JP2018523650A - 顔又は身体の表面を処置するためのシートパック - Google Patents
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Abstract
Description
別段に指示されない限り、本明細書中に記載される全てのパーセントは重量パーセントである。
本発明は、皮膚に局所的に適用された場合に、天然で未処置の皮膚細胞において24時間にわたり可変的に発現される遺伝子を刺激する少なくとも1種の成分、及び場合により組み合わせて少なくとも1種の利益剤を含有するトリートメント組成物を含浸させた吸収層を含むシートパックであって;上記シートパックが、天然で未処置の皮膚細胞において上記成分により刺激される同遺伝子が最大に発現される24時間以内の選択時間にシートパックを皮膚に局所的に適用するための使用説明書と共にパッケージに収容されている、上記シートパックを対象とする。
(a) 天然で未処置の皮膚細胞において24時間にわたり可変的に発現される遺伝子を同定するステップ、
(b) 吸収層と、場合により吸収層に結合された不透過層を含むシートパックを形成するステップ、
(c) 吸収層に、皮膚に局所的に適用された場合に上記(a)の遺伝子を刺激する少なくとも1種の成分を含有するトリートメント組成物を含浸させるステップ;
(d) 天然で未処置の皮膚細胞の大部分において上記(a)の遺伝子が最大に発現される時間に上記シートパックを皮膚に適用するための使用説明書を含むパッケージに、上記シートパックをパッケージするステップ
を含む、上記方法も対象とする。
(a) 吸収層と、場合によりそれに結合された不透過層を含むシートパックを形成するステップ;
(b) 吸収層に、天然の皮膚細胞に局所的に適用された場合に、上記天然の皮膚細胞において24時間にわたり可変的に発現される遺伝子を刺激する少なくとも1種の成分を含有するトリートメント組成物を含浸させるステップ、
(c) 天然で未処置の皮膚細胞において上記(b)の同遺伝子が最大に発現される時間に上記シートパックを皮膚に局所的に適用するステップ
を含む、上記方法も対象とする。
本発明の様々な成分及び実施形態は、本明細書中に詳細に記載される。
本発明は、吸収層と、場合により吸収層に結合された不透過層とを含むシートパックであって、吸収層に、天然の皮膚細胞において24時間にわたり可変的に発現される遺伝子を刺激する活性を有する少なくとも1種の成分を含有するトリートメント組成物が含浸されている、上記シートパックを対象とする。この成分はスキントリートメント活性物質であってもよく、又は少なくとも1種のさらなるスキントリートメント活性物質を組成物中に組み込むことが望ましい場合もある。シートパックは、天然で未処置の皮膚細胞において上記成分により刺激される同遺伝子が最大に発現される時間に上記シートパックを皮膚に局所的に適用するための使用説明書と共にパッケージに収容される。
本発明のシートパックは積層体形態であり、場合により少なくとも1つの不透過層を含む。「不透過」という用語は、上記層が通常は水分に対して不透過性であるため、シートマスク吸収層からの活性処方の蒸発を実質的に低減し得るか又は完全に阻害し得ることを意味する。積層体において使用される不透過層は、薄膜の形態で存在することが可能な金属箔製、合成ポリマー材料製又は天然ポリマー材料製であり得る。特に好ましいのは金属箔である。
好適な金属箔は、アルミニウム、シリカ、鉄、銅、マンガン、マグネシウム又は亜鉛を含有する金属合金であり得る。好ましいのは、0.1〜1.0%のシリカと鉄の組み合わせ、0.01〜0.12%の銅、0.001〜0.06%のマンガン、0.001〜0.06%のマグネシウム、0.001〜0.06%の亜鉛、及び約98%超のアルミニウム(好ましくは約98〜100%のアルミニウム)を含有する金属合金から得られるアルミ箔である。好ましいアルミ箔は、固体形態で色は銀色であり、融点650℃超及び比重2.5〜3.0(好ましくは約2.7)を有する。最も好ましいのは、2〜15マイクロン、好ましくは約5〜10マイクロン、さらに特に約7マイクロンの厚さを有するアルミ箔である。最も好ましいのは、Toyo KK、大阪府、日本により作製されたアルミ箔合金である。
積層体の作製に適した不透過層の例として、2〜20マイクロンの厚さを有する薄いシートにフィルムを形成することができるポリビニリデンクロリド、ポリエチレン、又は他のエチレン性不飽和モノマーのホモポリマー又はコポリマーも挙げられる。積層体に適したこのような不透過層の例として、カナダ特許第385753号において示される、商標「サランラップ(Saran Wrap)」で呼ばれる場合が多い種類のポリビニリデンクロリド又はポリエチレンが挙げられる。好ましい合成ポリマー不透過層は、金属箔と類似の機能的特徴(例えば比重(密度)2.5〜3.0、好ましくは約2.7など)を有する。
シートマスクを創出するために使用される吸収層は、好ましくは不織布から作製される。不織布は、編布又は織布のいずれでもない布を指す。これらは、典型的には、繊維又はフィラメントを機械的に、熱的に又は化学的に絡ませることによって形成される。吸収層に適した不織布は、様々な好ましい機能的特性を有する。
μ = F / N
(式中、Fは、水平面上で物体を動かすために必要とされる力であり、Nはその面に垂直な荷重)である。摩擦は、好ましくは摩擦テスターによって測定される。1つの好ましい実施形態において、不織布の摩擦係数は0.45MIU未満である。0.45MIU超の測定値を有する布は、硬い感触を与える傾向があり得る。
吸収層と不透過層との積層化は、所望の場合、結合剤を用いて達成される。結合剤は、2つの層を恒久的様式で確実に一緒にするものでなければならず、不透過層及び吸収層並びにトリートメント組成物と適合するものでなければならず、圧力及び熱の適用により層を共に融着することができるものでなければならない。結合を実現するために用いられる熱は、2層を効果的に積層するためには十分に低いが、吸収層の燃焼、分解、融解、又は他の崩壊を引き起こすほどには高くないものでなければならない。一実施形態において、結合剤は200〜300℃の融点を有し、その融点から約1〜35%低い温度において吸収層と不透過層とを効果的に融着することができる。最も好ましいのは、エチレン性不飽和モノマー繰り返し単位(例えばアクリル酸、メタクリル酸又はそれらの単純C1〜20アルキル若しくは芳香族エステル);あるいはエチレン、プロピレン、ブチレン繰り返し単位由来のポリマーである。特に好ましいのは、ポリエチレン、特に東ソー株式会社(Tosoh Corporation)により商品名「ペトロテン(Petrothene)」の下で販売されている低密度ポリエチレン(融点221〜248℃を有し、固体形態の乳白色のペレットであり、比重915〜935kg/m3を有する)である。最も好ましいのは、結合剤が200〜300℃の融点を有し、約300〜400℃の温度で不透過層を吸収層に結合させる場合である。
シートパックが積層体形態である場合、吸収層と不透過層は共に結合されて、吸収層が不透過層に接着されている積層体を形成しなければならない。結合は、結合材を含む押出機を、不織布のスプールと金属箔層のスプールの2つの別個のスプール間に配置し、上記の層が共に積層されるのに十分な量の圧力及び熱により2層間に結合材を押し出して、その後この積層体を別の回収ローラー上に巻き取ることによって最良に達成される。
トリートメント組成物(本明細書中により具体的に記載される)は、好ましくは、積層化プロセスの後、積層ロールを処置表面に望ましい所望の形及び大きさに切断する前、又はカスタマイズされた形に切断した後のいずれかに吸収層に含浸される。トリートメント組成物の吸収層への含浸が、積層体が所望の大きさ及び形に切断された後に起こることが最も好ましい。本発明の一実施形態において、トリートメント組成物は別の容器に収容され、消費者によりマスクに適用されてもよい。この場合、シートマスクと、トリートメント組成物で満たされた容器は、消費者により購入されるキットの形態で販売される。使用直前に、消費者は、皮膚の処置のためにトリートメント組成物をマスクの吸収層に適用する。
その後積層体は、処置される表面に応じて所望の形に切断される。例えば、顔トリートメントシートパックは、顔への適用に適した様々な形状に切断することができる。これらの形は、顔の表面全体を被覆する1ピースマスク、又は所望の戦略的領域(例えば、目の下、口の周り、又は皮膚の乾燥領域上)に配置し得る多様な小さいピースを包含する。
所望のケラチン表面にフィットさせるために切断されるシートパックは、好ましくは図4に表されるような気密性ポーチ又はエンベロープ28であるパッケージに収容される。パッケージの一種が図4に表される。シートパックを保持するためのエンベロープは、シートマスクを確実に折り畳まれていない状態のままとし得る大きさ及び形であり得る。あるいは、シートパックを半分又は4分の1に折り畳んで、より小さなサイズのエンベロープ28に保存することがより望ましい場合がある。使用説明書は、エンベロープ29の上に直接配置されていてもよいし、あるいは1つ以上のエンベロープ28が入っている二次パッケージ30の上に配置されていてもよい。二次パッケージは、1つ以上の保存エンベロープ28に収容されている個々のシートパックを保持するための箱30であり得る。使用説明書は、天然の皮膚細胞においてトリートメント組成物中の成分により活性化される同遺伝子が最大に発現される時間にシートパックを適用することを使用者に指示する。
本発明のシートパックにおいて使用されるトリートメント組成物は、好ましくは液体形態である。このトリートメント組成物は、エマルション(水中油エマルション若しくは油中水エマルションのいずれか)であってもよいし、溶液形態若しくは分散液形態であってもよい。特に好ましい形態はセラムと呼ばれ、これは一般的には水、保水剤及び他の成分の混合物であり、極めて少量の油相を含むか全く油相を含まない。シートパックに含浸させるのに適したトリートメント組成物は、25℃における粘度2〜1000cps、好ましくは約2〜200cps、より好ましくは約5〜50cps、及び比重1.000〜1.010、より好ましくは約1.000〜1.008、最も好ましくは約1.005を有し得る。トリートメント組成物を上記の粘度範囲内及び比重範囲内に維持することにより、トリートメント組成物が吸収層に適切に浸透し、層を透過するために十分に液状であるが層の透過において困難を生じるほど粘性ではなくなることを確実にする。
エキナセア抽出物、又はそれに由来する活性成分であるチコリ酸は、特にPER及びPER1の好適な活性化因子であることが示されている。チコリ酸成分は、合成であってもよいし、天然由来であってもよい。合成チコリ酸は、Sigma Aldrichなどの多くの商業的製造者から購入することができる。チコリ酸は、チコリ酸を含有することが知られている植物供給源、例えばエキナセア(Echinacea)、キクニガナ(Cichorium)、タンポポ(Taraxacum)、メボウキ(Ocimum)、メリッサ(Melissa)から、又は藻類若しくは海藻類から抽出することもできる。より具体的には、植物抽出物、例えば、ムラサキバレンギク(Echinacea purpurea)、チコリー(Cichorium intybus)、セイヨウタンポポ(Taraxacum officinale)、スイートバジル(Ocimum basilicum)、又はセイヨウヤマハッカ(Melissa officinalis)は優れた供給源である。「チコリ酸」という用語は、本明細書中で用いられる場合、皮膚細胞においてPER1遺伝子発現を増加させることができるそれらの任意の異性体も包含する。
種々のペプチドが好適なCLOCK又はPER1遺伝子活性化因子である。このようなペプチドの一例は、米国特許出願第2014/0045766号に開示されており、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
R1-(AA)n-X1-S-T-P-X2-(AA)p-R2
を有し、
式中、(AA)n-X1-S-T-P-X2-(AA)pは(配列番号1)であり:
X1は、スレオニン、セリンを表すか、又はゼロに等しく、
X2は、イソロイシン、ロイシン、プロリン、バリン、アラニン、グリシンを表すか、又はゼロに等しく、
AAは、任意のアミノ酸又はそれらの誘導体を表し、n及びpは0〜4の整数であり、
R1は、遊離の、又はアセチル基、ベンゾイル基、トシル基若しくはベンジルオキシカルボニル基のいずれかから選択され得る保護基で置換されているN末端アミノ酸の第一級アミン官能基を表し、
R2は、C1〜C20アルキル鎖又はNH2、NHY若しくはNYY基(YはC1〜C4アルキル鎖を表している)のいずれかから選択され得る保護基で置換されているC末端アミノ酸のカルボキシル官能基の水酸基を表し、
ここで一般式(I)の配列は、約3〜13個のアミノ酸残基を含み、
前記一般式(I)の配列は、アミノ酸X1及びX2の、他の化学的に等価のアミノ酸との置換を含む可能性があり;
ここでアミノ酸は、以下:
アラニン(A)
アルギニン(R)
アスパラギン(N)
アスパラギン酸(D)
システイン(C)
グルタミン酸(E)
グルタミン(Q)
グリシン(G)
ヒスチジン(H)
イソロイシン(I)
ロイシン(L)
リジン(K)
メチオニン(M)
フェニルアラニン(F)
プロリン(P)
セリン(S)
スレオニン(T)
トリプトファン(W)
チロシン(Y)
バリン(V)
である。
(配列番号1) S-T-P-NH2
Ser-Thr-Pro-NH2
(配列番号2) Y-V-S-T-P-Y-N-NH2
Tyr-Val-Ser-Thr-Pro-Tyr-Asn-NH2
(配列番号3) NH2-V-S-T-P-E-NH2
NH2-Val-Ser-Thr-Pro-Glu-NH2
(配列番号4) NH2-L-H-S-T-P-P-NH2
NH2-Leu-His-Ser-Thr-Pro-Pro-NH2
(配列番号5)CH3NH-R-H-S-T-P-E-NH2
CH3-NH-Arg-His-Ser-Thr-Pro-Glu-NH2
(配列番号6)CH3NH-H-S-T-P-E-CH3NH
CH3-NH-His-Ser-Thr-Pro-Glu-CH3-NH
R1-X1-X2-Ser-Pro-Leu-Gln-X3-X4-R2
(式中:
X1は、システイン、メチオニンであるか、又はゼロに等しく、
X2は、セリン、スレオニンであるか、又はゼロに等しく、
X3は、アラニン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、プロリン、バリンであるか、又はゼロに等しく、
X4は、アスパラギン、グルタミンであるか、又はゼロに等しく、
R1は、遊離の、又はアセチル基、ベンゾイル基、トシル基若しくはベンジルオキシカルボニル基から選択され得る保護基で置換されているN末端アミノ酸の第一級アミン官能基であり、
R2は、遊離の、あるいはC1〜20アルキル鎖又はNH2、NHY若しくはNYY基(ここで、YはC1〜4アルキル鎖である)から選択され得る保護基で置換されているC末端アミノ酸のカルボキシル官能基の水酸基である)
を有し、
前記一般式(I)の配列は、4〜8個のアミノ酸残基で形成されており、前記一般式(I)の配列は、アミノ酸X2〜X4の、他の化学的に等価のアミノ酸との置換を含む可能性がある。
Ser-Pro-Leu-Gln-NH2
を与えるように選択されるペプチドである。
トリートメント組成物は、好ましくは1種以上のさらなるスキントリートメント活性物質を含有する。スキントリートメント活性物質は、利益を提供するあらゆるもの、例えば皮膚美白剤(チロシナーゼ阻害又は他の経路を介する)、保湿剤、抗にきび剤、抗炎症剤、抗酒さ剤、細胞DNA修復活性物質、タンパク質修復活性物質、抗しわ剤、皮膚引き締め剤、光学的ぼかし剤(blurring agent)、油吸収活性物質、保水剤、コラーゲン若しくはエラスチン刺激活性物質、又は利益の提供に直接的又は間接的に寄与する特定の成分であり得る。このような活性物質は、約0.00001〜10%、好ましくは0.00005〜5%、より好ましくは約0.0001〜2%の量で存在し得る。好適な利益活性物質としては、例えば、限定するものではないが、本明細書中に示される利益活性物質が挙げられる。好ましいのは、可変的に発現される遺伝子を刺激する成分と組み合わせた場合に最適化された有効性を示す利益活性物質である。
組成物は、1種以上のDNA修復酵素を含有し得る。推奨範囲は、1種以上のDNA修復酵素約0.00001〜約35%、好ましくは約0.00005〜約30%、より好ましくは約0.0001〜約25%である。
トリートメント組成物は、約0.0001〜65%、好ましくは約0.0005〜50%、より好ましくは約0.001〜40%の量の1種以上のプロテアソーム活性化因子を含有し得る。好適なプロテアソーム活性化因子は、ケラチン表面の細胞においてプロテアソーム活性を刺激する任意の化合物、分子、又は活性成分である。プロテアソームは、損傷タンパク質を分解する細胞内のタンパク質複合体である。プロテアソーム活性化因子である成分は、年齢、細胞の損傷(例えばUV光に対する曝露によって引き起こされる細胞の損傷)によってプロテアソーム活性が低下する可能性がある細胞中のプロテアソーム活性を刺激する。
トリートメント組成物は、1種以上のプロバイオティクス微生物又はそれらの溶解物若しくは濾液を含有し得る。プロバイオティクス微生物抽出物は、任意のプロバイオティクス細菌又は酵母の発酵から得ることが可能であり、例えば、ラクトバチルス目(Lactobacillales)若しくはビフィドバクテリウム目(Bifidobacteriales)、又は酵母の属、サッカロマイセス(Saccharomyces)に由来するプロバイオティクス微生物抽出物が挙げられる。より好ましい細菌は、ビフィドバクテリウム及びラクトバチルスに由来する細菌である。ラクトバチルス目に由来する好適な細菌としては、アビオトロフィア属(Abiotrophia)、アエロコッカス属(Aerococcus)、カモバクテリウム属(Camobacterium)、エンテロコッカス属(Enterococcus)、ラクトバチルス属(Lactobacillus)、ラクトコッカス属(Lactococcus)、レウコノストック属(Leuconostoc)、オエノコッカス属(Oenococcus)、ペディオコッカス属(Pediococcus)、スポロラクトバチルス属(Sporolactobacillus)、テラゲノコッカス属(Teragenococcus)等が挙げられる。特に望ましいのは、相当多数の種が存在するラクトバチルス属に由来する細菌である。最も好ましいのは、ラクトバチルス・プランタルム(Lactobacillus Plantarum)又はラクトバチルス・カゼイ(Lactobacillus casei)若しくはラクトバチルス・ラムノサス(Lactobacillus rhamnosus)(P)である。
安定な、化粧上許容可能な組成物を提供するために、トリートメント組成物中に他の成分が存在していてもよい。このような成分としては、界面活性剤、増粘剤、保存剤、保水剤、植物抽出物、他のペプチド又はタンパク質などが挙げられる。
50〜95%の水
0.001〜5%の植物抽出物
0.01〜5%の可変遺伝子刺激活性物質、
0.01〜5%のスキントリートメント活性物質、
0.01〜5%の植物抽出物、
0.01〜5%の保水剤;及び
0.01〜5%の増粘剤
を含有し得る。
別の好適なトリートメント組成物は、以下:
50〜95%の水、
0.01〜5%の可変遺伝子刺激活性物質(スキントリートメント活性物質でもある)
0.01〜5%のDNA修復酵素;及び
0.01〜5%のビフィドバクテリウム属由来の不活性化細菌溶解物
を含有し得る。
本発明の方法において、シートパックは、所望のケラチン表面に1〜60分間の期間で適用される。しかしながら、シートパックの1つの特定の利益は、それが、10分以下で効果的なスキントリートメントを提供することである。最も標準的なシートパック製品は、20〜30分間を必要とする。20〜40平方インチを有する標準的な顔を処置するためには、満量24〜25mLが完璧である。マスクを外した後に顔上に残っているトリートメント組成物は、トリートメントローション又はクリームとして皮膚へマッサージすることが可能であり、皮膚にさらなる保湿剤を適用することを不必要にし得る。特に夜の休息時間中、皮膚バリアーは自然により透過性となり、これにより皮膚の最適化された処置を可能とする。1つの好ましい実施形態において、使用説明書は、消費者に、シートマスクを1200〜2400時間、より好ましくは1600〜2400時間、最も好ましくは1800〜2400時間の期間適用することを指示する。
(a) 天然で未処置の皮膚細胞において24時間にわたり可変的に発現される遺伝子を同定するステップ、
(b) 吸収層と、場合により吸収層に結合された不透過層を含むシートパックを形成するステップ、
(c) 吸収層に、皮膚に局所的に適用された場合に上記(a)の遺伝子を刺激する少なくとも1種の成分を含有するトリートメント組成物を含浸させるステップ;
(d) 天然で未処置の皮膚細胞において上記(a)の遺伝子が最大に発現される時間にシートパックを皮膚に適用するための使用説明書を含むパッケージに、シートパックをパッケージするステップ
を含む、上記方法も包含する。
(a) 吸収層と、場合によりそれに結合された不透過層を含むシートパックを形成するステップ;
(b) 吸収層に、天然の皮膚細胞に局所的に適用された場合に、天然の皮膚細胞において24時間にわたり可変的に発現される遺伝子を刺激する少なくとも1種の成分を含有するトリートメント組成物を含浸させるステップ、
(c) 天然で未処置の皮膚細胞において上記(b)の同遺伝子が最大に発現される時間に、前記シートパックを皮膚に局所的に適用するステップ
を含む、上記方法も対象とする。
正常ヒト表皮ケラチン生成細胞(NHEK)ドナーにおけるPER1遺伝子発現を、対照細胞及びオゾンに曝露された細胞においてレポーターアッセイを用いて試験した。NHEKを、黒壁96ウェルマイクロタイタープレートにおいて、EpiLife培地中3x104の濃度で3時間プレーティングした。次いで、細胞を、per1プロモーターエレメントの上流にライゲーションされたレポーター遺伝子としてのルシフェラーゼを含むプラスミドと共に添加物非含有培地においてトランスフェクトした。さらに、Plus試薬及びLipfectamine試薬(Invitrogen、Carlsbad、CA)の添加によりトランスフェクションを促進した。添加物非含有培地におけるトランスフェクションをさらに4時間行った。これが細胞を「飢餓状態」とし、これらの細胞がそれらの概日リズムに同期するようにさせる。トランスフェクション後、純粋な完全培地及びオゾンを含有する完全培地を添加し、16時間インキュベートした。次いで、ルシフェラーゼ試薬、Glo-Bright(Promega Corporation、ウィスコンシン州マディソン)を添加し、Lmax luminometer(Molecular Devices、カリフォルニア州サニーベール)中で発光を測定する。結果は図5に示され、未処置細胞が24時間にわたって可変的なPer1活性を示す(最大活性は0時(夜)に生じ、12時間後(昼)にその最低レベルまでゆっくりと低下し、その後24時間で再び増加する)ことを示す。オゾン処置細胞は、0時間、6時間、及び12時間でper1活性の低下を示し、オゾンの毒作用に対する細胞安定化は、24時間までに安定する。この結果は、NHEKにおけるper1遺伝子発現の関数としての未処置細胞の正常な概日リズムを示す。
トリートメント組成物を以下のとおりに調製した:
45〜65%(55%)パルプ、25〜45%(35%)レーヨン、及び5〜15%(10%)ポリエステル(不織布KP9650、三昭紙業株式会社(Sansho Shigyo Co. Ltd)、土佐市、高知県、日本)を含む不織布を、図3に示されるように、目、鼻及び口用の穴を有するフェイスマスク用のパターンに切断した。第2のフェイスマスクを、アルミニウム及びアルミニウム合金(約99.30%以上のアルミニウム、それぞれ0.7%以下のシリコン及び鉄、0.1%以下の銅、0.05%以下のマンガン、0.05%以下のマグネシウム及び0.05%以下の亜鉛)を含むアルミ箔(東洋アルミニウム株式会社(Toyo Aluminum KK)、大阪府、日本)と、同不織布との積層体を作製することによって作製した。1つのスプール上に不織布をロードした。2番目のスプール上にアルミ箔をロードした。低密度ポリエチレン(ペトロテン(Petrothene)、東ソー株式会社(Tosoh Corporation)、東京、日本)を含有する押出機が、2枚のフィルム間に上記の樹脂を押出し、これを図2に示されるとおり、圧力結合ローラーと冷却ローラーとの間で圧縮した。図2と同じ設計の第2のシートパックを積層化フィルムから切り出した。実施例2の組成物を、両シートマスクの不織層に含浸した。
EFT-400皮膚モデルを通した培地へのフルオレセインの移行を、特定の時点(t=0分、15分、30分、45分、60分、90分、120分、150分、180分)で蛍光プレートリーダーを用いて測定し、結果を比較した。マスクに起因するより多くの浸透効果は、培地へのより多くのフルオレセインの移動を示唆していた。
・EFT-400生皮膚等価物:Mattek;EFT-400;ロットNo. 17586;キットE(「LSE」)。
・EFT-400培地:Mattek;EFT-400-asy;ロットNo. 092914GSA。
・フルオレセイン:ベンダー:SigmaカタログNo. F6377-100G ロットNo. 061M0048V
・DPBS(ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水):ベンダー:Corning CellgroカタログNo. 21-0341-CV ロットNo. 21031456。
・提供されたマスク:
・55+/-5%パルプ、35+/-5%レーヨン、及び10%+/-5%ポリエステルを含む不織布に由来する吸収層のみを有するフェイスマスク。不織布は、三昭紙業株式会社から購入した。
・皮膚生検パンチ8mm(マスクから8mmの丸円片を切り出してEFT-400の内ウェルに適合させるため)。
・ブランク - LSE(生皮膚等価物)に何も適用しなかった。
・25μl DPBS単独を、LSEに局所的に適用した。
・25μlのフルオレセイン(@DPBS中100ppm希釈)を、LSEに局所的に適用した。
・吸収層単独マスクを、25μlのフルオレセイン(@100ppm)を配置したLSE上に重ねた。
・吸収層と不透過層の積層体のマスクを、25μlのフルオレセイン(@100ppm)を配置したLSE上に重ねた。
2.5ml培地(EFT-400)を構築して供給し、標準的な条件(5%CO2/37℃/100%湿度)で一晩インキュベートした。MatTek’s EpiDerm Full Thickness 400(EFT-400)使用プロトコルのとおりにLSEを維持した。
2. 8mm生検パンチを用いて、上記のとおりに提供されたサンプルから小円を適切に切り出した。
3. 25μlのDPBSを、指定ウェル上のLSE上にピペッティングした。
4. 25μlのDPBS中フルオレセイン単独(100ppm)をLSE上にピペッティングした。
5. ダイカットされた吸収層単独円をLSEウェル中に配置し、25μlのDPBS中100ppmフルオレセインをマスクの不織布上にピペッティングし、DPBS単独(対照)を含むウェルでもピペッティングした。
6. ダイカットされた吸収層と不透過層の積層体を取り出した。円片をウェルの上で保持しながら、吸収層を25μlのDPBS中100ppmフルオレセインで飽和させた。次いで、ダイカットマスク片の浸漬ディスクを、浸漬側を下にしてEFTウェルに急速に適用した。
7. 以下に示されるとおり、様々な時点で上清をLSEのウェル底から引き出し、最終読み取り(t=3時間)後に、プレートリーダーを介した蛍光分析を用いて読んだ。
i. 使用した設定は、底読み取り(Bottom Read Ex):494、発光(em):521、カットオフ(Cutoff):515であった。
・1,000μlの培地EFT-400培地中100ppmフルオレセインをチューブNo. 1にピペットする
・チューブ2〜8には、500μlのEFT-400-ASY培地単独を加える。
・チューブNo. 1から開始して、500μlの100ppmフルオレセインをチューブ1からチューブ2に移し、ピペットアップ及びダウンして徹底的に混合し、チューブNo. 2において最終濃度50ppmを作出する。
・次いで、徹底的に混合した後、チューブNo. 2から500μlをピペットしてチューブNo. 3に送り、ピペットアップ及びダウンして徹底的に混合する。チューブNo. 3において最終濃度25ppmを作出する。
・この連続移動を残りのチューブについて継続し、各連続希釈は後続のチューブの濃度を半分に低下させる。
・各チューブから得られた1ウェル当たり100μlの溶液を、96ウェルプレートの対応するウェルにピペットする。
100μl n=1。
A = ウェルに何も入っていない
B = ウェルに何も入っていない
C = 25μl DPBS単独
D = 25μl DPBS単独のウェル
E = 25μlのDPBS中100ppmフルオレセインのウェル
F = 25μlのDPBS中100ppmフルオレセインのウェル
G = 25μlの吸収層単独上100ppmフルオレセインのウェル
H = 25μlの吸収層単独上100ppmフルオレセインのウェル
I = 25μlのフルマスク上100ppmフルオレセインのウェル
J = 25μlのフルマスク上100ppmフルオレセインのウェル
Claims (22)
- 皮膚に局所的に適用された場合に、天然で未処置の皮膚細胞において24時間にわたり可変的に発現される遺伝子を刺激する少なくとも1種の成分を含有するトリートメント組成物を含浸させた吸収層を含むシートパックであって;前記シートパックが、天然で未処置の皮膚細胞において前記成分により刺激される同遺伝子が最大に発現される24時間以内の選択時間に前記シートパックを皮膚に局所的に適用するための使用説明書と共にパッケージに収容されている、前記シートパック。
- 天然で未処置の皮膚細胞において可変的に発現される遺伝子が、ピリオド遺伝子1、2、又は3(PER1、2、3);概日運動出力サイクル異常(CLOCK)遺伝子;脳及び筋肉アリール炭化水素受容体核内輸送体(BMAL)遺伝子;又はクリプトクロム概日遺伝子(CRY)の1つ以上である、請求項1に記載のシートパック。
- シートパックが、吸収層に結合された不透過層を有する積層体形態である、請求項2に記載のシートパック。
- 吸収層が不織布であり、不透過層が金属箔である、請求項3に記載のシートパック。
- 吸収層が、以下の仕様:
(a) ラローズ法による測定から5秒後に1グラム当たり0.03〜2.5mL/グラムの水を吸収する、
(b) 厚さ0.1〜1.0mm、
(c) 屈曲抵抗性1.0〜2.0mm.m2/グラム、
(d) ドレープ係数1〜70%、
(e) KES屈曲剛性B値0.20gf/cm2/cm以下;又は
(f) 摩擦係数0.45MIU未満
の1つ以上を有する不織布である、請求項4に記載のシートパック。 - 不織布が、綿、レーヨン及び合成繊維の混合物を含む、請求項5に記載のシートパック。
- 不織布が、25〜75%のパルプ(綿)、10〜50%のレーヨン、及び2〜15%のポリエステルを含む、請求項6に記載のシートパック。
- 不透過層が、以下の仕様:
(a) 約98〜100%のアルミニウム、
(b) 融点650℃超、
(c) 比重2.5〜3.0、
(d) 厚さ2〜15マイクロン
の1つ以上を有する金属箔である、請求項5に記載のシートパック。 - 吸収層が、融点221〜248℃及び比重915〜935kg/m3を有する合成ポリマーである結合剤により不透過層に結合されている、請求項4に記載のシートパック。
- 不透過層が、同じ吸収層を含むが吸収層に結合された不透過層は含まないシートパックによる処置面へのトリートメント組成物の皮膚浸透と比較した場合に、トリートメント組成物が処置面へのトリートメント組成物の皮膚浸透において少なくとも10%の改善を示すようにさせる、請求項4に記載のシートパック。
- 吸収層が、低密度ポリエチレンである結合剤により不透過層に結合されている、請求項4に記載のシートパック。
- 可変的に発現される遺伝子を刺激する成分が、スキントリートメント活性物質でもある、請求項1に記載のシートパック。
- トリートメント組成物が、さらなるスキントリートメント活性物質を含有する、請求項1に記載のシートパック。
- CLOCK、PER、CRY、又はBMALの活性化因子が、以下:
チコリ酸、
エキナセア抽出物、
トリペプチド-32、
テトラペプチド-26;又は
オートファジー活性化因子
の1つ以上である、請求項2に記載のシートパック。 - さらなるスキントリートメント活性物質が、DNA修復酵素、プロバイオティクス微生物、プロテアソーム活性化因子又はそれらの組み合わせである、請求項12に記載のシートパック。
- 顔又は身体の皮膚を処置するための、請求項1に記載のシートパック。
- 使用説明書が、シートパックを1800〜2400時間の範囲の時間に皮膚に適用するためのものである、請求項1に記載のシートパック。
- 使用説明書が、シートパックを2000〜2400時間の範囲の時間に皮膚に適用するためのものである、請求項15に記載のシートパック。
- 使用説明書が、シートパックを1800〜2400時間の範囲の時間に1〜60分間皮膚に適用するためのものである、請求項15に記載のシートパック。
- シートパックを作製するための方法であって、以下のステップ:
(a) 天然で未処置の皮膚細胞において24時間にわたり可変的に発現される遺伝子を同定するステップ、
(b) 吸収層と、場合により吸収層に結合された不透過層を含むシートパックを形成するステップ、
(c) 吸収層に、皮膚に局所的に適用された場合に上記(a)の遺伝子を刺激する少なくとも1種の成分を含有するトリートメント組成物を含浸させるステップ;
(d) 天然で未処置の皮膚細胞において上記(a)の遺伝子が最大に発現される時間にシートパックを皮膚に適用するための使用説明書を含むパッケージに、前記シートパックをパッケージするステップ
を含む、前記方法。 - 24時間にわたり可変的に発現される遺伝子が、1800〜2400時間の範囲の時間に最大に発現され、PER、CLOCK、BMAL、又はCRYの1つ以上である、請求項20に記載の方法。
- シートパックで皮膚を処置するための方法であって、以下のステップ:
(a) 吸収層と、場合によりそれに結合された不透過層を含むシートパックを形成するステップ;
(b) 吸収層に、天然の皮膚細胞に局所的に適用された場合に前記天然の皮膚細胞において24時間にわたり可変的に発現される遺伝子を刺激する少なくとも1種の成分を含有するトリートメント組成物を含浸させるステップ、
(c) 天然で未処置の皮膚細胞において上記(b)の同遺伝子が最大に発現される時間に前記シートパックを皮膚に局所的に適用するステップ
を含む、前記方法。
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