JP2020520385A - 癌治療のための薬剤の組み合わせ - Google Patents

Abstract

ヒト患者の癌の治療において、同時に使用するか、別々に使用するか、または逐次的に使用するための、（Ａ）多価不飽和脂肪酸と（Ｂ）化学療法剤化合物とを含む薬剤の組み合わせ。【選択図】図３

Description

本発明は、ヒト患者の癌の治療において、同時に使用するか、別々に使用するか、または逐次的に使用するための、（Ａ）多価不飽和脂肪酸と（Ｂ）化学療法剤化合物とを含む薬剤の組み合わせに関する。

欧州特許第２４０９９６３（Ｂ１）号（Lipopharma社より２０１０年に出願）には、癌の治療に多価不飽和脂肪酸の１，２−誘導体（Ｄ−ＰＵＦＡと称される）化合物を使用することが記載されている。
記載された脂肪酸誘導体化合物は以下の式を有する：
ＣＯＯＲ_１−ＣＨＲ_２−（ＣＨ_２）_ａ−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_ｂ−（ＣＨ２）_ｃ−ＣＨ_３。
好ましい化合物の例は、以下である：
ＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_６−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_２−（ＣＨ_２）_３−ＣＨ_３（１８２Ａ１）。

文献「Erazo, et al.; Clinical Cancer Research; 22(10) May 15, 2016」には、上述の化合物（１８２Ａ１）がさらに詳細に述べられている。上記文献で、この化合物は「ＡＢＴＬ０８１２」と称されており、本明細書ではこの用語を用いている。

この文献の記述によると、ＡＢＴＬ０８１２は、細胞のアポトーシスを活性化することなくオートファジー介在性の癌細胞死を誘導する。以下、この文献から抜粋する。
２５１５ページ：「現在の抗癌治療の多くはアポトーシスを活性化するものであり、化学療法への耐性が癌の主な課題となっている（２４）。オートファジー介在性の細胞死は、アポトーシス誘導薬に対する耐性を誘起することなく癌細胞を死滅させる別の方法として新たに注目されている（２５）」。
２５１７ページ：「一方で、ｍＴＯＲＣ１の活性化は一般的に、抗腫瘍剤への耐性獲得に関連するものである（６）。ＡＢＴＬ０８１２はＡｋｔ／ｍＴＯＲＣ１軸の強力な阻害剤であり、これを標準的な化学療法薬剤と組み合わせて投与すると、治療抵抗性またはアポトーシス難治性の腫瘍に効果的である可能性がある」。

本出願の出願日において、本出願人（AbilityPharma）のウェブページ（www.abilitypharma.com）にはニュース欄を設けていた（本出願の全ての発明者は、本出願及び２０１７年５月１６日付の欧州特許出願公開第１７３８２２８２６号優先出願の出願人に対して本明細書の当該権利全てを譲渡している。言い換えると、以下に示す本出願人のウェブページにおける掲載は、いわゆる「発明者由来開示」とみなすことができる（すなわち、公に開示された発明の対象は、発明者、一人もしくは複数人の共同発明者、または該発明者もしくは共同発明者から直接的もしくは間接的に発明の対象を知得した者に帰属することになる））。

以下、２０１６年１１月２２日付のニュースから抜粋する。
「カタロニア地方のバイオ医薬品企業Ability Pharmaceuticals社は、新規の標的抗癌剤であるＡＢＴＬ０８１２の第一段階の第２相臨床試験を開始し、進行性もしくは再発性の子宮内膜癌または扁平上皮肺癌を持つ８０名の患者に対して、第１選択療法としてパクリタキセル及びカルボプラチンと組み合わせた場合の有効性及び安全性を評価すると本日発表した。（中略）

前臨床癌モデルにおいて、ＡＢＴＬ０８１２は、肺癌、子宮内膜癌、膵臓癌、及び神経芽細胞腫などの広範囲のタイプの癌に単剤として有効であり、かつ安全性が高い。このモデルでは、ＡＢＴＬ０８１２はさらに、化学療法（タキサン類、白金化合物、及びゲムシタビン）と併用した場合に、その毒性を増すことなく相乗効果を有する」。

以下２０１６年１２月１４日付のニュースから抜粋する。
「前臨床試験では、ＡＢＴＬ０８１２は、膵臓癌において単剤として有効性を示し、ならびにタキサン類、白金化合物、及びゲムシタビンと組み合わせると、腫瘍退縮を誘発し、化学療法に付随する毒性を増すことなく相乗効果（８倍〜９０倍）を示した。（中略）
ＡＢＴＬ０８１２は現在、子宮内膜癌または扁平上皮肺癌を持つ患者に対する化学療法と組み合わせた第１選択療法として、第２相試験中である」。

他の化学療法剤と組み合わせたＡＢＴＬ０８１２化合物の使用に関して、上述のErazoらの文献及び出願人（AbilityPharma）が公開したニュースには、いかなる有意な実験データも開示されていない。つまり、組み合わせに関する記述はあるが、有意で立証可能な実験データによって何ら裏付けされていない単なる記述にすぎないものだと言える。

公開されたニュースは第２相試験に関するものである。当該技術で公知のように、第２相試験が行われているということは、第１相試験が完了しており、そこから得た情報から、当業者はヒトに対する安全性及び忍容性、ならびに薬物動態試験の結果がポジティブであることのみを結論づけることができる。つまり、ヒト患者に治療効果がもたらされるか否か、特に組み合わせによる相乗効果が得られるか否かについての情報が得られているわけではない。当業者は、第２相試験の後になって初めてその薬剤に治療効果があるか否かという結果を評価できる。本出願の出願日時点では、第２相試験から得た本明細書に関連する実験データはいずれも公開されていなかった。

本発明が解決しようとする課題は、より効果的な癌の治療を提供することである。

上述した通り、本明細書では化合物ＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_６−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_２−（ＣＨ_２）_３−ＣＨ_３をＡＢＴＬ０８１２と称している。

本明細書における実施例は、上述のＡＢＴＬ０８１２化合物を他の化学療法剤と組み合わせて使用することに関連した有意な相乗効果を示す様々な詳細実験データを提供している。

本明細書にさらに詳細に論じるように、本明細書に提供されている実験データは、確立されたインビトロ及びインビボ（例えばマウスでの）試験に基づいており、したがって、本明細書に提供されている実験データに基づけば、本明細書に記載の相乗効果がヒト癌患者で得られる可能性が高い、または確かに得られると言える。

本明細書の実施例４では、ヒト臨床試験からすでに得られた予備段階の結果について論じている。すでに行ったヒト臨床試験では、進行性子宮内膜癌または扁平上皮癌を持つ患者に対してＡＢＴＬ０８１２化合物をパクリタキセル及びカルボプラチンと組み合わせて使用すると、ヒトにも相乗効果が見られているという点からポジティブな結果となっている。

従来技術の知見に基づけば、当業者は、本明細書の実験結果から有意な相乗効果が得られる見込みを予測できなかったと思われる。

本出願人（AbilityPharma）のウェブページの開示について上述したように、このウェブページに開示された組み合わせに関する記載は、有意で立証可能な実験データによって裏付けされていない単なる記述にすぎないものだと言える。このウェブページの開示に基づけば、本明細書に記載の相乗効果がヒトの癌患者で得られる可能性を示すことができなかったか、または得られることを確証できなかったことは明らかである。

要約すると、本明細書の実施例は特に以下について明らかにするものである。

実施例１：インビトロ実験
１．１：ＡＢＴＬ０８１２とドセタキセルは、代表的な非小細胞肺腺癌細胞株においてインビトロで相乗効果を有する。ＡＢＴＬ０８１２はドセタキセルのＩＣ_５０を８０分の１未満に低減させ、ドセタキセルの細胞傷害性を劇的に増加させた。
１．２：ＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセルは、４種類の異なる肺癌細胞株においてインビトロで相乗効果を有する。ＡＢＴＬ０８１２はパクリタキセルのＩＣ_５０を細胞株に応じて７分の１〜２分の１の範囲に減じ、パクリタキセルの細胞傷害性を増加させた。
１．３：ＡＢＴＬ０８１２とゲムシタビンは、代表的な膵臓癌細胞株においてインビトロで相乗効果を有する。ＡＢＴＬ０８１２はゲムシタビンのＩＣ_５０を７分の１に減じ、ゲムシタビンの細胞傷害性を劇的に増加させた。
１．４：ＡＢＴＬ０８１２とカルボプラチンは、代表的な子宮内膜癌細胞株においてインビトロで相乗効果を有する。ＡＢＴＬ０８１２はカルボプラチンのＩＣ_５０を３分の１に減じ、カルボプラチンの細胞傷害性を増加させた。
１．５：ＡＢＴＬ０８１２とレチノイン酸は、代表的な神経芽細胞腫癌細胞株においてインビトロで相乗効果を有する。
１．６：ＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセルは、代表的な乳癌細胞株においてインビトロで相乗効果を有する。ＡＢＴＬ０８１２はパクリタキセルのＩＣ_５０を３分の１に減じ、パクリタキセルの細胞傷害性を増加させた。

実施例２：インビボ実験
２．１：代表的なインビボのマウスモデルにおいて、低用量のＡＢＴＬ０８１２は、ドセタキセルの肺癌抗腫瘍活性を毒性作用を及ぼすことなく増強した。
２．２：代表的なインビボのマウスモデルにおいて、ＡＢＴＬ０８１２と、パクリタキセル及びカルボプラチン（Ｐ／Ｃ）とを組み合わせて処置すると、扁平上皮癌（ＳＣＣ）モデルでの生存率が有意に増加した。処置２０日後の生存率は７５％であったのに対し、ＡＢＴＬ０８１２と賦形剤では０％の生存率であり、Ｐ／Ｃ群では２５％の生存率であった。
２．３：代表的なインビボのマウスモデルにおいて、ＡＢＴＬ０８１２とＰ／Ｃとを組み合わせると、各薬剤を単体で用いた場合の効果に比べて肺腺癌に対して相乗効果を示し、この組み合わせで処置した動物には、対照及び化学療法で処置した動物に比べて有意な腫瘍体積の減少が見られた。
２．４：代表的なインビボのマウスモデルにおいて、ＡＢＴＬ０８１２とペメトレキセド及びシスプラチンとを組み合わせると、化学療法のみを用いた場合の効果に比べて肺腺癌に対して相乗効果を示し、この組み合わせで処置した動物には、対照及び化学療法で処置した動物に比べて有意な腫瘍体積の減少が見られた。
２．５：代表的なインビボのマウスモデルにおいて、ＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセルとを組み合わせると、各薬剤を単体で用いた場合の効果に比べて子宮内膜癌に対して相乗効果を示し、この組み合わせで処置した動物には、対照動物に比べて有意な腫瘍体積の減少が見られた。
２．６：患者由来の異種移植片を用いた代表的なインビボのマウスモデルにおいて、ＡＢＴＬ０８１２とＰ／Ｃとを組み合わせると、子宮内膜癌に相乗効果を示し、Ｐ／Ｃと比較して有意に大幅な腫瘍体積の減少が見られ、かつ賦形剤群と比較して最初の４７日間で有意な腫瘍体積の減少も見られている。
２．７：代表的なインビボのマウスモデルにおいて、ＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセル／ゲムシタビン（Ｐ／Ｇｍ）とを組み合わせると、膵臓癌に相乗効果を示し、Ｐ／Ｇｍ単体に比べて有意に大幅な腫瘍体積の減少が見られた。また、Ｐ／Ｇｍにも賦形剤に比べて大幅な腫瘍体積の減少が見られた。
２．８：代表的なインビボのマウスモデルにおいて、ＡＢＴＬ０８１２とナブパクリタキセル（Ｎａｂ−Ｐ）／ゲムシタビンとを組み合わせると、膵臓癌に相乗効果を示し、Ｎａｂ−Ｐ／Ｇｍ単体に比べて有意に大幅な腫瘍体積の減少が見られた。また、Ｎａｂ−Ｐ／Ｇｍにも賦形剤に比べて大幅な腫瘍体積の減少が見られた。
２．９：代表的なインビボのマウスモデルにおいて、ＡＢＴＬ０８１２とシスプラチンとを組み合わせると、神経芽細胞腫癌に相乗効果を示し、ＡＢＴＬ０８１２とシスプラチンとを組み合わせることで長期間腫瘍の進行を安定化させている。
２．１０：代表的なインビボのマウスモデルにおいて、ＡＢＴＬ０８１２とドキソルビシンとを組み合わせると、乳癌に相乗効果を示し、ＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセルとを組み合わせることで賦形剤に比べて大幅な腫瘍体積の減少が見られた。

本明細書に提供されている実験データは、確立されたインビトロ及びインビボ（例えばマウスでの）試験に基づいており、したがって、本明細書に提供されている実験データに基づけば、本明細書に記載の相乗効果がヒト癌患者で得られる可能性が高い、または確かに得られると言える。

本明細書において実施例で評価した化学療法剤の例として、以下のものが挙げられる。
タキサン類：パクリタキセル（タキソール）、ナブパクリタキセル（アルブミン結合パクリタキセル）、及びドセタキセル
白金系薬剤：カルボプラチン及びシスプラチン
ヌクレオチド類似体及び前駆体類似体：ゲムシタビン
葉酸代謝拮抗物質：ペメトレキセド
アントラサイクリン：ドキソルビシン。
化学療法剤の種々の群／クラスを評価し、全てに対して、ＡＢＴＬ０８１２化合物と組み合わせて用いた場合に有意な相乗効果を示した。

本明細書に記載の実験データに基づけば、当該化学療法剤の多くで本明細書のポジティブな相乗効果を得ることができると考えられる。

上述したように、現在の抗癌治療の多くはアポトーシスを活性化し、上述の評価した他の化学療法剤もアポトーシスを活性化する。

ＡＢＴＬ０８１２は、細胞のアポトーシスを活性化することなくオートファジー介在性の癌細胞死を誘導する。本明細書に記載の実験データによると、ＡＢＴＬ０８１２を化学療法剤と組み合わせると、ＡＢＴＬ０８１２の基本的機序ではないにもかかわらず、予想外にアポトーシスのレベルが増加する可能性があることがわかる。

本明細書に記載の実験データによると、化学療法剤（例えば、ドセタキセル）に対して実質的に以下のことが明らかになった。

１００％の治療効果を付与する量のドセタキセルはＹの毒性をもたらす。

５０％の治療効果を付与する量のドセタキセルは毒性の低減をもたらす。

５０％の治療効果を付与する量のドセタキセルと５０％の治療効果を付与する量のＡＢＴＬ０８１２との組み合わせは、１００％の効果をもたらし、かつ毒性を同程度のレベルまで低減させたままにする。本発明者らにとって驚くべきことに、ＡＢＴＬ０８１２との組み合わせにより、有意に毒性を増加させることなく化学療法剤（例えば、ドセタキセル）の効果を大幅に増加させることが可能になった。

上述の欧州特許第２４０９９６３（Ｂ１）号に記載されているように、ＡＢＴＬ０８１２化合物は、他の多価不飽和脂肪酸化合物１，２−誘導体（Ｄ−ＰＵＦＡ）と構造的にかつ機能的に類似している。

したがって、欧州特許第２４０９９６３（Ｂ１）号に記載の実質的全ての脂肪酸誘導体化合物は、化学療法剤と組み合わせた場合に、本明細書に記載の相乗効果を有することになることは自明と考えられる。

よって、本発明の第１の態様は、ヒト患者の癌の治療において、同時に使用するか、別々に使用するか、または逐次的に使用するための、
（Ａ）式ＣＯＯＲ_１−ＣＨＲ_２−（ＣＨ_２）_ａ−（ＣＨ＝ＣＨＣＨ_２）_ｂ−（ＣＨ_２）_ｃ−ＣＨ_３の多価不飽和脂肪酸である化合物、その薬学的に許容される塩、またはその混合物であって、
（ｉ）ａは０〜７の間の任意の整数値を取ることができ、
（ｉｉ）ｂは２〜７の間の任意の整数値を取ることができ、
（ｉｉｉ）ｃは０〜７の間の任意の整数値を取ることができ、
（ｉｖ）Ｒ_１は、Ｈ、Ｎａ、Ｋ、ＣＨ_３、ＣＨ_３−ＣＨ_２、またはＰＯ（Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_３）_２であり、及び
（ｖ）Ｒ_２は、ＯＨ、ＯＣＨ_３、Ｏ−ＣＨ_３ＣＯＯＨ、ＣＨ_３、Ｃｌ、ＣＨ_２ＯＨ、ＯＰＯ（Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_３）_２、ＮＯＨ、Ｆ、ＨＣＯＯ、またはＮ（ＯＣＨ_２ＣＨ_３）_２である、化合物、その薬学的に許容される塩、またはその混合物と、
（Ｂ）化学療法剤化合物とを含む、薬剤の組み合わせに関する。

本文脈において当業者が理解するように、第１の態様の化合物（Ｂ）の化学療法剤は当然、第１の態様の化合物（Ａ）の範囲内となる化合物ではない。

本明細書で論じている併用治療について、本文脈において当業者が理解するように、２つの化合物である（Ａ）及び（Ｂ）が、例えば、単一の組成物として同時に投与されるか、または例えば、２つの別々の組成物として逐次的に投与されるかどうかは本質的なことではない。重要なことは、第２の化合物または薬剤が投与されたときに、最初に投与された化合物または薬剤の有効量が患者の体内にあることである。

したがって、第１の態様の「組み合わせ」という用語は、本明細書において、化合物（Ａ）と化合物（Ｂ）の様々な組み合わせ、例えば、単一の医薬組成物の状態、単一の活性化合物を含む別々の医薬製剤／組成物から構成される「タンク混合物」などの混合物の状態、及び、逐次的に、すなわち数時間もしくは数日などの短期間で順々に、または同時投与的に適用する場合に単一の活性成分を組み合わせて使用する状態での、該組み合わせに関する。化合物（Ａ）と化合物（Ｂ）を適用する順序は重要ではない。

化合物（Ａ）と化合物（Ｂ）との組み合わせは、同時投与用、別々の投与用、または逐次投与用に製剤化され得る。特に、投与が同時ではない場合、化合物は相互に比較的短い時間間隔で投与される。さらに化合物は、同じ剤形もしくは異なる剤形で投与されるか、または同じ投与経路もしくは異なる投与経路で投与され、例えば、一方の化合物は局所的に投与され、他方の化合物は経口的に投与され得る。例えば、以下のように２つの化合物の組み合わせを投与することができる。

２つの化合物は、同一の医薬製剤の一部分をなす組み合わせとして投与することができ、その場合、常に同時に投与される。

２つの化合物は、２つの単位／組成物の組み合わせとして投与することができ、その場合、その物質の１つを含む各々によって同時投与、逐次投与、または別々の投与が可能になる。

例えば、化合物（Ａ）は化合物（Ｂ）とは無関係に投与される（すなわち、２つの単位で投与される）が、同時に投与される。

別の好ましい例では、化合物（Ａ）がまず投与され、続いて化合物（Ｂ）が別々にもしくは逐次的に投与されるか、または化合物（Ｂ）がまず投与され、続いて化合物（Ａ）が別々にもしくは逐次的に投与される。

