JP2018519318A - （ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩 - Google Patents

Abstract

本開示は、（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩に関する。また本開示は、（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩を含む医薬品組成物にも関する。また本開示は、癌の治療方法であって、それを必要とする患者に（Ｓ）−［３，４−ジフロロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩を投与することを含む、方法にも関する。【選択図】なし

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１５年６月３０日に出願された米国仮特許出願第６２／１８７，００９号に対する優先権を主張する。上述の出願の全内容が本明細書に組み込まれる。

本開示は、（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩に関する。また本開示は、（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩を含む医薬品組成物にも関する。また本開示は、癌の治療方法であって、それを必要とする患者に（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩を投与することを含む、方法に関する。

従来、癌治療における飛躍的な改善は、新規な機構により作用する治療薬の同定と関連している。癌治療において開発さる可能性のある１つの機構は、ＭＥＫ（［Ｍ］ＡＰＫ／［Ｅ］ＲＫ［Ｋ］ｉｎａｓｅ）の調節である。ＭＥＫ阻害は、異常なＥＲＫ／ＭＡＰＫ経路シグナル伝達によって起こる癌の治療に有望な方策を示す（Ｓｏｌｉｔ ｅｔ ａｌ．，２００６；Ｗｅｌｌｂｒｏｃｋ ｅｔ ａｌ．，２００４）。ＭＥＫ−ＥＲＫシグナル伝達カスケードは、増殖因子、サイトカイン、及びホルモンに応答して細胞増殖、増殖、分化、ならびにアポトーシスを制御する保存経路である。この経路は、しばしばヒト腫瘍においてアップレギュレートされる、または異変するＲａｓの下流で機能する。ＭＥＫは、Ｒａｓ機能の不可欠なエフェクターである。ＥＲＫ／ＭＡＰＫ経路が全腫瘍の３０％においてアップレギュレートされており、Ｋ−Ｒａｓ及びＢ−Ｒａｆにおける発癌性活性化突然変異は、全ての癌の各々２２％及び１８％同定されている（Ａｌｌｅｎ ｅｔ ａｌ．，２００３；Ｂａｍｆｏｒｄ Ｓ，２００４；Ｄａｖｉｅｓ ｅｔ ａｌ．，２００２；Ｍａｌｕｍｂｒｅｓ ａｎｄ Ｂａｒｂａｃｉｄ、２００３）。悪性黒色腫の６６％（Ｂ−Ｒａｆ）、膵臓癌の６０％（Ｋ−Ｒａｓ）及び４％（Ｂ−Ｒａｆ）、結腸直腸癌の５０％（結腸、具体的には、Ｋ−Ｒａｓ：３０％，Ｂ−Ｒａｆ：１５％）、肺癌の２０％（Ｋ−Ｒａｓ）、２７％（Ｂ−Ｒａｆ）乳頭及び脱分化甲状腺癌、ならびに子宮内膜癌の１０〜２０％（Ｂ−Ｒａｆ）を含むヒト癌の大部分は活性化Ｒａｓ及びＲａｆ突然変異を有する。ＥＲＫ経路の阻害、特に、ＭＥＫキナーゼ活性の阻害は、細胞間接触及び運動性の低下ならびに血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）発現のダウンレギュレーションに概して起因して抗転移及び抗血管新生効果をもたらす。さらに、ドミナントネガティブなＭＥＫまたはＥＲＫの発現は、細胞培養において、及びｉｎ ｖｉｖｏでのヒト腫瘍異種移植片の初期及び転移成長において見られるように突然変異体Ｒａｓの形質転換能力を低下させた。したがって、ＭＥＫ−ＥＲＫシグナル伝達経路は、治療的介入の標的となる適切な経路であり、ＭＥＫを標的とする化合物は、多くの治療可能性を示す。

特異的にＭＥＫを阻害する１つの化合物は、（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンであり、これは以下の化学構造を有する：
。
化合物Ｉ
ＷＯ２００７／０４４５１５は、（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの合成を記載し、かつこの分子のＭＥＫを阻害、制御、及び／または調節する治療活性を開示する（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｓｓａｙ、２６８ページ）。化合物Ｉは、米国、ヨーロッパ、及び他のメラノーマを治療する場所でベムラフェニブ（ゼルボラフ（登録商標））との組み合わせで認可されている。

治療効果に加え、薬剤開発企業は、加工、製造、保存性及び／または薬剤としての有用性に適した性質を有する治療薬の好適な形態を提供するため努力している。したがって、所望の性質の一部または全てを有する形態の開発は、薬剤開発において重要である。

出願者は、癌などの増殖性疾患を治療するための医薬品組成物に用いる好適な性質を有する化合物Ｉの結晶性塩形態を発見した。

本開示は、本明細書に記載のように、化合物Ｉの結晶性フマル酸塩に関する。化合物Ｉのフマル酸塩は以下の構造を有し、かつヘミフマル酸塩として同定されている：
。

また本開示は、化合物Ｉの結晶性フマル酸塩を含む医薬品組成物に関する。

また本開示は、化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の使用に関する。

形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の赤外線スペクトルを示す。 形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩のＤＭＳＯ−ｄ_６中の^１Ｈ ＮＭＲスペクトルを示す。 形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩のＤＭＳＯ−ｄ_６中の^１３Ｃ ＮＭＲスペクトルを示す。 形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の^１３Ｃ ＮＭＲ固体スペクトルを示す。 形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の、正のエレクトロスプレー質量スペクトルを示す。 形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の、負のエレクトロスプレー質量スペクトルを示す。 メタノール中の、形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の紫外ペクトルを示す。 形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の示差走査熱量測定トレースを示す。 非晶形と称される化合物Ｉのフマル酸塩の示差走査熱量測定トレースを示す。 形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩のＸＲＰＤディフラクトグラムを示す。 非晶形と称される化合物Ｉのフマル酸塩のＸＲＰＤディフラクトグラムを示す。 ２５℃において、形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩に関する、動的水分吸着／脱着等温線を示す、グラフである。 非晶形と称される化合物Ｉのフマル酸塩の、２５℃における動的水分吸着／脱着等温線を示すグラフである。

本開示は、化合物Ｉの結晶性フマル酸塩に関する。また本発明は、本開示の化合物Ｉの結晶性フマル酸塩を含む、新規な組成物に関する。記載の化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の治療用途及びそれらを含む治療組成物は本開示の別々の態様を表す。化合物Ｉの結晶性フマル酸塩を特徴づけるために使用する技術を以下の実施例に記載する。これらの技術は、単独でまたは組み合わせで、化合物Ｉの結晶性フマル酸塩を特徴づけるために使用してよい。化合物Ｉの結晶性フマル酸塩はまた、本開示の図面を参照することによって特徴づけることができる。

化合物Ｉの結晶性フマル酸塩は熱力学的に安定であることが見いだされ、広範な実験の後で同定された唯一の結晶形であり、非吸湿性であり、製造において一貫して形成される。一方、非晶形は非結晶性であり、吸湿性であり、かつ結晶性形態Ａに転換する。加えて、化合物Ｉの塩を製造しようとする場合、フマル酸塩のみが単結晶形態であった。製造することができる他の塩は、非結晶または結晶質と非晶質の混合物であった。

化合物Ｉの結晶性フマル酸塩
本開示は、化合物Ｉの結晶性フマル酸塩に関する。また本開示は、化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の医薬品組成物に関する。フマル酸塩は、（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル−メタノン（化合物Ｉ）とフマル酸を化合させることにより製造されてよく、２：１の化合物Ｉ：フマル酸の化学量論を有する塩を形成する。化合物Ｉの結晶性フマル酸塩はヘミフマル酸塩を指してもよい。

フマル酸は以下の構造を有する：
。

ＸＬ５１８、ＧＤＣ−０９７３、コビメチニブ、［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］｛３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル｝−メタノン及びＣｏｔｅｌｌｉｃ（商標）を含む、化合物Ｉの様々な名称が存在する。

化合物Ｉは、様々な異なる手法のいずれかに従い、グラムスケール（１ｋｇ未満）またはキログラムスケール（１ｋｇ超）のいずれかで調製することができる。グラムスケール法は、化合物Ｉの合成（実施例２２ｂ）を記載するＷＯ２００７／０４４５１５に記述されており、この文書は全体が参照により本明細書に組み入れられる。あるいは、ＷＯ２０１４／０５９４２２に記述されている手順を用いてキログラムスケールで化合物Ｉを調製することができ、これも全体が参照により本明細書に組み入れられ、以下の実施例において提供される。

形態Ａは２５℃において１．６ｍｇ／ｍＬの水溶性を有する。２５℃／０％相対湿度（ＲＨ）及び２５℃／９０％ＲＨの状況下で、形態Ａは、アッセイ、純度、水分及び溶解における変化を示さなかった。ＤＳＣは、形態Ａは２３９℃の融点まで安定であると示した。溶媒の損失は観察されなかった。

本明細書に記載の形態Ａは、以下のうちの少なくとも１によって特徴づけられる：
（ｉ）実質的に図２に示されるような、ＤＭＳＯ−ｄ_６中の^１Ｈ ＮＭＲスペクトル、
（ｉｉ）実質的に図３に示されるような、ＤＭＳＯ−ｄ_６中の１３Ｃ ＮＭＲスペクトル、
（ｉｉｉ）１７５．３、１７３．６、１１７．５、１５５．５、及び１５３．５、±０．２ｐｐｍから選択される３以上のピークを有する、^１３Ｃ ＮＭＲ固体スペクトル、
（ｉｖ）実質的に図４に示されるような、^１３Ｃ ＮＭＲ固体スペクトル、
（ｖ）４．６、１２．１、１３．２、１３．６及び１４．５±０．２°２θから選択される３以上の２θ値を有する粉末Ｘ線回析パターン（ＣｕＫα λ＝１．５４１８Å）（結晶性形態の測定は室温で行われる）、
（ｖｉ）図１０に示されるパターンに実質的に従うＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン、ならびに
（ｖｉｉ）図８に実質的に従う示差走査熱量測定サーモグラム。

一実施形態においては、形態Ａは（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、（ｖ）、（ｖｉ）、または（ｖｉｉ）のうちの少なくとも２によって特徴づけられる。

他の実施形態においては、形態Ａは（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、（ｖ）、（ｖｉ）、または（ｖｉｉ）のうちの少なくとも３によって特徴づけられる。

他の実施形態においては、形態Ａは（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、（ｖ）、（ｖｉ）、または（ｖｉｉ）のうちの少なくとも４によって特徴づけられる。

他の実施形態においては、形態Ａは（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、（ｖ）、（ｖｉ）、または（ｖｉｉ）のうちの少なくとも５によって特徴づけられる。

他の実施形態においては、形態Ａは（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、（ｖ）、（ｖｉ）、または（ｖｉｉ）のうちの少なくとも６によって特徴づけられる。

他の実施形態においては、形態Ａは（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、（ｖ）、（ｖｉ）、または（ｖｉｉ）の全てによって特徴づけられる。

一実施形態においては、形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル）アゼチジン−１−イル−メタノンの結晶性フマル酸塩は、^１３Ｃ ＮＭＲ固体スペクトルにおいて１７５．３、１７３．６、１１７．５、１５５．５、及び１５３．５、±０．２ｐｐｍから選択される１、２、３、４、または５のピークによって特徴づけられる。

他の実施形態においては、形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル）アゼチジン−１−イル−メタノンの結晶性フマル酸塩は、１７３．６、１１７．５、１５５．５、及び１５３．５、±０．２ｐｐｍの^１３Ｃ ＮＭＲ固体スペクトルから選択される１以上のピークによって特徴づけられる。

他の実施形態においては、形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル）アゼチジン−１−イル−メタノンの結晶性フマル酸塩は、１７５．３、１１７．５、１５５．５、及び１５３．５、±０．２ｐｐｍの^１３Ｃ ＮＭＲ固体スプペクトルから選択される１、２、３、４、または５のピークによって特徴づけられる。

他の実施形態においては、形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル）アゼチジン−１−イル−メタノンの結晶性フマル酸塩は、１７５．３、１７３．６、１５５．５、及び１５３．５、±０．２ｐｐｍの^１３Ｃ ＮＭＲ固体スプペクトルから選択される１、２、３、または４のピークによって特徴づけられる。

他の実施形態においては、形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル）アゼチジン−１−イル−メタノンの結晶性フマル酸塩は、１７５．３、１７３．６、１１７．５、及び１５３．５、±０．２ｐｐｍの^１３Ｃ ＮＭＲ固体スプペクトルから選択される１、２、３、または４のピークによって特徴づけられる。

一実施形態においては、形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル）アゼチジン−１−イル−メタノンの結晶性フマル酸塩は、１７５．３、１７３．６、１１７．５、及び１５５．５、±０．２ｐｐｍの^１３Ｃ ＮＭＲ固体スプペクトルから選択される１、２、３、または４のピークによって特徴づけられる。

一実施形態においては、形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル）アゼチジン−１−イル−メタノンの結晶性フマル酸塩は、Ｘ線回析パターン（ＣｕＫα λ＝１．５４１８Å）において、４．６、１２．１、１３．２、１３．６及び１４．５±０．２°２θから選択される１、２、３、４、または５のピークによって特徴づけられる。

他の実施形態においては、形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル）アゼチジン−１−イル−メタノンの結晶性フマル酸塩は、Ｘ線回析パターン（ＣｕＫα λ＝１．５４１８Å）において、１２．１、１３．２、１３．６及び１４．５±０．２°２θから選択される１、２、３、または４のピークによって特徴づけられる。

