JP2019500875A - 組換えタンパク質の生成 - Google Patents
組換えタンパク質の生成 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2019500875A JP2019500875A JP2018534839A JP2018534839A JP2019500875A JP 2019500875 A JP2019500875 A JP 2019500875A JP 2018534839 A JP2018534839 A JP 2018534839A JP 2018534839 A JP2018534839 A JP 2018534839A JP 2019500875 A JP2019500875 A JP 2019500875A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- trna
- cell
- expression
- cells
- modified
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 title claims abstract description 36
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 title claims abstract description 36
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 5
- 108020004566 Transfer RNA Proteins 0.000 claims abstract description 83
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims abstract description 77
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 claims abstract description 13
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 128
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 64
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 claims description 33
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 claims description 32
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 29
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 29
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 29
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 29
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 29
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 26
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 25
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 22
- 108020005098 Anticodon Proteins 0.000 claims description 20
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 claims description 20
- 238000013519 translation Methods 0.000 claims description 19
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 17
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 15
- 238000001890 transfection Methods 0.000 claims description 14
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims description 13
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 claims description 13
- 230000035897 transcription Effects 0.000 claims description 11
- 238000013518 transcription Methods 0.000 claims description 11
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 10
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 claims description 9
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 9
- 230000009466 transformation Effects 0.000 claims description 9
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 claims description 7
- 241000235347 Schizosaccharomyces pombe Species 0.000 claims description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 7
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 6
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims description 6
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 6
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 claims description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 4
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 4
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 claims description 4
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 claims description 3
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 claims description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 3
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 claims description 2
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 claims description 2
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 claims description 2
- 241001138401 Kluyveromyces lactis Species 0.000 claims description 2
- 241000235058 Komagataella pastoris Species 0.000 claims description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 2
- 241000499912 Trichoderma reesei Species 0.000 claims description 2
- 241000235015 Yarrowia lipolytica Species 0.000 claims description 2
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 claims description 2
- 210000000692 cap cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 238000012937 correction Methods 0.000 claims description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 2
- 239000003262 industrial enzyme Substances 0.000 claims description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 claims description 2
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 claims description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 claims 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 35
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 33
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 22
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 19
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 19
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 19
- 229940022353 herceptin Drugs 0.000 description 18
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 17
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 16
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 16
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 description 15
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 13
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 12
- RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N puromycin Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C[C@H](N)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)[C@H](N2C3=NC=NC(=C3N=C2)N(C)C)O[C@@H]1CO RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N 0.000 description 12
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 11
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 10
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 10
- 241000894007 species Species 0.000 description 10
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 9
- 230000006870 function Effects 0.000 description 9
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 9
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 8
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 8
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 8
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 8
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 8
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 8
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 8
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 8
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 7
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 7
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 7
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 7
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 6
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 229950010131 puromycin Drugs 0.000 description 6
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 6
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 5
- 102100028250 Conserved oligomeric Golgi complex subunit 8 Human genes 0.000 description 5
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 5
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 5
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 description 5
- 101000860644 Homo sapiens Conserved oligomeric Golgi complex subunit 8 Proteins 0.000 description 5
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 5
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 5
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 5
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 5
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 5
- 108091061750 Signal recognition particle RNA Proteins 0.000 description 5
- 240000006394 Sorghum bicolor Species 0.000 description 5
- 229910052770 Uranium Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 5
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 5
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 5
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 5
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000013162 Cocos nucifera Nutrition 0.000 description 4
- 244000060011 Cocos nucifera Species 0.000 description 4
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 4
