JP2020515236A - 細胞療法および関連方法のエピジェネティック解析 - Google Patents
細胞療法および関連方法のエピジェネティック解析 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2020515236A JP2020515236A JP2019537282A JP2019537282A JP2020515236A JP 2020515236 A JP2020515236 A JP 2020515236A JP 2019537282 A JP2019537282 A JP 2019537282A JP 2019537282 A JP2019537282 A JP 2019537282A JP 2020515236 A JP2020515236 A JP 2020515236A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cell
- cells
- epigenetic
- composition
- genomic
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 425
- 230000001973 epigenetic effect Effects 0.000 title claims abstract description 301
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 title claims abstract description 232
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 title claims abstract description 109
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 1090
- 108010077544 Chromatin Proteins 0.000 claims abstract description 202
- 210000003483 chromatin Anatomy 0.000 claims abstract description 202
- 230000004044 response Effects 0.000 claims abstract description 184
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 168
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 69
- 108010047956 Nucleosomes Proteins 0.000 claims abstract description 35
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 claims abstract description 34
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 claims abstract description 34
- 210000001623 nucleosome Anatomy 0.000 claims abstract description 34
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims abstract description 20
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims abstract description 20
- 108010033040 Histones Proteins 0.000 claims abstract description 14
- 230000007067 DNA methylation Effects 0.000 claims abstract description 9
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 367
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 130
- 230000006870 function Effects 0.000 claims description 103
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 100
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims description 97
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims description 97
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 86
- 206010052015 cytokine release syndrome Diseases 0.000 claims description 85
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 85
- 108010019670 Chimeric Antigen Receptors Proteins 0.000 claims description 83
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 83
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 83
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 81
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 65
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 63
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 62
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 61
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 claims description 55
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 52
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 claims description 49
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 claims description 49
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 47
- 239000012636 effector Substances 0.000 claims description 42
- 206010029350 Neurotoxicity Diseases 0.000 claims description 39
- 206010044221 Toxic encephalopathy Diseases 0.000 claims description 39
- 231100000228 neurotoxicity Toxicity 0.000 claims description 39
- 230000007135 neurotoxicity Effects 0.000 claims description 39
- 238000013507 mapping Methods 0.000 claims description 35
- 208000037821 progressive disease Diseases 0.000 claims description 35
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 33
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 claims description 32
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 32
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 29
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 claims description 29
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 29
- 210000001266 CD8-positive T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 27
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 26
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 26
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 25
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 24
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 24
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 24
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 claims description 24
- 108010020764 Transposases Proteins 0.000 claims description 23
- 102000008579 Transposases Human genes 0.000 claims description 23
- 239000011324 bead Substances 0.000 claims description 23
- 238000012165 high-throughput sequencing Methods 0.000 claims description 23
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 22
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 22
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 claims description 21
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 claims description 21
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 claims description 21
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 claims description 20
- 238000000513 principal component analysis Methods 0.000 claims description 20
- -1 antibody Proteins 0.000 claims description 19
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 claims description 19
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 18
- 230000010354 integration Effects 0.000 claims description 18
- 230000002688 persistence Effects 0.000 claims description 18
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 18
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 17
- 230000008236 biological pathway Effects 0.000 claims description 16
- 230000004068 intracellular signaling Effects 0.000 claims description 16
- 108091027963 non-coding RNA Proteins 0.000 claims description 16
- 102000042567 non-coding RNA Human genes 0.000 claims description 16
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 16
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 16
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 15
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 claims description 15
- 210000003071 memory t lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 15
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 14
- 231100000371 dose-limiting toxicity Toxicity 0.000 claims description 14
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 claims description 14
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims description 14
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 claims description 13
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 13
- 238000010361 transduction Methods 0.000 claims description 13
- 230000026683 transduction Effects 0.000 claims description 13
- 238000003068 pathway analysis Methods 0.000 claims description 12
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 claims description 12
- 101150106931 IFNG gene Proteins 0.000 claims description 11
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 claims description 11
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 11
- 230000011664 signaling Effects 0.000 claims description 11
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 claims description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 10
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 claims description 10
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 10
- 230000004570 RNA-binding Effects 0.000 claims description 9
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 8
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 claims description 8
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 8
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 claims description 7
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 claims description 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 7
- 238000002487 chromatin immunoprecipitation Methods 0.000 claims description 7
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 claims description 7
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 claims description 7
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 claims description 7
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 7
- 230000035897 transcription Effects 0.000 claims description 7
- 238000013518 transcription Methods 0.000 claims description 7
- 101150063370 Gzmb gene Proteins 0.000 claims description 6
- 101150083678 IL2 gene Proteins 0.000 claims description 6
- 101150029684 IL2RA gene Proteins 0.000 claims description 6
- 108091032955 Bacterial small RNA Proteins 0.000 claims description 5
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 claims description 5
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 claims description 5
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 claims description 5
- 108020004418 ribosomal RNA Proteins 0.000 claims description 5
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 claims description 5
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 claims description 5
- 108020003589 5' Untranslated Regions Proteins 0.000 claims description 4
- 206010048962 Brain oedema Diseases 0.000 claims description 4
- 108010034791 Heterochromatin Proteins 0.000 claims description 4
- 101150030213 Lag3 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 108020005198 Long Noncoding RNA Proteins 0.000 claims description 4
- 108091007412 Piwi-interacting RNA Proteins 0.000 claims description 4
- 108091008109 Pseudogenes Proteins 0.000 claims description 4
- 102000057361 Pseudogenes Human genes 0.000 claims description 4
- 108020003224 Small Nucleolar RNA Proteins 0.000 claims description 4
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 claims description 4
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 4
- 208000006752 brain edema Diseases 0.000 claims description 4
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 claims description 4
- 210000004458 heterochromatin Anatomy 0.000 claims description 4
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 claims description 4
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 claims description 4
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 claims description 4
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 claims description 4
- 230000003068 static effect Effects 0.000 claims description 4
- 102000055501 telomere Human genes 0.000 claims description 4
- 108091035539 telomere Proteins 0.000 claims description 4
- 210000003411 telomere Anatomy 0.000 claims description 4
- 101150018129 CSF2 gene Proteins 0.000 claims description 3
- 101150116845 Cblb gene Proteins 0.000 claims description 3
- 101000851370 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 9 Proteins 0.000 claims description 3
- 229940076838 Immune checkpoint inhibitor Drugs 0.000 claims description 3
- 108091008026 Inhibitory immune checkpoint proteins Proteins 0.000 claims description 3
- 102000037984 Inhibitory immune checkpoint proteins Human genes 0.000 claims description 3
- 108091033773 MiR-155 Proteins 0.000 claims description 3
- 101100445364 Mus musculus Eomes gene Proteins 0.000 claims description 3
- 101100013967 Mus musculus Gata3 gene Proteins 0.000 claims description 3
- 101100149887 Mus musculus Sox10 gene Proteins 0.000 claims description 3
- 101100369993 Mus musculus Tnfsf10 gene Proteins 0.000 claims description 3
- 101150088803 NR4A1 gene Proteins 0.000 claims description 3
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 claims description 3
- 102100036856 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 9 Human genes 0.000 claims description 3
- 101100445365 Xenopus laevis eomes gene Proteins 0.000 claims description 3
- 239000012274 immune-checkpoint protein inhibitor Substances 0.000 claims description 3
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 claims description 3
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 claims description 3
- 229940043355 kinase inhibitor Drugs 0.000 claims description 3
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 claims description 3
- 239000003757 phosphotransferase inhibitor Substances 0.000 claims description 3
- 108700022487 rRNA Genes Proteins 0.000 claims description 3
- 230000032258 transport Effects 0.000 claims description 3
- 108091062157 Cis-regulatory element Proteins 0.000 claims description 2
- 108091092724 Noncoding DNA Proteins 0.000 claims description 2
- 238000007621 cluster analysis Methods 0.000 claims description 2
- 230000002584 immunomodulator Effects 0.000 claims description 2
- 102000009346 Adenosine receptors Human genes 0.000 claims 1
- 108050000203 Adenosine receptors Proteins 0.000 claims 1
- 108091029795 Intergenic region Proteins 0.000 claims 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 14
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 126
- 238000013515 script Methods 0.000 description 74
- 101000716102 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD4 Proteins 0.000 description 45
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 description 45
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 43
- 238000011467 adoptive cell therapy Methods 0.000 description 31
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 30
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 30
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 28
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 28
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 27
- 101000946843 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Proteins 0.000 description 26
- 102100034922 T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Human genes 0.000 description 26
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 22
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 21
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 19
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 18
- 239000013074 reference sample Substances 0.000 description 18
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 17
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 17
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 17
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 17
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 16
- 238000004422 calculation algorithm Methods 0.000 description 15
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 15
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 15
- CCEKAJIANROZEO-UHFFFAOYSA-N sulfluramid Chemical group CCNS(=O)(=O)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F CCEKAJIANROZEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 15
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 14
- 238000002826 magnetic-activated cell sorting Methods 0.000 description 14
- 239000000047 product Substances 0.000 description 14
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 14
- 230000008859 change Effects 0.000 description 13
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 13
- 102000006306 Antigen Receptors Human genes 0.000 description 12
- 108010083359 Antigen Receptors Proteins 0.000 description 12
- 101001018097 Homo sapiens L-selectin Proteins 0.000 description 12
- 102100033467 L-selectin Human genes 0.000 description 12
- 108700010039 chimeric receptor Proteins 0.000 description 12
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 12
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 12
- 108010074051 C-Reactive Protein Proteins 0.000 description 11
- 102100032752 C-reactive protein Human genes 0.000 description 11
- 101100010163 Mus musculus Dok2 gene Proteins 0.000 description 11
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 11
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 11
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 11
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 11
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 11
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 11
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 10
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 10
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 10
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 10
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 10
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 10
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 10
- 208000007660 Residual Neoplasm Diseases 0.000 description 9
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 9
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 9
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 9
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 9
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 9
