JP2016522810A - 抗菌活性を有する細菌株およびそれを含む生物的防除組成物 - Google Patents
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Abstract
Description
本開示の第1の態様は、病原性微生物による被験体の感染を治療または予防するための方法であって、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)、およびラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)から選択される乳酸桿菌(Lactobacillus)の少なくとも1つの株、あるいは前記株が培養されている培地由来の培養上清または無細胞濾液を含む組成物の有効量を、被験体に投与する、またはその他として被験体に曝露するステップを含む、方法を提供する。
以下の微生物株および株の組み合わせは、本明細書に記載の実験において使用した。
30%のグリセロールストックは、各分離株から作製し、長期の培養物保存用に、−80℃で維持した。短期間貯蔵の培養物は、寒天傾斜(3ケ月貯蔵)および寒天プレート(毎月継代培養する)上で4℃に維持した。分離株の初期特性を維持するため、3回のプレート継代培養後に、−80℃のストックから新たなプレートを作製する。
乳酸桿菌(Lactobacillus)株は、用途に応じて、MRS培養液(ディフコ(Difco))中またはMRS寒天プレート上のいずれかで、空気の存在下または不在下(ラクトバチルス・ラピ(L.rapi)は嫌気性を好む)で成長させた。培養物は、ルーチン的に、30〜34℃の中温度域で2日間成長させた。アセトバクター(Acetobacter)およびエタノリカ(Ethanolica)株は、用途に応じて、麦芽エキス培養液(オクソイド(Oxoid))中または麦芽エキス寒天プレート上のいずれかで好気的に成長させた。培養物は、ルーチン的に、30〜34℃の中温度域で2日間成長させた。
個々の株においては、滅菌ニクロム線を使用して、単一のコロニーを、新しい培養プレートから除去し、15mLの滅菌培地を有するユニバーサルボトルに移す。瓶は、30℃、140rpm、48時間に設定した振盪培養器内に確実に配置する(ラクトバチルス・ラピ(L.rapi)は振盪しない)。インキュベーション後、混濁細菌成長は、可視化される必要がある。「種子」接種瓶は、必要になるまで(最大1週間)4℃で貯蔵する。
分離株の各大規模培養後、試料は、無菌的に採取され、生存率カウントは、10倍連続希釈を用いて行う(層流フード内で実施)。湿ったスライドもまた調製し、純度を位相差顕微鏡を用いて観察し、培地上で存在し得るが成長することができない汚染物質について二重に検査する。48時間後、生存率用プレートは、純培養物(同じコロニー形態)について検査し、コロニーはカウントし、1mlあたりのコロニー形成単位(cfu/ml)値が得られる。グラム染色もまた、顕微鏡観察のため、実施する。
ショウガ黄化病は、1955年にクイーンズランド州で最初に報告された。それは、葉の黄変およびしおれやショウガの根茎腐敗をもたらす、フザリウム・オキシスポラム・エフ・エスピー・ジンギベリ(Fusarium oxysporum f.sp.zingiberi)によって引き起こされる。この疾患は、オーストラリアのショウガ産業において重大な経済的損失を引き起こしている。
・2つの寒天プレートを、各病原体の成長要件に特化して調製した。
・1mlの滅菌チップの大きい方の末端を用いて、6つの9mm穴を一方のプレート内にカットし、7つの9mm穴を2番目のプレート内にカットした。
・滅菌した0.85%生理食塩水2.5mlを、滅菌ビジュー瓶(bijoux bottle)に添加した。火炎殺菌した(flamed)白金耳を用いて、2〜3のコロニー(または2本の白金耳で真菌菌糸成長)を、新規に成長させた病原体のプレートから取り出し、洗い落として生理食塩水に入れ、十分にボルテックスしたことで、溶液は、見かけ上0.5のマクファーランド標準に近かった。
・滅菌スワブを、生理食塩水/コロニー混合物に浸漬し、穏やかな圧力を用いて、ウェルを破壊しないように注意して、スワブをプレートに対してジグザグに横断させた。これを3回繰り返し、プレートを各回ごとに少し回転させた。
・試験対象の特定のGL株の新しく成長させた培養液(1〜3日)を、滅菌した0.45μmのフィルターを通して濾過し、微生物を除去した。濾液は回収し、滅菌ビジュー瓶に入れた。
・プレートの各ウェルは、試験対象のGL株の各々で標識した。80μlの濾液を各ウェルに添加した。
・プレートは放置し、最上部に蓋をし、室温でインキュベートした。
・24時間後、プレートを、病原体の成長について検査した。任意のクリアな阻害域の直径(9mmのウェル径を含む)を測定し、記録した。成長がほとんどないかまたは弱いと見られた場合、プレートは、良好な成長が見られるまで、より長い間インキュベーション状態で放置した。
本方法は、成長するGL株の、上清濾液ではなく病原体に対する、本質的効果を検討するために用いられた。
・火炎殺菌した白金耳を用いて、新しいGL培養物にいくつかの垂直なストリーク(約1cm幅)を、(細菌成長要件に関連して)寒天プレートの中央から下方に作成した。
・プレートは、適切な成長温度で一晩インキュベートし、GL分離株の良好な成長が得られた。
・病原体の新しいプレート培養物を用いて、一本のラインを、プレートの左から右へ水平に横切るように作成した。プレートは、再びインキュベートした。
・インキュベーションの24時間後、プレートの左側を、真菌病原体およびGL株接種ライン間の任意の成長阻害領域について観察した(右側は病原体とGL株の混合物である)。必要があれば、プレートは、病原体の良好な成長が見られるまで、より長期間インキュベーション状態で放置した。
本方法は、GL株および病原体の異なる成長要件に関連した困難を回避するため、開発した。検査は、2セクションのペトリ皿内で、1セクションあたり2つの異なる成長培地を用いて実施した。
・2セクションを有する滅菌ペトリ皿を用いて、GL細菌培養寒天培地を、両セクションに注入した。
・一旦乾燥させてセットすると、各セクションの半分を無菌的に切り離した。離した4分の1のセクションは、病原体成長培地で満たした。
・1〜3つの新しいGL株コロニーは、2.5mlの滅菌した0.85%生理食塩水に、0.5のマクファーランド標準と同様の密度になるまで添加した。
・滅菌スワブを用いて、4分の1のセクションにつき3つの塗抹物を作成した。プレートは、微生物に応じて好気的(または嫌気的)に34℃で24〜48時間インキュベートした。
・3本の滅菌白金耳のサイズのfoz群を、新しいプレートから切断し、5mlの滅菌ミリQ水で洗浄し、十分にボルテックスし、混合した。
・滅菌スワブを用いて、1つの塗抹物を、病原体寒天培地全体に、GL株に接近しても接触しないように注意して作成した。
・プレートは、二重にラップし、病原体の成長速度に応じて、適切な病原体の成長温度(一般に27℃)で1〜10日間インキュベートした。
・病原体成長およびGL株エッジの間の距離を測定し、記録した。
これは、GL株の生培養物の病原体に対する直接的効果を観察するため、使用した。スワブによるfoz塗抹プレートを、上記のように調製した。10μlの新たに成長したGL株の一晩培養物を、foz塗抹プレートの最上部、マークしたスポット内に滴下した。プレートは、室温で一晩放置し、24および48時間の成長後、観察した。クリアな阻害域直径を記録した。
感染苗
次いで、発明者は、実施例1に記載の細菌株を含む組成物の、ハンツマン(Huntsman)スイカ苗中の植物病原菌フザリウム・オキシスポラム(Fusarium oxysporum)に対する効果について検討した。フザリウム・オキシスポラム(Fusarium oxysporum)は、多数の特殊型(エフ・エスピー(f.sp))を有する。スイカを冒してつる割病を引き起こす型は、フザリウム・オキシスポラム・エフ・エスピー・ニベウム(Fusarium oxysporum f.sp niveum)である。本試験で使用した苗は、フザリウム・オキシスポラム(Fusarium oxysporum)に感染され、(Jason Klotzによって提供された)土壌中に重要なフザリウム(Fusarium)問題を伴うスイカ農場から得た。
次いで、発明者は、本明細書に記載の微生物株組成物が、フザリウム・エスピー(Fusarium sp.)感染土壌に対してスイカ苗を保護し得るか否かについて検討した。
24のセルトレイを有する小型の伝播温室を、実験に使用した。トレイは、スイカを攻撃するフザリウム(Fusarium)種に感染されることが知られている混合された畑土壌のウェルで満たした。「キャンディ・レッド(Candy red)」スイカ種子のうちの3つの種子を、各セルに蒔いた。1つの調合物/対照につき、3つのセルを用いた。各トリオは下を袋詰めし、ドレナージが流れ出ることによる調合物間の二次汚染を阻止した。セルセットは、水対照、オートクレーブした土壌対照(2日置きに3回のオートクレーブ)および微生物組成物Mix G(実施例1参照)を有した。2つのセルセット、すなわち浸漬種子と非浸漬種子を比較した。種子は、滅菌水またはMix G(10/1に希釈)のいずれかに1時間浸漬した。各種子は、同様の深さまで蒔き、種蒔き直後、各セルに、6mlの滅菌水または1mlのMix G(1:10)+5mlの滅菌水を投与した。伝播温室は、密封し、直射日光を避けて周囲温度で12日間放置した。
実験2は、2つの例外を伴うが基本的に実験1と同様に設定した。種子は30分間浸漬し、最初の微生物組成物用量は1/3に低下した(1:10に希釈した300μlのMix Gを3mlの滅菌水に添加した)が、1週間後繰り返した。3mlの滅菌水を、水対照に添加した。
フザリウム・オキシスポラム・エフ・エスピー・クベンセ(Fusarium oxysporum f.sp cubense)(レース1〜4)は、バナナにおける破壊的なパナマ病の原因病原体である。厳格な検疫封じ込めに起因し、原因病原体は、実験室内で直接的に試験することができなかったが、毒性が低下した株が許可された(focの受託番号24322)。二重プレートアッセイを実施し、そこでは病原体を負荷によってGL組成物に対して成長させたが(実施例3参照)、個々のGL株については実施例1に記載した通りである。実験は、2通りに実施し、繰り返した。結果を表5に示す。結果によると、GL組成物がフザリウム(Fusarium)の成長を完全に阻害したことが示され、また、GL株のラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)Lz26、ラクトバチルス・ブレビス(Lactobacillus brevis)(TD)、TBおよびT9からの強力な抗菌効果が示される。
シュードセルコスポラ・マカダミア(Pseudocercospora macadamiae)は、マカダミアナッツの外皮斑点病の原因病原体である。それが原因でナッツが成熟前に木から落下し、それはマカダミア産業に多大な経済的損失をもたらす。マカダミアの木の一部の変種は、他種、例えばA16よりも感受性が高い。シュードセルコスポラ・マカダミア(Pseudocercospora macadamiae)の純粋な分離株は、クイーンズランド州第一次産業省(Queensland Department of PrimaryIndustries)培養株保存機関から得られた。実施例1に記載のGL株の、この真菌病原体の成長を阻害する能力を、実施例2に記載のように試験した。結果を下の表6に示す。ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)Lp18、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)Lb23、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)Lr24、ラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)Lz26、ラクトバチルス・ディオリボランス(Lactobacillus diolivorans)(N3)、ラクトバチルス・ブレビス(Lactobacillus brevis)(TD)、TBおよびT9は、活発に成長する培養物および成長培地(濾液)の双方を用いることで、病原体の成長を阻害することができた。
発明者は、室内実験を実施し、実施例1に記載のGL株の、ジャガイモそうか病の原因物質であるグラム陽性細菌ストレプトマイセス・スキャビーズ(Streptomyces scabies)の成長を阻害する能力を測定した。
臨床的乳腺炎は、乳業の中で重大な課題である。乳腺炎は、いくつかの異なる細菌種によって引き起こされる可能性があり、主要な原因種は、グラム陽性種の黄色ブドウ球菌(Staphylococcusaureus)およびストレプトコッカス・ウベリス(Streptococcusuberis)ならびにグラム陰性種の大腸菌(Escherichia coli)である。発明者は、実施例1に記載のGL株(単独および組み合わせ)の、大腸菌(Escherichia coli)の環境試料(分離株)、大腸菌(Escherichia coli)の実験室株(アメリカ培養細胞系統保存機関(ATCC)25922)ならびに黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)およびストレプトコッカス・ウベリス(Streptococcus uberis)の実験室株の成長を阻害する能力を検討した。
個々の乳酸桿菌(Lactobacillus)GL株の新しい一晩培養物を成長させた。3mlの一晩培養物を、4,000rpmで10分間回転させた。上清をデカントし、0.45μlのシリンジフィルターユニットを通して濾過し、滅菌ビジュー瓶に移した。各細菌培養物からの滅菌濾液およびMRS成長培地の対照は、滅菌した0.85%生理食塩水を用いて、1:1、1:3、1:5、1:10に希釈した。1mlの滅菌チップの幅広い末端(wide end)を用いて、6つのウェルの間隔をあけ、新しい栄養寒天プレート内で穴をカットした。プレートは、(0.5のマクファーランド標準に希釈した)3つの乳腺炎病原体のうちの1つを3回塗布した。80ulの各希釈濾液(ならびに無希釈およびMRS)を、6つのウェルの各々に添加した。これを、各病原体および各細菌濾液に対して繰り返した。プレートを34℃で一晩インキュベートした。成長のクリアな阻害域の直径を測定し、記録した。
6つの乳酸桿菌(Lactobacillus)GL株および2つの組成物(Mix 2およびMix 3;実施例1を参照)の各々の生存度を、実験開始時に測定した。各培養物の1mlあたりのコロニー形成単位(cfu/ml)の数を記録した(表14)。
発明者はまた、実施例1に記載のGL株の、シュードモナス・サバスタノイ(Pseudomonas savastanoi)(特にオリーブのこぶ病(olive gall disease)の原因物質)の成長を阻害する能力を、実施例2に記載の二重プレート検査方法を用いて検討した。結果は、表21に示す。
Claims (65)
- 病原性微生物による被験体の感染を治療または予防するための方法であって、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)、およびラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)から選択される乳酸桿菌(Lactobacillus)の少なくとも1つの株、あるいは前記株が培養されている培地由来の培養上清または無細胞濾液を含む組成物の有効量を、前記被験体に投与する、またはその他として前記被験体に曝露するステップを含む、方法。
- 病原性微生物によって引き起こされるか、またはそれに関連した、被験体における疾患を治療または予防するための方法であって、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)、およびラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)から選択される乳酸桿菌(Lactobacillus)の少なくとも1つの株、あるいは前記株が培養されている培地由来の培養上清または無細胞濾液を含む組成物の有効量を、前記被験体に投与する、またはその他として前記被験体に曝露するステップを含む、方法。
- 1つ以上の抗菌剤の有効量を、前記被験体に投与するか、またはその他として前記被験体に曝露するステップをさらに含む、請求項1または請求項2に記載の方法。
- 前記ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)株が、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)Lp18である、請求項1〜3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)株が、受託番号V11/022945の下、2011年10月27日にオーストラリア国立標準研究所に寄託されたラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)Lp18である、請求項4に記載の方法。
- 前記ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)株が、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)Lb23である、請求項1〜3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)株が、受託番号V11/022946の下、2011年10月27日にオーストラリア国立標準研究所に寄託されたラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)Lb23である、請求項6に記載の方法。
- 前記ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)株が、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)Lr24である、請求項1〜3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)株が、受託番号V11/022947の下、2011年10月27日にオーストラリア国立標準研究所に寄託されたラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)Lr24である、請求項8に記載の方法。
- 前記ラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)株が、ラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)Lz26である、請求項1〜3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)株が、受託番号V11/022948の下、2011年10月27日にオーストラリア国立標準研究所に寄託されたラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)Lz26である、請求項10に記載の方法。
- 前記組成物が、アセトバクター・ファバルム(Acetobacter fabarum)および/またはカンジダ・エタノリカ(Candida ethanolica)の株をさらに含む、請求項1〜11のいずれか一項に記載の方法。
- 前記アセトバクター・ファバルム(Acetobacter fabarum)株が、アセトバクター・ファバルム(Acetobacter fabarum)Afl5である、請求項12に記載の方法。
- 前記アセトバクター・ファバルム(Acetobacter fabarum)株が、受託番号V11/022943の下、2011年10月27日にオーストラリア国立標準研究所に寄託されたアセトバクター・ファバルム(Acetobacter fabarum)Afl5である、請求項13に記載の方法。
- 前記カンジダ・エタノリカ(Candida ethanolica)株が、カンジダ・エタノリカ(Candida ethanolica)Ce31である、請求項12に記載の方法。
- 前記カンジダ・エタノリカ(Candida ethanolica)株が、受託番号V11/022944の下、2011年10月27日にオーストラリア国立標準研究所に寄託されたカンジダ・エタノリカ(Candida ethanolica)Ce31である、請求項15に記載の方法。
- 前記組成物中の前記株のうちの1つ以上が被包される、請求項1〜16のいずれか一項に記載の方法。
- 前記被験体が、植物である、請求項1〜17のいずれか一項に記載の方法。
- 前記植物が、作物種である、請求項18に記載の方法。
- 前記被験体が、動物である、請求項1〜17のいずれか一項に記載の方法。
- 前記動物が、他の家畜(farm animal)の家畜(livestock)である、請求項20に記載の方法。
- 前記病原性微生物が、植物病または動物病の原因物質である、請求項1〜21のいずれか一項に記載の方法。
- 前記疾患が、腐敗、しおれ、さび病、斑点、胴枯れ病、がん腫病、ウドンコ病、カビ、虫こぶ、痂皮または乳腺炎である、請求項2または請求項22に記載の方法。
- 前記病原性微生物が、真菌である、請求項1〜23のいずれか一項に記載の方法。
- 前記真菌が、フザリウム・エスピー(Fusariumsp.)である、請求項24に記載の方法。
- 前記フザリウム・エスピー(Fusarium sp.)が、フザリウム・オキシスポラム(Fusarium oxysporum)である、請求項25に記載の方法。
- 前記フザリウム・オキシスポラム(Fusarium oxysporum)が、フザリウム・オキシスポラム・エフ・エスピー・ジンギベリ(Fusarium oxysporum f.sp.zingiberi)またはフザリウム・オキシスポラム・エフ・エスピー・ニベウム(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)である、請求項26に記載の方法。
- 前記真菌が、シュードセルコスポラ・マカダミア(Pseudocercospora macadamia)、フィアレモニウム・ジモルフォスポラム(Phialemonium dimorphosporum)、灰色かび病菌(Botrytis cinerea)および紋枯病菌(Rhizoctonia solani)から選択される、請求項24に記載の方法。
- 前記病原性微生物が、細菌である、請求項1〜23のいずれか一項に記載の方法。
- 前記病原菌が、ジャガイモそうか病菌(Streptomyces scabies)、ストレプトコッカス・ウベリス(Streptococcus uberis)、黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、大腸菌(Escherichia coli)、またはシュードモナス・サバスタニ(Pseudomonas savastani)である、請求項29に記載の方法。
- 前記被験体が植物であり、かつ、前記植物を前記組成物に曝露することは、前記植物が前記組成物とともに生育されるように土壌を処置するステップを含む、請求項1〜30のいずれか一項に記載の方法。
- 前記土壌が、前記植物、実生または植物種子の植付前、植付時あるいは植付後に処置される、請求項31に記載の方法。
- 前記被験体が植物であり、かつ、前記植物を前記組成物に曝露することは、植付前に植物根を処置するステップを含む、請求項1〜32のいずれか一項に記載の方法。
- 微生物の成長を阻害するための方法であって、前記微生物、あるいは前記微生物によってコロニー形成される環境またはコロニー形成され得る環境を、請求項1〜17のいずれか一項に定義される組成物の有効量に曝露させるステップを含む、方法。
- 前記微生物を1つ以上の抗菌剤の有効量に曝露させるステップをさらに含む、請求項34に記載の方法。
- 前記組成物の経時的な複数回の投与または適用を含む、請求項1〜34のいずれか一項に記載の方法。
- 前記組成物が、アセトバクター・ファバルム(Acetobacter fabarum)Af15、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)Lp18、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)Lb23、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)Lr24、ラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)Lz26、およびカンジダ・エタノリカ(Candida ethanolica)Ce31を含む、請求項1または請求項2に記載の方法。
- 前記組成物が、前記株を、前記乳酸桿菌(Lactobacillus)株の各々に対して2.5×105cfu/ml、カンジダ・エタノリカ(Candida ethanolica)Ce31に対して1.0×105cfu/ml、およびアセトバクター・ファバルム(Acetobacter fabarum)Af15に対して1.0×106cfu/mlの最終濃度で含む、請求項37に記載の方法。
- 前記組成物が、ラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)Lz26、NMI受託番号V12/022850と命名された前記細菌株、およびNMI受託番号V12/022849と命名された前記細菌株を含む、請求項1または請求項2に記載の方法。
- 前記組成物が、ラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)Lz26、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)Lb23、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)Lp18、カンジダ・エタノリカ(Candida ethanolica)Ce31、およびアセトバクター・ファバルム(Acetobacter fabarum)Af15を含む、請求項1または請求項2に記載の方法。
- 前記病原体が、フザリウム・エスピー(Fusarium sp.)であり、かつ、前記被験体は、スイカ種子または植物である、請求項39または請求項40に記載の方法。
- 前記組成物が、ラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)Lz26、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)Lp18、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)Lb23、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)Lr24、およびアセトバクター・ファバルム(Acetobacter fabarum)Af15を含む、請求項1または請求項2に記載の方法。
- 前記組成物が、ラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)Lz26、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)Lp18、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)Lb23、およびラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)Lr24を含む、請求項1または請求項2に記載の方法。
- 前記病原体が、乳腺炎の原因物質である、請求項42または請求項43に記載の方法。
- 病原性微生物による被験体の感染を治療または予防するための生物的防除組成物であって、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)、およびラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)から選択される乳酸桿菌(Lactobacillus)の少なくとも1つの株、あるいは前記株が培養されている培地由来の培養上清または無細胞濾液を含む、生物的防除組成物。
- 病原性微生物による被験体の感染によって引き起こされるか、またはそれに関連した、前記被験体における疾患を治療または予防するための生物的防除組成物であって、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)、およびラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)から選択される乳酸桿菌(Lactobacillus)の少なくとも1つの株、あるいは前記株が培養されている培地由来の培養上清または無細胞濾液を含む、生物的防除組成物。
- 微生物の成長を阻害するための組成物であって、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)、およびラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)から選択される乳酸桿菌(Lactobacillus)の少なくとも1つの株、あるいは前記株が培養されている培地由来の培養上清または無細胞濾液を含む、組成物。
- 請求項45〜47のいずれか一項に記載の組成物であって、1つ以上の抗菌剤をさらに含む、組成物。
- アセトバクター・ファバルム(Acetobacter fabarum)Af15、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)Lp18、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)Lb23、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)Lr24、ラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)Lz26、およびカンジダ・エタノリカ(Candida ethanolica)Ce31を含む、請求項45〜47のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記株を、前記乳酸桿菌(Lactobacillus)株の各々に対して2.5×105cfu/ml、カンジダ・エタノリカ(Candida ethanolica)Ce31に対して1.0×105cfu/ml、およびアセトバクター・ファバルム(Acetobacter fabarum)Af15に対して1.0×106cfu/mlの最終濃度で含む、請求項49に記載の組成物。
- ラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)Lz26、NMI受託番号V12/022850と命名された細菌株、およびNMI受託番号V12/022849と命名された細菌株を含む、請求項45〜47のいずれか一項に記載の組成物。
- ラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)Lz26、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)Lb23、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)Lp18、カンジダ・エタノリカ(Candida ethanolica)Ce31、およびアセトバクター・ファバルム(Acetobacter fabarum)Af15を含む、請求項45〜47のいずれか一項に記載の組成物。
- ラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)Lz26、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)Lp18、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)Lb23、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)Lr24、およびアセトバクター・ファバルム(Acetobacter fabarum)Af15を含む、請求項45〜47のいずれか一項に記載の組成物。
- ラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)Lz26、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)Lp18、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)Lb23、およびラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)Lr24を含む、請求項45〜47のいずれか一項に記載の組成物。
- 病原性微生物による被験体の感染を治療または予防するための組成物の作製を意図した、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)、およびラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)から選択される乳酸桿菌(Lactobacillus)の1つ以上の株の使用。
- 病原性微生物による被験体の感染によって引き起こされるか、またはそれに関連した、前記被験体における疾患を治療または予防するための組成物の作製を意図した、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)、およびラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)から選択される乳酸桿菌(Lactobacillus)の1つ以上の株の使用。
- 微生物の成長を阻害するための組成物の作製を意図した、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)、およびラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)から選択される乳酸桿菌(Lactobacillus)の1つ以上の株の使用。
- 病原性微生物による被験体の感染を治療または予防するための方法であって、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)、ラクトバチルス・カゼイ(Lactobacillus casei)、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)、ラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)、NMI受託番号V12/022850と命名された細菌株、およびNMI受託番号V12/022849と命名された細菌株から選択される乳酸桿菌(Lactobacillus)の少なくとも1つの株、あるいは前記株が培養されている培地由来の培養上清または無細胞濾液を含む組成物の有効量を、前記被験体に投与するか、またはその他として前記被験体に曝露するステップを含む、方法。
- 病原性微生物によって引き起こされるか、またはそれに関連した、被験体における疾患を治療または予防するための方法であって、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)、ラクトバチルス・カゼイ(Lactobacillus casei)、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)、ラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)、NMI受託番号V12/022850と命名された細菌株、およびNMI受託番号V12/022849と命名された細菌株から選択される乳酸桿菌(Lactobacillus)の少なくとも1つの株、あるいは前記株が培養されている培地由来の培養上清または無細胞濾液を含む組成物の有効量を、前記被験体に投与するか、またはその他として前記被験体に曝露するステップを含む、方法。
- 病原性微生物による被験体の感染を治療または予防するための生物的防除組成物であって、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)、ラクトバチルス・カゼイ(Lactobacillus casei)、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)、ラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)、NMI受託番号V12/022850と命名された細菌株、およびNMI受託番号V12/022849と命名された細菌株から選択される乳酸桿菌(Lactobacillus)の少なくとも1つの株、あるいは前記株が培養されている培地由来の培養上清または無細胞濾液を含む、生物的防除組成物。
- 病原性微生物による被験体の感染によって引き起こされるか、またはそれに関連した、前記被験体における疾患を治療または予防するための生物的防除組成物であって、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)、ラクトバチルス・カゼイ(Lactobacillus casei)、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)、ラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)、NMI受託番号V12/022850と命名された細菌株、およびNMI受託番号V12/022849と命名された細菌株から選択される乳酸桿菌(Lactobacillus)の少なくとも1つの株、あるいは前記株が培養されている培地由来の培養上清または無細胞濾液を含む、生物的防除組成物。
- 微生物の成長を阻害するための組成物であって、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)、ラクトバチルス・カゼイ(Lactobacillus casei)、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)、ラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)、NMI受託番号V12/022850と命名された細菌株、およびNMI受託番号V12/022849と命名された細菌株から選択される乳酸桿菌(Lactobacillus)の少なくとも1つの株、あるいは前記株が培養されている培地由来の培養上清または無細胞濾液を含む、組成物。
- 病原性微生物による被験体の感染を治療または予防するための組成物の作製を意図した、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)、ラクトバチルス・カゼイ(Lactobacillus casei)、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)、ラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)、NMI受託番号V12/022850と命名された細菌株、およびNMI受託番号V12/022849と命名された細菌株から選択される乳酸桿菌(Lactobacillus)の1つ以上の株の使用。
- 病原性微生物による被験体の感染によって引き起こされるか、またはそれに関連した、前記被験体における疾患を治療または予防するための組成物の作製を意図した、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)、ラクトバチルス・カゼイ(Lactobacillus casei)、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)、ラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)、NMI受託番号V12/022850と命名された細菌株、およびNMI受託番号V12/022849と命名された細菌株から選択される乳酸桿菌(Lactobacillus)の1つ以上の株の使用。
- 微生物の成長を阻害するための組成物の作製を意図した、ラクトバチルス・パラファラギニス(Lactobacillus parafarraginis)、ラクトバチルス・ブフネリ(Lactobacillus buchneri)、ラクトバチルス・ラピ(Lactobacillus rapi)、ラクトバチルス・カゼイ(Lactobacillus casei)、ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)、ラクトバチルス・ゼアエ(Lactobacillus zeae)、NMI受託番号V12/022850と命名された細菌株、およびNMI受託番号V12/022849と命名された細菌株から選択される乳酸桿菌(Lactobacillus)の1つ以上の株の使用。
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