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 4
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 4
- 102100024785 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 description 4
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 4
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 4
- 102000004058 Leukemia inhibitory factor Human genes 0.000 description 4
- 108090000581 Leukemia inhibitory factor Proteins 0.000 description 4
- 240000003183 Manihot esculenta Species 0.000 description 4
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 4
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 4
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 4
- 235000011684 Sorghum saccharatum Nutrition 0.000 description 4
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 4
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 4
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 4
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 4
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 4
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 4
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 4
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 4
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 4
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 4
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 4
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101150079312 pgk1 gene Proteins 0.000 description 4
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 4
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 4
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 4
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 4
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 4
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 229910000013 Ammonium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 102100036842 C-C motif chemokine 19 Human genes 0.000 description 3
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 3
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 3
- 244000163122 Curcuma domestica Species 0.000 description 3
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 3
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100037362 Fibronectin Human genes 0.000 description 3
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 3
- 101000978381 Homo sapiens C-C motif chemokine 14 Proteins 0.000 description 3
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 3
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 3
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 3
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 description 3
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 description 3
- 235000016735 Manihot esculenta subsp esculenta Nutrition 0.000 description 3
- 240000004658 Medicago sativa Species 0.000 description 3
- 102100030304 Platelet factor 4 Human genes 0.000 description 3
- 102000014450 RNA Polymerase III Human genes 0.000 description 3
- 108010078067 RNA Polymerase III Proteins 0.000 description 3
- 235000007238 Secale cereale Nutrition 0.000 description 3
- 244000082988 Secale cereale Species 0.000 description 3
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 3
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 3
- 102100021669 Stromal cell-derived factor 1 Human genes 0.000 description 3
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 3
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 3
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 3
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 3
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 3
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 3
- 235000003373 curcuma longa Nutrition 0.000 description 3
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 3
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 3
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 3
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 3
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N Ala-Gln Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000144725 Amygdalus communis Species 0.000 description 2
- 235000011437 Amygdalus communis Nutrition 0.000 description 2
- 241000219310 Beta vulgaris subsp. vulgaris Species 0.000 description 2
- 235000011331 Brassica Nutrition 0.000 description 2
- 241000219198 Brassica Species 0.000 description 2
- 235000011299 Brassica oleracea var botrytis Nutrition 0.000 description 2
- 240000003259 Brassica oleracea var. botrytis Species 0.000 description 2
- 102100023702 C-C motif chemokine 13 Human genes 0.000 description 2
- 101710112613 C-C motif chemokine 13 Proteins 0.000 description 2
- 102100023698 C-C motif chemokine 17 Human genes 0.000 description 2
- 102100023701 C-C motif chemokine 18 Human genes 0.000 description 2
- 102100021943 C-C motif chemokine 2 Human genes 0.000 description 2
- 101710155857 C-C motif chemokine 2 Proteins 0.000 description 2
- 102100036848 C-C motif chemokine 20 Human genes 0.000 description 2
- 102100031092 C-C motif chemokine 3 Human genes 0.000 description 2
- 101710155856 C-C motif chemokine 3 Proteins 0.000 description 2
- 102100021984 C-C motif chemokine 4-like Human genes 0.000 description 2
- 102100032366 C-C motif chemokine 7 Human genes 0.000 description 2
- 102100034871 C-C motif chemokine 8 Human genes 0.000 description 2
- 102100028892 Cardiotrophin-1 Human genes 0.000 description 2
- 235000009467 Carica papaya Nutrition 0.000 description 2
- 240000006432 Carica papaya Species 0.000 description 2
- 108010082169 Chemokine CCL17 Proteins 0.000 description 2
- 108010082155 Chemokine CCL18 Proteins 0.000 description 2
- 108010083700 Chemokine CCL20 Proteins 0.000 description 2
- 108010055124 Chemokine CCL7 Proteins 0.000 description 2
- 108010055204 Chemokine CCL8 Proteins 0.000 description 2
- 108010008951 Chemokine CXCL12 Proteins 0.000 description 2
- 102000016951 Chemokine CXCL2 Human genes 0.000 description 2
- 108010014414 Chemokine CXCL2 Proteins 0.000 description 2
- 108010005939 Ciliary Neurotrophic Factor Proteins 0.000 description 2
- 102100031614 Ciliary neurotrophic factor Human genes 0.000 description 2
- 241000207199 Citrus Species 0.000 description 2
- 108700010070 Codon Usage Proteins 0.000 description 2
- 235000003392 Curcuma domestica Nutrition 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- 102000003971 Fibroblast Growth Factor 1 Human genes 0.000 description 2
- 108090000386 Fibroblast Growth Factor 1 Proteins 0.000 description 2
- 102000003974 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 2
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 2
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- 101150009006 HIS3 gene Proteins 0.000 description 2
- 101000998953 Homo sapiens Immunoglobulin heavy variable 1-2 Proteins 0.000 description 2
- 101001008255 Homo sapiens Immunoglobulin kappa variable 1D-8 Proteins 0.000 description 2
- 101001047628 Homo sapiens Immunoglobulin kappa variable 2-29 Proteins 0.000 description 2
- 101001008321 Homo sapiens Immunoglobulin kappa variable 2D-26 Proteins 0.000 description 2
- 101001047619 Homo sapiens Immunoglobulin kappa variable 3-20 Proteins 0.000 description 2
- 101001008263 Homo sapiens Immunoglobulin kappa variable 3D-15 Proteins 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 2
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 2
- 102100036887 Immunoglobulin heavy variable 1-2 Human genes 0.000 description 2
- 102100022949 Immunoglobulin kappa variable 2-29 Human genes 0.000 description 2
- 108020004684 Internal Ribosome Entry Sites Proteins 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 2
- 235000017587 Medicago sativa ssp. sativa Nutrition 0.000 description 2
- 101000946797 Mus musculus C-C motif chemokine 9 Proteins 0.000 description 2
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000025272 Persea americana Species 0.000 description 2
- 235000008673 Persea americana Nutrition 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000010582 Pisum sativum Nutrition 0.000 description 2
- 240000004713 Pisum sativum Species 0.000 description 2
- 102100036154 Platelet basic protein Human genes 0.000 description 2
