JP2017507977A - 痙縮を治療するためのピペラジンフェノチアジン誘導体 - Google Patents
痙縮を治療するためのピペラジンフェノチアジン誘導体 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2017507977A JP2017507977A JP2016557029A JP2016557029A JP2017507977A JP 2017507977 A JP2017507977 A JP 2017507977A JP 2016557029 A JP2016557029 A JP 2016557029A JP 2016557029 A JP2016557029 A JP 2016557029A JP 2017507977 A JP2017507977 A JP 2017507977A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- group
- propyl
- alkyl
- compound
- phenothiazine
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 0 *C1N(*)C(*)C(*)N(*N2c(cc(*)cc3)c3Sc3cc(I)ccc23)C1* Chemical compound *C1N(*)C(*)C(*)N(*N2c(cc(*)cc3)c3Sc3cc(I)ccc23)C1* 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
- A61K31/5415—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. phenothiazine, chlorpromazine, piroxicam
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
- A61P21/02—Muscle relaxants, e.g. for tetanus or cramps
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D279/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom and one sulfur atom as the only ring hetero atoms
- C07D279/10—1,4-Thiazines; Hydrogenated 1,4-thiazines
- C07D279/14—1,4-Thiazines; Hydrogenated 1,4-thiazines condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D279/18—[b, e]-condensed with two six-membered rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D279/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom and one sulfur atom as the only ring hetero atoms
- C07D279/10—1,4-Thiazines; Hydrogenated 1,4-thiazines
- C07D279/14—1,4-Thiazines; Hydrogenated 1,4-thiazines condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D279/18—[b, e]-condensed with two six-membered rings
- C07D279/22—[b, e]-condensed with two six-membered rings with carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D279/24—[b, e]-condensed with two six-membered rings with carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hydrocarbon radicals, substituted by amino radicals, attached to the ring nitrogen atom
- C07D279/28—[b, e]-condensed with two six-membered rings with carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hydrocarbon radicals, substituted by amino radicals, attached to the ring nitrogen atom with other substituents attached to the ring system
Abstract
Description
・Aは直鎖又は分岐鎖状(C1〜C6)アルキル鎖を表し;
・R1は、
・水素原子、
・ハロゲン原子、
・アシル基CO-R7若しくはスルホニル基SO2-R7{式中、R7は(C1〜C6)アルキル基を表す}、
・スルホンアミド基SO2-NR8R9{式中、R8及びR9は独立して、水素原子又は(C1〜C6)アルキル基を表す}、又は
・少なくとも1個のハロゲン原子により置換されていてもよい(C1〜C6)アルキル、(C1〜C6)アルコキシ、(C1〜C6)アルキルメルカプト、チオ-(C1〜C6)アルキル若しくは(C1〜C6)アルキルスルホニル基を表し;
・R1'は、水素原子又はヒドロキシル基、好ましくは水素原子を表し;
・R2、R3、R4及びR5は同一又は異なって、それぞれ、水素原子又は(C1〜C6)アルキル基を表し;
・R6は、
・水素原子、
・アルキル鎖の末端で少なくとも1個のヒドロキシル基により置換されていてもよい(C1〜C6)アルキル基、
・(C1〜C4)アルキルアシルオキシ基、
・(C1〜C4)アルキル-OR10基
を表し、式中、R10は、
- 鎖の末端で少なくとも1個のヒドロキシル基により置換されていてもよい(C1〜C4)アルキル基、又は
- COR11基{R11は、アルキル鎖の末端でアミノ基により置換されていてもよい(C1〜C6)アルキル基である}
を表す]
の化合物又はその薬学的に許容される塩の1種に関する。
・水素原子、
・ハロゲン原子、好ましくは塩素原子、
