JP2020033281A - 肥満抑制剤 - Google Patents

Abstract

【課題】新規な肥満抑制剤を提供する。【解決手段】フロレト酸を有効成分として含有する、肥満抑制剤。【選択図】なし

Description

本発明は、肥満抑制剤に関する。

肥満、特に内臓脂肪の蓄積による肥満は、メタボリックシンドロームを引き起こす原因として世界的な健康問題となっている。肥満のメカニズムを組織的にみると、脂肪細胞が大量の脂肪を蓄積し肥大化した状態、さらに肥大化した脂肪細胞の数が大幅に増殖した状態を指す。

肥満を抑制するためには、適度な運動、摂取カロリーの制限が有効であるが、近年ではより効率よく肥満を抑制するために、肥満抑制剤の開発が進められている。特許文献１には、キーウィ抽出物が肥満抑制に有効であることが開示されている。

特表２０１０−５０３６０９号公報

本発明は、新規な肥満抑制剤を提供することを目的とする。

本発明は、一態様として、フロレト酸を有効成分として含有する、肥満抑制剤を提供する。

本発明者らは、ｉｎ ｖｉｔｒｏ試験によって、フロレト酸が肥満を抑制する作用を有することを見出した。すなわち、本発明の肥満抑制剤によれば、肥満を効果的に抑制することができる。

本発明の肥満抑制剤は、少なくとも脂肪蓄積抑制作用に基づくものであってよい。

本発明の肥満抑制剤は、少なくとも脂肪細胞への脂肪の蓄積を抑制する作用を有する。過度な脂肪の蓄積が抑制されることは、肥満を防止する有効な手段になり得るため、本発明の肥満抑制剤により、肥満が抑制される。

本発明は、他の態様として、フロレト酸を有効成分として含有する脂肪蓄積抑制剤を提供するということもできる。

本発明によれば、新規な肥満抑制剤を提供することができる。

前駆細胞（未分化）、比較例１、及び実施例１〜３の脂肪細胞において、蓄積した脂肪滴を染色した結果を示す顕微鏡写真である。 比較例１、及び実施例１〜３の脂肪蓄積率を示すグラフである。

以下、本発明の実施形態について説明する。ただし、本発明は以下の実施形態に限定されるものではない。

本明細書における肥満抑制剤は、肥満を抑制する作用を備える組成物である。肥満を抑制する作用とは、例えば、脂肪細胞における脂肪の蓄積を抑制する作用（脂肪蓄積抑制作用）、脂肪細胞に蓄積した脂肪の分解を促進する作用（脂肪分解促進作用）、又は脂肪細胞の増殖を抑制する作用（脂肪細胞増殖抑制作用）等であってよい。すなわち、本明細書における肥満抑制剤は、脂肪蓄積抑制剤、脂肪分解促進剤、又は脂肪細胞増殖抑制剤等であってよい。

一実施形態に係る肥満抑制剤は、フロレト酸を有効成分として含有する。

フロレト酸は芳香族ヒドロキシ酸の一種であり、３−（４−ヒドロキシフェニル）プロピオン酸とも称される化合物である。フロレト酸は、ｐ−クマル酸の２−プロペン酸側鎖の水素化、又はフロレチンヒドロラーゼによるフロレチンの加水分解によって生成されてよい。フロレト酸は、市販されているものであってもよく、微生物によってｐ−クマル酸が還元されたものであってもよい。ｐ−クマル酸からフロレト酸を得る場合、原料となるｐ−クマル酸は、市販されているもの、又はリグニン分解生成物から分離したものであってよい。このとき、リグニン分解物はイネ科植物由来のものであってよく、サトウキビ又はバガス由来のものであってもよい。

本実施形態に係る肥満抑制剤は、有効成分であるフロレト酸のみからなってもよく、食品、医薬部外品又は医薬品に使用可能な素材を更に配合してもよい。食品、医薬部外品又は医薬品に使用可能な素材としては、特に制限されるものではないが、例えば、アミノ酸、タンパク質、炭水化物、油脂、甘味料、ミネラル、ビタミン、香料、賦形剤、結合剤、滑沢剤、崩壊剤、乳化剤、界面活性剤、基剤、溶解補助剤、懸濁化剤等が挙げられる。

タンパク質としては、例えば、ミルクカゼイン、ホエイ、大豆タンパク、小麦タンパク、卵白等が挙げられる。炭水化物としては、例えば、コーンスターチ、セルロース、α化デンプン、小麦デンプン、米デンプン、馬鈴薯デンプン等が挙げられる。油脂としては、例えば、サラダ油、コーン油、大豆油、ベニバナ油、オリーブ油、パーム油等が挙げられる。甘味料としては、例えば、ブドウ糖、ショ糖、果糖、ブドウ糖果糖液糖、果糖ブドウ糖液糖等の糖類、キシリトール、エリスリトール、マルチトール等の糖アルコール、スクラロース、アスパルテーム、サッカリン、アセスルファムＫ等の人工甘味料、ステビア甘味料などが挙げられる。ミネラルとしては、例えば、カルシウム、カリウム、リン、ナトリウム、マンガン、鉄、亜鉛、マグネシウム、及びこれらの塩類等が挙げられる。ビタミンとしては、例えば、ビタミンＥ、ビタミンＣ、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＢ類、ビオチン、ナイアシン等が挙げられる。賦形剤としては、例えば、デキストリン、デンプン、乳糖、結晶セルロース等が挙げられる。結合剤としては、例えば、ポリビニルアルコール、ゼラチン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク等が挙げられる。崩壊剤としては、例えば、結晶セルロース、寒天、ゼラチン、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、デキストリン等が挙げられる。乳化剤又は界面活性剤としては、例えば、ショ糖脂肪酸エステル、クエン酸、乳酸、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、レシチン等が挙げられる。基剤としては、例えば、セトステアリルアルコール、ラノリン、ポリエチレングリコール等が挙げられる。溶解補助剤としては、例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム等が挙げられる。懸濁化剤としては、例えば、モノステアリン酸グリセリン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム等が挙げられる。これらは１種単独で、又は２種以上を組み合わせて使用されてもよい。

肥満抑制剤が他の素材を配合する場合、有効成分であるフロレト酸の含有量は、後述する肥満抑制剤の形態、使用目的等に応じて適宜設定すればよいが、脂肪細胞への脂肪の蓄積をより抑制しやすくする観点から、肥満抑制剤全量を基準として、好ましくは５０μｇ／ｇ以上、より好ましくは１００μｇ／ｇ以上、更に好ましくは１５０μｇ／ｇ以上であり、また、好ましくは１０ｍｇ／ｇ以下、より好ましくは７.５ｍｇ／ｇ以下、更に好ましくは５ｍｇ／ｇ以下である。

肥満抑制剤は、固体（粉末、顆粒等）、液体（溶液、懸濁液等）、ペースト等のいずれの形状であってもよく、散剤、丸剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、トローチ剤、液剤、懸濁剤等のいずれの剤形であってもよい。

肥満のメカニズムの一態様は、脂肪細胞が脂肪合成を行って脂肪が蓄積され、肥大化することである。本実施形態の肥満抑制剤は、特に、脂肪細胞における脂肪の蓄積を抑制する作用を有している。そのため、本実施形態の肥満抑制剤を摂取することにより、脂肪細胞への脂肪の蓄積が抑制され、結果として肥満が抑制される。この肥満抑制剤によれば、過度な運動や食事制限に頼ることなく肥満を効果的に抑制又は解消させることができるため、有用である。

肥満抑制剤が脂肪蓄積抑制作用を有しているか否かは、例えば、脂肪前駆細胞から脂肪細胞に分化誘導される際に蓄積した脂肪滴を親油性色素により染色して顕微鏡観察し、脂肪抑制剤を添加しなかった検体に比べて脂肪抑制剤を添加した検体の脂肪滴が減少しているか否かを観察することにより、確認することができる。また、肥満抑制剤が脂肪蓄積抑制作用を有しているか否かは、脂肪滴を染色した親油性色素を抽出して吸光度を測定し、脂肪抑制剤の添加に伴う吸光度の変化から脂肪蓄積の程度を算出することによっても確認することができる。

肥満抑制剤は、食品、医薬部外品又は医薬品として用いることができる。食品は、例えば、健康食品、特定保健用食品、機能性食品、栄養機能食品、サプリメント等の形態で提供されてもよい。

肥満抑制剤は、静脈投与等の非経口投与がされてよく、経口投与がされてもよい。肥満抑制剤は、経口投与されることが好ましい。

肥満抑制剤が、非経口投与される場合、投与量としては、例えば、フロレト酸が１回当たり２５μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのが好ましく、５０μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのがより好ましく、７５μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのが更に好ましい。また、フロレト酸が１日当たり７５μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのが好ましく、１５０μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのがより好ましく、２２０μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのが更に好ましい。また、フロレト酸が、１回当たり２０００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのが好ましく、１５００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのがより好ましく、１０００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのが更に好ましい。また、フロレト酸が１日当たり４０００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのが好ましく、３０００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのがより好ましく、２０００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのが更に好ましい。この範囲であれば、十分な血中濃度を達成することができ、肥満を抑制する作用をよりよく発現することができる。

肥満抑制剤が、経口投与される場合、投与量としては、フロレト酸が１回当たり３０μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのが好ましく、６０μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのがより好ましく、９０μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのが更に好ましい。また、フロレト酸が１日当たり６０μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのが好ましく、１２０μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのがより好ましく、１８０μｇ／ｋｇ（体重）以上となるように投与されるのが更に好ましい。また、フロレト酸が１回当たり１０００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのが好ましく、８００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのがより好ましく、６００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのが更に好ましい。また、フロレト酸が１日当たり３０００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのが好ましく、２０００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのがより好ましく、１０００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下となるように投与されるのが更に好ましい。この範囲であれば、十分な血中濃度を達成することができ、肥満を抑制する作用をよりよく発現することができる。

本実施形態の肥満抑制剤は上述した作用を有するため、肥満と診断された患者用として、また、肥満を未然に防ぐことを望む標準体重者用として用いることができる。

以下、実施例により本発明を説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。

［試験液の調製］
フロレト酸をエタノールに溶解させて、５０ｍｇ／ｍＬの試験液原液を調製した。この試験液原液をＤＭＥＭ培地で希釈し、検体濃度１０００μｇ／ｍＬ、５００μｇ／ｍＬ及び２５０μｇ／ｍＬの試験液を調製した。

［３Ｔ３−Ｌ１細胞脂肪蓄積抑制試験］
（細胞の培養）
マウス脂肪前駆細胞である３Ｔ３−Ｌ１細胞（国立研究開発法人 医薬基盤・健康・栄養研究所）を２４ウェルプレートに播種し、新生仔牛血清（１０ｖｏｌ％、培地全量基準）及びペニシリン−ストレプトマイシン溶液（１ｖｏｌ％、培地全量基準）を含有するＤＭＥＭ培地で４日間培養した。培養後、牛胎児血清（１０ｖｏｌ％、培地全量基準）及びペニシリン−ストレプトマイシン溶液（１ｖｏｌ％、培地全量基準）を含有するＤＭＥＭ培地に交換し、Ａｄｉｐｏｇｅｎｅｓｉｓ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔ（ケイマンケミカル社）を用いて、３Ｔ３−Ｌ１細胞を脂肪細胞へと分化させた。この際、調製した１０００μｇ／ｍＬ、５００μｇ／ｍＬ及び２５０μｇ／ｍＬの試験液を、それぞれ濃度が１／２になるように培地に添加した。すなわち、試験液の終濃度を、５００μｇ／ｍＬ（実施例１）、２５０μｇ／ｍＬ（実施例２）、１２５μｇ／ｍＬ（実施例３）とした。３日間培養後、新たに用意した培地（試験液を添加した培地）に交換した。また、Ａｄｉｐｏｇｅｎｅｓｉｓ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔにより脂肪細胞への分化誘導を行わないものを前駆細胞（未分化）、試験液を添加せずに同様の試験を行ったものを未処置対照（比較例１）とした。

（細胞の染色）
培養後、培養上清を除去し、Ａｄｉｐｏｇｅｎｅｓｉｓ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔの手順に従って細胞を固定した後、脂肪滴を染色するための親油性色素であるオイルレッドＯ溶液により細胞を染色した。

［脂肪滴の観察］
倒立型位相差顕微鏡を用いて、脂肪細胞に蓄積した脂肪滴を染色した結果を観察した。各サンプルの観察結果を図１に示す。図１において、（ａ）が前駆細胞（未分化）、（ｂ）が比較例１、（ｃ）が実施例１、（ｄ）が実施例２、（ｅ）が実施例３の観察結果である。その結果、比較例１の脂肪細胞では、オイルレッドＯで染色された脂肪滴の蓄積が多量に観察できたが、実施例１〜３の脂肪細胞では、比較例１の脂肪細胞と比較して、蓄積している脂肪滴が少なかった。

［脂肪蓄積率の測定］
脂肪滴を観察後、実施例１〜３、比較例１のサンプルに対して、Ａｄｉｐｏｇｅｎｅｓｉｓ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔに含まれる色素抽出液を添加し、脂肪滴に取り込まれたオイルレッドＯを抽出した。マイクロプレートリーダー（ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ Ｍ２ｅ、モレキュラーデバイス社）を用いて、抽出したオイルレッドＯの吸光度を５２０ｎｍにて測定した。

各サンプルの吸光度から、次式により脂肪蓄積率を算出した。
脂肪蓄積率（％）＝｛（Ｓａ−ＢＬ_Ａｖｒ）／（ＣＮ−ＢＬ_Ａｖｒ）_Ａｖｒ｝×１００
Ｓａ：各サンプルの吸光度
ＢＬ_Ａｖｒ：前駆細胞（未分化）の吸光度の平均値（ｎ＝３）
ＣＮ：比較例１（未処置対照）の吸光度
（ＣＮ−ＢＬ_Ａｖｒ）_Ａｖｒ：ＣＮよりＢＬ_Ａｖｒを差し引いた値の平均値（ｎ＝３）

脂肪蓄積率を算出した結果を図２に示す。脂肪蓄積率は、比較例１が１００±６．４％であったのに対して、実施例１が３１±２．７％、実施例２が４５±１１．６％、実施例３が５８±４．９％であった。

Claims (3)

1. フロレト酸を有効成分として含有する、肥満抑制剤。
2. 脂肪蓄積抑制作用に基づくものである、請求項１に記載の肥満抑制剤。
3. フロレト酸を有効成分として含有する、脂肪蓄積抑制剤。