JP2018502100A - ビタミンd3誘導体及びその薬学的用途 - Google Patents
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Abstract
Description
[式中、
RA及びRBはそれぞれ独立してヒドロキシル、NR1R2又はハロゲンから選択され;
R1及びR2はそれぞれ独立して水素、C1−4アルキル、適宜置換されていてもよいC1−4アルキルカルボニル、C1−4アルキルスルホニル、C1−4アルコキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、3〜6員シクロアルキル−C1−4アルキル、適宜置換されていてもよいC6−10アリールカルボニル、適宜置換されていてもよいC6−10アリールスルホニル、適宜置換されていてもよい5〜6員飽和ヘテロシクリル−C1−4アルキル、5〜6員ヘテロアリール又は以下の式:
R1及びR2は、適宜、それらが結合する窒素原子と一緒になって、適宜C6−10アリール環と縮合していてもよい含窒素オキソ置換飽和5〜6員ヘテロ環を形成していてもよく;
R3は水素又は=CH2である]
で示される化合物又はその薬学的に許容される塩を対象とする。
項1:一般式(I):
[式中、
RA及びRBはそれぞれ独立してヒドロキシル、NR1R2又はハロゲンから選択され;
R1及びR2はそれぞれ独立して水素、C1−4アルキル、適宜置換されていてもよいC1−4アルキルカルボニル、C1−4アルキルスルホニル、C1−4アルコキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、3〜6員シクロアルキル−C1−4アルキル、適宜置換されていてもよいC6−10アリールカルボニル、適宜置換されていてもよいC6−10アリールスルホニル、適宜置換されていてもよい5〜6員飽和ヘテロシクリル−C1−4アルキル、5〜6員ヘテロアリール又は以下の式:
R1及びR2は、適宜、それらが結合する窒素原子と一緒になって、適宜C6−10アリール環と縮合していてもよい含窒素オキソ置換飽和5〜6員ヘテロ環を形成していてもよく;
R3は水素又は=CH2である]
で示される化合物又はその薬学的に許容される塩。
R1及びR2が、適宜、それらが結合する窒素原子と一緒になって、適宜C6−10アリール環と縮合していてもよい含窒素オキソ置換飽和5〜6員ヘテロ環を形成していてもよく;
但し、R1及びR2が同時に水素ではない、項1記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
項4:R3が水素である、項1又は2のいずれか記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
項5:以下の式のいずれか:
で示される、項1〜4のいずれか記載の化合物。
項6:R2が水素である、項1〜5のいずれか記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
R1がtert−ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、アセチル、p−メチルフェニルスルホニル、o−ニトロフェニルスルホニル、p−トリフルオロメチルベンゾイル、p−ブロモベンゾイル、エチルカルボニル、プロピルカルボニル、p−メトキシベンゾイル、p−フルオロベンゾイル、p−[(トリフルオロメチル)チオ]ベンゾイル、2,3,4,5−テトラフルオロベンゾイル、2,4,5−トリフルオロベンゾイル、3,4−ジメトキシベンゾイル、2,3,4−トリフルオロベンゾイル、3,4−ジフルオロベンゾイル、2,4−ジフルオロベンゾイル、3−クロロ−4−フルオロベンゾイル、2−クロロ−4−フルオロベンゾイル、p−ニトロベンゾイル、2−トリフルオロメチル−4−フルオロベンゾイル、3−トリフルオロメチル−4−フルオロベンゾイル、p−トリフルオロメトキシベンゾイル、p−シアノベンゾイル、p−メトキシカルボニルベンゾイル、p−フェニルベンゾイル、2−モルホリニルエチル、2−(4−フルオロピペリジニル)エチル、2−(4−ヒドロキシピペリジニル)エチル、2−ピリジル、2−チアゾリル、シクロプロピルメチル、エチル、ブチル、メチルスルホニル、トリフルオロメチルカルボニル、5−ジメチルアミノ−1−ナフチルスルホニル又は以下の構造:
R2が水素であるか;或いは
R1及びR2がそれらが結合する窒素原子と一緒になってγ−ラクタム、δ−ラクタム又はフタルイミジルを形成していてもよい、項1〜5のいずれか記載の化合物。
項8:Xがフルオロであり;
R1がアセチル、トリフルオロメチルカルボニル、tert−ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、メチルスルホニル、5−ジメチルアミノ−1−ナフチルスルホニル、p−メチルフェニルスルホニル、o−ニトロフェニルスルホニル、p−トリフルオロメチルベンゾイル、p−ブロモベンゾイル、p−[(トリフルオロメチル)チオ]ベンゾイル又は以下の構造:
R2が水素であるか;或いは
R1及びR2がそれらが結合する窒素原子と一緒になってフタルイミジルを形成していてもよい、項5記載の化合物。
項11:疾患が体重減少の誘導による肥満(obesity through the induction of weight loss)、非アルコール性脂肪性肝炎(NASH)、脂肪肝又はがんである、項10記載の方法。
項13:項1〜9のいずれか記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分とし、薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
項14:非アルコール性脂肪性肝炎などの代謝性疾患、脂肪肝などの肝疾患、糖尿病、がん、肥満又は心血管疾患の治療薬の製造における項1〜9のいずれか記載の化合物又はその薬学的に許容される塩の使用。
項15:非アルコール性脂肪性肝炎などの代謝性疾患、脂肪肝などの肝疾患、糖尿病、がん、肥満又は心血管疾患の治療に用いるための項1〜9のいずれか記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
さらに別の態様において、R3は水素である。
Ac: アセチル
Bz: ベンゾイル
Ts: トルエンスルホニル
TMS: トリメチルシリル
TES: トリエチルシリル
Tf: トリフルオロメチルスルホニル
Boc: tert-ブトキシカルボニル
Ns: o-ニトロベンゼンスルホニル
Cbz: ベンジルオキシカルボニル
TBS: tert-ブチルジメチルシリル
HMDS: ビス(トリメチルシリル)アミド
PPTS: ピリジニウム p-トルエンスルホネート
NPhTh: フタルイミド
TBAF: フッ化テトラブチルアンモニウム
McCl: 塩化クロロメチルスルホニル
TPAP: テトラプロピルアンモニウム過ルテニウム酸塩
DIBAL: ジイソブチルアルミニウムヒドリド
TFAA: 無水トリフルオロ酢酸
DMAP: ジメチルアミノピリジン
HOBt: 1-ヒドロキシベンゾトリアゾール
TFA: トリフルオロ酢酸
NHS: N-ヒドロキシスクシンイミド
DCC: N,N'-ジシクロヘキシルカルボジイミド
EDC: 1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド
DMT-MM: 4-(4,6-ジメトキシ-1,3,5-トリアジン-2-イル)-4-メチルモルホリニウムクロリド
DIPEA: N,N-ジイソプロピルエチルアミン
TEA: トリエチルアミン
THF: テトラヒドロフラン
DMSO: ジメチルスルホキシド
DMF: ジメチルホルムアミド
NMM: N-メチルモルホリン
NMO: N-メチルモルホリン N-オキシド
DIAD: ジイソプロピルアゾジカルボキシレート
DAST: 三フッ化N,N-ジエチルアミノ硫黄
R3が=CH2である式(I)の化合物は、以下の手順に従い製造してもよい:
式[a1]の化合物を、トルエンなどの溶媒中、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)(すなわち、Pd(PPh3)4)などのパラジウム触媒及びトリエチルアミンなどの塩基の存在下、式[a2]の化合物とカップリングさせて式[a3]の化合物を得ることができる。反応温度は室温〜約100℃の範囲、好ましくは約90℃であってもよい。
化合物[a1]及び化合物[a2]は以下の中間体化合物の製法のいずれかに従い製造してもよい。
工程2a
式[a3]の化合物におけるtert−ブチルジメチルシリル及びトリエチルシリル基などの保護基は、テトラヒドロフランなどの溶媒中、3HF・Et3N及びHF・ピリジンなどのフッ化水素などの塩基で処理することにより脱保護して式[a4]の化合物を得ることができる。反応温度は反応が進行しうる任意の温度であってもよく、好ましくは室温である。
工程3a
R1及びR2は同時に水素ではない(例えばR1はアリールスルホニルであり、R2は水素である)式[a3]の化合物は、トリフェニルホスフィンなどの有機ホスフィン化合物及びジイソプロピルアゾジカルボキシレートなどのアゾカルボン酸エステルをテトラヒドロフランなどの溶媒中で用いて、光延反応を行ってもよい。得られた化合物を続けて処理するか、又は式[a3]の化合物を、ジエチルエーテルなどのエーテルなどの溶媒中、ナトリウムヒドリドなどの塩基の存在下、1−ドデカンチオールなどのチオールで処理して、式[a5]の化合物を得ることができる。反応温度は0℃から室温の範囲、好ましくは室温であってもよく、又は0℃から始めて室温まで上昇させて段階的に変化させてもよい。