- 101710195957 Platelet basic protein Proteins 0.000 description 2
- 108090000778 Platelet factor 4 Proteins 0.000 description 2
- 108010038512 Platelet-Derived Growth Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000010780 Platelet-Derived Growth Factor Human genes 0.000 description 2
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 101100394989 Rhodopseudomonas palustris (strain ATCC BAA-98 / CGA009) hisI gene Proteins 0.000 description 2
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 2
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 2
- 235000021536 Sugar beet Nutrition 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 2
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 2
- 108010009583 Transforming Growth Factors Proteins 0.000 description 2
- 102000009618 Transforming Growth Factors Human genes 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 210000001132 alveolar macrophage Anatomy 0.000 description 2
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 108010041776 cardiotrophin 1 Proteins 0.000 description 2
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 2
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 235000020971 citrus fruits Nutrition 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 244000013123 dwarf bean Species 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 238000001976 enzyme digestion Methods 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 description 2
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 229940096397 interleukin-8 Drugs 0.000 description 2
- XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N interleukin-8 Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@@H](NC(C)=O)CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@H](CO)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N 0.000 description 2
- 238000005040 ion trap Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 230000001452 natriuretic effect Effects 0.000 description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N pyridoxine Chemical compound CC1=NC=C(CO)C(CO)=C1O LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- DHCDFWKWKRSZHF-UHFFFAOYSA-L thiosulfate(2-) Chemical compound [O-]S([S-])(=O)=O DHCDFWKWKRSZHF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical compound CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 2
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 2
- 230000005026 transcription initiation Effects 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 238000003146 transient transfection Methods 0.000 description 2
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- 235000013976 turmeric Nutrition 0.000 description 2
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 2
- 238000003260 vortexing Methods 0.000 description 2
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N (D)-(+)-Pantothenic acid Chemical compound OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 2-(3-bromo-2-fluorophenyl)acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC(Br)=C1F PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CAAMSDWKXXPUJR-UHFFFAOYSA-N 3,5-dihydro-4H-imidazol-4-one Chemical compound O=C1CNC=N1 CAAMSDWKXXPUJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 241001133760 Acoelorraphe Species 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 241000701242 Adenoviridae Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 239000004254 Ammonium phosphate Substances 0.000 description 1
- 244000099147 Ananas comosus Species 0.000 description 1
- 235000007119 Ananas comosus Nutrition 0.000 description 1
- 101000661812 Arabidopsis thaliana Probable starch synthase 4, chloroplastic/amyloplastic Proteins 0.000 description 1
- 241001553178 Arachis glabrata Species 0.000 description 1
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 1
- 235000007558 Avena sp Nutrition 0.000 description 1
- 241000701412 Baculoviridae Species 0.000 description 1
- 241000143976 Battus Species 0.000 description 1
- KHBQMWCZKVMBLN-UHFFFAOYSA-N Benzenesulfonamide Chemical compound NS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 KHBQMWCZKVMBLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021533 Beta vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000014698 Brassica juncea var multisecta Nutrition 0.000 description 1
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 description 1
- 235000011293 Brassica napus Nutrition 0.000 description 1
- 235000006008 Brassica napus var napus Nutrition 0.000 description 1
- 240000000385 Brassica napus var. napus Species 0.000 description 1
- 240000007124 Brassica oleracea Species 0.000 description 1
- 235000003899 Brassica oleracea var acephala Nutrition 0.000 description 1
- 235000011301 Brassica oleracea var capitata Nutrition 0.000 description 1
- 235000017647 Brassica oleracea var italica Nutrition 0.000 description 1
- 235000001169 Brassica oleracea var oleracea Nutrition 0.000 description 1
- 240000008100 Brassica rapa Species 0.000 description 1
- 235000011292 Brassica rapa Nutrition 0.000 description 1
- 235000006618 Brassica rapa subsp oleifera Nutrition 0.000 description 1
- 235000004977 Brassica sinapistrum Nutrition 0.000 description 1
- 235000004936 Bromus mango Nutrition 0.000 description 1
- 102100036841 C-C motif chemokine 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100023705 C-C motif chemokine 14 Human genes 0.000 description 1
- 101710112622 C-C motif chemokine 19 Proteins 0.000 description 1
- 101710155855 C-C motif chemokine 4 Proteins 0.000 description 1
- 102100032367 C-C motif chemokine 5 Human genes 0.000 description 1
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 1
- 101100091490 Caenorhabditis elegans hrp-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102400000113 Calcitonin Human genes 0.000 description 1
- 108060001064 Calcitonin Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 235000002566 Capsicum Nutrition 0.000 description 1
- 235000003255 Carthamus tinctorius Nutrition 0.000 description 1
- 244000020518 Carthamus tinctorius Species 0.000 description 1
- 235000013912 Ceratonia siliqua Nutrition 0.000 description 1
- 240000008886 Ceratonia siliqua Species 0.000 description 1
- 108010082161 Chemokine CCL19 Proteins 0.000 description 1
- 108010055165 Chemokine CCL4 Proteins 0.000 description 1
- 108010055166 Chemokine CCL5 Proteins 0.000 description 1
- 239000005496 Chlorsulfuron Substances 0.000 description 1
- 235000007516 Chrysanthemum Nutrition 0.000 description 1
- 244000189548 Chrysanthemum x morifolium Species 0.000 description 1
- 235000010523 Cicer arietinum Nutrition 0.000 description 1
- 244000045195 Cicer arietinum Species 0.000 description 1
- 240000006740 Cichorium endivia Species 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 102000007644 Colony-Stimulating Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010071942 Colony-Stimulating Factors Proteins 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000055 Corticotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 1
- 102000012289 Corticotropin-Releasing Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010022152 Corticotropin-Releasing Hormone Proteins 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 241000219104 Cucurbitaceae Species 0.000 description 1
- 101000832061 Curcuma longa Phenylpropanoylacetyl-CoA synthase Proteins 0.000 description 1
- 244000007835 Cyamopsis tetragonoloba Species 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N D-Lyxoflavin Natural products OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- ZAQJHHRNXZUBTE-NQXXGFSBSA-N D-ribulose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)C(=O)CO ZAQJHHRNXZUBTE-NQXXGFSBSA-N 0.000 description 1
- ZAQJHHRNXZUBTE-UHFFFAOYSA-N D-threo-2-Pentulose Natural products OCC(O)C(O)C(=O)CO ZAQJHHRNXZUBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000450599 DNA viruses Species 0.000 description 1
- 235000002767 Daucus carota Nutrition 0.000 description 1
- 244000000626 Daucus carota Species 0.000 description 1
- 235000009355 Dianthus caryophyllus Nutrition 0.000 description 1
