JP2019182853A - Virus inactivator, norovirus inactivator and sanitation material - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、ウイルス不活性化剤、ノロウイルス不活性化剤及び衛生資材に関する。 The present invention relates to a virus inactivating agent, a norovirus inactivating agent, and a sanitary material.
ウイルスには、エンベロープを有するエンベロープウイルス（例えば、インフルエンザウイルス）や、エンベロープを有さないノンエンベロープウイルス（例えば、ノロウイルス）が存在している。
これらのウイルスの中には、ヒトに感染するものもあり、感染予防のために従来からウイルス不活性化剤が用いられていた。
Viruses include envelope viruses having an envelope (for example, influenza virus) and non-enveloped viruses having no envelope (for example, norovirus).
Some of these viruses infect humans, and virus inactivating agents have been used for the prevention of infection.
近年、ノロウイルス（ヒトノロウイルス）による感染性胃腸炎あるいは食中毒の発生が一年を通じて多発しており、特に１１〜３月が発生のピークとなっている。ノロウイルスは、カリシウイルス科、ノロウイルス属に分類されるエンベロープを持たないＲＮＡウイルス（以下、「ノロウイルス等」と記載する）であり、アルコール（エタノール、イソプロパノール等）、熱、酸性（胃酸等）、又は、乾燥等に対して強い抵抗力を有する。潜伏期間は１〜２日であると考えられており、嘔気、嘔吐、下痢の主症状が出るが、腹痛、頭痛、発熱、悪寒、筋痛、咽頭痛、倦怠感等を伴うこともある。 In recent years, infectious gastroenteritis or food poisoning due to norovirus (human norovirus) has occurred frequently throughout the year, especially in the 11 to March period. Norovirus is an RNA virus having no envelope (hereinafter referred to as “Norovirus etc.”) classified into the Caliciviridae and Norovirus genus, alcohol (ethanol, isopropanol etc.), heat, acidic (gastric acid etc.), or Has strong resistance to drying and the like. The incubation period is considered to be 1-2 days, and the main symptoms are nausea, vomiting, and diarrhea, but may be accompanied by abdominal pain, headache, fever, chills, myalgia, sore throat, malaise, and the like.
ノロウイルス等の感染経路の一つとして経口感染が知られており、ノロウイルス等に汚染された食物や水等を経口摂取することにより感染が成立する。
そのため、飲食店、給食施設、工場など食品を調理加工する場においては、食物や水等がノロウイルス等に汚染されないようにすることが求められている。
Oral infection is known as one of the infection routes of norovirus and the like, and infection is established by ingesting food or water contaminated with norovirus or the like.
Therefore, in places where food is cooked and processed, such as restaurants, school facilities, and factories, it is required to prevent food, water, and the like from being contaminated by norovirus.
ノロウイルス等による汚染を防ぐ手段として、食物、食器、調理台、調理器具等のノロウイルスを不活性化する方法がある。
ノロウイルス等を完全に不活性化させる方法としては、加熱処理が知られている。
しかし、飲食店、給食施設、工場など食品を調理加工する場において、常に、食器、調理台、調理器具等を加熱処理することは現実的でなく、食物の種類によっては加熱処理により風味が損なわれてしまう場合がある。つまり、加熱処理は、飲食店、給食施設、工場など食品を調理加工する場において、ノロウイルス等を不活性化する方法として適していなかった。
As a means for preventing contamination with norovirus or the like, there is a method for inactivating norovirus such as food, tableware, cooking tables, and cooking utensils.
Heat treatment is known as a method for completely inactivating norovirus and the like.
However, it is not practical to always heat-treat dishes, kitchen tables, utensils, etc. in places where food is cooked and processed, such as restaurants, lunch facilities, and factories, and depending on the type of food, the flavor is impaired by the heat treatment. There is a case that it will be. That is, heat treatment has not been suitable as a method for inactivating norovirus and the like in food processing places such as restaurants, school lunch facilities, and factories.
また、ノロウイルス等を不活性化させる方法として、塩素系漂白剤（次亜塩素酸ナトリウム等）を用いる方法も知られている。しかし、塩素系漂白剤は、金属に対する腐食作用、皮膚等に対する刺激作用、衣類に対する漂白作用等がある。そのため、その使用が制限されるという欠点があり、特に、人体に対する安全性への配慮から作業者の手指、食器、調理台、調理器具等にこれらの薬剤類を用いることは適当とはいえず、まして食物に直接触れさせることも適当とはいえなかった。
そのため、人体に対し安全であり、ノロウイルス等を不活性化できる方法が望まれていた。
As a method for inactivating norovirus or the like, a method using a chlorine bleach (such as sodium hypochlorite) is also known. However, chlorine bleach has a corrosive action on metals, an irritating action on skin, etc., and a bleaching action on clothes. Therefore, there is a drawback that its use is limited. In particular, it is not appropriate to use these chemicals for workers' fingers, tableware, cooking tables, cooking utensils, etc. in consideration of safety to the human body. Moreover, it was not appropriate to let food come into direct contact.
Therefore, a method that is safe for the human body and can inactivate norovirus and the like has been desired.
ヒトノロウイルスは、培養細胞を用いても増殖させることができない。
そのため、ヒトノロウイルスの不活性化に対する各種消毒剤等の消毒効果の検証には、代替ウイルスとしてネコカリシウイルス（ＦＣＶ）やマウスノロウイルス（ＭＮＶ）が広く用いられている。ＦＣＶ及びＭＮＶは、形態的特徴やゲノムの構造から、ヒトノロウイルスに近縁なウイルスであることが明らかにされている。
Human norovirus cannot be propagated using cultured cells.
Therefore, feline calicivirus (FCV) and murine norovirus (MNV) are widely used as alternative viruses for verifying the disinfection effect of various disinfectants and the like for inactivation of human norovirus. FCV and MNV have been shown to be closely related to human norovirus based on their morphological characteristics and genome structure.
例えば、非特許文献１には、エタノールを主成分とした中性または酸性のウイルス不活性化剤を用いたＦＣＶ及びＭＮＶの不活性化試験が記載されている。 For example, Non-Patent Document 1 describes FCV and MNV inactivation tests using a neutral or acidic virus inactivating agent mainly composed of ethanol.
非特許文献１に記載されたウイルス不活性化剤は、実験室レベルでの試験において、ＦＣＶ及びＭＮＶにある程度効果を示す。
しかし、このようなウイルス不活性化剤を、実際に飲食店、給食施設、工場などで使用する場合、充分なウイルス不活性化効果を示せなかった。
The virus inactivating agent described in Non-Patent Document 1 has some effect on FCV and MNV in laboratory tests.
However, when such a virus inactivating agent is actually used in restaurants, meal facilities, factories, etc., a sufficient virus inactivating effect has not been shown.
このようにウイルス不活性化剤の効果が充分に発揮されない原因は、環境中の汚れ、特にタンパク質汚れであると考えられた。
環境中のタンパク質汚れは、ウイルスの周囲に付着することになる。ウイルスの周囲のタンパク質汚れは、ウイルスの保護膜のように働き、エタノール及びその他の不活性化成分がウイルスと接触することを阻害すると考えられる。
そのため、非特許文献１に記載されたようなウイルス不活性化剤は、その効果を充分に発揮できなくなると考えられる。
Thus, it was thought that the cause that the effect of the virus inactivating agent was not sufficiently exhibited was environmental dirt, particularly protein dirt.
Protein stains in the environment will adhere around the virus. It is thought that the protein soil around the virus acts like a protective film of the virus and inhibits ethanol and other inactivating components from coming into contact with the virus.
Therefore, it is considered that a virus inactivating agent as described in Non-Patent Document 1 cannot sufficiently exert its effect.
また、非特許文献１に記載されたウイルス不活性化剤は、酸性であるので、使用時の金属腐食性が問題となることがあった。 Moreover, since the virus inactivating agent described in Non-Patent Document 1 is acidic, metal corrosiveness during use sometimes becomes a problem.
本発明は、上記問題点を鑑みてなされた発明であり、本発明の目的は、タンパク質汚れ存在下でも充分なウイルス不活性化効果を示すウイルス不活性化剤を提供することである。 The present invention has been made in view of the above problems, and an object of the present invention is to provide a virus inactivating agent that exhibits a sufficient virus inactivating effect even in the presence of protein soil.
すなわち、本発明のウイルス不活性化剤は、エタノールと、アミノ酸と、アルカリ剤とを含むことを特徴とする。 That is, the virus inactivating agent of the present invention is characterized by containing ethanol, an amino acid, and an alkaline agent.
本発明のウイルス不活性化剤はエタノールを含む。
ウイルスにエタノールを接触させることにより、ウイルスを不活性化することができる。
The virus inactivating agent of the present invention contains ethanol.
The virus can be inactivated by contacting ethanol with the virus.
