JP2016528193A - ホモ接合性家族性高コレステロール血症の治療方法 - Google Patents
ホモ接合性家族性高コレステロール血症の治療方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2016528193A JP2016528193A JP2016523717A JP2016523717A JP2016528193A JP 2016528193 A JP2016528193 A JP 2016528193A JP 2016523717 A JP2016523717 A JP 2016523717A JP 2016523717 A JP2016523717 A JP 2016523717A JP 2016528193 A JP2016528193 A JP 2016528193A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- seq
- sequence
- amino acid
- acid sequence
- pcsk9
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 151
- 206010045261 Type IIa hyperlipidaemia Diseases 0.000 title claims abstract description 45
- 208000030673 Homozygous familial hypercholesterolemia Diseases 0.000 title claims abstract description 44
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 342
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 303
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 262
- 238000008214 LDL Cholesterol Methods 0.000 claims description 257
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 claims description 152
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 27
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 18
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims 2
- 102100038955 Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 Human genes 0.000 abstract description 10
- 101710180553 Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 Proteins 0.000 abstract description 7
- 108091000831 antigen binding proteins Proteins 0.000 description 483
- 102000025171 antigen binding proteins Human genes 0.000 description 483
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 164
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 149
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 146
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 143
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 140
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 140
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 136
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 130
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 103
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 97
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 96
- 108010001831 LDL receptors Proteins 0.000 description 93
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 93
- 102000000853 LDL receptors Human genes 0.000 description 92
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 89
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 79
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 79
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 78
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 78
- 229940107161 cholesterol Drugs 0.000 description 69
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 65
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 55
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 53
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 49
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 48
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 48
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 47
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 46
- 102100040202 Apolipoprotein B-100 Human genes 0.000 description 40
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 38
- 101710095342 Apolipoprotein B Proteins 0.000 description 37
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 35
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 34
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 34
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 33
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 31
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 31
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 30
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 30
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 30
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 29
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 29
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 29
- 101001098868 Homo sapiens Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 Proteins 0.000 description 26
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 26
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 23
- 102000053786 human PCSK9 Human genes 0.000 description 23
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 23
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 22
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 21
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 21
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 21
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 21
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 21
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 20
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 19
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 19
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 19
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 19
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 19
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 18
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 17
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 17
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 17
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 17
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 16
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 16
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 16
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 16
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 16
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- 229940121710 HMGCoA reductase inhibitor Drugs 0.000 description 15
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 15
- 241000894007 species Species 0.000 description 15
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 15
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 15
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 14
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 14
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 14
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 108020005243 folate receptor Proteins 0.000 description 14
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 14
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 14
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 14
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 14
- 102200057382 rs137852912 Human genes 0.000 description 14
- 102100039160 Amiloride-sensitive amine oxidase [copper-containing] Human genes 0.000 description 13
- 108010089417 Sex Hormone-Binding Globulin Proteins 0.000 description 13
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 13
- 230000006870 function Effects 0.000 description 13
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 13
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 13
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 13
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 13
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 13
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 12
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 12
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 12
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 12
- -1 phospho Chemical class 0.000 description 12
- XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N taurine Chemical compound NCCS(O)(=O)=O XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000012384 transportation and delivery Methods 0.000 description 12
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 11
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 11
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 11
- 230000008859 change Effects 0.000 description 11
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 11
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 11
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 11
- 239000002471 hydroxymethylglutaryl coenzyme A reductase inhibitor Substances 0.000 description 11
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 11
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 11
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 11
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 11
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 11
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 10
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 10
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 10
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 10
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 10
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 10
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 10
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 10
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 10
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 10
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 10
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 10
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 10
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 10
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 9
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 9
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 9
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 9
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 9
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 9
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 9
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 9
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 9
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 9
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 9
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 9
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 8
- 208000035150 Hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 8
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 8
- 238000012452 Xenomouse strains Methods 0.000 description 8
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 8
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 8
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 8
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 8
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 8
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 8
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 8
- 210000004896 polypeptide structure Anatomy 0.000 description 8
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 8
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 8
- 230000004044 response Effects 0.000 description 8
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 8
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 8
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 8
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 8
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical group COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 7
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 7
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 7
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 7
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 7
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 7
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 7
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 7
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 7
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 7
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 7
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 7
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 7
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 7
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- 108010087904 neutravidin Proteins 0.000 description 7
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 7
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 7
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 7
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 7
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- 101100135848 Mus musculus Pcsk9 gene Proteins 0.000 description 6
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 6
- 238000004422 calculation algorithm Methods 0.000 description 6
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 description 6
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 6
- OLNTVTPDXPETLC-XPWALMASSA-N ezetimibe Chemical compound N1([C@@H]([C@H](C1=O)CC[C@H](O)C=1C=CC(F)=CC=1)C=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(F)C=C1 OLNTVTPDXPETLC-XPWALMASSA-N 0.000 description 6
