JP2017516473A - 細胞培養用バッグアセンブリ - Google Patents
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Abstract
Description
a)上に開示したバイオリアクターを用意する段階と、
b)第1培養区画5;25;45;65;85に培養培地及び細胞を導入する段階と、
c)第1培養区画において細胞を培養することで、第1細胞培養物を得る段階と、
d)第1弁手段10;30;50;70;90を開通することで、第1培養区画を第2培養区画6;26;46;66;86と流体的に接続する段階と、
e)第1細胞培養物を第2培養区画に移送する段階と、
f)第2培養区画に培養培地を導入する段階と、
g)第2培養区画において細胞を培養することで、第2細胞培養物を得る段階と
を含む。
h)第2弁手段を開通することで、第2培養区画を第3培養区画と流体的に接続する段階と、
i)第2細胞培養物を第3培養区画に移送する段階と、
j)第3培養区画に培地を導入する段階と、
k)第3培養区画において細胞を培養することで、第3細胞培養物を得る段階と
を含む。
a)1以上の培養区画85,86,87を含む1以上のバッグ82又はボトル、
b)恒温流体を含む1以上の可撓性温度制御区画98、及び
c)1以上の軸96の周りを前後に揺動するように構成されたトレー93又はトレーのスタック
を備えるバイオリアクターアセンブリを開示する。
a)上に開示したバイオリアクターアセンブリを用意する段階と、
b)1以上の培養区画85,86,87に培養培地及び細胞を導入する段階と、
c)1以上の培養区画において細胞を培養する段階と
を含む。
[実施態様1]
少なくとも第1培養区画(5;25;45;65;85)中の排液ポート(8;28;48;68;88)が弁手段(10;30;50;70;90)の開通時に第2培養区画(6;26;46;66;86)と流体的に接続されるように構成されている、複数の培養区画(5,6,7;25,26,27;45,46,47;65,66,67;85,86,87)を形成する1以上のバッグ(2,3,4;22;42;62,63,64;82)を備える細胞培養用のフレキシブルバッグアセンブリ(1;21;41;61;81)。
[実施態様2]
第2培養区画(6;26;46;66;86)が第1培養区画(5;25;45;65;85)の容積の少なくとも120%、例えば少なくとも150%の容積を有する、実施態様1に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(1;21;41;61;81)。
[実施態様3]
3以上の培養区画(5,6,7;25,26,27;45,46,47;65,66,67;85,86,87)を備え、第2培養区画(6;26;46;66;86)中の排液ポート(9;29;49;89)が弁手段(11;31;51;91)の開通時に第3培養区画(7;27;47;67;87)と流体的に接続されるように構成されている、実施態様1又は実施態様2に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(1;21;41;61;81)。
[実施態様4]
第3培養区画(7;27;47;67;87)が第2培養区画(6;26;46;66;86)の容積の少なくとも120%、例えば少なくとも150%の容積を有する、実施態様3に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(1;21;41;61;81)。
[実施態様5]
1以上の培養区画(5,6,7;25,26,27;45,46,47;65,66,67;85,86,87)、例えば第1培養区画(5;25;45;65;85)が、剛性又は半剛性容器である、実施態様1乃至4のいずれか1項に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(1;21;41;61;81)。
[実施態様6]
弁手段(10;30;50;70;90)が弁又はクランプである、実施態様1乃至5のいずれか1項に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(1;21;41;61;81)。
[実施態様7]
弁手段(10;30;50;70;90)がピンチ弁又はピンチクランプである、実施態様6に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(1;21;41;61;81)。
[実施態様8]
ピンチ弁又はピンチクランプが、外径15mmまでの管材(12;72)又は導管への適用に適合している、実施態様7に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(1;21;41;61;81)。
[実施態様9]
排液ポート(8,9;28,29;48,49;68)の少なくとも1つが浸漬管(68)である、実施態様1乃至8のいずれか1項に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(1;21;41;61;81)。
