JP6053241B1 - Disinfectant and sanitary materials - Google Patents
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Abstract
【課題】高いウイルス不活性化作用を奏する消毒液を提供する。【解決手段】フロログルシノール重合体を含む海藻抽出物と、エタノールとを含むことを特徴とする消毒液。【選択図】 なしDisclosed is a disinfectant that exhibits a high virus inactivating effect. A disinfecting solution comprising a seaweed extract containing a phloroglucinol polymer and ethanol. [Selection figure] None
Description
本発明は、消毒液及び衛生資材に関する。 The present invention relates to a disinfectant and a sanitary material.
近年、ノロウイルスによる感染性胃腸炎あるいは食中毒の発生が一年を通じて多発しており、特に１１〜３月が発生のピークとなっている。ノロウイルスは、カリシウイルス科、ノロウイルス属に分類されるエンベローブを持たないＲＮＡウイルス（以下、「ノロウイルス等」と記載する）であり、アルコール（エタノール、イソプロパノール等）、熱、酸性（胃酸等）、又は、乾燥等に対して強い抵抗力を有する。潜伏期間は１〜２日であると考えられており、嘔気、嘔吐、下痢の主症状が出るが、腹痛、頭痛、発熱、悪寒、筋痛、咽頭痛、倦怠感等を伴うこともある。 In recent years, the occurrence of infectious gastroenteritis or food poisoning due to norovirus has occurred frequently throughout the year, and the peak of the outbreak is in particular from 11 to March. Norovirus is an RNA virus (hereinafter referred to as “Norovirus etc.”) that does not have an envelope classified into the Caliciviridae and Norovirus genus, and alcohol (ethanol, isopropanol etc.), heat, acid (gastric acid etc.), or Has strong resistance to drying and the like. The incubation period is considered to be 1-2 days, and the main symptoms are nausea, vomiting, and diarrhea, but may also be accompanied by abdominal pain, headache, fever, chills, myalgia, sore throat, malaise, and the like.
ノロウイルス等の感染経路の一つとして経口感染が知られており、ノロウイルス等に汚染された食物や水等を経口摂取することにより感染が成立する。
そのため、飲食店、給食施設、工場など食品を調理加工する場においては、食物や水等がノロウイルス等に汚染されないようにすることが求められている。
Oral infection is known as one of the infection routes of norovirus and the like, and infection is established by ingesting food or water contaminated with norovirus or the like.
Therefore, in places where food is cooked and processed, such as restaurants, school facilities, and factories, it is required to prevent food, water, and the like from being contaminated by norovirus.
ノロウイルス等による汚染を防ぐ手段として、食物、食器、調理台、調理器具等のノロウイルスを不活性化する方法がある。
ノロウイルス等を完全に不活性化させる方法としては、加熱処理が知られている。
しかし、飲食店、給食施設、工場など食品を調理加工する場において、常に、食器、調理台、調理器具等を加熱処理することは現実的でなく、食物の種類によっては加熱処理により風味が損なわれてしまう場合がある。つまり、加熱処理は、飲食店、給食施設、工場など食品を調理加工する場において、ノロウイルス等を不活性化する方法として適していなかった。
As a means for preventing contamination with norovirus or the like, there is a method for inactivating norovirus such as food, tableware, cooking tables, and cooking utensils.
Heat treatment is known as a method for completely inactivating norovirus and the like.
However, it is not practical to always heat-treat dishes, kitchen tables, utensils, etc. in places where food is cooked and processed, such as restaurants, lunch facilities, and factories, and depending on the type of food, the flavor is impaired by the heat treatment. There is a case that it will be. That is, heat treatment has not been suitable as a method for inactivating norovirus and the like in food processing places such as restaurants, school lunch facilities, and factories.
また、ノロウイルス等を不活性化させる方法として、塩素系漂白剤（次亜塩素酸ナトリウム等）を用いる方法も知られている。しかし、塩素系漂白剤は、金属に対する腐食作用、皮膚等に対する刺激作用、衣類に対する漂白作用等がある。そのため、その使用が制限されるという欠点があり、特に、人体に対する安全性への配慮から作業者の手指、食器、調理台、調理器具等にこれらの薬剤類を用いることは適当とはいえず、まして食物に直接触れさせることも適当とはいえなかった。
そのため、人体に対し安全なノロウイルス等を不活性化できる方法が望まれていた。
As a method for inactivating norovirus or the like, a method using a chlorine bleach (such as sodium hypochlorite) is also known. However, chlorine bleach has a corrosive action on metals, an irritating action on skin, etc., and a bleaching action on clothes. Therefore, there is a drawback that its use is limited. In particular, it is not appropriate to use these chemicals for workers' fingers, tableware, cooking tables, cooking utensils, etc. in consideration of safety to the human body. Moreover, it was not appropriate to let food come into direct contact.
Therefore, a method capable of inactivating norovirus and the like that are safe for the human body has been desired.
人体に対し安全なノロウイルス等を不活性化する方法として、食物由来のウイルス不活性化物質を使用する方法が検討されてきた。
このような食物由来のウイルス不活性化物質として、特許文献１には、タンニンを含有するカキノキ属の植物の抽出物が開示されている。
As a method for inactivating noroviruses and the like that are safe for the human body, methods using food-derived virus inactivating substances have been studied.
As such a food-derived virus-inactivating substance, Patent Document 1 discloses an extract of a plant of the genus Oyster that contains tannin.
特許文献１には、タンニンを含有するカキノキ属の植物の抽出物を、エタノールと混合しした組成物とし、この組成物を用いることによりノロウイルス等を不活性化できることが示されている。
しかし、この組成物のノロウイルス等の不活性化作用は充分といえず、ノロウイルス等の不活性化作用がさらに高い食物由来のウイルス不活性化物質を発見すること、及び、そのウイルス不活性化物質を用いた消毒液の開発が望まれていた。
Patent Document 1 discloses that an extract of a plant belonging to the genus Oyster that contains tannin is mixed with ethanol to use a composition, which can inactivate norovirus and the like.
However, the inactivation action of norovirus and the like of this composition is not sufficient, the discovery of a food-derived virus inactivation substance having a higher inactivation action such as norovirus, and the virus inactivation substance The development of a disinfectant solution using a soot was desired.
本発明は、上記問題点を鑑みてなされた発明であり、本発明の目的は、高いウイルス不活性化作用を奏する消毒液を提供することである。 The present invention has been made in view of the above-mentioned problems, and an object of the present invention is to provide a disinfecting solution that exhibits a high virus inactivating action.
本発明者らは、７０種以上の組成物をスクリーニングした結果、フロログルシノール重合体を含む海藻抽出物にウイルス不活性化作用があることを見出し、本発明を完成させた。 As a result of screening 70 or more kinds of compositions, the present inventors have found that a seaweed extract containing a phloroglucinol polymer has a virus inactivating action, and completed the present invention.
すなわち、本発明の消毒液は、フロログルシノール重合体を含む海藻抽出物と、エタノールとを含むことを特徴とする。 That is, the disinfecting solution of the present invention includes a seaweed extract containing a phloroglucinol polymer and ethanol.
本発明の消毒液はフロログルシノール重合体を含む海藻抽出物を含む。
このフロログルシノール重合体を含む海藻抽出物はウイルス不活性化作用を奏する。
ウイルス不活性化作用の原理は、海藻抽出物に含まれるフロログルシノール重合体のウイルス粒子を凝集させる作用により、ウイルスの感染力がなくなることと考えられる。
このような原理により、種々のウイルスを不活性化することができる。
The disinfecting solution of the present invention contains a seaweed extract containing a phloroglucinol polymer.