- 230000005291 magnetic effect Effects 0.000 description 9
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 description 9
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 9
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 9
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 9
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 9
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 9
- 102000006942 B-Cell Maturation Antigen Human genes 0.000 description 8
- 108010008014 B-Cell Maturation Antigen Proteins 0.000 description 8
- 102000010029 Homer Scaffolding Proteins Human genes 0.000 description 8
- 108010077223 Homer Scaffolding Proteins Proteins 0.000 description 8
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 8
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 8
- 238000007481 next generation sequencing Methods 0.000 description 8
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 8
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 8
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 8
- 102100030379 Acyl-coenzyme A synthetase ACSM2A, mitochondrial Human genes 0.000 description 7
- 101100054737 Homo sapiens ACSM2A gene Proteins 0.000 description 7
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 7
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 7
- 238000002617 apheresis Methods 0.000 description 7
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 7
- 210000003969 blast cell Anatomy 0.000 description 7
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 7
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 7
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 7
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 7
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 7
- 241000894007 species Species 0.000 description 7
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 7
- 230000002110 toxicologic effect Effects 0.000 description 7
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 7
- 208000010839 B-cell chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 6
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 6
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 6
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 101000946889 Homo sapiens Monocyte differentiation antigen CD14 Proteins 0.000 description 6
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 6
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 6
- 102100035877 Monocyte differentiation antigen CD14 Human genes 0.000 description 6
- 238000003559 RNA-seq method Methods 0.000 description 6
- 108700009124 Transcription Initiation Site Proteins 0.000 description 6
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 6
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 6
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 6
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 6
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 6
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 6
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 6
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 6
- 210000004263 induced pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 6
- 210000003563 lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 6
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 6
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 6
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 6
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 6
- 102100036301 C-C chemokine receptor type 7 Human genes 0.000 description 5
- 102100027207 CD27 antigen Human genes 0.000 description 5
- 102000052510 DNA-Binding Proteins Human genes 0.000 description 5
- 101000716065 Homo sapiens C-C chemokine receptor type 7 Proteins 0.000 description 5
- 101000914511 Homo sapiens CD27 antigen Proteins 0.000 description 5
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 5
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 5
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 5
- 208000031422 Lymphocytic Chronic B-Cell Leukemia Diseases 0.000 description 5
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 5
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 5
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 5
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 5
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 5
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 5
- 208000032852 chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 5
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 5
- 229960004942 lenalidomide Drugs 0.000 description 5
- GOTYRUGSSMKFNF-UHFFFAOYSA-N lenalidomide Chemical compound C1C=2C(N)=CC=CC=2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O GOTYRUGSSMKFNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 5
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 4
- 101710096438 DNA-binding protein Proteins 0.000 description 4
- 108700024394 Exon Proteins 0.000 description 4
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 4
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 4
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 4
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 4
- 102000009571 Macrophage Inflammatory Proteins Human genes 0.000 description 4
- 108010009474 Macrophage Inflammatory Proteins Proteins 0.000 description 4
- 108020005196 Mitochondrial DNA Proteins 0.000 description 4
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 4
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 4
- 108010012306 Tn5 transposase Proteins 0.000 description 4
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 4
- 210000003651 basophil Anatomy 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 4
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 4
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 4
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 4
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 4
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 4
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 4
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 4
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 4
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 4
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 108020001756 ligand binding domains Proteins 0.000 description 4
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 4
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 4
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 4
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 4
- QCAWEPFNJXQPAN-UHFFFAOYSA-N methoxyfenozide Chemical compound COC1=CC=CC(C(=O)NN(C(=O)C=2C=C(C)C=C(C)C=2)C(C)(C)C)=C1C QCAWEPFNJXQPAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000000066 myeloid cell Anatomy 0.000 description 4
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 4
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 4
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 4
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 4
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 4
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 4
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 4
- 210000003171 tumor-infiltrating lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 3
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 description 3
- 108091007741 Chimeric antigen receptor T cells Proteins 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 description 3
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 3
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 208000001953 Hypotension Diseases 0.000 description 3
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 3
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 3
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 3
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 3
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 3
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 3
- 208000008771 Lymphadenopathy Diseases 0.000 description 3
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 3
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 3
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 3
- 108091023045 Untranslated Region Proteins 0.000 description 3
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 3
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 3
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 3
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 3
- 201000007201 aphasia Diseases 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 3
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 3
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 3
- 230000034994 death Effects 0.000 description 3
- 238000003066 decision tree Methods 0.000 description 3
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 229940126534 drug product Drugs 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 230000036543 hypotension Effects 0.000 description 3
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 3
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 3
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 3
- 238000012177 large-scale sequencing Methods 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 208000018555 lymphatic system disease Diseases 0.000 description 3
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 3
- 238000007885 magnetic separation Methods 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 3
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 3
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 3
- 210000001778 pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- 230000035807 sensation Effects 0.000 description 3
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 3
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 2
- AOYNUTHNTBLRMT-SLPGGIOYSA-N 2-deoxy-2-fluoro-aldehydo-D-glucose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](F)C=O AOYNUTHNTBLRMT-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 2
- 102100036475 Alanine aminotransferase 1 Human genes 0.000 description 2
- 108010082126 Alanine transaminase Proteins 0.000 description 2
- 102100021569 Apoptosis regulator Bcl-2 Human genes 0.000 description 2
- 108010003415 Aspartate Aminotransferases Proteins 0.000 description 2
- 102000004625 Aspartate Aminotransferases Human genes 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 2
- 101150017888 Bcl2 gene Proteins 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100447432 Danio rerio gapdh-2 gene Proteins 0.000 description 2
- 206010012218 Delirium Diseases 0.000 description 2
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 2
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 2
- 101150112014 Gapdh gene Proteins 0.000 description 2
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 2
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 2
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 2
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 2
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 2
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 2
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 2
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 2
- 102100040678 Programmed cell death protein 1 Human genes 0.000 description 2
- 101710089372 Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 description 2
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 2
- 101150033527 TNF gene Proteins 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 229940121359 adenosine receptor antagonist Drugs 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 2
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 2
- 230000011712 cell development Effects 0.000 description 2
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 2
- 210000003679 cervix uteri Anatomy 0.000 description 2
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 108091008034 costimulatory receptors Proteins 0.000 description 2
- 238000009295 crossflow filtration Methods 0.000 description 2
- 230000001461 cytolytic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000012350 deep sequencing Methods 0.000 description 2
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- 210000003162 effector t lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000010201 enrichment analysis Methods 0.000 description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 2
- 238000010230 functional analysis Methods 0.000 description 2
- 238000010199 gene set enrichment analysis Methods 0.000 description 2
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 2
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 2
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 238000000370 laser capture micro-dissection Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 2
- 210000005210 lymphoid organ Anatomy 0.000 description 2
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000031864 metaphase Effects 0.000 description 2
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 2
- 230000001617 migratory effect Effects 0.000 description 2
- 230000004879 molecular function Effects 0.000 description 2
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 2
- 231100000189 neurotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002887 neurotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 2
- 210000002741 palatine tonsil Anatomy 0.000 description 2
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 2
- 230000005298 paramagnetic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 101150085922 per gene Proteins 0.000 description 2
- 230000002572 peristaltic effect Effects 0.000 description 2
- 239000008191 permeabilizing agent Substances 0.000 description 2
- 238000002600 positron emission tomography Methods 0.000 description 2
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 2
- 239000000296 purinergic P1 receptor antagonist Substances 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 239000011535 reaction buffer Substances 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 2
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 2
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 2
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- 210000001179 synovial fluid Anatomy 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 2
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 2
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 2
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 2
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 2
- 230000009278 visceral effect Effects 0.000 description 2
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 2
- LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N (2s,3r)-2-[[(2r)-1-[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-hydroxybutanoic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCCCN LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- 108020005345 3' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 1
- AFHIIJICYLMCSH-VOTSOKGWSA-N 5-amino-2-[(e)-2-(4-benzamido-2-sulfophenyl)ethenyl]benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC(N)=CC=C1\C=C\C(C(=C1)S(O)(=O)=O)=CC=C1NC(=O)C1=CC=CC=C1 AFHIIJICYLMCSH-VOTSOKGWSA-N 0.000 description 1
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 102000013455 Amyloid beta-Peptides Human genes 0.000 description 1
- 108010090849 Amyloid beta-Peptides Proteins 0.000 description 1
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 1
- 101150029453 Aqp9 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150025446 Atn1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150050047 BHLHE40 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010006002 Bone pain Diseases 0.000 description 1
- 208000014644 Brain disease Diseases 0.000 description 1
- 208000007774 Broca Aphasia Diseases 0.000 description 1
- 101150037720 CCR7 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150017002 CD44 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150012716 CDK1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150022230 CNRIP1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150062345 CX3CR1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150004010 CXCR3 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100167280 Caenorhabditis elegans cin-4 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100510263 Caenorhabditis elegans klf-3 gene Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000005488 Capillary Leak Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 244000135860 Capparis spinosa subsp spinosa Species 0.000 description 1
- 102100025470 Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 8 Human genes 0.000 description 1
- 206010048610 Cardiotoxicity Diseases 0.000 description 1