- 240000006497 Dianthus caryophyllus Species 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical class S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100023688 Eotaxin Human genes 0.000 description 1
- 101710139422 Eotaxin Proteins 0.000 description 1
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 description 1
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 description 1
- 241000218218 Ficus <angiosperm> Species 0.000 description 1
- 235000016623 Fragaria vesca Nutrition 0.000 description 1
- 240000009088 Fragaria x ananassa Species 0.000 description 1
- 235000011363 Fragaria x ananassa Nutrition 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 101710198884 GATA-type zinc finger protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- 241000208152 Geranium Species 0.000 description 1
- 101800001586 Ghrelin Proteins 0.000 description 1
- 102400000442 Ghrelin-28 Human genes 0.000 description 1
- 102400000321 Glucagon Human genes 0.000 description 1
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 1
- DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N Glucagon-like peptide 1 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N 0.000 description 1
- 239000005562 Glyphosate Substances 0.000 description 1
- 239000000579 Gonadotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 1
- 241000219146 Gossypium Species 0.000 description 1
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 1
- 239000000095 Growth Hormone-Releasing Hormone Substances 0.000 description 1
- 241000700586 Herpesviridae Species 0.000 description 1
- 108010034791 Heterochromatin Proteins 0.000 description 1
- 101000713104 Homo sapiens C-C motif chemokine 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000713106 Homo sapiens C-C motif chemokine 19 Proteins 0.000 description 1
- 108020004466 Ile Transfer RNA Proteins 0.000 description 1
- 229930010555 Inosine Natural products 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N Inosine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC(O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- 102100026688 Interferon epsilon Human genes 0.000 description 1
- 101710147309 Interferon epsilon Proteins 0.000 description 1
- 102100022469 Interferon kappa Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 108010041872 Islet Amyloid Polypeptide Proteins 0.000 description 1
- 102000036770 Islet Amyloid Polypeptide Human genes 0.000 description 1
- LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N L-(-)-Sorbose Chemical compound OCC1(O)OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 235000003228 Lactuca sativa Nutrition 0.000 description 1
- 240000008415 Lactuca sativa Species 0.000 description 1
- 235000014647 Lens culinaris subsp culinaris Nutrition 0.000 description 1
- 244000043158 Lens esculenta Species 0.000 description 1
- 108010092277 Leptin Proteins 0.000 description 1
- 102000016267 Leptin Human genes 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N Linoleic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N 0.000 description 1
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000014826 Mangifera indica Nutrition 0.000 description 1
- 240000007228 Mangifera indica Species 0.000 description 1
- 235000004456 Manihot esculenta Nutrition 0.000 description 1
- 235000010624 Medicago sativa Nutrition 0.000 description 1
- 101710151321 Melanostatin Proteins 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- NPPQSCRMBWNHMW-UHFFFAOYSA-N Meprobamate Chemical compound NC(=O)OCC(C)(CCC)COC(N)=O NPPQSCRMBWNHMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N Molybdenum Chemical compound [Mo] ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000713102 Mus musculus C-C motif chemokine 1 Proteins 0.000 description 1
- 101100441533 Mus musculus Cxcl9 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000234295 Musa Species 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinyl-2-pyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HDFGOPSGAURCEO-UHFFFAOYSA-N N-ethylmaleimide Chemical compound CCN1C(=O)C=CC1=O HDFGOPSGAURCEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- 102400000064 Neuropeptide Y Human genes 0.000 description 1
- 102000003797 Neuropeptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000189 Neuropeptides Proteins 0.000 description 1
- 240000007817 Olea europaea Species 0.000 description 1
- 102400000050 Oxytocin Human genes 0.000 description 1
- 101800000989 Oxytocin Proteins 0.000 description 1
- XNOPRXBHLZRZKH-UHFFFAOYSA-N Oxytocin Natural products N1C(=O)C(N)CSSCC(C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C1CC1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 241000701945 Parvoviridae Species 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000006002 Pepper Substances 0.000 description 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- 241000709664 Picornaviridae Species 0.000 description 1
- 235000016761 Piper aduncum Nutrition 0.000 description 1
- 240000003889 Piper guineense Species 0.000 description 1
- 235000017804 Piper guineense Nutrition 0.000 description 1
- 235000008184 Piper nigrum Nutrition 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700625 Poxviridae Species 0.000 description 1
- 102100040918 Pro-glucagon Human genes 0.000 description 1
- 102000003946 Prolactin Human genes 0.000 description 1
- 108010057464 Prolactin Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 229930185560 Pseudouridine Natural products 0.000 description 1
- PTJWIQPHWPFNBW-UHFFFAOYSA-N Pseudouridine C Natural products OC1C(O)C(CO)OC1C1=CNC(=O)NC1=O PTJWIQPHWPFNBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000508269 Psidium Species 0.000 description 1
- 240000001679 Psidium guajava Species 0.000 description 1
- 235000013929 Psidium pyriferum Nutrition 0.000 description 1
- 102000009572 RNA Polymerase II Human genes 0.000 description 1
- 108010009460 RNA Polymerase II Proteins 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 238000010240 RT-PCR analysis Methods 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- 108010081734 Ribonucleoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004389 Ribonucleoproteins Human genes 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 241000207763 Solanum Species 0.000 description 1
- 235000002634 Solanum Nutrition 0.000 description 1
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 1
- 102100022831 Somatoliberin Human genes 0.000 description 1
- 101710142969 Somatoliberin Proteins 0.000 description 1
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 1
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 1
- 102100038803 Somatotropin Human genes 0.000 description 1
- 235000007230 Sorghum bicolor Nutrition 0.000 description 1
- 244000062793 Sorghum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 1
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 description 1
- 235000009184 Spondias indica Nutrition 0.000 description 1
- 101000857870 Squalus acanthias Gonadoliberin Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 101710088580 Stromal cell-derived factor 1 Proteins 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N Sulfurous acid Chemical compound OS(O)=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N Sulphide Chemical compound [S-2] UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019486 Sunflower oil Nutrition 0.000 description 1
- 101000797631 Sus scrofa Alveolar macrophage chemotactic factor 2 Proteins 0.000 description 1
- 101150057615 Syn gene Proteins 0.000 description 1
- 108700026226 TATA Box Proteins 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 1
- 235000009470 Theobroma cacao Nutrition 0.000 description 1
- JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N Thiamine Natural products CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700009124 Transcription Initiation Site Proteins 0.000 description 1
- 235000001484 Trigonella foenum graecum Nutrition 0.000 description 1
- 244000250129 Trigonella foenum graecum Species 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 208000035896 Twin-reversed arterial perfusion sequence Diseases 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102400000757 Ubiquitin Human genes 0.000 description 1
