JP2019512273A - グルカゴン様ペプチドを製造するための方法 - Google Patents
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Abstract
Description
NN2211としても知られている、リラグルチドである(N−ε−(γ−Glu(N−α−ヘキサデカノイル)))−Lys26Arg34−GLP−1(7−37)は、2型糖尿病の処置に対してと、関連する共存症を有する成人の肥満の処置に対して承認されている。この化合物は、半合成技術によって工業的規模で生成されている。EP−B 0
944 648には、組換えにより発現されたペプチドをNα−ヘキサデカノイル−Glu(ONSu)−OtBuと反応させて、リラグルチドを得ることが記載されている(その実施例35を参照のこと)。
LPPSにおいて使用される、極性の、非プロトン性溶媒からの直接の沈殿により、粘着性の、ガム様沈殿物を生じることが教示される。これは、最初に、目的のペプチドを、2−メチルテトラヒドロフランまたはトルエンに抽出し、続いて、この相からペプチドを沈殿させることによって回避することができる。アセトニトリル、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、n−ヘプタンおよびトルエンは、抽出物からペプチドの沈殿を誘導するために適切な逆溶媒として示されている。
(i)粗製グルカゴン様ペプチドを含む溶液Sを準備する工程と
(ii)工程(i)のペプチドをジイソプロピルエーテルおよびアセトニトリルを含む逆溶媒と混合することによって沈殿させる工程であり、体積比(ジイソプロピルエーテル:アセトニトリル)が(3:1)から(10:1)の範囲内にある、工程と;
(iii)工程(ii)から得られた沈殿物を、濾過および/または遠心分離によって単離する工程
とを含む方法に関する。
(i)グルカゴン様ペプチドを含む溶液を得る工程と;
(ii)(3:1)v/vから(10:1)v/vの範囲から選択される比で、ジイソプロピルエーテルおよびアセトニトリルを含む逆溶媒を使用して、グルカゴン様ペプチドを沈殿させる工程と;
(iii)沈殿物を分離する工程
とを含む方法を提供する。
(i)式I:
His−Ala−Glu−Gly−Thr−Phe−Thr−Ser−Asp−Val−Ser−Ser−Tyr−Leu−Glu−Gly−Gln−Ala−Ala−B1−Glu−Phe−Ile−Ala−Trp−Leu−Val−Arg−Gly−Arg−Gly
(式中、B1はLys(パルミトイル−Glu−OH)またはLys(H−Glu−OH)である)
のペプチドを含む溶液Sを準備する工程と;
(ii)溶液Sをジイソプロピルエーテルおよびアセトニトリルを含む逆溶媒と混合することによって、工程(i)のペプチドを沈殿させる工程であり、体積比(ジイソプロピルエーテル:アセトニトリル)が(3:1)から(10:1)の範囲内にある、工程と;
(iii)工程(ii)から得られた沈殿物を、好ましくは濾過および/または遠心分離によって、単離する工程
とを含む方法を指す。
略語:
Boc tertブチルオキシカルボニル
CLEAR 架橋したエトキシレートアクリレート
DBU ジアザビシクロ[5.4.0]ウンデカ−7−エン
DEPBT 3−(ジエトキシ−ホスホリルオキシ)−3H−ベンゾ[d][1,2,3]トリアジン−4−オン
DIC ジイソプロピルカルボジイミド
DIPEA ジイソプロピルエチルアミン
Dmb 2,4−ジメトキシベンジル
DMF N,N−ジメチルホルムアミド
DTE 1,4−ジチオエリトリオール
DTT 1,4−ジチオトレイトール
EDT 1,2−エタンジチオール
Fmoc 9−フルオレニルメチルオキシカルボニル
Hmb 2−ヒドロキシ−4−メトキシベンジル
HOBt ヒドロキシベンゾトリアゾール
HPLC 高速液体クロマトグラフィー
本明細書で使用する用語HPLCは、UHPLCを含む。
IPE ジイソプロピルエーテル
LPPS 液相ペプチド合成
MALDI−MS マトリックス支援レーザー脱離イオン化質量分析法
MTBE メチルtertブチルエーテル
MTT 4−メチルトリチル
NMP N−メチルピロリドン
OMpe 3−メチルペンタ−3−イルエステル
OtBu tertブチルエステル
