JP2016102091A - 生理活性物質の担持力を向上させたナノ粒子の製造方法 - Google Patents
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- Medicinal Preparation (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Description
〔1〕ガレート型カテキンを固形分として0.1重量%〜20重量%、ゼラチン、コラーゲンまたはこれらの分解物と、乳清タンパク質またはその分解物とからなる2種の動物性タンパク質を固形分として合計0.1重量%〜20重量%、酸を固形分として0.1〜20重量%となるように水、含水有機溶媒もしくは有機溶媒に前記3成分を混合して、ガレート型カテキン、動物性タンパク質含有液を得る工程(A)、
生理活性物質を水、含水有機溶媒もしくは有機溶媒に溶解させて、生理活性物質含有液を得る工程(B)、
前記工程(A)で得られたガレート型カテキン、動物性タンパク質含有液と、工程(B)で得られた生理活性物質含有液とを混合する工程(C)、
工程(C)で得られた混合液を乾燥して、ナノ粒子を得る工程(D)
を有することを特徴とする生理活性物質の担持力を向上させたナノ粒子の製造方法、
〔2〕前記工程(C)で得られた混合液を水、含水有機溶媒または有機溶媒を用いて希釈する前記〔1〕に記載の生理活性物質の担持力を向上させたナノ粒子の製造方法、
〔3〕前記乾燥が、加熱減圧乾燥、凍結乾燥または噴霧乾燥である前記〔1〕または〔2〕記載の生理活性物質の担持力を向上させたナノ粒子の製造方法、
〔4〕前記生理活性物質がユビキノール、スチルベン類、水溶性ビタミン、脂溶性ビタミンまたはカロテノイドである前記〔1〕〜〔3〕いずれか記載の生理活性物質の担持力を向上させたナノ粒子の製造方法、
〔5〕前記ナノ粒子の平均粒子径が10〜200nmである前記〔1〕〜〔4〕いずれか記載の生理活性物質の担持力を向上させたナノ粒子の製造方法
に関する。
ガレート型カテキンを固形分として0.1重量%〜20重量%、ゼラチン、コラーゲンまたはこれらの分解物と、乳清タンパク質またはその分解物とからなる2種の動物性タンパク質を固形分として合計0.1重量%〜20重量%、酸を固形分として0.1〜20重量%となるように水、含水有機溶媒もしくは有機溶媒に前記3成分を混合して、ガレート型カテキン、動物性タンパク質含有液を得る工程(A)、
生理活性物質を水、含水有機溶媒もしくは有機溶媒に溶解させて、生理活性物質含有液を得る工程(B)、
前記工程(A)で得られたガレート型カテキン、動物性タンパク質含有液と、工程(B)で得られた生理活性物質含有液とを混合する工程(C)、
工程(C)で得られた混合液を乾燥して、ナノ粒子を得る工程(D)
を有することを特徴とする。
また、本発明において、「担持力」とは、ナノ粒子中に生理活性物質を担持した状態を維持する力をいう。
ナノ粒子に担持されている生理活性物質の量は、後述の試験において判別することができる。
前記ナノ粒子の平均粒子径は、後述の実施例に記載のように、ゼータ電位・ナノ粒子径測定システム(ベックマン・コールター株式会社製、「DelsaMax PRO」)にて測定することができる。
本工程では、ガレート型カテキンを固形分として0.1重量%〜20重量%、ゼラチン、コラーゲンまたはこれらの分解物と、乳清タンパク質またはその分解物とからなる2種の動物性タンパク質を固形分として合計0.1重量%〜20重量%、酸を固形分として0.1〜20重量%となるように水、含水有機溶媒もしくは有機溶媒に前記3成分を混合してガレート型カテキン・動物性タンパク質含有液を得る。
ゼラチンの由来は、豚、魚、ニワトリ等、および遺伝子組み換え体のいずれかを用いることができる。なお、牛骨または豚骨由来の動物性タンパク質は、500nm以下の粒子が一部形成されるものの、凝集および沈殿が起こりやすいため、本発明では使用することが難しい。ただし、牛骨または豚骨由来のタンパク質が含まれている動物性タンパク質であっても、平均粒子径10〜200nmのナノ粒子が作製できれば、特に限定はなく使用することができる。
コラーゲンとしては、前記ゼラチンを酵素などで分解したものが挙げられ、コラーゲンペプチドも含まれる。
前記ゼラチンまたはコラーゲンの分解物としては、コラーゲンやコラーゲンペプチド以外の分解物が含まれる。
本発明では、前記ゼラチン、コラーゲンまたはこれらの分解物のいずれかを単独で使用してもよいし、2種以上を混合して用いてもよい。
乳清タンパク質は、乳が凝固した際に得られる可溶性タンパク質であり、好ましくは、ホエイプロテインアイソレート(WPI)もしくは加水分解ホエイペプチド(WPH)であり、より好ましくは乳より精製されたアルブミンおよびカゼインである。
また、乳清タンパク質の分解物とは、酵素などを用いて乳清タンパク質を分解したものが挙げられる。
前記溶媒として使用する有機溶媒としては、水と混和するものであればよく、特に限定はない。また、得られたナノ粒子の使用用途に適した溶媒を選択することが好ましく、例えば、食品用途に適した溶媒としては、グリセリン、プロピレングリコール、エタノール等が挙げられ、医薬品用途に適した溶媒としては、上記に加えてメタノール、アセトン、ジメチルスルホキシド等が挙げられる。
また、前記溶媒として使用する含水有機溶媒とは、前記有機溶媒と水との混合溶媒をいう。
ガレート型カテキンと動物性タンパク質の重量比(動物性タンパク質/ガレート型カテキン)が8.0を超える場合、200nm以下のナノ粒子が一部生成されるが、平均粒子径としては200nmを超える。また、前記ガレート型カテキンと動物性タンパク質の重量比が0.07未満でも同様である。
本工程では、生理活性物質を、水または含水有機溶媒または有機溶媒に溶解させて、生理活性物質含有液を作製する。
前記溶媒として使用する有機溶媒としては、水と混和するものであればよく、特に限定はない。また、得られたナノ粒子の使用用途に適した溶媒を選択することが好ましく、例えば、食品用途に適した溶媒としては、グリセリン、プロピレングリコール、エタノール等が挙げられ、医薬品用途に適した溶媒としては、上記に加えてメタノール、アセトン、ジメチルスルホキシド等が挙げられる。
また、前記溶媒として使用する含水有機溶媒とは、前記有機溶媒と水との混合溶媒をいう。
本工程では、前記工程(A)で作製した前記ガレート型カテキン、動物性タンパク質含有液と、前記工程(B)で作製した前記生理活性物質含有液とを混合し、得られる混合液中でナノ粒子を形成させる。
また、必要に応じて、混合液を作製する際に、水等の溶媒を添加してもよい。
本工程では前記希釈溶液を乾燥させてナノ粒子を得る。本工程において、前記工程(C)で得られた混合液中に形成されているナノ粒子に乾燥処理をさらに施すことで、前記ナノ粒子における生理活性物質の担持力を顕著に向上させることができる。
前記加熱減圧乾燥とは、加熱装置内を減圧させて沸点を下げることで、乾燥の促進を図り、少ないエネルギーで蒸発・乾燥させる方法をいう。凍結乾燥とは、まず凍結を行い、次いで真空中で、凍結した乾燥物の沸点を下げて、乾燥物の水分を昇華させて乾燥させる方法をいう。また、噴霧乾燥とは、液体を気体中に噴霧して急速に乾燥させ、乾燥粉体を製造する方法をいう。
前記乾燥方法は、いずれも、公知の乾燥装置を用いて行えばよい。
前記の工程(A)〜工程(D)で得られるナノ粒子中の生理活性物質の含有量としては、0.01〜20重量%が好ましい。
前記ナノ粒子を医薬用途で使用する場合、例えば、その摂取量は、所望の改善、治療または予防効果が得られるような量であれば特に制限されず、通常その態様、患者の年齢、性別、体質その他の条件、疾患の種類並びにその程度等に応じて適宜選択される。1日当たり約0.1mg〜1,000mg程度とするのがよく、これを1日に1〜4回に分けて摂取することができる。
