JP2020501503A - コンパニオンアニマルにおけるリン又は酵素を調節する組成物及び方法 - Google Patents

コンパニオンアニマルにおけるリン又は酵素を調節する組成物及び方法 Download PDF

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Abstract

コンパニオンアニマルにおける特定の種類の器官健康マーカーは、動物の食餌を調整して、特定の種類の器官健康マーカーを正又は負に調節する化合物の量を増加させるか、又は、動物の食餌を調整して、特定の種類の器官健康マーカーを正又は負に調節する化合物の量を減少させることによって向上され得る。特定の種類の器官健康マーカーは、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの１つ以上であり得る。【選択図】 なし

Description

[0001] （関連出願の相互参照）
本出願は、２０１６年１２月１５日に出願された米国仮出願第６２／４３４，５４２号の優先権を主張し、この開示の全体は本参照により本明細書に組み込まれる。
[0002]リン及び酵素は、生命において必須である。ホスフェート（ホスフェートイオンＰＯ４ ３−を含む化合物）は、ＤＮＡ、ＲＮＡ、及びＡＴＰ、並びに全ての細胞膜を形成するリン脂質の構成要素である。ホスフェート欠乏症候群は、栄養不良、ホスフェートの吸収不全、及び血液からホスフェートを取り込む（栄養不良後の再摂食など）か、又はホスフェートを尿中へ過剰に流出する代謝症候群によって引き起こされ得る。いずれも、血清中及び細胞内の可溶性ホスフェート濃度が低濃度状態である低リン酸血症を特徴とする。低リン血症の症状には、ＡＴＰレベルの低下による神経機能障害、並びに筋肉及び血球の破損が含まれる。ホスフェートが多すぎると、下痢及び、器官及び軟部組織の石灰化（硬化）を引き起こし、体内の鉄、カルシウム、マグネシウム、及び亜鉛の使用能を妨げる可能性がある。
[0003]酵素は、生体高分子触媒である。酵素は、化学反応を加速又は触媒する。プロセスの開始時に酵素が作用し得る分子は基質と呼ばれ、酵素はこれらを生成物と呼ばれる異なる分子に変換する。細胞内のほとんど全ての代謝プロセスは、生命を維持するのに十分な速さで生じるのに酵素を必要とする。細胞内で作製された一連の酵素は、その細胞において生じる代謝経路を決定する。酵素は、生物内で多種多様な機能を果たす。酵素は、しばしばキナーゼ及びホスファターゼを介するシグナル伝達及び細胞調節に不可欠である。酵素はまた、ミオシンに関してはＡＴＰを加水分解して筋収縮を生じさせることにより運動を発生させ、及び細胞骨格系の一部として細胞の周りにカーゴを輸送させもする。酵素は、固有の生体機能に加えて、それらの由来する組織をもとに、組織損傷及び疾患のサロゲートマーカーとしても機能し得る。マーカーとしての機能は、組織における細胞破壊により、酵素が（通常は血流中へ）放出され及び測定されることにより得られる。
[0004]本開示は、全体的に、ペットフード組成物；ペットフードの栄養効果を高める方法；及びコンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つを調節するための方法；に関する。具体的には、本開示は、コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つを調節するための代謝産物に関する。
[0005]本発明者らは、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼに関連する代謝化合物を同定することで、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼの予測モデルを開発した。他の外部因子を最小限に抑えるために、全て同じ食餌を与えられた複数のイヌを使用することで、高度に制御された研究が採用された。次に、同定された化合物を異なる濃度で（食餌を変えることにより）イヌ群に供給し、対応するリン／酵素の変化を測定することによって、検証モデルを開発した。
[0006]したがって、一般的な実施形態では、本開示は、タンパク質と、炭水化物と、脂肪と、繊維と、コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つを調節するための代謝産物と、を含む、ペットフード組成物を提供する。一実施形態では、ペットフード組成物は、コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つにおいて、少なくとも５％の増加又は少なくとも５％の減少を提供し得る。一態様では、ペットフードは、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼの増加を提供し得る。別の態様では、ペットフードは、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼの減少を提供し得る。
[0007]本開示はまた、ペットフードの製造に関連するコストを最小化する方法；ペットフードの栄養効果を高める方法；コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つを調節するための方法；及びコンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼの量における変化を検出する方法；をも提供する。
[0008]本開示によって提供される１つ以上の実施形態の利点は、動物の食餌を調整して、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼを正に調節する化合物の量を増加させるか、又はリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼを負に調節する化合物の量を減少させることによって、コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼを増加させるか又は減少させることである。
[0009]本開示によって提供される１つ以上の実施形態の別の利点は、一般に、本明細書で議論される非限定的な実施例によって例示されるように、同定された化合物又はその前駆体を適切に多量に含む又は少量含む成分を用いることによって、ペットフードの製造コストを最小化することである。
[0010]更なる特徴及び利点が本明細書において記述されており、下記の「発明を実施するための形態」から明らかとなるであろう。
[0011]定義
[0012]本開示及び添付の特許請求の範囲において使用するとき、単数形「１つの」（「a」、「an」及び「the」）には、別段の指示がない限り、複数の参照物も含まれる。したがって、例えば、「組成物（a composition）」又は「組成物（the composition）」についての言及は、２つ以上の組成物を含む。「Ｘ及び／又はＹ」という文脈で使用される用語「及び／又は」は、「Ｘ」、又は「Ｙ」、又は「Ｘ及びＹ」として解釈されるべきである。本明細書で使用される場合、用語の一覧が続く際の用語「例」及び「など」、「特に」は、単なる例示及び説明であり、排他的なもの又は包括的なものではない。
[0013]本明細書で使用されるとき、「約」は、例えば、参照数字の−１０％〜＋１０％の範囲、−５％〜＋５％の範囲内、又は一態様では、参照番号の−１％〜＋１％の範囲内、及び特定の態様では、参照番号の−０．１％〜＋０．１％の範囲内の数を指すものと理解される。更に、本明細書における全ての数値範囲は、その範囲内の全ての整数（integers,whole）又は分数を含むものと理解されるべきである。更に、これらの数値範囲は、この範囲内の任意の数又は数の部分集合を対象とする請求項を支持するために与えられていると解釈すべきである。例えば、１〜１０という開示は、１〜８、３〜７、１〜９、３．６〜４．６、３．５〜９．９などの範囲を支持するものと解釈すべきである。
[0014]本明細書に記載の全ての百分率は、特に断りのない限り、食品組成物の総重量によるものである。ｐＨについての参照がなされるとき、値は標準的な装置により２５℃にて測定されるｐＨに相当する。「量」は、組成物の１回分当たりの参照成分の総量、又は組成物の別個の単位当たりの総量であってよく、及び／又は乾燥重量による参照成分の重量％であり得る。更に、「量」にはゼロが含まれ、例えば、化合物の量の列挙は、ゼロを含まない範囲が続く場合を除き、その化合物が存在することを必ずしも意味しない。