工程4a
式[a5]の化合物をジクロロメタンなどの溶媒中、トリエチルアミンなどの塩基存在下、R1X’(ここに、X’はハロゲン又はヒドロキシルである)で処理して、式[a3]の化合物を得ることができる。反応温度は、反応が進行しうる任意の温度であってもよく、好ましくは0℃である。次いで、得られた化合物[a3]は工程2aに従い脱保護されて、式[a4]の化合物を得ることができる。
R3が水素である式(I)の化合物は、以下の手順に従い製造してもよい:
式[b1]の化合物をテトラヒドロフランなどの溶媒中、リチウムビス(トリメチルシリル)アミド(すなわち、LiHMDS)などの塩基の存在下、式[b2]の化合物で処理し、式[b3]の化合物を得ることができる。反応温度は−78℃から室温の範囲であってもく、好ましくは−78℃から始めて室温まで上昇させて段階的に変化させてもよい。
化合物[b1]及び化合物[b2]は以下の中間体化合物の製法のいずれかに従い製造してもよい。
工程2b
式[b3]の化合物をメタノール及びエタノールなどの溶媒中、ヒドラジン水和物及び炭酸カリウムなどの塩基で処理して、式[b4]の化合物を得てもよい。反応温度は室温から約60℃の範囲であってもよい。
工程3b
式[b4]の化合物はジクロロメタンなどの溶媒中、トリエチルアミンなどの塩基の存在下、R1X’(ここに、X’はハロゲン又はヒドロキシル)で処理し、次いで工程2aに従い、脱保護して式[b5]の化合物を得ることができる。R1X’との反応温度は、反応が進行しうる任意の温度であってもよく、好ましくは0℃である。
工程4b
あるいは、式[b4]の化合物を、ジクロロメタンなどの溶媒中、三フッ化N,N−ジエチルアミノ硫黄(すなわち、DAST)などのフッ素化剤で処理し、次いで工程2aに従って脱保護し、式[b6]の化合物を得ることができる。フッ素化反応の温度は、反応が進行しうる任意の温度であってもよく、好ましくは−78℃である。
反応式において、R1は項1と同義であり、X’はハロゲン又はヒドロキシルである。
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.05-7.40 (m, 5H), 5.90-5.74 (m, 2H), 4.78 (d, J = 4.80 Hz, 1H), 4.21-4.12 (m, 1H), 4.03 (dd, J = 7.89, 6.18 Hz, 1H), 1.98 (dd, J = 7.89, 7.20 Hz, 1H), 2.48-2.28 (m, 2H), 1.41 (s, 3H), 1.35 (s, 3H).
13C NMR (300 MHz, CDCl3) δ 166.26, 132.89,z 130.64, 129.54, 128.28, 126.98, 109.00, 74.95, 68.75, 65.18, 36.45, 26.81, 25.56.
HR-MS ESI C16H20Na1O4 [M+Na]+ 計算値: 299.12593, 実測値: 299.12835.
[α]25 D = +5.40 (CHCl3中c = 2.1)
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.04-7.39 (m, 5H), 5.91-5.72 (m, 2H), 4.77 (d, J = 5.49 Hz, 1H), 4.17 (dddd, J = 6.53, 6.53, 6.53, 3.09 Hz, 1H), 3.64 (dd, J = 11.31, 3.09 Hz, 1H), 3.46 (dd, J = 11.31, 7.23 Hz, 1H), 2.25 (dd, J = 6.54 Hz, 2H).
13C NMR (300 MHz, CDCl3) δ 166.49, 133.00, 131.11, 130.03, 129.55, 128.32, 127.18, 71.28, 66.13, 65.27, 36.24.
HR-MS ESI C13H16Na1O4 [M+Na]+ 計算値: 259.09463, 実測値: 259.09503.
[α]25 D = -6.18 (CHCl3中c = 2.0)
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.04-7.31 (m, 9H), 5.85-5.69 (m, 2H), 4.74 (d, J = 4.80 Hz, 2H), 4.04 (dd, J = 12.69, 6.51 Hz, 1H), 3.96-3.91 (m, 2H), 2.42 (s, 3H), 2.42-2.26 (m, 2H).
13C NMR (300 MHz, CDCl3) δ 166.30, 145.09, 132.98, 132.43, 130.01, 129.91, 129.70, 129.55, 128.32, 128.02, 127.90, 72.92, 68.60, 64.97, 35.82, 21.60.
HR-MS ESI C20H22Na1O6S1 [M+Na]+ 計算値: 413.10348, 実測値: 413.10279.
[α]25 D = +5.36 (CHCl3中c = 2.0)
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.06-7.40 (m, 5H), 5.92-5.77 (m, 2H), 4.79 (d, J = 4.80 Hz, 2H), 3.03-2.98 (m, 1H), 2.76 (dd, J = 4.83 Hz, 1H), 2.51 (dd, J = 4.83, 2.76 Hz, 1H), 2.36-2.33 (m, 2H).
13C NMR (300 MHz, CDCl3) δ 166.24, 132.89, 130.10, 129.82, 129.54, 128.27, 126.97, 65.09, 50.99, 46.51, 35.00.
HR-MS ESI C13H14Na1O3 [M+Na]+ 計算値: 241.08406, 実測値: 241.08341.
[α]25 D = -2.69 (CHCl3中c = 2.1)
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.05-7.39 (m, 5H), 5.93-5.74 (m, 2H), 4.78 (d, J = 5.85 Hz, 2H), 3.82-3.78 (m, 1H), 2.51-2.26 (m, 4H), 0.14 (s, 9H).
13C NMR (300 MHz, CDCl3) δ 166.28, 132.87, 131.08, 130.06, 129.52, 128.25, 127.37, 102.74, 87.67, 69.04, 65.19, 38.93, 28.12, -0.03.
HR-MS ESI C18H24Na1O3Si1 [M+Na]+ 計算値: 339.13924, 実測値: 339.14268.
[α]25 D = -2.89 (CHCl3中c = 3.5)
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.07-7.41 (m, 5H), 5.92-5.70 (m, 2H), 4.78 (d, J = 5.85 Hz, 2H), 3.91-3.83 (m, 1H), 2.49-2.24 (m, 4H), 0.88 (s, 9H), 0.15 (s, 9H), 0.08 (s, 3H), 0.06 (s, 3H).
13C NMR (300 MHz, CDCl3) δ 166.46, 132.98, 131.88, 130.38, 129.71, 128.41, 126.90, 104.36, 86.51, 70.78, 65.53, 39.91, 28.60, 25.90, 18.16, 0.17, -4.36, -4.51.
HR-MS ESI C18H24Na1O3Si1 [M+Na]+ 計算値: 453.22572 , 実測値: 453.22357.
[α]25 D = -5.34 (CHCl3中c = 2.4)
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.72-5.69 (m, 2H), 4.1 (d, J = 4.1 Hz, 2H), 3.89-3.81 (m, 1H), 2.43-2.24 (m, 2H), 2.31 (dd, J = 6.18, 2.73 Hz, 2H), 1.98 (t, J = 2.76 Hz, 1H), 0.88 (s, 9H), 0.07 (s, 3H), 0.05 (s, 3H).
15a: 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.90-5.78 (m, 1H), 5.24-5.12 (m, 2H), 4.76 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.42 (br, 1H), 3.82 (br, 1H), 2.51-2.33 (m, 2H), 2.04 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 1.79-1.60 (m, 2H), 1.45 (s, 9H).