本発明のウイルス不活性化剤は、アミノ酸及びアルカリ剤を含む。
アミノ酸の分子内の窒素原子の非共有電子対は、アルカリ剤との相乗効果によってウイルスの膜構造を変化させることができると考えられる。
このような作用により、ウイルスを不活性化することができると考えられる。
The virus inactivating agent of the present invention contains an amino acid and an alkaline agent.
It is considered that the unshared electron pair of the nitrogen atom in the amino acid molecule can change the viral membrane structure by a synergistic effect with the alkaline agent.
It is considered that the virus can be inactivated by such an action.
また、アルカリ剤により、ウイルス不活性化剤を中性〜弱アルカリ性に調整しやすくなる。 Moreover, it becomes easy to adjust a virus inactivation agent to neutrality-weak alkalinity with an alkali agent.
本発明のウイルス不活性剤では、上記アミノ酸は、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、トレオニン（スレオニン）、システイン、メチオニン、プロリン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、ヒスチジン、リシン、シスチン、テアニン、タウリン、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩、アルギニングルタミン酸塩、リシンアスパラギン酸塩及びリシングルタミン酸塩からなる群から選択される少なくとも１種であることが望ましい。
これらのアミノ酸は、アルカリ剤との相乗効果によってウイルスを不活性化するのに適している。
In the virus inactive agent of the present invention, the amino acids are glycine, alanine, valine, leucine, isoleucine, serine, phenylalanine, tyrosine, tryptophan, threonine (threonine), cysteine, methionine, proline, glutamine, asparagine, arginine, histidine, Desirably, at least one selected from the group consisting of lysine, cystine, theanine, taurine, aspartate, glutamate, arginine glutamate, lysine aspartate, and lysinghamate.
These amino acids are suitable for inactivating viruses by synergistic effects with alkaline agents.
また、本発明のウイルス不活性化剤では、上記アミノ酸は、アルギニン、ヒスチジン及びリシンからなる群から選択される少なくとも１種であることが望ましい。
これらのアミノ酸は塩基性アミノ酸である。塩基性アミノ酸は、分子内に複数の窒素原子を有する。そのため、アルカリ剤との相乗効果によるウイルスの膜構造の変化を、より効果的に起こすことができる。
In the virus inactivating agent of the present invention, the amino acid is preferably at least one selected from the group consisting of arginine, histidine and lysine.
These amino acids are basic amino acids. Basic amino acids have a plurality of nitrogen atoms in the molecule. Therefore, the change of the viral membrane structure due to the synergistic effect with the alkaline agent can be caused more effectively.
本発明のウイルス不活性化剤では、上記アルカリ剤は、炭酸塩、炭酸水素塩、リン酸二水素塩、リン酸水素二塩及びリン酸三塩からなる群から選択される少なくとも１種であることが望ましい。また、上記アルカリ剤は、ナトリウム塩、カリウム塩及びアンモニウム塩からなる群から選択される少なくとも１種の塩であることが望ましい。
これらのアルカリ剤は、ウイルス不活性化効果を向上させることができる。
In the virus inactivating agent of the present invention, the alkaline agent is at least one selected from the group consisting of carbonates, bicarbonates, dihydrogen phosphates, dihydrogen phosphates and trisphosphates. It is desirable. The alkaline agent is preferably at least one salt selected from the group consisting of sodium salts, potassium salts and ammonium salts.
These alkaline agents can improve the virus inactivating effect.
本発明のウイルス不活性化剤では、上記ウイルス不活性化剤中の上記エタノールの質量濃度は、８．０５〜８５．７０重量％であることが望ましい。
ウイルス不活性化剤中のエタノールの質量濃度が８．０５重量％未満であると、エタノールの質量濃度が低いので、エタノールが含まれることによるウイルス不活性化効果が発揮されにくくなる。
ウイルス不活性化剤中のエタノールの質量濃度が８５．７０重量％を超えると、ウイルス不活性化剤中のエタノールの質量濃度が高すぎ、引火しやすくなる。
In the virus inactivating agent of the present invention, the mass concentration of the ethanol in the virus inactivating agent is desirably 8.05 to 85.70% by weight.
When the mass concentration of ethanol in the virus inactivating agent is less than 8.05% by weight, the mass concentration of ethanol is low, so that the virus inactivating effect due to the inclusion of ethanol is hardly exhibited.
If the mass concentration of ethanol in the virus deactivator exceeds 85.70% by weight, the mass concentration of ethanol in the virus deactivator is too high, and it tends to catch fire.
本発明のウイルス不活性化剤では、上記ウイルス不活性化剤中の上記アミノ酸の質量濃度は、０．０５〜５．００重量％であることが望ましい。
ウイルス不活性化剤中のアミノ酸の質量濃度が、０．０５重量％未満であると、アミノ酸を含むことによるウイルス不活性化効果が発揮されにくい。
ウイルス不活性化剤中のアミノ酸の質量濃度が、５．００重量％を超えると、保管中にアミノ酸が析出しやすくなる。また、アミノ酸を含むことによるウイルス不活性化効果の向上が上限に近づき経済的でない。
In the virus inactivating agent of the present invention, the mass concentration of the amino acid in the virus inactivating agent is preferably 0.05 to 5.00% by weight.
When the mass concentration of the amino acid in the virus inactivating agent is less than 0.05% by weight, the virus inactivating effect due to the amino acid is hardly exhibited.
If the mass concentration of the amino acid in the virus inactivating agent exceeds 5.00% by weight, the amino acid tends to precipitate during storage. Moreover, the improvement of the virus inactivation effect by including an amino acid approaches an upper limit and is not economical.
本発明のウイルス不活性化剤では、上記ウイルス不活性化剤中の上記アルカリ剤の質量濃度は、０．０５〜１０．００重量％であることが望ましい。
ウイルス不活性化剤中のアルカリ剤の質量濃度が、０．０５重量％未満であると、アルカリ剤を含むことによるウイルス不活性化効果が発揮されにくい。
ウイルス不活性化剤中のアルカリ剤の質量濃度が、１０．００重量％を超えると、ｐＨが強アルカリ性になりやすく、また、保管中にアルカリ剤が析出しやすくなり、扱いにくくなる。
In the virus inactivating agent of the present invention, the mass concentration of the alkaline agent in the virus inactivating agent is preferably 0.05 to 10.00% by weight.
When the mass concentration of the alkaline agent in the virus inactivating agent is less than 0.05% by weight, the virus inactivating effect due to the inclusion of the alkaline agent is hardly exhibited.
If the mass concentration of the alkali agent in the virus inactivating agent exceeds 10.00% by weight, the pH tends to be strongly alkaline, and the alkali agent is likely to precipitate during storage, making it difficult to handle.
本発明のウイルス不活性化剤は、さらに酸剤を含むことが望ましい。また、上記酸剤としては、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、リン酸、酒石酸、フィチン酸、アジピン酸、グルコン酸及びコハク酸からなる群から選択される少なくとも１種であることが望ましい。
ウイルス不活性化剤が酸剤を含むことで、ウイルス不活性化効果がさらに向上する。また、酸剤を用いることにより、ウイルス不活性化剤のｐＨを調整することができる。
It is desirable that the virus inactivating agent of the present invention further contains an acid agent. The acid agent is preferably at least one selected from the group consisting of citric acid, malic acid, lactic acid, phosphoric acid, tartaric acid, phytic acid, adipic acid, gluconic acid and succinic acid.
When the virus inactivating agent contains an acid agent, the virus inactivating effect is further improved. Moreover, the pH of a virus inactivating agent can be adjusted by using an acid agent.
上記ウイルス不活性化剤中の上記酸剤の質量濃度は、０．００１〜２．００重量％であることが望ましい。
ウイルス不活性化剤中の酸剤の質量濃度が、０．００１重量％未満であると、酸剤の質量濃度が低すぎ、エタノールのウイルス不活性化効果を充分に増強させにくくなる。
ウイルス不活性化剤中の酸剤の質量濃度が、２．００重量％を超えると、酸剤の質量濃度が高すぎ、ウイルス不活性化剤を噴霧等した際に、べとつきやすくなり、また、酸剤の析出が生じやすくなる。また、ｐＨが低くなりやすく身体に使用した際、又は、身体に付着した際に刺激性が現れる。
The mass concentration of the acid agent in the virus inactivating agent is preferably 0.001 to 2.00% by weight.
If the mass concentration of the acid agent in the virus inactivating agent is less than 0.001% by weight, the mass concentration of the acid agent is too low, making it difficult to sufficiently enhance the virus inactivating effect of ethanol.
If the mass concentration of the acid agent in the virus inactivating agent exceeds 2.00% by weight, the mass concentration of the acid agent is too high, and when the virus inactivating agent is sprayed, it becomes easy to stick, Precipitation of the acid agent is likely to occur. In addition, when used on the body, the pH tends to be low, or irritation appears when attached to the body.