The seaweed extract containing this phloroglucinol polymer exhibits a virus inactivating action.
The principle of the virus inactivating action is considered to be that the infectivity of the virus is lost by the action of aggregating the phloroglucinol polymer virus particles contained in the seaweed extract.
By such a principle, various viruses can be inactivated.
本発明の消毒液はエタノールを含む。
上記海藻抽出物と、エタノールとを組み合わせることにより、海藻抽出物のウイルス不活性化作用と、エタノールによるウイルス不活性化作用とが相乗作用し、ウイルス不活性化作用が向上する。
そのため、本発明の消毒液は、好適にウイルスを不活性化することができる。
また、一般的に消毒液は、タンパク質汚れや油脂汚れ等の汚れがある環境下で使用される。このような汚れは、ウイルスの不活性化作用を抑制する場合がある。
しかし、本発明の消毒液では、上記の通り、海藻抽出物と、エタノールとの両方を含むのでウイルス不活性化作用が向上している。そのため、タンパク質汚れや油脂汚れ等の汚れがあったとしても、充分なウイルス不活性化作用を奏する。
また、本発明の消毒液にはエタノールが含まれているので、菌等の微生物に対しても抗菌活性を示す。
The disinfecting solution of the present invention contains ethanol.
By combining the seaweed extract and ethanol, the virus inactivating action of the seaweed extract and the virus inactivating action of ethanol synergize, and the virus inactivating action is improved.
Therefore, the disinfecting solution of the present invention can inactivate the virus suitably.
In general, the disinfectant is used in an environment where there is dirt such as protein dirt or oily dirt. Such dirt may suppress the inactivation action of the virus.
However, since the disinfecting solution of the present invention contains both the seaweed extract and ethanol as described above, the virus inactivating action is improved. Therefore, even if there is dirt such as protein dirt or oily dirt, it exhibits a sufficient virus inactivating action.
In addition, since the disinfecting solution of the present invention contains ethanol, it exhibits antibacterial activity against microorganisms such as bacteria.
本発明の消毒液は、エンベロープウイルス及び／又はノンエンベロープウイルスを不活性化することができる。
また、本発明の消毒液は、カリシウイルス科ウイルスに対して高いウイルス不活性化作用を示し、ベシウイルス属ウイルス及び／又はノロウイルス属ウイルスに対してより高いウイルス不活性化作用を示し、ネコカリシウイルス、マウスノロウイルス及びヒトノロウイルスからなる群から選択される少なくとも１種のウイルスに対して特に高いウイルス不活性化作用を示す。
The disinfecting solution of the present invention can inactivate enveloped viruses and / or non-enveloped viruses.
In addition, the disinfectant solution of the present invention exhibits a high virus inactivating action against Caliciviridae viruses, and a higher virus inactivating action against Besivirus and / or Norovirus viruses. It exhibits a particularly high virus inactivating action against at least one virus selected from the group consisting of viruses, murine noroviruses and human noroviruses.
本発明の消毒液では、上記消毒液中の上記海藻抽出物の割合は、０．０００１〜５．０重量％であることが望ましい。
消毒液中の海藻抽出物の割合が、０．０００１重量％未満であると、充分なウイルス不活性化作用を奏しにくくなる。
消毒液中の海藻抽出物の割合が、５．０重量％を超えると、海藻抽出物によるウイルス不活性化作用が上限に近づき経済的でない。
In the disinfecting solution of the present invention, the ratio of the seaweed extract in the disinfecting solution is preferably 0.0001 to 5.0% by weight.
When the proportion of the seaweed extract in the disinfectant is less than 0.0001% by weight, it becomes difficult to achieve a sufficient virus inactivating action.
When the ratio of the seaweed extract in the disinfectant solution exceeds 5.0% by weight, the virus inactivation action by the seaweed extract approaches the upper limit and is not economical.
本発明の消毒液では、上記海藻抽出物は、ヒバマタ科の海藻から抽出された海藻抽出物であることが望ましく、アスコフィラム・ノドサムから抽出された海藻抽出物であることがより望ましい。
これらの海藻は食用として用いられているので、これらの海藻から抽出された海藻抽出物は、人体に対し安全であると考えられる。
In the disinfecting solution of the present invention, the seaweed extract is preferably a seaweed extract extracted from a seaweed belonging to the family Hibamatidae, and more preferably a seaweed extract extracted from Ascophilum nodsum.
Since these seaweeds are used for food, seaweed extracts extracted from these seaweeds are considered safe for the human body.
本発明の消毒液では、上記フロログルシノール重合体は、フロログルシノールが２分子以上重合してなる化合物であることが望ましい。 In the disinfecting solution of the present invention, the phloroglucinol polymer is preferably a compound obtained by polymerizing two or more molecules of phloroglucinol.
本発明の消毒液では、上記フロログルシノール重合体の平均分子量は１，０００以上であることが望ましい。 In the disinfecting solution of the present invention, the average molecular weight of the phloroglucinol polymer is desirably 1,000 or more.
本発明の消毒液では、上記消毒液中の上記エタノールの割合は、８．０５〜８５．７０重量％であることが望ましい。
消毒液中のエタノールの割合が８．０５重量％未満であると、エタノールの割合が少ないので、エタノールが含まれることによるウイルス不活性化作用が発揮されにくくなる。
消毒液中のエタノールの割合が８５．７０重量％を超えると、消毒液中のエタノールの濃度が高すぎ、引火等の危険性が高くなる。
In the disinfecting solution of the present invention, the proportion of the ethanol in the disinfecting solution is desirably 8.05 to 85.70% by weight.
If the proportion of ethanol in the disinfectant solution is less than 8.05% by weight, the proportion of ethanol is small, so that the virus inactivating action due to the inclusion of ethanol is hardly exhibited.
If the proportion of ethanol in the disinfecting solution exceeds 85.70% by weight, the concentration of ethanol in the disinfecting solution is too high, and the risk of ignition or the like increases.
本発明の消毒液は、ｐＨが２．０〜９．０であることが望ましい。 The disinfecting solution of the present invention preferably has a pH of 2.0 to 9.0.
本発明の衛生資材は、上記本発明の消毒液を含むことを特徴とする。 The sanitary material of the present invention includes the disinfectant solution of the present invention.
本発明の消毒液は、ウイルス不活性化作用を奏するので、このような消毒液を含む衛生資材を用いることにより、ウイルス感染を防ぐことができる。 Since the disinfecting solution of the present invention exerts a virus inactivating action, virus infection can be prevented by using a sanitary material containing such a disinfecting solution.
本発明の消毒液は、高いウイルス不活性化作用を奏する。 The disinfecting solution of the present invention has a high virus inactivating effect.
以下、本発明の消毒液について具体的な実施形態を示しながら説明する。しかしながら、本発明は、以下の実施形態に限定されるものではなく、本発明の要旨を変更しない範囲において適宜変更して適用することができる。 Hereinafter, the disinfecting solution of the present invention will be described with reference to specific embodiments. However, the present invention is not limited to the following embodiments, and can be applied with appropriate modifications without departing from the scope of the present invention.
本発明の消毒液は、フロログルシノール重合体を含む海藻抽出物と、エタノールとを含むことを特徴とする。 The disinfecting solution of the present invention includes a seaweed extract containing a phloroglucinol polymer and ethanol.
本発明の消毒液はフロログルシノール重合体を含む海藻抽出物を含む。
このフロログルシノール重合体を含む海藻抽出物はウイルス不活性化作用を奏する。
ウイルス不活性化作用の原理は、海藻抽出物に含まれるフロログルシノール重合体のウイルス粒子を凝集させる作用により、ウイルスの感染力がなくなることと考えられる。さらに重合度が大きいほど、ウイルス凝集能が高く、不活性化が優れると考えられる。
このような原理により、種々のウイルスを不活性化することができる。
The disinfecting solution of the present invention contains a seaweed extract containing a phloroglucinol polymer.