15b: 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.84-5.72 (m, 1H), 5.24-5.11 (m, 2H), 4.72 (br, 1H), 4.25 (br, 1H), 3.93-3.85 (m, 1H), 2.51-2.35 (m, 2H), 2.06 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 1.78-1.65 (m, 2H), 1.44 (s, 9H).
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.83-5.72 (m, 1H), 5.18-5.07 (m, 2H), 4.26 (br, 1H), 4.01-3.93 (m, 1H), 2.43-2.27 (m, 2H), 2.01 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 1.79-1.72 (br, 2H), 1.42 (s, 9H), 0.90 (s, 9H), 0.10 (s, 3H), 0.09 (s, 3H).
14aについて記載した手順と同様にして、14b(35 mg, q.y.)を15b(23 mg, 0.094 mmol)から無色油状物として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.83-5.72 (m, 1H), 5.21-5.08 (m, 2H), 4.75 (br, 1H), 4.22-4.13 (m, 1H), 3.94-3.86 (m, 1H), 2.40-2.37 (m, 2H), 2.00 (t, J = 2.8 Hz, 1H), 1.86-1.59 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 0.91 (d, J = 3.5 Hz, 9H), 0.09 (s, 3H), 0.08 (d, J = 1.7 Hz, 3H).
20aについて記載した手順と同様にして、20b(37.2 mg, 25%, 3工程)をβ-アセトアミド(約0.17 mmol)から無色油状物として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.08-7.68 (m, 4H), 5.73 (d, J = 6.18 Hz, 1H), 5.55 (ddd, J = 13.08, 7.56, 5.52 Hz, 1H), 5.05 (dd, J = 12.72, 0.69 Hz, 1H), 4.90 (dd, J = 7.56, 0.69 Hz, 1H), 4.24-4.15 (m, 1H), 4.09-4.03 (m, 1H), 2.40 (ddd, J = 12.36, 3.09, 2.40 Hz, 1H), 2.32 (ddd, J = 12.36, 5.85, 2.07 Hz, 1H), 2.00 (t, J = 2.07 Hz, 1H), 1.89 (ddd, J = 10.65, 6.87, 2.07 Hz, 1H), 1.76 (ddd, J = 10.65, 5.85, 2.73 Hz, 1H), 0.92 (s, 9H), 0.17 (s,3H), 0.13 (s, 3H).
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.73-7.27 (m, 4H), 5.70 (d, J = 5.16 Hz, 1H), 5.63 (ddd, J = 17.19, 10.29, 6.54 Hz, 1H), 5.12 (dd, J = 17.19, 1.05 Hz, 1H), 5.01 (dd, J = 10.29, 1.05 Hz, 1H), 4.04-3.90 (m, 2H), 2.42 (s, 3H), 2.25 (ddd, J = 16.83, 4.80, 2.73 Hz, 1H), 2.10 (ddd, J = 16.83, 8.22, 2.73 Hz, 1H), 1.95 (t, J = 2.73 Hz, 1H), 1.85- 1.67 (m, 2H), 0.92 (s, 9H), 0.12 (s,3H), 0.10 (s, 3H).
1H NMR (CDCl3) δ 4.09 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 3.64 (dd, J = 3.3, 10.6 Hz, 1H), 3.39 (dd, J = 6.6, 10.6 Hz, 1H), 1.99 (dd, J = 2.6, 13.2 Hz, 1H), 1.88-1.76 (m, 3H), 1.63-1.29 (m. 9H), 1.20-1.12 (m. 2H), 1.03 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.95 (s, 3H)
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.64 (s, 1H), 2.89-2.84 (m, 1H), 2.04-1.15 (m, 18H), 1.18 (s, 6H), 0.97-0.62 (m, 12H), 0.56 (s, 3H), 0.56 (q, J = 7.89 Hz, 2H).
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.88-7.82 (m, 2H), 7.77-7.71 (m, 2H), 4.43 (dddd, J = 13.07, 12.73, 4.47, 4.13 Hz, 1H), 3.94 (dddd, J = 11.01, 10.66, 6.19, 4.47 Hz, 1H), 3.35 (dd, J = 14.10, 13.07 Hz, 1H), 2.75-2.63 (m, 2H), 2.58-2.43 (m, 2H), 2.19-2.10 (m, 1H), 0.87 (s, 9H), 0.07 (s, 3H), 0.06 (s, 3H).
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.45 (s, 1H), 4.14 (q, J = 7.22 Hz, 2H), 3.87-3.82 (m, 1H), 2.13-1.20(m, 18H), 1.28 (t, J = 7.22 Hz, 3H), 1.21 (s, 6H), 0.94 (d, J = 6.19 Hz, 3H), 0.57 (s, 3H).
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.21 (dd, J = 7.22, 6.88 Hz, 1H), 4.20 (dd, J = 6.19, 5.85 Hz, 2H), 2.64-2.59 (m, 1H), 2.01-1.20(m, 18H), 1.21 (s, 6H), 0.93 (d, J = 6.19 Hz, 3H), 0.54 (s, 3H).
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.22-7.56 (m, 4H), 5.01 (dd, J = 7.79, 7.79 Hz, 1H), 4.43 (dd, J = 14.20, 8.70 Hz, 1H), 4.20 (dd, J = 14.20, 6.87 Hz, 1H), 2.56-2.53 (m, 1H), 1.90-1.81 (m, 3H), 1.62-1.15(m, 15H), 1.17 (s, 6H), 0.93 (t, J = 7.79 Hz, 9H), 0.84 (d, J = 6.41 Hz, 3H), 0.55 (q, J = 7.79 Hz, 6H), 0.25 (s, 3H).
79aについて記載した方法と同様にして、cis-アルコール79b(47.8 mg, 36%)及びtrans-アルコール62b(61.5 mg, 47%)を78b(79.5 mg, 0.219 mmol)から無色油状物として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.87-7.70 (m, 4H), 5.05 (dddd, J = 12.38, 12.04, 4.47, 4.47 Hz, 1H), 4.52-4.46 (m, 1H), 3.31 (dd, J = 13.76, 12.73 Hz, 1H), 2.75-2.47 (m, 3H), 2.02-1.94 (m, 1H), 0.90 (s, 9H), 0.08 (s, 6H).
NHBoc VD3 18a及び18b
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.35 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 5.99 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 5.22 (s, 1H), 4.95 (s, 1H), 4.51-4.08 (m, 3H), 2.81 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 2.56 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 2.35-0.85 (m, 39H), 1.45 (s, 9H), 1.21 (s, 6H), 0.93 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 0.53 (s, 3H);
HRMS (ESI) C32H53N1Na1O4 [M+Na]+ 計算値: 538.3872, 実測値: 538.3882.
18aについて記載した手順と同様にして、16(59 mg, 0.124 mmol)及び14b(19 mg, 0.054 mmol)から1β-NHBoc VD3 18b(3.5 mg, 13%)を無色油状物として得た。
1-アミノ-25(OH)D 19a及び19b
1H NMR (300 MHz, MeOH-d4) δ 6.45 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 6.04 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 5.28 (s, 1H), 5.17 (s, 1H), 4.19-4.11 (m, 1H), 4.07-4.02 (m, 1H), 2.89 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 2.57 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 2.41-1.13 (m, 27H), 0.97 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 0.58 (s, 3H);
HRMS (ESI) C27H46N1O2 [M+H]+ 計算値: 416.3529, 実測値: 416.3532.
19aについて記載した手順と同様にして、19b(2.82 mg, 92%)を18b(3.5 mg, 0.00678 mmol)から黄色固体として得た。
1H NMR (300 MHz, MeOH-d4) δ 6.50 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 6.01 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 5.38 (s, 1H), 5.19 (s, 1H), 4.11-4.01 (m, 1H), 3.92-3.86 (m, 1H), 2.89 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 2.57 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 2.42-1.14 (m, 27H), 0.97 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 0.57 (s, 3H).
NHAc VD3 22a及び22b
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.38 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 5.97 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 5.37 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 5.20 (s, 1H), 4.96 (s, 1H), 4.77 (dd, J = 13.7, 6.0 Hz, 1H), 4.10-4.05 (m, 1H), 2.81 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 2.57 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 2.35-0.83 (m, 32H), 1.99 (s, 3H), 1.21 (s, 6H), 0.93 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.52 (s, 3H);
HRMS (ESI) C29H47N1Na1O3 [M+Na]+ 計算値: 480.3454, 実測値: 480.3458.
22aについて記載した手順と同様にして、1β-NHAc VD3 22b(10.6 mg, 79%)を16(104 mg, 0.221 mmol)及び20b(37.2 mg, 0.126 mmol)から無色油状物として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.46 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.36 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 5.95 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 5.27 (s, 1H), 4.95 (s,1H), 4.70-4.65 (m, 1H), 4.18-4.13 (m, 1H), 2.81 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 2.59 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 2.36-0.81 (m, 32H), 1.94 (s, 3H), 1.21 (s, 6H), 0.92 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.52 (s, 3H).
1α-NHNs VD3 28
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.20-7.24 (m, 4H), 6.36 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 5.74 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 5.41 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.37-4.09 (m, 2H), 2.78 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 2.55 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 2.31-0.80 (m, 30H), 1.23 (s, 6H), 0.93 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.51 (s, 3H);
HRMS (ESI) C33H48N2Na1O6S1 [M+Na]+ 計算値: 623.3131, 実測値: 623.3161.
1α-NHTs VD3 32
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.73 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.29 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.33 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 5.80 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.93 (s, 1H), 4.64 (s, 1H), 4.37 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.16-4.01 (m, 2H), 2.79-2.73 (m, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.24-0.80 (m, 30H), 1.22 (s, 6H), 0.94 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 0.54 (s, 3H);
HRMS (FAB) C34H51NNaO4S [M+Na]+ 計算値: 592.3437, 実測値: 592.3433.
1α-NHCbz VD3 36
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.36 (s, 5H), 6.36 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 5.97 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 5.23 (s, 1H), 5.12-5.09 (m, 2H), 4.97 (s, 1H), 4.57-4.46 (m, 1H), 4.12-4.06 (m, 1H), 2.84-0.81 (m, 32H), 1.22 (s, 6H), 0.93 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 0.51 (s, 3H).
HRMS (FAB) Calcd for C35H51NNaO4 [M+Na]+: 572.3716, 実測値: 572.3717.
アミン37
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.27 (d, J = 11.34 Hz, 1H), 5.98 (d, J = 11.34 Hz, 1H), 5.17 (s, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.16-4.08 (m, 1H), 3.76-3.69 (m, 1H), 2.85-2.77 (m, 1H), 2.49-0.80 (m, 25H), 1.18 (s, 6H), 0.94 (t, J = 7.89 Hz, 9H), 0.86 (s, 9H), 0.56 (q, J = 7.89 Hz, 6H), 0.54 (s, 3H), 0.59 (s, 6H).
1α-NH(p-CF3Bz) VD3 38
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.83 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.67 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 6.45 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 6.03 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.99 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 5.03 (s, 1H), 5.00-4.95 (m, 1H), 4.12-4.06 (m, 1H), 2.84 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 2.65 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 2.39-0.81 (m, 30H), 1.21 (s, 6H), 0.93 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.46 (s, 3H);
HRMS (ESI) C35H48F3N1Na1O3 [M+Na]+ 計算値: 610.3484, 実測値: 610.3458.
1α-NH(p-BrBz) VD3 39
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.59-7.52 (m, 4H), 6.45 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 5.99 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 5.96 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 5.29 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.98-4.92 (m, 1H), 4.10-4.02 (m, 1H), 2.83 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 2.64 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 2.38-0.83 (m, 30H), 1.21 (s, 6H), 0.94 (d, J = 5.9 Hz, 3H), 0.49 (s, 3H);
HRMS (ESI) C34H48Br1N1Na1O3 [M+Na]+ 計算値: 622.2695, 実測値: 622.2683.
1α-NH(p-OMeBz) VD3 40
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.68 (d, J = 8.72 Hz, 2H), 6.89 (d, J = 8.72 Hz, 2H), 6.44 (d, J = 11.44 Hz, 1H), 6.01 (d, J = 11.44 Hz, 1H), 5.93 (d, J = 8.28 Hz, 1H), 5.30 (s, 1H), 5.00 (s, 1H), 4.97-4.92 (m, 1H), 4.13-4.04 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 2.86-0.83 (m, 22H), 2.35 (dd, J = 12.80, 7.80 Hz, 1H) 1.20 (s, 6H), 0.93 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.51 (s, 3H);
HR-MS ESI C35H51N1Na1O4 [M+Na]+ 計算値: 572.37158, 実測値: 572.36923.
1α-NH(p-SCF3Bz) VD3 41
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.75 (d, J = 8.25 Hz, 2H), 7.68 (d, J = 8.25 Hz, 2H), 6.45 (d, J = 10.98 Hz, 1H), 6.07 (d, J = 7.92 Hz, 1H), 5.99 (d, J = 10.98 Hz, 1H), 5.30 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.95 (dd, J = 11.67, 6.87 Hz, 1H), 4.12-4.04 (m, 1H), 2.86-1.15 (m, 23H), 1.21 (s, 6H), 0.93 (d, J = 5.82 Hz, 3H), 0.48 (s, 3H);
HR-MS ESI C35H48F3N1Na1O3S1 [M+Na]+ 計算値: 642.32047, 実測値: 642.31973.
1α-NH(2,3,4,5-テトラフルオロBz) VD3 42
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.80-7.72 (m, 1H), 6.52 (dd, J = 11.92, 7.32 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 11.44 Hz, 1H), 5.97 (d, J = 11.44 Hz, 1H), 5.30 (s, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.98-4.92 (m, 1H), 4.11-4.04 (m, 1H), 2.86-1.15 (m, 22H), 2.35 (dd, J = 13.28, 7.80 Hz, 1H), 1.21 (s, 6H), 0.93 (d, J = 5.52 Hz, 3H), 0.48 (s, 3H);
HR-MS ESI C34H45F4N1Na1O3 [M+Na]+ 計算値: 614.32333, 実測値: 614.32730.
1α-NH(2,4,5-トリフルオロBz) VD3 43
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.00-7.93 (m, 1H), 6.98-6.92 (m, 1H), 6.62 (dd, J = 13.28, 8.24 Hz, 1H), 6.44 (d, J = 11.00 Hz, 1H), 5.97 (d, J = 11.00 Hz, 1H), 5.29 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.99-4.92 (m, 1H), 4.12-4.04 (m, 1H), 2.85-1.15 (m, 22H), 2.35 (dd, J = 12.84, 7.80 Hz, 1H), 1.21 (s, 6H), 0.93 (d, J = 6.44 Hz, 3H), 0.47 (s, 3H);
HR-MS ESI C34H46F3N1Na1O3 [M+Na]+ 計算値: 596.33275, 実測値: 596.33404.
1α-NH(3,4-ジメトキシBz) VD3 44
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.46-7.44 (m, 1H), 7.17-7.13 (m, 1H), 6.80 (d, J = 8.58 Hz, 1H), 6.44 (d, J = 10.65 Hz, 1H), 6.01 (d, J = 10.65 Hz, 1H), 5.96 (d, J = 8.25 Hz, 1H), 5.30 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 5.00-4.92 (m, 1H), 4.16-4.05 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3,91 (s,3H), 2.86-1.15 (m, 23H), 1.21 (s, 6H), 0.93 (d, J = 6.18 Hz, 3H), 0.50 (s, 3H);
HR-MS ESI C36H53N1Na1O5 [M+Na]+ 計算値: 602.38214, 実測値: 602.38563.
1α-NH(プロピオニル) VD3 45
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.39 (d, J = 11.34 Hz, 1H), 5.96 (d, J = 11.34 Hz, 1H), 5.33 (d, J = 8.58 Hz, 1H), 5.20 (s, 1H), 4.96 (s, 1H), 4.85-4.74 (m, 1H), 4.10-4.01 (m, 1H), 2.85-1.15 (m, 23H), 2.21 (q, J = 7.56 Hz, 2H), 1.21 (s, 6H), 1.15 (t, J = 7.56 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 6.18 Hz, 3H), 0.51 (s, 3H);
HR-MS ESI C30H49N1Na1O3 [M+Na]+ 計算値: 494.36101, 実測値: 494.36202.
1α-NH(ブチリル) VD3 46
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.39 (d, J = 11.34 Hz, 1H), 5.96 (d, J = 11.34 Hz, 1H), 5.33 (d, J = 8.25 Hz, 1H), 5.21 (s, 1H), 4.95 (s, 1H), 4.84-4.75 (m, 1H), 4.10-4.00 (m, 1H), 2.84-1.15 (m, 23H), 2.16 (t, J = 7.56 Hz, 2H), 1.66 (q, J = 7.56 Hz, 2H), 1.21 (s, 6H), 0.95 (t, J = 7.56 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 6.18 Hz, 3H), 0.52 (s, 3H);
HR-MS ESI C31H51N1Na1O3 [M+Na]+ 計算値: 508.37666, 実測値: 508.37541.
1α-NHEt VD3 47
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.38 (d, J = 11.31 Hz, 1H), 5.99 (d, J = 11.31 Hz, 1H), 5.12 (d, J = 2.04 Hz, 1H), 4.97 (d, J = 2.04 Hz, 1H), 4.13-4.04 (m, 1H), 3.33 (t, J = 4.47 Hz,, 1H), 2.81 (dd, J = 11.67, 3.78 Hz, 1H), 2.68 (dd, J = 11.34, 7.23 Hz, 1H), 2.65-1.15 (m, 22H), 2.52 (dd, J = 11.34, 7.23 Hz, 1H), 1.21 (s, 6H), 1.08 (t, J = 7.20 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 6.18 Hz, 3H), 0.51 (s, 3H);
HR-MS ESI C29H50N1O2 [M+H]+ 計算値: 444.38415, 実測値: 444.38318.
1α-NHBu VD3 48
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.38 (d, J = 11.31 Hz, 1H), 5.98 (d, J = 11.31 Hz, 1H), 5.13 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 4.98 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 4.13-4.02 (t, J = 4.11 Hz. 1H), 2.84-1.15 (m, 29H), 1.21 (s, 6H), 0.93 (d, J = 6.51 Hz, 3H), 0.89 (t, J = 7.20 Hz, 3H), 0.51 (s, 3H);
HR-MS ESI C31H54N1O2 [M+H]+ 計算値: 472.41545, 実測値: 472.41701.
1α-NH(シクロプロピルメチル) VD3 49
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.41 (d, J = 11.34 Hz, 1H), 5.92 (d, J = 11.34 Hz, 1H), 5.13 (d, J = 2.07 Hz, 1H), 5.01 (d, J = 2.07 Hz, 1H), 4.20-4.09 (m, 1H), 3.39 (t, J = 4.11 Hz, 1H), 2.85-1.15 (m, 30H), 1.21 (s, 6H), 0.93 (d, J = 6.51 Hz, 3H), 0.52 (s, 3H);
HR-MS ESI C31H52N1O2 [M+H]+ 計算値: 470.39980, 実測値: 470.39797.
1α-NH(2-モルホリノエチル) VD3 50
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.38 (d, J = 11.34 Hz, 1H), 5.98 (d, J = 11.34 Hz, 1H), 5.21 (s, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.18-4.08 (m, 1H), 3.68 (t, J = 4.47 Hz, 4H), 3.48-3.42 (m, 1H), 2.83-1.15 (m, 31H), 1.21 (s, 6H), 0.93 (d, J = 6.18 Hz, 3H), 0.50 (s, 3H);
HR-MS ESI C33H57N2O3 [M+H]+ 計算値: 529.43692, 実測値: 529.43542.
1α-NH(2-(4-ヒドロキシ ピペリジル)エチル) VD3 52
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.36 (d, J = 11.34 Hz, 1H), 6.01 (d, J = 11.34 Hz, 1H), 5.16 (d, J = 2.07 Hz, 1H), 4.98 (d, J = 2.07 Hz, 1H), 4.16-4.05 (m, 1H), 3.72-3.62 (m, 1H), 3.34 (t, J = 4.47 Hz, 1H), 2.83-1.15 (m, 34H), 1.21 (s, 6H), 0.93 (d, J = 5.82 Hz, 3H), 0.51 (s, 3H);
HR-MS ESI C34H59N2O3 [M+H]+ 計算値: 543.45257, 実測値: 543.44912.
1α-NHMs VD3 53
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.41 (d, J = 11.34 Hz, 1H), 5.95 (d, J = 11.34 Hz, 1H), 5.36 (s, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.34-4.25 (m, 1H), 4.14-4.04 (m, 1H), 2.83 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 2.98 (s, 3H), 2.83-1.15 (m, 23H), 1.21 (s, 6H), 0.93 (d, J = 6.18 Hz, 3H), 0.52 (s, 3H);
HR-MS ESI C28H47N1Na1O4S1 [M+Na]+ 計算値: 516.31235, 実測値: 516.31391.
1α-NH(p-フルオロBz) VD3 54
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.72 (dd, J = 8.72, 5.04 Hz,, 2H), 7.08 (t, J = 8.72 Hz, 2H), 6.45 (d, J = 11.00 Hz, 1H), 6.00 (d, J = 11.00 Hz, 1H), 5.94 (d, J = 7.80 Hz, 1H), 5.30 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.98-4.91 (m, 1H), 4.12-4.04 (m, 1H), 2.84 (dd, J = 12.84, 3.68 Hz, 1H), 2.64 (dd, J = 12.84, 3.68 Hz, 1H), 2.35 (dd, J = 12.84, 7.80 Hz, 1H), 2.21-1.15 (m, 20H), 1.21 (s, 6H), 0.94 (d, J = 5.96 Hz, 3H), 0.50 (s, 3H);
HR-MS ESI C34H48F1N1Na1O3 [M+Na]+ 計算値: 560.35159, 実測値: 560.35351.
1H NMR (CD3OD) δ 0.51 (s, 3H), 0.94-3.36 (m, 47H), 3.48-3.64 (m, 20H), 4.03-4.81 (m, 4H), 4.88 (s, 1H), 5.15 (s, 1H), 5.96 (d, 1H), 6.32 (d, 1H), 7.35 (d, 2H), 8.01 (d, 2H);
HRMS (FAB) C61H90F3N8NaO10S [M+Na]+ 計算値: 1207.6429, 実測値: 1207.6427.
19-ノル 1β-NPhth-3β-OTBS VD3 68及び1α-OTBS-3α-NPhth VD3 69
68; 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.85-7.81 (m, 2H), 7.73-7.69 (m, 2H), 6.23 (d, J = 11.45 Hz, 1H), 5.73 (d, J = 11.45 Hz, 1H), 4.20-4.10 (m, 1H), 3.67 (dddd, J = 10.99, 10.76, 5.95, 4.58 Hz, 1H), 2.82-1.15 (m, 25H), 1.18 (s, 6H), 0.95-0.91 (m, 12H), 0.88 (s, 9H), 0.57 (s, 3H), 0.55 (q, J = 7.79 Hz, 6H), 0.08 (s,3H), 0.05 (s, 3H).
69; 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.84-7.80 (m, 2H), 7.72-7.68 (m, 2H), 6.23 (d, J = 11.45 Hz, 1H), 5.85 (d, J = 11.45 Hz, 1H), 4.14 (dddd, J = 12.82, 12.36, 4.12, 4.12 Hz, 1H), 3.58 (dddd, J = 10.99, 10.53, 6.42, 4.12 Hz, 1H), 3.03-2.97 (m, 2H), 2.79-2.74 (m, 1H), 2.49 (ddd, J = 12.36, 12.36, 10.99 Hz , 1H), 2.22 (dd, J = 12.36, 3.66 Hz, 1H), 2.02-1.15 (m, 20H), 1.19 (s, 6H), 0.95 (t, J = 7.79 Hz, 9H), 0.93 (d, J = 6.41 Hz, 3H), 0.89 (s, 9H), 0.56 (q, J = 7.79 Hz, 6H), 0.56 (s, 3H), 0.09 (s,3H), 0.06 (s, 3H).
19-ノル 1β-アミノ-3β-OTBS VD3 70及び1α-OTBS-3α-アミノ VD3 71
70について記載した手順と同様にして、粗製の71を37(19.5 mg, 0.0256 mmol)から得た。
19-ノル 1β-NHTs-3β-OH VD3 72及び1α-OH-3α-NHTs VD3 73
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.76 (d, J = 8.26 Hz, 2H), 7.29 (d, J = 8.26 Hz, 2H), 6.26 (d, J = 11.35 Hz, 1H), 5.69 (d, J = 11.35 Hz, 1H), 5.20 (d, J = 8.94 Hz, 1H), 3.95-3.87 (m, 1H), 3.54-3.44 (m, 1H), 2.76 (dd, J = 11.70, 3.78 Hz, 1H), 2.45-2.36 (m, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.28 (dd, J = 13.42, 6.88 Hz, 1H), 2.15 (dd, J = 11.42, 6.54 Hz, 1H), 2.05-1.20 (m, 21H), 1.23 (s, 6H), 0.94 (d, J = 6.19 Hz, 3H), 0.54 (s, 3H).
HR-MS ESI C33H51N1Na1O4S1 [M+Na]+ 計算値: 580.34365, 実測値: 580.34011.
72について記載した手順と同様にして、1α-OTBS-3α-NHTs VD3 73(131.4 mg, 83%)を71(約0.283 mmol)から白色固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.76 (d, J = 8.26 Hz, 2H), 7.30 (d, J = 8.26 Hz, 2H), 6.10 (d, J = 11.01 Hz, 1H), 5.76 (d, J = 11.01 Hz, 1H), 5.20 (d, J = 8.60 Hz, 1H), 3.88-3.81 (m, 1H), 3.48-3.40 (m, 1H), 2.74-2.70 (m, 1H), 2.53 (dd, J = 13.07, 3.44 Hz, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.34-1.20 (m, 23H), 1.22 (s, 6H), 0.94 (d, J = 6.19 Hz, 3H), 0.56 (s, 3H).
HR-MS ESI C33H51N1Na1O4S1 [M+Na]+ 計算値: 580.34365, 実測値: 580.34781.
19-ノル 1β-NH(p-SCF3Bz)-3β-OH VD3 74及び1α-OH-3α-NH(p-SCF3Bz) VD3 75
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.73-7.64 (m, 4H), 7.50 (d, J = 8.26 Hz, 1H), 6.34 (d, J = 11.35 Hz, 1H), 5.72 (d, J = 11.35 Hz, 1H), 4.51-4.46 (m, 1H), 3.31-3.27 (m, 1H), 2.94 (dd, J = 13.42, 3.78 Hz, 1H), 2.79-2.74 (m, 1H), 2.60-2.56 (m, 1H), 2.35-1.20 (m, 22H), 1.21 (s, 6H), 0.90 (d, J = 6.54 Hz, 3H), 0.50 (s, 3H).
HR-MS ESI C34H48F3N1Na1O3S1 [M+Na]+ 計算値: 630.32047, 実測値: 630.31864.
74について記載した手順と同様にして、1α-OTBS-3α-NHTs VD3 75(5.06 mg, 65%)を71(約0.013 mmol)から白色固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.80-7.67 (m, 4H), 7.33 (d, J = 8.26 Hz, 1H), 6.29 (d, J = 11.01 Hz, 1H), 5.84 (d, J = 11.01 Hz, 1H), 4.40-4.32 (m, 1H), 4.23-4.18 (m, 1H), 2.76-2.68 (m, 1H), 2.60 (dd, J = 14.10, 5.85 Hz, 1H), 2.54-1.21 (m, 22H), 2.37 (dd, J = 14.10, 5.85 Hz, 1H), 1.22 (s, 6H), 0.94 (d, J = 6.19 Hz, 3H), 0.55 (s, 3H).
HR-MS ESI C34H48F3N1Na1O3S1 [M+Na]+ 計算値: 630.32047, 実測値: 630.32327.
19-ノル 1β-NPhth-3β-OH VD3 76及び1α-OH-3α-NHPhth VD3 77
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.86-7.70 (m, 4H), 6.27 (d, J = 11.35 Hz, 1H), 5.72 (d, J = 11.35 Hz, 1H), 4.24-4.13 (m, 1H), 3.72 (dddd, J = 11.01, 10.66, 6.88, 4.47 Hz, 1H), 2.81-2.74 (m, 2H), 2.61 (dd, J = 12.07, 4.13 Hz, 1H), 2.39 (ddd, J = 12.04, 11.70, 11.70 Hz, 1H), 2.25-1.19 (m, 21H), 1.20 (s, 6H), 0.93 (d, J = 6.54 Hz, 3H), 0.56 (s, 3H).
HR-MS ESI C34H47N1Na1O4 [M+Na]+ 計算値: 556.34028, 実測値: 556.34468.
76について記載した手順と同様にして、1α-OH-3α-NHPhth VD3 77(8.76 mg, 94%)を69(13.3 mg, 17.448μmol)から白色固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.85-7.69 (m, 4H), 6.25 (d, J = 11.35 Hz, 1H), 5.86 (d, J = 11.35 Hz, 1H), 4.17 (dddd, J = 12.38, 12.38, 4.13, 3.78 Hz, 1H), 3.72 (dddd, J = 11.01, 11.01, 6.54, 4.13 Hz, 1H), 3.16 (dd, J = 12.73, 4.13 Hz, 2H), 3.00 (dd, J = 12.38, 12.38 Hz, 1H), 2.77 (dd, J = 12.04, 3.78 Hz, 1H), 2.46 (ddd, J = 12.04, 11.70, 11.70 Hz, 1H), 2.77 (dd, J = 12.38, 3.78 Hz, 1H), 2.17-1.21 (m, 19H), 1.22 (s, 6H), 0.94 (d, J = 6.19 Hz, 3H), 0.55 (s, 3H).
HR-MS ESI C34H47N1Na1O4 [M+Na]+ 計算値: 556.34028, 実測値: 556.34111.
19-ノル 1α-NPhth-3β-OTBS VD3 82及び1α-OTBS-3β-NPhth VD3 83
82; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.84-7.68 (m, 4H), 6.14 (d, J = 10.99 Hz, 1H), 5.77 (d, J = 10.99 Hz, 1H), 4.64 (dddd, J = 11.91, 11.91, 4.58, 44.12 Hz, 1H), 4.26-4.22 (m, 1H), 2.89-1.14 (m, 25H), 1.17 (s, 6H), 0.93(t, J = 10.99 Hz, 9H), 0.91 (d, J = 6.41 Hz, 3H), 0.89 (s, 9H), 0.54 (q, J = 8.24 Hz, 6H), 0.51 (s, 3H), 0.06 (s,3H), 0.05 (s, 3H).
19-ノル 1α-アミノ-3β-OTBS VD3 84
19-ノル 1α-NHTs-3β-OH VD3 85
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.77-7.29 (m, 4H), 6.27 (d, J = 11.35 Hz, 1H), 5.59 (d, J = 11.35 Hz, 1H), 5.20 (d, J = 8.94 Hz, 1H), 4.00-3.93 (m, 1H), 3.69-3.60 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.28-1.20 (m, 24H), 1.23 (s, 6H), 0.95 (d, J = 6.19 Hz, 3H), 0.56 (s, 3H).
HR-MS FAB C33H51N1Na1O4S1 [M+Na]+ 計算値: 580.3437 , 実測値: 580.3435.
19-ノル 1α-NH(p-SCF3Bz)-3β-OH VD3 86
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.73-7.65 (m, 4H), 6.42 (d, J = 11.35 Hz, 1H), 6.03 (d, J = 8.26 Hz, 1H), 5.83 (d, J = 11.35 Hz, 1H), 4.55-4.48 (m, 1H), 3.97-3.88 (m, 1H), 2.85-1.20 (m, 25H), 1.21 (s, 6H), 0.93 (d, J = 5.85 Hz, 3H), 0.43 (s, 3H).
HR-MS FAB C34H48F3N1Na1O3S1 [M+Na]+ 計算値: 630.3205, 実測値: 630.3207.
19-ノル 1α-NPhth-3β-OH VD3 87
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.85-7.69 (m, 4H), 6.29 (d, J = 11.01 Hz, 1H), 5.80 (d, J = 11.01 Hz, 1H), 4.60-4.49 (m, 1H), 4.34-4.25 (m, 1H), 2.94-1.20 (m, 25H), 1.20 (s, 6H), 0.92 (d, J = 6.19 Hz, 3H), 0.51 (s, 3H).
HR-MS FAB C34H48N1O4 [M+H]+ 計算値: 534.3583, 実測値: 534.3567.
19-ノル 1α-NHAc-3β-OH VD3 88
1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 6.25 (d, J = 10.32 Hz, 1H), 5.82 (d, J = 10.32 Hz, 1H), 4.70-4.55 (m, 1H), 4.06-3.96 (m, 1H), 2.87-1.15 (m, 28H), 1.16 (s, 6H), 0.97 (d, J = 5.50 Hz, 3H), 0.56 (s, 3H).
HR-MS FAB C28H47N1Na1O3 [M+Na]+ 計算値: 468.3454, 実測値: 468.3454.
19-ノル 1α-NHMs-3β-OH VD3 89
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.32 (d, J = 11.01 Hz, 1H), 5.81 (d, J = 11.01 Hz, 1H), 4.08-4.00 (m, 1H), 3.84-3.76 (m, 1H), 2.98 (s, 3H), 2.78 (dd, J = 13.42, 4.13 Hz, 1H), 2.69 (dd, J = 13.42, 4.13 Hz, 1H), 2.49 (dd, J = 13.42, 4.13 Hz, 1H), 2.29 (dd, J = 13.07, 7.22 Hz, 1H), 2.19 (dd, J = 13.07, 7.22 Hz, 1H), 2.05-1.20 (m, 20H), 1.22 (s, 6H), 0.94 (d, J = 6.19 Hz, 3H), 0.54 (s, 3H).
HR-MS FAB C27H47N1Na1O4S1 [M+Na]+ 計算値: 504.3124, 実測値: 504.3121.
19-ノル 1α-NH(トリフルオロアセチル)-3β-OH VD3 90
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.38 (d, J = 11.35 Hz, 1H), 6.13 (d, J = 7.91 Hz, 1H), 5.77 (d, J = 11.35 Hz, 1H), 4.37-4.25 (m, 1H), 3.95 (dddd, J = 7.91, 7.91, 4.13, 4.13 Hz, 1H), 2.80 (dd, J = 11.70, 3.78 Hz, 1H), 2.57-1.20 (m, 24H), 1.22 (s, 6H), 0.94 (d, J = 6.19 Hz, 3H), 0.51 (s, 3H).
HR-MS FAB C28H45F3N1O3 [M+H]+ 計算値: 500.3351, 実測値: 500.3340.
19-ノル 1α-NHDns-3β-OH VD3 91
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.56-7.17 (m, 6H), 6.23 (d, J = 11.70 Hz, 1H), 5.60 (d, J = 11.70 Hz, 1H), 4.54 (d, J = 8.26 Hz, 1H), 3.92-3.85 (m, 1H), 3.65-3.54 (m, 1H), 2.90 (s, 6H), 2.76-1.23 (m, 25H), 1.24 (s, 6H), 0.95 (d, J = 6.19 Hz, 3H), 0.53 (s, 3H).
HR-MS FAB C38H56N2Na1O4S1 [M+Na]+ 計算値: 659.3859, 実測値: 659.3860.
19-ノル 1-OBz-3-OTBS VD3 94
19-ノル 1β-OBz-3β-OTBS VD3 95及び1α-OTBS-3α-OBz VD3 96
19-ノル 1α-F-3β-OTBS VD3 97
19-ノル 1α-F-3β-OH VD3 98
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.31 (d, J = 11.35 Hz, 1H), 5.80 (q, J = 11.35 Hz, 1H), 4.66 (ddddd, J = 48.16, 7.91,7.57, 3.78, 3.78 Hz, 1H), 3.77 (dddd, J = 7.91, 7.57, 3.78, 3.78 Hz, 1H) 2.79-1.18(m, 25H), 1.19 (s, 6H), 0.92 (d, J = 6.54 Hz, 3H), 0.53 (s, 3H).
HR-MS ESI C26H43F1Na1O2 [M+Na]+ 計算値: 429.31448, 実測値: 429.31441.
280の内因性脂質関連化合物からなる化合物ライブラリー内の化合物を、レポーター遺伝子の発現を阻害する能力についてスクリーニングした。この遺伝子では、ステロール調節エレメント(SRE)を三回繰り返し、ルシフェラーゼの発現を制御する。脂質の枯渇は、SREドメインに結合し、転写因子として機能してルシフェラーゼを発現するSREBPを活性化する。SREBP応答レポーター構築物を、対照のβ-ガラクトシダーゼ(β-gal)レポーター遺伝子とともに、CHO-K1細胞(chinese hamster ovary cell)に同時遺伝子導入した。レポーター遺伝子における構成的に活性化したアクチンプロモーターはβ-galの発現を活発にする。SREBP応答レポーター遺伝子からのルシフェラーゼ発現レベルをβ-gal発現レベル正規化した。
CHO-K1細胞を培地A(100 units/mLペニシリン、100μg/mL硫酸ストレプトマイシン及び5%(v/v)ウシ胎仔血清を補充した、Ham's F-12培地及びDulbecco's modified Eagle培地の1:1混合培地)中、加湿5% CO2下37℃にて維持した。
0日目に、CHO-K1細胞を、培地A中、2.0×104細胞/ウェルにて96ウェルプレートに添加した。1日目に、細胞にpCMV-PLAP-BP2513-1141(0.1μg/ウェル)、pCMV-SCAP(0〜2.0μg/ウェル)及びβ-galレポーター遺伝子を同時に遺伝子導入した。β-ガラクトシダーゼの発現は、プロトコールに従い、FuGENE(登録商標)HDトランスフェクション試薬(Promega)を用いてアクチンプロモーター(pAc-β-gal, 0.1μg/ウェル)により制御した。培養の5時間後、PBSで細胞を洗浄した後、VD誘導体(10μM)又はステロール(10μg/mLのコレステロール及び1.0μg/mLの25-ヒドロキシコレステロール)の非存在下又は存在下、培地B(100 units/mLペニシリン、100μg/mL硫酸ストレプトマイシン、5% (v/v)脂質枯渇血清、50μMコンパクチン及び50μMメバロン酸リチウムを補充した、Ham's F-12培地及びDulbecco's modified Eagle培地の1:1混合培地)中にてインキュベーションした。20時間後、培地のアリコートを分泌アルカリホスファターゼ活性についてアッセイした。各ウェル中の細胞を溶解させ、β-ガラクトシダーゼ活性の測定に用いた。アルカリホスファターゼ活性をβ-ガラクトシダーゼの活性により正規化した。
25(OH)Dは、レポーターアッセイにおいて濃度依存的にSREBPの活性化を阻害し、1.0μMのIC50値を有した(図2、第1表)。VD誘導体により媒介されるSREBPの阻害はSREBP-2のウェスタン・ブロット分析により確認した(図3)。細胞を25-ヒドロキシコレステロール [25-HC]で処理すると、SREBPの成熟型が消失し、SREBPの前駆体が蓄積して、25-HCがSREBP-SCAP複合体のERからゴルジ体への輸送を阻害したことを示した。これに対し、25(OH)Dで処理すると、成熟型及び前駆体の両方の濃度が減少し、VD誘導体がSREBPの前駆体濃度を軽減したことが示され、結果的に成熟型の濃度が軽減し、SREBP活性化が阻害された。
0日目にて、CHO-K1細胞を、培地A中、1.0×104細胞/ウェルにて96ウェルプレートに添加した。1日目にて、プロトコールに従い、FuGENE(登録商標)HDトランスフェクション試薬(Promega)を用いて細胞にSRE-1活性化ルシフェラーゼレポーター遺伝子(pSRE-Luc)及びpAc-β-galで20/1比にて同時遺伝子導入した。8〜12時間インキュベーション後、細胞をPBS緩衝液で洗浄した後、特定の試験化合物を含む培地Bにてインキュベーションした。各化合物のDMSO中のストック溶液を調製し、培地Bに添加し、200倍(v/v)希釈した(0.5% DMSO)。20〜24時間のインキュベーション後、各ウェル中の細胞をレポーター溶解緩衝液(Promega)で凍結融解することにより溶解し、アリコートを用いてルシフェラーゼ及びβ-ガラクトシダーゼ活性を測定した。ルシフェラーゼ活性をSteady-Glo(登録商標)ルシフェラーゼアッセイシステム(Promega)を用いて測定し、β-ガラクトシダーゼ活性をβ-ガラクトシダーゼ酵素アッセイシステム(Promega)を用いて測定した。ルシフェラーゼ活性をβ-ガラクトシダーゼ活性に正規化した。
0日目にて、CHO-K1細胞を、培地A中、3.0×105細胞/ウェルにて6ウェルプレートに添加した。1日目にて、細胞をPBSで洗浄した後、特定の試験化合物(5μM)の非存在下又は存在下、培地Bにてインキュベーションした。16時間のインキュベーション後、細胞を冷PBSで3回洗浄し、緩衝液A(50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 150 mM NaCl, 1% (v/v) Nonidet P40, 0.5% (w/v) デオキシコール酸ナトリウム, 8M尿素及びプロテアーゼ阻害剤カクテル(ナカライ))で溶解させた。細胞溶解物を25G針に16回通過させ、7,000 g、4℃にて10分間遠心分離した。上清を新たなチューブに移し、ペレットを緩衝液Aで抽出した。得られた緩衝液を7,000 g、4℃にて10分間遠心分離し、上清を先のものと合わせた。得られた溶解物を0.20容量の6×SDSサンプル緩衝液(ナカライ)と混合し、室温にて30分間インキュベーションした。サンプルを10% SDS-PAGEゲルにて分離し、SREBP-2(IgG-7D4)、SCAP(IgG-9D5)、c-Myc(IgG1-MC045)及びアクチン(AC-40)に対するマウスモノクローナル抗体を用いてブロットした。増強させた化学発光を用いて(ECLプライムウェスタンブロット検出試薬, GE Healthcare)、ImageQuant LAS 500(GE Healthcare)上に特異的なバンドを視覚化した。
25(OH)DのSCAPレベルに対する効果もまた、ウェスタンブロット分析により確認した(図4)。細胞を25(OH)Dで処理すると、SCAPレベル並びにSREBPレベルが減少した。さらに、SCAPレベルの減少は、25(OH)Dによって媒介され、一般的なプロテアーゼ阻害剤であるMG-132(図5)の添加によりキャンセルされ、25(OH)DはSCAPのユビキチン化を促進した(図6)。SREBPがSCAPと複合体を形成できない場合、SREBPの前駆体は急速に分解する(R. B. Rawsonら J. Biol. Chem. 1999, 274, 28549)。これらの結果により、25(OH)DがSCAPのユビキチン−プロテアーゼ分解を刺激し、SREBPの前駆体濃度が減少することが示唆された。
Claims (13)
- 一般式(I):
[式中、
RA及びRBはそれぞれ独立してヒドロキシル、NR1R2又はハロゲンから選択され;
R1及びR2はそれぞれ独立して水素、C1−4アルキル、適宜置換されていてもよいC1−4アルキルカルボニル、C1−4アルキルスルホニル、C1−4アルコキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、3〜6員シクロアルキル−C1−4アルキル、適宜置換されていてもよいC6−10アリールカルボニル、適宜置換されていてもよいC6−10アリールスルホニル、適宜置換されていてもよい5〜6員飽和ヘテロシクリル−C1−4アルキル、5〜6員ヘテロアリール又は以下の式:
R1及びR2は、適宜、それらが結合する窒素原子と一緒になって、適宜C6−10アリール環と縮合していてもよい含窒素オキソ置換飽和5〜6員ヘテロ環を形成していてもよく;
R3は水素又は=CH2である]
で示される化合物又はその薬学的に許容される塩。 - R1及びR2がそれぞれ独立して水素、C1−4アルキル、同一又は異なる少なくとも1つのハロゲンで適宜置換されていてもよいC1−4アルキルカルボニル、C1−4アルキルスルホニル、C1−4アルコキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、3〜6員シクロアルキル−C1−4アルキル、適宜ハロゲン、ハロ−C1−4アルキル、−S−ハロ−C1−4アルキル、C1−4アルコキシ、ハロ−C1−4アルコキシ、ニトロ、シアノ、C1−4アルコキシカルボニル及びC6−10アリールからなる群から選択される同一又は異なる少なくとも1つの基で置換されていてもよいC6−10アリールカルボニル、適宜C1−4アルキル、ニトロ及びジ−(C1−4アルキル)アミノからなる群から選択される同一又は異なる少なくとも1つの基で置換されていてもよいC6−10アリールスルホニル、適宜ハロゲン及びヒドロキシルからなる群から選択される同一又は異なる少なくとも1つの基で置換されていてもよい5〜6員飽和ヘテロシクリル−C1−4アルキル、5〜6員ヘテロアリール又は以下の式:
R1及びR2が、適宜、それらが結合する窒素原子と一緒になって、適宜C6−10アリール環と縮合していてもよい含窒素オキソ置換飽和5〜6員ヘテロ環を形成していてもよく;
但し、R1及びR2が同時に水素ではない、請求項1記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。 - R3が=CH2である、請求項1又は2のいずれか記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
- R3が水素である、請求項1又は2のいずれか記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
- 以下の式のいずれか:
で示される、請求項1〜4のいずれか記載の化合物。 - R2が水素である、請求項1〜5のいずれか記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
- 以下の構造を有する、請求項1記載の化合物:
- 治療を必要とする対象に、治療的有効量の請求項1〜7のいずれか記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を投与する工程、又は天然由来ビタミンD、天然由来ビタミンD3、もしくは25−OHVitD3、1,25−ジ−OHVitD3、24,25−ジ−OHVitD3などの天然由来ビタミンD3誘導体を投与する工程を含む、対象における代謝性疾患、肝疾患、肥満、糖尿病、心血管疾患又はがんの治療方法。
- 疾患が体重減少の誘導による肥満、非アルコール性脂肪性肝炎(NASH)、脂肪肝又はがんである、請求項8記載の方法。
- 治療を必要とする対象に、治療的有効量の請求項1〜7のいずれか記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を投与する工程、又は天然由来ビタミンD、天然由来ビタミンD3、もしくは25−OHVitD3、1,25−ジ−OHVitD3、24,25−ジ−OHVitD3などの天然由来ビタミンD3誘導体を投与する工程を含む、対象におけるSREBPの阻害方法。
- 請求項1〜7のいずれか記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分とし、薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
- 代謝性疾患、肝疾患、肥満、糖尿病、心血管疾患又はがんの治療薬の製造における請求項1〜7のいずれか記載の化合物又はその薬学的に許容される塩の使用。
- 代謝性疾患、肝疾患、肥満、糖尿病、心血管疾患又はがんの治療に用いられることを特徴とする、請求項1〜7のいずれか記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
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Citations (1)
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Non-Patent Citations (9)
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FUJISHIMA, T. ET AL., BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY, vol. 8, JPN6019051147, 2000, pages 123 - 134, ISSN: 0004184197 * |
GLEBOCKA, A. ET AL., ARCHIVES OF BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS, vol. 523, JPN6019051142, 2012, pages 48 - 57, ISSN: 0004184193 * |
MARCZAK, S. ET AL., BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS, vol. 11, JPN6019051146, 2001, pages 63 - 66, ISSN: 0004184196 * |
MICHALAK, K. ET AL., THE JOURNAL OF ORGANIC CHEMISTRY, vol. 76, JPN6019051144, 2011, pages 6906 - 6911, ISSN: 0004184195 * |
OVES, D. ET AL., BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY, vol. 14, JPN6019051140, 2006, pages 928 - 937, ISSN: 0004184192 * |
OVES, D. ET AL., THE JOURNAL OF ORGANIC CHEMISTRY, vol. 68, JPN6019051139, 2003, pages 1154 - 1157, ISSN: 0004184191 * |
SHIMAZAKI, M. ET AL., BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY, vol. 14, JPN6019051143, 2006, pages 4645 - 4656, ISSN: 0004184194 * |
WANG, X. X. ET AL., AMERICAN JOURNAL OF PHYSIOLOGY RENAL PHYSIOLOGY, vol. 300, JPN7019004176, 2011, pages 801 - 810, ISSN: 0004184198 * |
領田 優太、他, 日本薬学会第133年会 予稿集, JPN7019004177, 2013, ISSN: 0004184199 * |
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