例えば「医薬組成物」に関連する用語「医薬」は当該技術分野に基づいて理解されるものである。すなわち、この用語は、活性成分の生物活性が有効になる形態、かつ生理学的に忍容性のある形態、つまり、組成物を投与される対象に対して許容できない程度の毒性を持つ付加成分を含まない形態の製剤または組成物を意味するものである。特に、用語「薬学的に許容可能」は、動物、より具体的にはヒトでの使用において、州政府もしくは連邦政府の規制機関によって承認を受けていること、または米国薬局方もしくは他の一般に認識されている薬局方に記載されていることを意味する。

本発明の実施形態を、単に例示するために以下に記載している。
本明細書に記載の好ましい実施形態と他の本明細書に記載の好ましい実施形態との組み合わせは、さらにより好ましい実施形態となる。

ＡＢＴＬ０８１２は、Ａ５４９ヒト肺腺癌細胞株において、インビトロでドセタキセルとの相乗作用を示している。ＡＢＴＬ０８１２、ドセタキセル、及び両薬剤の組み合わせの細胞傷害性を検討したところ、ドセタキセル細胞傷害性の増強を観察することができ、低濃度（およそＩＣ_５０の半分の濃度）のＡＢＴＬ０８１２を添加するとＩＣ_５０は８６分の１に減少した。結果は、２つの独立した実験の平均値を示している。さらなる詳細については本明細書の実施例を参照されたい。

ＡＢＴＬ０８１２は、Ａ５４９及びＨ１９７５のヒト肺腺癌細胞株とＨ１５７及びＨＴＢ１８２のヒト扁平上皮肺癌細胞株とにおいて、インビトロでパクリタキセルとの相乗作用を示している。全４種類の肺癌細胞株におけるＡＢＴＬ０８１２、パクリタキセル、及び両薬剤の組み合わせの細胞傷害性を検討したところ、全４種類の細胞株において、パクリタキセルの細胞傷害性の増強を観察することができ、低濃度（およそＩＣ_５０の半分の濃度）のＡＢＴＬ０８１２を添加するとＩＣ_５０は細胞株に応じて７分の１〜２分の１の範囲まで減少した。結果は、各細胞株に対して２つの独立した実験の平均値を示している。さらなる詳細については本明細書の実施例を参照されたい。

ＡＢＴＬ０８１２は、ＭｉａＰａｃａ２ヒト膵臓癌細胞株において、インビトロでゲムシタビンとの相乗作用を示している。ＡＢＴＬ０８１２、ゲムシタビン、及び両薬剤の組み合わせの細胞傷害性を検討したところ、ＡＢＴＬ０８１２の存在下でゲムシタビンの細胞傷害性の増強を観察することができ、低濃度（およそＩＣ_５０の半分の濃度）のＡＢＴＬ０８１２を添加するとＩＣ_５０は７分の１に減少した。結果は、２つの独立した実験の平均値を示している。さらなる詳細については本明細書の実施例を参照されたい。

ＡＢＴＬ０８１２は、Ｉｓｈｉｋａｗａヒト子宮内膜癌細胞株において、インビトロでカルボプラチンとの相乗作用を示している。ＡＢＴＬ０８１２、カルボプラチン、及び両薬剤の組み合わせの細胞傷害性を検討したところ、ドセタキセルの細胞傷害性の増強を観察することができ、低濃度（およそＩＣ_５０の半分の濃度）のＡＢＴＬ０８１２を添加するとＩＣ_５０は３分の１に減少した。結果は、２つの独立した実験の平均値を示している。さらなる詳細については本明細書の実施例を参照されたい。

ＡＢＴＬ０８１２は、ＬＡＩ−５Ｓ及びＳＫ−Ｎ−ＢＥ（２）ヒト神経芽細胞腫細胞株において、インビトロでレチノイン酸との相乗作用を示している。ＡＢＴＬ０８１２、レチノイン酸、及び両薬剤の組み合わせの細胞傷害性を検討したところ、両細胞株においてレチノイン酸（ＲＡ）の細胞傷害性の増強を観察することができる。ＲＡを低濃度（およそＩＣ_３０の半分の濃度）のＡＢＴＬ０８１２とインキュベーションすると、ＲＡを伴った場合の細胞生存率がＬＡＩ−５Ｓでは８２．８％から２３．８％まで減少し、ＳＫ−Ｎ−ＢＥ（２）細胞では７０．４％から３４．７％まで減少した。結果は、２つの独立した実験の平均値を示している。さらなる詳細については本明細書の実施例を参照されたい。

ＡＢＴＬ０８１２は、ＭＤＡ−ＤＢ−２３１ヒトトリプルネガティブ乳癌細胞株において、インビトロでパクリタキセルとの相乗作用を示している。ＡＢＴＬ０８１２、パクリタキセル、及び両薬剤の組み合わせの細胞傷害性を検討したところ、パクリタキセル細胞傷害性の増強を観察することができ、低濃度（ＩＣ_５０未満）のＡＢＴＬ０８１２を添加するとＩＣ_５０は２．７分の１に減少した。結果は、２つの独立した実験の平均値を示している。さらなる詳細については本明細書の実施例を参照されたい。

ＡＢＴＬ０８１２は、インビボＡ５４９ヒト肺腺癌異種移植片モデルにおいて、毒性を増加させることなくドセタキセルの治療効果を増強させている。左：Ａ５４９ヒト肺腺癌異種移植片モデルにおいて、ＡＢＴＬ０８１２とドセタキセルとの組み合わせによる抗腫瘍効果を示しており、ＡＢＴＬ０８１２群、ドセタキセル群、及び賦形剤群と比べて腫瘍増殖が有意に低下していることがわかる。ｐ値は、ＡＢＴＬ０８１２とドセタキセルとの組み合わせ対ドセタキセル、及び該組み合わせ対賦形剤について測定している。右：全実験期間における種々の処置群の総体重について示す。さらなる詳細については本明細書の実施例を参照されたい。

ＡＢＴＬ０８１２は、インビボＨ１５７ヒト扁平上皮肺癌異種移植片モデルにおいて、毒性を増加させることなくパクリタキセル／カルボプラチン（Ｐ／Ｃ）の治療効果を増強させている。ＡＢＴＬ０８１２、Ｐ／Ｃ、ＡＢＴＬ０８１２＋Ｐ／Ｃ、及び賦形剤で処置したＨ１５７異種移植片のカプラン・マイヤープロットであり、ＡＢＴＬ０８１２＋Ｐ／Ｃで生存率が最も高くなっている。さらなる詳細については本明細書の実施例を参照されたい。

ＡＢＴＬ０８１２は、インビボＨ１９７５ヒト肺腺癌異種移植片モデルにおいて、毒性を増加させることなくＰ／Ｃの治療効果を増強させている。左：Ｈ１９７５ヒト肺腺癌異種移植片モデルにおいて、ＡＢＴＬ０８１２とＰ／Ｃとの組み合わせによる抗腫瘍効果を示しており、Ｐ／Ｃ群、ＡＢＴＬ０８１２群、及び賦形剤群と比べて腫瘍体積が最も減少していることがわかる。ｐ値は、ＡＢＴＬ０８１２とＰ／Ｃとの組み合わせ対Ｐ／Ｃ、及び該組み合わせ対賦形剤について測定している。右：全実験期間における種々の処置群の総体重について示す。さらなる詳細については本明細書の実施例を参照されたい。

ＡＢＴＬ０８１２は、インビボＡ５４９ヒト肺腺癌異種移植片モデルにおいて、毒性を増加させることなくペメトレキセド及びシスプラチンの治療効果を増強させている。左：ＡＢＴＬ０８１２とペメトレキセド及びシスプラチンとの組み合わせによる抗腫瘍効果を示しており、ペメトレキセド及びシスプラチン群、ならびに賦形剤群と比べて腫瘍増殖が有意に低下していることがわかる。ｐ値は、ＡＢＴＬ０８１２＋ペメトレキセド及びシスプラチン対賦形剤について測定している。右：全実験期間における種々の処置群の総体重について示す。さらなる詳細については本明細書の実施例を参照されたい。

ＡＢＴＬ０８１２は、同所的に移植されたインビボＩｓｈｉｋａｗａヒト子宮内膜癌異種移植片モデルにおいて、毒性を増加させることなくパクリタキセルの治療効果を増強させている。左：処置の３週間後に動物を屠殺し、腫瘍を切除し、腫瘍体積を測定した。ＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセルとの組み合わせを投与した動物では、賦形剤のみを投与した対照動物と比べて統計的有意な減少が見られた。ｐ値はＡＢＴＬ０８１２＋パクリタキセル対賦形剤について測定している。右：全実験期間における種々の処置群の総体重について示す。さらなる詳細については本明細書の実施例を参照されたい。

ＡＢＴＬ０８１２は、インビボヒト子宮内膜癌患者由来の異種移植片において、毒性を増加させることなくＰ／Ｃの治療効果を増強させている。図左：漿液性組織型、ＩＩＩＣ２期、１００％の子宮筋層への浸潤、骨盤リンパ節及び大動脈リンパ節及び血管裂孔への浸潤を持ち、ならびにｐ５３及びＰＩ３ＫＣＡ遺伝子の変異を保因している患者から外科的に切除した腫瘍片を、ヌードマウスに移植した。ＡＢＴＬ０８１２をＰ／Ｃと組み合わせると、Ｐ／Ｃ、ＡＢＴＬ０８１２、及び賦形剤と比較して腫瘍が有意に縮小することがわかる。ｐ値を図中に示している。右：全実験期間における種々の処置群の総体重について以下に示している。さらなる詳細については本明細書の実施例を参照されたい。

ＡＢＴＬ０８１２は、インビボＭｉａＰａｃａ２ヒト膵臓癌異種移植片モデルにおいて、毒性を増加させることなくゲムシタビンとパクリタキセル（Ｇｍ／Ｐ）を増強させている。左：ＡＢＴＬ０８１２とＧｅｍ／Ｐとの組み合わせによる抗腫瘍効果を示しており、Ｇｍ／Ｐ、ＡＢＴＬ０８１２、または賦形剤のみと比べて腫瘍体積が最も減少していることがわかる。ｐ値は、ＡＢＴＬ０８１２とゲムシタビン及びパクリタキセルとの組み合わせ対ゲムシタビン及びパクリタキセル、該組み合わせ対ゲムシタビン、ならびに該組み合わせ対賦形剤について測定している。右：全実験期間における種々の処置群の総体重について示す。さらなる詳細については本明細書の実施例を参照されたい。

ＡＢＴＬ０８１２は、２つのインビボＭｉａＰａｃａ２ヒト膵臓癌異種移植片モデルにおいて、毒性を増加させることなくゲムシタビン（Ｇｍ）単体、及びナブパクリタキセルと合わせて用いるゲムシタビン（Ｇｍ／Ｎａｂ−Ｐ）の作用を増強させている。左：ＡＢＴＬ０８１２とＧｍ／Ｎａｂ−Ｐとの組み合わせによる抗腫瘍効果を示しており、Ｇｍ／Ｎａｂ−Ｐ、ＡＢＴＬ０８１２、または賦形剤のみと比べて腫瘍体積が最も減少していることがわかる。右：ＡＢＴＬ０８１２とＧｍとの組み合わせによる抗腫瘍効果を示しており、Ｇｍ、ＡＢＴＬ０８１２、または賦形剤のみと比べて腫瘍体積が最も減少していることがわかる。ｐ値は、ＡＢＴＬ０８１２＋Ｇｍ／Ｎａｂ−Ｐ対賦形剤、及びＡＢＴＬ０８１２＋Ｇｍ対賦形剤について測定している。全実験期間における種々の処置群の総体重について以下に示している。さらなる詳細については本明細書の実施例を参照されたい。

ＡＢＴＬ０８１２は、インビボＳＨ−ＳＹ５Ｙヒト神経芽細胞腫異種移植片モデルにおいて、毒性を増加させることなくシスプラチンの治療効果を増強させている。左：ＡＢＴＬ０８１２とシスプラチンとの組み合わせによる抗腫瘍効果を示しており、ＡＢＴＬ０８１２、シスプラチン、または賦形剤のみと比べて腫瘍体積が最も減少していることがわかる。１０日目に、対照群の動物を屠殺しなければならず、同時に処置群の動物の半数も屠殺したが、残りの動物はさらに長い期間検討に用いた。左：処置１０日後に屠殺した時点での腫瘍重量（ｔ検定によりｐ＜０．０５）を示している。さらなる詳細については本明細書の実施例を参照されたい。

ＡＢＴＬ０８１２は、インビボＭＤＡ−ＤＢ−２３１ヒトトリプルネガティブ乳癌異種移植片モデルにおいて、毒性を増加させることなくドキソルビシンの治療効果を増強させている。左：ＡＢＴＬ０８１２とドキソルビシンとの組み合わせによる抗腫瘍効果を示しており、ドキソルビシン、ＡＢＴＬ０８１２、または賦形剤のみと比べて腫瘍体積が最も減少していることがわかる。ｐ値は、ＡＢＴＬ０８１２＋ドキソルビシン対賦形剤について測定している。右：全実験期間における種々の処置群の総体重について示す。さらなる詳細については本明細書の実施例を参照されたい。

ＡＢＴＬ０８１２は、インビボＥＧＩ−１ヒト胆管癌異種移植片モデルにおいて、毒性を増加させることなくゲムシタビン及びシスプラチン（Ｇｍ／Ｃｉｓ）の治療効果を増強させている。左：ＡＢＴＬ０８１２とＧｍ／Ｃｉｓとの組み合わせによる抗腫瘍効果を示しており、Ｇｍ／Ｃｉｓ、ＡＢＴＬ０８１２、または賦形剤のみと比べて腫瘍体積が最も減少していることがわかる。ｐ値は、ＡＢＴＬ０８１２＋Ｇｍ／Ｃｉｓ対賦形剤について測定している。右：全実験期間における種々の処置群の総体重について示す。さらなる詳細については本明細書の実施例を参照されたい。

第１の態様の化合物（Ａ）
好ましい実施形態では、
（ｉ）ａは５〜７の間の任意の整数値を取ることができ、
（ｉｉ）ｂは２〜４の間の任意の整数値を取ることができ、
（ｉｉｉ）ｃは１〜５の間の任意の整数値を取ることができる。

好ましくは、Ｒ_１は、Ｈ、Ｎａ、Ｋ、ＣＨ_３、ＣＨ_３−ＣＨ_２、またはＰＯ（Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_３）_２であってもよく、
好ましくは、Ｒ_２は、ＯＨ、ＯＣＨ_３、Ｏ−ＣＨ_３ＣＯＯＨ、ＣＨ_３、Ｃｌ、ＣＨ_２ＯＨ、ＯＰＯ（Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_３）_２、ＮＯＨ、Ｆ、ＨＣＯＯ、またはＮ（ＯＣＨ_２ＣＨ_３）_２であってもよい。

好ましい実施形態では、Ｒ_１はＨであり、Ｒ_２はＯＨである。

別の好ましい実施形態では、Ｒ_１はＮａであり、Ｒ_２はＯＨである。

好ましくは、化合物（Ａ）は、
ＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_６−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_２−（ＣＨ_２）_３−ＣＨ_３（ＡＢＴＬ０８１２）、
ＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_６−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_３−ＣＨ_３（１８３Ａ１）、
ＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_３−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_３−（ＣＨ_２）_３−ＣＨ_３（１８３Ａ２）、
ＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_２−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_４−（ＣＨ_２）_３−ＣＨ_３（２０４Ａ１）、
ＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_２−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３（２０５Ａ１）、及び
ＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−ＣＨ_２−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_６−ＣＨ_３（２２６Ａ１）、
からなる群から選択される少なくとも１つの化合物である。

最も好ましくは、化合物（Ａ）は、ＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_６−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_２−（ＣＨ_２）_３−ＣＨ_３（ＡＢＴＬ０８１２）である。

化合物（Ａ）の薬学的に許容される塩は、化合物（Ａ）の任意の薬学的に許容される塩を意味する。当該技術分野で公知のように、多数の既知の薬学的に許容される塩がある。薬学的に許容される塩の例として、以下に限定されないが、ナトリウム（Ｎａ）塩、カリウム塩、酢酸塩類、硫酸塩類、ピロ硫酸塩類、重硫酸塩類、亜硫酸塩類、亜硫酸水素塩類、リン酸塩類、リン酸一水素塩類、リン酸二水素塩類、メタリン酸塩類、ピロリン酸塩類、塩化物類、臭化物類、ヨウ化物類、酢酸塩類、プロピオン酸塩類、デカン酸塩類、カプリル酸塩類、アクリル酸塩類、ギ酸塩類、イソ酪酸塩類、カプロン酸塩類、ヘプタン酸塩類、プロピオン酸塩類、シュウ酸塩類、マロン酸塩類、コハク酸塩類、スベリン酸塩類、セバシン酸塩類、フマル酸塩類、マレイン酸塩類、ブチン−１，４−ジオエート、ヘキシン−１，６−ジオエート、安息香酸塩類、クロロ安息香酸塩類、安息香酸メチル類、ジニトロ安息香酸塩類、ヒドロキシ安息香酸塩類、メトキシ安息香酸塩類、フタル酸塩類、スルホン酸塩類、キシレンスルホン酸塩類、フィルアセテート（phylacetate）、フェニルプロピオン酸塩類、フェニル酪酸塩類、クエン酸塩類、乳酸塩類、ガンマ−ヒドロキシ酪酸塩類、グリコール酸塩類、酒石酸塩類、アルカンスルホン酸塩類（例えば、メタンスルホン酸塩またはメシル酸塩）、プロパンスルホン酸塩類、ナフタレン−１−スルホン酸塩類、ナフタレン−２−スルホン酸塩類、及びマンデル酸塩類が挙げられる。ある特定の実施形態では、化合物（Ａ）の塩はナトリウム塩である。

本文脈において当業者が理解するように、本明細書において、例えばＡＢＴＬ０８１２などの化合物（Ａ）の好ましい式に言及する場合には、その塩も含まれることになり、例えば、化合物（Ａ）がＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_６−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_２−（ＣＨ_２）_３−ＣＨ_３（ＡＢＴＬ０８１２）と言及されている場合にはＡＢＴＬ０８１２の塩も言及されていることになる。

好ましくは、化合物（Ａ）は、ＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_６−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_２−（ＣＨ_２）_３−ＣＨ_３（ＡＢＴＬ０８１２）のナトリウム塩である。

第１の態様の化合物（Ｂ）
好ましくは、化合物（Ｂ）は、
２官能アルキル化剤（好ましくは、シクロホスファミド、メクロレタミン、クロラムブシル、またはメルファラン）、
単官能アルキル化剤（好ましくは、ダカルバジン（ＤＴＩＣ）、ニトロソウレア類、またはテモゾロミド）、
アントラサイクリン（好ましくは、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン、ミトキサントロン、またはバルルビシン）、
タキサン（好ましくは、パクリタキセル、ドセタキセル、ナブパクリタキセル、またはタキソテール）、
エポチロン（好ましくは、パツピロン（patupilone）、サゴピロン、またはイクサベピロン）、
デアセチラーゼ阻害剤（好ましくは、ボリノスタットまたはロミデプシン）、
トポイソメラーゼＩ阻害剤（好ましくは、イリノテカンまたはトポテカン）、
トポイソメラーゼＩＩ阻害剤（好ましくは、エトポシド、テニポシド、または、タフルポシド（Tafluposide））、
キナーゼ阻害剤（好ましくは、ボルテゾミブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、ベムラフェニブ、またはビスモデギブ）、
ヌクレオチド類似体及び／または前駆体類似体（好ましくは、アザシチジン、アザチオプリン、カペシタビン、シタラビン、ドキシフルリジン、フルオロウラシル、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、メルカプトプリン、メトトレキサート、またはチオグアニン）、
ペプチド抗生物質（好ましくは、ブレオマイシンまたはアクチノマイシン）、
白金系薬剤（好ましくは、カルボプラチン、シスプラチン、またはオキサリプラチン）、
レチノイド（好ましくは、トレチノイン、アリトレチノイン、またはベキサロテン）、ならびに、
ビンカアルカロイド及び誘導体（好ましくは、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、またはビノレルビン）、
からなる群から選択される少なくとも１つの化学療法剤化合物である。

