JP2020195399A5 - - Google Patents
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- カリウムチャネル3(Kv1.3)のEL1細胞外ループに特異的に結合する免疫グロブリンシングル可変ドメインであって、
該免疫グロブリンシングル可変ドメインは、パッチクランプアッセイ法で決定された場合に、T細胞からのカリウムイオンの流出を減少させるか又は完全に阻害すらすることにより、Kv1.3の活性をモデュレーションし、
該免疫グロブリンシングル可変ドメインは、4つのフレームワーク領域(それぞれFR1〜FR4)と、3つの相補性決定領域(それぞれCDR1〜CDR3)とから本質的になり、ここで、
i)CDR1が、
a)配列番号:182、又は
b)配列番号:182のアミノ酸配列に対して、3、2、もしくは1つのアミノ酸差を有するアミノ酸配列、ここで、
−1位において、Gが、LもしくはRに変更されており、
−2位において、Lが、F、P、もしくはIに変更されており、
−3位において、Lが、PもしくはFに変更されており、
−4位において、Fが、S、LもしくはIに変更されており、
−5位において、Sが、IもしくはRに変更されており、
−6位において、Rが、C、A、P、V、もしくはLに変更されており、
−7位において、Nが、H、P、I、M、Y、T、もしくはDに変更されており、
−8位において、Sが、T、R、もしくはIに変更されており、
−9位において、Aが、VもしくはTに変更されており、及び/又は
−10位において、Gが、S、R、もしくはVに変更されている、
からなる群より選択され、
及び
ii)CDR2が、
c)配列番号:269及び配列番号:541〜555、又は
d)配列番号:269のアミノ酸配列に対して、3、2、もしくは1つのアミノ酸差を有するアミノ酸配列、ここで、
−1位において、Rが、GもしくはCに変更されており、
−2位において、Iが、V、T、S、もしくはLに変更されており、
−3位において、Rが、GもしくはLに変更されており、
−4位において、Mが、S、R、A、E、F、G、H、K、L、P、Q、V、W、Y、I、もしくはTに変更されており、
−5位において、Gが、V、S、もしくはTに変更されており、
−7位において、Sが、G、C、D、もしくはEに変更されており、及び/又は
−8位において、Iが、T、M、もしくはRに変更されている、
からなる群より選択され、
及び
iii)CDR3が、
e)配列番号:397、又は
f)配列番号:397のアミノ酸配列に対して、3、2、もしくは1つのアミノ酸差を有するアミノ酸配列、ここで、
−1位において、Wが、Gに変更されており、
−3位において、Eが、T、K、G、AもしくはIに変更されており、
−4位において、Gが、EもしくはDに変更されており、
−5位において、Fが、A、L、V、Y、T、もしくはSに変更されており、
−6位において、Yが、FもしくはDに変更されており、
−7位において、Eが、GもしくはKに変更されており、
−8位において、Yが、SもしくはHに変更されており、及び/又は
−9位において、Wが、S、G、もしくはCに変更されている、
からなる群より選択される、
免疫グロブリンシングル可変ドメイン。 - 前記免疫グロブリンシングル可変ドメインが、
−CDR1が配列番号:181であり、CDR2が配列番号:268であり、CDR3が配列番号:393である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:269であり、CDR3が配列番号:394である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:181であり、CDR2が配列番号:268であり、CDR3が配列番号:395である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:181であり、CDR2が配列番号:268であり、CDR3が配列番号:396である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:181であり、CDR2が配列番号:270であり、CDR3が配列番号:393である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:183であり、CDR2が配列番号:268であり、CDR3が配列番号:393である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:184であり、CDR2が配列番号:268であり、CDR3が配列番号:393である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:269であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:185であり、CDR2が配列番号:271であり、CDR3が配列番号:398である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:186であり、CDR2が配列番号:269であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:269であり、CDR3が配列番号:399である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:187であり、CDR2が配列番号:269であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:188であり、CDR2が配列番号:272であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:189であり、CDR2が配列番号:273であり、CDR3が配列番号:400である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:190であり、CDR2が配列番号:269であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:274であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:191であり、CDR2が配列番号:269であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:192であり、CDR2が配列番号:272であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:269であり、CDR3が配列番号:401である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:193であり、CDR2が配列番号:269であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:275であり、CDR3が配列番号:402である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:194であり、CDR2が配列番号:276であり、CDR3が配列番号:394である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:277であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:183であり、CDR2が配列番号:269であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:269であり、CDR3が配列番号:403である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:195であり、CDR2が配列番号:278であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:269であり、CDR3が配列番号:404である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:269であり、CDR3が配列番号:405である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:196であり、CDR2が配列番号:269であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:197であり、CDR2が配列番号:269であり、CDR3が配列番号:406である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:198であり、CDR2が配列番号:269であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:199であり、CDR2が配列番号:279であり、CDR3が配列番号:407である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:280であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:200であり、CDR2が配列番号:269であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:201であり、CDR2が配列番号:281であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:269であり、CDR3が配列番号:408である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:181であり、CDR2が配列番号:582であり、CDR3が配列番号:393である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:202であり、CDR2が配列番号:269であり、CDR3が配列番号:409である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:203であり、CDR2が配列番号:269であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:204であり、CDR2が配列番号:269であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:199であり、CDR2が配列番号:283であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:205であり、CDR2が配列番号:284であり、CDR3が配列番号:410である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:181であり、CDR2が配列番号:285であり、CDR3が配列番号:411である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:181であり、CDR2が配列番号:286であり、CDR3が配列番号:412である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:185であり、CDR2が配列番号:271であり、CDR3が配列番号:398である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:181であり、CDR2が配列番号:268であり、CDR3が配列番号:393である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:206であり、CDR2が配列番号:287であり、CDR3が配列番号:413である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:181であり、CDR2が配列番号:288であり、CDR3が配列番号:411である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:207であり、CDR2が配列番号:268であり、CDR3が配列番号:414である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:208であり、CDR2が配列番号:268であり、CDR3が配列番号:393である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:209であり、CDR2が配列番号:268であり、CDR3が配列番号:393である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:210であり、CDR2が配列番号:289であり、CDR3が配列番号:415である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:542であり、CDR3が配列番号:394である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:543であり、CDR3が配列番号:394である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:545であり、CDR3が配列番号:394である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:546であり、CDR3が配列番号:394である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:547であり、CDR3が配列番号:394である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:548であり、CDR3が配列番号:394である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:550であり、CDR3が配列番号:394である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:289であり、CDR3が配列番号:394である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:551であり、CDR3が配列番号:394である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:552であり、CDR3が配列番号:394である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:553であり、CDR3が配列番号:394である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:554であり、CDR3が配列番号:394である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:555であり、CDR3が配列番号:394である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:554であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:549であり、CDR3が配列番号:394である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:541であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:541であり、CDR3が配列番号:394である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:544であり、CDR3が配列番号:394である、ポリペプチド;
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:544であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド;及び
−CDR1が配列番号:182であり、CDR2が配列番号:549であり、CDR3が配列番号:397である、ポリペプチド
の群より選択される、
請求項1記載の免疫グロブリンシングル可変ドメイン。 - 前記免疫グロブリンシングル可変ドメインが、ドメイン抗体、ドメイン抗体として使用するのに適した免疫グロブリン、シングルドメイン抗体、シングルドメイン抗体として使用するのに適した免疫グロブリン、dAb、dAbとして使用するのに適した免疫グロブリン、ナノボディ、VHH配列、ヒト化VHH配列、ラクダ化VH配列、又は親和性成熟により得られたVHH配列から本質的になり、前記免疫グロブリンシングル可変ドメインが、配列番号1〜64、495、498〜513及び523〜540を有する免疫グロブリン、並びに配列番号1〜64、495、498〜513及び523〜540と90%を超える配列同一性を有する免疫グロブリンからなる群より選択される、請求項1又は2記載の免疫グロブリンシングル可変ドメイン。
- 請求項1〜3のいずれか一項記載の1つ以上の免疫グロブリンシングル可変ドメインを含むか、又は、同免疫グロブリンシングル可変ドメインから本質的になる、ポリペプチド。
- 前記ポリペプチドが、配列番号:452〜473、496〜497、及び514〜522を有するポリペプチド、並びに配列番号:452〜473、496〜497、及び514〜522に対して、80%超の配列同一性を有するポリペプチドからなる群より選択される、請求項4記載のポリペプチド。
- 請求項1〜3のいずれか一項記載の免疫グロブリンシングル可変ドメイン又は請求項4もしくは5記載のポリペプチドを含むか、又は、これらから本質的になる、化合物又は構築物であって、1つ以上のペプチドリンカーを介して連結されていてもよい1つ以上の他の基、残基、部分、又は結合ユニットを更に含む、化合物又は構築物。
- 前記1つ以上の他の基、残基、部分、又は結合ユニットが、対応する請求項1〜3のいずれか一項記載の免疫グロブリンシングル可変ドメイン又は請求項4もしくは5記載のポリペプチドと比較して、延長した半減期を有するポリペプチドを提供する、請求項6記載の化合物又は構築物。
- 延長した半減期を有する免疫グロブリンシングル可変ドメイン又はポリペプチドを提供する前記1つ以上の他の基、残基、部分、又は結合ユニットが、ポリエチレングリコール分子、血清タンパク質もしくはそのフラグメント、血清タンパク質に結合することができる結合ユニット、Fc部分、及び、血清タンパク質に結合することができる小型タンパク質又はペプチドからなる群より選択される、請求項7記載の化合物又は構築物。
- 前記化合物又は構築物が、配列番号:452〜473、496〜497、及び514〜522を有する化合物もしくは構築物、及び、配列番号:452〜473、496〜497、及び514〜522に対して、80%超の配列同一性を有する化合物もしくは構築物からなる群より選択される、請求項8記載の化合物又は構築物。
- 発現ベクターに含まれていてもよい、請求項1〜3のいずれか一項記載の免疫グロブリンシングル可変ドメイン、請求項4もしくは5記載のポリペプチド、又は請求項6〜9のいずれか一項記載の化合物もしくは構築物をコードする、核酸。
- 請求項10記載の核酸を含む、ホスト又はホスト細胞。
- 請求項1〜3のいずれか一項記載の免疫グロブリンシングル可変ドメイン、請求項4もしくは5記載のポリペプチド、請求項6〜9のいずれか一項記載の化合物もしくは構築物、又は請求項10記載の核酸から選択される少なくとも1つを含む、組成物。
- 少なくとも1つの薬学的に許容し得る単体、希釈剤もしくは賦形剤及び/又は補助剤を更に含み、1つ以上の更なる薬学的に活性なポリペプチド及び/又は化合物を含んでいてもよい、医薬組成物である、請求項12記載の組成物。
- 医薬として使用するための、請求項12又は13記載の組成物、請求項1〜3のいずれか一項記載の免疫グロブリンシングル可変ドメイン、請求項4又は5記載のポリペプチド、請求項6〜9のいずれか一項記載の化合物又は構築物。
- T細胞の活性化及び/又は増殖を阻害する並びに/或いはブロックするのに使用するための、請求項14記載の組成物、免疫グロブリンシングル可変ドメイン、ポリペプチド、又は化合物もしくは構築物。
- Kv1.3に関連する疾患、障害もしくは症状の治療又は予防に使用するための、請求項14もしくは15記載の組成物、請求項1〜3のいずれか一項記載の免疫グロブリンシングル可変ドメイン、請求項4もしくは5記載のポリペプチド、又は請求項6〜9のいずれか一項記載の化合物もしくは構築物。
- a)適切なホスト細胞又はホスト生物中において、又は、別の適切な発現系において、請求項10記載の核酸配列を発現させる工程と、必要に応じてその後に、
b)請求項1〜3のいずれか一項記載の免疫グロブリンシングル可変ドメイン又は請求項4もしくは5記載のポリペプチドを単離及び/又は精製する工程と
を少なくとも含む、
請求項1〜3のいずれか一項記載の免疫グロブリンシングル可変ドメイン又は請求項4もしくは5記載のポリペプチドを製造するための方法。
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