JP2018515145A - 初期アルツハイマー病又は軽度認知障害の診断方法 - Google Patents

初期アルツハイマー病又は軽度認知障害の診断方法 Download PDF

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Abstract

本発明は、アルツハイマー病又は軽度認知障害の診断方法に関する。本発明のアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断方法は、嗅覚組織のｍｉＲ−２０６の発現レベルを確認して、アルツハイマー病及び軽度認知障害の診断に高い診断率を示し、安価で診断可能であり、組織検査の安定性が非常に高いので、アルツハイマー病又は軽度認知障害の診断に顕著な効果を示す。【選択図】図１

Description

本発明は、初期アルツハイマー病又は軽度認知障害の診断方法に関する。
アルツハイマー疾患は、老化に伴う脳疾患であり、脳全体に亘る細胞外ベータアミロイド沈着である老人性斑点及び細胞内過リン酸化タウタンパク質により神経細胞が死滅するものであることが知られており、これは、進行性記憶障害、認知力欠損、個人性格の変化などを招く疾病である。全世界的に３５０万名以上がアルツハイマー病で苦しんでいるが、米国ＦＤＡにより承認された疾患改善効果を有する薬物は未だに開発されていないのが現状である。
アルツハイマー病の初期段階の患者の早期診断は、患者の治療に欠かせないものであり、潜在的なアルツハイマー病の治療剤に対する臨床試験を計画する上でも必要とされる。
しかしながら、これまで発病機序への取り組み及び治療剤の開発が盛んに行われてきており、しかも、多大な投資が行われてきたにも拘わらず、これまでアルツハイマー病は早期に診断し難い疾患であると認識されており、確かな早期診断バイオマーカーがないのが現状である。
この理由から、様々な診断法に関する研究・開発が盛んに行われているが、これまで知られている方法では、アルツハイマー病を早期に診断することは困難である。例えば、ＣＳＦマーカー及び様々なタイプの神経映像技法の急速な発展にも拘わらず、それぞれのバイオマーカーは制限点を有しており、何よりも認知機能が正常であるヒトから弱い認知損傷を有する患者を区別することが困難であるという限界がある。なお、ＣＳＦ Ａ４２の測定及びアミロイドＰＥＴ映像は、アミロイド蓄積のマーカーであるとはいえ、アミロイド陽性が信頼できる臨床診断結果を提供することはできない。
すなわち、核磁気共鳴画像法（ＭＲＩ：ｍａｇｎｅｔｉｃ ｒｅｓｏｎａｎｃｅ ｉｍａｇｉｎｇ）又はコンピュータ断層撮影（ＣＴ：ｃｏｍｐｕｔｅｄ ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ）を用いた脳映像診断、脳脊髄液（ＣＳＦ：Ｃｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌ ｆｌｕｉｄ）又は血液中でタウ（ｔａｕ）タンパク質、ベータアミロイド（ｂｅｔａ−ａｍｙｌｏｉｄ）の量を測定した診断、遺伝的な危険要素としてのＡＰＯＥ−ｅ４遺伝子の多様性型の分析などがアルツハイマー疾患の診断方法に用いられているが、アルツハイマー病の早期診断のための方法として採用するには依然として制限点を有している。
このような背景のもと、アルツハイマー病が早期に診断可能な新たなバイオマーカー及びこれを用いた診断方法を探り、これに基づくアルツハイマー病の早期診断及び予後の予測方法の開発が至急行われることが望まれている。
本発明は、アルツハイマー病又は軽度認知障害の診断又は予後の分析に必要な情報を提供するために嗅覚組織試料にあるｍｉＲＮＡ−２０６（ｍｉＲ−２０６）の発現を検出する方法を用いてアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断又は予後分析マーカーを検出する方法を提供することを目的とする。
また、本発明は、患者から分離された嗅覚組織試料中でｍｉＲ−２０６の発現レベルを測定するステップと、前記ｍｉＲ−２０６の発現レベルを基準レベルと比較するステップと、を含むアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断のための情報の提供方法を提供することを目的とする。
更に、本発明は、ｍｉＲ−２０６の発現レベルを測定する製剤として、前記遺伝子に特異的に結合するプライマー対、プローブ又はアンチセンスヌクレオチドを含む初期アルツハイマー病又は軽度認知障害診断用組成物を提供することを目的とする。
更にまた、本発明は、初期アルツハイマー病又は軽度認知障害診断用組成物を含む初期アルツハイマー病又は軽度認知障害診断用キットを提供することを目的とする。
上述した課題を解決するために、本発明は、アルツハイマー病又は軽度認知障害の診断又は予後の分析に必要な情報を提供するために嗅覚組織試料にあるｍｉＲ−２０６の発現を検出する方法を用いてアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断又は予後分析マーカーを検出する方法を提供する。
また、本発明において、前記ｍｉＲ−２０６の発現の検出は、ｍｉＲ−２０６に特異的に結合するプライマー対、プローブ又はアンチセンスヌクレオチドを用いて行うことを特徴とする。
更に、本発明において、前記ｍｉＲ−２０６の発現の検出は、逆転写酵素重合酵素反応、競争的逆転写酵素重合酵素反応、リアルタイム逆転写酵素重合酵素反応、ＲＮａｓｅ保護分析法、ノーザンブロッティング又はＤＮＡチップにより行われることを特徴とする。
更にまた、本発明において、前記嗅覚組織試料は、嗅覚粘膜試料又は嗅覚上皮試料であることを特徴とする。
更にまた、本発明において、前記アルツハイマー病は、初期アルツハイマー病であることを特徴とする。
更に、本発明は、患者から分離された嗅覚組織試料中でｍｉＲ−２０６の発現レベルを測定するステップと、前記ｍｉＲ−２０６の発現レベルを基準レベルと比較するステップと、を含むアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断のための情報の提供方法を提供する。
また、本発明において、前記ｍｉＲ−２０６の発現レベルを基準レベルと比較して、前記発現が増加すればアルツハイマー病又は軽度認知障害であると判定するステップを更に含むことを特徴とする。
更に、本発明において、前記ｍｉＲ−２０６の発現レベルの測定は、ｍｉＲ−２０６に特異的に結合するプライマー対、プローブ又はアンチセンスヌクレオチドを用いて行うことを特徴とする。
更にまた、本発明において、前記ｍｉＲ−２０６の発現の検出は、逆転写酵素重合酵素反応、競争的逆転写酵素重合酵素反応、リアルタイム逆転写酵素重合酵素反応、ＲＮａｓｅ保護分析法、ノーザンブロッティング又はＤＮＡチップにより行われることを特徴とする。
更にまた、本発明において、前記嗅覚組織試料は、嗅覚粘膜試料又は嗅覚上皮試料であることを特徴とする。
更にまた、本発明において、前記アルツハイマー病は、初期アルツハイマー病であることを特徴とする。
更にまた、本発明は、ｍｉＲ−２０６の発現レベルを測定する製剤として、前記遺伝子に特異的に結合するプライマー対、プローブ又はアンチセンスヌクレオチドを含む初期アルツハイマー病又は軽度認知障害診断用組成物を提供する。
更にまた、本発明は、上記の初期アルツハイマー病又は軽度認知障害診断用組成物を含む初期アルツハイマー病又は軽度認知障害診断用キットを提供する。
本発明のアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断方法は、嗅覚組織のｍｉＲ−２０６の発現レベルを確認して、アルツハイマー病及び軽度認知障害の診断に高い診断率を示し、安価で診断可能であり、組織検査の安定性が非常に高いので、アルツハイマー病又は軽度認知障害の診断に顕著な効果を示す。
したがって、これに基づく治療法及び予防法を用いて、アルツハイマー病又は軽度認知障害の治療効果を高めることができ、しかも、治療の副作用を極力抑えることができる。
嗅覚上皮試料のｍｉＲＮＡ−２０６リアルタイムＰＣＲ結果を示す図である。 嗅覚上皮ｍｉＲＮＡ−２０６レベル及び臨床スコア測定結果間の相関関係の分析結果を示す図である。
本発明の利点及び特徴、並びにこれらを達成する方法は、詳細に後述されている実施例を参照することによりなお一層明らかになるであろう。しかしながら、本発明は、後述する実施例に何等限定されるものではなく、異なる様々な形態に具体化され、単にこれらの実施例は本発明の開示を完全なものにし、本発明が属する技術分野において通常の知識を有する者に発明の範囲を完全に知らせるために提供されるものであり、本発明は特許請求の範囲のみにより定義される。
本発明者らは、アルツハイマー病の早期診断のためのバイオマーカーの発掘及び診断方法の開発のために鋭意努力を行ったところ、嗅覚（Ｏｌｆａｃｔｏｒｙ）組織においてｍｉＲＮＡ−２０６（ｍｉＲ−２０６）の発現レベルが初期アルツハイマー病の診断のためのバイオマーカーとして顕著な効果を示すことを見出し、本発明を完成するに至った。
本発明は、アルツハイマー病又は軽度認知障害の診断又は予後の分析に必要な情報を提供するために嗅覚組織試料にあるｍｉＲ−２０６の発現を検出する方法を用いてアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断又は予後分析マーカーを検出する方法を提供する。
本発明において、診断は、特定の疾病又は疾患に対するあるオブジェクトの感受性（ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ）を判定すること、現在、あるオブジェクトが特定の疾病又は疾患を有しているか否かを判定すること、特定の疾病又は疾患にかかったあるオブジェクトの予後（ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ）（例えば、アルツハイマー疾患の段階の決定又は治療に対する反応性の決定）を判定すること、又はセラメトリックス（ｔｈｅｒａｍｅｔｒｉｃｓ）（例えば、治療効能に関する情報を提供するためにオブジェクトの状態をモニタリングすること）を含む。
アルツハイマー病とは、老化に伴う脳疾患のことをいい、脳全体に亘る細胞外ベータアミロイド沈着である老人性斑点及び細胞内過リン酸化タウタンパク質により神経細胞が死滅するものであることが知られており、これは、進行性記憶障害、認知力欠損、個人性格の変化などを招く疾病である。
軽度認知障害とは、同じ年齢帯に比べて認知機能、特に、記憶力が低下している状態であって、日常生活を営む能力は保存されているため、現在のところ認知症ではない状態のことをいう。軽度認知障害は、アルツハイマー病に移行し得る高危険群であると認められ、アルツハイマー病を最も早期に発見可能な段階であり、治療効果を極大化させ得る、臨床学的に重要な段階である。
本発明によれば、アルツハイマー病の初期段階は臨床認知症評価尺度（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｄｅｍｅｎｔｉａ Ｒａｔｉｎｇ；ＣＤＲ）により表示され、ＣＤＲ ０．５は非常に弱い認知症（ｖｅｒｙ ｍｉｌｄ ｄｅｍｅｎｔｉａ）段階及び／又は最軽度認知障害であり、ＣＤＲ １は軽度認知障害（ｍｉｌｄ ｄｅｍｅｎｔｉａ）であると定義可能である。
また、標準対象体は、当業者にとって周知の方法に従い、アルツハイマー病の特異的な段階を有する他の定義によっても分類可能である。
本願発明のアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断又は予後分析マーカーを検出する方法は、軽度認知障害をはじめとして初期アルツハイマー病の診断又は予後分析マーカーの検出に顕著な効果を示す。
本願発明のアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断又は予後分析に必要な情報を提供するために、嗅覚組織試料にあるｍｉＲ−２０６の発現を検出する方法を利用する。
本発明において、嗅覚組織試料は、嗅覚上皮を構成する組織であって、前方鼻中隔（ａｎｔｅｒｉｏｒ ｎａｓａｌ ｓｅｐｔｕｍ）に位置する組織である。前記嗅覚組織試料は、動物、好ましくは、ヒトから採取した試料であってもよい。嗅覚組織試料は、これに制限されないが、粘膜（ｍｕｃｏｓａｌ）又は上皮（ｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ）であることが好ましい。例えば、嗅覚粘膜をブラシで掻き落としたときに付着する上皮細胞を用いてもよく、手術を通じて上皮組織を採取して用いてもよい。これらの試料は、発現レベルの測定のために当業界における周知の方法に従い適切に加工可能である。
本発明に係るｍｉＲ−２０６の発現を検出する方法は、ｍｉＲ−２０６成熟配列、好ましくは、配列番号１の塩基配列を有するｍｉＲ−２０６配列に特異的に結合するプライマー対、プローブ又はアンチセンスヌクレオチドを用いる。
本発明において、発現レベルの測定は、ｍｉＲＮＡ−２０６の発現レベルの測定を含む。本発明において、「ｍｉＲＮＡ−２０６の発現レベルの測定」とは、アルツハイマー病又は軽度認知障害の診断又は予後の分析に必要な情報を提供するために試料におけるｍｉＲＮＡ−２０６の有無及び発現度を確認する過程のことをいい、ｍｉＲＮＡ−２０６の量を測定することにより行われる。このための分析方法としては、逆転写酵素重合酵素反応、競争的逆転写酵素重合酵素反応、リアルタイム逆転写酵素重合酵素反応、ＲＮａｓｅ保護分析法、ノーザンブロッティング又はＤＮＡチップなどが挙げられるが、これらに制限されることはない。
例えば、定量的リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ（Ｒｅａｌ−ｔｉｍｅ ＲＴ−ＰＣＲ）を用いてｍｉＲＮＡ−２０６の発現レベルを測定する。また、各遺伝子のＣＴ（基準値に達するのに要するサイクル回数）を測定し、ΔＣＴ値（各マーカーのＣＴ−参照遺伝子の平均ＣＴ）を計算して、ｍｉＲＮＡ−２０６の発現量を２−ΔＣｔで定量化することができる。
本発明において、前記検出方法に用いられる方法は、好ましくは、定量的リアルタイムＲＴ−ＰＣＲであり、商用化されたｍｉＲ−２０６検出プライマー（例えば、アプライドバイオシステムズ社製、ＴＭ：０００５１０など）を用いることができる。
また、本発明は、患者から分離された嗅覚組織試料中でｍｉＲ−２０６の発現レベルを測定するステップと、前記ｍｉＲ−２０６の発現レベルを基準レベルと比較するステップと、を含むアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断のための情報の提供方法を提供する。
本発明に係るアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断のための情報の提供方法は、アルツハイマー病又は軽度認知障害の診断に顕著な効果を示し、特に、軽度認知障害をはじめとして初期アルツハイマー病の診断のための情報の提供に顕著な効果を有する。
本発明に係るアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断のための情報の提供方法は、患者から分離された嗅覚組織試料中でｍｉＲ−２０６の発現レベルを測定するステップを含み、これは、ｍｉＲ−２０６の発現を検出する方法に関する上述した内容を本発明の範囲内において適用することができる。
更に、本発明に係るアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断のための情報の提供方法は、前記ｍｉＲ−２０６の発現レベルを基準レベルと比較するステップを含む。
本発明において、基準レベルとは、本願に記載の方法により基準試料から検出及び判断される高い診断の予測性を示す遺伝子の発現レベルと同じレベルのことをいう。このような基準レベルは、数学的なアルゴリズム及び計算された指数から得られた、群集の統計学的な分析及び／又は危険性予測データから導き出される。基準となる特定の計数もまた、統計学的及び構造的な分類アルゴリズム及びその他の方法を用いることにより構成されて使用される。
一部の実施態様において、本願における「基準レベル」という用語は、予め測定された値のことをいい、例えば、当業者は、基準レベルを予め測定し、特異性、敏感性及び／又は正確性の観点から要件を満たすように設定してもよい。例えば、敏感性又は特異性は、それぞれ所定の限界、例えば、８０％、９０％又は９５％に設定可能であり、これらの要件は、陽性又は陰性の予測値の観点から定義されてもよい。基準レベルは、健常な個体において予め測定されてもよく、患者が属する疾患体（ｄｉｓｅａｓｅ ｅｎｔｉｔｙ）において予め測定されてもよい。
本発明において、発現レベルの基準レベルを決定するために平均値の算出やＲＯＣ曲線の分析などの統計的な分析方法が使用可能である。
本発明の一実施態様に係るＲＯＣ曲線は、診断の性能を示す曲線であり、敏感度（ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ）、特異度（ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ）、正確度（ａｃｃｕｒａｃｙ）により構成される。本発明において、敏感度（ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ）は、アルツハイマー病を有するヒトのうち陽性である比率であり、特異度（ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ）は、アルツハイマー病を有さないヒトのうち陰性である比率であり、正確度（ａｃｃｕｒａｃｙ）は、全体のケースのうち検査結果の的中比率を示す。ここで、特異度及び敏感度が両方とも高いとき、検査の正確度が高くなるため、ＲＯＣ曲線においてｘ軸が１−特異度、ｙ軸が敏感度となり、正確度（ａｃｃｃｕｒａｃｙ）を示すＡＵＣ（ａｒｅａ ｕｎｄｅｒ ｃｕｒｖｅ）は、曲線下の面積を意味する。
本発明の一実施態様によれば、基準レベルは、アルツハイマー病の予測及び診断に高い予測効果及び診断効果を示すカットオフ値である。アルツハイマー病の予測及び診断のために、ｍｉＲ−２０６の発現量は、ｍｉＲ−２０６のＲＯＣ曲線の分析においてＡＵＣ値が中等度レベル（約０．６レベル）以上、好ましくは、ＡＵＣ値が最も高いレベルの遺伝子の発現量を最適なカットオフ値にして基準レベル以上の試料に対してアルツハイマー病の発病率が高いことを予測する。
本発明において、「以上」又は「超え」という用語は、基準レベルを超えるレベルを意味するか、或いは、基準試料の発現レベルに比べて本願に記載の方法により検出された発現レベルにおける１％、２％、５％、１０％、２０％、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又はそれ以上の全体の増加を意味する。本発明において、「以下」又は「未満」という用語は、基準レベル未満のレベルを意味するか、或いは、基準試料の発現レベルに比べて本願に記載の方法により検出された発現レベルにおける１％、２％、５％、１０％、２０％、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又はそれ以上の全体の減少を意味する。
また、本発明のアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断のための情報の提供方法は、前記ｍｉＲ−２０６の発現レベルを基準レベルと比較して、前記発現が増加すれば、アルツハイマー病又は軽度認知障害であると判定するステップを更に含んでいてもよい。
上述した方法に従い、基準レベル以上の試料に対してはアルツハイマー病の発病率が高いことを予測する。
更に、本発明は、ｍｉＲ−２０６の発現レベルを測定する製剤として、前記遺伝子に特異的に結合するプライマー対、プローブ又はアンチセンスヌクレオチドを含む初期アルツハイマー病又は軽度認知障害診断用組成物を提供する。
前記初期アルツハイマー病又は軽度認知障害診断用組成物は、ｍｉＲ−２０６の発現レベルを測定することにより、初期アルツハイマー病又は軽度認知障害に対する診断及び予測を行うことができる。
前記診断用組成物は、前記遺伝子に特異的に結合するプライマー対、プローブ又はアンチセンスヌクレオチドのうちのいずれか一つ以上を含んでいてもよい。本発明が提供する塩基配列から前記プライマー対、プローブ又はアンチセンスヌクレオチドに対しては、当業者が手軽に配列をデザインすることができる。本発明の一実施態様によれば、前記ｍｉＲＮＡ−２０６の発現レベルを測定する製剤はプライマー対であって、配列番号２及び配列番号３の塩基配列を有していてもよい。
更にまた、本発明は、ｍｉＲ−２０６の発現レベルを測定する製剤として、前記遺伝子に特異的に結合するプライマー対、プローブ又はアンチセンスヌクレオチドを含む初期アルツハイマー病又は軽度認知障害診断用組成物を含む初期アルツハイマー病又は軽度認知障害診断用キットを提供する。
キットは、前記タンパク質をコーディングするポリヌクレオチドのうちのいずれか一つ以上の発現レベルを確認して検出することができる。本発明のキットには、初期アルツハイマー病又は軽度認知障害を診断するために発現レベルを測定するためのプライマー又はプローブだけではなく、前記ポリヌクレオチドの分析方法に用いて好適な一つ又はそれ以上の他の構成成分の組成物又は装置が含まれていてもよい。好ましくは、ｍｉＲ−２０６の定量検出のための診断キットは、前記ポリヌクレオチドに特異的に結合する１種以上のオリゴヌクレオチドを含んでいてもよいが、これらの一部の配列に対応するプライマー、逆転写酵素、Ｔａｑポリメラーゼ、ＰＣＲ用プライマー及びｄＮＴＰを含んでいてもよく、ポリヌクレオチドの発現レベルを測定するために前記「ｍｉＲＮＡ−２０６の発現レベルの測定」に関して記述された分析方法を用いたキットを用いてもよい。例えば、前記キットは、ＲＴ−ＰＣＲキット、競争的ＲＴ−ＰＣＲキット、リアルタイムＲＴ−ＰＣＲキット、リアルタイムＲＴ−ＰＣＲキット又はＤＮＡチップキットのうちから選択可能である。
＜実施例１＞患者の募集及び臨床的な評価
ソウル大学病院臨床試験審査委員会により承認された研究プロトコールを用いて、患者から同意を得た後に実験を行った。５０歳以上の被験者がこの研究に参加した。認知障害を有する患者はソウル大学病院神経科の外来患者クリニックから募集し、一般的な認知機能を有する参加者は募集公告を出して募集した。認知機能を評価するために、全ての患者は韓国版の臨床的認知症尺度（ｃｌｉｎｉｃａｌ ｄｅｍｅｎｔｉａ ｒａｔｉｎｇ；ＣＤＲ）検査、簡易精神状態検査（Ｍｉｎｉ−Ｍｅｎｔａｌ Ｓｔａｔｅ Ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ；ＭＭＳＥ−Ｋ）及びアルツハイマー病評価尺度認知機能下位尺度（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ Ｓｃａｌｅ−ｃｏｇｎｉｔｉｖｅｓｕｂｓｃａｌｅ；ＡＤＡＳ−ｃｏｇ−Ｋ）検査を受けた。Ｂｅｃｋ憂うつ尺度ＩＩ（Ｂｅｃｋ Ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｉｎｖｅｎｔｏｒｙ−ＩＩ；ＢＤＩ−ＩＩ）は、憂うつ症に随伴する認知の損傷を決定するために全ての患者に対して行われた。軽症から重症までの憂うつ症を有する患者は、認知機能のスコアとは無関係に憂うつ症グループに分類された。神経及びコミュニケーション障害並びに脳卒中の国立協会とアルツハイマー病及び関連疾患協会のアルツハイマー病の可能性に対する基準を満たす患者は認知症グループに分類され、一般的な認知機能（ＣＤＲ ０）を有するヒトは対照群に分類された。基礎嗅覚機能は、韓国型嗅覚検査（Ｋｏｒｅａｎ ｖｅｒｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｎｉｆｆｉｎｇ ｓｔｉｃｋ ｔｅｓｔ；ＫＶＳＳ）を用いて評価した。
＜実施例２＞嗅覚上皮の鼻腔組織の検査
鼻腔組織検査は、ソウル大学病院耳鼻咽喉科において行われた。２％のリドカイン及び０．１％のエピネフリンの混合物で湿らされた綿ガーゼが血管収縮及び局所麻酔に対してひび割れた隙間に挿入された。組織検査は、内視鏡案内に従い熟練した耳鼻咽喉科専門医により行われた。組織サンプルは、前方鼻中隔（ａｎｔｅｒｉｏｒ ｎａｓａｌ ｓｅｐｔｕｍ）から収集された。小さなキュレット又は小さなピンセットを用いて、２つ又は３つの２ｍｍの組織ブロックを鼻孔から回収した。鼻腔のパッキングは、出血を制御するために組織検査を行ってから１０分間行われた。被験者は、１５分〜１０分間臨床的に観察され、全ての患者は、基礎嗅覚機能に対する評価のための組織検査前にＫＶＳＳを受けた。
また、嗅覚上皮組織検査の安定性を確認したところ、鼻血のほとんどは組織検査を行ってから３０分後に調節された。なお、全ての患者は、急性合併症がなく、ほとんどの患者はいかなる不便も感じず、組織試料の採取に安定性が確保されたことを確認した。
＜実施例３＞ｍｉＲＮＡ−２０６のリアルタイムＰＣＲ
トータルＲＮＡは、Ｔｒｉｚｏｌ（インビトロジェン社製、ＵＳＡ）を用いて鼻の粘膜組織から分離し、ｍｉＲＮＡは、Ａｍｂｉｏｎ ｍｉｒＶａｎａ ｉｓｏｌａｔｉｏｎキットを用いて分離した。ＲＴ−ＰＣＲは、ｍｉｒＶａｎａ ｑＲＴ−ＰＣＲ ｍｉＲＮＡ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎキット及びｍｉＲ−２０６（ＴＭ：０００５１０）ａｎｄＵ６（ＴＭ：００１９７３）ｓｎＲＮＡ（アプライドバイオシステムズ社製、ＵＳＡ）に対するプライマーセットを用いて行った。
全てのＲＴ−ＰＣＲ反応は、ＡＢＩ ＰＲＩＳＭ ７０００ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ（アプライドバイオシステムズ社製、ＵＳＡ）において３回繰り返し行われ、４０サイクルの増幅が行われた。相対的な発現は、比較臨界サイクルを用いて計算し、ｍｉＲＮＡのレベルは、Ｕ６レベルに対してノーマライズされた。
＜実施例４＞基本特性の分析結果
前記実施例１〜３における被験者の基本特性に対する分析結果は、下記表１の通りである。
４１名の被験者が分析に登録され、被験者は彼らのＣＤＲスコア及びＢＤＩ−スコアに基づいてカテゴリ化された。また、認知的に健常であり、かつ、憂うつ症を示さない９名の患者はＣＤＲ ０（対照群）グループに割り当てられた。弱い認知障害を示す１３名の患者はＣＤＲ ０．５に割り当てられ、より強い認知障害を示す１１名の患者はＣＤＲ １に割り当てられた。軽症から重症までの憂うつ症を有する８名の患者は憂うつ症グループに分類された。患者の年齢はグループに跨って変化し、患者の性別はグループに跨って大差なかった。一方、相対的なｍｉＲ−２０６レベルは、ＣＤＲ０グループの平均値で割った値を意味する。
これらの事項については、表１にまとめて示す。

上記の結果から明らかなように、正常対照群に比べて認知異常があるＣＤＲ ０．５及びＣＤＲ １グループが顕著に高いｍｉＲ−２０６の発現レベルを示す。
＜実施例５＞初期認知症を有する患者の嗅覚上皮において増加されたｍｉＲ−２０６レベルの確認
嗅覚上皮試料のｍｉＲＮＡ ＲＴ−ＰＣＲの結果を図１に示す。
図１のＡは、それぞれの患者における相対的なｍｉＲＮＡ−２０６レベルを示し、図１のＢは、ＣＤＲ ０．５グループにおけるＲＯＣ曲線を示し、図１のＣは、ＣＤＲ １グループにおけるＲＯＣ曲線を示す。
図１のＡから明らかなように、初期認知症（初期アルツハイマー病、軽度認知障害）グループにおけるｍｉＲ−２０６レベルはこれらの対照群に比べて大幅に増加した。図１のＡから明らかなように、ＣＤＲ ０．５グループにおいて７．８倍の増加が確認され、ＣＤＲ １グループにおいて４１．５倍の増加が確認された。すなわち、認知症（アルツハイマー病、認知障害）の進行に伴い、かなり増加される傾向にある。これに対し、憂うつ症グループの場合、ｍｉＲ−２０６レベルにおいて変化を示さないため（１．２倍、統計的に有意差なし）、憂うつ症に随伴する認知異常とは区別される特徴があることが確認された。
また、受信者操作特性曲線（Ｒｅｃｅｉｖｅｒ ｏｐｅｒａｔｉｎｇ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｃｕｒｖｅ）は、ＣＤＲ ０．５、ＣＤＲ １認知症を有する患者を確認するための相対的なｍｉＲ−２０６レベルの最適なカットオフ値を決定するために用いられた。最適なカットオフ値は、敏感度及び特異度間の最も高い和であると定義され、曲線下の面積（ａｒｅａ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｃｕｒｖｅ；ＡＵＣ）が分析されて、ＣＤＲ ０．５又はＣＤＲ １認知症の診断に対する嗅覚上皮ｍｉＲ−２０６レベルの効率が評価された。上記の結果を図１のＢ及び図１のＣに示す。
図１のＢに示すように、ＣＤＲ ０．５認知症の診断のためのＡＵＣ値は０．９４２であり、Ｕ６に対する相対的なｍｉＲ−２０６の発現レベルが７．０６×１０−４を超えるとき、敏感度は８７．５％であり、特異度は９４．１％であった。認知機能が正常である対照群グループのうち誰もこのレベルよりも高いｍｉＲ−２０６レベルを示さなかった。
更に、図１のＣに示すように、ＣＤＲ １認知症の診断のためのＡＵＣ値は０．９７６であり、Ｕ６に対する相対的なｍｉＲ−２０６の発現が４９．７２×１０−４を超えるとき、敏感度は９０．９％であり、特異度は９３．３％であった。対照群又は憂うつ症グループのうち誰も前記値を超えるｍｉＲ−２０６値を示さなかった。
上記の結果から、嗅覚組織から確認されるｍｉＲ−２０６値が初期アルツハイマー病及び軽度認知障害に顕著な診断効果があることが確認された。
＜実施例６＞嗅覚上皮ｍｉＲ−２０６レベル及び臨床スコア間の相関関係
憂うつ症が認知機能に影響を与えるものと知られているため、憂うつ症を有さない患者における認知機能スコア及び相対的なｍｉＲ−２０６レベル間の相関関係を評価した。その結果を図２に示す。
図２のＡ及びＢに示すように、嗅覚上皮ｍｉＲ−２０６レベル及び認知機能スコアの間にかなり高い相関関係が確認された。すなわち、相対的なｍｉＲ−２０６レベルは、ＡＤＡＳ−Ｃｏｇ−Ｋスコアと陽性的な相関関係（図２のＡ）があり、ＭＭＳＥと陰性的な相関関係（図２のＢ）があることが確認された。
一方、ＢＤＩ−ＩＩ及びＫＶＳＳスコアと相対的なｍｉＲ−２０６レベルとの間の相関関係は全ての患者において評価され、その結果を図２のＣ及びＤに示す。
図２のＣ及びＤに示すように、相対的なｍｉＲ−２０６レベルは、ＢＤＩ−ＩＩ及びＫＶＳＳスコアと相関関係があることは確認されなかった。
上記の結果から、嗅覚上皮ｍｉＲ−２０６レベルが憂うつ症に随伴する認知障害を区別しながら初期アルツハイマー病及び軽度認知障害の診断に顕著な効果があることを確認した。

Claims (13)

  1. アルツハイマー病又は軽度認知障害の診断又は予後の分析に必要な情報を提供するために嗅覚組織試料にあるｍｉＲ−２０６の発現を検出する方法を用いてアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断又は予後分析マーカーを検出する方法。
  2. 前記ｍｉＲ−２０６の発現の検出は、ｍｉＲ−２０６に特異的に結合するプライマー対、プローブ又はアンチセンスヌクレオチドを用いて行う請求項１に記載のアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断又は予後分析マーカーを検出する方法。
  3. 前記ｍｉＲ−２０６の発現の検出は、逆転写酵素重合酵素反応、競争的逆転写酵素重合酵素反応、リアルタイム逆転写酵素重合酵素反応、ＲＮａｓｅ保護分析法、ノーザンブロッティング又はＤＮＡチップにより行われる請求項１に記載のアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断又は予後分析マーカーを検出する方法。
  4. 前記嗅覚組織試料は、嗅覚粘膜試料又は嗅覚上皮試料である請求項１に記載のアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断又は予後分析マーカーを検出する方法。
  5. 前記アルツハイマー病は、初期アルツハイマー病である請求項１に記載のアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断又は予後分析マーカーを検出する方法。
  6. 患者から分離された嗅覚組織試料中でｍｉＲ−２０６の発現レベルを測定するステップと、
    前記ｍｉＲ−２０６の発現レベルを基準レベルと比較するステップと、
    を含むアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断のための情報の提供方法。
  7. 前記ｍｉＲ−２０６の発現レベルを基準レベルと比較して、前記発現が増加すれば、アルツハイマー病又は軽度認知障害であると判定するステップを更に含む請求項６に記載のアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断のための情報の提供方法。
  8. 前記ｍｉＲ−２０６の発現レベルの測定は、ｍｉＲ−２０６に特異的に結合するプライマー対、プローブ又はアンチセンスヌクレオチドを用いて行う請求項６に記載のアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断のための情報の提供方法。
  9. 前記ｍｉＲ−２０６の発現の検出は、逆転写酵素重合酵素反応、競争的逆転写酵素重合酵素反応、リアルタイム逆転写酵素重合酵素反応、ＲＮａｓｅ保護分析法、ノーザンブロッティング又はＤＮＡチップにより行われる請求項６に記載のアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断のための情報の提供方法。
  10. 前記嗅覚組織試料は、嗅覚粘膜試料又は嗅覚上皮試料である請求項６に記載のアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断のための情報の提供方法。
  11. 前記アルツハイマー病は、初期アルツハイマー病である請求項６に記載のアルツハイマー病又は軽度認知障害の診断のための情報の提供方法。
  12. ｍｉＲ−２０６の発現レベルを測定する製剤として、遺伝子に特異的に結合するプライマー対、プローブ又はアンチセンスヌクレオチドを含む初期アルツハイマー病又は軽度認知障害診断用組成物。
  13. 請求項１２に記載の初期アルツハイマー病又は軽度認知障害診断用組成物を含む初期アルツハイマー病又は軽度認知障害診断用キット。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2021017402A (ja) * 2019-07-17 2021-02-15 東海物産株式会社 軽度認知障害改善用組成物及びこの組成物を用いた軽度認知障害の改善方法
JP2022508304A (ja) * 2018-09-26 2022-01-19 シャンハイ メンタル ヘルス センター （シャンハイ サイコロジカル カウンセリング トレーニング センター） Ａｄ誘発ｍｃｉの診断マーカーとその応用

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106544435A (zh) * 2016-09-30 2017-03-29 河北医科大学第医院 检测miR‑206所需逆转录引物对在制备预测试剂盒中的应用
KR102033776B1 (ko) 2017-10-31 2019-10-17 가천대학교 산학협력단 타우 단백질의 발현수준을 측정하는 제제를 포함하는 알츠하이머 중증도 진단용 조성물 및 이를 이용한 알츠하이머 중증도의 진단방법
KR20190112219A (ko) 2018-03-13 2019-10-04 전남대학교산학협력단 알츠하이머 질병 검출 방법, 알츠하이머 질병 검출 시스템 및 알츠하이머 질병 검출 방법을 수행하는 프로그램이 기록된 컴퓨터로 읽을 수 있는 기록매체
EP3807422A1 (en) 2018-06-15 2021-04-21 Universitat Autònoma de Barcelona Circulating mirnas as biomarkers for diagnosis of mild cognitive impairment and alzheimer´s disease
KR102177740B1 (ko) 2018-12-12 2020-11-11 재단법인대구경북과학기술원 인지 능력 평가 방법, 이의 시스템 및 이를 위한 웨어러블 디바이스
KR102473086B1 (ko) * 2019-03-06 2022-12-02 한양대학교 에리카산학협력단 은 나노갭 쉘을 이용한 알츠하이머병 진단방법
KR20220125745A (ko) 2021-03-04 2022-09-14 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단 후각세포의 진단 및 활성화 장치
KR102341233B1 (ko) * 2021-09-03 2021-12-20 주식회사 알츠코리아 경도인지장애 또는 알츠하이머성 치매 조기 진단을 위한 신규 마이크로 rna 바이오마커
CN114438195A (zh) * 2022-02-28 2022-05-06 暨南大学 阿尔茨海默病检测试剂盒、存储介质及电子设备
CN115078570B (zh) * 2022-05-30 2024-05-28 郑州大学第一附属医院 Tau蛋白639位硫氰酸氨基酸修饰在快速质谱法检测阿尔茨海默症中的应用
KR20240059132A (ko) 2022-10-27 2024-05-07 동의대학교 산학협력단 홍화 추출물을 포함하는 후각기능, 기억력 및 인지기능 개선용 조성물

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20120094295A1 (en) * 2008-11-21 2012-04-19 The Johns Hopkins University Neurodegenerative disease diagnostic compositions and methods of use
JP2013542921A (ja) * 2010-09-13 2013-11-28 エスエヌユー アールアンドディービー ファウンデーション ｍｉＲＮＡをターゲットとした神経変性疾患の治療
US20130337466A1 (en) * 2012-06-14 2013-12-19 Electronics And Telecommunications Research Institute Method for diagnosing alzheimer's disease using biomaterial
CN104480106A (zh) * 2014-10-08 2015-04-01 河北医科大学第一医院 检测轻度认知障碍患者血清/血浆微小rna标志物及其应用

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2530157B1 (en) * 2003-07-31 2016-09-28 Regulus Therapeutics Inc. Oligomeric compounds and compositions for use in modulation of miRNAs
CA2840196C (en) * 2011-06-27 2022-09-20 Eisai R&D Management Co., Ltd. Microrna biomarkers indicative of alzheimer's disease
KR102031194B1 (ko) * 2012-06-14 2019-10-11 한국전자통신연구원 베타-아밀로이드의 농도를 측정하는 방법
KR101609599B1 (ko) * 2013-07-26 2016-04-07 경상대학교 산학협력단 항원 검출용 형광 나노입자 및 그를 이용한 알츠하이머 치매의 조기 진단키트

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20120094295A1 (en) * 2008-11-21 2012-04-19 The Johns Hopkins University Neurodegenerative disease diagnostic compositions and methods of use
JP2013542921A (ja) * 2010-09-13 2013-11-28 エスエヌユー アールアンドディービー ファウンデーション ｍｉＲＮＡをターゲットとした神経変性疾患の治療
US20130337466A1 (en) * 2012-06-14 2013-12-19 Electronics And Telecommunications Research Institute Method for diagnosing alzheimer's disease using biomaterial
CN104480106A (zh) * 2014-10-08 2015-04-01 河北医科大学第一医院 检测轻度认知障碍患者血清/血浆微小rna标志物及其应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ANN NEUROL, vol. 67, no. 4, JPN6018045559, 2010, pages 462 - 469, ISSN: 0003921593 *
ANN NEUROL, vol. 72, JPN6018045563, 2012, pages 269 - 277, ISSN: 0003921595 *
EXPERIMENTAL NEUROLOGY, vol. 121, JPN6018045561, 1993, pages 93 - 105, ISSN: 0003921594 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2022508304A (ja) * 2018-09-26 2022-01-19 シャンハイ メンタル ヘルス センター （シャンハイ サイコロジカル カウンセリング トレーニング センター） Ａｄ誘発ｍｃｉの診断マーカーとその応用
JP7291221B2 (ja) 2018-09-26 2023-06-14 シャンハイ メンタル ヘルス センター （シャンハイ サイコロジカル カウンセリング トレーニング センター） Ａｄ誘発ｍｃｉの診断マーカーとその応用
JP2021017402A (ja) * 2019-07-17 2021-02-15 東海物産株式会社 軽度認知障害改善用組成物及びこの組成物を用いた軽度認知障害の改善方法
JP7321017B2 (ja) 2019-07-17 2023-08-04 東海物産株式会社 機能性食品

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