The seaweed extract containing this phloroglucinol polymer exhibits a virus inactivating action.
The principle of the virus inactivating action is considered to be that the infectivity of the virus is lost by the action of aggregating the phloroglucinol polymer virus particles contained in the seaweed extract. Furthermore, it is considered that the greater the degree of polymerization, the higher the virus aggregation ability and the better the inactivation.
By such a principle, various viruses can be inactivated.
また、上記フロログルシノール重合体を含む海藻抽出物は、エンベロープウイルス及び／又はノンエンベロープウイルスを不活性化するのに有用である。特に、カリシウイルス科ウイルスに対して高いウイルス不活性化作用を示し、ベシウイルス属ウイルス及び／又はノロウイルス属ウイルスに対してより高いウイルス不活性化作用を示し、ネコカリシウイルス、マウスノロウイルス及びヒトノロウイルスからなる群から選択される少なくとも１種のウイルスに対して特に高いウイルス不活性化作用を示す。 The seaweed extract containing the phloroglucinol polymer is useful for inactivating envelope viruses and / or non-enveloped viruses. In particular, it exhibits a high virus inactivating action against Caliciviridae viruses, a higher virus inactivating action against Besivirus and / or Norovirus viruses, feline calicivirus, mouse norovirus and human norovirus It exhibits a particularly high virus inactivating action against at least one virus selected from the group consisting of:
フロログルシノール重合体を含む海藻抽出物としては、ヒバマタ科の海藻から抽出された海藻抽出物であることが望ましく、アスコフィラム・ノドサム（別名：アルギット）から抽出された海藻抽出物であることがより望ましい。
これらの海藻は食用として用いられているので、これらの海藻から抽出された海藻抽出物は、人体に対し安全であると考えられる。さらに、クロメ、アラメ、カジメ等から抽出される海藻抽出物と比べて重合度が高く、生体内の機能性も確認されている。
The seaweed extract containing a phloroglucinol polymer is preferably a seaweed extract extracted from a seaweed of the family Hibamatidae, and more preferably a seaweed extract extracted from Ascofilum nodsum (aka: Argit). desirable.
Since these seaweeds are used for food, seaweed extracts extracted from these seaweeds are considered safe for the human body. Furthermore, the degree of polymerization is higher than that of seaweed extracts extracted from black seaweed, arame, cajime, etc., and the in vivo functionality has also been confirmed.
フロログルシノールとは、下記化学式（１）で示される化合物であり、本発明の消毒液におけるフロログルシノール重合体とは、フロログルシノールの１位、３位及び５位のヒドロキシル基のうち少なくとも１種のヒドロキシル基を介して複数のフロログルシノールが重合した化合物のことを意味する。
フロログルシノール重合体の構造は、直鎖構造であってもよく、分岐構造を有していてもよく、複数のフロログルシノールが環状に繋がった構造を有していてもよい。
Phloroglucinol is a compound represented by the following chemical formula (1), and the phloroglucinol polymer in the disinfecting solution of the present invention is at least one of hydroxyl groups at positions 1, 3, and 5 of phloroglucinol. It means a compound in which a plurality of phloroglucinols are polymerized through one kind of hydroxyl group.
The structure of the phloroglucinol polymer may be a straight chain structure, may have a branched structure, or may have a structure in which a plurality of phloroglucinols are linked in a cyclic manner.
本発明の消毒液において、フロログルシノール重合体は、フロログルシノールが２分子以上重合してなる化合物であることが望ましい。
フロログルシノールの重合数は、７分子以上であることがより望ましく、１０分子以上であることがさらに望ましく、２０分子以上であることがよりさらに望ましく、５０分子以上であることが特に望ましい。
また、フロログルシノールの重合数は、１０００分子以下であることが望ましく、５００分子以下であることがより望ましい。
In the disinfecting solution of the present invention, the phloroglucinol polymer is preferably a compound obtained by polymerizing two or more molecules of phloroglucinol.
The number of polymerizations of phloroglucinol is more preferably 7 or more, further preferably 10 or more, still more preferably 20 or more, and particularly preferably 50 or more.
Further, the polymerization number of phloroglucinol is desirably 1000 molecules or less, and more desirably 500 molecules or less.
また、本発明の消毒液において、フロログルシノール重合体の平均分子量が１，０００以上であることが望ましく、１，０００〜１００，０００であることがより望ましい。 In the disinfecting solution of the present invention, the average molecular weight of the phloroglucinol polymer is preferably 1,000 or more, and more preferably 1,000 to 100,000.
本発明の消毒液では、上記消毒液中の上記海藻抽出物の割合は、０．０００１〜５．０重量％であることが望ましく、０．００１〜３．０重量％であることがより望ましく、０．０１〜１．０重量％であることがさらに望ましい。
消毒液中の海藻抽出物の割合が、０．０００１重量％未満であると、充分なウイルス不活性化作用を奏しにくくなる。
消毒液中の海藻抽出物の割合が、５．０重量％を超えると、海藻抽出物によるウイルス不活性化作用が上限に近づき経済的でない。
In the disinfecting solution of the present invention, the ratio of the seaweed extract in the disinfecting solution is preferably 0.0001 to 5.0% by weight, and more preferably 0.001 to 3.0% by weight. More preferably, the content is 0.01 to 1.0% by weight.
When the proportion of the seaweed extract in the disinfectant is less than 0.0001% by weight, it becomes difficult to achieve a sufficient virus inactivating action.
When the ratio of the seaweed extract in the disinfectant solution exceeds 5.0% by weight, the virus inactivation action by the seaweed extract approaches the upper limit and is not economical.
本発明の消毒液はエタノールを含む。
上記海藻抽出物と、エタノールとを組み合わせることにより、海藻抽出物のウイルス不活性化作用と、エタノールによるウイルス不活性化作用とが相乗作用し、ウイルス不活性化作用が向上する。
そのため、本発明の消毒液は、好適にウイルスを不活性化することができる。
また、一般的に消毒液は、タンパク質汚れや油脂汚れ等の汚れがある環境下で使用される。このような汚れは、ウイルスの不活性化作用を抑制する場合がある、
しかし、本発明の消毒液では、上記の通り、海藻抽出物と、エタノールとの両方を含むのでウイルス不活性化作用が向上している。そのため、タンパク質汚れや油脂汚れ等の汚れがあったとしても、充分なウイルス不活性化作用を奏する。
The disinfecting solution of the present invention contains ethanol.
By combining the seaweed extract and ethanol, the virus inactivating action of the seaweed extract and the virus inactivating action of ethanol synergize, and the virus inactivating action is improved.
Therefore, the disinfecting solution of the present invention can inactivate the virus suitably.
In general, the disinfectant is used in an environment where there is dirt such as protein dirt or oily dirt. Such dirt may inhibit the inactivating action of the virus,
However, since the disinfecting solution of the present invention contains both the seaweed extract and ethanol as described above, the virus inactivating action is improved. Therefore, even if there is dirt such as protein dirt or oily dirt, it exhibits a sufficient virus inactivating action.
