JP2016528233A5 - - Google Patents

Claims (20)

1. アポリポタンパク質Ａ−Ｉ（Ａｐｏ Ａ−Ｉ）を精製するための方法であって、
   ａ）Ａｐｏ Ａ−Ｉと塩酸グアニジン（ＧｕＨＣｌ）とを含む溶液を用意する工程；および
   ｂ）該溶液を１５ｎｍ〜３５ｎｍの範囲の孔径を有するフィルターを通して濾過する工程
   を含む前記方法。
2. 溶液は、５〜３０ｇ／Ｌ、または５〜２０ｇ／Ｌ、または７〜１２ｇ／Ｌの範囲内のＡｐｏ Ａ−Ｉタンパク質濃度を含む、請求項１に記載の方法。
3. 溶液は、Ａｐｏ Ａ−Ｉの凝集を減少させるまたは阻害する濃度でＧｕＨＣｌを含む、請求項１または２に記載の方法。
4. 溶液は、１．３〜３．２Ｍ、または１．５〜２．０Ｍの範囲内の濃度でＧｕＨＣｌを含む、請求項３に記載の方法。
5. 溶液のｐＨは、７．１〜７．５の範囲内である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
6. 濾過は、０．２〜３．４バールの範囲内の圧力、および１８〜２６℃の範囲内の温度で実行される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
7. 溶液は、
   １）Ａｐｏ Ａ−Ｉ沈殿物を４．０〜４．６ＭのＧｕＨＣｌに懸濁する工程；ならびに／または
   ２）該懸濁物を５〜３０ｇ／Ｌの範囲内のＡｐｏ Ａ−Ｉタンパク質濃度および／もしくは１．３Ｍ〜３．２Ｍの範囲内のＧｕＨＣｌ濃度に希釈する工程
   の１つまたはそれ以上によって調製される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
8. 工程ａ）の前に、ウイルス不活化のために熱処理工程が実行される、または工程ｂ）の後に、ウイルス不活化のために熱処理工程が実行される、請求項１または７に記載の方法。
9. 熱処理は、
   溶液のｐＨを６．６〜８．０の範囲内に調節する工程；および続けて
   該溶液を５５〜６１℃の温度で約３０分〜約４時間加熱する工程
   を含む、請求項８に記載の方法。
10. ｐＨが６．６〜８．０の範囲内である溶液は、２．７Ｍ〜３．９Ｍの範囲内の濃度のＧｕＨＣｌを含む、請求項９に記載の方法。
11. ｐＨが６．６〜８．０の範囲内である溶液のｐＨは、７．０〜８．０の範囲内である、請求項９または１０に記載の方法。
12. ｐＨが６．６〜８．０の範囲内である溶液は、
    １）Ａｐｏ Ａ−Ｉ沈殿物を４．０〜４．６ＭのＧｕＨＣｌに懸濁する工程；ならびに
    ２）ＧｕＨＣｌ濃度を２．７Ｍ〜３．９Ｍの範囲内に、およびｐＨを６．６〜８．０の範囲内に調節する工程
    によって調製される、請求項９〜１１のいずれか１項に記載の方法。
13. 請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法によって精製されたＡｐｏ Ａ−Ｉ。
14. Ａｐｏ Ａ−Ｉ調製物であって、
    パルボウイルスに対して少なくとも１２ｌｏｇ ＬＲＶ（対数減少値）；および／またはノンエンベロープウイルスに対して少なくとも９ｌｏｇ ＬＲＶ；および／または
    脂質エンベロープウイルスに対して少なくとも８．５ｌｏｇ ＬＲＶ
    を有する前記Ａｐｏ Ａ−Ｉ調製物。
15. ｒＨＤＬ製剤であって、請求項１３に記載のＡｐｏ Ａ−Ｉまたは請求項１４に記載のＡｐｏ Ａ−Ｉ調製物；および脂質を含む前記ｒＨＤＬ製剤。
16. 再構成ＨＤＬ製剤を製造する方法であって、
    請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法によりＡｐｏ Ａ−Ｉを製造する工程；および
    Ａｐｏ Ａ−１を脂質と組み合わせ；または請求項１４に記載のＡｐｏ Ａ−Ｉ調製物を脂質と組み合わせ；それにより再構成ＨＤＬ製剤を製造する工程
    を含む前記方法。
17. ｒＨＤＬ製剤は、さらに界面活性剤を含む、請求項１５に記載のｒＨＤＬ製剤または請求項１６に記載の方法。
18. 界面活性剤は、コール酸ナトリウムである、請求項１７に記載のｒＨＤＬ製剤または方法。
19. 脂質は、ホスファチジルコリンである、請求項１５、１７もしくは１８のいずれか１項に記載のｒＨＤＬ製剤または請求項１６〜１８のいずれか１項に記載の方法。
20. Ａｐｏ Ａ−Ｉと脂質との比率は、１：４０〜１：７５（ｍｏｌ：ｍｏｌ）であり、
    コール酸ナトリウムは、０．５〜１．５ｇ／Ｌの濃度で存在する、
    請求項１９に記載のｒＨＤＬ製剤または方法。