- 108091007854 Cdh1/Fizzy-related Proteins 0.000 description 1
- 102000038594 Cdh1/Fizzy-related Human genes 0.000 description 1
- 102100023126 Cell surface glycoprotein MUC18 Human genes 0.000 description 1
- 108010078239 Chemokine CX3CL1 Proteins 0.000 description 1
- 102000014464 Chemokine CX3CL1 Human genes 0.000 description 1
- 238000001353 Chip-sequencing Methods 0.000 description 1
- 101150106726 Cnr2 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010071942 Colony-Stimulating Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000007644 Colony-Stimulating Factors Human genes 0.000 description 1
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 1
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 238000013382 DNA quantification Methods 0.000 description 1
- 108700020911 DNA-Binding Proteins Proteins 0.000 description 1
- 101150028905 DOCK9 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100239628 Danio rerio myca gene Proteins 0.000 description 1
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 1
- QRLVDLBMBULFAL-UHFFFAOYSA-N Digitonin Natural products CC1CCC2(OC1)OC3C(O)C4C5CCC6CC(OC7OC(CO)C(OC8OC(CO)C(O)C(OC9OCC(O)C(O)C9OC%10OC(CO)C(O)C(OC%11OC(CO)C(O)C(O)C%11O)C%10O)C8O)C(O)C7O)C(O)CC6(C)C5CCC4(C)C3C2C QRLVDLBMBULFAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- 101150059401 EGR2 gene Proteins 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 101150023500 EPAS1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000050880 Edar-Associated Death Domain Human genes 0.000 description 1
- 108700002114 Edar-Associated Death Domain Proteins 0.000 description 1
- 208000032274 Encephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 108010066687 Epithelial Cell Adhesion Molecule Proteins 0.000 description 1
- 102100031940 Epithelial cell adhesion molecule Human genes 0.000 description 1
- 108700039887 Essential Genes Proteins 0.000 description 1
- 240000002989 Euphorbia neriifolia Species 0.000 description 1
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 1
- 102000008857 Ferritin Human genes 0.000 description 1
- 108050000784 Ferritin Proteins 0.000 description 1
- 238000008416 Ferritin Methods 0.000 description 1
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 1
- 208000034951 Genetic Translocation Diseases 0.000 description 1
- 102100035716 Glycophorin-A Human genes 0.000 description 1
- 102000001398 Granzyme Human genes 0.000 description 1
- 108060005986 Granzyme Proteins 0.000 description 1
- 108010002459 HIV Integrase Proteins 0.000 description 1
- 102000006354 HLA-DR Antigens Human genes 0.000 description 1
- 108010058597 HLA-DR Antigens Proteins 0.000 description 1
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 1
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 description 1
- 206010019663 Hepatic failure Diseases 0.000 description 1
- 206010019842 Hepatomegaly Diseases 0.000 description 1
- 241000405147 Hermes Species 0.000 description 1
- 208000032672 Histiocytosis haematophagic Diseases 0.000 description 1
- 102100039869 Histone H2B type F-S Human genes 0.000 description 1
- 102000006947 Histones Human genes 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000914320 Homo sapiens Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 8 Proteins 0.000 description 1
- 101001074244 Homo sapiens Glycophorin-A Proteins 0.000 description 1
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 1
- 101001035372 Homo sapiens Histone H2B type F-S Proteins 0.000 description 1
- 101001053270 Homo sapiens Insulin gene enhancer protein ISL-2 Proteins 0.000 description 1
- 101001078143 Homo sapiens Integrin alpha-IIb Proteins 0.000 description 1
- 101001046686 Homo sapiens Integrin alpha-M Proteins 0.000 description 1
- 101001015004 Homo sapiens Integrin beta-3 Proteins 0.000 description 1
- 101000917858 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 1
- 101000917839 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Proteins 0.000 description 1
- 101000934338 Homo sapiens Myeloid cell surface antigen CD33 Proteins 0.000 description 1
- 101000581981 Homo sapiens Neural cell adhesion molecule 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000622137 Homo sapiens P-selectin Proteins 0.000 description 1
- 101100523829 Homo sapiens RBPMS gene Proteins 0.000 description 1
- 101000946860 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Proteins 0.000 description 1
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003839 Human Proteins Human genes 0.000 description 1
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 1
- 206010051125 Hypofibrinogenaemia Diseases 0.000 description 1
- 101150019209 IL13 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150047228 Id3 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150098378 Il17a gene Proteins 0.000 description 1
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 1
- 102100024390 Insulin gene enhancer protein ISL-2 Human genes 0.000 description 1
- 102100025306 Integrin alpha-IIb Human genes 0.000 description 1
- 102100022338 Integrin alpha-M Human genes 0.000 description 1
- 102100022297 Integrin alpha-X Human genes 0.000 description 1
- 102100032999 Integrin beta-3 Human genes 0.000 description 1
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 241000588747 Klebsiella pneumoniae Species 0.000 description 1
- 101150072501 Klf2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150051019 Klrg1 gene Proteins 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 1
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 description 1
- 206010024264 Lethargy Diseases 0.000 description 1
- 102100029185 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Human genes 0.000 description 1
- 208000004852 Lung Injury Diseases 0.000 description 1
- 206010025102 Lung infiltration Diseases 0.000 description 1
- 101150039798 MYC gene Proteins 0.000 description 1
- 208000004987 Macrophage activation syndrome Diseases 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 208000024556 Mendelian disease Diseases 0.000 description 1
- 101710151805 Mitochondrial intermediate peptidase 1 Proteins 0.000 description 1
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 101100273742 Mus musculus Cd69 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100232352 Mus musculus Il12rb1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100182712 Mus musculus Ly6a gene Proteins 0.000 description 1
- 101100148569 Mus musculus S1pr4 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000000112 Myalgia Diseases 0.000 description 1
- 102100025243 Myeloid cell surface antigen CD33 Human genes 0.000 description 1
- 208000002033 Myoclonus Diseases 0.000 description 1
- 101150062494 NSG2 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 1
- 102100027347 Neural cell adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 1
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 1
- 108010077850 Nuclear Localization Signals Proteins 0.000 description 1
- 102100023472 P-selectin Human genes 0.000 description 1
- 238000002944 PCR assay Methods 0.000 description 1
- 101150005879 PKM gene Proteins 0.000 description 1
- 101150050528 PRSS12 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 206010033661 Pancytopenia Diseases 0.000 description 1
- 206010034580 Peripheral motor neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 206010034620 Peripheral sensory neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 241001302191 Polyphemus Species 0.000 description 1
- 108010026552 Proteome Proteins 0.000 description 1
- 206010038687 Respiratory distress Diseases 0.000 description 1
- 208000025316 Richter syndrome Diseases 0.000 description 1
- 101150043606 S1pr5 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000042773 Small Nucleolar RNA Human genes 0.000 description 1
- 206010041660 Splenomegaly Diseases 0.000 description 1
- 108010011834 Streptolysins Proteins 0.000 description 1
- 208000010513 Stupor Diseases 0.000 description 1
- 108700042075 T-Cell Receptor Genes Proteins 0.000 description 1
- 102100035794 T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Human genes 0.000 description 1
- 210000000662 T-lymphocyte subset Anatomy 0.000 description 1
- 208000001871 Tachycardia Diseases 0.000 description 1
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 description 1
- 102000003929 Transaminases Human genes 0.000 description 1
- 206010069363 Traumatic lung injury Diseases 0.000 description 1
- 241000703392 Tribec virus Species 0.000 description 1
- 206010045170 Tumour lysis syndrome Diseases 0.000 description 1
- 101150007691 Unc5a gene Proteins 0.000 description 1
- 241000607618 Vibrio harveyi Species 0.000 description 1
- 101150024410 Xcl1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100459258 Xenopus laevis myc-a gene Proteins 0.000 description 1
- 101150104157 YES1 gene Proteins 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000010398 acute inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 230000004721 adaptive immunity Effects 0.000 description 1
- 210000004100 adrenal gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000004931 aggregating effect Effects 0.000 description 1
- 125000002355 alkine group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 208000012759 altered mental status Diseases 0.000 description 1
- 210000004381 amniotic fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- 238000003287 bathing Methods 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 230000008512 biological response Effects 0.000 description 1
- 238000001369 bisulfite sequencing Methods 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000259 cardiotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000003320 cell separation method Methods 0.000 description 1
- 230000010001 cellular homeostasis Effects 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000013611 chromosomal DNA Substances 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 230000036461 convulsion Effects 0.000 description 1
- 230000002338 cryopreservative effect Effects 0.000 description 1
- 208000024389 cytopenia Diseases 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000000779 depleting effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 1
- UVYVLBIGDKGWPX-KUAJCENISA-N digitonin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H]([C@]2(CC[C@@H]3[C@@]4(C)C[C@@H](O)[C@H](O[C@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O[C@H]6[C@@H]([C@@H](O[C@H]7[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)CO7)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O6)O[C@H]6[C@@H]([C@@H](O[C@H]7[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@@H](CO)O5)O)C[C@@H]4CC[C@H]3[C@@H]2[C@@H]1O)C)[C@@H]1C)[C@]11CC[C@@H](C)CO1 UVYVLBIGDKGWPX-KUAJCENISA-N 0.000 description 1
- UVYVLBIGDKGWPX-UHFFFAOYSA-N digitonine Natural products CC1C(C2(CCC3C4(C)CC(O)C(OC5C(C(O)C(OC6C(C(OC7C(C(O)C(O)CO7)O)C(O)C(CO)O6)OC6C(C(OC7C(C(O)C(O)C(CO)O7)O)C(O)C(CO)O6)O)C(CO)O5)O)CC4CCC3C2C2O)C)C2OC11CCC(C)CO1 UVYVLBIGDKGWPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 1
- 208000009190 disseminated intravascular coagulation Diseases 0.000 description 1
- 238000011143 downstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 230000001094 effect on targets Effects 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 238000001976 enzyme digestion Methods 0.000 description 1
- 238000000407 epitaxy Methods 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 1
- 208000010771 expressive aphasia Diseases 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 206010016256 fatigue Diseases 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003325 follicular Effects 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 239000012595 freezing medium Substances 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000010437 gem Substances 0.000 description 1
- 238000011331 genomic analysis Methods 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- 231100001156 grade 3 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 210000000224 granular leucocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 206010019847 hepatosplenomegaly Diseases 0.000 description 1
- 238000007417 hierarchical cluster analysis Methods 0.000 description 1
- 230000005745 host immune response Effects 0.000 description 1
- 210000002861 immature t-cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000009851 immunogenic response Effects 0.000 description 1
- 238000013394 immunophenotyping Methods 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000007901 in situ hybridization Methods 0.000 description 1
- 229910052738 indium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 239000012212 insulator Substances 0.000 description 1
- 238000012432 intermediate storage Methods 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 230000031146 intracellular signal transduction Effects 0.000 description 1
- 238000010212 intracellular staining Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 1
- 231100001106 life-threatening toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 231100000835 liver failure Toxicity 0.000 description 1
- 208000007903 liver failure Diseases 0.000 description 1
- 230000003908 liver function Effects 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 230000004904 long-term response Effects 0.000 description 1
- 210000004880 lymph fluid Anatomy 0.000 description 1
- 210000004324 lymphatic system Anatomy 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 210000001370 mediastinum Anatomy 0.000 description 1
- 230000006386 memory function Effects 0.000 description 1
- 230000006996 mental state Effects 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 210000002433 mononuclear leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 201000002239 motor neuritis Diseases 0.000 description 1
- 201000005545 motor peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 208000025113 myeloid leukemia Diseases 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000441 neoplastic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 208000004296 neuralgia Diseases 0.000 description 1
- 230000006764 neuronal dysfunction Effects 0.000 description 1
- 201000001119 neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 230000007823 neuropathy Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000633 nuclear envelope Anatomy 0.000 description 1
- 231100000862 numbness Toxicity 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 230000008816 organ damage Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 210000004976 peripheral blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 230000008823 permeabilization Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 238000002205 phenol-chloroform extraction Methods 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
- 210000004910 pleural fluid Anatomy 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 238000011176 pooling Methods 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000001323 posttranslational effect Effects 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 101150107865 prf1 gene Proteins 0.000 description 1
- 210000004986 primary T-cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 108020001580 protein domains Proteins 0.000 description 1
- 230000009145 protein modification Effects 0.000 description 1
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012175 pyrosequencing Methods 0.000 description 1
- 238000013442 quality metrics Methods 0.000 description 1
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 230000001373 regressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150024819 s1pr1 gene Proteins 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 238000010187 selection method Methods 0.000 description 1
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 1
- 238000011896 sensitive detection Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 1
- 210000001044 sensory neuron Anatomy 0.000 description 1
- 201000005572 sensory peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 239000002924 silencing RNA Substances 0.000 description 1
- 238000004513 sizing Methods 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000010741 sumoylation Effects 0.000 description 1
- 238000007864 suspending Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 description 1
- 230000006794 tachycardia Effects 0.000 description 1
- 210000001138 tear Anatomy 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 1
- ACOJCCLIDPZYJC-UHFFFAOYSA-M thiazole orange Chemical compound CC1=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C1.C1=CC=C2C(C=C3N(C4=CC=CC=C4S3)C)=CC=[N+](C)C2=C1 ACOJCCLIDPZYJC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 108091008023 transcriptional regulators Proteins 0.000 description 1