ONSu=OSu N−ヒドロキシスクシンイミド
OxymaPure(登録商標) シアノ−ヒドロキシイミノ−酢酸エチルエステル
PEG ポリエチレングリコール
PEGA アクリルアミド−PEGコポリマー
Pbf 2,2,4,6,7−ペンタメチルジヒドロベンゾフラン−5−スルホニル
RT 室温
SPPS 固相ペプチド合成
tBu tertブチル
TBTU (ベンゾトリアゾリル)テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレートTES トリエチルシラン
THF テトラヒドロフラン
TIPS トリイソプロピルシラン
Trt トリチル
TFA トリフルオロ酢酸
UHPLC 超高速液体クロマトグラフィー
HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVRGRG (配列番号4)(式中、アミノ酸配列の20位のリシル部分(Lys20、K20)が修飾されている)で書かれた、簡単なリラグルチドのポリペプチド鎖の誘導体を指すことに直ぐに気付く。より詳細には、Lys20のイプシロンアミノ基が、アミド結合を介して、グルタミル部分のガンマカルボキシル基(γ−Glu、γ−E)のガンマカルボキシル基にコンジュゲートしている。グルタミル部分は、そのアミノ基を介して、パルミチン酸=ヘキサデカン酸部分にコンジュゲートしているか、または遊離NH2(アルファアミノ基、Nα)を保有する。
部分を除いて、アミノ酸側鎖で他の修飾を有さない。したがって、式Iのペプチドは、好ましくは、十分に保護されていないペプチドであり、好ましくはさらに修飾されない。
好ましくは、式Iのペプチドは、SPPS、LPPSまたはその組合せから得られる。より好ましくは、式Iのペプチドは、SPPSを含むか、SPPSからなる方法から得られる。
したがって、本発明の工程(i)は、以下の工程を含む
(i−a)グルカゴン様ペプチドにコンジュゲートされた固相を準備する工程であって、少なくともGlu、AspおよびLysの側鎖が保護基を有する、工程、
(i−b)樹脂からペプチドを切断し、場合により保護基を除去する、工程。
(i−a)式:H−His−Ala−Glu−Gly−Thr−Phe−Thr−Ser−Asp−Val−Ser−Ser−Tyr−Leu−Glu−Gly−Gln−Ala−Ala−B2−Glu−Phe−Ile−Ala−Trp−Leu−Val−Arg−Gly−Arg−Gly−[樹脂]
(式中、B2はLys(パルミトイル−Glu−OR1)またはB2はLys(R2−Glu−OR1)であり、R1はカルボン酸保護基であり、R2はアミノ保護基であり;少なくともGlu、AspおよびLysの側鎖が保護基を有する)の固相がコンジュゲートされたグルカゴン様ペプチドを準備する工程と;
(i−b)前駆体ペプチドを樹脂から切断する工程
とを含む。
(A) TBTU/DIPEA;
(B) DIC/OximaPure(登録商標)(シアノ−ヒドロキシイミノ−酢酸エチルエステル);
(C) DEPBT/DIPEA;および
(D) DIC/HOBt
からなる群から各工程について独立して選択される1種またはそれ以上のカップリング試薬/添加剤混合物によって活性化される。
12から選択される位置に対応するか、または同一の位置に導入される。
例示的に、切断は、1時間まで、1.5時間まで、2時間まで、2.5時間まで、3時間まで、3.5時間まで、もしくは4時間まで、または4時間超、約0から4℃、4から10℃、10〜15℃、15から25℃、または25から35℃の温度で、洗浄された樹脂を切断組成物とインキュベートすることによって行われる(好ましくは、不活性ガス下で)。例示的に、切断は、1時間まで、1.5時間まで、2時間まで、2.5時間まで、3時間まで、3.5時間まで、もしくは4時間まで、または4時間超、約0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、または32℃の温度で、洗浄された樹脂を切断組成物とインキュベートすることによって行われる(好ましくは、不活性ガス下で)。
(ii−a)ジイソプロピルエーテルおよびアセトニトリルを予め混合した後、それを工程(i)から得られた溶液Sと混合する工程;