また、本発明の消毒液には、エタノールが含まれているので、ウイルス不活性化作用のスペクトルが広がる。
上記の通り、本発明の海藻抽出物は、ネコカリシウイルス、マウスノロウイルス及びヒトノロウイルスに対し高いウイルス不活性化作用を示し、その他のノンエンベロープウイルスであるポリオウイルス、アデノウイルス、ロタウイルス等に対しても高いウイルス不活化作用を示す。
また、本発明の消毒液は、さらに、エタノールが含まれるので、インフルエンザウイルス、コロナウイルス、ヘルペスウイルス、ワクシニアウイルスに対し高いウイルス不活性化作用を示す。
Moreover, since the disinfecting solution of the present invention contains ethanol, the spectrum of virus inactivating action is broadened.
As described above, the seaweed extract of the present invention exhibits a high virus inactivating action against feline calicivirus, mouse norovirus and human norovirus, and against other non-enveloped viruses such as poliovirus, adenovirus, rotavirus and the like. Even a high virus inactivating effect is exhibited.
Further, since the disinfectant of the present invention further contains ethanol, it exhibits a high virus inactivating action against influenza virus, coronavirus, herpes virus, and vaccinia virus.
さらに、本発明の消毒液には、エタノールが含まれているので、細菌等の微生物に対しても抗菌活性を示す。 Furthermore, since the disinfecting solution of the present invention contains ethanol, it exhibits antibacterial activity against microorganisms such as bacteria.
本発明の消毒液では、上記消毒液中の上記エタノールの割合は、８．０５〜８５．７０重量％であることが望ましく、２４．６９〜７３．５４重量％であることがより望ましく、３７．８８〜６７．８９重量％であることがさらに望ましい。
消毒液中のエタノールの割合が８．０５重量％未満であると、エタノールの割合が少ないので、エタノールが含まれることによるウイルス不活性化作用が発揮されにくくなる。
消毒液中のエタノールの割合が８５．７０重量％を超えると、消毒液中のエタノールの濃度が高すぎ、引火等の危険性が高くなる。
In the disinfecting solution of the present invention, the proportion of the ethanol in the disinfecting solution is preferably 8.05 to 85.70% by weight, more preferably 24.69 to 73.54% by weight, 37 It is more desirable that it is .88 to 67.89% by weight.
If the proportion of ethanol in the disinfectant solution is less than 8.05% by weight, the proportion of ethanol is small, so that the virus inactivating action due to the inclusion of ethanol is hardly exhibited.
If the proportion of ethanol in the disinfecting solution exceeds 85.70% by weight, the concentration of ethanol in the disinfecting solution is too high, and the risk of ignition or the like increases.
本発明の消毒液は、ｐＨが２．０〜９．０であることが望ましい。
また、人体に対する安全性の観点から、消毒液のｐＨは、４．０〜８．０であることが望ましく、５．０〜８．０であることがより望ましい。
また、ウイルスの不活性化作用の観点から、消毒液のｐＨは、２．０〜６．０であることが望ましく、２．０〜５．０であることがより望ましい。
The disinfecting solution of the present invention preferably has a pH of 2.0 to 9.0.
Further, from the viewpoint of safety to the human body, the pH of the disinfectant is preferably 4.0 to 8.0, and more preferably 5.0 to 8.0.
In addition, from the viewpoint of virus inactivating action, the pH of the disinfectant is preferably 2.0 to 6.0, and more preferably 2.0 to 5.0.
本発明の消毒液は、さらにグリセリン脂肪酸エステル、炭素原子数２〜１０の有機酸及びその塩、リン酸及びその塩、グリセリン等が含まれていてもよい。
グリセリン脂肪酸エステルとしては、モノグリセリン脂肪酸エステルであってもよく、ポリグリセリン脂肪酸エステルであってもよい。例えば、モノグリセリンカプリル酸エステル、モノグリセリンカプリン酸エステル、モノグリセリンラウリン酸エステル、ジグリセリンカプリル酸エステル、ヘキサグリセリンラウリン酸エステル、デカグリセリンラウリン酸エステル等があげられる。
炭素原子数２〜１０の有機酸及びその塩としては、乳酸、ＤＬ−リンゴ酸、クエン酸、酒石酸及びその塩があげられる。
The disinfecting solution of the present invention may further contain glycerin fatty acid ester, an organic acid having 2 to 10 carbon atoms and a salt thereof, phosphoric acid and a salt thereof, glycerin and the like.
The glycerin fatty acid ester may be a monoglycerin fatty acid ester or a polyglycerin fatty acid ester. For example, monoglycerin caprylic acid ester, monoglycerin capric acid ester, monoglycerin lauric acid ester, diglycerin caprylic acid ester, hexaglycerin lauric acid ester, decaglycerin lauric acid ester and the like can be mentioned.
Examples of the organic acid having 2 to 10 carbon atoms and salts thereof include lactic acid, DL-malic acid, citric acid, tartaric acid and salts thereof.
本発明の消毒液が不活性化するウイルスの種類は、特に限定されないが、本発明の消毒液は、エンベロープウイルス及び／又はノンエンベロープウイルスを不活性化することができる。
また、本発明の消毒液は、カリシウイルス科ウイルスに対して高いウイルス不活性化作用を示し、ベシウイルス属ウイルス及び／又はノロウイルス属ウイルスに対してより高いウイルス不活性化作用を示し、ネコカリシウイルス、マウスノロウイルス及びヒトノロウイルスからなる群から選択される少なくとも１種のウイルスに対して、特に高いウイルス不活性化作用を示す。
The kind of virus inactivated by the disinfecting solution of the present invention is not particularly limited, but the disinfecting solution of the present invention can inactivate enveloped viruses and / or non-enveloped viruses.
In addition, the disinfectant solution of the present invention exhibits a high virus inactivating action against Caliciviridae viruses, and a higher virus inactivating action against Besivirus and / or Norovirus viruses. It exhibits a particularly high virus inactivating action against at least one virus selected from the group consisting of viruses, mouse noroviruses and human noroviruses.
本発明の消毒液は、ネコカリシウイルスを試験ウイルスとした下記ウイルス感染力価測定において、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値が、作用時間０分におけるウイルス感染力価の値より２．０以上小さいことが望ましく、４．０以上小さいことがより望ましい。
本発明の消毒液が、このようなウイルス不活性化作用を奏すると、カリシウイルス科ウイルスの感染を防止することができる。
In the disinfectant solution of the present invention, the virus infectivity titer at an action time of 1 minute is 2. more than the virus infectivity titer at an action time of 0 min in the following virus infection titration measurement using feline calicivirus as a test virus. It is preferably 0 or more and more preferably 4.0 or more.
When the disinfecting solution of the present invention exhibits such a virus inactivating action, infection with the caliciviridae virus can be prevented.
（ネコカリシウイルス感染力価測定）
（１）ネコカリシウイルスを、ネコ腎由来株化細胞であるＣＲＦＫ細胞（ＡＴＣＣ ＣＣＬ−９４）に感染させて細胞を培養する。
（２）次に、ネコカリシウイルスが感染したかどうかを細胞変性効果（Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ：ＣＰＥ）により確認する。
細胞変性効果を確認した後、培養細胞の凍結融解を繰り返すことにより、培養細胞を破砕する。
（３）次に、得られた培養細胞破砕液を遠心分離し、上清をウイルス溶液とする。
（４）消毒液と、ウイルス溶液とを９：１の割合（容量）で混合し、室温で１分経過後、ＯＰＴＩ−ＭＥＭ培地で１００倍希釈することにより、消毒液のウイルスに対する作用を停止させる。
この工程により得られた溶液を消毒液１分作用ウイルス溶液とする。
（５）ＯＰＴＩ−ＭＥＭ培地と、ウイルス溶液とを９：１の割合（容量）で混合した直後、ＯＰＴＩ−ＭＥＭ培地で１００倍希釈することにより、得られた溶液を消毒液０分作用ウイルス溶液とする。
（６）消毒液０分作用ウイルス溶液、消毒液１分作用ウイルス溶液を、それぞれ、ＯＰＴＩ−ＭＥＭ培地により１０倍段階希釈した。ＣＲＦＫ細胞を培養した９６ｗｅｌｌマイクロプレートの培地を捨て、段階希釈液を１００μＬずつ加えた。
（７）消毒液０分作用ウイルス溶液及び消毒液１分作用ウイルス溶液の段階希釈液が加えられたＣＲＦＫ細胞を３７℃、５％ＣＯ２の条件で、４日間培養する。
（８）培養したＣＲＦＫ細胞のＣＰＥを指標にＴＣＩＤ５０（Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｏｓｅ ５０％）により各ウイルス溶液のウイルス感染力価（対数）を定量する。
（９）上記（１）〜（８）の工程を３回独立に行い、消毒液０分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間０分におけるウイルス感染力価とし、消毒液１分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値とする。
(Measurement of feline calicivirus infection titer)
(1) CRFK cells (ATCC CCL-94), a feline kidney-derived cell line, are infected with feline calicivirus, and the cells are cultured.
