JP2018533021A5 - - Google Patents
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Claims (15)
- サンプル中の第1の分析物および第2の分析物の存在または不在を検出するための方法であって、第1の分析物のみが固有の抗原またはエピトープを有することを除いて前記2つの分析物は同一であり、以下の順序で以下の工程:
a)第1の検出タグを用いて第1の分析物にタグ付けするために、第1の分析物に抗体のような第1の検出剤をコンジュゲートする工程;
b)第1の分析物を捕捉し、かつサンプルから第1の分析物を完全に枯渇させるために、第1の分析物の固有の抗原またはエピトープに抗体のような第1の捕捉剤をコンジュゲートする工程;
c)第2の検出タグを用いて第2の分析物にタグ付けするために、第1の分析物を完全に枯渇させた前記サンプル中の第2の分析物に抗体のような第2の検出剤をコンジュゲートする工程;
d)第1の分析物を完全に枯渇させた前記サンプルから第2の分析物を捕捉するために、第2の分析物に抗体のような第2の捕捉剤をコンジュゲートする工程;
e)前記抗体のような第1の捕捉剤および前記抗体のような第2の捕捉剤の部位それぞれにおいて前記第1の検出タグおよび前記第2の検出タグの存在または不在を検出し、それにより、前記サンプル中の第1の分析物および第2の分析物の存在または不在を検出する工程
を含むイムノアッセイを含んでなる、方法。 - 前記抗体のような第1の検出剤および前記抗体のような第2の検出剤が、前記サンプル中でまたは前記サンプルとともに自由に移動できる遊離した抗体のような第1の検出剤および抗体のような第2の検出剤であり、かつ、前記抗体のような第1の捕捉剤および前記抗体のような第2の捕捉剤が、基体上の所定の部位に固定された固定化された抗体のような第1の捕捉剤および抗体のような第2の捕捉剤である、請求項1に記載の方法。
- 前記抗体のような第1の捕捉剤の濃度が前記抗体のような第1の検出剤の濃度以上であり、好ましくは、1:1〜5:1の間、より好ましくは、1.5:1〜3:1の間の比にある、請求項1または2に記載の方法。
- 前記方法が、サンプル流れ方向に、サンプルアプリケーションパッド(3)、第1のコンジュゲーションパッド(10)、少なくとも1本の第1のテストライン(11)および任意選択により少なくとも1本の第1のコントロールライン(12)を有するニトロセルロースメンブレン(4)、第2のコンジュゲーションパッド(20)、少なくとも1本の第2のテストライン(21)および任意選択により少なくとも1本の第2のコントロールライン(22)を有するニトロセルロースメンブレン(4’)、ならびに吸収パッド(5)を含んでなるラテラルフローアッセイストリップ(1)を用いたラテラルフローイムノクロマトグラフィーアッセイであり;
その第1のコンジュゲーションパッド(10)が、前記抗体のような第1の検出剤を含有し、その第1のテストライン(11)が、前記抗体のような第1の捕捉剤によって形成され、その第2のコンジュゲーションパッド(20)が、前記抗体のような第2の検出剤を含有し、かつ、その第2のテストライン(21)が、前記抗体のような第2の捕捉剤によって形成され、その任意選択の少なくとも1本の第1のコントロールライン(12)が、前記抗体のような第1の検出剤に特異的に結合する第1の抗体のような対照剤を含有し、その任意選択の少なくとも1本の第2のコントロールライン(22)が、前記抗体のような第2の検出剤に特異的に結合する抗体のような第2の対照剤を含有する、請求項1〜3のいずれか一項に記載の方法。 - 前記第1の分析物が、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(MRSA)であり、かつ、前記第2の分析物が、メチシリン感受性黄色ブドウ球菌(MSSA)である、請求項1〜4のいずれか一項に記載の方法。
- 前記抗体のような第1の検出剤および前記抗体のような第1の捕捉剤が、ペニシリン結合タンパク質2a(PBP2a)の異なるエピトープに特異的であり;かつ、前記抗体のような第2の検出剤および前記抗体のような第2の捕捉剤が、ペニシリン結合タンパク質2(PBP2)の異なるエピトープに特異的である、請求項1〜5のいずれか一項に記載の方法。
- 前記サンプルが、生物試料、環境試料または食品試料から採取される、請求項1〜6のいずれか一項に記載の方法。
- 前記イムノアッセイを実施する前に、前記サンプルが、IgG抗体コーティングされた磁性ビーズを用いて、黄色ブドウ球菌を単離濃縮することによって前処理され、前記IgG抗体が、そのFab領域で磁性ビーズに結合しており、黄色ブドウ球菌のプロテインAと特異的に相互作用するように、そのFc領域は使われていない状態である、請求項5〜7のいずれか一項に記載の方法。