(ii−b)ジイソプロピルエーテルを工程(i)から得られた溶液Sと最初に混合し、次に、アセトニトリルを、溶液Sおよびジイソプロピルエーテルを含む混合物と混合する工程;または
(ii−c)アセトニトリルを工程(i)から得られた溶液Sと最初に混合し、次に、ジイソプロピルエーテルを、溶液Sおよびアセトニトリルを含む混合物と混合する工程
によって、逆溶媒を工程(i)から得られた溶液Sと混合することを含む。
まとめると、本発明の(IPE:ACN)の体積範囲が、最終的に得られる。当業者は、アセトニトリルとジイソプロピルエーテルのアリコートが、本発明の体積範囲に合計されるまで、溶液Sと交互に混合されることを理解する。
(i)式I:
His−Ala−Glu−Gly−Thr−Phe−Thr−Ser−Asp−Val−Ser−Ser−Tyr−Leu−Glu−Gly−Gln−Ala−Ala−B1−Glu−Phe−Ile−Ala−Trp−Leu−Val−Arg−Gly−Arg−Gly
(式中、B1はLys(パルミトイル−Glu−OH)またはLys(H−Glu−OH)である)
のペプチドを含む溶液Sを準備する工程であり;
前記溶液Sの準備が:
(i−a)固相:
H−His−Ala−Glu−Gly−Thr−Phe−Thr−Ser−Asp−Val−Ser−Ser−Tyr−Leu−Glu−Gly−Gln−Ala−Ala−B2−Glu−Phe−Ile−Ala−Trp−Leu−Val−Arg−Gly−Arg−Gly−[樹脂]
(式中、B2はLys(パルミトイル−Glu−OtBu)またはLys(Boc−Glu−OtBuであり、
Glu、AspおよびLysの少なくとも側鎖が、保護基を保有する)
にコンジュゲートされた前駆体ペプチドを準備する、工程と;
(i−b)トリフルオロ酢酸(TFA)を含む切断組成物によって、前駆体ペプチドを樹脂から切断する工程
とを含み、
工程(i)から得られた前記溶液Sが、トリフルオロ酢酸(TFA)、水ならびにチオール捕捉剤および/またはシラン捕捉剤から選択される1種またはそれ以上の捕捉剤を含み;
(ii)溶液Sをジイソプロピルエーテルおよびアセトニトリルからなる逆溶媒と混合することによって、工程(i)のペプチドを沈殿させる工程であり、体積比(ジイソプロピルエーテル:アセトニトリル)が(3:1)から(5:1)の範囲内にある、工程と;
(iii)工程(ii)から得られた沈殿物を、好ましくは濾過および/または遠心分離によって、単離する工程
とを含む。
His−Ala−Glu−Gly−Thr−Phe−Thr−Ser−Asp−Val−Ser−Ser−Tyr−Leu−Glu−Gly−Gln−Ala−Ala−B2−Glu−Phe−Ile−Ala−Trp−Leu−Val−Arg−Gly−Arg−Gly−[樹脂]
(式中、B2はLys(パルミトイル−Glu−OR1)またはB2はLys(R2−Glu−OR1)であり、R1はカルボン酸保護基であり、R2はアミノ保護基であり、
少なくともGlu、AspおよびLysの側鎖が保護基を保有し、
少なくとも1つの擬プロリンジペプチドが、Gly4〜Thr5、Phe6〜Thr7、Thr7〜Ser8、Val10〜Ser11またはSer11〜Ser12からなる群
から選択される位置に存在する)
にコンジュゲートされた前駆体ペプチドに関する。
(A)本発明による方法から得ることができるリラグルチドペプチド、または固相から本発明による前駆体ペプチドを切断することから得ることができるリラグルチドペプチドと(B)薬学的に許容される担体
とを含む医薬組成物を指す。
実施例1:グルカゴン様ペプチドの固相ペプチド合成
段階的に、リラグルチドのFmoc−SPPSを、標準のFmocアミノ酸誘導体、Fmoc−Ala−OH、Fmoc−Arg(Pbf)−OH、Fmoc−Asp(OtBu)−OH、Fmoc−Asp(OMpe)−OH、Fmoc−Gly−OH、Fmoc−Gln(Trt)−OH、Fmoc−Glu(OtBu)−OH、Boc−His(Boc)−OH、Fmoc−His(1−Trt)−OH Fmoc−Ile−OH、Fmoc−Leu−OH、Fmoc−Phe−OH、Fmoc−Ser(tBu)−OH、Fmoc−Thr(tBu)−OH、Fmoc−Trp(Boc)−OH、Fmoc−Tyr(tBu)−OH、およびFmoc−Val−OH、ならびに以前に記載した構築ブロック、Fmoc−Lys(Nε−(γ−グルタミル(OtBu)−(Nα−ヘキサデカノイル)))(=Fmoc−Lys(パルミトイル−Glu−OtBu)−OH、WO 2013/171135を参照のこと)ならびにFmoc−Gly−Thr(Psi(Me,Me)pro)−OH、Fmoc−Phe−Thr(Psi(Me,Me)pro)−OH、Fmoc−Thr(tBu)−Ser(Psi(Me,Me)pro)−OH、Fmoc−Val−Ser(Psi(Me,Me)pro)−OH、およびFmoc−Ser(tBu)−Ser(Psi(Me,Me)pro)−OHから選択される少なくとも1つの擬プロリンジペプチドを使用して、100〜200または200〜400メッシュのH−Gly−2−クロロトリチル樹脂(Bachem 番号4092098または4026823)上で実施した。カップリング反応を、DIC/OxymaPure(登録商標)、TBTU/DIPEAまたはDEPBT/DIPEAのいずれかを用い、適当なカップリング時間(1.5〜24.0時間)およびFmoc脱保護時間(0.5〜4.0時間)で実行した。
His−Ala−Glu−Gly−Thr−Phe−Thr−Ser−Asp−Val−Ser−Ser−Tyr−Leu−Glu−Gly−Gln−Ala−Ala−Lys(Boc−Glu−OtBu)−Glu−Phe−Ile−Ala−Trp−Leu−Val−Arg−Gly−Arg−Gly−[樹脂]
の段階的Fmoc SPPSを、H−Gly−2−クロロトリチル樹脂を使用して、自動合成機で行った。カップリング反応を、反応性の標準Fmocアミノ酸誘導体、カップリング試薬としてのDIC/OxymaPure(登録商標)またはTBTU/DIPEAおよび溶媒としてのDMFを使用して行った。例外として、Boc−His(Boc)−OHのカップリングは、DMF中のDEPBT/DIPEAを使用して行った。カップリング時間は1.5時間から4時間の間で変化した。Fmoc−Lys(Boc−Glu−OtBu)−OH構築ブロックの導入を手動で行い(DIC/OxymaPure(登録商標)、4時間のカップリング時間)、一方、合成の残りは、完全に自動化したペプチド合成により行った。Fmoc脱保護は、20%のピペリジンのDMF中溶液(v/v)を使用して実施した。脱保護時間は、15から90分までの間で変化した。各カップリング後、計画的なキャッピング工程を無水酢酸を使用して実施した。
一般的手順:
ペプチド樹脂(5g)を50mLの切断組成物に懸濁させ、室温で3時間撹拌した。次いで、樹脂を濾去し、TFA(2×3.5mL)で洗浄した。切断組成物と洗浄画分をプールした。570mLのそれぞれの逆溶媒を、沈殿を開始させるために添加した。得られた懸濁液を、濾過用漏斗または標準の加圧濾過装置(「ポケットフィルター」)のいずれかを使用することによるペプチド沈殿物の分離の前に、さらに2時間撹拌した。濾過時間およびペプチド樹脂に対する総収率を決定した。沈殿物をそれぞれのエーテル(3×15mL)で洗浄し、真空下、室温で乾燥させて、粗製ペプチドを得た。
乾燥させたペプチド沈殿物を、分析逆相UHPLCによって、純度およびTFA含量について分析し、凝集物含量を、分析サイズ排除UHPLCによって決定した。沈殿物の外観/粘着性を、目視検査によって評価した。
逆溶媒を予め混合しなかった場合、純度を、63.1%までさらに改善することができたが、ACN部分とIPE部分に分け、次に、前記部分をペプチド溶液と接触させた(データは示さず)。種々の沈殿方法の比較をさらに容易にするために、性能スコアPを、P=P濾過時間×P純度×P収率×P外観×P凝集含量として計算した。1〜3の範囲の各サブスコアとして、最大性能スコアは243であり、最小スコアは1である。このメートル法で評価する場合にも、IPE/ACNの混合物は、テストされた他の逆溶媒と比較して明らかに有利であることが分かった。
さらなる実験は、リラグルチドの製造についてEP−A2 757 107に開示されているTFA/チオアニソール/アニソール/EDT(90:5:3:2)v/v/v/vから構成される切断組成物を使用する以外は、上記実施例2におけるように行った。
性能スコアの実測値108(3×2×3×3×2)は、IPE/ACN逆溶媒の有利な効果が、1つの特定のペプチド含有溶液に制限されないことを例証する。
沈殿のための好ましい温度範囲を分析するために、さらなる実験を上記実施例2におけるように行った。
EP−A2 757 107に記載されているように、リラグルチドを、TFA/チオアニソール/アニソール/EDT(90:5:3:2)v/v/v/vを用いたインキュベーションにより樹脂から切断し、氷冷したジエチルエーテルを使用して沈殿させた。沈殿物を、上記実施例2におけるように分析した。
上記実施例2におけるように得られた粗製リラグルチドペプチド沈殿物を、トランケートされたリラグルチド変異体について、分析逆相UHPLCおよび質量分析によって分析した。とりわけ、アシル化されたリラグルチドを含む、N末端でトランケートされたリラグルチド変異体[21〜31]を検出することができた。さらに、C末端でトランケートされた変異体リラグルチド[1〜30]が実測された。
Claims (15)
- リラグルチドペプチドまたはその塩を製造するための方法であって:
(i)式I:
His−Ala−Glu−Gly−Thr−Phe−Thr−Ser−Asp−Val−Ser−Ser−Tyr−Leu−Glu−Gly−Gln−Ala−Ala−B1−Glu−Phe−Ile−Ala−Trp−Leu−Val−Arg−Gly−Arg−Gly
(式中、B1はLys(パルミトイル−Glu−OH)またはLys(H−Glu−OH)である)
のペプチドを含む溶液Sを準備する工程と;
(ii)溶液Sをジイソプロピルエーテルおよびアセトニトリルを含む逆溶媒と混合することによって、工程(i)のペプチドを沈殿させる工程であり、体積比(ジイソプロピルエーテル:アセトニトリル)が(3:1)から(10:1)の範囲内にある、工程と;
(iii)工程(ii)から得られた沈殿物を、好ましくは濾過および/または遠心分離によって、単離する工程
とを含む前記方法。 - 工程(i)は:
(i−a)固相:
His−Ala−Glu−Gly−Thr−Phe−Thr−Ser−Asp−Val−Ser−Ser−Tyr−Leu−Glu−Gly−Gln−Ala−Ala−B2−Glu−Phe−Ile−Ala−Trp−Leu−Val−Arg−Gly−Arg−Gly−[樹脂]
(式中、B2はLys(パルミトイル−Glu−OR1)またはB2はLys(R2−Glu−OR1)であり、R1はカルボン酸保護基であり、R2はアミノ保護基であり;少なくともGlu、AspおよびLysの側鎖が保護基を保有する)
にコンジュゲートされた前駆体ペプチドを準備する工程と;
(i−b)前駆体ペプチドを樹脂から切断する工程
とを含む、請求項1に記載の方法。 - 工程(i−a)は、適切に保護されたアミノ酸誘導体またはジペプチド誘導体を使用するFmocベースの固相ペプチド合成を含み、前記保護されたアミノ酸誘導体またはジペプチド誘導体は、
(A) (ベンゾトリアゾリル)テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート(TBTU)/ジイソプロピルエチルアミン(DIPEA);
(B) ジイソプロピルカルボジイミド(DIC)/シアノ−ヒドロキシイミノ−酢酸エチルエステル;
(C) 3−(ジエトキシ−ホスホリルオキシ)−3H−ベンゾ[d][1,2,3]トリアジン−4−オン(DEPBT)/DIPEA;および
(D) DIC/ヒドロキシベンゾトリアゾール(HOBt)
からなる群から各工程について独立して選択される1種またはそれ以上のカップリング試薬/添加剤混合物によって活性化される、請求項2に記載の方法。 - 1種またはそれ以上の擬プロリンジペプチドが、式IのペプチドのGly4〜Thr5、Phe6〜Thr7、Thr7〜Ser8、Val10〜Ser11またはSer11〜Ser12からなる群から選択される位置に導入され、好ましくは、Fmoc−Gly−Thr(Psi(Me,Me)pro)−OH、Fmoc−Phe−Thr(Psi(Me,Me)pro)−OH、Fmoc−Thr(tBu)−Ser(Psi(Me,Me)pro)−OH、Fmoc−Val−Ser(Psi(Me,Me)pro)−OH、およびFmoc−Ser(tBu)−Ser(Psi(Me,Me)pro)−OHからなる群から選択される1種またはそれ以上の擬プロリンジペプチド誘導体が使用される、請求項2または3に記載の方法。
- N末端ヒスチジン部分は、Boc−His(Boc)−OH、Boc−His(1−Trt)−OH、およびFmoc−His(1−Trt)−OHからなる群から選択されるアミノ酸誘導体ならびにカップリング試薬/添加剤混合物であるDEPBT/DIPEAを使用して、固相にコンジュゲートされた前駆体ペプチドに導入される、請求項2〜4のいずれか1項に記載の方法。
- Fmoc保護基は、N,N−ジメチルホルムアミド(DMF)中5〜50%(v/v)のピペリジンまたは4−メチルピペリジン、N−メチルピロリドン(NMP)中5〜50%(v/v)のピペリジンまたは4−メチルピペリジン、DMF中1〜5%(v/v)のジアザビシクロ[5.4.0]ウンデカ−7−エン(DBU)、およびDMF中50%(v/v)のモルホリンから選択される混合物を使用して、固相にコンジュゲートされた成長ペプチド鎖から切断される、請求項3〜5のいずれか1項に記載の方法。
- パルミチン酸の活性化エステル、好ましくはN−スクシンイミジルパルミテートを、式IのペプチドのLys(H−Glu−OH)部分と、または工程(i−a)で準備した前駆体ペプチドからアミノ保護基R2を切断することによって得ることができるLys(H−Glu−OR1)部分と反応させる工程をさらに含む、請求項1〜6のいずれか1項に記載の方法。
- 工程(i)から得られた溶液Sは、トリフルオロ酢酸(TFA)および1種またはそれ以上の捕捉剤をさらに含み、好ましくは、捕捉剤は、チオール捕捉剤および/またはシラン捕捉剤から選択される、請求項1〜7のいずれか1項に記載の方法。
- 工程(ii)で使用される逆溶媒は、少なくとも50%(v/v)、好ましくは少なくとも75%(v/v)、最も好ましくは100%(v/v)の、ジイソプロピルエーテルおよびアセトニトリルからなる混合物Mを含み、前記混合物M中の体積比(ジイソプロピルエーテル:アセトニトリル)は、(3:1)から(5:1)の範囲内にある、請求項1〜8のいずれか1項に記載の方法。
- 工程(ii)は:
(ii−a)ジイソプロピルエーテルおよびアセトニトリルを予め混合した後、それを工程(i)から得られた溶液Sと混合する工程;または
(ii−b)ジイソプロピルエーテルを工程(i)から得られた溶液Sと最初に混合し、次に、アセトニトリルを、溶液Sおよびジイソプロピルエーテルを含む混合物と混合する工程;または
(ii−c)アセトニトリルを工程(i)から得られた溶液Sと最初に混合し、次に、ジイソプロピルエーテルを、溶液Sおよびアセトニトリルを含む混合物と混合する工程
によって、逆溶媒を工程(i)から得られた溶液Sと混合することを含む、請求項1〜9のいずれか1項に記載の方法。 - 工程(ii)は、−5℃から10℃、好ましくは0℃から10℃の範囲の温度で行われ、工程(ii)は、古典的な沈殿プロトコルまたは逆沈殿プロトコルを使用して行われる、請求項1〜10のいずれか1項に記載の方法。
- 請求項1〜11のいずれか1項に記載の方法から得ることができるリラグルチドペプチド沈殿物。
- トランケートされたリラグルチド変異体を含有する、請求項12に記載のリラグルチドペプチド沈殿物。
- 樹脂:
His−Ala−Glu−Gly−Thr−Phe−Thr−Ser−Asp−Val−Ser−Ser−Tyr−Leu−Glu−Gly−Gln−Ala−Ala−B2−Glu−Phe−Ile−Ala−Trp−Leu−Val−Arg−Gly−Arg−Gly−[樹脂]
(式中、B2はLys(パルミトイル−Glu−OR1)またはB2はLys(R2−Glu−OR1)であり、R1はカルボン酸保護基であり、R2はアミノ保護基であり、
少なくともGlu、AspおよびLysの側鎖が保護基を保有し、
少なくとも1つの擬プロリンジペプチドが、Gly4〜Thr5、Phe6〜Thr7、Thr7〜Ser8、Val10〜Ser11またはSer11〜Ser12からなる群から選択される位置に存在する)
にコンジュゲートされた前駆体ペプチド。 - (A)請求項1〜11のいずれか1項に記載の方法から得ることができるリラグルチドペプチド、または請求項14に記載の前駆体ペプチドを固相から切断して得ることができるリラグルチドペプチドと
(B)薬学的に許容される担体
とを含む医薬組成物。
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