(2) Next, whether or not feline calicivirus is infected is confirmed by a cytopathic effect (CPE).
After confirming the cytopathic effect, the cultured cells are disrupted by repeating freeze-thawing of the cultured cells.
(3) Next, the obtained cultured cell lysate is centrifuged, and the supernatant is used as a virus solution.
(4) Disinfecting solution and virus solution are mixed at a ratio (volume) of 9: 1, and after 1 minute at room temperature, the action of the disinfecting solution against virus is stopped by diluting 100 times with OPTI-MEM medium. Let
The solution obtained in this step is used as a disinfectant 1-minute virus solution.
(5) Immediately after the OPTI-MEM medium and the virus solution are mixed at a ratio (volume) of 9: 1, the resulting solution is diluted 100-fold with the OPTI-MEM medium. And
(6) Disinfectant solution 0-minute action virus solution and disinfectant solution 1-minute action virus solution were each diluted 10-fold with OPTI-MEM medium. The medium of the 96-well microplate on which CRFK cells were cultured was discarded, and 100 μL of serial dilution was added.
(7) CRFK cells to which a serially diluted solution of the antiseptic solution 0 minute action virus and the antiseptic solution 1 minute effect virus solution are added are cultured for 4 days at 37 ° C. and 5% CO 2 .
(8) The virus infection titer (logarithm) of each virus solution is quantified by TCID 50 (Tissue Culture Infectious Dose 50%) using CPE of the cultured CRFK cells as an index.
(9) The above steps (1) to (8) are carried out three times independently, and the average value of the virus infectivity titer calculated using the antiseptic 0-minute action virus solution is calculated as the virus infectivity at the action time 0 minutes. The average value of the virus infection titer calculated using the antiseptic solution 1-minute action virus solution is taken as the value of the virus infection titer at the action time of 1 minute.
本発明の消毒液は、マウスノロウイルスを試験ウイルスとした下記ウイルス感染力価測定において、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値が、作用時間０分におけるウイルス感染力価の値より２．０以上小さいことが望ましく、４．０以上小さいことがより望ましい。
本発明の消毒液が、このようなウイルス不活性化作用を奏すると、カリシウイルス科ウイルスの感染を防止することができる。
In the disinfectant solution of the present invention, the virus infection titer at the action time of 1 minute is 2.0% higher than the virus infection titer at the action time of 0 minute in the following virus infection titration measurement using mouse norovirus as the test virus. It is preferably smaller than this, and more preferably 4.0 or smaller.
When the disinfecting solution of the present invention exhibits such a virus inactivating action, infection with the caliciviridae virus can be prevented.
（マウスノロウイルス感染力価測定）
（１）マウスノロウイルスを、マウスのマクロファージ由来細胞株であるＲＡＷ ２６４．７細胞（ＡＴＣＣ ＴＩＢ−７１）に感染させて細胞を培養する。
（２）次に、マウスノロウイルスが感染したかどうかを細胞変性効果（Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ：ＣＰＥ）により確認する。
細胞変性効果を確認した後、培養細胞の凍結融解を繰り返すことにより、培養細胞を破砕する。
（３）次に、得られた培養細胞破砕液を遠心分離し、上清をウイルス溶液とする。
（４）消毒液と、ウイルス溶液とを９：１の割合（容量）で混合し、室温で１分経過後、１０％牛胎児血清含有ＤＭＥＭ培地で１００倍希釈することにより、消毒液のウイルスに対する作用を停止させる。
この工程により得られた溶液を消毒液１分作用ウイルス溶液とする。
（５）１０％牛胎児血清含有ＤＭＥＭ培地と、ウイルス溶液とを９：１の割合（容量）で混合した直後、１０％牛胎児血清含有ＤＭＥＭ培地で１００倍希釈することにより、得られた溶液を消毒液０分作用ウイルス溶液とする。
（６）消毒液０分作用ウイルス溶液及び消毒液１分作用ウイルス溶液を、それぞれ、１０％牛胎児血清含有ＤＭＥＭ培地により、１０倍段階希釈する。１ウェルにＲＡＷ ２６４．７細胞を５０μＬずつ分注した９６ｗｅｌｌマイクロプレートに、各段階希釈液を５０μＬずつ加える。
（７）消毒液０分作用ウイルス溶液及び消毒液１分作用ウイルス溶液の段階希釈液が加えられたＲＡＷ ２６４．７細胞を３７℃、５％ＣＯ２の条件で、４日間培養する。
（８）培養したＲＡＷ ２６４．７細胞のＣＰＥを指標にＴＣＩＤ５０（Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｏｓｅ ５０％）により各ウイルス溶液のウイルス感染力価（対数）を定量する。
（９）上記（１）〜（８）の工程を３回独立に行い、消毒液０分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間０分におけるウイルス感染力価とし、消毒液１分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値とする。
(Measurement of mouse norovirus infection titer)
(1) A mouse norovirus is infected with RAW 264.7 cells (ATCC TIB-71), which is a mouse macrophage-derived cell line, and the cells are cultured.
(2) Next, it is confirmed by cytopathic effect (CPE) whether mouse norovirus was infected.
After confirming the cytopathic effect, the cultured cells are disrupted by repeating freeze-thawing of the cultured cells.
(3) Next, the obtained cultured cell lysate is centrifuged, and the supernatant is used as a virus solution.
(4) The disinfectant solution and the virus solution are mixed at a ratio (volume) of 9: 1, and after 1 minute at room temperature, diluted 100-fold with DMEM medium containing 10% fetal bovine serum, thereby the virus of the disinfectant solution The action on is stopped.
The solution obtained in this step is used as a disinfectant 1-minute virus solution.
(5) Immediately after mixing the DMEM medium containing 10% fetal bovine serum and the virus solution at a ratio (volume) of 9: 1, the solution obtained by diluting 100 times with the DMEM medium containing 10% fetal bovine serum Is used as a 0 minute action virus solution.
(6) The antiseptic solution 0-minute action virus solution and the antiseptic solution 1-minute action virus solution are each diluted 10-fold in 10% fetal bovine serum-containing DMEM medium. 50 μL of each serial dilution is added to a 96-well microplate containing 50 μL of RAW 264.7 cells per well.
(7) RAW 264.7 cells to which a serially diluted solution of a 0 minute action virus solution and a 1 minute action virus solution of a disinfectant solution are added are cultured at 37 ° C. and 5% CO 2 for 4 days.
(8) The virus infection titer (logarithm) of each virus solution is quantified by TCID 50 (Tissue Culture Infectious Dose 50%) using CPE of cultured RAW 264.7 cells as an index.
