JP2019533472A5

JP2019533472A5 -

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Publication number: JP2019533472A5
Application number: JP2019524363A
Authority: JP
Filing date: 2017-11-13
Publication date: 2020-12-24

Description

本開示は、オリゴヌクレオチド及びその医薬組成物を対象とする。オリゴヌクレオチドは、配列番号８３のＨＢＶｃｃｃＤＮＡゲノム配列内の複数のヌクレオチドに相補的である配列を含む。実施形態では、オリゴヌクレオチドは、ＨＢＶｃｃｃＤＮＡゲノム内の少なくとも１２ヌクレオチドに相補的である配列を含む。実施形態では、オリゴヌクレオチドは、ＨＢＶｃｃｃＤＮＡゲノムのエンハンサーＩ領域内で少なくとも１２ヌクレオチドに相補的である。実施形態では、オリゴヌクレオチドは、ＨＢＶｃｃｃＤＮＡゲノムのヌクレオチド位置９６７〜ヌクレオチド位置１３２２に対応する領域に存在する、少なくとも１２ヌクレオチドに相補的である配列を含む。実施形態では、オリゴヌクレオチドの配列は、配列番号１〜６５のうちのいずれか１つである。

一態様では、本開示は、ＨＢＶｃｃｃＤＮＡゲノムのエンハンサーＩ付近又はその中の複数のヌクレオチドに相補的である配列を含むオリゴヌクレオチドを提供し、ここでエンハンサーＩは、配列番号８３のＨＢＶｃｃｃＤＮＡゲノム配列のヌクレオチド位置９００〜ヌクレオチド位置１３１０に対応する。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドは、ＨＢＶｃｃｃＤＮＡゲノムのエンハンサーＩ領域内で少なくとも１５ヌクレオチドに相補的である。ある実施形態では、オリゴヌクレオチドは、ＨＢＶｃｃｃＤＮＡゲノムのエンハンサーＩ領域内で少なくとも１９ヌクレオチドに相補的である。

別の態様では、本開示は、ＨＢＶｃｃｃＤＮＡゲノムのヌクレオチド位置９６０〜ヌクレオチド位置１３３０に対応するゲノム領域に存在する少なくとも１５ヌクレオチドに相補的である配列を含むオリゴヌクレオチドを提供し、ここでＨＢＶｃｃｃＤＮＡゲノム配列は、配列番号８３である。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドは、ＨＢＶｃｃｃＤＮＡゲノムのヌクレオチド位置９６０〜ヌクレオチド位置１３３０に対応するゲノム領域に存在する、少なくとも１９ヌクレオチドに相補的である配列を含む。追加的に又は代替的に、いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドの配列は、配列番号１〜８２からなる群から選択される。追加的に又は代替的に、上記実施形態のうちのいずれかにおいて、オリゴヌクレオチドは、第２のヌクレオチドへのＰＳ結合を有する少なくとも１つの第１のヌクレオチドを含み、当該第１のヌクレオチドは、Ｆ及びＯ−アルキルからなる群から選択される置換で２’位において修飾され、当該Ｏ−アルキルは、任意にアルコキシで置換される。追加的に又は代替的に、上記の実施形態のうちのいずれかにおいて、オリゴヌクレオチドの各ヌクレオチドは、ＰＳ結合によってオリゴヌクレオチドの他のヌクレオチドに結合され、Ｏ−Ｍｅで２’位において修飾される。

別の態様では、本開示は、ＨＢＶの治療に使用するためのオリゴヌクレオチドを提供し、ここでオリゴヌクレオチドは、ＨＢＶｃｃｃＤＮＡゲノムのエンハンサーＩ付近又はその中の複数のヌクレオチドに相補的である配列を含み、エンハンサーＩは、配列番号８３のＨＢＶｃｃｃＤＮＡゲノムのヌクレオチド位置９００〜ヌクレオチド位置１３１０に対応する。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドは、ＨＢＶｃｃｃＤＮＡゲノムのヌクレオチド位置９６０〜ヌクレオチド位置１３３０に対応するゲノム領域に存在する、少なくとも１５ヌクレオチドに相補的である配列を含む。ある特定の実施形態では、オリゴヌクレオチドの配列は、配列番号１〜８２からなる群から選択される。

ＨＢＶゲノムの物理的マップを示す。ＨＢＶゲノムは、長さがおよそ３２００ヌクレオチドであり、エンハンサーＩ領域のヌクレオチド配列は、位置９００で始まり、位置１３１０で終わる。様々な濃度の配列番号７１で治療されたＨＢＶ感染したＰＨＨのサザンブロット結果を示す。様々な濃度の配列番号７１で治療されたＨＢＶ感染したＰＨＨのｑＰＣＲ結果を示す。様々な濃度の配列番号７１で治療されたＨＢＶ感染したＰＨＨのｃｃｃＤＮＡレベルの低減率％を示す。様々な濃度の配列番号７５、配列番号７２及び配列番号７０で治療されたＨＢＶ感染したＰＨＨのサザンブロット結果を示す。図２Ａ〜図２Ｄにおいて、ＰＨＨを０日目にＨＢＶに感染させ、４日目に示されたｃｃｃＤＮＡ標的化オリゴヌクレオチドで治療した。１１日目にＨｉｒｔＤＮＡ抽出法を使用して、ＰＨＨからＨＢＶｃｃｃＤＮＡを抽出した。投与後２４時間、７２時間、又は１６８時間のマウスにおける、配列番号７１及び配列番号８０（配列番号７１は３’ＧａｌＮＡｃを有する）のインビボ肝臓濃度を示す。マウスにおける配列番号７１及び配列番号８０の肝臓Ｃｍａｘ及び肝臓半減期を示す。図３Ａ〜図３Ｂについて、１０ｍｇ／ｋｇの示されたオリゴヌクレオチドを、Ｃ５７Ｂｌ／６雌マウス（ｎ＝３）に皮下送達した。配列番号７１及び配列番号７２で治療されたＨＢＶ感染したＰＨＨが、ＩＦＮ活性化遺伝子発現の増加を呈したことを示す。配列番号７１、配列番号７２、ＰＢＳ（陰性対照）及びレシキモド（Ｒ８４８）（陽性対照）と接触させたＰＢＭＣ（ＨＢＶ陰性ドナー由来）において観察されたサイトカイン誘導のレベルを示す。コンセンサスＨＢＶゲノム配列（配列番号８３）を示す。コンセンサスＨＢＶゲノム配列（配列番号８３）を示す。

Claims

配列番号８３のＨＢＶｃｃｃＤＮＡゲノム配列内の複数のヌクレオチドに相補的である配列を含む、オリゴヌクレオチド。
前記オリゴヌクレオチドが、前記ＨＢＶｃｃｃＤＮＡゲノムのエンハンサーＩ領域内の少なくとも１２ヌクレオチドに相補的である、請求項１に記載のオリゴヌクレオチド。
ＨＢＶｃｃｃＤＮＡゲノムのヌクレオチド位置９６７〜ヌクレオチド位置１３２２に対応するゲノム領域に存在する少なくとも１２ヌクレオチドに相補的である配列を含む、オリゴヌクレオチド。
前記オリゴヌクレオチドの前記配列が、配列番号１〜６５からなる群から選択される、請求項３に記載のオリゴヌクレオチド。
前記オリゴヌクレオチドが、第２のヌクレオチドに対するホスホロチオエート（ＰＳ）結合を有する少なくとも１つの第１のヌクレオチドを含有し、前記第１のヌクレオチドが、Ｆ及びＯ−アルキルからなる群から選択される置換で２’位において修飾され、前記Ｏ−アルキルが、任意にアルコキシで置換されている、請求項１〜４のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
シトシン核酸塩基を有する前記オリゴヌクレオチドの各ヌクレオチドが、２’−Ｏ−Ｍｅ、５−メチルシトシン（５ｍｍＣ）であるように修飾され、各他のヌクレオチドが、２’位においてＯ−Ｍｅ修飾（ｍＡ、ｍＧ及びｍＵ）を含むように修飾され、各ヌクレオチドが、ヌクレオチド間にホスホロチオエート（ＰＳ）結合を含有する、請求項５に記載のオリゴヌクレオチド。
前記オリゴヌクレオチドの前記配列が、配列番号６６〜７２及び７４〜８２からなる群から選択される、請求項６に記載のオリゴヌクレオチド。
前記オリゴヌクレオチドが、第２のヌクレオチドに対するチオホスホロアミダート（ＮＰＳ）結合を有する少なくとも１つの第１のヌクレオチドを含有し、前記第１のヌクレオチドが、Ｆ及びＯ−アルキルからなる群から選択される置換で２’位において修飾され、前記Ｏ−アルキルが、任意にアルコキシで置換されている、請求項１〜４のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
シトシン核酸塩基を有する前記オリゴヌクレオチドの各ヌクレオチドが、２’−Ｏ−Ｍｅ、５−メチルシトシン（５ｍｍＣ）を含むように修飾され、各他のヌクレオチドが、２’位においてＯ−Ｍｅ修飾（ｍＡ、ｍＧ及びｍＵ）を含むように修飾され、各ヌクレオチドが、ヌクレオチド間にチオホスホロアミダート（ＮＰＳ）結合を含有する、請求項８に記載のオリゴヌクレオチド。
前記オリゴヌクレオチドの前記配列が、配列番号７３である、請求項９に記載のオリゴヌクレオチド。
前記オリゴヌクレオチドに共役された少なくとも１つの標的化部分を更に含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載のオリゴヌクレオチド。
前記オリゴヌクレオチドに共役された前記標的化部分が、ＧａｌＮＡｃ、パルミトイル及びトコフェロール誘導体からなる群から選択される、請求項１１に記載のオリゴヌクレオチド。
前記オリゴヌクレオチドの前記配列が、配列番号８０〜８２からなる群から選択される、請求項１２に記載のオリゴヌクレオチド。
請求項１〜１３のいずれか一項に記載の少なくとも１つのオリゴヌクレオチドを含む、医薬組成物。
ＨＢＶの治療をするための請求項１４に記載の医薬組成物。
前記オリゴヌクレオチドの配列が、配列番号１〜８２からなる群から選択される、請求項１５に記載の医薬組成物。
前記オリゴヌクレオチドの投与が、対象におけるＨＢｅＡｇレベル、ＨＢｓＡｇレベル又はＨＢＶＤＮＡレベルのうちの少なくとも１つの減少をもたらす、請求項１５に記載の医薬組成物。
前記オリゴヌクレオチドの投与が、対象におけるＨＢＶｃｃｃＤＮＡの低減をもたらす、請求項１５に記載の医薬組成物。
抗ウイルス剤、ヌクレオチド類似体、ヌクレオシド類似体、逆転写酵素阻害剤、免疫調節物質、治療ワクチン、ウイルス侵入阻害剤、カプシド阻害剤、ｓｉＲＮＡ、アンチセンスオリゴヌクレオチド、及びｃｃｃＤＮＡ阻害剤からなる群から選択される１種又は２種以上の追加の治療剤を更に含む、請求項１５に記載の医薬組成物。