他の実施形態においては、形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル）アゼチジン−１−イル−メタノンの結晶性フマル酸塩は、Ｘ線回析パターン（ＣｕＫα λ＝１．５４１８Å）において、４．６、１２．１、１３．６及び１４．５±０．２°２θから選択される１、２、３、または４のピークによって特徴づけられる。

他の実施形態においては、形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル）アゼチジン−１−イル−メタノンの結晶性フマル酸塩は、Ｘ線回析パターン（ＣｕＫα λ＝１．５４１８Å）において、４．６、１３．６及び１４．５±０．２°２θから選択される１、２、３、または４のピークによって特徴づけられる。

一実施形態においては、形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル）アゼチジン−１−イル−メタノンの結晶性フマル酸塩は、Ｘ線回析パターン（ＣｕＫα λ＝１．５４１８Å）において、４．６、１２．１、１３．２及び１３．６±０．２°２θから選択される１、２、３、または４のピークによって特徴づけられる。

形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル）アゼチジン−１−イル−メタノンの結晶性フマル酸塩の他の固体特性は図に示され、以下の実施例において考察される。一実施形態においては、形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル）アゼチジン−１−イル−メタノンの結晶性フマル酸塩は、以下にほぼ等しい単位格子パラメータによって特徴づけられる。
結晶系：正方晶
空間群：Ｐ４３２１２
晶癖：薄板状
単位格子サイズ
ａ＝７．８８２５Å
ｂ＝７．８８２５Å
ｃ＝７６．８４６Å
α＝９０°
β＝９０°
γ＝９０°
温度：２９３Ｋ
格子体積：４７７４．７Å^３
格子単位中の分子：８
密度：１．６３７ｇ／ｃｍ^３
形態Ａの単位格子パラメータは約２５℃、例えば、外気温または室温において計測した。

他の実施形態においては、本開示は実質的に純粋な形態で、態様及び／または実施形態のいずれかにおいて本明細書に記載の形態Ａに関する。

また本開示は、形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の調製方法に関する。形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の調製、固体特性、及び特徴は、以下の実施例に記載される。

医薬品組成物
本開示の他の態様は、化合物Ｉの結晶性フマル酸塩、及び医薬的に許容される１以上の賦形剤を含む医薬品組成物に関する。化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の量は、治療的に有効量であってよい。本開示の他の態様は、化合物Ｉの結晶性フマル酸塩、またはそれらの組み合わせ、及び医薬的に許容される賦形剤を含む固体もしくは分散液医薬品組成物に関する。

一実施形態においては、製剤は錠剤製剤である。一般に錠剤は、混合、造粒及び錠剤化により、活性薬剤、充填剤、崩壊剤ならびに滑沢剤から形成される。

充填剤は当該技術分野において公知であり、例えば、限定されることなく、糖類、糖アルコール、セルロース系、及び他の充填剤が挙げられる。好適な糖類及び糖アルコールの非限定例としては、デキストレイト、デキストリン、デキストロース、ラクトース、マルトデキストリン、マンニトール、イソマルト、ソルビトール、スクロース、糖球、キシリトール、フルクトース、ラクチトール、エリトリトール、マルチトール、キシロース、グルコース、マンノース、ガラクトース、マルトース、セロビオース、トレハロース及びラフノースが挙げられる。セルロース系の非限定例としては、微晶性セルロース（「ＭＣＣ」）及びケイ化ＭＣＣが挙げられる。他の充填剤の非限定例としては、炭酸カルシウム、硫酸カルシウム、ケイ酸カルシウム、キチン、キトサン、二塩基性リン酸カルシウム二水和物、パルミチン酸ステアリン酸グリセリン、水素添加植物油、カオリン、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、炭酸マグネシウム、酸化マグネシウム、ポリメタクリレート、塩化カリウム、粉末セルロース、アルファ化でんぷん、塩化ナトリウム、でんぷん、タルク、ならびに二及び三塩基性リン酸カルシウムが挙げられる。本開示のいくつかの態様においては、充填剤はラクトース、ＭＣＣ、ケイ化ＭＣＣ、二塩基性リン酸カルシウム、マンニトール、イソマルト、アルファ化でんぷん、及びそれらの組み合わせである。

崩壊剤は当該技術分野において公知である。非限定例としては、カルボキシメチルスターチナトリウム（グリコール酸でんぷんナトリウム）などの加工でんぷん；クロスポビドンなどの架橋ポリビニルピロリドン；クロスカルメロースナトリウムなどの加工セルロース；架橋アルギン酸；ジェランガム及びキサンタンガムなどのガム；ケイ化カルシウムが挙げられる。本開示のいくつかの態様においては、崩壊剤はクロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、グリコール酸でんぷんナトリウム、及びそれらの組み合わせである。本開示のいくつかの態様においては、崩壊剤はクロスカルメロースナトリウム、グリコール酸でんぷんナトリウム、及びそれらの組み合わせである。

滑沢剤は当該技術分野において公知である。非限定例としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸、ステアリルフマル酸ナトリウム、水素添加植物油、ポリエチレングリコール（４０００〜６０００）、及びラウリル硫酸ナトリウムが挙げられる。本開示のいくつかの態様においては、滑沢剤はステアリン酸マグネシウム、ステアリルフマル酸ナトリウム、及びそれらの組み合わせである。

本開示の錠剤製造の一態様においては、充填剤、崩壊剤及び滑沢剤がスクリーンを通過することにより砕塊され、砕塊したプレブレンド材料を形成する。砕塊したプレブレンド材料は、ブレンド装置で活性薬剤と組み合わされ、混合されプレブレンドを形成する。プレブレンドは乾式造粒装置で造粒され（例えば、造粒、製粉及びスクリーニングにより）、顆粒剤を形成する。充填剤、崩壊剤及び滑沢剤は顆粒剤中に粒内成分として存在する。さらなる崩壊剤及び滑沢剤はスクリーンを通過することによって砕塊し、ブレンド装置において顆粒剤と組み合わされる砕塊材料と形成し、かつ混合され最終ブレンドを形成する。最終ブレンドは錠剤化装置で錠剤化され、核錠を形成する。核錠は、フィルムコーティング装置においてコーティング混合物で被覆され、被覆錠剤を形成する。

本明細書で用いられる、粒内とは、顆粒剤中に成分を包含するように造粒の前に添加される成分を指す。さらに、本明細書で用いられる、粒外とは、錠剤圧縮におけるような、圧縮の前に顆粒剤と組み合わせる成分を指す。

本開示の他の錠剤製造工程においては、粒内充填剤及び粒内崩壊剤をスクリーニングならびにブレンダー装置内で活性薬剤と組み合わせることにより破塊する。続いて成分を混合し、一次プレブレンドを形成する。粒内滑沢剤は、スクリーニング及びブレンダー装置内で一次プレブレンドと組み合わせることにより破塊される。続いて成分を混合し、プレブレンドを形成する。プレブレンドは造粒装置において、造粒、製粉及びスクリーニングにより乾式造粒され、顆粒剤を形成する。粒外崩壊剤を、スクリーニングによって破塊し、ブレンダー装置内で顆粒剤と組み合わせる。続いて成分を混合し、一次最終ブレンドを形成する。粒外滑沢剤を、スクリーニングによって破塊し、ブレンダー装置内で一次最終ブレンドと組み合わせる。続いて成分を混合し、最終ブレンドを形成する。最終ブレンドを錠剤化装置で錠剤化し、核錠を形成する。フィルムコート個体混合物を水と組み合わせ、懸濁装置で懸濁し、フィルムコーティング混合物を形成した。核錠をフィルムコーティング装置においてコーティング混合物で被覆し、被覆錠剤を形成した。

本開示の一つの特定の製造態様は、以下のプレブレンディング、造粒／製粉及びスクリーニング、最終ブレンディング、錠剤化、ならびにコーティングステップを含む。プレブレンドは２ステップにおいて形成される。第１のステップにおいては、粒内ラクトース一水和物、粒内クロスカルメロースナトリウム、及び粒内微晶性セルロースをスクリーニングして破塊し、ブレンダーに入れる。破塊は、振動シフターまたはインラインシフターを使用して、材料を１．０ｍｍメッシュスクリーンに通過させるなどの当業者に公知の方法により行ってよい。続いて、コビメチニブヘミフマル酸塩形態Ａをブレンダーに装填し、ブレンダー内容物をブレンディング速度６ｒｐｍで３０分間混合する。第２のステップにおいては、粒内ステアリン酸マグネシウムを０．５ｍｍメッシュスクリーンに通過させて破塊するためスクリーニングし、内容物をブレンディング速度６ｒｐｍで８分間混合してプレブレンドを製造する。いくつかのかかる態様においては、４２０，０００錠を製造するのに適したプレブレンドバッチが製造され、プレブレンドは２２．９８２ｋｇの微結晶性セルロース、１５．３２２ｋｇのラクトース一水和物、１．００８ｋｇのクロスカルメロースナトリウム及び０．１２６ｋｇのステアリン酸マグネシウムを含む。プレブレンドはローラー圧縮によって乾式造粒され、製粉、１ｍｍスクリーンを通ってスクリーニングされる。いくつかのかかる態様においては、粒子サイズＤ［ｖ，０．５］が３８μｍ未満である活性薬剤に対し、ローラー圧縮力は２ｋＮ／ｃｍに設定され、ギャップサイズは５ｍｍである。いくつかの他のかかる態様においては、粒子サイズＤ［ｖ，０．５］が少なくとも３８μｍである活性薬剤に対し、ローラー圧縮力は２ｋＮ／ｃｍ〜４ｋＮ／ｃｍに設定され、ギャップサイズは４ｍｍ〜５ｍｍである。最終ブレンドは２ステップで形成される。第１のステップにおいては、上記の通り、破塊するため、粒外クロスカルメロースナトリウム１．０ｍｍスクリーンに通してスクリーニングし、ブレンダー内で顆粒剤と組み合わせる。ブレンダー内容物をブレンディング速度６ｒｐｍで１０分間混合する。第２のステップにおいては、粒外ステアリン酸マグネシウムを破塊するため０．５ｍｍスクリーンに通してスクリーニングし、ブレンダーに装填し、内容物をブレンディング速度６ｒｐｍで８分間混合して最終ブレンドを形成する。４２０，０００錠を製造するのに適した最終ブレンドバッチが製造される態様においては、粒外クロスカルメロースナトリウムの量は１．００８ｋｇであり、粒外ステアリン酸マグネシウムの量は０．６３ｋｇである。最終ブレンドを回転錠剤化プレスなどのプレスで、主要圧縮力１４ｋＮ〜１９ｋＮで圧縮し、錠剤コアを形成する。錠剤コアを、当該技術分野において公知のパンコーティング装置を用いてコーティング懸濁液の噴霧により被覆する。４２０，０００錠を製造するのに適した最終ブレンドバッチが製造されるいくつかの他のかかる態様においては、コーティング懸濁液は０．８０６ｋｇのポリビニルアルコール、０．５０４ｋｇの二酸化チタン、０．４０７ｋｇのマクロゴール／ＰＥＧ３３５０、０．２９８ｋｇのタルク、及び適当量の精製水を含み、コーティング懸濁液を形成する。いくつかの他のかかる態様においては、コーティング組成物はＯｐａｄｒｙ ＩＩ Ｗｈｉｔｅ ８５Ｆ１８４２２である。４２０，０００錠の製造に好適なバッチサイズ以外のバッチサイズは、同じ比率の成分で調製することができる。

好適なブレンダーは当該技術分野において公知であり、均一に２以上の成分を混合するために通常医薬品工業において採用される、Ｖシェイプブレンダー、ダブルコーンブレンダー、ビン（コンテナー）ブレンダー及びロータリードラムブレンダーを含む、任意の装置を含む。配合ブレンダー容量、ブレンダー充填率、回転速度及び回転時間は、成分の本質的に均一な混合物を達成するために、日常的な実験に基づいて当業者によって適宜に決定され得る。ブレンダー容量は、適切には５０Ｌ、１００Ｌ、２００Ｌ、２５０Ｌ、またはそれ以上である。ブレンダー充填率の選択は、対流及び３次元材料移動を可能とし、適切には、約３０％〜約６０％、約４５％〜約６５％、約３２％〜約５３％または約３２％〜４０％などの約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約６０％、約７０％、ならびにそれらの範囲である。ブレンド時間は、好適には５分、１０分、１５分、２０分、３０分、４０分、５０分、６０分またはそれ以上である。回転速度は、適切には、例えば、２ｒｐｍ、３ｒｐｍ、４ｒｐｍ、５ｒｐｍ、６ｒｐｍ、７ｒｐｍ、８ｒｐｍ、９ｒｐｍまたは１０ｒｐｍである。

乾式造粒、製粉及びスクリーニング装置は当該技術分野において公知であり、Ｇｅｒｔｉｓ、Ｆｉｔｚｐａｔｒｉｃｋ（登録商標）、及びＦｒｕｅｎｄ−Ｖｅｃｔｏｒを含むいくつかの製造業者から市販で入手可能である。通常、かかる装置はローラー圧縮力、ギャップ幅、ローラー速度及び供給率の制御を提供する。ローラー表面は滑らかでも刻み付きでもよく、または一方のローラー表面が滑らかで他方のローラー表面が刻み付きであってもよい。様々な様態のいずれにおいても、プレブレンドをローラー圧縮機の供給ホッパーに装填する。特定の力及びギャップサイズにおいてローラー圧縮を行い、かつ工程は好適にはギャップ制御下で実施する。形成されたリボンをスクリーンに通して細かくし、顆粒剤を製造する。本開示のいくつかの態様においては、スクリーンはミルと一体化している。ギャップサイズは、適切には約２ｍｍ〜５ｍｍ、約２ｍｍ〜４ｍｍ、約３ｍｍ〜５ｍｍ、もしくは約４ｍｍ〜５ｍｍ、などの２ｍｍ、約３ｍｍ、約４ｍｍまたは約５ｍｍ、及びそれらの範囲である。ローラー圧縮力は適切には、約１ｋＮ／ｃｍ〜約８ｋＮ／ｃｍ，約２ｋＮ／ｃｍ〜約５ｋＮ／ｃｍ約または２ｋＮ／ｃｍ〜約４ｋＮ／ｃｍなどの約１ｋＮ／ｃｍ、約２ｋＮ／ｃｍ、約３ｋＮ／ｃｍ、約４ｋＮ／ｃｍ、約５ｋＮ／ｃｍ、約６ｋＮ／ｃｍ、約７ｋＮ／ｃｍもしくは約８ｋＮ／ｃｍ、及びそれらの範囲である。製粉スクリーンサイズは、適切には約０．５ｍｍ〜約２．５ｍｍ、約０．５ｍｍ〜約２．０ｍｍ、約０．５ｍｍ〜約１．５ｍｍ、約０．５ｍｍ〜約１．２５ｍｍ、約０．７５ｍｍ〜約２．５ｍｍ、約０．７５ｍｍ〜約２．０ｍｍ、約０．７５ｍｍ〜約１．５ｍｍ、約０．７５ｍｍ〜約１．２５ｍｍなどの０．５ｍｍ、０．７５ｍｍ、１．０ｍｍ、１．２５ｍｍ、１．５ｍｍ、１．７５ｍｍ、２．０ｍｍ、２．２５ｍｍもしくは２．５ｍｍ、及びそれらの範囲である。本開示のいくつかの特定の態様においては、１．０ｍｍの製粉スクリーンを使用する。

適切な錠剤プレスは当該技術分野において公知であり、例えば、Ｒｉｖａ−Ｐｉｃｃｏｌａ、Ｆｅｔｔｅ、Ｂｏｓｃｈ Ｐａｃｋａｇｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、ＧＥＡ及びＮａｔｏｌｉ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙから市販で入手可能である。通常、それぞれの錠剤は硬化鋼で作られたダイスの中で顆粒をプレスすることによって作られる。ダイスは中心に穴が開いた円盤型である。ダイスの頂部及び底部に適合する２つの硬化鋼パンチによってダイスの中央で粉末を圧縮し、それにより錠剤を形成する。錠剤圧縮は、粉末を詰め込み、錠剤形成のための主圧縮力の適用の前にわずかにブレンドを圧縮することを含む第１のプレ圧縮段階を有する二段階で行ってよい。錠剤を圧縮の後ダイスから駆出する。本開示のいくつかの態様においては、圧縮力は約５ｋＮ〜約２０ｋＮ、約１４ｋＮ〜約１９ｋＮ、約１４ｋＮ〜約１８ｋＮ、または約８ｋＮ〜約１３ｋＮなどの約５ｋＮ、約６ｋＮ、約７ｋＮ、約８ｋＮ、約９ｋＮ、約１０ｋＮ、約１１ｋＮ、約１２ｋＮ、約１３ｋＮ、約１４ｋＮ、約１５ｋＮ、約１６ｋＮ、約１７ｋＮ、約１８ｋＮ、約１９ｋＮもしくは約２０ｋＮ、及びそれらの範囲である。本開示のいくつかの態様においては、約６０ｍｇの活性薬剤を含む錠剤は、約１４ｋＮ〜約１８ｋＮの圧縮力で形成されうる。本開示の他の態様においては、約２０ｍｇの活性薬剤を含む錠剤は、約８ｋＮ〜約１３ｋＮの圧縮力で形成されうる。

いくつかの態様においては、錠剤コアは、表Ａに示される成分及び濃度範囲（重量％）を含む。
表Ａ

本開示のいくつかの態様においては、錠剤コアは、２０ｍｇの活性薬剤を含む錠剤に基づいて、表Ｂに示される成分及び濃度範囲（重量％）を含む。２０ｍｇ以外、例えば４０ｍｇまたは６０ｍｇの活性薬剤を含む錠剤に関しては、２０ｍｇ錠剤に関して以下に開示される様々な成分の比が維持される。
表Ｂ

本開示のいくつかの態様においては、錠剤コアは、２０ｍｇの活性薬剤を含む錠剤に基づいて、表Ｃに示される成分及び濃度範囲（重量％）を含む。
表Ｃ

本開示のいくつかの態様においては、錠剤コアは、２０ｍｇの活性薬剤を含む錠剤に基づいて、表Ｄに示される成分及び濃度範囲（重量％）を含む。
表Ｄ

本開示のいくつかの態様においては、被覆錠剤コアは、２０ｍｇの活性薬剤を含む錠剤に基づいて、表Ｅに示される成分及び濃度範囲（重量％）を含む。フィルムコーティング組成物の成分及び濃度範囲（重量％）を表Ｆに示す。
表Ｅ
表Ｆ

治療方法
本開示の他の態様は、癌の治療方法であって、それを必要とする患者に化合物Ｉの結晶性フマル酸塩を投与することを含む、方法に関する。特定の実施形態においては、化合物Ｉの結晶性フマル酸塩は形態Ａである。投与される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の量は、治療的に許容される有効量であってよい。

本開示の他の態様においては、治療方法はそれを必要とする患者に、上記の化合物Ｉの結晶性フマル酸塩及び医薬的に許容可能な賦形剤を含む医薬品組成物投与することにより実施することができる。本開示の他の態様は、上記のように、癌の治療方法に関する。治療される癌は、メラノーマ（ＢＲＡＦ Ｖ６００変異メラノーマを含む）、乳癌（三種陰性乳癌を含む）、結腸直腸癌（ＫＲＡＳ変異結腸直腸癌を含む）、非小細胞肺癌、急性骨髄性白血病、及び膵癌である。

ＢＲＡＦ阻害剤はメラノーマの治療に使用されており、ベムラフェニブは現在メラノーマの治療に使用されているＢＲＡＦ阻害剤である。したがって、本開示の他の態様は、患者におけるメラノーマの治療方法に関し、この方法は治療を必要とする患者に、治療的に有効量の化合物Ｉの結晶性フマル酸塩を単独でまたはベムラフェニブと組み合わせて投与することを含む。一実施形態においては、化合物Ｉの結晶性フマル酸塩をベムラフェニブの前または後、もしくは同時に投与する。他の実施形態においては、メラノーマはＢＲＡＦ Ｖ６００変異メラノーマである。特定の実施形態においては、ＢＲＡＦ Ｖ６００変異の切除不能または転移性メラノーマを有する患者に化合物Ｉの結晶性フマル酸塩を投与する。本開示の他の態様は、患者におけるＢＲＡＦ Ｖ６００変異メラノーマの治療方法に関し、この方法は治療を必要とする患者に、治療的に有効量の化合物Ｉの結晶性フマル酸塩を単独でまたはベムラフェニブと組み合わせて投与することを含む。一実施形態においては、化合物Ｉの結晶性フマル酸塩をベムラフェニブの前または後、もしくは同時に投与する。特定の実施形態においては、ＢＲＡＦ Ｖ６００変異の切除不能または転移性メラノーマを有する患者の治療のため、ゼルボラフ（登録標章）（ベムラフェニブ）と組み合わせて化合物Ｉの結晶性フマル酸塩を投与する。

チロシンキナーゼ阻害剤は非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）を治療するために使用されている。ゲフィチニブ及びエルロチニブは、現在ＮＳＣＬＣの治療に使用されている、チロシンキナーゼと呼ばれる上皮増殖因子の受容体を標的とする血管新生阻害剤である。他の化合物は、ＭＥＨＤ７９４５Ａのように、非小細胞肺癌の治療のために臨床開発中である。したがって、本開示の他の態様は、患者における非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）の治療方法に関し、この方法はこの方法は治療を必要とする患者に、治療的に有効量の化合物Ｉの結晶性フマル酸塩を、任意でエルロチニブまたはゲフィチニブと組み合わせて投与することを含む。他の実施形態においては、組み合わせはエルロチニブとの組み合わせである。他の実施形態においては、組み合わせはＭＥＨＤ７９４５Ａとの組み合わせである。

本開示の他の態様は、制御不能の、異常な、及び／または望まれない細胞活動と関連している疾病または障害を治療する方法であって、それを必要とする患者に、治療的に有効量の形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩を投与することを含む、方法に関する。この治療方法を、形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の医薬品組成物を投与することにより行ってよい。

本開示の他の態様は、上記の疾患または障害の治療のための薬剤を製造するための、上記の実施形態のいずれかによる形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の使用に関する。医薬品組成物は化合物Ｉの結晶性フマル酸塩を含む任意の医薬形態であってよい。医薬品組成物は、例えば錠剤、カプセル、外用、または経皮であってよい。通常医薬品組成物は、約１重量％〜約９９重量％の活性化合物（複数可）、または活性化合物（複数可）の結晶性形態、及び９９重量％〜１重量％の１以上の好適な医薬賦形剤を含む。一実施例においては、組成物は約５重量％〜約７５重量％の活性化合物であり、残りは以下に論ずる好適な医薬賦形剤である。

「治療的に有効」量の化合物Ｉの結晶性フマル酸塩は、癌に罹患する患者を治療するのに十分な量を指す。本開示による治療的に有効量は、本明細書で論ずる病状及び障害の治療または予防に治療的に有益な量である。本開示の化合物Ｉの結晶性フマル酸塩は、キナーゼのシグナル伝達、特にＷＯ２００７／０４４５１５に記載されるようなＭＥＫ１／２を阻害、制御及び／または調節する治療活性を有する。

任意の特定の患者の治療に必要な実際量は、治療している病状及び重症度；採用される特定の医薬品組成物；患者の年齢、体重、総体的な健康、性別及び食事；投与の方法；投与の時間；投与の経路；及び本開示による活性組成物（複数可）の排泄経路、または活性組成物（複数可）の結晶性形態；採用される特定の化合物と組み合わせてまたは同時に使用される任意の薬剤；ならびに医療分野において周知の他のかかる要因を含む種々の要因に左右されるであろう。これらの要因は、Ｇｏｏｄｍａｎ及びＧｉｌｍａｎ’ｓ “Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ”，Ｔｅｎｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａ．Ｇｉｌｍａｎ，Ｊ．Ｈａｒｄｍａｎ ａｎｄ Ｌ．Ｌｉｍｂｉｒｄ，ｅｄｓ．，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ Ｐｒｅｓｓ，１５５−１７３，２００１において論じられ、これは本明細書に参照により組み込まれる。本開示による活性化合物（複数可）、または活性化合物（複数可）の結晶性形態及びそれらを含む医薬品組成物は、抗癌剤または一般的に癌の治療をしている患者に投与する他の薬剤と組み合わせて使用してよい。それらはまた、単一の医薬組成物中に１以上のかかる薬剤と同時製剤化されてもよい。

医薬品組成物のタイプに応じて、医薬的に許容される賦形剤は、任意の１または当該技術分野において公知の賦形剤の組合せから選択されてよい。医薬的に許容される賦形剤の選択は、使用される投与の所望の方法によって部分的に決定される。本開示の医薬品組成物、つまり、本開示の活性化合物（複数可）、または活性化合物（複数可）の結晶性形態の１のために、賦形剤は、活性化合物（複数可）が結晶であろうとなかろうと、活性化合物（複数可）が実質的に特定の形態を維持するように選択されるべきである。すなわち、任意の賦形剤は実質的に活性化合物（複数可）の形態を変化させるべきでない。また、望ましくない生物学的効果を生じさせるか、そうでなければ医薬組成物の任意の他の成分と有害な方法で相互作用することなどによって、担体が活性化合物の形態と不適合でないようにすべきである。

本開示の医薬品組成物は、医薬製剤分野において公知の方法により調製してよい。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ Ｅｄ．，（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９９０）を参照のこと。固体剤形においては、化合物Ｉを少なくとも１のクエン酸ナトリウムもしくは医薬的に許容される賦形剤もしくは二リン酸カルシウムまたは（ａ）例えばでんぷん、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、及びケイ酸などの充填剤もしくは増量剤などの他の賦形剤；（ｂ）例えば、セルロース誘導体、でんぷん、アルギナート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロース、及びアカシアゴムなどの結合剤；（ｃ）例えば、グリセロールなどの保湿剤；（ｄ）例えば、寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモもしくはタピオカ粉、アルギン酸、クロスカルメロースナトリウム、錯体シリケート及び炭酸ナトリウムなどの崩壊剤；（ｅ）例えば、パラフィンなどの溶液抑制剤；（ｆ）例えば、４級アンモニウム化合物などの吸収促進剤；（ｇ）例えば、セチルアルコール、及びモノステアリン酸グリセリル、ステアリン酸マグネシウム他などの湿潤剤；（ｈ）例えば、カオリン及びベントナイトなどの吸着剤；ならびに（ｉ）例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固形ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムなどの滑沢剤もしくはそれらの混合物と混合する。カプセル、錠剤、及び丸剤の場合、剤形は緩衝剤を含んでもよい。

通常、アジュバントと呼ばれ、医薬製剤分野において公知の医薬的に許容される賦形剤を、本開示の医薬品材料に使用してもよい。これらは、保存料、湿潤剤、懸濁剤、甘味料、香料、芳香剤、乳化剤、及び分配剤を含むが、これらに限定されない。微生物の活動の防止を、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸他などの抗菌剤及び抗真菌剤によって保障することができる。例えば、糖類、塩化ナトリウム他などの等張剤を含むことが所望され得る。必要に応じて、本開示の医薬品組成物は、湿潤剤または乳化剤、ｐＨ緩衝剤などの少量の補助物質、及び例えば、クエン酸、ソルビタンラウレート、オレイン酸トリエタノールアミン、ならびにブチルヒドロキシトルエンなどの抗酸化物質を含んでもよい。

上記の固形剤形は、腸溶性コーティング及び他の当該技術分野において周知のものなどのコーティングならびに外殻を有して製造してよい。それらは鎮静剤を含んでよく、腸管の特定の部分において、遅発性様式で活性化合物または化合物を放出するような組成物であってもよい。使用してよい組込組成物の例は、重合物質及びワックスである。活性化合物は、適切な場合、上記の賦形剤の１以上と共にマイクロカプセル化形態であってよい。

活性化合物に加えて、懸濁液は例えば、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトール及びソルビタンエステル、微晶性セルロース、アルミニウムメタヒドロキシオキシド、ベントナイト、寒天及びトラガント、またはこれらの物質の混合物、他などの懸濁剤を含んでよい。

直腸内投与のための組成物は、例えば、活性化合物（複数可）、もしくは活性化合物（複数可）の結晶性形態を、例えば好適な非刺激性賦形剤もしくは通常の温度で固形であるが、体温では液体であり、したがって好適な体腔内では溶解し、その中に活性成分を放出するココアバター、ポリエチレングリコール、座薬ワックスと混合することにより調製することができる坐薬である。

活性化合物（複数可）、または活性化合物（複数可）の結晶性形態がそれらの製剤中で維持されるため、固形剤形は本開示の医薬品組成物に好適である。カプセル、錠剤、丸剤、散剤、及び顆粒剤を含む、経口投与のための固形剤形が、特に好適である。かかる固形剤形においては、活性化合物（複数可）は少なくとも１の不活性の、医薬的に許容される賦形剤と混合されている。純粋な形態におけるまたは適切な医薬品組成物における活性化合物（複数可）、または活性化合物（複数可）の結晶性形態の投与は、類似の有用性を果たす投与もしくは薬剤の、許容可能な方法のいずれかを介して行われうる。したがって、例えば、経口、経鼻、非経口（静脈内、筋肉内、もしくは皮下）、局所的、経皮的、腟内、膀胱内、槽内、もしくは直腸に、固形、半固形、凍結乾燥粉末の形態、もしくは、例えば錠剤、座薬、丸剤、軟カプセル剤もしくは硬ゼラチンカプセル剤、散剤、液剤、懸濁液またはエアロゾル、他などの液体剤形、好ましくは正確な投与量の簡単な管理に適した単位剤形において投与されてよい。投与における１つの好ましい経路は、治療される病状の重症度に応じて調節されうる簡便な投与計画を用いた経口投与である。

（Ｓ）−［３，４−ジフロロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノン（化合物Ｉ）の調製
化合物Ｉは、ＷＯ２０１４／０５９４２２に記載のように調製することができ、これは全内容が参照により本明細書に組み入れられ、かつ一般的にはスキーム１に示される。塩基の存在下で、市販で入手可能な（３Ｓ，５Ｒ，８ａＳ）−３−フェニル−ヘキサヒドロ−オキサゾロ［３，２−ａ］ピリジン−カルボニトリルＶＩＩと市販で入手可能なｔｅｒｔ−ブチル「−３−オキソ−１−アデチジンカルボキシレートＶＩＩａとの反応により化合物ＶＩが調製される。化合物ＶＩを、酸の存在下で、シアノ水素化ホウ素ナトリウムなどの水素化物還元剤と処理し、続いて水性水酸化ナトリウムと処理して化合物Ｖを得る。酸を用いたＶの脱保護により化合物ＩＶを得られ、これを、触媒量のピリジンの存在下で、酸塩化物ＩＶａと結合してＩＩＩを得る。ＩＩＩの水素化によりピペリジン誘導体ＩＩを得る。最後に、ＩＩと２−フルオロ−４−ヨードアニリンＩＩａのカップリングにより、所望の化合物を得る。
スキーム１
結晶性形態の一般的な製造方法

結晶性形態は、例えば、好適な溶媒混合物からの結晶化または再結晶；昇華；融解物からの発達；他の相からの個体変換；超臨界流体からの結晶化；及びジェット噴霧が挙げられるが、これらに限定されない種々の方法により調製されうる。溶媒混合物の結晶性形態の結晶化または再結晶技術としては、例えば、溶媒の蒸去；溶媒混合物の温度の低下；化合物及び／またはその塩の過飽和溶媒混合物の結晶播種；化合物及び／またはその塩の過飽和溶媒混合物からの結晶播種；溶媒混合物の凍結乾燥；ならびに溶媒混合物への貧溶媒（対溶媒）の添加が挙げられるが、これらに限定されない。ハイスループット結晶化技術を用いて多形を含む結晶性形態を調製することができる。

多形を含む薬剤の結晶、調製方法、及び薬剤結晶の性質決定は、Ｓｏｌｉｄ−Ｓｔａｔｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｄｒｕｇｓ，Ｓ．Ｒ．Ｂｙｒｎ，Ｒ．Ｒ．Ｐｆｅｉｆｆｅｒ、及びＪ．Ｇ．Ｓｔｏｗｅｌｌ，２^ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＳＳＣＩ，Ｗｅｓｔ Ｌａｆａｙｅｔｔｅ，Ｉｎｄｉａｎａ（１９９９）で論じられている。

溶媒を使用する結晶化技術においては、通常、溶媒（複数可）は例えば、化合物の溶解性；利用する結晶化技術；及び溶媒の蒸気圧が挙げられるが限定されない１以上の要因に基づいて選択される。溶媒の組合せを使用してよい。例えば、化合物を第１の溶媒中に溶解し、続いて貧溶媒を添加し、溶液中の化合物の溶解度を低下させ、結晶の形成を沈殿させる溶液を得ることができる。貧溶媒は、その中の化合物の溶解性が低い溶媒である。

結晶の調製において使用できる１つの方法においては、化合物Ｉのフマル酸塩を、懸濁及び／または好適な溶媒中で撹拌し、溶解を促進する加熱されてよいスラリーを得ることができる。本明細書で用いられる「スラリー」という用語は、化合物の飽和溶液を意味し、かかる溶液はさらなる量の化合物を含み、与えられた温度で化合物及び溶媒の不均一混合物を得ることができる。

播種された結晶を任意の結晶化混合物に添加し、結晶化を促進してよい。播種は、特定の多形の成長を制御するために、及び／または結晶性生成物の粒径分布を制御するために使用され得る。したがって、必要とされる種子の量の計算は、例えば、「Ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ Ｃｏｏｌｉｎｇ Ｂａｔｃｈ Ｃｒｙｓｔａｌｌｉｚｅｒｓ，」Ｊ．Ｗ．Ｍｕｌｌｉｎ及びＪ．Ｎｙｖｌｔ，Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９７１，２６，３６９０３７７に記載されているように、利用可能な種子の大きさならびに平均生成物粒子の所望の大きさに依存する。一般に、バッチ内において効果的に結晶の成長を制御するために、小型の種子が必要とされる。小型の種子は、ふるい、製粉、もしくは大きな結晶の微粒子化によって、または溶液の微晶性化によって生成される。製粉または結晶の微粒子化において、所望の結晶性形態からの結晶化度の変化（つまり、非晶性または他の多形性形態への変化）を避けるため、管理するべきである。

冷却した結晶化混合物を、真空下で濾過し、単離した固形生成物を、冷再結晶化溶媒などの好適な溶媒で洗浄してよい。洗浄した後、生成物を窒素パージ下で乾燥させ、所望の結晶性形態を得ることができる。例えば、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）；粉末Ｘ線回析（ＸＲＰＤ）；及び熱重量分析（ＴＧＡ）が挙げられるが、これらに限定されない好適な分光法または解析技術によって生成物を解析し、化合物の結晶性形態を形成されたことを保障される。得られた結晶性形態は、結晶化手順で元来用いられている化合物の重量に基づいて、約７０重量％を超える単離収率、好ましくは約９０重量％を超える単離収率で生成することができる。場合により、生成物は補助製粉またはメッシュスクリーンを通過させることにより破塊されてもよい。

本開示の特徴及び利点は、以下の詳細な説明を読むことによって、当業者によってより容易に理解され得る。明確にするため、別個の実施形態の文脈において、上記及び下記に記載される本発明の定の特徴を組み合わせて単一の実施形態を形成しもよいことを理解されたい。反対に、簡便にするため、単一の実施形態の文脈において記載される本開示の様々な特徴を、それらのサブコンビネーションを形成するように組み合わせてもよい。本開示はさらに以下の実施例によって説明され、実施例は開示内容の範囲または精神をそれらに記載された特定の手順に限定するものとして解釈されるべきではない。

本明細書に記載されている定義は、参照により本明細書に組み込まれるいずれの特許、特許出願、及び／または特許出願公開に記載された定義よりも優先される。すべての測定値は実験誤差の影響を受ける場合があり、本発明の精神の範囲内である。

本明細書で用いられる「非結晶」とは結晶性ではない分子及び／またはイオンの固形を指す。非結晶個体は、明確な最大値を有するＸ線回析パターンを示さない。

本明細書で用いられる「実質的に純粋」という用語は、かかる結晶性形態の重量に基づいて少なくとも約９０重量％を含む形態Ａを意味する。「少なくとも約９０重量％」という用語は、均等論の適用性を特許請求の範囲に限定することを意図するものではないが、例えば、言及された結晶形の重量に基づいて９０、約９１、約９２ 約９３、約９４、約９５、約９６、約９７、約９８、約９９及び約１００重量％が挙げられるが、これらに限定されない。形態Ａの残りは、例えば結晶形態を調製する場合に生じる、化合物Ｉのフマル酸塩の他の形態（複数可）及び／または反応不純物ならびに／もしくは加工不純物を含み得る。反応不純物及び／または加工不純物の存在は、例えば、クロマトグラフィー、核磁気共鳴分光法、質量分析、及び／または赤外線分光法などの当該技術分野において公知の解析技術によって同定することができる。

他の態様において、本発明は、形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の調製方法に関し、以下を含む：
溶媒中に溶解したフマル酸を溶媒に溶解した化合物Ｉの混合物に添加し、形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩を形成すること；及び
得られた形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の結晶を採取すること。

この実施形態において、使用される溶媒は極性溶媒である。特定の溶媒中のフマル酸及び／または化合物Ｉの溶解性に応じて、完全に溶解するためには穏やかな加熱（４０〜８０℃）を必要としうる。例えば、フマル酸はアルコール（例えば、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノールもしくはイソプロパノール他）などの極性プロトン性溶媒中に、単独でもしくは１以上の他の溶媒とまたは水との混合物として溶解させることができる。あるいは、フマル酸をテトラヒドロフラン、ジクロロメタン、他などの非プロトン溶媒に溶解させることができる。同様に、化合物Ｉはジクロロメタンもしくはアルコール（例えば、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノールもしくはイソプロパノール他）などの極性プロトン性溶媒中に、単独でもしくは１以上の他の溶媒とまたは水との混合物として溶解させることができる。次いで、フマル酸溶液を化合物Ｉの溶液に添加し、得られた混合物を沈殿物が形成するまで静置させてよい。いくつかの場合において、結晶形成を促進するために、得られた混合物を冷却または種子結晶を添加する。他の場合においては、結晶形成を促進するために、ヘプタン他のような非極性炭化水素溶媒などの貧溶媒が使用される。

したがって、別の態様では、本発明は、以下を含む形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の調製方法に関する：
第１の溶媒に化合物Ｉを溶解させて第１の混合物を形成すること；
第２の溶媒にフマル酸を溶解させて第２の混合物を形成すること；
第１の混合物を第２の混合物に冷却しながら添加し、沈殿物として結晶を形成すること；及び
形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の結晶を採取すること。

前態様におけるように、使用される溶媒は極性溶媒である。特定の実施形態においては、第１及び第２の溶媒は同一であり、イソプロパノールと水の混合物である。一実施形態においては、イソプロパノールの水に対する比は９：１である。他の実施形態においては、イソプロパノールの水に対する比は４：１である。他の実施形態においては、イソプロパノールの水に対する比は８５：１５である。通常、１重量当量の化合物Ｉにつき約７〜１１重量当量の第１の溶媒が使用され、１重量当量のフマル酸につき２．０〜３．０重量当量の第２の溶媒が使用される。より詳細には、１重量当量の化合物Ｉにつき約８〜１０重量当量の第１の溶媒が使用され、１重量当量のフマル酸につき２．４〜２．７重量当量の第２の溶媒が使用される。

１つのフマル酸の分子は、２つの分子を有する塩を形成し、化合物Ｉのヘミフマル酸塩を形成する。したがって、１重量当量の化合物Ｉにつき約０．５当量のフマル酸が使用される。通常、１重量当量の化合物Ｉにつき０．５１〜０．５３当量が使用される。

典型的な実施例においては、フマル酸を添加する前に、例えば、第１の溶媒に溶解した化合物Ｉを活性化炭素に通過させて濾過する。次いで、第２の溶媒に溶解させたフマル酸を第１の溶媒中の化合物Ｉの溶液に、約４０〜９０℃；より好ましくは６０〜８５℃；さらに好ましくは７５〜８０℃の温度で穏やかに加熱しながらゆっくりと添加する。場合によっては、播種結晶を化合物Ｉ及びプロパノール／水溶媒中のフマル酸の混合物に添加してよい。結晶化プロセスを完了させるため、混合物を約２０℃に冷却してよい。得られた結晶を濾過により単離する。

さらなる態様においては、本発明は、以下を含む形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の調製方法に関する：
溶媒中に溶解したフマル酸を溶媒中に溶解した化合物Ｉの混合物を添加し、形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩を形成すること。

この態様の一実施形態においては、プロセスは形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の種子結晶を混合物に添加することを含む。

さらなる実施形態においては、本発明は、形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の調製方法であって、非結晶形態の化合物Ｉを、溶媒中に６５〜８０℃の温度で穏やかに加熱しながら溶解し、次いで結晶形態が得られるまで、得られた混合物を冷却すること含む、方法に関する。一実施形態においては、種子結晶を混合物に添加してよい。他の実施形態においては、混合物を２０℃まで冷却してよい。次いで、得られた結晶を濾過により単離する。

実施形態
本発明は、以下の非限定実施形態によって特徴づけられる。

実施形態１．形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩。

実施形態２．前記塩が以下のうちの少なくとも１によって特徴づけられる、実施形態１の形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩：
（ｉ）実質的に図２に示されるような、ｄ_６ＤＭＳＯ中の^１Ｈ ＮＭＲスペクトル、
（ｉｉ）実質的に図３に示されるような、ｄ_６ＤＭＳＯ中の１３Ｃ ＮＭＲスペクトル、
（ｉｉｉ）１７５．３、１７３．６、１１７．５、１５５．５、及び１５３．５、±０．２ｐｐｍから選択される３以上のピークを有する、^１３Ｃ ＮＭＲ固体スプペクトル、
（ｉｖ）実質的に図４に示されるような、^１３Ｃ ＮＭＲ固体スプペクトル、
（ｖ）結晶性形態の測定は室温で行われる、４．６、１２．１、１３．２、１３．６及び１４．５±０．２°２θから選択される３以上の２θ値を有する粉末Ｘ線回析パターン（ＣｕＫα λ＝１．５４１８Å）、
（ｖｉ）実質的に図１０に示されるパターンに従う、粉末Ｘ線回析（ＸＲＰＤ）パターン、ならびに
（ｖｉｉ）実質的に図８に従う、示差走査熱量測定サーモグラム。

実施形態３．前記塩が、１７５．３、１７３．６、１１７．５、１５５．５、及び１５３．５、±０．２ｐｐｍから選択される３以上のピークを有する、^１３Ｃ ＮＭＲ固体スプペクトルによって特徴づけられる、実施形態１の形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩。

実施形態４．前記塩が、４．６、１２．１、１３．２、１３．６及び１４．５±０．２°２θから選択される３以上の２θ値を有する粉末Ｘ線回析パターン（ＣｕＫα λ＝１．５４１８Å）によって特徴づけられ、結晶性形態の測定は室温で行われる、実施形態１の形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩。

実施形態５．前記塩が、前記塩の重量に基づいて、最小９０重量％形態Ａである、実施形態１〜４の形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩。

実施形態６．形態Ａと称される実施形態１〜３の（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩、及び医薬的に許容される賦形剤を含む、医薬品組成物

実施形態７．癌を治療するための医薬品製造のための形態Ａと称される実施形態１〜５の（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩の使用。

実施形態８．癌治療における療法で使用するための、形態Ａと称される実施形態１〜５の（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩。

実施形態９．メラノーマ（ＢＲＡＦ Ｖ６００変異メラノーマを含む）、乳癌（三種陰性乳癌を含む）、結腸直腸癌（ＫＲＡＳ変異結腸直腸癌を含む）、非小細胞肺癌、急性骨髄性白血病、及び膵癌からなる群から選択される癌を治療するための医薬品として使用するための、形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩。

実施形態１０．前記癌はＢＲＡＦ Ｖ６００変異メラノーマである、実施形態９の使用。

実施形態１１．メラノーマ治療のための医薬品としてベムラフェニブと組み合わせた、形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩。

実施形態１２．患者におけるＢＲＡＦ Ｖ６００変異メラノーマの治療方法であって、治療を必要とする患者に、治療的に有効量の化合物Ｉの結晶性フマル酸塩を、単独でまたはベムラフェニブと組み合わせて投与することを含む、方法。

実施形態１３．前記化合物Ｉの結晶性フマル酸塩をベムラフェニブの前または後、もしくは同時に投与する、実施形態１２の方法

実施形態１４．溶媒中に溶解したフマル酸を、溶媒中に溶解した化合物Ｉの混合物に添加し、化合物Ｉの結晶性フマル酸塩を形成することを含む、形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の調整方法。

以下の実施例は本発明の範囲を例示説明する。当業者が本発明をより明確に理解し実施できるように、以下の実施例及び調製物を提供する。これらは、本発明の範囲を限定するものとみなされるべきではなく、単にそれらの例示的で代表的なものであるとみなされるべきである。

実施例１
３−（（３Ｓ，５Ｒ，８ａＳ）−５−シアノ−３−フェニル−ヘキサヒドロ−オキサゾロ［３，２−ａ］ピリジン−５−イル）−３−ヒドロキシ−アゼチジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの合成

（３Ｓ，５Ｒ，８ａＳ）−３−フェニル−ヘキサヒドロ−オキサゾロ［３，２−ａ］ピリジン−カルボン酸（２０．０ｇ、８７．６ｍｍｏｌ、１．０当量）及びジメチルテトラヒドロピリミドン（ＤＭＰＵ、１１．３ｇ、８７．６ｍｍｏｌ、１．０当量）のＴＨＦ（９５．１ｍＬ）中の混合物を、透明の液体が得られるまで１０分間撹拌した。続いて混合物を−７０℃〜−８０℃まで冷却し、内部温度を−７０℃〜−８０℃に維持しながら、３０分にわたってリチウムジイソプロピルアミン（ヘプタン、ＴＨＦ及びエチルベンゼン中２８％溶液）（３５．２ｇ、９２ｍｍｏｌ、１．０５当量）を添加した。添加が完了した後、混合物を−７０℃〜−８０℃でさらに２時間撹拌し、続いて内部温度が−７０℃〜−８０℃を維持する間、３０分を超えて３−オキソ−アゼチジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１６．２ｇ、９４．６ｍｍｏｌ、１．０８当量）を添加した。添加が完了した後、反応混合物を−７０℃〜−８０℃で１時間撹拌した。

別個のフラスコに、塩化ナトリウム溶液（１０．３ｇ）、脱イオン水（１０３．０ｇ）及び酢酸（５．２９ｇ、８７．６ｍｍｏ、１．０当量）を用意し、０℃まで冷却した。内部温度を１０℃未満に維持しながら、３０分にわたって反応混合物を反応停止混合物に添加した。反応混合物のフラスコをＴＨＦ（２６．７ｇ）ですすぎ、すすぎ液を反応停止混合物と組み合わせた。５℃で２０分間激しく撹拌した後、撹拌を停止し、層を分離させた。下部水相を廃棄した。酢酸エチル（６１．８ｇ）及び脱イオン水（６８．５ｇ）を有機相に添加した。５℃で１０分間の激しく撹拌した後、撹拌を停止し、層を分離させ、下部水相を廃棄した。洗浄手順を脱イオン水（６８．５ｇ）でもう一度繰り返した。

有機相を減圧下（ジャケット温度約４０〜４５℃、圧力＝２００〜１８０ｍｂａｒ）で、総体積１２０ｍＬの蒸留物が得られるまで濃縮し、黄みがかった溶液を得た。減圧を解放し、ヘプタン（１０２．０ｇ）を、１０分にわたって添加した。残留容量が一定に保たれるような速度でヘプタン（１７７ｇ）を添加することにより、減圧下での蒸留（ジャケット温度約３５〜４０℃、圧力＝２５０〜１１０ｍｂａｒ）を続けた。１０分の蒸留の後、濃く、撹拌可能な懸濁液が得られた。減圧を解放し、イソプロパノール（１０．２ｇ）を３５℃で１５分にわたって添加した。懸濁液を４５℃に加熱し、３０分間撹拌した。その後、懸濁液を、２時間にわたって０℃まで冷却し、１時間０℃を保持した。懸濁液をガラス濾過器で濾過した。フラスコ及び濾過ケーキをプレ冷却（約５℃）ヘプタン（４６．６ｇ）で洗い流し、湿ったケーキを減圧下において、一定重量まで４０℃で一晩乾燥させ、わずかにベージュ色の結晶として表題化合物を得た。
ＨＰＬＣ純度：９１．９％−面積 Ｍｐ．（ＤＳＣ：外挿ピーク：１５１．８０℃．１Ｈ−ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：７．３０〜７．５０（ｍ，５ Ｈ），４．１７ − ４．２７（ｍ，３ Ｈ），３．９４〜４．０１（ｍ，２ Ｈ），４．１１−４．１（ｍ，２ Ｈ），４．０９（ｄ，１ Ｈ），３．９５（ｄ，１Ｈ），３．８７（ｄｄ，１Ｈ），３．７６（ｄｄ，１Ｈ），３．５４〜３．７０（ｂｒ，１Ｈ），２．８５〜３．０３（ｂｒ，１Ｈ），２．１８〜２．２５（ｍ，１Ｈ），２．１２（ｂｒ，１Ｈ），１．９７〜２．０４（ｍ，１Ｈ），１．８５〜１．９４（ｍ，１Ｈ），１．６１〜１．７９（ｍ，３Ｈ），１．４１（ｓ，９Ｈ）．ＭＳ（ＥＩ）：ｍ／ｚ＝４００．４８（［Ｍ＋Ｈ］＋，１００％）

実施例２
３−ヒドロキシ−３−［（Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−フェニル−エチル）−ピペリジン−２−ｙｌ］アゼチジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの合成

３−（（３Ｓ，５Ｒ，８ａＳ）−５−シアノ−３−フェニル−ヘキサヒドロ−オキサゾロ［３，２−ａ］ピリジン−５−イル）−３−ヒドロキシ−アゼチジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１２．０ｇ、３０．０ｍｍｏ、１．０当量）及びシアノ水素化ホウ素ナトリウム（３．１８ｇ、５０．６ｍｍｏｌ、１．６８当量）のＥｔＯＨ（７０ｍＬ）中の混合物を３０℃まで加熱し、ＥｔＯＨ（２０ｍＬ）中の暖かい混合物である酢酸（３．６３ｍｌ、６３．５ｍｍｏｌ、２．１当量）に２時間以内でゆっくりと添加した。続いて、得られた混合物を、さらに３時間７０℃〜７５℃で撹拌した。反応が完了した後、混合物を２３℃まで冷却し、３０分以内でゆっくりとトルエン（１００ｍＬ）及びＮａＯＨ水溶液（６０ｇ、１０％−ｗ／ｗ）の混合物に添加し、１５分間撹拌した。反応フラスコを急冷混合物で洗い流した。層が分離し、有機相をトルエン（３０ｍＬ）で洗浄した。組み合わせた有機相を減圧下（ジャケット温度約３５〜４０℃、２００〜８５ｍｂａｒ）で、８０ｍＬ（７０．８２ｇ）の黄みがかった生成物溶液を得られるまで濃縮した。ＰＨＬＣ純度：９７．６％面積

分析目的のため、生成物溶液をロータリーエバポレーターで十分に濃縮し、ＥｔＯＨで処理し、再び十分に濃縮して１９．２ｇの泡沫状生成物を得た。残渣を、酢酸エチル（３０ｍＬ）及びＭｅＯＨ（１５ｍＬ）の混合物に溶解し、酢酸エチルを溶出剤として使用し、シリカゲル１２０ｇで、フラッシュクロマトグラフィーにより精製した。それぞれ１００ｍＬの、６画分のうち３〜５画分を組み合わせ、ロータリーエバポレーターにより真空下で十分に濃縮して無色泡沫状物１４．６ｇを得た。再度残渣をヘプタン／酢酸エチル２：１（ｖ ／ ｖ）の最少混合物に再度溶解し、ヘプタン／酢酸エチル２：１（ｖ／ｖ）を溶出液として使用して１９０ｇのシリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィーにより精製した 。７００ｍＬの前留分の後、１０のその後の画分（合計８００ｍＬ）を組み合わせ、ロータリーエバポレーターにより真空下で十分に蒸発させ（浴温３５℃、圧力２０ｍｂａｒ以上）、残渣を３５℃で一晩乾燥させ、表題化合物を無色の固体として得た。Ｍｐ．外挿ピーク２２０．９℃（発熱分解を伴った溶融）^１Ｈ−ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ７．３８〜７．４１（ｍ，２Ｈ），７．３４〜７．３８（ｍ，２Ｈ），７．２７〜７．３０（ｍ，１Ｈ），４．２８〜４．５０（ｂｒ，１Ｈ），４．１９（ｄｄ，１Ｈ），４．１１〜４．１（ｍ，２Ｈ），４．０９（ｄ，１Ｈ），３．９５（ｄ，１Ｈ），３．８７（ｄｄ，１Ｈ），３．８３（ｔ，１ Ｈ），３．０８ − ３．１６（ｍ，１Ｈ），２．８５（ｄｄｄ，１Ｈ），２．５７（ｄｄｄ，１Ｈ），１．７６〜１．８４（ｍ，１Ｈ），１．６８〜１．７５（ｍ，１Ｈ），１．５３〜１．５８（ｍ，１Ｈ），１．４１〜１．４８（ｂｓ，９ Ｈ），１．３１〜１．４１（ｍ，２Ｈ），１．２１〜１．３１（ｍ，２Ｈ）．ＭＳ（ＥＩ）：ｍ／ｚ＝３７７．２４（［Ｍ＋Ｈ］^＋ ，１００％）．Ｃ_２１Ｈ_３２Ｎ_２Ｏ_４に対するＥＡ：計算値：Ｃ ６６．９９，Ｈ８．５７，Ｎ７．４４；実測値Ｃ６７．３８，Ｈ８．５０，Ｎ７．２９

実施例３
３−［（Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−フェニル−エチル）−ピペリジン−２−イル］−アゼチジン−３−オールジヒドロクロリドの合成

トルエン中の３−ヒドロキシ−３−［（Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−フェニル−エチル）−ピペリジン−２−イル］アゼチジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（６９．８ｇ、２９．６ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を、２３〜２７℃で１２分内での水（３０．１ｇ）及びＨＣｌ（３７％、７．２２ｇ、７３．３ｍｍｏｌ、２．５当量）の混合物と処理し、１０分間撹拌した。得られた二相性混合物を５０℃まで３０分以内で加熱し、５０℃４時間撹拌し続けた。完全に変換した後、混合物を室温まで減温し、相を分離させた。水相をトルエン（３６ｍＬ）で洗浄し、相を分離させ４４．２ｇの黄みがかった水溶液生成物を得た。ＰＨＬＣ純度：９６．３％−面積

分析目的のため、生成物溶液をロータリーエバポレーター（浴温４５℃）で十分に濃縮させた。黄みがかった油状残渣をＭｅＯＨ（１９０ｍＬ）に溶解させ、再度十分にロータリーエバポレーターによって、真空化で濃縮させた。残渣をＭｅＯＨ／酢酸エチル１：１（ｖ／ｖ）の混合物の最小量に取り、ＭｅＯＨ／酢酸エチル１：１（ｖ／ｖ）の混合物を溶出剤として用い、シリカゲル（１５０ｇ）でフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。４００ｍＬの前留分を採取し、廃棄し、その後の画分（１．５Ｌ）を合わせ、真空下（浴温４０℃、圧力２０ｍｂａｒ以上）でロータリーエバポレーターによって完全に濃縮し、ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）に溶解した黄みがかった油状物が得られた。油状物を室温で酢酸エチル（８０ｍＬ）に滴下して添加すると、生成物が沈殿した。固体を濾過し酢酸エチル（３０ｍＬ）ですすいだ。恒量まで３０℃の真空下で一晩乾燥し、無色固体として表題化合物（２２．０ｇ）を得た。Ｍｐ．（ＤＳＣ）：Ｔ_{ｏｎｓｅｔ}１１４．２ °Ｃ，外挿ピーク：１２３．４℃．１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ９．５０〜９．６４（ｂｒ，１Ｈ），８．９１〜９．０３（ｂｒ，１ Ｈ），７．７８（ｓ，１Ｈ），７．６２〜７．５６（ｍ，２ Ｈ），７．４１〜７．５２（ｍ，３Ｈ），６．０３（ｂｓ，１Ｈ），４．５６〜４．６７（ｍ，１Ｈ），４．４５（ｄｄ，１ Ｈ），４．２５〜４．３３（ｍ，２Ｈ），４．２３（ｄｄ，１Ｈ），４．１８（ｄｄ，１ Ｈ），３．９５〜４．０５（ｍ，１Ｈ），３．８３（ｄｄ，１Ｈ），３．４５〜３．５４（ｍ，１ Ｈ），３．２６〜３．４０（ｍ，１Ｈ），１．６７〜１．８６（ｍ，４Ｈ），１．５５〜１．６５（ｍ，１Ｈ），１．３７〜１．５１（ｍ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＩ）：ｍ／ｚ ＝ ２７７（［Ｍ＋Ｈ］^＋ 遊離塩基１００％）．Ｃ_１６Ｈ_２６Ｎ_２Ｏ_２Ｃｌ_２に対するＥＡ水（９．２％−ｗ／ｗ）及びＨＣｌ（２．０当量に代わる２．１当量）に対する補正：計算値：Ｃ４９．４４，Ｈ７．８０，Ｎ７．２１，Ｏ １６．４０，Ｃｌ１９．１５；実測値Ｃ４８．７６，Ｈ ７．４８，Ｎ ７．３６，Ｏ１６．４４，Ｃｌ １９．１１．

実施例４
｛３−ヒドロキシ−３−［（Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−フェニル−エチル）−ピペリジン−２−イル］−アゼチジン−１−イル｝−（２，３，４−トリフルオロ−フェニル）−メタノン

２，３，４−トリフルオロ−ベンゾイルクロライド：
２，３，４−トリフルオロ安息香酸（１００ｇ、５６８ｍｍｏｌ、１．０当量）を、トルエン（１０００ｍＬ）中で懸濁し、ピリジン（０．２５４ｍＬ、３．１５ｍｍｏｌ、０．００５５当量）で処理した。得られた懸濁液を６０〜７０℃に加熱すると、混合物は透明な黄みがかった溶液となった。この温度で、塩化オキサリル（９４．４ｇ、７２９ｍｍｏｌ、１．３当量）を、１５６分にわたってゆっくりと添加した。添加が完了した後、完全になるまで１０分間撹拌し続けた。真空下（ジャケット温度：６０〜７０℃、圧力：２００〜１００ｍｂａｒ）での蒸留により、トルエン（３６０ｍＬ）を部分的に除去した。水溶液を室温まで冷却し、黄みがかりわずかに濁った溶液６３６ｇを得、それをＮ_２雰囲気中で保存し、その後のステップでさらに処理するにことなく使用した。ＨＰＬＣ純度：９９．２％−面積

｛３−ヒドロキシ−３−［（Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−フェニル−エチル）−ピペリジン−２−イル］−アゼチジン−１−イル｝−（２，３，４−トリフルオロ−フェニル）−メタノン：
３−［（Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−フェニル−エチル）−ピペリジン−２−イル］−アゼチジン−３−オールジヒドロクロライド水溶液（４３．５ｇ）をＥｔＯＨ（２４ｍＬ）で処理し１０分間室温で撹拌した。この混合物に、２６１ｍＬの水中のリン酸三カリウムの溶液（２８．８ｇ、１３６ｍｍｏｌ、４．７当量）を１４分以内に１０〜２０℃のバッチ温度で加え、混合物を１５℃で１５分間撹拌した（ｐＨ１１．９）。この水溶液に、滴下漏斗によって３４ｇの上記の２，３，４−トリフルオロ安息香酸（３４．０ｇ、２９．８ｍｍｏｌ、１．０当量）を、激しく撹拌しながら、３２分にわたって１０〜２０℃のバッチ温度で加えた。滴下漏斗をトルエン（１．２ｍＬ）ですすぎ、二相性混合物を室温で６０分間撹拌した。相を分離させ、水相を廃棄した。有機相を水（４２ｇ）中の炭酸ナトリウム（３．３６ｇ、３１．５ｍｍｏｌ、１．０９当量）で洗浄し、室温で３０分撹拌した。層を分離させ、有機相を塩化ナトリウム水溶液（３０ｇ、１０％ｗ／ｗ）で洗浄した。ロータリーエバポレーター（浴温５０℃、圧力２００ｍｂａｒ未満）において、有機相を体積約３０％まで濃縮した。残渣をＥｔＯＨ（２３ｍＬ）に取り入れ、４０〜５０℃で５分間撹拌した。再度、溶液をロータリーエバポレーター（浴温５０℃、圧力２００ｍｂａｒ未満、１７ｍｌ蒸留物）で濃縮し、非常に粘稠性の油状物を得た。残渣を再度ＥｔＯＨ（２３ｍＬ）に取り入れ、１０分間撹拌し、目的の容量（５３ｍＬ、４６．０６ｇ）に達するために再度さらにＥｔＯＨ（１２ｍＬ）で希釈した。ＨＰＬＣ純度：８５．０％−面積

分析目的のため、生成物溶液（９０ｍＬ）を濾過して濾過残渣をＥｔＯＨ（１５ｍＬ）で洗浄した。ロータリーエバポレーター（浴温４０℃、圧力１５０ｍｂａｒ未満）において、溶液を完全に濃縮し、残渣をＭＴＢＥ（４０ｍＬ）に取り入れ、続いて再度十分に濃縮し、次いで酢酸エチル（２９ｍＬ）及びヘプタン（４０ｍＬ）の混合物に取り入れ、次いで十分に濃縮し、次いで再度ＭＴＢＥ（２０ｍＬ）及びヘプタン（５０ｍＬ）の混合物に取り入れ、再度十分に濃縮し、最終的に泡沫状固体（３２．５ｇ）を得た。固体残渣（３２．０ｇ）を酢酸エチル（２０ｍＬ）に溶解させ、シリカゲル（１５０ｇ）フラッシュクロマトグラフィーにより、酢酸エチルを溶出剤として使用して精製した。２００ｍＬを前処理した後、６画分（８００ｍＬ）を合わせて、ロータリーエバポレーター（浴温４０℃、圧力２０ｍｂａｒ以上）において完全に濃縮し、２８．０ｇのわずかに黄、黄みがかった油状物を得た。室温で、油状物残渣をジクロロメタン（２０ｍＬ）に取り入れ、ヘプタン（１５０ｍＬ）で希釈し、ロータリーエバポレーターで再度十分に濃縮し、続いて残渣をＭＴＢＥ（２０ｍＬ）に溶解し、再度ロータリーエバポレーター内の溶媒を完全に除去することにより、ゴム状泡沫物を得た。この泡沫物をトルエン（３０ｍＬ、室温）に溶解し、室温で滴下漏斗により２０分を超えてヘプタン（４００ｍＬ）滴下して加えると、生成物は沈殿し始めた滴下漏斗をトルエン（４ｍＬ）ですすぎ、懸濁液を室温で１時間撹拌し続けた。固体を濾去し、反応器及び濾過ケーキを濾液ならびに続いてヘプタン（１５ｍＬ）で２回すすいだ。３５℃の真空下で、重量が１７．８８ｇの無色の個体が得られるまで乾燥した。ＨＰＬＣ純度：９７．０％−面積，残渣溶媒：トルエン（１．２％−ｗ／ｗ）及びヘプタン（２．３％−ｗ／ｗ）．Ｍｐ（視覚的）：Ｔ_{ｏｎｓｅｔ}：５５〜７３℃（発熱分解を伴った溶融）．^１ＨＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６，１２０℃）：δ７．４１〜７．４７（ｍ，２Ｈ），７．２７〜７．３２（ｍ，２Ｈ），７．２１〜７．２６（ｍ，２Ｈ），７．１２〜７．１９（ｍ，１Ｈ），５．２１（ｂｓ，１Ｈ），４．３５（ｂｄ，１ Ｈ），４．２２（ｂｓ，１Ｈ），４．０５（ｄｄ，１Ｈ），３．９１〜４．０１（ｍ，１Ｈ），３．７４〜３．９０（ｍ，４Ｈ），３．０１（ｄｄ，１Ｈ），２．７５〜２．８４（ｍ，１Ｈ），２．４９〜２．５９（ｍ，１Ｈ），１．６８〜１．８１（ｍ，１Ｈ），１．５１〜１．６５（ｍ，１Ｈ），１．２３〜１．５０（ｍ，３Ｈ），１．０９〜１．２２（ｍ，１Ｈ）．ＭＳ（ＥＩ）：ｍ／ｚ＝４３５（［Ｍ＋Ｈ］^＋，１００％）．Ｃ_２３Ｈ_２５Ｆ_３Ｎ_２Ｏ_３に対するＥＡ，残渣トルエン（１．２％−ｗ／ｗ）及びヘプタン（２．３％−ｗ／ｗ）に対する補正：計算値：Ｃ ６４．３８，Ｈ６．０７，Ｆ１２．６６，Ｎ６．２２；実測値Ｃ６４．０１，Ｈ６．０４，Ｆ１２．６３，Ｎ ６．３５．

実施例５
（（Ｓ）−３−ヒドロキシ−３−ピペリジン−２−イル−アゼチジン−１−イル）−（２，３，４−トリフルオロ−フェニル）−メタノンヒドロクロリドの合成

アルゴン下、１８５ｍＬのガラス質加圧滅菌器にＰｄ／Ｃ（３．３７ｇ、１．３ｍｍｏｌ、０．０４当量、６０．２％ｗｗ水、１０％ｗｗパラジウム炭素）、水（０．２２ｇ）及びＥｔＯＨ（５３ｍＬ、４６ｇ、２９ｍｍｏｌ、１．０当量）中の｛３−ヒドロキシ−３−［（Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−ヒドロキシ−１−フェニル−エチル）−ピペリジン−２−イル］−アゼチジン−１−イル｝−（２，３，４−トリフルオロ−フェニル）−メタノンを充填した。混合物をＥｔＯＨ（１３ｍＬ）、酢酸（４．１５ｍＬ、７２ｍｍｏｌ、２．５当量）、及び水性塩酸（２．５ｍｌ、３７％−ｗ／ｗ、３０ｍｍｏｌ、１．０当量）で処理した。加圧滅菌器を不活性化し、２ｂａｒのＨ_２で加圧し、反応を２ｂａｒのＨ_２圧で、２５℃で１２時間行った。圧力を加圧滅菌器から解放し、懸濁液をＭｅＯＨ（２５ｍＬ）で処理し、３０分間撹拌し続け、アルゴン保護下において濾紙上で濾過した。加圧滅菌器及び濾過残渣をＭｅＯＨ（４ｍＬ）ですすいだ。合わせた濾液を減圧下で、初期体積の約２０〜３０パーセントまで蒸発させた。残渣をイソプロパノール（３８．５ｍＬ）で、３０〜３５℃において処理し、１時間撹拌し、２０〜２５℃に冷却し、水（０．５８ｇ）及び塩酸（２．５ｍＬ、３７％−ｗｗ、３０ｍｍｏｌ、１．０当量）で処理した。得られた懸濁液を２５〜３５℃の真空下で、約２２ｍＬの体積に達するまで濃縮し、２５〜３５℃でＭＴＢＥ（３１ｍＬ）を添加した。最終懸濁液を５〜１０℃まで冷却し、１時間撹拌し、次いで濾過した。濾過ケーキを低温ＭＴＢＥ（１２ｍＬ）ですすぎ、３５℃の真空化で、重量が一定になるまで乾燥し、表題化合物を無色固体として得た。ＨＰＬＣ純度：９９．６％−範囲Ｍｐ．（ＤＳＣ）：Ｔ_{ｏｎｓｅｔ}：２４６．３℃，算出ピーク：２４８．８℃（発熱分解による溶融）．１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６，１２０°Ｃ）：δ８．５９（ｂｓ，２Ｈ），７．１４〜７．４８（ｍ，２Ｈ），６．５４（ｂｓ，１ Ｈ），４．３９（ｄｄ，１ Ｈ），４．２３（ｄｄ，１ Ｈ），３．８５〜３．９７（ｍ，２ Ｈ），３．２７〜３．３５（ｍ，１Ｈ），３．２０〜３．２７（ｍ，１ Ｈ），２．８０〜２．９５（ｍ，１ Ｈ），１．７８〜１．８８（ｍ，２ Ｈ），１．６４〜１．７８（ｍ，２ Ｈ），１．４０〜１．６４（ｍ，２ Ｈ）．ＭＳ（ＥＩ）：ｍ／ｚ ＝ ３１５（遊離塩基の［Ｍ＋Ｈ］^＋ 、１００％）．Ｃ_１５Ｈ_１７Ｆ_３Ｎ_２Ｏ_２ｘＨｃｌに対するＥＡ：計算値：Ｃ ５１．３６，Ｈ５．１７，Ｎ７．９９，Ｆ１６．２５；測定値Ｃ５１．１９，Ｈ４．８９，Ｎ ７．９１，Ｆ１６．０６．

実施例６
（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノン（化合物Ｉ）の合成

（（Ｓ）−３−ヒドロキシ−３−ピペリジン−２−イル−アゼチジン−１−イル）−（２，３，４−トリフルオロ−フェニル）−メタノンヒドロクロリド（１５．０ｇ、４２．８ｍｍｏｌ、１．０当量）及び２−フルオロ−４−ヨード−アニリン（１１．１ｇ、４７ｍｍｏｌ、１．１当量）のＴＨＦ（９０ｍＬ）中溶液に、ＴＨＦ中のＬｉＨＭＤＳ（１４９ｇ、２０．７％ｗ／ｗ、１８４ｍｍｏｌ、４．３当量）を、８８分にわたって２０〜３０℃で添加した。撹拌を２時間続けた。完全に変換した後、混合物を、水（７５ｍＬ）中の硫酸（１２．０ｇ、９６％〜ｗ ／ｗ、１１８ｍｍｏｌ、２．７５当量）の混合物に２５分にわたって添加し、１時間撹拌し続けた。層を分離させ、有機相を水（６０ｍＬ）及びトルエン（９６ｍＬ）の混合物で洗浄した。有機相を真空化で約１５０ｍＬの体積まで濃縮した。トルエン（２５０ｍＬ）を添加し、ジャケット温度５５℃で、トルエン（４００ｍＬ）を連続的に投与することによってバッチ体積を一定に保ちながら圧力８４ｍｂａｒで残留ＴＨＦを留去すると、生成物の沈殿が遅くなった。続いてバッチ温度を２時間以内に１０℃に下げ、懸濁液を１０℃で一晩撹拌し続けた。生成物を濾別し、ケーキを冷トルエン（１５０ｍＬ）ですすいだ。３５℃の真空化で、重量が一定になるまで乾燥し、表題化合物を無色固体（２０．６６ｇ）として得た。ＰＨＬＣ純度：９９．７％−範囲Ｍ．ｐ（ＤＳＣ）：Ｔ_{ｏｎｓｅｔ}： １６６．７℃，計算ピーク：１６８．２℃（９１．５ Ｊ／ｇ）．^１Ｈ ＮＭＲ（６００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ^３）：δ８．２８ − ８．４８（ｂｒ，１ Ｈ），７．３９（ｄｄ，１ Ｈ），７．３２（ｄｄｄ，１ Ｈ），７．０９ − ７．１４（ｍ，１ Ｈ），６．７５ − ６．８６（ｂｒ，１ Ｈ），６．６０（ｄｄｄ，１ Ｈ），４．１０（ｄ，２ Ｈ），４．０５ − ４．２０（ｂｒ，１ Ｈ），３．９３ − ４．０４（ｂｒ，１ Ｈ），３．０９（ｄ，１ Ｈ），２．７０（ｄ，１ Ｈ），２．５６ − ２．６７（ｂｒ，１ Ｈ），１．６８ − １．８７（ｍ，１ Ｈ），１．５０ − １．６４（ｍ，２ Ｈ），１．２５ − １．３８（ｍ，２ Ｈ），１．０７ − １．２４（ｍ，１ Ｈ）．ＭＳ（ＥＩ）：ｍ／ｚ ＝ ５３２（［Ｍ＋Ｈ］^＋，１００％）．Ｃ_２１Ｈ_２１Ｆ_３ＩＮ_２Ｏ_３に対するＥＡ：計算値：Ｃ４７．４７，Ｈ３．９８，Ｎ７．９１，Ｆ１０．７３；実測値Ｃ４７．６８，Ｈ４．００，Ｎ７．６６，Ｆ１０．８０．

実施例７
形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノン（化合物Ｉ）の結晶性フマル酸塩の調整

（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノン（８０ｋｇ）を２−プロパノール／水８８：１２ｗ／ｗ（９重量当量（ｗ当量））に７７℃で溶解させ、活性化炭素で濾過した。フマル酸（０．５２当量）を、２−プロパノール／水８８：１２ｗ／ｗ（２．６ｗ当量）に溶解させた。初期量のフマル酸溶液（全量の８％）を（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの濾過溶液に７７℃で溶解させた。播種結晶（０．０２３ｗ当量）を懸濁液として２−プロパノール／水８８：１２ｗ／ｗ（０．２ｗ当量）に７７℃で添加した。残った量のフマル酸溶液を６時間以内で同一の温度で添加した。結晶化を完了させるため、懸濁液を７時間以内で２０℃まで冷却した。化合物Ｉの結晶性フマル酸塩形態Ａを遠心分離により単離し、２−プロパノール（例えば、０．６ｗ当量）で洗浄し、減圧下で、最大５５℃で乾燥させ、破塊した。

形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフロロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩の性質決定例

元素分析
元素分析結果を１１７８．７１ｇ／ｍｏｌの相対分子量及び Ｃ_４６Ｈ_４６Ｆ_６Ｉ_２Ｎ_６Ｏ_８の組成からから算出し、表１に示す。結果は上記の構造と一致している。
表１：Ｃ_４６Ｈ_４６Ｆ_６Ｉ_２Ｎ_６Ｏ_８の元素分析

赤外線分光法
ｉＤ５ ＡＴＲアクセサリを備えたＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃのｉＳ５フーリエ変換赤外（ＦＴＩＲ）分光光度計を使用した。赤外線（ＩＲ）スペクトルは、４０００〜６５０ｃｍ^−１の範囲内で反射ＩＲ測定値として記録され、図１に示されている。ＩＲスペクトルは上記の構造と一致している。特徴的なＩＲ伸縮の概要を表２に示す。
表２：化合物Ｉのフマル酸塩のＩＲ割り当て

ジメチルスルホキシド溶液中のＮＭＲスペクトル
核磁気共鳴（ＮＭＲ）測定を、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ６００及び４００ＭＨｚ分光計で行った。６００ＭＨｚの機械には５ｍｍのＴＣＩ、ｚ−ｇｒａｄｉｅｎｔ ＣｒｙｏＰｒｏｂｅが装備され、４００ＭＨｚの機械には５ｍｍのＢＢＦＯ、ｚ−ｇｒａｄｉｅｎｔ Ｐｒｏｂｅが装備されていた。試料は、全ての陽子検出実験のために、ＤＭＳＯ−ｄ６（Ｄ、９９．８％）０．７５ｍＬ中の形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩６ｍｇを溶解することによって調製した。^１３Ｃ−ＮＭＲ及び^１９Ｆ−ＮＭＲのためには、０．７５ｍＬのＤＭＳＯ−ｄ６に６２ｍｇを溶解させた。

^１Ｈ−ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，２５℃でのＤＭＳＯ−ｄ６）：２５℃で６００ＭＨｚでの^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、ヘミフマル酸塩の存在を証明する、遊離塩基とフマル酸塩との２：１関係を示し、信号の積分値は６．６２及び６．４２ｐｐｍであった。アゼチジン環には８のプロトンシグナルがあり、一方で４しか予想されず、１：１の比率で２の信号セットが存在することを示す。

^１Ｈ ＮＭＲ（ｄ６ＤＭＳＯ）は図２に示される。δ８．５４（ｓ，１Ｈ）８．５０（ｓ，１Ｈ），７．５７（ｄｄ，２Ｈ），７．３７（ｄｄ，２Ｈ），７．３１（ｍ，２Ｈ），７．１８（ｍ，２Ｈ），６．６７（ｔ，２Ｈ），６．４２（ｓ，２Ｈ），４．２５（ｄ，ＩＨ），４．１５ ｄ，１Ｈ），４．０９（ｄ，１Ｈ）４．０１（ｄ，１Ｈ），３．９２（ｄ，１Ｈ），３．８６（ｄ，１Ｈ），３．７１（ｔ，２Ｈ）３．０３（ｄ，２Ｈ），２．７９（ｍ，２Ｈ）８，３８（ｔ，２Ｈ），１．６２（ｍ，６Ｈ）１．２４（ｍ ６Ｈ）（２．５０五重項１．９ＤＭＳＯ）

^１３Ｃ ＮＭＲ（ｄ_６ＤＭＳＯ）は図３に示される。δ１６８．０，１６７．５，１５２．３，１５１．４，１４３．６，１３５．２，１３３．２，１３１．３，１３０．５，１２４．６，１２３．７，１２３．０，１２２．７，１１９．８，１１９．６，１１０．７，８１．６，８１．５，７０．３，７０．３，６３．０，６１．８，６０．７，６０．６，５９．０，５８．１，４５．５，４５．４，２４．１，２３．７，２３．１，３９．５（ＤＭＳＯ−ｄ_６）

液体状態ＮＭＲ分光法の結果を支持するため、構造の解明のために固体ＮＭＲ分光法も行った。液体ＮＭＲ法においては、回転異性体混合物をもたらす自由回転において観察された制限のために、いくつかの信号が２倍になるが、固体ＮＭＲ分光法の結果はこの立体障害の影響を受けない。したがって、より明確なピーク同定が、固体ＮＭＲ分光法を使用する化合物Ｉのフマル酸塩に可能である。

形態Ａの^１３Ｃ ＮＭＲは図４に示される。δ１７５．３，１７３．６，１６８．９，１５５．５，１５３．５，１４４．４，１４２．５，１３７．０，１３６．０ １３５．５，１３２．０，１３０．５，１２７．２，１２５．０，１２４．０，１１７．９ｍ １０８．０，８２．２，７１．７，６４．０，５９．３，５６．２，４５．０，２５．３，２４．０，２２．２

形態Ａの^１３Ｃ固体ＮＭＲは他の（Ｓ）−［３，４−ジフロロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの構造の解明に使用する分析技術からの結果を確証する。遊離塩基の構造中及び対イオンの構造中に存在するすべての炭素をスペクトルで検出する。

^１９Ｆ−ＮＭＲ（２５℃での６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１９Ｆ−ＮＭＲは３つのフッ素原子を示した。

質量分析
アジレント６５２０ＱＴＯＦ分光計を、ＥＳＩ正ＣＩＤ ＭＳＭＳ及びＥＳＩ負ＭＳに使用した。化合物Ｉのフマル酸塩について得られた陽イオンエレクトロスプレー質量スペクトルを図５に示す。５６２．０７１４ｍ／ｚの［Ｍ＋Ｈ］^＋は化合物Ｉ（遊離塩基）の化学式と一致している。Ｍ＋Ｈの断片化挙動は、衝突誘起解離（ＣＩＤ）によって試験された。窒素を衝突ガスとして使用した。すべてのフラグメントは、化合物Ｉの構造と良好な相関関係にあった。

フマル酸塩化合物Ｉ［Ｍ−Ｈ］⁻について得られた負のエレクトロスプレー質量スペクトル（図６）は、ｍ／ｚ＝１１５．００４５（計算値：ｍ／ｚ＝１１５．００３７；差ｍ／ ｚ＝０．０００８）であり、それはフマル酸塩対イオンの存在を示す。

Ｘ線回折による（Ｓ）−［３，４−ジフロロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノン形態Ａ結晶性フマル酸塩の結晶構造分析
粉末Ｘ線回析（ＸＲＰＤ）試験
単結晶をループに乗せ、大気温度で測定した。データは、シンクロトロン放射を伴うＤＥＣＴＲＩＳ Ｐｉｌａｔｕｓ ６Ｍ検出器及びプログラムＸＤＳで処理されたデータを備えたＳｗｉｓｓ Ｌｉｇｈｔ ＳｏｕｒｃｅビームラインＸ１０ＳＡで収集した。結晶構造を解析し、ＳｈｅｌＸＴＬ（Ｂｒｕｋｅｒ ＡＸＳ，Ｋａｒｌｓｒｕｈｅ）で精緻化した。

形態Ａと称される化合物Ｉのフマル酸塩の構造は、カーン・インゴルド・プレローグ順位測に従い、（Ｓ）−立体配置を有する１のキラル中心を含む。構造を証明するために、単結晶判定を行った。溶媒のゆっくりとした蒸発により、アセトニトリル／水（１：１）中の希薄溶液から単結晶を結晶化させた。結晶化によって立体配座が変化しないことを証明するために、キラル高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を加えて行った。結晶データを表３に要約する。
表３： 形態Ａ結晶データ
形態Ａの子立体構造及び結晶構造パラメータを表３に示す。形態Ａの結晶構造では、ピペリジン窒素はプロトン化され、フマル酸は脱プロトン化される。フマル酸塩は、２つのピペリジン及び異なる活性の分子からの２つのＯＨ基によって配位される。結晶充填は無限の分子間水素結合鎖により特徴づけられる。絶対構造パラメータ（Ｆｌａｃｋパラメータ：０．０４８、ｅｓｄ ０．０１３）によって示されるように、ピペリジン環のキラル炭素原子の立体配置が（Ｓ）であることが確認された。

（Ｓ）−［３，４−ジフロロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩の紫外スペクトル
約２００ｎｍ、２３９ｎｍ、２７６ｎｍ及び３１０ｎｍのＵＶ−Ｖｉｓ吸収極大は、それぞれ芳香族環部分ならびにｎ→π^＊孤立電子対のπ→π^＊遷移を示す。図７におけるスペクトルは、化合物Ｉのフマル酸塩の構造と一致し、かつ構造内に存在する発色団の期待される特徴を示す。

（Ｓ）−［３，４−ジフロロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩の構造解明：多型性
１５を超える化合物Ｉの塩形態を、例えば、安息香酸、マロン酸、フマル酸、マンデル酸、酢酸及びオロチン酸から調製された塩を含む臨床開発のための適合性について評価した。安息香酸、マロン酸、マンデル酸、酢酸及びオロチン酸が、溶媒及び条件に応じて非晶質塩、結晶塩、または非晶質塩と結晶塩の混合物を形成する場合、以下に説明するようにフマル酸から調製された塩が最も望ましいことが明らかとなった。

化合物Ｉのフマル酸塩の結晶性固形の包括的な選別により、１つの結晶形態（Ａ型）及び１つの非晶質形態（非晶質形態）が明らかとなった。無溶媒で非吸湿性である形態Ａは、熱力学的に安定な形態であり、かつ製造プロセスによって一貫して生成される形態である。非晶形は、非結晶性であり、吸湿性である。非晶形は、加熱及び水中の溶媒媒介相転移によって形態Ａに変換することが観察されている。多形選別中に行われる約３０００の結晶化実験において、さらなる多形相は観察されなかった。ＤＳＣ測定値及び温度調整ＸＲＰＤに基づいて、融解が発生するまでの過熱下での多形相は観察されなかった。工程条件（溶媒２−プロパノール／水 ８８：１２、温度：２０℃）を用いたスラリー実験においては、非晶形は速やかに形態Ａに変換した。加熱下において、９０℃〜２００℃で非晶形は形態Ａに変換した。

示差走査熱量測定（ＤＳＣ）及び粉末Ｘ線回析（ＸＲＰＤ）によって、形態Ａ及び非晶形を識別することができる。さらに、形態Ａと非晶形の違いは、ラマン分光法及び^１３Ｃ固体核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光法を用いて実証されている。

示差走査熱量測定（ＤＳＣ）
Ｍｅｔｔｌｅｒ−Ｔｏｌｅｄｏ社製機器（ＤＳＣ８２０／８２１ｅ／１；ＦＲＳ０５センサー）を用いてＤＳＣサーモグラムを記録した。試料約２〜６ｍｇをアルミニウム蒸発皿に入れ、アルミニウム蓋で密封した。加熱前に蓋を自動的に穿孔した。通常、窒素下の試料を１０Ｋ／分の比率で最大２５０℃まで加熱した。

結晶性形態Ａは２３９．６℃（Ｔ_{ｏｎｓｅｔ}）で融解を起こした。融解及び分解が重複しているので、融解熱ならびにＴ_{ｅｘｔｒａ．ｐｏｌ．}は決定されなかった（図８）。

非晶形は、１１６．２℃（粉砕から）及び１２０．６℃（凍結乾燥から）のガラス転移を示し、続いて１５０℃〜２００℃の結晶化に起因する発熱事象が形態Ａに現れた。約２２５℃を超えると、材料が融解し始める（図９）。

形態Ａ及び非晶形の粉末Ｘ線回析
周囲条件でＳＴＯＥ社製ＳＴＡＤＩ Ｐ回折計（ＣｕＫα線［１．５４Å］、一次モノクロメーター、シリコンストリップ検出器、角度範囲３°〜４２°２−θ、総測定時間約３０分）を用いて、透過幾何学におけるＸ線回析パターンを記録した。試料を用意し、さらなる材料の処理（例えば、粉砕またはふるい）をせずに分析した。

表４に示されるように、結晶性形態Ａは２−θ値に発現する、一連の特徴的な回析ピーク位置によって選択的に同定される。個々の形態に特徴的なＸＲＰＤ回折図を図１０及び図１１に示す。
表４

結晶性形態Ａ及び非晶形の固有溶解速度
それぞれの固有溶解測定のため、フラットディスク（表面積＝０．５ｃｍ^２）に約１５ｋＮの負荷をかけて、結晶性形態Ａまたは非晶形試料からペレットを製造した。圧縮後、それぞれのペレットをＸＲＰＤによって点検し、ペレット成型工程中に多形性変換が起きていないことを確かめた。使用した実験条件を表５にまとめる。
表５

形態Ａ及び非晶形（凍結乾燥から）のバッチを使用して、それぞれの固体形態の固有溶出速度を決定した。固有の溶解は、一定の表面積を溶解媒体に曝すことによって異なる結晶形態の特徴付けを可能にする。得られた結果を表６にまとめる。
表６

それぞれの形態の固有溶解速度は大いに異なる。データに基づき、非晶形は、結晶性形態Ａより約３５倍速い固有溶解速度を有する。

結晶性形態Ａ及び非晶形の吸湿性
水分吸着／脱離データをＤＶＳ−１／ＤＶＳ−ＨＴ／ＤＶＳ−内因性（ＳＭＳ表面測定システム）水分バランスシステムで収集した。吸着／脱着等温線は、２５℃で０％ＲＨ（相対湿度）から９０％ＲＨの範囲で段階的に測定した。ＲＨの次のレベル（重量基準が満たされない場合、最大平衡時間２４時間）に切り替える基準として、０．００２ｍｇ／分未満の重量変化が選択された。データを試料の初期水分量に対して修正；つまり、０％ＲＨで試料が乾燥した後の重量をゼロ点として取った。所定の物質の吸湿性は、表７に示すように、ＲＨを０％ＲＨから９０％ＲＨに上げたときの質量の増加を特徴とする。
表７

結晶性形態Ａの水分吸着／脱着データが図１２に示されている。標準的な動的蒸気収着実験のタイムスケールの間、変換は観察されなかった。０％ＲＨから９０％ＲＨの間では、形態Ａは最小かつ可逆的な±０．１％の重量増加または損失を示し、したがって、非吸湿性であると分類される。

非晶形の水分吸着／脱着データは図１３に提供される（凍結乾燥から）。標準的な動的蒸気収着実験のタイムスケールの間、変換は観察されなかった。０％ＲＨから９０％ＲＨの間では、非晶形は可逆的な±１２．１％の重量増加または損失を示し、したがって、吸湿性であると分類される。

前述の開示は、明瞭化及び理解のために、例示及び実施例によっていくらか詳細に記載されている。本発明は、様々な具体的かつ好ましい実施形態及び技術を参照して説明されている。しかし、本発明の精神及び範囲内にとどまりながら、多くの変形及び修正させることができることを理解されたい。当業者であれば、添付の特許請求の範囲内で変更及び修正を実施できることは明らかであろう。したがって、上記の説明は例示的なものであり、限定的なものではないことを理解されたい。したがって、本発明の範囲は、上記の説明を参照せずに決定されるべきであり、かかる請求項が権利を与えられる等価物の全範囲とともに、添付の特許請求の範囲を参照して決定されるべきである。

Claims (14)

1. （Ｓ）−［３，４−ジフロロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩。
2. 形態Ａと称され、以下のうちの少なくとも１によって特徴づけられる、請求項１に記載の結晶性フマル酸塩：
   （ｉ）実質的に図２に示されるような、ｄ_６ＤＭＳＯ中の^１Ｈ ＮＭＲスペクトル、
   （ｉｉ）実質的に図３に示されるような、ｄ_６ＤＭＳＯ中の１３Ｃ ＮＭＲスペクトル、
   （ｉｉｉ）１７５．３、１７３．６、１１７．５、１５５．５、及び１５３．５、±０．２ｐｐｍから選択される３以上のピークを有する、^１３Ｃ ＮＭＲ固体スプペクトル、
   （ｉｖ）実質的に図４に示されるような、^１３Ｃ ＮＭＲ固体スプペクトル、
   （ｖ）４．６、１２．１、１３．２、１３．６及び１４．５±０．２°２θから選択される３以上の２θ値を有する粉末Ｘ線回析パターン（ＣｕＫα λ＝１．５４１８Å）（結晶性形態の測定は室温で行われる）、
   （ｖｉ）実質的に図１０に示されるパターンに従う、粉末Ｘ線回析（ＸＲＰＤ）パターン、ならびに、
   （ｖｉｉ）実質的に図８に従う、示差走査熱量測定サーモグラム。
3. 前記塩は、１７５．３、１７３．６、１１７．５、１５５．５、及び１５３．５、±０．２ｐｐｍから選択される３以上のピークを有する、^１３Ｃ ＮＭＲ固体スプペクトルによって特徴づけられる、請求項１に記載の、形態Ａと称される、（Ｓ）−［３，４−ジフロロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩。
4. 前記塩は、４．６、１２．１、１３．２、１３．６及び１４．５±０．２°２θから選択される３以上の２θ値を含む粉末Ｘ線回析パターン（ＣｕＫα λ＝１．５４１８Å）によって特徴づけられ、結晶性形態の測定は室温で行われる、請求項１に記載の、形態Ａと称される、（Ｓ）−［３，４−ジフロロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩。
5. 前記塩は、前記塩の重量に基づき少なくとも９０重量％の形態Ａである、請求項１〜４に記載の（Ｓ）−［３，４−ジフロロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩。
6. 請求項１〜４に記載の、形態Ａと称される、（Ｓ）−［３，４−ジフロロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩、及び医薬的に許容される賦形剤を含む、医薬品組成物。
7. 癌を治療するための医薬品を製造するための、請求項１〜４のいずれか１項に記載の、形態Ａと称される、（Ｓ）−［３，４−ジフロロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩の使用。
8. 癌治療における療法ための、請求項１〜４のいずれかに１項に記載の、形態Ａと称される、（Ｓ）−［３，４−ジフロロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩の使用。
9. メラノーマ（ＢＲＡＦ Ｖ６００変異メラノーマを含む）、乳癌（三種陰性乳癌を含む）、結腸直腸癌（ＫＲＡＳ変異結腸直腸癌を含む）、非小細胞肺癌、急性骨髄性白血病、及び膵癌からなる群から選択される癌を治療するための医薬品として使用する、形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフロロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩。
10. 前記癌は、ＢＲＡＦ Ｖ６００変異メラノーマである、請求項８に記載の使用。
11. ベムラフェニブと組み合わせて、メラノーマ治療のための医薬品として使用される、形態Ａと称される（Ｓ）−［３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−２−イル」）アゼチジン−１−イル］−メタノンの結晶性フマル酸塩。
12. 対象におけるＢＲＡＦ Ｖ６００変異メラノーマの治療方法であって、化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の治療有効量を、単独でまたはベムラフェニブと組み合わせて治療を必要とする前記対象に投与することを含む、前記方法。
13. 前記化合物Ｉの結晶性フマル酸塩がベムラフェニブの前または後、もしくは同時に投与される、請求項１２に記載の方法。
14. 溶媒中に溶解したフマル酸を溶媒に溶解した化合物Ｉの混合物に添加し、形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩を形成すること、及び得られた形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩の結晶を採取すること
    を含む、形態Ａと称される化合物Ｉの結晶性フマル酸塩を調製する方法。