本発明のウイルス不活性化剤では、上記ウイルス不活性化剤のｐＨは、８〜１２であることが望ましい。
ノロウイルス等には、エタノールを含み、かつ、中性〜アルカリ性のウイルス不活性化剤に対し耐性を示すものも存在する（例えば、ネコカリシウイルス等）。
そのため、一般的に、ウイルス不活性化剤は酸性の状態で使用されることになる。
しかし、ウイルス不活性化剤が酸性であると、皮膚刺激性が強いという問題がある。
本発明のウイルス不活性化剤は、アミノ酸を含むのでｐＨが８〜１２であっても、充分なウイルス不活性化効果を示す。また、ウイルス不活性化剤の皮膚刺激性が充分に低減されている。
In the virus inactivating agent of the present invention, the pH of the virus inactivating agent is desirably 8-12.
Some noroviruses and the like contain ethanol and are resistant to neutral to alkaline virus inactivating agents (for example, feline calicivirus).
Therefore, generally, a virus inactivating agent is used in an acidic state.
However, when the virus inactivating agent is acidic, there is a problem that skin irritation is strong.
Since the virus inactivating agent of the present invention contains an amino acid, it exhibits a sufficient virus inactivating effect even if the pH is 8-12. Moreover, the skin irritation of the virus inactivating agent is sufficiently reduced.
本発明のノロウイルス不活性化剤は、上記本発明のウイルス不活性化剤からなることを特徴とする。
上記本発明のウイルス不活性化剤は、ノロウイルス等に対して高いウイルス不活性化効果を示す。
The norovirus inactivating agent of the present invention comprises the above-described virus inactivating agent of the present invention.
The virus inactivating agent of the present invention exhibits a high virus inactivating effect against norovirus and the like.
本発明の衛生資材は、上記本発明のウイルス不活性化剤、又は、上記本発明のノロウイルス不活性化剤を含むことを特徴とする。
本発明のウイルス不活性化剤又はノロウイルス不活性化剤は、ウイルス不活性化効果を示すので、このようなウイルス不活性化剤を含む本発明の衛生資材を用いることにより、ウイルス感染を防ぐことができる。
The sanitary material of the present invention includes the virus inactivating agent of the present invention or the norovirus inactivating agent of the present invention.
Since the virus inactivating agent or norovirus inactivating agent of the present invention exhibits a virus inactivating effect, it is possible to prevent viral infection by using the sanitary material of the present invention containing such a virus inactivating agent. Can do.
本発明のウイルス不活性化剤は、アミノ酸及びアルカリ剤を含む。
アミノ酸の分子内の窒素原子の非共有電子対は、アルカリ剤との相乗効果によってウイルスの膜構造を変化させることができると考えられる。
このような作用により、ウイルスを不活性化することができると考えられる。
The virus inactivating agent of the present invention contains an amino acid and an alkaline agent.
It is considered that the unshared electron pair of the nitrogen atom in the amino acid molecule can change the viral membrane structure by a synergistic effect with the alkaline agent.
It is considered that the virus can be inactivated by such an action.
以下、本発明のウイルス不活性化剤について具体的な実施形態を示しながら説明する。しかしながら、本発明は、以下の実施形態に限定されるものではなく、本発明の要旨を変更しない範囲において適宜変更して適用することができる。 Hereinafter, the virus inactivating agent of the present invention will be described with reference to specific embodiments. However, the present invention is not limited to the following embodiments, and can be applied with appropriate modifications without departing from the scope of the present invention.
本発明のウイルス不活性化剤は、エタノールと、アミノ酸と、アルカリ剤とを含むことを特徴とする。 The virus inactivating agent of the present invention is characterized by containing ethanol, an amino acid, and an alkaline agent.
本発明のウイルス不活性化剤は、エタノールを含む。
ウイルスにエタノールを接触させることにより、ウイルスを不活性化することができる。
The virus inactivating agent of the present invention contains ethanol.
The virus can be inactivated by contacting ethanol with the virus.
本発明のウイルス不活性化剤では、ウイルス不活性化剤中のエタノールの質量濃度は、８．０５〜８５．７０重量％であることが望ましく、２４．６９〜７４．７０重量％であることがより望ましく、３３．３８〜６０．００重量％であることがさらに望ましい。
ウイルス不活性化剤中のエタノールの質量濃度が８．０５重量％未満であると、エタノールの質量濃度が低いので、エタノールが含まれることによるウイルス不活性化効果が発揮されにくくなる。
ウイルス不活性化剤中のエタノールの質量濃度が８５．７０重量％を超えると、ウイルス不活性化剤中のエタノールの質量濃度が高すぎ、引火しやすくなる。
In the virus inactivating agent of the present invention, the mass concentration of ethanol in the virus inactivating agent is preferably from 8.05 to 85.70% by weight, and from 24.69 to 74.70% by weight. Is more desirably 33.38 to 60.00% by weight.
When the mass concentration of ethanol in the virus inactivating agent is less than 8.05% by weight, the mass concentration of ethanol is low, so that the virus inactivating effect due to the inclusion of ethanol is hardly exhibited.
If the mass concentration of ethanol in the virus deactivator exceeds 85.70% by weight, the mass concentration of ethanol in the virus deactivator is too high, and it tends to catch fire.
本発明のウイルス不活性化剤は、アミノ酸及びアルカリ剤を含む。
アミノ酸の分子内の窒素原子の非共有電子対は、アルカリ剤との相乗効果によってウイルスの膜構造を変化させることができると考えられる。
このような作用により、ウイルスを不活性化することができると考えられる。
The virus inactivating agent of the present invention contains an amino acid and an alkaline agent.
It is considered that the unshared electron pair of the nitrogen atom in the amino acid molecule can change the viral membrane structure by a synergistic effect with the alkaline agent.
It is considered that the virus can be inactivated by such an action.
本発明のウイルス不活性化剤では、上記アミノ酸は、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、トレオニン（スレオニン）、システイン、メチオニン、プロリン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、ヒスチジン、リシン、シスチン、テアニン、タウリン、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩、アルギニングルタミン酸塩、リシンアスパラギン酸塩及びリシングルタミン酸塩からなる群から選択される少なくとも１種であることが望ましい。
これらのアミノ酸は、アルカリ剤との相乗効果によってウイルスを不活性化するのに適している。
In the virus inactivating agent of the present invention, the amino acids are glycine, alanine, valine, leucine, isoleucine, serine, phenylalanine, tyrosine, tryptophan, threonine (threonine), cysteine, methionine, proline, glutamine, asparagine, arginine, histidine. Desirable is at least one selected from the group consisting of lysine, cystine, theanine, taurine, aspartate, glutamate, arginine glutamate, lysine aspartate, and lysingtaminate.
These amino acids are suitable for inactivating viruses by synergistic effects with alkaline agents.
また、本発明のウイルス不活性化剤では、上記アミノ酸は、アルギニン、ヒスチジン及びリシンからなる群から選択される少なくとも１種であることが望ましい。
これらのアミノ酸は塩基性アミノ酸である。塩基性アミノ酸は、分子内に複数の窒素原子を有する。そのため、アルカリ剤との相乗効果によるウイルスの膜構造の変化を、より効果的に起こすことができる。
In the virus inactivating agent of the present invention, the amino acid is preferably at least one selected from the group consisting of arginine, histidine and lysine.
These amino acids are basic amino acids. Basic amino acids have a plurality of nitrogen atoms in the molecule. Therefore, the change of the viral membrane structure due to the synergistic effect with the alkaline agent can be caused more effectively.
なお、本発明のウイルス不活性化剤を製造する際に、アミノ酸は、アミノ酸塩の態様で使用してもよい。特に、アミノ酸塩を構成するアミノ酸が塩基性アミノ酸である場合、アミノ酸塩は塩酸塩であることが望ましい。 In addition, when manufacturing the virus inactivating agent of this invention, you may use an amino acid in the aspect of an amino acid salt. In particular, when the amino acid constituting the amino acid salt is a basic amino acid, the amino acid salt is preferably a hydrochloride.
本発明のウイルス不活性化剤では、上記ウイルス不活性化剤中の上記アミノ酸の質量濃度は、０．０５〜５．００重量％であることが望ましく、０．０５〜３．００重量％であることがより望ましく、０．１０〜２．００重量％であることがさらに望ましい。
ウイルス不活性化剤中のアミノ酸の質量濃度が、０．０５重量％未満であると、アミノ酸を含むことによるウイルス不活性化効果が発揮されにくい。
ウイルス不活性化剤中のアミノ酸の質量濃度が、５．００重量％を超えると、使用時にアミノ酸が析出しやすくなる。また、アミノ酸を含むことによるウイルス不活性化効果の向上が上限に近づき経済的でない。
In the virus inactivating agent of the present invention, the mass concentration of the amino acid in the virus inactivating agent is preferably 0.05 to 5.00% by weight, and 0.05 to 3.00% by weight. More desirably, it is more desirably 0.10 to 2.00% by weight.
When the mass concentration of the amino acid in the virus inactivating agent is less than 0.05% by weight, the virus inactivating effect due to the amino acid is hardly exhibited.