- 第1の分析物および第2の分析物を検出するために、請求項1〜8のいずれか一項に記載のイムノアッセイを実施するためのラテラルフローイムノクロマトグラフィーストリップであって、第1の分析物のみが固有の抗原またはエピトープを有することを除いて前記2つの分析物は同一であり、サンプル流れ方向に、サンプルアプリケーションパッド(3)、第1のコンジュゲーションパッド(10)、少なくとも1本の第1のテストライン(11)および任意選択により少なくとも1本の第1のコントロールライン(12)を有するニトロセルロースメンブレン(4)、第2のコンジュゲーションパッド(20)、少なくとも1本の第2のテストライン(21)および任意選択により少なくとも1本の第2のコントロールライン(22)を有するニトロセルロースメンブレン(4’)、ならびに吸収パッド(5)を含んでなり;
前記第1のコンジュゲーションパッド(10)が、第1の検出タグを用いて前記第1の分析物にタグ付けするために、前記第1の分析物に対する抗体のような第1の検出剤を含有し;
前記第1のテストライン(11)が、前記第1の分析物を捕捉しかつ前記サンプルからその第1の分析物を完全に枯渇させるために、前記第1の分析物に対する抗体のような第1の捕捉剤によって形成され;
前記第2のコンジュゲーションパッド(20)が、第2の検出タグを用いて前記第2の分析物にタグ付けするために、前記サンプル中の前記第2の分析物に対する抗体のような第2の検出剤を含有し;
前記第2のテストライン(21)が、第1の分析物を完全に枯渇させた前記サンプルから前記第2の分析物を捕捉するために、前記第2の分析物に対する抗体のような第2の捕捉剤によって形成され;
前記任意選択の少なくとも1本の第1のコントロールライン(12)が、前記抗体のような第1の検出剤に特異的に結合する抗体のような第1の対照剤を含有し;
前記任意選択の少なくとも1本の第2のコントロールライン(22)が、前記抗体のような第2の検出剤に特異的に結合する抗体のような第2の対照剤を含有する、ラテラルフローイムノクロマトグラフィーストリップ。 - 前記抗体のような第1の検出剤および前記抗体のような第2の検出剤が、前記サンプル中でまたは前記サンプルとともに自由に移動できる遊離した抗体のような第1の検出剤および抗体のような第2の検出剤であり、前記抗体のような第1の捕捉剤および前記抗体のような第2の捕捉剤がそれぞれ、前記第1のテストラインおよび前記第2のテストライン(11、21)の部位に固定された固定化された抗体のような第1の捕捉剤および抗体のような第2の捕捉剤であり、かつ、前記任意選択の第1のコントロールラインおよび第2のコントロールライン(12、22)の抗体のような剤が、前記第1のコントロールラインおよび前記第2のコントロールライン(12、22)の部位に固定されている、請求項9に記載のラテラルフローイムノクロマトグラフィーストリップ。
- 前記第1の分析物が、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌(MRSA)であり、かつ、前記第2の分析物が、メチシリン感受性黄色ブドウ球菌(MSSA)である、請求項9または10に記載のラテラルフローイムノクロマトグラフィーストリップ。
- 前記抗体のような第1の検出試薬および前記抗体のような第1の捕捉試薬が、ペニシリン結合タンパク質2a(PBP2a)の異なるエピトープに特異的であり;かつ、前記抗体のような第2の検出試薬および前記抗体のような第2の捕捉試薬が、ペニシリン結合タンパク質2(PBP2)の異なるエピトープに特異的である、請求項9〜11のいずれか一項に記載のラテラルフローイムノクロマトグラフィーストリップ。
- 第1のコンジュゲーションパッド(10)および第1のテストライン(11)の少なくとも1つのさらなるセットが、第1のコンジュゲーションゾーン(10)および第1のテストライン(11)の第1のセットに続く、請求項9〜12のいずれか一項に記載のラテラルフローイムノクロマトグラフィーストリップ。
- サンプル中の第1の分析物および第2の分析物の存在または不在を検出するためのキットであって、請求項9〜13のいずれか一項に記載のラテラルフローイムノクロマトグラフィーストリップを含んでなる、キット。
- 以下:
スワブからサンプルを溶出するための薬剤を含んでなる、患者からサンプルを採取するためのスワブ;
サンプル中の黄色ブドウ球菌の不在または存在を検出するためのEbfイムノクロマトグラフィーディップスティック;
黄色ブドウ球菌を単離濃縮するためのIgG抗体コーティングされた磁性ビーズであって、前記IgG抗体は、そのFab領域で磁性ビーズに結合しており、黄色ブドウ球菌のプロテインAと特異的に相互作用するように、そのFc領域は使われていない状態であり;洗浄工程および磁性ビーズからの黄色ブドウ球菌の溶出のための薬剤を含んでなる、磁性ビーズ;および
黄色ブドウ球菌の固定化および透過処理のための薬剤
の少なくとも1つをさらに含んでなる、請求項14に記載のキット。
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