[0015]用語「食品」、「食品製品」及び「食品組成物」は、ヒトを含む動物によって摂取されることが意図され、動物に少なくとも１つの栄養素を提供する製品又は組成物を意味する。更に、この点において、これらの用語は、製品又は組成物は、摂取の準備が整った形態であり、それから摂取可能な製品又は組成物が作られる、単なる中間体ではないことを意味しているものの、いくつかの実施形態では、他の食品組成物を加えることができる。用語「ペットフード」とは、ペットに摂取されることを意図した任意の食品組成物を意味する。用語「ペット」とは、本開示により提供される組成物から恩恵を授かることができるか、又はかかる組成物を堪能することのできる任意の動物を意味する。例えば、ペットは、鳥類、ウシ科動物、イヌ科動物、ウマ科動物、ネコ科動物、ヤギ、オオカミ科動物、ネズミ、ヒツジ又はブタといった動物であってもよいが、ペットは任意の好適な動物であり得る。
[0016]用語「コンパニオンアニマル」とは、犬又は猫を意味する。一実施形態では、本明細書に開示される組成物及び方法は、高齢の犬又は高齢の猫に関与する。犬は、犬の寿命の最後の２５％にある場合高齢と見なされる。犬の寿命は、その体格及び／又は犬種によるが、本開示においては、高齢犬は、少なくとも５歳齢（例えば、少なくとも６歳齢、少なくとも７歳齢、又は少なくとも８歳齢）である犬である。猫の寿命は、その体格及び／又は猫種によるが、本開示においては、高齢猫は、少なくとも７歳齢（例えば、少なくとも８歳齢、少なくとも９歳齢、又は少なくとも１０歳齢）である猫である。
[0017]本明細書で使用されるとき、「同程度のコンパニオンアニマル」とは、コンパニオンアニマルと同じ性別、品種、及び年齢の健康な動物を指す。
[0018]本明細書で使用されるとき、「代謝産物」は、代謝の中間体又は生成物でありコンパニオンアニマルにおいて生物学的活性を有する化合物を指し、その前駆体を含む。本明細書で使用されるとき、「前駆体」は、コンパニオンアニマルにおいて代謝中に代謝産物へと代謝する任意の化合物を指す。例えば、特定の代謝産物がシステインである場合、「代謝産物」はシステインの前駆体（例えば、メチオニン）を含む。
[0019]「有効な量」という用語は、（ｉ）本明細書に記載されている特定の疾患、状態、若しくは障害を治療若しくは予防するか、（ｉｉ）特定の疾患、状態、若しくは障害のうちの１つ以上の症状を減弱、改善、若しくは排除するか、又は（ｉｉｉ）特定の疾患、状態、若しくは障害のうちの１つ以上の症状の発症を予防若しくは遅延させる本発明の化合物の量を意味する。一実施形態では、本代謝産物又は代謝産物の組み合わせは、コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼを調節するのに有効な量で存在し得る。
[0020]本明細書において表現される投与量は、別に表現しない限り、１日当たりの体重１ｋｇ当たりのミリグラム（ｍｇ／ｋｇ／日）である。
[0021]用語「長期投与」は、１ヶ月を超える反復投与又は摂取の期間を意味する。所定の実施形態のために、２、３、又は４ヶ月より長い期間を用いることができる。また、５、６、７、８、９、又は１０ヶ月以上を含むより長い期間を用いることもできる。１１ヶ月又は１年を超える期間を使用してもよい。１年、２年、３年、又はそれ以上の年を超えて延長したより長期の使用は、本発明に含まれる。特定の老齢動物については、動物は、その残りの生涯にわたって定期的な摂取を続けることになるであろう。これはまた、「長い」期間の摂取と称することができる。
[0022]用語「定期的に」又は「定期的投与」は、少なくとも毎月の組成物の投与又は組成物の摂取を意味し、一態様では、少なくとも毎週の投与を意味する。所定の実施形態では、週に２回又は３回など、より頻繁な投与又は摂取を行うことができる。更に、他の実施形態では、少なくとも１日１回の摂取を含む計画を用いることができる。当業者は、化合物又はその化合物の特定の代謝産物の血中濃度又はその化合物の摂取後に生じる血中濃度が、投与頻度を評価又は決定するための有用なツールであり得ることを理解するであろう。例えば、特定の代謝産物を含むペットフード組成物における供給量を決定するために、その代謝産物の血中濃度によって有用な情報が提供され得る。本明細書において明示的に例示されているかどうかにかかわらず、代謝産物などの測定される化合物の所望の血中濃度を許容可能範囲内に維持することを可能にする頻度は、本明細書において有用であり得る。当業者であれば、供給量は、摂取又は投与される組成物並びに食物を摂取する動物の関数であり、いくつかの食品組成物は、測定される化合物（例えば、代謝産物）の所望の血中濃度を維持するために、より多い又はより少ない頻度での投与を必要とし得ることを理解するであろう。
[0023]相対的な用語である「改善する（improve）」、「増加する（increase）」、「高める（enhance）」、「減少する（decrease）」などは、代謝産物などを少量有するか又は含まないが他は同一である組成物と比較して、本明細書に開示される組成物（代謝産物を含む組成物）の効果を指す。
[0024]「ブレンドされた」組成物は、互いに少なくとも１つの異なる特性を有する少なくとも２つの成分を単に有するものである。一態様では、含水率と水分活性とは、本開示の文脈で異なり得る。この点において、「ブレンドされた」組成物についての記載は、ブレンドされた組成物が「ブレンド」と称されることがある、つまりは成分を互いに区別できないように混合する加工を受けることを意味するものではなく、一態様では、ある成分を他の成分と混合してブレンドされた組成物を形成する際（例えば、ドライ成分をウェット成分又はセミモイスト成分と混合する際）、かかる加工は回避される。更に、この点に関して、ブレンドされた組成物において、互いに少なくとも１つの異なる特性を有する少なくとも２つの成分の各々は、それらの別個の同一性及び外観を保持し得る。
[0025]「ウェットフード」とは、含水率が約５０％〜約９０％、一態様では約７０％〜約９０％のペットフードを意味する。「ドライフード」とは、含水率が約２０％未満、一態様では約１５％未満、特定の態様では約１０％未満のペットフードを意味する。「セミモイストフード」とは、含水率が約２０％〜約５０％、一態様では約２５％〜約３５％のペットフードを意味する。
[0026]「キブル」は本明細書では「チャンク」と同義的に使用され、両方の用語はペレット形状又は他の任意の形状を有し得るドライ又はセミモイストのペットフード片を意味し、食品組成物を個別の片にスライスすることで作ることができる。キブルの非限定例としては、粒子状のもの、ペレット、ペットフード、脱水肉、食肉代替品、野菜、及びこれらの組み合わせの片、並びに肉若しくは野菜の干物、ローハイド、及びビスケットなどのペットスナックが挙げられる。「食肉代替品」とは、外観、食感及び物理的構造の点で天然の肉片に類似している肉エマルジョン製品である。
[0027]用語「リン／酵素」及び「器官健康マーカー」は、相互に交換可能であり、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼからなる群の少なくとも１つの要素を指す。
[0028]用語「栄養補助食品」とは、通常の動物の食餌に加えて摂取されることが意図された製品を意味する。栄養補助食品は、任意の形態、例えば、固体、液体、ゲル、錠剤、カプセル、粉末などであってよい。一態様では、それらは都合のよい投与形態で提供され得る。いくつかの実施形態では、それらは、バルク粉末、液体、ゲル、又は油などのバルク消費者パッケージで提供され得る。他の実施形態では、補助食品は、スナック、トリート、サプリメントバー、飲料などの他の食品アイテムに含まれるようにバルク量で提供され得る。
[0029]本明細書に開示される組成物には、本明細書にて具体的に開示されない任意の要素が存在しない場合がある。したがって、「を含む（comprising）」という用語を用いた実施形態の開示は、特定されている構成成分「から本質的になる（consisting essentially of）」及び「からなる（consisting of）」実施形態の開示を含む。同様にして、本明細書で開示される方法には、本明細書において具体的に開示されない任意のステップが存在しない場合がある。したがって、「を含む」という用語を用いた実施形態の開示は、特定されているステップ「から本質的になる」及び「からなる」実施形態の開示を含む。別途記載のない限り及び直接的に明言のない限り、本明細書に開示される任意の実施形態を、任意の他の実施形態と組み合わせることもできる。
[0030]実施形態、態様、実施例などの本議論は、それらが全ての方法及び組成物に適用し得るという点で独立している。例えば、ペットフード組成物に使用される代謝産物は、かかるペットフードの作製に関連するコストを最小限に抑える方法又は調節する方法に使用することができ、その逆も可能である。
[0031] 実施形態