前記ナノ粒子を医薬部外品に添加する場合には、該医薬部外品中に、通常0.001〜30重量%添加するのが好ましい。
また、前記ナノ粒子を化粧品として使用する場合には、化粧品中に0.1ppm〜2000ppmの濃度となるようにするのが好ましい。
ゼラチン(商品名:G微粉、新田ゼラチン社製)0.1g、乳清タンパク質(商品名:エンラクトSAT、日本新薬社製)0.9g、緑茶抽出物(ガレート型カテキン64%)1.8g、クエン酸2gを粉体で混合し、これに蒸留水5.2gを添加して80℃で加温しながらホモジナイザーにて均一化させてゼラチン・ガレート型カテキン含有溶液(pH2.0)10gを得た。
次いで、エタノール9gとレスベラトロール(関東化学社製)1gとを添加して混合して生理活性物質溶液10gを得た。
ゼラチン・ガレート型カテキン含有溶液10gと生理活性物質溶液10gを均一に混合し、これを5倍量の10%エタノール溶液にて希釈した。さらに10倍量の0.4重量%大豆多糖類(商品名:SM−1200、三栄源社製)溶液でこれを希釈し、等倍量の0.2重量%リン酸塩で希釈してナノ粒子含有液とした。
前記ナノ粒子含有液を、噴霧乾燥機(東京理科社製)を用いて噴霧乾燥し、ナノ粒子粉末10gを得た。
なお、噴霧乾燥の条件としては、入口温度180℃、出口温度90℃、乾燥空気量0.4m3/min、噴霧圧力50kPa、流速400mL/hとした。
得られたナノ粒子粉末を再度水に分散させ、ゼータ電位・ナノ粒子径測定システム(ベックマン・コールター株式会社製、「DelsaMax PRO」)を用いて平均粒子径を測定した結果、平均粒子径は86.6nmであった。
ナノ粒子中の生理活性物質の担持力の測定は透析法を用いて測定した。
以上のことから、本発明の製造方法によってナノ粒子に担持されている生理活性物質の脱離を抑えることができ、所望量の生理活性物質を含有するナノ粒子を製造することで、ガレート型カテキン、動物性タンパク質および生理活性物質等の複数の機能性成分の生体利用性をより向上させることができることがわかる。
Claims (5)
- ガレート型カテキンを固形分として0.1重量%〜20重量%、ゼラチン、コラーゲンまたはこれらの分解物と、乳清タンパク質またはその分解物とからなる2種の動物性タンパク質を固形分として合計0.1重量%〜20重量%、酸を固形分として0.1〜20重量%となるように水、含水有機溶媒もしくは有機溶媒に前記3成分を混合して、ガレート型カテキン、動物性タンパク質含有液を得る工程(A)、
生理活性物質を水、含水有機溶媒もしくは有機溶媒に溶解させて、生理活性物質含有液を得る工程(B)、
前記工程(A)で得られたガレート型カテキン、動物性タンパク質含有液と、工程(B)で得られた生理活性物質含有液とを混合する工程(C)、
工程(C)で得られた混合液を乾燥して、ナノ粒子を得る工程(D)
を有することを特徴とする生理活性物質の担持力を向上させたナノ粒子の製造方法。 - 前記工程(C)で得られた混合液を水、含水有機溶媒または有機溶媒を用いてさらに希釈する請求項1に記載の生理活性物質の担持力を向上させたナノ粒子の製造方法。
- 前記乾燥が、加熱減圧乾燥、凍結乾燥または噴霧乾燥である請求項1または2記載の生理活性物質の担持力を向上させたナノ粒子の製造方法。
- 前記生理活性物質がユビキノール、スチルベン類、水溶性ビタミン、脂溶性ビタミンまたはカロテノイドである請求項1〜3いずれか記載の生理活性物質の担持力を向上させたナノ粒子の製造方法。
- 前記ナノ粒子の平均粒子径が10〜200nmである請求項1〜4いずれか記載の生理活性物質の担持力を向上させたナノ粒子の製造方法。
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