アシル基CO-R7{式中、R7は、(C1〜C6)アルキル基、好ましくはメチル又はn-プロピル基を表す}、
スルホンアミド基SO2-NR8R9{式中、R8及びR9は独立して、水素原子、若しくは(C1〜C6)アルキル基を表し、好ましくはR8及びR9はメチル基を表す}、
・少なくとも1個のフッ素原子により置換されていてもよい(C1〜C6)アルキル基、好ましくはトリフルオロメチル基、又は
・チオ-(C1〜C6)アルキル基、好ましくはチオ-エチル(-SCH2CH3)基を表す。
・アルキル鎖の末端で少なくとも1個のヒドロキシル基により置換されていてもよい(C1〜C6)アルキル基、好ましくはメチル又はエチル基、
・-OR10基により置換されたエチル基
を表し、式中、R10は、
- 鎖の末端で少なくとも1個のヒドロキシル基により置換されていてもよいエチル基、又は
- COR11基{R11はアルキル鎖の末端でアミノ基により置換されていてもよい(C1〜C6)アルキル基を表す}
を表す。
- 2-[2-[4-[2-メチル-3-(10H-フェノチアジン-10-イル)プロピル]-1-ピペラジニル]エトキシ]エタノール;
- 2-[4-[3-[2-(トリフルオロメチル)-10H-フェノチアジン-10-イル]プロピル]-ピペラジン-1-イル]エタノール(化合物3);
- 2-[4-[3-(2-クロロ-10H-フェノチアジン-10-イル)プロピル]ピペラジン-1-イル]エタノール(化合物1);
- 2-(4-(3-(2-クロロ-10H-フェノチアジン-10-イル)プロピル)ピペラジン-1-イル)エチルヘプタノエート;
- 2-クロロ-10-[3-(4-メチル-1-ピペラジニル)プロピル]-10H-フェノチアジン(化合物2);
- 2-[4-[3-(2-クロロ-10H-フェノチアジン-10-イル)プロピル]ピペラジン-1-イル]エチルアセテート;
- 10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-2-(トリフルオロメチル)-10H-フェノチアジン(化合物4);
- 2-(エチルチオ)-10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-10H-フェノチアジン(化合物8);
- 1-[10-[3-[4-(2-ヒドロキシエチル)ピペラジン-1-イル]プロピル]-10H-フェノチアジン-2-イル]エタノン(化合物5);
- N,N-ジメチル-10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-10H-フェノチアジン-2-スルホンアミド(化合物6);
- 1-[10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-10H-フェノチアジン-2-イル]ブタン-1-オン;及び
- 10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-10H-フェノチアジン(化合物7)
からなる群から選択される。
・Aは直鎖又は分岐鎖状(C1〜C6)アルキル鎖を表し;
・R1は、
・水素原子、
・ハロゲン原子、
・アシル基CO-R7若しくはスルホニル基SO2-R7{式中、R7は(C1〜C6)アルキル基を表す}、
・スルホンアミド基SO2-NR8R9{式中、R8及びR9は独立して、水素原子又は(C1〜C6)アルキル基を表す}、又は
・少なくとも1個のハロゲン原子により置換されていてもよい(C1〜C6)アルキル、(C1〜C6)アルコキシ、(C1〜C6)アルキルメルカプト、チオ-(C1〜C6)アルキル若しくは(C1〜C6)アルキルスルホニル基を表し;
・R1'は、水素原子又はヒドロキシル基、好ましくは水素原子を表し;
・R2、R3、R4及びR5は同一又は異なって、それぞれ、水素原子又は(C1〜C6)アルキル基を表し;
・R6は、
・水素原子、
・アルキル鎖の末端で少なくとも1個のヒドロキシル基により置換されていてもよい(C1〜C6)アルキル基、
・(C1〜C4)アルキルアシルオキシ基、
・(C1〜C4)アルキル-OR10基
を表し、式中、R10は、
- 鎖の末端で少なくとも1個のヒドロキシル基により置換されていてもよい(C1〜C4)アルキル基、又は
- COR11基{R11は、アルキル鎖の末端でアミノ基により置換されていてもよい(C1〜C6)アルキル基である}
を表す]
の化合物又はその薬学的に許容される塩の1種に関する。
・水素原子、
・ハロゲン原子、
・アシル基CO-R7又はスルホニル基SO2-R7{式中、R7は(C1〜C6)アルキル基を表す}、
・スルホンアミド基SO2-NR8R9{式中、R8及びR9は独立して、水素原子、若しくは(C1〜C6)アルキル基を表す}、又は
・少なくとも1個のハロゲン原子により置換されていてもよい(C1〜C6)アルキル、(C1〜C6)アルコキシ、(C1〜C6)アルカノイル、(C1〜C6)アルキルメルカプト、チオ-(C1〜C6)アルキル若しくは(C1〜C6)アルキルスルホニル基を表す。
・水素原子、
・ハロゲン原子、好ましくは塩素原子、
・アシル基CO-R7{式中、R7は、(C1〜C6)アルキル基、好ましくはメチル又はn-プロピル基を表す}、
・スルホンアミド基SO2-NR8R9{式中、R8及びR9は独立して、水素原子、若しくは(C1〜C6)アルキル基を表し、好ましくはR8及びR9はメチル基を表す}、
・少なくとも1個のフッ素原子により置換されていてもよい(C1〜C6)アルキル基、好ましくはトリフルオロメチル基、又は
・チオ-(C1〜C6)アルキル基、好ましくはチオ-エチル(-SCH2CH3)基を表す。
・水素原子、
・塩素原子、
・アシル基CO-R7{式中、R7はメチル又はn-プロピル基を表す}、
・スルホンアミド基SO2-NR8R9{式中、R8及びR9はメチル基を表す}、又は
・トリフルオロメチル、若しくはチオ-エチル(-SCH2CH3)基を表す。
・水素原子、
・アルキル鎖の末端で少なくとも1個のヒドロキシル基により置換されていてもよい(C1〜C6)アルキル基、
・(C1〜C4)アルキルアシルオキシ基、
・(C1〜C4)アルキル-OR10基
を表し、式中、R10は、
- 鎖の末端で少なくとも1個のヒドロキシ基により置換されていてもよい(C1〜C4)アルキル基、又は
- COR11基{R11は、アルキル鎖の末端でアミノ基により置換されていてもよい(C1〜C6)アルキル基である}
を表す。
・アルキル鎖の末端で少なくとも1個のヒドロキシル基により置換されていてもよい、(C1〜C6)アルキル基、好ましくはメチル又はエチル基、
・-OR10単位により置換されたエチル基{式中、R10は好ましくは
- アルキル鎖の末端で少なくとも1個のヒドロキシル基により置換されていてもよいエチル、又は
- COR11基{R11はアルキル鎖の末端でアミノ基により置換されていてもよい(C1〜C6)アルキル基である}
を表す}
を表す。
- 2-[2-[4-[2-メチル-3-(10H-フェノチアジン-10-イル)プロピル]-1-ピペラジニル]エトキシ]エタノール;
- 2-[4-[3-[2-(トリフルオロメチル)-10H-フェノチアジン-10-イル]プロピル]-ピペラジン-1-イル]エタノール;
- 2-[4-[3-(2-クロロ-10H-フェノチアジン-10-イル)プロピル]ピペラジン-1-イル]エタノール;
- 2-(4-(3-(2-クロロ-10H-フェノチアジン-10-イル)プロピル)ピペラジン-1-イル)エチルヘプタノエート;
- 2-クロロ-10-[3-(4-メチル-1-ピペラジニル)プロピル]-10H-フェノチアジン;
- 2-[4-[3-(2-クロロ-10H-フェノチアジン-10-イル)プロピル]ピペラジン-1-イル]エチルアセテート;
- 10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-2-(トリフルオロメチル)-10H-フェノチアジン;
- 2-(エチルチオ)-10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-10H-フェノチアジン;
- 1-[10-[3-[4-(2-ヒドロキシエチル)ピペラジン-1-イル]プロピル]-10H-フェノチアジン-2-イル]エタノン;
- N,N-ジメチル-10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-10H-フェノチアジン-2-スルホンアミド;
- 1-[10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-10H-フェノチアジン-2-イル]ブタン-1-オン;及び
- 10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-10H-フェノチアジン
からなる群から選択される。
- 2-[4-[3-[2-(トリフルオロメチル)-10H-フェノチアジン-10-イル]プロピル]-ピペラジン-1-イル]エタノール;
- 2-[4-[3-(2-クロロ-10H-フェノチアジン-10-イル)プロピル]ピペラジン-1-イル]エタノール;
- 2-クロロ-10-[3-(4-メチル-1-ピペラジニル)プロピル]-10H-フェノチアジン;
- 10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-2-(トリフルオロメチル)-10H-フェノチアジン;
- 2-(エチルチオ)-10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-10H-フェノチアジン;
- 1-[10-[3-[4-(2-ヒドロキシエチル)ピペラジン-1-イル]プロピル]-10H-フェノチアジン-2-イル]エタノン;
- N,N-ジメチル-10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-10H-フェノチアジン-2-スルホンアミド;及び
- 10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-10H-フェノチアジン
からなる群から選択される。
- 2-[4-[3-(2-クロロ-10H-フェノチアジン-10-イル)プロピル]ピペラジン-1-イル]エタノール;及び
- 2-クロロ-10-[3-(4-メチル-1-ピペラジニル)プロピル]-10H-フェノチアジン
からなる群から選択される。
本発明は、特に虚血若しくは外傷性損傷、又は圧迫症候群後の痙縮を治療するのに使用するための、開示した実施形態のいずれかを含む少なくとも1つの上記式の化合物と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物にも関する。
化合物1〜8によるカリウムクロライド共輸送体KCC2の特異的活性化。
1.材料及び方法
1.1.化合物
化合物1〜8の化学構造を図1Aに示す。化合物1〜4、6及び8はPrestwick Chemical社から購入した。化合物5はSigma Aldrich社(St Louis、MO、USA)から購入し、化合物7はSanta Cruz Biotechnology社(Dallas、TX、USA)から購入した。これらの化合物の全てをDMSO溶液(アルゴン下)中に入れ、冷凍保存して、正確に20mM濃度で供給する。
野生型又はKCC2発現型ヒト胎児由来腎臓(HEK)293細胞(提供:麻酔科教授Eric Delpire、Vanderbilt University Medical Center、Nashville、TN)を、10%FBS(Life technologies社)、50ユニット/mLペニシリン、及び50pg/mLストレプトマイシン(Life technologies社)を補充したDMEM/Ham's F-12培地(1:l)(Life technologies社、Carlsbad、CA、USA)で80〜90%コンフルエントに達するまで培養した。KCC2発現型クローンはピューロマイシン選択下に置いた(20μg/ml、Life technologies社)。
KCC2活性を評価するために、FluxOR(商標)カリウムイオンチャネルアッセイ(Life technologies社、Carlsbad、CA、USA)を、製品情報シート及び先に公開された論文(Delpireら、2009、Proc. Natl. Acad. Sci. USA、106、5383〜88頁)に概説されている通りに行い、半自動ハイスループットスクリーニングに適合した。実験は、Na+/K+ポンプ及びNKCC1共輸送体をそれぞれ遮断するために、全てのバッファー中にウアバイン200μM及びブメタニド10μMの存在下で行った。簡潔には、色素を含有するローディングバッファー中で、室温で90分(FluxOR試薬の1/2000希釈)100,000細胞/75μlの密度で懸濁細胞をインキュベートした後、遠心分離し、アッセイバッファーに同じ細胞密度で再懸濁した。いくつかの100,000細胞(75μl)を、96ウェル黒壁μclearボトムプレート(Greiner Bio-One社、Monroe、NC、USA)の各ウェルに手動で入れ、Biomek(登録商標)NX Laboratory automation workstation(Beckman Coulter社、Villepinte、フランス)を使用して、PBS1%DMSO(5、30及び50μM)中異なる濃度の化合物1〜8(5μl)をプレートに加えた。15分間のインキュベーション後、ベースライン蛍光シグナルをPolarstar omegaマイクロプレートリーダー(490nm励起及び520nm発光、BMG Labtech社)で測定した。次いで、20μL/ウェルの5×タリウム刺激用バッファー(最終濃度:Tl+:2mM、K+:10mM)を注入し、蛍光シグナルを30分後に読み取った。
刺激用バッファーにより誘発されたシグナル取得の後、PrestoBlue(登録商標)Cell Viability Reagent(Life technologies社)、細胞膜透過性レサズリンベースの溶液を製造業者の手順に従って、細胞生存率指示薬(励起/発光(nm):535〜560/590〜615)として使用した。次いで、細胞数の範囲を使用して生成した蛍光曲線を使用して、各ウェル中の生存細胞数を計算するための方程式を定義し、それによって化合物1〜8の細胞毒性を評価した。
各ウェルにつき刺激用バッファー注入の30分後に測定した蛍光値からベースライン蛍光値を差し引き、この差を細胞数に正規化した。化合物は、被処理細胞/未処理細胞シグナル比>1.10で、KCC2発現型細胞に対する選択的活性を示し、野生型細胞に対してわずかな影響を示した(被処理細胞/未処理細胞シグナル比=1±0.2)。比の最大が100%となるよう、値を百分率に換算した。
各化合物についてのFluxOR蛍光アッセイの結果を図1Cに示す。(-)は対照アッセイ(すなわち、薬物なし、DMSOのみ)を表し、細胞毒性の濃度は除外し、図1Bにおける70%までの細胞生存率についてのデータのみを考慮した。
プロクロルペラジン(2)によるKCC2発現の促進。
1.材料及び方法
1.1.細胞モデル及び細胞培養
野生型又はKCC2発現型ヒト胎児由来腎臓(HEK)293細胞(提供:麻酔科教授Eric Delpire、Vanderbilt University Medical Center、Nashville、TN)を、10%FBS(Life technologies社)、50ユニット/mLペニシリン、及び50pg/mLストレプトマイシン(Life technologies社)を補充したDMEM/Ham's F-12培地(1:l)(Life technologies社、Carlsbad、CA、USA)で80〜90%コンフルエントまで培養した。KCC2発現型クローンはピューロマイシン選択下に置いた(20μg/ml、Life technologies社)。
野生型及びKCC2発現型HEK293細胞又はNSC-34を採取し、溶解バッファー(1% Igepal CA-630、0.1%SDS、10mMピロリン酸ナトリウム、10mM NaF、10mM NaVO4、10mMヨードアセトアミド及びプロテアーゼインヒビターカクテルを含有するPBS)中でホモジナイズし、4℃で30分間18000gで遠心分離した。DCプロテインアッセイ(Bio-rad社)を使用して上清中のタンパク質濃度を決定した。同量の総タンパク質を6%又は7%SDS PAGEで分離し、PVDF膜に転写した。0.05%Tween、5%脱脂粉乳を含むトリス緩衝生理食塩水でブロッキングした後、膜をKCC2抗体(1/1000希釈、Merck-Millipore社、Billerica、MA、USA)、又は抗ホスホセリン940 KCC2(1/1000希釈、PhosphoSolutions社)又は抗Actin抗体(1/500希釈、Sigma Aldrich社)で4℃で一晩プローブした。HRPコンジュゲート抗ウサギ二次抗体を、化学発光系における検出に使用した(Thermo Scientific、Waltham、MA、USA)。シグナル強度を画像解析ソフトウェアImage lab(Bio-rad社、Hercules、CA、USA)で測定した。
HEK KCC2及びNSC-34 KCC2細胞株におけるKCC2の総発現に対するプロクロルペラジン(2)の効果(10μM)をウエスタンブロット分析によって試験した(それぞれ、図2A及び図2B)。
プロクロルペラジン(2)による電気生理学的記録及びIn vivo試験
1.材料及び方法
1.1.動物
新生仔及び成体(150〜250g)雌性Wistarラット(Charles River社、Burlington MA USA)を使用した。動物は、12時間の明暗周期の温度を管理した動物ケア施設に収容した。本発明者らは、動物の苦痛及び動物の使用数を最小限にするのに尽力した。新生仔を低体温法により麻酔した。本発明者らは、フランス法規(Ministry of Food, Agriculture and Fisheries、Division of Health and Protection of Animals)に従って実験を行った。地方のDirection of Veterinary Services及びEthical Committee(Marseille、Provence)がそれぞれ、適切なライセンスを交付し、プロトコールを承認した。
生後4日又は5日目の新生仔ラットから摘出した脊髄を脊髄根と共に切断した。簡潔には、断頭及び内臓摘出後に、冷人工脳脊髄液(ACSF;130 NaCl、4 KCl、3.75 CaCl2、1.3 MgSO4、0.58 NaH2PO4、25 NaHCO3及び10グルコースを含有(mM単位)(全ての化合物はSigma社から入手した);95%O2/5%CO2で酸素化した、pH=7.4)中で、背側椎弓切除術及び硬膜の素早い除去により脊髄を露出させた。次いで仙髄節からT8までの脊髄を、末梢神経根と共に脊柱から取り出した。次いで標本を記録チャンバーに移し、sylgard(Dow-Corning社;USA)で被覆した記録チャンバー内で標本を腹側を上にしてピンで固定し、ACSF溶液で連続的に灌流した。軟膜を除去した後、2M酢酸K(70〜100-MΩ抵抗)を充填したガラス微小電極を使用して腰髄運動ニューロン(MN)を細胞内記録した。不連続カレントクランプ(DCC)モード(Axoclamp 2B増幅器;Digidata 1200インターフェース;pClamp9ソフトウェア;Axon Instruments社、Sunnyvale、CA、USA)で細胞内電位を記録した。ガラス吸引電極を使用して、記録したものから2〜3分節吻側の同側の腹索を刺激した。そのような刺激は、DL-2-アミノ-5-ホスホノ吉草酸(DL-APV、50μM)及び6-シアノ-7-ニトロキノキサリン-2,3-ジオン(CNQX、10μM)の存在下でGABAA及びGly介在性抑制性シナプス後電位(IPSP)を誘発した(Bosら、2013;Boulenguezら、2010;Jean-Xavierら、2006)。本発明者らは、様々な保持電位(500ms長電流パルス)でIPSPを記録し、各MNについて少なくとも20個の値を収集した。IPSPの振幅を測定し、保持電位に対してプロットし、回帰直線からEIPSPを得た。
新生仔の脊髄損傷及びin vitroの電気生理学用の標本
ラットに出生時に低体温法により深く麻酔をかけた。背側正中線の皮膚切開を胸椎にかけて行い、それを覆う筋膜と筋肉を引っ込め、脊椎の背面を露出させた。部分椎弓切除術の後、脊髄をハサミでT8胸椎レベルで完全に離断した。次いで損傷部の空洞を滅菌吸収性局所止血材Surgicoll(Medical Biomaterial Products社;Neustadt-Glewe、ドイツ)で埋めた。皮膚切開を縫合糸(PDSII 6.0、Ethicon;Johnson and Johnson社;Brussels、ベルギー)で閉じ、Steri-Strips(3M Health Care社;St. Paul、MN)で覆った。外科手術全体は麻酔後に10分未満で行われた。偽手術ラットを脊髄離断を除いて同じように処置した。手術後に、新生仔は温度を35±1℃に維持した暖かい環境で45分回復させた。次いで創傷を清潔にし、ラットを暖かい環境で40分間保った後、巣に戻した。
腰椎VR及びDRの応答の細胞外電気生理学的シグナルを、ワセリンで浴から絶縁されたステンレス鋼製接触電極により記録した。データは、Clampex 10.2ソフトウェア(Molecular Devices社;Sunnyvale、CA、USA)を使用して、AC結合増幅器(帯域幅:70〜3kHz)及びDigidata 1440Aインターフェースによって取得した。
手術:ラットの胸髄節をSCIモデルとして使用した。成体雌性Wistarラット(225/250g、Charles River社)に、50mg/kgケタミン(Imalgen(登録商標)、Merial社、Duluth、Georgia、USA)及び0.25mg/kgメデトミジン(Domitor(登録商標)、Janssen Pharmaceutica社、Beerse、ベルギー)で腹腔内麻酔をかけた。抗生物質アモキシシリン(Duphamox LA(登録商標)、Pfizer社、150mg/kg)を手術前に皮下注射した。T8〜T10脊椎にわたって皮膚を縦に切り、局所麻酔剤(2%プロカイン塩酸塩、Pharmy H社、Saint-Germain-en-Laye、フランス)を筋肉内注射した後、傍脊柱筋を切開した。椎弓切除術を脊椎分節T9で行った。脊髄をマイクロ剪刀でT8脊髄分節のレベルで離断した。最後に、傍脊柱筋及び皮膚を縫合し、ラットを鎮痛のためにブプレノルフィンで処置した(麻酔から覚醒する前に1回の注射及びその後の48時間の期間にわたって更に4回の注射)。ラットの体重、体温及び水の摂取量を確認し、自律性が回復されるまで、ラットの膀胱を手で1日2回空にした。
損傷後29日目に、ケタミン麻酔(100mg/kg、i.p.)下のラットにおけるH反射を、脛骨神経刺激の付近に経皮的に挿入したステンレス鋼製針電極対を使用して、測定した。記録電極は足首の下の指屈筋に入れ、参照電極は足にs.c.で入れた。H反射は、そのベースライン値を得るために、0.2Hz 1Hz、2Hz及び5Hzの周波数で3回測定した。次いで、プロクロルペラジンジマレイン酸塩(2)(0.1%DMSO、0.9%NaCl中10μg/kg i.v.、n=6)又はそのビヒクル(0.1%DMSO、0.9%NaCl、n=5)のいずれかでラットを処置した。H反射を各20分、0.2Hz 1Hz、2Hz及び5Hzの周波数で5回測定した。
手術:ラットの胸髄片側切断をSCIモデルとして使用した。成体雌性Wistarラット(Charles River社)に、50mg/kgケタミン(Imalgen(登録商標)、Merial社、Duluth、Georgia、USA)及び0.25mg/kgメデトミジン(Domitor(登録商標)、Janssen Pharmaceutica社、Beerse、ベルギー)で腹腔内麻酔した。抗生物質アモキシシリン(Duphamox LA(登録商標)、Pfizer社、150mg/kg)を手術の前に皮下注射した。T8〜T10脊椎にわたって縦に皮膚を切り、局所麻酔剤(2%プロカイン塩酸塩、Pharmy H社、Saint-Germain-en-Laye、フランス)を筋肉内注射した後、傍脊柱筋を切開した。椎弓切除術を脊椎分節T9で実施した。脊髄を、マイクロ剪刀によってT8脊髄分節のレベルで左側で半切断した。最後に、傍脊柱筋及び皮膚を縫合し、ラットを鎮痛のためにブプレノルフィンで処置した(麻酔から覚醒する前に1回の注射及びその後の24時間の期間にわたって更に2回の注射)。アスピリンをラットの給水瓶に3日間希釈した(aspegic、150ml中200mg)。ラットの体重、体温及び水の摂取量を確認し、自律性が回復するまで、ラットの膀胱を手で1日2回空にした。
損傷後21日目に、ベースライン値を得るために、ラットをVon Freyの毛及び足底試験で1回試験した。5分後に、プロクロルペラジンジマレイン酸塩(2)(0.9%NaCl中2mg/kg ip、若しくは0.9%NaCl、0.1%DMSO中50ng/kg iv)又はそのビヒクルのいずれかでラットを処置した。実験は動物が受けた処置にブラインドであった。次いで、薬物の効果を機械的及び熱的痛覚過敏について交互に15分毎に、即ち注射後10、30、40、及び100分にそれぞれ測定した。
2.1プロクロルペラジン(2)によるEIPSPの過分極(in vitro試験)
新生仔ラットから摘出したin vitroの脊髄標本において、KCC2機能を調査する方法は、運動ニューロン(MN)を細胞内記録し、抑制性シナプス電位(EIPSP)の逆転電位により与えられるクロライド平衡電位を測定することにより提供される。EIPSPの値が過分極する程、塩化物イオンの細胞内濃度が低くなり、結果として、KCC2機能が強くなる。
本発明者らは、P5〜7ラットにおいてそれぞれ肢の屈筋及び伸筋に投射する腰髄MN(L3及びL5分節)の相互抑制に対する5、10及び20μMプロクロルペラジン(2)の効果を検討した(Nicolopoulos-Stournaras及びIles、1983)(図3D)。脊髄を出生日に横断したが、これはシナプス後抑制の強さを減少させるプロトコールである(SCIを無傷と比較)。プロクロルペラジン(2)適用の開始から20分後に測定を行った。プロクロルペラジン(2)は、用量依存的に相互抑制の強さを顕著に増加させたので、無傷の脊髄と同等の抑制が20μMのプロクロルペラジン(2)で観察された(n=6;図3D;ANOVA)。
筋電図中の神経学的に無傷及び痙性の個体の記録におけるホフマン反射(H反射)、脊髄が介在する単シナプス反射。
Von Frey試験は、脊髄損傷後のものを含め、神経障害性疼痛に対する治療の効果を評価するのに典型的に使用される。この試験は、足逃避を誘発し得る機械刺激の閾値を測定する。この閾値は脊髄損傷後にかなり低減され、慢性疼痛の構成要素である痛覚過敏を反映する。
本発明者らは、本発明の化合物が細胞モデルでカリウム/クロライド輸送(FluxORアッセイによって明らかにされたように)及びKCC2細胞の発現を増強することが可能であることを実証した。
Claims (8)
- 痙縮の治療のための使用のための、式(I):
・Aは直鎖又は分岐鎖状(C1〜C6)アルキル鎖を表し;
・R1は、
・水素原子、
・ハロゲン原子、
・アシル基CO-R7若しくはスルホニル基SO2-R7{式中、R7は(C1〜C6)アルキル基を表す}、
・スルホンアミド基SO2-NR8R9{式中、R8及びR9は独立して、水素原子又は(C1〜C6)アルキル基を表す}、又は
・少なくとも1個のハロゲン原子により置換されていてもよい(C1〜C6)アルキル、(C1〜C6)アルコキシ、(C1〜C6)アルキルメルカプト、チオ-(C1〜C6)アルキル若しくは(C1〜C6)アルキルスルホニル基を表し;
・R1'は、水素原子又はヒドロキシル基、好ましくは水素原子を表し;
・R2、R3、R4及びR5は同一又は異なって、それぞれ、水素原子又は(C1〜C6)アルキル基を表し;
・R6は、
・水素原子、
・アルキル鎖の末端で少なくとも1個のヒドロキシル基により置換されていてもよい(C1〜C6)アルキル基、
・(C1〜C4)アルキルアシルオキシ基、
・(C1〜C4)アルキル-OR10基
を表し、式中、R10は、
- 鎖の末端で少なくとも1個のヒドロキシル基により置換されていてもよい(C1〜C4)アルキル基、
- 又はCOR11基{R11は、アルキル鎖の末端でアミノ基により置換されていてもよい(C1〜C6)アルキル基である}
を表す]
の化合物又はその薬学的に許容される塩の1種。 - Aが直鎖又は分岐鎖状(C3〜C4)アルキル鎖を表す、請求項1に記載の使用のための化合物。
- R1が、
・水素原子、
・ハロゲン原子、好ましくは塩素原子、
・アシル基CO-R7{式中、R7は、(C1〜C6)アルキル基、好ましくはメチル基若しくはn-プロピル基を表す}、
・スルホンアミド基SO2-NR8R9{式中、R8及びR9は独立して、水素原子、若しくは(C1〜C6)アルキル基を表し、好ましくはR8及びR9はメチル基を表す}、
・少なくとも1個のフッ素原子により置換されていてもよい(C1〜C6)アルキル基、好ましくはトリフルオロメチル基、又は
・チオ-(C1〜C6)アルキル基、好ましくはチオ-エチル(-SCH2CH3)基
を表す、請求項1又は2に記載の使用のための化合物。 - R1'、R2、R3、R4及びR5が水素原子を表す、請求項1から3のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
- R6が、
・アルキル鎖の末端で少なくとも1個のヒドロキシル基により置換されていてもよい、(C1〜C6)アルキル基、好ましくはメチル又はエチル基、
・-OR10基により置換されたエチル基
を表し、式中、R10は、
- 鎖の末端で少なくとも1個のヒドロキシル基により置換されていてもよいエチル基、又は
- COR11基{R11はアルキル鎖の末端でアミノ基により置換されていてもよい(C1〜C6)アルキル基である}
を表す、請求項1から4のいずれか一項に記載の使用のための化合物。 - 前記化合物が、
- 2-[2-[4-[2-メチル-3-(10H-フェノチアジン-10-イル)プロピル]-1-ピペラジニル]エトキシ]エタノール;
- 2-[4-[3-[2-(トリフルオロメチル)-10H-フェノチアジン-10-イル]プロピル]-ピペラジン-1-イル]エタノール;
- 2-[4-[3-(2-クロロ-10H-フェノチアジン-10-イル)プロピル]ピペラジン-1-イル]エタノール;
- 2-(4-(3-(2-クロロ-10H-フェノチアジン-10-イル)プロピル)ピペラジン-1-イル)エチルヘプタノエート;
- 2-クロロ-10-[3-(4-メチル-1-ピペラジニル)プロピル]-10H-フェノチアジン;
- 2-[4-[3-(2-クロロ-10H-フェノチアジン-10-イル)プロピル]ピペラジン-1-イル]エチルアセテート;
- 10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-2-(トリフルオロメチル)-10H-フェノチアジン;
- 2-(エチルチオ)-10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-10H-フェノチアジン;
- 1-[10-[3-[4-(2-ヒドロキシエチル)ピペラジン-1-イル]プロピル]-10H-フェノチアジン-2-イル]エタノン;
- N,N-ジメチル-10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-10H-フェノチアジン-2-スルホンアミド;
- 1-[10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-10H-フェノチアジン-2-イル]ブタン-1-オン;及び
- 10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-10H-フェノチアジン
からなる群から選択される、請求項1から5のいずれか一項に記載の使用のための化合物。 - 前記化合物が、
- 2-[4-[3-[2-(トリフルオロメチル)-10H-フェノチアジン-10-イル]プロピル]-ピペラジン-1-イル]エタノール;
- 2-[4-[3-(2-クロロ-10H-フェノチアジン-10-イル)プロピル]ピペラジン-1-イル]エタノール;
- 2-クロロ-10-[3-(4-メチル-1-ピペラジニル)プロピル]-10H-フェノチアジン;
- 10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-2-(トリフルオロメチル)-10H-フェノチアジン;
- 2-(エチルチオ)-10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-10H-フェノチアジン;
- 1-[10-[3-[4-(2-ヒドロキシエチル)ピペラジン-1-イル]プロピル]-10H-フェノチアジン-2-イル]エタノン;
- N,N-ジメチル-10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-10H-フェノチアジン-2-スルホンアミド;及び
- 10-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロピル]-10H-フェノチアジン
からなる群から選択される、請求項1から5のいずれか一項に記載の使用のための化合物。 - 虚血若しくは外傷性損傷、又は圧迫症候群後の痙縮を治療するための、請求項1から7のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP14305345 | 2014-03-10 | ||
EP14305345.2 | 2014-03-10 | ||
PCT/EP2015/054973 WO2015135947A1 (en) | 2014-03-10 | 2015-03-10 | Piperazine phenothiazine derivatives for treating spasticity |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2017507977A true JP2017507977A (ja) | 2017-03-23 |
Family
ID=50289606
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016557029A Pending JP2017507977A (ja) | 2014-03-10 | 2015-03-10 | 痙縮を治療するためのピペラジンフェノチアジン誘導体 |
Country Status (4)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9814727B2 (ja) |
EP (1) | EP3116495B1 (ja) |
JP (1) | JP2017507977A (ja) |
WO (1) | WO2015135947A1 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2021525707A (ja) * | 2018-05-25 | 2021-09-27 | ザ チルドレンズ メディカル センター コーポレーション | 脊髄損傷を処置するための方法 |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9695138B1 (en) | 2016-10-17 | 2017-07-04 | Acenda Pharma, Inc. | Phenothiazine derivatives and methods of use thereof |
WO2018217766A1 (en) * | 2017-05-22 | 2018-11-29 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Kcc2 expression enhancing compounds and uses thereof |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AT201598B (de) * | 1956-08-01 | 1959-01-10 | Rhone Poulenc Sa | Verfahren zur Herstellung von neuen Phenthiazinderivaten |
US2928767A (en) * | 1957-07-17 | 1960-03-15 | Smith Kline French Lab | Stabilized phenothiazine preparations |
DE1090667B (de) * | 1956-04-18 | 1960-10-13 | Sandoz Ag | Verfahren zur Herstellung von basischen Phenthiazinderivaten |
US3885034A (en) * | 1955-09-07 | 1975-05-20 | Bayer Ag | Phenothiazine derivatives in the treatment of psychotic persons |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3857943A (en) * | 1969-03-27 | 1974-12-31 | May & Baker Ltd | New phenothiazine derivatives in the treatment of spasticity of muscles |
US20100113563A1 (en) | 2004-01-30 | 2010-05-06 | Zaijie Wang | Method for Treating Pain with a Calmodulin Inhibitor |
PT1470818E (pt) | 2003-04-25 | 2006-11-30 | Neuro3D | Utilização de derivados de fenotiazina piperazina no fabrico de um medicamento com efeitos neuroprotectores e/ou neurotróficos no cns e/ou pns |
RU2537226C2 (ru) | 2008-02-18 | 2014-12-27 | Лабораторьос Дель Др. Эстеве, С.А. | Применение соединений, связывающихся с лигандами сигма-рецептора, для лечения развития невропатической боли вследствие химиотерапии |
-
2015
- 2015-03-10 WO PCT/EP2015/054973 patent/WO2015135947A1/en active Application Filing
- 2015-03-10 JP JP2016557029A patent/JP2017507977A/ja active Pending
- 2015-03-10 US US15/124,510 patent/US9814727B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2015-03-10 EP EP15708550.7A patent/EP3116495B1/en active Active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3885034A (en) * | 1955-09-07 | 1975-05-20 | Bayer Ag | Phenothiazine derivatives in the treatment of psychotic persons |
DE1090667B (de) * | 1956-04-18 | 1960-10-13 | Sandoz Ag | Verfahren zur Herstellung von basischen Phenthiazinderivaten |
AT201598B (de) * | 1956-08-01 | 1959-01-10 | Rhone Poulenc Sa | Verfahren zur Herstellung von neuen Phenthiazinderivaten |
US2928767A (en) * | 1957-07-17 | 1960-03-15 | Smith Kline French Lab | Stabilized phenothiazine preparations |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2021525707A (ja) * | 2018-05-25 | 2021-09-27 | ザ チルドレンズ メディカル センター コーポレーション | 脊髄損傷を処置するための方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US9814727B2 (en) | 2017-11-14 |
WO2015135947A1 (en) | 2015-09-17 |
US20170014421A1 (en) | 2017-01-19 |
EP3116495A1 (en) | 2017-01-18 |
EP3116495B1 (en) | 2019-11-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
TWI452039B (zh) | 抗神經變性疾病用劑 | |
Brocard et al. | Cleavage of Na+ channels by calpain increases persistent Na+ current and promotes spasticity after spinal cord injury | |
US20200338097A1 (en) | Use of a heterocyclic bcl-2 inhibitor for removing senescent cells and treating senescence-associated conditions | |
JP6723222B2 (ja) | 関節病態の治療 | |
US20040077591A1 (en) | Histone deacetylase inhibitors for the treatment of multiple sclerosis, amyotrophic lateral sclerosis and Alzheimer's Disease | |
JP2010504338A (ja) | 筋萎縮性側索硬化症(ALS)の治療のための水素化ピリド[4,3−b]インドール | |
EA028343B1 (ru) | Лечение дегенеративного заболевания сустава | |
JP2020530847A (ja) | プリドピジンによる筋萎縮性側索硬化症の治療方法 | |
KR20020008847A (ko) | 1-[4-(5-시아노인돌-3-일)부틸]-4-(2-카바모일-벤조푸란-5-일)-피페라진 및 그의 생리학적으로 허용가능한 염의신규한 용도 | |
EA030333B1 (ru) | Способ лечения и/или предотвращения расстройств настроения | |
CN112773765A (zh) | 治疗普拉德-威利综合征的方法 | |
JP2017507977A (ja) | 痙縮を治療するためのピペラジンフェノチアジン誘導体 | |
KR20190019171A (ko) | 섬유증 치료에서 사용하기 위한 wnt 억제제 | |
JP2009534415A (ja) | ニューロトロフィン発現に対するampa受容体モジュレーターの作用の薬理学的制御 | |
KR20170045353A (ko) | 요실금 예방용 및/또는 치료용의 신규한 의약 조성물 | |
CA3168610A1 (en) | Masitinib for the treatment of a multiple sclerosis patient subpopulation | |
US20220144904A1 (en) | Composition for and Method of Improving Tissue Performance | |
JP2007519709A (ja) | 神経接続欠陥、例えば精神分裂病及び自閉症の治療においてエポチロン(epothilone)を使用する方法 | |
AU754719B2 (en) | Method of treating neurodegenerative diseases | |
KR102576433B1 (ko) | 노화-관련 질환 및/또는 퇴행성 질환에 사용하는 약제학적 결합물 | |
JP2019509296A (ja) | 筋萎縮性側索硬化症を防止および/またはこれと戦うためのポリリジン化合物の多重錯化合物 | |
JP6559357B2 (ja) | ブチリデンフタリドの使用 | |
KR20210102208A (ko) | 신경계 질환의 치료 | |
JP7478895B1 (ja) | 痒みの予防又は改善剤 | |
JP7478894B1 (ja) | 痒みの予防又は改善剤 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20180301 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20181029 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20181025 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20190117 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190423 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20190909 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20191203 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20200525 |