JP2019525724A5

JP2019525724A5 -

Info

Publication number: JP2019525724A5
Application number: JP2018556993A
Authority: JP
Filing date: 2017-05-02
Publication date: 2020-06-18
Anticipated expiration: 2037-05-02

Description

異なる置換順列ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１（配列番号１５）；ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ２（配列番号１６）；、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｂ（配列番号１７）；ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｂＡ１１（配列番号１８）；ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ５（配列番号１９）；ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｂＡ１１Ｂ６Ｇ２（配列番号４６）；ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｂＡ１１Ｂ６Ｈ３（配列番号４７）；ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｃ（配列番号４８）；ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｄ（配列番号４９）；ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｅ（配列番号５０）；ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｆ（配列番号５１）；ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ３（配列番号５２）；ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ３ｂ（配列番号５３）；ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ３ｃ（配列番号５４）；ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ４（配列番号５５）；ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ４ｂ（配列番号５６）；およびｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ４ｃ（配列番号５７）；ならびにｈｕ３Ｄ６ＶＬｖ１、ｈｕ３Ｄ６ＶＬｖ２、ｈｕ３Ｄ６ＶＬｖ３、およびｈｕ３Ｄ６ＶＬｖ４（それぞれ、配列番号２０〜２３）（表３および４）を含む１７個のヒト化重鎖可変領域バリアントおよび４個のヒト化軽鎖可変領域バリアントを構築した。選択ヒトフレームワークに基づく逆突然変異およびその他の変異を有する、代表的ヒト化ＶκおよびＶｈの設計をそれぞれ、表３および４に示す。表３および４の灰色網掛け領域は、カバット／コチアの組み合わせにより定義されるＣＤＲを示している。配列番号：１５〜１９、配列番号：２０〜２３、配列番号４６〜５７は、表５に示すように、逆突然変異およびその他の変異を含む。ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ２、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｂ、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｂＡ１１、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ５、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｂＡ１１Ｂ６Ｇ２、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｂＡ１１Ｂ６Ｈ３、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｃ、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｄ、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｅ、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｆ、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ３、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ３ｂ、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ３ｃ、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ４、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ４ｂ、およびｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ４ｃ中の位置のアミノ酸は表６に示している。ｈｕ３Ｄ６ＶＬｖ１、ｈｕ３Ｄ６ＶＬｖ２、ｈｕ３Ｄ６ＶＬｖ３、およびｈｕ３Ｄ６ＶＬｖ４中の位置のアミノ酸は、表７に示している。ヒト化ＶＨ鎖ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ２、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｂ、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｂＡ１１、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ５、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｂＡ１１Ｂ６Ｇ２、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｂＡ１１Ｂ６Ｈ３、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｃ、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｄ、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｅ、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ１ｆ、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ３、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ３ｂ、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ３ｃ、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ４、ｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ４ｂ、およびｈｕ３Ｄ６ＶＨｖ４ｃ（それぞれ、配列番号１５〜１９、４６〜５７）のパーセンテージヒト化度およびヒト化ＶＬ鎖ｈｕ３Ｄ６ＶＬｖ１、ｈｕ３Ｄ６ＶＬｖ２、ｈｕ３Ｄ６ＶＬｖ３、およびｈｕ３Ｄ６ＶＬｖ４（それぞれ、配列番号２０〜２３）のパーセンテージヒト化度は表８に示している。

Claims

ヒトタウへの結合に関して抗体３Ｄ６と競合する、単離モノクローナル抗体。
ヒトタウ上の、３Ｄ６と同じエピトープに結合する、請求項１に記載の抗体。
配列番号１１の３つの軽鎖ＣＤＲおよび配列番号７の３つの重鎖ＣＤＲを含む、請求項１に記載の抗体。
キメラ、ベニア、もしくはそれらのヒト化型である、請求項１に記載の抗体。
前記３つの重鎖ＣＤＲが、配列番号８、９、および１０であり、前記３つの軽鎖ＣＤＲが、配列番号１２、１３、および１４であるか、
前記３つの重鎖ＣＤＲが、配列番号３２、配列番号９、および配列番号１０であり、前記３つの軽鎖ＣＤＲが、配列番号１２〜１４であるか、
前記３つの重鎖ＣＤＲが、配列番号３３、配列番号３４、および配列番号１０であり、前記３つの軽鎖ＣＤＲが、配列番号１２〜１４であるか、または、
前記３つの重鎖ＣＤＲが、配列番号８、配列番号３５、および配列番号１０であり、前記３つの軽鎖ＣＤＲが、配列番号１２〜１４であるか、または、
前記３つの重鎖ＣＤＲが、配列番号３９〜４１であり、前記３つの軽鎖ＣＤＲが、配列番号３６〜３８であり、但し、これは、位置Ｈ２７がＦまたはＹにより占められ、Ｈ２８がＮまたはＴにより占められ、Ｈ２９がＩまたはＦにより占められ、Ｈ３０がＫまたはＴにより占められ、位置Ｈ５１がＩまたはＶにより占められ、位置Ｈ５４がＮまたはＤにより占められ、位置Ｈ６０がＤまたはＡにより占められ、Ｈ６１がＰまたはＥにより占められ、Ｈ１０２がＦまたはＹにより占められるという条件の場合である、請求項１に記載の抗体。
ＣＤＲ−Ｈ１が、配列番号４２、配列番号５８、配列番号５９、または配列番号６０を含むアミノ酸配列を有し、ＣＤＲ−Ｈ２が、配列番号４３、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、または配列番号６４を含むアミノ酸配列を有し、かつＣＤＲ−Ｈ３が、配列番号６５を含むアミノ酸配列を有する、請求項５に記載の抗体。
位置Ｈ１７をＴまたはＳ、および位置Ｈ２０をＩまたはＶとすることができること以外は、配列番号１５〜１９および配列番号４６〜５７のいずれか１つに少なくとも９０％同一性のアミノ酸配列を有するヒト化成熟重鎖可変領域、および配列番号２０〜２３のいずれか１つに少なくとも９０％同一性のアミノ酸配列を有するヒト化成熟軽鎖可変領域を含む、請求項４〜６のいずれか１項に記載のヒト化抗体。
次に示す前記ＶＨ領域の位置の少なくとも１つが指定したアミノ酸により占められる、請求項４に記載のヒト化抗体：Ｈ１０がＥまたはＤにより占められ、Ｈ１２がＫまたはＶにより占められ、Ｈ１３がＫまたはＲにより占められ、Ｈ１７がＴ、ＬまたはＳにより占められ、Ｈ２４がＶまたはＡにより占められ、Ｈ２７がＦまたはＹにより占められ、Ｈ２８がＮまたはＴにより占められ、Ｈ２９がＩまたはＦにより占められ、Ｈ３０がＫまたはＴにより占められ、Ｈ３８が、ＱまたはＲにより占められ、Ｈ４０がＡまたはＲにより占められ、Ｈ４２がＧまたはＥにより占められ、Ｈ４３が、ＫまたはＱにより占められ、Ｈ４８がＭまたはＩにより占められ、Ｈ５１がＶまたはＩにより占められ、Ｈ５４がＮまたはＤにより占められ、Ｈ６０がＤまたはＡにより占められ、Ｈ６１がＰまたはＥにより占められ、Ｈ６６がＲまたはＫにより占められ、Ｈ６７がＶまたはＡにより占められ、Ｈ７６がＤまたはＮにより占められ、Ｈ８０が、ＭまたはＬにより占められ、Ｈ８１がＥまたはＱにより占められ、Ｈ８２ａがＳまたはＧにより占められ、Ｈ８３がＴまたはＲにより占められ、Ｈ９１がＹまたはＦにより占められ、Ｈ９３が、ＡまたはＳにより占められ、Ｈ１０２がＦまたはＹにより占められ、Ｈ１０８がＴまたはＬにより占められ、Ｈ１０９がＬまたはＶにより占められる。
前記ＶＨ領域の位置Ｈ１２、Ｈ２４、Ｈ３８、Ｈ４０、Ｈ４３、Ｈ４８、Ｈ６７、Ｈ８０、Ｈ８１、Ｈ８２Ａ、Ｈ８３、Ｈ９１、およびＨ９３が、それぞれ、Ｖ、Ａ、Ｒ、Ｒ、Ｑ、Ｉ、Ａ、Ｌ、Ｑ、Ｇ、Ｔ、Ｆ、およびＳにより占められることが前提である、請求項８に記載のヒト化抗体。
前記ＶＬ領域の位置Ｌ３６、Ｌ３７、およびＬ１００が、それぞれ、Ｌ、Ｌ、およびＧにより占められることが前提である、請求項９に記載のヒト化抗体。
位置Ｈ１７をＴまたはＳ、および位置Ｈ２０をＩまたはＶとすることができること以外は、配列番号１５〜１９および配列番号４６〜５７のいずれか１つに少なくとも９５％同一性のアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域、および配列番号２０〜２３のいずれか１つに少なくとも９５％同一性のアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域を含む、請求項７に記載のヒト化抗体。
位置Ｈ１７をＴまたはＳ、および位置Ｈ２０をＩまたはＶとすることができること以外は、配列番号１５〜１９および配列番号４６〜５７のいずれか１つに少なくとも９８％同一性のアミノ酸配列を有する成熟重鎖可変領域、および配列番号２０〜２３のいずれか１つに少なくとも９８％同一性のアミノ酸配列を有する成熟軽鎖可変領域を含む、請求項１１に記載のヒト化抗体。
前記成熟重鎖可変領域が配列番号１５〜１９および配列番号４６〜５７のいずれかのアミノ酸配列を有し、前記成熟軽鎖可変領域が配列番号２０〜２３のいずれか１つのアミノ酸配列を有する、請求項１２に記載のヒト化抗体。
前記成熟重鎖可変領域が配列番号１８のアミノ酸配列を有し、前記成熟軽鎖可変領域が配列番号２１のアミノ酸配列を有する、請求項１３に記載のヒト化抗体。
完全な抗体である、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の抗体。
結合フラグメントである、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の抗体。
前記アイソタイプがヒトＩｇＧ１である、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の抗体。
軽鎖定常領域に融合されている成熟軽鎖可変領域および重鎖定常領域に融合されている成熟重鎖可変領域を含む、請求項１〜１５のいずれか１項に記載のヒト化抗体。
前記重鎖定常領域が、天然のヒト重鎖定常領域と比較してＦｃγ受容体への結合が低減した天然のヒト重鎖定常領域の変異型である、請求項１８に記載のヒト化抗体。
前記重鎖定常領域がＩｇＧ１アイソタイプである、請求項１８または１９に記載のヒト化抗体。
前記アイソタイプが、ヒトＩｇＧ２またはＩｇＧ４アイソタイプである、請求項１８または１９に記載の抗体。
請求項１〜２１のいずれか１項で定められる抗体および薬学的に許容されるキャリアを含む医薬組成物。
請求項１〜２１のいずれか１項に記載の抗体の前記重鎖および／または軽鎖をコードする核酸、前記核酸を含む組換え体発現ベクター、または前記組換え体発現ベクターで形質転換された宿主細胞。
マウス抗体のヒト化方法であって、
（ａ）１種または複数の受容体抗体を選択すること；
（ｂ）保持されるべき前記マウス抗体のアミノ酸残基を特定すること；
（ｃ）前記マウス抗体重鎖のＣＤＲを含むヒト化重鎖をコードする核酸および前記マウス抗体軽鎖のＣＤＲを含むヒト化軽鎖をコードする核酸を合成すること、ならびに
（ｄ）宿主細胞中で前記核酸を発現させてヒト化抗体を産生すること
を含み、
前記マウス抗体が３Ｄ６であり、３Ｄ６が、配列番号７の成熟重鎖可変領域および配列番号１１の成熟軽鎖可変領域を特徴とする、方法。
ヒト化抗体、キメラ抗体またはベニヤ抗体の産生方法であって、
（ａ）前記抗体の重鎖および軽鎖をコードする核酸で形質転換された細胞を培養し、それにより、前記細胞が前記抗体を分泌すること；ならびに
（ｂ）細胞培養培地から前記抗体を精製すること
を含み、
前記抗体が、３Ｄ６のヒト化型、キメラ型またはベニヤ型である、方法。
ヒト化抗体、キメラ抗体またはベニヤ抗体を産生する細胞株の製造方法であって、
（ａ）抗体の重鎖および軽鎖ならびに選択可能マーカーをコードするベクターを細胞に導入すること；
（ｂ）前記ベクターの増大したコピー数を有する細胞を選択する条件下で、前記細胞を増殖すること；
（ｃ）前記選択した細胞から単一の細胞を単離すること；ならびに
（ｄ）抗体の収率に基づいて選択した単一の細胞からクローニングした細胞を保存すること
を含み、
前記抗体が、３Ｄ６のヒト化型、キメラ型またはベニヤ型である、方法。
タウの凝集を抑制するまたは減らすための、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の抗体。
タウ関連疾患を処置または予防するための、請求項１〜２１のいずれか１項で定められる抗体を含む、医薬組成物。
前記タウ関連疾患が、アルツハイマー病、ダウン症候群、軽度認知障害、原発性年齢関連タウオパチー、脳炎後パーキンソニズム、外傷後認知症またはボクサー認知症、ピック病、Ｃ型ニーマン・ピック病、核上性麻痺、前頭側頭型認知症、前頭側頭葉変性症、嗜銀性顆粒病、ｇｌｏｂｕｌａｒｇｌｉａｌｔａｕｏｐａｔｈｙ、グァム筋萎縮性側索硬化症−パーキンソン病／認知症複合；大脳皮質基底核変性症（ＣＢＤ）、レビー小体型痴呆、レビー小体型アルツハイマー病（ＬＢＶＡＤ）、または進行性核上麻痺（ＰＳＰ）である、請求項２８に記載の医薬組成物。
前記タウ関連疾患が、アルツハイマー病である、請求項２９に記載の医薬組成物。