本文脈で理解されるように、化合物（Ｂ）の好ましい記載例のいずれに対しても、化合物（Ａ）がＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_６−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_２−（ＣＨ_２）_３−ＣＨ_３（ＡＢＴＬ０８１２）であることが最も好ましい。

より好ましくは、化合物（Ｂ）は、
シクロホスファミド、
メルファラン、
ドセタキセル、
パクリタキセル、
ナブパクリタキセル、
カルボプラチン、
シスプラチン、
オキサリプラチン、
メトトレキサート、
ペメトレキセド、
アザチオプリン、
カペシタビン、
フルオロウラシル
メルカプトプリン、
ゲムシタビン、
ブレオマイシン、
アクチノマイシン、
ビンクリスチン、
ビンブラスチン、
ビノレルビン、
レチノイン酸、
テモゾロミド、
ダウノルビシン、
ドキソルビシン、
イリノテカン、及び、
トポテカン、
からなる群から選択される少なくとも１つの化学療法剤化合物である。

より好ましくは、化合物（Ｂ）は、
ドセタキセル、
パクリタキセル、
ナブパクリタキセル、
カルボプラチン、
シスプラチン、
オキサリプラチン、
メトトレキサート、
ペメトレキセド、
ゲムシタビン、
ブレオマイシン、
レチノイン酸、
テモゾロミド、
ドキソルビシン、
イリノテカン、及び、
トポテカン、
からなる群から選択される少なくとも１つの化学療法剤化合物である。

第１の態様の化合物（Ｂ）が２つ以上の異なる化学療法剤を含むことが好ましい場合があり（特に化合物（Ａ）がＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_６−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_２−（ＣＨ_２）_３−ＣＨ_３（ＡＢＴＬ０８１２）である場合）、例えば、好ましくは第１の態様の化合物（Ｂ）が、
パクリタキセル及びカルボプラチン、
パクリタキセル及びゲムシタビン、
ナブパクリタキセル及びゲムシタビン、
ゲムシタビン及びシスプラチン、
ペメトレキセド及びシスプラチン、
を含む場合が挙げられる。

特に癌が肺癌（好ましくは非小細胞肺腺癌）である場合には、化合物（Ａ）がＡＢＴＬ０８１２であり、化合物（Ｂ）がドセタキセルであることが極めて好ましい。（これらの好ましい実施形態の例として、本明細書の実施例１．１及び実施例２．１を参照されたい）。

特に癌が肺癌（非小細胞肺癌）である場合には、化合物（Ａ）がＡＢＴＬ０８１２であり、化合物（Ｂ）がパクリタキセルであることが極めて好ましい。（これらの好ましい実施形態の例として、本明細書の実施例１．２を参照されたい）。

特に癌が膵臓癌である場合には、化合物（Ａ）がＡＢＴＬ０８１２であり、化合物（Ｂ）がゲムシタビンであることが極めて好ましい。（例えば、これらの好ましい実施形態の例として、本明細書の実施例１．３を参照されたい）。

特に癌が子宮内膜細胞癌である場合には、化合物（Ａ）がＡＢＴＬ０８１２であり、化合物（Ｂ）がカルボプラチンであることが極めて好ましい。（これらの好ましい実施形態の例として、本明細書の実施例１．４を参照されたい）。

特に癌が神経芽細胞腫である場合には、化合物（Ａ）がＡＢＴＬ０８１２であり、化合物（Ｂ）がレチノイン酸であることが極めて好ましい。（これらの好ましい実施形態の例として、本明細書の実施例１．５を参照されたい）。

特に癌が乳癌（好ましくはトリプルネガティブ乳癌）である場合には、化合物（Ａ）がＡＢＴＬ０８１２であり、化合物（Ｂ）がパクリタキセルであることが極めて好ましい。（これらの好ましい実施形態の例として、本明細書の実施例１．６を参照されたい）。

特に癌が扁平上皮癌（好ましくは非小細胞扁平上皮肺癌）である場合には、化合物（Ａ）がＡＢＴＬ０８１２であり、化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びカルボプラチンであることが極めて好ましい。（これらの好ましい実施形態の例として、本明細書の実施例２．２を参照されたい）。

特に癌が非小細胞肺腺癌である場合には、化合物（Ａ）がＡＢＴＬ０８１２であり、化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びカルボプラチンであることが極めて好ましい。（これらの好ましい実施形態の例として、本明細書の実施例２．３を参照されたい）。

特に癌が非小細胞肺腺癌である場合には、化合物（Ａ）がＡＢＴＬ０８１２であり、化合物（Ｂ）がペメトレキセド及びシスプラチンであることが極めて好ましい。（これらの好ましい実施形態の例として、本明細書の実施例２．４を参照されたい）。

特に癌が子宮内膜癌である場合には、化合物（Ａ）がＡＢＴＬ０８１２であり、化合物（Ｂ）がパクリタキセルであることが極めて好ましい。（これらの好ましい実施形態の例として、本明細書の実施例２．５を参照されたい）。

特に癌が子宮内膜癌である場合には、化合物（Ａ）がＡＢＴＬ０８１２であり、化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びカルボプラチンであることが極めて好ましい。（これらの好ましい実施形態の例として、本明細書の実施例２．６を参照されたい）。

特に癌が膵臓癌である場合には、化合物（Ａ）がＡＢＴＬ０８１２であり、化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びゲムシタビンであることが極めて好ましい。（これらの好ましい実施形態の例として、本明細書の実施例２．７を参照されたい）。

特に癌が膵臓癌である場合には、化合物（Ａ）がＡＢＴＬ０８１２であり、化合物（Ｂ）がゲムシタビンか、またはナブパクリタキセル及びゲムシタビンであることが極めて好ましい。（これらの好ましい実施形態の例として、本明細書の実施例２．８を参照されたい）。

特に癌が神経芽細胞腫である場合には、化合物（Ａ）がＡＢＴＬ０８１２であり、化合物（Ｂ）がシスプラチンであることが極めて好ましい。（これらの好ましい実施形態の例として、本明細書の実施例２．９を参照されたい）。

特に癌がトリプルネガティブ乳癌である場合には、化合物（Ａ）がＡＢＴＬ０８１２であり、化合物（Ｂ）がドキソルビシンであることが極めて好ましい。（これらの好ましい実施形態の例として、本明細書の実施例２．１０を参照されたい）。

特に癌が胆管癌である場合には、化合物（Ａ）がＡＢＴＬ０８１２であり、化合物（Ｂ）がゲムシタビン及びシスプラチンであることが極めて好ましい。（これらの好ましい実施形態の例として、本明細書の実施例２．１１を参照されたい）。

特に癌が神経芽細胞腫癌である場合には、化合物（Ａ）がＡＢＴＬ０８１２であり、化合物（Ｂ）がテモゾロミド及びイリノテカンであることが好ましい。

特に癌が神経芽細胞腫癌である場合には、化合物（Ａ）がＡＢＴＬ０８１２であり、化合物（Ｂ）がドキソルビシン及びトポテカンであることが好ましい。

好ましくは、本明細書に記載の薬剤の組み合わせは、化合物（Ａ）がＡＢＴＬ０８１２であり、かつ
−化合物（Ｂ）がドセタキセルであり、癌が肺癌、好ましくは非小細胞肺腺癌であるか、
−化合物（Ｂ）がパクリタキセルであり、癌が肺癌、好ましくは非小細胞肺腺癌であるか、
−化合物（Ｂ）がゲムシタビンであり、癌が膵臓癌であるか、
−化合物（Ｂ）がカルボプラチンであり、癌が子宮内膜癌であるか、
−化合物（Ｂ）がレチノイン酸であり、癌が神経芽細胞腫であるか、
−化合物（Ｂ）がパクリタキセルであり、癌が乳癌、好ましくはトリプルネガティブ乳癌であるか、
−化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びカルボプラチンであり、癌が扁平上皮癌、好ましくは非小細胞扁平上皮肺癌であるか、
−化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びカルボプラチンであり、癌が非小細胞肺腺癌であるか、
−化合物（Ｂ）がペメトレキセド及びシスプラチンあり、癌が非小細胞肺腺癌であるか、
−化合物（Ｂ）がパクリタキセルであり、癌が子宮内膜癌であるか、
−化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びカルボプラチンであり、癌が子宮内膜癌であるか、
−化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びゲムシタビンであり、癌が膵臓癌であるか、
−化合物（Ｂ）がゲムシタビンであり、癌が膵臓癌であるか、
−化合物（Ｂ）がゲムシタビン及びナブパクリタキセルであり、癌が膵臓癌であるか、
−化合物（Ｂ）がシスプラチン及びゲムシタビンであり、癌が神経芽細胞腫であるか、
−化合物（Ｂ）がドキソルビシン酸であり、癌が乳癌、好ましくはトリプルネガティブ乳癌であるか、
−化合物（Ｂ）がシスプラチン及びゲムシタビンであり、癌が胆管癌であるか、
−化合物（Ｂ）がゲムシタビンであり、癌が胆管癌であるか、
−化合物（Ｂ）がトポテカンであり、癌が神経芽細胞腫であるか、
−化合物（Ｂ）がイリノテカンであり、癌が神経芽細胞腫であるか、または、
−化合物（Ｂ）がテモゾロミドであり、癌が神経芽細胞腫である。

上述したように、本明細書の実施例４では、ヒト臨床試験からすでに得られた予備段階の結果について論じている。すでに行ったヒト臨床試験では、進行性子宮内膜癌または扁平上皮癌を持つ患者に対してＡＢＴＬ０８１２化合物をパクリタキセル及びカルボプラチンと組み合わせて使用すると、ヒトにも相乗効果が見られているという点からポジティブな結果となっている。

したがって、本明細書に記載の薬剤の組み合わせは、化合物（Ａ）がＡＢＴＬ０８１２であり、かつ
−化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びカルボプラチンであり、癌が進行性子宮内膜癌、好ましくは進行性子宮内膜癌の場合であるか、または、
−化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びカルボプラチンであり、癌が扁平上皮癌の場合である。

好ましくはＡＢＴＬ０８１２は経口的に投与され、好ましくはＡＢＴＬ０８１２の投与量は１２００ｍｇ〜１４００ｍｇの用量である。

より好ましくは、ＡＢＴＬ０８１２は経口的に投与され、化学療法と組み合わせて、１日３回、１２００ｍｇ〜１４００ｍｇの用量で投与を開始する。

癌
好ましくは、癌は、
肺癌、
非小細胞肺癌、
小細胞肺癌、
扁平上皮癌、
腺癌、
子宮内膜癌、
膵臓癌、
膠芽腫、
乳癌、
頭頸部癌、
神経芽細胞腫、及び、
胆管癌、
からなる群から選択される少なくとも１つの癌である。

好ましくは、癌は、
非小細胞肺癌、
扁平上皮癌、
子宮内膜癌、
膵臓癌、
膠芽腫、
乳癌、
神経芽細胞腫、及び、
胆管癌、
からなる群から選択される少なくとも１つの癌である。

化合物（Ａ）及び／または化合物（Ｂ）の投与
上述したように、本明細書で論じている併用治療に関して、２つの化合物である（Ａ）及び（Ｂ）が、例えば、単一の組成物として同時に投与されるか、または例えば、２つの別々の組成物として逐次的に投与されるかどうかは本質的なことではない。重要なことは、第２の化合物または薬剤が投与されたときに、最初に投与された化合物または薬剤の有効量が患者の体内にあることである。

本明細書に論じている薬剤の組み合わせが化合物（Ａ）と化合物（Ｂ）とを含む単一の組成物であることが好ましい場合もある。

化合物（Ａ）（特にＡＢＴＬ０８１２）は経口的に投与されるのが好ましい。

化合物（Ａ）（特にＡＢＴＬ０８１２）の投与量は、好ましくは２００ｍｇ〜６０００ｍｇ（好ましくは２０００ｍｇ）の用量、より好ましくは３００ｍｇ〜１６００ｍｇの用量、さらにより好ましくは４５０ｍｇ〜１４５０ｍｇの用量である。

さらに好ましくは、化合物（Ａ）（特にＡＢＴＬ０８１２）の投与量は、好ましくは１日あたり２００ｍｇ〜６０００ｍｇ（好ましくは２０００ｍｇ）の総用量、より好ましくは１日あたり３００ｍｇ〜１６００ｍｇの総用量、さらにより好ましくは１日あたり４５０ｍｇ〜１４５０ｍｇの総用量である。好ましくは、該総用量は１日に１回〜５回、より好ましくは１日に２回〜４回、最も好ましくは１日に３回投与される。

したがって、該総用量が例えば、１日に１２００ｍｇであり、１日に３回投与される場合、例えば、各回４００ｍｇを３回投与することになる。

化合物（Ｂ）に関しては、投与の好ましい経路は一般的に、対象となる化学療法剤に依存する。

好ましい化合物（Ｂ）の好ましい投与経路を以下に簡単に示す。
ドセタキセル−輸液を介した静脈内投与が好ましい。
パクリタキセル−輸液を介した静脈内投与が好ましい。
カルボプラチン−輸液を介した静脈内投与が好ましい。
シスプラチン−輸液を介した静脈内投与が好ましい。
ゲムシタビン−輸液を介した静脈内投与が好ましい。
ナブパクリタキセル（アブラキサン（登録商標））−輸液を介した静脈内投与が好ましい。
ペメトレキセド−輸液を介した静脈内投与が好ましい。
ドキソルビシン−静脈内投与が好ましい。

特許請求の範囲の形式における本発明の態様／実施形態
項１．
薬剤の組み合わせであって、ヒト患者の癌の治療において、同時に使用するか、別々に使用するか、または逐次的に使用するための、
（Ａ）式ＣＯＯＲ_１−ＣＨＲ_２−（ＣＨ_２）_ａ−（ＣＨ＝ＣＨＣＨ_２）_ｂ−（ＣＨ_２）_ｃ−ＣＨ_３の多価不飽和脂肪酸である化合物、その薬学的に許容される塩、またはその混合物であって、
（ｉ）ａが０〜７の間の任意の整数値を取ることができ、
（ｉｉ）ｂが２〜７の間の任意の整数値を取ることができ、
（ｉｉｉ）ｃが０〜７の間の任意の整数値を取ることができ、
（ｉｖ）Ｒ_１が、Ｈ、Ｎａ、Ｋ、ＣＨ_３、ＣＨ_３−ＣＨ_２、またはＰＯ（Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_３）_２であり、及び
（ｖ）Ｒ_２が、ＯＨ、ＯＣＨ_３、Ｏ−ＣＨ_３ＣＯＯＨ、ＣＨ_３、Ｃｌ、ＣＨ_２ＯＨ、ＯＰＯ（Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_３）_２、ＮＯＨ、Ｆ、ＨＣＯＯ、またはＮ（ＯＣＨ_２ＣＨ_３）_２である、化合物、その薬学的に許容される塩、またはその混合物と、
（Ｂ）化学療法剤化合物とを含む、薬剤の組み合わせ。
項２．
項１に記載の薬剤の組み合わせであって、
（ｉ）ａが５〜７の間の任意の整数値を取ることができ、
（ｉｉ）ｂが２〜４の間の任意の整数値を取ることができ、及び
（ｉｉｉ）ｃが１〜５の間の任意の整数値を取ることができる、薬剤の組み合わせ。
項３．
Ｒ_１がＨであり、Ｒ_２がＯＨである、先行項のいずれかに記載の薬剤の組み合わせ。
項４．
化合物（Ａ）が、
ＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_６−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_２−（ＣＨ_２）_３−ＣＨ_３（ＡＢＴＬ０８１２）、
ＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_６−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_３−ＣＨ_３（１８３Ａ１）、
ＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_３−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_３−（ＣＨ_２）_３−ＣＨ_３（１８３Ａ２）、
ＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_２−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_４−（ＣＨ_２）_３−ＣＨ_３（２０４Ａ１）、
ＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_２−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_５−ＣＨ_３（２０５Ａ１）、及び、
ＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−ＣＨ_２−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_６−ＣＨ_３（２２６Ａ１）、
からなる群から選択される少なくとも１つの化合物、またはその薬学的に許容される塩である、先行項のいずれかに記載の薬剤の組み合わせ。
項５．
化合物（Ａ）がＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_６−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_２−（ＣＨ_２）_３−ＣＨ_３（ＡＢＴＬ０８１２）またはその薬学的に許容される塩である、先行項のいずれかに記載の薬剤の組み合わせ。
項６．
化合物（Ａ）がＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_６−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_２−（ＣＨ_２）_３−ＣＨ_３（ＡＢＴＬ０８１２）のナトリウム塩である、項５に記載の薬剤の組み合わせ。
項７．
前記癌が、
肺癌、
非小細胞肺癌、
扁平上皮癌、
腺癌、
子宮内膜癌、
漿液性癌
膵臓癌、
膠芽腫癌、
耐性再発乳癌
頭頸部癌、
神経芽細胞腫癌、及び、
胆管癌、
からなる群から選択される少なくとも１つの癌である、先行項のいずれかに記載の薬剤の組み合わせ。
項８．
化合物（Ｂ）が、
ドセタキセル、
パクリタキセル、
カルボプラチン、
シスプラチン、
ゲムシタビン、
ナブパクリタキセル、
レチノイン酸、
テモゾロミド、
イリノテカン、
ドキソルビシン、及び、
トポテカン、
からなる群から選択される少なくとも１つの化学療法剤化合物である、先行項のいずれかに記載の薬剤の組み合わせ。
項９．
化合物（Ａ）がＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_６−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_２−（ＣＨ_２）_３−ＣＨ_３（ＡＢＴＬ０８１２）またはその薬学的に許容される塩である、項８に記載の薬剤の組み合わせ。
項１０．
化合物（Ｂ）がドセタキセルであり、前記癌が肺癌、好ましくは非小細胞肺腺癌であるか、
化合物（Ｂ）がパクリタキセルであり、前記癌が肺癌、好ましくは非小細胞肺腺癌であるか、
化合物（Ｂ）がゲムシタビンであり、前記癌が膵臓癌であるか、
化合物（Ｂ）がカルボプラチンであり、前記癌が子宮内膜細胞癌であるか、
化合物（Ｂ）がレチノイン酸であり、前記癌が神経芽細胞腫であるか、
化合物（Ｂ）がパクリタキセル酸であり、前記癌が乳癌、好ましくはトリプルネガティブ乳癌であるか、
化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びカルボプラチンであり、前記癌が扁平上皮癌、好ましくは非小細胞扁平上皮肺癌であるか、
化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びカルボプラチンであり、前記癌が非小細胞肺腺癌であるか、
化合物（Ｂ）がペメトレキセド及びシスプラチンあり、前記癌が非小細胞肺腺癌であるか、
化合物（Ｂ）がパクリタキセルであり、前記癌が子宮内膜癌であるか、
化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びカルボプラチンであり、前記癌が子宮内膜癌であるか、
化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びゲムシタビンであり、前記癌が膵臓癌であるか、
化合物（Ｂ）がゲムシタビンであり、前記癌が膵臓癌であるか、
化合物（Ｂ）がゲムシタビン及びナブパクリタキセルであり、前記癌が膵臓癌であるか、
化合物（Ｂ）がシスプラチン及びゲムシタビンであり、前記癌が神経芽細胞腫癌であるか、
化合物（Ｂ）がドキソルビシン酸であり、前記癌が乳癌、好ましくはトリプルネガティブ乳癌であるか、または
化合物（Ｂ）がシスプラチン及びゲムシタビンであり、前記癌が胆管癌である、項９に記載の薬剤の組み合わせ。
項１１．
前記薬剤の組み合わせが、化合物（Ａ）と化合物（Ｂ）とを含む単一の組成物である、先行項のいずれかに記載の薬剤の組み合わせ。
項１２．
化合物（Ａ）が経口的に投与される、先行項のいずれかに記載の薬剤の組み合わせ。
項１３．
化合物（Ａ）の投与量が、１日あたり２００ｍｇ〜２０００ｍｇの総用量である、先行項のいずれかに記載の薬剤の組み合わせ。
項１４．
化合物（Ａ）がＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_６−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_２−（ＣＨ_２）_３−ＣＨ_３（ＡＢＴＬ０８１２）またはその薬学的に許容される塩である、項１２から項１３のいずれかに記載の薬剤の組み合わせ。
項１５．
化合物（Ｂ）がドセタキセルであり、輸液を介して静脈内に投与されるか、
化合物（Ｂ）がパクリタキセルであり、輸液を介して静脈内に投与されるか、
化合物（Ｂ）がカルボプラチンであり、輸液を介して静脈内に投与されるか、
化合物（Ｂ）がシスプラチンであり、輸液を介して静脈内に投与されるか、
化合物（Ｂ）がゲムシタビンであり、輸液を介して静脈内に投与されるか、
化合物（Ｂ）がナブパクリタキセルであり、輸液を介して静脈内に投与されるか、
化合物（Ｂ）がテモゾロミドであり、経口的に（例えばカプセル剤の形態で）投与されるか、
化合物（Ｂ）がイリノテカンであり、輸液を介して静脈内に投与されるか、
化合物（Ｂ）がドキソルビシンであり、静脈内に投与されるか、または、
化合物（Ｂ）がトポテカンであり、輸液を介して静脈内に投与される、
項１４に記載の薬剤の組み合わせ。