- 238000011222 transcriptome analysis Methods 0.000 description 1
- 230000002463 transducing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000011277 treatment modality Methods 0.000 description 1
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009966 trimming Methods 0.000 description 1
- 208000010380 tumor lysis syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000000439 tumor marker Substances 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000034512 ubiquitination Effects 0.000 description 1
- 238000010798 ubiquitination Methods 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 description 1
- 230000002227 vasoactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 108700026220 vif Genes Proteins 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 238000012070 whole genome sequencing analysis Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6813—Hybridisation assays
- C12Q1/6827—Hybridisation assays for detection of mutation or polymorphism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
- A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
- A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K39/4611—T-cells, e.g. tumor infiltrating lymphocytes [TIL], lymphokine-activated killer cells [LAK] or regulatory T cells [Treg]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/463—Cellular immunotherapy characterised by recombinant expression
- A61K39/4631—Chimeric Antigen Receptors [CAR]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/463—Cellular immunotherapy characterised by recombinant expression
- A61K39/4632—T-cell receptors [TCR]; antibody T-cell receptor constructs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- A61K39/464411—Immunoglobulin superfamily
- A61K39/464412—CD19 or B4
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- A61K39/464416—Receptors for cytokines
- A61K39/464417—Receptors for tumor necrosis factors [TNF], e.g. lymphotoxin receptor [LTR], CD30
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6806—Preparing nucleic acids for analysis, e.g. for polymerase chain reaction [PCR] assay
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
- C12Q1/6886—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material for cancer
-
- G—PHYSICS
- G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
- G16B—BIOINFORMATICS, i.e. INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR GENETIC OR PROTEIN-RELATED DATA PROCESSING IN COMPUTATIONAL MOLECULAR BIOLOGY
- G16B20/00—ICT specially adapted for functional genomics or proteomics, e.g. genotype-phenotype associations
- G16B20/10—Ploidy or copy number detection
-
- G—PHYSICS
- G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
- G16B—BIOINFORMATICS, i.e. INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR GENETIC OR PROTEIN-RELATED DATA PROCESSING IN COMPUTATIONAL MOLECULAR BIOLOGY
- G16B20/00—ICT specially adapted for functional genomics or proteomics, e.g. genotype-phenotype associations
- G16B20/20—Allele or variant detection, e.g. single nucleotide polymorphism [SNP] detection
-
- G—PHYSICS
- G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
- G16B—BIOINFORMATICS, i.e. INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR GENETIC OR PROTEIN-RELATED DATA PROCESSING IN COMPUTATIONAL MOLECULAR BIOLOGY
- G16B30/00—ICT specially adapted for sequence analysis involving nucleotides or amino acids
- G16B30/10—Sequence alignment; Homology search
-
- G—PHYSICS
- G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
- G16B—BIOINFORMATICS, i.e. INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR GENETIC OR PROTEIN-RELATED DATA PROCESSING IN COMPUTATIONAL MOLECULAR BIOLOGY
- G16B40/00—ICT specially adapted for biostatistics; ICT specially adapted for bioinformatics-related machine learning or data mining, e.g. knowledge discovery or pattern finding
- G16B40/10—Signal processing, e.g. from mass spectrometry [MS] or from PCR
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
- A61K2239/46—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterised by the cancer treated
- A61K2239/48—Blood cells, e.g. leukemia or lymphoma
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
- C07K14/7051—T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
- C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
- C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/03—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a transmembrane segment
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6869—Methods for sequencing
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/142—Toxicological screening, e.g. expression profiles which identify toxicity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/154—Methylation markers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/156—Polymorphic or mutational markers
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Bioinformatics & Computational Biology (AREA)
- Evolutionary Biology (AREA)
- Theoretical Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioethics (AREA)
- Computer Vision & Pattern Recognition (AREA)
- Signal Processing (AREA)
Abstract
Description
本出願は、2017年1月10日に出願された「細胞療法および関連方法のエピジェネティック解析」と題する米国仮特許出願第62/444,802号、2017年8月29日に出願された「細胞療法および関連方法のエピジェネティック解析」と題する米国仮特許出願第62/551,752号、および2017年12月8日に出願された「細胞療法および関連方法のエピジェネティック解析」と題する米国仮特許出願第62/596,662号からの優先権を主張するものであり、それらの内容は、その全体が参照により本明細書に組み入れられる。
本出願は、配列表と共に電子形式で提出されている。配列表は、2018年1月10日に作成された、サイズ35,537バイトの735042009440SeqList.TXTという表題のファイルとして提供される。配列表の電子形式での情報は、その全体が参照により本明細書に組み入れられる。
本開示は、いくつかの局面において、細胞療法による治療の転帰および/または該細胞の表現型もしくは機能を予測するゲノム領域を同定する方法に関する。いくつかの態様では、該方法は、細胞療法用の操作細胞を作製するための方法および/または細胞療法(例えば、細胞療法用の操作細胞)に対する応答を予測するための方法に関連して、該細胞のエピジェネティックおよび/またはエピジェノミック解析を含む。いくつかの態様では、該方法は、クロマチンアクセシビリティ、ヌクレオソーム占有率、ヒストン修飾、空間的染色体コンフォメーション、転写因子占有率および/またはDNAメチル化などの、1つまたは複数の遺伝子領域のエピジェネティック特性の変化または変更を評価し、特徴付けし、かつ解析する工程を含む。いくつかの態様では、エピジェネティックおよび/またはエピジェノミック解析は、細胞(例えば、細胞療法用の操作細胞)のエピジェネティック特性を決定することを含む。
養子細胞療法に関連して使用される細胞を作製して投与するための様々な戦略が利用可能であり、例えば、遺伝子操作されたT細胞を作製するための方法、またはCARなどの抗原受容体により操作されたような、遺伝子操作T細胞を投与する方法などがある。いくつかの局面では、利用可能な方法は完全に満足といえるほどのものではないかもしれない。養子細胞療法に関連して細胞を作製しかつ細胞を投与するためのさらなる戦略が必要とされている。そのようなニーズを満たす方法が提供される。
本明細書では、細胞療法による治療の転帰を予測する1つまたは複数のゲノム領域を同定する方法が提供され、該方法は、(a)細胞もしくは細胞集団の1つまたは複数のゲノム領域のエピジェネティック特性を解析または決定する工程であって、該細胞もしくは集団が、(i)組換え受容体を含む第2の組成物を生成するように該組換え受容体で遺伝子操作される細胞の第1の組成物中、または(ii)該組換え受容体を含む細胞の第2の組成物中に含まれる、工程;および(b)該1つまたは複数のゲノム領域にわたって全体的に、エピジェネティック特性が細胞療法の転帰を予測する、示す、またはそれと相関する、該1つまたは複数のゲノム領域のうちの1つまたは複数を同定する工程であって、該細胞療法が該組換え受容体を含む細胞の第2の組成物を投与することを含む、工程を含む。いくつかの態様では、その転帰は、任意で、完全奏効、部分奏効、進行性疾患、分子的に検出可能な疾患、再発、奏効の持続性、効果に関連するもしくはそれを示す転帰、または毒性に関連するもしくはそれを示す転帰である。
同じまたは同様の疾患または状態を有する対象に投与されたときに所望の転帰を示すことが分かっている、細胞組成物の細胞内の該1つまたは複数のゲノム領域におけるエピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティに関連するかまたはそれを示す値もしくはレベルである;または
対象のグループに個別に投与された複数の細胞組成物のそれぞれの細胞からの該1つまたは複数のゲノム領域におけるエピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティに関連するかまたはそれを示す、平均(average)、中央、もしくは平均(mean)の値もしくはレベルであるか、または平均(average)、中央、もしくは平均(mean)値もしくはレベルの標準偏差内であり、この場合、該グループの各対象は投与時の望ましい転帰を投与後に示し続けた;または
正常もしくは健康な対象からの同様の細胞組成物におけるエピジェネティック特性に関連するかまたはそれを示す値もしくはレベルである。
I. 細胞のエピジェネティック状態を評価するための方法
細胞もしくは細胞組成物(養子細胞療法に関連して使用するための対象由来の初代細胞、例えばT細胞を含有する細胞組成物)の1つまたは複数のゲノム領域についてのエピジェネティックなプロファイルまたはシグネチャを決定するための方法が提供される。いくつかの態様では、該細胞組成物は、組換え受容体、例えばキメラ抗原受容体(CAR)、で細胞を操作する前および操作した後の組成物を含めて、細胞療法の製作または操作に関連した組成物を含む。いくつかの局面では、細胞もしくは細胞組成物のゲノム領域のエピジェネティックなプロファイルもしくはシグネチャおよび/または1つまたは複数のエピジェネティックな特性は、該細胞のある種の特徴または特性に関する情報、例えば、該細胞もしくは細胞組成物の表現型、活性化状態および/もしくは機能に関連するもの、ならびに/または細胞療法による治療の1つまたは複数の転帰を示す、該転帰に関連する、該転帰に相関する、および/もしくは該転帰を予測するものを提供することができる。これらの方法は次のような観察に基づいている;すなわち、特定の遺伝子またはゲノム領域のエピジェネティックな特性、例えばクロマチンアクセシビリティは、転写に依存する方法(例えば、RNAシーケンシング)などの他のシステムでは不可能である、細胞組成物の特徴および特性の詳細で、精巧で、かつ/または包括的な追跡を可能にする。いくつかの局面では、そのようなエピジェネティック特性は、疾患転帰、応答転帰、毒性転帰などの転帰と相関し、かつ/または細胞の表現型、持続性、活性および/もしくは機能と相関することが見出されている。そのような相関関係は、特定の局面では、転写、タンパク質発現を評価する方法などの、既存の分析方法を用いて、および/または細胞内染色によって、観察されない。
提供された方法のいずれにおいても、エピジェネティックおよび/またはエピジェノミック解析は、1つの遺伝子座、複数の遺伝子座もしくはゲノム座位、ゲノム領域および/またはゲノムにおける変化または修飾、例えば、クロマチンアクセシビリティ、ヌクレオソーム占有率、ヒストン修飾、空間的染色体コンフォメーション、転写因子占有率および/またはDNAメチル化などを評価し、特徴付けし、かつ解析する工程を含み得る。
提供された方法のいくつかの態様では、エピジェネティックおよび/またはエピジェノミック解析、例えばエピジェネティック/エピジェノミックな特性、状態および/またはプロファイルの決定は、ゲノム領域、座位および/もしくは区間の、かつ/またはゲノムワイドレベルでの、例えばゲノムの大部分もしくはゲノム全体を通しての、クロマチンアクセシビリティの評価を含む。いくつかの局面では、エピジェネティック/エピジェノミックプロファイルは、特定の細胞もしくは細胞組成物の、1つまたは複数のゲノム領域、座位および/もしくは区間での、かつ/またはゲノムワイドレベルでの、エピジェネティック/エピジェノミック特性に基づいて、決定される。
いくつかの態様では、クロマチンアクセシビリティは、ハイスループットシーケンシング法に連結されたDNA挿入エレメントを用いて評価される。いくつかの態様では、クロマチンアクセシビリティは、ATAC-seq、例えば、その全体が参照により本明細書に組み入れられるUS20160060691に記載の方法およびそこに記載の方法の変形などを用いて評価される。いくつかの態様では、エピジェネティックおよび/またはエピジェノミック解析の例示的なアッセイには、例えば、WO2015102536、WO2015159295、WO2015130968、WO201692070、Dirks et al. Clinical Epigenetics (2016) 8:122;Buenrostro et al., Nat Methods. (2013) 10(12): 1213-1218;Sung et al., Nat Methods. (2016) 13(3): 222-228に記載されるものが含まれ、それらの全体が参照により本明細書に組み入れられる。いくつかの態様では、クロマチンアクセシビリティのアッセイ、例えばATAC-seqは、次のような利点を有する:ライブラリー作製が単純、アッセイ時間が短い(ある種のアッセイには3〜4日を要するのに対して、数時間以内に結果が得られる)、超音波処理またはフェノール-クロロホルム抽出が不要、抗体が不要(抗体によって導入され得る制限およびバイアスを排除する)、高感度酵素消化が不要(面倒で高感度の酵素タイトレーションを排除する)、インプットとしてごく少数の細胞のみが必要、およびダイナミックレンジが広い。いくつかの態様では、ATAC-seqなどのクロマチンアクセシビリティのアッセイは、単一アッセイおよび/または単一時点で、組成物中の細胞の状態、質、一貫性、表現型、特徴および/または特性(例えば、ゲノム全体を通してのクロマチンアクセシビリティの状態)のより正確で予測的な評価を提供し、RNAまたはタンパク質の発現レベルなどの他のパラメータを別個に評価する必要がない、といった利点を有する。
いくつかの態様において、エピジェネティックおよび/またはエピジェノミック状態は、サンプル、例えば細胞もしくは細胞組成物を含むサンプルにおいて測定され、評価され、かつ/または決定される。いくつかの態様では、そのサンプルは、対象から採取、収集、および/または取得された生物学的サンプルであり、かつ/または対象から採取、収集、および/または取得された細胞を含む。特定の態様では、対象は疾患もしくは状態を有し、かつ/または疾患もしくは状態を有することが疑われる。いくつかの態様では、対象は治療法を受けたことがあるか、受けることになるか、または治療法を受ける候補である。いくつかの態様では、その治療法は細胞療法および/または免疫療法を施すことである。特定の態様では、細胞療法は該疾患もしくは状態を治療しかつ/または治療することができる。いくつかの態様では、サンプル中の細胞もしくは細胞組成物は細胞療法のための細胞を含む。いくつかの態様では、その治療法は1つまたは複数の操作された細胞を含む細胞療法である。いくつかの態様では、操作された細胞は組換え受容体を発現する。いくつかの態様において、組換え受容体はキメラ抗原受容体(CAR)または組換えT細胞受容体(TCR)である。
いくつかの態様では、提供された方法はまた、エピジェネティック/エピジェノミックな特性および/またはプロファイルの1つまたは複数の側面のさらなる処理および/または解析をも含む。いくつかの態様では、提供された方法は、特定の細胞もしくは細胞組成物のエピジェネティック/エピジェノミック特性および/またはプロファイルを別の細胞もしくは細胞組成物のそれらと比較すること(例えば、比較分析および/または差次的分析)、または正規化もしくはさらなる解析工程のためのメトリックおよびカウントを生成することを含む。いくつかの局面では、さらなる処理および/または解析は、ヌクレオソーム占有率解析などの、シーケンス結果を解析するための追加の工程の使用を含む。
いくつかの態様では、該アッセイは、2つ以上のサンプルを比較するために使用され得る。いくつかの態様では、該アッセイは以下の工程を含むことができる:本明細書で提供されたアッセイまたは解析方法を用いて、第1の細胞集団または第1の細胞組成物を解析して第1のエピジェネティックマップを作成する工程;本明細書で提供されたアッセイまたは解析方法を用いて、第2の細胞集団または第2の細胞組成物を解析して第2のエピジェネティックマップを作成する工程;および第1のエピジェネティックマップを第2のエピジェネティックマップと比較して、例えば、クロマチンアクセシビリティまたは転写因子占有率の差異もしくは変化を検出する工程。
いくつかの態様では、エピジェネティック/エピジェノミックプロファイルからの配列および/またはピークの解析は、例えば配列および/またはピークの結果を正規化または定量化するための、該結果のさらなる処理または解析を含む。いくつかの局面では、該解析は正規化尺度を採用することを含む。任意で、正規化尺度は、遺伝子に関連するメトリック、例えばアノテートされた遺伝子あたりの正規化されたカウントを生成することを含み得る。いくつかの態様では、アッセイ、例えばATAC-seqなどのクロマチンアクセシビリティアッセイ、からのデータは、閾値および/もしくは値を決定するために、特定の転帰に関連する座位および/もしくは遺伝子を同定するために、かつ/または他のアッセイの結果および解析と比較するために、さらに処理または解析される。例えば、いくつかの態様では、ATAC-seqピークは、ゲノム座位領域マップまたはゲノムマップと重ね合わせた、正規化された頻度などの頻度をプロットすることによって同定することができる。いくつかの態様では、正規化頻度値はFPKMまたはRPKMを含む。いくつかの態様では、本明細書で使用する用語「FPKM」は、1キロベースあたりの、マップされたリード数100万あたりの断片数(Fragments Per Kilobase per Million fragments mapped)を指す。いくつかの態様では、用語「RPKM」は、1キロベースあたりの、マップされたリード数100万あたりのリード数(Reads Per Kilobase per Million reads mapped)を指す。FPKMまたはRPKMは、任意のゲノム特徴(例えば、エクソン、転写産物、トランスポゾンの挿入、ヒストン修飾、ヌクレオソーム占有率、DNAメチル化、または転写因子などのタンパク質の占有率)の存在を定量化するための、または任意のゲノム座標(それにアライメントするシーケンシングリードの存在量によって決定される)の存在を定量化するための単位である。FPKMおよびRPKM測定は、サンプル内およびサンプル間の存在量レベルの比較を容易にするために、ゲノム単位の相対的長さならびにそれにマッピングされるリードの総数によって存在量を正規化する。いくつかの局面では、正規化頻度値は、上位四分位数(upper quartile:UQ)、サイズファクター(size factor:SF)、100万あたりのカウント数(counts per million:CPM)、RPKM(Reads Per Kilobase Million)、FPKM(Fragments Per Kilobase Million)、またはTPM(Transcripts Per Kilobase Million)を含む。
いくつかの局面では、さらなる処理工程は、エピジェネティック/エピジェノミックプロファイルにおいてヌクレオソームの占有率もしくは位置決めを評価すること、またはヌクレオソームフリー領域(NFR)を同定することを含む。
いくつかの態様では、提供された方法はまた、エピジェネティック/エピジェノミックな特性および/またはプロファイルの1つまたは複数の側面のさらなる適用および/または解析を含む。いくつかの態様では、提供された方法は、例えば特定の細胞もしくは細胞組成物のエピジェネティック/エピジェノミック特性および/またはプロファイルを、参照サンプルのものおよび/または参照プロファイルと比較する、さらなる解析および/または適用の工程を含む。いくつかの局面では、さらなる解析および/または適用は、シーケンス結果を解析するための追加の標準または方法を用いて、さらなる特徴、特性および/または状態を決定すること;さらなる下流解析、遺伝子サブセット解析、生物学的経路解析、転写占有率解析、もしくはモチーフ解析、クラスタリング解析、および/またはさらなる適用(例えば、細胞療法の転帰との相関または関連)を行うこと;トランスジェニック配列の組込みを評価すること;参照サンプルおよび/または参照プロファイルと比較すること;ならびに/または細胞もしくは細胞組成物の表現型もしくは状態または他の特性を評価することを含む。
いくつかの態様では、本明細書に記載されるアッセイ、工程および/または手順の1つまたは複数は、特定のサンプル、例えば特定の細胞、細胞集団もしくは細胞組成物のエピジェネティックおよび/またはエピジェノミックな特性、状態および/もしくはプロファイルを決定するために使用され得る。いくつかの局面では、該方法は、参照細胞もしくは参照細胞組成物、または対照細胞および/もしくは対照細胞組成物のエピジェネティックおよび/またはエピジェノミックな特性、状態および/もしくはプロファイルを決定するために使用される。いくつかの局面では、本明細書に記載されるアッセイ、工程および/または手順の1つまたは複数は、参照エピジェネティック特性、例えば参照エピジェネティックおよび/またはエピジェノミックプロファイルを決定するために使用され得る。いくつかの局面では、そのような特性またはプロファイルのいずれかを使用して、試験サンプル(例えば、他の細胞もしくは細胞組成物)、または試験条件もしくは手順(例えば、細胞もしくは細胞組成物、例えば養子細胞療法のための細胞組成物を生成し、製造しかつ/または操作するための条件もしくは手順)と比較し、かつ/またはそれを評価することができる。いくつかの局面では、さらなる解析および/または適用の方法もしくは手順は、試験サンプルのエピジェネティック/エピジェノミックプロファイルを参照サンプルのそれおよび/または参照プロファイルと比較することを含む。
いくつかの局面では、提供されたアッセイおよび解析方法は、他のゲノム解析もしくは機能解析の工程を組み合わせるかまたは適用することを含めて、追加の、さらなるまたは下流の解析を含むことができる。いくつかの局面では、さらなるまたは下流の解析は、該解析または適用の工程のいずれか1つまたは複数と組み合わせて使用され得る。いくつかの局面では、例示的なさらなるまたは下流の解析工程は、閾値化およびクラスター化手法、予測モデリング、遺伝子オントロジー(GO)解析、モチーフ解析および/または主成分解析(PCA)を含むことができる。いくつかの局面では、下流解析方法はいずれもコンピュータにより実行され得る。
いくつかの局面では、追加の、さらなるまたは下流の解析を含めて、前記解析方法はいずれも、1つまたは複数の選択されたゲノム領域または遺伝子座に対して実施され得る。いくつかの局面では、該方法は、1つまたは複数の選択された遺伝子、例えば、遺伝子のサブセット、遺伝子のパネルまたは遺伝子のモジュールに基づいて実施することができる。いくつかの局面では、解析方法はいずれも、ゲノム領域、ゲノム座位での、特定の遺伝子または遺伝子の特定のパネル、モジュールもしくはセット(例えば、同様の活性および/または機能に関連し、かつ/または同時制御もしくは同時発現される遺伝子のパネル、モジュールもしくはセット)でのまたはその付近での、エピジェネティック/エピジェノミック状態を評価するために使用され得る。いくつかの局面では、解析は、予め選択された遺伝子または遺伝子のパネル、モジュールもしくはセットで実施することができる。いくつかの局面では、同様のエピジェネティックおよび/またはエピジェノミックな特性、状態および/またはパターンを示す遺伝子を使用して、関心対象の遺伝子または遺伝子のパネル、モジュールもしくはセット(例えば、転帰または特徴、例えば所望の転帰または特徴に関連する、相関する、またはそれを示すもの)を同定することができるように、解析を実施することができる。いくつかの局面では、そのような遺伝子のパネル、モジュールまたはセットは、試験サンプルを評価するために使用され得る。
いくつかの態様では、前記方法は、細胞に送達もしくは導入された核酸分子または構築物またはトランスジーン(例えば、操作のために、例えば組換え受容体を発現させるために、細胞に導入された構築物)の組込み部位を同定し、かつ/または特徴付けることを含み得る。いくつかの態様では、1つまたは複数の組込み部位は、本明細書に記載の方法から得られた核酸配列(例えば、組み込まれた構築物配列に隣接する核酸配列を含む)に基づいて決定され得る。いくつかの態様では、組込みの数および位置が決定され得る。いくつかの態様では、核酸組込み部位におけるエピジェネティックおよび/またはエピジェノミックプロファイルを決定することができる。いくつかの態様では、組込みのための核酸分子または構築物は、トランスジーン(例えば組換え受容体)をコードするベクター(例えばウイルスベクター)、核酸分子、トランスポゾンおよび/または核酸構築物を含む。いくつかの態様では、該方法は、組み込まれた核酸分子もしくは構築物の数および/または存在量を決定することを含み得る。例えば、いくつかの態様では、核酸、例えばウイルスベクターなどのベクター、または構築物のコピー数は、操作された細胞、例えば組換え受容体を発現するように操作された細胞において決定することができる。いくつかの態様では、該方法は、コードされた遺伝子(例えば、コードされた組換え受容体)の発現レベルを決定することを含む。
名称に束縛されることを望まないが、例示的な配列操作およびアライメント手順、例えば、本明細書において参照されるスクリプトの説明を提供する。このリストは、網羅的または決定的であるようには意図されず、むしろ、本明細書に列挙されるスクリプトは、提供される解析について有用であり得るスクリプトのタイプの例として役立つ。
提供される方法の一部の態様において、組換え受容体で遺伝子操作される予定であるかまたは組換え受容体で遺伝子操作された細胞の組成物中に含まれる細胞の集団のような、細胞の集団のゲノムのエピジェネティック特性(例えば、クロマチンアクセシビリティ)は、提供される方法に従う細胞療法の治療転帰の発生と相関するかまたは相関し得る。
一部の態様において、治療剤(例えば、CAR T細胞)の投与に対する対象中の毒性転帰は、評価またはモニターすることができる。一部の態様において、毒性転帰は、毒性事象、例えば、サイトカイン放出症候群(CRS)、重度CRS(sCRS)、マクロファージ活性化症候群、腫瘍崩壊症候群、3日以上にわたる少なくとも38℃もしくは約38℃の発熱、および少なくとも20 mg/dLもしくは約20 mg/dLのC反応性タンパク質(CRP)の血漿レベル、神経毒性および/または重度の神経毒性の存在であるかまたはこれらと関連する。一部の態様において、毒性転帰は、徴候、もしくは症状、特定の徴候、および症状、ならびに/またはその量もしくは程度であり、これらの存在または非存在は、対象中の毒性の特定の程度、重症度またはレベルを指定し得る。治療剤(例えば、CAR-T細胞)の望まれない毒性転帰に関連する特定の徴候、症状および/またはその量もしくは程度を指定または決定することは、当業者のレベル内にある。
一部の態様において、治療転帰は、細胞療法の応答または有効性転帰、細胞療法の毒性転帰、細胞療法に対する免疫原性応答であるか、または、細胞療法の別の特性または特徴(例えば、対象における細胞の存続または拡大)である。ある態様において、治療転帰は、細胞療法の治療的または予防的有効性転帰である。一部の態様において、細胞療法の応答転帰は、特定の用量での有効性転帰を含む。一部の局面において、細胞療法の治療転帰は、応答を達成するために必要である細胞療法の用量を含む。一部の局面において、細胞の存続および/または拡大を評価する。
一部の態様において、提供される方法は、養子細胞療法用の細胞を評価するために使用することができる。提供される方法のいずれかにおいて、細胞療法についての細胞のエピジェネティックおよび/またはエピゲノミック解析は、ゲノム座位もしくはゲノム中の変化または修飾、例えば、クロマチンアクセシビリティ、ヌクレオソーム占有率、ヒストン修飾、空間的染色体コンフォメーション、転写因子占有率、および/またはDNAメチル化を評価および解析するための工程を含むことができる。一部の態様において、提供される方法は、細胞の1つまたは複数のエピジェネティックおよび/またはエピゲノミック解析工程を伴う。一部の局面において、エピジェネティックおよび/またはエピゲノミック解析は、細胞の遺伝子操作前に行われる。場合によっては、エピジェネティックおよび/またはエピゲノミック解析は、細胞が組換え受容体で遺伝子操作された後に行われる。
細胞は、一般的に、真核細胞、例えば、哺乳動物細胞であり、典型的には、ヒト細胞、例えば、ヒト対象から誘導され、例えば組換え受容体を発現するように、操作されたヒト細胞である。一部の態様において、前記細胞は血液、骨髄、リンパ、またはリンパ系臓器に由来し、免疫系の細胞、例えば、自然免疫もしくは適応免疫の細胞、例えば、リンパ球、典型的にはT細胞および/またはNK細胞を含む骨髄系細胞またはリンパ系細胞である。他の例示的な細胞には、幹細胞、例えば、人工多能性幹細胞(iPSC)を含む多分化能性幹細胞および多能性幹細胞が含まれる。前記細胞は、典型的には、初代細胞、例えば、対象から直接単離された、および/または対象から単離され、凍結された細胞である。一部の態様において、前記細胞には、T細胞または他の細胞タイプの1つまたは複数のサブセット、例えば、全T細胞集団、CD4+細胞、CD8+細胞、およびその部分母集団、例えば、機能、活性化状態、成熟度、分化能、増殖、再循環、局在化、および/もしくは持続の能力、抗原特異性、抗原受容体のタイプ、特定の臓器もしくは区画における存在、マーカーもしくはサイトカイン分泌プロファイル、ならびに/または分化の程度によって規定されるT細胞または他の細胞タイプの1つまたは複数のサブセットが含まれる。処置しようとする対象に関して、前記細胞は同種異系および/または自己由来でもよい。前記方法の中には既製の方法が含まれる。一部の局面において、例えば、既製の技術の場合、前記細胞は多能性および/または多分化能性であり、例えば、幹細胞、例えば、人工多能性幹細胞(iPSC)である。一部の態様において、前記方法は、対象から細胞を単離する段階、細胞を調製、処理、培養、および/または操作する段階、ならびに凍結保存前または凍結保存後に細胞を同じ対象に再導入する段階を含む。
一部の態様では、操作された細胞の調製は1つまたは複数の培養段階および/または調製段階を含む。トランスジェニック受容体、例えば、CARをコードする核酸を導入するための細胞は、試料、例えば、生物学的試料、例えば、対象から得られた試料または対象に由来する試料から単離されてもよい。一部の態様では、細胞が単離される対象は、前記疾患もしくは状態を有するか、細胞療法を必要とするか、または細胞療法が適用される対象である。対象は、一部の態様では、特定の治療介入、例えば、養子細胞療法を必要とし、このために細胞が単離、処理、および/または操作される、ヒトである。