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 6
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 6
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 6
- 229960002743 glutamine Drugs 0.000 description 6
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 6
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 6
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 6
- 229960003080 taurine Drugs 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 5
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 5
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 5
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 5
- 125000000174 L-prolyl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(*)=O 0.000 description 5
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 5
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 5
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 5
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 5
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 5
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 5
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 5
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 5
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 5
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 5
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 5
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 5
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 5
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 5
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 5
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 5
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- VTAKZNRDSPNOAU-UHFFFAOYSA-M 2-(chloromethyl)oxirane;hydron;prop-2-en-1-amine;n-prop-2-enyldecan-1-amine;trimethyl-[6-(prop-2-enylamino)hexyl]azanium;dichloride Chemical compound Cl.[Cl-].NCC=C.ClCC1CO1.CCCCCCCCCCNCC=C.C[N+](C)(C)CCCCCCNCC=C VTAKZNRDSPNOAU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 229920001268 Cholestyramine Polymers 0.000 description 4
- 229920002905 Colesevelam Polymers 0.000 description 4
- 229920002911 Colestipol Polymers 0.000 description 4
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 4
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 4
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 4
- HEMJJKBWTPKOJG-UHFFFAOYSA-N Gemfibrozil Chemical compound CC1=CC=C(C)C(OCCCC(C)(C)C(O)=O)=C1 HEMJJKBWTPKOJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010070675 Glutathione transferase Proteins 0.000 description 4
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 4
- 102100029100 Hematopoietic prostaglandin D synthase Human genes 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 4
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 4
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 4
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 4
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 4
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 4
- 239000002585 base Substances 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 4
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 4
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 4
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 4
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 4
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 4
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 4
- YMTINGFKWWXKFG-UHFFFAOYSA-N fenofibrate Chemical compound C1=CC(OC(C)(C)C(=O)OC(C)C)=CC=C1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 YMTINGFKWWXKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 4
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 4
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 4
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 4
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 4
- 235000014304 histidine Nutrition 0.000 description 4
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 4
- NXFFJDQHYLNEJK-CYBMUJFWSA-N laropiprant Chemical compound C=1([C@@H](CC(O)=O)CCC=1C=1C=C(F)C=C(C2=1)S(=O)(=O)C)N2CC1=CC=C(Cl)C=C1 NXFFJDQHYLNEJK-CYBMUJFWSA-N 0.000 description 4
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 4
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 4
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 4
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 4
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 4
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 4
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 3
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 3
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 3
- 108091029865 Exogenous DNA Proteins 0.000 description 3
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 3
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 3
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 3
- 208000000563 Hyperlipoproteinemia Type II Diseases 0.000 description 3
- 101710172072 Kexin Proteins 0.000 description 3
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PCZOHLXUXFIOCF-UHFFFAOYSA-N Monacolin X Natural products C12C(OC(=O)C(C)CC)CC(C)C=C2C=CC(C)C1CCC1CC(O)CC(=O)O1 PCZOHLXUXFIOCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004988 N-glycosylation Effects 0.000 description 3
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 3
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 3
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 3
- 229940127226 anticholesterol agent Drugs 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 3
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 3
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 3
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 3
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 3
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 3
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 3
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 3
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 3
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 3
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 3
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 3
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 3
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 3
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 210000003000 inclusion body Anatomy 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 3
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 3
- 229960004844 lovastatin Drugs 0.000 description 3
- PCZOHLXUXFIOCF-BXMDZJJMSA-N lovastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 PCZOHLXUXFIOCF-BXMDZJJMSA-N 0.000 description 3
- QLJODMDSTUBWDW-UHFFFAOYSA-N lovastatin hydroxy acid Natural products C1=CC(C)C(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C2C(OC(=O)C(C)CC)CC(C)C=C21 QLJODMDSTUBWDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 3
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 3
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 3
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 description 3
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 3
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 3
- RYMZZMVNJRMUDD-HGQWONQESA-N simvastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)C(C)(C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 RYMZZMVNJRMUDD-HGQWONQESA-N 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 3
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 3
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 3
- 229920003169 water-soluble polymer Polymers 0.000 description 3
- 229940051223 zetia Drugs 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical group N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- ZGGHKIMDNBDHJB-NRFPMOEYSA-M (3R,5S)-fluvastatin sodium Chemical compound [Na+].C12=CC=CC=C2N(C(C)C)C(\C=C\[C@@H](O)C[C@@H](O)CC([O-])=O)=C1C1=CC=C(F)C=C1 ZGGHKIMDNBDHJB-NRFPMOEYSA-M 0.000 description 2
- ILPUOPPYSQEBNJ-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-2-phenoxypropanoic acid Chemical compound OC(=O)C(C)(C)OC1=CC=CC=C1 ILPUOPPYSQEBNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 2-phenylethanol Chemical compound OCCC1=CC=CC=C1 WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010025188 Alcohol oxidase Proteins 0.000 description 2
- 108010032595 Antibody Binding Sites Proteins 0.000 description 2
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 2
- XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N Atorvastatin Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N 0.000 description 2
- XUKUURHRXDUEBC-UHFFFAOYSA-N Atorvastatin Natural products C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 229940122502 Cholesterol absorption inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 2
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 2
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 2
- DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N Glucagon-like peptide 1 Chemical class C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N 0.000 description 2
- 229920000209 Hexadimethrine bromide Polymers 0.000 description 2
- 101000889953 Homo sapiens Apolipoprotein B-100 Proteins 0.000 description 2
- 101000935587 Homo sapiens Flavin reductase (NADPH) Proteins 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 2
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 2
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 108010028554 LDL Cholesterol Proteins 0.000 description 2
- 101710122864 Major tegument protein Proteins 0.000 description 2
- 102100031545 Microsomal triglyceride transfer protein large subunit Human genes 0.000 description 2
- 102000004140 Oncostatin M Human genes 0.000 description 2
- 108090000630 Oncostatin M Proteins 0.000 description 2
- 101150094724 PCSK9 gene Proteins 0.000 description 2
- 229940124754 PPAR-alpha/gamma agonist Drugs 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 229940080774 Peroxisome proliferator-activated receptor gamma agonist Drugs 0.000 description 2
- 101710182846 Polyhedrin Proteins 0.000 description 2
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 2
- 229920001219 Polysorbate 40 Polymers 0.000 description 2
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 2
- TUZYXOIXSAXUGO-UHFFFAOYSA-N Pravastatin Natural products C1=CC(C)C(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C2C(OC(=O)C(C)CC)CC(O)C=C21 TUZYXOIXSAXUGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000006437 Proprotein Convertases Human genes 0.000 description 2
- 108010044159 Proprotein Convertases Proteins 0.000 description 2
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 2
- 238000011579 SCID mouse model Methods 0.000 description 2
- RYMZZMVNJRMUDD-UHFFFAOYSA-N SJ000286063 Natural products C12C(OC(=O)C(C)(C)CC)CC(C)C=C2C=CC(C)C1CCC1CC(O)CC(=O)O1 RYMZZMVNJRMUDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AJLFOPYRIVGYMJ-UHFFFAOYSA-N SJ000287055 Natural products C12C(OC(=O)C(C)CC)CCC=C2C=CC(C)C1CCC1CC(O)CC(=O)O1 AJLFOPYRIVGYMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 2
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 2
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 2
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000256251 Spodoptera frugiperda Species 0.000 description 2
- 108090000787 Subtilisin Proteins 0.000 description 2
- 229940100389 Sulfonylurea Drugs 0.000 description 2
- 101710199973 Tail tube protein Proteins 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- 241000723873 Tobacco mosaic virus Species 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 2
- 101000980463 Treponema pallidum (strain Nichols) Chaperonin GroEL Proteins 0.000 description 2
- 241000255985 Trichoplusia Species 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 2
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 2
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 2
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 2
- 239000003529 anticholesteremic agent Substances 0.000 description 2
- 239000003472 antidiabetic agent Substances 0.000 description 2
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 description 2
- 210000001106 artificial yeast chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229960005370 atorvastatin Drugs 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000080 bile acid sequestrant Polymers 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 2
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 2
- RYYVLZVUVIJVGH-UHFFFAOYSA-N caffeine Chemical compound CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N=CN2C RYYVLZVUVIJVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 description 2
- 229960005110 cerivastatin Drugs 0.000 description 2
- SEERZIQQUAZTOL-ANMDKAQQSA-N cerivastatin Chemical compound COCC1=C(C(C)C)N=C(C(C)C)C(\C=C\[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)=C1C1=CC=C(F)C=C1 SEERZIQQUAZTOL-ANMDKAQQSA-N 0.000 description 2
- 230000003196 chaotropic effect Effects 0.000 description 2
- TZRFSLHOCZEXCC-HIVFKXHNSA-N chembl2219536 Chemical compound N1([C@H]2C[C@@H]([C@H](O2)COP(O)(=O)S[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=O)S[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(=O)S[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C(C)=C2)=O)COP(O)(=O)S[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(=O)S[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=O)S[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)COP(O)(=O)S[C@H]2[C@H]([C@@H](O[C@@H]2COP(O)(=O)S[C@H]2[C@H]([C@@H](O[C@@H]2COP(O)(=O)S[C@H]2[C@H]([C@@H](O[C@@H]2COP(O)(=O)S[C@H]2[C@H]([C@@H](O[C@@H]2COP(O)(=O)S[C@H]2[C@H]([C@@H](O[C@@H]2CO)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OCCOC)N2C(N=C(N)C(C)=C2)=O)OCCOC)N2C(N=C(N)C(C)=C2)=O)OCCOC)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OCCOC)N2C(N=C(N)C(C)=C2)=O)OCCOC)SP(O)(=O)OC[C@H]2O[C@H](C[C@@H]2SP(O)(=O)OC[C@H]2O[C@H](C[C@@H]2SP(O)(=O)OC[C@H]2O[C@H](C[C@@H]2SP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H]([C@@H](O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OCCOC)SP(O)(=O)OC[C@H]2[C@@H]([C@@H]([C@H](O2)N2C(N=C(N)C(C)=C2)=O)OCCOC)SP(O)(=O)OC[C@H]2[C@@H]([C@@H]([C@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)OCCOC)SP(O)(=O)OC[C@H]2[C@@H]([C@@H]([C@H](O2)N2C(N=C(N)C(C)=C2)=O)OCCOC)SP(O)(=O)OC[C@H]2[C@H](O)[C@@H]([C@H](O2)N2C(N=C(N)C(C)=C2)=O)OCCOC)N2C(N=C(N)C(C)=C2)=O)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)C=C(C)C(N)=NC1=O TZRFSLHOCZEXCC-HIVFKXHNSA-N 0.000 description 2
- 239000003354 cholesterol ester transfer protein inhibitor Substances 0.000 description 2
- 229940125881 cholesteryl ester transfer protein inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 229960001152 colesevelam Drugs 0.000 description 2
- 229940097479 colestid Drugs 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 2
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 2
- ORTQZVOHEJQUHG-UHFFFAOYSA-L copper(II) chloride Chemical compound Cl[Cu]Cl ORTQZVOHEJQUHG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000006184 cosolvent Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 2
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 2
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 2
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 2
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 229960002297 fenofibrate Drugs 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- 229960003765 fluvastatin Drugs 0.000 description 2
- 238000002825 functional assay Methods 0.000 description 2
- 229960003627 gemfibrozil Drugs 0.000 description 2
- 229940049906 glutamate Drugs 0.000 description 2
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 2
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N guanidine group Chemical group NC(=N)N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 2
- 239000013628 high molecular weight specie Substances 0.000 description 2
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 2
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 2
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 2
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229950008292 laropiprant Drugs 0.000 description 2
- 238000000670 ligand binding assay Methods 0.000 description 2
- 229940063720 lopid Drugs 0.000 description 2
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 2
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229950009116 mevastatin Drugs 0.000 description 2
- AJLFOPYRIVGYMJ-INTXDZFKSA-N mevastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=CCC[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 AJLFOPYRIVGYMJ-INTXDZFKSA-N 0.000 description 2
- BOZILQFLQYBIIY-UHFFFAOYSA-N mevastatin hydroxy acid Natural products C1=CC(C)C(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C2C(OC(=O)C(C)CC)CCC=C21 BOZILQFLQYBIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 2
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 2
- 229960004778 mipomersen Drugs 0.000 description 2
- 108091060283 mipomersen Proteins 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 210000000066 myeloid cell Anatomy 0.000 description 2
- GACQNVJDWUAPFY-UHFFFAOYSA-N n'-[2-[2-(2-aminoethylamino)ethylamino]ethyl]ethane-1,2-diamine;hydrochloride Chemical compound Cl.NCCNCCNCCNCCN GACQNVJDWUAPFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 230000004031 neuronal differentiation Effects 0.000 description 2
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 2
- 230000000414 obstructive effect Effects 0.000 description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002797 pitavastatin Drugs 0.000 description 2
- VGYFMXBACGZSIL-MCBHFWOFSA-N pitavastatin Chemical compound OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)\C=C\C1=C(C2CC2)N=C2C=CC=CC2=C1C1=CC=C(F)C=C1 VGYFMXBACGZSIL-MCBHFWOFSA-N 0.000 description 2
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 2
- 239000000249 polyoxyethylene sorbitan monopalmitate Substances 0.000 description 2
- 235000010483 polyoxyethylene sorbitan monopalmitate Nutrition 0.000 description 2
- 239000001818 polyoxyethylene sorbitan monostearate Substances 0.000 description 2
- 235000010989 polyoxyethylene sorbitan monostearate Nutrition 0.000 description 2
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 2
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 229940101027 polysorbate 40 Drugs 0.000 description 2
- 229940113124 polysorbate 60 Drugs 0.000 description 2
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 2
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 2
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 2
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 229960002965 pravastatin Drugs 0.000 description 2
- TUZYXOIXSAXUGO-PZAWKZKUSA-N pravastatin Chemical compound C1=C[C@H](C)[C@H](CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)[C@H]2[C@@H](OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@H](O)C=C21 TUZYXOIXSAXUGO-PZAWKZKUSA-N 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 2
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 description 2
- 229940073095 questran Drugs 0.000 description 2
- 238000002708 random mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- 229960000672 rosuvastatin Drugs 0.000 description 2
- BPRHUIZQVSMCRT-VEUZHWNKSA-N rosuvastatin Chemical compound CC(C)C1=NC(N(C)S(C)(=O)=O)=NC(C=2C=CC(F)=CC=2)=C1\C=C\[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O BPRHUIZQVSMCRT-VEUZHWNKSA-N 0.000 description 2
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 239000006152 selective media Substances 0.000 description 2
- 229960002855 simvastatin Drugs 0.000 description 2
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 2
- 229940115679 slo-niacin Drugs 0.000 description 2
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 2
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L sodium sulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])=O GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000004059 squalene synthase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 2
- YROXIXLRRCOBKF-UHFFFAOYSA-N sulfonylurea Chemical class OC(=N)N=S(=O)=O YROXIXLRRCOBKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 2
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 2
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 2
- 238000003151 transfection method Methods 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 2
- 229940055755 tricor Drugs 0.000 description 2
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N tristearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 2
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 2
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 2
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 229940111503 welchol Drugs 0.000 description 2
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- WHBMMWSBFZVSSR-GSVOUGTGSA-N (R)-3-hydroxybutyric acid Chemical compound C[C@@H](O)CC(O)=O WHBMMWSBFZVSSR-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- YUIOPHXTILULQC-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dithiane-2,5-diol Chemical compound OC1CSC(O)CS1 YUIOPHXTILULQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BRMWTNUJHUMWMS-UHFFFAOYSA-N 3-Methylhistidine Natural products CN1C=NC(CC(N)C(O)=O)=C1 BRMWTNUJHUMWMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- AGFIRQJZCNVMCW-UAKXSSHOSA-N 5-bromouridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 AGFIRQJZCNVMCW-UAKXSSHOSA-N 0.000 description 1
- 229940117976 5-hydroxylysine Drugs 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 1
- KHOITXIGCFIULA-UHFFFAOYSA-N Alophen Chemical compound C1=CC(OC(=O)C)=CC=C1C(C=1N=CC=CC=1)C1=CC=C(OC(C)=O)C=C1 KHOITXIGCFIULA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001156002 Anthonomus pomorum Species 0.000 description 1
- 108010008150 Apolipoprotein B-100 Proteins 0.000 description 1
- 241001367049 Autographa Species 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100026189 Beta-galactosidase Human genes 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101001011741 Bos taurus Insulin Proteins 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 1
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 241000701489 Cauliflower mosaic virus Species 0.000 description 1
- GHXZTYHSJHQHIJ-UHFFFAOYSA-N Chlorhexidine Chemical compound C=1C=C(Cl)C=CC=1NC(N)=NC(N)=NCCCCCCN=C(N)N=C(N)NC1=CC=C(Cl)C=C1 GHXZTYHSJHQHIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710094648 Coat protein Proteins 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- 241000557626 Corvus corax Species 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N D-cystine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CSSC[C@@H](N)C(O)=O LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N D-lysine Chemical compound NCCCC[C@@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010067770 Endopeptidase K Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 108700039887 Essential Genes Proteins 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 239000001116 FEMA 4028 Substances 0.000 description 1
- 241000724791 Filamentous phage Species 0.000 description 1
- 102000004961 Furin Human genes 0.000 description 1
- 108090001126 Furin Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 102100021181 Golgi phosphoprotein 3 Human genes 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 229940122440 HIV protease inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 101001095815 Homo sapiens E3 ubiquitin-protein ligase RING2 Proteins 0.000 description 1
- 101001076408 Homo sapiens Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 101001051093 Homo sapiens Low-density lipoprotein receptor Proteins 0.000 description 1
- 101001128694 Homo sapiens Neuroendocrine convertase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000601394 Homo sapiens Neuroendocrine convertase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101001098872 Homo sapiens Proprotein convertase subtilisin/kexin type 7 Proteins 0.000 description 1
- 101000703436 Homo sapiens Sex hormone-binding globulin Proteins 0.000 description 1
- 102000003839 Human Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000003332 Ilex aquifolium Nutrition 0.000 description 1
- 241000209027 Ilex aquifolium Species 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 1
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N Inosine Chemical class O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC(O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 1
- 102100026019 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 1
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 1
- LPHGQDQBBGAPDZ-UHFFFAOYSA-N Isocaffeine Natural products CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N(C)C=N2 LPHGQDQBBGAPDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 1
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 125000000510 L-tryptophano group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2N([H])C([H])=C(C([H])([H])[C@@]([H])(C(O[H])=O)N([H])[*])C2=C1[H] 0.000 description 1
- 108010033266 Lipoprotein(a) Proteins 0.000 description 1
- 102000057248 Lipoprotein(a) Human genes 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102100024640 Low-density lipoprotein receptor Human genes 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710125418 Major capsid protein Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 240000002769 Morchella esculenta Species 0.000 description 1
- 235000002779 Morchella esculenta Nutrition 0.000 description 1
- 108010085220 Multiprotein Complexes Proteins 0.000 description 1
- 102000007474 Multiprotein Complexes Human genes 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 101001026869 Mus musculus F-box/LRR-repeat protein 3 Proteins 0.000 description 1
- 108010021466 Mutant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000008300 Mutant Proteins Human genes 0.000 description 1
- DTERQYGMUDWYAZ-ZETCQYMHSA-N N(6)-acetyl-L-lysine Chemical compound CC(=O)NCCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O DTERQYGMUDWYAZ-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- JDHILDINMRGULE-LURJTMIESA-N N(pros)-methyl-L-histidine Chemical compound CN1C=NC=C1C[C@H](N)C(O)=O JDHILDINMRGULE-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- JJIHLJJYMXLCOY-BYPYZUCNSA-N N-acetyl-L-serine Chemical compound CC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O JJIHLJJYMXLCOY-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- PYUSHNKNPOHWEZ-YFKPBYRVSA-N N-formyl-L-methionine Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC=O PYUSHNKNPOHWEZ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N N-methyl-guanidine Natural products CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102100032132 Neuroendocrine convertase 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100037732 Neuroendocrine convertase 2 Human genes 0.000 description 1
- 108020005497 Nuclear hormone receptor Proteins 0.000 description 1
- 101710141454 Nucleoprotein Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- 101710083689 Probable capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 102100038950 Proprotein convertase subtilisin/kexin type 7 Human genes 0.000 description 1
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000012614 Q-Sepharose Substances 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 1
- 229940123495 Squalene synthetase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 101710135785 Subtilisin-like protease Proteins 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N Sulfurous acid Chemical compound OS(O)=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 1
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 description 1
- 101150117115 V gene Proteins 0.000 description 1
- YVPOVOVZCOOSBQ-AXHZAXLDSA-N [(1s,3r,7s,8s,8ar)-8-[2-[(2r,4r)-4-hydroxy-6-oxooxan-2-yl]ethyl]-3,7-dimethyl-1,2,3,7,8,8a-hexahydronaphthalen-1-yl] (2s)-2-methylbutanoate;pyridine-3-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1.C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 YVPOVOVZCOOSBQ-AXHZAXLDSA-N 0.000 description 1
- 238000000367 ab initio method Methods 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 229940034653 advicor Drugs 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000009824 affinity maturation Effects 0.000 description 1
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 1
- 238000012867 alanine scanning Methods 0.000 description 1
- 229910001508 alkali metal halide Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000008045 alkali metal halides Chemical class 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 229940125516 allosteric modulator Drugs 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BRLDZKPJJNASGG-KRWDZBQOSA-N alpha-berbine Chemical compound C1=CC=C2CN3CCC4=CC=CC=C4[C@@H]3CC2=C1 BRLDZKPJJNASGG-KRWDZBQOSA-N 0.000 description 1
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000003277 amino acid sequence analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012870 ammonium sulfate precipitation Methods 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940127003 anti-diabetic drug Drugs 0.000 description 1
- 230000003302 anti-idiotype Effects 0.000 description 1
- 230000000561 anti-psychotic effect Effects 0.000 description 1
- 229940125708 antidiabetic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002220 antihypertensive agent Substances 0.000 description 1
- 229940030600 antihypertensive agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 1
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 1
- 238000002617 apheresis Methods 0.000 description 1
- 239000013011 aqueous formulation Substances 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 238000005844 autocatalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 229950011321 azaserine Drugs 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960004365 benzoic acid Drugs 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YBHILYKTIRIUTE-UHFFFAOYSA-N berberine Chemical compound C1=C2CC[N+]3=CC4=C(OC)C(OC)=CC=C4C=C3C2=CC2=C1OCO2 YBHILYKTIRIUTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940093265 berberine Drugs 0.000 description 1
- QISXPYZVZJBNDM-UHFFFAOYSA-N berberine Natural products COc1ccc2C=C3N(Cc2c1OC)C=Cc4cc5OCOc5cc34 QISXPYZVZJBNDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N beta-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N 0.000 description 1
- 235000011175 beta-cyclodextrine Nutrition 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 229960004853 betadex Drugs 0.000 description 1
- 229940096699 bile acid sequestrants Drugs 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 125000004057 biotinyl group Chemical group [H]N1C(=O)N([H])[C@]2([H])[C@@]([H])(SC([H])([H])[C@]12[H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- IXIBAKNTJSCKJM-BUBXBXGNSA-N bovine insulin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3NC=NC=3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)C(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1=CN=CN1 IXIBAKNTJSCKJM-BUBXBXGNSA-N 0.000 description 1
- 239000004067 bulking agent Substances 0.000 description 1
- DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N but-3-enoic acid;ethene Chemical compound C=C.OC(=O)CC=C DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001948 caffeine Drugs 0.000 description 1
- VJEONQKOZGKCAK-UHFFFAOYSA-N caffeine Natural products CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1C=CN2C VJEONQKOZGKCAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960003260 chlorhexidine Drugs 0.000 description 1
- 238000003759 clinical diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010372 cloning stem cell Methods 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000009137 competitive binding Effects 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000006957 competitive inhibition Effects 0.000 description 1
- 239000008139 complexing agent Substances 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000011443 conventional therapy Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 229960003280 cupric chloride Drugs 0.000 description 1
- OOTFVKOQINZBBF-UHFFFAOYSA-N cystamine Chemical compound CCSSCCN OOTFVKOQINZBBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940099500 cystamine Drugs 0.000 description 1
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 1
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N delta-DL-hydroxylysine Natural products NCC(O)CCC(N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- PGUYAANYCROBRT-UHFFFAOYSA-N dihydroxy-selanyl-selanylidene-lambda5-phosphane Chemical compound OP(O)([SeH])=[Se] PGUYAANYCROBRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N dimethylaminoamidine Natural products CN(C)C(N)=N SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003467 diminishing effect Effects 0.000 description 1
- NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-K dioxido-sulfanylidene-sulfido-$l^{5}-phosphane Chemical compound [O-]P([O-])([S-])=S NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- DCSRPHQBFSYJNN-UHFFFAOYSA-L disodium 4-[(2-arsonophenyl)diazenyl]-3-hydroxynaphthalene-2,7-disulfonate Chemical compound [Na+].[Na+].Oc1c(N=Nc2ccccc2[As](O)(O)=O)c2ccc(cc2cc1S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O DCSRPHQBFSYJNN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- LOZWAPSEEHRYPG-UHFFFAOYSA-N dithiane Natural products C1CSCCS1 LOZWAPSEEHRYPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 239000013583 drug formulation Substances 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N erythro-5-hydroxy-L-lysine Chemical compound NC[C@H](O)CC[C@H](N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005038 ethylene vinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 238000002270 exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000013213 extrapolation Methods 0.000 description 1
- 229960000815 ezetimibe Drugs 0.000 description 1
- 201000001386 familial hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000011990 functional testing Methods 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-GUCUJZIJSA-N galactitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-GUCUJZIJSA-N 0.000 description 1
- UHBYWPGGCSDKFX-VKHMYHEASA-N gamma-carboxy-L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(C(O)=O)C(O)=O UHBYWPGGCSDKFX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000004153 glucose metabolism Effects 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-L glutamate group Chemical group N[C@@H](CCC(=O)[O-])C(=O)[O-] WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-L 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003505 heat denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 description 1
- 150000002411 histidines Chemical class 0.000 description 1
- 239000004030 hiv protease inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229920001519 homopolymer Polymers 0.000 description 1
- 102000043555 human LDLR Human genes 0.000 description 1
- 102000048069 human RNF2 Human genes 0.000 description 1
- 210000005104 human peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 1
- 229960002163 hydrogen peroxide Drugs 0.000 description 1
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012872 hydroxylapatite chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000001841 imino group Chemical group [H]N=* 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 229940041682 inhalant solution Drugs 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 238000001155 isoelectric focusing Methods 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229910052747 lanthanoid Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002602 lanthanoids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 238000001638 lipofection Methods 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 210000003563 lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000013178 mathematical model Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 108091005573 modified proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000035118 modified proteins Human genes 0.000 description 1
- 238000000302 molecular modelling Methods 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000009223 neuronal apoptosis Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 229940099635 niacor Drugs 0.000 description 1
- 229940033757 niaspan Drugs 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 102000006255 nuclear receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020004017 nuclear receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002515 oligonucleotide synthesis Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000000065 osmolyte Effects 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- KHPXUQMNIQBQEV-UHFFFAOYSA-N oxaloacetic acid Chemical compound OC(=O)CC(=O)C(O)=O KHPXUQMNIQBQEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000016236 parenteral nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 150000008298 phosphoramidates Chemical class 0.000 description 1
- LFGREXWGYUGZLY-UHFFFAOYSA-N phosphoryl Chemical group [P]=O LFGREXWGYUGZLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BZQFBWGGLXLEPQ-REOHCLBHSA-N phosphoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)COP(O)(O)=O BZQFBWGGLXLEPQ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 229920000191 poly(N-vinyl pyrrolidone) Polymers 0.000 description 1
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 description 1
- 229920001583 poly(oxyethylated polyols) Polymers 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 239000004633 polyglycolic acid Substances 0.000 description 1
- 229920002338 polyhydroxyethylmethacrylate Polymers 0.000 description 1
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 229940071643 prefilled syringe Drugs 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 238000002818 protein evolution Methods 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940076788 pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 229940044601 receptor agonist Drugs 0.000 description 1
- 239000000018 receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 238000002702 ribosome display Methods 0.000 description 1
- 239000012146 running buffer Substances 0.000 description 1
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000007423 screening assay Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- JRPHGDYSKGJTKZ-UHFFFAOYSA-K selenophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=[Se] JRPHGDYSKGJTKZ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000012312 sodium hydride Substances 0.000 description 1
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 235000010265 sodium sulphite Nutrition 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000010473 stable expression Effects 0.000 description 1
- 238000012289 standard assay Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 239000012443 tonicity enhancing agent Substances 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 230000002463 transducing effect Effects 0.000 description 1
- 230000010474 transient expression Effects 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- ODLHGICHYURWBS-LKONHMLTSA-N trappsol cyclo Chemical compound CC(O)COC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)COCC(O)C)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1COCC(C)O ODLHGICHYURWBS-LKONHMLTSA-N 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 1
- 229960000281 trometamol Drugs 0.000 description 1
- 241000701366 unidentified nuclear polyhedrosis viruses Species 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 108700026220 vif Genes Proteins 0.000 description 1
- 238000011179 visual inspection Methods 0.000 description 1
- 229940009349 vytorin Drugs 0.000 description 1
- PNAMDJVUJCJOIX-XVZWKFLSSA-N vytorin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)C(C)(C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1.N1([C@@H]([C@H](C1=O)CC[C@@H](O)C=1C=CC(F)=CC=1)C=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(F)C=C1 PNAMDJVUJCJOIX-XVZWKFLSSA-N 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 238000002424 x-ray crystallography Methods 0.000 description 1
- 229940072168 zocor Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/40—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Obesity (AREA)
- Hematology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
本出願は、電子形式での配列表とともに出願されている。配列表は、2013年6月27日に作成された、サイズ322KBのA−1837−WO−PCT−SequenceList062713.txtという表題のファイルとして提供される。電子形式での配列表の情報は、参照することによりその全体が本明細書に組み込まれる。
本発明は、プロタンパク質コンベルターゼスブチリシン/ケクシン9型(PCSK9)に対する抗原結合タンパク質(例えば、抗体)を用いた、ホモ接合性家族性高コレステロール血症の治療方法に関する。
前記一般的な記述及び以下の詳細な説明はいずれも例示的及び説明的なものに過ぎず、特許請求の範囲に記載されている本発明を限定するものではないことを理解しなければならない。本出願において、単数形の使用は、特に別段の記載がなければ、複数形を含む。本出願において、「または」の使用は、別段の記載がなければ、「及び/または」を意味する。さらに、「含んでいる」という用語並びに「含む」及び「含まれた」などのその他の語形の使用は、限定的なものではない。また、「要素」または「成分」などの用語は、特に別段の記載がなければ、一つの単位を含む要素及び成分並びに2つ以上のサブユニットを含む要素及び成分の両方を包含する。また、「部分」という用語の使用は、構成部分の一部または構成部分の全体を含み得る。
・アルゴリズム:Needleman et al.,1970,J.Mol.Biol.,48:443−453
・比較行列:Henikoff et al.,1992,上記から得られるBLOSum62
・ギャップペナルティ:12(末端ギャップに対するペナルティはなし)
・ギャップ長ペナルティ:4
・類似性の閾値:0
2)中性親水性:Cys、Ser、Thr、Asn、Gln;
3)酸性:Asp、Glu;
4)塩基性:His、Lys、Arg;
5)鎖の方向性に影響を与える残基:Gly、Pro;及び
6)芳香族:Trp、Tyr、Phe。
プロタンパク質コンベルターゼスブチリシンケクシン9型(PCSK9)は、低密度リポタンパク質受容体(LDLR)タンパク質のレベルの制御に関与しているセリンプロテアーゼである(Horton et al,2007;Seidah and Prat,2007)。PCSK9は、セリンプロテアーゼのスブチリシン(S8)ファミリーのプロホルモン−プロタンパク質コンベルターゼである(Seidah et al.,2003)。典型的なヒトPCSK9アミノ酸配列は、図1Aの配列番号1(下線が付されているタンパク質の「プロ」ドメインを図示する)及び図1Bの配列番号3(太字のシグナル配列及び下線が付されたプロドメインを図示する)として表されている。典型的なヒトPCSK9のコード配列が、配列番号2として表されている(図1B)。本明細書において記載されているように、PCSK9タンパク質は、完全長PCSK9タンパク質の断片も含むことができる。PCSK9タンパク質の構造は、2つのグループによって最近解決された(Cunningham et al.,Nature Structural & Molecular Biology,2007,and Piper et al.,Structure,15:1−8,2007)(いずれも、参照により、全体が本明細書に組み込まれる)。PCSK9は、シグナル配列、N末端プロドメイン、スブチリシン様触媒ドメイン、及びC末端ドメインを含む。
本明細書において記載されているように、PCSK9に対する抗原結合タンパク質は、ヒト化抗体及び/またはその一部を含むことができる。そのような戦略の重要な実用的用途は、マウス液性免疫系の「ヒト化」である。
本明細書において記載されているように、PCSK9に結合する抗原結合タンパク質は、ヒト(即ち、完全ヒト)抗体及び/またはその一部を含み得る。ある特定の実施形態において、重鎖及び軽鎖免疫グロブリン分子をコードするヌクレオチド配列並びに重鎖及び軽鎖免疫グロブリン分子を含むアミノ酸配列(特に、可変領域に対応する配列)が提供される。ある特定の実施形態において、相補性決定領域(CDR)、特に、CDR1からCDR3に対応する配列が提供される。ある特定の実施形態によれば、そのような免疫グロブリン分子を発現するハイブリドーマ細胞株が提供される。ある特定の実施形態によれば、そのようなモノクローナル抗体を発現するハイブリドーマ細胞株が提供される。ある特定の実施形態において、ハイブリドーマ細胞株は、表2中に記載されている細胞株のうちの少なくとも1つ、例えば、21B12、16F12、及び31H4から選択される。ある特定の実施形態において、ヒトPCSK9に対する精製されたヒトモノクローナル抗体が提供される。
提供される他の抗体は、表2及び図2A〜3JJ及び3LL〜JJJ並びに3LLL中に示されている可変重鎖及び可変軽鎖の組み合わせまたはサブパートによって形成され、表2中の配列(配列全体または配列のサブパート(例えば、1つまたはそれ以上のCDR))及び図2A〜3JJ及び3LL〜JJJ並びに3LLLの配列のアミノ酸配列に対して、それぞれ、少なくとも50%、50〜60、60〜70、70〜80%、80〜85%、85〜90%、90〜95%、95〜97%、97〜99%、または99%超の同一性を有する可変軽鎖及び/または可変重鎖を含む上掲のABPバリアントである。いくつかの事例において、そのような抗体は、少なくとも1つの重鎖及び1つの軽鎖を含むのに対して、他の例において、バリアント形態は、2つの同一の軽鎖及び2つの同一の重鎖(またはこれらのサブパート)を含有する。いくつかの実施形態において、結合に影響を及ぼす変動及び結合に影響を及ぼさないと思われる変動を観察することによって修飾することが可能な抗体の区画を特定するために、図2A〜3D(並びに13A〜13J、及び図31A及び31B中の他の実施形態)中の配列比較を使用することができる。例えば、類似の配列を比較することによって、修飾可能な区画(例えば、特定のアミノ酸)を特定し、ABPの機能性をなお保持しながら(または改善しながら)、それらをどのようにして修飾することができるかを特定することができる。いくつかの実施形態において、ABPのバリアントは、図13A、13C、13F、13G、13H、13I、13J、及び/または31A及び31B中に図示されているコンセンサス基及び配列を含み、変動が、図中に可変として特定される位置において可能である。図13A、13C、13F、13G、31A、及び31Bに示されているCDRは、Chothia法(構造ループ領域の位置に基づく。例えば、「Standard conformations for the canonical structures of immunoglobulins」Bissan Al−Lazikani,Arthur M.Lesk and Cyrus Chothia,Journal of Molecular Biology,273(4):927−948,7 November(1997)を参照されたい)とKabat法(配列変動性に基づく。例えば、Sequences of Proteins of Immunological Interest,Fifth Edition.NIH Publication No.91−3242,Kabat et al.,(1991)を参照されたい)のハイブリッド組み合わせに基づいて定義された。何れかの方法によって決定された各残基は、CDR残基の最終リスト中に含められた(図13A、13C、13F、13G、31A、及び31Bに記載されている)。図13H、13I、及び13J中のCDRは、Kabat法のみによって得られた。別段の記載がなければ、図13H〜13J中の定義されたコンセンサス配列、CDR、及びFRは、図13中において参照されているABPに対する表記CDR及びFRを定義し、制御する。
ある特定の実施形態において、(抗体などの)抗原結合タンパク質は、抗原(例えば、PCSK9)を用いた免疫化によって産生される。ある特定の実施形態において、抗体は、完全長PCSK9、PCSK9の可溶性形態、触媒ドメインのみ、図1A中に示されているPCSK9の成熟形態、PCSK9のスプライスバリアント形態、またはこれらの断片を用いた免疫化によって作製することができる。ある特定の実施形態において、本発明の抗体は、ポリクローナル若しくはモノクローナルであり得、及び/または組み換え抗体であり得る。ある特定の実施形態において、本発明の抗体は、例えば、ヒト抗体を産生することができるトランスジェニック動物の免疫化によって調製されたヒト抗体である(例えば、PCT出願公開W093/12227を参照されたい)。
ある特定の実施形態において、モノクローナル抗体を作製するために、ファージディスプレイ技術が使用される。ある特定の実施形態において、そのような技術は、完全ヒトモノクローナル抗体を作製する。ある特定の実施形態において、単一のFabまたはFv抗体断片をコードするポリヌクレオチドが、ファージ粒子の表面上に発現される。例えば、Hoogenboom et al.,J.Mol.Biol.,227:381(1991);Marks et al.,J Mol Biol 222:581(1991);米国特許第5,885,793号を参照されたい。ある特定の実施形態において、標的に対する親和性を有する抗体断片を特定するために、ファージが「スクリーニング」される。従って、ある特定のそのようなプロセスは、糸状バクテリオファージの表面上への抗体断片レパートリーのディスプレー及び標的への抗体断片レパートリーの結合によってファージのその後の選択を通じて免疫選択を模倣する。ある特定のそのような手法では、高親和性機能的中和抗体断片が単離される。(以下により詳しく論述されている)ある特定のそのような実施形態において、ヒト抗体遺伝子の完全なレパートリーは、末梢血リンパ球から天然に再配置されたヒトV遺伝子をクローニングすることによって作製される。例えば、「Mullinax et al,Proc Natl Acad Sci(USA),87:8095−8099(1990)」を参照されたい。
本明細書中に提供されている方法で有用な抗PCSK9抗体が結合するエピトープが提供される。いくつかの実施形態において、本明細書に開示されている抗体によって結合されるエピトープは、特に有用である。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されている抗体によって結合されるエピトープの何れかに結合する抗原結合タンパク質は、有用である。いくつかの実施形態において、表2並びに図2及び3に列記されている抗体の何れかによって結合されるエピトープは、特に有用である。いくつかの実施形態において、エピトープは、触媒ドメインPCSK9上に存在する。
別の態様において、PCSK9への特異的結合に関して、本明細書中に記載されているエピトープに結合する例示された抗体または機能的断片の1つと競合する抗原結合タンパク質が提供される。そのような抗原結合タンパク質は、本明細書中に例示されている抗原結合タンパク質の1つと同じエピトープまたは重複するエピトープにも結合し得る。例示された抗原結合タンパク質と同じエピトープと競合し、または結合する抗原結合タンパク質及び断片は、類似の機能的特性を示すと予想される。例示された抗原結合タンパク質及び断片は、重鎖及び軽鎖可変領域ドメイン並びに表2及び/または図2〜3に含まれるCDRを有するものなど、上述のものを含む。従って、具体例として、提供される抗原結合タンパク質には、
(a)図2〜3に列記されている抗体に対して列記されているCDRの6つ全て;
(b)表2中に列記されている抗体に対して列記されているVH及びVL;または
(c)表2に列記されている抗体に対して明記されている2つの軽鎖及び2つの重鎖
を有する抗体または抗原結合タンパク質と競合するものが含まれる。
本明細書で提供されるのは、上述の方法で有用な、PCSK9に対する抗原結合タンパク質を含む医薬製剤である。本明細書において使用される、「医薬製剤」は、それを必要とする患者への非経口投与(静脈内、筋肉内、皮下、噴霧、肺内、鼻腔内、または髄腔内を含むが、これらに限定されない)に適している薬学的に活性な薬物、すなわち、PCSK9に対する少なくとも1つの抗原結合タンパク質の無菌組成物であり、米国食品医薬品局または他の外国国内当局によって安全と見なされた、医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び他の添加剤のみが含まれる。医薬製剤としては、液体、例えば、直接投与され得る水溶液、投与前に希釈剤を加えることで溶液に再構成され得る凍結乾燥された粉末が挙げられる。「医薬製剤」という用語の範囲から具体的に除外されるものは、患者への局所投与用の組成物、経口摂取用の組成物、及び非経口栄養補給用の組成物である。
表2及び図2及び/または3並びに図31A及び31B中に図示されている1つまたはそれ以上の重鎖相補性決定領域(CDRH)及び1つまたはそれ以上の軽鎖相補性決定領域(CDRL)を含むPCSK9に対する抗原結合タンパク質の何れかを、本発明の方法に従って、ホモ接合性家族性高コレステロール血症と診断された患者に投与することができる。他のある特定の実施形態において、表2及び図2及び/または3並びに図31A及び31B中に図示されているPCSK9に対する抗原結合タンパク質のアミノ酸配列と少なくとも90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、表2及び図2及び/または3並びに図31A及び31B中に図示されているPCSK9に対する任意の抗原結合タンパク質のアミノ酸配列と少なくとも90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域とを含む、PCSK9に対する抗原結合タンパク質を、本発明の方法に従って、ホモ接合性家族性高コレステロール血症と診断された患者に投与することができる。さらに他の実施形態において、表2及び図2及び/または3及び/または13及び/または図31A及び31B中に図示されている、PCSK9に対する任意の抗原結合タンパク質を、本発明の方法に従って、ホモ接合性家族性高コレステロール血症と診断された患者に投与することができる。他のある特定の実施形態において、PCSK9に対する他の抗原結合タンパク質;すなわち、配列番号588の軽鎖可変ドメインと配列番号589の重鎖可変ドメインとからなる抗体を、ホモ接合性家族性高コレステロール血症と診断された患者に投与することができる。いくつかの実施形態において、21B12、26H5、31H4、8A3、11F1、または8A1のうちの何れか1つを、ホモ接合性家族性高コレステロール血症と診断された患者に投与することができる。
当業者によって理解されるように、本明細書中に提供されている方法は、プロタンパク質コンベルターゼスブチリシン/ケクシン9型(PCSK9)に対する抗原結合タンパク質(例えば、抗体)を用いた、ホモ接合性家族性高コレステロール血症と診断された患者の治療方法である。
ある特定の実施形態において、PCSK9に対する1つまたはそれ以上の抗原結合タンパク質の治療的有効量及び別の治療剤を投与することを含む、ホモ接合性家族性高コレステロール血症を治療する方法が提供される。ある特定の実施形態において、PCSK9に対する抗原結合タンパク質は、少なくとも1つの他の治療剤の投与前に投与される。ある特定の実施形態において、PCSK9に対する抗原結合タンパク質は、少なくとも1つの他の治療剤の投与と同時に投与される。ある特定の実施形態において、PCSK9に対する抗原結合タンパク質は、少なくとも1つの他の治療剤の投与後に投与される。
免疫化及び力価測定
抗PCKS9抗体及びハイブリドーマの作製
リンパ球の回収、B細胞の単離、融合及びハイブリドーマの作製
この実施例は、免疫細胞がどのようにして回収され、ハイブリドーマがどのようにして作製されたかについて概説する。選択された免疫化マウスを頚椎脱臼によって屠殺し、各コホートから流入領域リンパ節を採集し、プールした。細胞を組織から放出させるために、DMEM中で磨り潰すことによって、リンパ系組織からB細胞を解離させ、細胞をDMEM中に懸濁した。細胞を計数し、穏やかに、但し、完全に細胞を再懸濁させるために、1億のリンパ球当たりDMEM0.9mLを細胞ペレットに添加した。
PCSK9抗体の選択
本実施例は、様々なPCSK9抗原結合タンパク質をどのようにして性質決定し、選択したかについて概説する。(実施例1及び2で作製されたハイブリドーマから産生された)分泌された抗体のPCSK9への結合を評価した。抗体の選択は、結合データ及びLDLRへのPCSK9の結合の阻害及び親和性に基づいた。以下に記載されているように、ELISAによって、可溶性PCSK9への結合を分析した。結合親和性を定量するために、BIAcore(登録商標)(表面プラズモン共鳴)を使用した。
野生型PCSK9に結合する抗体に対する一次スクリーニングを行った。2つの採集物に対して、一次スクリーニングを行った。一次スクリーニングは、ELISAアッセイを含み、以下のプロトコルを用いて行った。
次いで、安定なハイブリドーマが確立されたことを確認するために、野生型PCSK9への結合に関して、3000の陽性を再スクリーニングした。スクリーニングは、以下のように行った。Costar3702培地結合384ウェルプレート(Corning Life Sciences)を使用した。40μL/ウェルの体積で、1×PBS/0.05%アジド中、3μg/mLのニュートラビジンで、プレートを被覆した。4℃で一晩、プレートをインキュベートした。次いで、Titertekプレート洗浄装置(Titertek,Huntsville,AL)を用いて、プレートを洗浄した。3サイクルの洗浄を行った。1×PBS/1%ミルク90μLでプレートをブロックし、室温で約30分間インキュベートした。次いで、M384プレート洗浄装置を用いてプレートを洗浄した。3サイクルの洗浄を行った。捕捉試料は、V5タグを持たないb−PCSK9であり、40μL/ウェルの体積で、1×PBS/1%ミルク/10mM Ca2+中に0.9μg/mLで添加した。次いで、プレートを室温で1時間インキュベートした。次に、3サイクル洗浄を用いて、プレートを洗浄した。1×PBS/1%ミルク/10mM Ca2+40μL中に、上清10μLを移し、室温で1.5時間インキュベートした。再度、3サイクル洗浄を用いて作動されるTitertekプレート洗浄装置を用いて、プレートを洗浄した。1×PBS/1%ミルク/10mM Ca2+中、100ng/mL(1:4000)の濃度のヤギ抗ヒトIgGFcPOD40μL/ウェルをプレートに添加し、プレートを室温で1時間インキュベートした。3サイクル洗浄を用いて作動されるTitertekプレート洗浄装置を用いて、プレートをもう一度洗浄した。最後に、1ステップTMB(Neogen,Lexington,Kentucky)の40μL/ウェルをプレートに添加し、室温で30分後に、1Nの塩酸(40μL/ウェル)で反応停止処理した。Titertekプレートリーダーを用いて、450nmでODを直ちに読み取った。合計2441の陽性を、第二のスクリーニングで反復した。次いで、その後のスクリーニングにおいて、これらの抗体を使用した。
次いで、抗体がヒト及びマウスPCSK9の両方に結合できることを確認するために、マウスPCSK9に対する交叉反応性に関して、ハイブリドーマのパネルをスクリーニングした。交叉反応性スクリーニングでは、以下のプロトコルを使用した。Costar3702培地結合384ウェルプレート(Corning Life Sciences)を使用した。40μL/ウェルの体積で、1×PBS/0.05%アジド中、3μg/mLのニュートラビジンでプレートを被覆した。4℃で一晩、プレートをインキュベートした。次いで、Titertekプレート洗浄装置(Titertek,Huntsville,AL)を用いて、プレートを洗浄した。3サイクルの洗浄を行った。1×PBS/1%ミルク90μLでプレートをブロックし、室温で約30分間インキュベートした。次いで、Titertekプレート洗浄装置を用いてプレートを洗浄した。3サイクルの洗浄を行った。捕捉試料は、ビオチン化されたマウスPCSK9であり、40μL/ウェルの体積で、1×PBS/1%ミルク/10mM Ca2+中に1μg/mLで添加した。次いで、プレートを室温で1時間インキュベートした。次に、3サイクル洗浄を用いて作動されるTitertekプレート洗浄装置を用いて、プレートを洗浄した。上清50μLをプレートに移し、室温で1時間インキュベートした。再度、3サイクル洗浄を用いて、プレートを洗浄した。1×PBS/1%ミルク/10mM Ca2+中、100ng/mL(1:4000)の濃度のヤギ抗ヒトIgGFcPOD40μL/ウェルをプレートに添加し、プレートを室温で1時間インキュベートした。3サイクル洗浄を用いて、プレートをもう一度洗浄した。最後に、1ステップTMB(Neogen,Lexington,Kentucky)の40μL/ウェルをプレートに添加し、室温で30分後に、1N塩酸(40μL/ウェル)で反応停止処理した。Titertekプレートリーダーを用いて、450nmでODを直ちに読み取った。579抗体が、マウスPCSK9と交叉反応することが観察された。次いで、その後のスクリーニングにおいて、これらの抗体を使用した。
PCSK9中のD374Y変異は、ヒト集団中において文献に記載されている(例えば、Timms KM et al,「A mutation in PCSK9 causing autosomal−dominant hypercholesterolemia in a Utah pedigree」,Hum.Genet.114:349−353,2004)。抗体が野生型に対して特異的であるか、またはPCSK9のD374Y形態に結合したかどうかを測定するために、次いで、変異D374Yを含む変異体PCSK9配列への結合に関して、試料をスクリーニングした。スクリーニングのためのプロトコルは、以下の通りであった。スクリーニングでは、Costar3702培地結合384ウェルプレート(Corning Life Sciences)を使用した。40μL/ウェルの体積で、1×PBS/0.05%アジド中、4μg/mLのニュートラビジンで、プレートを被覆した。4℃で一晩、プレートをインキュベートした。次いで、Titertekプレート洗浄装置(Titertek,Huntsville,AL)を用いて、プレートを洗浄した。3サイクルの洗浄を行った。1×PBS/1%ミルク90μLでプレートをブロックし、室温で約30分間インキュベートした。次いで、Titertekプレート洗浄装置を用いてプレートを洗浄した。3サイクルの洗浄を行った。1×PBS/1%ミルク/10mM Ca2+中、1μg/mLの濃度のビオチン化されたヒトPCSK9D374Yでプレートを被覆し、室温で1時間インキュベートした。次いで、Titertekプレート洗浄装置を用いてプレートを洗浄した。3サイクルの洗浄を行った。後期枯渇ハイブリドーマ培養上清を、PBS/ミルク/Ca2+中に1:5希釈し(10mL+40mL)、室温で1時間インキュベートした。次に、1×PBS/1%ミルク/10mM Ca2+中、1μg/mLで、ウサギ抗ヒトPCSK9(Cayman Chemical)及びヒト抗His1.2.3(1:2)の40μL/ウェルをプレート上に滴定し、次いで、室温で1時間インキュベートした。次いで、Titertekプレート洗浄装置を用いてプレートを洗浄した。3サイクルの洗浄を行った。1×PBS/1%ミルク/10mM Ca2+中、100ng/mL(1:4000)の濃度のヤギ抗ヒトIgGFcHRP40μL/ウェルをプレートに添加し、プレートを室温で1時間インキュベートした。1×PBS/1%ミルク/10mM Ca2+中、100ng/mL(1:4000)の濃度のヤギ抗ウサギIgGFcHRP40μL/ウェルをプレートに添加し、プレートを室温で1時間インキュベートした。次いで、Titertekプレート洗浄装置を用いてプレートを洗浄した。3サイクルの洗浄を行った。最後に、1ステップTMB(Neogen,Lexington,Kentucky)の40μL/ウェルをプレートに添加し、室温で30分後に、1N塩酸(40μL/ウェル)で反応停止処理した。Titertekプレートリーダーを用いて、450nmでODを直ちに読み取った。野生型PCSK9に対する陽性ヒットの96%以上が、変異体PCSK9も結合した。
LDLRへのPCSK9結合を遮断する抗体をスクリーニングするために、D374Y PCSK9変異体を用いたアッセイを開発した。LDLRに対してより高い結合親和性を有するので、このアッセイに対してその変異体を使用し、より感度が高い受容体リガンド遮断アッセイの開発を可能とした。受容体リガンド遮断スクリーニングでは、以下のプロトコルを使用した。スクリーニングでは、Costar3702培地結合384ウェルプレート(Corning Life Sciences)を使用した。40μL/ウェルの体積で、1×PBS/0.05%アジド中、2μg/mLのヤギ抗LDLR(R&D、カタログ番号AF2148)でプレートを被覆した。4℃で一晩、プレートをインキュベートした。次いで、Titertekプレート洗浄装置(Titertek,Huntsville,AL)を用いて、プレートを洗浄した。3サイクルの洗浄を行った。1×PBS/1%ミルク90μLでプレートをブロックし、室温で約30分間インキュベートした。次いで、Titertekプレート洗浄装置を用いてプレートを洗浄した。3サイクルの洗浄を行った。捕捉試料は、LDLR(R&D、カタログ番号2148LD/CF)であり、40μL/ウェルの体積で、1×PBS/1%ミルク/10mM Ca2+中に0.4μg/mLで添加した。次いで、プレートを室温で1時間10分間インキュベートした。同時に、Nuncポリプロピレンプレート中のハイブリドーマ枯渇上清15μLとともに、ビオチン化されたヒトD374Y PCSK9の20ng/mLをインキュベートし、枯渇上清濃度を1:5希釈した。次いで、プレートを室温で約1時間30分間プレインキュベートした。次に、3サイクル洗浄を用いて作動されるTitertekプレート洗浄装置を用いて、プレートを洗浄した。プレインキュベートされた混合物50μL/ウェルを、LDLRで被覆されたELISAプレート上に移し、室温で1時間インキュベートした。LDLRに結合されたb−PCSK9を検出するために、アッセイ希釈液中の500ng/mLのストレプトアビジンHRP40μL/ウェルをプレートに添加した。プレートを室温で1時間インキュベートした。再度、Titertekプレート洗浄装置を用いてプレートを洗浄した。3サイクルの洗浄を行った。最後に、1ステップTMB(Neogen, Lexington, Kentucky)の40μL/ウェルをプレートに添加し、室温で30分後に、1N塩酸(40μL/ウェル)で反応停止処理した。Titertekプレートリーダーを用いて、450nmでODを直ちに読み取った。スクリーニングによって、PCSK9とLDLRウェル間での相互作用を遮断する384の抗体が同定され、100の抗体は相互作用を強く遮断した(OD<0.3)。これらの抗体は、PCSK9とLDLRの結合相互作用を90%超阻害した(90%超の阻害)。
次いで、第一の大規模受容体リガンド阻害アッセイにおいて同定された中和物質の384のサブセットに対して、変異体酵素を用いて受容体リガンドアッセイを反復した。384の遮断物質サブセットアッセイのスクリーニングでは、大規模受容体リガンド遮断スクリーニングにおいて行われたものと同じプロトコルを使用した。この反復スクリーニングによって、最初のスクリーニングデータが確認された。
3000の上清の当初パネル中には、野生型PCSK9に特異的に結合するが、huPCSK9(D374Y)変異体に結合しないことが示された86の抗体が存在していた。LDLR受容体への野生型PCSK9の結合を遮断する能力に関して、これらの86の上清を検査した。以下のプロトコルを使用した。スクリーニングでは、Costar3702培地結合384ウェルプレート(Corning Life Sciences)を使用した。40μL/ウェルの体積で、1×PBS/0.05%アジド中、10μg/mLの抗His1.2.3でプレートを被覆した。4℃で一晩、プレートをインキュベートした。次いで、Titertekプレート洗浄装置(Titertek,Huntsville,AL)を用いて、プレートを洗浄した。3サイクルの洗浄を行った。1×PBS/1%ミルク90μLでプレートをブロックし、室温で約30分間インキュベートした。次いで、Titertekプレート洗浄装置を用いてプレートを洗浄した。3サイクルの洗浄を行った。LDLR(R&D Systems,#2148LD/CFまたはR&D Systems,#2148LD)を、40μL/ウェルの体積で、1×PBS/1%ミルク/10mM Ca2+中に5μg/mLで添加した。次いで、プレートを室温で1時間インキュベートした。次に、3サイクル洗浄を用いて作動されるTitertekプレート洗浄装置を用いて、プレートを洗浄した。同時に、Nuncポリプロピレンプレート中のハイブリドーマ枯渇上清とともに、ビオチン化されたヒト野生型PCSK9をプレインキュベートした。1×PBS/1%ミルク/10mM Ca2+中、583ng/mLの濃度でb−PCSK9の33μL中にハイブリドーマ上清22μLを移し、最終のb−PCSK9濃度=350ng/mL及び1:2.5の最終希釈で枯渇上清を得た。プレートを室温で約1時間30分間プレインキュベートした。プレインキュベートされた混合物50μL/ウェルを、LDLRが捕捉されたELISAプレート上に移し、室温で1時間インキュベートした。次いで、Titertekプレート洗浄装置を用いてプレートを洗浄した。3サイクルの洗浄を行った。アッセイ希釈液中の500ng/mLのストレプトアビジンHRP40μL/ウェルをプレートに添加した。プレートを室温で1時間インキュベートした。次いで、Titertekプレート洗浄装置を用いてプレートを洗浄した。3サイクルの洗浄を行った。最後に、1ステップTMB(Neogen,Lexington,Kentucky)の40μL/ウェルをプレートに添加し、室温で30分後に、1N塩酸(40μL/ウェル)で反応停止処理した。Titertekプレートリーダーを用いて、450nmでODを直ちに読み取った。
記載されているアッセイの結果に基づいて、PCSK9との所望の相互作用を有する抗体を産生するとして、いくつかのハイブリドーマ株が同定された。各株からクローンの管理可能な数を単離するために、限外希釈を使用した。ハイブリドーマ株の番号(例えば、21B12)及びクローン番号(例えば、21B12.1)によって、クローンを表記した。一般に、いかなる特定の株の異なるクローン間の差も、本明細書中に記載されている機能的アッセイによって検出されなかった。少数の事例では、機能的アッセイにおいて異なる挙動を示した特定の株からクローンが特定された。例えば、25A7.1は、PCSK9/LDLRを遮断しないが、25A7.3(本明細書において、25A7と称される)は中和性であることが見出された。単離されたクローンを、ハイブリドーマ培地50〜100mL中でそれぞれ増殖させ、枯渇するまで増殖させた(即ち、約10%未満の細胞生存率)。これらの培養物の上清中でのPCSK9に対する抗体の濃度及び効力を、本明細書中に記載されているようなELISAによって、及びインビトロ機能的検査によって測定した。本明細書に記載されているスクリーニングの結果として、PCSK9に対する抗体の最も高い力価を有するハイブリドーマを同定した。図2A〜3D及び表2中に、選択されたハイブリドーマが示されている。
ハイブリドーマからのヒト31H4 IgG4抗体の作製
この実施例は、ハイブリドーマ株から、抗原結合タンパク質の1つをどのようにして作製するかについて一般的に記載する。作製作業は、枯渇上清生成50mLを使用した後、プロテインA精製を行った。Integra作製を大規模化し、その後実行した。ハイブリドーマ株31H4を、培地20mL中のT75フラスコで増殖させた(Integra Media、表5)。ハイブリドーマはT75フラスコ中でほぼ集密状態になった時点で、Integraフラスコに移した(Integra Biosciences,Integra CL1000,カタログ番号90 005)。
形質移入された細胞からの組み換え31H4ヒトIgG2抗体の作製
本実施例は、31H4 IgG2抗体が形質移入された細胞からどのようにして作製されるかを概説している。一過性発現のために293細胞及び安定な発現のためにCHO細胞を、31H4重鎖及び軽鎖をコードするプラスミドで形質移入した。細胞及び細胞破砕物を除去することによって、形質移入された細胞からの馴化培地を回収した。透明になった馴化培地をプロテインA−セファロースカラム上に搭載した。任意で、培地をまず濃縮し、次いで、プロテインAセファロースカラム上に搭載することができる。徹底的なPBS洗浄によって、非特異的結合を除去した。プロテインAカラムからの標準的酸性抗体溶出(50mMクエン酸塩、pH3.0など)によって、プロテインAカラム上に結合された抗体タンパク質を回収した。プロテインAセファロースプール中の凝集した抗体タンパク質を、サイズ排除クロマトグラフィーまたはQセファロース樹脂などの陰イオン交換樹脂上の結合イオン交換クロマトグラフィーによって除去した。31H4タンパク質に対する具体的なIEX条件は、pH7.8〜8.0でQ−セファロースHPである。25カラム体積の10mM〜500mMのNaCl勾配を用いて、抗体を溶出した。
ハイブリドーマからのヒト21B12 IgG4抗体の作製
本実施例は、ハイブリドーマから抗体21B12 IgG4がどのようにして作製されたかを概説する。ハイブリドーマ株21B12を、培地中のT75フラスコで増殖させた(Integra Media、表5)。ハイブリドーマはT75フラスコ中でほぼ集密状態になった時点で、Integraフラスコに移した(Integra Biosciences,Integra CL1000,カタログ番号90 005)。
形質移入された細胞からのヒト21B12 IgG2抗体の作製
本実施例は、21B12 IgG2抗体が形質移入された細胞からどのようにして作製されるかを概説している。細胞(一過性発現のために293細胞及び安定な発現のためにCHO細胞)を、21B12重鎖及び軽鎖をコードするプラスミドで形質移入した。細胞及び細胞破砕物を除去することによって、ハイブリドーマ細胞からの馴化培地を回収した。透明になった馴化培地をプロテインA−セファロースカラム上に搭載した。任意で、培地をまず濃縮し、次いで、プロテインAセファロースカラム上に搭載することができる。徹底的なPBS洗浄によって、非特異的結合を除去した。プロテインAカラムからの標準的酸性抗体溶出(50mMクエン酸塩、pH3.0など)によって、プロテインAカラム上に結合された抗体タンパク質を回収した。プロテインAセファロースプール中の凝集した抗体タンパク質を、サイズ排除クロマトグラフィーまたはSP−セファロース樹脂などの陽イオン交換樹脂上の結合イオン交換クロマトグラフィーによって除去した。21B12タンパク質に対する具体的なIEX条件は、pH5.2でSP−セファロースHPであった。20mM酢酸ナトリウム緩衝液中の10mM〜500mMのNaCl勾配を含有する緩衝液の25カラム体積で抗体を溶出した。
抗体重鎖及び軽鎖の配列分析
次いで、Sanger(ジデオキシ)ヌクレオチド配列決定によって、上記抗体の軽鎖及び重鎖に対する核酸及びアミノ酸配列を決定した。次いで、核酸配列に対してアミノ酸配列を推定した。可変ドメインに対する核酸配列が、図3E〜3JJ及び図3LL〜BBB中に図示されている。
大腸菌中の抗体の作製
抗体のいくつかは、大腸菌中でも産生され、例えば、実施例4〜6と同様に作製された抗体とはいくつか若干のアミノ酸の相違を有する。可変領域中の第一の残基は、21B12の重鎖及び軽鎖並びに31H4の軽鎖に対するグルタミンに代わるグルタミン酸であった。可変領域の配列中の相違の他に、(同じく、抗体が大腸菌中で産生されたという事実のために)座標によって記載されている抗体の定常領域中にもいくつかの相違が存在した。図3LLLは、配列番号156及び155と比べた場合の、(大腸菌中で産生された)21B12、31H4、及び31A4Fabの定常領域間の相違を(下線付きの影または太字によって)強調表示している。21B12、31H4、及び31A4に関して、軽鎖定常配列は、ヒトλ(配列番号156)と類似している。下線が付されたグリシン残基は挿入であり、この間で、21B12と31H4可変領域が終結し、λ配列が開始する。
PCSK9に対する抗体の結合の性質決定
PCSK9に結合するいくつかの抗原が同定されたら、結合の性質を定量し、さらに性質決定するために、いくつかのアプローチを使用した。試験の一態様において、Biacore親和性分析を行った。試験の別の態様において、KinExA(登録商標)親和性分析を行った。これらの試験において使用された試料及び緩衝液が、以下の表9.1に示されている。
本実施例に記載されているPCSK9に対する21B12抗体のBIAcore(登録商標)(表面プラズモン共鳴装置、Biacore,Inc.,Piscataway,NJ)親和性分析を、製造業者の指示書に従って行った。
16F12及び31H4のKinExA(登録商標)(Sapidyne Instruments,Inc.,Boise,ID)親和性分析を、製造業者の指示書に従って行った。簡潔に述べれば、Reacti−Gel(商標)(6×)(Pierce)を、ヒトV5タグ付加されたカニクイザルまたはHisタグ付加されたマウスPCSK9タンパク質の1つで予め被覆し、BSAで遮断した。次いで、抗体31H4及びPCSK9タンパク質の1つの何れかの10または100pMを、室温で8時間、PCSK9タンパク質の様々な濃度(0.1pM〜25nM)でインキュベートした後PCSK9が被覆されたビーズを通過させた。ビーズが結合された31H4の量を、蛍光的に(Cy5)標識されたヤギ抗ヒトIgG(H+L)抗体(Jackson Immuno Research)によって定量した。結合シグナルは、結合平衡での遊離の31H4の濃度に比例している。一部位均一結合モデルを用いて、競合曲線の2つの組の非線形回帰から、平衡解離定数(KD)を得た。KinExA(登録商標)Proソフトウェアを分析で使用した。この分析において作製された結合曲線が、図4A〜4Fとして表されている。
D374Y PCSK9/LDLR結合を遮断する31H4及び21B12の効力
本実施例は、PCSK9 D374YがLDLRに結合する能力を遮断する上での、抗体の2つに対するIC50値を提供する。緩衝液A(100mMカコジル酸ナトリウム、pH7.4)中に希釈されたヤギ抗LDL受容体抗体(R&D Systems)2μg/mLで、透明な384ウェルプレート(Costar)を被覆した。緩衝液Aでプレートを完全に洗浄した後、緩衝液B(緩衝液A中の1%ミルク)で2時間ブロックした。洗浄後、緩衝液C(10mM CaCl2が補充された緩衝液B)中に希釈されたLDL受容体(R&D Systems)0.4μg/mLとともに、プレートを1.5時間インキュベートした。このインキュベーションと同時に、緩衝液A中に希釈された31H4 IgG2、31H4 IgG4、21B12 IgG2、または21B12 IgG4抗体の様々な濃度または緩衝液Aのみ(対照)とともに、ビオチン化されたD374Y PCSK9の20ng/mLをインキュベートした。LDL受容体を含有するプレートを洗浄し、ビオチン化されたD374Y PCSK9/抗体混合物をプレートに移し、室温で1時間インキュベートした。LDL受容体へのビオチン化されたD374Yの結合を、緩衝液C中の500ng/mLのストレプトアビジン−HRP(Biosource)とともに、次いで、TMB基質(KPL)とともにインキュベートすることによって検出した。1N HClを用いてシグナルをクエンチし、450nmで吸光度を読み取った。
細胞LDL取り込みアッセイ
本実施例は、様々な抗原結合タンパク質が細胞によるLDLの取り込みを低減させ得ることを示す。10%FBSが補充されたDMEM培地(Mediatech,Inc)中に、5×105細胞/ウェルの濃度で、透明な底の黒い96ウェルプレート(Costar)中に、ヒトHepG2細胞を播種し、37℃(5%CO2)で一晩インキュベートした。PCSK9と抗体の複合体を形成させるために、取り込み緩衝液(1%FBSを加えたDMEM)中に希釈された抗体の様々な濃度または取り込み緩衝液のみ(対照)とともに、室温で1時間、D374Y ヒトPCSK9の2μg/mLをインキュベートした。PBSで細胞を洗浄した後、D374Y PCSK9/抗体混合物を細胞に移した後、6μg/mLの最終濃度で、取り込み緩衝液中にLDL−BODIPY(Invitrogen)を希釈した。37℃(5%CO2)で3時間インキュベーション後、細胞をPBSで完全に洗浄し、480〜520nm(励起)及び520〜600nm(発光)で、Safire(商標)(TECAN)によって、細胞蛍光シグナルを検出した。
6日の試験における31H4抗体の血清コレステロール低減効果
PCSK9タンパク質に対する抗体治療を介した野生型(WT)マウスにおける総血清コレステロール(TC)低減を評価するために、以下の手順を行った。
6日の試験における、LDLRレベルに対する抗体31H4の効果
本実施例は、予測されたように、抗原結合タンパク質が、経時的に、対象中のLDLRのレベルを変化させることを示す。LDLRレベルに対する抗体31H4の効果を確認するために、ウェスタンブロット分析を行った。実施例11で記載した屠殺されたマウスから得られた肝臓組織50〜100mgを、完全なプロテアーゼ阻害剤(Roche)を含有するRIPA緩衝液(Santa Cruz Biotechnology Inc.)0.3mL中において均質化した。ホモジネートを氷上で30分間インキュベートし、細胞破砕物を沈降させるために遠心分離した。BioRadタンパク質アッセイ試薬(BioRad laboratories)を用いて、上清中のタンパク質濃度を測定した。70℃で10分間、タンパク質100μgを変性させ、4〜12%Bis−Tris SDS勾配ゲル(Invitrogen)上で分離した。0.45μm PVDF膜(Invitrogen)にタンパク質を移し、室温で1時間、5%無脂肪ミルクを含有する洗浄緩衝液(50mM Tris PH7.5、150mM NaCl、2mM CaCl2、及び0.05%Tween20)中でブロックした。次いで、室温で1時間、ヤギ抗マウスLDLR抗体(R&D system)1:2000または抗βアクチン(sigma)1:2000を用いて、ブロットのプローブ検査を行った。ブロットを短時間洗浄し、ウシ抗ヤギIgG−HRP(Santa Cruz Biotechnology Inc.)1:2000またはヤギ抗マウスIgG−HRP(Upstate)1:2000とともにインキュベートした。室温で1時間インキュベーション後、ブロットを完全に洗浄し、ECL plusキット(Amersham biosciences)を用いて、免疫反応性バンドを検出した。ウェスタンブロットは、図9に図示されているように、抗体31H4の存在下でのLDLRタンパク質レベルの増加を示した。
13日の試験における抗体31H4の血清コレステロール低減効果
13日の試験において、PCSK9タンパク質に対する抗体治療を介した野生型(WT)マウスにおける総血清コレステロール(TC)低減を評価するために、以下の手順を行った。
13日の試験における、HDLレベルに対する抗体31H4の効果
実施例14中の動物に対するHDLレベルも調べた。HDLレベルは、マウスにおいて減少していた。より具体的には、10mg/kgで投薬された動物は、3日目に、HDLレベルの33%の減少を示し、13日までに、投薬前レベルまで徐々に復帰した。図10Bは、この実験の結果を図示する。HDLレベルは、3日目に34%減少した。図10Bは、反復された13日の実験の結果を図示する。
抗体の反復投与は、抗原結合ペプチドの継続的な有益性をもたらす
追加の投薬によるさらなる有益性に関して、上記実施例において得られた結果を延長することができるかを確認するために、実施例14及び15中の実験を反復した(投薬スケジュールは、図11Aに図示されている)。結果が、図11Bに示されている。図11Bのグラフから明らかなように、全てのマウスが31H4抗原結合タンパク質の最初の注射を受けたので、マウスの両群は、総血清コレステロールの著しい減少を示し、31H4 ABPのさらなる注射を受けたマウスは、総血清コレステロールの継続した低下を示したのに対して、対照注射を受けただけのマウスは、最終的には、総血清コレステロールの増加を示した。図11に関して、%変化は、t=0時間でのナイーブ動物に対する(*P<0.01、**P<0.001)。
高コレステロール血症を治療するためのPCSK9抗体の使用
高コレステロール血症の症候を呈するヒト患者に、31H4(または、例えば、21B12)などのPCSK9抗体の治療的有効量を投与する。治療中の定期的な時点で、血清コレステロールレベルが低下したかどうかを測定するために、ヒト患者をモニターする。治療後に、PCSK9抗体を用いた治療を受けている患者は、治療を受けていない関節炎患者と比べて、低下した血清コレステロールレベルを有することが見出される。
高コレステロール血症を予防するためのPCSK9抗原結合タンパク質の使用
高コレステロール血症を発症するリスクを示すヒト患者が、家族歴の分析及び/またはライフスタイル及び/または現在のコレステロールレベルを介して特定される。対象は、PCSK9抗体、31H4(または例えば、21B12)の治療的有効量を定期的に投与される(例えば、週に1回)。治療中の定期的な時点で、血清コレステロールレベルが減少したかどうかを測定するために、患者をモニターする。治療後に、PCSK9抗体を用いた予防的処置を行っている対象は、治療されていない対象と比べて、血清コレステロールレベルを低減させたことが見出される。
PCSK9 ABPは、スタチンの存在下でLDLRをさらに上方制御した
本実施例は、スタチンの存在下で使用された場合、PCSK9に対するABPは、LDLRの利用可能性のさらなる増加をもたらしたことを示し、2つの併用によってさらなる有益性を達成し得ることを示す。
コンセンサス配列
抗PCSK9 ABPのVH及びVLに対応するCDRの標準的な系統発生分析を用いて、コンセンサス配列を決定した。VHまたはVLに対応する同じ配列内に隣接するCDRを保持することによって、コンセンサス配列を決定した。要約すれば、比較並置の遂行及び系統発生の推定を容易にするために、VHまたはVLの何れかの可変ドメイン全体に対応するアミノ酸配列をFASTAフォーマットに変換した。次に、VHまたはVLに対応する同じ配列内にCDRをなお隣接させながら、偶発的現象(例えば、共通の生殖系列フレームワークの承継を偶発的に共有する無関係の抗体など)に起因するアミノ酸位置重み付けバイアスを一切導入することなく、CDRのみの検査を実施できるように、これらの配列のフレームワーク領域を、人工のリンカー配列(「bbbbbbbbbb」代用配列、非特異的な核酸構築物)で置き換えた。次いで、標準的なClutalW様アルゴリズム(Thompson et al.,1994,Nucleic Acids Res.22:4673−4680を参照されたい)を使用するプログラムを用いて、配列類似性並置検査に、このフォーマットのVHまたはVL配列を供した。2.0のギャップ伸長ペナルティとともに、8.0のギャップ生成ペナルティを使用した。同様に、このプログラムは、分岐長の比較及びグループ分けを介して配列群の類似性及び相違を構築し、図解するために、UPGMA(unweighted pair group method using arithmetic averages;非加重結合法)または隣接結合法(Neighbor−Joining method)(Saitou and Nei,1987,Molecular Biology and Evolution 4:406−425を参照されたい)を用いる配列類似性並置に基づくフィログラム(系統発生樹の図解)を作成した。何れの方法も、類似の結果をもたらしたが、UPGMA法はより単純で、より保守的な一群の仮説を使用するので、UPGMAによって得られた系統樹を最終的に使用した。UPGMAによって得られた系統樹(グループ内の各配列のうち、100残基当たり15未満の置換を有するとして、配列の類似のグループ(スケールに関して、系統樹の図解中の注釈参照)が定義された)を作成し、コンセンサス配列集合を定義するために使用した。比較の結果が、図13A〜13J並びに図31A及び31B中に図示されている。図13Eでは、クレードを形成する軽鎖中の配列が、重鎖中でもクレードであり、15未満の置換を有するように、グループを選択した。
11F1結合特異性
このアッセイからの結果は、11F1がPCSK9に結合するが、PCSK1、PCSK2、PCSK7、またはフリンには結合しないことを実証しており、11F1のPCSK9に対する特異性を実証している。
LDLR:PCSK9結合の11F1阻害の効力
この実施例は、ナノモル濃度の11F1が、このアッセイの条件下で、LDLRへのD374Y及び野生型PCSK9の両方の結合を阻害することが可能であることを実証している。
細胞LDL取り込みを遮断する11F1の効果
11F1は、インビトロでPCSK9とLDLRの間の相互作用を遮断し、HepG2細胞中のLDL取り込みのPCSK9−媒介低下を防ぐことができる。
ここで報告されたEC50値は、11F1に対して3〜6回の別々の測定から得られた代表的な平均値である。
マウスモデル中のアデノ随伴ウイルスを介して発現したヒトPCSK9を遮断する11F1及び8A3の効果
抗PCSK9抗体11F1または8A3の単回静脈内ボーラス投与により、AAVによってヒトPCSK9を発現するマウス中の血清非HDL−C及びTCの著しい減少をもたらす。この実施例は、インビボでのヒトPCSK9の機能を遮断する抗PCSK9抗体の両方の効果を実証している。
WinNonlin Enterpriseバージョン5.1.1(Pharsight,St.Louis,MO)を用いて、各対象の所定の基準時点を用いて血清濃度の非コンパートメント解析(NCA)を行った。終末相排出速度定数及び半減期を推定するためのデータポイントを、濃度−時間プロファイルの目視検査によって選択した。報告されたNCAパラメータには、見かけ上の半減期(t1/2)、時間0から最後に測定した濃度の血清濃度−時間曲線下の領域(AUC0−t)、及び見かけ上の血清クリアランス(CL0−t)が含まれる。AUC0−tは、線形/対数線形台形方法を用いて決定し、CL0−tは、11F1、8A3、及び31H4抗体に関して投薬量/AUC0−tによって算出した。実際の投薬量は30mg/kg標的の20%以内であることが試験後の投薬量溶液分析により示された。しかしながら、IgG2対照に関して、実際の投薬量は目的とする標的の40%のみであったことが分析により示された。従って、12mg/kgの補正投薬量を、IgG2対照のCL0−t算出に用いた。パラメータは、有効数字2桁で報告された半減期以外は、有効数字3桁で報告された。
全てのコレステロール結果を平均±標準誤差で表した。全ての薬物動態学的データを平均±標準偏差で表した。1元配置分散分析によって決定されたp値0.05を閾値として用いて、抗KLH IgG2対照抗体を注入した動物と抗PCSK9抗体を同じ時点で投与した動物の間の統計的有意性を決定した。
ベースラインを確立するため、ヒトPCSK9を発現するマウスの一部を、抗体の注射前に安楽死させ、血液を回収した。これらの動物中の非HDL−C、HDL−C、及びTCレベルは、それぞれ、33±4、117±4、及び183±9mg/dL(平均±標準誤差)であった。ナイーブ動物中のPCSK9レベルは、4921ng/mL±2044ng/mLであると決定した。
30mg/kgの静脈内投与で、11F1及び8A3は、非常によく似た薬物動態学的挙動を有した(図22)。これら2つの分子に関して、AUC0−t曝露、推定CL0−t、及び見かけ上の半減期は同等であった(図23の表)。抗KLH IgG2対照抗体は、11F1及び8A3よりもAUC0−t曝露が予想外に低下したが、これは、意図したよりも低い投薬量で抗体が投与されたことによる可能性が高い(30mg/kgとは対照的に12mg/kg、抗体濃度が標的の40%であることが投薬量溶液分析により示された。補正投薬量を用いて算出した場合、抗KLH IgG2対照抗体CL0−tは、11F1及び8A3のものと同様であり、抗KLH IgG2対照抗体の見かけ上の半減期は、120時間超と推定された。11F1及び8A3のCL0−t値は抗KLH IgG2対照抗体により近いので、AAVモデル中で投与した他の抗体と比較した場合、抗体の体内動態におけるPCSK9リガンドの影響は、11F1及び8A3に対してあまりはっきりしないことがこれらのデータにより示された。
マウス中のAAV(約5μg/mL)によるヒトPCSK9の発現により、約33mg/dLの血清非HDL−Cレベルがもたらされた。11F1を30mg/kg注射後、血清非HDL−Cの著しい低減が、注射後1日目、2日目、及び4日目に観察された(対照動物と比べて最大で59%)。TCの著しい低減は、4日目のみ見られた。8A3の注射により、対照動物と比べて最大で65%の非HDL−C低減という類似パターンがもたらされた。しかしながら、8A3投与は、注射後2日目のみ著しいTC低減をもたらし、最大で24%であった。11F1または8A3のいずれを投与された動物においても、HDL−Cの著しい減少は観察されなかった。11F1及び8A3の血清抗体レベルの分析により、抗KLH IgG2対照抗体と同様のプロファイルが実証された。
カニクイザルの血清脂質に対する11F1、21B12、及び8A3の単回皮下投与の効果
カニクイザルへの11F1、8A3、または21B12の単回皮下投与により、血清LDL−C及びTCの著しい低減がもたらされる。この試験は、抗PCSK9抗体が非ヒト霊長類における血清コレステロールを低減する能力があることを実証している。
ベースラインを共変量として、かつ、処置群を母数効果として見なす統計モデルを、LDL−C、HDL−C、TC、及びトリグリセリドの各時点での対数変換された応答にフィッティングした。チューキーの多重比較補正を適用して、各時点での一対比較を調整した。調整されたp値を用いて、統計的有意性をα=0.05で評価した。
11F1の最大LDL−C低減は、注射後9日目に観察され、抗KLH IgG2対照抗体処置サル(対照動物)と比べて、LDL−Cは57%低減した。LDL−Cは、対照動物で観察されたものと類似のレベルに27日目までに戻った。21B12の最大LDL−C低減は、注射後3日目に観察され、対照動物と比べて、LDL−Cは64%低減した。LDL−Cは、対照動物と類似のレベルに6日目までに戻った。8A3の最大LDL−C低減は、注射後4日目に観察され、対照動物と比べて、LDL−Cは54%低減した。LDL−Cは、対照動物で観察されたものと類似のレベルに27日目までに戻った(図24)。
11F1の最大TC低減は、注射後9日目に観察され、抗KLH IgG2対照抗体処置サル(対照動物)と比べて、TCは27%低減した。TCは、対照動物で観察されたものと類似のレベルに27日目までに戻った。21B12の最大TC低減は、注射後3日目に観察され、対照動物と比べて、TCは20%低減した。TCは、ビヒクル処置サルで観察されたものと類似のレベルに4日目までに一時的に戻ったが、14〜18日(14日及び18日を含む)目に著しく低下した。8A3の最大TC低減は、注射後9日目に観察され、対照動物と比べて、TCは22%低減した。TCは、対照動物で観察されたものと類似のレベルに30日目までに戻った(図25)。
平均でかつ各時点において、11F1または8A3で処置した動物のHDL−Cまたはトリグリセリドレベルは、抗KLH IgG2対照抗体処置サルで観察されたものと(α=0.05有意水準に基づいて)有意に異なっていなかった。しかしながら、21B12は、単一の時点で(注射後18日目に)HDL−Cに統計的に有意な変化を示した(図26及び図27)。
注射後3日目、6日目、15日目、24日目、及び33日目に血清ApoBレベルを測定した。11F1及び8A3は、抗KLH IgG2対照抗体処置サルと比べて3〜24日目にApoB低減を伴った(図28)。21B12は、3日目のみ統計的に有意により低いApoBレベルを伴った。
治療による平均濃度−時間プロファイルの要約プロットを図29に示す。11F1、21B12、8A3、及び抗KLH IgG2対照抗体を受けた動物の推定平均薬物動態パラメータを図30の表に示す。
45日間にわたる試験で、TC及びLDL−Cの統計的に有意な低減が、抗KLH IgG2対照抗体と比べて11F1、21B12、または8A3を投与された動物で観察された。11F1は、2〜24日目(2日目及び24日目を含む)で(抗KLH IgG2対照抗体と比べて)統計的に有意なLDL−C低減を伴った。21B12は、1〜4日目(1日目及び4日目を含む)で(抗KLH IgG2対照抗体と比べて)統計的に有意なLDL−C低減を示した。8A3は、1〜24日目(1日目及び24日目を含む)で(抗KLH IgG2対照抗体と比べて)統計的に有意なLDL−C低減を示した。TCの変化及びApoBの変化は、全てのグループにおいてLDL−Cで観察された変化に酷似していた。11F1は、注射後9日目で(同じ時点での抗KLH IgG2対照抗体と比べて)LDL−Cの最大低減を達成した(−57%)。21B12は、注射後3日目で(同じ時点での抗KLH IgG2対照抗体と比べて)LDL−Cの最大低減を達成した(−64%)。8A3は、注射後4日目で(同じ時点での抗KLH IgG2対照抗体と比べて)LDL−Cの最大低減を達成した(−54%)。21B12は、単一の時点、注射後18日目でHDL−Cを低減させた。11F1または8A3投与後のHDL−Cレベルに統計的に有意な変化は観察されなかった。11F1、21B12、または8A3投与後のトリグリセリドレベルに統計的に有意な変化は観察されなかった。
ヘテロ接合型家族性高コレステロール血症を有する対象のLDL−Cに対するヒト抗PCSK9抗体の安全性、耐性、及び効果を評価するための2部の試験
研究設計:これは、2部からなる試験である。A部は、非盲検、単一アーム、多施設共同の予備試験である。B部は、登録を拡張した以外はA部と同一設計である、抗体、21B12、(配列番号592の重鎖及び配列番号591の軽鎖)の二重盲検、無作為化、プラセボ対照、多施設共同の試験である。組み入れ/除外基準及び評価スケジュールの両方は、A部及びB部で同一である。
・ 12以上〜65歳以下の男性及び女性
・ ホモ接合性家族性高コレステロール血症の診断
・ 少なくとも4週間の安定した脂質低減療法
・ LDLコレステロールが130mg/dl(3.4mmol/L)超
・ トリグリセリドが400mg/dL(4.5mmol/L)未満
・ スクリーニング時の体重が40kg以上
を含む。
除外基準は:
・ 無作為化前の8週間以内にLDLまたは血漿アフェレーシス
・ ニューヨーク心臓協会(NYHA)クラスIIIまたはIV、または最新の既知の左心室駆出分画率が30%未満
・ 無作為化前の3カ月以内に心筋梗塞、不安定狭心症、経皮冠動脈インターベンション (PCI)、冠動脈バイパス・グラフト(CABG)、または発作
・ 計画されている心臓手術または血管再開通術
・ 制御されない心臓不整脈
・ 管理不良高血圧
を含む。
*コレステロールの値を1リットル当たりのミリモルに変換するには、0.0259で乗算する。アポリポタンパク質A1またはアポリポタンパク質Bの値を1リットル当たりのグラムに変換するには、0.01で乗算する。トリグリセリドの値を1リットル当たりのミリモルに変換するには、0.0113で乗算する。遊離PCSK9の値を1リットル当たりのナノモルに変換するには、72で除算する。
†中央値(四分位範囲)。
Q4W:4週間ごと、Q2W:2週間ごと、SE:標準誤差、LDL:低密度リポタンパク質、HDL:高密度リポタンパク質、PCSK9:プロタンパク質コンベルターゼスブチリシン/ケクシン9型。
特許、特許出願、論文、教科書など、本明細書中に引用される全ての参考文献、及びそれらの中に引用されている参考文献は、すでに組み込まれていない場合には、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。参照により組み込まれた参考文献中に与えられている定義または用語の何れもが本明細書中に提供されている用語及び論述と異なる場合、本発明の用語及び定義が優先される。
前記明細書は、当業者が本発明の実施を可能にするのに十分であると考えられる。前述の記載及び実施例は、本発明のある特定の好ましい実施形態を詳述し、本発明者らによって想定される最良の様式を記載する。しかしながら、前記述が本文中でどれほど詳細に記載されているとしても、本発明は、多くの様式で実施することができ、本発明は、添付の特許請求の範囲及びそのあらゆる均等物に従って解釈すべきであることが理解される。
Claims (27)
- ホモ接合性家族性高コレステロール血症と診断された患者の血清LDLコレステロールの低減方法であって、
少なくとも1つの抗PCSK9抗体を、血清LDLコレステロールの低減を必要とする前記患者に約120mg〜約3000mgの投薬量で投与することにより、前記血清LDLコレステロールレベルを少なくとも約10%低減させることを含む、前記方法。 - ホモ接合性家族性高コレステロール血症と診断された患者の治療方法であって、
少なくとも1つの抗PCSK9抗体を、治療を必要とする前記患者に約120mg〜約3000mgの投薬量で投与することにより、前記患者の前記ホモ接合性家族性高コレステロール血症を治療することを含む、前記方法。 - 前記患者の血清LDLコレステロールレベルを、a)少なくとも約15%、b)少なくとも約20%、c)少なくとも約30%、d)少なくとも約40%、及びe)少なくとも約50%からなる群から選択される量だけ低減させる、請求項1に記載の方法。
- 前記抗PCSK9抗体が、
a)配列番号23のCDRL1配列の軽鎖相補性領域(CDR)と、配列番号23のCDRL2配列のCDRL2と、配列番号23のCDRL3配列のCDRL3、及び配列番号49のCDRH1配列の重鎖相補性決定領域(CDR)と、配列番号49のCDRH2配列のCDRH2と、及び配列番号49のCDRH3配列のCDRH3、または
b)配列番号465のCDRL1配列の軽鎖相補性領域(CDR)と、配列番号465のCDRL2配列のCDRL2と、配列番号465のCDRL3配列のCDRL3、及び配列番号463のCDRH1配列の重鎖相補性決定領域(CDR)と、配列番号463のCDRH2配列のCDRH2と、配列番号463のCDRH3配列のCDRH3、または、
c)配列番号12のCDRL1配列の軽鎖相補性領域(CDR)と、配列番号12のCDRL2配列のCDRL2と、配列番号12のCDRL3配列のCDRL3、及び配列番号67のCDRH1配列の重鎖相補性決定領域(CDR)と、配列番号67のCDRH2配列のCDRH2と、配列番号67のCDRH3配列のCDRH3、または、
d)配列番号461のCDRL1配列の軽鎖相補性領域(CDR)と、配列番号461のCDRL2配列のCDRL2と、配列番号461のCDRL3配列のCDRL3、及び配列番号459のCDRH1配列の重鎖相補性決定領域(CDR)と、配列番号459のCDRH2配列のCDRH2と、配列番号459のCDRH3配列のCDRH3、または、
e)配列番号485のCDRL1配列の軽鎖相補性領域(CDR)と、配列番号485のCDRL2配列のCDRL2と、配列番号485のCDRL3配列のCDRL3、及び配列番号483のCDRH1配列の重鎖相補性決定領域(CDR)と、配列番号483のCDRH2配列のCDRH2と、配列番号483のCDRH3配列のCDRH3と、または、
f)配列番号582のCDRL1配列の軽鎖相補性領域(CDR)と、配列番号582のCDRL2配列のCDRL2と、配列番号582のCDRL3配列のCDRL3、及び配列番号583のCDRH1配列の重鎖相補性決定領域(CDR)と、配列番号583のCDRH2配列のCDRH2と、配列番号583のCDRH3配列のCDRH3、
を含む、請求項3に記載の方法。 - 前記抗PCSK9抗体が、
(a)配列番号23のアミノ酸配列と少なくとも90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号49のアミノ酸配列と少なくとも90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、または、
(b)配列番号12のアミノ酸配列と少なくとも90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号67のアミノ酸配列と少なくとも90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、または、
(c)配列番号461のアミノ酸配列と少なくとも90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号459のアミノ酸配列と少なくとも90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、または、
(d)配列番号465のアミノ酸配列と少なくとも90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号463のアミノ酸配列と少なくとも90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、または、
(e)配列番号485のアミノ酸配列と少なくとも90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号483のアミノ酸配列と少なくとも90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、または、
(f)配列番号582のアミノ酸配列と少なくとも90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号583のアミノ酸配列と少なくとも90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、
を含む、請求項3に記載の方法。 - 前記抗PCSK9抗体が、
(a)配列番号23のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号49のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、または、
(b)配列番号12のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号67のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、または、
(c)配列番号461のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号459のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、または、
(d)配列番号465のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号463のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、または、
(e)配列番号485のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号483のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、または、
(f)配列番号582のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号583のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、または、
(g)配列番号591のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号590のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、
を含む、請求項3に記載の方法。 - 前記抗PCSK9抗体が、
(a)配列番号156の軽鎖定常配列、または
(b)配列番号157の軽鎖定常配列、または、
(c)配列番号154の重鎖定常配列、または、
(d)配列番号155の重鎖定常配列、または、
(e)配列番号156の軽鎖定常配列と、配列番号154の重鎖定常配列、または、
(f)配列番号157の軽鎖定常配列と、配列番号154の重鎖定常配列、または、
(g)配列番号156の軽鎖定常配列と、配列番号155の重鎖定常配列、または、
(h)配列番号157の軽鎖定常配列と、配列番号155の重鎖定常配列、
をさらに含む、請求項4、5、または6に記載の方法。 - 前記抗PCSK9抗体が、前記軽鎖可変ドメインのC末端にグリシン残基をさらに含む、請求項6に記載の方法。
- 前記少なくとも1つの抗PCSK9抗体が、21B12、11F1、31H4、8A3、及び8A1からなる群から選択される請求項6に記載の方法。
- 前記抗PCSK9抗体を、a)約120mg〜約700mg、b)約140mg〜約600mg、c)約140mg〜約450mg、d)約420mg、e)約450mg、f)約600mg、g)約700mg、h)約1400mg、i)約1200mg、j)約420mg〜約3000mg、k)約1000mg〜約3000mg、またはl)約3000mgからなる群から選択される投薬量で前記患者に投与する、請求項4に記載の方法。
- 前記抗PCSK9抗体を、(1)1週間に1回、(2)2週間に1回、(3)1カ月に1回、(4)3カ月に1回、(5)6カ月に1回、及び(6)12カ月に1回からなる群から選択されるスケジュールで前記患者に投与する、請求項10に記載の方法。
- 前記投与ステップが、前記少なくとも1つの抗PCSK9抗体を非経口で投与することを含む、請求項10に記載の方法。
- 前記投与ステップが、前記少なくとも1つの抗PCSK9抗体を静脈内に投与することを含む、請求項12に記載の方法。
- 前記投与ステップが、前記少なくとも1つの抗PCSK9抗体を皮下に投与することを含む、請求項12に記載の方法。
- 前記少なくとも1つの抗PCSK9抗体が、配列番号23のCDRL1配列の軽鎖相補性決定領域(CDR)と、配列番号23のCDRL2配列のCDRL2と、配列番号23のCDRL3配列のCDRL3、及び配列番号49のCDRH1配列の重鎖相補性決定領域(CDR)と、配列番号49のCDRH2配列のCDRH2と、配列番号49のCDRH3配列のCDRH3とを含む、請求項14に記載の方法。
- 前記少なくとも1つの抗PCSK9抗体が、配列番号23のアミノ酸配列と少なくとも90%同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号49のアミノ酸配列と少なくとも90%同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域とを含む、請求項14に記載の方法。
- 前記少なくとも1つの抗PCSK9抗体が、配列番号23のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号49のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域とを含む、請求項14に記載の方法。。
- 前記少なくとも1つの抗PCSK9抗体が、配列番号591のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号590のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域とを含む、請求項14に記載の方法。
- 前記少なくとも1つの抗PCSK9抗体が、
(a)配列番号156の軽鎖定常配列、または、
(b)配列番号157の軽鎖定常配列、または、
(c)配列番号154の重鎖定常配列、または、
(d)配列番号155の重鎖定常配列、または、
(e)配列番号156の軽鎖定常配列と、配列番号154の重鎖定常配列、または、
(f)配列番号157の軽鎖定常配列と、配列番号154の重鎖定常配列、または、
(g)配列番号156の軽鎖定常配列と、配列番号155の重鎖定常配列、または、
(h)配列番号157の軽鎖定常配列と、配列番号155の重鎖定常配列、
をさらに含む、請求項17または18に記載の方法。 - 前記抗PCSK9抗体が、前記軽鎖可変ドメインのC末端でグリシン残基をさらに含む、請求項19に記載の方法。
- 前記抗PCSK9抗体を、前記患者に、約70mg〜約450mgの投薬量で2週間ごとに1回皮下投与し、前記患者の血清LDLコレステロールレベルを、約7〜14日間で少なくとも約10〜50%低減させる、請求項15に記載の方法。
- 前記抗PCSK9抗体を、前記患者に、約70〜約450mgの投薬量で1カ月に1回皮下投与し、前記患者の血清LDLコレステロールレベルを、約21〜31日間で少なくとも約10〜50%低減させる、請求項15に記載の方法。
- 前記抗PCSK9抗体を、約420mgの投薬量で前記患者に投与する、請求項21に記載の方法。
- 前記抗PCSK9抗体を、約420mgの投薬量で前記患者に投与する、請求項22に記載の方法。
- ホモ接合性家族性高コレステロール血症と診断された患者の血清LDLコレステロールの低減方法であって、
配列番号591のアミノ酸配列を含む軽鎖と配列番号590のアミノ酸配列を含む重鎖とを含む抗PCSK9抗体を、血清LDLコレステロールの低減を必要とする患者に約420mgの投薬量で投与することにより、前記血清LDLコレステロールレベルを少なくとも約10%低減させることを含む、前記方法。 - 前記抗PCSK9抗体を、前記患者に2週間ごとに1回投与する、請求項25に記載の方法。
- 前記抗PCSK9抗体を、前記患者に1カ月に1回投与する、請求項25に記載の方法。
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
PCT/US2013/048714 WO2014209384A1 (en) | 2013-06-28 | 2013-06-28 | Methods for treating homozygous familial hypercholesterolema |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017244758A Division JP6639463B2 (ja) | 2017-12-21 | 2017-12-21 | ホモ接合性家族性高コレステロール血症の治療方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2016528193A true JP2016528193A (ja) | 2016-09-15 |
JP6267792B2 JP6267792B2 (ja) | 2018-01-24 |
Family
ID=48790655
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016523717A Active JP6267792B2 (ja) | 2013-06-28 | 2013-06-28 | ホモ接合性家族性高コレステロール血症の治療方法 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP3013422A1 (ja) |
JP (1) | JP6267792B2 (ja) |
AU (2) | AU2013396206B2 (ja) |
CA (1) | CA2916259C (ja) |
WO (1) | WO2014209384A1 (ja) |
Families Citing this family (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SG174053A1 (en) | 2006-09-01 | 2011-09-29 | Therapeutic Human Polyclonals Inc | Enhanced expression of human or humanized immunoglobulin in non-human transgenic animals |
CA2954767A1 (en) * | 2014-07-14 | 2016-01-21 | Amgen Inc. | Crystalline antibody formulations |
CN106589127A (zh) * | 2015-10-16 | 2017-04-26 | 钜川生物医药 | 一种pcsk9抗体及其制备方法和应用 |
SG10202006332PA (en) * | 2015-10-29 | 2020-08-28 | Hoffmann La Roche | Transgenic rabbit with common light chain |
US20200270365A1 (en) * | 2016-01-05 | 2020-08-27 | Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. | Pcsk9 antibody, antigen-binding fragment thereof, and medical uses thereof |
BR112019020148A2 (pt) | 2017-04-13 | 2020-05-05 | Cadila Healthcare Ltd | peptídeo |
JP6639463B2 (ja) * | 2017-12-21 | 2020-02-05 | アムジエン・インコーポレーテツド | ホモ接合性家族性高コレステロール血症の治療方法 |
EP3911648A4 (en) | 2019-01-18 | 2022-10-26 | Astrazeneca AB | PCSK9 INHIBITORS AND METHODS OF USE THEREOF |
KR20210095781A (ko) | 2020-01-24 | 2021-08-03 | 주식회사 에이프릴바이오 | 항원결합 단편 및 생리활성 이펙터 모이어티로 구성된 융합 컨스트럭트를 포함하는 다중결합항체 및 이를 포함하는 약학조성물 |
Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2010508817A (ja) * | 2006-11-07 | 2010-03-25 | メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド | Pcsk9のアンタゴニスト |
JP2010523135A (ja) * | 2007-04-13 | 2010-07-15 | ノバルティス アーゲー | プロタンパク質転換酵素サブチリシン/ケキシン9型(pcsk9)を調整する分子および方法 |
JP2010536384A (ja) * | 2007-08-23 | 2010-12-02 | アムジエン・インコーポレーテツド | プロタンパク質コンベルターゼスブチリシンケクシン9型(pcsk9)に対する抗原結合タンパク質 |
JP2011501952A (ja) * | 2007-10-26 | 2011-01-20 | シェーリング コーポレイション | 脂質障害およびコレステロール障害を治療するための抗pcsk9および方法 |
WO2012101253A1 (en) * | 2011-01-28 | 2012-08-02 | Sanofi | Pharmaceutical compositions comprising human antibodies to pcsk9 |
WO2012154999A1 (en) * | 2011-05-10 | 2012-11-15 | Amgen Inc. | Methods of treating or preventing cholesterol related disorders |
WO2013033969A1 (en) * | 2011-09-07 | 2013-03-14 | SemiLEDs Optoelectronics Co., Ltd. | Systems and methods for producing white-light light emitting diodes |
Family Cites Families (80)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3180193A (en) | 1963-02-25 | 1965-04-27 | Benedict David | Machines for cutting lengths of strip material |
US3773919A (en) | 1969-10-23 | 1973-11-20 | Du Pont | Polylactide-drug mixtures |
US4179337A (en) | 1973-07-20 | 1979-12-18 | Davis Frank F | Non-immunogenic polypeptides |
US4263428A (en) | 1978-03-24 | 1981-04-21 | The Regents Of The University Of California | Bis-anthracycline nucleic acid function inhibitors and improved method for administering the same |
JPS6023084B2 (ja) | 1979-07-11 | 1985-06-05 | 味の素株式会社 | 代用血液 |
US4399216A (en) | 1980-02-25 | 1983-08-16 | The Trustees Of Columbia University | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
IE52535B1 (en) | 1981-02-16 | 1987-12-09 | Ici Plc | Continuous release pharmaceutical compositions |
US4640835A (en) | 1981-10-30 | 1987-02-03 | Nippon Chemiphar Company, Ltd. | Plasminogen activator derivatives |
EP0088046B1 (de) | 1982-02-17 | 1987-12-09 | Ciba-Geigy Ag | Lipide in wässriger Phase |
HUT35524A (en) | 1983-08-02 | 1985-07-29 | Hoechst Ag | Process for preparing pharmaceutical compositions containing regulatory /regulative/ peptides providing for the retarded release of the active substance |
DE3474511D1 (en) | 1983-11-01 | 1988-11-17 | Terumo Corp | Pharmaceutical composition containing urokinase |
US4740461A (en) | 1983-12-27 | 1988-04-26 | Genetics Institute, Inc. | Vectors and methods for transformation of eucaryotic cells |
US4496689A (en) | 1983-12-27 | 1985-01-29 | Miles Laboratories, Inc. | Covalently attached complex of alpha-1-proteinase inhibitor with a water soluble polymer |
EP0206448B1 (en) | 1985-06-19 | 1990-11-14 | Ajinomoto Co., Inc. | Hemoglobin combined with a poly(alkylene oxide) |
US4791192A (en) | 1986-06-26 | 1988-12-13 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Chemically modified protein with polyethyleneglycol |
US4959455A (en) | 1986-07-14 | 1990-09-25 | Genetics Institute, Inc. | Primate hematopoietic growth factors IL-3 and pharmaceutical compositions |
ATE87659T1 (de) | 1986-09-02 | 1993-04-15 | Enzon Lab Inc | Bindungsmolekuele mit einzelpolypeptidkette. |
US4946778A (en) | 1987-09-21 | 1990-08-07 | Genex Corporation | Single polypeptide chain binding molecules |
US5260203A (en) | 1986-09-02 | 1993-11-09 | Enzon, Inc. | Single polypeptide chain binding molecules |
US4912040A (en) | 1986-11-14 | 1990-03-27 | Genetics Institute, Inc. | Eucaryotic expression system |
GB8823869D0 (en) | 1988-10-12 | 1988-11-16 | Medical Res Council | Production of antibodies |
US5175384A (en) | 1988-12-05 | 1992-12-29 | Genpharm International | Transgenic mice depleted in mature t-cells and methods for making transgenic mice |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
US5859205A (en) | 1989-12-21 | 1999-01-12 | Celltech Limited | Humanised antibodies |
US6150584A (en) | 1990-01-12 | 2000-11-21 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
US6075181A (en) | 1990-01-12 | 2000-06-13 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
US6673986B1 (en) | 1990-01-12 | 2004-01-06 | Abgenix, Inc. | Generation of xenogeneic antibodies |
DK0463151T3 (da) | 1990-01-12 | 1996-07-01 | Cell Genesys Inc | Frembringelse af xenogene antistoffer |
FR2664073A1 (fr) | 1990-06-29 | 1992-01-03 | Thomson Csf | Moyens de marquage d'objets, procede de realisation et dispositif de lecture. |
US6300129B1 (en) | 1990-08-29 | 2001-10-09 | Genpharm International | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5814318A (en) | 1990-08-29 | 1998-09-29 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5545806A (en) | 1990-08-29 | 1996-08-13 | Genpharm International, Inc. | Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5633425A (en) | 1990-08-29 | 1997-05-27 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5770429A (en) | 1990-08-29 | 1998-06-23 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
DK0546073T3 (da) | 1990-08-29 | 1998-02-02 | Genpharm Int | Frembringelse og anvendelse af transgene, ikke-humane dyr, der er i stand til at danne heterologe antistoffer |
US5877397A (en) | 1990-08-29 | 1999-03-02 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
CA2090473A1 (en) | 1990-08-29 | 1992-03-01 | Robert M. Kay | Homologous recombinatin in mammalian cells |
US5874299A (en) | 1990-08-29 | 1999-02-23 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US6255458B1 (en) | 1990-08-29 | 2001-07-03 | Genpharm International | High affinity human antibodies and human antibodies against digoxin |
US5625126A (en) | 1990-08-29 | 1997-04-29 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5661016A (en) | 1990-08-29 | 1997-08-26 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
US5789650A (en) | 1990-08-29 | 1998-08-04 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
WO1992022670A1 (en) | 1991-06-12 | 1992-12-23 | Genpharm International, Inc. | Early detection of transgenic embryos |
WO1994004679A1 (en) | 1991-06-14 | 1994-03-03 | Genentech, Inc. | Method for making humanized antibodies |
AU2235992A (en) | 1991-06-14 | 1993-01-12 | Genpharm International, Inc. | Transgenic immunodeficient non-human animals |
AU2515992A (en) | 1991-08-20 | 1993-03-16 | Genpharm International, Inc. | Gene targeting in animal cells using isogenic dna constructs |
US5565332A (en) | 1991-09-23 | 1996-10-15 | Medical Research Council | Production of chimeric antibodies - a combinatorial approach |
ES2227512T3 (es) | 1991-12-02 | 2005-04-01 | Medical Research Council | Produccion de anticuerpos contra auto-antigenos a partir de repertorios de segmentos de anticuerpos fijados en un fago. |
US5869619A (en) | 1991-12-13 | 1999-02-09 | Xoma Corporation | Modified antibody variable domains |
ATE249840T1 (de) | 1991-12-13 | 2003-10-15 | Xoma Corp | Verfahren und materialien zur herstellung von modifizierten variablen antikörperdomänen und ihre therapeutische verwendung |
EP0746609A4 (en) | 1991-12-17 | 1997-12-17 | Genpharm Int | NON-HUMAN TRANSGENIC ANIMALS CAPABLE OF PRODUCING HETEROLOGOUS ANTIBODIES |
WO1994000569A1 (en) | 1992-06-18 | 1994-01-06 | Genpharm International, Inc. | Methods for producing transgenic non-human animals harboring a yeast artificial chromosome |
AU675661B2 (en) | 1992-07-24 | 1997-02-13 | Abgenix, Inc. | Generation of xenogeneic antibodies |
US6066718A (en) | 1992-09-25 | 2000-05-23 | Novartis Corporation | Reshaped monoclonal antibodies against an immunoglobulin isotype |
US5981175A (en) | 1993-01-07 | 1999-11-09 | Genpharm Internation, Inc. | Methods for producing recombinant mammalian cells harboring a yeast artificial chromosome |
EP0754225A4 (en) | 1993-04-26 | 2001-01-31 | Genpharm Int | HETEROLOGIC ANTIBODY-PRODUCING TRANSGENIC NON-HUMAN ANIMALS |
US5625825A (en) | 1993-10-21 | 1997-04-29 | Lsi Logic Corporation | Random number generating apparatus for an interface unit of a carrier sense with multiple access and collision detect (CSMA/CD) ethernet data network |
US5643763A (en) | 1994-11-04 | 1997-07-01 | Genpharm International, Inc. | Method for making recombinant yeast artificial chromosomes by minimizing diploid doubling during mating |
EP0823941A4 (en) | 1995-04-28 | 2001-09-19 | Abgenix Inc | HUMAN ANTIBODIES DERIVED FROM IMMUNIZED XENO MOUSES |
US6127977A (en) | 1996-11-08 | 2000-10-03 | Cohen; Nathan | Microstrip patch antenna with fractal structure |
EP1916300A1 (en) | 1995-08-29 | 2008-04-30 | Kirin Pharma Kabushiki Kaisha | Chimeric animal and method for producing the same |
ES2301183T3 (es) | 1996-12-03 | 2008-06-16 | Amgen Fremont Inc. | Anticuerpo completamente humano que se une al receptor del egfr. |
US6133426A (en) | 1997-02-21 | 2000-10-17 | Genentech, Inc. | Humanized anti-IL-8 monoclonal antibodies |
US6660843B1 (en) | 1998-10-23 | 2003-12-09 | Amgen Inc. | Modified peptides as therapeutic agents |
US6833268B1 (en) | 1999-06-10 | 2004-12-21 | Abgenix, Inc. | Transgenic animals for producing specific isotypes of human antibodies via non-cognate switch regions |
AU2001259432B2 (en) | 2000-05-03 | 2005-04-21 | Amgen Inc. | Modified peptides, comprising an FC domain, as therapeutic agents |
WO2008006332A1 (de) | 2006-07-13 | 2008-01-17 | Luk Lamellen Und Kupplungsbau Beteiligungs Kg | Laschenkette für insbesondere einen fahrzeugantrieb |
AR070315A1 (es) | 2008-02-07 | 2010-03-31 | Merck & Co Inc | Anticuerpos 1b20 antagonistas de pcsk9 |
AR070316A1 (es) | 2008-02-07 | 2010-03-31 | Merck & Co Inc | Antagonistas de pcsk9 (proproteina subtilisina-kexina tipo 9) |
TWI516501B (zh) | 2008-09-12 | 2016-01-11 | 禮納特神經系統科學公司 | Pcsk9拮抗劑類 |
JO3672B1 (ar) | 2008-12-15 | 2020-08-27 | Regeneron Pharma | أجسام مضادة بشرية عالية التفاعل الكيماوي بالنسبة لإنزيم سبتيليسين كنفرتيز بروبروتين / كيكسين نوع 9 (pcsk9). |
CA2777698A1 (en) | 2009-10-30 | 2011-05-05 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Ax1 and ax189 pcsk9 antagonists and variants |
WO2012054438A1 (en) | 2010-10-22 | 2012-04-26 | Schering Corporation | Anti-pcsk9 |
AR084456A1 (es) | 2010-12-22 | 2013-05-15 | Genentech Inc | Anticuerpo anti-pcsk9 y metodos de uso |
JP2014511378A (ja) | 2011-02-11 | 2014-05-15 | アイアールエム・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー | Pcsk9アンタゴニスト |
AR087715A1 (es) | 2011-09-16 | 2014-04-09 | Lilly Co Eli | Anticuerpos anti pcsk9 y usos de los mismos |
US9401875B2 (en) | 2012-06-01 | 2016-07-26 | Nippon Telegraph And Telephone Corporation | Packet transfer processing method and packet transfer processing device |
JP6071725B2 (ja) | 2013-04-23 | 2017-02-01 | カルソニックカンセイ株式会社 | 電気自動車の駆動力制御装置 |
US9300829B2 (en) | 2014-04-04 | 2016-03-29 | Canon Kabushiki Kaisha | Image reading apparatus and correction method thereof |
US11284893B2 (en) | 2019-04-02 | 2022-03-29 | Covidien Lp | Stapling device with articulating tool assembly |
-
2013
- 2013-06-28 CA CA2916259A patent/CA2916259C/en active Active
- 2013-06-28 WO PCT/US2013/048714 patent/WO2014209384A1/en active Application Filing
- 2013-06-28 AU AU2013396206A patent/AU2013396206B2/en active Active
- 2013-06-28 JP JP2016523717A patent/JP6267792B2/ja active Active
- 2013-06-28 EP EP13737090.4A patent/EP3013422A1/en active Pending
-
2020
- 2020-02-13 AU AU2020201012A patent/AU2020201012C1/en active Active
Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2010508817A (ja) * | 2006-11-07 | 2010-03-25 | メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド | Pcsk9のアンタゴニスト |
JP2010523135A (ja) * | 2007-04-13 | 2010-07-15 | ノバルティス アーゲー | プロタンパク質転換酵素サブチリシン/ケキシン9型(pcsk9)を調整する分子および方法 |
JP2010536384A (ja) * | 2007-08-23 | 2010-12-02 | アムジエン・インコーポレーテツド | プロタンパク質コンベルターゼスブチリシンケクシン9型(pcsk9)に対する抗原結合タンパク質 |
JP2011501952A (ja) * | 2007-10-26 | 2011-01-20 | シェーリング コーポレイション | 脂質障害およびコレステロール障害を治療するための抗pcsk9および方法 |
WO2012101253A1 (en) * | 2011-01-28 | 2012-08-02 | Sanofi | Pharmaceutical compositions comprising human antibodies to pcsk9 |
WO2012154999A1 (en) * | 2011-05-10 | 2012-11-15 | Amgen Inc. | Methods of treating or preventing cholesterol related disorders |
WO2013033969A1 (en) * | 2011-09-07 | 2013-03-14 | SemiLEDs Optoelectronics Co., Ltd. | Systems and methods for producing white-light light emitting diodes |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
CIRCULATION, vol. 126, no. 20, JPN6017009825, 2012, pages 2408 - 2417, ISSN: 0003522899 * |
JOURNAL OF THE AMERICAN HEART ASSOCIATION, vol. 2, no. 2, JPN6017009827, 18 March 2013 (2013-03-18), pages 000028 - 1, ISSN: 0003522898 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU2020201012C1 (en) | 2022-06-30 |
AU2013396206A1 (en) | 2016-01-21 |
AU2020201012B2 (en) | 2021-12-23 |
JP6267792B2 (ja) | 2018-01-24 |
CA2916259C (en) | 2024-02-20 |
EP3013422A1 (en) | 2016-05-04 |
WO2014209384A1 (en) | 2014-12-31 |
CA2916259A1 (en) | 2014-12-31 |
AU2013396206B2 (en) | 2019-11-14 |
AU2020201012A1 (en) | 2020-03-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6599527B2 (ja) | コレステロール関連障害を治療または予防する方法 | |
EP2844285B1 (en) | Stable formulations containing anti-pcsk9 antibodies | |
US20150004174A1 (en) | Methods for treating homozygous familial hypercholesterolemia | |
JP6267792B2 (ja) | ホモ接合性家族性高コレステロール血症の治療方法 | |
US20140004122A1 (en) | Methods for treating or preventing cholesterol related disorders | |
EP2615114A2 (en) | Antigen binding proteins to proprotein convertase subtilisin kexin type 9 (PCSK9) | |
JP6639463B2 (ja) | ホモ接合性家族性高コレステロール血症の治療方法 | |
NZ734570B2 (en) | Methods of treating or preventing cholesterol related disorders | |
NZ618300B2 (en) | Methods of treating or preventing cholesterol related disorders |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20170328 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20170622 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170928 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20171031 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20171116 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6267792 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R153 | Grant of patent term extension |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R153 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |