JP2017140051A5 - - Google Patents

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  1. N末端からC末端へと
    (a)短縮型セリンプロテアーゼ
    (b)抗体重鎖定常(Fc)ドメイン;および
    (c)細胞標的化scFv抗体ドメイン
    を含む細胞標的化構築物。
  2. 前記短縮型セリンプロテアーゼが、配列番号1と少なくとも80%同一であるグランザイムB(GrB)ポリペプチドである、請求項1に記載の細胞標的化構築物。
  3. 前記GrBポリペプチドが、以下の特徴:
    (a)Asp37に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失;
    (b)Asn51に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失;
    (c)Asn84に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失;
    (d)Arg96に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失;
    (e)Arg100に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失;
    (f)Arg102に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失;
    (g)Asp150に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失;
    (h)Arg201に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失;
    (i)Cys210に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失;
    (j)Lys221に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失;
    (k)Lys222に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失;
    (l)Lys225に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失;または
    (m)Arg226に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失
    の1つまたは複数を含む、請求項2に記載の細胞標的化構築物。
  4. Cys210に対応する位置におけるアミノ酸置換もしくは欠失を含む、請求項3に記載の細胞標的化構築物。
  5. Cys210に対応する位置においてAlaアミノ酸を含む、請求項4に記載の細胞標的化構築物。
  6. 前記Fcドメインが、ヒトIgG Fcドメインである、請求項1に記載の細胞標的化構築物。
  7. 前記Fcドメインが、ヒトIgG1 Fcドメインである、請求項6に記載の細胞標的化構築物。
  8. 前記scFvドメインが、GP240、5T4、HER1、HER2、CD−33、CD−38、VEGFR−1、VEGFR−2、CEA、FGFR3、IGFBP2、Fn14またはIGF−1Rに結合する、請求項1に記載の細胞標的化構築物。
  9. 前記scFvドメインが、GP240、Fn14またはHER2に結合する、請求項8に記載の細胞標的化構築物。
  10. 前記scFvドメインがGP240に結合する、請求項9に記載の細胞標的化構築物。
  11. 前記scFvがscFvMELである、請求項10に記載の細胞標的化構築物。
  12. 前記scFvドメインがHER2に結合する、請求項9に記載の細胞標的化構築物。
  13. 前記scFvが4D5である、請求項12に記載の細胞標的化構築物。
  14. 前記scFvドメインがFn14に結合する、請求項9に記載の細胞標的化構築物。
  15. 前記scFvがIT4である、請求項14に記載の細胞標的化構築物。
  16. 前記scFvドメインが、配列番号45と少なくとも90%同一である配列を含む、請求項14に記載の細胞標的化構築物。
  17. 前記GrBコード配列が、Lys27およびArg28に対応する位置におけるアミノ酸置換を含む、請求項2に記載の細胞標的化構築物。
  18. Lys27およびArg28に対応する位置における前記アミノ酸置換が、K27EまたはK27LおよびR28Aである、請求項17に記載の細胞標的化構築物。
  19. 前記GrBコード配列が、 82 PKN 84 に対応する位置において置換された配列PVPNを含む、請求項2に記載の細胞標的化構築物。
  20. 請求項1〜19のいずれか一項に記載の細胞標的化構築物を薬学的に許容される担体中に含む組成物。
  21. 請求項1〜19のいずれか一項に記載の細胞標的化構築物をコードする核酸配列を含むポリヌクレオチド分子。
  22. 請求項21に記載のポリヌクレオチド分子を含む宿主細胞。
  23. 請求項1〜19のいずれか一項に記載の細胞標的化構築物を発現する、請求項22に記載の宿主細胞。
  24. 哺乳動物細胞、酵母細胞、細菌細胞、繊毛虫細胞または昆虫細胞である、請求項22に記載の宿主細胞。
  25. ポリペプチドを製造する方法であって、
    (a)請求項21に記載のポリヌクレオチド分子を、コードされるポリペプチドを産生する条件下で細胞において発現させるステップ、および
    (b)該ポリペプチドを該細胞から精製するステップ
    を含む方法。
  26. 細胞増殖性疾患を有する被験体の処置において使用するための、請求項1〜19のいずれか一項に記載の細胞標的化構築物を含む組成物。
  27. 前記細胞増殖性疾患が自己免疫疾患である、請求項26に記載の組成物。
  28. 前記細胞増殖性疾患ががんまたは前がん状態である、請求項26に記載の組成物。
  29. 前記がんが、肺がん、乳がん、脳がん、前立腺がん、脾臓がん、膵臓がん、子宮頸部がん、卵巣がん、頭頸部がん、食道がん、肝臓がん、皮膚がん、腎臓がん、白血病、骨がん、精巣がん、結腸がん、または膀胱がんである、請求項28に記載の組成物。
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