(9) The above steps (1) to (8) are carried out three times independently, and the average value of the virus infectivity titer calculated using the antiseptic 0-minute action virus solution is calculated as the virus infectivity at the action time 0 minutes. The average value of the virus infection titer calculated using the antiseptic solution 1-minute action virus solution is taken as the value of the virus infection titer at the action time of 1 minute.
次に、本発明の消毒液を用いた本発明の用途を説明する。
本発明の消毒液は、手洗い液、中性洗剤、消臭剤に加えてもよい。
本発明の消毒剤を含む手洗い液、中性洗剤、消臭剤等は、ポンプボトルやスプレーガンに詰められていてもよい。
Next, the use of the present invention using the disinfectant of the present invention will be described.
The disinfecting solution of the present invention may be added to a hand washing solution, a neutral detergent, and a deodorant.
A hand-washing liquid, a neutral detergent, a deodorant and the like containing the disinfectant of the present invention may be packed in a pump bottle or a spray gun.
また衛生資材に用いてもよい。このような衛生資材は、本発明の衛生資材でもある。 Moreover, you may use for a sanitary material. Such a sanitary material is also the sanitary material of the present invention.
本発明の衛生資材は、上記本発明の消毒液を含むことを特徴とする。
本発明の消毒液は、ウイルス不活性化作用を奏するので、このような消毒液を含む衛生資材を用いることにより、ウイルス感染を防ぐことができる。
The sanitary material of the present invention includes the disinfectant solution of the present invention.
Since the disinfecting solution of the present invention exerts a virus inactivating action, virus infection can be prevented by using a sanitary material containing such a disinfecting solution.
本発明の衛生資材は、特に限定されるものではないが、例えば、マスク、使い捨て手袋、使い捨て布巾、ティッシュペーパー、ウエットティッシュ等があげられる。 The sanitary material of the present invention is not particularly limited, and examples thereof include a mask, disposable gloves, disposable cloths, tissue paper, and wet tissue.
以下に本発明をより具体的に説明する実施例を示すが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。 Examples for more specifically explaining the present invention are shown below, but the present invention is not limited to these examples.
（実施例１）
エタノールが２４．６９重量％、アスコフィラム・ノドサムから抽出された海藻抽出物（製造元：理研ビタミン株式会社、商品名：海藻ポリフェノール（フロログルシノールの重合数が１０分子以上のフロログルシノール重合体を含有））が０．５０重量％、ＤＬ−リンゴ酸（製造元：扶桑化学工業株式会社製、商品名：リンゴ酸フソウ）が０．０５重量％、ＤＬ−リンゴ酸ナトリウム（製造元：扶桑化学工業株式会社製、商品名：リンゴ酸ソルト）が０．３０重量％、グリセリン（製造元：阪本薬品工業株式会社製、商品名：グリセリンＲＧ）が０．５０重量％、残分として水を混合し、実施例１に係る消毒液を作製した。実施例１に係る消毒液のｐＨは６．５であった。
Example 1
Seaweed extract extracted from Ascophyllum nodsum with ethanol of 24.69% by weight (Manufacturer: Riken Vitamin Co., Ltd., trade name: Seaweed polyphenol (contains phloroglucinol polymer with a phloroglucinol polymerization number of 10 or more) )) Is 0.50% by weight, DL-malic acid (manufacturer: Fuso Chemical Industries, trade name: Fuso malate) is 0.05% by weight, DL-sodium malate (manufacturer: Fuso Chemical Industries, Ltd.) Product name: Malic acid salt) is 0.30% by weight, Glycerin (manufacturer: Sakamoto Yakuhin Kogyo Co., Ltd., trade name: Glycerin RG) is 0.50% by weight, and the remainder is mixed with water. 1 was prepared. The pH of the disinfectant solution according to Example 1 was 6.5.
（実施例２〜５）、（比較例１〜８）並びに（参考例１及び２）
消毒液の材料の種類及び割合を表１に示すように変更した以外は、実施例１と同様に実施例２〜５、比較例１〜８、並びに、参考例１及び２の消毒液を作製した。
なお、表１中「％」は重量％を意味する。
(Examples 2 to 5), (Comparative Examples 1 to 8) and (Reference Examples 1 and 2)
The disinfecting liquids of Examples 2 to 5, Comparative Examples 1 to 8 and Reference Examples 1 and 2 were prepared in the same manner as in Example 1 except that the types and ratios of the disinfecting liquid materials were changed as shown in Table 1. did.
In Table 1, “%” means% by weight.
表１中のウイルス不活性化物質は、以下の物質である。
海藻エキス（クロメ、アラメ、カジメ等からの抽出物）：製造元：日油株式会社、商品名：エクレクストＢＧ（フロログルシノールの重合数が７分子未満のフロログルシノール重合体を含有）
月見草（種子）エキス：製造元：オリザ油化株式会社、商品名：月見草エキス―ＷＳＰＨ
カリンエキス：製造元：丸善製薬株式会社、商品名：カリンエキスＭＦ
柿抽出物：製造元：リリース科学工業株式会社、商品名：パンシル ＰＳ−Ｍ
ブドウ種子抽出物：製造元：株式会社常盤植物化学研究所、商品名：ビノフェロン
生コーヒー豆エキス：製造元：オリザ油化株式会社、商品名：生コーヒー豆エキス−Ｐ
ゆず種子抽出物：製造元：オリザ油化株式会社、商品名：ユズ種子エキス−ＷＳＰ
The virus inactivating substances in Table 1 are the following substances.
Seaweed extract (extract from chrome, arame, scallop, etc.): manufacturer: NOF Corporation, trade name: Electst BG (contains phloroglucinol polymer with a phloroglucinol polymerization number of less than 7 molecules)
Evening Primrose (seed) extract: Manufacturer: Oriza Yuka Co., Ltd., Trade name: Evening Primrose Extract-WSPH
Karin extract: Manufacturer: Maruzen Pharmaceutical Co., Ltd., Trade name: Karin extract MF
Koji Extract: Manufacturer: Release Kagaku Kogyo Co., Ltd., Trade Name: Pancil PS-M
Grape Seed Extract: Manufacturer: Tokiwa Phytochemical Laboratories Co., Ltd., Trade Name: Binoferon Fresh Coffee Bean Extract: Manufacturer: Oriza Oil Chemical Co., Ltd., Trade Name: Fresh Coffee Bean Extract-P
Yuzu seed extract: Manufacturer: Oriza Yuka Co., Ltd., Trade name: Yuzu Seed Extract-WSP
（ネコカリシウイルスの感染力価測定）
消毒液として、各実施例、各比較例及び各参考例に係る消毒液を用い、上記（ネコカリシウイルス感染力価測定）の方法に基づき、作用時間０分におけるウイルス感染力価の値と、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値との差を算出して評価した。評価基準は以下の通りである。結果を表１に示す。
Ａ：４．０以上の感染力価の減少（充分な効果あり）
Ｂ：２．０以上、４．０未満の感染力価の減少（効果あり）
Ｃ：２．０未満の感染力価の減少（効果なし）
(Infectious titer measurement of feline calicivirus)
As the disinfectant, using the disinfectant according to each example, each comparative example and each reference example, based on the above method (feline calicivirus infectious titer measurement), The difference from the value of the virus infection titer at an action time of 1 minute was calculated and evaluated. The evaluation criteria are as follows. The results are shown in Table 1.