When the mass concentration of the amino acid in the virus inactivating agent exceeds 5.00% by weight, the amino acid is likely to precipitate during use. Moreover, the improvement of the virus inactivation effect by including an amino acid approaches an upper limit and is not economical.
本発明のウイルス不活性化剤は、アルカリ剤を含む。アルカリ剤により、ウイルス不活性化剤を中性〜弱アルカリ性に調整しやすくなる。 The virus inactivating agent of the present invention contains an alkaline agent. The alkali agent makes it easy to adjust the virus inactivating agent to neutral to weak alkalinity.
本発明のウイルス不活性化剤では、上記アルカリ剤は、炭酸塩、炭酸水素塩、リン酸二水素塩、リン酸水素二塩、リン酸三塩からなる群から選択される少なくとも１種であることが望ましい。
また、上記アルカリ剤は、ナトリウム塩、カリウム塩及びアンモニウム塩からなる群から選択される少なくとも１種の塩であることが望ましい。
上記アルカリ剤の内、特に望ましいものは、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸アンモニウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素アンモニウム、リン酸三カリウムである。
これらのアルカリ剤は、ウイルス不活性化効果を向上させることができる。
なお、本発明のウイルス不活性化剤では、これらアルカリ剤を１種類だけ含んでいてもよく、複数種類含んでいてもよい。
In the virus inactivating agent of the present invention, the alkaline agent is at least one selected from the group consisting of carbonates, bicarbonates, dihydrogen phosphates, dihydrogen phosphates, and trisphosphates. It is desirable.
The alkaline agent is preferably at least one salt selected from the group consisting of sodium salts, potassium salts and ammonium salts.
Of the above alkaline agents, sodium carbonate, potassium carbonate, ammonium carbonate, sodium bicarbonate, ammonium bicarbonate, and tripotassium phosphate are particularly desirable.
These alkaline agents can improve the virus inactivating effect.
In addition, in the virus inactivating agent of this invention, these alkali agents may be included only 1 type and may include multiple types.
なお、アルカリ剤が、炭酸塩や炭酸水素塩であると、ウイルス不活性化剤に含まれているアミノ酸の作用により、これらのアルカリ剤がエタノールへ溶けやすくなる。そのため、本発明のウイルス不活性化剤の溶解性及び低温安定性が向上する。 If the alkaline agent is a carbonate or bicarbonate, these alkaline agents are easily dissolved in ethanol by the action of amino acids contained in the virus inactivating agent. Therefore, the solubility and low temperature stability of the virus inactivating agent of the present invention are improved.
本発明のウイルス不活性化剤では、上記ウイルス不活性化剤中の上記アルカリ剤の質量濃度は、０．０５〜１０．００重量％であることが望ましく、０．１０〜５．００重量％であることがより望ましく、０．１０〜３．００重量％であることがさらに望ましく、０．２０〜２．００重量％であることがよりさらに望ましい。
ウイルス不活性化剤中のアルカリ剤の質量濃度が、０．０５重量％未満であると、アルカリ剤を含むことによるウイルス不活性化効果が発揮されにくい。
ウイルス不活性化剤中のアルカリ剤の質量濃度が、１０．００重量％を超えると、ｐＨが強アルカリ性になりやすく、また、使用時にアルカリ剤が析出しやすくなり、扱いにくくなる。
In the virus inactivating agent of the present invention, the mass concentration of the alkaline agent in the virus inactivating agent is desirably 0.05 to 10.00% by weight, preferably 0.10 to 5.00% by weight. It is more desirable that it is 0.10 to 3.00% by weight, and further desirably 0.20 to 2.00% by weight.
When the mass concentration of the alkaline agent in the virus inactivating agent is less than 0.05% by weight, the virus inactivating effect due to the inclusion of the alkaline agent is hardly exhibited.
If the mass concentration of the alkali agent in the virus inactivating agent exceeds 10.00% by weight, the pH tends to be strongly alkaline, and the alkali agent is likely to precipitate during use, making it difficult to handle.
本発明のウイルス不活性化剤では、上記ウイルス不活性化剤のｐＨは、８〜１２であることが望ましく、８〜１１であることがより望ましい。
ノロウイルス等には、エタノールを含み、かつ、中性〜アルカリ性のウイルス不活性化剤に対し耐性を示すものも存在する（例えば、ネコカリシウイルス等）。
そのため、一般的に、ウイルス不活性化剤は酸性の状態で使用されることになる。
しかし、ウイルス不活性化剤が酸性であると、皮膚刺激性が強いという問題がある。
本発明のウイルス不活性化剤は、アミノ酸を含むのでｐＨが８〜１２であっても、充分なウイルス不活性化効果を示す。また、ウイルス不活性化剤の皮膚刺激性が充分に低減されている。
In the virus inactivating agent of the present invention, the pH of the virus inactivating agent is desirably 8 to 12, and more desirably 8 to 11.
Some noroviruses and the like contain ethanol and are resistant to neutral to alkaline virus inactivating agents (for example, feline calicivirus).
Therefore, generally, a virus inactivating agent is used in an acidic state.
However, when the virus inactivating agent is acidic, there is a problem that skin irritation is strong.
Since the virus inactivating agent of the present invention contains an amino acid, it exhibits a sufficient virus inactivating effect even if the pH is 8-12. Moreover, the skin irritation of the virus inactivating agent is sufficiently reduced.
本発明のウイルス不活性化剤は、さらに酸剤を含むことが望ましい。また、上記酸剤としては、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、リン酸、酒石酸、フィチン酸、アジピン酸、グルコン酸及びコハク酸からなる群から選択される少なくとも１種であることが望ましい。
ウイルス不活性化剤が酸剤を含むことで、ウイルス不活性化効果がさらに向上する。また、酸剤を用いることにより、ウイルス不活性化剤のｐＨを調整することができる。
なお、本発明のウイルス不活性化剤では、これら酸剤を１種類だけ含んでいてもよく、複数種類含んでいてもよい。
It is desirable that the virus inactivating agent of the present invention further contains an acid agent. The acid agent is preferably at least one selected from the group consisting of citric acid, malic acid, lactic acid, phosphoric acid, tartaric acid, phytic acid, adipic acid, gluconic acid and succinic acid.
When the virus inactivating agent contains an acid agent, the virus inactivating effect is further improved. Moreover, the pH of a virus inactivating agent can be adjusted by using an acid agent.
In addition, the virus inactivating agent of the present invention may contain only one kind of these acid agents or a plurality of kinds.
上記ウイルス不活性化剤中の上記酸剤の質量濃度は、０．００１〜２．００重量％であることが望ましく、０．０１〜１．００重量％であることがより望ましい。
ウイルス不活性化剤中の酸剤の質量濃度が、０．００１重量％未満であると、酸剤の質量濃度が低すぎ、エタノールのウイルス不活性化効果を充分に増強させにくくなる。
ウイルス不活性化剤中の酸剤の質量濃度が、２．００重量％を超えると、酸剤の質量濃度が高すぎ、ウイルス不活性化剤を噴霧等した際に、べとつきやすくなり、また、酸剤の析出が生じやすくなる。また、ｐＨが低くなりやすく身体に使用した際、又は、身体に付着した際に刺激性が現れる。
The mass concentration of the acid agent in the virus inactivating agent is preferably 0.001 to 2.00% by weight, and more preferably 0.01 to 1.00% by weight.
If the mass concentration of the acid agent in the virus inactivating agent is less than 0.001% by weight, the mass concentration of the acid agent is too low, making it difficult to sufficiently enhance the virus inactivating effect of ethanol.
If the mass concentration of the acid agent in the virus inactivating agent exceeds 2.00% by weight, the mass concentration of the acid agent is too high, and when the virus inactivating agent is sprayed, it becomes easy to stick, Precipitation of the acid agent is likely to occur. In addition, when used on the body, the pH tends to be low, or irritation appears when attached to the body.
本発明のウイルス不活性化剤は、さらに無機塩を含んでいてもよい。
このような無機塩としては、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化マグネシウム、塩化カルシウム、塩化アンモニウム、臭化ナトリウム、臭化カリウム、臭化カルシウム、硫酸ナトリウム、硫酸カリウム、硫酸マグネシウム、硫酸アンモニウム、硝酸カリウム、チオシアン酸カリウム、チオシアン酸アンモニウム等が挙げられる。
ウイルス不活性化剤がこれらの無機塩を含むと、ウイルスの周囲のタンパク質汚れを塩溶又は塩析させることができ、エタノールをウイルスに接触させやすくなる。
その結果ウイルス不活性化効果を向上させることができる。
なお、本発明のウイルス不活性化剤は、これらの無機塩を１種類だけ含んでいてもよく、複数種類含んでいてもよい。
The virus inactivating agent of the present invention may further contain an inorganic salt.
