４ｍｍｏｌ）、アセトン（６．２１ｇ，１０６．８５ｍｍｏｌ）、１−ベンジル−２，５−ジヒドロピロール−２，５−ジオン４ｂ（４．００ｇ，２１．３７ｍｍｏｌ）およびトルエン（４０ｍＬ）を入れた。得られた反応液を１４０℃で４８時間撹拌した。反応完了後、反応混合物を濃縮し、粗製品をシリカゲルクロマトグラフィーカラム（石油エーテル／酢酸エチル＝１００−０％）によって精製し、化合物４ｃを得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ７．４０−７．３２（ｍ，１０Ｈ），４．７７−４．７２（ｔ，Ｊ＝５．２，２Ｈ），３．９６−３．７４（ｍ，３Ｈ），２．９０−２．６６（ｍ，３Ｈ），２．３１（ｓ，３Ｈ），１．６０（ｓ，３Ｈ）。

工程２
１０００ｍＬ水素化瓶に化合物４ｃ（５．２８ｇ，１５．１５ｍｍｏｌ）および３５０ｍＬのメタノールを入れた後、窒素ガスの保護下において湿潤パラジウム炭素（２．００ｇ，純度１０％）およびＢｏｃ_２Ｏ（６．６１ｇ，３０．３０ｍｍｏｌ）を入れ、懸濁液を水素ガスで３回置換した。得られた混合物を水素ガス（５０ｐｓｉ）において５０℃で１６時間撹拌した。反応完了後、反応混合物をろ過し、濃縮し、粗製品をシリカゲルクロマトグラフィーカラム（石油エーテル／酢酸エチル＝１００−０％）によって精製し、化合物４ｄを得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ７．２３−７．２０（ｍ，５Ｈ），４．５７（ｓ，２Ｈ），２．９３−２．８３（ｍ，４Ｈ），１．４１−１．３６（ｍ，１５Ｈ）。

工程３
５０ｍＬ三口丸底フラスコに化合物４ｄ（３００ｍｇ，０．８４ｍｍｏｌ）および７ｍＬのテトラヒドロフランを入れた後、窒素ガスの保護下において０℃でゆっくりボラン−テトラヒドロフラン（１Ｍ，３．４ｍＬ）を滴下し、得られた反応液を５０℃に昇温させて２．５時間撹拌した。反応終了後、０℃に降温させ、ゆっくりメタノール（１０ｍＬ）を滴下してクエンチングし、そして混合物を濃縮した。分取薄層クロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝２：１）によって精製し、化合物４ｅを得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋３３１、実測値３３１。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ７．３２−７．２６（ｍ，５Ｈ），３．６２（ｓ，２Ｈ），３．２５（ｓ，１Ｈ），２．９８−２．９５（ｍ，１Ｈ），２．７２−２．６６（ｍ，２Ｈ），２．５１−２．４４（ｍ，２Ｈ），２．３２−２．２９（ｍ，１Ｈ），２．１１（ｍ，１Ｈ），１．４６−１．３４（ｍ，１５Ｈ）。

工程４
５０ｍＬ水素化瓶に化合物４ｅ（１００ｍｇ，０．３０ｍｍｏｌ）および５ｍＬのメタノールを入れた後、窒素ガスの保護下において湿潤パラジウム炭素（１００ｍｇ，純度１０％）を入れ、懸濁液を順に窒素ガスおよび水素ガスで３回置換した。混合溶液を水素ガス（５０ｐｓｉ）において５０℃で１２時間撹拌した。反応終了後、反応混合物をろ過し、濃縮し、化合物４ｆを得たが、そのまま次の工程に使用した。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋２４１、実測値２４１。

工程５
５０ｍＬ丸底フラスコに化合物４ｆ（７２ｍｇ，前の工程における粗製品）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（７７ｍｇ，０．６０ｍｍｏｌ）および１ｍＬのジクロロメタンを入れ、０℃および窒素ガスの保護下においてゆっくりクロロギ酸ベンジル（７７ｍｇ，０．４５ｍｍｏｌ）を滴下した。反応液を２５℃に昇温させ、そして同温度で３時間撹拌した。反応終了後、反応混合物をＮ，Ｎ，Ｎ−トリメチルエチレンジアミン（２ｍＬ，１０％）で洗浄し、さらにジクロロメタン（５ｍＬ×３）で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、粗製品を分取薄層クロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝２：１）によって精製し、化合物４ｇを得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ−５６＋Ｈ］^＋３１９、実測値３１９。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ７．３７−７．３６（ｍ，５Ｈ），５．１８−５．０９（ｍ，２Ｈ），３．６８−３．５９（ｍ，２Ｈ），３．４８−３．３９（ｍ，２Ｈ），３．６７−３．３５（ｍ，１Ｈ），２．８４−２．８０（ｍ，１Ｈ），１．９９−１．９５（ｍ，２Ｈ），１．４７−１．２９（ｍ，１５Ｈ）。
工程６
２５ｍＬ丸底フラスコに化合物４ｇ（６２ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ）および１ｍＬのジクロロメタンを入れた後、窒素ガスの保護下においてトリフルオロ酢酸（１９０ｍｇ，１．６７ｍｍｏｌ）を滴下し、そして２５℃で１時間撹拌した。反応終了後、反応混合物をそのまま濃縮し、化合物４ｈ（４６ｍｇ、粗製品）を得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋２７５、実測値２７５。
工程７
２５ｍＬ丸底フラスコに化合物４ｈ（４６ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（６５ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）および１．５ｍＬのジクロロメタンを入れ、０℃および窒素ガスの保護下においてゆっくりイソキノリニルスルホニルクロリド１ｉ（４９ｍｇ，０．２２ｍｍｏｌ）を滴下し、そして２５℃で２時間撹拌した。反応終了後、反応混合物をそのまま濃縮し、粗製品を分取薄層クロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１：１）によって精製し、化合物４ｉを得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋４６６、実測値４６６。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ９．３４−９．３３（ｍ，１Ｈ），８．６８−８．６６（ｍ，１Ｈ），８．４９−８．３９（ｍ，２Ｈ），８．２１−８．１９（ｍ，１Ｈ），７．７１−７．６６（ｍ，１Ｈ），７．３４−７．２８（ｍ，５Ｈ），５．０９−５．０５（ｍ，２Ｈ），３．６４−３．４９（ｍ，２Ｈ），３．３３−３．２８（ｍ，１Ｈ），３．０８−２．９７（ｍ，３Ｈ），２．８１−２．８０（ｍ，１Ｈ），２．５４−２．５２（ｍ，１Ｈ），１．３２−１．２７（ｍ，６Ｈ）。

工程８
５ｍＬマイクロ波管に化合物４ｉ（３２ｍｇ，０．０７ｍｍｏｌ）および１ｍＬのトリフルオロ酢酸を入れ、密封し、１００℃でマイクロ波反応器において１時間撹拌した。反応終了後、反応混合物をそのまま濃縮し、粗製品を分取液体クロマトグラフィーＨＰＬＣによって精製し、化合物４を得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋３３２、実測値３３２。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ９．４２（ｓ，１Ｈ），８．６９−８．６８（ｍ，１Ｈ），８．６０−８．５９（ｍ，１Ｈ），８．５６−８．５４（ｍ，１Ｈ），８．４５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８６（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），３．８２−３．７７（ｍ，１Ｈ），３．２６−３．２０（ｍ，２Ｈ），２．９８（ｍ，１Ｈ），２．９７（ｍ，１Ｈ），２．５４−２．４４（ｍ，３Ｈ），１．４１（ｓ，６Ｈ）．
実施例５

工程１
化合物５ａ（４．００ｇ，１８．３３ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解させ、水素化ナトリウム（０．８８ｇ，２１．９９ｍｍｏｌ，６０％）を窒素ガスの保護下において温度が０℃のままでゆっくり入れた。混合物を２５℃で１０分間撹拌した後、ブロモプロペン４．４３ｇ，３６．６６ｍｍｏｌ）を反応液に入れた。混合物を２５℃で続いて撹拌して３時間反応させた。反応終了後、反応液を飽和塩化アンモニウム水溶液２０ｍＬで０℃でクエンチングし、水（４０ｍＬ）、酢酸エチル（４０ｍＬ×３）を入れ、有機相を合併して飽和食塩水（５０ｍＬ×１）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、粗製品をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１００−０％）によって精製し、化合物５ｂを得た。

工程２
化合物５ｂ（２．５０ｇ，９．６８ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（４０ｍＬ）に溶解させ、−７８℃および窒素ガスの保護下においてゆっくり水素化ジイソブチルアルミニウム（１Ｍ，１７．４ｍＬ）を滴下した。得られた反応液を−７８℃で続いて６時間撹拌した。反応終了後、反応液を飽和塩化アンモニウム水溶液（２０ｍＬ）およびＨＣｌ（１Ｎ，１０ｍＬ）を２５℃でクエンチングし、水（２０ｍＬ）、酢酸エチル（４０ｍＬ×３）を入れ、有機相を合併して飽和食塩水（４０ｍＬ×１）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、粗製品をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１００−０％）によって精製し、化合物５ｃを得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ９．３２（ｓ，１Ｈ），５．９０−５．７８（ｍ，１Ｈ），５．２３−５．１１（ｍ，２Ｈ），４．１４（ｑ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），３．９５（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，２Ｈ），１．２７（ｓ，６Ｈ），１．２３（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，３Ｈ）。

工程３
化合物５ｃ（１．５０ｇ，７．５３ｍｍｏｌ）およびベンジルグリシン４ａ（２．４９ｇ，１５．０６ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのトルエンに溶解させた。得られた反応混合物を１３０℃で撹拌して１６時間反応させた。反応終了後、反応液に水（１０ｍＬ）を入れ、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出し、有機相を合併して飽和食塩水（２０ｍＬ×１）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、粗製品をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１００−０％）によって精製し、化合物５ｄを得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ７．３８−７．３４（ｍ，２Ｈ），７．３０（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．２６−７．２０（ｍ，１Ｈ），４．１６（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），３．９７（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，２Ｈ），３．６４−３．５５（ｍ，１Ｈ），３．４８−３．４０（ｍ，１Ｈ），３．２９（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ），３．１１−２．９８（ｍ，２Ｈ），２．８４−２．７３（ｍ，１Ｈ），２．４５−２．３６（ｍ，１Ｈ），１．８７−１．９３（ｍ，１Ｈ），１．３０（ｓ，６Ｈ），１．２５（ｓ，３Ｈ）。

工程４
化合物５ｄ（４００ｍｇ，１．３２ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのアセトニトリルに溶解させた後、トリメチルヨードシラン（２．６５ｇ，１３．２３ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた反応液を２５℃で続いて６時間撹拌した。反応終了後、反応液に２０ｍＬの水を入れて反応をクエンチングし、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を合併して飽和食塩水（３０ｍＬ×１）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、粗製品５ｅを得た。そのまま次の工程に使用した。

工程５
化合物５ｅ（２５０ｍｇ，１．０９ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのジクロロメタンに溶解させた後、順にジカルボン酸ジ−ｔ−ブチル（４７４ｍｇ，２．１７ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（２８１ｍｇ，２．１７ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた混合物を２５℃で続いて１６時間撹拌した。反応終了後、反応液に水（１０ｍＬ）を入れ、ジクロロメタン（２０ｍＬ×２）で抽出し、有機相を合併して飽和食塩水（２０ｍＬ×１）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、得られた粗製品を分取薄層クロマトグラフィープレート（酢酸エチル／石油エーテル＝５／１）によって精製して化合物５ｆを得た。

工程６
化合物５ｆ（３００ｍｇ，０．９１ｍｍｏｌ）および無水酢酸（１８５ｍｇ，１．８２ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（３０ｍＬ）に溶解させた後、窒素ガスの保護下においてパラジウム炭素（６０ｍｇ，１０％）を入れた。得られた反応液を水素ガスで３回置換した後、水素ガス雰囲気（５０ｐｓｉ）および５０℃で続いて３時間撹拌した。反応終了後、反応液をろ過し、濃縮し、粗製品５ｇを得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋２８３、実測値２８３。

工程７
２５℃で塩酸酢酸エチル（２０ｍＬ，４Ｍ）を化合物５ｇ（２５０ｍｇ，０．８９ｍｍｏｌ）の５ｍＬ酢酸エチル溶液に滴下した。得られた反応液を同温度で続いて０．５時間撹拌した。反応終了後、そのまま溶媒を除去して粗製品５ｈを得た。そのまま次の工程に使用した。

工程８
化合物１ｉ（１５０ｍｇ，０．６６ｍｍｏｌ）および化合物５ｈ（２００ｍｇ，塩酸塩）を５ｍＬのジクロロメタンに溶解させた後、ジイソプロピルエチルアミン（１４２ｍｇ，１．１０ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた反応液を２５℃で続いて１６時間撹拌した。反応終了後、そのまま濃縮して溶媒を除去し、水（５ｍＬ）を入れ、酢酸エチル（１０ｍＬ×２）で抽出し、有機相を合併して飽和食塩水（１５ｍＬ×１）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、得られた粗製品を分取薄層クロマトグラフィープレート（酢酸エチル）によって精製して化合物５ｉを得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋３７４、実測値３７４。

工程９
化合物５ｉ（１００ｍｇ，０．６６ｍｍｏｌ）をエタノール（０．５ｍＬ）および水（１ｍＬ）の混合溶媒に溶解させ、水酸化ナトリウム（３２１ｍｇ，８．０３ｍｍｏｌ）を入れた。得られた反応液を１００℃で続いて１６時間撹拌した。反応終了後、希塩酸（１Ｎ）でｐＨが中性になるように調整し、高速液体クロマトグラフィー法によって精製して化合物５を得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋３３２、実測値３３２。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ） δ ９．３８（ｓ，１Ｈ），８．６６−８．５４（ｍ，３Ｈ），８．４３−８．３７（ｍ，１Ｈ），７．８２（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），３．７５−３．８０（ｍ，１Ｈ），３．２９−３．２０（ｍ，２Ｈ），３．１３−３．０７（ｍ，１Ｈ），２．８９−２．６８（ｍ，３Ｈ），１．９７−１．８８（ｍ，１Ｈ），１．４９（ｓ，３Ｈ），１．３６（ｓ，３Ｈ）。

実施例６

工程１
０℃で化合物６ａ（１５．５８ｇ，８２．３４ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（３２．８７ｇ，８６．４６ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（２２．３５ｇ，１７２．９１ｍｍｏｌ）の２００ｍＬジクロロメタン溶液にＮ−メトキシメチルアミン塩酸塩（８．８３ｇ，９０．５７ｍｍｏｌ）を入れた。得られた反応液を２５℃に昇温させで続いて１６時間撹拌した。反応終了後、反応液に２００ｍＬの水を入れ、１Ｎの水酸化ナトリウム水溶液でｐＨが１４になるように調整し、ジクロロメタン（２００ｍＬ×２）で抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、粗製品をシリカゲルカラム（石油エーテル／酢酸エチル＝１００−０％）によって精製し、化合物６ｂを得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ５．２５（ｓ，１Ｈ），４．６９（ｓ，１Ｈ），３．７８（ｓ，３Ｈ），３．２２（ｓ，３Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ），１．３２（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，３Ｈ）。

工程２
０℃および窒素ガスの保護下において、化合物６ｂ（１４．６９ｇ，６３．２４ｍｍｏｌ）の２００ｍＬＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの溶液に水素化ナトリウム（４．３０ｇ，１０７．５１ｍｍｏｌ，６０％）を分けて入れた後、続いて１０分間撹拌し、さらに０℃で続いて３−ブロモプロペン（１９．１３ｇ，１５８．１０ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた反応液を１５℃で２２時間反応させた。反応終了後、反応液に２００ｍＬの飽和塩化アンモニウム水溶液、２００ｍＬの水を入れ、酢酸エチル（２００ｍＬ×２）で抽出した。有機相を飽和食塩水（３００ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、得られた粗製品をシリカゲルカラム（石油エーテル／酢酸エチル＝１００−０％）によって精製し、化合物６ｃを得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ５．８６−５．８１（ｍ，１Ｈ），５．３０−５．２５（ｍ，１Ｈ），５．１４−５．０４（ｍ，２Ｈ），３．９５−３．８３（ｍ，２Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ），３．１６（ｓ，３Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ）１．３１（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，３Ｈ）。

工程３
−７８℃および窒素ガスの保護下において、化合物６ｃ（１３．３３ｇ，４８．９５ｍｍｏｌ）の２００ｍＬテトラヒドロフラン溶液にＤＩＢＡＬ−Ｈ（９７．９０ｍｍｏｌ，９７．９ｍＬ，１Ｍ）を入れた。得られた反応液を２０℃に昇温させで続いて２時間撹拌した。反応終了後、反応液に４００ｍＬの飽和酒石酸カリウムナトリウム、２００ｍＬの水、３００ｍＬの酢酸エチルを入れ、酢酸エチル（３００ｍＬ×２）で抽出し、有機相を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮してそのまま粗製品の化合物６ｄを得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ９．５６（ｓ，１Ｈ），５．８７−５．８１（ｍ，１Ｈ），５．３０−５．１０（ｍ，３Ｈ），３．８５−３．７６（ｍ，１Ｈ），３．５６−３．４９（ｍ，１Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ）１．３４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，３Ｈ）。

工程４
化合物６ｄ（１２．９６ｇ，６０．７７ｍｍｏｌ）および化合物４ａ（２５．１０ｇ，１５１．９３ｍｍｏｌ）の３０７ｍＬトルエン溶液を１３５℃に加熱して２４時間反応させた。反応終了後、反応系に３００ｍＬの水を入れ、酢酸エチル（３００ｍＬ×４）で抽出し、有機相を飽和食塩水（３００ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、得られた粗製品をシリカゲルカラム（石油エーテル／酢酸エチル＝１００−０％）によって精製して化合物６ｅを得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ７．２６−７．１６（ｍ，５Ｈ），３．９６−３．６１（ｍ，２Ｈ），３．４５−３．２０（ｍ，３Ｈ），２．９８−２．８４（ｍ，１Ｈ），２．７３−２．５９（ｍ，２Ｈ），２．２０−２．１３（ｍ，１Ｈ）１．９７−１．８４（ｍ，１Ｈ），１．５８−１．４６（ｍ，１Ｈ），１．３８（ｓ，９Ｈ），１．０１−０．８５（ｍ，３Ｈ）。

工程５
窒素ガスの保護下において、化合物６ｅ（７．００ｇ，２２．１２ｍｍｏｌ）およびＡｃ_２Ｏ（４．５２ｇ，４．１ｍＬ，４４．２４ｍｍｏｌ）の１００ｍＬ酢酸エチル溶液に乾燥パラジウム炭素（１．００ｇ，１０％）を入れた。反応液を水素ガスで３回置換した。得られた反応液を水素ガス雰囲気（５０ｐｓｉ）および５０℃で続いて撹拌して１０時間反応させた。反応完了後、反応液をろ過し、濃縮し、粗製品をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１００−０％）によって精製して化合物６ｆを得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ−１００］^＋２６９、実測値２６９。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ４．０３−４．０１（ｍ，２Ｈ），３．５９−３．５０（ｍ，２Ｈ），３．４８−３．３５（ｍ，２Ｈ），２．９４−２．９３（ｍ，１Ｈ），２．０９−２．０２（ｍ，４Ｈ），１．８０−１．７０（ｍ，１Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ），１．２８−１．１２（ｍ，３Ｈ）。

工程６
０℃および窒素ガスの保護下において、化合物６ｆ（４．３４ｇ，１６．１７ｍｍｏｌ）の２０ｍＬジクロロメタン溶液にトリフルオロ酢酸（３６．８７ｇ，３２３．４０ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた反応液を２５℃で続いて１２時間撹拌した。反応終了後、そのまま濃縮し、得られた粗製品に０℃で飽和炭酸ナトリウム水溶液２０ｍＬを入れ、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出し、飽和食塩水（２０ｍＬ×３）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、粗製品の化合物６ｇを得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋１６９、実測値１６９。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ） δ４．００−３．９１（ｍ，２Ｈ），３．６９−３．５２（ｍ，２Ｈ），３．４１−３．０４（ｍ，３Ｈ），２．７１−２．６１（ｍ，３Ｈ），２．０９−２．０２（ｍ，４Ｈ），１．８３−１．７６（ｍ，１Ｈ）。

工程７
化合物６ｇ（２．０８ｇ，１２．３７ｍｍｏｌ）および化合物３ａ（３．０４ｇ，１２．３７ｍｍｏｌ）から実施例１の工程７の合成方法に従って化合物６ｈを得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋３７８、実測値３７８。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ９．１７（ｓ，１Ｈ），８．６２−８．５５（ｍ，２Ｈ），８．２３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７３（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．３３−４．２２（ｍ，１Ｈ），４．１２−４．０２（ｍ，１Ｈ）３．８１−３．７１（ｍ，１Ｈ），３．７０−３．６０（ｍ，１Ｈ），３．５８−３．４２（ｍ，１Ｈ），３．０７−２．９６（ｍ，１Ｈ），，２．０５（ｓ，３Ｈ），１．９５−１．８３（ｍ，１Ｈ），１．５５−１．４５（ｍ，１Ｈ），１．４４−１．３５（ｍ，１Ｈ），１．０７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，３Ｈ）。

工程８
化合物６ｈ（２．２６ｇ，５．９９ｍｍｏｌ）の１２．５ｍＬエタノールおよび２５ｍＬ水の混合溶液に濃塩酸２５ｍＬ（１２Ｍ）を入れた。得られた反応液を１００℃で２４時間反応させた。反応終了後、濃縮してエタノールを除去した後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でｐＨが７になるように調整し、固体が析出し、ろ過して得られた粗製品を高速液体クロマトグラフィーによって精製して化合物６を得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋３３６、実測値３３６。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ９．１５（ｓ，１Ｈ），８．８２（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．５８（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．２２（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７２（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．０４−３．９２（ｍ，１Ｈ），３．８１−３．７６（ｍ，１Ｈ），３．４７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），３．，３４ −３．３０（ｍ，１Ｈ），３．１５−３．０５（ｍ，１Ｈ），２．９５−２．８５（ｍ，２Ｈ），２．０３−１．９６（ｍ，１Ｈ），１．６０−１．５４（ｍ，１Ｈ），１．２０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，３Ｈ）。

６−１と６−２

ＳＦＣ分析条件：
カラム：ＣｈｉｒａｌｐａｋＡＤ−３１００×４．６ｍｍＩ．Ｄ．，３μｍ
移動相：Ａ：ＣＯ_２Ｂ：メタノール（０．０５％ＤＥＡ）
勾配：Ｂは４．５分間内で５％から４０％に、そして４０％で２．５分間維持した後、Ｂは５％で１ｍｉｎ維持した。
流速：２．８ｍＬ／ｍｉｎ
カラム温度：４０℃
６−１保持時間ｔ＝３．８１８分
^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ９．１３（ｓ，１Ｈ），８．８１−８．８０（ｍ，１Ｈ），８．５６（ｂｒｓ，１Ｈ），８．２１−８．１９（ｍ，１Ｈ），７．７０（ｂｒｓ，１Ｈ），４．０１−４．００（ｍ，１Ｈ），３．７７−３．７５（ｍ，１Ｈ），３．４６−３．４５（ｍ，１Ｈ），３．３１（ｂｒｓ，１Ｈ），３．０６（ｂｒｓ，１Ｈ），２．８６（ｂｒｓ，２Ｈ），２．０７（ｂｒｓ，１Ｈ），１．５７（ｂｒｓ，１Ｈ），１．２０−１．１９（ｍ，３Ｈ）。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋３３６、実測値３３６。

６−２保持時間ｔ＝４．１１１分
^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ９．１３（ｓ，１Ｈ），８．８１−８．８０（ｍ，１Ｈ），８．５５（ｂｒｓ，１Ｈ），８．２０−８．１９（ｍ，１Ｈ），７．７０（ｂｒｓ，１Ｈ），４．０１（ｂｒｓ，１Ｈ），３．７７（ｂｒｓ，１Ｈ），３．４６（ｂｒｓ，１Ｈ），３．３１（ｂｒｓ，１Ｈ），３．０６（ｂｒｓ，１Ｈ），２．８７（ｂｒｓ，２Ｈ），２．０７（ｂｒｓ，１Ｈ），１．５６（ｂｒｓ，１Ｈ），１．１９（ｂｒｓ，３Ｈ）。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋３３６、実測値３３６。

実施例７

工程１
実施例６の合成方法に従って化合物６ｇ（１．００ｇ，５．９４ｍｍｏｌ）および化合物１ｉ（１．７３ｇ，６．５３ｍｍｏｌ）から２工程の反応を経て化合物７を得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋３６０、実測値３６０。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ９．３５（ｓ，１Ｈ），８．７１−８．６９（ｍ，１Ｈ），８．５６−８．５０（ｍ，２Ｈ），８．２０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），３．８８−３．８７（ｍ，１Ｈ），３．６８−３．６４（ｍ，１Ｈ），３．４２−３．４０（ｍ，１Ｈ），３．１８−３．１７（ｍ，１Ｈ），２．８２−２．７３（ｍ，３Ｈ），１．９０−１．８６（ｍ，１Ｈ），１．４３−１．４１（ｍ，１Ｈ），１．２２−１．２１（ｍ，３Ｈ）。

７−１と７−２

ＳＦＣ分析条件：
カラム：ＣｈｉｒａｌｐａｋＡＤ−３１００×４．６ｍｍＩ．Ｄ．，３ｕｍ
移動相：Ａ：ＣＯ_２Ｂ：メタノール（０．０５％ＤＥＡ）
勾配：Ｂは５分間内で５％から４０％に、そして４０％で２．５分間維持した後、Ｂは５％で１ｍｉｎ維持した
流速：２．５ｍＬ／ｍｉｎ
カラム温度：３５℃
７−１保持時間ｔ＝４．０６２分
^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ９．２７（ｓ，１Ｈ），８．６３−８．６１（ｍ，１Ｈ），８．４９−８．４２（ｍ，２Ｈ），８．１３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６２（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），３．７８−３．７７（ｍ，１Ｈ），３．６１−３．５６（ｍ，１Ｈ），３．３２−３．３１（ｍ，１Ｈ），３．１０−３．０６（ｍ，１Ｈ），２．６７−２．６４（ｍ，３Ｈ），１．８１−１．７６（ｍ，１Ｈ），１．３３−１．３２（ｍ，１Ｈ），１．１５−１．１４（ｍ，３Ｈ）。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋３１８、実測値３１８。

７−２保持時間ｔ＝４．３０３分
^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ９．２７（ｓ，１Ｈ），８．６３−８．６１（ｍ，１Ｈ），８．４９−８．４２（ｍ，２Ｈ），８．１２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６２（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），３．７８−３．７６（ｍ，１Ｈ），３．６１−３．５６（ｍ，１Ｈ），３．３２−３．３０（ｍ，１Ｈ），３．０９−３．０５（ｍ，１Ｈ），２．６７−２．６４（ｍ，３Ｈ），１．８１−１．７５（ｍ，１Ｈ），１．３３−１．３２（ｍ，１Ｈ），１．１５−１．１４（ｍ，３Ｈ）。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋３１８、実測値３１８。

実施例８

工程１
２５℃で、化合物８ａ（５０．００ｇ，５６１．２３ｍｍｏｌ）および炭酸水素ナトリウム（１４１．４５ｇ，１．６８ｍｏｌ）の２５０ｍＬテトラヒドロフランおよび２５０ｍＬ水の混合溶液にクロロギ酸エチル（８４．９ｇ，７８２．３４ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた反応液を２５℃で撹拌して４８ｈ反応させた。反応終了後、ろ過し、濃縮してテトラヒドロフランを除去した後、水（５０ｍＬ）を入れ、メチル−ｔ−ブチルエーテル（２００ｍＬ×１）で抽出した。水相をｐＨが１になるように調整し、酢酸エチル（２００ｍＬ×２）で抽出し、有機相を合併し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、粗製品の化合物８ｂを得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ５．１９（ｓ，１Ｈ），４．４３−４．３８（ｍ，１Ｈ），４．１６−４．１２（ｍ，２Ｈ），１．４７（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，３Ｈ），１．２７（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）。

工程２
０℃および窒素ガスの保護下において、化合物８ｂ（４０．００ｇ，２４８．２０ｍｍｏｌ）の５００ｍＬ酢酸エチル溶液に順にプロピルホスホン酸無水物（４７３．８３ｇ，７４４．６ｍｍｏｌ，５０％）およびジイソプロピルエチルアミン（１２８．３１ｇ，９９２．８０ｍｍｏｌ）を入れた。得られた反応液を２５℃で撹拌して１０分間反応させ、さらにＮ−メトキシメチルアミン塩酸塩（２６．６３ｇ，２７３．０２ｍｍｏｌ）を入れた。反応液を２５℃で続いて撹拌して１６時間反応させた。反応終了後、反応液に水（３００ｍＬ）を入れ、酢酸エチル（２００ｍＬ×２）で抽出し、有機相を合併し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、粗製品をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１００−０％）によって精製して化合物８ｃを得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ５．４３−５．４２（ｍ，１Ｈ），４．７３−４．６９（ｍ，１Ｈ），４．０８（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），３．７６（ｓ，３Ｈ），３．２０（ｓ，３Ｈ），１．３２（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），１．２２（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）。

工程３
０℃および窒素ガスの保護下において、３−ブロモプロペン（３１．９９ｇ，２６４．４２ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４００ｍＬ）溶液に水素化ナトリウム（８．４６ｇ，２１１．５４ｍｍｏｌ，６０％）を分けて入れた。反応液を１０分間撹拌した後、さらに化合物８ｃ（３６．００ｇ，１７６．２８ｍｍｏｌ）を入れた。得られた反応液を２０℃に昇温させた後、続いて撹拌して５時間反応させた。反応終了後、反応液に飽和塩化アンモニウム溶液（３００ｍＬ）および水（２００ｍＬ）を入れ、酢酸エチル（４００ｍＬ×３）で抽出し、有機相を合併して飽和食塩水（４００ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、粗製品をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１００−０％）によって精製し、化合物８ｄを得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ５．８３−５．７７（ｍ，１Ｈ），５．２６−５．０１（ｍ，３Ｈ），４．１１−４．０７（ｍ，２Ｈ），３．９７−３．９０（ｍ，２Ｈ），３．７３−３．６６（ｍ，３Ｈ），３．１７−２．９５（ｍ，３Ｈ），１．３６−１．２９（ｍ，３Ｈ），１．２４−１．１９（ｍ，３Ｈ）。

工程４
−７８℃および窒素ガスの保護下において、化合物８ｄ（１０．００ｇ，４０．９３ｍｍｏｌ）の１５０ｍＬテトラヒドロフラン溶液に水素化ジイソブチルアルミニウム（８１．９ｍＬ，１Ｍ）を滴下した。滴下完了後、混合物をゆっくり２０℃に昇温させ、そして同温度で撹拌して３時間反応させた。反応終了後、反応液にゆっくり飽和酒石酸カリウムナトリウム溶液（５００ｍＬ）および水（２００ｍＬ）を入れ、酢酸エチル（３００ｍＬ×３）で抽出し、有機相を合併して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、粗製品をカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１００−０％）によって精製し、化合物８ｅを得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ９．５１（ｓ，１Ｈ），５．８１−５．７４（ｍ，１Ｈ），５．１８−５．０９（ｍ，２Ｈ），４．１２−４．０４（ｍ，３Ｈ），３．９５−３．７４（ｍ，２Ｈ），１．３４−１．２８（ｍ，３Ｈ），１．２２−１．１３（ｍ，３Ｈ）。

工程５
化合物８ｅ（４．６５ｇ，２５．１１ｍｍｏｌ）および化合物４ａ（８．２９ｇ，５０．２１ｍｍｏｌ）から実施例５の工程３の合成方法に従って化合物８ｆを得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋２８９、実測値２８９。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ７．２１−７．１３（ｍ，５Ｈ），４．０６−４．０１（ｍ，２Ｈ），３．８１（ｂｒｓ，２Ｈ），３．４９−３．４６（ｍ，１Ｈ），３．４４−３．３８（ｍ，２Ｈ），２．８８（ｓ，１Ｈ），２．６９（ｂｒｓ，２Ｈ），２．１７−２．１１（ｍ，１Ｈ），１．９５−１．８５（ｍ，１Ｈ），１．５５−１．４３（ｍ，１Ｈ），１．１９−１．１５（ｍ，３Ｈ），１．０２−０．９５（ｍ，３Ｈ）。

工程６
窒素ガスの保護下において、化合物８ｆ（２．００ｇ，６．９４ｍｍｏｌ）およびジカルボン酸ジ−ｔ−ブチル（３．０３ｇ，１３．８８ｍｍｏｌ）の１５０ｍＬメタノール溶液に湿潤パラジウム炭素（２００ｍｇ，１０％）を入れた。得られた反応液を水素ガスで３回置換した後、水素ガス雰囲気（５０ｐｓｉ）および５０℃で撹拌して２４時間反応させた。反応終了後、ろ過し、濃縮し、粗製品をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１００−０％）によって精製して化合物８ｇを得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ４．１５−４．０９（ｍ，３Ｈ），３．８６−５．７５（ｍ，１Ｈ），３．６０−３．５５（ｍ，２Ｈ），３．３６−３．３４（ｍ，２Ｈ），３．０２−２．９１（ｍ，１Ｈ），１．９８−１．９３（ｍ，１Ｈ），１．７３（ｓ，１Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ），１．２８−１．２３（ｍ，３Ｈ）。

工程７
化合物８ｇ（２５０ｍｇ，０．８４ｍｍｏｌ）をエタノール（４ｍＬ）および水（３ｍＬ）の混合溶媒に溶解させ、水酸化カリウム（１．５０ｇ，２６．８１ｍｍｏｌ）を入れた。得られた反応液を１２０℃で撹拌して４０時間反応させた。反応終了後、反応液を濃縮してエタノールを除去し、水（５ｍＬ）を入れ、ジクロロメタン（５ｍＬ×２）で抽出し、有機相を合併し、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、粗製品をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール＝１００−０％）によって精製して化合物８ｈを得た。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ３．８６−３．５７（ｍ，２Ｈ），３．２８−３．２３（ｍ，１Ｈ），３．０７−３．１０（ｍ，２Ｈ），２．７７（ｓ，１Ｈ），２．６０−２．５５（ｍ，１Ｈ），１．８３−２．７５（ｍ，２Ｈ），１．６５−１．５３（ｍ，１Ｈ），１．４１（ｓ，９Ｈ），１．２０−１．１３（ｍ，３Ｈ）。

工程８
化合物８ｈ（８１ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）および化合物８ｉ（２００ｍｇ，０．７２ｍｍｏｌ）から実施例１の工程７の合成方法に従って化合物８ｊを得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋４３２、実測値４３２。

工程９
２０℃において、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を化合物８ｊ（１０９ｍｇ，０．２５ｍｍｏｌ）の６ｍＬのジクロロメタン溶液に滴下し、反応液を続いて２時間撹拌した。反応終了後、反応液をそのまま濃縮し、粗製品を高速液体クロマトグラフィーによって精製し、化合物８を得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋３３２、実測値３３２。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ） δ９．２０（ｓ，１Ｈ），８．８０（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），８．４８（ｓ，１Ｈ），８．３７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．７７（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．１２−４．１０（ｍ，１Ｈ），３．８２−３．７８（ｍ，１Ｈ），３．６２−３．６０（ｍ，１Ｈ），３．４１−３．３７（ｍ，１Ｈ），３．６２−３．６０（ｍ，１Ｈ），３．１８（ｂｒｓ，１Ｈ），３．０８−３．０５（ｍ，５Ｈ），２．０９−２．０４（ｍ，１Ｈ），１．８０−１．７９（ｍ，１Ｈ），１．３４−１．３２（ｍ，３Ｈ）。

実施例９

工程１
化合物７ａ（８０ｍｇ，０．２２ｍｍｏｌ）を１ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、ｍ−クロロ過安息香酸（６８ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ，８５％）を０℃および窒素ガスの保護下において反応液に入れた。得られた反応液を２５℃で４時間撹拌した。反応終了後、０℃で飽和炭酸ナトリウム水溶液（２０ｍＬ）および飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液（２０ｍＬ）でクエンチングし、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を合併して飽和食塩水（２０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した後、分取薄層クロマトグラフィー（メタノール／ジクロロメタン＝１：１０）によって精製して化合物９ａを得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋３７６、実測値３７６。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ８．８２（ｓ，１Ｈ），８．６１（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），８．２５（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．７１（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．３１−４．２９（ｍ，１Ｈ），３．９７（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），３．７１−３．６６（ｍ，１Ｈ），３．３５−３．３３（ｍ，１Ｈ），３．３０−３．２６（ｍ，１Ｈ），３．０４−３．０３（ｍ，２Ｈ），２．０４−１．９３（ｍ，１Ｈ），１．８６（ｓ，３Ｈ），１．７６−１．７０（ｍ，１Ｈ），１．２１（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）。

工程２
化合物９ａ（６６ｍｇ，０．１８ｍｍｏｌ）を１ｍＬの無水酢酸に溶解させ、窒素ガスの保護下において反応混合物を１２０℃で４時間撹拌した。反応終了後、反応液を濃縮し、０℃で飽和炭酸ナトリウム水溶液（２０ｍＬ）でクエンチングし、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を合併して飽和食塩水（２０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。残留物を分取薄層クロマトグラフィー（メタノール／ジクロロメタン＝１：１０）によって精製し、化合物９ｂを得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋３７６、実測値３７６。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ８．６８（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），８．３７（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．６１−７．５７（ｍ，１Ｈ），７．５３−７．４８（ｍ，１Ｈ），７．２５−７．２３（ｍ，１Ｈ），４．３２−４．３１（ｍ，１Ｈ），３．９７−３．９５（ｍ，１Ｈ），３．７１−３．６７（ｍ，１Ｈ），３．３６−３．２８（ｍ，１Ｈ），３．２０−３．１６（ｍ，１Ｈ），３．０２−２．９８（ｍ，２Ｈ），１．９３−１．９２（ｍ，１Ｈ），１．８４（ｓ，３Ｈ），１．７４−１．７０（ｍ，１Ｈ），１．２６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）。

工程３
化合物９ｂ（５３ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ）から実施例６の工程８の合成方法に従って化合物９を得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋３３４、実測値３３４。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ） δ ８．６１（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．４１（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６６（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４５（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．３５（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），３．８１−３．７９（ｍ，１Ｈ），３．６４−３．５９（ｍ，１Ｈ），３．５０−３．３９（ｍ，１Ｈ），３．１１−３．０７（ｍ，１Ｈ），２．８８−２．８６（ｍ，１Ｈ），２．８１−２．６８（ｍ，２Ｈ），１．９０−１．８３（ｍ，１Ｈ），１．４５（ｂｒｓ，１Ｈ），１．２２（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）。

実施例１０

工程１
化合物６ｈから実施例９の合成方法に従って３工程の反応によって化合物１０を得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋３５２、実測値３５２。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ） δ ８．６６−８．６３（ｍ，２Ｈ），７．７４（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．０８−４．０６（ｍ，１Ｈ），３．７２−３．６４（ｍ，２Ｈ），３．３７−３．３４（ｍ，１Ｈ），３．１８−３．１０（ｍ，１Ｈ），３．０４−３．０２（ｍ，２Ｈ），２．０９−２．０４（ｍ，１Ｈ），１．７５−１．７２（ｍ，１Ｈ），１．２１（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）。

実施例１１

工程１
化合物１ｊから実施例９の工程１の合成方法に従って化合物１１ａを得た。

工程２
化合物１１ａ（４０ｍｇ，０．０９ｍｍｏｌ）、テトラブチルアンモニウムブロミド（６ｍｇ，０．０２ｍｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（２２ｍｇ，０．２７ｍｍｏｌ）の３ｍＬ水および３ｍＬジクロロメタンの混合溶液にベンゾイルクロリド（２５ｍｇ，０．１８ｍｍｏｌ）を入れた。得られた反応液を２０℃で１時間反応させた。反応終了後、分液し、水相をジクロロメタン（５ｍＬ×２）で抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、粗製品を分取薄層クロマトグラフィー（酢酸エチル）によって精製して化合物１１ｂを得た。

工程３
化合物１１ｂ（１５ｍｇ，０．０３ｍｍｏｌ）から実施例１の工程８の合成方法に従って化合物１１を得た。

ＭＳ−ＥＳＩ計算値［Ｍ＋Ｈ］^＋３４６、実測値３４６。

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ_２Ｏ） δ ８．５４（ｂｒｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．３８（ｂｒｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．６５（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．１４（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），４．００−３．８３（ｍ，２Ｈ），３．７５−３．６５（ｍ，１Ｈ），３．５４−３．３９（ｍ，１Ｈ），３．３５−３．１４（ｍ，２Ｈ），２．４１−２．２８（ｍ，１Ｈ），２．０８−１．９３（ｍ，１Ｈ），１．３６−１．２４（ｍ，１Ｈ），１．１３−０．９９（ｍ，１Ｈ），０．８４−０．７２（ｍ，１Ｈ），０．６５−０．５３（ｍ，１Ｈ）。

体外におけるＲＯＣＫプロテインキナーゼ抑制活性の評価
実験目的：化合物のＲＯＣＫプロテインキナーゼ抑制のＩＣ_５０値を検出した。

実験材料：
緩衝溶液の測定：２０ｍＭＨｅｐｅｓ（ｐＨ７．５）、１０ｍＭＭｇＣｌ_２、１ｍＭＥＧＴＡ、０．０２％Ｂｒｉｊ３５、０．０２ｍｇ／ｍｌＢＳＡ、０．１ｍＭＮａ_３ＶＯ_４、２ｍＭＤＴＴ、１％ＤＭＳＯ
実験操作：
新しく調製された緩衝溶液にＲＯＣＫプロテインキナーゼの基質であるＬｏｎｇＳ６Ｋｉｎａｓｅｓｕｂｓｔｒａｔｅｐｅｐｔｉｄｅを濃度が２０μＭになるように入れた。その後、１ｎＭＲＯＣＫプロテインキナーゼを入れ、均一に撹拌した。Ｅｃｈｏ５５０で被験化合物または陽性参照物を含有するＤＭＳＯ段階希釈液（１０μＭから、３倍段階希釈されたもの）を入れた。室温で２０分間予備インキュベートし、^３３Ｐ−ＡＴＰ（放射強度１０?Ｃｉ／μＬ）を入れて反応を開始させ、室温で２時間反応させた。その後、Ｐ８１イオン交換紙（Ｗｈａｔｍａｎ＃３６９８−９１５）でろ過し、０．７５％リン酸で洗浄した。Ｆｉｌｔｅｒ−Ｂｉｎｄｉｎｇ方法によって放射強度を検出した。

化合物のプロテインキナーゼ抑制活性は、ブランク基質（ＤＭＳＯのみ）に対する残ったプロテインキナーゼ活性として表す。Ｐｒｉｓｍソフトパッケージ（ＧｒａｐｈＰａｄＳｏｆｔｗａｒｅ，ＳａｎＤｉｅｇｏＣａｌｉｆｏｒｎｉａ，ＵＳＡ）によってＩＣ５０値および曲線を計算した。結果を表１に示す。

本実験はＦａｓｕｄｉｌ（ファスジル）を陽性参照物とした。

実験結果：

結果から、本発明の化合物が顕著で、ひいては予想外のプロテインキナーゼ抑制活性を有することがわかる。

ラット体内における薬物動態学の評価
実験目的
雄のＳＤラットを被験動物とし、単回投与後の化合物の血漿における薬物濃度を測定して薬物動態学の挙動を評価した。

実験操作
健康の成年オスＳＤラットを６匹選び（週齢７〜１０週、上海ＳＬＡＣ実験動物有限公司から購入）、ランダムに２群に３匹ずつ分け、一方の群では、被験化合物を２ｍｇ／ｋｇで静脈投与し、もう一方の群では、被験化合物を１０ｍｇ／ｋｇで胃内投与した。静脈投与群および胃内投与群では、溶媒はいずれも１０％ＤＭＳＯ＋１８％ＨＰ−β−ＣＤ＋７２％生理食塩水であった。静脈投与群では、動物への投与後０．０８３３、０．２５、０．５、１、２、４、８および２４時間で血液のサンプルを採取し、胃内投与群では、動物への投与後０．２５、０．５、１、２、４、６、８および２４時間で血液のサンプルを採取した。ＬＣＭＳＭＳ法によって血漿における薬物濃度を測定し、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ＜商標＞ｖｅｒｓｉｏｎ６．３（ＰｈａｒｓｉｇｈｔＭｏｕｎｔａｉｎＶｉｅｗ，ＣＡ）薬物動態学ソフトを使用し、非コンパートメントモデルの対数台形法で関連薬物動態学的パラメーターを計算した。

実験結果
測定結果を表２に示す。

結果から、本発明の化合物は半減期が約３倍向上し、クリアランスが顕著に低下したことがわかり、本発明が既存技術よりも優れた性質を持つことが証明された。

ラット体内おける薬効学の研究
実験目的
被験化合物（実施例６）のＳＤラット左肺片側肺線維化における治療効果を観察し、類似する作用機序のファスジルおよび臨床治療用薬物であるピルフェニドンおよびニンテダニブを参照とした。

実験操作
オスＳＤラットを、体重によってランダムに１１群、すなわち、偽手術群、モデル群、ニンテダニブ１００および３０ｍｇ／ｋｇ／ｄ−ｑｄ群、ピルフェニドン５０および１５ｍｇ／ｋｇ／ｄ−ｂｉｄ群、ファスジル２５ｍｇ／ｋｇ／ｄ−ｑｄ群、被験化合物（実施例６）１、３、１０ｍｇ／ｋｇ／ｄ−ｂｉｄ群および被験化合物（実施例６）３ｍｇ／ｋｇ／ｄ−ｑｄ群に分けた。各群の動物はモデル構築の８日目から胃内投与し、計１４日投与した。最後の投与後、全部の動物を安楽死させ、左肺を取り、肺内に等量のホルマリン溶液を灌注し、重量および肺病理学を測定し、肺線維化スコアの状況を分析した。

実験結果
ＭａｓｓｏｎＴｒｉｃｈｒｏｍｅ染色によって左肺の肺線維化病巣に対して肺線維化病巣の面積、肺線維化の病理スコアおよび線維化レベルパラメーターを測定して病理的評価を行った。肺線維化ａｓｈｃｒａｆｔスコアの結果から、陽性薬物であるニンテダニブおよびピルフェニドンはモデル群と比べていずれも肺線維化の改善が顕著な程度であったことが示された（ｐ＜０．０５）（図１）。被験化合物（実施例６）は３つの異なる投与量で毎日２回で連続１４日経口投与すると、顕著な肺線維化の抑制が見られ、モデル群と比べて有意差があったが（ｐ＜０．００１）（図１）、明らかな投与量依存性治療効果が見られなかった。被験化合物（実施例６）は毎日１回で３ｍｇ／ｋｇで経口投与すると、同様に顕著な肺線維化を抑制する治療効果が見られ、そして同様の投与量の毎日２回の経口投与の治療効果と一致し、有意差が見られなかった（図１）。被験化合物は毎日１回で２５ｍｇ／ｋｇで連続１４日投与すると、陽性薬物であるファスジルと同様の肺線維化を抑制する治療効果が得られた（ｐ＜０．００１）（図１）。ａｓｈｃｒａｆｔスコア３点を堺に３点以下（３点を含む）または４点以上（４点を含む）の肺線維化程度の百分率を計算したところ、モデル群では、ほぼ６５％以上の病巣領域のスコアが４点または４点以上で、薬物で治療された後、各薬物治療群では、動物の病巣領域のうち、スコアが３点以下の領域が７０％以上を占めている。統計学の結果から、陽性薬物であるニンテダニブおよびピルフェニドンはモデル群と比べて有意差があったことが示された（ｐ＜０．００１）。各被験化合物（実施例６）の異なる投与量の治療群は統計的有意差があったが、明らかな投与量依存性治療効果が見られなかった（図２）。

実験結論：ブレオマイシンによって誘導されたラット肺線維化モデルにおいて、被験化合物（実施例６）は連続２週間投与して治療すると、投与量に依存する肺線維化を抑制する治療効果が示され、そして１ｍｇ／ｋｇＢＩＤという低投与量で効果があった。被験化合物（実験例６）はより低い投与量でニンテダニブ、ピルフェニドンおよびファスジルに相当する肺線維化に対する改善作用に達する。

ｈＥＲＧ実験
実験で使用された安定してｈＥＲＧカリウムチャネルを発現する細胞はＡｖｉｖａＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓからのＣＨＯ−ｈＥＲＥで、ＣＨＯ−ｈＥＲＧを５％ＣＯ_２、３７℃の環境で培養した。ｈＥＲＧＱＰａｔｃｈ^ＨＴＸ実験は室温で行われた。ＱＰａｔｃｈＡｓｓａｙＳｏｆｔｗａｒｅ５．２（ＳｏｐｈｉｏｎＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）のソフトで全細胞プラン、電圧刺激プランおよび化合物検出プランを立てた。まず、所定の電圧刺激を３０回繰り返し、当該領域は後の分析のベースライン領域となり、その後５ μＬの細胞外液を入れ、３回繰り返した。順に各化合物を作用濃度で入れ、また５ μＬの体積で添加を３回繰り返した。各測定濃度は細胞を５ｍｉｎ以上インキュベートした。記録の全過程において、各指標がデータ分析の検出基準に達する必要があり、当該基準に達しなかった場合、当該細胞は分析の範囲に入らず、化合物を測定しなおし、以上の記録過程はいずれもＱｐａｔｃｈ分析ソフトによって自動的に操作された。各化合物の測定濃度は順に０．２４μＭ、１．２０μＭ、６．００μＭ、３０．００μＭで、各濃度に少なくとも２つの細胞を繰り返した。各完全電流記録において、ピーク電流の陰性対照に対する百分率に基づき、各化合物の作用濃度の抑制百分率を算出することができる。標準方程式で投与量と効果の関係の曲線をフィッテイングし、具体的な方程式は以下の通りである。

Ｃは化合物の測定濃度で、ｎは傾きである。

曲線のフィッティングおよび抑制率の計算はいずれもＱｐａｔｃｈ分析ソフトによって完成され、最低濃度における抑制率が半数抑制超か、最高濃度における抑制率が半数抑制未満で、当該化合物の相応するＩＣ_５０が最低濃度未満か、ＩＣ_５０値が最高濃度超である。

実験結果
実施例の化合物のｈＥＲＧ抑制活性の結果を表３に示す。

結果から、本発明の化合物は、既存技術と比べ、ｈＥＲＧの潜在的リスクがより低いことが示された。

Claims

式（Ｉ）で表される化合物、その薬学的に許容される塩およびその異性体。

[ただし、
Ｔ_１、Ｔ_２はそれぞれ独立にＮＨまたはＣＨ_２から選ばれ、
Ｒ_１、Ｒ_３はそれぞれ独立にＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ_２から選ばれ、あるいはそれぞれ独立に任意に１、２または３個のＲで置換された：Ｃ_１−３アルキル基から選ばれ、
Ｒ_２はＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨまたはＮＨ_２から選ばれ、
Ｒ_４は任意に１、２または３個のＲで置換された：Ｃ_１−３アルキル基から選ばれ、
あるいは、Ｒ_３とＲ_４は連結し、任意に１、２または３個のＲで置換された３〜６員環を形成しており、
ＲはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨまたはＮＨ_２から選ばれる。]
Ｒ_１、Ｒ_３はそれぞれ独立にＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ_２またはＣＨ_３から選ばれる請求項１に記載の化合物、その薬学的に許容される塩およびその異性体。
Ｒ_４はＣＨ_３から選ばれる請求項１に記載の化合物、その薬学的に許容される塩およびその異性体。
構造単位

は

から選ばれる請求項１に記載の化合物、その薬学的に許容される塩およびその異性体。
構造単位

は

から選ばれる請求項１〜４に記載の化合物、その薬学的に許容される塩およびその異性体。
Ｒ_３とＲ_４は連結し、任意に１、２または３個のＲで置換された３員環を形成している請求項１に記載の化合物、その薬学的に許容される塩およびその異性体。
構造単位

は

から選ばれる請求項４または６に記載の化合物、その薬学的に許容される塩およびその異性体。
から選ばれる請求項１〜３のいずれかに記載の化合物、その薬学的に許容される塩およびその異性体。
[ただし、Ｒ_１〜Ｒ_４は請求項１〜３で定義された通りである。]
から選ばれる式で表される化合物、その薬学的に許容される塩およびその異性体。
活性成分として治療有効量の請求項１〜９のいずれかに記載の化合物、その薬学的に許容される塩およびその異性体と、薬学的に許容される担体とを含む薬物組成物。
血管収縮による関連疾患を治療する薬物の製造における、請求項１〜９のいずれかに記載の化合物、その薬学的に許容される塩およびその異性体の使用。
血管収縮による関連疾患を治療する薬物の製造における、請求項１０に記載の組成物の使用。