[実施態様10]
管材(12;72)によって接続された2以上のバッグ(2,3,4;62,63,64)、例えば3以上のバッグ(2,3,4;62,63,64)を備える、実施態様1乃至9のいずれか1項に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(1;61)。
[実施態様11]
2以上のバッグ(2,3,4)がトレー(13)上に横に並べて配置されるように構成されている、実施態様10に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(1)。
[実施態様12]
2以上のバッグ(62,63,64)がトレー(73)上又はトレーのスタック上に積み重ねられるように構成されている、実施態様10に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(61)。
[実施態様13]
複数の培養区画(25,26,27;45,46,47;85,86,87)が内部導管(32;92)を介して接続されているか又は接続可能である1以上の多区画バッグ(22;42;82)を備える、実施態様1乃至12のいずれか1項に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(21;41;81)。
[実施態様14]
複数の培養区画(25,26,27;45,46,47)が1以上の破壊可能な封止部(52)を介して接続可能である1以上の多区画バッグ(22;42)を備える、実施態様1乃至13のいずれか1項に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(21;41)。
[実施態様15]
1以上の温度制御区画(98)を備える1以上のバッグ(82)を備える、実施態様1乃至14のいずれか1項に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(81)。
[実施態様16]
1以上のバッグ(82)が上部フィルム(99)、底部フィルム(100)及び境界フィルム(97)を備え、境界フィルム(97)が、1以上の温度制御区画(98)と1以上の培養区画(85,86,87)、例えば少なくとも第1培養区画(85)とを区切っている、実施態様15に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(81)。
[実施態様17]
温度制御区画(98)が恒温流体注入口及び場合によっては恒温流体排出口を備える、実施態様15又は実施態様16に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(81)。
[実施態様18]
第1培養区画(85)の容積が1L未満、例えば50〜250mLであり、及び/又は温度制御区画(98)の容積が第1培養区画(85)の容積の少なくとも10倍である、実施態様15乃至17のいずれか1項に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(81)。
[実施態様19]
揺動トレー台上での細胞培養に適合した、実施態様1乃至18のいずれか1項に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(1;21;41;61;81)。
[実施態様20]
各培養区画(5,6,7;25,26,27;45,46,47;65,66,67;85,86,87)がガス注入口(14;34;54;74;94)及びガス排出口(15;35;55;75;95)を備える、実施態様1乃至19のいずれか1項に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(1;21;41;61;81)。
[実施態様21]
放射線殺菌などによる殺菌済みの状態で供給される、実施態様1乃至20のいずれか1項に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(1;21;41;61;81)。
[実施態様22]
1以上の軸(16;36;56;76;96)の周りを前後に揺動するように構成されたトレー(13;33;53;73;93)上又はトレーのスタック上に搭載された実施態様1乃至21のいずれか1項に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(1;21;41;61;81)を備えるバイオリアクターアセンブリ。
[実施態様23]
培養区画(5,6,7;25,26,27;45,46,47;65,66,67;85,86,87)の少なくとも1つに細胞培養物を含む、実施態様22に記載のバイオリアクターアセンブリ。
[実施態様24]
a)実施態様22に記載のバイオリアクターアセンブリを用意する段階と、
b)第1培養区画(5;25;45;65;85)に培養培地及び細胞を導入する段階と、
c)第1培養区画(5;25;45;65;85)において細胞を培養することで、第1細胞培養物を得る段階と、
d)第1弁手段(10;30;50;70;90)を開通することで、第1培養区画(5;25;45;65;85)を第2培養区画(6;26;46;66;86)と流体的に接続する段階と、
e)第1細胞培養物を第2培養区画(6;26;46;66;86)に移送する段階と、
f)第2培養区画(6;26;46;66;86)に培地を導入する段階と、
g)第2培養区画(6;26;46;66;86)において細胞を培養することで、第2細胞培養物を得る段階と
を含む、細胞を培養する方法。
[実施態様25]
段階e)の後に、第1弁手段(10;30;50;70;90)を閉鎖する段階e’)をさらに含む、実施態様24に記載の方法。
[実施態様26]
h)第2弁手段(11;31;51;91)を開通することで、第2培養区画(6;26;46;66;86)を第3培養区画(7;27;47;67;87)と流体的に接続する段階と、
i)第2細胞培養物を第3培養区画(7;27;47;67;87)に移送する段階と、
j)第3培養区画(7;27;47;67;87)に培地を導入する段階と、
k)第3培養区画(7;27;47;67;87)において細胞を培養することで、第3細胞培養物を得る段階と
をさらに含む、実施態様24又は実施態様25に記載の方法。
[実施態様27]
段階i)の後に、(第2)弁手段(11;31;51;91)を閉鎖する段階i’)をさらに含む、実施態様26に記載の方法。
[実施態様28]
1以上の培養区画(85,86,87)と1以上の温度制御区画(98)とを含む1以上のバッグ(82)を備える細胞培養用のフレキシブルバッグアセンブリ(81)。
[実施態様29]
1以上のバッグ(82)が上部フィルム(99)、底部フィルム(100)及び境界フィルム(97)を備え、境界フィルム(97)が1以上の温度制御区画(98)と1以上の培養区画(85,86,87)、例えば各培養区画(85,86,87)とを区切っている、実施態様28に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(81)。
[実施態様30]
1以上の培養区画(85,86,87)、例えば各培養区画(85,86,87)が1L未満、例えば50〜250mLの容積を有し、及び/又は温度制御区画(98)の容積が、1以上の培養区画(85,86,87)、例えば各培養区画(85,86,87)の容積の少なくとも10倍である、実施態様28又は実施態様29に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(81)。
[実施態様31]
温度制御区画(98)が恒温流体用の注入口及び排出口を備える、実施態様28乃至30のいずれか1項に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(81)。
[実施態様32]
a)1以上の培養区画(85,86,87)を含む1以上のバッグ(82)又はボトル、
b)恒温流体を含む1以上の可撓性温度制御区画(98)、及び
c)1以上の軸(96)の周りを前後に揺動するように構成されたトレー(93)
を備え、1以上の可撓性温度制御区画(98)がトレー(93)上に搭載され、1以上のバッグ(82)又はボトルが1以上の可撓性温度制御区画(98)の上に設けられている、バイオリアクターアセンブリ。
[実施態様33]
1以上の可撓性温度制御区画(98)が1以上のバッグ(82)の一部を形成している、実施態様32に記載のバイオリアクターアセンブリ。
[実施態様34]
1以上の可撓性温度制御区画(98)が1以上のバッグ(82)とは別個の第2バッグの一部を形成している、実施態様32に記載のバイオリアクターアセンブリ。
[実施態様35]
a)実施態様32乃至34のいずれか1項に記載のバイオリアクターアセンブリを用意する段階と、
b)1以上の培養区画(85,86,87)に培養培地及び細胞を導入する段階と、
c)1以上の培養区画(85,86,87)において細胞を培養する段階と
を含む、細胞を培養する方法。
[実施態様36]
段階c)における温度が目標温度±2℃、例えば±1℃又は±0.5℃の範囲内に維持される、実施態様35に記載の方法。
[実施態様37]
可撓性温度制御区画(98)を通して恒温流体を循環させる、実施態様35又は実施態様36に記載の方法。
[実施態様38]
1以上の培養区画(85,86,87)が、制御ユニットに電気的又は電磁的に接続される温度センサーを備え、恒温流体の温度が、フィードバックループを使って、制御ユニットによって制御される、実施態様35乃至37のいずれか1項に記載の方法。
Claims (11)
- 細胞培養用のフレキシブルバッグアセンブリ(1;21;41;61;81)であって、
少なくとも第1培養区画(5;25;45;65;85)中の排液ポート(8;28;48;68;88)が弁手段(10;30;50;70;90)の開通時に第2培養区画(6;26;46;66;86)と流体的に接続されるように構成されている、複数の培養区画(5,6,7;25,26,27;45,46,47;65,66,67;85,86,87)を形成する1以上のバッグ(2,3,4;22;42;62,63,64;82)
を備えるフレキシブルバッグアセンブリ(1;21;41;61;81)。 - 3以上の培養区画(5,6,7;25,26,27;45,46,47;65,66,67;85,86,87)を備え、第2培養区画(6;26;46;66;86)中の排液ポート(9;29;49;89)が弁手段(11;31;51;91)の開通時に第3培養区画(7;27;47;67;87)と流体的に接続されるように構成されている、請求項1に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(1;21;41;61;81)。
- 管材(12)によって接続された2以上のバッグ、例えば3以上のバッグを備え、場合によっては2以上のバッグが、トレー(13)上に横に並べて配置されるか、又はトレー(73)上もしくはトレーのスタック上に積み重ねられるように構成されている、請求項1乃至請求項2のいずれか1項に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(1;61)。
- 複数の培養区画(25,26,27;45,46,47;85,86,87)が内部導管(32;92)によって及び/又は1以上の破壊可能な封止部(52)によって接続されているか又は接続可能である1以上の多区画バッグ(22;42;82)を備える、請求項1乃至請求項3のいずれか1項に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(21;41;81)。
- 1以上の温度制御区画(98)を備える1以上のバッグ(82)を備え、場合によっては1以上のバッグ(82)が上部フィルム(99)、底部フィルム(100)及び境界フィルム(97)を備え、境界フィルム(97)が、1以上の温度制御区画(98)と1以上の培養区画(85,86,87)、例えば少なくとも第1培養区画(85)とを区切っている、請求項1乃至請求項4のいずれか1項に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(81)。
- 1以上の軸(16;36;56;76;96)の周りを前後に揺動するように構成されたトレー(13;33;53;73;93)上又はトレーのスタック上に搭載された請求項1乃至請求項21のいずれか1項に記載のフレキシブルバッグアセンブリ(1;21;41;61;81)を備えるバイオリアクターアセンブリ。
- 細胞の培養方法であって、
a)請求項6に記載のバイオリアクターアセンブリを用意する段階と、
b)第1培養区画(5;25;45;65;85)に培養培地及び細胞を導入する段階と、
c)第1培養区画(5;25;45;65;85)において細胞を培養することで、第1細胞培養物を得る段階と、
d)第1弁手段(10;30;50;70;90)を開通することで、第1培養区画(5;25;45;65;85)を第2培養区画(6;26;46;66;86)と流体的に接続する段階と、
e)第1培養物を第2培養区画(6;26;46;66;86)に移送する段階と、
e’)場合によっては、第1弁手段(10;30;50;70;90)を閉鎖する段階と、
f)第2培養区画(6;26;46;66;86)に培地を導入する段階と、
g)第2培養区画(6;26;46;66;86)において細胞を培養することで、第2細胞培養物を得る段階と
を含む方法。 - 1以上の培養区画(85,86,87)と1以上の温度制御区画(98)とを含む1以上のバッグ(82)を備え、場合によっては1以上のバッグ(82)が上部フィルム(99)、底部フィルム(100)及び境界フィルム(97)を備え、境界フィルム(97)が1以上の温度制御区画(98)と1以上の培養区画(85,86,87)、例えば各培養区画(85,86,87)とを区切っている、細胞培養用のフレキシブルバッグアセンブリ(81)。
- バイオリアクターアセンブリであって、
a)1以上の培養区画(85,86,87)を含む1以上のバッグ(82)又はボトル、
b)恒温流体を含む1以上の可撓性温度制御区画(98)、及び
c)1以上の軸(96)の周りを前後に揺動するように構成されたトレー(93)
を備え、1以上の可撓性温度制御区画(98)がトレー(93)上に搭載され、1以上のバッグ(82)又はボトルが1以上の可撓性温度制御区画(98)の上に設けられている、バイオリアクターアセンブリ。 - 1以上の可撓性温度制御区画(98)が1以上のバッグ(82)の一部を形成している、又は
1以上の可撓性温度制御区画(98)が1以上のバッグ(82)とは別個の第2バッグの一部を形成している、請求項9に記載のバイオリアクターアセンブリ。 - 細胞の培養方法であって、
a)請求項8乃至請求項9のいずれか1項に記載のバイオリアクターアセンブリを用意する段階と、
b)1以上の培養区画(85,86,87)に培養培地及び細胞を導入する段階と、
c)1以上の培養区画(85,86,87)において細胞を培養する段階と
を含み、場合によっては段階c)における温度が、目標温度±2℃、例えば±1℃又は±0.5℃の範囲内に維持され、及び/又は可撓性温度制御区画(98)を通して恒温流体を循環させる、方法。
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