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 description 1
- 108010004977 Vasopressins Proteins 0.000 description 1
- 102000002852 Vasopressins Human genes 0.000 description 1
- 235000010749 Vicia faba Nutrition 0.000 description 1
- 240000006677 Vicia faba Species 0.000 description 1
- 235000002098 Vicia faba var. major Nutrition 0.000 description 1
- 241000219977 Vigna Species 0.000 description 1
- 240000004922 Vigna radiata Species 0.000 description 1
- 235000010721 Vigna radiata var radiata Nutrition 0.000 description 1
- 235000011469 Vigna radiata var sublobata Nutrition 0.000 description 1
- 235000010726 Vigna sinensis Nutrition 0.000 description 1
- 235000007244 Zea mays Nutrition 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 1
- 108700010877 adenoviridae proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000020224 almond Nutrition 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012501 ammonium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229910000148 ammonium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019289 ammonium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- KBZOIRJILGZLEJ-LGYYRGKSSA-N argipressin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N1)=O)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(N)=O)C1=CC=CC=C1 KBZOIRJILGZLEJ-LGYYRGKSSA-N 0.000 description 1
- 101150030721 ata gene Proteins 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- WGDUUQDYDIIBKT-UHFFFAOYSA-N beta-Pseudouridine Natural products OC1OC(CN2C=CC(=O)NC2=O)C(O)C1O WGDUUQDYDIIBKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N bromophenol blue Chemical compound C1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N calcitonin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(N)=O)C(C)C)C(=O)[C@@H]1CSSC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1 BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N 0.000 description 1
- 229960004015 calcitonin Drugs 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 238000007623 carbamidomethylation reaction Methods 0.000 description 1
- FPPNZSSZRUTDAP-UWFZAAFLSA-N carbenicillin Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)C(C(O)=O)C1=CC=CC=C1 FPPNZSSZRUTDAP-UWFZAAFLSA-N 0.000 description 1
- 229960003669 carbenicillin Drugs 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 230000003399 chemotactic effect Effects 0.000 description 1
- 239000005482 chemotactic factor Substances 0.000 description 1
- 235000003733 chicria Nutrition 0.000 description 1
- VJYIFXVZLXQVHO-UHFFFAOYSA-N chlorsulfuron Chemical compound COC1=NC(C)=NC(NC(=O)NS(=O)(=O)C=2C(=CC=CC=2)Cl)=N1 VJYIFXVZLXQVHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150040312 cho gene Proteins 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000013611 chromosomal DNA Substances 0.000 description 1
- 230000004186 co-expression Effects 0.000 description 1
- 238000012761 co-transfection Methods 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M cobalt(2+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+2].N#[C-].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 229940041967 corticotropin-releasing hormone Drugs 0.000 description 1
- KLVRDXBAMSPYKH-RKYZNNDCSA-N corticotropin-releasing hormone (human) Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(N)=O)[C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO)[C@@H](C)CC)C(C)C)C(C)C)C1=CNC=N1 KLVRDXBAMSPYKH-RKYZNNDCSA-N 0.000 description 1
- 244000038559 crop plants Species 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 1
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 1
- MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N diammonium hydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].OP([O-])([O-])=O MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- GRWZHXKQBITJKP-UHFFFAOYSA-L dithionite(2-) Chemical compound [O-]S(=O)S([O-])=O GRWZHXKQBITJKP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 235000005489 dwarf bean Nutrition 0.000 description 1
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000012149 elution buffer Substances 0.000 description 1
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 1
- 230000037149 energy metabolism Effects 0.000 description 1
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000012847 fine chemical Substances 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- GNKDKYIHGQKHHM-RJKLHVOGSA-N ghrelin Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CN)COC(=O)CCCCCCC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 GNKDKYIHGQKHHM-RJKLHVOGSA-N 0.000 description 1
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 1
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- XDDAORKBJWWYJS-UHFFFAOYSA-N glyphosate Chemical compound OC(=O)CNCP(O)(O)=O XDDAORKBJWWYJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940097068 glyphosate Drugs 0.000 description 1
- XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N gonadorelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N 0.000 description 1
- 229940035638 gonadotropin-releasing hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 1
- 239000007952 growth promoter Substances 0.000 description 1
- 230000002363 herbicidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000003815 herbicide antidote Substances 0.000 description 1
- 210000004458 heterochromatin Anatomy 0.000 description 1
- 210000003917 human chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000009851 immunogenic response Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960003786 inosine Drugs 0.000 description 1
- 108010080375 interferon kappa Proteins 0.000 description 1
- 108010045648 interferon omega 1 Proteins 0.000 description 1
- 229960001388 interferon-beta Drugs 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- PGLTVOMIXTUURA-UHFFFAOYSA-N iodoacetamide Chemical compound NC(=O)CI PGLTVOMIXTUURA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000534 ion trap mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- NMCUIPGRVMDVDB-UHFFFAOYSA-L iron dichloride Chemical class Cl[Fe]Cl NMCUIPGRVMDVDB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 1
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 1
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 1
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229940039781 leptin Drugs 0.000 description 1
- NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N leptin Chemical compound O=C([C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)CCSC)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N 0.000 description 1
- 235000020778 linoleic acid Nutrition 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N linoleic acid Natural products CCCCC\C=C/C\C=C\CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- XIXADJRWDQXREU-UHFFFAOYSA-M lithium acetate Chemical compound [Li+].CC([O-])=O XIXADJRWDQXREU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000012160 loading buffer Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000012092 media component Substances 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 235000019713 millet Nutrition 0.000 description 1
- 230000002297 mitogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 229910052750 molybdenum Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011733 molybdenum Substances 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010844 nanoflow liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 229910017464 nitrogen compound Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002830 nitrogen compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- URPYMXQQVHTUDU-OFGSCBOVSA-N nucleopeptide y Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 URPYMXQQVHTUDU-OFGSCBOVSA-N 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000014593 oils and fats Nutrition 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 125000001477 organic nitrogen group Chemical group 0.000 description 1
- 150000002898 organic sulfur compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229940043515 other immunoglobulins in atc Drugs 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- XNOPRXBHLZRZKH-DSZYJQQASA-N oxytocin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](N)C(=O)N1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-DSZYJQQASA-N 0.000 description 1
- 229960001723 oxytocin Drugs 0.000 description 1
- 229940014662 pantothenate Drugs 0.000 description 1
- 235000019161 pantothenic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011713 pantothenic acid Substances 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- LUYQYZLEHLTPBH-UHFFFAOYSA-N perfluorobutanesulfonyl fluoride Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)S(F)(=O)=O LUYQYZLEHLTPBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- -1 phosphinotricin Chemical compound 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000009465 prokaryotic expression Effects 0.000 description 1
- 229940097325 prolactin Drugs 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 1
- PTJWIQPHWPFNBW-GBNDHIKLSA-N pseudouridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1C1=CNC(=O)NC1=O PTJWIQPHWPFNBW-GBNDHIKLSA-N 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 235000008160 pyridoxine Nutrition 0.000 description 1
- 239000011677 pyridoxine Substances 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 238000004725 rapid separation liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000011535 reaction buffer Substances 0.000 description 1
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 235000019192 riboflavin Nutrition 0.000 description 1
- 229960002477 riboflavin Drugs 0.000 description 1
- 239000002151 riboflavin Substances 0.000 description 1
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000012723 sample buffer Substances 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000001743 silencing effect Effects 0.000 description 1
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 1
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 1
- 229940001941 soy protein Drugs 0.000 description 1
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- UNFWWIHTNXNPBV-WXKVUWSESA-N spectinomycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](NC)[C@@H](O)[C@H]([C@@H]([C@H]1O1)O)NC)[C@]2(O)[C@H]1O[C@H](C)CC2=O UNFWWIHTNXNPBV-WXKVUWSESA-N 0.000 description 1
- 229960000268 spectinomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 239000002600 sunflower oil Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 229940126622 therapeutic monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N thiamine Chemical compound CC1=C(CCO)SCN1CC1=CN=C(C)N=C1N KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019157 thiamine Nutrition 0.000 description 1
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 description 1
- 239000011721 thiamine Substances 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 229940113082 thymine Drugs 0.000 description 1
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 1
- 238000012250 transgenic expression Methods 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 235000001019 trigonella foenum-graecum Nutrition 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 229960003726 vasopressin Drugs 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 229940011671 vitamin b6 Drugs 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/80—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for fungi
- C12N15/81—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for fungi for yeasts
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/67—General methods for enhancing the expression
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/62—DNA sequences coding for fusion proteins
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
Description
が提供される。
i)本発明に記載の改変細胞を提供するステップ、
ii)上記改変細胞により発現される1つまたは複数の組換えタンパク質/ペプチドの発現に好適な細胞培養条件下でi)の細胞をインキュベートするステップ、および任意選択で
iii)改変細胞または細胞培養培地から、発現した組換えタンパク質/ペプチドを単離するステップ
を含む、方法が提供される。
i)発現させようとする組換えタンパク質をコードする核酸分子のヌクレオチド配列を分析して、1つまたは複数のコドン/アンチコドンtRNAミスマッチを特定するステップ、
ii)少なくとも1つのコドンにおける少なくとも1つの塩基対形成ミスマッチを修正する1つまたは複数のtRNA遺伝子を含む1つまたは複数の転写カセットで細胞をトランスフェクトまたは形質転換して、改変細胞を提供するステップ、
iii)発現させようとする組換えタンパク質で上記改変細胞をトランスフェクトまたは形質転換するステップ、および任意選択で
iv)上記組換えタンパク質を発現するための細胞培養条件を提供するステップ
を含む、方法が提供される。
i)発現させようとする組換えタンパク質をコードする核酸分子のヌクレオチド配列を分析して、1つまたは複数のコドン/アンチコドンtRNAミスマッチを特定するステップ、
ii)上記組換えタンパク質をコードするmRNAおよび上記mRNA中の少なくとも1つのコドンにおける少なくとも1つの塩基対形成ミスマッチを修正する1つまたは複数のtRNAを含む反応混合物を提供するステップ、および
iii)上記mRNAからの上記組換えタンパク質の合成のための反応条件を提供するステップ
を含む、方法が提供される。
1つまたは複数のtRNA遺伝子を含む発現ベクター、任意で
1つまたは複数の組換え核酸分子を受容するように適合した発現ベクター、ならびに
サブクローニングおよび/またはトランスフェクション/形質転換に必要な酵素および緩衝液
を含むキットが提供される。
抗体は、ポリクローナル、モノクローナル抗体、CDRを含むヒト化およびキメラ抗体ならびに由来断片を含む。
医薬タンパク質の例は、「サイトカイン」を含む。サイトカインは、いくつかの多様な細胞機能に関連する。これらは、免疫系の調節、エネルギー代謝の調節ならびに増殖および発達の制御を含む。サイトカインは、標的細胞上の細胞表面で発現される受容体を介してそれらの効果を仲介する。サイトカインの例として、インターロイキン、例えばIL1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32および33が挙げられる。他の例として、成長ホルモン、レプチン、エリスロポエチン、プロラクチン、腫瘍壊死因子[TNF:tumour necrosis factor]、顆粒球コロニー刺激因子(GCSF:granulocyte colony stimulating factor)、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子(GMCSF:granulocyte macrophage colony stimulating factor)、毛様体神経栄養因子(CNTF:ciliary neurotrophic factor)、カルジオトロフィン−1(CT−1:cardiotrophin−1)、白血病阻止因子(LIF:leukemia inhibitory factor)およびオンコスタチンM(OSM:oncostatin M)、インターフェロンα、インターフェロンβ、インターフェロンε、インターフェロンκおよびωインターフェロンが挙げられる。
ヒトtRNA−Tyr−ATA遺伝子のpcDNA3へのクローニング
5’末端でattB配列の付加を伴い、BglII(5’)およびXhoI(3’)制限酵素配列を端部に有するヒトtRNA−Tyr−ATA遺伝子(chr2:219110270−219110770)を含有する500bpゲノムDNA断片(配列番号1)をLife Technologies社により合成し、ベクターpMK−Tyr_ATAで提供した。この配列を、BglIIおよびXhoIによる37℃での消化により放出し、ゲルを精製した。真核生物発現ベクターpcDNA3をBglIIおよびXhoIで消化して、CMVプロモーターを除去し、ゲルを精製した。2つのDNA断片を、T4リガーゼ(NEB社)を使用して接合し、化学誘導コンピテントE.coliに42℃で1分間のヒートショックにより導入した。プラスミドを続いて、得られたカルベニシリン抵抗性(50μg/ml)コロニーから単離し、インサートの存在を制限酵素消化および続くシークエンシングにより確認した。
CHO−K1細胞を、10%ウシ胎児血清で補充したハムF12培地中で生育させ、37℃で5%CO2中にて培養した。トランスフェクションのために、3mlの培地を含む6ウェルプレート中の1ウェル当たり350,000個の細胞を播種した。翌日、培地を除去し、1mlの新しい培地で置換し、X−fect試薬(Clontech社)を使用して製造者の使用説明書に従い5μgのプラスミドを細胞に導入した。24時間後、3ウェルからの全ての細胞を回収し、pcDNAベクターがネオマイシン抵抗性遺伝子を有するので、400μg/ml G418を補充した15mlの培地を含むT75フラスコに再播種した。これらの細胞を3日後に1:4に分け、G418は600μg/mlまで増大させた。細胞を続いて2〜3日毎に1:4に分け、G418はさらに12日目で800μg/mlまで増大させた。完全に形質転換された抵抗性細胞株を示す、さらなる細胞死が起こらなくなるときまで、選択を800μg/mlで継続した。G418の存在下で培養した形質転換されていない細胞は増殖せず、着実に数が減った。
1ml/ウェルのTrizol(Life technologies社)を使用して製造者の使用説明書に従い、CHO細胞からRNAを抽出した。沈殿後、RNAペレットを、4uのRNアーゼ非含有DNアーゼ1(NEB社 M0303S)を含有する30μlの1×DNアーゼ1緩衝液中に懸濁し、RNAを37℃で30分間インキュベートし、その後反応を70℃で10分間にて停止させた。その後、以下のように、SuperScript IV(Life Technologies社)およびランダムモノマー(Sigma社)を使用して、1μgのRNAをcDNAに逆転写した[1μgのRNA、1μlのランダムモノマー、1μlの10mM dNTP混合物、RNアーゼ非含有水を14μlになるように混合し、70℃まで5分間加熱し、その後氷上で冷却し、4μlの5×SSIV緩衝液、1μlの100mM DTTおよび1μlのSuperScript IV逆転写酵素を添加し、室温で10分間、その後55℃で30分間静置し、その後反応を80℃で10分間にて停止させる]。このcDNAを続いてDNアーゼ/RNアーゼ非含有水で100μlまで希釈し、OneTaqポリメラーゼ2×混合物(NEB社)および遺伝子特異的プライマー(配列番号2:ATAフォワード−GCTGGTAGAGCAGAGGACTAT、配列番号3:ATA(2)リバース−TCGAACCAGCAACCTAAGGAC)でのPCR反応で使用した。[標準緩衝液を伴うOneTaq2×−10μl、cDNA−2μl、10μMプライマー−0.2μl、dH2Oで20μlにする]。PCR条件−[94℃−3分間、(94℃−30秒間、62℃−12秒間、68℃−12秒間)×35、68℃−3分間]。PCRの結果は、3%TBEアガロースゲル上でSYBR Safe DNA染色(Invitrogen社)にて可視化した。
各tRNA遺伝子につき、Ile−GAT1−1 hg19_dna範囲ChrX:3756418〜3756491、Asn−ATT1−1 hg19_dna範囲chr1:147718729〜147719202である配列を以下のようにして得た。これらの配列を、それらを分離するHindIII部位を有し、pcDNA−Tyr−ATA中のTyr−ATA tRNA配列に隣接するクローニングのためのBamHI部位を端部に有するDNAの1断片(配列番号4)として合成した(図3)。得られた構築物は、pcDNA.YINと命名した。
pcDNA−Tyr−ATAについて上記に説明するように、pcDNA−YINを、CHO K1細胞に安定にトランスフェクトした。tRNA−Tyr−ATAについて上記に説明するように、各tRNAの発現をトランスフェクタントにおいて確認した(図4)。tRNA−Ile−GATのプライマー配列は、(配列番号5:フォワード−TCAGGCGGCCGGTTAGC、配列番号6:リバース−GCTAACGCCGTGGCCGGTG)であり、tRNA−Asn−ATTのプライマー配列は、(配列番号7フォワード−TCGCTAGTACCTGTCTCTGTGGおよび配列番号8:リバース−CCTGGGTGGTCTTGAACTACTC)であった。
細胞がトランスフェクション時に50〜70%コンフルエントになるように、トランスフェクションの1日前に、3×105個のCHO細胞を、6ウェルCostar透明TC処理細胞培養プレート(Corning社)中の1mlの完全増殖培地(F12/DMEM)中に播種した。微量遠心分離管中で、ハーセプチン(トラスツズマブ)をコードする5μgのプラスミドpCET 1006L+H(図5)DNAを、最終体積が100μlになるようにXfect反応緩衝液で希釈し、高速で5秒間のボルテックスにより混合した。1.5μl Xfectポリマーを、希釈したプラスミドDNAに添加し、高速で10秒間のボルテックスにより十分に混合した(ポリマー:DNAの比は一定に維持した:1μgのプラスミドDNA当たり0.3μlのXfectポリマー)。混合物を室温で10分間インキュベートしてナノ粒子複合体を形成させた。100μlのナノ粒子複合体溶液全てを、ウェル中の細胞培養培地に一滴ずつ添加した。プレートを37℃、5%CO2で4時間から一晩インキュベートし、その後ナノ粒子複合体を吸引により細胞から除去し、2〜3mlの新しい完全増殖培地で置換し、プレートを37℃のインキュベーターに戻した。24時間後、細胞をトリプシン処理し、計数し、非処理プレート中のGlutamax(Gibco社)およびピューロマイシン(10μg/ml)で補充したClonaCell(商標)半固体培地(Stem Cell Technologies社)中に200、500または1000個の細胞/mlで再懸濁した。プレートを、コロニーが明らかに見えるようになるまで、37℃、5%CO2で14〜21日間インキュベートした。個々のコロニーを、10%FCSおよび10ug/mlピューロマイシンを補充した液体F12培地にピペットで入れ、増殖させ、その後、ウェスタンブロットにより分析した。
ハーセプチン(トラスツズマブ)発現がどのように、pcDNA.YINを使用したヒトtRNA−IleGAT1−1、tRNA−AsnATT1−1およびtRNA−TyrATA遺伝子の一過性または安定的導入によるゆらぎ抑制に応答するか試験するために、pCET 1006L+Hで安定にトランスフェクトしたクローンを使用した。CHO細胞は、これらの3つのtRNAを有さず、それゆえIle、AsnおよびTyrについて、それぞれ、ATC、AATおよびTATコドンを解読するためにゆらぎに依存する。
質量分析(MS:mass spectrometry)による分析のために、ハーセプチンを、Pierce社Protein A磁気ビーズ(Thermo Scientific Pierce社 50μl、0.5mg)を使用して、安定に発現するCHO細胞の単一細胞クローンの播種後72〜96時間で回収した細胞培養上清(10% Ultra−Low IgG FBS[Thermo Scientific社]を含むF12:DMEM培地)から精製した。磁気ビーズをピペットで微量遠心分離管に移した。管を磁石上に置いて保存溶液からビーズを分離した。磁気ビーズを1mlの洗浄緩衝液(0.05% Tween−20洗剤を含有するTBS)で洗浄し、ビーズを磁石により回収し、上清を除去した。30mlの細胞培養上清を、Ultracel−50膜(Merck Millipore社)を有するAmicon社製Ultra−15遠心分離フィルターユニットを使用して1.5mlまで濃縮し、ビーズに添加し、回転しながら室温で60分間インキュベートした。管を磁石上に置き、上清を除去した。ビーズ/抗体複合体を、500μlの洗浄緩衝液中に再懸濁し、穏やかなピペッティングにより洗浄した。ビーズ/抗体複合体を全部で3回洗浄し、各洗浄の間に磁石上で分離した。ビーズ懸濁液を、管壁に結合したタンパク質の共溶出を避けるために、クリーン管に移した。100μlの溶出緩衝液(50mMグリシンpH2.8)をビーズに10分間添加して抗体を溶出し、15μl 1M TRIS pH7.5を添加することにより緩衝液を中和した。溶出したタンパク質を、LDS試料緩衝液(Biorad社、4:1)と混合し、DTT(最終濃度100mM)により還元した。混合物を95℃で10分間加熱し、4〜15% SDS−PAGEゲル(Biorad社)上にローディングした。ゲルを製造業者の使用説明書に従って泳動した(180V、30〜40分)。SDS−PAGEゲルを、InstantBlueクーマシーベースタンパク質染色(Expedeon社)を使用して染色した。DTEでの還元およびヨードアセトアミドでのS−カルバミドメチル化後に、ゲル内トリプシン消化を行った。ゲル片を、25mM炭酸水素アンモニウムを含有する50%(v:v)水性アセトニトリルで2回、その後アセトニトリルで1回洗浄し、真空濃縮器内で20分間乾燥させた。シークエンシンググレードの改変ブタトリプシン(Promega社)を50mM酢酸中に溶解し、その後25mM炭酸水素アンモニウムで5倍希釈して0.02μg/μLの最終トリプシン濃度を得た。ゲル片を、25μLのトリプシン溶液を添加することにより再水和し、10分後、十分な25mM炭酸水素アンモニウム溶液を添加してゲル片を覆った。消化物を37℃で一晩インキュベートした。ペプチドを、0.1%トリフルオロ酢酸(v:v)を含有する50%(v:v)水性アセトニトリルで3回洗浄することにより抽出し、その後真空濃縮器内で乾燥させ、水性0.1%トリフルオロ酢酸(v:v)中に再構成した。ペプチドを、PepMap 100Å C18、5μmトラップカラム(300μm×5mm、Thermo社)およびAcclaim PepMap RSLCまたはEasyNanoカラム、2μm、100Å(C18、75μm×150mm、Thermo社)を備えたUltiMate 3000 RSLCナノHPLCシステム(Thermo社)上にローディングした。トラップ洗浄溶媒は水性0.05%(v:v)トリフルオロ酢酸であり、トラッピング流速は15μl/分であった。トラップを3分間洗浄し、その後キャピラリーカラムへの流動に変えた。分離は、2つの溶媒(溶媒A:水性1%(v:v)ギ酸;溶媒B:1%(v:v)ギ酸を含有する水性80%(v:v)アセトニトリル)の勾配溶出を使用した。キャピラリーカラムの流速は、300nl/分であった。カラム温度は40℃であり、勾配プロファイルは、7分間にわたる直線3〜10%B、30分間にわたる直線10〜35%B、5分間にわたる直線35〜99%Bであり、その後99%溶媒Bでの4分間の洗浄に進めた。カラムを初期条件に戻し、15分間再平衡化し、その後続いて注入した。
上流末端および下流末端で、それぞれ、BamHIおよびSpeI制限酵素部位を端部に有するtRNA49−LeuCAG遺伝子(chr1:1527350−1527050)を含有する、分裂酵母Schizosaccharomyces pombeの第1染色体からのゲノムDNAの300bp断片(配列番号9)を、Life Technologies社により合成した。この配列を37℃でのBamHIおよびSpeIによる消化により放出し、ゲル精製した。このDNA断片を、BamHIおよびSpeIで切断したベクターpRS426(図9)に導入して、T4リガーゼ(NEB社)を室温で2時間使用してプラスミドpAU39を作製し、化学誘導コンピテントE.coli(DH5α)に42℃で0.5分間のヒートショックにより導入した。得られたアンピシリン抵抗性(100μg/ml)コロニーからプラスミドpAU39を続いて単離し、インサートの存在を制限酵素消化により確認した後、配列決定を行った。
Saccharomyces cerevisiae株COG8−TAP(遺伝子型his3Δ1 leu2Δ0 met15Δ0 ura3Δ0、COG8−TAP::HIS3、Mat a)を、酢酸リチウムを使用して、pAU39または空のpRS426ベクターで形質転換した。形質転換体を標準の最小限培地(SD、プラスミド選択に適切なアミノ酸を欠いている)中で生育させた。5 OD600単位相当の細胞を対数増殖期の液体培養物から回収し、120μl溶解緩衝液中に再懸濁し、その後95℃で2分間インキュベートし、100μgのガラスビーズ(425〜600μm、酸で洗浄済み)の存在下で3分間ボルテックスした。溶解物を8%SDS PAGEにより分離し、その後、上記のとおり、COG8に対する抗体およびローディング対照Pgk1でのウェスタンブロッティングにより分析した(図10)。
Claims (38)
- 転写カセットを含む核酸分子でのトランスフェクションまたは形質転換により改変された単離された真核細胞であって、前記転写カセットが、トランスファーRNA[tRNA]をコードする少なくとも1つのヌクレオチド配列を含み、前記tRNAが、真核細胞にないアンチコドンヌクレオチド配列を含み、前記アンチコドン配列が、対応するメッセンジャーRNA[mRNA]コドンにおける同族の第1、第2または第3のヌクレオチド位置のいずれか1つで塩基ミスマッチを修正して、翻訳効率を改善し、および/または遺伝子コードの縮重の結果としてのアミノ酸誤取り込みを減少させる、単離された真核細胞。
- 前記塩基ミスマッチ修正が、前記細胞の前記mRNAの翻訳中のゆらぎに対する依存を低減する、請求項1に記載の単離された真核細胞。
- 前記tRNAが、前記対応するmRNAコドンにおける前記第1、第2または第3のヌクレオチド位置における塩基ミスマッチを修正する、請求項1または2に記載の単離された真核細胞。
- 前記核酸分子が、前記tRNAの真核生物発現に適合された発現ベクターの部分である、請求項1から3のいずれか一項に記載の単離された真核細胞。
- 組換えタンパク質、ポリペプチドまたはペプチドをコードする核酸分子での形質転換またはトランスフェクションによりさらに改変されている、請求項1から4のいずれか一項に記載の単離された真核細胞。
- 前記発現ベクターが、哺乳動物細胞における発現に適合されている、請求項1から5のいずれか一項に記載の単離された真核細胞。
- 前記発現ベクターが、真菌細胞における発現に適合されている、請求項1から5のいずれか一項に記載の単離された真核細胞。
- 前記発現ベクターが、昆虫細胞における発現に適合されている、請求項1から5のいずれか一項に記載の単離された真核細胞。
- 前記発現ベクターが、植物細胞における発現に適合されている、請求項1から5のいずれか一項に記載の単離された真核細胞。
- 昆虫細胞、植物細胞、真菌細胞または哺乳動物細胞である、請求項1から9のいずれか一項に記載の単離された真核細胞。
- 単離された前記哺乳動物細胞が、非ヒト哺乳動物細胞である、請求項10に記載の単離された真核細胞。
- 単離された前記哺乳動物細胞が、チャイニーズハムスター卵巣[CHO]、HEK293、NS0またはCAP細胞からなる群から選択される、請求項10または11に記載の単離された真核細胞。
- 前記真菌細胞が、酵母:Saccharomyces cerevisae、Schizosaccharomyces pombe、Yarrowia lipolytica、Pichia pastoris、Aspergillus属、例えばA.niger、Kluyveromyces lactisおよびTrichoderma reeseiからなる群から選択される、請求項10に記載の単離された真核細胞。
- 前記発現カセットが、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14または15個の異なるtRNAをコードするヌクレオチド配列を含む、請求項1から13のいずれか一項に記載の単離された真核細胞。
- 前記核酸が、Ala−tRNA、Arg−tRNA、Asp−tRNA、Asn−tRNA、Cys−tRNA、Glu−tRNA、Gln−tRNA、Gly−tRNA、His−tRNA、Ile−tRNA、Leu−tRNA、Lys−tRNA、Met−tRNA、Phe−tRNA、Pro−tRNA、Ser−tRNA、Thr−tRNA、Trp−tRNA、Tyr−tRNAおよびVal−tRNAの群から選択されるトランスファーRNAをコードする、請求項1から14のいずれか一項に記載の単離された真核細胞。
- 前記アンチコドンが、シトシンおよび/またはアデニンを多く含む、請求項1から15のいずれか一項に記載の単離された真核細胞。
- 前記アンチコドンが、ウラシルを含まない、請求項1から15のいずれか一項に記載の単離された真核細胞。
- 前記アンチコドンが、AGC、GGC、CGC、UGC、ACC、GCC、CCC、UCC、AGG、GGG、CGG、UGG、AGU、GGU、CGU、UGU、AAC、GAC、CAC、UAC、AAA、GAA、AUU、GUU、CUU、UUU、AUC、GUC、CUC、UUC、AGA、GGA、CGA、UGA、ACU、GCU、ACG、GCG、CCG、UCG、CCU、UCU、AAG、GAG、CAG、UAG、CAA、UAA、AAU、GAU、UAU、CAU、AUA、GUA、ACA、GCA、AUG、GUG、CUG、UUG、CCAからなる群から選択される、請求項1から15のいずれか一項に記載の単離された真核細胞。
- 前記改変細胞が、治療用抗体をコードする核酸分子で形質転換またはトランスフェクトされている、請求項1から18のいずれか一項に記載の単離された真核細胞。
- 前記改変細胞が、医薬または治療用タンパク質またはペプチドをコードする核酸分子で形質転換またはトランスフェクトされている、請求項1から18のいずれか一項に記載の単離された真核細胞。
- 前記改変細胞が、工業用酵素をコードする核酸分子で形質転換またはトランスフェクトされている、請求項1から18のいずれか一項に記載の単離された真核細胞。
- 前記改変細胞が、7SLヌクレオチド配列を含む核酸分子での形質転換またはトランスフェクションによりさらに改変されている、請求項1から21のいずれか一項に記載の単離された真核細胞。
- 前記核酸分子が、配列番号10で示されるヌクレオチド配列または配列番号10で示されるヌクレオチド配列に全長にわたり少なくとも90%のヌクレオチド配列同一性を有するヌクレオチド配列バリアントを含む、請求項22に記載の単離された真核細胞。
- 前記核酸分子が、配列番号10で示されるヌクレオチド配列を含むか、またはそれからなる、請求項23に記載の単離された真核細胞。
- 組換えタンパク質の生成における遺伝子コードの縮重の結果としてのtRNAミスマッチを低減することにおける使用のための請求項1から24のいずれか一項に記載の改変細胞。
- tRNAミスマッチにおける前記低減が、前記改変細胞による前記mRNAの翻訳中の前記細胞のゆらぎへの依存を低減させる、請求項25に記載の改変細胞。
- 遺伝子コードの縮重の結果としてのtRNAミスマッチを低減させるための方法であって、
i)請求項1〜24のいずれか一項に記載の改変細胞を提供するステップ、
ii)前記改変細胞により発現される1つまたは複数の組換えタンパク質/ペプチドの発現に好適な細胞培養条件下でi)の前記細胞をインキュベートするステップ、および任意で
iii)前記改変細胞または細胞培養培地から、発現した組換えタンパク質/ペプチドを単離するステップ
を含む、方法。 - 細胞発現系における選択された組換えタンパク質の発現をカスタマイズする方法であって、
i)発現させようとする組換えタンパク質をコードする核酸分子のヌクレオチド配列を分析して、1つまたは複数のコドン/アンチコドンtRNAミスマッチを特定するステップ、
ii)少なくとも1つのコドンにおける少なくとも1つの塩基対形成ミスマッチを修正する1つまたは複数のtRNA遺伝子を含む1つまたは複数の転写カセットで細胞をトランスフェクトまたは形質転換して、改変細胞を提供するステップ、
iii)発現させようとする前記組換えタンパク質で前記改変細胞をトランスフェクトまたは形質転換するステップ、および任意で
iv)前記組換えタンパク質を発現するための細胞培養条件を提供するステップ
を含む、方法。 - 前記細胞が、真核細胞である、請求項28に記載の方法。
- 前記細胞が、哺乳動物細胞、真菌細胞、昆虫細胞または植物細胞である、請求項29に記載の方法。
- 前記細胞が、原核細胞である、請求項28に記載の方法。
- 前記原核細胞が、細菌細胞である、請求項31に記載の方法。
- 請求項28から32のいずれか一項に記載の方法により得られるか、または得ることができる改変細胞。
- 請求項1から25または33のいずれか一項に記載の改変細胞を含む細胞培養容器。
- 前記細胞培養容器が、発酵槽のようなバイオリアクターである、請求項34に記載の容器。
- 組換えタンパク質のカスタマイズされたin vitro合成の方法であって、
i)発現させようとする組換えタンパク質をコードする核酸分子のヌクレオチド配列を分析して、1つまたは複数のコドン/アンチコドンtRNAミスマッチを特定するステップ、
ii)前記組換えタンパク質をコードするmRNAおよび前記mRNA中の少なくとも1つのコドンにおける少なくとも1つの塩基対形成ミスマッチを修正する1つまたは複数のtRNAを含む反応混合物を提供するステップ、および
iii)前記mRNAからの前記組換えタンパク質の合成のための反応条件を提供するステップ
を含む、方法。 - 前記反応混合物が、発現ベクターおよびRNAポリメラーゼを含み、前記方法が、組合せ転写/翻訳反応である、請求項36に記載の方法。
- 1つまたは複数のtRNA遺伝子を含む発現ベクター、任意で
1つまたは複数の組換え核酸分子を受容するように適合した発現ベクター、ならびに
サブクローニングおよび/またはトランスフェクション/形質転換に必要な酵素および緩衝液
を含むキット。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GBGB1600512.6A GB201600512D0 (en) | 2016-01-12 | 2016-01-12 | Recombinant protein production |
PCT/GB2017/050028 WO2017121988A1 (en) | 2016-01-12 | 2017-01-09 | Recombinant protein production |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2019500875A true JP2019500875A (ja) | 2019-01-17 |
JP7257788B2 JP7257788B2 (ja) | 2023-04-14 |
Family
ID=55445872
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2018534839A Active JP7257788B2 (ja) | 2016-01-12 | 2017-01-09 | 組換えタンパク質の生成 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US11268101B2 (ja) |
EP (1) | EP3377633B9 (ja) |
JP (1) | JP7257788B2 (ja) |
ES (1) | ES2949051T3 (ja) |
GB (1) | GB201600512D0 (ja) |
WO (1) | WO2017121988A1 (ja) |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AU2020209941A1 (en) * | 2019-01-18 | 2021-07-22 | Flagship Pioneering, Inc. | TREM compositions and uses thereof |
JP2022534988A (ja) * | 2019-05-31 | 2022-08-04 | フラッグシップ パイオニアリング, インコーポレイテッド | tRNAプールを調節するためのTREMの使用 |
GB202107057D0 (en) * | 2021-05-18 | 2021-06-30 | Univ York | Glycosylation method |