実施例１：ＡＢＴＬ０８１２と種々の化学療法剤との組み合わせ−インビトロアッセイ
１．１：肺癌におけるＡＢＴＬ０８１２とドセタキセルとを組み合わせた場合の細胞生存率アッセイ
試験参照：ＡＢＴ−ＥＩ−
試験施設：バルセロナ自治大学（ＵＡＢ）のプロテインキナーゼ及び細胞シグナリンググループ（Protein Kinases & Cell Signaling Group）
ＧＬＰコンプライアンス：準拠
試験化合物：ＡＢＴＬ０８１２（バッチ００６／２０１０）
基準化合物：ドセタキセル（Fluka社、０１８５５−５ＭＧ−Ｆ、バッチ１４２５７３８Ｖ）
試験系：Ａ５４９（ヒト肺癌）細胞株
目的：ＡＢＴＬ０８１２とドセタキセルとの組み合わせが細胞生存率に及ぼす影響を評価する。ドセタキセルは肺癌で使用される細胞傷害性化合物であり、肺癌において治療効果のあり得る組み合わせとして、ＡＢＴＬ０８１２とドセタキセルとを使用することが考えられる。

方法：Ａ５４９細胞を、ＡＢＴＬ０８１２（３μＭ〜３００μＭ）、ドセタキセル（０．０１μＭ〜１００μＭ）、またはその両方の組み合わせ（ＩＣ_５０未満、すなわち２０μＭという固定濃度のＡＢＴＬ０８１２と０．０１μＭ〜１００μＭのドセタキセル）と、それぞれの濃度を種々増加させながら合わせて３日間インキュベーションした（ＦＢＳ０．５％）。全ての場合についてＭＴＴアッセイにより細胞生存率を評価し、ＡＢＴＬ０８１２、ドセタキセル、及びその組み合わせそれぞれについてＩＣ_５０を算出した。さらに、相乗作用を評価するために、組み合わせ指数（ＣＩ）をChou及びTalalayの方法（Chou 2006、Chou 2010）に従って以下のように算出した。ＣＩ＝（Ｄ）１／（Ｄｘ）１＋（Ｄ）２／（Ｄｘ）２であり、ＣＩ＜１は相乗効果があり、ＣＩ＝１は相加効果があり、ＣＩ＞１は拮抗作用があることを示す。分母の（Ｄｘ）１はＤ１「単体」がシステムをｘ％阻害する値であり、（Ｄｘ）２はＤ２「単体」がシステムをｘ％阻害する値である。分子の（Ｄ）１及び（Ｄ）２は「組み合わせて」ｘ％阻害する値である。示した結果は、２つの独立した実験の平均値である。

結果：予想通り、ＡＢＴＬ０８１２及びドセタキセルは単体で用いると細胞傷害性を有した。低濃度のＡＢＴＬ０８１２（２０μＭ、ＩＣ_１０と同等）を加えると、ドセタキセルの細胞傷害性が顕著に増加した。ＡＢＴＬ０８１２の存在下でドセタキセルのＩＣ_５０は８０分の１未満に減少し、すなわち１．７μＭから０．０２μＭとなった（以下の表と本明細書の図１を参照されたい）。

ＡＢＴＬ０８１２とドセタキセルの持ち得る相乗作用をChou及びTalalayの方法（Chou 2006、Chou 2010）に従って算出した。この２つの薬剤の組み合わせは５０％の細胞生存率においてＣＩ＝０．４７となり、活性を網羅して相乗作用を有した。このＣＩ値は相乗作用を示している。

結論：ＡＢＴＬ０８１２とドセタキセルは、肺腺癌細胞株Ａ５４９において、インビトロで相乗作用を有する。ＡＢＴＬ０８１２（２０μＭ）という最適以下の濃度により、ドセタキセルのＩＣ_５０が８０分の１未満に減少している。これらの結果は、この２つの薬剤の組み合わせをインビボで肺癌に適用する可能性をもたらしている。ドセタキセルは肺癌の複数のステージにおける選択薬であり、ＡＢＴＬ０８１２との組み合わせは、この２つの薬剤に肺癌細胞で細胞傷害性作用を増加させるという相乗作用が見られたため、有益な作用を及ぼす可能性がある。

１．２：肺癌におけるＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセルとを組み合わせた場合の細胞生存率アッセイ
試験参照：ＬＮ３−Ｔ３０及びＡＢＴ−ＥＩ−０４８
試験施設：バルセロナ自治大学（ＵＡＢ）のプロテインキナーゼ及び細胞シグナリンググループ（Protein Kinases & Cell Signaling Group）
ＧＬＰコンプライアンス：準拠
試験化合物：ＡＢＴＬ０８１２（バッチ００２／２０１２）
基準化合物：パクリタキセル（SelleckChem社、S1 150-10MG、バッチ09）
試験系：変異ＫＲＡＳを有するＡ５４９（ヒト肺癌）細胞株、変異ＰＴＥＮを有するＨ１５７（ヒト非小細胞肺扁平上皮癌）、ＨＴＢ１８２：ヒト非小細胞肺扁平上皮癌、及びＨ１９７５：変異ＰＩ３ＫＣＡを有するヒト非小細胞肺腺癌

目的：ＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセルとの組み合わせが細胞生存率に及ぼす影響を評価する。パクリタキセルは肺癌で使用される細胞傷害性化合物であり、肺癌において治療効果のあり得る組み合わせとして、ＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセルとを使用することが考えられる。

方法：Ａ５４９細胞を、ＡＢＴＬ０８１２（３μＭ〜３００μＭ）、パクリタキセル（０．００３μＭ〜１μＭ）、またはＩＣ_５０未満となる固定濃度のＡＢＴＬ０８１２と０．００３μＭ〜１μＭのパクリタキセルとの組み合わせと、それぞれの濃度を種々増加させながら合わせて、０．１％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ中で７２時間インキュベーションした。また、Ｈ１５７細胞、Ｈ１９５７細胞、及びＨＴＢ−８１２細胞を、パクリタキセル（０．００１μＭ〜１０μＭ）単体、及びＩＣ_５０未満となる固定濃度のＡＢＴＬ０８１２との組み合わせと、パクリタキセルの濃度を種々増加させながら合わせて、０．１％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ中で４８時間インキュベーションした。全ての場合についてＭＴＴアッセイにより細胞生存率を評価し、パクリタキセル及び組み合わせについてＩＣ_５０を算出した。種々の細胞株に対する組み合わせの濃度は以下の通りであった。

Ａ５４９細胞：ＡＢＴＬ０８１２のＩＣ_５０＝４９μＭ。パクリタキセルを、１０μＭ（ＩＣ_１０）、２０μＭ（ＩＣ_２５）、及び３０μＭ（ＩＣ_３５）のＡＢＴＬ０８１２と組み合わせた。
Ｈ１５７細胞：ＡＢＴＬ０８１２のＩＣ_５０＝２３μＭ。パクリタキセルを、１０μＭ（ＩＣ_２０）及び１５μＭ（ＩＣ_３５）のＡＢＴＬ０８１２と組み合わせた。
Ｈ１９５７細胞：ＡＢＴＬ０８１２のＩＣ_５０＝４３μＭ。パクリタキセルを、１０μＭ（ＩＣ_１０）及び２０μＭ（ＩＣ_２０）のＡＢＴＬ０８１２と組み合わせた。
ＨＴＢ−８１２細胞：ＡＢＴＬ０８１２のＩＣ_５０＝２９μＭ。パクリタキセルを、１０μＭ（ＩＣ_２０）及び１５μＭ（ＩＣ_３５）のＡＢＴＬ０８１２と組み合わせた。
さらに、前節で述べたように、組み合わせ指数（ＣＩ）をパクリタキセルＩＣ_５０の値に対して算出した。

結果：ＡＢＴＬ０８１２及びパクリタキセルは全ての４種類の肺癌細胞株において細胞傷害性を有した。別途用いたＡ５４９肺癌細胞株において、１５μＭ、２０μＭ、または３０μＭのＡＢＴＬ０８１２を加えると、パクリタキセルの細胞傷害性が増加した。組み合わせた場合のＩＣ_５０は各薬剤単体を用いた場合よりも小さい値となり、パクリタキセルのＩＣ_５０が２分の１（１５μＭ及び２０μＭ）または７分の１（３０μＭ）に減少することがわかった。このパクリタキセルＩＣ_５０の減少は相乗作用であり、ＣＩ値は、ＡＢＴＬ０８１２が１５μＭの場合に０．３４、２０μＭの場合に０．２８、３０μＭの場合に０．２２となった。Ｈ１５７細胞では得られた相乗作用がＡ５４９細胞ほどは強くはなく、１５μＭのＡＢＴＬ０８１２（ＩＣ_３５）と組み合わせた場合にのみパクリタキセルの細胞傷害性が増強し、パクリタキセルのＩＣ_５０が４．１９μＭから２．３９μＭに減少して１．７５分の１となり、これはＣＩ値０．７の相乗作用を示している。Ｈ１９５７細胞の場合には、１０μＭ（ＩＣ_１０）のＡＢＴＬ０８１２が添加されると相乗作用が見られず、ＩＣ_５０値が変化していない（３．６８μＭ対３．４７μＭ）。一方、２０μＭ（ＩＣ_２０）のＡＢＴＬ０８１２が添加されるとＩＣ_５０値が６．５分の１に減少して、３．６８μＭから０．５６μＭとなっている。このＨ１９５７細胞におけるパクリタキセルＩＣ_５０の減少でＣＩが０．３となり相乗作用を示した。また、ＨＴＢ−８１２細胞は評価した２つの濃度で良好な相乗作用を示し、１０μＭ（ＩＣ_２０）のＡＢＴＬ０８１２が添加されると２．７１μＭから０．８１μＭに減少して３分の１となり、２０μＭ（ＩＣ_３５）のＡＢＴＬ０８１２が添加されると２．７１μＭから０．７５μＭに減少して３．６分の１となっている。これらのＨＴＢ−８１２細胞におけるパクリタキセルＩＣ_５０の減少でＣＩがそれぞれ０．４及び０．５となり相乗作用を示した。さらなる詳細は図２を参照されたい。

結論：ＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセルは、４種類全ての評価肺癌細胞株において、それぞれの変異状態とは無関係にインビトロで相乗効果を有する。最適以下の濃度のＡＢＴＬ０８１２により、パクリタキセルのＩＣ_５０が減少した。これらの結果は、この２つの薬剤の組み合わせをインビボで肺癌に適用する可能性をもたらしている。

１．３：膵臓癌におけるＡＢＴＬ０８１２単体の場合またはゲムシタビンと組み合わせた場合の細胞生存率アッセイ
試験参照：ＬＮ１−Ｔ５６−Ｔ５８
試験施設：バルセロナ自治大学（ＵＡＢ）のプロテインキナーゼ及び細胞シグナリンググループ（Protein Kinases & Cell Signaling Group）
ＧＬＰコンプライアンス：準拠
試験化合物：ＡＢＴＬ０８１２（バッチ００６／２０１０）
基準化合物：ゲムシタビン（Sigma社、Ｇ６４２３、バッチ０４１ Ｍ４７２７Ｖ）
試験系：ＭｉａＰａｃａ２（ヒト膵癌）

目的：膵臓癌細胞株ＭｉａＰａｃａ２において、ＡＢＴＬ０８１２をゲムシタビンに添加した場合に生じ得る相乗作用について評価する。ゲムシタビンは、ほとんどのタイプの膵臓癌に対する標準治療とみなされている。多くの場合、主に進行性膵臓癌に対しては、ゲムシタビンは他の薬剤と組み合わせて投与されており（Ghaneh and Neoptolemos 2007）、２つの薬剤を組み合わせた効果があるか否かを知得するのは興味深いことである。

方法：ＭｉａＰａｃａ２細胞を２４ウェルプレートにゲムシタビン（０．０１μＭ〜１００μＭ）、ＡＢＴＬ０８１２（３μＭ〜３００μＭ）、または両者の組み合わせ（ＩＣ_５０未満、すなわち固定濃度２５μＭのＡＢＴＬ０８１２と０．０１μＭ〜１００μＭのゲムシタビン）と共に播種し、インキュベーターに７２時間載置した（０．５％ＦＢＳ）。細胞生存率をＭＴＴアッセイにより調べ、それぞれのパラメータを決定して相乗作用が生じ得るかを評価した。まず、各薬剤単体または該組み合わせに対するＩＣ_５０を算出した。次に、相乗作用（ＣＩ）を上述したように算出した。

結果：組み合わせた場合のＩＣ_５０は各薬剤単体を用いた場合よりも小さい値となり、ゲムシタビンのＩＣ_５０は７分の１に減少することがわかった。組み合わせの実験用に選択したＡＢＴＬ０８１２の濃度は単体では極めて低い活性を持っていた（１０％未満の細胞傷害性）が、ゲムシタビンの細胞傷害性を増強したことに留意されたい。以下の表と本明細書の図３を参照のこと。

ＡＢＴＬ０８１２とゲムシタビンの持ち得る相乗作用を、非連続の種々の組み合わせ比率に対してChou及びTalalayの方法（Chou 2006、Chou 2010）に従って算出した。この２つの薬剤の組み合わせは５０％の細胞生存率においてＣＩ＝０．６５となり、活性を網羅して相乗作用を有した。このＣＩ値は相乗効果を示している。

結論：ＡＢＴＬ０８１２及びゲムシタビンは、膵臓癌細胞株ＭｉａＰａｃａ２においてインビトロで相乗効果を有する。ＡＢＴＬ０８１２（２５μＭ）という最適以下の濃度により、ゲムシタビンのＩＣ_５０が７分の１に減少している。これらの結果は、この２つの薬剤の組み合わせをインビボで使用できる可能性をもたらしている。

１．４：子宮内膜癌におけるＡＢＴＬ０８１２単体の場合またはカルボプラチンと組み合わせた場合の細胞生存率アッセイ
試験参照：ＡＢＴ−ＥＩ−０６５
試験施設：バルセロナ自治大学（ＵＡＢ）のプロテインキナーゼ及び細胞シグナリンググループ（Protein Kinases & Cell Signaling Group）
ＧＬＰコンプライアンス：準拠
試験化合物：ＡＢＴＬ０８１２（バッチ００６／２０１０）
基準化合物：カルボプラチン（Sigma社、Ｃ２５３８）
試験系：Ｉｓｈｉｋａｗａ（ヒト子宮内膜癌）

目的：子宮内膜癌細胞株Ｉｓｈｉｋａｗａにおいて、ＡＢＴＬ０８１２をカルボプラチンに添加した場合に生じ得る相乗作用について評価する。カルボプラチンは、ほとんどのタイプの子宮内膜癌に対する標準治療とみなされている。したがって、２つの薬剤を組み合わせた効果があるか否かを知得するのは興味深いことである。

方法：Ｉｓｈｉｋａｗａ細胞を、２４ウェルプレートに、４μＭのＡＢＴＬ０８１２の存在下（ＩＣ_１０と同等量）、カルボプラチン（１μＭ〜３００μＭ）の濃度を種々増加させながら合わせて４８時間播種した（０．５％ＦＢＳ）。細胞生存率をＭＴＴアッセイにより調べ、それぞれのパラメータを決定して相乗作用が生じ得るかを評価した。まず、各薬剤単体または該組み合わせに対するＩＣ_５０を算出した。

結果：組み合わせた場合のＩＣ_５０は各薬剤単体を用いた場合よりも小さい値となり、カルボプラチンのＩＣ_５０は３分の１に減少することがわかった。組み合わせの実験用に選択したＡＢＴＬ０８１２の濃度は単体では極めて低い活性を持っていた（１０％未満の細胞傷害性）が、ゲムシタビンの細胞傷害性を増強したことに留意されたい。本明細書の図４を参照のこと。

結論：ＡＢＴＬ０８１２及びカルボプラチンは、子宮内膜癌細胞株Ｉｓｈｉｋａｗａにおいてインビトロで相乗効果を有する。ＡＢＴＬ０８１２（４μＭ）という最適以下の濃度により、カルボプラチンのＩＣ_５０が３分の１に減少している。これらの結果は、この２つの薬剤の組み合わせをインビボで使用できる可能性をもたらしている。

１．５：神経芽細胞腫におけるＡＢＴＬ０８１２単体の場合またはレチノイン酸を組み合わせた場合の細胞生存率アッセイ
試験参照：ＡＢＴ−ＥＩ−０５５
試験施設：小児癌のトランスレーショナルリサーチ部門（Laboratory of Translational Research in Pediatric Cancer）（ＶＨＩＲ）
ＧＬＰコンプライアンス：準拠
試験化合物：ＡＢＴＬ０８１２（バッチ００６／２０１０）
基準化合物：レチノイン酸（Sigma社、Ｒ２６２５）
試験系：ＳＫ−Ｎ−ＢＥ（２）：ヒト神経芽細胞腫細胞株、及びＬＡ１−５Ｓ：神経芽細胞腫細胞株ＬＡ−Ｎ−１のクローン亜系

目的：ＡＢＴＬ０８１２とレチノイン酸（ＲＡ）との組み合わせが、神経芽細胞腫細胞株ＳＫ−Ｎ−ＢＥ（２）及びＬＡ１−５Ｓの細胞生存率に及ぼす影響を評価する。

方法：ＬＡ１−５Ｓ細胞及びＳＫ−Ｎ−ＢＥ（２）細胞を、ＩＣ_５０未満となる固定濃度のＡＢＴＬ０８１２（３０μＭ）、または１０μＭ、２０μＭ、及び３０μＭと増加させた濃度のレチノイン酸、またはその両者の組み合わせとインキュベーションした。１０μＭのレチノイン酸は、神経芽細胞腫患者に対して第１相試験で経口的に投与された薬理学的用量である（Villablanca et al. 1995）。０．５％のＦＢＳを含むＩＭＤＭ中で細胞を２４時間処置した。全ての場合において、細胞生存率をクリスタルバイオレットアッセイにより評価した。種々の用量を６回の繰り返し測定で評価し、示した結果は２つの独立した実験の平均値である。統計学的解析を、GraphPad Prism（登録商標）5.0ソフトウェアを用いてｔ検定の原理に従って行った（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１）。

結果：ＡＢＴＬ０８１２は、低濃度で単剤として用いた場合にはＬＡ１−５Ｓ及びＳＫ−Ｎ−ＢＥ（２）の神経芽細胞腫細胞株において弱い細胞傷害性を示し、レチノイン酸は、１０μＭ及び２０μＭの濃度では、さらに低い有効性を示した。３０μＭのＡＢＴＬ０８１２とレチノイン酸とを組み合わせると、両方の神経芽細胞腫細胞株において高い細胞傷害性をもたらした。死細胞または非増殖細胞の割合は、各薬剤を単体で用いた場合に対して、組み合わせたいずれの場合においても高くなっており、相乗効果を示している。細胞死の増加は、全ての濃度で統計的に有意であった（^＊＊＊ｐ＜０．００１）。さらなる詳細は本明細書の図５を参照されたい。

結論：ＡＢＴＬ０８１２とＲＡとの組み合わせは強い相乗効果を有し、神経芽細胞腫細胞株のＳＫ−Ｎ−ＢＥ（２）及びＬＡ１−５Ｓにおいてインビトロで細胞傷害活性を増強する。ＲＡは一般的に、神経芽細胞腫の微小残存病変段階の管理に臨床で使用されているため、本データは、本組み合わせを用いた神経芽細胞腫を扱う研究を加速させるものである。

１．６：乳癌におけるＡＢＴＬ０８１２単体の場合またはパクリタキセルと組み合わせた場合の細胞生存率アッセイ
試験参照：ペンディング
試験施設：ＵｄＧの標的研究所（Targets lab）
ＧＬＰコンプライアンス：準拠
試験化合物：ＡＢＴＬ０８１２（バッチ００６／２０１０）
基準化合物：パクリタキセル（SelleckChem社、Ｓ１ １５０）
試験系：ＭＤＢ−ＤＡ−２３１（ヒトトリプルネガティブ乳癌）

目的：トリプルネガティブ乳癌細胞株ＭＤＢ−ＤＡ−２３１において、ＡＢＴＬ０８１２をパクリタキセルに添加した場合に生じ得る相乗作用について評価する。

方法：ＭＤＢ−ＤＡ−２３１細胞を、２４ウェルプレートに、５μＭ、１０μＭ、２０μＭのＡＢＴＬ０８１２存在下（全濃度はＩＣ_２５未満）、パクリタキセル（１ｎＭ〜１００μＭ）の濃度を種々増加させながら共に合わせて４８時間播種した（０．５％ＦＢＳ）。細胞生存率をＭＴＴアッセイにより調べ、それぞれのパラメータを決定して相乗作用が生じ得るかを評価した。まず、各薬剤単体または該組み合わせに対するＩＣ_５０を算出した。

結果：組み合わせた場合のＩＣ_５０は各薬剤単体を用いた場合よりも小さい値となり、パクリタキセルのＩＣ_５０は２．７分の１に減少することがわかった。組み合わせの実験用に選択したＡＢＴＬ０８１２の濃度は単体では極めて低い活性を持っていた（１０％未満の細胞傷害性）が、パクリタキセルの細胞傷害性を増強し、ＣＩ値が、ＡＢＴＬ０８１２の５μＭに対して０．３、１０μＭに対して０．２、及び２０μＭに対して０．１６となる強い相乗作用を示したことに留意されたい。以下の表と本明細書の図６を参照のこと。

結論：ＡＢＴＬ０８１２及びカルボプラチンは、子宮内膜癌細胞株Ｉｓｈｉｋａｗａにおいてインビトロで相乗効果を有する。ＡＢＴＬ０８１２（４μＭ）という最適以下の濃度により、カルボプラチンのＩＣ_５０が３分の１に減少している。これらの結果は、この２つの薬剤の組み合わせをインビボで使用できる可能性をもたらしている。

実施例２：ＡＢＴＬ０８１２と種々の化学療法剤との組み合わせ−インビボアッセイ

２．１：ドセタキセルと組み合わせた場合のマウスのＡ５４９異種移植片
試験参照：ＡＬＭ−ＩＤＩＢＡＰＳ
試験施設：分子腫瘍学及びトランスレーショナル腫瘍学リサーチグループ（Molecular and Translational Oncology Research Group）、ＩＤＩＢＡＰＳ、バルセロナ大学病院（Hospital Clinic Barcelona）
ＧＬＰコンプライアンス：準拠
試験化合物：ＡＢＴＬ０８１２（バッチ００２／２０１２）
基準化合物：ドセタキセル
試験系：ｎｕ／ｎｕ雄マウス

目的：ＡＢＴＬ０８１２単体の場合、またはドセタキセル、すなわち非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）治療のための標準薬剤と組み合わせた場合の抗腫瘍活性を調べる。

方法：マウスの側腹部に５×１０^６個のＡ５４９細胞を注入して、腫瘍形成を促した。２０日後、腫瘍の体積が約５０ｍｍ^３になったときに、動物を一様に無作為抽出して、種々の処置を開始した。ＡＢＴＬ０８１２を経口経路により３０ｍｇ／ｋｇ／日で１週間に５回投与した。ドセタキセル５ｍｇ／ｋｇを１週間に１回、腹腔内投与した（Coxon et al. 2012）。腫瘍体積と体重とを１週間に３回モニタリングした。

結果：ＡＢＴＬ０８１２により、腫瘍体積が対照動物に比べて有意に減少した（ＡＮＯＶＡ、ｔ検定を順に実施）。ＡＢＴＬ０８１２の有効性はドセタキセル処置で見られた有効性と全く同等であった。だが興味深いことに、ＡＢＴＬ０８１２はドセタキセルの抗腫瘍効果を増強した。統計学的解析によると、この組み合わせ療法は、ドセタキセル単体と比べて腫瘍増殖を有意に低減させることがわかった（ｔ検定によりｐ＜０．００１）。さらに、ＡＢＴＬ０８１２がドセタキセルと共に投与された群を含めた処置群のいずれにも、体重や血液学的な値に減少が見られなかった（データは示さず）ことから、この組み合わせが何ら有害作用を及ぼさなかったことが示唆される。Ａ５４９肺癌異種移植片モデルにおけるＡＢＴＬ０８１２とドセタキセルとの組み合わせの抗腫瘍効果に関しては、屠殺時に、全ての処置が対照に比べて腫瘍体積を著しく減少させていた（^＊、ＡＮＯＶＡ、ｔ検定解析を順に実施）。さらに、３０ｍｇ／ｋｇのＡＢＴＬ０８１２とドセタキセルとの組み合わせが、ドセタキセル単体での処置と比べて有意に有効性が高かった（^＊＊ｐ＜０．０１、ｔ検定）。一方、単体の処置の場合にも組み合わせた処置の場合にもいずれも体重への影響は見られなかった。さらなる詳細は本明細書の図７を参照されたい。

結論：Ａ５４９細胞由来の肺癌異種移植片モデルにおいて、ＡＢＴＬ０８１２は腫瘍増殖を低下させる。このモデルでは、ＡＢＴＬ０８１２は標準治療（ＳＯＣ）のドセタキセルと同様の有効性を有する。単独療法としてのＡＢＴＬ０８１２及びドセタキセルは、Ａ５４９細胞由来の肺癌異種移植片モデルにおいて、腫瘍体積を同様に減少させた。だがＡＢＴＬ０８１２は、ドセタキセルの抗腫瘍活性を有害作用を及ぼすことなく増強させる。これらの結果は、ＡＢＴＬ０８１２とドセタキセルとを組み合わせた療法が、肺癌の治療として臨床的関心を持たれることを示唆するものである。

２．２：マウスのヒト扁平上皮ＮＳＣＬＣ（Ｈ１５７）異種移植片においてＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセル及びカルボプラチンとを組み合わせた場合の有効性
試験参照：ＡＬＭ−ＩＤＩＢＡＰＳ
試験施設：分子腫瘍学及びトランスレーショナル腫瘍学リサーチグループ（Molecular and Translational Oncology Research Group）、ＩＤＩＢＡＰＳ、バルセロナ大学病院（Hospital Clinic Barcelona）
ＧＬＰコンプライアンス：準拠
試験化合物：ＡＢＴＬ０８１２（バッチＫ１０２Ｅ）
試験系：ｎｕ／ｎｕ雄マウス

目的：ヒト扁平上皮ＮＳＣＬＣ異種移植片モデルにおいてＡＢＴＬ０８１２単体の場合、ならびにパクリタキセル及びカルボプラチン（Ｐ／Ｃ）と組み合わせた場合の生存率をカプラン・マイヤー解析を用いて調べる。

方法：マウスの側腹部に５×１０^６個のＨ１５７細胞を注入して、腫瘍形成を促した。腫瘍の体積が約１００ｍｍ^３になったときに、動物を一様に無作為抽出して（１群あたりｎ＝８）、種々の処置を開始した。検討した種々の条件を、賦形剤の投与、１２０ｍｇ／ｋｇのＡＢＴＬ０８１２の毎日経口投与、カルボプラチン１５ｍｇ／ｋｇ及びパクリタキセル５０ｍｇ／ｋｇの腹腔内投与、さらに、これらの２つのレジメンの組み合わせ投与群とした。ＡＢＴＬ０８１２を通例、最初のＰ／Ｃ投与前の２日間及び投与後の２日間投与し、４回のＡＢＴＬ０８１２投与と１週間に１回のＰ／Ｃ投与とを続けた。腫瘍体積を週に３回モニタリングした。カプラン・マイヤープロットを作成するために、試験から動物を除外するためのエンドポイント基準を、１０００ｍｍ^３を超える腫瘍体積、または倫理委員会により承認されたアニマルウェルフェアの種々の指標とした。実験手順を終了させるために１０００ｍｍ^３に達する前にマウスを屠殺せざるを得なかったＡＢＴＬ０８１２＋Ｐ／Ｃ群を除き、各群の全動物が１０００ｍｍ^３に達するか、またはウェルフェアに関連したエンドポイント基準に達するまで処置を続けた。

結果：ＡＢＴＬ０８１２とＰ／Ｃとを組み合わせた処置は、カプラン・マイヤー解析で最も効果的な療法であることがわかる。本明細書の図８に示すように、ＡＢＴＬ０８１２とＰ／Ｃとの組み合わせは、生存率に関して最も効果的な処置であり、他の群と比べて有意な効果があることがわかる。処置開始２０日後、ＡＢＴＬ０８１２とＰ／Ｃとを組み合わせて処置した群は毒性のいかなる徴候を示すことなく生存率が７５％となるが、これに対してＡＢＴＬ０８１２群及びＰ／Ｃ群は０％、賦形剤群は２０％となる。

結論：エンドポイント基準をアニマルウェルフェア指標の種々の測定値に基づいて設定し、エンドポイントの決定値を示した。動物の健康状態が安定している場合、１０００ｍｍ^３の腫瘍体積をエンドポイント基準として設定した。これらの条件下で、Ｈ１５７扁平上皮ＮＳＣＬＣ異種移植片モデルにおけるカプラン・マイヤー解析によると、ＡＢＴＬ０８１２とＰ／Ｃとを組み合わせた処置は生存率を有意に増加させ、処置の２０日後に７５％の生存率となっており、これに対してＡＢＴＬ０８１２群及び賦形剤群では０％の生存率であり、Ｐ／Ｃ群では２５％の生存率である。

２．３：マウスのヒト腺癌ＮＳＣＬＣ（Ｈ１９７５）異種移植片においてＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセル及びカルボプラチンとを組み合わせた場合の有効性

試験参照：ＡＢＴ−ＥＩ−０４９
試験施設：分子腫瘍学及びトランスレーショナル腫瘍学リサーチグループ（Molecular and Translational Oncology Research Group）、ＩＤＩＢＡＰＳ、バルセロナ大学病院（Hospital Clinic Barcelona）
ＧＬＰコンプライアンス：準拠
試験化合物：ＡＢＴＬ０８１２（バッチ００２／２０１２）
基準化合物：パクリタキセル（Selleckchem社カタログ番号Ｓ１１５０）、カルボプラチン（Sigma Aldrich社カタログ番号Ｃ２５３８）
試験系：ｎｕ／ｎｕ雄マウス

目的：ヒト肺腺癌異種移植片において、ＡＢＴＬ０８１２単体の場合、ならびにパクリタキセル及びカルボプラチンを組み合わせた場合の抗腫瘍活性を調べる。パクリタキセルとカルボプラチンとの組み合わせは、ＮＳＣＬＣの治療として標準療法のうちの１つである。

方法：Ｈ１９７５細胞株を１０％のＦＢＳを含むＤＭＥＭ中で常套的に培養し、腫瘍接種用に指数的な増殖期の細胞を収集し、カウントした。ＦＢＳを含まない増殖培地５０μｌ及びマトリゲル（Corning社カタログ番号３５４２３４）５０μｌに懸濁させた２．５×１０^６個のＨ１９５７細胞を、マウスの側腹部に注入した。腫瘍体積を１週間に３日モニタリングし、腫瘍が１００ｍｍ^３（５０〜１５０ｍｍ^３の間）に達した場合に、郡内で同様の平均腫瘍体積を持つ４つの処置群に均等に動物を分けたが、５０ｍｍ^３よりも小さい腫瘍または１５０ｍｍ^３よりも大きい腫瘍を除外して変動を最小化した。

処置群は以下の通りである。
−賦形剤群（ｎ＝７）：５％グリセロール水溶液２００μｌで１週間に４日経口処置し、食塩水１００μｌを１週間に１回腹腔内に２本注射した。
−ＡＢＴＬ０８１２（ｎ＝９）：５％グリセロール水溶液中に再懸濁させた１２０ｍｇ／ｋｇのＡＢＴＬ０８１２を２００μｌで１週間に５回経口処置した。
−パクリタキセル／カルボプラチン（ｎ＝９）：１５ｍｇ／ｋｇのパクリタキセル１００μｌを腹腔内投与し、５ｍｇ／ｋｇのカルボプラチン１００μｌを腹腔内投与して１週間に１回処置した。
−ＡＢＴＬ０８１２＋パクリタキセル／カルボプラチン（ｎ＝９）：１２０ｍｇ／ｋｇのＡＢＴＬ０８１２を２００μｌで１週間に４日経口処置し、１５ｍｇ／ｋｇのパクリタキセル１００μｌと５ｍｇ／ｋｇのカルボプラチン１００μｌとを腹腔内投与して１週間に１回処置した。

結果：Ｈ１９５７細胞由来の異種移植片において、ＡＢＴＬ０８１２をパクリタキセル及びカルボプラチンと組み合わせて投与すると、インビボでの抗腫瘍効果が最も高くなっている。パクリタキセル及びカルボプラチンを投与すると賦形剤群と比べて腫瘍体積が減少し、ＡＢＴＬ０８１２単体を投与すると同様の腫瘍体積の減少が効果の増す傾向を伴って見られた。一方、ＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセル及びカルボプラチンとの３種を組み合わせると腫瘍体積が最も減少し、有意な違いが見られた。さらに、３種を組み合わせた群では処置の最初の週に体重のわずかな減少が見られたが、その後の実験では安定化しており、ＡＢＴＬ０８１２がドセタキセルと共に投与された群を含めた処置群のいずれにも、体重や血液学的な値に減少が見られなかった（データは示さず）ことから、この組み合わせは何ら有害作用を及ぼさなかったことが示唆される。さらなる詳細は本明細書の図９を参照されたい。

結論：Ｈ１９７５細胞由来の肺癌異種移植片モデルにおいて、経口的に投与されたＡＢＴＬ０８１２は腫瘍増殖を低下させる。このモデルでは、ＡＢＴＬ０８１２は標準治療（ＳＯＣ）のパクリタキセル＋カルボプラチンと同様の有効性を有する。さらに、ＡＢＴＬ０８１２はパクリタキセル／カルボプラチンの抗腫瘍活性を有害作用を及ぼすことなく増強する。

これらの結果は、ＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセル／カルボプラチンとを組み合わせた療法が、肺癌の治療として臨床的関心を持たれることを示唆するものである。

２．４：マウスのヒト腺癌ＮＳＣＬＣ（Ａ５４９）異種移植片においてＡＢＴＬ０８１２とペメトレキセド及びシスプラチンとを組み合わせた場合の有効性
試験参照：ＡＢＴ−ＥＩ−０５２
試験施設：バルセロナ自治大学（ＵＡＢ）のプロテインキナーゼ及び細胞シグナリンググループ（Protein Kinases & Cell Signaling Group）
ＧＬＰコンプライアンス：準拠
試験化合物：ＡＢＴＬ０８１２（バッチＫ１０２Ｅ）
基準化合物：ペメトレキセド（Sigma Aldrich社カタログ番号ＰＨＲ１５９６）及びシスプラチン（Sigma Aldrich社カタログ番号Ｐ４３９４）
試験系：ｎｕ／ｎｕ雄マウス

目的：本試験の目的は、ヒト肺腺癌Ａ５４９細胞を移植した免疫抑制性ヌードマウスにおいて、肺癌の皮下異種移植片モデルの処置として、ＡＢＴＬ０８１２単体の場合、または標準治療化学療法であるペメトレキセド及びシスプラチンと組み合わせた場合の抗腫瘍有効性を調べることである。

方法：Ａ５４９細胞株を１０％のＦＢＳを含むＤＭＥＭ中で常套的に培養し、腫瘍接種用に指数的な増殖期の細胞を収集し、カウントした。ＦＢＳを含まない増殖培地５０μｌ及びマトリゲル（Corning社カタログ番号３５４２３４）５０μｌに懸濁させた５×１０^６個のＭｉａＰａｃａ２細胞を、８週齢の雌ヌードマウス５０匹の側腹部に注入した。腫瘍体積を１週間に３日モニタリングし、腫瘍が１００ｍｍ^３（５０〜１５０ｍｍ^３の間）に達した場合に、郡内で同様の平均腫瘍体積を持つ３つの処置群に均等に動物を分けたが、５０ｍｍ^３よりも小さい腫瘍または１５０ｍｍ^３よりも大きい腫瘍を除外して変動を最小化した。
処置群は以下の通りである。
−賦形剤群（ｎ＝７）：５％グリセロール水溶液２００μｌで１週間に４回経口処置し、食塩緩衝液２００μｌ（化学療法賦形剤）を１週間に２回腹腔内処置した。
−ペメトレキセド／シスプラチン（ｎ＝２０）：１００ｍｇ／ｋｇのペメトレキセド１００μｌを１週間に２回腹腔内投与し、２ｍｇ／ｋｇのシスプラチン１００μｌを１週間に１回腹腔内投与した。
−ＡＢＴＬ０８１２＋ペメトレキセド／シスプラチン（ｎ＝２０）：５％グリセロール水溶液に再懸濁させた１２０ｍｇ／ｋｇのＡＢＴＬ０８１２を２００μｌで１週間に４回経口処置し、１００ｍｇ／ｋｇのペメトレキセド１００μｌを腹腔内投与し、２ｍｇ／ｋｇのシスプラチン１００μｌを１週間に１回腹腔内投与した。

結果：図１に示すように、ＡＢＴＬ０８１２とペメトレキセド及びシスプラチンとの組み合わせは、ペメトレキセド／シスプラチンの治療効果を増強して強い抗腫瘍効果を示し、ペメトレキセド／シスプラチン処置群と比べて有意に腫瘍体積を減少させることができた。ＡＢＴＬ０８１２＋ペメトレキセド／シスプラチンは、処置の３３日目からペメトレキセド／シスプラチンと比べて有意な腫瘍の減少を示し、この差は４１日目の処置最終日までの間により顕著になった。ペメトレキセド／シスプラチン、及びＡＢＴＬ０８１２＋ペメトレキセド／シスプラチンの両方の処置群は、処置の２２日目から４１日目の処置最終日まで、賦形剤群に比べて有意な腫瘍体積の減少を示した。

処置由来の毒性に関して、処置した４１日間にわたってモニタリングした全４つの群に対する総体重の経時変化を図２に示している。毒性または臨床病理学的な徴候は何も見られなかったが、ＡＢＴＬ０８１２＋ペメトレキセド／シスプラチン群ではその他の群と比べて処置の最初の週に体重のわずかな減少が見られ、これは、化学療法を受けているときに食事摂取量が減少しているためである。それ以上の臨床病理的な症状はいずれの群にも見られなかった。さらなる詳細は本明細書の図１０を参照されたい。

結論：上述したように、Ａ５４９細胞由来の肺癌異種移植片モデルにおいて、ＡＢＴＬ０８１２は腫瘍増殖を低下させる。このモデルでは、ＡＢＴＬ０８１２は、ペメトレキセド及びシスプラチンの抗腫瘍活性を有害作用を及ぼすことなく増強する。ペメトレキセドとシスプラチンとを用いる療法は、肺腺癌患者に対して最も一般的な第１選択治療であり、これらの結果は、ＡＢＴＬ０８１２とペメトレキセド及びシスプラチンとを組み合わせた療法が、肺癌患者の治療として臨床的関心を持たれることを示唆するものである。

２．５：マウスの子宮内膜同所性モデルにおけるＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセルとを組み合わせた場合の有効性試験
試験施設：Xenopat（スペイン国バルセロナ）
ＧＬＰ試験：準拠
試験化合物：ＡＢＴＬ０８１２（バッチ００１ Ｒ／２０１４）、パクリタキセル（Teva社）
試験系：無胸腺ヌードＦｏｘｎ１ ｎｕ雌マウス

目的：子宮内膜癌のＩｓｈｉｋａｗａ同所性モデルにおいて、経口投与したＡＢＴＬ０８１２と腹腔内投与したパクリタキセルとの組み合わせが抗腫瘍有効性に及ぼす影響を評価する。

方法：雌マウスの子宮部に腫瘍由来のＩｓｈｉｋａｗａ細胞株の３ｍｍ^３片を同所的に移植した。薬剤処置を開始する前に、全動物の体重を測定し、腫瘍体積を触診法により評価した。その腫瘍体積に基づいて、マウスを乱塊法を用いて群に分けた。パクリタキセルを７日毎に腹腔内投与した（１５ｍｇ／ｋｇ）。ＡＢＴＬ０８１２を強制経口投与し、その投与スケジュールは、５日間の投与と２日間の非投与とした（１日あたり１２０ｍｇ／ｋｇ）。全体として、以下の表に示すように動物を４つの投与群に分けた。
子宮内膜癌同所性モデルにおける投与群

腫瘍体積を式Ｖ＝π／６×Ｌ×Ｗ^２（式中Ｌは腫瘍の長軸、Ｗは腫瘍の短軸である）を用いて概算した。所定のモニタリング時に、動物をチェックし、運動能などの通常の挙動、餌の目測、体重増または体重減（体重は投与の間に１週間に２回測定した）、目／毛のつやの変化（matting）及び任意の他の異常作用に、腫瘍増殖及び処置が与える影響について調べた。各サブセット内の動物の数に基づいて、死亡及び臨床的症状を記録した。

同所性腫瘍が屠殺時にのみ測定できることを考慮し、動物の一部（１群につきｎ＝２〜３）を処置の１週間後に屠殺して、腫瘍増殖に対する初期の影響を測定した。動物のほとんどを処置の３週間後に屠殺した（１群につきｎ＝５〜７）。

結果：腫瘍断片由来の３ｍｍ^３のＩｓｈｉｋａｗａ細胞株をマウス一組（ｎ＝３６）に同所的に移植したが、全実験処置の間に、動物の挙動に対する影響は何ら見られなかった。パクリタキセルとの組み合わせで処置した動物には、腫瘍重量増加の減少やいくらかの体重減少が見られたが、体重減少は処置期間の終了時に部分的に回復した。対照群と比べた場合のこの体重減少が１０％に達しなかったことを考慮すると、毒性を有さなかったと考えられる。薬剤処置を１週間または３週間行った後に動物を屠殺し、上述した方法で腫瘍体積を測定した。１週間処置した動物には何の差異も観察されなかった。しかしながら、３週間処置した動物において、パクリタキセル＋ＡＢＴＬ０８１２の組み合わせで処置した動物には相加的効果が見られた。本明細書の図１１を参照されたい。

結論：ＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセルとを組み合わせると、各薬剤を単体で用いた場合の効果に比べて相乗効果を示し、この組み合わせで治療した動物には、対照動物に比べて有意な腫瘍体積の減少が見られた。同時に、この組み合わせで処置した動物にはいくらかの体重減少が見られた。しかしながら、有毒作用があるとはみなされなかった。

２．６：マウスの患者由来異種移植片（ＰＤＸ）子宮内膜モデルにおけるＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセル及びカルボプラチンとを組み合わせた場合の有効性試験
試験参照：ＡＢＴ−ＥＩ−０４３
試験施設：ＶＨＩＲ
ＧＬＰコンプライアンス：準拠
試験化合物：ＡＢＴＬ０８１２（バッチＫ１０２Ｅ＝ＭＥＩ−０１４−１５）
基準化合物：パクリタキセル（Selleckchem社カタログ番号Ｓ１１５０）、カルボプラチン（Sigma Aldrich社カタログ番号Ｃ２５３８）
試験系：無胸腺ヌードＦｏｘｎ１ ｎｕ雌マウス

目的：ヌードマウスに皮下移植したＰＤＸモデルにおいて、ＡＢＴＬ０８１２単体の場合、ならびにパクリタキセル及びカルボプラチン（Ｐ／Ｃ）と組み合わせた場合の抗腫瘍活性を調べる。

方法：漿液性組織型、ＩＩＩＣ２期、１００％の子宮筋層への浸潤、骨盤リンパ節及び大動脈リンパ節及び血管裂孔への浸潤を持ち、ならびにｐ５３及びＰＩ３ＫＣＡ遺伝子の変異を保因している患者から外科的に切除した腫瘍を、複数のヌードマウスの側腹部に移植した。腫瘍が１００ｍｍ^３超に増殖した後に腫瘍をマウスから抽出し、２ｍｍ長の断片に刻み、４０匹のマウスの側腹部に再移植した。平均腫瘍体積が１００ｍｍ^３に達した場合に、マウスを複数の処置群に均等に分け、以下のように投与した。賦形剤の投与（ｎ＝１１）、１２０ｍｇ／ｋｇのＡＢＴＬ０８１２を１週間に５回経口投与（ｎ＝１０）、パクリタキセル（５０ｍｇ／ｋｇ）／カルボプラチン（１５ｍｇ／ｋｇ）（Ｐ／Ｃ）を腹腔内投与（ｎ＝１２）、及びＡＢＴＬ０８１２＋Ｐ／Ｃの投与については、ＡＢＴＬ０８１２（ｎ＝１０）を常に最初のＰ／Ｃ投与前の２日間及び投与後の２日間投与し、４回のＡＢＴＬ０８１２投与と１週間に１回のＰ／Ｃ投与とを続けた投与とし、用量は別々に投与された場合と同量にした。

この処置が腫瘍増殖に及ぼす影響を、その体積を測定することによって評価し、この処置の有効性を調べた。動物の健康状態と薬剤が誘発する毒性とを、試験の間の動物の体重により見積もった。腫瘍サイズの進展及び腫瘍重量を二元配置ＡＮＯＶＡ（日毎分析）により評価した。

ＡＢＴＬ０８１２をＰ／Ｃサイクルの後に継続投与する第２相臨床試験デザインを評価するために、Ｐ／Ｃ群、及びＡＢＴＬ０８１２＋Ｐ／Ｃ群でのＰ／Ｃ処置を停止し、ＡＢＴＬ０８１２の長期投与を続けた。腫瘍体積をＰ／Ｃ処置を停止した後に続く１７日間測定した。

結果：腫瘍が約１００ｍｍ^３に達した場合に、４０匹のマウス一組をランダムに４つの処置群に分けた。本明細書の図１２に示すように、処置開始から４７日後に、ＡＢＴＬ０８１２＋Ｐ／Ｃは、賦形剤、ＡＢＴＬ０８１２単体、及びＰ／Ｃ単体に比べて有効性が最も高くなり、統計的に有意な腫瘍増殖の低減が見られた。総体重の有意な減少がなかったことからわかるように、この治療結果の改善は新たな有毒症状を伴わなかった。ＡＢＴＬ０８１２を単体で投与すると、いかなる有毒症状も招くことなくＰ／Ｃと同じ有効性を示している。

４７日目に、Ｐ／Ｃ投与を停止する一方、ＡＢＴＬ０８１２の投与を１週間に５日継続的に続けて、ＡＢＴＬ０８１２の投与の継続によって腫瘍の再発が避けられるか、または遅らせることができるかを調べた。マウスへの処置を停止したＰ／Ｃ群では、腫瘍が同様かまたはわずかに速い速度で増殖し続けたのに対し、ＡＢＴＬ０８１２投与を維持したＡＢＴＬ０８１２＋Ｐ／Ｃ群では、腫瘍増殖割合の増加が見られなかった上に、寛解傾向を示した。全実験にわたりＡＢＴＬ０８１２投与を続けたＡＢＴＬ０８１２群では、Ｐ／Ｃと極めてよく似た腫瘍増殖の阻害が見られ、一定の増殖傾向を維持し、増殖割合の増加を招く可能性がある耐性作用の徴候を何ら示さなかった。

結論：ＡＢＴＬ０８１２とＰ／Ｃとを組み合わせると相乗効果を示し、Ｐ／Ｃ単体と比較して有意に大幅な腫瘍体積の減少が見られており、かつ賦形剤群と比較して初めの４７日間で有意な腫瘍体積の減少も見られている。単剤療法として投与されたＡＢＴＬ０８１２には、Ｐ／Ｃの投与で得られたものと同じ腫瘍増殖を低減する効果が見られる。体重減少はＡＢＴＬ０８１２群でのみ１５日目に部分的に見られたが、続く４日間で体重の減少が回復し、その後の実験では安定したままであった。他の群のいずれも毒性とみられる作用は何ら見られなかった。

第１選択としてＡＢＴＬ０８１２をＰ／Ｃと組み合わせて投与し、化学療法サイクルの後もＡＢＴＬ０８１２を継続投与するヒトでの第２相臨床試験を評価するために、４７日目にＰ／Ｃ処置を停止する一方で、ＡＢＴＬ０８１２投与を続けた。このヒト子宮内膜ＰＤＸにおいて、Ｐ／Ｃ及びＡＢＬ０８１２では腫瘍増殖が低減しなかったが、Ｐ／Ｃ処置後にＡＢＴＬ０８１２を継続的に投与すると腫瘍再発を効果的に防止し、化学療法を停止した１０日後に寛解傾向を示した。

２．７：ＭｉａＰａｃａ−２細胞を移植したマウスのヒト膵臓異種移植片モデルにおけるＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセル／ゲムシタビン（Ｐ／Ｇｍ）とを組み合わせた場合の有効性試験
試験参照：ＡＢＴ＿ＥＩ＿００１＿ＸＰ
試験施設：バルセロナ自治大学（ＵＡＢ）のAbility Virtual Lab
ＧＬＰコンプライアンス：準拠
試験化合物：ＡＢＴＬ０８１２（バッチＫ１０２Ｅ＝ＭＥＩ−０１４−１５）
基準化合物：パクリタキセル／ゲムシタビン（Ｐ／Ｇｍ）
試験系：無胸腺ヌードＦｏｘｎ１ ｎｕ雌マウス

目的：膵臓癌のＭｉａＰａｃａ２異種移植片マウスモデルにおいて、経口投与したＡＢＴＬ０８１２と、Ｐ／Ｇｍとの組み合わせが抗腫瘍有効性に及ぼす影響を評価する。賦形剤、ＡＢＴＬ０８１２、及びＡＢＴＬ０８１２とＰ／Ｇｍとの組み合わせの他、腹腔内投与のＰ／Ｇｍを陽性対照として用いた。有効性を腫瘍増殖により評価し、化合物の忍容性及び毒性は動物の体重変化により評価した。

方法：無胸腺雌ヌードマウス（１群につきｎ＝９）の側腹部に０．１ｍｌのＭｉａＰａｃａ２細胞（血清を含まないＤＭＥＭ培地に溶かした５×１０^６個の細胞／ｍｌとマトリゲルとの１：１混合）を皮下経路で注入した。腫瘍体積（ＴＶ）を長さ×（幅）^２×１／２として１週間に３回測定した。平均腫瘍体積が１００ｍｍ^３に達した場合に、マウスを複数の処置群に均等に分け、以下のように投与した。賦形剤の投与、１２０ｍｇ／ｋｇのＡＢＴＬ０８１２を１週間に５回投与、Ｐ／Ｇｍの１５ｍｇ／ｋｇ及び６０ｍｇ／ｋｇを１週間に２回投与、ならびにＡＢＴＬ０８１２とＰ／Ｇｍとの組み合わせの投与については、ＡＢＴＬ０８１２を常にＰ／Ｇｍ投与（３日目及び６日目）前の２日間及び投与後の２日間、１週間に４回（１日目、２日目、４日目、５日目）全４週間の投与とした。

この処置が腫瘍増殖に及ぼす影響を、その体積を測定することによって評価し、この処置の有効性を調べた。動物の健康状態と、薬剤が誘発する毒性とを、試験の間の動物の体重により見積もった。有意な差異が見られた期間において、腫瘍サイズの進展を二元配置ＡＮＯＶＡ（日毎分析）及びスチューデントのｔ検定により評価した。

結果：本明細書の図１３のグラフは、Ｐ／Ｇｍと組み合わせて経口的に投与したＡＢＴＬ０８１２が相対腫瘍体積と毒性の指標である総体重とに及ぼす影響を示している。Ｐ／Ｇｍと組み合わせたＡＢＴＬ０８１２が最も高い有効性を示し、所定の時点においてＰ／Ｇｍ単体と比べて有意に腫瘍体積を減少させている。さらにＡＢＴＬ０８１２とＰ／Ｇｍとを組み合わせた処置は、残りの群とは対照的に、処置１０日目以降に全動物において腫瘍退縮を示している。ＡＢＴＬ０８１２単体は、処置した最初の１５日内にはポジティブな効果があるように思われるが、その後は賦形剤群と同様の腫瘍体積を示している。所定の用量でのＰ／Ｇｍ処置は、賦形剤群及びＡＢＴＬ０８１２群と比べて腫瘍体積を減少させているが、分析した期間では統計的な有意性は見られていない。総体重のグラフからは、ＡＢＴＬ０８１２とＰ／Ｇｍとの組み合わせが総体重に及ぼす影響を他の群と比較して知ることができる。ＡＢＴＬ０８１２＋Ｐ／Ｇｍの投与初期後にわずかな体重減少が見られるが、組み合わせに由来する毒性は最小限であり、試験中いかなる動物にも急性有毒作用が見られなかった。

結論：ＡＢＴＬ０８１２とＰ／Ｇｍとを組み合わせると、Ｐ／Ｇｍ単体で用いた場合に比べて相乗効果を示し、有意に大幅な腫瘍体積の減少が見られた。Ｐ／Ｇｍはまた、賦形剤群及びＡＢＴＬ０８１２群に比べて大幅な腫瘍体積の減少を示しているが、統計的に有意ではない。単剤療法として投与されたＡＢＴＬ０８１２は、賦形剤群で得られた腫瘍増殖と同じ腫瘍増殖の推移を示している。ＡＢＴＬ０８１２＋Ｐ／Ｇｍ処置が、その組み合わせで処置した全ての個々の動物において腫瘍退縮を誘発することができ、処置１０日目までは腫瘍体積が約１００ｍｍ^３のままであったが、処置１０日後には１００ｍｍ^３未満となり腫瘍の退縮を示していることは注目に値する。ＡＢＴＬ０８１２＋Ｐ／Ｇｍ群において体重の減少が部分的に見られたが、どの群由来のマウスにも有害とみなされる作用は見られなかった。

２．８：ＭｉａＰａｃａ−２細胞を移植したマウスのヒト膵臓異種移植片モデルにおけるＡＢＴＬ０８１２とナブパクリタキセル／ゲムシタビン（Ｎａｂ−Ｐａｃ／Ｇｍ）とを組み合わせた場合の有効性試験
試験参照：ＡＢＴ−ＥＩ−０５３
試験施設：バルセロナ自治大学（ＵＡＢ）のAbility Virtual Lab
ＧＬＰコンプライアンス：準拠
試験化合物：ＡＢＴＬ０８１２（バッチＫ１０２Ｅ＝ＭＥＩ−０１４−１５）
基準化合物：ゲムシタビン塩酸塩（Sigma Aldrich社Ｇ６４２３）、
ナブパクリタキセル（アブラキサン、ＩＤ：３３６９２７２、Celgene社）
試験系：無胸腺ヌードＦｏｘｎ１ ｎｕ雌マウス

目的：本試験の目的は、ＭｉａＰａｃａ２細胞を移植した免疫抑制性ヌードマウスのインビボヒト膵臓異種移植片モデルにおいて、標準治療（ＳＯＣ）である化学療法ゲムシタビンの抗腫瘍効果と、腹腔内（ｉ．ｐ．）投与したゲムシタビン／ナブパクリタキセルの組み合わせの抗腫瘍効果とを増強する経口投与ＡＢＴＬ０８１２の有効性及び安全性を評価することである。この両方の化学療法例は、ヒト進行性膵臓癌の治療に最も一般的である第１選択療法である。

方法：ＭｉａＰａｃａ２細胞株を常套的に培養し、腫瘍接種用に指数的な増殖期の細胞を収集し、カウントした。ＦＢＳを含まない増殖培地５０μｌ及びマトリゲル（Corning社カタログ番号３５４２３４）５０μｌに懸濁させた５×１０^６個のＭｉａＰａｃａ２細胞を、免疫不全無胸腺ヌード雌マウス５５匹の側腹部に皮下注入した。腫瘍体積を１週間に３日モニタリングし、腫瘍が１００ｍｍ^３（５０〜１５０ｍｍ^３の間）に達した場合に、郡内で同様の平均腫瘍体積を持つ６つの処置群に均等に動物を分けたが、５０ｍｍ^３よりも小さい腫瘍または１５０ｍｍ^３よりも大きい腫瘍を除外して変動を最小化した。

処置群は以下の通りである。
−賦形剤群（ｎ＝９）：５％グリセロール水溶液２００μｌ（ＡＢＴＬ０８１２賦形剤）で１週間に５回経口処置し、食塩緩衝液２００μｌ（化学療法賦形剤）を１週間に２回腹腔内処置した。

−ＡＢＴＬ０８１２（ｎ＝９）：蒸留水溶液と５％のグリセロールとの２００μｌ溶液１２０ｍｇ／ｋｇで１週間に５回経口処置した。

−ゲムシタビン（ｎ＝９）：６０ｍｇ／ｋｇの滅菌水１００μｌ溶液で１週間に２回腹腔内投与した。
−ゲムシタビン＋ナブパクリタキセル（ｎ＝８）：ナブパクリタキセルを粉末ストック（１０重量％）から０．９％のＮａＣｌ溶液で新たに調製し、５ｍｇ／ｋｇの２３０μｌ溶液で１週間に２回腹腔内投与した。ゲムシタビンは、６０ｍｇ／ｋｇの滅菌水１００μｌ溶液で１週間に２回腹腔内投与した。腸管壊死を防止するために注入箇所を変え、ナブパクリタキセルとゲムシタビンとをマウス腹部において相互にできる限り離して注入することが重要である。

−ゲムシタビン＋ＡＢＴＬ０８１２（ｎ＝１０）：１２０ｍｇ／ｋｇのＡＢＴＬ０８１２を蒸留水と５％グリセロールとの２００μｌ溶液で１週間に５回経口処置し、６０ｍｇ／ｋｇのゲムシタビンを滅菌水１００μｌ溶液で１週間に２回腹腔内投与した。腹腔内注入がもたらすストレスを減らすことを目的に、一般的には最後に投与されるＡＢＴＬ０８１２を常に化学療法の前に投与した。

−ゲムシタビン＋ナブパクリタキセル＋ＡＢＴＬ０８１２（ｎ＝８）：１２０ｍｇ／ｋｇのＡＢＴＬ０８１２を蒸留水と５％グリセロールとの２００μｌ溶液で１週間に５回経口処置し、６０ｍｇ／ｋｇのゲムシタビンを滅菌水１００μｌ溶液で１週間に２回腹腔内投与し、５ｍｇ／ｋｇのナブパクリタキセルを０．９％ＮａＣｌ溶液２３０μｌで１週間に２回腹腔内投与した。ゲムシタビン＋ナブパクリタキセル群で行ったように、腹部の離れた領域に注入した。腹腔内注入がもたらすストレスを減らすことを目的に、ＡＢＴＬ０８１２を常に化学療法の前に投与した。

処置の有効性を腫瘍体積を１週間に３日測定することにより評価した。さらに、総体重を１週間に３日モニタリングして、処置に付随する毒性を評価し、さらに臨床病理的な徴候が見られるかを目視観察した。試験の最後に、マウスを二酸化炭素吸入により安楽死させ、さらに頸椎脱臼法により確実に屠殺した。

結果：ＡＢＴＬ０８１２により増強される可能性がある強い抗腫瘍反応を持たないように、化学療法の最適以下の投与量（参考文献に基づく）を選択したため、化学療法の投与量が少なくなり、結果的に望ましくない有害事象を減らすことができた。図１４は、化学療法、ＡＢＴＬ０８１２、またはこれらの組み合わせという異なるレジメンで処置したＭｉａＰａｃａ２由来異種移植片の腫瘍体積の推移を示す。図１４Ａは、ゲムシタビン＋Ｎａｂ−Ｐａｃで処置した異種移植片の腫瘍体積推移を、ゲムシタビン＋Ｎａｂ−Ｐａｃ＋ＡＢＴＬ０８１２処置、ＡＢＴＬ０８１２処置、及び賦形剤処置と比較して示したものである。賦形剤群と比べると、３つの組み合わせであるＧｅｍ＋Ｎａｂ−Ｐａｃ＋ＡＢＴＬ０８１２は、２２日目以降有意な腫瘍体積の減少を示しており、試験の終了までこの統計的有意性を維持している。処置の最後の５日間は大幅な腫瘍体積の違いがあり、賦形剤群と腫瘍体積に有意な違い示していないＧｅｍ＋Ｎａｂ−Ｐａｃ群とは対照的となっている。Ｇｅｍ＋Ｎａｂ−Ｐａｃ＋ＡＢＴＬ０８１２とＧｅｍ＋Ｎａｂ−Ｐａｃとを比較すると、処置の最終日に、３つの組み合わせの方が有意に腫瘍体積を減少させている。ＡＢＴＬ０８１２単体投与は、処置の最初の２０日間はＧｅｍ＋Ｎａｂ−Ｐａｃ群に比べて腫瘍体積の変化に良好な応答をしているが、その後の試験期間には腫瘍体積の変化が同様になり、有意な違いはどの時点でも観察されなかった。

図１４Ｂは、ゲムシタビンで処置した異種移植片の腫瘍体積推移を、ゲムシタビン＋ＡＢＴＬ０８１２処置、ＡＢＴＬ０８１２処置、及び賦形剤処置と比較して示したものである。賦形剤群と比べると、２つの組み合わせであるＧｅｍ＋ＡＢＴＬ０８１２は、１７日目以降有意な腫瘍体積の減少を示し、試験の終了までこの統計的有意性を維持しており、賦形剤群と腫瘍体積に有意な違い示していないゲムシタビン群とは対照的である。ＧｅｍとＧｅｍ＋ＡＢＴＬ０８１２とを比較すると、処置の最終日に、２つの組み合わせの方が腫瘍体積を有意に減少させている。ＡＢＴＬ０８１２単体投与は、Ｇｅｍ群に比べて処置全体にわたって腫瘍体積の推移が良好に応答しているが、有意な違いはどの時点でも観察されなかった。

マウスの総体重を全試験期間にわたって１週間に３日モニタリングした。図１４ＣはＧｅｍ＋Ｎａｂ−Ｐａｃ群、Ｇｅｍ＋Ｎａｂ−Ｐａｃ＋ＡＢＴＬ０８１２群、賦形剤群、及びＡＢＴＬ０８１２群の総体重の変化を示し、図１４ＤはＧｅｍ群、Ｇｅｍ＋ＡＢＴＬ０８１２群、賦形剤群、及びＡＢＴＬ０８１２群の総体重の変化を示す。いずれの群においても体重減少に関わる毒性の徴候は観察されず、全ての群で全試験期間にわたって体重増加が見られ、これは処置に付随する毒性がないことを示すものである。それ以上の臨床病理的な症状はいずれの群にも見られなかった。さらなる詳細は図１４を参照されたい。

結論：この試験は、進行膵臓癌の治療において、ＡＢＴＬ０８１２単体の場合、またはＳＯＣ化学療法との組み合わせた場合の有効性を求めるために計画したものである。ゲムシタビンとナブパクリタキセルとの組み合わせ、またはゲムシタビン単体は、進行膵臓癌患者の第一選択治療である。これらをＡＢＴＬ０８１２と組み合わせて、かつ望ましくない副次的作用を減らす最適以下の化学療法用量を用いることによって、２つの治療が増強されるかについて評価した。ＡＢＴＬ０８１２は、毒性を減少させつつ両方の化学療法処置を増強し、賦形剤及び化学療法処置単体と比べて腫瘍体積を大幅に減少させることがわかる。さらに、ＡＢＴＬ０８１２単体投与は、化学療法と同様な有効性を示し、どの処置群においても総体重に関して臨床病理的な徴候や毒性に関連した徴候が見られなかった。

２．９：神経芽細胞腫異種移植片モデル（シスプラチン感受性）におけるＡＢＴＬ０８１２単体の場合またはシスプラチンと組み合わせた場合の有効性試験
試験参照：ＡＢＴＬ０８１２ノート、２０〜３６ページ
試験施設：バルデブロン研究所（Vail d'Hebron Research Institute）の小児癌トランスレーショナルリサーチ部門（Laboratory of Translational Research in Pediatric Cancer）
ＧＬＰコンプライアンス：準拠
試験化合物：ＡＢＴＬ０８１２（バッチ００２／２０１３）
基準化合物：シスプラチン（Sigma社カタログ番号Ｃ２２１００００）
試験系：ｎｕ／ｎｕ雌マウス、ＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞株

目的：神経芽細胞腫細胞株ＳＨ−ＳＹ５Ｙにおいて、ＡＢＴＬ０８１２単体の場合、またはシスプラチンと組み合わせた場合の有効性を求めることである。

方法：免疫不全無胸腺ＮＭＲＩ−Ｆｏｘｎ１ｎｕ／Ｆｏｘｎ１ｎｕヌードマウスにＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞を皮下注入した。この細胞株を遺伝子操作してルシフェラーゼを発現させたが、このルシフェラーゼは腫瘍サイズや転移形成のインビボ試験を可能にするものである。腫瘍の平均体積が８０ｍｍ^３に達した場合に、マウスをランダムに種々の処置群に分けた。ＡＢＴＬ０８１２を毎日１２０ｍｇ／ｋｇで経口投与した。合わせて、神経芽細胞腫治療の化学療法導入期に含まれる薬剤であるシスプラチンを用いた。シスプラチンを２ｍｇ／ｋｇで１週間に２回腹腔内投与した（Wang et al. 2010）。さらに、ＡＢＴＬ０８１２とシスプラチンとを所定の用量で組み合わせた場合の影響について検討した。

結果：
Ａ．腫瘍サイズ：この実験により、ＡＢＴＬ０８１２は、腫瘍の進行を妨げ、シスプラチンと同様の有効性を有することがわかった。腫瘍サイズに関する倫理的問題のため、処置の１０日後に対照群の動物を屠殺せざるを得なかった。この時点で、処置群の半数の動物を屠殺して、腫瘍重量、血液学的パラメータ、及び転移形成について測定した（以下を参照されたい）。これらの群の中で屠殺する動物は、腫瘍サイズの統計的分布に従って選択した。屠殺したマウスの腫瘍重量の測定により、ＡＢＴＬ０８１２の有効性は標準治療のシスプラチンと同様であるという観測が裏付けられた。処置群の残りの動物（１群あたり約５匹のマウス）の腫瘍体積を分析した結果、ＡＢＴＬ０８１２とシスプラチンとの組み合わせが腫瘍増殖を長期に安定化させることがわかった。体重のモニタリングにより、ＡＢＴＬ０８１２と組み合わせた処置が体重のわずかな減少（＜１０％）を一次的に誘発することがわかった。しかしながら、この影響は数日後に回復している。さらなる詳細は本明細書の図１５を参照されたい。

Ｂ．安全性プロフィール：処置の安全性を評価するための血液学的解析によると、ＡＢＴＬ０８１２の血液ヘマトクリットへの影響はなかったが、シスプラチンが貧血症を誘発し白血球数を減少させたことがわかる（以下の表を参照）。シスプラチンに関連した貧血症は、化学療法薬剤で治療を受けている患者に頻繁に見られる副作用である（Wood and Hrushesky 1995）。

表５
ＳＨ−ＳＹ５Ｙ異種移植片モデルにおける動物の血液学的解析。血液は屠殺時に動物から採取し、血液組成は自動分析装置により測定した。ＡＮＯＶＡに続けてボンフェローニ補正を行った結果^＊ｐ＜０．０５である。

Ｃ．転移形成：ＡＢＴＬ０８１２が転移形成に及ぼす影響を調べるため、ルシフェラーゼレポーターベクターで形質導入したＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞株を用いた。上述したように、この細胞株由来の異種移植片腫瘍を保有するマウスを、ＡＢＴＬ０８１２、シスプラチン、またはこれら２つの薬剤の組み合わせで処置した。処置の１０日後、動物を屠殺し、肺及び肝臓のルシフェラーゼ発現細胞をモニタリングすることにより転移をエクスビボで評価した。これらの分析の結果、ＡＢＴＬ０８１２は、単剤としてもシスプラチンと組み合わせた場合にも、上述の器官で転移形成を阻害した。一方で、シスプラチン単体では、賦形剤処置した動物と比べて転移形成を阻害する有意な作用は見られなかった。

結論：単剤としてのＡＢＴＬ０８１２は、シスプラチンと同様の有効性を有するが、血液学的パラメータに関してより安全性が高い。興味深いことに、ＡＢＴＬ０８１２をシスプラチンと組み合わせると、腫瘍進行の長期にわたる安定化がもたらされている。さらに、ＡＢＴＬ０８１２は神経芽細胞腫のマウスモデルにおいて自然転移形成を阻害したが、シスプラチンは阻害しなかった。これらのデータから、ＡＢＴＬ０８１２が現在の白金系化学療法に比べて治療効果を高める可能性があることが示唆される。

２．１０：マウスのヒトトリプルネガティブ乳癌（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１）異種移植片においてＡＢＴＬ０８１２とドキソルビシンとを組み合わせた場合の有効性

試験参照：ペンディング
試験施設：バルセロナ自治大学（ＵＡＢ）のAbility laboratory
ＧＬＰコンプライアンス：準拠
試験化合物：ＡＢＴＬ０８１２（バッチ００２／２０１２）
基準化合物：ドキソルビシン（Sigma社カタログ番号Ｄ１５１５）
試験系：ｎｕ／ｎｕ雄マウス

目的：ヒトトリプルネガティブ乳癌異種移植片において、ＡＢＴＬ０８１２単体の場合、及びドキソルビシンと組み合わせた場合の抗腫瘍活性を調べる。

方法：ＭＤＡ−ＤＢ−２３１細胞株を１０％のＦＢＳを含むＤＭＥＭ中で常套的に培養し、腫瘍接種用に指数的な増殖期の細胞を収集し、カウントした。ＦＢＳを含まない増殖培地５０μｌ及びマトリゲル（Corning社カタログ番号３５４２３４）５０μｌに懸濁させた２．５×１０^６個のＭＤＡ−ＤＢ−２３１細胞を、マウスの側腹部に注入した。腫瘍体積を１週間に３日モニタリングし、腫瘍が１００ｍｍ^３（５０〜１５０ｍｍ^３の間）に達した場合に、郡内で同様の平均腫瘍体積を持つ４つの処置群に均等に動物を分けたが、５０ｍｍ^３よりも小さい腫瘍または１５０ｍｍ^３よりも大きい腫瘍を除外して変動を最小化した。

処置群は以下の通りである。
−賦形剤群（ｎ＝７）：５％グリセロール水溶液２００μｌで１週間に４日経口処置し、食塩水１００μｌを１週間に１回腹腔内に２本注射した。
−ＡＢＴＬ０８１２（ｎ＝９）：５％グリセロール水溶液中に再懸濁させた１２０ｍｇ／ｋｇのＡＢＴＬ０８１２を２００μｌで１週間に５回経口処置した。
−ドキソルビシン（ｎ＝９）：２ｍｇ／ｋｇのドキソルビシン１００μｌ溶液を１週間に１回腹腔内投与して処置した。
−ＡＢＴＬ０８１２＋ドキソルビシン（ｎ＝９）：１２０ｍｇ／ｋｇのＡＢＴＬ０８１２を２００μｌ溶液で１週間に４日経口処置し、２ｍｇ／ｋｇのドキソルビシン１００μｌ溶液で１週間に１回腹腔内処置した。

結果：ＭＤＡ−ＤＢ−２３１細胞由来の異種移植片において、ＡＢＴＬ０８１２をドキソルビシンと組み合わせて投与すると、インビボでの抗腫瘍効果が最も高くなっている。ＡＢＴＬ０８１２単体投与は、ドキソルビシン単体と同様な腫瘍体積減少をもたらしたが、ＡＢＴＬ０８１２とドキソルビシンとの２つの組み合わせは、最も大幅な腫瘍体積減少を示し、この試験の終了時には有意な差異をもたらしている。全ての処置群で総体重が同様の経時変化を有し、処置に付随する毒性がないことを示している。さらなる詳細は本明細書の図１６を参照されたい。

結論：上述したように、ＭＤＡ−ＤＢ−２３１細胞由来の乳癌異種移植片モデルにおいて、ＡＢＴＬ０８１２は腫瘍増殖を低下させる。このモデルでは、ＡＢＴＬ０８１２はドキソルビシンの抗腫瘍活性を増強する。ドキソルビシン療法は乳癌患者にとって一般的な治療の選択肢であり、これらの結果は、ＡＢＴＬ０８１２とドキソルビシンとを組み合わせた療法が、乳癌患者の治療として臨床的関心を持たれることを示唆するものである。

２．１１．マウスのヒト胆管癌（ＥＧＩ−１）異種移植片においてＡＢＴＬ０８１２とゲムシタビン及びシスプラチンとを組み合わせた場合の有効性
試験参照：ＡＢＴ−ＥＩ
試験施設：Biodonostia衛生研究所（Health Research Institute）の肝疾患グループ（Liver Disease Group）
ＧＬＰコンプライアンス：準拠
試験化合物：ＡＢＴＬ０８１２（バッチ００２／２０１２）
基準化合物：ゲムシタビン塩酸塩（Sigma Aldrich社Ｇ６４２３）及びシスプラチン（Sigma社カタログ番号Ｃ２２１００００）
試験系：ｎｕ／ｎｕ雄マウス

目的：ヒト胆管癌異種移植片において、ＡＢＴＬ０８１２単体の場合、またはゲムシタビン及びシスプラチンと組み合わせた場合の抗腫瘍活性を調べる。ゲムシタビンとシスプラチンとの組み合わせは、胆管癌の治療として標準療法の１つである。

方法：ＥＧＩ−１細胞株を１０％のＦＢＳを含むＤＭＥＭ中で常套的に培養し、腫瘍接種用に指数的な増殖期の細胞を収集し、カウントした。ＦＢＳを含まない増殖培地５０μｌ及びマトリゲル（Corning社カタログ番号３５４２３４）５０μｌに懸濁させた１×１０^６個のＨ１９５７細胞を、マウスの側腹部に注入した。腫瘍体積を１週間に３日モニタリングし、腫瘍が１００ｍｍ^３（５０〜１５０ｍｍ^３の間）に達した場合に、郡内で同様の平均腫瘍体積を持つ４つの処置群に均等に動物を分けたが、５０ｍｍ^３よりも小さい腫瘍または１５０ｍｍ^３よりも大きい腫瘍を除外して変動を最小化した。

処置群は以下の通りである。
−賦形剤群（ｎ＝８）：５％グリセロール水溶液２００μｌで１週間に４日経口処置し、食塩水１００μｌを１週間に１回腹腔内に２本注射した。
−ＡＢＴＬ０８１２（ｎ＝８）：５％のグリセロール水溶液中に再懸濁させた１２０ｍｇ／ｋｇのＡＢＴＬ０８１２を２００μｌで１週間に５回経口処置した。
−ゲムシタビン／シスプラチン（ｎ＝８）：５０ｍｇ／ｋｇのゲムシタビン１００μｌ溶液と、２ｍｇ／ｋｇのシスプラチン１００μｌ溶液とを１週間に１回腹腔内投与した。

−ＡＢＴＬ０８１２＋ゲムシタビン／シスプラチン（ｎ＝８）：１２０ｍｇ／ｋｇのＡＢＴＬ０８１２を２００μｌで１週間に４日経口処置し、５０ｍｇ／ｋｇのゲムシタビン１００μｌ溶液と、２ｍｇ／ｋｇのシスプラチン１００μｌ溶液とを１週間に１回腹腔内投与して処置した。

結果：ＥＧＩ−１細胞由来の異種移植片において、ＡＢＴＬ０８１２をゲムシタビン及びシスプラチンと組み合わせて投与すると、インビボでの抗腫瘍効果が最も高くなっている。ゲムシタビン及びシスプラチンを投与すると賦形剤群に比べて腫瘍体積が減少したが、統計的に有意な差は見られなかった。ＡＢＴＬ０８１２＋ゲムシタビン及びシスプラチン処置は賦形剤に比べて統計的に有意な腫瘍体積の減少を示したが、ＡＢＴＬ０８１２単体投与は、処置の最終日までに賦形剤に比べて腫瘍体積減少が見られておらず、化学療法群と同様な腫瘍体積となった。さらなる詳細は図１７を参照されたい。

結論：上述したように、ＥＧＩ−１細胞由来の肺腺癌異種移植片モデルにおいて、ＡＢＴＬ０８１２は腫瘍増殖を低下させる。このモデルでは、ＡＢＴＬ０８１２はゲムシタビン及びシスプラチン投与の抗腫瘍活性を増強する。ゲムシタビン及びシスプラチン療法は胆管癌患者にとって一般的な治療の選択肢であり、これらの結果は、ＡＢＴＬ０８１２とゲムシタビン及びシスプラチンとを組み合わせた療法が、胆管癌患者の治療として臨床的関心を持たれることを示唆するものである。

実施例３：化学療法と組み合わせた場合の毒性
ＡＢＴＬ０８１２を化学療法剤と組み合わせた場合の毒性に関する情報を、免疫抑制性マウスで有効性試験を行う間に得た。ＡＢＴＬ０８１２＋／−パクリタキセル＋／−カルボプラチンの組み合わせに関する特定の毒性試験を行った。

試験参照：Ｎ−０２２２０
試験施設：Vivotecnia（スペイン国マドリッド）
ＧＬＰ試験：準拠
試験化合物：ＡＢＴＬ０８１２（バッチ００１Ｒ／２０１４）、パクリタキセル（Aurovitas社、バッチ６８Ｊ５０４１）、カルボプラチン（Sigma-Aldrich社、バッチＬＳＢＬ７０５８ｖ）
試験系：ＣＤ−１雌マウス、１２週齢

目的：ＡＢＴＬ０８１２をカルボプラチン及びパクリタキセルと組み合わせた場合の２週間投与後の毒性プロフィールの算出。

方法：４５匹の雌ＣＤ−１マウスを体重による層別化により９つの実験群（Ａ−ｌ）（１群あたり５匹の動物）に分け、処置や、基準剤（パクリタキセル及びカルボプラチン）を投与する日を変えた。

以下の表は処置群についてまとめたものである。前述の有効性試験と同一の投与スケジュール及び用量を用いたことに留意されたい。
表６
マウスにおけるＡＢＴＬ０８１２、パクリタキセル、カルボプラチン、及びその組み合わせの毒性を評価するための処置群

安全性評価は、全試験にわたって記録した死亡率、局所的及び全身的な臨床徴候、体重、ならびに飼料消費の観察結果に基づいて行った。さらに、全ての動物において屠殺前に臨床病理測定（生化学及び血液学）を行った。観察期間の終了時（最後の投与の１日後）に、全ての生き残った動物を屠殺し、肉眼的剖検を施した。また、安全性評価は、屠殺時に採取した選択標的器官の重量に基づいて行った。

結果：試験剤の経口処置と基準剤の腹腔内処置とを繰り返しても死亡には至らなかった。局所的にも全身的にも処置に付随した臨床徴候は見られなかった。

動物の体重増加量の平均値には、試験の過程を通してわずかな違いが見られた。群Ａ（対照群）と群Ｃ（パクリタキセルを週に１回投与して処置した群）の動物を除いて、ほとんどの動物は試験の最初の４日で体重が減少する傾向にあった。一方、ほとんどの動物で、試験期間全体を通すと絶対体重増加量に統計的な有意差が見られなかった。ＡＢＴＬ０８１２の１日１回５日間経口投与を２つの期間行い、かつパクリタキセルとカルボプラチンとを１週間に１回（各期間の最初の経口投与と同日に）腹腔内投与した群Ｆの動物のみ、全試験期間の間、他の複数の動物群（賦形剤で処置した群Ａ、パクリタキセルで処置した群Ｃ、パクリタキセルとカルボプラチンとの組み合わせで処置した群Ｅ）と比べて体重増加量が顕著に減少した。

サンプルサイズが小さいために統計学的解析を行うのは不可能であったが、飼料消費量は群Ａの動物が他の群の動物に比べて多い様子であった。臨床生化学パラメータに関しては、ほとんどの群でクレアチニンとトリグリセリドのレベルが対照群に比べて低くなった。一方、ヘマトクリットレベルにおいては（群Ｆの動物で）対照群に比べて統計的に有意な減少が見られ、血小板レベルにおいてはＡＢＴＬ０８１２経口投与とパクリタキセル及びカルボプラチンの腹腔内投与との組み合わせで処置した群（群Ｆ及び群Ｇの動物）で対照群に比べて統計的に有意な減少が見られた。これらの値は通常の範囲内であったが、臨床病理パラメータの処置の影響を除外することができなかったと考えられる。

処置の終了時に安楽死させた全動物の剖検を巨視的に観察した結果、試験剤に関連するとみなされる変化は何ら見られなかった。動物ＩＤ３２の肝臓には白い領域が見られ、動物ＩＤ３３の膵臓には色素沈着が見られた。また、絶対器官重量及び相対器官重量は処置群間で同様であった。

以下の表は安全性の点から最も有意な所見をまとめたものである。
表７
ＡＢＴＬ０８１２単体の場合及びＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセル及びカルボプラチンとを組み合わせた場合の毒性試験における関連性の高い生化学的及び血液学的所見

結論：得られた結果を考慮すると、評価した実験条件下では、以下のことを結論づけることができる。
−試験剤であるＡＢＴＬ０８１２単体の経口投与と、その投与とパクリタキセル及びカルボプラチンの１週間に１回の腹腔内投与とを組み合わせた投与を繰り返しても死亡に至ることはなく、良好な忍容性があった。試験の過程を通していずれの動物にも局所的にも全身的にも毒性を示す臨床徴候が見られなかった。
−ほとんどの動物が試験期間を通して体重を維持した。試験剤と２つの基準剤とを組み合わせて（各期間の最初の投与日と同日に）処置した動物にのみ統計的に有意な違いが見られた。
−群Ａの動物の飼料消費量は、試験期間でほとんど全ての動物よりも高い様子であった。
−臨床病理（生化学パラメータ及び血液学的パラメータ）評価の結果、処置群には対照群に比べて統計的に有意な違いがあった。この株及び性別の動物の持つ正常範囲内となる値がほとんどであったが、処置の影響を除外することができなかったと考えられる。血小板数への影響はカルボプラチンによるものであるが、３つの実験剤を組み合わせた際には無視できない程度の血小板数のさらなる微減少があった。
−処置による肉眼的剖検の所見及び絶対器官重量または相対器官重量への影響は見られなかった。

実施例４：ＡＢＴＬ０８１２と種々の化学療法剤との組み合わせ−ヒトデータ
４．１：進行性子宮内膜癌または扁平上皮ＮＳＣＬＣを持つ患者において、ＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセル及びカルボプラチンとを組み合わせた場合の有効性及び安全性を評価するための第１相／第２相オープンラベル試験

進行性子宮内膜癌または扁平上皮非小細胞肺癌を有する患者において、第１相／第２相臨床試験を行っている。これは、ＡＢＴＬ０８１２を経口的に投与する多施設のオープンラベル試験であり、化学療法と組み合わせて１日３回１３００ｍｇで投与開始する。

Ａ．試験の目的
第１相主要エンドポイント：進行性もしくは転移性の子宮内膜癌または扁平上皮ＮＳＣＬＣを持つ患者における第１選択療法としてのＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセル＋カルボプラチンとの組み合わせの安全性及び忍容性を評価することである。
第２相主要エンドポイント：進行性もしくは転移性の子宮内膜癌または扁平上皮ＮＳＣＬＣを持つ患者における第１選択療法としてのＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセル＋カルボプラチンとの組み合わせの有効性を評価することである。

Ｂ．試験計画
この試験は無作為化されておらず、全ての参加患者にＡＢＴＬ０８１２とパクリタキセル及びカルボプラチンとを投与している。この相を２つの期間に分けている。
第１の期間：ＡＢＴＬ０８１２を化学療法剤と組み合わせて投与する。
第２の期間：ＳＯＣサイクルを完了した後に、第１の期間から１２カ月までＡＢＴＬ０８１２を単一療法として投与する。

結論：ヒト臨床試験からすでに得られた予備段階の結果では、進行性子宮内膜癌または扁平上皮癌を持つ患者に対してＡＢＴＬ０８１２化合物をパクリタキセル及びカルボプラチンと組み合わせて使用すると、ヒトにも相乗効果が見られているという点からポジティブな結果となっている。

参考文献
１：欧州特許第２４０９９６３（Ｂ１）号（Lipopharma−２０１０年に出願）
２：Erazo, et al.; Clinical Cancer Research; 22(10) May 15, 2016
３：本出願人（AbilityPharma）のウェブページで公開された２０１６年１１月２２日付のニュース
４：本出願人（AbilityPharma）のウェブページで公開された２０１６年１２月１４日付のニュース

Claims (14)

1. 薬剤の組み合わせであって、ヒト患者の癌の治療において、同時に使用するか、別々に使用するか、または逐次的に使用するための、
   （Ａ）式ＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_６−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_２−（ＣＨ_２）_３−ＣＨ_３（ＡＢＴＬ０８１２）の多価不飽和脂肪酸である組成物、その薬学的に許容される塩、またはその混合物と、
   （Ｂ）化学療法剤化合物であって、化合物（Ｂ）が、
   シクロホスファミド、
   メルファラン、
   ドセタキセル、
   パクリタキセル、
   ナブパクリタキセル、
   カルボプラチン、
   シスプラチン、
   オキサリプラチン、
   メトトレキサート、
   ペメトレキセド、
   アザチオプリン、
   カペシタビン、
   フルオロウラシル、
   メルカプトプリン、
   ゲムシタビン、
   ブレオマイシン、
   アクチノマイシン、
   ビンクリスチン、
   ビンブラスチン、
   ビノレルビン、
   レチノイン酸、
   テモゾロミド、
   ダウノルビシン、
   ドキソルビシン、
   イリノテカン、及び
   トポテカン、
   からなる群から選択される少なくとも１つの化学療法剤化合物である、化学療法剤化合物とを含む、薬剤の組み合わせ。
2. 化合物（Ｂ）が、
   ドセタキセル、
   パクリタキセル、
   ナブパクリタキセル、
   カルボプラチン、
   シスプラチン、
   オキサリプラチン、
   メトトレキサート、
   ペメトレキセド、
   ゲムシタビン、
   ブレオマイシン、
   レチノイン酸、
   テモゾロミド、
   ドキソルビシン、
   イリノテカン、及び、
   トポテカン、
   からなる群から選択される少なくとも１つの化学療法剤化合物である、請求項１に記載の薬剤の組み合わせ。
3. 化合物（Ａ）がＣＯＯＨ−ＣＨＯＨ−（ＣＨ_２）_６−（ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２）_２−（ＣＨ_２）_３−ＣＨ_３（ＡＢＴＬ０８１２）のナトリウム塩である、請求項１または請求項２に記載の薬剤の組み合わせ。
4. 前記癌が、
   肺癌、
   非小細胞肺癌、
   小細胞肺癌、
   扁平上皮癌、
   腺癌、
   子宮内膜癌、
   膵臓癌、
   膠芽腫、
   乳癌、
   頭頸部癌、
   神経芽細胞腫、及び、
   胆管癌、
   からなる群から選択される少なくとも１つの癌である、請求項１から請求項３のいずれかに記載の薬剤の組み合わせ。
5. 前記癌が、
   非小細胞肺癌、
   扁平上皮癌、
   子宮内膜癌、
   膵臓癌、
   膠芽腫、
   乳癌、
   神経芽細胞腫、及び、
   胆管癌、
   からなる群から選択される少なくとも１つの癌である、請求項１から請求項４のいずれかに記載の薬剤の組み合わせ。
6. 化合物（Ｂ）がドセタキセルであり、前記癌が肺癌、好ましくは非小細胞肺腺癌であるか、
   化合物（Ｂ）がパクリタキセルであり、前記癌が肺癌、好ましくは非小細胞肺腺癌であるか、
   化合物（Ｂ）がゲムシタビンであり、前記癌が膵臓癌であるか、
   化合物（Ｂ）がカルボプラチンであり、前記癌が子宮内膜癌であるか、
   化合物（Ｂ）がレチノイン酸であり、前記癌が神経芽細胞腫であるか、
   化合物（Ｂ）がパクリタキセルであり、前記癌が乳癌、好ましくはトリプルネガティブ乳癌であるか、
   化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びカルボプラチンであり、前記癌が扁平上皮癌、好ましくは非小細胞扁平上皮肺癌であるか、
   化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びカルボプラチンであり、前記癌が非小細胞肺腺癌であるか、
   化合物（Ｂ）がペメトレキセド及びシスプラチンあり、前記癌が非小細胞肺腺癌であるか、
   化合物（Ｂ）がパクリタキセルであり、前記癌が子宮内膜癌であるか、
   化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びカルボプラチンであり、前記癌が子宮内膜癌であるか、
   化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びゲムシタビンであり、前記癌が膵臓癌であるか、
   化合物（Ｂ）がゲムシタビンであり、前記癌が膵臓癌であるか、
   化合物（Ｂ）がゲムシタビン及びナブパクリタキセルであり、前記癌が膵臓癌であるか、
   化合物（Ｂ）がシスプラチン及びゲムシタビンであり、前記癌が神経芽細胞腫であるか、
   化合物（Ｂ）がドキソルビシン酸であり、前記癌が乳癌、好ましくはトリプルネガティブ乳癌であるか、
   化合物（Ｂ）がシスプラチン及びゲムシタビンであり、前記癌が胆管癌であるか、
   化合物（Ｂ）がゲムシタビンであり、前記癌が胆管癌であるか、
   化合物（Ｂ）がトポテカンであり、前記癌が神経芽細胞腫であるか、
   化合物（Ｂ）がイリノテカンであり、前記癌が神経芽細胞腫であるか、または、
   化合物（Ｂ）がテモゾロミドであり、前記癌が神経芽細胞腫である、
   請求項１から請求項５のいずれかに記載の薬剤の組み合わせ。
7. 化合物（Ｂ）がドセタキセルであり、前記癌が肺癌、好ましくは非小細胞肺腺癌であるか、
   化合物（Ｂ）がゲムシタビンであり、前記癌が膵臓癌であるか、
   化合物（Ｂ）がカルボプラチンであり、前記癌が子宮内膜癌であるか、
   化合物（Ｂ）がレチノイン酸であり、前記癌が神経芽細胞腫であるか、
   化合物（Ｂ）がパクリタキセルであり、前記癌が乳癌、好ましくはトリプルネガティブ乳癌であるか、
   化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びカルボプラチンであり、前記癌が扁平上皮癌、好ましくは非小細胞扁平上皮肺癌であるか、
   化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びカルボプラチンであり、前記癌が非小細胞肺腺癌であるか、
   化合物（Ｂ）がペメトレキセド及びシスプラチンあり、前記癌が非小細胞肺腺癌であるか、
   化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びカルボプラチンであり、前記癌が子宮内膜癌であるか、
   化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びゲムシタビンであり、前記癌が膵臓癌であるか、
   化合物（Ｂ）がゲムシタビンであり、前記癌が膵臓癌であるか、
   化合物（Ｂ）がゲムシタビン及びナブパクリタキセルであり、前記癌が膵臓癌であるか、
   化合物（Ｂ）がドキソルビシン酸であり、前記癌が乳癌、好ましくはトリプルネガティブ乳癌であるか、
   化合物（Ｂ）がシスプラチン及びゲムシタビンであり、前記癌が胆管癌であるか、または、
   化合物（Ｂ）がゲムシタビンであり、前記癌が胆管癌である、
   請求項１から請求項６のいずれかに記載の薬剤の組み合わせ。
8. 化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びカルボプラチンであり、前記癌が進行性子宮内膜癌、好ましくは進行性子宮内膜癌の場合であるか、または、
   化合物（Ｂ）がパクリタキセル及びカルボプラチンであり、前記癌が扁平上皮癌の場合である、請求項１から請求項７のいずれかに記載の薬剤の組み合わせ。
9. 化合物（Ａ）が経口的に投与される、請求項８に記載の薬剤の組み合わせ。
10. 化合物（Ａ）の投与量が、１２００ｍｇ〜１４００ｍｇの用量である、請求項９に記載の薬剤の組み合わせ。
11. 前記薬剤の組み合わせが、化合物（Ａ）と化合物（Ｂ）とを含む単一の組成物である、請求項１から請求項１０のいずれかに記載の薬剤の組み合わせ。
12. 化合物（Ａ）が経口的に投与される、請求項１から請求項１１のいずれかに記載の薬剤の組み合わせ。
13. 化合物（Ａ）の投与量が、１日あたり２００ｍｇ〜２０００ｍｇの総用量である、請求項１から請求項１２のいずれかに記載の薬剤の組み合わせ。
14. 化合物（Ｂ）がドセタキセルであり、輸液を介して静脈内に投与されるか、
    化合物（Ｂ）がパクリタキセルであり、輸液を介して静脈内に投与されるか、
    化合物（Ｂ）がカルボプラチンであり、輸液を介して静脈内に投与されるか、
    化合物（Ｂ）がシスプラチンであり、輸液を介して静脈内に投与されるか、
    化合物（Ｂ）がゲムシタビンであり、輸液を介して静脈内に投与されるか、
    化合物（Ｂ）がナブパクリタキセルであり、輸液を介して静脈内に投与されるか、
    化合物（Ｂ）がテモゾロミドであり、経口的に投与されるか、
    化合物（Ｂ）がイリノテカンであり、輸液を介して静脈内に投与されるか、
    化合物（Ｂ）がドキソルビシンであり、静脈内に投与されるか、または、
    化合物（Ｂ）がトポテカンであり、輸液を介して静脈内に投与される、
    請求項１から請求項１３のいずれかに記載の薬剤の組み合わせ。