A: Decrease in infectious titer of 4.0 or more (sufficient effect)
B: Decrease in infectious titer of 2.0 or more and less than 4.0 (effective)
C: Decrease in infectious titer less than 2.0 (no effect)
（汚れ負荷時のネコカリシウイルスの感染力価測定）
消毒液として、各実施例、各比較例及び各参考例に係る消毒液を用い、上記（ネコカリシウイルス感染力価測定）の（３）工程を以下の（３´）に変更した以外は、上記（ネコカリシウイルス感染力価測定）と同様に汚れ負荷時のネコカリシウイルス感染力価測定を行った。
作用時間０分におけるウイルス感染力価の値と、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値との差を算出して評価した。評価基準は上記（ネコカリシウイルスの感染力価測定）の評価基準と同様である。結果を表１に示す。
（３´）牛肉エキス（ナカライテスク社製）０．１ｇをＯＰＴＩ−ＭＥＭ培地で溶解して１０％肉エキス液を作製し、遠心分離後の培養細胞破砕液の上清と、１０％肉エキスとを１：１の割合（容量）で混合し、ウイルス溶液とする。
(Measurement of feline calicivirus infectivity titer during soil loading)
As the disinfectant, using the disinfectant according to each example, each comparative example and each reference example, except that (3) step of the above (feline calicivirus infection titer measurement) was changed to the following (3 '), The feline calicivirus infectious titer was measured when the soil was loaded in the same manner as described above (feline calicivirus infectious titer measurement).
The difference between the value of the virus infection titer at the action time of 0 minutes and the value of the virus infection titer at the action time of 1 minute was calculated and evaluated. The evaluation criteria are the same as the evaluation criteria described above (measurement of feline calicivirus infectivity titer). The results are shown in Table 1.
(3 ′) 0.1 g of beef extract (manufactured by Nacalai Tesque) was dissolved in OPTI-MEM medium to prepare a 10% meat extract solution, the supernatant of the cultured cell lysate after centrifugation and the 10% meat extract Are mixed at a ratio (volume) of 1: 1 to obtain a virus solution.
（マウスノロウイルスの感染力価測定）
消毒液として、各実施例、各比較例及び各参考例に係る消毒液を用い、上記（マウスノロウイルスの感染力価測定）の方法に基づき、作用時間０分におけるウイルス感染力価の値と、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値との差を算出して評価した。評価基準は以下の通りである。結果を表１に示す。
Ａ：４．０以上の感染力価の減少（充分な効果あり）
Ｂ：２．０以上、４．０未満の感染力価の減少（効果あり）
Ｃ：２．０未満の感染力価の減少（効果なし）
(Measurement of infectious titer of mouse norovirus)
As the disinfectant, using the disinfectant according to each example, each comparative example and each reference example, based on the above method (measurement of infectious titer of mouse norovirus), the value of the virus infectivity titer at 0 minutes of action, The difference from the value of the virus infection titer at an action time of 1 minute was calculated and evaluated. The evaluation criteria are as follows. The results are shown in Table 1.
A: Decrease in infectious titer of 4.0 or more (sufficient effect)
B: Decrease in infectious titer of 2.0 or more and less than 4.0 (effective)
C: Decrease in infectious titer less than 2.0 (no effect)
（汚れ負荷時のマウスノロウイルスの感染力価測定）
消毒液として、各実施例、各比較例及び各参考例に係る消毒液を用い、上記（マウスノロウイルス感染力価測定）の（３）工程を以下の（３´´）に変更した以外は、上記（マウスノロウイルス感染力価測定）と同様に汚れ負荷時のマウスノロウイルス感染力価測定を行った。
作用時間０分におけるウイルス感染力価の値と、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値との差を算出して評価した。評価基準は上記（マウスノロウイルス感染力価測定）の評価基準と同様である。結果を表１に示す。
（３´´）牛肉エキス（ナカライテスク社製）０．１ｇをＤＭＥＭ培地で溶解して１０％肉エキス液を作製し、遠心分離後の培養細胞破砕液の上清と、１０％肉エキスとを１：１の割合（容量）で混合し、ウイルス溶液とする。
(Measurement of infectious titer of mouse norovirus at the time of soil loading)
As the disinfectant, using the disinfectant according to each example, each comparative example and each reference example, except that the (3) step of (Mouse Norovirus Infectivity Titer Measurement) was changed to the following (3 ″), In the same manner as described above (mouse norovirus infectious titer measurement), mouse norovirus infectious titer was measured when the soil was loaded.
The difference between the value of the virus infection titer at the action time of 0 minutes and the value of the virus infection titer at the action time of 1 minute was calculated and evaluated. The evaluation criteria are the same as the evaluation criteria described above (measurement of murine norovirus infection titer). The results are shown in Table 1.
(3 ″) 0.1 g of beef extract (manufactured by Nacalai Tesque) was dissolved in DMEM medium to prepare a 10% meat extract solution, and the supernatant of the cultured cell lysate after centrifugation, 10% meat extract, Are mixed at a ratio (volume) of 1: 1 to obtain a virus solution.
（インフルエンザウイルスの感染力価測定）
（１）インフルエンザウイルスを、ＭＤＣＫ（ＮＢＬ−２）細胞（ＡＴＣＣ ＣＣＬ−３４）に感染させて細胞を培養した。
（２）次に、インフルエンザウイルスが感染したかどうかを細胞変性効果（Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ：ＣＰＥ）により確認した。
細胞変性効果を確認した後、培養細胞の凍結融解を３回繰り返すことにより、培養細胞を破砕した。
（３）次に、得られた培養細胞破砕液の上清をろ過し、インフルエンザウイルス溶液とした。
（４）各実施例、各比較例及び各参考例に係る消毒液と、ウイルス溶液とを９：１（容量）の割合で混合し、室温で１分経過後、０．２％牛胎児血清含有ＤＭＥＭ培地で１００倍希釈することにより、消毒液のウイルスに対する作用を停止させた。
この工程により得られた溶液を消毒液１分作用ウイルス溶液とした。
（５）０．２％牛胎児血清含有ＤＭＥＭ培地と、ウイルス溶液とを９：１（容量）の割合で混合した直後、０．２％牛胎児血清含有ＤＭＥＭ培地で１００倍希釈することにより、得られた溶液を消毒液０分作用ウイルス溶液とする。
（６）消毒液０分作用ウイルス溶液、消毒液１分作用ウイルス溶液を、それぞれ、０．２％牛胎児血清含有ＤＭＥＭ培地により、１０倍段階希釈した。１ウェルに５％牛胎児血清含有ＤＭＥＭ培地で懸濁したＭＤＣＫ細胞を分注した９６ｗｅｌｌマイクロプレートに、ウイルスの段階希釈液を加えた。
（７）消毒液０分作用ウイルス溶液、消毒液１分作用ウイルス溶液が加えられたＭＤＣＫ細胞を３７℃、５％ＣＯ２の条件で、４日間培養した。
（８）培養したＭＤＣＫ細胞のＣＰＥを指標にＴＣＩＤ５０（Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｏｓｅ ５０％）により各ウイルス溶液のウイルス感染力価を定量した。
（９）上記（１）〜（８）の工程を３回独立に行い、消毒液０分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間０分におけるウイルス感染力価とし、消毒液１分作用ウイルス溶液を用いて算出されたウイルス感染力価の平均値を、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値とした。
作用時間０分におけるウイルス感染力価の値と、作用時間１分におけるウイルス感染力価の値との差を算出して評価した。評価基準は以下の通りである。結果を表１に示す。
Ａ：４．０以上の感染力価の減少（充分な効果あり）
Ｂ：２．０以上、４．０未満の感染力価の減少（効果あり）
Ｃ：２．０未満の感染力価の減少（効果なし）
(Measurement of influenza virus infection titer)
(1) MDCK (NBL-2) cells (ATCC CCL-34) were infected with influenza virus, and the cells were cultured.
(2) Next, whether or not influenza virus was infected was confirmed by cytopathic effect (CPE).
After confirming the cytopathic effect, the cultured cells were disrupted by repeating freeze-thawing of the cultured cells three times.
(3) Next, the supernatant of the obtained cultured cell lysate was filtered to obtain an influenza virus solution.
(4) The disinfectant solution according to each example, each comparative example and each reference example and the virus solution were mixed at a ratio of 9: 1 (volume), and after 1 minute at room temperature, 0.2% fetal bovine serum By diluting 100 times with the containing DMEM medium, the action of the disinfectant solution against the virus was stopped.
The solution obtained in this step was used as a disinfectant 1-minute virus solution.
(5) Immediately after mixing 0.2% fetal bovine serum-containing DMEM medium and virus solution at a ratio of 9: 1 (volume), by diluting 100 times with 0.2% fetal bovine serum-containing DMEM medium, The resulting solution is used as a 0 minute action virus solution for disinfectant.
(6) Disinfectant solution 0-minute action virus solution and disinfectant solution 1-minute action virus solution were each diluted 10-fold with 0.2% fetal bovine serum-containing DMEM medium. Serial dilutions of virus were added to 96-well microplates in which MDCK cells suspended in DMEM medium containing 5% fetal calf serum were dispensed in one well.
(7) MDCK cells to which the antiseptic solution 0-minute action virus solution and the antiseptic solution 1-minute action virus solution were added were cultured at 37 ° C. and 5% CO 2 for 4 days.
(8) The virus infection titer of each virus solution was quantified by TCID 50 (Tissue Culture Infectious Dose 50%) using CPE of cultured MDCK cells as an index.
(9) The above steps (1) to (8) are carried out three times independently, and the average value of the virus infectivity titer calculated using the antiseptic 0-minute action virus solution is calculated as the virus infectivity at the action time 0 minutes. The average value of the virus infection titer calculated using the disinfectant 1-minute action virus solution was defined as the value of the virus infection titer at the action time of 1 minute.
The difference between the value of the virus infection titer at the action time of 0 minutes and the value of the virus infection titer at the action time of 1 minute was calculated and evaluated. The evaluation criteria are as follows. The results are shown in Table 1.
A: Decrease in infectious titer of 4.0 or more (sufficient effect)
B: Decrease in infectious titer of 2.0 or more and less than 4.0 (effective)
C: Decrease in infectious titer less than 2.0 (no effect)
（大腸菌に対する抗菌活性測定）
（１）大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＮＢＲＣ３９７２）を普通ブイヨン培地に接種し、３５℃で２４時間培養し菌液とした。
（２）各実施例、各比較例及び各参考例の消毒液と菌液とを９９：１の割合（容量）で混合し、室温で１分経過後、ＳＣＤ培地に１白金耳移植し、３５℃で４８時間培養後、菌の生死を判定した。
（３）ＳＣＤ培地に濁りが見られた場合、菌が死滅しなかった、濁りが見られない場合菌が死滅したと判断した。
（４）菌が死滅したと判断される各消毒液について、その消毒液を水で２倍に希釈し、消毒液の希釈液を用い上記（１）〜（３）と同様の操作を行い菌の生死を判定した。
（５）菌が死滅しなくなるまで、消毒液の希釈倍率（原液からの希釈倍率）を１ずつ上げて上記（１）〜（３）と同様の操作を繰り返し、各消毒液の大腸菌が死滅した最大の希釈倍率を測定した。
結果を表１に示す。
なお、表１中の「活性なし」という評価は、消毒液の原液を使用して上記（１）〜（３）の操作を行った際に、菌が死滅しなかったことを意味する。
(Measurement of antibacterial activity against E. coli)
(1) E. coli ( Escherichia coli NBRC3982) was inoculated into a normal broth medium and cultured at 35 ° C. for 24 hours to obtain a bacterial solution.
(2) The disinfecting solution and the bacterial solution of each example, each comparative example and each reference example were mixed at a ratio (volume) of 99: 1, and after 1 minute at room temperature, 1 platinum ear was transplanted into the SCD medium. After culturing at 35 ° C. for 48 hours, the viability of the bacteria was determined.
(3) When turbidity was seen in the SCD medium, it was judged that the bacteria were not killed, and when no turbidity was seen, the bacteria were killed.
(4) For each disinfectant that is determined to have killed the bacteria, dilute the disinfectant with water twice and use the diluted disinfectant to perform the same operations as in (1) to (3) above. Judgment of life or death.
(5) Increase the dilution rate of the disinfectant solution (dilution rate from the stock solution) by 1 until the bacteria are no longer killed, and repeat the same operations as in the above (1) to (3), and the Escherichia coli in each disinfectant solution has been killed. The maximum dilution factor was measured.
The results are shown in Table 1.
In addition, the evaluation of “no activity” in Table 1 means that the bacteria were not killed when the operations (1) to (3) were performed using a stock solution of the disinfectant solution.
（黄色ブドウ球菌に対する抗菌活性測定）
大腸菌の代わりに黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ＮＢＲＣ１２７３２）を用いた以外は、上記（大腸菌に対する抗菌活性試験）と同様に、各消毒液の黄色ブドウ球菌が死滅した最大の希釈倍率を測定した。
結果を表１に示す。
(Measurement of antibacterial activity against Staphylococcus aureus)
Except for using Staphylococcus aureus NBRC12732 instead of Escherichia coli, the maximum dilution rate at which Staphylococcus aureus was killed was measured in the same manner as above (antibacterial activity test against Escherichia coli).
The results are shown in Table 1.
カリシウイルス科ウイルスの感染力価測定の結果、各実施例に係る消毒液は、ネコカリシウイルス及びマウスノロウイルスに対し、高いウイルス不活性化作用を示した。
現在、ヒトノロウイルスは、培養細胞を用いても増殖させることができない。そのため、ノロウイルスの不活性化に対する検証には、代替ウイルスとしてネコカリシウイルス及びマウスノロウイルスが広く用いられている。
表１に示す結果より、各実施例に係る消毒液は、ヒトノロウイルスに対しても高いウイルス不活性化作用を示すと予測される。
特に、各実施例に係る消毒液は、汚れ負荷時のネコカリシウイルスの感染力価測定及び汚れ負荷時のマウスノロウイルスの感染力価測定においても高いウイルス不活性化作用を示した。
さらに、各実施例に係る消毒液は、インフルエンザウイルスに対する高いウイルス不活性化作用を示し、高い抗菌活性も示した。
As a result of measuring the infectious titer of the caliciviridae virus, the disinfecting solution according to each example showed a high virus inactivating action against feline calicivirus and mouse norovirus.
Currently, human norovirus cannot be propagated using cultured cells. Therefore, feline calicivirus and mouse norovirus are widely used as alternative viruses for verification of inactivation of norovirus.
From the results shown in Table 1, it is predicted that the disinfecting solution according to each Example shows a high virus inactivating action against human norovirus.
In particular, the disinfectant solution according to each example showed a high virus inactivating action in the measurement of the feline calicivirus infectious titer when loaded with dirt and the infectious titer of mouse norovirus when loaded with dirt.
Furthermore, the disinfectant solution according to each example showed a high virus inactivating action against influenza virus and also showed high antibacterial activity.
Claims (12)
前記フロログルシノール重合体は、フロログルシノールが７分子以上重合してなる化合物であることを特徴とする消毒液。 A seaweed extract containing phloroglucinol polymers, and ethanol seen including,
The phloroglucinol polymer is a compound formed by polymerizing 7 or more molecules of phloroglucinol .
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