本開示の一態様では、ペットフード組成物は、タンパク質と、炭水化物と、脂肪と、繊維と、コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つとを調節するための代謝産物を含み得る。一態様では、ペットフード組成物は、コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼを調節するための少なくとも２つの別個の代謝産物を含む、少なくとも８つの別個の代謝産物を含み得る。一実施形態では、ペットフード組成物は、コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つにおいて増加を提供し得る。一態様では、コンパニオンアニマルは高齢犬又は高齢猫であり得る。
[0032]本開示の別の態様では、コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つを調節する方法が提供される。本方法は、タンパク質と、炭水化物と、脂肪と、繊維と、コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つを調節するための代謝産物と、を含む、ペットフード組成物をコンパニオンアニマルに投与するステップを含む。一態様では、コンパニオンアニマルは高齢犬又は高齢猫であり得る。
[0033]本開示の更に別の態様では、コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つの量の変化を測定する方法は、コンパニオンアニマルの血清サンプルを取得するステップと、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つを調節する血清サンプルから少なくとも３つの別個の代謝産物の濃度を測定するステップと、代謝産物濃度を、同程度のコンパニオンアニマルの各代謝産物の平均代謝産物濃度と比較した後、代謝産物濃度が平均代謝産物濃度と異なる場合、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼが変化したとして判定するステップと、を含み得る。
[0034]本開示の更に別の態様は、高齢犬又は高齢猫などのコンパニオンアニマルによる摂取のために設計された第１の配合を有するペットフードの製造に関連するコストを最小化する方法である。本開示の更なる態様は、高齢犬又は高齢猫などのコンパニオンアニマルに摂取されるように設計された第１の配合を有するペットフードの栄養効果を高める方法である。これらの方法は、ペットフードの第１の配合を調整して第２の配合にするステップを含む。第１及び第２の配合のうちの少なくとも１つは、コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つを調節するための代謝産物を含む。調整は、第１の配合における代謝産物の量を第２の配合において異なる量に変更することを含む。
[0035]コストの「最小化」とは、第２の配合の作製に関連するコストが、第１の配合の作製に関連するコストよりも低いことを意味する（例えば、１回分当たりの単位、単位重量当たり、単位体積当たり、又は総エネルギー当たりなど）。「高められた」栄養効果とは、第２の配合の栄養効果が、第１の配合の栄養効果よりも大きいことを意味する。
[0036]本明細書で議論されるように、ペットフード組成物及び方法は、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つを調節するための代謝産物又は複数の代謝産物を含有し得る。様々な態様では、本組成物及び方法は、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちのいずれか１つ、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの２つ、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの３つ、若しくはリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼの各々１つについて、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は更には１０の代謝産物を含有し得る。このように、一実施形態では、組成物は、コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼの各々１つを個別に調節するための少なくとも３つの代謝産物を含む、少なくとも１２つの代謝産物を含み得る。別の実施形態では、組成物は、コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼの各々１つを個別に調節するための少なくとも３つの代謝産物を含む、少なくとも１６の代謝産物を含み得る。更に、一実施形態では、組成物は、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つを調節する少なくとも４つの別個の代謝産物を含み得る。更には、一実施形態では、組成物は、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つを調節する少なくとも５つの別個の代謝産物を含み得る。更に別の実施形態では、本方法は、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼからなる群から選択される少なくとも２つの要素を調節することができ、組成物は、少なくとも６つの別個の代謝産物、少なくとも２つの要素の各々を調節するための３つの別個の代謝産物を含み得る。更に別の実施形態では、本方法は、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼからなる群から選択される少なくとも３つの要素を調節することができ、組成物は、少なくとも９つの別個の代謝産物、少なくとも３つの要素の各々を調節するための３つの別個の代謝産物を含み得る。更に別の実施形態では、本方法は、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼの各々を調節することができ、組成物は、少なくとも１２の別個の代謝産物、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼの各々を調節するための３つの別個の代謝産物を含み得る。上述のように、代謝産物と、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼとの関係は、方法及び組成物の実施形態の両方において使用され得る。
[0037]いくつかの実施形態では、代謝産物は特定のリン／酵素を負に調節し、代謝産物の量の変更は、代謝産物の量を減少させることを含む。いくつかの実施形態では、代謝産物は特定のリン／酵素を負に調節し、代謝産物の量の変更は、代謝産物の量を増加させることを含む。いくつかの実施形態では、代謝産物は特定のリン／酵素を正に調節し、代謝産物の量の変更は、代謝産物の量を増加させることを含む。他の実施形態では、代謝産物は特定のリン／酵素を正に調節し、代謝産物の量の変更は、代謝産物の量を減少させることを含む。これらは、互いに排他的な実施形態ではなく、特定の実施形態は、第１の特定のリン／酵素を負に調節する代謝産物の量を減少させ、第２の特定のリン／酵素を正に調節する代謝産物の量を増加させることを含むことができ、第１及び第２の特定のリン／酵素は、同じ又は異なる特定のリン／酵素（例えば、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの１つ以上）であり得る。
[0038]代謝産物の量を減少させることは、代謝産物の量を直接減少させること、及び／又は代謝産物を含む成分の量を減少させることを含み得る。いくつかの実施形態では、代謝産物の量を減少させることは、代謝産物の前駆体の量を直接減少させること、及び／又は代謝産物の前駆体を含む成分の量を減少させることを含み得る。例えば、第２の配合は、第１の配合と比較して、多量の代謝産物又はその前駆体を有する成分（例えば、代謝産物又はその前駆体の量を、他の成分のうちの１つ以上のものの量より多く有する成分）をより少なく含有し得る。
[0039]代謝産物の量を増加させることは、代謝産物の量を直接増加させること、及び／又は代謝産物を含む成分の量を増加させることを含み得る。いくつかの実施形態では、代謝産物の量を増加させることは、代謝産物の前駆体の量を直接増加させること、及び／又は代謝産物の前駆体を含む成分の量を増加させることを含み得る。例えば、第２の配合は、第１の配合と比較して、多量の代謝産物又はその前駆体を有する成分（例えば、代謝産物又はその前駆体の量を、他の成分のうちの１つ以上のものの量より多く有する成分）をより多く含有し得る。