細胞は、一般に、組換え受容体を発現する。受容体には、抗原受容体、例えば、機能的非TCR抗原受容体、例えば、キメラ抗原受容体(CAR)、および他の抗原結合受容体、例えば、トランスジェニックT細胞受容体(TCR)が含まれ得る。受容体には、他のキメラ受容体、例えば、特定のリガンドへ結合し、かつ、CAR中に存在するものと同様の膜貫通ドメインおよび/または細胞内シグナル伝達ドメインを有する受容体も含まれ得る。受容体の中には、抗原受容体、およびその1つまたは複数の成分を含有する受容体がある。組換え受容体は、キメラ受容体、例えば、リガンド結合ドメインまたはその結合断片と細胞内シグナル伝達ドメインまたは領域とを含有するもの、機能的非TCR抗原受容体、キメラ抗原受容体(CAR)、およびT細胞受容体(TCR)、例えば、組換えまたはトランスジェニックTCR、キメラ自己抗体受容体(CAAR)、ならびに前述のものうちのいずれかの成分を含み得る。組換え受容体、例えばCARは、一般に、一部の局面ではリンカーおよび/または膜貫通ドメインを介して、1つまたは複数の細胞内シグナル伝達成分へ連結された細胞外抗原(またはリガンド)結合ドメインを含む。
一部の態様では、操作細胞、例えばT細胞は、特定の抗原(またはマーカーもしくはリガンド)、例えば、特定の細胞タイプの表面上に発現される抗原について特異性を有するCARを発現する。一部の態様では、抗原はポリペプチドである。一部の態様では、それは糖質または他の分子である。一部の態様では、抗原は、正常な、または標的ではない細胞もしくは組織と比較して、前記疾患または状態の細胞、例えば、腫瘍細胞または病原性細胞の表面で選択的に発現しているか、または過剰発現している。他の態様では、前記抗原は正常細胞の表面で発現している、および/または操作された細胞の表面で発現している。
一部の態様において、腫瘍、ウイルスまたは自己免疫タンパク質の抗原のような、標的ポリペプチドのペプチドエピトープまたはT細胞エピトープを認識するT細胞受容体(TCR)またはその抗原結合部分を発現する操作細胞、例えば、T細胞を提供する。
を有する。
一部の態様において、組換え受容体は、キメラ自己抗体受容体(CAAR)である。一部の態様において、CAARは自己抗体に特異的である。一部の態様において、CAARを発現する細胞、例えば、CAARを発現するように操作されたT細胞は、正常抗体発現細胞ではなく、自己抗体発現細胞に特異的に結合しそしてこれを死滅させるために使用され得る。一部の態様において、CAAR発現細胞は、自己免疫疾患などの、自己抗原の発現と関連する自己免疫疾患を治療するために使用することができる。一部の態様において、CAAR発現細胞は、自己抗体を最終的に産生しそして細胞表面上に自己抗体を提示するB細胞を標的化し、これらのB細胞を治療介入のための疾患特異的標的としてマークすることができる。一部の態様において、CAAR発現細胞は、抗原特異的キメラ自己抗体受容体を使用して病原性B細胞を標的化することによって、自己免疫疾患における病原性B細胞を効率的に標的化および死滅化するために使用することができる。一部の態様において、組換え受容体は、CAAR、例えば、米国特許出願公開番号US 2017/0051035に記載される任意のCAARである。
一部の態様において、本細胞および方法は、例えばそれぞれが同じまたは異なる(same of a different)抗原を認識し、典型的にはそれぞれが異なる細胞内シグナル伝達成分を含む、2つ以上の遺伝子操作された受容体の、細胞での発現などといった、多重標的化戦略を含む。そのような多重標的化戦略は、例えば、国際特許出願公開番号WO 2014055668 A1(例えばオフターゲット、例えば正常細胞上では個別に存在するが、処置しようとする疾患または状態の細胞上にのみ一緒に存在する2つの異なる抗原を標的とする、活性化CARと補助刺激CARの組み合わせが記載されている)およびFedorov et al., Sci. Transl. Medicine, 5(215) (December, 2013)(活性化CARと阻害性CARとを発現する細胞、例えば活性化CARは、正常細胞または非疾患細胞と処置しようとする疾患または状態の細胞との両方に発現する1つの抗原に結合し、阻害性CARは、正常細胞または処置することが望まれていない細胞だけに発現する別の抗原に結合するものが記載されている)に記載されている。
一部の態様において、エピジェネティックおよび/またはエピゲノミック解析を含む本明細書に記載される方法によって、操作細胞を提供する。一部の態様において、細胞、例えば、組換え受容体で遺伝子操作された細胞(例えば、CAR-T細胞)を、組成物として提供し、これは、薬学的組成物および製剤、例えば、ある特定の用量で投与するための、またはある特定の用量を分けて投与するための数の細胞を含む単位用量形態組成物を含む。薬学的組成物および製剤は、一般に、1つまたは複数の任意選択の薬学的に許容される担体または賦形剤を含む。一部の態様において、前記組成物は、少なくとも1つの追加の治療剤を含む。
一部の態様において、提供される方法は、一般に、組換え分子、例えば組換え受容体、例えばCAR、他のキメラ受容体、または他の抗原受容体、例えばトランスジェニックTCRを発現する細胞の用量を、疾患または状態、例えば、その成分が組換え分子、例えば受容体によって特異的に認識されかつ/または処置される疾患または状態を有する対象へ投与する工程を伴う。一部の態様において、エピジェネティクスおよび/またはエピゲノミクスを評価するために提供される方法を使用して、細胞を解析する。一部の局面において、エピジェネティックおよび/またはエピゲノミック解析は、遺伝子操作の前および/または後に細胞に対して行うことができる。投与は、一般に、疾患または状態の1つまたは複数の症状の改善をもたらし、かつ/または、疾患もしくは状態またはその症状を処置または予防する。
一部の態様において、提供される方法に従って、かつ/または、提供される製造品もしくは組成物で、ある用量の細胞が対象に投与される。一部の態様において、用量のサイズおよびタイミングは、対象における特定の疾患または状態の関数として決定される。場合によっては、提供された説明を考慮して、特定の疾患に対する用量のサイズまたはタイミングを経験的に決定し得る。
キットおよび製造品、例えば、本明細書に提供される方法を行うための試薬、例えば、細胞、例えば操作用の細胞中の、1つまたは複数のゲノム領域、例えばゲノム座位でのエピジェネティック特性を評価するための試薬を含有するキットおよび製造品をさらに提供する。一部の態様において、キットはまた、他のパラメータを評価するためか、または、1つまたは複数のゲノム領域、例えばゲノム座位について追加のエピジェネティックおよび/またはエピゲノミック解析を行うための試薬を含む。
特に定義のない限り、本明細書において用いられる専門用語、注釈、ならびに他の技術用語および科学用語または専門語は全て、クレームされた対象が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有することが意図される。場合によっては、理解しやすいように、および/または容易に参照できるように、一般的に理解されている意味を有する用語が本明細書において定義される。本明細書における、このような定義の記載が、必ず、当技術分野において一般的に理解されているものと、かなり大きく異なると解釈することはしてはならない。
提供する態様には以下のものがある:
1. 細胞療法による治療の転帰の予測となる1つまたは複数のゲノム領域を同定する方法であって、
(a)細胞もしくは細胞集団の1つまたは複数のゲノム領域のエピジェネティック特性を解析または決定する工程であって、該細胞もしくは集団が、(i)組換え受容体を含む第2の組成物を生成するように該組換え受容体で遺伝子操作される細胞の第1の組成物中、または(ii)該組換え受容体を含む細胞の第2の組成物中に含まれる、工程;および
(b)該1つまたは複数のゲノム領域にわたって全体的に、エピジェネティック特性が細胞療法の転帰を予測する、示す、またはそれと相関する、該1つまたは複数のゲノム領域のうちの1つまたは複数を同定する工程であって、該細胞療法が該組換え受容体を含む細胞の第2の組成物を投与することを含む、工程
を含む、方法。
2. 前記転帰が、任意で、完全奏効、部分奏効、進行性疾患、分子的に検出可能な疾患、再発、奏効の持続性、効果に関連するもしくは効果を示す転帰、または毒性に関連するもしくは毒性を示す転帰である、態様1の方法。
3. 細胞療法による治療の転帰を予測する1つまたは複数のゲノム領域を同定する方法であって、
(a)第1の治療用組成物に含まれる細胞または細胞の集団についての1つまたは複数のゲノム領域のエピジェネティック特性のレベルもしくは程度または相対的なレベルもしくは程度を決定または測定する工程;
(b)第2の治療用組成物に含まれる細胞または細胞の集団についての該1つまたは複数のゲノム領域の該エピジェネティック特性のレベルもしくは程度または相対的なレベルもしくは程度を決定または測定する工程;
(c)該ゲノム領域の1つまたは複数について、(a)における該レベルまたは程度と、(b)における該レベルまたは程度とを比較する工程
を含む、方法。
4. (a)において決定または測定されたレベルまたは程度が、(b)において決定または測定されたレベルまたは程度と比較して異なる、任意で有意に異なる、該1つまたは複数のゲノム領域のうちの1つまたは複数を同定する工程をさらに含む、態様3の方法。
5. 複数のゲノム領域のそれぞれについて、(a)において検出または測定されたレベルまたは程度と(b)において検出または測定されたレベルまたは程度との間の差または有意差によって、該エピジェネティック特性またはその程度もしくはレベルが、第1および第2の治療用組成物の一方では生じるかまたは生じたが他方では生じない転帰と相関する、それを予測する、その可能性もしくはリスクを予測することが示され、該転帰が、任意で、完全奏効、部分奏効、進行性疾患、分子的に検出可能な疾患、再発、奏効の持続性、効果に関連するもしくは効果を示す転帰、または毒性に関連するもしくは毒性を示す転帰である、態様3または態様4の方法。
6. 前記ゲノム領域がゲノム座位または遺伝子を含む、態様1〜5のいずれかの方法。
7. 前記ゲノム領域が遺伝子のオープンリーディングフレームを含む、態様1または態様2の方法。
8. エピジェネティック特性がクロマチンアクセシビリティ、ヌクレオソーム占有率、ヒストン修飾、空間的染色体コンフォメーション、転写因子占有率、およびDNAメチル化の中から選択される、態様1〜7のいずれかの方法。
9. エピジェネティック特性がクロマチンアクセシビリティである、態様1〜8のいずれかの方法。
10. エピジェネティック特性がクロマチンアクセシビリティ、クロマチンアクセシビリティのレベルもしくは程度、クロマチンアクセシビリティの相対的なレベルもしくは程度を含む;および/または
エピジェネティック特性が該ゲノム領域にわたるクロマチンアクセシビリティの程度もしくはレベル、その相対的な程度もしくはレベル、またはそのプロファイルもしくはマップを含む;
態様1〜9のいずれかの方法。
11. クロマチンアクセシビリティが、ハイスループットシーケンシングによるトランスポザーゼ接近可能クロマチンのアッセイ(ATAC-seq)またはハイスループットシーケンシングに連結されたクロマチン免疫沈降(ChIP-seq)によって測定される、態様8〜10のいずれかの方法。
12. クロマチンアクセシビリティがATAC-seqにより測定される、態様8〜11のいずれかの方法。
13. エピジェネティック特性を解析する工程が、該1つまたは複数のゲノム領域の各々またはそのサブセットに沿って、エピジェネティック特性に関連するかまたはそれを示す配列リードのプロファイル、任意でクロマチンアクセシビリティに関連するかまたはそれを示す配列リードのプロファイルを示すエピジェネティックマップを作成することを含み、かつ/または
該ゲノム領域の長さに沿った複数の部位もしくは部分の各々について、エピジェネティックなリードアウト、任意でクロマチンアクセシビリティを示す1つまたは複数の配列リードを該部位もしくは部分において生成させることを含み、ここで、該1つまたは複数の配列リードの量が、該部位もしくは部分における該エピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティ、の程度もしくはレベルを示す、
態様1〜12のいずれかの方法。
14. 前記の解析する工程が、任意で、該ゲノム領域にわたって、該エピジェネティックなリードアウトの全体的な程度もしくはレベルを決定すること、任意でアクセシビリティの全体的な程度もしくはレベルを決定することをさらに含む、態様13の方法。
15. エピジェネティック特性を解析する工程が、該1つまたは複数のゲノム領域にわたってクロマチンアクセシビリティの値もしくはレベルを決定、測定または定量することを含む、態様1〜14のいずれかの方法。
16. エピジェネティック特性を解析する工程が、該1つまたは複数のゲノム領域またはそのサブセットにわたって、エピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティに関連するかまたはそれを示す値もしくはレベルを決定、測定または定量することを含む、態様1〜14のいずれかの方法。
17. 前記の値もしくはレベルが、該1つまたは複数のゲノム領域の各々またはそのサブセット内のFPKM(fragments per kilobase per million of mapped reads:1キロベースあたりの、マップされたリード数100万あたりの断片数)値であるか、またはFPKM値を決定することを含む、態様15または態様16の方法。
18. 前記の値もしくはレベルが、該1つまたは複数のゲノム領域の各々またはそのサブセット内のFPKM値であるか、またはFPKM値を合計もしくは総計することを含む、態様15〜17のいずれかの方法。
19. 工程(a)および(b)が、組換え受容体で操作された細胞を含む第2の細胞組成物をそれぞれ独立して投与された複数の対象に対して実施される、態様1〜18のいずれかの方法。
20. 各ゲノム領域またはそのサブセットについて、複数の対象のそれぞれについての細胞療法の転帰にマッピングされた各ゲノム座位の配列リードの値もしくはレベルを含むディスプレイを作製する、態様16〜19のいずれかの方法。
21. 前記ディスプレイがヒートマップ、散布図、階層的クラスタリングおよび/またはコンステレーションプロットを含む、態様20の方法。
22. 前記1つまたは複数のゲノム領域を同定することが、細胞療法の転帰に基づいてクラスター解析を実施することを含む、態様20または態様21の方法。
23. 細胞療法の転帰を示すまたはそれと相関する該1つまたは複数のゲノム領域を同定することが、同じまたは同様の転帰を有する対象の少なくとも大多数が該ディスプレイにおいて一緒にクラスターを作るかどうかを判定することを含む、態様20または態様21の方法。
24. 同じまたは同様の転帰を有する対象の少なくとも55%、60%、70%、80%、90%、95%またはそれ以上が該ディスプレイにおいて一緒にクラスターを作る場合に、ゲノム領域が同定される、態様23の方法。
25. 前記細胞の全ゲノムが解析される、態様1〜24のいずれかの方法。
26. 前記細胞のゲノムの一部が解析される、態様1〜24のいずれかの方法。
27. 前記ゲノムの一部が、細胞の表現型、活性化状態、活性化シグナルの強度、もしくはエフェクター機能に関連するもしくはそれを示すか、またはそれに関連するもしくはそれを示す可能性が高い1つまたは複数のゲノム領域、任意で1つまたは複数のゲノム座位を含む、態様26の方法。
28. 細胞療法の転帰が、細胞療法の応答、毒性、免疫原性、または表現型もしくは機能;完全奏効、部分奏効、進行性疾患、分子的に検出可能な疾患、再発、奏効の持続性、効果に関連するもしくはそれを示す転帰、または毒性に関連するもしくはそれを示す転帰である、態様1〜27のいずれかの方法。
29. 前記応答が、完全奏効、部分奏効、進行性疾患、または分子的に検出可能な疾患である、態様28の方法。
30. 前記毒性が、サイトカイン放出症候群(CRS)、重度CRS、グレード3以上のCRS、神経毒性、重度の神経毒性、グレード3以上の神経毒性、および/または脳浮腫である、態様28の方法。
31. 前記毒性が用量制限毒性(DLT)である、態様28または態様30の方法。
32. 2〜50、2〜20、2〜10、2〜5、5〜50、5〜20、5〜10、10〜50、10〜20、もしくは20〜50、または約2〜50、約2〜20、約2〜10、約2〜5、約5〜50、約5〜20、約5〜10、約10〜50、約10〜20、もしくは約20〜50のゲノム領域のエピジェネティック特性が解析される、態様1〜31のいずれかの方法。
33. 2つ以上のゲノム領域を含むパネルが同定される、態様1〜32のいずれかの方法。
34. 第1の細胞組成物および第2の細胞組成物が、対象から選択されたまたは単離された初代細胞を含む、態様1〜33のいずれかの方法。
35. 前記細胞が免疫細胞である、態様1〜34のいずれかの方法。
36. 免疫細胞がT細胞またはNK細胞である、態様1〜35のいずれかの方法。
37. T細胞がCD4+および/またはCD8+ T細胞である、態様1〜36のいずれかの方法。
38. 細胞の第2の組成物が解析される、態様1〜37のいずれかの方法。
39. 細胞の第2の組成物が組換え受容体をコードする核酸を含む、態様1〜38のいずれかの方法。
40. 前記核酸分子がウイルスベクターに含まれる、態様39の方法。
41. ウイルスベクターが、アデノウイルス、レンチウイルス、レトロウイルス、ヘルペスウイルス、またはアデノ随伴ウイルスベクターである、態様40の方法。
42. 第1の細胞組成物および/または第2の細胞組成物が、1つまたは複数の条件または作用物質の存在下でインプット組成物を培養することによって生成される、態様1〜41のいずれかの方法。
43. 前記1つまたは複数のゲノム領域が、細胞の活性化状態またはエフェクター状態に関与するかまたは関与する可能性が高い遺伝子を含む、態様1〜42のいずれかの方法。
44. 対象に投与するための細胞組成物を評価する方法であって、
(a)組換え受容体で操作された細胞を含む細胞組成物に含まれる細胞の1つまたは複数のゲノム領域のエピジェネティックプロファイルを解析する工程;および
(b)各ゲノム領域のエピジェネティックプロファイルを、個別に、参照プロファイルと比較する工程であって、その比較によって、該細胞の集団が、対象に投与されたとき、転帰を示すもしくはもたらすか、またはその可能性が高いかどうかが示される、工程
を含む、方法。
45. 細胞療法の転帰が、細胞療法の応答、毒性、免疫原性、または表現型もしくは機能;完全奏効、部分奏効、進行性疾患、分子的に検出可能な疾患、再発、奏効の持続性、効果に関連するもしくはそれを示す転帰、または毒性に関連するもしくはそれを示す転帰である、態様44の方法。
46. 前記応答が完全奏効または部分奏効である、態様45の方法。
47. 前記比較によって、前記細胞組成物が転帰を示すまたは示す可能性が高いことが示される場合に、該細胞組成物を対象に投与する、態様44〜46のいずれかの方法。
48. 前記比較によって、前記細胞組成物が転帰を示さないまたは示さない可能性が高いことが示される場合には、
(i)該細胞組成物が変更された細胞組成物を投与する;
(ii)細胞の用量が変更された該細胞組成物を投与する;
(iii)対象に投与される細胞の投与計画が変更された該細胞組成物を投与する;
(iv)1つもしくは複数の他の治療剤と組み合わせて該細胞組成物を投与する;または
(v)対象に該細胞組成物を投与しない
のいずれかである、態様47の方法。
49. 変更された細胞組成物を投与する前に、変更された細胞組成物に含まれる細胞に対して工程(a)および(b)を繰り返す、態様48の方法。
50. 細胞の投与計画を変更することが、初回用量の細胞を対象に投与した後で、第2用量の細胞を対象に投与することを含む、態様49の方法。
51. 後続の用量の細胞が、初回用量の細胞を投与してから少なくとも1週間、2週間、3週間、4週間、2ヶ月、3ヶ月、4ヶ月、5ヶ月、6ヶ月、9ヶ月、または12ヶ月後に投与される、態様50の方法。
52. 前記1つまたは複数のゲノム領域が、細胞療法に対する応答に関連するか、またはそれを示す、態様44〜51のいずれかの方法。
53. 参照プロファイルが、該1つもしくは複数のゲノム領域の各々のエピジェネティック特性についての閾値、または該1つもしくは複数のゲノム領域内の全体的なエピジェネティック特性についての閾値を含む、態様44〜52のいずれかの方法。
54. 前記閾値が、
同じまたは同様の疾患または状態を有する対象に投与されたときに転帰を示すことが分かっている、細胞組成物の細胞内の該1つまたは複数のゲノム領域におけるエピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティの値またはレベルである、あるいは
該対象に投与されたときに転帰を示すことが分かっている、複数の細胞組成物のそれぞれの細胞からの該1つまたは複数のゲノム領域におけるエピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティの平均(average)、中央、または平均(mean)の値またはレベルである、
態様53の方法。
55. 前記閾値が、正常または健康な対象からの細胞におけるエピジェネティック特性の値もしくはレベルを含む、態様44〜54のいずれかの方法。
56. 前記閾値が、ナイーブな表現型または長命なメモリー表現型を示す細胞におけるエピジェネティック特性の値もしくはレベルを含む、態様44〜55のいずれかの方法。
57. 細胞培養物を評価する方法であって、
(a)1つまたは複数の試験物質または条件の存在下でインプット細胞組成物を培養することによって得られたアウトプット細胞組成物に含まれる細胞の1つまたは複数のゲノム領域のエピジェネティックプロファイルを解析する工程;および
(b)各ゲノム領域のエピジェネティックプロファイルを、個別に、参照プロファイルと比較する工程であって、その比較によって、該細胞が所定の表現型もしくは機能を示すか、または示す可能性が高いかどうかが示される、工程
を含む、方法。
58. 所定の表現型もしくは機能が、該細胞のエフェクター機能もしくは活性化状態を示し、かつ/または該細胞がナイーブな表現型もしくは長命なメモリー表現型を有することを示す、態様57の方法。
59. 前記1つまたは複数の試験物質または条件が、血清の存在もしくは濃度;培養時間;刺激剤の存在もしくは量;刺激剤の種類もしくは程度;アミノ酸の存在もしくは量;温度;インプット組成物の供給源もしくは細胞型;インプット組成物中の細胞型の比もしくはパーセンテージ、任意でCD4+/CD8+ 細胞比;ビーズの存在もしくは量;細胞密度;静置培養;振とう培養;灌流;ウイルスベクターの種類;ベクターコピー数;形質導入アジュバントの存在;凍結保存におけるインプット組成物の細胞密度;組換え受容体の発現の程度;または細胞表現型を調節する化合物の存在を含む、態様57または態様58の方法。
60. 前記1つまたは複数の試験物質または条件が、試験化合物のライブラリーからの1つまたは複数の化合物を含む、態様58または態様59の方法。
61. 前記比較によって、該細胞組成物が表現型もしくは機能を有するかまたは有する可能性が高いことが示される場合、該細胞を培養するための該1つまたは複数の試験物質または条件を選択する工程を含む、態様57〜60のいずれかの方法。
62. 前記比較によって、該細胞組成物が表現型もしくは機能を有しないまたは有しない可能性が高いことが示される場合、1つまたは複数のさらなる試験物質または条件を用いて工程(a)および(b)を繰り返す工程を含む、態様57〜60のいずれかの方法。
63. 参照プロファイルが、該1つもしくは複数のゲノム領域の各々のエピジェネティック特性についての閾値、または該1つもしくは複数のゲノム領域内の全体的なエピジェネティック特性についての閾値を含む、態様57〜62のいずれかの方法。
64. 前記閾値が、
表現型もしくは機能を示すことが分かっている、参照細胞組成物の細胞内の該1つまたは複数のゲノム領域におけるエピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティ、の値もしくはレベルである;あるいは、
表現型もしくは機能を示すことが分かっている、複数の参照細胞組成物のそれぞれの細胞からの該1つまたは複数のゲノム領域におけるエピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティ、の平均(average)、中央、または平均(mean)の値もしくはレベルである;
態様63の方法。
65. 参照細胞組成物が、ナイーブT細胞、長命なメモリーT細胞、セントラルメモリーT細胞(Tcm)、または幹様メモリーT細胞(Tcsm)を示す表現型を有する、態様64の方法。
66. エピジェネティック特性を解析する工程が、該1つまたは複数のゲノム領域にわたってクロマチンアクセシビリティの値もしくはレベルを決定、測定または定量することを含む、態様44〜65のいずれかの方法。
67. エピジェネティック特性を解析する工程が、該1つまたは複数のゲノム領域またはそのサブセットにおいて、エピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティに関連するかまたはそれを示す配列リードの値もしくはレベルを決定、測定または定量することを含む、態様44〜66のいずれかの方法。
68. 値もしくはレベルを決定、測定または定量することが、該1つまたは複数のゲノム領域の各々またはそのサブセット内のFPKM(fragments per kilobase per million of mapped reads:1キロベースあたりの、マップされたリード数100万あたりの断片数)値を決定することを含む、態様66または態様67の方法。
69. 値もしくはレベルを決定、測定または定量することが、該1つまたは複数のゲノム領域の各々またはそのサブセット内のFPKM値を合計または総計することを含む、態様66〜68のいずれかの方法。
70. 前記1つまたは複数のゲノム領域が、少なくとも2〜50、2〜20、2〜10、2〜5、5〜50、5〜20、5〜10、10〜50、10〜20、または20〜50のゲノム領域を含むパネルを含む、態様1〜69のいずれかの方法。
71. 前記1つまたは複数のゲノム領域が、細胞のエフェクター様機能または活性化状態に関連するかまたはそれを示す1つまたは複数のゲノム座位を含む、態様27〜70のいずれかの方法。
72. 前記1つまたは複数のゲノム領域が、Nr4a1、Cblb、Irf4、Tbx21、Eomes、Ifng、Il2ra、Il2、Csf2、Gzmb、Tnfsf10、Gata3、Mir155、Sox21、Ctla4、Lag3、およびPdcd1からなる群より選択される遺伝子座を含む、態様27〜71のいずれかの方法。
73. 前記1つまたは複数のゲノム領域が、Ctla4、Il2ra、Il2、Ifng、およびGzmbからなる群より選択されるゲノム座位を含む、態様27〜72のいずれかの方法。
74. 前記ゲノム領域がゲノム座位または遺伝子を含む、態様27〜73のいずれかの方法。
75. 前記ゲノム領域が遺伝子のオープンリーディングフレームを含む、態様27〜74のいずれかの方法。
76. 前記エピジェネティック特性が、クロマチンアクセシビリティ、ヌクレオソーム占有率、ヒストン修飾、空間的染色体コンフォメーション、転写因子占有率、およびDNAメチル化の中から選択される、態様27〜75のいずれかの方法。
77. 前記エピジェネティック特性がクロマチンアクセシビリティである、態様27〜76のいずれかの方法。
78. クロマチンアクセシビリティが、ハイスループットシーケンシングによるトランスポザーゼ接近可能クロマチンのアッセイ(ATAC-seq)またはハイスループットシーケンシングに連結されたクロマチン免疫沈降(ChIP-seq)によって測定される、態様77の方法。
79. クロマチンアクセシビリティがATAC-seqにより測定される、態様77または態様78の方法。
80. 前記細胞が対象由来のサンプルから得られる、態様1〜79のいずれかの方法。
81. 前記細胞が免疫細胞、任意でT細胞、任意でCD4+および/またはCD8+ T細胞である、態様80の方法。
82. 組換え受容体が疾患もしくは状態に関連する抗原に結合し、それを認識し、それを標的とする;および/または
組換え受容体がT細胞受容体もしくは機能的非T細胞受容体である;および/または
組換え受容体がキメラ抗原受容体(CAR)である;
態様1〜81のいずれかの方法。
83. CARが、抗原に特異的に結合する細胞外抗原認識ドメインとITAMを含む細胞内シグナル伝達ドメインとを含み、任意で、細胞内シグナル伝達ドメインがCD3ゼータ(CD3ζ)鎖の細胞内ドメインを含む;および/または
CARが共刺激シグナル伝達領域をさらに含み、任意で、共刺激シグナル伝達領域がCD28もしくは4-1BBのシグナル伝達ドメインを含む;
態様82の方法。
84. 複数の細胞を含む細胞組成物であって、パネル中の1つまたは複数の遺伝子のエピジェネティック特性のレベルまたは値が、該組成物中の細胞の少なくとも50%で閾値を上回るか、または下回る、細胞組成物。
85. 前記レベルまたは値が、該組成物中の細胞の少なくとも60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%またはそれ以上で閾値を上回るか、または下回る、態様84の細胞組成物。
86. 前記閾値が、
表現型もしくは機能を示すことが分かっている、参照細胞組成物の細胞内の該1つまたは複数のゲノム領域におけるエピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティ、の値もしくはレベルである;あるいは、
表現型もしくは機能を示すことが分かっている、複数の参照細胞組成物のそれぞれの細胞からの該1つまたは複数のゲノム領域におけるエピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティ、の平均(average)、中央、または平均(mean)の値もしくはレベルである;
態様84または態様85の細胞組成物。
87. 参照細胞組成物が、ナイーブT細胞、長命なメモリーT細胞、セントラルメモリーT細胞(Tcm)、または幹様メモリーT細胞(Tcsm)を表す表現型を有する、態様84〜86のいずれかの細胞組成物。
88. 前記パネルが、2〜50、2〜20、2〜10、2〜5、5〜50、5〜20、5〜10、10〜50、10〜20、もしくは20〜50、または約2〜50、約2〜20、約2〜10、約2〜5、約5〜50、約5〜20、約5〜10、約10〜50、約10〜20、もしくは約20〜50のゲノム領域を含む、態様84〜87のいずれかの組成物。
89. 細胞療法による治療の転帰に関連する1つまたは複数のゲノム領域を同定する方法であって、
(a)細胞もしくは細胞集団の1つまたは複数のゲノム領域のエピジェネティック特性を解析または決定する工程であって、該細胞もしくは集団が、(i)組換え受容体を含む第2の組成物を生成するように該組換え受容体で遺伝子操作される細胞の第1の組成物、または(ii)該組換え受容体を含む細胞の第2の組成物に含まれる、工程;および
(b)該1つまたは複数のゲノム領域にわたって全体的に、エピジェネティック特性が細胞療法の転帰を予測する、示す、またはそれと相関する、該1つまたは複数のゲノム領域のうちの1つまたは複数を同定する工程であって、該細胞療法が該組換え受容体を含む細胞の第2の組成物を対象または対象のグループに投与することを含む、工程
を含む、方法。
90. 前記転帰が、有効性、応答、持続性、毒性、もしくは免疫原性に関連するかまたはそれを示す転帰である、態様89の方法。
91. 前記転帰が応答であり、該応答が、完全奏効、部分奏効、進行性疾患、分子的に検出可能な疾患、再発、または奏効の持続性である、態様90の方法。
92. 前記転帰が毒性であり、該毒性が、サイトカイン放出症候群(CRS)、重度CRS、グレード3以上のCRS、神経毒性、重度の神経毒性、グレード3以上の神経毒性、および/または脳浮腫である、90の方法。
93. 前記毒性が用量制限毒性(DLT)である、態様90または92の方法。
94. 第1の組成物が、CD4+初代ヒトT細胞および/もしくはCD8+初代ヒトT細胞について濃縮されている、ならびに/または
第2の組成物が、CD4+初代ヒトT細胞および/もしくはCD8+初代ヒトT細胞について濃縮されている、
態様89〜93のいずれかの方法。
95. 細胞組成物の1つまたは複数の特性または特徴を決定するための方法であって、
T細胞組成物の1つまたは複数のゲノム領域のエピジェネティック特性を解析または決定する工程を含み、
該T細胞組成物がCD4+初代ヒトT細胞および/またはCD8+初代ヒトT細胞について濃縮されている、方法。
96. 前記細胞組成物が、(i)組換え受容体を含む第2のT細胞組成物を生成するように該組換え受容体で遺伝子操作される細胞の第1のT細胞組成物、または(ii)該組換え受容体を含む細胞の第2のT細胞組成物である、態様95の方法。
97. 前記細胞組成物が、70%超もしくは約70%超、75%超もしくは約75%超、80%超もしくは約80%超、85%超もしくは約85%超、90%超もしくは約90%超、95%超もしくは約95%超、または98%超もしくは約98%超のCD4+および/もしくはCD8+初代ヒトT細胞を含む、ならびに/または
前記細胞組成物が、本質的にCD4+および/もしくはCD8+初代ヒトT細胞からなる、
態様84〜96のいずれかの方法。
98. 前記1つまたは複数のゲノム領域のそれぞれのエピジェネティック特性を、個別に、
異なる細胞組成物からの細胞の対応するエピジェネティック特性と、および/または
参照プロファイル、任意で細胞組成物の属性もしくは特徴を示すかまたはそれと相関することが公知の参照プロファイルと
比較する工程をさらに含む、態様95〜97の方法。
99. 前記比較が、
前記細胞組成物内の細胞の状態、表現型、もしくは機能、任意で活性化、エフェクター、もしくはメモリーの状態;該細胞組成物内の細胞の一貫性もしくは均一性;該細胞の組成物が、対象または対象のグループに投与されたとき、転帰を示すもしくはもたらすか、またはその可能性が高いかどうか;外因性核酸の組込みの位置、存在量もしくは頻度;該細胞組成物内の細胞のクローン性;および/または該細胞組成物中の操作細胞の割合もしくは頻度
を示すか、またはそれと相関する、態様98の方法。
100. 細胞組成物の属性または特徴に関連するエピジェネティック特性を決定または同定するための方法であって、
(a)第1の細胞組成物に含まれる細胞もしくは細胞集団の1つもしくは複数のゲノム領域のエピジェネティック特性のレベルもしくは程度または相対的なレベルもしくは程度を決定または測定する工程;
(b)第2の細胞組成物に含まれる細胞もしくは細胞集団の該1つもしくは複数のゲノム領域の該エピジェネティック特性のレベルもしくは程度または相対的なレベルもしくは程度を決定または測定する工程;および
(c)(a)での該レベルもしくは程度と(b)での該レベルもしくは程度を比較する工程であって、該1つもしくは複数のゲノム領域のエピジェネティック特性のレベルもしくは程度の差、任意で有意差が、第1および第2の組成物の一方の細胞に存在するが他方には存在しない属性もしくは特徴を示すかまたはそれと相関する、エピジェネティック特性の存在を同定または決定する、工程
を含む、方法。
101. 第1の組成物と第2の組成物の一方が組換え受容体で遺伝子操作される細胞を含み、かつ第1の組成物と第2の組成物の他方が該組換え受容体を発現するように操作された細胞を含む、
第1の組成物および第2の組成物が、異なるドナー由来の、任意で疾患状態、疾患の重症度、または疾患のタイプに基づいて異なるドナー由来の、初代細胞を含む、
第1の組成物および第2の組成物が、細胞を操作するための作業プロセスの異なる段階または工程の細胞を含む、
第1の組成物と第2の組成物の一方が、細胞の活性、表現型もしくは機能を調節する作用物質と接触させた細胞を含み、第1の組成物と第2の組成物の他方が、そのように接触させてない同様の細胞を含む、または
第1の組成物と第2の組成物の一方が、対象への投与後に、第1および第2の組成物の一方では生じるかまたは生じたが他方では生じない転帰に関連する細胞組成物のサンプルを含む、
態様100の方法。
102. 前記作用物質が、ポリペプチドもしくはタンパク質、ペプチド、抗体、核酸、ウイルスベクターもしくはウイルス調製物、または小分子化合物である、態様101の方法。
103. 前記作用物質が、刺激性試薬、任意で抗CD3/抗CD28;免疫調節剤、CARに特異的な抗イディオタイプ抗体もしくはその抗原結合フラグメント、免疫チェックポイント阻害剤、代謝経路のモジュレーター、アデノシン受容体アンタゴニスト、キナーゼ阻害剤、抗TGFβ抗体もしくは抗TGFβR抗体、またはサイトカインである、態様101または102の方法。
104. 第1の組成物の属性または特徴が、
状態、表現型、もしくは機能、任意で活性化、エフェクターもしくはメモリーの状態、表現型、もしくは機能;外因性核酸の組込みの位置、存在量、もしくは頻度;該細胞組成物内の細胞のクローン性;該細胞組成物中の操作細胞の割合もしくは頻度;および/または該細胞の組成物が対象または対象のグループに投与されたとき、転帰を示すもしくはもたらすか、またはその可能性が高いかどうか
を示す、態様100〜103のいずれかの方法。
105. 前記転帰が、有効性、応答、持続性、毒性、または免疫原性に関連するかまたはそれを示す転帰である、態様100または104の方法。
106. 前記転帰が応答であり、該応答が、完全奏効、部分奏効、進行性疾患、分子的に検出可能な疾患、再発、または奏効の持続性である、態様105の方法。
107. 前記転帰が毒性であり、該毒性が、サイトカイン放出症候群(CRS)、重度CRS、グレード3以上のCRS、神経毒性、重度の神経毒性、グレード3以上の神経毒性、および/または脳浮腫である、106の方法。
108. 前記毒性が用量制限毒性(DLT)である、態様106または107の方法。
109. 複数回繰り返される、態様1100〜108のいずれかの方法。
110. 第1の組成物と第2の組成物の一方の大部分に存在するが他方には存在しないエピジェネティック特性が同定または決定される、態様109の方法。
111. 細胞組成物の属性または特徴を評価する方法であって、
(a)組換え受容体で操作された細胞および/もしくは組換え受容体により遺伝子操作される細胞を含む細胞組成物に含まれる細胞もしくは細胞集団の1つまたは複数のゲノム領域のエピジェネティック特性を解析する工程;および
(b)該1つまたは複数のゲノム領域のエピジェネティック特性を、個別に、参照プロファイルと比較する工程であって、その比較によって、該細胞の組成物がその属性もしくは特徴を示すか、または示す可能性が高いかどうかが示される、工程
を含む、方法。
112. 前記属性または特徴が、
状態、表現型、もしくは機能、任意で活性化、エフェクターもしくはメモリーの状態、表現型、もしくは機能;外因性核酸の組込みの位置、存在量、もしくは頻度;該細胞組成物内の細胞のクローン性;該細胞組成物中の操作細胞の割合もしくは頻度;および/または該細胞の組成物が対象または対象のグループに投与されたとき、転帰を示すもしくはもたらすか、またはその可能性が高いかどうか
を示す、態様111の方法。
113. 前記属性または特徴は、該細胞の組成物が対象または対象のグループに投与されたとき、転帰を示すもしくはもたらすか、またはその可能性が高いかどうかであり、前記方法は、対象に投与するための該細胞組成物を評価するためである、態様113または112の方法。
114. 前記転帰が、効果、応答、持続性、毒性、または免疫原性に関連するかまたはそれを示す転帰である、態様112または113の方法。
115. 前記転帰が応答であり、該応答が、完全奏効、部分奏効、進行性疾患、分子的に検出可能な疾患、再発、または奏効の持続性である、態様114の方法。
116. 前記転帰が毒性であり、該毒性が、サイトカイン放出症候群(CRS)、重度CRS、グレード3以上のCRS、神経毒性、重度の神経毒性、グレード3以上の神経毒性、および/または脳浮腫である、115の方法。
117. 前記毒性が用量制限毒性(DLT)である、態様115または116の方法。
118. 前記比較によって、該細胞組成物が所望の転帰を示すかまたは示す可能性が高いことが示される場合に、該細胞組成物を対象に投与する、態様111〜117のいずれかの方法。
119. 前記比較によって、該細胞組成物が所望の転帰を示さないかまたは示さない可能性が高いことが示される場合には、
(i)該細胞組成物が変更された細胞組成物を投与する;
(ii)細胞の用量が変更された該細胞組成物を投与する;
(iii)対象に投与される細胞の投与計画が変更された該細胞組成物を投与する;
(iv)1つもしくは複数の他の治療剤と組み合わせて該細胞組成物を投与する;または
(v)対象に該細胞組成物を投与しない
のいずれかである、態様111〜118のいずれかの方法。
120. 所望の転帰が、完全奏効、部分奏効、もしくは持続的奏功であり、かつ/またはグレード3以下の神経毒性、すなわちグレード1もしくはグレード2の神経毒性であるか、グレード3以下のCRS、すなわちグレード1もしくはグレード2のCRSであるか、いかなるグレードの神経毒性もしくはいかなるグレードのCRSも含まない、態様118または119の方法。
121. 前記細胞組成物中の細胞を操作するための1つまたは複数の工程において1つまたは複数の作用物質または条件を変えることによって、前記細胞組成物が変更される、態様119または120の方法。
122. 前記1つまたは複数の作用物質または条件が、
血清の存在もしくは濃度;培養時間;刺激剤の存在もしくは量;刺激剤の種類もしくは程度;アミノ酸の存在もしくは量;温度;細胞組成物の供給源もしくは細胞型;細胞組成物中の細胞型の比もしくはパーセンテージ、任意でCD4+/CD8+ 細胞比;ビーズの存在もしくは量;細胞密度;静置培養;振とう培養;灌流;ウイルスベクターの種類;ベクターコピー数;形質導入アジュバントの存在;凍結保存における細胞組成物の細胞密度;組換え受容体の発現の程度;または細胞表現型を調節する化合物の存在
から選択される、態様121の方法。
123. 変更された細胞組成物を投与する前に、変更された細胞組成物に含まれる細胞に対して工程(a)および(b)を繰り返す、態様121または122の方法。
124. 細胞の投与計画を変更することが、初回用量の細胞を対象に投与した後で、第2用量の細胞を対象に投与することを含む、態様123の方法。
125. 後続の用量の細胞が、初回用量の細胞を投与してから少なくとも1週間、2週間、3週間、4週間、2ヶ月、3ヶ月、4ヶ月、5ヶ月、6ヶ月、9ヶ月、または12ヶ月後に投与される、態様124の方法。
126. 参照プロファイルが、該1つもしくは複数のゲノム領域の各々のエピジェネティック特性についての閾値、または該1つもしくは複数のゲノム領域内の全体的なエピジェネティック特性についての閾値を含む、態様111〜125のいずれかの方法。
127. 前記閾値が、
同じまたは同様の疾患または状態を有する対象に投与されたときに所望の転帰を示すことが分かっている、細胞組成物の細胞内の該1つまたは複数のゲノム領域におけるエピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティに関連するかまたはそれを示す値またはレベルである、
対象のグループに個別に投与された複数の細胞組成物のそれぞれの細胞からの該1つもしくは複数のゲノム領域におけるエピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティに関連するかもしくはそれを示す、平均(average)、中央、もしくは平均(mean)の値もしくはレベルであるか、または該値もしくはレベルの標準偏差内である(ここで、該グループの各対象は投与後に所望の転帰を示し続けた)、あるいは
正常もしくは健康な対象からの同様の細胞組成物におけるエピジェネティック特性に関連するかまたはそれを示す値もしくはレベルである、
態様126の方法。
128. 前記比較が差次的アクセシビリティ解析を含む、および/または
参照プロファイルが、該1つまたは複数のゲノム領域内の配列リードのピークを含む参照エピジェネティックマップを含む、
態様111〜125のいずれかの方法。
129. 参照エピジェネティックマップが、同じまたは同様の疾患または状態を有する対象への該細胞もしくは細胞組成物の投与後に、所望の転帰を示すことが分かっている細胞組成物のアクセシビリティ解析、任意でクロマチンアクセシビリティから決定される、
参照エピジェネティックマップが、対象のグループに個別に投与された複数の細胞組成物の間で、アクセシビリティ解析、任意でクロマチンアクセシビリティからの配列リードの共通のピークから決定され、該グループの各対象は投与後に所望の転帰を示し続けた、または
参照エピジェネティックマップが、正常もしくは健康な対象からの同様の細胞組成物のアクセシビリティ解析、任意でクロマチンアクセシビリティから決定される、
態様128の方法。
130. 細胞組成物を評価する方法であって、
(a)1つまたは複数の試験物質もしくは条件の存在下でインプット組成物を培養することによって得られた、アウトプット細胞組成物に含まれる細胞の、および/またはインプット組成物に含まれる細胞の、1つまたは複数のゲノム領域のエピジェネティック特性を解析する工程;ならびに
(b)該1つまたは複数のゲノム領域のエピジェネティック特性を、個別に、参照プロファイルと比較する工程であって、その比較によって、該細胞が所定の特徴もしくは属性を示すか、または示す可能性が高いかどうかが示される、工程
を含む、方法。
131. 所定の特徴または属性が、
前記組成物内の細胞の状態、表現型、もしくは機能;該細胞組成物内の細胞の一貫性もしくは均一性;外因性核酸の組込みの位置、存在量、もしくは頻度;該細胞組成物内の細胞のクローン性;および/または該細胞組成物中の操作細胞の割合もしくは頻度
である、態様130の方法。
132. 所定の表現型または属性が、
前記細胞のエフェクター機能もしくは活性化状態を示し、かつ/または該細胞がナイーブな表現型もしくは長命なメモリー表現型を有することを示す、状態、表現型、または機能
である、態様131の方法。
133. 前記1つまたは複数の試験物質または条件が、
血清の存在もしくは濃度;培養時間;刺激剤の存在もしくは量;刺激剤の種類もしくは程度;アミノ酸の存在もしくは量;温度;インプット組成物の供給源もしくは細胞型;インプット組成物中の細胞型の比もしくはパーセンテージ、任意でCD4+/CD8+ 細胞比;ビーズの存在もしくは量;細胞密度;静置培養;振とう培養;灌流;ウイルスベクターの種類;ベクターコピー数;形質導入アジュバントの存在;凍結保存におけるインプット組成物の細胞密度;組換え受容体の発現の程度;または細胞表現型を調節する化合物の存在
を含む、態様131または132の方法。
134. 前記1つまたは複数の試験物質または条件が、試験化合物のライブラリーからの1つまたは複数の化合物を含む、態様131〜133のいずれかの方法。
135. 前記比較によって、該細胞組成物が所望の特徴または属性を有するかまたは有する可能性が高いことが示される場合、該細胞を培養するための1つまたは複数の試験物質または条件を選択する工程、および/あるいは対象に投与するための該細胞組成物を選択する工程を含む、態様131〜134のいずれかの方法。
136. 前記比較によって、該細胞組成物が所望の特徴または属性を有しないかまたは有しない可能性が高いことが示される場合、1つまたは複数のさらなる試験物質または条件を用いて工程(a)および(b)を繰り返す工程を含む、態様131〜134のいずれかの方法。
137. 参照プロファイルが、該1つもしくは複数のゲノム領域の各々のエピジェネティック特性についての閾値、または該1つもしくは複数のゲノム領域内の全体的なエピジェネティック特性についての閾値を含む、態様131〜136のいずれかの方法。
138. 前記閾値が、
所望の属性または特徴を示すことが公知の、細胞組成物の細胞内の該1つまたは複数のゲノム領域におけるエピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティに関連するかまたはそれを示す、値またはレベルである、
所望の属性または特徴を示すことが公知の、複数の細胞組成物のそれぞれの細胞からの該1つもしくは複数のゲノム領域におけるエピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティに関連するかもしくはそれを示す、平均(average)、中央、もしくは平均(mean)の値もしくはレベルであるかまたは該値もしくはレベルの標準偏差内である、
態様137の方法。
139. 前記比較が差次的アクセシビリティ解析を含む、および/または
参照プロファイルが、該1つもしくは複数のゲノム領域内の配列リードのピークを含む参照エピジェネティックマップを含む、
態様131〜136のいずれかの方法。
140. 参照エピジェネティックマップが、所望の属性または特徴を示すことが公知の細胞組成物のアクセシビリティ解析、任意でクロマチンアクセシビリティから決定される、
参照エピジェネティックマップが、所望の属性または特徴を示すことが公知の複数の細胞組成物の間で、アクセシビリティ解析、任意でクロマチンアクセシビリティからの配列リードの共通のピークから決定される、
態様139の方法。
141. 所望の転帰または特徴が、ナイーブT細胞、長命メモリーT細胞、セントラルメモリーT細胞(Tcm)、または幹様メモリーT細胞(Tcsm)を示す表現型または機能である、態様131〜140のいずれかの方法。
142. 前記ゲノム領域がゲノム座位または遺伝子を含む、態様89〜141のいずれかの方法。
143. 前記ゲノム領域が、コード領域、遺伝子のオープンリーディングフレーム、非コード領域、遺伝子間領域、または調節エレメントを含む、態様89〜142のいずれかの方法。
144. 前記ゲノム領域が遺伝子のオープンリーディングフレームを含む、態様89〜143のいずれかの方法。
145. 前記ゲノム領域が遺伝子間領域または調節エレメントを含む、態様89〜143のいずれかの方法。
146. 前記ゲノム領域が、イントロン、エクソン、シス調節エレメント、プロモーター、エンハンサー、上流活性化配列(UAS)、3'非翻訳領域(UTR)、5'UTR、非コードRNA生成領域、非コードRNA(ncRNA)遺伝子、miRNA遺伝子、siRNA遺伝子、piRNA遺伝子、snoRNA遺伝子、lncRNA遺伝子、リボソームRNA(rRNA)遺伝子、スモールRNA結合部位、非コードRNA結合部位、偽遺伝子、転写終結部位(TTS)、リピート、テロメア領域、アクセス可能なクロマチン領域、アクセス不可能なクロマチン領域、オープンクロマチン領域、および/またはヘテロクロマチン領域を含む、態様89〜143および145のいずれかの方法。
147. エピジェネティック特性が、クロマチンアクセシビリティ、ヌクレオソーム占有率、ヒストン修飾、空間的染色体コンフォメーション、転写因子占有率、およびDNAメチル化の中から選択される、態様89〜146のいずれかの方法。
148. エピジェネティック特性がクロマチンアクセシビリティである、態様89〜147のいずれかの方法。
149. エピジェネティック特性が、クロマチンアクセシビリティ、クロマチンアクセシビリティのレベルもしくは程度、クロマチンアクセシビリティの相対的なレベルもしくは程度を含む、および/または
エピジェネティック特性が、該ゲノム領域のクロマチンアクセシビリティの程度もしくはレベル、その相対的な程度もしくはレベル、またはそのプロファイルもしくはマップを含む、
態様89〜148のいずれかの方法。
150. クロマチンアクセシビリティが、ハイスループットシーケンシングによるトランスポザーゼ接近可能クロマチンのアッセイ(ATAC-seq)またはハイスループットシーケンシングに連結されたクロマチン免疫沈降(ChIP-seq)によって測定される、態様147〜149のいずれかの方法。
151. クロマチンアクセシビリティがATAC-seqにより測定される、態様147〜150のいずれかの方法。
152. エピジェネティック特性を評価することが、
(1)細胞または細胞集団からクロマチンを単離すること、
(2)クロマチンを挿入酵素複合体(insertional enzyme complex)で処理して、ゲノムDNAのタグ付加断片を生成させること、
(3)タグ付加断片の全部もしくは一部を配列決定して、複数の配列リードを生成すること、
(4)配列リードをゲノムのゲノム領域にアライメントさせ、フィルタリングし、かつマッピングすること、および
(5)各細胞または細胞集団について複数のゲノム領域における配列リードのピークを決定または同定すること
を含む、態様147〜151のいずれかの方法。
153. エピジェネティック特性を解析または評価することが、配列リードのピークを比較すること、および任意で、2つ以上の細胞または細胞組成物からのサンプル間で異なっている配列リードのピークを同定することをさらに含む、態様152の方法。
154. 配列リードのピークが、
濃縮されている、バックグラウンドを上回る、かつ/または周囲の領域の配列リードと比較してより高いピークシグナル、レベル、または値を有する、配列リード
を含む、態様152または153の方法。
155. エピジェネティック特性を解析または評価することが、2つ以上の細胞集団からのサンプル間で異なっている配列リードのピークを含むとして同定されたゲノム領域のモチーフ解析、転写因子占有率解析、および/または生物学的経路解析を行うことをさらに含む、態様152〜154のいずれかの方法。
156. エピジェネティック特性を解析または評価することが、配列リードのピークを含むゲノム領域内のヌクレオソームの位置を決定することをさらに含む、態様152〜155のいずれかの方法。
157. エピジェネティック特性を解析することが、
前記1つまたは複数のゲノム領域の各々またはそのサブセットに沿って、エピジェネティック特性に関連するかまたはそれを示す配列リード、任意でクロマチンアクセシビリティに関連するかまたはそれを示す配列リードのプロファイルを示すエピジェネティックマップを作成することを含む、および/あるいは
該ゲノム領域の長さに沿った複数の部位または部分の各々について、エピジェネティックなリードアウト、任意でクロマチンアクセシビリティを示す1つまたは複数の配列リードを該部位または部分で生成させることを含み、ここで、該1つまたは複数の配列リードの量が、該部位または部分における該エピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティの程度またはレベルを示す、
態様89〜156のいずれかの方法。
158. 前記解析することが、任意で、該ゲノム領域にわたって、該エピジェネティック特性の全体的な程度またはレベルを決定すること、任意でアクセシビリティの全体的な程度またはレベルを決定することをさらに含む、態様157の方法。
159. エピジェネティック特性を解析することが、該1つまたは複数のゲノム領域にわたってクロマチンアクセシビリティの値またはレベルを決定、測定、または定量することを含む、態様89〜158のいずれかの方法。
160. エピジェネティック特性を解析することが、該1つまたは複数のゲノム領域またはそのサブセットにわたって、エピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティに関連するかまたはそれを示す値またはレベルを決定、測定、または定量することを含む、態様89〜159のいずれかの方法。
161. 前記値もしくはレベルが、該1つもしくは複数のゲノム領域の各々またはそのサブセット内のFPKM(fragments per kilobase per million of mapped reads:1キロベースあたりの、マップされたリード数100万あたりの断片数)値であるか、またはFPKM値を決定することを含む、態様127、138、159または160の方法。
162. 前記値またはレベルが、該1つもしくは複数のゲノム領域の各々またはそのサブセット内のFPKM(fragments per kilobase per million of mapped reads)値であるか、またはFPKM値を合計もしくは総計することを含む、態様127、138、および159〜161のいずれかの方法。
163. 前記解析が、前記リードの配列同一性、質、マッピング位置、または他のシーケンシング特性に基づいて、ミトコンドリアリードおよび/または追加の汚染配列を除去するための工程を含む、態様89〜162のいずれかの方法。
164. 前記解析が、定量的精度を改善するために重複リードを除去するための工程を含む、態様89〜163のいずれかの方法。
165. 前記解析が、配列リードを、特定のエピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティまたはクロマチン占有率を表すサブセットに分離するための工程を含み、配列決定された断片のサイズが、該エピジェネティック特性を表す程度またはレベルを決定するために使用される、態様89〜164のいずれかの方法。
166. 工程(a)および(b)が、組換え受容体で操作された細胞を含む第2の細胞組成物をそれぞれ独立して投与された複数の対象からの細胞組成物に対して実施される、態様89〜94および142〜165のいずれかの方法。
167. 各ゲノム領域またはそのサブセットについて、複数の対象のそれぞれについての細胞療法の転帰にマッピングされた各ゲノム座位の配列リードの値またはレベルを含むディスプレイを作製する、態様89〜94および142〜166のいずれかの方法。
168. ディスプレイがヒートマップ、散布図、階層的クラスタリング、および/またはコンステレーションプロットを含む、態様167の方法。
169. 前記1つまたは複数のゲノム領域を同定することが、細胞療法の転帰に基づいてクラスター解析を実施することを含む、態様89〜169および142〜169のいずれかの方法。
170. 細胞療法の転帰を示すまたはそれと相関する前記1つまたは複数のゲノム領域を同定することが、同じまたは同様の転帰を有する対象の少なくとも大多数が該ディスプレイにおいて一緒にクラスターを作るかどうかを判定することを含む、態様89〜169および142〜169のいずれかの方法。
171. 同じまたは同様の転帰を有する対象の少なくとも55%、60%、70%、80%、90%、95%またはそれ以上が該ディスプレイにおいて一緒にクラスターを作る場合に、ゲノム領域が同定される、態様170の方法。
172. 前記細胞の全ゲノムが解析される、態様89〜171のいずれかの方法。
173. 前記細胞のゲノムの一部が解析される、態様89〜172のいずれかの方法。
174. 前記ゲノムの一部が、
細胞の表現型、活性化状態、活性化シグナルの強度、もしくはエフェクター機能に関連するもしくはそれを示すか、またはそれに関連するもしくはそれを示す可能性が高い、1つまたは複数のゲノム領域、任意で1つまたは複数のゲノム座位
を含む、態様173の方法。
175. 前記解析が、主成分解析(PCA)、生物学的経路解析、遺伝子オントロジー(GO)解析、および/またはモチーフ解析を実施することをさらに含む、態様89〜174のいずれかの方法。
176. 前記解析が、T細胞メモリー表現型、T細胞活性化状態、エフェクター機能、サイトカイン応答、輸送、持続性、または消耗性に関連する1つまたは複数のゲノム領域の生物学的経路解析および/または遺伝子サブセット解析を含む、態様175の方法。
177. 前記1つまたは複数のゲノム領域が、細胞のエフェクター様機能または活性化状態に関連するかまたはそれを示す1つまたは複数のゲノム座位を含む、態様174〜176のいずれかの方法。
178. 該1つまたは複数のゲノム領域が、Nr4a1、Cblb、Irf4、Tbx21、Eomes、Ifng、Il2ra、Il2、Csf2、Gzmb、Tnfsf10、Gata3、Mir155、Sox21、Ctla4、Lag3、およびPdcd1からなる群より選択される遺伝子座を含む、態様174〜177のいずれかの方法。
179. 前記1つまたは複数のゲノム領域が、Ctla4、Il2ra、Il2、Ifng、およびGzmbからなる群より選択されるゲノム座位を含む、態様174〜178のいずれかの方法。
180. 2〜50、2〜20、2〜10、2〜5、5〜50、5〜20、5〜10、10〜50、10〜20、もしくは20〜50、または約2〜50、約2〜20、約2〜10、約2〜5、約5〜50、約5〜20、約5〜10、約10〜50、約10〜20、もしくは約20〜50のゲノム領域のエピジェネティック特性が解析される、または
少なくとも2、3、5、6、7、8、9、10、15、20、30、40、50、60、70、80、90、100、200、300、400、500、もしくはそれ以上のゲノム領域のエピジェネティック特性が解析される、または
1つのゲノム領域のみのエピジェネティック特性が解析される、
態様89〜180のいずれかの方法。
181. 2つ以上のゲノム領域を含むパネルが同定される、態様89〜180のいずれかの方法。
182. トランスジーンの組込みを評価する方法であって、組換え受容体で遺伝子操作された細胞または細胞組成物において、トランスジーンの核酸配列を含む1つまたは複数のゲノム領域のエピジェネティック特性を決定する工程を含む、方法。
183. 前記遺伝子操作が、細胞組成物の1つまたは複数の細胞内に、組換え受容体をコードする核酸を導入することによって行われる、態様182の方法。
184. 前記導入が、前記核酸を含むウイルスベクターによる形質導入によるものである、態様183の方法。
185. エピジェネティック特性がクロマチンアクセシビリティである、態様182〜184のいずれかの方法。
186. エピジェネティック特性が、クロマチンアクセシビリティ、クロマチンアクセシビリティのレベルもしくは程度、クロマチンアクセシビリティの相対的なレベルもしくは程度を含む、および/または
エピジェネティック特性が、該ゲノム領域のクロマチンアクセシビリティの程度もしくはレベル、その相対的な程度もしくはレベル、またはそのプロファイルもしくはマップを含む、
態様182〜185のいずれかの方法。
187. クロマチンアクセシビリティが、ハイスループットシーケンシングによるトランスポザーゼ接近可能クロマチンのアッセイ(ATAC-seq)またはハイスループットシーケンシングに連結されたクロマチン免疫沈降(ChIP-seq)によって測定される、態様182〜186のいずれかの方法。
188. クロマチンアクセシビリティがATAC-seqにより測定される、態様182〜187のいずれかの方法。
189. エピジェネティック特性を評価することが、
(1)細胞または細胞集団からクロマチンを単離すること、
(2)クロマチンを挿入酵素複合体で処理して、ゲノムDNAのタグ付加断片を生成させること、
(3)タグ付加断片の全部もしくは一部を配列決定して、複数の配列リードを生成すること、
(4)配列リードをゲノムのゲノム領域にアライメントさせ、フィルタリングし、かつマッピングすること、および
(5)各細胞または細胞集団について複数のゲノム領域における配列リードのピークを決定または同定すること
を含む、態様188の方法。
190. エピジェネティック特性を解析または評価することが、トランスジーンの核酸配列にマッピングされるかまたはそれに一致する配列リードのピークを決定することをさらに含む、態様189の方法。
191. 配列リードのピークが、
濃縮されている、バックグラウンドを上回る、かつ/または周囲の領域の配列リードと比較してより高いピークシグナル、レベル、または値を有する、配列リード
を含む、態様182〜190のいずれかの方法。
192. エピジェネティック特性を解析することが、
トランスジーンの核酸配列を含むゲノム領域の、エピジェネティック特性に関連するかまたはそれを示す配列リード、任意でクロマチンアクセシビリティに関連するかまたはそれを示す配列リードのプロファイルを示すエピジェネティックマップを作成することを含み、かつ/または
該ゲノム領域の長さに沿ったトランスジーンの核酸配列を含むゲノム領域について、エピジェネティックなリードアウト、任意でクロマチンアクセシビリティを示す1つまたは複数の配列リードを該領域で生成させることを含み、ここで、該1つまたは複数の配列リードの量が、該領域における該エピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティ、の程度もしくはレベルを示す、
態様182〜191のいずれかの方法。
193. エピジェネティック特性を決定することが、トランスジーンの核酸配列を含むゲノム領域にわたってクロマチンアクセシビリティの値またはレベルを決定、測定、または定量することを含む、態様182〜192のいずれかの方法。
194. エピジェネティック特性を決定することが、トランスジーンの核酸配列を含むゲノム領域にわたって、エピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティに関連するかまたはそれを示す値またはレベルを決定、測定、または定量することを含む、態様182〜193のいずれかの方法。
195. 前記細胞組成物、任意で細胞の第1の組成物および/または第2の組成物が、対象由来のサンプルから得られたおよび/または対象から選択もしくは単離された初代細胞を含む、態様89〜194のいずれかの方法。
196. 前記細胞が免疫細胞である、態様89〜195のいずれかの方法。
197. 免疫細胞がT細胞またはNK細胞である、態様89〜196のいずれかの方法。
198. T細胞がCD4+および/またはCD8+ T細胞である、態様89〜197のいずれかの方法。
199. 組換え受容体が、疾患もしくは状態に関連する抗原に結合する、それを認識する、もしくはそれを標的とする、および/または
組換え受容体がT細胞受容体もしくは機能的非T細胞受容体である、および/または
組換え受容体がキメラ抗原受容体(CAR)である、
態様89〜198のいずれかの方法。
200. CARが、抗原に特異的に結合する細胞外抗原認識ドメインと、ITAMを含む細胞内シグナル伝達ドメインとを含み、任意で、細胞内シグナル伝達ドメインがCD3ゼータ(CD3ζ)鎖の細胞内ドメインを含む、および/または
CARが、任意でCD28もしくは4-1BBのシグナル伝達ドメインを含む共刺激シグナル伝達領域をさらに含む、
態様199の方法。
以下の実施例は、例示を目的として含まれるにすぎず、本発明の範囲を限定することを意図しない。
キメラ抗原受容体で遺伝子操作されたCD4+/CD8+ T細胞の組成物を、シーケンシングによるトランスポザーゼ接近可能クロマチンのアッセイ (ATAC-Seq)を使用してクロマチンアクセシビリティについて評価した。
ATAC-Seqを使用し、遺伝子操作された細胞を含有する細胞組成物中のT細胞活性化状態または応答と関連する遺伝子のクロマチンアクセシビリティを評価し、細胞内サイトカイン染色(ICS;任意で、細胞内フローサイトメトリーと呼ばれる)による同じ遺伝子のタンパク質発現と比較した。実施例1に記載されるように産生された、抗-CD19 CARを発現する遺伝子操作されたヒトT細胞を解凍した。フローサイトメトリーによるタンパク質マーカーの評価のために、細胞を、ゴルジ阻害剤の存在下で酢酸ミリスチン酸ホルボール(PMA)/イオノマイシンで培養中に再刺激し、そしてフローサイトメトリーによって評価した。遺伝子のクロマチンアクセシビリティを測定するために、遺伝子操作された細胞を、さらなる再刺激なしで、実施例1に概説されたようにATAC-seqによって評価した。
ATAC-seqを使用する全ゲノム解析を、実施例1において上述されたように産生された抗-CD19 CARを発現する遺伝子操作されたヒトT細胞を含有するCDPからの解凍されたCD8+細胞に対して行った。ATAC-seqの結果を、独立して、治療が完全奏効(CR)、進行性疾患(PD)または部分奏効(PR)をもたらしたかどうかに基づく、自己由来操作細胞での治療に対する対象の応答転帰とさらに相関させた。アスタリスクは細胞投与開始後3ヶ月でCRからPDへ変わった対象を示す。正常ドナー(ND)CD8+細胞の全ゲノム解析もATAC-seqによって評価した。階層的クラスタリングを、各遺伝子の遺伝子本体にわたるFPKMの合計によって計算されたような、各遺伝子についてのクロマチンアクセシビリティの差異に基づいて行い、これは、各遺伝子について低(青色)から高(赤色)へスケーリングされた。
対象から得られたが抗-CD19 CARで操作されなかったT細胞を含有する、凍結保存されたCMATサンプルを、表現型に基づいて、ナイーブT細胞(TN)、セントラルメモリーT細胞(TCM)、エフェクター細胞およびエファクターメモリーT細胞(TE+EM)、またはエフェクターメモリーRA(TEMRA)へ分離した。各サブセットからの細胞を、Immgen Consortium (Best et al., Nature Immunology (2013) 14:404-412)によって同定されたメモリーCD8+ T細胞モジュールからの選択された遺伝子サブセットを示した6つの遺伝子パネルの各々のクロマチンアクセシビリティについて評価した。階層的クラスタリングを、各遺伝子の遺伝子本体にわたるFPKMの合計によって計算されたような、各遺伝子についてのクロマチンアクセシビリティの差異に基づいて行い、これは、各遺伝子について低(青色)から高(赤色)へスケーリングされた。評価された細胞タイプについての各遺伝子パネルについてのクロマチンアクセシビリティのシグネチャプロファイルを、図5Aに示す。結果は、遺伝子サブセットのこれらのパネルのクロマチンアクセシビリティは、細胞の表現型エフェクター様状態を示すことを実証した。
実施例1において上述されたように産生された抗-CD19 CARを発現する遺伝子操作されたヒトT細胞を含有するCDPからの解凍されたCD8+細胞を、T細胞のシグナルおよびエフェクター機能の強度と関連する遺伝子座で、各遺伝子の遺伝子本体にわたるFPKMの合計によって計算されるような、クロマチンアクセシビリティについてさらに解析した。ATAC-seqの結果を、独立して、治療が完全奏効(CR)、進行性疾患(PD)または部分奏効(PR)をもたらしたかどうかに基づく、自己由来操作細胞での治療に対する対象の応答転帰とさらに相関させた。正常ドナー(ND)CD8+細胞もATAC-seqによって評価した。
遺伝子発現およびクロマチンアクセシビリティを、レナリドマイドの存在または非存在下における、刺激時のCAR T細胞において評価した。
例示的な免疫遺伝子(例えば、サイトカイン、ケモカイン、細胞表面マーカー)でのまたは付近でのクロマチンアクセシビリティを、実施例1に記載された例示的な抗-CD19 CARでの遺伝子操作前および後の細胞組成物からのサンプル間で評価および比較した。凍結保存されたCD4+またはCD8+操作細胞組成物(CDP)または操作へ供されなかったマッチしたサンプル(CMAT)から、サンプルを解凍した。場合によっては、CMATサンプルを、解析のためにナイーブT細胞(TN)、セントラルメモリーT細胞(TCM)、エフェクターおよびエフェクターメモリーT細胞(TE+EM)またはエフェクターメモリーRA(TEMRA)として表現型によって分離した。実質的に実施例1に記載されるように、ライブラリーを作製した。
実施例1に記載されるような、同一のドナーからのCD8+ CDP細胞およびCD8+ CMAT細胞を、以下のように表面マーカー発現および表現型に基づいて亜集団へ分離した:CD27+CCR7+、CD27+CCR7-、CD27-CCR7-、ナイーブT細胞(TN)、セントラルメモリーT細胞(TCM)、エフェクター細胞およびエファクターメモリーT細胞(TE+EM)ならびにエフェクターメモリーRA(TEMRA)。一般に実施例7に記載されるように、ATAC-seqを亜集団に対して行った。アクセシビリティピークを決定し、細胞の亜集団間で共通のまたは重複するピークおよびユニークなピークを評価することによってゲノミックインターバル解析へ供した。
CDP細胞組成物中のゲノミックアクセシビリティおよびピークプロファイルと、操作T細胞が投与された対象における応答転帰との関係を、評価した。CD4+およびCD8+ CDP細胞アクセシビリティピークプロファイルを、一般に上記実施例1および3に記載されるように、自己由来操作細胞組成物が投与された対象についてATAC-seqによって決定した。
ATAC-seqを使用し、操作細胞におけるキメラ抗原受容体(CAR)をコードするウイルスベクターの組込みに関する様々なパラメータを評価した。
クロマチンアクセシビリティピークプロファイルを、異なる抗-CD19 CAR+ T細胞CDP T細胞組成物およびCMAT T細胞組成物において、または抗-CD19 CAR+ T細胞の投与を受けた対象からのCD8+ 抗-CD19 CAR+ T細胞において、T細胞受容体(TCR)鎖をコードする遺伝子座にわたって評価した。
異なるキメラ抗原受容体での遺伝子操作前および後の、3人の異なる健康なドナーからのCD4+/CD8+ T細胞の組成物を、主成分分析(PCA)、差次的アクセシビリティ解析、生物学的経路解析、および遺伝子の選択されたサブセットでの解析を含む追加の下流解析と共に、ATAC-seqを使用してクロマチンアクセシビリティについて評価した。
クロマチンアクセシビリティプロファイルを、キメラ抗原受容体(CAR)を発現する自己由来操作細胞が投与された、臨床研究中の対象からのCMATおよびCDPサンプルにおいて評価した。アクセシビリティプロファイルを、ある応答転帰を達成した対象または毒性を示した対象において、決定および比較した。
再発性または難治性(R/R)侵攻型非ホジキンリンパ腫(NHL)を有する成人ヒト対象に、抗-CD19 CARを発現する自己由来操作CD4+および/またはCD8+ T細胞を投与した。操作細胞の作製のために、CD4+/CD8+ T細胞を、PBMCの白血球搬出からの免疫親和性に基づく濃縮によって単離し、凍結保存した(CMAT、操作前)。単離されたCD4+/CD8+T細胞を、活性化し、抗-CD19 CARをコードするウイルスベクターで形質導入し、このウイルスベクターは、抗-CD19 scFv、免疫グロブリン由来のスペーサー、CD28由来の膜貫通ドメイン、4-1BB由来の補助刺激領域、およびCD3ゼータ細胞内シグナル伝達ドメインを含有した。このウイルスベクターは、切断型受容体をコードする配列さらに含有し、これは、CAR発現についての代理マーカーとして役立ち;T2Aリボソームスキップ配列によってCAR配列から分離された。結果として生じた操作細胞を凍結保存した(CDP、凍結保存操作細胞組成物)。
24人の対象からの合計82個のCD4+またはCD8+ CMATまたはCDPサンプルを、一般に実施例1に記載されるように、ATAC-seqによってアッセイした。得られた配列をマッピングし、ATAC-seqアクセシビリティピークを、MACS2を使用してコールした。得られた配列およびピークを、データの一貫性および忠実度を保証するために、アンマップド、アンペアードおよびデュプリケートリード、ミトコンドリアDNAの割合、有効なシーケンス深さ、0.1以下の偽発見率(FDR)を有するMACS2ピークの数、ピーク内のリードの割合(FRiP)、およびユニークなピークの数を含む、様々なシーケンシング品質管理メトリクスを使用して解析した。7つのサンプルを低い濃縮および/またはデータ忠実度のために除外した。
各遺伝子のプロモーター領域についての正規化アクセシビリティカウントメトリック(プロモーターアクセシビリティ)を、CD4+およびCD8+細胞集団中の各遺伝子座でのクロマチンアクセシビリティに基づいて、細胞タイプの確認としてCDPおよびCMAT細胞集団中のCD4およびCD8Aプロモーターで評価した。CD4プロモーターでのアクセシビリティに対するCD8Aプロモーターでのアクセシビリティの比率を決定した。図21に示されるように、CD8A:CD4アクセシビリティ比は、CDPおよびCMATサンプルの両方について、各組成物のCD4+またはCD8+状態を反映した。
差次的アクセシビリティ解析を、操作細胞組成物の投与後、異なる応答転帰または毒性転帰の達成へ進んだ対象由来のサンプルにおいて、異なるアクセシビリティを有するピークについて、行った。
一般に上述されるような、コンセンサスピークセット上の正規化カウントに対するPCA、および異なる応答転帰または毒性転帰を達成した対象からのCDPまたはCMATサンプル中の差次的アクセシビリティ解析。CDPサンプルについてのPCA(コンセンサスセット:112,495ピーク)は、一般に、CD4+およびCD8+サンプルが細胞タイプ(CD4+またはCD8+細胞)に基づいてクラスター化することを示した。CMATサンプルのPCA(コンセンサスセット:106,867ピーク)も、一般に、サンプルが、細胞タイプ(CD4+またはCD8+)に基づいてクラスター化したが、これらのサンプルはCDPサンプルほどしっかりとはクラスター化しなかったことを示し、これは、可変性が、CDPサンプル内の可変性と比較して、異なるCMATサンプル内でより大きかったことを示す。
改変ATAC-seq法を使用し、キメラ抗原受容体で遺伝子操作されたCD8+ T細胞におけるクロマチンアクセシビリティプロファイルを評価し、実施例1に一般に記載されるATAC-seq法と比較した。
Claims (112)
- 細胞療法による治療の転帰に関連する1つまたは複数のゲノム領域を同定する方法であって、
(a)細胞もしくは細胞集団の1つまたは複数のゲノム領域のエピジェネティック特性を解析または決定する工程であって、該細胞もしくは集団が、(i)組換え受容体を含む第2の組成物を生成するように該組換え受容体で遺伝子操作される細胞の第1の組成物中、または(ii)該組換え受容体を含む細胞の第2の組成物中に含まれる、工程;および
(b)該1つまたは複数のゲノム領域にわたって全体的に、エピジェネティック特性が細胞療法の転帰を予測する、示す、またはそれと相関する、該1つまたは複数のゲノム領域のうちの1つまたは複数を同定する工程であって、該細胞療法が該組換え受容体を含む細胞の第2の組成物を対象または対象のグループに投与することを含む、工程
を含む、方法。 - 前記転帰が、有効性、応答、持続性、毒性、もしくは免疫原性に関連するかまたはそれを示す転帰である、請求項1に記載の方法。
- 前記転帰が応答であり、該応答が、完全奏効、部分奏効、進行性疾患、分子的に検出可能な疾患、再発、または奏効の持続性である、請求項2に記載の方法。
- 前記転帰が毒性であり、該毒性が、サイトカイン放出症候群(CRS)、重度CRS、グレード3以上のCRS、神経毒性、重度の神経毒性、グレード3以上の神経毒性、および/または脳浮腫である、請求項2に記載の方法。
- 前記毒性が用量制限毒性(DLT)である、請求項2または4に記載の方法。
- 第1の組成物が、CD4+初代ヒトT細胞および/もしくはCD8+初代ヒトT細胞について濃縮されている、ならびに/または
第2の組成物が、CD4+初代ヒトT細胞および/もしくはCD8+初代ヒトT細胞について濃縮されている、
請求項1〜5のいずれか一項に記載の方法。 - 細胞組成物の1つまたは複数の特性または特徴を決定するための方法であって、
T細胞組成物の1つまたは複数のゲノム領域のエピジェネティック特性を解析または決定する工程を含み、
該T細胞組成物がCD4+初代ヒトT細胞および/またはCD8+初代ヒトT細胞について濃縮されている、方法。 - 前記細胞組成物が、(i)組換え受容体を含む第2のT細胞組成物を生成するように該組換え受容体で遺伝子操作される細胞の第1のT細胞組成物、または(ii)該組換え受容体を含む細胞の第2のT細胞組成物である、請求項7に記載の方法。
- 前記細胞組成物が、70%超もしくは約70%超、75%超もしくは約75%超、80%超もしくは約80%超、85%超もしくは約85%超、90%超もしくは約90%超、95%超もしくは約95%超、または98%超もしくは約98%超のCD4+および/もしくはCD8+初代ヒトT細胞を含む、ならびに/または
前記細胞組成物が、本質的にCD4+および/もしくはCD8+初代ヒトT細胞からなる、
請求項6〜8のいずれか一項に記載の方法。 - 前記1つまたは複数のゲノム領域のそれぞれのエピジェネティック特性を、個別に、
異なる細胞組成物からの細胞の対応するエピジェネティック特性と、および/または
参照プロファイル、任意で細胞組成物の属性もしくは特徴を示すかまたはそれと相関することが公知の参照プロファイルと
比較する工程をさらに含む、請求項7または8に記載の方法。 - 前記比較が、
前記細胞組成物内の細胞の状態、表現型、もしくは機能、任意で活性化、エフェクター、もしくはメモリーの状態;該細胞組成物内の細胞の一貫性もしくは均一性;該細胞の組成物が、対象または対象のグループに投与されたとき、転帰を示すもしくはもたらすか、またはその可能性が高いかどうか;外因性核酸の組込みの位置、存在量もしくは頻度;該細胞組成物内の細胞のクローン性;および/または該細胞組成物中の操作細胞の割合もしくは頻度
を示すか、またはそれと相関する、請求項10に記載の方法。 - 細胞組成物の属性または特徴に関連するエピジェネティック特性を決定または同定するための方法であって、
(a)第1の細胞組成物に含まれる細胞もしくは細胞集団の1つもしくは複数のゲノム領域のエピジェネティック特性のレベルもしくは程度または相対的なレベルもしくは程度を決定または測定する工程;
(b)第2の細胞組成物に含まれる細胞もしくは細胞集団の該1つもしくは複数のゲノム領域の該エピジェネティック特性のレベルもしくは程度または相対的なレベルもしくは程度を決定または測定する工程;および
(c)(a)での該レベルもしくは程度と(b)での該レベルもしくは程度を比較する工程であって、該1つもしくは複数のゲノム領域のエピジェネティック特性のレベルもしくは程度の差、任意で有意差が、第1および第2の組成物の一方の細胞に存在するが他方には存在しない属性もしくは特徴を示すかまたはそれと相関する、エピジェネティック特性の存在を同定または決定する、工程
を含む、方法。 - 第1の組成物と第2の組成物の一方が組換え受容体で遺伝子操作される細胞を含み、かつ第1の組成物と第2の組成物の他方が該組換え受容体を発現するように操作された細胞を含む、
第1の組成物および第2の組成物が、異なるドナー由来の、任意で疾患状態、疾患の重症度、または疾患のタイプに基づいて異なるドナー由来の、初代細胞を含む、
第1の組成物および第2の組成物が、細胞を操作するための作業プロセスの異なる段階または工程の細胞を含む、
第1の組成物と第2の組成物の一方が、細胞の活性、表現型もしくは機能を調節する作用物質と接触させた細胞を含み、第1の組成物と第2の組成物の他方が、そのように接触させてない同様の細胞を含む、または
第1の組成物と第2の組成物の一方が、対象への投与後に、第1および第2の組成物の一方では生じるかまたは生じたが他方では生じない転帰に関連する細胞組成物のサンプルを含む、
請求項12に記載の方法。 - 前記作用物質が、ポリペプチドもしくはタンパク質、ペプチド、抗体、核酸、ウイルスベクターもしくはウイルス調製物、または小分子化合物である、請求項13に記載の方法。
- 前記作用物質が、刺激性試薬、任意で抗CD3/抗CD28;免疫調節剤、CARに特異的な抗イディオタイプ抗体もしくはその抗原結合フラグメント、免疫チェックポイント阻害剤、代謝経路のモジュレーター、アデノシン受容体アンタゴニスト、キナーゼ阻害剤、抗TGFβ抗体もしくは抗TGFβR抗体、またはサイトカインである、請求項13または14に記載の方法。
- 第1の組成物の属性または特徴が、
状態、表現型、もしくは機能、任意で活性化、エフェクターもしくはメモリーの状態、表現型、もしくは機能;外因性核酸の組込みの位置、存在量、もしくは頻度;該細胞組成物内の細胞のクローン性;該細胞組成物中の操作細胞の割合もしくは頻度;および/または該細胞の組成物が対象または対象のグループに投与されたとき、転帰を示すもしくはもたらすか、またはその可能性が高いかどうか
を示す、請求項12〜15のいずれか一項に記載の方法。 - 前記転帰が、有効性、応答、持続性、毒性、または免疫原性に関連するかまたはそれを示す転帰である、請求項12または16に記載の方法。
- 前記転帰が応答であり、該応答が、完全奏効、部分奏効、進行性疾患、分子的に検出可能な疾患、再発、または奏効の持続性である、請求項17に記載の方法。
- 前記転帰が毒性であり、該毒性が、サイトカイン放出症候群(CRS)、重度CRS、グレード3以上のCRS、神経毒性、重度の神経毒性、グレード3以上の神経毒性、および/または脳浮腫である、請求項18に記載の方法。
- 前記毒性が用量制限毒性(DLT)である、請求項18または19に記載の方法。
- 複数回繰り返される、請求項12〜20のいずれか一項に記載の方法。
- 第1の組成物と第2の組成物の一方の大部分に存在するが他方には存在しないエピジェネティック特性が同定または決定される、請求項21に記載の方法。
- 細胞組成物の属性または特徴を評価する方法であって、
(a)組換え受容体で操作された細胞および/もしくは組換え受容体により遺伝子操作される細胞を含む細胞組成物に含まれる細胞もしくは細胞集団の1つまたは複数のゲノム領域のエピジェネティック特性を解析する工程;および
(b)該1つまたは複数のゲノム領域のエピジェネティック特性を、個別に、参照プロファイルと比較する工程であって、その比較によって、該細胞の組成物がその属性もしくは特徴を示すか、または示す可能性が高いかどうかが示される、工程
を含む、方法。 - 前記属性または特徴が、
状態、表現型、もしくは機能、任意で活性化、エフェクターもしくはメモリーの状態、表現型、もしくは機能;外因性核酸の組込みの位置、存在量、もしくは頻度;該細胞組成物内の細胞のクローン性;該細胞組成物中の操作細胞の割合もしくは頻度;および/または該細胞の組成物が対象または対象のグループに投与されたとき、転帰を示すもしくはもたらすか、またはその可能性が高いかどうか
を示す、請求項23に記載の方法。 - 前記属性または特徴は、該細胞の組成物が対象または対象のグループに投与されたとき、転帰を示すもしくはもたらすか、またはその可能性が高いかどうかであり、前記方法は、対象に投与するための該細胞組成物を評価するためである、請求項23または24に記載の方法。
- 前記転帰が、効果、応答、持続性、毒性、または免疫原性に関連するかまたはそれを示す転帰である、請求項24または25に記載の方法。
- 前記転帰が応答であり、該応答が、完全奏効、部分奏効、進行性疾患、分子的に検出可能な疾患、再発、または奏効の持続性である、請求項26に記載の方法。
- 前記転帰が毒性であり、該毒性が、サイトカイン放出症候群(CRS)、重度CRS、グレード3以上のCRS、神経毒性、重度の神経毒性、グレード3以上の神経毒性、および/または脳浮腫である、請求項27に記載の方法。
- 前記毒性が用量制限毒性(DLT)である、請求項27または28に記載の方法。
- 前記比較によって、該細胞組成物が所望の転帰を示すかまたは示す可能性が高いことが示される場合に、該細胞組成物を対象に投与する、請求項23〜29のいずれか一項に記載の方法。
- 前記比較によって、該細胞組成物が所望の転帰を示さないかまたは示さない可能性が高いことが示される場合には、
(i)該細胞組成物が変更された細胞組成物を投与する;
(ii)細胞の用量が変更された該細胞組成物を投与する;
(iii)対象に投与される細胞の投与計画が変更された該細胞組成物を投与する;
(iv)1つもしくは複数の他の治療剤と組み合わせて該細胞組成物を投与する;または
(v)対象に該細胞組成物を投与しない
のいずれかである、請求項23〜30のいずれか一項に記載の方法。 - 所望の転帰が、完全奏効、部分奏効、もしくは持続的奏功であり、かつ/またはグレード3以下の神経毒性、すなわちグレード1もしくはグレード2の神経毒性であるか、グレード3以下のCRS、すなわちグレード1もしくはグレード2のCRSであるか、いかなるグレードの神経毒性もしくはいかなるグレードのCRSも含まない、請求項30または31に記載の方法。
- 該細胞組成物中の細胞を操作するための1つまたは複数の工程において1つまたは複数の作用物質または条件を変えることによって、前記細胞組成物が変更される、請求項31または32に記載の方法。
- 前記1つまたは複数の作用物質または条件が、
血清の存在もしくは濃度;培養時間;刺激剤の存在もしくは量;刺激剤の種類もしくは程度;アミノ酸の存在もしくは量;温度;細胞組成物の供給源もしくは細胞型;細胞組成物中の細胞型の比もしくはパーセンテージ、任意でCD4+/CD8+ 細胞比;ビーズの存在もしくは量;細胞密度;静置培養;振とう培養;灌流;ウイルスベクターの種類;ベクターコピー数;形質導入アジュバントの存在;凍結保存における細胞組成物の細胞密度;組換え受容体の発現の程度;または細胞表現型を調節する化合物の存在
から選択される、請求項33に記載の方法。 - 変更された細胞組成物を投与する前に、変更された細胞組成物に含まれる細胞に対して工程(a)および(b)を繰り返す、請求項33または34に記載の方法。
- 細胞の投与計画を変更することが、初回用量の細胞を対象に投与した後で、第2用量の細胞を対象に投与することを含む、請求項35に記載の方法。
- 後続の用量の細胞が、初回用量の細胞を投与してから少なくとも1週間、2週間、3週間、4週間、2ヶ月、3ヶ月、4ヶ月、5ヶ月、6ヶ月、9ヶ月、または12ヶ月後に投与される、請求項36に記載の方法。
- 参照プロファイルが、該1つもしくは複数のゲノム領域の各々のエピジェネティック特性についての閾値、または該1つもしくは複数のゲノム領域内の全体的なエピジェネティック特性についての閾値を含む、請求項23〜37のいずれか一項に記載の方法。
- 前記閾値が、
同じまたは同様の疾患または状態を有する対象に投与されたときに所望の転帰を示すことが分かっている、細胞組成物の細胞内の該1つまたは複数のゲノム領域におけるエピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティに関連するかまたはそれを示す値またはレベルである、
対象のグループに個別に投与された複数の細胞組成物のそれぞれの細胞からの該1つもしくは複数のゲノム領域におけるエピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティに関連するかもしくはそれを示す、平均(average)、中央、もしくは平均(mean)の値もしくはレベルであるか、または該値もしくはレベルの標準偏差内である(ここで、該グループの各対象は投与後に所望の転帰を示し続けた)、あるいは
正常もしくは健康な対象からの同様の細胞組成物におけるエピジェネティック特性に関連するかまたはそれを示す値もしくはレベルである、
請求項38に記載の方法。 - 前記比較が差次的アクセシビリティ解析を含む、および/または
参照プロファイルが、該1つまたは複数のゲノム領域内の配列リードのピークを含む参照エピジェネティックマップを含む、
請求項23〜37のいずれか一項に記載の方法。 - 参照エピジェネティックマップが、同じまたは同様の疾患または状態を有する対象への該細胞もしくは細胞組成物の投与後に、所望の転帰を示すことが分かっている細胞組成物のアクセシビリティ解析、任意でクロマチンアクセシビリティから決定される、
参照エピジェネティックマップが、対象のグループに個別に投与された複数の細胞組成物の間で、アクセシビリティ解析、任意でクロマチンアクセシビリティからの配列リードの共通のピークから決定され、該グループの各対象は投与後に所望の転帰を示し続けた、または
参照エピジェネティックマップが、正常もしくは健康な対象からの同様の細胞組成物のアクセシビリティ解析、任意でクロマチンアクセシビリティから決定される、
請求項40に記載の方法。 - 細胞組成物を評価する方法であって、
(a)1つもしくは複数の試験物質もしくは条件の存在下でインプット組成物を培養することによって得られた、アウトプット細胞組成物に含まれる細胞の、および/またはインプット組成物に含まれる細胞の、1つまたは複数のゲノム領域のエピジェネティック特性を解析する工程;ならびに
(b)該1つまたは複数のゲノム領域のエピジェネティック特性を、個別に、参照プロファイルと比較する工程であって、その比較によって、該細胞が所定の特徴もしくは属性を示すか、または示す可能性が高いかどうかが示される、工程
を含む、方法。 - 所定の特徴または属性が、
前記組成物内の細胞の状態、表現型、もしくは機能;該細胞組成物内の細胞の一貫性もしくは均一性;外因性核酸の組込みの位置、存在量、もしくは頻度;該細胞組成物内の細胞のクローン性;および/または該細胞組成物中の操作細胞の割合もしくは頻度
である、請求項42に記載の方法。 - 所定の表現型または属性が、
前記細胞のエフェクター機能もしくは活性化状態を示し、かつ/または該細胞がナイーブな表現型もしくは長命なメモリー表現型を有することを示す、状態、表現型、または機能
である、請求項43に記載の方法。 - 前記1つまたは複数の試験物質または条件が、
血清の存在もしくは濃度;培養時間;刺激剤の存在もしくは量;刺激剤の種類もしくは程度;アミノ酸の存在もしくは量;温度;インプット組成物の供給源もしくは細胞型;インプット組成物中の細胞型の比もしくはパーセンテージ、任意でCD4+/CD8+ 細胞比;ビーズの存在もしくは量;細胞密度;静置培養;振とう培養;灌流;ウイルスベクターの種類;ベクターコピー数;形質導入アジュバントの存在;凍結保存におけるインプット組成物の細胞密度;組換え受容体の発現の程度;または細胞表現型を調節する化合物の存在
を含む、請求項43または44に記載の方法。 - 前記1つまたは複数の試験物質または条件が、試験化合物のライブラリーからの1つまたは複数の化合物を含む、請求項43〜45のいずれか一項に記載の方法。
- 前記比較によって、該細胞組成物が所望の特徴または属性を有するかまたは有する可能性が高いことが示される場合、該細胞を培養するための1つまたは複数の試験物質または条件を選択する工程、および/あるいは対象に投与するための該細胞組成物を選択する工程を含む、請求項42〜46のいずれか一項に記載の方法。
- 前記比較によって、該細胞組成物が所望の特徴または属性を有しないかまたは有しない可能性が高いことが示される場合、1つまたは複数のさらなる試験物質または条件を用いて工程(a)および(b)を繰り返す工程を含む、請求項42〜46のいずれか一項に記載の方法。
- 参照プロファイルが、該1つもしくは複数のゲノム領域の各々のエピジェネティック特性についての閾値、または該1つもしくは複数のゲノム領域内の全体的なエピジェネティック特性についての閾値を含む、請求項42〜48のいずれか一項に記載の方法。
- 前記閾値が、
所望の属性または特徴を示すことが公知の、細胞組成物の細胞内の該1つまたは複数のゲノム領域におけるエピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティに関連するかまたはそれを示す、値またはレベルである、
所望の属性または特徴を示すことが公知の、複数の細胞組成物のそれぞれの細胞からの該1つもしくは複数のゲノム領域におけるエピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティに関連するかもしくはそれを示す、平均(average)、中央、もしくは平均(mean)の値もしくはレベルであるかまたは該値もしくはレベルの標準偏差内である、
請求項49に記載の方法。 - 前記比較が差次的アクセシビリティ解析を含む、および/または
参照プロファイルが、該1つもしくは複数のゲノム領域内の配列リードのピークを含む参照エピジェネティックマップを含む、
請求項42〜48のいずれか一項に記載の方法。 - 参照エピジェネティックマップが、所望の属性または特徴を示すことが公知の細胞組成物のアクセシビリティ解析、任意でクロマチンアクセシビリティから決定される、
参照エピジェネティックマップが、所望の属性または特徴を示すことが公知の複数の細胞組成物の間で、アクセシビリティ解析、任意でクロマチンアクセシビリティからの配列リードの共通のピークから決定される、
請求項51に記載の方法。 - 所望の転帰または特徴が、ナイーブT細胞、長命メモリーT細胞、セントラルメモリーT細胞(Tcm)、または幹様メモリーT細胞(Tcsm)を示す表現型または機能である、請求項42〜52のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ゲノム領域がゲノム座位または遺伝子を含む、請求項1〜53のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ゲノム領域が、コード領域、遺伝子のオープンリーディングフレーム、非コード領域、遺伝子間領域、または調節エレメントを含む、請求項1〜54のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ゲノム領域が遺伝子のオープンリーディングフレームを含む、請求項1〜55のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ゲノム領域が遺伝子間領域または調節エレメントを含む、請求項1〜55のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ゲノム領域が、イントロン、エクソン、シス調節エレメント、プロモーター、エンハンサー、上流活性化配列(UAS)、3'非翻訳領域(UTR)、5'UTR、非コードRNA生成領域、非コードRNA(ncRNA)遺伝子、miRNA遺伝子、siRNA遺伝子、piRNA遺伝子、snoRNA遺伝子、lncRNA遺伝子、リボソームRNA(rRNA)遺伝子、スモールRNA結合部位、非コードRNA結合部位、偽遺伝子、転写終結部位(TTS)、リピート、テロメア領域、アクセス可能なクロマチン領域、アクセス不可能なクロマチン領域、オープンクロマチン領域、および/またはヘテロクロマチン領域を含む、請求項1〜55および57のいずれか一項に記載の方法。
- エピジェネティック特性が、クロマチンアクセシビリティ、ヌクレオソーム占有率、ヒストン修飾、空間的染色体コンフォメーション、転写因子占有率、およびDNAメチル化の中から選択される、請求項1〜58のいずれか一項に記載の方法。
- エピジェネティック特性がクロマチンアクセシビリティである、請求項1〜59のいずれか一項に記載の方法。
- エピジェネティック特性が、クロマチンアクセシビリティ、クロマチンアクセシビリティのレベルもしくは程度、クロマチンアクセシビリティの相対的なレベルもしくは程度を含む、および/または
エピジェネティック特性が、該ゲノム領域のクロマチンアクセシビリティの程度もしくはレベル、その相対的な程度もしくはレベル、またはそのプロファイルもしくはマップを含む、
請求項1〜60のいずれか一項に記載の方法。 - クロマチンアクセシビリティが、ハイスループットシーケンシングによるトランスポザーゼ接近可能クロマチンのアッセイ(ATAC-seq)またはハイスループットシーケンシングに連結されたクロマチン免疫沈降(ChIP-seq)によって測定される、請求項59〜61のいずれか一項に記載の方法。
- クロマチンアクセシビリティがATAC-seqにより測定される、請求項59〜62のいずれか一項に記載の方法。
- エピジェネティック特性を評価することが、
(1)細胞または細胞集団からクロマチンを単離すること、
(2)クロマチンを挿入酵素複合体(insertional enzyme complex)で処理して、ゲノムDNAのタグ付加断片を生成させること、
(3)タグ付加断片の全部もしくは一部を配列決定して、複数の配列リードを生成すること、
(4)配列リードをゲノムのゲノム領域にアライメントさせ、フィルタリングし、かつマッピングすること、および
(5)各細胞または細胞集団について複数のゲノム領域における配列リードのピークを決定または同定すること
を含む、請求項59〜63のいずれか一項に記載の方法。 - エピジェネティック特性を解析または評価することが、配列リードのピークを比較すること、および任意で、2つ以上の細胞または細胞組成物からのサンプル間で異なっている配列リードのピークを同定することをさらに含む、請求項64に記載の方法。
- 配列リードのピークが、
濃縮されている、バックグラウンドを上回る、かつ/または周囲の領域の配列リードと比較してより高いピークシグナル、レベル、または値を有する、配列リード
を含む、請求項64または65に記載の方法。 - エピジェネティック特性を解析または評価することが、2つ以上の細胞集団からのサンプル間で異なっている配列リードのピークを含むとして同定されたゲノム領域のモチーフ解析、転写因子占有率解析、および/または生物学的経路解析を行うことをさらに含む、請求項64〜66のいずれか一項に記載の方法。
- エピジェネティック特性を解析または評価することが、配列リードのピークを含むゲノム領域内のヌクレオソームの位置を決定することをさらに含む、請求項64〜67のいずれか一項に記載の方法。
- エピジェネティック特性を解析することが、
前記1つまたは複数のゲノム領域の各々またはそのサブセットに沿って、エピジェネティック特性に関連するかまたはそれを示す配列リード、任意でクロマチンアクセシビリティに関連するかまたはそれを示す配列リードのプロファイルを示すエピジェネティックマップを作成することを含む、および/あるいは
該ゲノム領域の長さに沿った複数の部位または部分の各々について、エピジェネティックなリードアウト、任意でクロマチンアクセシビリティを示す1つまたは複数の配列リードを該部位または部分で生成させることを含み、ここで、該1つまたは複数の配列リードの量が、該部位または部分における該エピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティの程度またはレベルを示す、
請求項1〜68のいずれか一項に記載の方法。 - 前記解析することが、任意で、該ゲノム領域にわたって、該エピジェネティック特性の全体的な程度またはレベルを決定すること、任意でアクセシビリティの全体的な程度またはレベルを決定することをさらに含む、請求項69に記載の方法。
- エピジェネティック特性を解析することが、該1つまたは複数のゲノム領域にわたってクロマチンアクセシビリティの値またはレベルを決定、測定、または定量することを含む、請求項1〜70のいずれか一項に記載の方法。
- エピジェネティック特性を解析することが、該1つまたは複数のゲノム領域またはそのサブセットにわたって、エピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティに関連するかまたはそれを示す値またはレベルを決定、測定、または定量することを含む、請求項1〜71のいずれか一項に記載の方法。
- 前記値もしくはレベルが、該1つもしくは複数のゲノム領域の各々またはそのサブセット内のFPKM(fragments per kilobase per million of mapped reads:1キロベースあたりの、マップされたリード数100万あたりの断片数)値であるか、またはFPKM値を決定することを含む、請求項39、50、71または72に記載の方法。
- 前記値またはレベルが、該1つもしくは複数のゲノム領域の各々またはそのサブセット内のFPKM(fragments per kilobase per million of mapped reads)値であるか、またはFPKM値を合計もしくは総計することを含む、請求項39、50、および71〜73のいずれか一項に記載の方法。
- 前記解析が、前記リードの配列同一性、質、マッピング位置、または他のシーケンシング特性に基づいて、ミトコンドリアリードおよび/または追加の汚染配列を除去するための工程を含む、請求項1〜74のいずれか一項に記載の方法。
- 前記解析が、定量的精度を改善するために重複リードを除去するための工程を含む、請求項1〜75のいずれか一項に記載の方法。
- 前記解析が、配列リードを、特定のエピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティまたはクロマチン占有率を表すサブセットに分離するための工程を含み、配列決定された断片のサイズが、該エピジェネティック特性を表す程度またはレベルを決定するために使用される、請求項1〜76のいずれか一項に記載の方法。
- 工程(a)および(b)が、組換え受容体で操作された細胞を含む第2の細胞組成物をそれぞれ独立して投与された複数の対象からの細胞組成物に対して実施される、請求項1〜6および54〜77のいずれか一項に記載の方法。
- 各ゲノム領域またはそのサブセットについて、複数の対象のそれぞれについての細胞療法の転帰にマッピングされた各ゲノム座位の配列リードの値またはレベルを含むディスプレイを作製する、請求項1〜6および54〜78のいずれか一項に記載の方法。
- ディスプレイがヒートマップ、散布図、階層的クラスタリング、および/またはコンステレーションプロットを含む、請求項79に記載の方法。
- 前記1つまたは複数のゲノム領域を同定することが、細胞療法の転帰に基づいてクラスター解析を実施することを含む、請求項79または80に記載の方法。
- 細胞療法の転帰を示すまたはそれと相関する前記1つまたは複数のゲノム領域を同定することが、同じまたは同様の転帰を有する対象の少なくとも大多数が該ディスプレイにおいて一緒にクラスターを作るかどうかを判定することを含む、請求項79または80に記載の方法。
- 同じまたは同様の転帰を有する対象の少なくとも55%、60%、70%、80%、90%、95%またはそれ以上が該ディスプレイにおいて一緒にクラスターを作る場合に、ゲノム領域が同定される、請求項82に記載の方法。
- 前記細胞の全ゲノムが解析される、請求項1〜83のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞のゲノムの一部が解析される、請求項1〜84のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ゲノムの一部が、
細胞の表現型、活性化状態、活性化シグナルの強度、もしくはエフェクター機能に関連するもしくはそれを示すか、またはそれに関連するもしくはそれを示す可能性が高い、1つまたは複数のゲノム領域、任意で1つまたは複数のゲノム座位
を含む、請求項85に記載の方法。 - 前記解析が、主成分解析(PCA)、生物学的経路解析、遺伝子オントロジー(GO)解析、および/またはモチーフ解析を実施することをさらに含む、請求項1〜86のいずれか一項に記載の方法。
- 前記解析が、T細胞メモリー表現型、T細胞活性化状態、エフェクター機能、サイトカイン応答、輸送、持続性、または消耗性に関連する1つまたは複数のゲノム領域の生物学的経路解析および/または遺伝子サブセット解析を含む、請求項87に記載の方法。
- 前記1つまたは複数のゲノム領域が、細胞のエフェクター様機能または活性化状態に関連するかまたはそれを示す1つまたは複数のゲノム座位を含む、請求項86〜88のいずれか一項に記載の方法。
- 前記1つまたは複数のゲノム領域が、Nr4a1、Cblb、Irf4、Tbx21、Eomes、Ifng、Il2ra、Il2、Csf2、Gzmb、Tnfsf10、Gata3、Mir155、Sox21、Ctla4、Lag3、およびPdcd1からなる群より選択される遺伝子座を含む、請求項86〜89のいずれか一項に記載の方法。
- 前記1つまたは複数のゲノム領域が、Ctla4、Il2ra、Il2、Ifng、およびGzmbからなる群より選択されるゲノム座位を含む、請求項86〜90のいずれか一項に記載の方法。
- 2〜50、2〜20、2〜10、2〜5、5〜50、5〜20、5〜10、10〜50、10〜20、もしくは20〜50、または約2〜50、約2〜20、約2〜10、約2〜5、約5〜50、約5〜20、約5〜10、約10〜50、約10〜20、もしくは約20〜50のゲノム領域のエピジェネティック特性が解析される、請求項1〜91のいずれか一項に記載の方法。
- 2つ以上のゲノム領域を含むパネルが同定される、請求項1〜92のいずれか一項に記載の方法。
- トランスジーンの組込みを評価する方法であって、組換え受容体で遺伝子操作された細胞または細胞組成物において、トランスジーンの核酸配列を含む1つまたは複数のゲノム領域のエピジェネティック特性を決定する工程を含む、方法。
- 前記遺伝子操作が、細胞組成物の1つまたは複数の細胞内に、組換え受容体をコードする核酸を導入することによって行われる、請求項94に記載の方法。
- 前記導入が、前記核酸を含むウイルスベクターによる形質導入によるものである、請求項95に記載の方法。
- エピジェネティック特性がクロマチンアクセシビリティである、請求項94〜96のいずれか一項に記載の方法。
- エピジェネティック特性が、クロマチンアクセシビリティ、クロマチンアクセシビリティのレベルもしくは程度、クロマチンアクセシビリティの相対的なレベルもしくは程度を含む、および/または
エピジェネティック特性が、該ゲノム領域のクロマチンアクセシビリティの程度もしくはレベル、その相対的な程度もしくはレベル、またはそのプロファイルもしくはマップを含む、
請求項94〜97のいずれか一項に記載の方法。 - クロマチンアクセシビリティが、ハイスループットシーケンシングによるトランスポザーゼ接近可能クロマチンのアッセイ(ATAC-seq)またはハイスループットシーケンシングに連結されたクロマチン免疫沈降(ChIP-seq)によって測定される、請求項94〜98のいずれか一項に記載の方法。
- クロマチンアクセシビリティがATAC-seqにより測定される、請求項94〜99のいずれか一項に記載の方法。
- エピジェネティック特性を評価することが、
(1)細胞または細胞集団からクロマチンを単離すること、
(2)クロマチンを挿入酵素複合体で処理して、ゲノムDNAのタグ付加断片を生成させること、
(3)タグ付加断片の全部もしくは一部を配列決定して、複数の配列リードを生成すること、
(4)配列リードをゲノムのゲノム領域にアライメントさせ、フィルタリングし、かつマッピングすること、および
(5)各細胞または細胞集団について複数のゲノム領域における配列リードのピークを決定または同定すること
を含む、請求項100に記載の方法。 - エピジェネティック特性を解析または評価することが、トランスジーンの核酸配列にマッピングされるかまたはそれに一致する配列リードのピークを決定することをさらに含む、請求項101に記載の方法。
- 配列リードのピークが、
濃縮されている、バックグラウンドを上回る、かつ/または周囲の領域の配列リードと比較してより高いピークシグナル、レベル、または値を有する、配列リード
を含む、請求項94〜102のいずれか一項に記載の方法。 - エピジェネティック特性を解析することが、
トランスジーンの核酸配列を含むゲノム領域の、エピジェネティック特性に関連するかまたはそれを示す配列リード、任意でクロマチンアクセシビリティに関連するかまたはそれを示す配列リードのプロファイルを示すエピジェネティックマップを作成することを含み、かつ/または
該ゲノム領域の長さに沿ったトランスジーンの核酸配列を含むゲノム領域について、エピジェネティックなリードアウト、任意でクロマチンアクセシビリティを示す1つまたは複数の配列リードを該領域で生成させることを含み、ここで、該1つまたは複数の配列リードの量が、該領域における該エピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティ、の程度もしくはレベルを示す、
請求項94〜103のいずれか一項に記載の方法。 - エピジェネティック特性を決定することが、トランスジーンの核酸配列を含むゲノム領域にわたってクロマチンアクセシビリティの値またはレベルを決定、測定、または定量することを含む、請求項94〜104のいずれか一項に記載の方法。
- エピジェネティック特性を決定することが、トランスジーンの核酸配列を含むゲノム領域にわたって、エピジェネティック特性、任意でクロマチンアクセシビリティに関連するかまたはそれを示す値またはレベルを決定、測定、または定量することを含む、請求項94〜105のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞組成物、任意で細胞の第1の組成物および/または第2の組成物が、対象由来のサンプルから得られたおよび/または対象から選択もしくは単離された初代細胞を含む、請求項1〜106のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞が免疫細胞である、請求項1〜1074のいずれか一項に記載の方法。
- 免疫細胞がT細胞またはNK細胞である、請求項1〜108のいずれか一項に記載の方法。
- T細胞がCD4+および/またはCD8+ T細胞である、請求項1〜109のいずれか一項に記載の方法。
- 組換え受容体が、疾患もしくは状態に関連する抗原に結合する、それを認識する、もしくはそれを標的とする、および/または
組換え受容体がT細胞受容体もしくは機能的非T細胞受容体である、および/または
組換え受容体がキメラ抗原受容体(CAR)である、
請求項1〜110のいずれか一項に記載の方法。 - CARが、抗原に特異的に結合する細胞外抗原認識ドメインと、ITAMを含む細胞内シグナル伝達ドメインとを含み、任意で、細胞内シグナル伝達ドメインがCD3ゼータ(CD3ζ)鎖の細胞内ドメインを含む、および/または
CARが、任意でCD28もしくは4-1BBのシグナル伝達ドメインを含む共刺激シグナル伝達領域をさらに含む、
請求項111に記載の方法。
Applications Claiming Priority (7)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201762444802P | 2017-01-10 | 2017-01-10 | |
US62/444,802 | 2017-01-10 | ||
US201762551752P | 2017-08-29 | 2017-08-29 | |
US62/551,752 | 2017-08-29 | ||
US201762596662P | 2017-12-08 | 2017-12-08 | |
US62/596,662 | 2017-12-08 | ||
PCT/US2018/013227 WO2018132518A1 (en) | 2017-01-10 | 2018-01-10 | Epigenetic analysis of cell therapy and related methods |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2020515236A true JP2020515236A (ja) | 2020-05-28 |
JP2020515236A5 JP2020515236A5 (ja) | 2021-02-25 |
JP7429338B2 JP7429338B2 (ja) | 2024-02-08 |
Family
ID=61198889
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019537282A Active JP7429338B2 (ja) | 2017-01-10 | 2018-01-10 | 細胞療法および関連方法のエピジェネティック解析 |
Country Status (9)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US11821027B2 (ja) |
EP (1) | EP3568414A1 (ja) |
JP (1) | JP7429338B2 (ja) |
CN (1) | CN110691792A (ja) |
AU (1) | AU2018207305A1 (ja) |
CA (1) | CA3049461A1 (ja) |
MA (1) | MA47283A (ja) |
MX (1) | MX2019008227A (ja) |
WO (1) | WO2018132518A1 (ja) |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US11519033B2 (en) * | 2018-08-28 | 2022-12-06 | 10X Genomics, Inc. | Method for transposase-mediated spatial tagging and analyzing genomic DNA in a biological sample |
WO2020072480A1 (en) * | 2018-10-01 | 2020-04-09 | Lonza Ltd | Ssi cells with predictable and stable transgene expression and methods of formation |
WO2020198942A1 (zh) * | 2019-03-29 | 2020-10-08 | 中国科学技术大学 | 基于峰聚类的单细胞染色质可及性测序数据分析方法和系统 |
EP4104177A1 (en) * | 2020-02-13 | 2022-12-21 | 10X Genomics, Inc. | Methods for characterizing cells using gene expression and chromatin accessibility |
CN113436683A (zh) * | 2020-03-23 | 2021-09-24 | 北京合生基因科技有限公司 | 筛选候选插入片段的方法和系统 |
CN117286229B (zh) * | 2023-11-23 | 2024-05-03 | 中山大学中山眼科中心 | 一种mhc区域三维基因组结构的高通量长读长测序方法 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2015509728A (ja) * | 2012-03-12 | 2015-04-02 | エピオンティス ゲーエムベーハー | Cd3cd4陽性tリンパ球の同定用のエピジェネティックマーカー |
Family Cites Families (70)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4452773A (en) | 1982-04-05 | 1984-06-05 | Canadian Patents And Development Limited | Magnetic iron-dextran microspheres |
US4690915A (en) | 1985-08-08 | 1987-09-01 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Adoptive immunotherapy as a treatment modality in humans |
US4795698A (en) | 1985-10-04 | 1989-01-03 | Immunicon Corporation | Magnetic-polymer particles |
IN165717B (ja) | 1986-08-07 | 1989-12-23 | Battelle Memorial Institute | |
DE68919715T2 (de) | 1988-12-28 | 1995-04-06 | Stefan Miltenyi | Verfahren sowie materialien zur hochgraduierten magnetischen abspaltung biologischer materialien. |
US5200084A (en) | 1990-09-26 | 1993-04-06 | Immunicon Corporation | Apparatus and methods for magnetic separation |
US5827642A (en) | 1994-08-31 | 1998-10-27 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Rapid expansion method ("REM") for in vitro propagation of T lymphocytes |
WO1996013593A2 (en) | 1994-10-26 | 1996-05-09 | Procept, Inc. | Soluble single chain t cell receptors |
WO1996018105A1 (en) | 1994-12-06 | 1996-06-13 | The President And Fellows Of Harvard College | Single chain t-cell receptor |
US20020150914A1 (en) | 1995-06-30 | 2002-10-17 | Kobenhavns Universitet | Recombinant antibodies from a phage display library, directed against a peptide-MHC complex |
US6451995B1 (en) | 1996-03-20 | 2002-09-17 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Single chain FV polynucleotide or peptide constructs of anti-ganglioside GD2 antibodies, cells expressing same and related methods |
WO1999018129A1 (en) | 1997-10-02 | 1999-04-15 | Sunol Molecular Corporation | Soluble single-chain t-cell receptor proteins |
RU2149023C1 (ru) | 1998-04-20 | 2000-05-20 | Ерхов Валентин Сергеевич | Способ получения специфической антисыворотки к универсальному опухолевому антигену и способ диагностики злокачественных опухолей с использованием этой антисыворотки |
IL139345A0 (en) | 1998-05-19 | 2001-11-25 | Avidex Ltd | Multivalent t cell receptor complexes |
CA2343156A1 (en) | 1998-09-04 | 2000-03-16 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Fusion receptors specific for prostate-specific membrane antigen and uses thereof |
WO2000023573A2 (en) | 1998-10-20 | 2000-04-27 | City Of Hope | Cd20-specific redirected t cells and their use in cellular immunotherapy of cd20+ malignancies |
US20040191260A1 (en) | 2003-03-26 | 2004-09-30 | Technion Research & Development Foundation Ltd. | Compositions capable of specifically binding particular human antigen presenting molecule/pathogen-derived antigen complexes and uses thereof |
CA2410510A1 (en) | 2000-06-02 | 2001-12-13 | Memorial Sloan-Kettering Cancer Center | Artificial antigen presenting cells and methods of use thereof |
EP1334188B1 (en) | 2000-11-07 | 2006-08-30 | City of Hope | Cd19-specific redirected immune cells |
US7070995B2 (en) | 2001-04-11 | 2006-07-04 | City Of Hope | CE7-specific redirected immune cells |
US20090257994A1 (en) | 2001-04-30 | 2009-10-15 | City Of Hope | Chimeric immunoreceptor useful in treating human cancers |
ES2239246T3 (es) | 2001-08-31 | 2005-09-16 | Avidex Limited | Receptor soluble de celulas t. |
US6992176B2 (en) | 2002-02-13 | 2006-01-31 | Technion Research & Development Foundation Ltd. | Antibody having a T-cell receptor-like specificity, yet higher affinity, and the use of same in the detection and treatment of cancer, viral infection and autoimmune disease |
WO2003070752A2 (en) | 2002-02-20 | 2003-08-28 | Dyax Corporation | Mhc-peptide complex binding ligands |
US20030170238A1 (en) | 2002-03-07 | 2003-09-11 | Gruenberg Micheal L. | Re-activated T-cells for adoptive immunotherapy |
US7446190B2 (en) | 2002-05-28 | 2008-11-04 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Nucleic acids encoding chimeric T cell receptors |
NZ539225A (en) | 2002-10-09 | 2006-09-29 | Avidex Ltd | Single chain recombinant T cell receptors |
US20050129671A1 (en) | 2003-03-11 | 2005-06-16 | City Of Hope | Mammalian antigen-presenting T cells and bi-specific T cells |
AU2005247950B2 (en) | 2004-05-27 | 2012-02-02 | Receptor Logic, Inc. | Antibodies as T cell receptor mimics, methods of production and uses thereof |
US20090304679A1 (en) | 2004-05-27 | 2009-12-10 | Weidanz Jon A | Antibodies as T cell receptor mimics, methods of production and uses thereof |
US20090226474A1 (en) | 2004-05-27 | 2009-09-10 | Weidanz Jon A | Antibodies as T cell receptor mimics, methods of production and uses thereof |
ATE475669T1 (de) | 2004-06-29 | 2010-08-15 | Immunocore Ltd | Einen modifizierten t-zellen-rezeptor exprimierende zellen |
EP2141997B1 (en) | 2007-03-30 | 2012-10-31 | Memorial Sloan-Kettering Cancer Center | Constitutive expression of costimulatory ligands on adoptively transferred t lymphocytes |
US8727132B2 (en) | 2007-12-07 | 2014-05-20 | Miltenyi Biotec Gmbh | Sample processing system and methods |
US8479118B2 (en) | 2007-12-10 | 2013-07-02 | Microsoft Corporation | Switching search providers within a browser search box |
US20120164718A1 (en) | 2008-05-06 | 2012-06-28 | Innovative Micro Technology | Removable/disposable apparatus for MEMS particle sorting device |
TWI460602B (zh) | 2008-05-16 | 2014-11-11 | Counsyl Inc | 廣用的懷孕前篩檢裝置 |
JP5173594B2 (ja) | 2008-05-27 | 2013-04-03 | キヤノン株式会社 | 管理装置、画像形成装置及びそれらの処理方法 |
EP2331566B1 (en) | 2008-08-26 | 2015-10-07 | City of Hope | Method and compositions for enhanced anti-tumor effector functioning of t cells |
US9080211B2 (en) | 2008-10-24 | 2015-07-14 | Epicentre Technologies Corporation | Transposon end compositions and methods for modifying nucleic acids |
CA2777053A1 (en) | 2009-10-06 | 2011-04-14 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Human single-chain t cell receptors |
CA2779526C (en) | 2009-11-03 | 2022-12-06 | City Of Hope | Truncated epiderimal growth factor receptor (egfrt) for transduced t cell selection |
DK2649086T3 (en) | 2010-12-09 | 2017-09-18 | Univ Pennsylvania | USING CHEMICAL ANTIGEN RECEPTOR-MODIFIED T-CELLS TO TREAT CANCER |
BR112013024395B1 (pt) | 2011-03-23 | 2021-10-26 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Composições adotivas de imunoterapia celular e método para fabricação da dita composição |
JP6082997B2 (ja) | 2011-04-01 | 2017-02-22 | メモリアル スローン−ケタリング キャンサー センター | Hla−a2により提示されるwt1ペプチドへのt細胞受容体様抗体 |
US8398282B2 (en) | 2011-05-12 | 2013-03-19 | Delphi Technologies, Inc. | Vehicle front lighting assembly and systems having a variable tint electrowetting element |
EP2776451B1 (en) | 2011-11-11 | 2018-07-18 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Cyclin a1-targeted t-cell immunotherapy for cancer |
EP2814846B1 (en) | 2012-02-13 | 2020-01-08 | Seattle Children's Hospital d/b/a Seattle Children's Research Institute | Bispecific chimeric antigen receptors and therapeutic uses thereof |
WO2013126726A1 (en) | 2012-02-22 | 2013-08-29 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Double transgenic t cells comprising a car and a tcr and their methods of use |
EP2844743B1 (en) | 2012-05-03 | 2021-01-13 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Enhanced affinity t cell receptors and methods for making the same |
US9092401B2 (en) | 2012-10-31 | 2015-07-28 | Counsyl, Inc. | System and methods for detecting genetic variation |
LT2884999T (lt) | 2012-08-20 | 2021-04-12 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Ląstelinės imunoterapijos būdas ir kompozicijos |
AU2013327136A1 (en) | 2012-10-02 | 2015-04-16 | Memorial Sloan-Kettering Cancer Center | Compositions and methods for immunotherapy |
UY35468A (es) | 2013-03-16 | 2014-10-31 | Novartis Ag | Tratamiento de cáncer utilizando un receptor quimérico de antígeno anti-cd19 |
AU2014268710B2 (en) | 2013-05-23 | 2018-10-18 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Transposition into native chromatin for personal epigenomics |
EP3068402A4 (en) | 2013-11-13 | 2017-11-22 | Counsyl, Inc. | Automated nucleic acid repeat count calling methods |
US10801070B2 (en) * | 2013-11-25 | 2020-10-13 | The Broad Institute, Inc. | Compositions and methods for diagnosing, evaluating and treating cancer |
SG11201605259QA (en) | 2013-12-30 | 2016-07-28 | Agency Science Tech & Res | Methods for measuring biomarkers in gastrointestinal cancer |
CA2940653A1 (en) | 2014-02-27 | 2015-09-03 | Vijay Kuchroo | T cell balance gene expression, compositions of matters and methods of use thereof |
WO2015159295A1 (en) | 2014-04-17 | 2015-10-22 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Methods and kits for analyzing dna binding moieties attached to dna |
US10301370B2 (en) | 2014-05-02 | 2019-05-28 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Compositions and methods of chimeric autoantibody receptor T cells |
KR20220127359A (ko) | 2014-07-25 | 2022-09-19 | 유니버시티 오브 워싱톤 | 무세포 dna를 생성하는 조직 및/또는 세포 유형을 결정하는 방법 및 이를 사용하여 질환 또는 장애를 확인하는 방법 |
CN106973568B (zh) | 2014-10-08 | 2021-07-23 | 诺华股份有限公司 | 预测针对嵌合抗原受体疗法的治疗应答性的生物标志及其用途 |
US20160140289A1 (en) | 2014-10-16 | 2016-05-19 | Counsyl, Inc. | Variant caller |
EP3031929A1 (en) | 2014-12-11 | 2016-06-15 | Mdc Max-Delbrück-Centrum Für Molekulare Medizin Berlin - Buch | Genome architecture mapping |
AU2016284455A1 (en) | 2015-06-22 | 2017-11-23 | Myriad Women's Health, Inc. | Methods of predicting pathogenicity of genetic sequence variants |
MY201101A (en) * | 2015-09-17 | 2024-02-05 | Novartis Ag | Car t cell therapies with enhanced efficacy |
US9678850B1 (en) | 2016-06-10 | 2017-06-13 | Palantir Technologies Inc. | Data pipeline monitoring |
US20220076779A1 (en) | 2016-06-16 | 2022-03-10 | The Johns Hopkins University | Methods and system for epigenetic analysis |
EP3618842B1 (en) | 2017-05-01 | 2023-10-18 | Juno Therapeutics, Inc. | Combination of a cell therapy and an immunomodulatory compound |
-
2018
- 2018-01-10 JP JP2019537282A patent/JP7429338B2/ja active Active
- 2018-01-10 EP EP18705031.5A patent/EP3568414A1/en active Pending
- 2018-01-10 WO PCT/US2018/013227 patent/WO2018132518A1/en unknown
- 2018-01-10 CA CA3049461A patent/CA3049461A1/en active Pending
- 2018-01-10 CN CN201880016199.3A patent/CN110691792A/zh active Pending
- 2018-01-10 MX MX2019008227A patent/MX2019008227A/es unknown
- 2018-01-10 AU AU2018207305A patent/AU2018207305A1/en active Pending
- 2018-01-10 US US16/476,856 patent/US11821027B2/en active Active
-
2019
- 2019-10-28 MA MA047283A patent/MA47283A/fr unknown
-
2023
- 2023-10-17 US US18/488,850 patent/US20240158837A1/en active Pending
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2015509728A (ja) * | 2012-03-12 | 2015-04-02 | エピオンティス ゲーエムベーハー | Cd3cd4陽性tリンパ球の同定用のエピジェネティックマーカー |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
MOLECULAR THERAPY, vol. 22, no. 9, JPN6022003421, 2014, pages 1698 - 1706, ISSN: 0005065876 * |
SCIENCE, vol. 354, no. 6316, JPN6022003420, 2016, pages 1160 - 1165, ISSN: 0005065878 * |
SCIENCE, vol. 354, no. 6316, JPN6022003422, 2016, pages 1165 - 1169, ISSN: 0005065877 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN110691792A (zh) | 2020-01-14 |
MX2019008227A (es) | 2020-08-17 |
EP3568414A1 (en) | 2019-11-20 |
MA47283A (fr) | 2019-11-20 |
US20240158837A1 (en) | 2024-05-16 |
CA3049461A1 (en) | 2018-07-19 |
WO2018132518A1 (en) | 2018-07-19 |
US20190345543A1 (en) | 2019-11-14 |
JP7429338B2 (ja) | 2024-02-08 |
AU2018207305A1 (en) | 2019-07-25 |
US11821027B2 (en) | 2023-11-21 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7429338B2 (ja) | 細胞療法および関連方法のエピジェネティック解析 | |
Gubin et al. | High-dimensional analysis delineates myeloid and lymphoid compartment remodeling during successful immune-checkpoint cancer therapy | |
JP7430136B2 (ja) | 疲弊したt細胞に関連する疾患を治療するための方法および組成物 | |
EP3585402B1 (en) | Compositions, articles of manufacture and methods related to dosing in cell therapy | |
Christodoulou et al. | Engineering CAR-NK cells to secrete IL-15 sustains their anti-AML functionality but is associated with systemic toxicities | |
US20200147210A1 (en) | Methods and compositions of use of cd8+ tumor infiltrating lymphocyte subtypes and gene signatures thereof | |
Gubin et al. | Checkpoint blockade cancer immunotherapy targets tumour-specific mutant antigens | |
JP2021073440A (ja) | キメラ抗原受容体療法に対する治療応答性を予測するバイオマーカーおよびその使用 | |
JP7038353B2 (ja) | エクスビボのbite活性化t細胞 | |
JP2021502343A (ja) | 細胞療法とガンマセクレターゼ阻害剤との組み合わせ | |
US20190298772A1 (en) | Combination therapy of a t cell-based therapy and a btk inhibitor | |
JP2022084710A (ja) | Car-t細胞の投薬を決定するための方法 | |
JP2023036841A (ja) | キナーゼ阻害剤との組み合わせで治療用t細胞を使用するための方法および組成物 | |
US20210128616A1 (en) | Phenotypic markers for cell therapy and related methods | |
US20220155321A1 (en) | Selection of t cell receptors | |
JP2023528215A (ja) | 臨床応答に関連する特徴量の特定方法およびその使用 | |
US20210102168A1 (en) | Methods and compositions for the modulation of cell interactions and signaling in the tumor microenvironment | |
JP2023519304A (ja) | 多発性骨髄腫における免疫療法の標的およびその同定方法 | |
US20210132042A1 (en) | Methods of assessing or monitoring a response to a cell therapy | |
Zhao et al. | FGL2-targeting T cells exhibit antitumor effects on glioblastoma and recruit tumor-specific brain-resident memory T cells | |
Shahid et al. | Immune profiling after allogeneic hematopoietic cell transplantation in pediatric acute myeloid leukemia | |
Verma et al. | Early expression of CD94 and loss of CD96 on CD8+ T cells after allogeneic stem cell tranplantation is predictive of subsequent relapse and survival | |
US20240091259A1 (en) | Generation of anti-tumor t cells | |
US20240197878A1 (en) | Personalized allogeneic immunotherapy | |
Norton et al. | Changes in immune cell populations following KappaMab, lenalidomide and low‐dose dexamethasone treatment in multiple myeloma |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190807 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210108 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20210108 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20210209 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20220131 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20220415 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220801 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20221128 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230228 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20230524 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20230809 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230818 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20231019 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20231117 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20231117 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20231117 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7429338 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |