JP2020500930A - エベロリムス、ダクトリシブまたは両方で免疫応答を増強する方法 - Google Patents

Abstract

本発明は、対象における免疫応答を増強する方法に関する。

Description

関連特許出願の相互参照
本出願は、２０１６年１１月２３日に出願された米国仮特許出願第６２／４２５，７６６号明細書；２０１７年３月２４日に出願された米国仮特許出願第６２／４７６，１６０号明細書；および２０１７年１０月２４日に出願された米国仮特許出願第６２／５７６，５１１号明細書の優先権を主張するものであり、これらのそれぞれの内容は、参照により本明細書に組み込まれる。

発明の分野
本発明は、対象における免疫応答の促進および／または増強のための、同時、別個または順次使用のための、（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せ；そのような組合せを含む医薬組成物；対象における免疫応答を促進するおよび／または増強する方法であって、それを必要とする対象への、前記ＲＡＤ００１もしくはＢＥＺ２３５または組合せの投与を含む方法；対象における免疫応答の促進および／または増強用の医薬の調製のためのその使用；ならびにその商品パッケージに関する。

発明の背景
ｍＴＯＲは、成長因子、アミノ酸およびエネルギーの形態の環境信号を統合する上で中心的役割を果たす、進化的に保存されたセリン／トレオニンキナーゼである。免疫系の研究において、ｍＴＯＲは、免疫微小環境からの信号を感知および統合する上でのその役割により、免疫機能の重大な調節因子として浮上しつつある。免疫細胞機能の重要な調節因子としての細胞代謝のより優れた理解により、ｍＴＯＲは、免疫機能と代謝との間の不可欠な連結であることを証明している。ｍＴＯＲは、Ｔ細胞、Ｂ細胞および抗原提示細胞において、適応免疫応答を導く、例えば、分化、活性化および機能を促進する能力を有する。

発明の要旨
一態様において、本発明は、（ａ）低用量のＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）低用量のＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを、患者に投与するステップを含み、患者が、ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩、ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩、またはそれらの組合せを投与されていない患者よりも、感染症による疾病をより少なく経験する、方法に関する。

別の態様において、本発明は、対象における免疫応答の促進および／または増強のための、同時、別個または順次使用のための、（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せに関する。

一態様において、本発明は、（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを含む医薬組成物を提供する。一部の実施形態において、ＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩は、先天性免疫等、対象における免疫応答を促進するおよび／または増強する際に有効である。一部の実施形態において、組合せは、対象における免疫応答を促進するおよび／または増強する際に、共同で治療的に有効である。

一態様において、本発明は、対象における免疫応答を促進するおよび／または増強する方法であって、それを必要とする対象に、（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを、前記免疫応答を促進するおよび／または増強する際に有効な量で投与するステップを含む方法を提供する。

一態様において、本発明は、老齢化に関連する状態を治療する方法であって、前記老齢化に関連する状態を治療するために、それを必要とする対象に、有効量の（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを投与するステップを含む方法も提供する。

一態様において、本発明は、対象における免疫応答の促進および／または増強のためならびに免疫応答の促進および／または増強用の医薬の調製のための、（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せの使用を提供する。

一態様において、本発明は、対象における老齢化に関連する状態の治療のための、（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せの使用を提供する。

一態様において、本発明は、有効成分として、（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを、対象における免疫応答の促進および／または増強におけるそれらの同時、別個または順次使用のための説明書と一緒に含む商品パッケージを提供する。

一態様において、本発明は、（ａ）ＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩、ならびに（ｂ）対象における免疫応答の促進および／または増強におけるＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩との同時、別個または順次使用のための説明書を含む商品パッケージを提供する。

図１は、ＲＡＤ００１および／またはＢＥＺ２３５治療対プラセボコホートにおける、インフルエンザワクチン株に対する抗体力価の増大を示す。ＲＡＤ００１および／またはＢＥＺ２３５治療コホートにおける３つのインフルエンザワクチン株（Ａ／Ｈ１Ｎ１［Ａ／カリフォルニア／７／２００９］、Ａ／Ｈ３Ｎ２［Ａ／テキサス／５０／２０１２］またはＢ［Ｂ／マサチューセッツ／２／２０１２］）のそれぞれに対する幾何平均力価（ＧＭＴ）の比における、プラセボコホートと比べた増大（ワクチン接種の４週間後／ベースライン）が示されている。黒色太線は、研究のプライマリーエンドポイントを満たすために、３つのインフルエンザワクチン株のうちの２つにおいて必要とされるプラセボと比べたＧＭＴ比の１．２倍の増大を示している。アスタリスクは、プラセボと比べたＧＭＴの増大が１．０を超える確率が１００％であることを示している。 図２は、単独またはＲＡＤ００１と組み合わせたＢＥＺ２３５が、対象が研究薬物で治療された６週間の間に、気道感染症の罹患率および重症度を減少させることを示す。単独またはＲＡＤ００１と組み合わせたＢＥＺ２３５は、対象が研究薬物で治療された６週間の間に、気道感染症の罹患率および重症度を減少させる。（上部）対象が研究薬物で治療された６週間の間に、１つまたは複数の気道感染症を有すると報告された各コホートにおける対象のパーセンテージが示されている。（下部）対象が研究薬物で治療された６週間の間に、中等度の重症度の気道感染症を経験した対象のパーセンテージが示されている。研究において、重度と評価された気道感染症を経験した対象はいなかった。各バーの上部の数字は、プラセボと比べたパーセント変化を示している。 図３は、ＢＥＺ２３５およびＲＡＤ００１＋ＢＥＺ２３５は免疫系およびインターフェロン誘導遺伝子発現の上方調節につながるが、プラセボ治療はそうではないことを示す。６週間の研究薬物治療の前対後の、全血における遺伝子発現変化のパスウェイエンリッチメント解析が示されている。この解析は、経路の高度に有意なエンリッチメントが、ＢＥＺ２３５単独療法およびＢＥＺ２３５＋ＲＡＤ００１組合せコホートにおいては免疫系およびインターフェロンシグナル伝達に関係しているが、プラセボコホートにおいてはそうではないことを明らかにした。Ｘ軸は、各経路における遺伝子の発現の平均ｌｏｇ２倍変化を示している。ｙ軸は、経路上方調節のｐ値の−ｌｏｇ１０を示しており、６より大きい値は、０．０５未満のボンフェローニの偽発見率で統計的有意性を示している。各点は、具体的な生物学的経路を表す。 図４は、ＢＥＺ２３５が、１０ｍｇを上回る用量で許容できないほど高いＰＫ変動性を有することを示す。用量（ｍｇ）対ＡＵＣｌａｓｔが示されている。各点は、各コホートにおける各個々の患者について、投薬の１日目または８日目のいずれかにおけるＢＥＺ２３５ ＡＵＣｌａｓｔを表す。 図５は、単独またはＲＡＤ００１と組み合わせたＢＥＺ２３５が、細胞外マトリックスリモデリングタンパク質を上方調節することを示す。

発明の特定の実施形態の詳細な説明
一態様において、本発明は、（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せに関する。別の態様において、本発明は、対象における免疫応答を促進するおよび／または増強する方法であって、対象に、有効量の（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを、同時、別個または順次投与によって投与するステップを含む方法を提供する。

本明細書において使用される一般用語は、明示的に別段の記載がない限り、下記の意味で定義される。

用語「を含む（comprising）」および「を含む（including）」は、本明細書において、別段の注記がない限り、それらのオープンエンドおよび非限定的な意味で使用される。

本発明を記述する文脈において（とりわけ下記の特許請求の範囲の文脈において）、用語「ａ」および「ａｎ」および「ｔｈｅ」ならびに同様の言及は、本明細書において別段の指示がない限りまたは文脈によって明らかに否定されない限り、単数形および複数形の両方を包括すると解釈されるべきである。化合物、塩等について複数形の形態が使用される場合、これは、単一の化合物、塩等も意味すると受け取られる。

用語「組合せ（combination）」または「医薬組合せ（pharmaceutical combination）」は、本明細書において、ＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩およびＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩が、同じ時間に、または組合せパートナーが協同性、例えば相乗効果を示すことを可能にする時間間隔以内で別個に、独立して投与されてよい場合、１つの投薬量単位形態（dosage unit form）の固定組合せ、非固定組合せまたは組合せ投与用の部品のキットのいずれかを指すと定義される。

用語「固定組合せ（fixed combination）」は、有効成分または治療剤、例えばＲＡＤ００１およびＢＥＺ２３５が、単一の実体または剤形の形態で、同時に患者に投与されることを意味する。

用語「非固定組合せ（non-fixed combination）」は、有効成分または治療剤、例えばＲＡＤ００１およびＢＥＺ２３５が、いずれも、同時に、同時発生的にまたは具体的な時間制限を設けず順次に、のいずれかで別個の実体または剤形として患者に投与されることを意味し、ここで、そのような投与は、それを必要とする対象、例えば哺乳動物またはヒトの体内において、治療有効レベルの２つの化合物を提供する。

用語「医薬組成物」は、本明細書において、その対象に影響を及ぼす特定の疾患または状態を治療するために、対象、例えば哺乳動物またはヒトに投与される少なくとも１つの治療剤を含有する混合物または溶液を指すと定義される。

用語「薬学的に許容される」は、本明細書において、妥当な医学的判断の範囲内で、合理的なベネフィット／リスク比に見合う形で、過剰な毒性、刺激 アレルギー反応および他の問題の合併症なしに、対象、例えば哺乳動物またはヒトの組織と接触させるのに好適である化合物、生物学的作用物質、材料、組成物および／または剤形を指すと定義される。

用語「組合せ投与（combined administration）」は、本明細書において使用される場合、単一の対象、例えば哺乳動物またはヒトへの、選択された治療剤の投与を包含すると定義され、作用物質が必ずしも同じ投与ルートによってまたは同じ時間に投与されるとは限らない、治療レジメンを含むように意図されている。

用語「治療すること」または「治療」は、本明細書において使用される場合、対象における少なくとも１つの症状を、軽減する、低減させるもしくは緩和する、または疾患、状態および／もしくは障害の進行の遅延に影響を及ぼす、治療を含む。例えば、治療は、障害の１つもしくはいくつかの症状の縮減または障害の完全な根絶であり得る。本発明の意味の範囲内で、用語「治療する」は、発症（すなわち、疾患の臨床的兆候の前の期間）を阻止する、遅延させる、および／または、疾患を発生するもしくは悪化させるリスクを低減させることも意味する。

用語「共同で治療的に活性」または「共同治療効果」は、本明細書において使用される場合、治療される温血動物（例えば、ヒト）が相乗的相互作用（共同治療効果）等の相互作用を依然として示すように、治療剤が別個に（経時的にずらした様式で、例えば配列特異的な様式で）与えられてよいことを意味する。そうなっているか否かは、とりわけ、両方の治療剤が、治療されるヒトの血液中に、少なくともある特定の時間間隔の間に存在することを示す血中レベルに準拠することによって、決定することができる。

治療剤の「有効量」、「薬学的有効量」または「治療有効量」は、免疫応答の促進および／または増強の徴候および症状を臨床的に観察可能な、ベースラインを超える観察可能な改善を提供するために十分な量である。

用語「相乗効果」は、本明細書において使用される場合、例えば（ａ）ＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩、および（ｂ）ＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩等の２つの作用物質の、効果を生成する、例えば、対象における免疫応答を促進および／または増強し、これが、それらだけで投与される各薬物の効果の単純な相加よりも大きい、作用を指す。相乗効果は、例えば、シグモイドＥｍａｘ方程式（Holford, N. H. G. and Scheiner, L. B., Clin. Pharmacokinet. 6: 429-453 (1981)）、ロエベ相加式（Loewe, S. and Muischnek, H., Arch. Exp. Pathol Pharmacol. 114: 313-326 (1926)）および半数効果方程式（Chou, T. C. and Talalay, P., Adv. Enzyme Regul. 22: 27-55 (1984)）等の好適な方法を使用して、計算することができる。上記で言及した各方程式を、実験データに適用して、薬物の組合せの効果を評価するのを支援するための対応するグラフを作成することができる。上記で言及した方程式に関連する、対応するグラフは、それぞれ、濃度効果曲線、アイソボログラム曲線および組合せ指数曲線である。

用語「対象」または「患者」は、本明細書において使用される場合、免疫応答を促進するおよび／もしくは増強するならびに／または老齢化に関連する状態を有することができる、動物を含む。対象の例は、哺乳動物、例えば、ヒト、イヌ、雌ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ネコ、マウス、ウサギ、ラットおよびトランスジェニック非ヒト動物を含む。一部の実施形態において、対象は、ヒト、例えば、老齢化に関連する状態に罹患している、罹患するリスクがある、または潜在的に罹患する可能性がある、ヒトである。

用語「約」または「およそ」は、所与の値または範囲の１０％以内、例えば５％以内という意味を有するものとする。

免疫応答の文脈における用語「促進する」または「増強する」は、数ある中でも、がん細胞を標的化するおよび／または死滅させる、病原体および病原体感染細胞を標的化するおよび／または死滅させる免疫細胞の能力の増大、ならびにワクチン接種後の防御免疫等の、免疫応答の増大を指す。一部の実施形態において、防御免疫は、同じ抗原を発現している病原体によるその後の感染症から保護するための十分な免疫応答（抗体力価等）または新たな病原体に対する保護の存在を指す。

用語「免疫老化（immunosenescence）」または「免疫老化状態にある（immunosenescent）」は、数ある中でも、例えば、がん、ワクチン接種、感染性病原体に対して免疫応答異常をもたらす、免疫機能の減少を指す。これは、感染症に応答する宿主の能力およびとりわけワクチン接種による長期免疫記憶の発生の両方を伴う。この免疫欠損は、普遍的であり、長寿命および短寿命種の両方において、経時的時間よりもむしろ平均余命に対するそれらの年齢に応じて、見られる。これは、高齢者の間での疾病率および死亡率の増発の主要な寄与因子とみなされる。免疫老化は、無作為な劣化現象ではなく、むしろ、進化パターンを逆に繰り返すと思われ、免疫老化によって影響を受けるパラメーターのほとんどは、遺伝子制御下にあると思われる。免疫老化は、時に、ウイルスおよび細菌等の多様な抗原への不可避の曝露の連続的感作の結果として想定することもできる。

免疫老化は、例えば老齢個体群における多くの病理学的に有意な健康問題につながる多因子状態である。造血幹細胞の機能の低下、ＰＤ１＋リンパ球の増大、食細胞、マクロファージ、樹状細胞、単球、Ｔ細胞、Ｂ細胞およびＮＫ細胞の機能の低下、ならびに先天性、細胞媒介性または体液性免疫の低下等の、年齢依存性生物学的変化は、免疫老化の発症に寄与する。一態様において、免疫老化は、個体において、免疫細胞中のテロメア長を測定することによって、測定することができる（例えば、米国特許第５，７４１，６７７号明細書を参照）。免疫老化は、個体において、通常よりも少ない数のナイーブＣＤ４および／もしくはＣＤ８Ｔ細胞、早期プロ−Ｂ細胞およびプレ−Ｂ細胞の減少、ＴおよびＢ細胞レパートリーの減少、ＰＤ１発現Ｔ細胞の数の増大、例えば、通常よりも少ない数のＰＤ−１陰性Ｔ細胞、ＣＤ８＋ＣＤ２８ｎｅｇＴ細胞の増大、ＣＤ５７＋および／もしくはＫＬＲＧ１＋ＣＤ８＋Ｔ細胞の増大、ＬＡＧ−３−陽性Ｔ細胞の数の増大、Ｔ細胞表面糖タンパク質の変化、抗体グリコシル化の変化、細胞内発現タンパク質のもしくは免疫細胞の表面上のグリコシル化の変化、ＩＣＯＳ、ＣＴＬＡ−４、Ｔｉｍ−３および／もしくはＬＡＧ−３発現ＣＤ４Ｔ細胞の増大、または老齢化した対象におけるワクチン接種に対する応答の減少を実証することによって、決定することもできる。

用語「免疫応答異常（impaired immune response）」は、対象が、数ある中でも、例えば、がん、ワクチン接種、病原体感染症に対して適切な免疫応答を有さない状態を指す。一部の実施形態において、免疫応答異常を有する対象は、予防的ワクチン接種後に保護抗体力価レベルに達しないことが予測されるか、または、この場合、対象は、治療的ワクチン接種後に細胞媒介性免疫または疾患負荷の減少を有さない。対象が先天性免疫応答遺伝子の発現異常を有する場合、対象は、免疫応答異常も有し得る。対象が、免疫機能が減少していることが公知である、または、高齢者、化学療法治療を受けている対象、無脾症の対象、免疫不全対象もしくはＨＩＶ／ＡＩＤＳを有する対象等、免疫機能減少の病歴を有する、個体群のメンバーである場合、対象は、免疫応答異常も有し得る。本明細書において記述されている方法は、低い免疫増強用量のｍＴＯＲ阻害剤、例えば、ＲＡＤ００１等のアロステリックｍＴＯＲ阻害剤の投与により、免疫応答異常の治療を可能にする。

用語「低い免疫増強用量（low, immune enhancing dose）」は、ｍＴＯＲ阻害剤、例えばアロステリックｍＴＯＲ阻害剤、例えばＲＡＤ００１もしくはラパマイシン、またはカタリティックｍＴＯＲ阻害剤（catalytic mTOR inhibitor）と併せて使用される場合、例えば、Ｐ７０Ｓ６キナーゼ活性の阻害によって測定されるように、ｍＴＯＲ活性を完全にではないが部分的に阻害するｍＴＯＲ阻害剤の用量を指す。例えばＰ７０Ｓ６キナーゼの阻害によってｍＴＯＲ活性を審査するための方法は、本明細書において論じられている。用量は、完全な免疫抑制をもたらすためには不十分であるが、免疫応答を増強するためには十分である。ある実施形態において、低い免疫増強用量のｍＴＯＲ阻害剤は、ＰＤ−１陽性Ｔ細胞の数もしくはパーセンテージの減少および／またはＰＤ−１陰性Ｔ細胞の数もしくはパーセンテージの増大、あるいはＰＤ−１陰性Ｔ細胞／ＰＤ−１陽性Ｔ細胞の比の増大をもたらす。ある実施形態において、低い免疫増強用量のｍＴＯＲ阻害剤は、ナイーブＴ細胞の数の増大をもたらす。ある実施形態において、低い免疫増強用量のｍＴＯＲ阻害剤は、下記のうちの１つまたは複数をもたらす：
血液細胞におけるインターフェロン誘導遺伝子の発現の増大
マーカーＬＡＧ−３、ＣＴＬＡ−４、ＩＣＯＳまたはＴｉｍ−３を発現しているＴ細胞のパーセンテージの減少；
例えばメモリーＴ細胞、例えばメモリーＴ細胞前駆体上における、下記のマーカー：ＣＤ６２Ｌｈｉｇｈ、ＣＤ１２７ｈｉｇｈ、ＣＤ２７＋およびＢＣＬ２のうちの１つまたは複数の発現の増大；
例えばナイーブまたはメモリーＴ細胞、例えばメモリーＴ細胞前駆体上における、ＫＬＲＧ１またはＣＤ５７の発現の減少；ならびに
メモリーＴ細胞前駆体、例えば、下記の特徴：増大したＣＤ６２Ｌｈｉｇｈ、増大したＣＤ１２７ｈｉｇｈ、増大したＣＤ２７＋、減少したＫＬＲＧ１および増大したＢＣＬ２のいずれか１つまたは組合せを持つ細胞の数の増大；
ここで、上述した変化のいずれかは、例えば未治療対象と比較して、例えば少なくとも一時的に出現する。

ある実施形態において、ある用量のｍＴＯＲ阻害剤は、少なくとも５であるが９０％以下、少なくとも１０であるが９０％以下、少なくとも１５であるが９０％以下、少なくとも２０であるが９０％以下、少なくとも３０であるが９０％以下、少なくとも４０であるが９０％以下、少なくとも５０であるが９０％以下、少なくとも６０であるが９０％以下または少なくとも７０であるが９０％以下のｍＴＯＲ阻害に関連するまたはそれを提供する。

ある実施形態において、ある用量のｍＴＯＲ阻害剤は、少なくとも５であるが８０％以下、少なくとも１０であるが８０％以下、少なくとも１５であるが８０％以下、少なくとも２０であるが８０％以下、少なくとも３０であるが８０％以下、少なくとも４０であるが８０％以下、少なくとも５０であるが８０％以下または少なくとも６０であるが８０％以下のｍＴＯＲ阻害に関連するまたはそれを提供する。

ある実施形態において、ある用量のｍＴＯＲ阻害剤は、少なくとも５であるが７０％以下、少なくとも１０であるが７０％以下、少なくとも１５であるが７０％以下、少なくとも２０であるが７０％以下、少なくとも３０であるが７０％以下、少なくとも４０であるが７０％以下または少なくとも５０であるが７０％以下のｍＴＯＲ阻害に関連するまたはそれを提供する。

ある実施形態において、ある用量のｍＴＯＲ阻害剤は、少なくとも５であるが６０％以下、少なくとも１０であるが６０％以下、少なくとも１５であるが６０％以下、少なくとも２０であるが６０％以下、少なくとも３０であるが６０％以下または少なくとも４０であるが６０％以下のｍＴＯＲ阻害に関連するまたはそれを提供する。

ある実施形態において、ある用量のｍＴＯＲ阻害剤は、少なくとも５であるが５０％以下、少なくとも１０であるが５０％以下、少なくとも１５であるが５０％以下、少なくとも２０であるが５０％以下、少なくとも３０であるが５０％以下または少なくとも４０であるが５０％以下のｍＴＯＲ阻害に関連するまたはそれを提供する。

ある実施形態において、ある用量のｍＴＯＲ阻害剤は、少なくとも５であるが４０％以下、少なくとも１０であるが４０％以下、少なくとも１５であるが４０％以下、少なくとも２０であるが４０％以下、少なくとも３０であるが４０％以下または少なくとも３５であるが４０％以下のｍＴＯＲ阻害に関連するまたはそれを提供する。

ある実施形態において、ある用量のｍＴＯＲ阻害剤は、少なくとも５であるが３０％以下、少なくとも１０であるが３０％以下、少なくとも１５であるが３０％以下、少なくとも２０であるが３０％以下または少なくとも２５であるが３０％以下のｍＴＯＲ阻害に関連するまたはそれを提供する。

ある実施形態において、ある用量のｍＴＯＲ阻害剤は、少なくとも１、２、３、４もしくは５であるが２０％以下、少なくとも１、２、３、４もしくは５であるが３０％以下、少なくとも１、２、３、４もしくは５であるが３５以下、少なくとも１、２、３、４もしくは５であるが４０％以下または少なくとも１、２、３、４もしくは５であるが４５％以下のｍＴＯＲ阻害に関連するまたはそれを提供する。

ある実施形態において、ある用量のｍＴＯＲ阻害剤は、少なくとも１、２、３、４または５であるが９０％以下のｍＴＯＲ阻害に関連するまたはそれを提供する。

本明細書において論じられているように、ｍＴＯＲ阻害の程度は、Ｐ７０Ｓ６Ｋ阻害の程度として表現することができ、例えば、ｍＴＯＲ阻害の程度は、Ｐ７０Ｓ６Ｋ活性の減少のレベルによって、例えばＰ７０Ｓ６Ｋ基質のリン酸化の減少によって、決定することができる。ｍＴＯＲ阻害のレベルは、本明細書において記述されている方法によって、例えばブーレイアッセイによって、審査することができる。

免疫応答の文脈における用語「促進する」または「増強する」は、数ある中でも、がん細胞を標的化するおよび／または死滅させる、病原体および病原体感染細胞を標的化するおよび／または死滅させる免疫細胞の能力の増大、ならびにワクチン接種後の防御免疫等、免疫応答の増大を指す。一部の実施形態において、防御免疫は、同じ抗原を発現している病原体によるその後の感染症から保護するための十分な免疫応答（抗体力価等）の存在を指す。

ｍＴＯＲ阻害剤
本明細書において使用される場合、用語「ｍＴＯＲ阻害剤」は、細胞においてｍＴＯＲキナーゼを阻害する、化合物もしくはリガンド、または薬学的に許容されるその塩を指す。ある実施形態において、ｍＴＯＲ阻害剤は、アロステリック阻害剤である。ある実施形態において、ｍＴＯＲ阻害剤は、カタリティック阻害剤である。

アロステリックｍＴＯＲ阻害剤は、中性三環式化合物ラパマイシン（シロリムス）、ラパマイシン関連化合物、すなわち、例えば、ラパマイシン誘導体、ラパマイシン類似体（ラパログとも称される）を含む、ラパマイシンとの構造的および機能的類似性を有する化合物、ならびにｍＴＯＲ活性を阻害する他のマクロライド化合物を含む。

ラパマイシンは、式Ａに示される構造を有する、ストレプトマイセス・ハイグロスコピカス（Streptomyces hygroscopicus）によって生成される公知のマクロライド抗生物質である。

例えば、McAlpine, J.B., et al., J. Antibiotics (1991) 44: 688；Schreiber, S.L., et al., J. Am. Chem. Soc. (1991) 113: 7433；米国特許第３，９２９，９９２号明細書を参照されたい。ラパマイシンのために提案されている種々の番号付けスキームがある。混乱を回避するために、具体的なラパマイシン類似体が本明細書において命名される場合、その名称は、式Ａの番号付けスキームを使用し、ラパマイシンを参照して与えられる。

本発明において有用なラパマイシン類似体は、例えば、ラパマイシンのシクロヘキシル環上のヒドロキシル基がＯＲ_１によって置きかえられているＯ置換類似体（ここで、Ｒ_１は、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシアルコキシアルキル、アシルアミノアルキルまたはアミノアルキルである）であり、例えば、参照によりその内容が組み込まれる米国特許第５，６６５，７７２号明細書および国際公開第９４／０９０１０号パンフレットに記述されている通り、エベロリムスとしても公知のＲＡＤ００１である。他の好適なラパマイシン類似体は、２６または２８位で置換されているものを含む。ラパマイシン類似体は、上記で言及した類似体のエピマー、特に、４０、２８または２６位で置換されている類似体のエピマーであってよく、例えば、参照によりその内容が組み込まれる米国特許第６，０１５，８１５号明細書、国際公開第９５／１４０２３号パンフレットおよび国際公開第９９／１５５３０号パンフレットに記述されている通り、場合によりさらに水素化されていてよく、例えば、参照によりその内容が組み込まれる米国特許第７，０９１，２１３号明細書、国際公開第９８／０２４４１号パンフレットおよび国際公開第０１／１４３８７号パンフレットにおいて記述されているゾタロリムスまたはラパマイシン類似体としても公知のＡＢＴ５７８、例えば、リダホロリムスとしても公知のＡＰ２３５７３であってよい。

米国特許第５，６６５，７７２号明細書から本発明において使用するために好適なラパマイシン類似体の例は、４０−Ｏ−ベンジル−ラパマイシン、４０−Ｏ−（４’−ヒドロキシメチル）ベンジル−ラパマイシン、４０−Ｏ−［４’−（１，２−ジヒドロキシエチル）］ベンジル−ラパマイシン、４０−Ｏ−アリル−ラパマイシン、４０−Ｏ−［３’−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４（Ｓ）−イル）−プロパ−２’−エン−１’−イル］−ラパマイシン、（２’Ｅ，４’Ｓ）−４０−Ｏ−（４’，５’−ジヒドロキシペンタ−２’−エン−１’−イル）−ラパマイシン、４０−Ｏ−（２−ヒドロキシ）エトキシカルボニルメチル−ラパマイシン、４０−Ｏ−（２−ヒドロキシ）エチル−ラパマイシン、４０−Ｏ−（３−ヒドロキシ）プロピル−ラパマイシン、４０−Ｏ−（６−ヒドロキシ）ヘキシル−ラパマイシン、４０−Ｏ−［２−（２−ヒドロキシ）エトキシ］エチル−ラパマイシン、４０−Ｏ−［（３Ｓ）−２，２−ジメチルジオキソラン−３−イル］メチル−ラパマイシン、４０−Ｏ−［（２Ｓ）−２，３−ジヒドロキシプロパ−１−イル］−ラパマイシン、４０−Ｏ−（２−アセトキシ）エチル−ラパマイシン、４０−Ｏ−（２−ニコチノイルオキシ）エチル−ラパマイシン、４０−Ｏ−［２−（Ｎ−モルホリノ）アセトキシ］エチル−ラパマイシン、４０−Ｏ−（２−Ｎ−イミダゾリルアセトキシ）エチル−ラパマイシン、４０−Ｏ−［２−（Ｎ−メチル−Ｎ’−ピペラジニル）アセトキシ］エチル−ラパマイシン、３９−Ｏ−デスメチル−３９，４０−Ｏ，Ｏ−エチレン−ラパマイシン、（２６Ｒ）−２６−ジヒドロ−４０−Ｏ−（２−ヒドロキシ）エチル−ラパマイシン、４０−Ｏ−（２−アミノエチル）−ラパマイシン、４０−Ｏ−（２−アセトアミノエチル）−ラパマイシン、４０−Ｏ−（２−ニコチンアミドエチル）−ラパマイシン、４０−Ｏ−（２−（Ｎ−メチル−イミダゾ−２’−イルカルボエトキサミド）エチル）−ラパマイシン、４０−Ｏ−（２−エトキシカルボニルアミノエチル）−ラパマイシン、４０−Ｏ−（２−トリルスルホンアミドエチル）−ラパマイシン、および４０−Ｏ−［２−（４’，５’−ジカルボエトキシ−１’，２’，３’−トリアゾール−１’−イル）−エチル］−ラパマイシンを含むがこれらに限定されない。

本発明において有用な他のラパマイシン類似体は、ラパマイシンのシクロヘキシル環上のヒドロキシル基および／または２８位のヒドロキシ基がヒドロキシエステル基で置きかえられていることが公知である類似体、例えば、米国再発行特許第ＲＥ４４，７６８号明細書において見られるラパマイシン類似体、例えばテムシロリムスである。

本発明において有用な他のラパマイシン類似体は、１６位のメトキシ基が、別の置換基、例えば（場合によりヒドロキシ置換）アルキニルオキシ、ベンジル、オルトメトキシベンジルもしくはクロロベンジルで置きかえられている、ならびに／または、３９位のメトキシ（mexthoxy）基が、３９炭素と一緒に削除され、そのため、ラパマイシンのシクロヘキシル環が３９位のメトキシ（methyoxy）基を欠くシクロペンチル環になるものを含み；例えば、参照によりその内容が組み込まれる国際公開第９５／１６６９１号パンフレットおよび国際公開第９６／４１８０７号パンフレットにおいて記述されている通りである。類似体は、ラパマイシンの４０位のヒドロキシがアルキル化され、および／または３２−カルボニルが還元されるように、さらに修飾され得る。

国際公開第９５／１６６９１号パンフレットからのラパマイシン類似体は、１６−デムトキシ−１６−（ペンタ−２−イニル）オキシ−ラパマイシン、１６−デムトキシ−１６−（ブタ−２−イニル）オキシ−ラパマイシン、１６−デムトキシ−１６−（プロパルギル）オキシ−ラパマイシン、１６−デメトキシ−１６−（４−ヒドロキシ−ブタ−２−イニル）オキシ−ラパマイシン、１６−デムトキシ−１６−ベンジルオキシ−４０−Ｏ−（２−ヒドロキシエチル）−ラパマイシン、１６−デムトキシ−１６−ベンジルオキシ−ラパマイシン、１６−デメトキシ−１６−オルト−メトキシベンジル−ラパマイシン、１６−デメトキシ−４０−Ｏ−（２−メトキシエチル）−１６−ペンタ−２−イニル）オキシ−ラパマイシン、３９−デメトキシ−４０−デスオキシ−３９−ホルミル−４２−ノル−ラパマイシン、３９−デメトキシ−４０−デスオキシ−３９−ヒドロキシメチル−４２−ノル−ラパマイシン、３９−デメトキシ−４０−デスオキシ−３９−カルボキシ−４２−ノル−ラパマイシン、３９−デメトキシ−４０−デスオキシ−３９−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）カルボニル−４２−ノル−ラパマイシン、３９−デメトキシ−４０−デスオキシ−３９−（モルホリン−４−イル）カルボニル−４２−ノル−ラパマイシン、３９−デメトキシ−４０−デスオキシ−３９−［Ｎ−メチル，Ｎ−（２−ピリジン−２−イル−エチル）］カルバモイル−４２−ノル−ラパマイシンおよび３９−デメトキシ−４０−デスオキシ−３９−（ｐ−トルエンスルホニルヒドラゾノメチル）−４２−ノル−ラパマイシンを含むがこれらに限定されない。

国際公開第９６／４１８０７号パンフレットからのラパマイシン類似体は、３２−デオキソ−ラパマイシン、１６−Ｏ−ペンタ−２−イニル−３２−デオキソ−ラパマイシン、１６−Ｏ−ペンタ−２−イニル−３２−デオキソ−４０−Ｏ−（２−ヒドロキシ−エチル）−ラパマイシン、１６−Ｏ−ペンタ−２−イニル−３２−（Ｓ）−ジヒドロ−４０−Ｏ−（２−ヒドロキシエチル）−ラパマイシン、３２（Ｓ）−ジヒドロ−４０−Ｏ−（２−メトキシ）エチル−ラパマイシンおよび３２（Ｓ）−ジヒドロ−４０−Ｏ−（２−ヒドロキシエチル）−ラパマイシンを含むがこれらに限定されない。

別の好適なラパマイシン類似体は、参照によりその内容が組み込まれる米国特許出願公開第２００５／０１０１６２４号明細書に記述されている通り、ウミロリムスである。

哺乳動物細胞において、ラパマイシンの標的（ｍＴＯＲ）キナーゼは、ｍＴＯＲＣ１複合体またはｍＴＯＲＣ２複合体として記述されている多タンパク質複合体として存在し、これは、栄養素およびエネルギーの利用可能性を感知し、成長因子からの入力およびストレスシグナル伝達を統合する。ｍＴＯＲＣ１複合体は、ラパマイシン等のアロステリックｍＴＯＲ阻害剤に対して感受性であり、ｍＴＯＲ、ＧβＬ、およびｍＴＯＲの調節関連タンパク質（ｒａｐｔｏｒ）で構成され、ペプチジル−プロリルイソメラーゼＦＫＢＰ１２タンパク質（ＦＫ５０６結合タンパク質１Ａ、１２ｋＤａ）と結合する。対照的に、ｍＴＯＲＣ２複合体は、ｍＴＯＲ、ＧβＬ、およびｍＴＯＲのラパマイシン非感受性コンパニオンタンパク質（ｒｉｃｔｏｒ）で構成され、ＦＫＢＰ１２タンパク質とインビトロで結合しない。

ｍＴＯＲＣ１複合体は、タンパク質翻訳制御に関与し、成長および増殖調節のための成長因子および栄養素感受性装置として動作することが示されてきた。ｍＴＯＲＣ１は、２つの主要な下流基質：リボソームタンパク質Ｐ７０Ｓ６をリン酸化するＰ７０Ｓ６キナーゼ、およびｅＩＦ４Ｅ調節キャップ依存性翻訳をモジュレートする上で主要な役割を果たす真核生物翻訳開始因子４Ｅ結合タンパク質１（４ＥＢＰ１）を介して、タンパク質翻訳を調節する。ｍＴＯＲＣ１複合体は、細胞のエネルギーおよび栄養素恒常性に応答して細胞成長を調節し、ｍＴＯＲＣ１の脱調節は、多種多様なヒトがんにおいて一般的である。ｍＴＯＲＣ２の機能は、Ａｋｔのリン酸化を介して細胞生存を調節すること、およびアクチン細胞骨格ダイナミクスのモジュレートすることを伴う。

ｍＴＯＲＣ１複合体は、主に、ＦＫＢＰ１２との細胞内複合体の形成およびｍＴＯＲのＦＫＢＰ１２−ラパマイシン結合（ＦＲＢ）ドメインとの結合を伴うラパマイシンの作用機序のために、ラパマイシンおよび誘導体等のアロステリックｍＴＯＲ阻害剤に対して感受性である。これは、ｍＴＯＲＣ１の配座変化をもたらし、この変化は、その足場タンパク質ｒａｐｔｏｒとの相互作用を変化および弱化させ、これはＰ７０Ｓ６Ｋ１等の基質がｍＴＯＲにアクセスしてリン酸化されるのを妨ぐと考えられている。ラパマイシンおよびＲＡＤ００１等のラパログは、良性および悪性両方の増殖性障害に関連するｍＴＯＲの超活性化を阻害することによって、臨床的重要性を獲得した。

別名エベロリムス（Ａｆｉｎｉｔｏｒ（登録商標））として知られているＲＡＤ００１は、化学名（１Ｒ，９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｒ，１６Ｅ，１８Ｒ，１９Ｒ，２１Ｒ，２３Ｓ，２４Ｅ，２６Ｅ，２８Ｅ，３０Ｓ，３２Ｓ，３５Ｒ）−１，１８−ジヒドロキシ−１２−｛（１Ｒ）−２−［（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−ヒドロキシエトキシ）−３−メトキシシクロヘキシル］−１−メチルエチル｝−１９，３０−ジメトキシ−１５，１７，２１，２３，２９，３５−ヘキサメチル−１１，３６−ジオキサ−４−アザ−トリシクロ［３０．３．１．０４，９］ヘキサトリアコンタ−１６，２４，２６，２８−テトラエン−２，３，１０，１４，２０−ペンタオンおよび下記の化学構造

を有する。

エベロリムスは、進行性腎がんの治療のためのＦＤＡ承認薬であり、腫瘍学においていくつかの他の第ＩＩＩ相臨床試験で調査されている。前臨床研究は、エベロリムスが、おそらくラパマイシン感受性ｍＴＯＲＣ１機能の抑制を通して、多種多様な腫瘍細胞株の増殖をインビトロおよびインビボの両方で阻害できることを示した。ラパマイシンの誘導体としてのエベロリムスは、ｍＴＯＲＣ１機能の一部、すなわちＰ７０Ｓ６キナーゼ（Ｐ７０Ｓ６Ｋ）および下流Ｐ７０Ｓ６Ｋ基質Ｐ７０Ｓ６を阻害する上で高度に強力な、アロステリックｍＴＯＲ阻害剤である。エベロリムス（および他のラパマイシン類似体）のようなアロステリックｍＴＯＲ阻害剤は、ｍＴＯＲＣ２経路またはその結果として生じるＡｋｔシグナル伝達の活性化を阻害する際に効果をほとんどまたは全く有さない。アロステリックｍＴＯＲ阻害剤のさらなる例は、シロリムス（ラパマイシン、ＡＹ−２２９８９）、４０−［３−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルプロパノエート］−ラパマイシン（テムシロリムスまたはＣＣＩ−７７９とも呼ばれる）およびリダホロリムス（ＡＰ−２３５７３／ＭＫ−８６６９）を含む。アロステリックｍＴＯＲ阻害剤の他の例は、ゾタロリムス（ＡＢＴ５７８）およびウミロリムスを含む。

代替的にまたは加えて、カタリティックＡＴＰ競合性ｍＴＯＲ阻害剤は、ｍＴＯＲキナーゼドメインを直接標的化し、ｍＴＯＲＣ１およびｍＴＯＲＣ２の両方を標的化することが分かっている。これらは、４ＥＢＰ１−Ｔ３７／４６リン酸化およびキャップ依存性翻訳等のラパマイシン抵抗性ｍＴＯＲＣ１出力をモジュレートすることから、ラパマイシンのようなアロステリックｍＴＯＲ阻害剤よりも完全なｍＴＯＲＣ１の阻害剤でもある。

ＢＥＺ２３５は、化学名２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリルおよび下記の化学構造

を有する、カタリティックｍＴＯＲ阻害剤である。

ＢＥＺ２３５は、そのモノトシレート塩形態で使用されてもよい。ＢＥＺ２３５の合成は、国際公開第２００６／１２２８０６号パンフレットにおいて記述されており、その内容は、参照により本明細書に組み込まれる。

カタリティックｍＴＯＲ阻害剤として、ＢＥＺ２３５は、ラパマイシン感受性（Ｐ７０Ｓ６Ｋのリン酸化、およびその後のＰ７０Ｓ６のリン酸化）およびラパマイシン非感受性（４ＥＢＰ１のリン酸化）機能の両方を含む、ｍＴＯＲＣ１複合体の完全な機能を停止させることができる。ＢＥＺ２３５は、使用した薬物濃度に従う示差的効果を有し、それにより、ｍＴＯＲＣ１阻害は、非常に低濃度（１０ｎｍｏｌ／Ｌ以下）で優勢であり、ｍＴＯＲＣ１およびｍＴＯＲＣ２阻害は低濃度（２００ｎｍｏｌ／Ｌ未満）であるが二重ＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲ阻害は比較的高濃度（およそ５００ｎｍｏｌ／Ｌ）で、優勢である。

コード番号、一般名または商標名によって同定される有効成分の構造は、標準概論「The Merck Index」の現行版、またはデータベース、例えばPatents International（例えば、IMS World Publications）から取り込まれてよい。その対応する内容は、参照により本明細書に組み込まれる。

一部の実施形態において、本発明は、対象における免疫応答の増強または促進のための、同時、別個または順次使用のための、（ａ）ＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩、および（ｂ）ＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩を含む組合せを提供する。

一部の実施形態において、ＲＡＤ００１は、中性形態である。一部の実施形態において、ＢＥＺ２３５は、モノトシレート塩である。一部の実施形態において、ＲＡＤ００１は、０．０１〜０．２ｍｇの投薬量範囲、例えば０．１ｍｇで投与される。一部の実施形態において、ＢＥＺ２３５は、１〜２０ｍｇの投薬量範囲、例えば１０ｍｇで投与される。

一部の実施形態において、化合物（単数もしくは複数）またはそれらの組合せは、即時放出剤形である。一部の実施形態において、化合物（単数もしくは複数）またはそれらの組合せは、週当たり１回投与される。一部の実施形態において、化合物（単数もしくは複数）またはそれらの組合せは、１日当たり１回投与される。

一部の実施形態において、対象は、免疫不全である。一部の実施形態において、対象は、ＨＩＶ＋であるか、またはＡＩＤＳを有する。一部の実施形態において、対象は、感染性疾患を有する。

一部の実施形態において、対象は、免疫応答異常を有する。一部の実施形態において、対象は、免疫老化状態にある。一部の実施形態において、対象は、老齢化に関連する状態、例えば免疫老化を有する。

本発明の一実施形態において、本発明は、（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せ、および少なくとも１つの薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。

治療方法
一態様において、本発明は、（ａ）低用量のＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）低用量のＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを、患者に投与するステップを含み、患者が、ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩、ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩、またはそれらの組合せを投与されていない患者よりも、感染症による疾病をより少なく経験する、方法を提供する。

一部の実施形態において、患者の先天性免疫は、増強される。

一部の実施形態において、抗原特異的免疫は、増強されない。

一部の実施形態において、少なくとも１つのインターフェロン誘導遺伝子（ＩＳＧ）は、上方調節される。

一部の実施形態において、感染症は、尿路感染症である。

一部の実施形態において、感染症は、歯もしくは歯茎の感染症である。

一部の実施形態において、感染症は、気道感染症である。

一部の実施形態において、感染症は、ウイルス感染症である。

一部の実施形態において、患者は、高齢者である。

一部の実施形態において、患者は、少なくとも６５歳である。

一部の実施形態において、患者は、少なくとも７５歳である。

一部の実施形態において、患者は、少なくとも８５歳である。

一部の実施形態において、低用量のＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩、低用量のＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩、またはそれらの組合せは、患者に、最大連続約６週間、最大連続約８週間、最大連続約１０週間、最大連続約１２週間、最大連続約１６週間、最大連続約２０週間、最大連続約６か月間、最大約１年間にわたって、または長期治療の一部として（無期限に）投与される。

一部の実施形態において、低用量のＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩は、患者に、最大連続約３週間、最大連続約６週間、最大連続約８週間、最大連続約１０週間、最大連続約１２週間、最大連続約１６週間、最大連続約２０週間、最大連続約２４週間、または最大連続約６か月間にわたって投与される。

一部の実施形態において、患者は、ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩、ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩、またはそれらの組合せの投与後、約１日から約１年まで、感染症による疾病をより少なく経験し続ける。

一部の実施形態において、患者は、ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩、ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩、またはそれらの組合せの投与後、少なくとも１か月および約１年までにわたって、感染症による疾病をより少なく経験し続ける。

一部の実施形態において、患者は、ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩、ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩、またはそれらの組合せの投与後、少なくとも３か月および約１年までにわたって、感染症による疾病をより少なく経験し続ける。

一部の実施形態において、患者は、ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩、ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩、またはそれらの組合せの投与後、少なくとも６か月間にわたって、感染症による疾病をより少なく経験し続ける。

一部の実施形態において、患者は、低用量のＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩を単独療法として投与される。

一部の実施形態において、患者は、低用量のＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩を単独療法として投与される。

一部の実施形態において、患者は、低用量のＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩および低用量のＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩の両方を組合せ療法として投与される。

一部の実施形態において、低用量のＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩を受けている患者の薬物動態ＡＵＣ変動性は、より高用量のＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩を受けている患者よりも低い。

一部の実施形態において、ＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩は、中性形態である。

一部の実施形態において、ＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩は、モノトシレート塩である。

一部の実施形態において、方法は、０．０１〜０．２ｍｇのＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩の投与を含む。

一部の実施形態において、方法は、１〜５０ｍｇのＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩の投与を含む。

一部の実施形態において、対象は、免疫不全である。

一部の実施形態において、対象は、免疫応答異常を有する。

一部の実施形態において、対象は、免疫老化状態にある。

一態様において、本発明は、少なくとも１つのインターフェロン誘導遺伝子（ＩＳＧ）を上方調節する方法であって、（ａ）低用量のＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）低用量のＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを、患者に投与するステップを含む方法を提供する。

一態様において、本発明は、細胞外マトリックスリモデリングに関与する少なくとも１つのタンパク質を上方調節する方法であって、（ａ）低用量のＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）低用量のＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを、患者に投与するステップを含む方法を提供する。

一部の実施形態において、細胞外マトリックスリモデリングに関与するタンパク質は、少なくとも１日、約１週間、約３週間、約４週間、約５週間、約６週間、約８週間、約１０週間、約１２週間、約１６週間、約２０週間、約２４週間または約６か月間にわたる治療後に、有意に上方調節される。

一部の実施形態において、本発明は、異常な細胞外マトリックスリモデリングに関連する疾患または状態を治療する方法であって、（ａ）低用量のＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）低用量のＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを、患者に投与するステップを含む方法を提供する。

一部の実施形態において、異常な細胞外マトリックスリモデリングに関連する疾患または状態は、駆出率が保たれた心不全、慢性腎不全等の心不全、糸球体腎症（glomerunephropathy）、皮膚の老齢化、ＮＡＳＨ、肝繊維症／肝硬変、特発性肺線維症を含む肺線維症、老齢化に関連する腱機能不全／硬直、変形性関節症を含む関節炎、サルコペニア、骨髄線維症、骨髄異形成、血液脳関門の老齢化に関連する機能不全、糖尿病性腎症、アテローム性動脈硬化、または創傷治癒から選択される。

一部の実施形態において、本発明は、対象における免疫応答を促進するまたは増強する方法であって、前記対象に、（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを、免疫応答を促進するまたは増強する際に治療的に有効な、または共同で治療的に有効な量で投与するステップを含む方法を提供する。

一部の実施形態において、本発明は、対象における老齢化に関連する状態を治療する方法であって、前記対象に、（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを、老齢化に関連する状態、例えば免疫老化を、治療する、予防するまたは軽快させるために治療的に有効な、または共同で治療的に有効な分量で投与するステップを含む方法を提供する。

一部の実施形態において、本発明は、免疫応答の促進または増強用の医薬の調製のための、（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せの使用を提供する。

一部の実施形態において、本発明は、老齢化に関連する状態、例えば免疫老化の治療用の医薬の調製のための、（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せの使用を提供する。

一部の実施形態において、本発明は、ＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩、および免疫応答の促進または増強におけるＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩との同時、別個または順次使用のための説明書を含む商品パッケージを提供する。

一部の実施形態において、本発明は、ＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩、および老齢化に関連する状態の治療におけるＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩との同時、別個または順次使用のための説明書を含む商品パッケージを提供する。

一部の実施形態において、組合せの使用の利益は、より低用量の（ａ）ＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩；および（ｂ）ＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩が、組み合わせて使用される場合に使用できること、例えば、投薬量が、多くの場合、より少なくするだけではなく、より低い頻度で適用される必要もある、またはより大きい用量を用いた場合、または組合せパートナーの１つを単独で用いた場合に観察される副作用の罹患率縮減を呈することである。これは、治療される患者の所望および要件に従うものである。

確立された試験モデルによって、（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せの投与が、本明細書において先に記述した有益な効果をもたらすことを、示すことができる。当業者は、そのような有益な効果を証明するための妥当な試験モデルを選択することが十分にできる。化合物または組合せの薬理学的活性は、例えば、当技術分野において公知の通りまたは以下で記述する通り、臨床研究においてまたはインビボもしくはインビトロ試験手順において実証されてよい。

一態様において、本発明は、対象における免疫応答を促進するおよび／または増強する際に共同で治療的に有効な分量の、（ａ）ＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩；および（ｂ）ＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩を含む医薬組成物を提供する。この組成物において、組合せパートナー（ａ）および（ｂ）は、単一の製剤または単位剤形で、任意の好適なルートによって投与される。単位剤形は、固定組合せであってもよい。

さらなる態様において、本発明は、対象における免疫応答を促進するおよび／または増強する際に共同で治療的に有効な分量の、同時発生的にではあるが別個に投与されるまたは順次に投与される、（ａ）ＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩；および（ｂ）ＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩を別個に含む医薬組成物を提供する。

組合せパートナーの別個投与のための、または固定組合せ、すなわち単一の生薬組成物での投与のための、（ａ）ＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩；および（ｂ）ＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩を含む医薬組成物は、当技術分野において公知の様式で調製されてよく、対象への腸内（経口または経直腸等）および／または非経口投与に好適なものであり、治療有効量の少なくとも１つの組合せパートナーを単独で、例えば上記で示されている通りに、または１つもしくは複数の薬学的に許容される担体との組合せで含むものである。

新規医薬組成物は、約０．１％から約９９．９％まで、例えば約１％から約６０％までの、有効成分（単数または複数）を含有してよい。

先行する実施形態のいずれかに従う一部の実施形態において、対象は、少なくとも６５歳である。

一部の実施形態において、対象は、うっ血性心不全を有する。

一部の実施形態において、対象は、真性糖尿病を有する。

一部の実施形態において、対象は、慢性腎不全を有する。

一部の実施形態において、対象は、現喫煙者である。

一部の実施形態において、対象は、ＣＯＰＤを有する。

慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）は、正常呼吸に干渉し、完全には可逆的でない、肺気流の慢性閉塞を特徴とする、肺疾患である。より身近な用語「慢性気管支炎」および「気腫」は、もはや使用されておらず、現在はＣＯＰＤ診断内に含まれる。ＣＯＰＤは、単に「喫煙者の咳」ではなく、過小診断された、命を脅かす肺疾患である。ＣＯＰＤ診断は、ある人物がいかに深く呼吸することができるかおよびいかに速く空気が肺に出入りすることができるかを測定する、肺活量測定法と呼ばれる簡単な試験によって確認される。そのような診断は、咳、痰の生成もしくは呼吸困難（難しいまたは苦しい呼吸）の症状、および／または疾患のリスク要因への曝露歴を有する任意の患者において検討されるべきである。肺活量測定法が利用不可能である場合、ＣＯＰＤの診断は、すべての利用可能なツールを使用して為されるべきである。異常な息切れおよび努力性呼出時間の増大等の臨床症状および徴候を使用して、診断を助けることができる。低ピークフローは、ＣＯＰＤと一致するが、それは他の肺疾患によっておよび試験中の性能不良によって引き起こされ得るため、ＣＯＰＤに特異的ではない場合がある。慢性咳および痰の生成は、多くの場合、気流制限の発生よりも何年も前に起こるが、咳および痰の生成を伴うすべての個体がＣＯＰＤの発生に進むわけではない。

一部の実施形態において、対象は、老人ホーム施設に居住する。

一部の実施形態において、対象は、生活介護施設に居住している。

一部の実施形態において、対象は、高度看護施設に居住する。

一部の実施形態において、対象は、リハビリテーション施設に居住する。

一部の実施形態において、対象は、１つまたは複数の日常生活動作で補助を必要とする。

日常生活動作（ＡＤＬ）は、人々が補助を必要とすることなく毎日する傾向がある習慣となっている活動である。６つの基本的なＡＤＬ：食事、入浴、更衣、トイレの使用、移動（歩行）および排尿排便の随意調節がある。ＡＤＬを実施する個体の能力は、どんな種類の長期ケア（例えば、老人ホームケアまたは在宅ケア）および保険適用（すなわち、メディケア、メディケイドまたは長期ケア保険）を個体が必要とするかを決定するために重要である。

ＡＤＬ（日常生活動作）：料理、摂食、入浴、更衣、身繕い、仕事、家事および余暇等のセルフケアのために我々が行う任意の日常活動を含む、日常生活において我々が通常すること。ＡＤＬを実施することができるか、またはできないかは、多くの障害において能力／能力障害の非常に実用的な尺度として使用することができる。

一部の実施形態において、対象は、運動能力障害を有する。

運動能力障害または運動機能障害は、ある人物の四肢の１つもしくは複数を使用するための能力の異常、または、歩行する、物体を握るもしくは持ち上げるために必要とされる力の減少を指す。車椅子、松葉杖または歩行器の使用を利用して、運動を支援する場合がる。運動機能障害は、老齢化に関連するサルコペニア、疾患、事故または先天性障害等のいくつかの要因によって引き起こされる場合があり、筋肉、神経筋または整形外科的機能障害による結果である場合がある。

腸内または非経口投与のための、固定組合せまたは非固定組合せを含む開示された化合物または組合せを含む医薬組成物は、例えば、糖衣錠、錠剤、カプセル剤もしくは坐剤、またはアンプル剤等の単位剤形のものである。別段の指示がなければ、これらは、当技術分野において公知の様式で、例えば種々の従来の混合、粉体化、造粒、糖衣、溶解、凍結乾燥プロセスまたは当業者には容易に明らかな製作技術によって調製される。複数の投薬量単位の投与によって必要有効量に到達してよいことから、各剤形の個々の用量に含有される組合せパートナーの単位含有量は、それ自体で有効量を構成する必要がないことが分かるであろう。非経口投与のための組合せパートナーの単位含有量は、投与前に有効投薬量に希釈される、より高い投薬量の組合せパートナーを含有してよいことがさらに分かるであろう。

作用物質の組合せまたは作用物質の組合せの個々の作用物質を含有する単位剤形は、カプセル剤、例えばゼラチンカプセル剤の内部に封入されたマイクロ錠剤の形態であってよい。このため、医薬製剤において用いられるような、Ｐｆｉｚｅｒから入手可能なＣＡＰＳＵＧＥＬ（商標）として公知の硬ゼラチンカプセル剤等のゼラチンカプセル剤を使用することができる。

本発明の単位剤形は、医薬品に使用される追加の従来の担体または添加剤を場合によりさらに含んでよい。そのような担体の例は、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、流動促進剤、安定剤、および充填剤、賦形剤、着色剤、香味剤、および保存剤を含むがこれらに限定されない。当業者は、剤形の特定の所望の特性に関して、前述の担体の１つまたは複数を、慣用的実験により、いかなる過度の負担もなく、選択してよい。使用される各担体の量は、当技術分野において慣習的な範囲内で変動してよい。参照によりすべてが本明細書に組み込まれる下記の参考文献は、経口剤形を製剤化するために使用される技術および添加剤を開示している。The Handbook of Pharmaceutical Excipients, 4th edition, Rowe et al., Eds., American Pharmaceuticals Association (2003)；およびRemington: the Science and Practice of Pharmacy, 20th edition, Gennaro, Ed., Lippincott Williams & Wilkins (2003)を参照されたい。

これらの任意選択の追加の従来の担体は、溶融造粒の前または最中に１つもしくは複数の従来の担体を初期混合物に組み込むことによって、または１つもしくは複数の従来の担体を経口剤形中の顆粒剤と組み合わせることによってのいずれかで、経口剤形に組み込んでよい。後者の実施形態において、組み合わせた混合物を、例えばＶブレンダーを通してさらに混和し、その後、錠剤、例えばモノリシック錠剤に圧縮もしくは成型するか、カプセルによってカプセル化するか、またはサシェに充填してよい。

薬学的に許容される崩壊剤の例は、デンプン；粘土；セルロース；アルギン酸塩；ガム；架橋ポリマー、例えば、架橋ポリビニルピロリドンまたはクロスポビドン、例えば、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ（Ｗａｙｎｅ、ＮＪ）製のＰＯＬＹＰＬＡＳＤＯＮＥ ＸＬ（商標）；架橋カルボキシメチルセルロースナトリウムまたはクロスカルメロースナトリウム、例えば、ＦＭＣ製のＡＣ−ＤＩ−ＳＯＬ（商標）；および架橋カルボキシメチルセルロースカルシウム；大豆多糖；ならびにグアーガムを含むがこれらに限定されない。崩壊剤は、組成物の約０重量％から約１０重量％の量で存在してよい。一実施形態において、崩壊剤は、組成物の約０．１重量％から約５重量％の量で存在してよい。

薬学的に許容される結合剤の例は、デンプン；セルロースおよびその誘導体、例えば、微結晶性セルロース、例えば、ＦＭＣ（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、ＰＡ）製のＡＶＩＣＥＬ ＰＨ（商標）、ヒドロキシプロピルセルロースヒドロキシエチルセルロースおよびヒドロキシプロピルメチルセルロースＤｏｗ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｒｐ．（Ｍｉｄｌａｎｄ、ＭＩ）製のＭＥＴＨＯＣＥＬ（商標）；スクロース；デキストロース；コーンシロップ；多糖；ならびにゼラチンを含むがこれらに限定されない。結合剤は、組成物の約０重量％から約５０重量％、例えば、２〜２０重量％の量で存在してよい。

薬学的に許容される滑沢剤および薬学的に許容される流動促進剤の例は、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、デンプン、タルク、第３リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸アルミニウム、ステアリン酸カルシウム、炭酸マグネシウム、酸化マグネシウム、ポリエチレングリコール、粉末セルロースおよび微結晶性セルロースを含むがこれらに限定されない。滑沢剤は、組成物の約０重量％から約１０重量％の量で存在してよい。一実施形態において、滑沢剤は、組成物の約０．１重量％から約１．５重量％の量で存在してよい。流動促進剤は、約０．１重量％から約１０重量％の量で存在してよい。

薬学的に許容される充填剤および薬学的に許容される賦形剤の例は、製菓用砂糖、圧縮可能な砂糖、デキストレート、デキストリン、デキストロース、ラクトース、マンニトール、微結晶性セルロース、粉末セルロース、ソルビトール、スクロースおよびタルクを含むがこれらに限定されない。充填剤および／または賦形剤は、例えば、組成物の約０重量％から約８０重量％の量で存在してよい。

治療剤または毒性なしに効能を産出する作用物質の、最適な比、個々および組み合わせた投薬量ならびに濃度は、部位を標的化する治療剤の利用可能性の反応速度論に基づき、当業者に公知の方法を使用して決定される。

本発明に従って、治療有効量の、（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せのそれぞれは、同時にまたは順次にかつ任意の順序で投与されてよく、成分は、別個にまたは固定組合せとして投与されてよい。例えば、一態様において、本発明は、本発明による感染症または老齢化に関連する疾患を予防するまたは治療する方法を提供し、同時にまたは任意の順序で順次に、共同で治療的に有効な量で、一部の実施形態において相乗的に有効な量で、例えば本明細書において記述されている量に対応する１日または間欠投薬量での、（ｉ）遊離または薬学的に許容される塩形態の第１の作用物質（ａ）の投与および（ｉｉ）遊離または薬学的に許容される塩形態の作用物質（ｂ）の投与を含んでよい。個々の治療剤は、治療のコース中の異なる時点に別個に、または分割されたもしくは単一の組合せ形態で同時発生的に、投与されてよい。さらに、用語「投与すること」は、インビボで治療剤に変換する治療剤のプロドラッグの使用も包含する。したがって、本発明は、同時または交互治療のすべてのそのようなレジメンを内包するとして理解されるべきであり、用語「投与すること」は、相応に理解されるべきである。

治療剤のそれぞれまたはそれらの組合せの有効投薬量は、用いられる特定の治療剤または医薬組成物、投与モード、治療されている状態および治療されている状態の重症度に応じて変動してよい。故に、投薬レジメンは、投与ルートならびに患者の腎および肝機能を含む多様な要因に従って選択される。通常の技量の臨床医または医師は、状態を緩和する、それに対抗する、またはその進行を阻止するために必要とされる単一の有効成分の有効量を容易に決定し処方することができる。

２つの治療剤が組み合わせて使用される実施形態において、治療剤のそれぞれの有効投薬量は、組合せ中の他の治療剤（単数または複数）と比較して、治療剤（単数または複数）の１つのより頻繁な投与を必要とする場合がある。したがって、適切な投薬を可能にするために、パッケージ化された医薬製品は、化合物の組合せを含有する１つまたは複数の剤形、および治療剤（単数または複数）の組合せの１つを含有するが組合せの他の治療剤（単数または複数）を含有しない１つまたは複数の剤形を含有してよい。

（ａ）ＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩；および（ｂ）ＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩の組合せ等の治療剤の組合せが、単一の薬物として市販されている通りの形態で適用される場合、それらの投薬量および投与モードは、本明細書において別段の言及がなければ、それぞれの市販薬の添付文書上に提供された情報に従うものであってよい。

一部の実施形態において、ＲＡＤ００１、例えばその遊離形態は、１日におよび／または週に約０．０１ｍｇから約１ｍｇまでの範囲内の用量で、経口的に投与される。一部の実施形態において、ＲＡＤ００１、特にその遊離形態の投薬量は、１日に０．１ｍｇの投薬量で、成人に経口的に投与される。

一部の実施形態において、ＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩、例えばそのｐ−トルエンスルホン酸塩は、１日に約１ｍｇから約２０ｍｇまでまたは１日におよび／もしくは週に約１ｍｇから約５０ｍｇまでの範囲内の用量で、経口的に投与される。一部の実施形態において、ＢＥＺ２３５またはそのｐ−トルエンスルホン酸塩等の薬学的に許容されるその塩の投薬量は、１日に約１０ｍｇの投薬量で、６５歳以上の人物等の成人に、例えば経口的に投与される。一部の実施形態において、ＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩の投薬量は、約２ｍｇから約１９ｍｇ、約３ｍｇから約１７ｍｇ、約４ｍｇから約１６ｍｇ、約５ｍｇから約１５ｍｇ、約６ｍｇから約１４ｍｇ、約７ｍｇから約１３ｍｇ、約８ｍｇから約１２ｍｇ、または約９ｍｇから約１１ｍｇである。一部の実施形態において、ＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩の用量は、約１ｍｇ、約２ｍｇ、約３ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約６ｍｇ、約７ｍｇ、約８ｍｇ、約９ｍｇ、約１０ｍｇ、約１１ｍｇ、約１２ｍｇ、約１３ｍｇ、約１４ｍｇ、約１５ｍｇ、約１６ｍｇ、約１７ｍｇ、約１８ｍｇ、約１９ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、または約５０ｍｇである。一部の実施形態において、ＢＥＺ２３５は、そのｐ−トルエンスルホン酸塩として経口的に投与される。一部の実施形態において、ＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩は、１日当たり２回、１日当たり１回、２日毎に１回、３日毎に１回、４日毎に１回、５日毎に１回、６日毎に１回、週に１回、２週間毎に１回、３週間毎に１回、４週間毎に１回、月に１回、２か月毎に１回、３か月毎に１回、４か月毎に１回、６か月毎に１回、または年に１回、投与される。

対象における免疫応答の促進および／もしくは増強のためのならびに／または対象における老齢化に関連する状態を治療するための各治療剤の最適投薬量は、公知の方法を使用して、各個体について経験的に決定することができ、疾患の進行の程度；個体の年齢、体重、全体的健康、性別および食生活；投与の時間およびルート；ならびに個体が服用している他の薬剤を含むがこれらに限定されない多様な要因に応じて決まることになる。最適投薬量は、当技術分野において周知である慣用的試験および手順を使用して、確立されてよい。

単一の剤形を生成するために担体材料と組み合わせてよい各治療剤の量は、治療される個体および特定の投与モードに応じて変動することになる。一部の実施形態において、本明細書において記述されている通りの治療剤の組合せを含有する単位剤形は、治療剤が単独で投与される場合、典型的に投与される量の組合せの各作用物質を含有することになる。

投薬頻度は、使用される治療剤および治療される特定の状態に応じて変動してよい。概して、有効な療法を提供するために十分な最小投薬量の使用が好ましい。患者は、概して、当業者には身近であろう、治療されている状態に好適なアッセイを使用して、治療有効性についてモニターされてよい。

一態様において、本発明は、対象における免疫応答を促進するおよび／または増強する方法であって、それを必要とする対象に、（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを、対象における免疫応答を促進するおよび／または増強する際に治療的に有効な、または共同で治療的に有効な量で投与するステップを含む方法を提供する。

別の態様において、本発明は、対象における老齢化に関連する状態を治療する方法であって、それを必要とする対象に、ある量の（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを、免疫老化等の老齢化に関連する状態を治療するために治療的に有効な、または共同で治療的に有効な量で投与するステップを含む方法を提供する。

別の態様において、本発明は、対象における免疫応答を促進するおよび／または増強する方法であって、それを必要とする対象に、ＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩を、先天性免疫応答等の対象における免疫応答を促進するおよび／または増強する際に治療的に有効である量で投与するステップを含む方法を提供する。

別の態様において、本発明は、対象における老齢化に関連する状態を治療する方法であって、それを必要とする対象に、ある量のＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩を、免疫老化等の老齢化に関連する状態を治療するために治療的に有効である量で投与するステップを含む方法を提供する。

別の態様において、本発明は、免疫応答の増強および／もしくは促進のためならびに／または免疫応答の増強および／もしくは促進用の医薬の調製のための、（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せの使用を提供する。

別の態様において、本発明は、老齢化に関連する状態の治療のためおよび／または免疫老化等の老齢化に関連する状態の治療用の医薬の調製のための、（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せの使用を提供する。

別の態様において、本発明は、免疫応答の増強および／もしくは促進のためならびに／または先天性免疫応答等の免疫応答の増強および／もしくは促進用の医薬の調製のための、ＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩の使用を提供する。

別の態様において、本発明は、老齢化に関連する状態の治療のためおよび／または免疫老化等の老齢化に関連する状態の治療用の医薬の調製のための、ＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩の使用を提供する。

一態様において、本発明は、有効成分として、（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを、免疫応答の増強および／または治療における、それらの同時、別個または順次使用のための説明書と一緒に含む商品パッケージを提供する。

別の態様において、本発明は、有効成分として、（ａ）ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを、免疫老化等の老齢化に関連する状態の治療における、それらの同時、別個または順次使用のための説明書と一緒に含む商品パッケージを提供する。

一態様において、本発明は、ＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩、ならびに免疫応答の増強および／または促進におけるＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩との同時、別個または順次使用のための説明書を含む商品パッケージを提供する。

別の態様において、本発明は、ＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩、および免疫老化等の老齢化に関連する状態の治療におけるＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩との同時、別個または順次使用のための説明書を含む商品パッケージを提供する。

別の態様において、本発明は、ＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩、ならびに先天性免疫応答等の免疫応答の増強および／または促進におけるＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩との同時、別個または順次使用のための説明書を含む商品パッケージを提供する。

別の態様において、本発明は、ＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩、および免疫老化等の老齢化に関連する状態の治療におけるＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩との同時、別個または順次使用のための説明書を含む商品パッケージを提供する。

別の態様において、本発明は、ＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩、ならびに先天性免疫応答等の免疫応答の増強および／または促進における使用のための説明書を含む商品パッケージを提供する。

別の態様において、本発明は、ＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩、および免疫老化等の老齢化に関連する状態の治療における使用のための説明書を含む商品パッケージを提供する。

病原性感染症
別の態様において、本明細書において提供される方法を使用して、対象における病原体による感染症を治療するまたは予防することができる。一部の実施形態において、対象は、免疫欠損がある。一部の実施形態において、対象は、免疫老化状態にある。一部の実施形態において、病原体は、ウイルス性病原体、例えば、ウイルス性病原体、例えば、ＨＩＶ、髄膜炎の原因となるウイルス、脳炎の原因となるウイルス、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、狂犬病ウイルス、ポリオウイルス、インフルエンザウイルス、パラインフルエンザウイルス、アデノウイルス、ライノウイルス、麻疹ウイルス、ムンプスウイルス、風疹、百日咳、パピローマウイルス、黄熱病ウイルス、呼吸器合胞体ウイルス、パルボウイルス、ノーウォークウイルス、チクングニアウイルス、エボラウイルスを含む出血熱ウイルス、デングウイルス、ジカウイルス、ならびにヘルペスウイルス、例えば、水痘、サイトメガロウイルスおよびエプスタイン・バールウイルスである。一部の実施形態において、感染症は、慢性ウイルス感染症等のウイルス感染症である。一部の実施形態において、慢性ウイルス感染症は、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、エプスタイン・バールウイルス、ＨＩＶ、サイトメガロウイルス、単純ヘルペスウイルス１、単純ヘルペスウイルス２、ヒトパピローマウイルス、アデノウイルスおよびカポジ肉腫関連ヘルペスウイルスから選択される。一部の実施形態において、慢性ウイルス感染症は、ＨＩＶを含む。

例えば、Ｌｉｃｈｔｅｒｆｅｌｄおよび同僚は、ＨＩＶ特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞が、ＰＤ−１の阻害時に、テロメア長の低減ならびにテロメア長およびテロメラーゼ活性の増大を示すことを観察した（例えば、Lichterfeld, M et al. (2008) Blood 112(9):3679- 3687を参照）。別の例において、ＰＤ−１は、Ｃ型肝炎（ＨＶＣ）特異的ＣＤ８＋細胞毒性Ｔリンパ球において有意に上方調節された（例えば、Golden-Mason, L (2007) J. Virol. 81(17): 9249-9258を参照）。

一部の実施形態において、ウイルス感染症は、ウイルス性気道感染症を含む。一部の実施形態において、ウイルス性気道感染症は、ウイルス性上気道感染症である。一部の実施形態において、ウイルス性気道感染症は、ウイルス性下気道感染症である。一部の実施形態において、ウイルス性気道感染症は、ライノウイルス、コロナウイルス、インフルエンザウイルス、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、アデノウイルス、メタニューモウイルス、エンテロウイルス、ボカウイルス パラミクソウイルスおよび／またはパラインフルエンザウイルスによって引き起こされる。一部の実施形態において、ウイルス性気道感染症は、肺炎である。一部の実施形態において、ウイルス性気道感染症は、肺膿瘍を含む。一部の実施形態において、ウイルス性気道感染症は、気管支炎を含む。

一部の実施形態において、病原体は、細菌性病原体、例えば、数ある中でも、髄膜炎菌（Meningococcus）、ヘモフィルス属（Haemophilus）、肺炎球菌（Pneumococcus）、ブドウ球菌（Staphylococcus）、連鎖球菌（Streptococcus）、ナイセリア（Neisseria）、モラクセラ属（Moraxella）、大腸菌（Escherichia coli）、クレブシエラ菌（Klebsiella）、シュードモナス菌（Pseudomonas）、エンテロバクター属（Enterobacter）、プロテウス（Proteus）、セラチア属（Serratia）、レジオネラ菌（Legionella）、サルモネラ菌（Salmonella）、赤痢菌（Shigella）、アシネトバクター（Acinetobacer）、リステリア（Listeria）、クラミジア（Chlamydia）およびマイコバクテリウム（Mycobacterium）から選択される細菌性病原体である。

一部の実施形態において、病原体は、寄生性病原体、例えば、トキソプラズマ（Toxoplasma）、リーシュマニア（Leishmania）およびマラリア、クルーズトリパノソーマ（T. cruzii）、寄生蠕虫、例えば、住血吸虫属（Schistosoma）である。

一部の実施形態において、病原体は、酵母または真菌性病原体、例えば、カンジダ属（Candida）、クリプトコッカス属（Cryptococcus）、コクシジオイデス属（Coccidioides）、ブラストミセス属（Blastomyces）、アスペルギルス属（aspergillus）またはムコール真菌（mucormycetes）である。

老化および他の障害
別の態様において、本明細書において提供される方法を使用して、対象における老化を治療することができる。本明細書において使用される場合、用語「老化」は、すべての種類の老齢化を含むことになっている。一部の実施形態において、老化は、免疫欠損、例えば免疫老化を含む。免疫老化は、老齢化に伴う感染症に対する免疫応答の低減を含み、Ｔ細胞系譜における胸腺退縮から生じて、Ｔ細胞産生および移出の減少をもたらす（例えば、Shimatani, K et al. (2009) PNAS 106 (37):15807-15812を参照）。一部の実施形態において、抗原に対するＴ細胞応答を阻害する、ＰＤ−１の持続発現によって定義される真正な年齢依存性ＣＤ４＋またはＣＤ８＋Ｔ細胞集団の集団の増大がある（例えば、Shimatani, K et al. (2009) PNAS 106 (37):15807-15812；Nunes, C et al. (2012) Clinical Cancer Research 18(3):678-687を参照）。一部の実施形態において、老化は、細胞がそれ以上分裂しない細胞の老化を含む。一部の実施形態において、老齢化に関連する免疫老化は、造血幹細胞によるナイーブリンパ球の産生の減少を含む（Chen, Science Signalling, ra75, 2009）。細胞の老化は、各細胞分裂またはｐ１６の細胞内発現に伴って出現するテロメアの進行性短縮と相関している。一部の実施形態において、老化は、好中球、リンパ球、ＮＫ細胞、マクロファージおよび／または樹状細胞の機能の、老齢化に関連する減少を含む（例えば、Boraschi D et al. (2013) Sci Transl Med 5(185):ps8；Kumar R and Burns EA. (2008) Expert Rev. Vaccines 7(4): 467-479を参照）。

例証（exemplification）
下記の実施例は、上述した本発明を例証するが、しかしながら、本発明の範囲をいかようにも限定することは意図されていない。本発明の医薬化合物、組合せおよび組成物の有益な効果は、関連技術の当業者にそのようなものとして公知である他の試験モデルによって決定することもできる。

実施例１： ＢＥＺ２３５は、抗原特異的免疫を増強しないが、インターフェロン誘導遺伝子（ＩＳＧ）の上方調節を介して先天性免疫を増強することにより、感染率（infection rate）を減少させるという主張を裏付けるデータ
合計２６４人の、不安定な病状がない６５歳以上の高齢者ボランティアが、無作為二重盲検プラセボ対照試験に登録した。対象を、プラセボ、または４つの経口ｍＴＯＲ阻害剤投薬レジメン：１日にＲＡＤ００１：０．５ｍｇ、１日にＲＡＤ００１ ０．１ｍｇ、１日にＢＥＺ２３５ １０ｍｇ、もしくは１日に０．１ｍｇのＲＡＤ００１および１０ｍｇのＢＥＺ２３５の組合せのうちの１つを受けるように、無作為に割り当てた。対象を、研究薬物で６週間にわたって治療し、２週間の無薬物期間後、２０１４年の季節性インフルエンザワクチン（Ｆｌｕｖａｘ（登録商標）、ＣＳＬ Ｂｉｏｔｈｅｒａｐｉｅｓ）を与えた。インフルエンザワクチン中の３つのインフルエンザ株に対する血球凝集阻害（ＨＩ）抗体力価を、ベースライン時およびインフルエンザワクチン接種の４週間後に収集した血清中で測定した。血清ＨＩ力価を、Ｑｕｅｓｔ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓで測定した。次いで、対象は、その後、もう９か月間にわたって研究薬物を絶った。研究のプライマリーエンドポイントは、３つのインフルエンザワクチン株のうちの少なくとも２つに対する血球凝集阻害（ＨＩ）幾何平均力価（ＧＭＴ）比（ワクチン接種の４週間後のＧＭＴ／ベースライン時におけるＧＭＴ）において、プラセボと比べて１．２倍の増大であった。ＭＦ−５９ワクチンアジュバントによって誘導されるインフルエンザＧＭＴ比におけるおよそ１．２倍の増大は、インフルエンザの疾病の減少と関連していたことから、このエンドポイントが選択された（１）。

低用量ＲＡＤ００１（１日に０．１ｍｇ）およびＢＥＺ２３５（１日に１０ｍｇ）の組合せだけが、研究のプライマリーエンドポイントを満たしており、３／３のインフルエンザワクチン株においてインフルエンザＧＭＴ比の１．２倍よりも大きい統計学的に有意な増大をもたらした（図１）。ＲＡＤ００１単独療法（１日に０．１ｍｇまたは０．５ｍｇ）は、１／３のインフルエンザワクチン株においてのみインフルエンザＧＭＴ比の１．２倍よりも大きい統計学的に有意な増大をもたらした。ＢＥＺ２３５単独療法は、３つのインフルエンザワクチン株のいずれに対してもインフルエンザＧＭＴ比の増大をもたらさなかった。これらの結果は、低用量アロステリック（ＲＡＤ００１）およびカタリティック（ＢＥＺ２３５）ｍＴＯＲ阻害剤の組合せが、インフルエンザワクチン接種応答において、ＲＡＤ００１またはＢＥＺ２３５単独療法よりも大きい改善をもたらしたことを示唆している。

免疫機能の追加の評価として、各治療群における全体の感染率を、研究薬物治療の開始の翌年中に対象が経験したあらゆる感染症を日誌に記録させ、これを各研究訪問時に研究調査員がレビューすることによって評価した。１人当たりの年間感染数は、ＲＡＤ００１ ０．１ｍｇ＋ＢＥＺ２３５ １０ｍｇの組合せおよびＢＥＺ２３５単独療法治療群の対象において、プラセボと比べて優位に減少した（表１）。加えて、尿路感染症（表２）ならびに歯および歯茎の感染症（表３）の率は、ＢＥＺ２３５単独療法およびＲＡＤ００１＋ＢＥＺ２３５治療群において、プラセボまたはＲＡＤ００１単独療法治療群よりも低かった。

対象を研究薬物で治療した６週間中の感染率も検査した。６週間の研究薬物治療中に出現した主要な感染症は、気道感染症であった。ＢＥＺ２３５およびＲＡＤ００１＋ＢＥＺ２３５はいずれも、対象を研究薬物で治療した６週間中の気道感染症の罹患率および重症度の低減をもたらした（図２）。

低用量ＢＥＺ２３５単独療法の組合せまたはＲＡＤ００１＋ＢＥＺ２３５の組合せ療法が高齢者における感染率を低減させた、可能性のある機構を探究するために、ＲＮＡｓｅｑ遺伝子発現プロファイリングを、ベースライン時およびプラセボ、ＢＥＺ２３５またはＲＡＤ００１＋ＢＥＺ２３５治療のいずれかの６週間後に対象から取得した全血中で実施した。全血のＲＮＡｓｅｑ解析は、経路の高度に有意なエンリッチメントがインターフェロンシグナル伝達に関係していることを明らかにした（図３）。その発現がエンリッチされた経路において最も高度に上方調節されている遺伝子の一部は、ウイルスに対する免疫応答において重大な役割を果たす１型インターフェロン誘導遺伝子（ＩＳＧ）のサブセットを含んでいた（表４）（２）。これらの知見は、低用量ＢＥＺ２３５および／またはＢＥＺ２３５＋ＲＡＤ００１の組合せ療法による免疫系およびインターフェロン誘導遺伝子のサブセットの上方調節が、免疫機能を増強し、それにより、高齢者における感染率を低減させることを示唆している。

ＲＮＡＳｅｑによる遺伝子発現プロファイリング
末梢静脈血試料を、ＰＡＸｇｅｎｅ Ｂｌｏｏｄ ＲＮＡチューブ中に収集した。全ＲＮＡを、ＰＡＸｇｅｎｅで収集した血液から精製し、Ａｇｉｌｅｎｔ ２１００バイオアナライザ（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｓａｎｔａ Ｃｌａｒａ、ＣＡ、ＵＳＡ）を使用して、単離されたＲＮＡの品質および収率を評価した。ＲＮＡ−Ｓｅｑライブラリは、ＲＮＡから、Ｒｉｂｏ−Ｚｅｒｏグロビンキット付きのＩｌｌｕｍｉｎａ ＴｒｕＳｅｑ標準全ＲＮＡを使用して、調製した。このキットは、リボソームＲＮＡおよびグロビンｍＲＮＡの除去を単一ステップで実施した。取得されたライブラリは、Ｉｌｌｕｍｉｎａ ＨｉＳｅｑ２５００プラットフォームをペアエンドモードで使用して、２×７６塩基対（ｂｐ）の読み取り長さまでシーケンスした。製造業者のソフトウェアを使用して機器からの画像を処理して、ＦＡＳＴＱシーケンスファイルを作成した。

ＦＡＳＴＱファイルに対してＦａｓｔＱＣ（バージョン０．１０）を実行することによって、リード品質を評価した。シーケンシングリードは優れた品質を示し、平均Ｐｈｒｅｄスコアはすべての塩基位置について３０よりも高かった。１つの試料当たり１億個の７６ｂｐペアエンドリードの平均を、ホモ・サピエンス（Homo sapiens）ゲノム（バージョンＧＲＣｈ３８）にマッピングし、ヒト遺伝子および転写産物アノテーションにＲｅｆＳｅｑ ＵＣＳＣを使用した。自社の遺伝子定量化パイプラインを使用して、各遺伝子にマッピングするカウント数を決定した（Schuierer, S. & Roma, G. The exon quantification pipeline (EQP): a comprehensive approach to the quantification of gene, exon and junction expression from RNA-seq data. Nucleic acids research (2016)）。平均して、全リードの８８％がゲノムまたは転写産物にマッピングされ、整列したリードの３０％が発現シーケンスにマッピングされた。８００万個未満の発現リードを持つ試料および鎖不均衡を実証する３つの試料をさらなる解析から除いた。

ＲＮＡＳｅｑ差次的遺伝子発現解析
任意の治療／時間条件において１００万個当たり１未満のカウントの平均発現を持つあらゆる遺伝子を検出不可能とみなし、さらなる解析から除いた。次いで、残りの遺伝子についてのカウントデータを、Ｒ統計計算ソフトウェア（ｖ３．１．３）で、ｌｉｍｍａパッケージにあるｖｏｏｍ正規化手順を使用して正規化した（Law, CW, Chen, Y, Shi, W, and Smyth, GK (2014). Voom: precision weights unlock linear model analysis tools for RNA-seq read counts. Genome Biology 15, R29.）。

データの技術的品質を審査する場合、本発明者らは、Ｒにおいてｐｒｃｏｍｐ関数を使用して主成分解析を実施した。この解析は、第１の主成分が試料処理の複数の側面（ＲＮＡ抽出バッチ、ｍＲＮＡの収率等）を反映することを示していた。故に、本発明者らは、技術的バリエーションの調整として、この主成分の値をその後の解析に含めた。

各遺伝子について、下記の線形混合モデルをｖｏｏｍ正規化発現データに当てはめ、ＳＡＳ ｖ９．３ソフトウェアを使用して、関連する共変量（年齢、性別およびＢＭＩ）およびＰＣ１を調整した。
ｐｒｏｃ ｍｉｘｅｄ ｄａｔａ＝ｅｘｐｒｓＤａｔａ ａｎｏｖａｆ；
ｃｌａｓｓ ＳｕｂｊＩＤ Ｄａｙ Ｔｒｔ Ｇｅｎｄｅｒ；
ｍｏｄｅｌ ｌｏｇ２ｅｘｐｒｓ＝Ｄａｙ Ｔｒｔ Ｄａｙ^＊Ｔｒｔ ＰＣ１ Ａｇｅ Ｇｅｎｄｅｒ Ｂｍｉ／ｓｏｌｕｔｉｏｎ ＤＤＦＭ＝ＫｅｎｗａｒｄＲｏｇｅｒ；
ｒｅｐｅａｔｅｄ Ｄａｙ／ｔｙｐｅ＝ｕｎ ｓｕｂｊｅｃｔ＝ＳｕｂｊＩＤ；
ｂｙ ｇｅｎｅ；
ここで、ｌｏｇ２ｅｘｐｒｓは、ｖｏｏｍ正規化発現測定を指し；Ｄａｙは、試料が採取された時点（投薬前または後）を指し；Ｔｒｔは、対象の治療群を指し；ＰＣ１は、その試料についてのＰＣ１の値を指し；Ａｇｅは、対象の年齢を指し；Ｇｅｎｄｅｒは、対象の性別を指し；Ｂｍｉは、対象のボディマス指数を指し；およびＳｕｂｊＩＤは、対象のＩＤを指す。差次的発現変化倍率およびｐ値は、ＳＡＳ ｅｓｔｉｍａｔｅステートメントを使用して取得した。この解析は、治療アーム（ＢＥＺ、ＲＡＤ＋ＢＥＺおよびプラセボ）のそれぞれについて遺伝子発現応答シグネチャーをもたらした。これらの遺伝子発現シグネチャーは、各治療についての治療前対後の変化倍率およびｐ値からなるものであった。

ＲＮＡＳｅｑ遺伝子発現パスウェイエンリッチメント解析
この解析のために、本発明者らは、各治療応答シグネチャー内の定義された生物学的経路において遺伝子の上方または下方調節されている非対称を探した。カノニカル経路（ｃ２．ｃｐ．ｖ５．０．ｅｎｔｒｅｚ．ｇｍｔ）は、カノニカルシグネチャーデータベース（ｈｔｔｐ：／／ｓｏｆｔｗａｒｅ．ｂｒｏａｄｉｎｓｔｉｔｕｔｅ．ｏｒｇ／ｇｓｅａ／ｍｓｉｇｄｂ／）からダウンロードした。シグネチャーは、「ＲＮＡＳｅｑ差次的発現解析」の節において記述されている通りに定義した。各経路および治療応答シグネチャーについて、重み付きＫＳ検定をこれまでに記述されている通り実施し（Subramanian et al. Gene set enrichment analysis: A knowledge-based approach for interpreting genome-wide expression profiles. Proc. Nat. Acad. Sci. vol 102. no 43. 15545-15550 2005）、得られた−ｌｏｇ１０（ｐ値）を、経路における遺伝子の平均変化倍率の関数として、図３にプロットした。

ＲＮＡＳｅｑ遺伝子発現−上方調節されている遺伝子の指定
遺伝子は、テューキーの外れ値検出法を使用して、それらの変化倍率が外れ値であると決定された場合、上方調節されているとみなした。具体的には、上方調節されている遺伝子は、下記の基準を満たした：ｌｏｇ２（ＦＣ治療後対前）はＱ３＋１．５^＊（Ｑ３−Ｑ１）よりも大きく、ここで、各治療について、Ｑ３はｌｏｇ２（ＦＣ）の上方（すなわち、第３）四分位数であり、Ｑ１は下方（すなわち、第１）四分位数である。

ＢＥＺ２３５単独療法が、インフルエンザワクチン接種に対する応答を改善しなかったが感染率を減少させたという知見は、全く予想外であった。インフルエンザワクチン接種応答は、抗原特異的適応免疫の読み出しである。故に、これらの知見は、ＢＥＺ２３５が、ＲＡＤ００１とは異なり、特異的抗原に対する免疫応答を改善しないことを示唆している。代わりに、ＢＥＺ２３５、およびＢＥＺ２３５＋ＲＡＤ００１の組合せは、ＩＳＧ発現の上方調節を介して、複数の病原体に対する非抗原特異的先天性免疫応答を改善することにより、感染率を低減させ得る。

実施例２： ＲＡＤ００１＋ＢＥＺ２３５は、いずれかの単独療法よりも選択的かつ完全なＴＯＲＣ１阻害をこの組合せがもたらすため、高齢者におけるワクチン接種応答（老齢化に関連するエンドポイント）を改善するためのＲＡＤ００１またはＢＥＺ２３５単独療法のいずれかよりも大きい効能を有し得る
老齢化は、ｍＴＯＲ経路を含む細胞シグナル伝達経路のディスクリートセット（discreet set）の攪乱によるものである可能性がある。ｍＴＯＲは、２つの複合体：ＴＯＲＣ１およびＴＯＲＣ２を介してシグナル伝達する。前臨床種における老齢化に対するｍＴＯＲ阻害の有益な効果の多くは、ＴＯＲＣ１の阻害によって媒介され得る（３，４）。対照的に、ＴＯＲＣ２阻害は、高血糖症、高コレステロール血症、および雄マウスにおける寿命減少に関連するとされてきた（４，５）。加えて、いくつかの長寿命動物モデルでは、ＴＯＲＣ２活性が減少するよりもむしろ増大していた（６）。したがって、ＴＯＲＣ１特異的阻害は、免疫機能の低下等のヒトにおける老齢化に関連する状態の治療に最適となり得る。ＲＡＤ００１等のラパログは、ＴＯＲＣ１複合体の下流にあるＳ６Ｋノードのみを一貫して阻害するアロステリックｍＴＯＲ阻害剤のクラスである（７）。低濃度のＢＥＺ２３５も、１日に１０ｍｇのＢＥＺ２３５（およそ１０〜２０ｎＭ）を投与した高齢者対象の血清中で実現されたように、ＴＯＲＣ１の下流にあるＳ６Ｋノードのみを一貫して阻害する（８）。より高い用量では、ＢＥＺ２３５は、ＴＯＲＣ１を完全に阻害するが、ＴＯＲＣ２も阻害する（８，９）。しかしながら、低用量のＲＡＤ００１と組み合わせた低用量のカタリティック阻害剤は、ＴＯＲＣ２活性を阻害することなく、ＴＯＲＣ１の下流にあるすべてではないとしてもほとんどのノードを相乗的に阻害する（８，１０）。本発明者らの臨床知見は、低用量ＲＡＤ００１およびＢＥＺ２３５の組合せを用いて実現される、より完全かつ選択的なＴＯＲＣ１阻害が、高齢者対象におけるインフルエンザワクチン応答の、低用量ＲＡＤ００１またはＢＥＺ２３５単独療法よりも良好な増強に関連していることを示唆している。低用量ＲＡＤ００１およびＢＥＺ２３５の組合せは、組合せのより完全かつ選択的なＴＯＲＣ１阻害により、他の老齢化に関連する状態について、ＲＡＤ００１および／またはＢＥＺ２３５単独療法よりも良好な効能も有し得る。

実施例３： ＢＥＺ２３５またはＢＥＺ２３５＋ＲＡＤ００１を使用して、インターフェロン誘導遺伝子（ＩＳＧ）のサブセットの低レベル上方調節を介し、高齢者における免疫機能を安全に増強し、感染率を減少させることができる
ＢＥＺ２３５単独療法またはＲＡＤ００１＋ＢＥＺ２３５の組合せ治療後の全血中におけるＩＳＧ上方調節の規模は、小さかった（１〜９％）。ＩＳＧ発現の低レベル増大は、ＩＳＧ誘導のはるかに大きい増大を有するインターフェロンで治療した患者において出現する望ましくない有害事象を回避しながら、高齢者において免疫機能を増強し感染率を減少させるために十分であり得る（１１）。故に、低レベルＩＳＧ誘導は、インターフェロン療法で治療した患者における高レベルＩＳＧ誘導に関連する安全性および忍容性の問題を回避すると考えられる。

実施例４： ＢＥＺ２３５またはＢＥＺ２３５＋ＲＡＤ００１の６週間のコースは、薬物中止後、免疫機能における持続的な改善をもたらす
ＢＥＺ２３５単独療法およびＲＡＤ００１＋ＢＥＺ２３５の組合せは、研究薬物が６週間の治療後に中止されたという事実にもかかわらず、１年間にわたる全体の感染率の有意な低減をもたらした。結果は、ｍＴＯＲ阻害剤療法が、薬物中止後数か月にわたって、免疫機能における持続的な改善をもたらし得ることを示唆している。ｍＴＯＲ阻害剤ラパマイシンの短期コースも、マウスにおいて寿命を延長することが示されており、一過性ｍＴＯＲ阻害の有益な効果が薬物中止後数か月にわたって持続したという概念を裏付けている（１２，１３）。

実施例５： ＢＥＺ２３５のＰＫ変動性は低用量の投与を介して和らげることができる
ＢＥＺ２３５は、腫瘍学適応症のための二重ＰＩ３Ｋ−ｍＴＯＲカタリティック阻害剤として開発された。しかしながら、腫瘍学適応症に使用された高用量のＢＥＺ２３５（１日に１２００ｍｇの最大忍容量まで）は、許容できないほど高い患者間の変動性に関連していた（ＡＵＣｔａｕ，ｓｓパーセント変動係数（％ＣＶ）＝１１３％）。ＰＫ変動性は、一部には、ｐＨ３を上回るＢＥＺ２３５の低い溶解度によるものであり得る。しかしながら、１日にＢＥＺ２３５ １０ｍｇの患者間の変動性は、許容されるもの（ＡＵＣｌａｓｔ，ｓｓ％ＣＶ＝３９％）であった。これはおそらく低用量のＢＥＺ２３５は低ｐＨの胃中で完全に吸収され得るからである。１日に１０ｍｇを上回る用量のＢＥＺ２３５の増大するＰＫ変動性を、図４に示す。

実施例６： 単独またはＲＡＤ００１と組み合わせたＢＥＺ２３５は、細胞外マトリックスリモデリングタンパク質の上方調節を介して幅広い抗老齢化効果を有し得る
細胞外マトリックスリモデリングは、抗老齢化介入の多様なセットの根底にある共通機構である（１４）。これらの知見は、細胞外マトリックスの代謝回転の欠如が、老齢化に寄与すること、および細胞外マトリックスリモデリングを促進する作用物質が、老齢化に関連する状態に対して有益な効果を有し得ることを示唆している。血清プロテオミクスは、ＢＥＺ２３５単独療法またはＢＥＺ２３５＋ＲＡＤ００１の組合せ療法が、細胞外マトリックスリモデリングを促進することを示唆している。血清試料は、ベースライン時、または、プラセボ、１日にＢＥＺ２３５ １０ｍｇもしくは１日にＢＥＺ２３５ １０ｍｇ＋ＲＡＤ００１ ０．１ｍｇの組合せによる６週間の治療後に、高齢者対象から取得した。６週間のＢＥＺ２３５単独療法またはＢＥＺ２３５＋ＲＡＤ００１の組合せはいずれも、細胞外マトリックス分解／リモデリングに関与するタンパク質の発現における高度に有意な上方調節（ｎｅｇｌｏｇ１０ ＢＥＺ２３５については１４．３４およびＢＥＺ２３５＋ＲＡＤ００１の組合せについては１３．３２のｐ値）をもたらしたが、プラセボはそうではなかった（図５）。これらの知見は、ＢＥＺ２３５単独療法またはＢＥＺ２３５＋ＲＡＤ００１の組合せが、細胞外マトリックスのリモデリングを刺激することによって幅広い抗老齢化効果を有し得ることを示唆している。ＢＥＺ２３５単独療法またはＢＥＺ２３５＋ＲＡＤ００１の組合せは、心不全、慢性腎不全および皮膚の老齢化を含む組織の細胞外マトリックスにおける老齢化に関連する異常に関連する、老齢化に関連する状態の治療において特に効果的となり得る。

実施例７： 単独またはＲＡＤ００１と組み合わせたＢＥＺ２３５は、高齢者対象における気道感染症（ＲＴＩ）を減少させ得る
米国において、肺炎およびインフルエンザは、８５歳以上の人々における死因の第５位である（National Vital Statistics Report, Deaths, Final Data for 2014, 2016）。その上、呼吸器系ウイルス（現在は有効な治療がない）は、この個体群における市中肺炎の大部分を引き起こす（Jain et al 2015）。加えて、米国における８５歳以上の人々の７％が、毎年ＲＴＩで緊急治療室に行く（Goto et al 2016）。最後に、ＲＴＩでの入院は、８５歳以上の対象の、老人ホームに入れられるリスクを増大させる。米国において、８５〜９５歳の人々の１０％のみが老人ホームに居住するが、入院している８５歳以上の対象の３６％は、老人ホームへ退院する（The Older Population 2010 US Census Briefs, National Center for Health Statistics Data Brief 2015）。

ＲＴＩの予防も、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、喘息、慢性気管支炎、２型真性糖尿病（Ｔ２ＤＭ）、うっ血性心不全（ＣＨＦ）および現在の喫煙等、根本的なリスク要因のある６５歳以上の高齢者対象にとって、アンメットメディカルニーズである。例えば、ＲＴＩは、ＣＯＰＤおよび喘息悪化の最も一般的な原因である（Nicholson et al BMJ, 2003; Sethi et al 2008）。ＲＴＩは、うっ血性心不全を持つ患者における入院の１６％の根本的な原因でもある（Chin and Goldman 1997）。Ｔ２ＤＭを持つ患者は、下気道感染症のリスクも増大し（Muller et al 2005）、肺炎での入院のリスクも増大する（Kornum et al 2008）。現在の喫煙は、市中肺炎を発生するリスクも増大させる（Almirall et al 1999）。最後に、以前に肺炎を有していた高齢者対象は、再発性肺炎のリスクが増大する（Hedlund et al 1992）。

したがって、この研究の目的は、ＲＴＩ関連疾病率または死亡率のリスクが増大した高齢者対象における、ＲＴＩの罹患率を低減させるためのさらなる開発用の用量選択を支持するために、単独またはＲＡＤ００１と組み合わせたＢＥＺ２３５の、効能、忍容性および安全性を審査することである。

本発明者らは、現喫煙者であり、根本的なＣＯＰＤ、喘息、慢性気管支炎、ＣＨＦおよび／もしくはＴ２ＤＭを有し、かつ／または過去１２か月の間にＲＴＩで入院していたもしくは緊急治療室に行った、８５歳以上または６５歳以上として定義される、高リスク高齢者個体群において、低用量ｍＴＯＲ阻害剤が、ＲＴＩの罹患率および重症度を減少させるか否かを決定することとする。

目的および関連エンドポイント

研究デザイン
これは、不安定な病状がない高齢者対象における、プラセボと比較した、２用量の単独またはＲＡＤ００１と組み合わせたＢＥＺ２３５の、安全性、忍容性および効能を評価するための、２４週間の、無作為化、盲検化、プラセボ制御、並行群、用量設定２段階アダプティブデザイン研究である。対象は、８５歳以上または６５歳以上のいずれか、および現喫煙者である、または根本的なＣＯＰＤ、喘息、慢性気管支炎、Ｔ２ＤＭもしくはＣＨＦを持つ、かつ／あるいは過去１年の間にＲＴＩで入院していたまたは緊急治療室において審査されていたことによって定義される通り、気道感染症のリスクが増大していれば、含まれ得る。研究は、６週間のスクリーニング期間、４週間の導入期間、１６週間の治療期間および８週間の追跡調査期間で構成されることになる。

研究期間：各対象についての研究の総予定持続時間は、無作為化から最後の追跡調査訪問まで最大２４週間であり（図３〜１）；研究治療は１６週間にわたって行われる。

スクリーニング期間：スクリーニング訪問（ベースライン／無作為化前の最大６週間）中に、対象は、包含／除外基準に基づき、試験に参加するための適格性について評価されることになる。

導入期間：導入期間（ベースライン／無作為化前の最大４週間）中に、スクリーニング訪問中に適格性基準を満たした対象は、研究に登録することになり、診療所に入り、対象がこの試験に慣れ、それにより、ベースライン訪問時における試験変動性を低減させるために、手の握力試験および６分間歩行テスト（６ＭＷＴ）を受けることになる。対象には、６ＭＷＴの前および後に、息切れアンケートも施されることになる。加えて、導入期間中に、対象は、心機能を評価するためのベースライン心エコー検査を受けることになる。

盲検治療期：パート１（南または北半球のいずれかで行われる）

治療期（１６週間）：ベースライン訪問（訪問３）時、適格な対象は、３つの治療群のうちの１つに、１：１：１の比で無作為化されることになる。
（１）１日にＢＥＺ２３５ ５ｍｇ
（２）１日にＢＥＺ２３５ １０ｍｇ
（３）１日に適合するプラセボ

対象を、１６週間にわたって研究薬物で治療する。総登録者数はおよそ１６８人の対象であり、およそ５６人の対象が各治療群に登録する。およそ１０％の中断率があり、およそ１５０人の対象が研究のパート１を完了するという結果になる（各アームにおよそ５０人の対象）ことが想定される。中断率が１０％よりも高い場合、交代要員を登録してよい。

ベースライン訪問時に、対象は、臨床審査を受け、ベースライン安全性評価、ＥＡＳＴ（ＩｇＥレベル）およびバイオマーカー評価のために採血されることになる。季節性インフルエンザワクチンをまだ受けていなかった対象からは、インフルエンザ力価を得ることになる。対象はまた、握力、６ＭＷＴを受け、ベースライン訪問時における６ＭＷＴの前および後に息切れアンケートの全項目に回答することになる。次いで、対象は、診療所において第１回用量の研究薬物を与えられ、研究薬物を持って帰宅することになる。対象は、ベースライン訪問から、日誌も持って帰宅することになる。対象は、毎日自宅で投与した研究薬剤のカプセルの時間および数を日誌に記録するように指導されることになる。対象は、訪問と訪問との間に出現するあらゆる感染症症状を日誌に記録するようにも指導されることになる。最後に、対象は、症状が解決するまで、上気道感染症の症状を発生したら毎日書き込むように指導される短期ウィスコンシン上気道症状調査（ＷＵＲＳＳ−２１）を持って帰宅することにもなる。

対象が研究薬物を１週間にわたって服用した後、第１週の研究薬物が忍容性良好であったことを確認するために、対象と現場との間で電話が行われるべきである。研究薬物が研究薬物治療の第１週中に忍容されない場合、調査員は、ｒｅｓＴＯＲｂｉｏメディカルモニターによる審議後に研究薬物を中止してよい。

研究薬物が忍容性良好であり続けるならば、対象は、１６週間にわたって研究薬物で治療されることになり、この期間中に、対象は、最初の８週間は２週間毎に（２、４、６および８週目に訪問）、次いで最後の８週間は４週間毎に（１２および１６週目に訪問）、診療所に再来して、臨床審査を受け、安全性評価のために採血されることになる。ＰＫ評価のために、４、６および８週目の訪問時にも採血されることになる。バイオマーカー評価のために、ベースライン時ならびに６、１６および２４週目の訪問時に採血されることになる。現場は、研究中、週に２回、電話でまたは現場訪問においてのいずれかで対象に接触して、対象が研究薬物を指導された通りに服用していることおよび研究薬物が忍容性良好であり続けていることを確認することになる。現場は、各接触中に気道感染症アンケートを施し、２つ以上の気道感染症症状または１つ以上の非気道感染症症状を発生している対象に、調査員によって対象を審査できるように可能な限り早く、予定外の訪問のために来るように指導することにもなる。

感染症症状により予定外の訪問のために現場に来る対象は、研究操作マニュアルにおいて記述されている通り、感染症の関連する徴候および症状を感染症調査員ワークシートに書き留める調査員によって審査されることになる。ＲＴＩの症状を有する対象は、診療所において鼻咽頭スワブを採取されることになる。対象が予定外の訪問のために現場に再来することができないまたは意に沿わない場合、調査員は、対象に電話をかけ、電話で感染症調査員ワークシートの全項目に回答し、対象が次の訪問のために来た際に鼻咽頭スワブを取得することができる。すべての感染症に対して適切な医学的ケアが提供されることになる。追加の医学的ケアを必要とする対象は、そのヘルスケア提供者にまたは指示されていれば病院に、照会すべきである。

研究中に、対象の日常のヘルスケアの一部として季節性インフルエンザワクチンを受ける対象は、インフルエンザ力価を得るために、対象のインフルエンザワクチン接種のおよそ４週間後に、予定外の訪問のために現場に再来するよう求められることになる。

１６週間の研究薬物治療後、対象は、安全性研究所およびバイオマーカー評価のために採血され、繰り返し握力評価、６ＭＷＴを受け、６ＭＷＴの前および後、１６週目の訪問時に、息切れアンケートの全項目に回答することになる。対象は、１６週間の研究薬物治療を完了した後に、繰り返し心エコー図も受けることになる。

治療後追跡調査期間（８週間）：すべての対象は、研究薬物の最後の投薬後、８週間にわたって追跡調査されることになり、この期間中に、出現するあらゆる感染症を対象の日誌に記録し続けるように言われることになる。現場は、週に２回対象に電話をかけ、呼吸器症状アンケートへの週に２回の接触を施すのを続けることになる。２つ以上の気道感染症症状または１つ以上の非気道感染症症状を発生している対象は、上述した通り、調査員によって対象を審査できるように可能な限り早く、予定外の訪問のために来るように指導されることになる。気道感染症症状を持つ対象は、呼吸器系ウイルスＰＣＲのために鼻咽頭スワブを採取されることになる。さらなる詳細は、研究操作マニュアルにおいて提供される。

研究の終わりの２４週目の訪問時に、対象は、完全な身体検査を受け、安全性研究所およびバイオマーカー評価のために採血され、繰り返し握力評価、６ＭＷＴを受け、６ＭＷＴの前および後に息切れアンケートの全項目に回答することになる。

２４週目の訪問時または後に、調査員は、対象の医療記録をレビューして、研究データベースに書き留められていない追加の感染症が出現したか否かを決定することになる。書き留められていなかった感染症についての情報は、適切な調査員感染症ワークシートに記録されることになる。

研究薬物に関連するとみなされ、追跡調査期間の終わりに解決も安定化もされていない、医学的に重要な検査所見の異常または医学的に重要なＡＥを発生している患者は、予定された治療後追跡調査期間を越えて、これらの事象が解決または安定化されるまで、追跡調査されることになる。研究の完了時にこれらの事象が解決されていない場合、「継続中」としてデータベースに書き留められるべきである。

中間解析（ＩＡ）：パート１で無作為化された少なくとも１２０人の対象が１６週目の訪問を完了すると、ＩＡが実施されることになる。非盲検データモニタリング委員会（ＤＭＣ）によりＩＡの結果をレビューし、研究のための勧告を作製することになる。中間解析で可能な決定は、
− 無益なためにＢＥＺ２３５単独療法投薬アームの研究を停止するか、またはパート２において１もしくは２つのＢＥＺ２３５治療アームを用いて続けるか、
− パート１中の気道感染症の率に基づき、研究をサイズ変更するか否か、
− パート１からの安全性データおよび気道感染症率データに基づき、治療の持続時間を変更するか否か、ならびに／あるいは
− 追加のＰＫ試料採取が必要とされるか否かおよび／またはＰＫ試料採取レジメンを簡略化することができるか否か
である。

パート２（パート１とは反対側の半球において行われる）：パート２では、スクリーニング訪問中に適格性基準を満たした３１０〜４３０人の間の対象が研究に登録することになる。これらの対象は、プラセボ、パート１からの０、１または２用量のＢＥＺ２３５、および５ｍｇまたは１０ｍｇのＢＥＺ２３５＋ＲＡＤ００１ ０．１ｍｇに無作為化されることになる。パート１におけるものと同一の手順を、パート２におけるスクリーニング、導入、治療および治療後追跡調査期間中に適用することとする。

図３−１ 研究デザイン：

研究デザインの根拠：研究は、効能、忍容性および安全性データを公平な方式で取得し、調査されている薬物の用量反応特徴を決定するための、標準的な無作為化、盲検化、プラセボ制御、並行群研究としてデザインされる。導入期間は、ベースライン心エコー図を取得するためならびに対象を６ＭＷＴおよび手の握力評価に慣れさせるために含まれる。パート１および２における１６週間の治療は、各半球において冬の寒さおよびインフルエンザ流行期間中にＲＴＩの臨床的に意味がある低減をもたらすために十分であるとみなされる。研究の最後の８週間は、対象が研究薬物治療を中止した後にＲＴＩの低減が持続するか否かについての情報を提供するであろう。研究薬物が定常レベルに到達した後のＰＫの特徴付けを可能にするために、ＰＫ試料は、すべての対象において、４、６および８週目の訪問時に取得されるであろう。

研究個体群：Ｎｏｖａｒｔｉｓによって行われた２つの以前の臨床試験（ＣＲＡＤ００２Ｘ２２０２およびＣＢＥＺ２３５Ｙ２２０１）からのデータは、低用量のＢＥＺ２３５および／またはＲＡＤ００１による６５歳以上の高齢者対象の６週間の治療が安全であり、ＲＴＩの罹患率を減少させたことを示唆している。単独またはＲＡＤ００１と組み合わせたＢＥＺ２３５のリスク／利益は、ＲＴＩ関連疾病率および死亡率のリスクが増大している高齢者対象において最も好都合であり得る。したがって、本研究では、本発明者らは、下記の条件の１つを有することによって定義される通りの、ＲＴＩ関連疾病率および死亡率のリスクが増大しているとみなされる高齢者対象を登録することとする：
− ８５歳以上
− 次のものを持つ６５歳以上：
− 喘息
− ＣＯＰＤゴールドクラスＩまたはＩＩ
○ 気管支拡張薬後ＦＥＶ_１／ＦＶＣ＜０．７０およびＦＥＶ_１≧５０％が予測される
− 慢性気管支炎
− Ｔ２ＤＭ
− ＣＨＦニューヨーク心臓協会機能分類Ｉ〜ＩＩ
○ 普通の活動中に症状なしまたは軽度の症状（息切れおよび／または狭心症）ならびにわずかな制限
− 現喫煙者
− これまでの１２か月の間にＲＴＩで１回または複数回の緊急治療室訪問または入院

さらなる包含基準：
女性は閉経後でなくてはならない。女性は、適切な臨床プロファイル（例えば、年齢に適している、血管運動症状歴）で１２か月の自然な（自発的な）無月経を有したか、または、少なくとも６週間前に、外科的両側卵巣摘出術（子宮摘出術の有無にかかわらず）、子宮全摘出術もしくは卵管結紮術を行ったならば、閉経後であり出産の可能性がないとみなされる。卵巣摘出術単独の事例において、女性の生殖状態が追跡調査ホルモンレベル評価によって確認されている場合のみ、その女性は、出産の可能性がないとみなされる。

出産の可能性があるパートナーを持つ性的に活動的な男性対象は、研究薬物使用の最中および研究薬物を停止した後１週間は、コンドームを進んで装着しなくてはならず、この期間中は子どもの父親となるべきではない。コンドームは、精液を介する薬物の送達を予防するために、精管切除した男性も使用する必要がある。

スクリーニングおよびベースライン時、バイタルサイン（収縮期および拡張期血圧、脈拍数ならびに呼吸速度）は、対象が少なくとも３分間にわたって休憩した後に、座位で評価されることになる。座位でのバイタルサインは、下記の範囲内であるべきである：
・ ３５．０〜３７．５℃の間の経口または鼓膜の体温
・ 収縮期血圧、９０〜１６０ｍｍＨｇ
・ 拡張期血圧、５０〜９５ｍｍＨｇ
・ 脈拍数、４０〜９５ｂｐｍ

バイタルサインがこれらの範囲外である場合、調査員は、最大２つの追加の読み取りを取得してよく、そのため、最大３つの連続評価が為される。少なくとも読み取りの最後のセットは、対象が適格となるために、上記で提供されている範囲内でなくてはならない。

対象は、少なくとも４０ｋｇの重量でなくてはならない。

対象は、調査員とうまくコミュニケーションを取ることができ、研究の要件を理解および順守することができなくてはならない。

研究の結果は、異なる方法を使用して定量化されてよい。例えば、結果は、感染症の総数を対象の総数で割ることによって計算される通り、特定の期間中の感染率を見ることによって定量化されてよい。代替として、研究の結果は、特定の期間中の１つまたは複数の感染症を有する対象のパーセンテージを見ることによって定量化されてよい。

プライマリーエンドポイント：研究のプライマリーエンドポイントは、１６週間の研究薬物治療中に１つまたは複数のＲＴＩを経験する対象のパーセンテージの減少である。なぜなら、ＲＴＩが高齢者において有意な疾病率および死亡率を引き起こすからである（Millett et al 2013）。

副次的エンドポイント：副次的エンドポイントとして、１つまたは複数のＲＴＩを２４週間（研究薬物治療中に１６週間、続いて、研究薬物治療をやめて８週間）にわたって経験する対象のパーセンテージを評価して、高齢者対象が、研究薬物中止後に気道感染症率の低減を有し続けるか否かを決定することとする。

高齢者におけるほとんどの気道感染症はウイルスによって引き起こされる（Jain et al 2015）ことから、研究所で確認されたウイルス性気道感染症の罹患率に対する単独またはＲＡＤ００１と組み合わせたＢＥＺ２３５の効果（鼻咽頭スワブの呼吸器系ウイルスＰＣＲによって決定される通り）は、対象が研究薬物を受けている１６週間の間に評価することとする。

追加の副次的エンドポイントとして、単独でまたはＲＡＤ００１と組み合わせて与えられたＢＥＺ２３５の薬物動態（ＰＫ）を審査することとする。

探究エンドポイント：探究エンドポイントとして、ＲＴＩの罹患率に対する単独またはＲＡＤ００１と組み合わせたＢＥＺ２３５の効果を、高齢者の具体的なサブセットにおいて探究して、効能がサブグループ間で変動するか否かを決定することとする。

ベースラインから１６または２４週目までの、すべての感染症の罹患率およびＵＴＩの罹患率に対する、プラセボと比較した、単独またはＲＡＤ００１と組み合わせたＢＥＺ２３５の効果も探究することとする。なぜなら、臨床試験ＣＢＥＺ２３５Ｙ２２０１において、１日にＢＥＺ２３５ １０ｍｇまたは１日にＢＥＺ２３５ １０ｍｇプラスＲＡＤ００１ ０．１ｍｇの組合せのいずれかで６週間にわたって治療した高齢者対象は、研究薬物投与後１年間にわたって、すべての感染症率の有意な減少およびＵＴＩ率の減少を有したからである。

追加の探究エンドポイントとして、上気道症状の持続時間および／または重症度に対する、プラセボと比較した、単独またはＲＡＤ００１と組み合わせたＢＥＺ２３５の効果を、ＷＵＲＳＳ−２１調査を使用して評価することとする。

ＣＢＥＺ２３５Ｙ２２０１の結果は、高齢者ボランティアが、インフルエンザワクチンを受ける２週間前に、ＲＡＤ００１と組み合わせた低用量ＢＥＺ２３５の６週間のコースを受けた場合に、インフルエンザワクチン接種への高齢者ボランティアの応答が増強されたことを示していた。したがって、探究エンドポイントとして、インフルエンザワクチン接種への応答に対する、プラセボと比較した、単独またはＲＡＤ００１と組み合わせたＢＥＺ２３５の効果を、研究中の対象の日常のヘルスケアの一部としてインフルエンザワクチンを受ける対象において評価することとする。

単独またはＲＡＤ００１と組み合わせたＢＥＺ２３５によるｍＴＯＲ阻害は、単に免疫機能を改善させ感染率を減少させることを越える抗老齢化効果を有し得る。本発明者らの以前の臨床試験において、１日にＢＥＺ２３５ １０ｍｇおよびＲＡＤ００１ ０．１ｍｇの組合せで６週間にわたって治療した対象のサブセットは、研究薬物使用の最中にエネルギーの増大を自発的に報告したが、プラセボで治療した対象はそうではなかった。加えて、ｍＴＯＲ阻害剤ラパマイシンで治療した老齢マウスは、プラセボ治療対照と比較して、身体活動および／または握力が増大したことが注記されている（Flynn et al 2013）。したがって、追加の探究エンドポイントとして、本発明者らは、６ＭＷＴによって評価される通り、単独またはＲＡＤ００１と組み合わせたＢＥＺ２３５が握力および／または耐久力を増大させるか否かを評価することとする。

ｍＴＯＲ阻害剤は、老齢マウスにおいて、心機能を改善することも報告されている（Flynn et al 2013）。したがって、追加の探究エンドポイントとして、本発明者らは、ベースラインと比べた１６週目における心エコー検査によって評価される通り、単独またはＲＡＤ００１と組み合わせたＢＥＺ２３５が、プラセボと比較して、心機能を改善するか否かを決定することとする。

最終探究エンドポイントとして、全血中における遺伝子発現に対するおよび血清プロテオミクスに対する単独またはＲＡＤ００１と組み合わせたＢＥＺ２３５の効果を評価して、単独もしくはＲＡＤ００１と組み合わせたＢＥＺ２３５が免疫機能を改善し得るおよび／または老齢化生物学に影響を与え得る機構を、さらに解明することとする。

用量／レジメンの根拠、投与ルートおよび治療の持続時間：Ｎｏｖａｒｔｉｓ臨床研究ＣＢＥＺ２３５Ｙ２２０１において、すべてのｍＴＯＲ阻害剤投薬レジメン（１日にＢＥＺ２３５ １０ｍｇ、１日にＲＡＤ００１ ０．５ｍｇまたは０．１ｍｇ、および１日にＢＥＺ２３５ １０ｍｇプラス１日にＲＡＤ００１ ０．１ｍｇ）は、忍容性良好であり、高齢者対象が研究薬物治療を受けた６週間の間に、気道感染症の罹患率を５０〜６０％の間だけ低減させた。加えて、１日にＢＥＺ２３５ １０ｍｇおよびＲＡＤ００１ ０．１ｍｇの組合せは、インフルエンザワクチン接種に対する応答を有意に改善させた。本研究では、本発明者らは、これらの知見を拡大し、気道感染症率が最高である場合の各半球における冬の寒さおよびインフルエンザ流行期間の間に、高齢者対象をより長い１６週間の持続時間にわたって治療した場合、単独またはＲＡＤ００１と組み合わせたＢＥＺ２３５が気道感染症の罹患率を減少させるか否かを決定することとする。本発明者らは、１日にＢＥＺ２３５ ５ｍｇ対１０ｍｇの安全性および効能を比較することにより、ＢＥＺ２３５についての最小の効果的な用量レベルも調査することとする。１日にＢＥＺ２３５ １０ｍｇを本研究では１用量として選択した。なぜなら、これが臨床研究ＣＢＥＺ２３５Ｙ２２０１において気道感染症および全感染症の両方の低減に関連していたからである。１日にＢＥＺ２３５ ５ｍｇは、モデリングおよびシミュレーションによって、Ｓ６Ｋリン酸化を１０％だけ阻害することが予測され、したがって、本研究では、治療量以下であってよく、最小限に効果的な用量を確立し得る。本発明者らは、１日にＢＥＺ２３５ １０ｍｇ超から２回のＢＥＺ２３５ １０ｍｇまでの用量を試験することとする（we will test doses of BEZ235 above 10 mg up to BEZ235 10 mg twice daily）。なぜなら、以前の臨床研究におけるＢＥＺ２３５のＰＫ変動性は、２５ｍｇ以上の用量において高かったからである。したがって、本明細書において企図されているある特定の投薬レジメンは、例えば、１日２回の１０ｍｇのＢＥＺ２３５の投与を含む。一部のそのような実施形態において、投薬レジメンは、例えば、単独で（すなわち、ＲＡＤ００１なし）またはＲＡＤ００１と組み合わせて、例えば０．１ｍｇのＲＡＤ００１の１日用量と組み合わせてのいずれかでの、１日２回の１０ｍｇのＢＥＺ２３５の投与を含む。一部の実施形態において、本明細書において企図されている投薬レジメンは、約０．０１５ｍｇから約０．１ｍｇまでの範囲の量のＲＡＤ００１を毎日投与することを含む。一部のそのような実施形態において、約０．０１５ｍｇから約０．１ｍｇまでの範囲の量のＲＡＤ００１を、ある量のＢＥＺ２３５と組み合わせて投与する。

参考文献

列挙される実施形態
第１の実施形態において、本発明は、（ａ）低用量のＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）低用量のＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを患者に投与するステップを含み、患者が、ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；またはそれらの組合せを投与されていない患者よりも、感染症による疾病をより少なく経験する、方法である。

第２の実施形態において、本発明は、患者の先天性免疫が、増強される、第１の実施形態に従う方法である。

第３の実施形態において、本発明は、抗原特異的免疫が、増強されない、第１または第２の実施形態に従う方法である。

第４の実施形態において、本発明は、少なくとも１つのインターフェロン誘導遺伝子（ＩＳＧ）が、上方調節される、第２の実施形態に従う方法である。

第５の実施形態において、本発明は、感染症が、尿路感染症；または歯もしくは歯茎の感染症である、第１から第４の実施形態のいずれか１つに従う方法である。

第６の実施形態において、本発明は、感染症が、気道感染症である、第１から第４の実施形態のいずれか１つに従う方法である。

第７の実施形態において、本発明は、感染症が、ウイルス感染症である、第１から第４の実施形態のいずれか１つに従う方法である。

第８の実施形態において、本発明は、患者が、高齢者である、第１から第７の実施形態のいずれか１つに従う方法である。

第９の実施形態において、本発明は、患者が、少なくとも６５歳である、第１から第８の実施形態のいずれか１つに従う方法である。

第１０の実施形態において、本発明は、患者が、少なくとも７５歳；または少なくとも８５歳である、第１から第９の実施形態のいずれか１つに従う方法である。

第１１の実施形態において、本発明は、低用量のＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩、低用量のＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩、またはそれらの組合せが、患者に、最大連続約６週間にわたって投与される、第１から第１０の実施形態のいずれか１つに従う方法である。

第１２の実施形態において、本発明は、患者が、ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩、ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩、またはそれらの組合せの投与後、約１日から約１年まで、感染症による疾病をより少なく経験し続ける、第１１の実施形態に従う方法である。

第１３の実施形態において、本発明は、患者が、ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩、ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩、またはそれらの組合せの投与後、少なくとも１か月および約１年までにわたって、感染症による疾病をより少なく経験し続ける、第１１の実施形態に従う方法である。

第１４の実施形態において、本発明は、患者が、ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩、ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩、またはそれらの組合せの投与後、少なくとも３か月および約１年までにわたって、感染症による疾病をより少なく経験し続ける、第１１の実施形態に従う方法である。

第１５の実施形態において、本発明は、患者が、ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩、ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩、またはそれらの組合せの投与後、少なくとも６か月間にわたって、感染症による疾病をより少なく経験し続ける、第１１の実施形態に従う方法である。

第１６の実施形態において、本発明は、患者が、低用量のＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩を単独療法として投与される、第１から第１５の実施形態のいずれか１つに従う方法である。

第１７の実施形態において、本発明は、患者が、低用量のＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩を単独療法として投与される、第１から第１５の実施形態のいずれか１つに従う方法である。

第１８の実施形態において、本発明は、患者が、低用量のＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩および低用量のＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩の両方を組合せ療法として投与される、第１から第１５の実施形態のいずれか１つに従う方法である。

第１９の実施形態において、本発明は、低用量のＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩を受けている患者の薬物動態ＡＵＣ変動性が、より高用量のＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩を受けている患者よりも低い、第１から第１６または第１８の実施形態のいずれか１つに従う方法である。

第２０の実施形態において、本発明は、ＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩が、中性形態である、第１から第１５、第１７または第１８の実施形態のいずれか１つに従う方法である。

第２１の実施形態において、本発明は、ＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩が、モノトシレート塩である、第１から第１６または第１８の実施形態のいずれか１つに従う方法である。

第２２の実施形態において、本発明は、０．０１〜０．２ｍｇのＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩の投与を含む、第１から第１５または第１７から第２１の実施形態のいずれか１つに従う方法である。

第２３の実施形態において、本発明は、１〜５０ｍｇのＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩の投与を含む、第１から第１６または第１８から第２２の実施形態のいずれか１つに従う方法である。

第２４の実施形態において、本発明は、対象が、免疫不全である、第１から第２３の実施形態のいずれか１つに従う方法である。

第２５の実施形態において、本発明は、対象が、免疫応答異常を有する、第１から第２４の実施形態のいずれか１つに従う方法である。

第２６の実施形態において、本発明は、対象が、免疫老化状態にある、第１から第２５の実施形態のいずれか１つに従う方法である。

第２７の実施形態において、本発明は、少なくとも１つのインターフェロン誘導遺伝子（ＩＳＧ）を上方調節する方法であって、（ａ）低用量のＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）低用量のＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを、患者に投与するステップを含む方法である。

第２８の実施形態において、本発明は、細胞外マトリックスリモデリングに関与する少なくとも１つのタンパク質を上方調節する方法であって、（ａ）低用量のＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）低用量のＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを、患者に投与するステップを含む方法である。

第２９の実施形態において、本発明は、細胞外マトリックスリモデリングに関与するタンパク質が、少なくとも約１週間；少なくとも約２週間；少なくとも約３週間；または少なくとも約６週間にわたる治療後に、有意に上方調節される、第２８の実施形態の方法である。

第３０の実施形態において、本発明は、異常な細胞外マトリックスリモデリングに関連する疾患または状態を治療する方法であって、（ａ）低用量のＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）低用量のＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを、患者に投与するステップを含む方法である。

第３１の実施形態において、本発明は、異常な細胞外マトリックスリモデリングに関連する疾患または状態が、心不全、駆出率が保たれた心不全、慢性腎不全、糸球体腎症（glomerunephropathy）、皮膚の老齢化、ＮＡＳＨ、肝繊維症／肝硬変、特発性肺線維症を含む肺線維症、老齢化に関連する腱機能不全／硬直、変形性関節症を含む関節炎、サルコペニア、骨髄線維症、骨髄異形成（myelodysplasia）、血液脳関門の老齢化に関連する機能不全、糖尿病性腎症、アテローム性動脈硬化、または創傷治癒から選択される、第３０の実施形態の方法である。

Claims (33)

1. （ａ）低用量のＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）低用量のＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを患者に投与するステップを含み、前記患者が、ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩、ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩、またはそれらの組合せを投与されていない患者よりも、感染症による疾病をより少なく経験する、方法。
2. 前記患者の先天性免疫が、増強される、請求項１に記載の方法。
3. 抗原特異的免疫が、増強されない、請求項１または２に記載の方法。
4. 少なくとも１つのインターフェロン誘導遺伝子（ＩＳＧ）が、上方調節される、請求項２に記載の方法。
5. 前記感染症が、尿路感染症である、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
6. 前記感染症が、気道感染症である、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
7. 前記感染症が、歯周感染症を含む口腔感染症である、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
8. 前記感染症が、ウイルス感染症である、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
9. 前記患者が、高齢者である、請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
10. 前記患者が、少なくとも６５歳である、請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
11. 前記患者が、少なくとも７５歳である、請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
12. 前記患者が、少なくとも８５歳である、請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
13. 前記低用量のＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩、前記低用量のＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩、またはそれらの組合せが、前記患者に、最大連続約６週間にわたって投与される、請求項１から１２のいずれか一項に記載の方法。
14. 前記患者が、前記ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩、前記ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩、またはそれらの組合せの投与後、約１日から約１年まで、感染症による疾病をより少なく経験し続ける、請求項１３に記載の方法。
15. 前記患者が、前記ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩、前記ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩、またはそれらの組合せの投与後、少なくとも１か月および約１年までにわたって、感染症による疾病をより少なく経験し続ける、請求項１３に記載の方法。
16. 前記患者が、前記ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩、前記ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩、またはそれらの組合せの投与後、少なくとも３か月および約１年までにわたって、感染症による疾病をより少なく経験し続ける、請求項１３に記載の方法。
17. 前記患者が、前記ＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩、前記ＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩、またはそれらの組合せの投与後、少なくとも６か月間にわたって、感染症による疾病をより少なく経験し続ける、請求項１３に記載の方法。
18. 前記患者が、前記低用量のＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩を単独療法として投与される、請求項１から１７のいずれか一項に記載の方法。
19. 前記患者が、前記低用量のＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩を単独療法として投与される、請求項１から１７のいずれか一項に記載の方法。
20. 前記患者が、前記低用量のＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩および前記低用量のＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩の両方を組合せ療法として投与される、請求項１から１７のいずれか一項に記載の方法。
21. 前記低用量のＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩を受けている患者の薬物動態ＡＵＣ変動性が、より高用量のＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩を受けている患者よりも低い、請求項１から１８または２０のいずれか一項に記載の方法。
22. ＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩が、中性形態である、請求項１から１７、１９または２０のいずれか一項に記載の方法。
23. ＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩が、モノトシレート塩である、請求項１から１８または２０のいずれか一項に記載の方法。
24. ０．０１〜０．２ｍｇのＲＡＤ００１または薬学的に許容されるその塩の投与を含む、請求項１から１７または１９から２３のいずれか一項に記載の方法。
25. １〜２０ｍｇのＢＥＺ２３５または薬学的に許容されるその塩の投与を含む、請求項１から１８または２０から２４のいずれか一項に記載の方法。
26. 前記対象が、免疫不全である、請求項１から２５のいずれか一項に記載の方法。
27. 前記対象が、免疫応答異常を有する、請求項１から２６のいずれか一項に記載の方法。
28. 前記対象が、免疫老化状態にある、請求項１から２７のいずれか一項に記載の方法。
29. 少なくとも１つのインターフェロン誘導遺伝子（ＩＳＧ）を上方調節する方法であって、（ａ）低用量のＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）低用量のＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを、患者に投与するステップを含む、方法。
30. 細胞外マトリックスリモデリングに関与する少なくとも１つのタンパク質を上方調節する方法であって、（ａ）低用量のＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）低用量のＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを、患者に投与するステップを含む、方法。
31. 細胞外マトリックスリモデリングに関与する前記タンパク質が、少なくとも約３週間にわたる治療後に、有意に上方調節される、請求項３０に記載の方法。
32. 異常な細胞外マトリックスリモデリングに関連する疾患または状態を治療する方法であって、（ａ）低用量のＲＡＤ００１もしくは薬学的に許容されるその塩；（ｂ）低用量のＢＥＺ２３５もしくは薬学的に許容されるその塩；または（ｃ）それらの組合せを、患者に投与するステップを含む、方法。
33. 異常な細胞外マトリックスリモデリングに関連する前記疾患または状態が、心不全、駆出率が保たれた心不全、慢性腎不全、糸球体腎症（glomerunephropathy）、皮膚の老齢化、ＮＡＳＨ、肝繊維症／肝硬変、特発性肺線維症を含む肺線維症、老齢化に関連する腱機能不全／硬直、変形性関節症を含む関節炎、サルコペニア、骨髄線維症、骨髄異形成（myelodysplasia）、血液脳関門の老齢化に関連する機能不全、糖尿病性腎症、アテローム性動脈硬化、または創傷治癒から選択される、請求項３２に記載の方法。