[0040]一般的には、本明細書に記載される方法及び組成物は、コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つにおいて増加又は減少を提供し得る。いくつかの実施形態では、増減は、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、又は更に５０％であり得る。一態様では、組成物及び方法は増加を提供し得る。別の態様では、組成物及び方法は低下を提供し得る。このように、本調節及びその結果として生じる増加又は減少は、元の組織（肝臓、腎臓、骨、胎盤、腸、膵臓、心臓、筋肉、赤血球などを含むが、これらに限定されない）に対する損傷又は疾患を治療及び／又は防止し、並びに低リン酸血症、神経機能障害、下痢、器官の石灰化、又は軟部組織の石灰化を治療し得る。
[0041]一実施形態では、増加又は減少は、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも２つにおいて可能である。別の実施形態では、増加又は減少は、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも３つにおいて可能である。更に別の実施形態では、この増加又は減少は、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼの各々１つにおいて可能である。
[0042]成分中の代謝産物（例えば、代謝産物の前駆体）及び任意量の代謝産物を含む成分は、例えばガスクロマトグラフィー又は液体クロマトグラフィーなどの分離技術を使用して、次に質量分析を使用する、成分分析によって同定され得る。
[0043]これらの組成物及び方法の各々において、ペットフード組成物は、ウェットフード、セミモイストフード又はドライフードであり得る。一実施形態では、ペットフード組成物は、ブレンドされた組成物の１つ以上の成分である。いくつかの実施形態では、ペットフード組成物はキブルであり、いくつかの実施形態では、ペットフード組成物は食肉代替品である。更に、別の実施形態では、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼを調節するための本組成物は、本明細書に記載される代謝産物を含む栄養補助食品であり得る。更に、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つを調節する方法は、コンパニオンアニマルに栄養補助食品を投与するステップを含み得る。
[0044]かかるペットフード組成物は、コンパニオンアニマルの体重１ポンド当たり約３ｇのペットフードから体重１ポンド当たり約１６ｇのペットフードまでの範囲の量でコンパニオンアニマルに投与され得る。更に、代謝産物は、食品組成物の約０．０１重量％〜約１０重量％の量で存在し得る。一態様では、代謝産物は、食品の約０．０１〜約１，０００ｍｇ／ｋｇの濃度で存在し得る。別の態様では、代謝産物は、食品の１キログラム当たり約１ＩＵ〜約５００，０００ＩＵの濃度で存在し得る。一実施形態では、ペットフード組成物は、動物の健康及び／又は体重を維持するのに十分な量でコンパニオンアニマルに投与され得る。一態様では、投与は定期的投与であり得る。
[0045]上記され、本出願において以下に詳述されるように、本発明者らは、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼに関連する代謝化合物を同定した。したがって、ペットフード組成物中の代謝産物は、これらの化合物のうちの１つであり得る。しかしながら、代謝産物は、代謝産物が本明細書に明示的に開示されていない場合であっても、コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つを調節するための任意の代謝産物であり得る。例えば、代謝産物は、本明細書中に開示される方法を使用して同定されるが、本明細書に明示的に開示されていない化合物であり得る。更には、化合物がリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つと確実に関連する場合、代謝産物は、本明細書に開示されていない方法を使用して同定される化合物であり得る。
[0046]非限定的な例として、代謝産物は、リンを調節することができ、Ｘ−１６０１３、Ｘ−１２１９５、ホモシステイン、Ｘ−１６９７５、エリトリトール、アラビトール、ベタイン、Ｎ−アセチルフェニルアラニン、Ｘ−０９７８９、３−ヒドロキシ酪酸（ＢＨＢＡ）、シトルリン、マンノース、２−オキシインドール−３−酢酸、Ｎ−アセチルトリプトファン、グリセリン酸、Ｘ−１５４３９、キシロン酸、トレイトール、３−アミノイソ酪酸、アラキドン酸（２０：４ｎ６）、Ｘ−１１３７８、γ−グルタミルフェニルアラニン、フェニルアラニン、Ｘ−１６０７１、トリゴネリン（Ｎ’−ニコチン酸メチル）、アラントイン、グルタチオン（酸化型（ＧＳＳＧ））、Ｎ−アセチルセリン、アラビノース、及びこれらの混合物からなる群から選択され得る。一実施形態では、代謝産物はリンを調節することができ、ホモシステイン、エリトリトール、アラビトール、ベタイン、Ｎ−アセチルフェニルアラニン、３−ヒドロキシ酪酸（ＢＨＢＡ）、シトルリン、マンノース、２−オキシインドール−３−酢酸、Ｎ−アセチルトリプトファン、グリセリン酸、キシロン酸、トレイトール、３−アミノイソ酪酸、アラキドン酸（２０：４ｎ６）、γ−グルタミルフェニルアラニン、フェニルアラニン、トリゴネリン（Ｎ’−ニコチン酸メチル）、アラントイン、グルタチオン（酸化型（ＧＳＳＧ））、Ｎ−アセチルセリン、アラビノース、及びこれらの混合物からなる群から選択され得る。
[0047]別の非限定的な例として、代謝産物は、アルカリホスファターゼを調節することができ、リジン、Ｘ−１４３１４、γ−グルタミルフェニルアラニン、Ｘ−１１９１４、アラビノース、フェニルアラニン、及びこれらの混合物からなる群から選択され得る。一実施形態において、代謝産物は、アルカリホスファターゼを調節することができ、リジン、γ−グルタミルフェニルアラニン、アラビノース、フェニルアラニン、及びこれらの混合物からなる群から選択され得る。
[0048]更に別の非限定的な例として、代謝産物は、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼを調節することができ、３−ウレイドプロピオン酸、トレイトール、エリスロン酸、グロノ−１，４−ラクトン、Ｃ−グリコシルトリプトファン、尿素、２−ヒドロキシグルタル酸、ブチリルカルニチン、ジメチルグリシン、プソイドウリジン、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ；２０：５ｎ３）、ウラシル、Ｘ−１２１０４、１−リノレオイルグリセロホスホイノシトール、ジホモリノレン酸（２０：３ｎ３又はｎ６）、ホスフェート、及びこれらの混合物からなる群から選択され得る。一実施形態では、代謝産物は、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼを調節することができ、３−ウレイドプロピオン酸、トレイトール、エリスロン酸、グロノ−１，４−ラクトン、Ｃ−グリコシルトリプトファン、尿素、２−ヒドロキシグルタル酸、ブチリルカルニチン、ジメチルグリシン、プソイドウリジン、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ；２０：５ｎ３）、ウラシル、及びこれらの混合物からなる群から選択され得る。
[0049]更なる非限定的な例として、代謝産物は、γ−グルタミルトランスフェラーゼを調節することができ、３−アミノイソ酪酸、トリゴネリン（Ｎ’−ニコチン酸メチル）、Ｎ−アセチルセリン、タウロケノデオキシコール酸、エリトリトール、１５−メチルパルミチン酸（２−メチルパルミチン酸の同重体）、アラントイン、タウロコール酸、トレイトール、３−ホスホグリセリン酸、ベタイン、アラビトール、セバシン酸（デカン二酸）、Ｘ−１６９７５、スタキドリン、シトルリン、クエン酸塩、グリコール酸（ヒドロキシ酢酸）、カンペステロール、Ｘ−１２１９５、Ｘ−１１９１４、Ｘ−０９７８９、及びこれらの混合物からなる群から選択され得る。一実施形態では、代謝産物は、γ−グルタミルトランスフェラーゼを調節することができ、３−アミノイソ酪酸、トリゴネリン（Ｎ’−ニコチン酸メチル）、Ｎ−アセチルセリン、タウロケノデオキシコール酸、エリトリトール、１５−メチルパルミチン酸（２−メチルパルミチン酸の同重体）、アラントイン、タウロコール酸、トレイトール、及びこれらの混合物からなる群から選択され得る。
[0050]本開示の更に別の態様では、方法は、コンパニオンアニマルによって摂取されるように設計された第１の配合を有するペットフードの栄養効果を高め、この方法は、第１の配合を有するペットフードを、第１のコンパニオンアニマルに投与するステップを含む。この方法は、コンパニオンアニマルからの体液サンプル（例えば、血漿）中の、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つを調節する代謝産物を含むサロゲートマーカーの量を測定するステップを更に含む。この方法は、ペットフードの第１の配合を、第２の配合へと調整するステップを更に含み、かかる第２の配合は、（ｉ）第２の配合中に存在し、第１の配合中に存在しない成分、（ｉｉ）第２の配合中に存在せず、第１の配合中に存在する成分、（ｉｉｉ）第１及び第２の配合中に異なる量で存在する成分、及び（ｉｖ）これらの組み合わせ、からなる群から選択されて第１の配合とは異なる第２の配合を有する。調整は、前工程において測定されたサロゲートマーカーの量に少なくとも部分的に基づく。
[0051]調整は、特定のリン／酵素を負に調節する代謝産物の量を直接減少させること、及び／又は特定のリン／酵素を負に調節する代謝産物を含む成分の量を減少させることを含み得る。いくつかの実施形態では、代謝産物の量を減少させることは、代謝産物の前駆体の量を直接減少させること、及び／又は代謝産物の前駆体を含む成分の量を減少させることを含み得る。例えば、第２の配合は、第１の配合と比較して、多量の代謝産物又はその前駆体を有する成分（例えば、代謝産物又はその前駆体の量を、他の成分のうちの１つ以上のものの量より多く有する成分）をより少なく含有し得る。
[0052]調整は、特定のリン／酵素を正に調節する代謝産物の量を直接増加させること、及び／又は特定のリン／酵素を正に調節する代謝産物を含む成分の量を増加させることを含み得る、代謝産物の量を増加させることを含み得る。いくつかの実施形態では、代謝産物の量を増加させることは、代謝産物の前駆体の量を直接増加させること、及び／又は代謝産物の前駆体を含む成分の量を増加させることを含み得る。例えば、第２の配合は、第１の配合と比較して、多量の代謝産物又はその前駆体を有する成分（例えば、代謝産物又はその前駆体の量を、他の成分のうちの１つ以上のものの量より多く有する成分）をより多く含有し得る。
[0053]上記したように、代謝産物（例えば代謝産物の前駆体）を含む成分、及び任意に成分中の代謝産物の量は、例えば、ガスクロマトグラフィー又は液体クロマトグラフィーなどの分離技術を使用して、次に質量分析を使用する、成分分析によって同定することができる。
[0054]本方法は、第２の配合にてペットフードを製造するステップを更に含む。一実施形態では、方法は、第２の配合を有するペットフードを、第２のコンパニオンアニマルに投与するステップを含む。
[0055]この方法は、特定のコンパニオンアニマルのためにカスタマイズされた栄養を提供するのに使用され得る。例えば、第１及び第２のコンパニオンアニマルは、第１の配合を有するペットフードを投与される動物が、評価される第１の配合の特定のリン／酵素を１つ以上有するような、同じ特定のコンパニオンアニマルであり得る。次いで、この同じ動物には、得られた第２の配合が提供され、かかる配合により、動物は、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つをより効果的に調節する。その結果、ペット所有者は、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの１つ以上における、ペットの年齢に起因する変化を補償し得る。
[0056]代替的又は追加的に、この方法は、性別、おおよその年齢、おおよその体型（例えば、体重、高さ、及び／又は長さ）又は品種のうちの１つ以上が共通するコンパニオンアニマルのためにカスタマイズされた栄養を提供するのに使用され得る。例えば、第２のコンパニオンアニマルは、第１のコンパニオンアニマルとは異なる特定の動物であり得るが、（ｉ）第１のコンパニオンアニマルとほぼ同じ位の年齢、（ｉｉ）第１のコンパニオンアニマルと同じ位の体型、（ｉｉｉ）第１のコンパニオンアニマルと同じ品種、（ｉｖ）第１のコンパニオンアニマルと同じ性別、及び（ｉｖ）これらの組み合わせからなる群から選択される特性を有する。一実施形態では、第２のコンパニオンアニマルは、各々が第１のコンパニオンアニマルと特性を共有する複数のコンパニオンアニマルのうちの１つであり得る。この方法は、第２の配合を有するペットフードを、複数のコンパニオンアニマルに投与するステップを含み得る。一実施形態では、複数のコンパニオンアニマルの少なくとも一部は、第１のコンパニオンアニマルとは離れて位置する。
[0057]本明細書で開示されるペットフード組成物は、コンパニオンアニマルなどのペットによる摂取のために配合される任意の食品であり得る。一実施形態では、ペットフード組成物は、米国飼料検査官協会（ＡＡＦＣＯ）によって定義され、組成物が意図される動物の種類（例えば、犬又は猫）によって異なる完全栄養を提供する。
[0058]ペットフード組成物は、乳化した肉などの肉を含んでもよい。好適な肉の例としては、家禽肉、牛肉、豚肉、ラム肉、及び魚、特にペットに好適な種類の肉が挙げられる。肉は、臓物を含む、動物の任意の追加的な部分を含むことができる。肉のいくらか又は全てを、１種以上のミートミールとして、すなわち、ＡＡＦＣＯが規定するとおりの、乾燥したか又はひき肉にした、実質的に均一なサイズの粒子を形成する肉として提供してもよい。追加的又は代替的に、エンドウ豆タンパク質、トウモロコシタンパク質（例えば、挽いたトウモロコシ又はトウモロコシグルテン）、小麦タンパク質（例えば、挽いた小麦又は小麦グルテン）、大豆タンパク質（例えば、大豆粕、大豆濃縮物、又は大豆分離物）、米タンパク質（例えば、挽いた米又は米グルテン）等の植物性タンパク質を使用することができる。
[0059]本明細書に開示されるペットフード組成物は、植物油、風味剤、着色剤及び水を含み得る。好適な植物油としては、大豆油、トウモロコシ油、綿実油、ヒマワリ油、キャノーラ油、落花生油、紅花油等が挙げられる。好適な風味剤の例としては、酵母、獣脂、レンダリングされた動物肉（例えば、家禽肉、牛肉、ラム肉、豚肉）、風味抽出物又はブレンド（例えば、グリルした牛肉）、動物消化物などが挙げられる。好適な着色剤としては、青色１号、青色２号、緑色３号、赤色３号、赤色４０号、黄色５号、黄色６号等のＦＤ＆Ｃ着色剤、カラメル色素、アンナット、クロロフィリン、コチニール、ベタニン、ウコン、サフラン、パプリカ、リコピン、ニワトコジュース、パンダン、チョウマメ等の天然色素、二酸化チタン；並びに当業者に既知の任意の好適な食品着色剤が挙げられる。
[0060]本明細書で開示されるペットフード組成物は、穀粉に追加又はその代替として他の穀物及び／又は他のデンプン、アミノ酸、食物繊維、糖類、動物油、アロマ類、植物油に追加又はその代替として他の油、湿潤剤、保存料、ポリオール、塩、口腔ケア成分、抗酸化剤、ビタミン、ミネラル、プロバイオティクス微生物、生理活性分子、又はこれらの組み合わせ等の追加の原材料を任意に含み得る。
[0061]好適なデンプンとしては、例えば、トウモロコシ、米、小麦、大麦、カラス麦、大豆等の穀物、並びにこれらの穀物の混合物が挙げられ、好適なデンプンは、いずれかの穀粉に少なくとも部分的に含まれ得る。好適な湿潤剤としては、塩、糖類、プロピレングリコール、並びにグリセリン及びソルビトール等の多価グリコール（polyhydric glycol）等が挙げられる。好適な口腔ケア成分としては、クロロフィルを含有するアルファルファ栄養素濃縮物、重炭酸ナトリウム、ホスフェート（例えば、リン酸三カルシウム、ピロリン酸、ピロリン酸四ナトリウム、メタリン酸、及びオルトリン酸）、ペパーミント、クローブ、パセリ、生姜などが挙げられる。好適な抗酸化剤の例としては、ブチル化ヒドロキシアニソール（「ＢＨＡ」）、及びブチル化ヒドロキシトルエン（「ＢＨＴ」）、ビタミンＥ（トコフェロール）等が挙げられる。
[0062]使用され得るビタミンの非限定的な例としては、ビタミンＡ、Ｂ複合体（Ｂ−１、Ｂ−２、Ｂ−６及びＢ−１２等）、Ｃ、Ｄ、Ｅ及びＫ、ナイアシン並びにパントテン酸及び葉酸等の酸性ビタミン並びにビオチンが挙げられる。好適なミネラルの非限定的な例としては、カルシウム、鉄、亜鉛、マグネシウム、ヨウ素、銅、リン、マンガン、カリウム、クロム、モリブデン、セレン、ニッケル、スズ、ケイ素、バナジウム、及びホウ素などが挙げられる。
[0063]好適な保存料の非限定例としては、ソルビン酸カリウム、ソルビン酸、パラヒドロキシ安息香酸メチルナトリウム、プロピオン酸カルシウム、プロピオン酸及びこれらの組み合わせが挙げられる。
[0064]本明細書で開示されるペットフード組成物における各々の更なる成分の具体的な量は、第１の食材及び任意の第２の食材に含まれる成分；動物の種；動物の年齢、体重、健康状態、性別、及び食餌；動物の飲食速度；食品製品を動物に摂取させる目的などの様々な因子に応じたものとなる。したがって、成分、及びその量は非常に様々であり得る。
[0065]例えば、上記の成分のいずれかの量は、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの１つ以上において推定される効果（例えば、本明細書中に開示される方法の１つによって同定される効果）に基づいて増加又は減少され得る。一実施形態では、上記の成分の１つ以上の量は、かかる成分が、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの１つ以上を正に調節する代謝産物を含む場合、増加され得る。追加的又は代替的に、上記の成分の１つ以上の量は、かかる成分が、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの１つ以上を負に調節する代謝産物を含む場合、減少され得る。
[0066]上記したように、代謝産物（例えば代謝産物の前駆体）を含む成分、及び任意に成分中の代謝産物の量は、例えば、ガスクロマトグラフィー又は液体クロマトグラフィーなどの分離技術を使用して、次に質量分析を使用する、成分分析によって同定することができる。
[0067]以下の非限定的な実施例は、本開示の実施形態の例示である。
方法
[0068]各実施例は、以下の研究から得られた。
[0069]以下の表１に示すように、８３匹のイヌ全てに食餌Ａを５週間供給し、続いて１週間の移行期間後に１５匹に食餌Ｂを５週間供給した。各食餌の第５週の供給中に、一晩絶食した後に血漿及び血清サンプルを採取した。遠心分離後、血漿をクライオバイアルに分割し、−８０℃で凍結させた。製造業者の説明書に従って、Ｃｏｂａｓ（登録商標）ｃ３１１又はｅ４１１臨床化学分析装置（Ｒｏｃｈｅ製）を使用して、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼを測定した。
Figure 2020501503
[0070]代謝分析は、Ｍｅｔａｂｏｌｏｎ Ｉｎｃ．の以下の方法を使用して行った。ＧＣ／ＭＳ及びＬＣ／ＭＳ／ＭＳプラットフォーム上で分析するために、サンプルを抽出して均等に分割した。Ｍｅｔａｂｏｌｏｎ Ｉｎｃ．によるピーク面積積分による代謝産物の同定及び代謝産物の定量のため、独自のソフトウェアを使用して、社内基準ライブラリにイオンを合致させた。以下の表に、各代謝産物を一意に同定し、個々に区別できるように、質量及び保持指標を示す。
[0071]分析の際、サンプルを融解し、タンパク質を除去するための抽出物を調製し、タンパク質に結合した小分子又は沈殿したタンパク質マトリックスに物理的に捕捉された小分子を取り除き、広範囲の化学的に多様な代謝産物を回収した。各実験の血漿サンプルの個別のアリコートを採取した後、「Ｃｌｉｅｎｔ Ｍａｔｒｉｘ」（ＣＭＴＲＸ）サンプルの作成のために分取した。これらのＣＭＴＲＸサンプルは、プラットフォーム実行中に注入され、テクニカルレプリケートとして提供され、一貫して検出される全ての生化学物質の定量における変動を求めること、及び全体的なプロセス変動性及びプラットフォーム性能を監視することを可能にした。全ての実験及びＣＭＴＲＸサンプルの抽出物をＧＣ／ＭＳ及びＬＣ／ＭＳ／ＭＳプラットフォーム上で分析するために分割した。
[0072]ＣＭＴＲＸテクニカルレプリケートサンプルは、クライアント調査サンプルのように、プロセス全体を通じて独立して処理した。全てのプロセスサンプル（ＧＣカラム性能、プロセスブランクなどを評価するために使用される有機成分のＣＭＴＲＸ及びＧｒｏｂ試験混合物）は、毎日等しい間隔をあけて注入し、全てのクライアントサンプルは、毎日の実行中に無作為に分配した。データは、複数のプラットフォーム実行日にわたって収集し、これによって、個々の化合物ごとに各実行日ブロックの中央値を計算することによって「ブロック正規化」した。この正規化により、日間の機器ゲインやドリフトは最小限に抑えられるが、日内のサンプルの変動性には干渉しない。欠測値（もしあれば）は、使用した機器での生化学物質の検出レベルを下回っているものと仮定され、特定の生化学物質に観察された最小値であると解釈した。
[0073]質量分析計への注入の直前に、各実験及びプロセス標準試料にいくつかの内部標準を加えた。これらの内部標準についての相対標準偏差（ＲＳＤ）の中央値を計算することによって、プラットフォーム変動性（７％）の測度が決定される。これらの標準は、機器への注入の直前にサンプルに追加されるので、この値は機器の変動性を反映する。更に、ＣＭＴＲＸにおいて常に測定される生化学物質の相対標準偏差（ＲＳＤ）の中央値は、実際の実験サンプルについてのプロセス内の全変動性及びこれらのサンプル内の内在性代謝産物の定量における変動性（１２％）を表す。ＣＭＴＲＸ及び内部標準に関する結果は、プラットフォームがプロセス仕様に適合するデータを生成したことを示した。
[0074]血漿中に合計５８９個の代謝産物が検出された。この合計は、参照ライブラリ（命名された化合物）で命名された構造と合致する多くの生化学物質（４０１個）に対応する。残りの生化学物質（１８８個）は、個別の化学物質（すなわち、それらが別個の分子式及び構造の単一分子を表す）を表しているが、参照ライブラリ（命名されていない／未知の化合物）で命名された生化学物質と現在は合致していない。
[0075] 実施例１（リン）
リンとの代謝産物相関を、血漿メタボロミクスに基づいて決定した（表２）。これによって、リンに正又は負のいずれかの影響を及ぼし得る化合物の予測モデルが提供された。これらの化合物を異なる濃度で供与し（食餌Ｂ対食餌Ａ；表３）、リンの変化（表４）に注目し、検証モデルとして供した。２つの異なる食餌の代謝産物組成を決定して、特定の化合物の相対的なレベルを特定した。モデルによって検証されたものを表５に示す。
Figure 2020501503
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[0076] 実施例２（アルカリホスファターゼ）
アルカリホスファターゼとの代謝産物相関を、血漿メタボロミクスに基づいて決定した（表６）。これによって、アルカリホスファターゼに正又は負のいずれかの影響を及ぼし得る化合物の予測モデルが提供された。これらの化合物を異なる濃度で供与し（食餌Ｂ対食餌Ａ；表７）、アルカリホスファターゼの変化（表８）に注目し、検証モデルとして供した。２つの異なる食餌の代謝産物組成を決定して、特定の化合物の相対的なレベルを特定した。モデルによって検証された化合物を表９に示す。
Figure 2020501503
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[0077] 実施例３（アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ）
アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼとの代謝産物相関を、血漿メタボロミクスに基づいて決定した（表１０）。これによって、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼに正又は負のいずれかの影響を及ぼし得る化合物の予測モデルが提供された。化合物を異なる濃度で供与し（食餌Ｂ対食餌Ａ；表１１）、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼの変化（表１２）に注目し、検証モデルとして供した。特定の化合物の相対的なレベルを特定するために、２つの異なる食餌の代謝産物組成を決定した。モデルによって検証された化合物を表１３に示す。
Figure 2020501503
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[0078] 実施例４（γ−グルタミルトランスフェラーゼ）
γ−グルタミルトランスフェラーゼとの代謝産物相関を、血漿メタボロミクスに基づいて決定した（表１４）。これによって、γ−グルタミルトランスフェラーゼに正又は負のいずれかの影響を及ぼし得る化合物の予測モデルが提供された。これらの化合物を異なる濃度で供与し（食餌Ｂ対食餌Ａ；表１５）、γ−グルタミルトランスフェラーゼの変化（表１６）に注目し、検証モデルとして供した。特定の化合物の相対的なレベルを特定するために、２つの異なる食餌の代謝産物組成を決定した。モデルによって検証された化合物を表１７に示す。
Figure 2020501503
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[0079]本明細書に記載される本実施形態に対する様々な変更及び修正が、当業者には明らかであることは理解されるべきである。このような変更及び修正は、本発明の主題の趣旨及び範囲から逸脱することなく、かつ意図される利点を損なうことなく、行うことができる。したがって、このような変更及び修正は、添付の特許請求の範囲に包含されることが意図される。

Claims (20)

  1. ペットフード組成物であって、
    タンパク質と、炭水化物と、脂肪と、繊維と、
    コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼを調節するための少なくとも２つの別個の代謝産物を含む、少なくとも８つの別個の代謝産物と、を含み、
    リンを調節する前記代謝産物が、Ｘ−１６０１３、Ｘ−１２１９５、ホモシステイン、Ｘ−１６９７５、エリトリトール、アラビトール、ベタイン、Ｎ−アセチルフェニルアラニン、Ｘ−０９７８９、３−ヒドロキシ酪酸（ＢＨＢＡ）、シトルリン、マンノース、２−オキシインドール−３−酢酸、Ｎ−アセチルトリプトファン、グリセリン酸、Ｘ−１５４３９、キシロン酸、トレイトール、３−アミノイソ酪酸、アラキドン酸（２０：４ｎ６）、Ｘ−１１３７８、γ−グルタミルフェニルアラニン、フェニルアラニン、Ｘ−１６０７１、トリゴネリン（Ｎ’−ニコチン酸メチル）、アラントイン、グルタチオン（酸化型（ＧＳＳＧ））、Ｎ−アセチルセリン、アラビノース、及びこれらの混合物からなる群から選択され；
    アルカリホスファターゼを調節する前記代謝産物が、リジン、Ｘ−１４３１４、γ−グルタミルフェニルアラニン、Ｘ−１１９１４、アラビノース、フェニルアラニン、及びこれらの混合物からなる群から選択され；
    アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼを調節する前記代謝産物が、３−ウレイドプロピオン酸、トレイトール、エリスロン酸、グロノ−１，４−ラクトン、Ｃ−グリコシルトリプトファン、尿素、２−ヒドロキシグルタル酸、ブチリルカルニチン、ジメチルグリシン、プソイドウリジン、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ；２０：５ｎ３）、ウラシル、Ｘ−１２１０４、１−リノレオイルグリセロホスホイノシトール、ジホモリノレン酸（２０：３ｎ３又はｎ６）、ホスフェート、及びこれらの混合物からなる群から選択され；
    γ−グルタミルトランスフェラーゼを調節する前記代謝産物が、３−アミノイソ酪酸、トリゴネリン（Ｎ’−ニコチン酸メチル）、Ｎ−アセチルセリン、タウロケノデオキシコール酸、エリトリトール、１５−メチルパルミチン酸（２−メチルパルミチン酸の同重体）、アラントイン、タウロコール酸、トレイトール、３−ホスホグリセリン酸、ベタイン、アラビトール、セバシン酸（デカン二酸）、Ｘ−１６９７５、スタキドリン、シトルリン、クエン酸塩、グリコール酸（ヒドロキシ酢酸）、カンペステロール、Ｘ−１２１９５、Ｘ−１１９１４、Ｘ−０９７８９、及びこれらの混合物からなる群から選択され；
    前記ペットフード組成物が、前記コンパニオンアニマルに前記ペットフードを投与する際に、前記コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つの量において、少なくとも５％の増加又は少なくとも５％の減少を提供する、ペットフード組成物。
  2. 前記組成物が、コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼの各々を調節するための少なくとも３つの別個の代謝産物を含む、少なくとも１２の別個の代謝産物を含む、請求項１に記載のペットフード組成物。
  3. 前記組成物が、コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼの各々を調節するための少なくとも４つの別個の代謝産物を含む、少なくとも１６の別個の代謝産物を含む、請求項１に記載のペットフード組成物。
  4. 前記代謝産物がリンを調節し、ホモシステイン、エリトリトール、アラビトール、ベタイン、Ｎ−アセチルフェニルアラニン、３−ヒドロキシ酪酸（ＢＨＢＡ）、シトルリン、マンノース、２−オキシインドール−３−酢酸、Ｎ−アセチルトリプトファン、グリセリン酸、キシロン酸、トレイトール、３−アミノイソ酪酸、アラキドン酸（２０：４ｎ６）、γ−グルタミルフェニルアラニン、フェニルアラニン、トリゴネリン（Ｎ’−ニコチン酸メチル）、アラントイン、グルタチオン（酸化型（ＧＳＳＧ））、Ｎ−アセチルセリン、アラビノース、及びこれらの混合物からなる群から選択される、請求項１に記載のペットフード組成物。
  5. 前記代謝産物がアルカリホスファターゼを調節し、リジン、γ−グルタミルフェニルアラニン、アラビノース、フェニルアラニン、及びこれらの混合物からなる群から選択される、請求項１に記載のペットフード組成物。
  6. 前記代謝産物がアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼを調節し、３−ウレイドプロピオン酸、トレイトール、エリスロン酸、グロノ−１，４−ラクトン、Ｃ−グリコシルトリプトファン、尿素、２−ヒドロキシグルタル酸、ブチリルカルニチン、ジメチルグリシン、プソイドウリジン、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ；２０：５ｎ３）、ウラシル、及びこれらの混合物からなる群から選択される、請求項１に記載のペットフード組成物。
  7. 前記代謝産物がγ−グルタミルトランスフェラーゼを調節し、３−アミノイソ酪酸、トリゴネリン（Ｎ’−ニコチン酸メチル）、Ｎ−アセチルセリン、タウロケノデオキシコール酸、エリトリトール、１５−メチルパルミチン酸（２−メチルパルミチン酸の同重体）、アラントイン、タウロコール酸、トレイトール、及びこれらの混合物からなる群から選択される、請求項１に記載のペットフード組成物。
  8. 前記ペットフード組成物が、前記コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つの量において、少なくとも１０％の増加を提供する、請求項１に記載のペットフード組成物。
  9. コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つを調節する方法であって、
    タンパク質と、炭水化物と、脂肪と、繊維と、前記コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つを調節するための少なくとも３つの別個の代謝産物と、を含む、ペットフード組成物を前記コンパニオンアニマルに投与するステップを含み、
    リンを調節する前記代謝産物が、Ｘ−１６０１３、Ｘ−１２１９５、ホモシステイン、Ｘ−１６９７５、エリトリトール、アラビトール、ベタイン、Ｎ−アセチルフェニルアラニン、Ｘ−０９７８９、３−ヒドロキシ酪酸（ＢＨＢＡ）、シトルリン、マンノース、２−オキシインドール−３−酢酸、Ｎ−アセチルトリプトファン、グリセリン酸、Ｘ−１５４３９、キシロン酸、トレイトール、３−アミノイソ酪酸、アラキドン酸（２０：４ｎ６）、Ｘ−１１３７８、γ−グルタミルフェニルアラニン、フェニルアラニン、Ｘ−１６０７１、トリゴネリン（Ｎ’−ニコチン酸メチル）、アラントイン、グルタチオン（酸化型（ＧＳＳＧ））、Ｎ−アセチルセリン、アラビノース、及びこれらの混合物からなる群から選択され；
    アルカリホスファターゼを調節する前記代謝産物が、リジン、Ｘ−１４３１４、γ−グルタミルフェニルアラニン、Ｘ−１１９１４、アラビノース、フェニルアラニン、及びこれらの混合物からなる群から選択され；
    アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼを調節する前記代謝産物が、３−ウレイドプロピオン酸、トレイトール、エリスロン酸、グロノ−１，４−ラクトン、Ｃ−グリコシルトリプトファン、尿素、２−ヒドロキシグルタル酸、ブチリルカルニチン、ジメチルグリシン、プソイドウリジン、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ；２０：５ｎ３）、ウラシル、Ｘ−１２１０４、１−リノレオイルグリセロホスホイノシトール、ジホモリノレン酸（２０：３ｎ３又はｎ６）、ホスフェート、及びこれらの混合物からなる群から選択され；
    γ−グルタミルトランスフェラーゼを調節する前記代謝産物が、３−アミノイソ酪酸、トリゴネリン（Ｎ’−ニコチン酸メチル）、Ｎ−アセチルセリン、タウロケノデオキシコール酸、エリトリトール、１５−メチルパルミチン酸（２−メチルパルミチン酸の同重体）、アラントイン、タウロコール酸、トレイトール、３−ホスホグリセリン酸、ベタイン、アラビトール、セバシン酸（デカン二酸）、Ｘ−１６９７５、スタキドリン、シトルリン、クエン酸塩、グリコール酸（ヒドロキシ酢酸）、カンペステロール、Ｘ−１２１９５、Ｘ−１１９１４、Ｘ−０９７８９、及びこれらの混合物からなる群から選択される、方法。
  10. 前記組成物が、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つを調節する少なくとも４つの別個の代謝産物を含む、請求項９に記載の方法。
  11. 前記組成物が、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つを調節する少なくとも５つの別個の代謝産物を含む、請求項９に記載の方法。
  12. 前記方法が、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼからなる群から選択される少なくとも２つの器官健康マーカーを調節し、前記組成物が、少なくとも６つの別個の代謝産物、前記少なくとも２つの器官健康マーカーの各々を調節するための３つの別個の代謝産物を含む、請求項９に記載の方法。
  13. 前記方法が、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼからなる群から選択される少なくとも３つの器官健康マーカーを調節し、前記組成物が、少なくとも９つの別個の代謝産物、少なくとも３つの器官健康マーカーの各々を調節するための３つの別個の代謝産物を含む、請求項９に記載の方法。
  14. 前記方法が、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼの各々を調節し、前記組成物が、少なくとも１２の別個の代謝産物、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、及びγ−グルタミルトランスフェラーゼの各々を調節するための３つの別個の代謝産物を含む、請求項９に記載の方法。
  15. 前記ペットフード組成物が、前記コンパニオンアニマルに前記ペットフードを定期的に投与する際に、前記コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つにおいて、少なくとも５％の増加又は少なくとも５％の減少を提供する、請求項９に記載の方法。
  16. 前記調節が、肝臓、腎臓、骨、胎盤、腸、膵臓、心臓、筋肉、赤血球を含む元の組織に対する損傷又は疾患；低リン酸血症；神経機能障害；下痢；器官の石灰化；又は軟部組織の石灰化；を治療する、請求項９に記載の方法。
  17. コンパニオンアニマルにおけるリン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つの量における変化を測定する方法であって、
    前記コンパニオンアニマルの血清サンプルを得るステップと、
    少なくとも３つの別個の代謝産物の濃度を、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つを調節する前記血清サンプルから測定するステップと、
    前記代謝産物濃度と、同程度のコンパニオンアニマルの各代謝産物の平均代謝産物濃度とを比較した後、前記代謝産物濃度が前記平均代謝産物濃度と異なる場合、リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼが変化したとして判定するステップとを含み、
    リンを調節する前記代謝産物が、Ｘ−１６０１３、Ｘ−１２１９５、ホモシステイン、Ｘ−１６９７５、エリトリトール、アラビトール、ベタイン、Ｎ−アセチルフェニルアラニン、Ｘ−０９７８９，３−ヒドロキシ酪酸（ＢＨＢＡ）、シトルリン、マンノース、２−オキシインドール−３−酢酸、Ｎ−アセチルトリプトファン、グリセリン酸、Ｘ−１５４３９、キシロン酸、トレイトール、３−アミノイソ酪酸、アラキドン酸（２０：４ｎ６）、Ｘ−１１３７８、γ−グルタミルフェニルアラニン、フェニルアラニン、Ｘ−１６０７１、トリゴネリン（Ｎ’−ニコチン酸メチル）、アラントイン、グルタチオン（酸化型（ＧＳＳＧ））、Ｎ−アセチルセリン、アラビノース、及びこれらの混合物からなる群から選択され；
    アルカリホスファターゼを調節する前記代謝産物が、リジン、Ｘ−１４３１４、γ−グルタミルフェニルアラニン、Ｘ−１１９１４、アラビノース、フェニルアラニン、及びこれらの混合物からなる群から選択され；
    アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼを調節する前記代謝産物が、３−ウレイドプロピオン酸、トレイトール、エリスロン酸、グロノ−１，４−ラクトン、Ｃ−グリコシルトリプトファン、尿素、２−ヒドロキシグルタル酸、ブチリルカルニチン、ジメチルグリシン、プソイドウリジン、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ；２０：５ｎ３）、ウラシル、Ｘ−１２１０４、１−リノレオイルグリセロホスホイノシトール、ジホモリノレン酸（２０：３ｎ３又はｎ６）、ホスフェート、及びこれらの混合物からなる群から選択され；
    γ−グルタミルトランスフェラーゼを調節する前記代謝産物が、３−アミノイソ酪酸、トリゴネリン（Ｎ’−ニコチン酸メチル）、Ｎ−アセチルセリン、タウロケノデオキシコール酸、エリトリトール、１５−メチルパルミチン酸（２−メチルパルミチン酸の同重体）、アラントイン、タウロコール酸、トレイトール、３−ホスホグリセリン酸、ベタイン、アラビトール、セバシン酸（デカン二酸）、Ｘ−１６９７５、スタキドリン、シトルリン、クエン酸塩、グリコール酸（ヒドロキシ酢酸）、カンペステロール、Ｘ−１２１９５、Ｘ−１１９１４、Ｘ−０９７８９、及びこれらの混合物からなる群から選択される、方法。
  18. リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つを調節するための少なくとも４つの別個の代謝産物の濃度を測定する、請求項１７に記載の方法。
  19. リン、アルカリホスファターゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、又はγ−グルタミルトランスフェラーゼのうちの少なくとも１つを調節するための少なくとも５つの別個の代謝産物の濃度を測定する、請求項１７に記載の方法。
  20. 前記代謝産物がリンを調節し、ホモシステイン、エリトリトール、アラビトール、ベタイン、Ｎ−アセチルフェニルアラニン、３−ヒドロキシ酪酸（ＢＨＢＡ）、シトルリン、マンノース、２−オキシインドール−３−酢酸、Ｎ−アセチルトリプトファン、グリセリン酸、キシロン酸、トレイトール、３−アミノイソ酪酸、アラキドン酸（２０：４ｎ６）、γ−グルタミルフェニルアラニン、フェニルアラニン、トリゴネリン（Ｎ’−ニコチン酸メチル）、アラントイン、グルタチオン（酸化型（ＧＳＳＧ））、Ｎ−アセチルセリン、アラビノース、ホモシステイン、エリトリトール、アラビトール、ベタイン、Ｎ−アセチルフェニルアラニン、及びこれらの混合物からなる群から選択され；
    前記代謝産物がアルカリホスファターゼを調節し、リジン、γ−グルタミルフェニルアラニン、アラビノース、フェニルアラニン、及びこれらの混合物からなる群から選択され；
    前記代謝産物がアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼを調節し、３−ウレイドプロピオン酸、トレイトール、エリスロン酸、グロノ−１，４−ラクトン、Ｃ−グリコシルトリプトファン、尿素、２−ヒドロキシグルタル酸、ブチリルカルニチン、ジメチルグリシン、プソイドウリジン、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ；２０：５ｎ３）、ウラシル、及びこれらの混合物からなる群から選択され；又は
    前記代謝産物がγ−グルタミルトランスフェラーゼを調節し、３−アミノイソ酪酸、トリゴネリン（Ｎ’−ニコチン酸メチル）、Ｎ−アセチルセリン、タウロケノデオキシコール酸、エリトリトール、１５−メチルパルミチン酸（２−メチルパルミチン酸の同重体）、アラントイン、タウロコール酸、トレイトール、及びこれらの混合物からなる群から選択される、請求項１７に記載の方法。
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