Such inorganic salts include sodium chloride, potassium chloride, magnesium chloride, calcium chloride, ammonium chloride, sodium bromide, potassium bromide, calcium bromide, sodium sulfate, potassium sulfate, magnesium sulfate, ammonium sulfate, potassium nitrate, and thiocyanic acid. Examples include potassium and ammonium thiocyanate.
When the virus inactivating agent contains these inorganic salts, the protein soil around the virus can be salt-dissolved or salted out, and ethanol can be easily brought into contact with the virus.
As a result, the virus inactivation effect can be improved.
In addition, the virus inactivating agent of the present invention may contain only one kind of these inorganic salts, or may contain a plurality of kinds.
本発明のウイルス不活性化剤は、さらに凝集剤を含んでいてもよい。
凝集剤としては、ポリグルタミン酸及びその塩等が挙げられる。
凝集剤は、環境中のタンパク質汚れを凝集させることができ、タンパク質汚れをウイルスの周囲から分離させることができる。
ウイルスの周囲からタンパク質汚れが分離されると、エタノールとウイルスとが直接接触する。そのため、エタノールの作用が発揮されるのでウイルスが不活性化されることになる。
The virus inactivating agent of the present invention may further contain an aggregating agent.
Examples of the flocculant include polyglutamic acid and a salt thereof.
The flocculant can agglomerate protein soils in the environment and separate the protein soils from the surroundings of the virus.
When protein soil is separated from the virus's surroundings, ethanol and virus come into direct contact. Therefore, since the action of ethanol is exerted, the virus is inactivated.
本発明のウイルス不活性化剤は、さらに界面活性剤を含んでいてもよい。
ウイルス不活性化剤が界面活性剤を含むと、汚れ等を洗浄する洗浄剤としても用いることができる。
なお、本発明のウイルス不活性化剤では、これら界面活性剤を１種類だけ含んでいてもよく、複数種類含んでいてもよい。
The virus inactivating agent of the present invention may further contain a surfactant.
When the virus inactivating agent contains a surfactant, it can also be used as a cleaning agent for cleaning dirt and the like.
The virus inactivating agent of the present invention may contain only one kind of these surfactants or a plurality of kinds.
界面活性剤としては、脂肪酸エステル等を用いてもよい。
また、脂肪酸エステルとしては、グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル等が挙げられる。
グリセリン脂肪酸エステルとしては、モノグリセリン脂肪酸エステルであってもよく、ポリグリセリン脂肪酸エステルであってもよい。例えば、モノグリセリンカプリル酸エステル、モノグリセリンカプリン酸エステル、モノグリセリンラウリン酸エステル、ジグリセリンカプリル酸エステル、ヘキサグリセリンラウリン酸エステル、デカグリセリンラウリン酸エステル等が挙げられる。
ショ糖脂肪酸エステルとしては、ショ糖カプリン酸エステル、ショ糖ラウリン酸エステル、ショ糖ミリスチン酸エステル、ショ糖パルミチン酸エステル、ショ糖ステアリン酸エステル、ショ糖オレイン酸エステル、ショ糖べヘン酸エステル、ショ糖エルカ酸エステル等が挙げられる。
ソルビタン脂肪酸エステルとしては、ソルビタンモノ脂肪酸エステルであってもよく、ソルビタンジ脂肪酸エステルであってもよく、ソルビタントリ脂肪酸エステルであってもよい。また、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル等であってもよい。
A fatty acid ester or the like may be used as the surfactant.
Examples of the fatty acid ester include glycerin fatty acid ester, sucrose fatty acid ester, sorbitan fatty acid ester and the like.
The glycerin fatty acid ester may be a monoglycerin fatty acid ester or a polyglycerin fatty acid ester. For example, monoglycerin caprylic acid ester, monoglycerin capric acid ester, monoglycerin lauric acid ester, diglycerin caprylic acid ester, hexaglycerin lauric acid ester, decaglycerin lauric acid ester and the like can be mentioned.
Sucrose fatty acid esters include sucrose caprate, sucrose laurate, sucrose myristic ester, sucrose palmitate, sucrose stearate, sucrose oleate, sucrose behenate, Examples thereof include sucrose erucic acid ester.
The sorbitan fatty acid ester may be a sorbitan monofatty acid ester, a sorbitan difatty acid ester, or a sorbitan trifatty acid ester. Moreover, polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester etc. may be sufficient.
本発明のウイルス不活性化剤は、さらにウイルス不活性化効果を有する化合物を含んでいてもよい。
このような化合物としては、例えば、緑茶抽出物、紫茶抽出物、マキベリー抽出物、ブドウ抽出物、カンカニクジュヨウ抽出物、月見草種子抽出物、ウーロン茶抽出物、ピーナツ種皮抽出物、ビルベリー抽出物、ヒバマタ科の海藻から抽出された海藻抽出物等の天然物抽出物が挙げられる。
The virus inactivating agent of the present invention may further contain a compound having a virus inactivating effect.
Such compounds include, for example, green tea extract, purple tea extract, maqui berry extract, grape extract, citrus extract, evening primrose seed extract, oolong tea extract, peanut seed coat extract, bilberry extract And natural product extracts such as seaweed extract extracted from the seaweed of Hibarataceae.
また、本発明のウイルス不活性化剤には、上記の成分以外に保湿剤、エモリエント剤、香料、色素、陽イオン界面活性剤、増粘剤、消炎剤等を含んでいてもよい。 Further, the virus inactivating agent of the present invention may contain a moisturizer, emollient, fragrance, dye, cationic surfactant, thickener, anti-inflammatory agent and the like in addition to the above components.
本発明のウイルス不活性化剤は、インフルエンザウイルス等のエンベロープウイルスや、ノロウイルス等のノンエンベロープウイルスに対してウイルス不活性化効果を示す。
特に、本発明のウイルス不活性化剤は、ノロウイルスに対して高いウイルス不活性化効果を示す。
そのため、本発明のウイルス不活性化剤は、ノロウイルス不活性剤として使用することが望ましい。
なお、本明細書において、「ノロウイルス不活性化剤」とは、ネコカリシウイルス、マウスノロウイルス及びヒトノロウイルスからなる群から選択される少なくとも１種のウイルスに対して使用されるウイルス不活性化剤を意味する。
The virus inactivating agent of the present invention exhibits a virus inactivating effect against envelope viruses such as influenza viruses and non-enveloped viruses such as noroviruses.
In particular, the virus inactivating agent of the present invention exhibits a high virus inactivating effect on Norovirus.
Therefore, it is desirable to use the virus inactivating agent of the present invention as a norovirus inactivating agent.
In the present specification, the “norovirus inactivating agent” refers to a virus inactivating agent used for at least one virus selected from the group consisting of feline calicivirus, mouse norovirus and human norovirus. means.
本発明のウイルス不活性化剤は、ネコカリシウイルスを試験ウイルスとした下記タンパク質汚れ存在時ネコカリシウイルス感染力価測定において、作用時間１分におけるウイルス感染力価（対数）の値が、作用時間０分におけるウイルス感染力価（対数）の値より２．０以上減少していることが望ましく、４．０以上減少していることがより望ましい。
本発明のウイルス不活性化剤が、このようなウイルス不活性化効果を奏すると、カリシウイルス科ウイルスの感染を防止することができる。
In the virus inactivating agent of the present invention, the virus infectivity titer (logarithm) at an action time of 1 minute is determined as the action time in the feline calicivirus infectivity titer measurement in the presence of the following protein stain using feline calicivirus as a test virus It is desirable that the virus infection titer (logarithm) at 0 minute is reduced by 2.0 or more, more preferably 4.0 or more.
When the virus inactivating agent of the present invention exhibits such a virus inactivating effect, infection of the Caliciviridae virus can be prevented.
（タンパク質汚れ存在時ネコカリシウイルス感染力価測定）
（１）ネコカリシウイルスを、ネコ腎由来株化細胞であるＣＲＦＫ細胞（ＡＴＣＣ ＣＣＬ−９４）に感染させて細胞を培養する。
（２）次に、ネコカリシウイルスが感染したかどうかを細胞変性効果（Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ：ＣＰＥ）により確認する。
細胞変性効果を確認した後、培養細胞の凍結融解を繰り返すことにより、培養細胞を破砕する。
（３）牛肉エキス（ナカライテスク社製）０．１ｇをＯＰＴＩ−ＭＥＭ培地で溶解して１０％肉エキス液を作製し、遠心分離後の培養細胞破砕液の上清と、１０％肉エキスとを１：１の割合（容量）で混合し、ウイルス溶液とする。
（４）ウイルス不活性化剤と、ウイルス溶液とを９：１の割合（容量）で混合し、室温で１分経過後、ＯＰＴＩ−ＭＥＭ培地で１００倍希釈することにより、ウイルス不活性化剤のウイルスに対する作用を停止させる。
この工程により得られた溶液をウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液とする。
（５）ＯＰＴＩ−ＭＥＭ培地と、ウイルス溶液とを９：１の割合（容量）で混合した直後、ＯＰＴＩ−ＭＥＭ培地で１００倍希釈することにより、得られた溶液をウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液とする。
（６）ウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液、ウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液を、それぞれ、ＯＰＴＩ−ＭＥＭ培地により１０倍段階希釈する。ＣＲＦＫ細胞を培養した９６ｗｅｌｌマイクロプレートの培地を捨て、段階希釈液を１００μＬずつ加える。
（７）ウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液及びウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液の段階希釈液が加えられたＣＲＦＫ細胞を３７℃、５％ＣＯ２の条件で、４日間培養する。
（８）培養したＣＲＦＫ細胞のＣＰＥを指標にＴＣＩＤ５０（Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｏｓｅ ５０％）により各ウイルス溶液のウイルス感染力価（対数）を定量する。
（９）上記（１）〜（８）の工程を３回独立に行い、ウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間０分におけるウイルス感染力価とし、ウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値とする。
(Measurement of feline calicivirus infection titer in the presence of protein stains)
(1) CRFK cells (ATCC CCL-94), a feline kidney-derived cell line, are infected with feline calicivirus, and the cells are cultured.
(2) Next, whether or not feline calicivirus is infected is confirmed by a cytopathic effect (CPE).
After confirming the cytopathic effect, the cultured cells are disrupted by repeating freeze-thawing of the cultured cells.
(3) 0.1 g of beef extract (manufactured by Nacalai Tesque) was dissolved in OPTI-MEM medium to prepare a 10% meat extract solution, and the supernatant of the cultured cell lysate after centrifugation, 10% meat extract, Are mixed at a ratio (volume) of 1: 1 to obtain a virus solution.
(4) The virus inactivating agent and the virus solution are mixed at a ratio (volume) of 9: 1, and after 1 minute at room temperature, the virus inactivating agent is diluted 100-fold with OPTI-MEM medium. Stop the action on viruses.
The solution obtained by this step is used as a virus inactivating agent 1-minute action virus solution.
(5) Immediately after the OPTI-MEM medium and the virus solution were mixed at a ratio (volume) of 9: 1, the resulting solution was diluted 100 times with the OPTI-MEM medium, and the resulting solution was 0 minutes in the virus inactivating agent. Use a working virus solution.
(6) The virus inactivating agent 0-minute action virus solution and the virus inactivating agent 1-minute action virus solution are each diluted 10-fold in an OPTI-MEM medium. Discard the medium of the 96-well microplate in which CRFK cells were cultured, and add 100 μL of serial dilutions.
(7) CRFK cells to which a serially diluted virus solution of virus inactivator 0-minute action virus solution and virus inactivator 1-minute action virus solution are added are cultured at 37 ° C. and 5% CO 2 for 4 days. .
(8) The virus infection titer (logarithm) of each virus solution is quantified by TCID 50 (Tissue Culture Infectious Dose 50%) using CPE of the cultured CRFK cells as an index.
(9) The above steps (1) to (8) are independently carried out three times, and the average value of the virus infectivity titer calculated using the virus inactivating agent 0-minute action virus solution is determined at an action time of 0 minutes. The virus infectivity titer, and the average value of the virus infectivity calculated using the virus inactivating agent 1-minute action virus solution is taken as the value of the virus infectivity titer at the action time of 1 minute.
本発明のウイルス不活性化剤は、マウスノロウイルスを試験ウイルスとした下記タンパク質汚れ存在時マウスノロウイルス感染力価測定において、作用時間１分におけるウイルス感染力価（対数）の値が、作用時間０分におけるウイルス感染力価（対数）の値より２．０以上減少していることが望ましく、４．０以上減少していることがより望ましい。
本発明のウイルス不活性化剤が、このようなウイルス不活性化効果を奏すると、カリシウイルス科ウイルスの感染を防止することができる。
The virus inactivating agent of the present invention has a virus infectivity titer (logarithm) value of 1 minute in action time 0 minutes in the measurement of mouse norovirus infection titer in the presence of the following protein stain using mouse norovirus as a test virus. It is desirable that the virus infection titer (logarithmic value) is reduced by 2.0 or more, more preferably 4.0 or more.
When the virus inactivating agent of the present invention exhibits such a virus inactivating effect, infection of the Caliciviridae virus can be prevented.
（タンパク質汚れ存在時マウスノロウイルス感染力価測定）
（１）マウスノロウイルスを、マウスのマクロファージ由来細胞株であるＲＡＷ ２６４．７細胞（ＡＴＣＣ ＴＩＢ−７１）に感染させて細胞を培養する。
（２）次に、マウスノロウイルスが感染したかどうかを細胞変性効果（Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ：ＣＰＥ）により確認する。
細胞変性効果を確認した後、培養細胞の凍結融解を繰り返すことにより、培養細胞を破砕する。
（３）牛肉エキス（ナカライテスク社製）０．１ｇをＤＭＥＭ培地で溶解して１０％肉エキス液を作製し、遠心分離後の培養細胞破砕液の上清と、１０％肉エキスとを１：１の割合（容量）で混合し、ウイルス溶液とする。
（４）ウイルス不活性化剤と、ウイルス溶液とを９：１の割合（容量）で混合し、室温で１分経過後、１０％牛胎児血清含有ＤＭＥＭ培地で１００倍希釈することにより、ウイルス不活性化剤のウイルスに対する作用を停止させる。
この工程により得られた溶液をウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液とする。
（５）１０％牛胎児血清含有ＤＭＥＭ培地と、ウイルス溶液とを９：１の割合（容量）で混合した直後、１０％牛胎児血清含有ＤＭＥＭ培地で１００倍希釈することにより、得られた溶液をウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液とする。
（６）ウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液及びウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液を、それぞれ、１０％牛胎児血清含有ＤＭＥＭ培地により、１０倍段階希釈する。１ウェルにＲＡＷ ２６４．７細胞を５０μＬずつ分注した９６ｗｅｌｌマイクロプレートに、各段階希釈液を５０μＬずつ加える。
（７）ウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液及びウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液の段階希釈液が加えられたＲＡＷ ２６４．７細胞を３７℃、５％ＣＯ２の条件で、４日間培養する。
（８）培養したＲＡＷ ２６４．７細胞のＣＰＥを指標にＴＣＩＤ５０（Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｏｓｅ ５０％）により各ウイルス溶液のウイルス感染力価（対数）を定量する。
（９）上記（１）〜（８）の工程を３回独立に行い、ウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間０分におけるウイルス感染力価とし、ウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値とする。
(Measurement of mouse norovirus infection titer in the presence of protein stains)
(1) A mouse norovirus is infected with RAW 264.7 cells (ATCC TIB-71), which is a mouse macrophage-derived cell line, and the cells are cultured.
(2) Next, it is confirmed by cytopathic effect (CPE) whether mouse norovirus was infected.
After confirming the cytopathic effect, the cultured cells are disrupted by repeating freeze-thawing of the cultured cells.
(3) 0.1 g of beef extract (manufactured by Nacalai Tesque) is dissolved in DMEM medium to prepare a 10% meat extract solution, and the supernatant of the cultured cell lysate after centrifugation and 10% meat extract are 1 Mix at a ratio (volume) of 1 to make a virus solution.
(4) A virus inactivating agent and a virus solution are mixed at a ratio (volume) of 9: 1, and after 1 minute at room temperature, diluted with DMEM medium containing 10% fetal bovine serum 100 times. Stop the action of the inactivating agent on the virus.
The solution obtained by this step is used as a virus inactivating agent 1-minute action virus solution.
(5) Immediately after mixing the DMEM medium containing 10% fetal bovine serum and the virus solution at a ratio (volume) of 9: 1, the solution obtained by diluting 100 times with the DMEM medium containing 10% fetal bovine serum Is a virus inactivator 0 minute action virus solution.
(6) The virus inactivating agent 0-minute action virus solution and the virus inactivating agent 1-minute action virus solution are each diluted 10-fold in 10% fetal bovine serum-containing DMEM medium. 50 μL of each serial dilution is added to a 96-well microplate containing 50 μL of RAW 264.7 cells per well.
(7) RAW 264.7 cells to which a serially diluted virus solution of virus inactivator 0-minute action virus solution and virus inactivator 1-minute action virus solution were added under conditions of 37 ° C. and 5% CO 2 Incubate for days.
(8) The virus infection titer (logarithm) of each virus solution is quantified by TCID 50 (Tissue Culture Infectious Dose 50%) using CPE of cultured RAW 264.7 cells as an index.
(9) The above steps (1) to (8) are independently carried out three times, and the average value of the virus infectivity titer calculated using the virus inactivating agent 0-minute action virus solution is determined at an action time of 0 minutes. The virus infectivity titer, and the average value of the virus infectivity calculated using the virus inactivating agent 1-minute action virus solution is taken as the value of the virus infectivity titer at the action time of 1 minute.
本発明のウイルス不活性化剤は、インフルエンザウイルスを試験ウイルスとした下記タンパク質汚れなし時インフルエンザウイルス感染力価測定において、作用時間１分におけるウイルス感染力価（対数）の値が、作用時間０分におけるウイルス感染力価（対数）の値より２．０以上小さいことが望ましく、４．０以上小さいことがより望ましい。
本発明のウイルス不活性化剤が、このようなウイルス不活性化効果を奏すると、インフルエンザウイルスの感染を防止することができる。
In the virus inactivating agent of the present invention, the virus infectivity titer (logarithm) at an action time of 1 minute is 0 minutes at the action time in the measurement of the influenza virus infection titer without the following protein stain using the influenza virus as a test virus. It is preferably 2.0 or more smaller than the value of the virus infection titer (logarithm), and more preferably 4.0 or more.
When the virus inactivating agent of the present invention exhibits such a virus inactivating effect, infection with influenza virus can be prevented.
（タンパク質汚れなし時インフルエンザウイルス感染力価測定）
（１）インフルエンザウイルスを、イヌ腎臓尿細管上皮細胞由来株化細胞であるＭＤＣＫ細胞に感染させて細胞を培養する。
（２）次に、インフルエンザウイルスが感染したかどうかを細胞変性効果（Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ：ＣＰＥ）により確認する。
細胞変性効果を確認した後、培養細胞の凍結融解を繰り返すことにより、培養細胞を破砕する。
（３）次に、得られた培養細胞破砕液を遠心分離し、上清をウイルス溶液とする。
（４）ウイルス不活性化剤と、ウイルス溶液とを９：１の割合（容量）で混合し、室温で１分経過後、２μｇ／ｍＬトリプシン（牛脾臓由来結晶）を含むＥＭＥＭ培地（以下、トリプシン含有ＥＭＥＭ培地）で１００倍希釈することにより、ウイルス不活性化剤のウイルスに対する作用を停止させる。
この工程により得られた溶液をウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液とする。
（５）トリプシン含有ＥＭＥＭ培地と、ウイルス溶液とを９：１の割合（容量）で混合した直後、トリプシン含有ＥＭＥＭ培地で１００倍希釈することにより、得られた溶液をウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液とする。
（６）ウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液、ウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液を、それぞれ、トリプシン含有ＥＭＥＭ培地により１０倍段階希釈した。ＭＤＣＫ細胞を培養した９６ｗｅｌｌマイクロプレートの培地を捨て、段階希釈液を１００μＬずつ加えた。
（７）ウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液及びウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液の段階希釈液が加えられたＭＤＣＫ細胞を３７℃、５％ＣＯ２の条件で、４日間培養する。
（８）培養したＭＤＣＫ細胞のＣＰＥを指標にＴＣＩＤ５０（Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｏｓｅ ５０％）により各ウイルス溶液のウイルス感染力価（対数）を定量する。
（９）上記（１）〜（８）の工程を３回独立に行い、ウイルス不活性化剤０分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間０分におけるウイルス感染力価とし、ウイルス不活性化剤１分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値とする。
(Influenza virus infection titer measurement without protein contamination)
(1) Infect influenza virus with MDCK cells, which are canine kidney tubular epithelial cell-derived cell lines, and culture the cells.
(2) Next, whether or not influenza virus is infected is confirmed by a cytopathic effect (CPE).
After confirming the cytopathic effect, the cultured cells are disrupted by repeating freeze-thawing of the cultured cells.
(3) Next, the obtained cultured cell lysate is centrifuged, and the supernatant is used as a virus solution.
(4) A virus inactivating agent and a virus solution are mixed at a ratio (volume) of 9: 1, and after 1 minute at room temperature, an EMEM medium containing 2 μg / mL trypsin (crystals derived from bovine spleen) (hereinafter, By diluting 100 times with trypsin-containing EMEM medium), the action of the virus inactivating agent on the virus is stopped.
The solution obtained by this step is used as a virus inactivating agent 1-minute action virus solution.
(5) Immediately after mixing the trypsin-containing EMEM medium and the virus solution at a ratio (volume) of 9: 1, the solution obtained by diluting 100 times with the trypsin-containing EMEM medium was used for 0 minutes of the virus inactivating agent. Use a working virus solution.
(6) The virus inactivating agent 0-minute action virus solution and the virus inactivating agent 1-minute action virus solution were each diluted 10-fold in a trypsin-containing EMEM medium. The medium of the 96-well microplate in which MDCK cells were cultured was discarded, and 100 μL of serial dilution was added.
(7) MDCK cells to which a serially diluted virus solution of virus inactivator 0-minute action virus solution and virus inactivator 1-minute action virus solution are added are cultured at 37 ° C. and 5% CO 2 for 4 days. .
(8) The virus infection titer (logarithm) of each virus solution is quantified by TCID 50 (Tissue Culture Infectious Dose 50%) using CPE of cultured MDCK cells as an index.
(9) The above steps (1) to (8) are independently carried out three times, and the average value of the virus infectivity titer calculated using the virus inactivating agent 0-minute action virus solution is determined at an action time of 0 minutes. The virus infectivity titer, and the average value of the virus infectivity calculated using the virus inactivating agent 1-minute action virus solution is taken as the value of the virus infectivity titer at the action time of 1 minute.
次に、本発明のウイルス不活性化剤、及び、本発明のノロウイルス不活性化剤の用途を説明する。
本発明のウイルス不活性化剤、又は、本発明のノロウイルス不活性化剤は、手洗い液、中性洗剤、消臭剤に加えてもよい。
本発明のウイルス不活性化剤、又は、本発明のノロウイルス不活性化剤を含む手洗い液、洗浄剤、消臭剤等は、ポンプボトルやスプレーボトルに詰められていてもよい。
Next, the use of the virus inactivating agent of the present invention and the norovirus inactivating agent of the present invention will be described.
The virus inactivating agent of the present invention or the norovirus inactivating agent of the present invention may be added to a hand washing solution, a neutral detergent, and a deodorant.
The virus inactivating agent of the present invention or the hand washing liquid, cleaning agent, deodorant and the like containing the norovirus inactivating agent of the present invention may be packed in a pump bottle or a spray bottle.
また衛生資材に用いてもよい。このような衛生資材は、本発明の衛生資材でもある。 Moreover, you may use for a sanitary material. Such a sanitary material is also the sanitary material of the present invention.
本発明の衛生資材は、上記本発明のウイルス不活性化剤、又は、上記本発明のノロウイルス不活性化剤を含むことを特徴とする。
本発明のウイルス不活性化剤は、ウイルス不活性化効果を奏するので、このようなウイルス不活性化剤を含む衛生資材を用いることにより、ウイルス感染を防ぐことができる。
The sanitary material of the present invention includes the virus inactivating agent of the present invention or the norovirus inactivating agent of the present invention.
Since the virus inactivating agent of the present invention has a virus inactivating effect, viral infection can be prevented by using a sanitary material containing such a virus inactivating agent.
本発明の衛生資材は、特に限定されるものではないが、例えば、マスク、使い捨て手袋、使い捨て布巾、ティッシュペーパー、ウエットティッシュ等があげられる。 The sanitary material of the present invention is not particularly limited, and examples thereof include a mask, disposable gloves, disposable cloths, tissue paper, and wet tissue.
以下に本発明をより具体的に説明する実施例を示すが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。 Examples for more specifically explaining the present invention are shown below, but the present invention is not limited to these examples.
（実施例１）
エタノールが５０．００重量％、アルギニンが０．７５重量％、炭酸水素ナトリウムが０．５０重量％、クエン酸が０．５０重量％、グリセリン脂肪酸エステルが０．１０重量％、ショ糖脂肪酸エステルが０．１０重量％となるようにこれら化合物と、水とを混合して実施例１に係るウイルス不活性化剤を作製した。
Example 1
50.00 wt% ethanol, 0.75 wt% arginine, 0.50 wt% sodium bicarbonate, 0.50 wt% citric acid, 0.10 wt% glycerin fatty acid ester, sucrose fatty acid ester These compounds and water were mixed so that it might become 0.10 weight%, and the virus inactivating agent based on Example 1 was produced.
（実施例２〜１８）及び（比較例１〜７）
ウイルス不活性化剤の材料の種類及び割合を表１及び表２に示すように変更した以外は、実施例１と同様に実施例２〜１８及び比較例１〜７に係るウイルス不活性化剤を作製した。
なお、表１中「％」は重量％を意味する。
(Examples 2 to 18) and (Comparative Examples 1 to 7)
The virus inactivating agent according to Examples 2 to 18 and Comparative Examples 1 to 7 as in Example 1 except that the type and ratio of the virus inactivating agent were changed as shown in Tables 1 and 2. Was made.
In Table 1, “%” means% by weight.
（タンパク質汚れ存在時ネコカリシウイルス感染力価測定）
ウイルス不活性化剤として、実施例１〜１７及び比較例１〜６に係るウイルス不活性化剤を用い、上記（タンパク質汚れ存在時ネコカリシウイルス感染力価測定）の方法に基づき、作用時間０分におけるウイルス感染力価の値と、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値との差を算出して評価した。評価基準は以下の通りである。結果を表１及び表２に示す。
Ａ：４．０以上の感染力価の減少（充分な効果あり）
Ｂ：２．０以上、４．０未満の感染力価の減少（効果あり）
Ｃ：２．０未満の感染力価の減少（効果なし）
(Measurement of feline calicivirus infection titer in the presence of protein stains)
As the virus inactivating agent, the virus inactivating agents according to Examples 1 to 17 and Comparative Examples 1 to 6 were used, and the action time was 0 based on the above method (measurement of feline calicivirus infectious titer when protein soil was present). The difference between the value of the virus infection titer in minutes and the value of the virus infection titer in action time of 1 minute was calculated and evaluated. The evaluation criteria are as follows. The results are shown in Tables 1 and 2.
A: Decrease in infectious titer of 4.0 or more (sufficient effect)
B: Decrease in infectious titer of 2.0 or more and less than 4.0 (effective)
C: Decrease in infectious titer less than 2.0 (no effect)
（タンパク質汚れなし時ネコカリシウイルス感染力価測定）
ウイルス不活性化剤として、実施例１〜１７及び比較例１〜６に係るウイルス不活性化剤を用い、上記（タンパク質汚れ存在時ネコカリシウイルス感染力価測定）の（３）工程において、１０％肉エキスを混合せず、遠心分離後の培養細胞破砕液の上清をウイルス溶液とした以外は、上記（タンパク質汚れ存在時ネコカリシウイルス感染力価測定）と同様にタンパク質汚れなし時ネコカリシウイルス感染力価測定を行った。
作用時間０分におけるウイルス感染力価の値と、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値との差を算出して評価した。評価基準は上記（タンパク質汚れ存在時ネコカリシウイルス感染力価測定）の評価基準と同様である。結果を表１及び表２に示す。
(Measurement of feline calicivirus infection titer without protein stain)
As the virus inactivating agent, the virus inactivating agents according to Examples 1 to 17 and Comparative Examples 1 to 6 were used, and in the above (3) step (measurement of feline calicivirus infectious titer when protein soil was present), 10 Feline calici when there is no protein stain in the same manner as described above (measurement of feline calicivirus infectious titer when protein stain is present) except that the supernatant of the cultured cell lysate after centrifugation is not mixed and the virus solution is used. Viral infection titer was measured.
The difference between the value of the virus infection titer at the action time of 0 minutes and the value of the virus infection titer at the action time of 1 minute was calculated and evaluated. The evaluation criteria are the same as the evaluation criteria described above (measurement of feline calicivirus infectious titer when protein soil is present). The results are shown in Tables 1 and 2.
（タンパク質汚れ存在時マウスノロウイルス感染力価測定）
ウイルス不活性化剤として、実施例１〜１７及び比較例１〜６に係るウイルス不活性化剤を用い、上記（タンパク質汚れ存在時マウスノロウイルス感染力価測定）の方法に基づき、作用時間０分におけるウイルス感染力価の値と、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値との差を算出して評価した。評価基準は以下の通りである。結果を表１及び表２に示す。
Ａ：４．０以上の感染力価の減少（充分な効果あり）
Ｂ：２．０以上、４．０未満の感染力価の減少（効果あり）
Ｃ：２．０未満の感染力価の減少（効果なし）
(Measurement of mouse norovirus infection titer in the presence of protein stains)
Using the virus inactivating agent according to Examples 1 to 17 and Comparative Examples 1 to 6 as a virus inactivating agent, based on the above method (measuring mouse norovirus infectious titer when protein soil is present), the action time is 0 minutes. The difference between the value of the virus infection titer in and the value of the virus infection titer at 1 minute of action time was calculated and evaluated. The evaluation criteria are as follows. The results are shown in Tables 1 and 2.
A: Decrease in infectious titer of 4.0 or more (sufficient effect)
B: Decrease in infectious titer of 2.0 or more and less than 4.0 (effective)
C: Decrease in infectious titer less than 2.0 (no effect)
（タンパク質汚れなし時マウスノロウイルス感染力価測定）
ウイルス不活性化剤として、実施例１〜１７及び比較例１〜６に係るウイルス不活性化剤を用い、上記（タンパク質汚れ存在時マウスノロウイルス感染力価測定）の（３）工程において、１０％肉エキスを混合せず、遠心分離後の培養細胞破砕液の上清をウイルス溶液とした以外は、上記（タンパク質汚れ存在時マウスノロウイルス感染力価測定）と同様にタンパク質汚れなし時マウスノロウイルス感染力価測定を行った。
作用時間０分におけるウイルス感染力価の値と、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値との差を算出して評価した。評価基準は上記（タンパク質汚れ存在時マウスノロウイルス感染力価測定）の評価基準と同様である。結果を表１及び表２に示す。
(Measurement of mouse norovirus infectious titer without protein stain)
As the virus inactivating agent, the virus inactivating agent according to Examples 1 to 17 and Comparative Examples 1 to 6 was used. Mouse norovirus infectivity in the absence of protein stains as described above (measurement of mouse norovirus infectivity titer in the presence of protein stains), except that the meat extract was not mixed and the supernatant of the cultured cell disrupted solution after centrifugation was changed to a virus solution. The value was measured.
The difference between the value of the virus infection titer at the action time of 0 minutes and the value of the virus infection titer at the action time of 1 minute was calculated and evaluated. The evaluation criteria are the same as the evaluation criteria described above (measurement of mouse norovirus infectious titer when protein soil is present). The results are shown in Tables 1 and 2.
（タンパク質汚れなし時インフルエンザウイルス感染力価測定）
ウイルス不活性化剤として、実施例１〜１８及び比較例１〜７に係るウイルス不活性化剤を用い、上記（タンパク質汚れなし時インフルエンザウイルス感染力価測定）の方法に基づき、作用時間０分におけるウイルス感染力価の値と、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値との差を算出して評価した。評価基準は以下の通りである。結果を表１及び表２に示す。
Ａ：４．０以上の感染力価の減少（充分な効果あり）
Ｂ：２．０以上、４．０未満の感染力価の減少（効果あり）
Ｃ：２．０未満の感染力価の減少（効果なし）
(Influenza virus infection titer measurement without protein contamination)
Using the virus inactivating agent according to Examples 1 to 18 and Comparative Examples 1 to 7 as a virus inactivating agent, based on the above method (measurement of influenza virus infectivity titer without protein stain), an action time of 0 minutes The difference between the value of the virus infectious titer in and the value of the virus infectious titer after 1 minute of action was calculated and evaluated. The evaluation criteria are as follows. The results are shown in Tables 1 and 2.
A: Decrease in infectious titer of 4.0 or more (sufficient effect)
B: Decrease in infectious titer of 2.0 or more and less than 4.0 (effective)
C: Decrease in infectious titer less than 2.0 (no effect)
（溶解性試験及び低温安定性）
アルカリ剤として、炭酸塩又は炭酸水素塩が用いられた実施例１〜４、６、７、９〜１１及び１４〜１６に係るウイルス不活性化剤、並びに、比較例１及び２に係るウイルス不活性化剤について、溶解性試験及び低温安定性試験を行った。これらの評価手順は以下の通りである。結果を表３に示す。
溶解性試験：各ウイルス不活性化剤の材料を混合して、２０℃、５００ｒｐｍで５分攪拌後、各ウイルス不活性化剤の状態を目視で観察した。評価基準は以下の通りである。
Ａ：完全にアルカリ剤が溶解していた。
Ｂ：アルカリ剤が完全に溶解しておらず、底に残留していた。
低温安定性試験：各ウイルス不活性化剤を調合し、−７℃、２４時間静置した後、各ウイルス不活性化剤の状態を目視で観察した。評価基準は以下の通りである。
Ａ：完全にアルカリ剤が溶解していた。
Ｂ：アルカリ剤が析出していた。
(Solubility test and low temperature stability)
Virus inactivating agents according to Examples 1-4, 6, 7, 9-11 and 14-16, in which carbonates or hydrogen carbonates are used as alkaline agents, and virus inactivation according to Comparative Examples 1 and 2 The activator was subjected to a solubility test and a low temperature stability test. These evaluation procedures are as follows. The results are shown in Table 3.
Solubility test: The ingredients of each virus inactivating agent were mixed and stirred at 20 ° C. and 500 rpm for 5 minutes, and then the state of each virus inactivating agent was visually observed. The evaluation criteria are as follows.
A: The alkali agent was completely dissolved.
B: The alkali agent was not completely dissolved and remained at the bottom.
Low temperature stability test: Each virus inactivating agent was prepared and allowed to stand at −7 ° C. for 24 hours, and then the state of each virus inactivating agent was visually observed. The evaluation criteria are as follows.
A: The alkali agent was completely dissolved.
B: Alkaline agent was precipitated.
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