WO2023009547A1 (en) * | 2021-07-26 | 2023-02-02 | Flagship Pioneering Innovations Vi, Llc | Trem compositions and uses thereof |
WO2023220342A2 (en) * | 2022-05-13 | 2023-11-16 | Shape Therapeutics Inc. | Engineered tranfer rnas |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH05236987A (ja) * | 1991-08-20 | 1993-09-17 | Nippon Sanso Kk | 非天然型アミノ酸組み込み蛋白質とその製造法及び試薬キット |
JP2006500927A (ja) * | 2002-09-13 | 2006-01-12 | ザ・ユニバーシティ・オブ・クイーンズランド | コドン翻訳効率に基づく遺伝子発現系 |
US20120183957A1 (en) * | 2009-09-24 | 2012-07-19 | Anima Cell Metrology, Inc. | Systems and methods for measuring translation of target proteins in cells |
JP2015145371A (ja) * | 2007-10-30 | 2015-08-13 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | 陽イオン交換クロマトグラフィーによる抗体の精製 |
JP2016509855A (ja) * | 2013-03-15 | 2016-04-04 | メディミューン リミテッド | 新規の核酸分子 |
JP2016154502A (ja) * | 2015-02-25 | 2016-09-01 | 神戸天然物化学株式会社 | 酸化セスキテルペンの生産およびその利用 |
Family Cites Families (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6214602B1 (en) | 1998-08-28 | 2001-04-10 | Promega Corporation | Host cells for expression of clostridial toxins and proteins |
DE60042396D1 (de) | 1999-01-27 | 2009-07-30 | Carstens Carsten Peter | Hohe expression eines heterologen proteins mit seltenen codons |
WO2004085463A2 (en) * | 2003-03-21 | 2004-10-07 | Neurion Pharmaceuticals | Methods of unnatural amino acid incorporation in proteins in mammalian cells |
US20050028639A1 (en) | 2003-08-04 | 2005-02-10 | Jen-Show Chang | Luminous pedals for bicycles |
US20050287639A1 (en) * | 2004-05-17 | 2005-12-29 | California Institute Of Technology | Methods of incorporating amino acid analogs into proteins |
JP2007037445A (ja) | 2005-08-02 | 2007-02-15 | Institute Of Physical & Chemical Research | tRNA合成方法、核酸、アミノアシルtRNA合成方法及び非天然型アミノ酸組み込み蛋白質の製造方法 |
PL1999259T3 (pl) | 2006-03-03 | 2015-01-30 | California Inst Of Techn | Specyficzne miejscowo wprowadzanie aminokwasów do cząsteczek |
CN101535338A (zh) | 2006-10-18 | 2009-09-16 | 斯克利普斯研究院 | 在哺乳动物细胞中将非天然氨基酸遗传掺入蛋白质 |
JP5679147B2 (ja) * | 2008-02-07 | 2015-03-04 | 独立行政法人理化学研究所 | 非天然塩基を含む改変tRNA及びその用途 |
JP5236987B2 (ja) | 2008-04-22 | 2013-07-17 | ナブテスコ株式会社 | ホームドア装置 |
US20130149699A1 (en) * | 2011-10-31 | 2013-06-13 | The University of Texas Medical Branch at Galveston | Translation Kinetic Mapping, Modification and Harmonization |
WO2014160032A1 (en) * | 2013-03-13 | 2014-10-02 | University Of Louisville Research Foundation, Inc. | Exosome-associated rna as a diagnostic marker |
EP3052624A1 (en) * | 2013-10-02 | 2016-08-10 | Wageningen Universiteit | Systematic optimization of coding sequence for functional protein expression |
-
2016
- 2016-01-12 GB GBGB1600512.6A patent/GB201600512D0/en not_active Ceased
-
2017
- 2017-01-09 WO PCT/GB2017/050028 patent/WO2017121988A1/en active Application Filing
- 2017-01-09 JP JP2018534839A patent/JP7257788B2/ja active Active
- 2017-01-09 US US16/065,421 patent/US11268101B2/en active Active
- 2017-01-09 EP EP17700873.7A patent/EP3377633B9/en active Active
- 2017-01-09 ES ES17700873T patent/ES2949051T3/es active Active
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH05236987A (ja) * | 1991-08-20 | 1993-09-17 | Nippon Sanso Kk | 非天然型アミノ酸組み込み蛋白質とその製造法及び試薬キット |
JP2006500927A (ja) * | 2002-09-13 | 2006-01-12 | ザ・ユニバーシティ・オブ・クイーンズランド | コドン翻訳効率に基づく遺伝子発現系 |
JP2015145371A (ja) * | 2007-10-30 | 2015-08-13 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | 陽イオン交換クロマトグラフィーによる抗体の精製 |
US20120183957A1 (en) * | 2009-09-24 | 2012-07-19 | Anima Cell Metrology, Inc. | Systems and methods for measuring translation of target proteins in cells |
JP2016509855A (ja) * | 2013-03-15 | 2016-04-04 | メディミューン リミテッド | 新規の核酸分子 |
JP2016154502A (ja) * | 2015-02-25 | 2016-09-01 | 神戸天然物化学株式会社 | 酸化セスキテルペンの生産およびその利用 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
INSECT MOL. BIOL., 2011, VOL.20, NO.2, PP.177-187, JPN6021031369, ISSN: 0004571173 * |
村松正實監訳, T. A. BROWN, ゲノム 新しい生命情報システムへのアプローチ, 株式会社メディカル・サイエ, JPN6021031370, ISSN: 0004571172 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP3377633B9 (en) | 2023-10-04 |
ES2949051T3 (es) | 2023-09-25 |
WO2017121988A1 (en) | 2017-07-20 |
JP7257788B2 (ja) | 2023-04-14 |
GB201600512D0 (en) | 2016-02-24 |
EP3377633C0 (en) | 2023-06-07 |
ES2949051T9 (es) | 2023-10-24 |
EP3377633A1 (en) | 2018-09-26 |
US20180362992A1 (en) | 2018-12-20 |
EP3377633B1 (en) | 2023-06-07 |
US11268101B2 (en) | 2022-03-08 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7257788B2 (ja) | 組換えタンパク質の生成 | |
US7884264B2 (en) | Compositions and methods for inhibition of fucosyltransferase and xylosyltransferase expression in duckweed plants | |
US11667921B2 (en) | Regulation of translation of expressed genes | |
DK2861741T3 (en) | CHO expression system | |
US20120301919A1 (en) | Ires mediated multicistronic vectors | |
EP2848687B1 (en) | Novel expression vector | |
CA2614998C (en) | Production of sialylated glycoproteins in bryophytes | |
JP4817514B2 (ja) | 新規動物細胞用ベクターおよびその使用 | |
Buyel et al. | Predictive models for the accumulation of a fluorescent marker protein in tobacco leaves according to the promoter/5′ UTR combination | |
CN107810271B (zh) | 用于在植物细胞中生产具有改变的糖基化模式的多肽的组合物和方法 | |
WO2010006415A1 (en) | Mammalian cell expression vectors and utilization | |
EP2859103A2 (en) | CELL ENGINEERING USING RNAs | |
JP7382138B2 (ja) | Hspa5遺伝子のプロモーター | |
EP1893757B1 (en) | Expression vector and methods of producing high levels of proteins | |
EA037273B1 (ru) | Экспрессионная кассета | |
EP2938726B1 (en) | Heterologous intron within a signal peptide | |
US10227604B2 (en) | Plant synthesizing hypoallergenic paucimannose type N-glycan and uses thereof | |
Yang et al. | RNA silencing is induced by the expression of foreign recombinant products in transgenic rice | |
WO2022243286A1 (en) | Method of glycoslyated protein production in a cell | |
US9663797B2 (en) | Optimized expression cassette for expressing a polypeptide with high yield | |
WO2023030914A1 (en) | Increase of protein expression and secretion by artificial co-expression of hdlbp/vigilin | |
AU2019395023A1 (en) | Matrix attachment regions and uses in promoting gene expression | |
EP1904636A2 (en) | Improvements in or relating to protein production |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20191219 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20201118 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20201201 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20210226 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210318 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20210817 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20211216 |
|
C60 | Trial request (containing other claim documents, opposition documents) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C60 Effective date: 20211216 |
|
C11 | Written invitation by the commissioner to file amendments |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C11 Effective date: 20220105 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20220225 |
|
C21 | Notice of transfer of a case for reconsideration by examiners before appeal proceedings |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C21 Effective date: 20220301 |
|
A912 | Re-examination (zenchi) completed and case transferred to appeal board |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A912 Effective date: 20220401 |
|
C211 | Notice of termination of reconsideration by examiners before appeal proceedings |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C211 Effective date: 20220405 |
|
C22 | Notice of designation (change) of administrative judge |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C22 Effective date: 20230117 |
|
C23 | Notice of termination of proceedings |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C23 Effective date: 20230228 |
|
C03 | Trial/appeal decision taken |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C03 Effective date: 20230328 |
|
C30A | Notification sent |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C3012 Effective date: 20230328 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20230404 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7257788 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |