JP2017513462A - 微細加工コンポーネントを用いた細胞分別システム - Google Patents
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Abstract
Description
本発明の課題は、MEMSチップにおける通路の目詰まりを回避すると同時に、MEMSチップのための通路をそれよりも著しく大きい液体貯蔵器の流路に整合させて連通可能にする手段を提供することにある。
図1は、微細加工された細胞分別メカニズムであるMEMSチップソーター10の概略図であり、ここで説明する粒子分別システムにおいてこれを使用することができる。細胞分別メカニズムの詳細については、米国特許出願第13/998,095号明細書を参照されたい。微細加工された細胞分別メカニズム10の主たる独特な特徴は、細胞分別バルブ10の動きが、バルブの製造面と平行なことである。これに加え廃棄流路140が、試料流入路120と分別流出路122とに対し、実質的に直交している。これらの特徴によって、マイクロ流体分別における速度および精度、バルブのスループットならびに容易さの点で、めざましい利点が得られるようになる。
図3は細胞分別システム1の概略図であり、このシステムは、マイクロ流体通路、使い捨てカートリッジ1000内に収容されたMEMSチップソーター10、および磁束発生装置400を使用することができる。以下では、このシステムの他のいくつかのコンポーネントについて、およびそれらのコンポーネントがMEMSチップソーター10とどのように相互作用するのかについて述べる。特に図3では、インタロゲーション領域200に対するインタロゲーションレーザーの光路と、流路120〜140内の液流の制御と、MEMSチップソーター10の制御について説明する。システムレベルの説明をした後で、マイクロ流体システム1を高精度かつ高い信頼性で予期されるとおりに動作させることのできるシステム1の独特の特徴について論じることにする。
流体制御手段2500は、MEMSチップ細胞分別バルブ10の流路中を通過して流れる液体の方向と速度を制御することができる。以下で説明する複数の判定基準に基づき、流体制御手段2500を制御することができる。流体制御手段2500は、空気圧バルブ、液圧バルブ、および/または一方向バルブを含むことができ、および/またはピストンまたはポンプおよび対応する流体通路を含むことができる。通常動作中、コントローラー2900を含むフィードバックループにおいて流体制御手段2500により、たとえば細胞速度、流体圧力、または事象率などが一定に維持されるように、流れを制御することができる。
図4は、図3に示した粒子分別システムにおいて使用することのできる、使い捨てカートリッジ1000の一例を示す分解斜視図である。使い捨てカートリッジ1000は、天板1135および基部1130などのような複数の組立部品を含むことができる。
試料貯蔵器20内において、天板1135と基部1130との間に、磁化されたプロペラ1150と、磁化されたプロペラ1150のためのシャフトとして動作可能なニードル1160とを封入することができる。循環する磁場に晒されると、磁化されたプロペラ1150はシャフト1160において回転することができ、それによって試料貯蔵器20の内容物が混合または均質化される。最終的に、0.20μmのフィルター1170を分別貯蔵器22の上に配置することができ、これによって分別された内容物が周囲環境の汚染物から保護される。別の選択肢として、プロペラ1150を小型モータと機械的に結合することによりダイレクトに駆動することもでき、この小型モータによってプロペラ1150の回転を生じさせることができ、つまりは試料貯蔵器20の内容物を混合することができる。混合器の構造の詳細は、図6にさらに詳しく示されており、あとでこの図面を参照しながら説明する。
MEMSチップソーター10の微細加工された著しく細かい構造部材と、それよりもかなり多い液量の貯蔵器20,22,40との間に、移行領域を用意するために、インターポーザー1400が設けられている。インターポーザー1400を、たとえば射出成形などによってプラスチックから形成することができ、これには±10mmのオーダーの中間の許容差をもたせることができる。インターポーザー1400の1つの特徴は、MEMSデバイス10の著しく小さい構造と、カートリッジ1000および貯蔵器20,22,40の肉眼で見える大きい構造との間の移行部分を提供することである。したがってここで述べる細胞分別システム1は、ケイ素基板の表面に微細加工された細胞分別バルブ10と、使い捨てカートリッジ1000と、インターポーザー1400とを含むことができる。細胞分別バルブ10は、そこから導かれた微細加工流路を備えており、標的粒子を非標的物質から分離する。使い捨てカートリッジ1000には、試料貯蔵器20と分別貯蔵器22と廃棄貯蔵器40とが含まれている。さらにインターポーザー1400によって、ケイ素基板に微細加工された流路と、使い捨てカートリッジの貯蔵器との間で液体が連通状態にされる。
1)MEMSチップソーター10をインターポーザー1400に接着するステップ、
2)インターポーザー1400をカートリッジ1000の位置決めピンに配置するステップ、
3)インターポーザー1400を押圧するステップ、
4)インターポーザー1400とカートリッジ1000との間のギャップに接着剤を導入するステップ、
5)紫外線により接着剤を硬化するステップ、
6)カートリッジ基部1130を、たとえばグルー、セメント、または超音波溶接などによって、カートリッジ天板1135に取り付けるステップ。
図1、図2および図3を参照しながら説明したシステムのさらに別の観点は、小さいMEMSチップソーター10を作動させる、厳密に局在化された磁場の必要性である。
Claims (23)
- ケイ素基板の表面に微細加工され、標的粒子を非標的物質から分離する細胞分別バルブであって、
前記細胞分別バルブから導かれた微細加工流路と、試料貯蔵器、分別貯蔵器および廃棄貯蔵器を含む使い捨てカートリッジと、インターポーザーと、を備えており、
前記インターポーザーは、ケイ素基板に微細加工された流路と前記使い捨てカートリッジの貯蔵器との間で液体を連通させる、
細胞分別バルブ。 - 前記細胞分別バルブは、標的粒子を試料流路から前記ケイ素基板に形成された分別流路へと向かわせ、非標的物質を前記試料流路からやはり前記ケイ素基板に形成された廃棄流路へと向かわせる、
請求項1記載の細胞分別システム。 - 前記細胞分別バルブは、前記表面と平行な1つの平面内で移動し、
微細加工された前記細胞分別バルブが第1のポジションにあるときに、前記細胞分別バルブは、標的粒子を前記試料流路から前記廃棄流路へ向かわせ、
前記分別流路と前記廃棄流路とが実質的に逆平行であり、かつ、前記試料流路と前記廃棄流路とが実質的に直交している第2ポジションにあるときに、前記細胞分別バルブは、非標的粒子を前記分別流路へ向かわせる、
請求項1記載の細胞分別システム。 - 前記使い捨てカートリッジの前記分別貯蔵器と前記ケイ素基板の前記分別流路との間の分別流体経路と、前記使い捨てカートリッジの前記廃棄貯蔵器と前記廃棄流路との間の廃棄流体経路と、前記試料流路と前記試料貯蔵器との間の試料流体経路とが、前記インターポーザーによって形成される、
請求項3記載の細胞分別システム。 - 前記分別貯蔵器は、さらにサイフォン構造を有しており、前記サイフォン構造は、前記分別貯蔵器の前記サイフォン構造内の少量の分別流体を収集し、前記少量の分別流体は、前記分別貯蔵器の流体総量の約10%よりも少ない、
請求項4記載の細胞分別システム。 - 前記試料貯蔵器はさらに、前記試料貯蔵器の壁に形成された漏斗状構造部材を有しており、前記漏斗状構造部材は、少量の試料流体を収集し、前記少量の試料流体は、前記試料貯蔵器の流体総量の約10%よりも少ない、
請求項4記載の細胞分別システム。 - 前記廃棄貯蔵器はさらに、前記廃棄貯蔵器の壁に形成された漏斗状構造部材を有しており、前記漏斗状構造部材は、少量の廃棄流体を収集し、前記少量の廃棄流体は、前記廃棄貯蔵器の流体総量の約10%よりも少ない、
請求項4記載の細胞分別システム。 - 前記インターポーザーは、接着剤により前記ケイ素基板に取り付けられ、前記使い捨てカートリッジ内に設置される、
請求項1記載の細胞分別システム。 - 前記細胞分別バルブはさらに、微細加工された前記細胞分別バルブにインレイ加工された透磁性材料と、微細加工された前記細胞分別バルブの外部に設けられた第1の磁束発生源と、前記細胞分別バルブが形成される基板と、を有しており、
前記磁束は、インレイ加工された前記透磁性材料と相互作用して、微細加工された粒子分別メカニズムを動かし、
前記第1の磁束発生源がアクティブであれば、微細加工された前記粒子分別メカニズムが、前記第1のポジションから前記第2のポジションへと移動する、
請求項3記載の細胞分別システム。 - 前記細胞分別バルブが前記第1のポジションにあるときに、前記試料流路と前記廃棄流路との間に通路が形成される、
請求項3記載の細胞分別システム。 - 微細加工された粒子分別バルブが前記第2のポジションにあるときに、前記試料流路と前記分別流路との間に通路が形成される、
請求項1記載の細胞分別システム。 - 前記細胞分別バルブは、力の印加に応答して、前記第1のポジションから前記第2のポジションへ移動する、
請求項11記載の細胞分別システム。 - 前記力は、機械的、静電的、静磁気的、圧電的および電磁的な力のうちの少なくとも1つである、
請求項12記載の細胞分別システム。 - 前記使い捨てカートリッジはさらに、シャフトに設けられたプロペラを含み、前記プロペラは、前記試料貯蔵器内に配置されている、
請求項1記載の細胞分別システム。 - 前記プロペラは、磁気材料を含み、可変の磁場と相互作用し、前記可変の磁場により前記プロペラは自身のシャフトにおいて回転して、前記試料貯蔵器の内容物が混合される、
請求項12記載の細胞分別システム。 - 前記プロペラは、前記シャフトを回転させるモータ駆動の機械的結合部によって回転させられる、
請求項14記載の細胞分別システム。 - 前記試料流路に配置されたインタロゲーション手段をさらに含み、前記インタロゲーション手段は、試料流において標的粒子を非標的物質から区別する、
請求項2記載の細胞分別システム。 - 前記インタロゲーション手段は、レーザー誘起蛍光システムのレーザーを含み、標的粒子に蛍光標識が付着され、前記蛍光標識は前記レーザーにより照射されると蛍光信号を発生する、
請求項17記載の細胞分別システム。 - 前記使い捨てカートリッジは、ポジショニング可能なステージ上で前記細胞分別システムに受け入れられるように構成されており、前記使い捨てカートリッジは、少なくとも1つのレーザー光源と少なくとも1つの光検出器とに合わせて、前記ステージ上でポジショニング可能である、
請求項1記載の細胞分別システム。 - 前記細胞分別システムは、さらにコンピューターを含み、前記コンピューターは、標的粒子を非標的物質から分離するために、少なくとも1つのレーザー光源、少なくとも1つの光源、および前記細胞分別バルブと通信を行う、
請求項19記載の細胞分別システム。 - 前記廃棄カートリッジはさらに、前記インタロゲーション手段を較正する少なくとも1つの較正領域を含む、
請求項17記載の細胞分別システム。 - 前記インターポーザーはさらに、前記インタロゲーション手段を較正する少なくとも1つの較正領域を含む、
請求項17記載の細胞分別システム。 - 前記インターポーザーの流路の底部に付加的な小さい流路を設け、前記付加的な小さい流路は、前記付加的な小さい流路が配置される前記流路の深さと幅の5〜20%である、
請求項1記載の細胞分別システム。
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